Աղբյուր
Wagoner ալկոհոլիզմի կենտրոն եւ այլն Հակում Հետազոտություններ, նեյրոնագիտության ինստիտուտ, Տեխասի համալսարան, Օսթին, Օսթին, TX, 78712, ԱՄՆ: [էլեկտրոնային փոստով պաշտպանված].
Վերացական
Վերացական:
ՄԻՋԱՎԱՅՐԸ:
Ալկոհոլի ներթափանցումը նվազեցնելու կամ կարգավորելու անկարողությունը ալկոհոլի օգտագործման խանգարումների համար առանձնահատուկ նշան է: Խմելու փորձի վրա հիմնված փոփոխությունների վեպի վարքային եւ գենետիկական մոդելների հետազոտությունները կխթանեն ալկոհոլի օգտագործման խանգարումների վերաբերյալ մեր գիտելիքները: Մկների երկու F1 հիբրիդային շտամների համեմատելով նախկինում նկատվել է առանձնահատուկ ալկոհոլային ինքնավարության վարքագիծ: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) ցույց են տալիս ալկոհոլի բարձր կոնցենտրացիաների փորձառությունից հետո եւ ալկոհոլի ժամանակահատվածները իսկ C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) ցույց է տալիս ալկոհոլի կայունության նախապատվությունը: Այս ֆենոտիպերը հետաքրքիր են, քանի որ այդ հիբրիդները ցուցադրում են գենետիկական հավելումների (BxN) եւ գերիշխողության (BxF) հայտնաբերումը էթանոլի ընդունման մեջ փորձի կախվածության տեսանկյունից:
Մասնավորապես, BxF- ն ցուցադրում է կայուն ալկոհոլային նախապատվություն եւ BxN ցուցահանդեսը բարձր էթանոլի կոնցենտրացիաների փորձից հետո կրճատվել է ալկոհոլային նախապատվությունը, սակայն, ցածր էթանոլի կոնցենտրացիաների հետ կապված փորձը արտադրում է կայուն ալկոհոլի նախապատվություն երկու հիբրիդների համար.
Սույն ուսումնասիրության մեջ մենք փորձարկեցինք այն վարկածը, որ այս ֆենոտիպերը ներկայացված են ընկճվածության գործակիցը, ΔFosB- ի դիֆերենցիալ արտադրությամբ, պարգեւատրման, զրպարտության եւ շեշտակի հետ կապված ուղեղի շրջաններում:
ԱՐԴՅՈՒՆՔՆԵՐ
Նեյրոնային պլաստիկության փոփոխությունները (ինչպես ΔFosB մակարդակներով) փոփոխվել են փորձը կախվածության մեջ, ինչպես նաեւ ուղեղի տարածքը եւ գենոտիպի կոնկրետությունը, հետագայում ապահովելով, որ նեյրոնային սխեմանը հիմնվում է էթանոլի օգտագործման մոտիվացիայի վրա.
BxN մկաններն իջեցրել են ալկոհոլային նախապատվությունները, որոնք ավելի ցածր էին ΔFosB մակարդակներում, Edinger-Westphal միջուկում, քան մկները `ցուցադրելով կայուն ալկոհոլի նախապատվությունը եւ աճել ΔFosB մակարդակները կենտրոնական միջամտության մեջ, համեմատած վերահսկվող մկների հետ:
BxN մկները, որոնք ցուցադրում են կայուն ալկոհոլի նախապատվությունը, ավելի բարձր են ΔFosB մակարդակները վրացական tegmental տարածքում, Edinger-Westphal միջուկը եւ amygdala (կենտրոնական եւ կողային ստորաբաժանումներ):
Ավելին, ներս BxN մկները ΔFosB մակարդակները Edinger-Westphal միջուկում եւ ventral tegmental շրջաններում զգալիորեն դրականորեն փոխկապակցված են էթանոլի նախապատվության եւ ընդունման հետ. Բացի դրանից, հիերարխիկ կլաստերների վերլուծությունը ցույց է տվել, որ շատ ցածր ΔFosB մակարդակ ունեցող շատ էթանոլային միամիտ մկները գտնվում են կլաստերում, մինչդեռ շատ մկներ, որոնք ցուցադրում են կայուն ալկոհոլային նախապատվություն, ընդհանուր առմամբ բարձր ΔFosB մակարդակները միասին են:
ԵԶՐԱԿԱՑՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐ:
Համեմատելով եւ հակադրելով երկու ալկոհոլային phenotypes, այս ուսումնասիրությունը ցույց է տալիս, որ պարգեւատրման եւ սթրեսային սխեմաները (ներառյալ Edinger-Westphal միջուկը, ventral tegmental տարածքը, amygdala) անցնում զգալի ոսպնյակներ, որոնք արտահայտվում են որպես նվազեցված ալկոհոլային նախապատվություններ:
Ընդհանուր տեղեկություններ
Կան հայտնի զգայունության գործոններ, բնապահպանական եւ գենետիկական, ալկոհոլի չարաշահման եւ ալկոհոլիզմի հետ կապված: Ալկոհոլի ավելցուկային քանակությամբ խմելու ունակությունը անհատի համար քիչ ազդեցություն է հանդիսանում շատ ալկոհոլիկների հիմնական առաջնային ախտանիշն է `նշելով, որ ալկոհոլային ռեակցիայի ցածր մակարդակը ալկոհոլիզմի զարգացման հիմնական խոցելի գործոն է [1,2]: Ալկոհոլի խթանմանը նպաստող նյարդաբիոլոգիական գործոնները որոշելու համար կօգնեն ալկոհոլի օգտագործման եւ չարաշահման մասին մեր պատկերացումները եւ արդյունավետ ռազմավարություն է ալկոհոլի օգտագործման խանգարումներով ախտորոշված անձանց բարելավված բուժման զարգացման համար: Մարդկային հիվանդությունը ընդօրինելու համար կրծող մոդելների կիրառումը հզոր գործիք է այս հիվանդության հասկացության առաջընթացի եւ բուժման բարելավման գործում: Ալկոհոլի չարաշահման եւ ալկոհոլիզմի ասպեկտները ուսումնասիրելու համար կան մի քանի կրծող մոդել, սակայն ալկոհոլիզմի ոչ մի մոդել ամբողջությամբ. Այն չափը, որով մկնիկը բանավոր կերպով ինքնուրույն վարելու էթանոլային լուծումներ նման բնապահպանական պայմաններում, մեծապես կախված է իր գենետիկական ֆոնի վրա [3].
Վերջերս հայտնաբերեցինք, որ C57BL / 6JXFVB / NJ (BxF) եւ FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 հիբրիդային մկները ինքնուրույն վարում են ալկոհոլի անսովոր բարձր մակարդակները `երկու շշերի նախապատվությունների թեստերի ժամանակ (կանայք սպառում են 20-35 գ / կգ / օր եւ տղամարդիկ 7-25 գ / կգ / օր, կախված կոնցենտրացիայից եւ պարադիգից) [4]: Այս նոր գենետիկական մոդելը զգալի առավելություն ունի, երբ առկա է անբարենպաստ շտամների համեմատ, այդ թվում, գերդաստանի ֆենոտիպի ապացույցների եւ ալկոհոլի բարձր մակարդակի խմելու [4]: Բացի այդ, BxF մկների կողմից ցուցադրվող բարձր էթանոլի սպառումը երեւում է երկու հավելյալ էթանոլի խմելու պարադիգմների մեջ (խմելու եւ մթնոլորտային ընդունման ընթացքում, երբ նախատեսված է հեղուկի մատչելիության ժամանակ) [4]: Այնուհետեւ ականատես ենք լինում ալկոհոլի ինքնուրույն վարման առանձնահատկություններին, երբ դրանք համեմատվում են մկների երկու F1 հիբրիդային շտամների հետ: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) ցույց է տալիս ալկոհոլի բարձր կոնցենտրացիաների փորձի եւ ալկոհոլի ժամանակաշրջանների զգալի կրճատումից հետո եւ BxF ցույց տված ալկոհոլի նախապատվությունը:5]. Օգտագործելով վարքային թեստերի մարտկոցը, մենք ցույց տվեցինք, որ BxN- ն ավելի զգայուն է, քան BxF մկները համարձակ եւ հանգստացնող, բայց ոչ պարգեւող, էթանոլի հետեւանքները [6].
Ալկոհոլի սպառման բարձր մակարդակի վարքի եւ գենետիկական մոդելների վերաբերյալ հիմնական հետազոտությունները եւ խմելու փորձը հարուցված փոփոխությունները կխորացնեն ալկոհոլի չարաշահման եւ ալկոհոլիզմի վերաբերյալ մեր գիտելիքները: Կրճատված ալկոհոլի նախապատվությունների ֆենոտիպը հետաքրքիր է, քանի որ BxN մկները նախապես ցույց են տալիս, որ էթանոլային լուծումների համար գերադասելիություն կա: Չնայած ալկոհոլի օգտագործման նվազեցման մոտիվացիան, բարձր էթանոլի կոնցենտրացիաների եւ անբավարարության հետ կապված փորձից հետո, BxN մկները կարող են նմանվել ալկոհոլային խմիչքների չափավոր չափաբաժիններին, որ նրանք դեռ օգտագործում են էթանոլի լուծույթներ, սակայն նվազեցված մակարդակով, հավանաբար, վտանգավոր փորձի պատճառով:
Առողջ ալկոհոլի նախապատվությունների մոդելը նույնպես հետաքրքիր է, քանի որ BxF մկները կայունորեն օգտագործում են էթանոլի չափազանց բարձր մակարդակները `անկախ նախորդ փորձից: Սպառված եւ նվազեցված ալկոհոլի նախապատվությունը կարող է կապված լինել ալկոհոլի զրկանքների ազդեցության հետ, այն երեւույթը, երբ կենդանիները ցույց են տալիս, որ ալկոհոլի օգտագործումը զգալիորեն ավելացել է հարկադիր բռնագանձումից հետոe [7]: Ալկոհոլի զրկանքների ազդեցությունը օգտակար երեւույթ է ալկոհոլային խմիչքի վարքի ավելացման ուսումնասիրության համար: Չնայած ալկոհոլի զրկանքների ազդեցությունը դրդելու համար հայտնի փորձարարական գրաֆիկը բավականին տարբեր է, քան այստեղ օգտագործվող ժամանակացույցը, համեմատելով կայուն եւ նվազեցված ալկոհոլային նախասիրության համեմատ ալկոհոլի զրկանքների ազդեցությունը, վերաբերում է այստեղ քննարկվող տարբեր վարքային ֆենոտիպերին, ալկոհոլային հետազոտության կրծող մոդելների կարեւոր երեւույթին: Ալկոհոլի նվազեցման նախապատվությունը կլինի ալկոհոլի զրկանքի ազդեցության հակառակն ու ալկոհոլի նախապատվությունը կարող է բնորոշվել որպես ալկոհոլի զրկանքների ազդեցության բացակայություն: Տարբեր գենետիկական կենդանիների մոդելները, ինչպիսիք են BxF եւ BxN, մեծապես նպաստում են դաշտի առաջխաղացմանը, քանի որ ալկոհոլի օգտագործման խանգարումներն առաջանում են գենետիկայի եւ շրջակա միջավայրի միջեւ բարդ փոխհարաբերություններից: Այս հիբրիդների համար անհապաղ վաղ գենի հայտնաբերումը հանգեցնում է ուղեղի սխեմաների պատկերացումն էթանոլի պարգեւատրման եւ հրատապ հատկությունների համար:
Էթանոլը եւ այլ թմրամիջոցներով զբաղվող նյարդային սարքերը ուսումնասիրվել են հատուկ կրծող մոդելներում, օգտագործելով նեյրոնային պլաստիկության եւ / կամ գործունեության մոլեկուլային մարկերներ [8-15]: Self-administered եւ experimenter-administered էթանոլ չի հանգեցնում համարժեք ուղեղի metabolic քարտեզներ, առաջարկելով հատուկ սխեմաների հիմքում ամրապնդող ազդեցությունները էթանոլի [8,9].
Ալկոհոլային հետազոտություններում լայնորեն ուսումնասիրված մեկ հիմնական բաղադրիչը բուժման կայուն եւ նվազեցված ալկոհոլային նախընտրությունների վարքագծի ուսումնասիրությունն է եւ այդ վարքագծի ընթացքում ներգրավված նեյրոնային սխեմաների հայտնաբերումը: Այս փորձի նպատակն էր բացահայտել ուղեղի շրջանները, որոնք զբաղվում էին ալկոհոլի կայուն եւ նվազեցված նախընտրությունից: Քանի որ խրոնիկ ալկոհոլիզմի կառավարումը (չարաշահման այլ դեղամիջոցներ) ցույց տվեց, որ ուղեղի տարածաշրջանային տարբերությունները ΔFosB մակարդակում են, մենք փորձարկեցինք այն վարկածը, որ այս վարքագծային ֆենոտիպերը ներկայացված են սեռական տարրական գործոնի, ΔFosB- ի տարբերակիչ արտադրությամբ, ներգրավված վարձատրության, խանդի եւ սթրեսի մեջ [10].
ΔFosB մակարդակներում տարածաշրջանային տարբերություններ առաջացնող քրոնիկ խանգարումները ներառում են չարաշահման թմրանյութեր (ալկոհոլ, կոկաին, ամֆետամին, նիկոտին, մորֆին եւ հակաբիոտիկներ), քրոնիկական սթրես (զսպվածության սթրես, անկանխատեսելի ոտքի հարված, էլեկտրոկոնվուլյոզային բռնկումներ) եւ կոմպոզիցիոն անիվի վազք [11]: Որպես գլխուղեղի երկարատեւ հարմարվողականության հնարավոր միջնորդ, FosB- ի գերիշխող տարբերակը (FosB կամ ΔFosB) `քրոնիկական էթանոլի բուժման պատասխանը կարեւոր տարբերակ է:
Կան մի քանի ուսումնասիրություններ, որոնք չափվում են FosB- ի եւ ΔFosB- ի քրոնիկ խանգարումներից հետո, որոնց համար այն չի հաստատվել, որ ΔFosB- ը գերիշխող izoform էր (օրինակ `ստորեւ նկարագրվածները): Այնուամենայնիվ, կա հստակ ապացույց, որ ΔFosB- ը ոչ թե FosB- ը քրոնիկական խթանիչներից հետո գերիշխող izoform է [10-12]: Ռիաբինի եւ Վանգ (1998) ուսումնասիրությունը ցույց է տվել, որ DBA / 2J մկների նախընտրած ցածր ալկոհոլով չորս օր կրկնվող էթանոլի ներարկումները հանգեցրել են FosB արտահայտության կայուն աճի հետեւյալ ուղեղի շրջաններում. Նախորդ կորտիկային ամինդալոիդ միջուկը, կողային հատվածի վենտրալը, կենտրոնական ամիգդալան , կողային ամիգդալա, կողային հիպոթալամուս, ճառագայթային ակկեմենսների շերտ, ստրիի տերմինալի անկողնային միջուկ եւ թալամուսի միջուկային միջուկը [13]: Նրանց արդյունքները հայտնաբերում են էթանոլային արձագանքող նյարդաբուծություն: FosB արտահայտությունը նույնպես չափվել է բարձր ալկոհոլի մեջ, նախընտրելով C57BL / 6J մկնիկը, մուտքի թույլատրելի պայմաններում էթանոլ ինքնավերահսկման ձեռքբերման եւ պահպանման ժամանակ: Ինքնակարգավորման ձեռքբերման ժամանակ FosB- ի մակարդակներում փոփոխություններ չեն եղել [14]. Այնուամենայնիվ, երկու շաբաթվա ընթացքում էթանոլ ինքնասպանության սահմանափակ մուտքի թույլտվություն ստանալուց հետո, FosB- ի մակարդակը բարձրացել է amygdala- ի եւ Edinger-Westphal միջուկի կենտրոնական միջուկային միջուկում [15]. Ընդհանուր առմամբ, զեկույցներում հայտնաբերում են էթանոլ ինքնազբաղմամբ զբաղվող նոր տարածաշրջանները, ինչպես նաեւ դեր է կատարում mesocorticolimbic ուղիների եւ ընդլայնված amygdala [16]: Այնուամենայնիվ, կարեւոր է նշել, որ ΔFOSB մակարդակի փոփոխությունները կախված են էթանոլի վարման, դոզայի եւ բուժման ժամանակահատվածի տեւողությունից,13-15].
Սույն հետազոտության մեջ օգտագործվող մկնիկի շտամները հետաքրքիր մոդելներ են տալիս կայուն եւ կրճատված ալկոհոլային նախապատվության եւ այդ հստակ ալկոհոլային պատասխանների համար պատասխանատու մեխանիզմների համեմատության համար: Այս ուսումնասիրությունը ցույց է տալիս, որ ալկոհոլի նախապատվությունը նվազեցնող մկները նույնպես զգալի զգայունություն են ցուցաբերում պարգեւատրման եւ սթրեսային սխեմաների մեջ (այդ թվում `Edinger-Westphal միջուկը, վրացական tegmental տարածքը, amygdala, միջուկի accumbens եւ cingulate cortex):
Արդյունքներ
Ալկոհոլի կոնցենտրացիաների եւ անբավարարության ժամանակների ազդեցությունը BxF եւ BxN մկների ինքնուրույն կառավարման վրա
Որպեսզի ցույց տանք, որ տարբեր էթանոլի կոնցենտրացիաների եւ / կամ ձգձգման ժամանակաշրջանները փոխեցին հետագա էթանոլի սպառումը, մենք մշակեցինք չորս ժամանակացույց (խմբերի) `էթանոլի սպառման չափման համար (Նկար (Գծապատկեր 1a, բ):1ա, բ): Յուրաքանչյուր հիբրիդի համար գոյություն ունեցավ չորս փորձարարական խումբ `բարձր կոնցենտրացիաներ, գերբնակեցման ժամանակաշրջաններով բարձր կոնցենտրացիաներ, ցածր կոնցենտրացիաներ եւ ցածր կոնցենտրացիաներ, որոնք գերազանցում են ժամկետները: Էթանոլի նախապատվությունների ամբողջական տվյալները (Նկար (Նկար 2)2) եւ սպառումը (Նկար (Նկար 3)3) տվյալները (բոլոր խմբերի եւ երկու գենոտիպերի համար) ներկայացվում են հղման համար: Սահմանել եւ նկարագրել կայուն եւ նվազեցված ալկոհոլային նախասիրությունների վարքային ֆենոտիպները, 9% էթանոլի նախապատվությունը եւ սպառման տվյալները ներկայացված են թվերով Նկարներ 44 և եւ5:5. Այս վարքագծային ֆենոտիպները հիմնված են 9% էթանոլի նախապատվության եւ սպառման համեմատությամբ, Բարձր կոնցենտրացիաների խմբերում առաջին, երկրորդ, երրորդ եւ չորրորդ ներկայացումների եւ Հանգստյան կոնցենտրացիաների խմբերի համար համապատասխան փորձարարական օրերի համեմատ: Կատարվեց 9% էթանոլի նախապատվություն եւ սպառումը ANOVA (genotype x time) երկու եղանակով: Բարձր կոնցենտրացիաների խմբի համար էթանոլի նախապատվությունը (Նկար (Նկար 4a)4ա) եւ սպառումը (Նկար (Նկար 5a)5ա) BxF- ի համար ավելի մեծ էր, քան BxN, և BxF- ն ցուցաբերեց կայուն ալկոհոլային նախապատվություն և սպառում, մինչդեռ BxN- ն ցուցաբերեց ալկոհոլի նվազեցված նախապատվություն և սպառում (ETHANOL PREFERENCE - փոխազդեցություն F (3,54) = 4.83, P <0, գենոտիպ F (01, 1,54) = 24.10, P <0.001, ժամանակ F (3,54) = 9.92, P <0.0001; ETHANOL սպառում - փոխազդեցություն N / S, գենոտիպ F (1,54) = 50.73, P <0.0001, ժամանակ F (3,54, 11.68) = 0.0001, Պ <XNUMX): Բարձր կոնցենտրացիաների խմբի համար ձեռնպահ մնալով, էթանոլի նախապատվությունը (Նկար) (Նկար 4b)4բ) եւ սպառումը (Նկար (Նկար 5b)5բ) BxF- ի համար ավելի մեծ էր, քան BxN, և BxF- ն ցուցաբերեց կայուն ալկոհոլային նախապատվություն և սպառում, մինչդեռ BxN- ն ցուցադրեց նվազեցված ալկոհոլային նախապատվություն և սպառում (ETHANOL PREFERENCE - փոխազդեցություն F (3,132) = 15.89, P <0.0001, գենոտիպ F (1,132) = 250.43, P = P <0.0001): Conածր կոնցենտրացիաների խմբի համար էթանոլի նախապատվությունը (Նկար (Նկար 4c)4գ) եւ սպառումը (Նկար (Նկար 5c)5գ) BxF- ի համար ավելի մեծ էր, քան BxN, և երկուսն էլ հիբրիդները ցուցաբերում էին կայուն ալկոհոլի նախապատվություն և սպառում (ETHANOL PREFERENCE - փոխազդեցություն N / S, գենոտիպ F (1,54) = 12.2, P <0.01, ժամանակ N / S; ETHANOL սպառում - փոխազդեցություն N / S, գենոտիպ F (1,54) = 74.83, P <0.0001, ժամանակ N / S): Ձեռնպահ մնալով ցածր կոնցենտրացիաների խմբի համար `էթանոլի նախապատվությունը (Նկար) (Նկար 4d)4դ) եւ սպառումը (Նկար (Նկար 5d)5դ) BxF- ի համար ավելի մեծ էր, քան BxN, և երկու հիբրիդներն էլ ցուցաբերում էին ալկոհոլի նախապատվության և սպառման չափավոր իջեցում (ETHANOL PREFERENCE - փոխազդեցություն N / S, F գենոտիպ (1,132) = 166.58, P <0.0001, ժամանակ N / S; ETHANOL սպառումը - փոխազդեցություն F (3,132) = 3.61, P <0.05, գենոտիպ F (1,132) = 480.64, P <0.0001, ժամանակ F (3,132) = 7.87, P <0.0001): Ամփոփելով, Բարձր կոնցենտրացիաների խմբերում (առանց ձեռնպահ մնալու) BxF- ն ցուցաբերեց կայուն ալկոհոլային նախապատվություն, մինչդեռ BxN- ն ցուցաբերեց նվազեցված ալկոհոլային նախապատվություն և ցածր կոնցենտրացիաների խմբերում (առանց ձեռնպահ մնալու), և BxF- ն, և B6xN- ն ցուցադրեցին կայուն ալկոհոլի նախապատվություն: Քանի որ հետաքրքրության ֆենոտիպերը լավագույնս նկարագրվում են խմբերով ՝ առանց ձեռնպահ մնալու, դրանք ուսումնասիրության մնացած մասն են կազմում:
ΔFosB մակարդակները
ΔFosB- ի քանակական եւ վերլուծությունը օգտագործվել է քրոնիկ կերպով ակտիվացած նեյրովժամանակի հայտնաբերման համար `կայուն եւ նվազեցված ալկոհոլային նախասիրությունների ժամանակ: Յուրաքանչյուր հիբրիդի համար եղել են երեք փորձարարական խմբեր `բարձր կոնցենտրացիաներ, ցածր կոնցենտրացիաներ եւ ջուր (հսկողություն): ΔFosB- ի տվյալները ներկայացված են որպես տոկոս ΔFosB դրական նեյրոններ [(ΔFosB դրական նեյրոնների #) / (ΔFosB դրական նեյրոնների # եւ Nissl դրական նեյրոնների #) (Աղյուսակ (Table1):1): Նախորդ աշխատանքը ցույց է տվել, որ էթանոլի փորձը կարող է առաջացնել նեյրոդեգեներացիա [17]: Հետեւաբար, մենք ուսումնասիրեցինք նեյրոնային թվերը այս ուսումնասիրության մեջ եւ ոչ մի զգալի տարբերություն չպատասխանեցին այս հետազոտության մեջ թվարկված ուղեղի շրջանի գենոտիպի կամ խմբի վրա: ΔFOSB- ի տվյալների հետեւյալ երեք վերլուծությունները կատարվեցին. 1) երեք ձեւով ANOVA (genotype x խմբ x brain region), 2) երկու տարբերակ ANOVA (ուղեղի տարածաշրջանի x խումբ) յուրաքանչյուր գենոտիպի համար եւ 3) ցանցեր:
Կրկնվող չափումները եռակողմ ANOVA (գենոտիպ x խումբ x ուղեղի շրջան) բացահայտեցին գենոտիպ x ուղեղի շրջանի փոխազդեցություն [F (15,375) = 2.01, P <.05], խումբ x ուղեղի տարածաշրջանի փոխազդեցություն [F (15.375) = 1.99, P <0.01], և ուղեղի շրջանի հիմնական ազդեցությունը [F (15,375) = 43.36, P <.000]: Յուրաքանչյուր գենոտիպի համար կրկնակի ANOVA (ուղեղի շրջան x խումբ) կրկնվող միջոցառումները ցույց տվեցին, որ խմբի և ուղեղի շրջանի հիմնական ազդեցությունը կա և՛ BxF- ի, և՛ BxN- ի համար [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001, հիմնական ազդեցությունը խումբ; F (15,374) = 25.64, P <.0001, ուղեղի շրջանի հիմնական ազդեցությունը; BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001, խմբի հիմնական ազդեցությունը; F (15,360) = 23.73, P <.0001, գենոտիպի հիմնական ազդեցությունը]: Հետընտրական վերլուծությունը բացահայտեց խմբի վեց նշանակալի տարբերություններ BxN- ի համար (Նկար) (Նկար 6a-c):6ac): Ցածր կոնցենտրացիաների խմբում ΔFosB մակարդակը բարձր է, քան La, CeC / CeL, EW եւ VTA ջրի խմբում: ΔFosB- ի տոկոսը բարձր է բարձր կոնցենտրացիաների խմբում, քան CeMPV- ի Ջրային խումբը: ΔFosB տոկոսը ցածր կոնցենտրացիաների խմբում ավելի բարձր էր, քան EW- ի բարձր կոնցենտրացիաները: ΔFosB տվյալները, չափված բոլոր մյուս ուղեղների համար ներկայացված են աղյուսակում Table1- ը:1, Pearson- ի r փոխհարաբերական վերլուծությունն օգտագործվել է `որոշելու համար, արդյոք ΔFosB դրական նեյրոնների% -ը տրված ուղեղի շրջանում փոխկապակցված են էթանոլի օգտագործման կամ նախընտրության հետ: Էթանոլի սպառումն ու նախապատվությունը զգալի դրական փոխկապակցվածություն են ցուցաբերել BxN մկների EW- ի և VTA- ի% ΔFosB- ի հետ (ETHANOL Consumation - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; ETHANOL PREFERENCE - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p <0.05 բոլորի համար).
Հետազոտվել է ΔFosB արտահայտության, գենոտիպի, ուղեղի շրջանի եւ էթանոլի սպառման միջեւ բարդ հարաբերությունները, օգտագործելով հիմնական բաղադրիչ վերլուծությունը եւ հիերարխիկ կլաստերացումը: Հիմնական բաղադրիչների վերլուծությունը ցույց է տվել, որ տվյալների փոփոխականության մեծությունը (~ 80%) ներկայացված է 5 բաղադրիչներով: Այնուհետեւ կատարվեց եւ կարգադրեց չկառավարվող հիերարխիկ կլաստեր (ըստ ֆիզիկական եւ ուղեղային տարածքների), օգտագործելով առաջին հիմնական բաղադրիչը (Նկար (Գծապատկեր 7):7): Անհատական կլաստերները հայտնաբերեցին ուժեղ, բայց ոչ կատարյալ, խմբաքանակային բաղադրիչները, որոնք հիմնված էին էթանոլի սպառման վրա, անկախ ժառանգությունից: Էթանոլի միացնող մկների մեծ մասը միասին համախմբվել եւ ավելի քիչ են ցուցաբերել ΔFosB- ից, քան միջին եւ մկների մի քանիսը, որոնք ցույց են տալիս ալկոհոլի նախապատվությունը, միասին համախմբված եւ ավելի ընդհանրապես ΔFosB ցուցադրեցին, քան միջինը: Այս երկու կլաստերները շատ տարբեր էին: Երեք կլաստերները ներկայացված են ΔFosB արժեքների եւ էթանոլի խմելու ֆենոտիպների ավելի մեծ, քան պակաս եւ միջին խառնուրդով:
Քննարկում
Մկների երկու F1 հիբրիդային շտամների համեմատությամբ նկատվել է առանձնահատուկ ալկոհոլային ինքնասպասարկման վարքագիծ: BxN- ը ցույց է տալիս ալկոհոլի բարձր կոնցենտրացիաների փորձի եւ ալկոհոլի ժամանակաշրջանների ժամանակ ալկոհոլի նախապատվությունը նվազեցնելու համար, մինչդեռ BxF ցույց է տալիս ալկոհոլի նախապատվությունը. BxF մոդելները կայուն, բարձր սպառումը (կայուն ալկոհոլի նախապատվությունը) եւ BxN մոդելները չափավոր խմելու (նվազեցված ալկոհոլային նախապատվությունը): Neuronal plastisite (կամ գործունեությունը, ինչպես չափվել է ΔFosB մակարդակներով) տարբեր էր կախված էթանոլի փորձից, հետագայում ապահովելով հատուկ նեյրոնային սխեմաների հիմնական դերը կայուն եւ նվազեցված ալկոհոլային նախասիրություններում:
C57BL / 6- ի բարձր ալկոհոլային սպառման համար, էթանոլի նախապատվությունը եւ սպառումը մեծապես կախված են նախնական էթանոլի կոնցենտրացիայի, հեռու մնացորդի եւ ենթամաշկային (C57BL / 6Cr կամ C57BL / 6J)7,18]: Մենք հայտնաբերեցինք, որ BxF մկների մեջ դիտված էթանոլի նախապատվությունը եւ սպառումը փորձարկված չորս տարբեր ժամանակացույցերում հետեւողականորեն ավելի բարձր էին (եւ ավելի կայուն, քան BxN- ում): BxN- ում չափավոր բարձր էթանոլի նախապատվությունը եւ սպառումը միայն պահպանվել են խրոնիկ խմիչքի մեկ գրաֆիկով (ցածր կոնցենտրացիաների առանց ձանձրույթի), մինչդեռ նախապատվության եւ սպառման կրճատումները դիտարկվում են բոլոր քրոնիկական խմիչքի ժամանակացույցերի փորձարկմամբ: BxN- ը նվազեցրել է ալկոհոլային նախապատվությունը, որը առաջարկում է նոր կենդանիների մոդել, որի փորձը (էթանոլի կրկնակի ներկայացումը բարձր էթանոլի բազմազանության եւ / կամ մի քանի կարճ ժամանակահատվածների փորձի արդյունքում) կրճատում է իրենց պատասխանը նախկինում բարձր նախընտրելի էթանոլի կոնցենտրացիայի նկատմամբ:
Self-administered եւ experimenter- ի կողմից իրականացվող էթանոլը արտադրում է տարբեր ուղեղային նյութափոխանակության քարտեզներ, որոնք առաջարկում են հատուկ սխեմաներ, հիմք ընդունելով էթանոլի ուժեղ ազդեցությունները [8,9]: Մենք փորձեցինք այն վարկածը, որ կայուն եւ նվազեցվող ալկոհոլային նախասիրությունների վարքային ֆենոտիպերը ներկայացված են հատվածային ազդանշանի գործակիցը, ΔFosB- ի դիֆերենցիալ արտադրությամբ, որը հայտնի է ներգրավված վարձատրության, նողկալի եւ սթրեսի մեջ: ΔFosB- ն յուրահատուկ երկարատեւ կայունություն ունեցող transcription գործոն է եւ չի դանդաղեցնում խթանիչը, քանի որ c-Fos- ը չի օգտագործում, այլ կուտակվում է քրոնիկական բուժումներում: ΔFosB- ի աճը կապված է նյարդային ակտիվության ավելացման հետ եւ մտածում են երկարատեւ նեյրոնային պլաստիկության արտացոլման մասին: Մենք պարզեցինք, որ ուղեղի շրջաններում ΔFosB դրական նեյրոնների տոկոսը կախված է գենոտիպից (BxF եւ BxN) եւ խմբի (Ջրի վերահսկողություն, ցածր կոնցենտրացիաներ եւ բարձր կոնցենտրացիաներ):
Fկամ BxN- ի հետագա վերլուծությունը ցույց է տվել, որ կամավոր էթանոլի սպառումը հանգեցրել է EW միջուկում, VTA- ում եւ amygdala- ում ΔFosB- ի աճին, նշելով, որ ուղեղի շրջաններում ավելացել է նեյրոնային պլաստիկությունը, որը հայտնի է եղել էթանոլի, պարգեւի եւ սթրեսային արձագանքների մեջ: BxN մկները Բարձր կոնցենտրացիաների խմբում (նվազեցված ալկոհոլային նախապատվությունը) նվազեցրել է նեյրոնային պլաստիկությունը EW- ում `ենթադրելով, որ այդ նեյրոնները արձագանքում են ալկոհոլային խմիչքի փորձի վրա` կապված պլաստիկության հետ: Ցածր կոնցենտրացիաների խմբում (ցուցադրվում է կայուն ալկոհոլի նախապատվություն), EW- ում նեյրոնային պլաստիկությունը մեծ է, քան բարձր կոնցենտրացիաների եւ ջրային հսկողության խմբերում: Չնայած տարբեր էթանոլի խմիչ պարադիգմների եւ գենետիկական մկնիկի մոդելների օգտագործման միջոցով, մեր BxN մկների EW- ի մեր արդյունքները համընկնում են նախորդ Էթանոլ սպառման ուսումնասիրությունների հետ [14,15]: Ոչ preganglionic EW- ն վերջերս բնութագրվել է որպես perioculomotor urocortin (Ucn) պարունակող նեյրոններ [19]: Ucn1- ը corticotropin- ի ազատման գործակիցն է (CRF), որը նման է պեպտիդին, որը կապում է CRF1- ի եւ CRF2 ընկալիչների հետ: Նախկին ուսումնասիրությունները, օգտագործելով գենետիկական, դեղագործական եւ վնասազերծման մոտեցումները, ցույց տվեցին, որ Ucn1- ը ներգրավված է ալկոհոլի սպառման կարգավորման մեջ [19-22]: Տայստեղ հայտնի գենետիկ դժգոհություն է բարձր ալկոհոլի օգտագործման կրծողների համար, որը փոխկապակցված է EW եւ LSi- ի Ucn1- ի բարձր բազային մակարդակներով [23]: Այսպիսով, անսպասելի էր BxF մկների նախընտրելի եւ սպառող բարձր ալկոհոլի համար EW- ում դիտվող հետխորհրդային կարեւորության բացակայությունը: Թերեւս սա պայմանավորված է BxF ջրի խմբի ΔFosB մակարդակների փոքր բարձր մակարդակով, BxN ջրի խմբի համեմատ: Հատկապես, ΔFosB- ի մակարդակները բոլոր մկների համար պարունակում էին կայուն ալկոհոլային նախապատվություններ (BxF High Concentrations խումբը, BxF Low Concentrations խումբը եւ BxN Low Concentrations խումբը):
BxN- ի համար, ցածր կոնցենտրացիաների խմբում էթանոլի սպառման ավելացումը ավելացել է նեյրոնային պլաստիկությունը VTA- ում (ավելի բարձր է, քան բարձր կոնցենտրացիաների եւ ջրային հսկողության խմբերում): Էթանոլի նախապատվությունը եւ սպառումը նույնպես մեծ էին Հանգստյան կոնցենտրացիաների խմբի համար. Հատուկ նշանակության բացակայությունը, որը մենք նկատել ենք VTA- ում, բարձր սպիրտի համար նախընտրում եւ սպառում BxF մկնիկը անսպասելի էր եւ կարող է պայմանավորված լինել ջրային հսկողության խմբի ΔFosB- ի բազալային մակարդակների մի փոքր ավելի բարձր մակարդակից: BxF ջրային ռեսուրսների մակարդակով ΔFosB մակարդակները մի փոքր բարձրացել են BxN ջրի խմբի համեմատ, մինչդեռ ΔFosB մակարդակները բավականին նման էին բոլոր մկների համար, որոնք պարունակում էին կայուն ալկոհոլային նախընտրություններ (BxF Բարձր կոնցենտրացիաների խումբ, BxF ցածր կոնցենտրացիաների խումբ եւ BxN ցածր կոնցենտրացիաների խումբ) . ՎՏԱ դոպամին համակարգը մեծ դեր է խաղում էթանոլի ամրապնդման հետեւանքների միջամտության մեջ եւ մասնակցում է էթանոլի եւ պարգեւատրման հետ կապված վարքագծի համար կարեւոր բազմաթիվ փոխադարձ կապերի [24-26]: Բացի այդ, VTA- ն նախագծում է amygdala եւ EW միջուկը: Rats- ը ցուցադրվել է ինքնակառավարման էթանոլի ուղղակիորեն VTA- ին [27]. Բացի այդ, էթանոլի ազդեցությունը մեծացնում է ՎՏԱ-ի դոպամիներգիկ նեյրոնների կրակումը [28,29]: Կրակի բարձրացումը կարող է կապված լինել ՎՏԱ-ի ΔFosB- ի զորակոչի հետ, որը մենք դիտում էինք BxN- ի քրոնիկ կամավորական էթանոլի կիրառման հետ:
Ալկոհոլի կախվածությունը առաջացնում է երկարաժամկետ neuroadaptations, ինչը հանգեցնում է բացասական հուզական վիճակների. բացասական ամրապնդման կարեւոր մեխանիզմը amygdala- ի շրջանակներում կորտիկոտրոպին-ազատող գործոն (CRF) ազդանշան է: [30]: CeA- ի նեյրոնների դեղագործական մանիպուլյացիաները նպատակաուղղված են GABA, CRF, opioid, serotonin, dynorphin եւ norepinephrine reseptors [25,31-34]: ԳABA- ի հակաօգտագործողները, ինչպես նաեւ CRF- ի հակադիտողները, նվազեցնում են էթանոլի սպառումը [32,33,35]. Ցեմենտի լյարդները կրճատում են վտանգավոր էթանոլի օգտագործումը [36]. Մեր բացահայտումները հետագայում նպաստում են CeA- ի դերի ալկոհոլային խմիչքի վարքագծի կանոններում: Գաբաերջիկ նեյրոնները կենտրոնական ամիրդալայում ձեւավորվում են տարասեռ բնակչության, որոնց կապերը հայտնվում են իրենց պեպտիդների պարունակության հետ: Այս GABaergic նեյրոնները ինտեգրվում են CeA- ի արտադրողական գործունեության վրա: Ինչպես վերանայվել է [Wee եւ Koob (2010]), բերբեւէ ուսումնասիրությունները դինորֆինի եւ կափփայի օփիոիդային ընկալիչների դերը որոշել են էթանոլի խթանի պահպանման եւ թուլացման ժամանակe [37]: Վերջերս Walker- ը ցույց է տվել, որ κ-opioid- ի վերափոխիչ հակադեոնտիկ, ոչ-բինալֆորֆիմին, ընդլայնված amygdala- ի շրջանակներում ընտրովիորեն նվազեցնում է էթանոլի ինքնակառավարումը կախյալ կենդանիներից [38]: Kappa opioid reseptor signaling- ը մնում է ստրեսի, պարգեւի եւ զզվելի խաչմերուկում հետազոտության հիմնական հետաքրքրությունը: Այն նաեւ ցույց է տվել, որ սթրեսից բխող էթանոլի ինքնակառավարումն իրականացվում է kappa opioid reseptor ազդանշանների միջոցով: [39]: Կենտրոնական CeA- ն կարող է բաժանվել լոտո-գլխիկով (CeL / CeC) եւ միջին միջնամասում: CeB / CeC- ի GABAergic նեյրոնները ստանում են դոպամիներգիկ innervations VTA- ից, ինչպես նշվեց նախկինում, այս նեյրոնները ակտիվանում են սուր վարակազերծման վարվելուց հետո եւ ցուցադրվում են ΔFosB մկների աճող ալկոհոլի նախապատվությունը: Բացի այդ, տեսեք Mc [Հարսը (2002]) գերազանց վերանայման համար CeA- ի եւ ալկոհոլի [40]: Մեր հետազոտության մեջ, BxN մկնիկը կայուն ալկոհոլային նախասիրությամբ (Ցածր կոնցենտրացիաների խումբ) ցուցադրեց CeC / CeL- ի եւ La եւ BxN- ի մկների աճող նեյրոնային պլաստիկությունը, որը նվազեցրեց ալկոհոլի նախապատվությունը (Բարձր կոնցենտրացիաների խումբ) ցուցադրեց CeMPV- ում ավելացված նեյրոնային պլաստիկությունը: Այս արդյունքները ցույց են տալիս, որ հատուկ էթանոլի փորձը ներառում է պլաստիկությունը ամիբդալում GABAergic neurons- ում: Այս տվյալների հետ մեկտեղ, VTA- ի եւ EW- ի նեյրոնային պլաստիկության համապատասխան փոփոխությունների հետ մեկտեղ, մենք առաջարկում ենք, որ այս օղակը ենթարկվում է զգալի զգայունության, կայուն ալկոհոլի նախապայմանների պայմաններում:
Նախորդ հետազոտությունները ցույց են տվել, որ C57BL / 6J մկները կարող են հասնել բարձր արյան ալկոհոլի մակարդակների `երկու շիշի խմելու միջոցով, սակայն այդ արյան ալկոհոլի մակարդակը կայուն չէ եւ հաճախ խմելը չի համապատասխանում Dole- ի եւ Gentry- ի (1984) դեղագործական մոտիվացման չափանիշներին [41,42]: BxN մկների ցուցադրվող նվազեցված ալկոհոլային նախապատվությունը սպառված է ավելի քիչ, քան սպասվում է տիպիկ C57BL / 6J մկնիկից [1]: Հետեւաբար, չնայած, որ մենք արյան ալկոհոլի նմուշներ չենք արել, հավանական չէ, որ BxN մկները ցույց են տալիս, որ ալկոհոլի նախապատվությունը նվազեցվում է ֆունկցիոնալորեն համապատասխան ալերգիայի մակարդակով, ինչը նշանակում է, որ բարձր ալկոհոլի կոնցենտրացիաները անհրաժեշտ չեն այդ ուղեղի շրջաններում խթանելու համար: Կարեւոր է նշել, որ խմբում զգալի նշանակալի ազդեցություն կա նաեւ BxF- ում, չնայած որ BxF ուղեղի շրջաններում հետհաշվարկային արդյունքները (բազմապատկված համեմատությունների համար շտկված են) ցույց չեն տվել զգալի փոփոխություններ ΔFosB- ի դրական նեյրոններ `քրոնիկ էթանոլի օգտագործման հետ կապված ցանկացած տարածաշրջանի համար այս տարբեր ժամանակացույցերով:
Որպեսզի պատկերացնեն փոփոխականների պոտենցիալ հարաբերությունները, կատարվել է հիերարխիկ կլաստեր: Արդյունքում վերլուծության ջերմամշակումը ցույց է տալիս ΔFosB մակարդակների եւ էթանոլի սպառման միջեւ ընդհանուր միտումը, անկախ ժառանգությունից: Բարձր ΔFosB մակարդակները կապված էին բարձր խմելու հետ, եւ ցածր ΔFosB մակարդակները կապված էին հսկողության կենդանիների հետ. սակայն հարաբերության ուժը բավարար չէ միայն ճշգրիտ կանխատեսել խմելու ֆենոտիպների վրա, որոնք հիմնված են միայն ΔFosB մակարդակների վրա:
Եզրակացություններ
Հատկապես ալկոհոլային ինքնակառավարման վարքագիծը դիտվում է մկների երկու F1 հիբրիդային շտամներով. BxN ցույց է տալիս ալկոհոլի նախապատվությունը նվազեցրած ալկոհոլի բարձր կոնցենտրացիայի փորձից հետո, իսկ BxF ցույց է տալիս ալկոհոլի նախապատվությունը: BxF մոդելները կայուն, բարձր սպառումը (կայուն ալկոհոլի նախապատվությունը) եւ BxN մոդելները չափավոր խմելու (նվազեցված ալկոհոլային նախապատվությունը): Նեյրոնային պլաստիկության փոփոխությունները (ինչպես ΔFosB մակարդակներով) փոփոխվել են փորձի կախվածությունը, ինչպես նաեւ ուղեղի տարածաշրջանը եւ գենոտիպին հատուկ, հետագայում որոշելով նեյրոնային սխեմաները `հիմնված են էթանոլի օգտագործման մոտիվացիայի վրա: Այս արդյունքները ցույց են տալիս, որ հիբրիդային մկների մեկ ծնողական շղթայի փոփոխությունը հանգեցնում է ալկոհոլի սպառման օրինակների փոփոխությանը եւ ΔFosB արտահայտության ձեւավորման մեջ նկատելի փոփոխությունների, ինչը ենթադրում է, որ տարբեր հիբրիդային մկների մեջ ներգրավված են ուղեղի տարբեր ցանցերը:
Մեթոդներ
էթիկա
Այս ուսումնասիրությունը կատարվել է խիստ համապատասխան `Առողջության ազգային ինստիտուտների լաբորատոր կենդանիների խնամքի եւ օգտագործման ուղեցույցում ներկայացված առաջարկությունների համաձայն: Արձանագրությունը հաստատվել է Օսթինում (AUP 2010-00028) Տեխասի համալսարանի կենդանիների պահպանության եւ օգտագործման կոմիտեին կողմից: Բոլոր վիրահատությունները կատարվեցին նատրիումի պենտոբարբնական անզգայացման ժամանակ, եւ բոլոր ջանքերը գործադրվեցին տառապանքը նվազեցնելու համար:
Կենդանիներ
Ուսումնասիրությունները կատարվել են C1BL / 57J- ի կամ FVB / NJ- ի կամ NZB / B6NJ մկների (BxF F1 եւ BxN F1- ից, մայրական լարված x բնորոշ լարվածությունից) ստացված միջմոլորակային F1 հիբրիդային մկների միջոցով: C57BL / 6J, FVB / NJ եւ NZB / B1NJ բուծողները ձեռք են բերվել The Jackson Laboratory- ից (Bar Harbor, ME) եւ համակցված են 7-8 շաբաթվա ընթացքում: Offspring- ը զավթվել է գենոտիպերի յուրաքանչյուր տեսակի (BxF F1, BxN F1) իսպանական խմբերի մեջ: Մենք փորձարկեցինք միայն կանացի մկների համար, որպեսզի համեմատենք նախկինում հավաքված տվյալների հետ [1,5,6]: Մկները տեղադրվեցին սննդի եւ ջրով ստանդարտ խցերում ad libitum. Գաղութի սենյակը եւ փորձարկման սենյակը գտնվում էին 12 ժամյա լույսի վրա. 12 h մութ ցիկլ (լույսերը 07- ում `00):
Երկու շշերի ընտրություն էթանոլի նախապատվությունների փորձարկում
Երկու շիշի ընտրության մեթոդը օգտագործվել է իգական սեռերի BxF եւ BxN մկների քաղցկեղի ինքնուրույն կառավարման մեթոդները որոշելու համար [1,6]: F1- ի հիբրիդային մկները (տարիքային 63 օր) առանձին տեղադրվեցին ստանդարտ խցերում, իսկ մեկ շաբաթվա ընթացքում տնկվեցին շշեր `ջրի պարունակող խողովակներով, նախքան էթանոլ լուծույթի ներդրումը: Սովորությունից հետո մկները հասանելի էին երկու նույնական շշեր `մեկ ջուր, իսկ մյուսը` էթանոլ լուծում: Տրոյի դիրքերը փոխվել են ամեն օր `դիրքորոշման նախապատվությունների վերահսկման համար: Հաշվի առնելով պոտենցիալ արտահոսքի եւ գոլորշիացման համար, մկնիկը առանց մկների վերահսկվող խցիկներից խցանված միջին քաշը ամեն օր ենթարկվել է անհատական խմելու արժեքից: Մկները փորձարկվել էին յուրաքանչյուր 4 օրվա ընթացքում: Բոլոր հեղուկի սպառումը փորձարկվել է ամեն օր: Էթանոլի օգտագործման եւ էթանոլի նախապատվության քանակությունը հաշվարկվել է յուրաքանչյուր մկնիկի համար, եւ այդ արժեքները միջին հաշվարկվել են էթանոլի յուրաքանչյուր կոնցենտրացիայի համար: Ալկոհոլի կոնցենտրացիաների ազդեցությունը եւ BxF- ի եւ BxN- ի մկների մեջ ինքնակառավարման վրա ինքնատիրապետման ազդեցությունը դրսեւորվեց փորձարարական խմբի մեջ `բարձր կոնցենտրացիաների հասանելիությամբ (3-35% էթանոլի լուծումների հասանելիության հասանելիություն, այնուհետեւ` 3- ի 9, 18, եւ 27% էթանոլը, վերջացրած 9% էթանոլի վերջնական ներկայացմամբ) եւ մեկ այլ խումբ `ցածր կոնցենտրացիաների շնորհիվ (3-9% էթանոլի հասանելիության հասանելիություն, իսկ փորձի մնացորդը կատարվում է 9% էթանոլի մատչելիությամբ): Այս խմբերից յուրաքանչյուրն ունեցել է մի ենթախումբ, որը արել կամ չհանդիպեց երեք շաբաթվա ընթացքում մեկ շաբաթվա ընթացքում: Վերահսկիչ մկները նմանատիպ պայմաններ են ունեցել, միեւնույն ժամանակ փորձարարական մկները, բայց միայն մեկ շիշ ջուր է առաջարկվում:
Ջրի (n = 14-16), բարձր կոնցենտրացիաները (n = 10), խտացնող ժամանակաշրջաններով (n = 20), ցածր կոնցենտրացիաների (n = 10) եւ ցածր կոնցենտրացիաների (N = 20): Տես նկարը Նկար11 մանրամասն շշերի ընտրության խմբի ժամանակացույցների համար:
ΔFosB Immunohistochemistry եւ քանակականացում
ΔFosB իմունոհիստոքիմիան (IHC) չափվել է ուղեղի 16 շրջաններում այն մկներից, որոնք ունեցել են 72 օրվա շարունակական հասանելիություն կամ ջրի (վերահսկիչ) կամ ջրի և ալկոհոլի [Բարձր կոնցենտրացիաներ և ցածր կոնցենտրացիաներ]: Բարձր կոնցենտրացիաների ազդեցությունը էթանոլի նախընտրության և սպառման վրա շատ ավելի մեծ էր, քան ձեռնպահության ազդեցությունը. հետեւաբար, ձեռնպահ մնալու շրջաններ ապրած խմբերն ընդգրկված չեն ΔFosB IHC չափումներում: Բացի այդ, փորձը կատարվել է կայուն կամ նվազեցված ալկոհոլի նախապատվության առաջին իսկ տեսքից դուրս ՝ ցույց տալու համար, որ վարքագծային ֆենոտիպերը կայուն են էթանոլի կոնցենտրացիայի փոփոխությունների կրկնվող ցիկլերով ՝ էթանոլի քրոնիկ սպառման հետևանքները ուսումնասիրելու համար: Փորձի 73-րդ օրը ալկոհոլը հեռացնելուց չորս-ութ ժամ անց մկները խորապես անզգայացվեցին (175 մգ / կգ նատրիումի պենտոբարբիտալ) և ներծծվելով 20 մլ 0.01 Մ ֆոսֆատային բուֆերային աղով (PBS), որին հաջորդում էր 100 մլ 4%: paraformaldehyde- ը PBS- ում: Ուղեղները հեռացվեցին, տեղադրվեցին 4% պարաֆորմալդեհիդի մեջ 4 ° C ջերմաստիճանում, ներկառուցված 3% ագարոզայի մեջ, կտրված (50 մմ, պսակ) վիբրատոմի վրա, տեղադրեցին կրիոպրոտեկտիվ (30% սախարոզա, 30% էթիլենգլիկոլ և 0.1% պոլիվինիլ պիրոլիդոնը PBS- ում) գիշերը 4 ° C ջերմաստիճանում և պահվում է −20 ° C ջերմաստիճանում մինչև IHC- ի համար մշակվելը: Հալված հատվածները լվացվեցին PBS- ով, մաքրվեցին 0.3% H2O2- ով և մեկ ժամով ինկուբացվեցին այծի 3% նորմալ շիճուկում `ոչ սպեցիֆիկ պիտակավորումը նվազագույնի հասցնելու համար: Հյուսվածքների հատվածներն այնուհետև ինկուբացվեցին գիշերը 4 ° C ջերմաստիճանում `3% այծի նորմալ շիճուկում և anti-FosB- ում (SC-48, 1: 5000 նոսրացում, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA): Բաժինները մեկ ժամ լվացվեցին, ինկուբացվեցին բիոտինիլացված այծի հակատապաստային Ig- ում (1: 200 նոսրացում, Vector Laboratories, Burlingame, CA), լվացվեցին և ինկուբացվեցին ավիդին-բիոտինային համալիրում (1: 200 նոսրացում, Elite kit-Vector Laboratories): , Պերօքսիդազի ակտիվությունը պատկերացվել է 0.05% դիամինոբենզիդինի (0.015% H պարունակող) հետ արձագանքման միջոցով2O2): Հյուսվածքների բաժինները Նիսլին հակասական էին (օգտագործելով մեթիլեն կապույտ / աղացած II): Կույր հաշվելու համար սլայդները կոդավորվեցին: ΔFosB-IR նեյրոնները հաշվարկվել են 50X (նավթի) խոշորացումով `օգտագործելով օպտիկական ֆորտրատորի մեթոդը եւ StereoInvestigator համակարգչային ծրագրերը: Նմուշառման պարամետրի տեղեկություն. Հաշվարկային շրջանակ (50um x 50um x 10um) նույնն է բոլոր տարածաշրջանների համար, Այնուամենայնիվ, ցանցի չափը որոշվել է յուրաքանչյուր ուղեղի տարածաշրջանում `ապահովելու, որ ընդհանուր երկկողմ բջիջները հաշվի առնեն 100-300- ը` 0.1- ից պակաս փոփոխական գործակիցը հասնելու համար: Տվյալները հաշվարկվել են որպես յուրաքանչյուր տարածաշրջանի համար ΔFosB դրական միջուկների (ΔFosB դրական միջուկների / նեյրոնների քանակը) տոկոսը:
Այս հետազոտության մեջ օգտագործված FosB հակամարմինը (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) բարձրացվել է FosB- ի ներքին շրջանի դեմ եւ ճանաչում է ինչպես FosB, այնպես էլ ΔFosB- ն: Թեեւ այս հակամարմինը ճանաչում է թե FosB- ն, թե ΔFosB- ն, այս հետազոտության մեջ քանակականացված իմունոֆոտիվ նեյրոնները կոչվում են ΔFosB դրական նեյրոններ, քանի որ այն ցույց է տվել, որ թմրանյութերի չարաշահման, ներառյալ ալկոհոլը, մասնավորապես, ΔFosB- ի, ոչ FosB- ին առաջացնում են նեյրոններ: Perrotti եւ այլն. ([2008)) ΔFosB- ի ինդուկցիան (ի պատասխան խրոնիկական տուբերկուլյոզի վարման, ներառյալ ալկոհոլը), օգտագործելով երկու հակամարմիններ, մեկը ճանաչում է FosB եւ ΔFosB (SC-48) եւ մեկ ընտրող ΔFosB (ոչ առեւտրային առումով) եւ գտել է, որ բոլոր դեղերի համար սովորել է FosB հակաբիոտիկի (SC-48) օգտագործմամբ դիտարկվող իմունգորակտիվությունը պայմանավորված է ΔFosB- ի կողմից, քանի որ նրանք չեն հայտնաբերել որեւէ immunoreactive neurons, օգտագործելով երկարամյա FosB [10]: Բացի այդ, ΔFosB- ը հայտնի է որպես ուղեղի տարածաշրջանում եւ բջջային տիպի յուրահատուկ ձեւով, տարբեր քրոնիկական բուժումներով եւ հստակ վերանայումներով այս թեմայի վերաբերյալ առկա են [11,43,44].
Նեյրոանատոմիկ կառուցվածքների հապավումները եւ վայրերը
Il - ինֆրալիմբիկ կեղեվ (+ 1.70 մմ); Cg1 - cingulate ծառի կեղեվ 1 (+1.1 մմ); Cg2 - cingulate ծառի կեղեվ 1 (+1.10 մմ); NAcc միջուկ - կորիզի միջուկի միջուկ (+1.10 մմ); NAcc shell - միջուկի ակումբենսի թաղանթ (+1.10 մմ); LSi - կողային միջնապատի միջանկյալ (+1.10 մմ); La - կողային ամիգդալա (− 1.22 մմ); Բլա - բազալիտրալ ամիգդալա (− 1.22 մմ); CeC / CeL - կենտրոնական պարկուճային և կենտրոնական կողային ամիգդալա (− 1.22 մմ); CeMPV - ամիգդալայի կենտրոնական միջուկի միջին հետինոտնտեսային հատված (−1.22 մմ); PAG - պերիակվադուկտալ մոխրագույն (− 3.64 մմ); EW - Edinger-Westphal կորիզ (− 3.64 մմ); VTA - փորոքային հատվածային տարածք (− 3.64 մմ); DR - կռնակի ռեփ (- 4.60 մմ); PBN - parabrachial կորիզ (−5.2 մմ); NTS - nucleus tractus solitarius (− 6.96 մմ): Մկնիկի ուղեղը ստերեոտաքսիկ կոորդինատներում[45] օգտագործվել է սելջուկորեն համապատասխանում յուրաքանչյուր մեկի երեք հատվածի յուրաքանչյուր ուղեղի քանակականացման համար:
Վիճակագրական ընթացակարգեր
Տվյալները ներկայացվում են որպես միջին ± SEM, բացառությամբ այն դեպքերի, երբ այլ բան նշված չէ: Տվյալները սովորաբար բաժանվում են: Վիճակագրությունը կատարվել է 6 վիճակագրական տարբերակի (StatSoft, Tulsa, OK, ԱՄՆ) եւ GraphPad Prism- ի 4.00 տարբերակի (GraphPad Software, San Diego, CA, ԱՄՆ) օգտագործմամբ: Կրկնվող միջոցառումները երկկողմանի ANOVA- ները իրականացվել են էթանոլի սպառման եւ նախասահմանման տվյալների համար, որպեսզի գնահատեն խմբերի միջեւ եղած տարբերությունները: ΔFosB- ի տվյալները կատարվել են երկու եւ երեք ձեւով ANOVA- ների համար, որոնք գնահատելու են խմբի (բարձր կոնցենտրացիաների, ցածր կոնցենտրացիաների եւ ջրի), ուղեղի տարածաշրջանի եւ գենոտիպի փոխազդեցությունները եւ հիմնական ազդեցությունները: Bonferroni- ի բազմակողմանի համեմատությունը եւ Bonferroni- ի հետընտրական շտկումները կատարվել են համապատասխան դեպքերում: Մասնավորապես, մենք ենթադրում էինք, որ սթրեսը եւ պարգեւատրման սխեմաները կբարձրացնեին FosB- ը մկների մեջ, ցույց տալով ալկոհոլի նախապատվությունը: Յուրաքանչյուր հիբրիդ խաչի համար Pearson- ն օգտագործվել է ΔFosB մակարդակների եւ էթանոլի փորձառու մկների մեջ էթանոլի նախասիրության եւ սպառման միջեւ զգալի փոխկապակցվածության հայտնաբերման համար:
Հիերարխիկ կլաստերները կատարվել են, որպեսզի պատկերացնեն, թե ինչպես են տվյալները փոխում եւ գնահատում, թե ինչպես են տվյալների խումբը միասին: Տպագրված միջին արժեքները փոխարինվել են անհայտ կորած տոկոսների ΔFosB տվյալներից, որոնք չեն գերազանցում տվյալների 15% -ը: Թեեւ ավելի մեծ աստիճանի անորոշություն կա, քան, եթե, ըստ էության, դիտարկված արժեքները դիտարկվեն, հիերարխիկ կլաստերների վերլուծությունը պահանջում է ամբողջական անդամակցություն կամ լրիվ վերացում, ըստ գործի իմաստների համեմատության: Հիերարխիկ կլաստերների կատարումը կատարվել էր Ward- ի մեթոդով եւ արդյունքում առաջացնող կլաստերները պատվիրվել էին հիմնական բաղադրիչ վերլուծության առաջին սկզբունքային բաղադրիչով (JMP®, Version 8, SAS Institute Inc., Cary, NC): Ջրի եւ էթանոլի փորձառու խմբերի համար յուրաքանչյուր ուղեղի համար ΔFosB տվյալները z-score փոխակերպվել եւ հիմնական բաղադրիչները վերլուծություն է իրականացվել, որոշելու համար կլաստերների քանակը: Տվյալները, այնուհետեւ, կլաստեր էին ուղեղի շրջանների եւ անհատների կողմից, վերահսկվող հիերարխիկ կլաստերների վերլուծության միջոցով:
Հեղինակների ներդրումները
ARO, YAB, RAH, TAJ- ն նպաստեց հետազոտության նախագծմանը: ARO- ն ձեռք է բերել տվյալներ: ARO, IP, RDM վերլուծել են տվյալները: Ձեռնարկի ստեղծման եւ վերանայման մեջ ընդգրկված էին ԱՀԿ, ՌԴԿ, ԱՊ, ՏԱ, ԵԲ եւ ՌՀՀ: Բոլոր հեղինակները կարդացել եւ հաստատել են վերջնական ձեռագիրը:
Լրացուցիչ
Մենք ցանկանում ենք շնորհակալություն հայտնել Drs- ին: Ջոի Մեյֆիլդը եւ Քոլին ՄքՔլունգը, օգտակար քննարկումների համար եւ Մարնիի Մարտինեսը, Ջենիֆեր Սթոքսը, Միշել Ֆոշատը, Խոսե Կիենֆյուգոսը, Ջեյմեյ Սեյմուրը եւ Դարշան Պանդիան: Այս հետազոտությունը աջակցել է Ալկոհոլիզմի կոնսորցիումի դրամաշնորհի AA13520- ի ինտեգրալային նեյրոնագիտության նախաձեռնությանը եւ Ալկոհոլի չարաշահման եւ ալկոհոլիզմի դրամաշնորհների ազգային ինստիտուտ AA06399-S- ի եւ AA16424- ի կողմից:
Սայլակ
- Գարսիա-Անդրեաս C, Wall TL, Ehlers CL- ը: Հրդեհային առասպելն ու պատասխանը Առաքելական հնդկացիների ալկոհոլի նկատմամբ: Am J հոգեբուժության. 1997;154: 983-988: [PubMed]
- Schuckit MA- ը, Smith TL, Kalmijn J. Ալկոհոլի պատասխանատման մակարդակի վերաբերյալ ենթախմբերում հայտնաբերված արդյունքները `որպես ալկոհոլի օգտագործման խանգարումների ռիսկի գործոն` քոլեջի կանանց եւ լատինամիկ բնակչություն: Ալկոհոլի հիվանդանոց 2004;10: 1499-1508: [PubMed]
- Բելկապ Ջ.Կ., Crabbe JC, Young ER. 15 inbred մկնիկի շտամների էթանոլի կամավոր սպառումը: Հոգեբրոֆարմոլոգիա: 1993;112: 503-510: doi: 10.1007 / BF02244901: [PubMed] [Խաչ]
- Բլեդնով Յա, Մետտեն Պ, Ֆինն Դ DA, Ռոդոս Ջ.Ս., Բերզեսոն Ս.Ն., Հարրիս Ռ., Քրաբբե Ջ. Հիբրիդային C57BL / 6J x FVB / NJ մկները ավելի շատ ալկոհոլ են խմում, քան C57BL / 6J մկները: Ալկոհոլի հիվանդանոց 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Բլեդնով Յա, Օզբերն AR, Walker D, Ահմեդ Ս, Բելկապ Փ. եւ այլն: Հիբրիդ մկները որպես ալկոհոլի սպառման գենետիկական մոդելներ: Բեվավ Գենետ: 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Օզբերն AR, Հարրիս Ռ., Բլեդնով Յ. C57BL / 6JxFVB / NJ- ի եւ C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1 հիբրիդային մկների միջեւ վարքային տարբերությունները `կապված էթանոլի ընդունման վերահսկողության հետ: Բեվավ Գենետ: 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. C57BL / 6J- ում ալկոհոլի չարաշահման եւ ուժեղացում ազդեցություն: Ալկոհոլի հիվանդանոց 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Խաչ]
- Porrino LJ, Whitlow CT, Սամսոն Հ. Էթանոլի եւ էթանոլի / սակրոլի ինքնակառավարման ազդեցությունը առնետների տեղական ուղեղային գլյուկոզայի օգտագործման վրա: Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26: [PubMed]
- Williams-Hemby L, Porrino LJ- ն: Էթանոլի ցածր եւ միջին չափաքանակները առնետների ճարպային մետաբոլիկ փոփոխությունների հստակ ձեւավորում են: Ալկոհոլի հիվանդանոց 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Խաչ]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ: DeltaFosB- ի ուղեղի հագեցված տարբերակները չարաշահման թմրամիջոցներով: Synapse- ը: 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ: DeltaFosB- ը ուղեղի երկարաժամկետ հարմարվողության համար մոլեկուլային անջատիչ է: Brain Res Մոլ Brain Res. 2004;132: 146-154: [PubMed]
- Պերոտտի Լի, Բոլանոս CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB- ն կուտակվում է հոգեբուժական բուժումից հետո վրացական tegmental տարածքի հետի պոչի մեջ գտնվող GABAergic բջիջների բնակչության մեջ: Eur J Neurosci: 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Խաչ]
- Ռյաբինի Ա.Է., Վան Յ. Կրկնվող ալկոհոլային խմիչքը տարբեր կերպ է ազդում C-Fos- ի եւ FosB- ի սպիտակուցների immunoreactivity- ին DBA / 2J մկների վրա: Ալկոհոլի հիվանդանոց 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Խաչ]
- Ռյաբինի Ա.Է., Բախտել Ռ., Ֆրիման Պ, Ռայներեր Ֆ. ITF արտահայտությունը մկնիկի ուղեղում ալկոհոլային ինքնազբաղման ձեռքբերման ժամանակ: Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Խաչ]
- Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE: Ալկոհոլային խմիչքը առաջացնում է ուղեղի տարածաշրջան `սինդրոմ փոփոխություններ` ճնշման ազդանշանի գործոնների արտահայտման համար: Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Խաչ]
- Kalivas PW. Ինչպես ենք որոշում, թե որն է թմրամիջոցների առաջացման պատճառը: Նատ Նեուրոսցի: 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Խաչ]
- Crews FT, Nixon K. Ալկոհոլիզմի նյարդահեգեներացիայի եւ վերականգնման մեխանիզմներ: Ալկոհոլը: 2009;44: 115-127: doi: 10.1093 / alcalc / agn079: [Խաչ]
- Խիստի ՌՏ, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF- ը: C57BL / 6 մկների ենթաշերտերում էթանոլային զրկման ազդեցության բնութագրումը: Ալկոհոլը: 2006;40: 119-126: doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE: Urocortin 1- ի բջիջները մկնիկի ուղեղում լարվածություն են: Neuroscience. 2005;132: 729-740: doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047: [PubMed] [Խաչ]
- Ռիաբինի Ա. C57BL / 6J մկների Edinger-Westphal միջուկի լորձերը խանգարում են էթանոլի հիպոթերմային եւ էթանոլի օգտագործմանը: Eur J Neurosci: 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Խաչ]
- Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA- ն: Urocortin 1 microinjection մկնիկի կողային հատվածում կարգավորում է ալկոհոլի սպառման ստացումը եւ արտահայտումը: Neuroscience. 2008;151: 780-790: doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Տյուրեք VF, Tsivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE: Urocortin 1- ի արտահայտությունը հինգ զույգ շառի գծում ընտրվածորեն սնվել է ալկոհոլային խմիչքի տարբերությունների համար: Հոգեբրոֆարմոլոգիա: 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Խաչ]
- Ryabinin AE, Weitemier AZ: The urocortin 1 neurocircuit: էթանոլային զգայունություն եւ պոտենցիալ ներգրավում ալկոհոլի սպառման մեջ: Brain Res Rev. 2006;52: 368-380: doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007: [PubMed] [Խաչ]
- Սամսոն Հ.Հ., Տոլլիվեր Գ.Ա., Հարակուի Մ, Հոդ Ք. Ալկոհոլի ինքնակառավարումը `մեսոլիբիկ դոպամինի դերը: Ann NY Acad Sci. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Խաչ]
- McBride WJ, Li TK: Ալկոհոլիզմի կենդանիների մոդելներ. Կրծողների մեջ բարձր ալկոհոլային խմիչքի վարքի նյարդաբանություն: Քրիտ Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Խաչ]
- Coob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Neurocircuitry թիրախ է էթանոլի պարգեւատրման եւ կախվածության մեջ: Ալկոհոլի հիվանդանոց 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Խաչ]
- Ռոդդ Զա, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ: Էստոնիայի ինքնակառավարման ինքնավարացում, տղամարդկանց Wistar առնետների վրացական ազդեցության շրջանում, դոպամինային նեյրոնների ներգրավման ապացույց: J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Խաչ]
- Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Էթանոլի ցածր դոզանները ակտիվացնում են դոպամիներգիկ նեյրոնները `վրացական ներկրող տարածքում: Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Խաչ]
- Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie հեռուստատեսություն: Էթանոլն ավելացնում է ռոմանտիկ վրացական իշեմիալ տարածքի դոպամինային նեյրոնների կրակումը: Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Խաչ]
- Հեիլիգ Մ, Կոոբ Գ. Ալկոհոլային կախվածության մեջ կորտիկոտրոպինային ազատման գործոնի համար կարեւոր դեր է խաղում: Թրենդներ Նյարդաբան: 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Dyr W, Kostowski W. Այն փաստը, որ amygdala ներգրավվում է 5-HT3 ընդունիչ հակագոնիստների արգելակում է առնետների մեջ ալկոհոլային խմիչքի վրա: Ալկոհոլը: 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Խաչ]
- Գիլպին Ն.Վ., Ռիչարդսոն Հ.Ն., Կոոբ Գ.Ֆ. CRF1-receptor- ի եւ opioid- ընկալիչների հակաօգտագործիչների ազդեցությունը ալկոհոլի նախընտրելի (P) առնետների ալկոհոլային խմիչքի կախվածության աճի վրա: Ալկոհոլի հիվանդանոց 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Hyytiä P, Koob GF- ն: GABAA- ի ընկալիչի հակասությունը ընդլայնված amigdala- ում նվազեցնում է առնետների ինքնավարացումը: Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Խաչ]
- Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. Էթանոլը մեծացնում է GABAergic փոխանցումը առաջացնող եւ կենտրոնական ամիրդդալա նեյրոնների առաջացնող եւ postsynaptic վայրերում: Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058: doi: 10.1073 / pnas.0437926100: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Roberts AJ, Cole M, Koob GF- ն: Intra-amygdala muscimol- ը նվազեցնում է գործոն էթանոլի ինքնակառավարումը կախյալ առնետներից: Ալկոհոլի հիվանդանոց 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Խաչ]
- Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Կրճատվել է փորձարարական անհանգստություն եւ կամավոր էթանոլ սպառումը առնետների կենտրոնական, բայց ոչ basolateral amygdala վնասվածքներից հետո: Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Խաչ]
- Վի Ս, Կոոբ Գ. Դինֆորին-կափփա օփիոիդային համակարգի դերը չարաշահման թմրամիջոցների ուժեղացման հետեւանքների մեջ: Psychopharmacology (Բեռլին) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Walker BM- ի, Valdez GR- ի, McLaughlin JP- ի, Bakalkin G.- ը: Դինֆորինը / կաբփա օփիոիդային ռեցեպտորների համակարգերը, որոնք օգտագործում են ալկոհոլի չարաշահումը եւ կախվածությունը: Ալկոհոլը: 2012;46: 359-370: doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP- ն: Էթանոլի պայմանավորված տեղանքի նախապատվության եւ ինքնակարգավորման սթրեսային ազդեցության ներթափանցման endogenous kappa-opioid միջնորդությունը: Psychopharmacology (Բեռլին) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Խաչ]
- McBride WJ- ն: Ամիրդալայի կենտրոնական միջուկը եւ ալկոհոլի եւ ալկոհոլային խմիչքի վարքագծի հետեւանքները կրծողների մեջ: Pharmacol Biochem Behav- ը: 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Խաչ]
- Dole VP- ը, Gentry RT- ը: Մկների ալկոհոլիզմի անալոգային մոտեցումը. Մոդելի մասշտաբային գործոնները: Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546: doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Dole VP- ը, Gentry RT- ը: Մկների մեջ ալկոհոլիզմի անալոգային դիմանալը. Դեղագործորեն խթանող խմիչքի ճանաչման չափանիշները: Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471: doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed] [Խաչ]
- Nestler EJ- ն: Կախվածության մոլեկուլային նյարդաբիոլոգիա: Am J Addict. 2001;10: 201-217: doi: 10.1080 / 105504901750532094: [PubMed] [Խաչ]
- Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: երկարատեւ նյարդային եւ վարքային պլաստիկության մոլեկուլային միջնորդ: Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Խաչ]
- Franklin KJ, Paxinos G. Մկնիկի ուղեղը ստերեոտաքսիկ կոորդինատներում: 2. Սան Դիեգո, Կալիֆոռնիա. 2001.
;