Նեվոլոգիայի ամսագիր, 6 սեպտեմբեր 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Պիտեր Օլաուսոն1, J. David Jentsch2, Նատալի Տրոնսոն1, Rachel L. Neve3, Էրիկ Ջ. Նեստլեր4, եւ Ջեյն Ռ. Թեյլորը1
1.Նամակագրությունը պետք է հասցեագրվի Ջեյն Ռ. Թեյլորի, Հոգեբուժության բաժնի, Մոլեկուլային հոգեբուժության բաժանմունքի, Յեյլի բժշկական համալսարանի բժշկության դպրոցի, Ռիբիոֆի հետազոտական կենտրոնի, Կոնեկտիկուտի հոգեկան առողջության կենտրոնի, 34 Park Street- ի, New Haven- ից, CT 06508- ից:[էլեկտրոնային փոստով պաշտպանված]
Վերացական
Մոտիվացիայի փոփոխությունները ենթարկվել են մի շարք հոգեբուժական խանգարումների, այդ թվում, թմրանյութերի չարաշահման եւ դեպրեսիայի պաթոֆիզիոլոգիայում: Չարաշահման կամ սթրեսի թմրամիջոցների կրկնակի ազդեցությունը հայտնի է դանդաղորեն առաջացնել արգանդի գործադրման գործոնը ΔFosB- ի միջուկային հեծանիվների (NAc) եւ դորալ ստերիմատում, որը ենթադրվում է, որ նպաստում է դոպամինային կարգավորվող ազդանշաններում նեյրոհարդապետությանը. Այնուամենայնիվ, քիչ հայտնի է ΔFosB- ի կոնկրետ ներգրավվածությունը ախորժելի մոտիվացված վարքագծի կարգավորմամբ: Այստեղ մենք ցույց ենք տալիս, որ ΔFosB- ի ինդուկցիկ գերազանց արտահայտությունը NAc- ում եւ բուսական փոխանցման մկների դորալ ստերիմատում, կամ հատկապես առնետների NAc- ի միջուկում, օգտագործվում է վիրուսով միջնորդավորված գենային փոխանցման միջոցով, ուժեղացված սննդամթերքի ամրապնդվող գործիքային կատարման եւ առաջադիմական արձագանքի արձագանքման միջոցով: Շատ նմանատիպ վարքային ազդեցություն է հայտնաբերվել կոկաինի, ամֆետամինի, MDMA [(+) - 3,4-methylenedioxymethamphetamine] կամ առնետների մեջ նիկոտին նախորդ կրկնվող ազդեցությունից հետո: Այս արդյունքները ցույց են տալիս ΔFosB- ի կողմից մոտիվացիոն գործընթացների հզոր կարգավորումը եւ վկայում այն մասին, որ NAc- ի ներսում ΔFosB- ի ինդուկցիայի միջոցով գենի հայտնաբերման մեջ թմրամիջոցների ներածված փոփոխությունները կարող են կարեւոր դեր խաղալ գործիքային վարքագծի վրա ազդեցության ազդեցության ազդեցության մեջ:
ներածություն
Կրկնվող թմրանյութերի ազդեցությունը առաջացնում է ժամանակավոր դինամիկ փոփոխություններ գեների արտագրման մեջ, որոնք առաջացնում են երկարատեւ նեյրոհամակարգերներ, միջուկի ականջակալների ներսում (NAc) (Nestler, 2004): Այս ուղեղի շրջանը կարեւոր դեր է խաղում ինչպես թմրամիջոցների, այնպես էլ բնական ամրացման գործընթացներում (Քելլի եւ Բերրիջ, 2002), թեեւ քիչ բան է հայտնի transcription- ի գործոնների մասին, որոնք ազդում են նյարդաբուծի կողմից վարվող վարքագծի վրա, ախորժակի ուժեղացուցիչների, ինչպիսիք են սննդամթերքը: ΔFosB- ն քրոնիկ թմրամիջոցների ազդեցության հետեւանքով NAc եւ dorsal striatum- ում ակտիվացված transcription գործոնն է (Konradi et al., 1994; Nye եւ այլն, 1995; Chen եւ այլն, 1997; Pich եւ այլն, 1997; Shaw-Lutchman եւ այլոք, 2003) եւ compulsive անիվի վազում (Werme et al., 2002): Այն նաեւ ներթափանցվում է այս շրջաններում քրոնիկ սթրեսի մի քանի ձեւերով (Perrotti եւ այլոք, 2004): Թմրամիջոցների ուժեղացման գործընթացների բարելավումը կապված է ստերիլալ ΔFosB- ի ինդուկացիայի հետ,Kelz եւ այլն, 1999; Colby եւ այլն, 2003; Zachariou et al., 2006): Այնուամենայնիվ, հայտնի չէ, որ այս շրջաններում բարձր ΔFosB մակարդակների հետեւանքները բնական հզորացնողների կողմից գործիքային պահվածքի վրա:
Գործիքային պատասխանների կատարումը թմրամիջոցների վարման վարքագծի անհրաժեշտ բաղադրիչն է, որը կարող է դեգրադացվել կամ անխոչընդոտ լինել, քանի որ կախվածության առաջընթացն անցնում է (Jentsch եւ Taylor, 1999; Berke եւ Hyman, 2000; Բերիր եւ Ռոբինսոն, 2003; Everitt եւ Robbins, 2005): ԱՀԿ-ն ներգրավված է գործիքային վարքագծի բազմաթիվ ասպեկտների մեջ `կախվածության համար (Բալլին եւ Քիլքսոս, 1994; Corbit եւ այլն, 2001; դե Բորչգրավ եւ այլն, 2002; Դի Կիանոն եւ Էվերիտ, 2004b; Everitt եւ Robbins, 2005): Հետեւաբար, հավանական է, որ NAC- ի շրջանակներում թմրամիջոցների ներգրավված նյարդաբաշխումները կարող են ազդել գործիքային գործողությունների կատարման վրա: Անշուշտ, քրոնիկ կոկաինը ենթարկվում է սաքսոզի-ամրապնդվող գործիքային առաջադրանքի (Miles et al., 2004) եւ մանիպուլյացիաները, որոնք մտածում են արգելափակել նեյրոպլաստիկության մակարդակը NAC միջուկում, ներառյալ PKA- ի արգելումը (սպիտակուցային kinase A) կամ սպիտակուցային սինթեզը, խանգարել սննդի վարձատրվող գործիքային պատասխաններինBaldwin et al., 2002a; Hernandez et al., 2002): ԱՀԿ-ն նաեւ միջնորդում է պայմանավորված ազդեցությունների մղիչ ազդեցությունը գործիքային վարքագծի վրա (Պարկինսոն եւ այլք, 1999; Corbit եւ այլն, 2001; Hall եւ այլն, 2001; Di Ciano եւ Everitt, 2004a; Ito et al., 2004), ապահովելով նեւրոբիոլոգիական նյութեր, որոնցով ΔFosB- ի զորակոչումը կարող է ուժեղորեն ազդել ագրեսիվ ուժեղացուցիչների համար, ինչպիսիք են սննդի, ջրի կամ չարաշահման թմրամիջոցների գործադրումը եւ մոտիվացիան:
Այստեղ մենք ուսումնասիրեցինք ΔFosB- ի ազդեցությունները սննդամթերքի շարժիչ գործիքային վարքագծի վրա `օգտագործելով երկու լրացուցիչ գենետիկական մոտեցումներ. (1) ΔFosB- ի ինջեկուլային գերբնակեցում NAc- ի եւ բուսական փոխանցման մկների (NSE-tTA × TetOp-ΔFosB) եւ (2) գերբնակեցման խորքային ստերիմատ ΔFosB- ի ԱՀ-ի միջուկում, մասնավորապես, առնետների վիրուսով միջնորդավորված գենային օգտագործման միջոցով. Մենք նաեւ գնահատեցինք, թե արդյոք նախորդ կրկնակի ազդեցությունը կոկաինի, ամֆետամինի, (+) - 3,4-methylenedioxymethamphetamine- ի (MDMA) կամ նիկոտինին, աճող ΔFosB- ի պայմաններում, կնպաստի առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի միջոցով սննդի ուժեղացված գործիքային պատասխան եւ / ինչպես ցույց տվեց թմրամիջոցների ուժեղացված ինքնակառավարման համար (Horger et al., 1990, 1992; Պիացա եւ այլն, 1990; Vezina եւ այլք, 2002; Miles et al., 2004): Մեր արդյունքները ցույց են տալիս, որ ΔFosB- ի կայուն ազդեցությունը գործիքային վարքագծի վրա եւ ենթադրում է, որ այս transcriptional factor- ը կարող է գործել NAc- ի առանցքում `որպես մոտիվացիոն գործառույթի կարգավորող:
Նյութեր եւ մեթոդներ
Կենդանիներ եւ կենդանիների խնամք
Փորձանմուշորեն միամիտ Sprague Dawley առնետները ձեռք են բերվել Շարլզ լիճ լաբորատորիաներից (Wilmington, MA): Male bitransgenic 11A մկները ստացան խաչից հեմոսիգոգային տրանսգենային մկների միջեւ, որոնք արտահայտում են նեյրոնային հատուկ enolase (NSE) -tTA tetracycline transactivator սպիտակուցը (գիծ A) եւ TetOp- ի (tetracycline- արձագանքող խթանող) -DFosB (գծի 11) արտահայտող մկաններ; ծնողական տողերը պահպանվել են խառնված խառը ֆոնի վրա (50% ICR եւ 50% C57BL6 × SJL) (Chen եւ այլն, 1998; Kelz եւ այլն, 1999): Այս կրկնօրինակային 11A մկները արտահայտում են ΔFosB միայն այն ժամանակ, երբ (1) երկու տրանսգենները ներառում են նույն բջիջը, եւ (2) տրանսկսով տրանստրարյան ակտիվացումը չի արգելվում թթվասիքլին հակաբիոտիկների, օրինակ `դոկիկիկլլինի առկայությամբ: Այս մկների նկատմամբ դոկիքսցիկլինի վարումը կարող է դյուրացնել հսկողությունը ΔFosB արտահայտության նկատմամբ եւ օգտագործվել կանխարգելման ժամանակ արտահայտությունը. իսկ դոկտիքսիլլինայի կառավարումը կապված է ΔFosB- ի հայտնաբերելի արտահոսքի արտահայտությամբ (Chen եւ այլն, 1998; Kelz եւ այլն, 1999): Բացի այդ, 11A- ն անց է կացվում նախկին փորձերի համար, քանի որ դրանք արտահայտում են արտահայտման օրինակ, որը հիմնականում սահմանափակվում է դինորֆին պարունակող շնչողական նեյրոններ (ինչպես NAc եւ dorsal striatum), որոնք շատ նման են քրոնիկական թմրանյութի ΔFosB ներդիրի օրինակին: բացահայտում (Kelz եւ այլն, 1999): Ավելին, ΔFosB- ի այս ստիատալային արտահայտության քանակականացումը նախկինում քանակականացված է (Chen եւ այլն, 1998; Kelz եւ այլն, 1999): Մկները ստեղծվել են Տեխասի հարավ-արեւմտյան համալսարանում եւ պահպանվել եւ փորձարկվել են Յեյլի կառույցներում: Հղիության եւ զարգացման ընթացքում բոլոր մկները պահպանում էին դոքսիկսինլին մինչեւ 8-9 շաբաթը խմելու ջրի մեջ 100 μg / մլ- ի կոնցենտրացիայում, պայմանները, որոնք հայտնի են TetOp- ի վրա հիմնված տրանսգենդերին «անջատված» վիճակում պահպանելու համար եւ օգտագործվում են 6- ից շաբաթական դոկիոցիկլին, երբ ΔFosB արտահայտությունը դառնում է առավելագույն (Kelz եւ այլն, 1999): Բոլոր փորձերը ներառում էին համեմատաբար ցածր դեվիկսցիկլինի համեմատած ողնաշարի կրկնակի մկների համեմատությունը, որը ինքնին չի ազդում շարժիչ վարքի վրա (Kelz եւ այլն, 1999; McClung եւ Nestler, 2003; Zachariou et al., 2006).
Բոլոր փորձարարական սուբյեկտները տեղադրվեցին զույգերով (առնետներ) կամ խմբերի (մկներ `չորսից հինգը մեկ վանդակի համար) հսկվող ջերմաստիճանի եւ խոնավության պայմաններում, 12 ժամյա լույսի / մութ ցիկլով (լույս է 7- ում` 00 AM- ում եւ անջատված է 7- ում `00- ում: Վարչապետ): Նրանց թույլատրվել է առնվազն 7 դ, նախքան որեւէ ուսումնասիրության հարմարեցնելու բնակարանային հարմարությունները: Կենդանիները բոլոր ժամանակներում ջրի մուտքի թույլտվություն ունեին եւ սննդի սահմանափակ մատչում, ինչպես նաեւ ստորեւ: Բոլոր կենդանիների օգտագործումը իրականացվել է «Լաբորատոր կենդանիների խնամքի եւ օգտագործման համար» առողջապահական ուղեցույցի Ազգային ինստիտուտների համաձայն եւ հաստատվել է Տեխասի հարավ-արեւմտյան եւ Յեյլի համալսարանի Կենդանիների խնամքի եւ օգտագործման կոմիտեների կողմից:
Drugs
Կոկաինի հիդրոքլորիդը (ՆԻԴԱ), դ-ամֆետամին սուլֆատ (Սիգմա, Սեն - Լուի, ՄՈ), MDMA հիդրոքլորիդ (տրամադրված NIDA- ի կողմից) եւ (-) - նիկոտինի ջրածնային տիտրատ (Սիգմա) ) լուծարվել են ստերիլ ֆիզիոլոգիական աղիով (0.9%) եւ intraperitonally ներարկել 5 մլ / կգ (մկների) կամ 2 մլ / կգ (առնետների) ծավալով: Նիկոտինի լուծույթի pH- ն ճշգրտվել է ներարկմանից առաջ նատրիումի բիկարբոնատով:
Վիրուսային վեկտորները
Վիրուսային միջնորդավորված գենային փոխանցումը կատարվել է նախկինում նկարագրված (Կառլզոն եւ այլք, 1998; Perrotti եւ այլոք, 2004): Մի խոսքով, կոնկրետ սպիտակուցները կոդավորող cDNA- ները տեղադրվեցին HERPES պարզեցված վիրուսի (HSV) amplicon HSV-PrPUC- ի մեջ եւ փաթեթավորվում է վիրուսի միջոցով `օգնական 5dl1.2- ի միջոցով: HSV-LacZ- ի արտահայտման շարժիչ վեկտորները, որոնք ստուգում են պրոտեին β-galactosidase կամ HSV-ΔFosB կոդավորում, ΔFosB- ի համար կոդավորմամբ, հետագայում փորձարկվող արձանագրության համաձայն NAc միջուկը ներթափանցվեց:
Փորձարարական ընթացակարգ
Նկարագրություն:
1- ի փորձը ուսումնասիրել է նախորդ կրկնվող թմրամիջոցների ազդեցությունը սննդամթերքի ամրապնդման գործիքային կատարման եւ առաջադիմական արձագանքի վրա: Ազդանշանները պատահականորեն բաժանվեցին հինգ փորձարարական խմբերի (n = 9-10 / խումբ): Այս խմբերը ստացան երկու անգամյա ներարկումներ (intraperitoneally, 9- ում, 00 AM- ում եւ 5- ում `00 PM- ով), աղիով կամ հետեւյալ դեղերից մեկը` նիկոտին, 0.35 մգ / կգ; MDMA, 2.5 մգ / կգ; կոկաինը, 15 մգ / կգ; կամ amphetamine, 2.5 մգ / կգ, 15 հաջորդ օրվա համար: Դոզանները ընտրվել էին մեր նախկինում հրապարակված տվյալների հիման վրա (Taylor եւ Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), եւ թմրամիջոցների ազդեցության լոկոմոտիվի խթանումը դիտվել է 1 եւ 15 բուժման օրերի ընթացքում: ՀՆՈՒՄՔ-ից դուրս գալուց հետո կենդանիները վերապատրաստվել են 5 օրացուցային օրվա համար գործիքային պատասխանների վրա եւ հետագայում փորձարկվել հաջորդ օրը արձագանքող առաջադեմ հարաբերակցության վրա: Երկու կենդանիներ բացառվել են վիճակագրական վերլուծությունից, քանի որ նրանք չեն ստացել գործիքային պատասխանը `ոչ ավելի, քան մեկ ակտիվ լծակ պատասխան` երեք վերջնական վերապատրաստման դասընթացներից յուրաքանչյուրում:
2- ի եւ 3- ի փորձերը ուսումնասիրել են ΔFosB- ի ինդուկտիվ ստիատալային գերբնակեցման հետեւանքները, որոնք անջատիչ մկների մեջ առաջացնում են գործիքային աշխատանքի եւ ուժեղացման առաջադեմ հարաբերակցության վրա: Այս մկների մեջ ΔFosB- ի ինդուկցիկ գերազանց ցուցադրությունը նախկինում ցուցադրվել է որպես թմրամիջոցների կրկնակի ազդեցության կրկնօրինակման ազդեցությունը լոկոմոտիվային գործունեության մեջ եւ պայմանավորված տեղային նախապատվությունների պարադիգմները (Kelz եւ այլն, 1999; Zachariou et al., 2006): Այս մկները կարող են խիստ կարեւոր տեղեկություններ տրամադրել striatal ΔFosB- ի ներդրման վերաբերյալ որոշակի վարքագծային գործընթացներին: Genotyped male mice- ը պահպանվել է դոկիքսիքցլինի վրա կամ անցել է ջրի քաշեք 8 շաբաթվա ընթացքում: Փորձարկումները սկսվել են 6 շաբաթվա ընթացքում դոկիքսցիկլինից դուրս գալու ժամանակ, որի ժամանակ transgene արտահայտությունը առավելագույնն է (Kelz եւ այլն, 1999): 2- ի փորձի մեջ կենդանիները (n = 16) սննդի սահմանափակումներն էին եւ դասավանդվում էին 10 հաջորդ օրվա համար ստորեւ նկարագրված գործիքային ընթացակարգով (տես ստորեւ, Գործիքային պատասխան եւ առաջադեմ հարաբերակցության փորձարկում): Գործիքային փորձարկումների ավարտից հետո այս մկների վրա գնահատվել է կոկաինի կողմից առաջացած շարժիչային շարժիչի խթանումը: 3- ի փորձարկումում մկների առանձին խումբը (n = 18) վերապատրաստվել են 10 օրացուցային օրվա ընթացքում գործիքային պատասխանի վրա, որի պայմաններում առավելագույնը 50 հաստատողներ են մատուցվել: 11 օրվա ընթացքում բոլոր մկները փորձարկվել են առաջադիմական արձագանքի վրա: Օրվա 12- ում մենք որոշեցինք ամրապնդվող արժեզրկման հետեւանքները, նախաորակավորելով առաջադիմական արձագանքի վրա:
4- ի եւ 5- ի փորձերը ուսումնասիրել են ΔFosB- ի վիրուսային միջամտության գերբնակեցման ազդեցությունները, մասնավորապես, NAc- ի շրջանակներում: 4- ի փորձը փորձարկեց ΔFosB overexpression- ի ազդեցությունը գործիքային կատարման վրա: Այստեղ աթոռներ էին ներարկվել HSV-ΔFosB (n = 8) կամ HSV-LacZ (n = 8) NAc միջուկում եւ վերապատրաստվել 40 ժամ հետո սկսած գործիքային ընթացակարգին: 10- ի ամենօրյա վերապատրաստման դասընթացներից հետո բազային ակտիվության մակարդակները գնահատվել են ստորեւ նկարագրված ստորգետնյա ակտիվության մոնիտորինգի սարքավորումների բոլոր կենդանիների համար (տես ներքեւում, Locomotor գործունեությունը): 5- ի փորձը գնահատել է NAc ΔFosB- ի գերբնակեցման ազդեցությունը, մասնավորապես, առաջադեմ հարաբերակցության արձագանքման վրա: Այստեղ առնետները նախապես պատրաստվում էին 15 օրացուցային օրերի համար, փորձարարական խմբերի համար, իսկ հետո NAc միջուկում ներծծվել HSV-ΔFosB (n = 8) կամ HSV-LacZ (n = 7): Կենդանիները մնացել են չստուգված եւ չլուծված են 4 d- ի համար `թույլ տալով ΔFosB արտահայտությունը հասնել գագաթնակետին: Օրվա ընթացքում 5- ին ներարկվելուց հետո բոլոր կենդանիները փորձարկվել էին առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի վրա լծակի սեղմման համար: Թեստավորման վերջին օրվանից հետո, բոլոր առնետները սպանվեցին եւ ինֆուզիոնների տեղադրումը NAc հանգույցում հաստատեց գաստուկիմիական ձեւով: Ինֆուզիոն թնդանոթների տեղադրման հիման վրա երկու առնետները հանվել են 4 փորձից եւ մեկ առնետ 5 փորձից:
Գենային արտահայտման բնութագրումը կատարվել է կենդանիների առանձին խմբում: Այստեղ HSV-LacZ- ը ներարկվել է NAc- ի միջուկում եւ կենդանիները սպանվել են 3 դ ուշ: Β-galactosidase- ի արտահայտությունը հետագայում գնահատվել է իմունոգեւորոիմիկորեն:
Տեղաշարժիչ գործունեություն.
Լոկոմոտիվի գործունեությունը չափվում էր ակտիվների հաշվիչներով (Digiscan կենդանիների գործունեության մոնիտոր, Omnitech Electronics, Columbus, OH): Ակտիվության հաշվիչները հագեցած էին ինֆրակարմիր ֆոտոխցիկների երկու շարքով, 16 սմ-ով տեղադրված 2.5 սենսորներից բաղկացած յուրաքանչյուր տող: Գործունեության հաշվիչները վերահսկվում են եւ տվյալների մոնիտորներից տվյալների հավաքած PC համակարգչի միջոցով, օգտագործելով Micropro ծրագրային ապահովում (Omnitech Electronics):
Փորձարարական կենդանիները տեղադրվեցին թափանցիկ պլաստիկ տուփերում (25 × 45 × 20 սմ), որոնք գործադրման համար էին դրված: Կենդանիները նախապես թույլատրվում էին սովորել մինչեւ 30 րոպե լոկոմոտիվային ակտիվության ձայնագրման սարքավորում: Որոշ փորձնական փորձարկումներում կենդանիները հետագայում դուրս էին բերվել, փորձարկվելով կոկաին, ամֆետամին, նիկոտին կամ տրանսպորտային միջոց, ներս մտան արկղերի մեջ: Այնուհետեւ լոկոմոտիվային ակտիվությունը արձանագրվեց 60 րոպե, սկսած 5 րոպեից մինչեւ թմրամիջոցների ներարկումը `կանխարգելման չպահանջող ներարկման ենթադրյալ հիպիմատիլությունից: Բոլոր փորձերը կատարվեցին կենդանիների լույսի փուլում (9- ի միջեւ `00 AM եւ 6: 00 PM):
Գործիքային արձագանքման եւ պրոգրեսիվ հարաբերակցության փորձարկում:
Գործիքային պատասխանը գնահատվել է առնետների (30 × 20 × 25 սմ) կամ մկների (16 × 14 × 13 սմ) համար օգտագործվող ստանդարտ օպերատիվ խցիկների միջոցով, MedPC ծրագրով վերահսկվող (Med Associates, St. Albans, VT): Յուրաքանչյուր պալատը տեղադրվել է ձայնային տաքացնող արտաքին խցիկում `սպիտակ աղմուկի գեներատորով եւ օդափոխիչով, որը նվազեցնում է արտաքին աղմուկի ազդեցությունը: Պալատը լուսավորված է հետեւի պատին տեղադրված տան լույսը: Գնդկաթթու դիսպենսերները պարունակվում էին սննդի կարկուտներով (20 կամ 45 մգ, Bio-Serv, Frenchtown, NJ), որպես ամսագրի մեջ ամրապնդող: Գլխի մուտքերը հայտնաբերվել են ֆոտոցելիով, ամրացված բեռնարկղի վերեւում: Այս ամսագրում խթանող լույս էր: Առնետների համար ամսագրի յուրաքանչյուր կողմում տեղադրվեց մեկ լծակ: Մկների համար պալատների հետեւի պատին տեղադրվեցին երկու նոսեպոկային բացվածքներ (այսինքն `հակառակ ուղղիչ ամսագրի):
5- ի ընթացքում դասընթացների մեկնարկից անմիջապես առաջ կենդանիները սահմանափակվում էին օրական 90 րոպե մատչելիությամբ եւ ցնցուղի վրա հիմնված սննդային գնդիկների վրա (մկաններ, 20 մգ, առնետներ, 45 մգ) իրենց տուփերում: Թեստավորման ժամանակահատվածում սննդային կարկուտները պարբերաբար մատչելի էին պահեստային պալատներում, վարքագծային արձանագրության համաձայն (տես ստորեւ), ինչպես նաեւ անսահմանափակ քանակությամբ տան վանդակում, 90 րոպե, սկսած 30 րոպեից ամենօրյա ստուգումներից հետո: Սննդի մատչելիության գրաֆիկը թույլ է տալիս յուրաքանչյուր կենդանու հասնել իրենց անհատական հագեցվածության կետին եւ նվազեցնում է գերիշխող եւ ենթական կենդանիների միջեւ մրցակցության հետեւանքով առաջացող փոփոխականությունը: Մեր ձեռքերում այս ժամանակացույցը թույլ է տալիս դանդաղ քաշի ձեռք բերել նախնական քաշի կորուստից հետո ~85-90% անվճար սնուցող կշիռներ: Կենդանիների կշիռները վերահսկվում էին ամբողջ փորձի ընթացքում:
Բոլոր առարկաները նախեւառաջ սովորել են 2 դ- ի փորձարկման ապարատին. սեմինարի ընթացքում սննդային կարկուտները տեղադրվեցին reinforcer ամսագրին, ֆիքսված ժամանակի 15- ի (FT-15) ժամանակացույցում: Հաջորդ օրվանից առարկաները ստացան ամենօրյա դասընթացներ 10 հաջորդ օրվա համար: Սննդամթերքի արձագանքումը փորձարկվել էր նախկինում հրատարակված գործիքային պայմանների կիրառման հիման վրա (Baldwin et al., 2002b): Պատասխանելով ճիշտ (այսինքն `ակտիվ) լծակի / nosepoke- ին, ամրապնդվեց, իսկ մյուս (ոչ ակտիվ) լծակի վրա արձագանքելը ծրագրավորված հետեւանքներ չուներ: Ակտիվ նոսեպոկի կամ լծակի (ձախ / աջ) դիրքորոշումը հավասարակշռված է բոլոր փորձարարական խմբերի համար: Պատասխանի պահանջի ավարտը (տես ստորեւ) հանգեցրեց ամսագրի խթանման լույսի սկիզբը, հետեւեց 1- ի հետագա մեկ սննդի գնդիկի առաքմանը: Երկրորդ վայրկյանից հետո խթանիչ լույսն անջատվեց: Առաջին 10 հաստատակամները ձեռք են բերվել արձագանքման հաջողված ավարտից հետո, ֆիքսված հարաբերակցության (FR1) ժամանակացույցի հիման վրա, որից հետո գնդիկները հասանելի էին փոփոխական հարաբերակցությամբ (VR2) ժամանակացույցի վրա: Նիստը տեւեց 15 րոպե:
Փորձերը 3 (առնետները) եւ 5 (առնետները) օգտագործեցին այլընտրանքային վերապատրաստման ժամանակացույցներ `խուսափելու գործիքային կատարողականության տարբերությունների հնարավոր ազդեցությունից, հետագա առաջադիմական արձագանքի վրա (մանրամասն ստորեւ) վերապատրաստման ընթացքում: Փորձի 3- ում, մկները վերապատրաստվել են FRNNXX- ի ժամանակացույցի համար 1- ի համար, իսկ հետո FR2- ի ժամանակացույցի համար, 2- ի համար: Փորձարկման առաջին 8 դը օգտագործվում է 3 րոպե նստաշրջանում: Վերջին 60 ուսումնական օրերի ընթացքում նիստը դադարեցվեց, երբ 7 ամրապնդողները ձեռք են բերվել: Փորձի 50- ում, առնետները վերապատրաստվել են FR5 / VR1- ի ժամանակացույցի 2- ի մինեկ նիստում, ինչպես նշված է վերը նշված բոլոր փորձերի համար, երկու բացառություններով: Նախ, 15 պանելների / նստաշրջանի առավելագույն քանակն է: Երկրորդ, այս կենդանիները ստացան 150 լրացուցիչ օրվա ուսուցում (այսինքն `ընդհանուր 5 դ), թույլ տալով կայուն աշխատանքի կայացում առաջարկել ցանկացած փորձարարական մանիպուլյացիա:
Կենդանիները նույնպես փորձարկվել էին սննդի համար պատասխանելու համար, ամրապնդման առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի վրա: Այս փորձարկման ընթացքում սննդամթերքի ստացման պատասխանը պահանջվում է որպես FR1 ժամանակացույց, սակայն աստիճանաբար աճել է 2- ի միջոցով, որպեսզի հետագա reinforcer ձեռք բերի (այսինքն `1, 3, 5, 7 ..., X + 2 արձագանքները): Օգտագործելով առնետների օգտագործման դեղերի փորձառությունը, գրաֆիկը աստիճանաբար ավելացվեց 5- ով `1, 6, 11, 16 ..., X + 5- ի վերջնական ժամանակացույցը: Բոլոր մյուս պարամետրերը պահպանվել են վերը նշված վերապատրաստման ընթացակարգին նույնական: Թեստը դադարեցվեց, երբ 5 րոպե ոչ մի ակտիվ պատասխան չի կատարվել:
Reinforcer արժեզրկումը:
Հզոր ուժերի արժեզրկման ազդեցությունը դիտարկվում էր որպես հատուկ ֆունկցիոնալ նախապատվություն: Այստեղ, մկներին թույլատրվել է անսահմանափակ հացահատիկով հիմնված սննդային կարկուտներ օգտագործել իրենց տան վանդակում, նախքան 3 ժամ առաջ, փորձարկվելուց առաջ ամրագրման առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցը:
Վիրաբուժական մեթոդներ.
Կենդանիները զննում էին ETHNOL (35% v / v) եւ propylene glycol (183.6% v / v) պարունակող Equithesin- ից [pentobarbital (10 մգ / կգ) եւ քլորալրատ (39 մգ / կգ) խառնուրդը: վարակված է 4.32 մլ / կգ, ip]: Cannulas (Plastics One, Roanoke, VA) վիրաբուժական իմպլանտանտ էին, որոնք ուղղված էին ԱՀԿ-ի վերեւում, օգտագործելով Kopf ստերեոտակտիկական սարքավորումները: Bregma- ի նկատմամբ կիրառվող ստերեոտակտիկական կոորդինատները հետեւյալն էին. Նախորդ / հետերային, + 1.5 մմ; կողային / միջին, ± 1.5 մմ; ventral / dorsal, -6.0 մմ (Paxinos եւ Watson, 1986): The cannulars խարսխված է գանգի օգտագործելով պտուտակներ եւ ատամնաբուժական ցեմենտի. Անթափանցիկ խանգարումների կանխարգելման նպատակով գլխատախտակները տեղադրվեցին գլխատողներ: Վիրահատությունից հետո կենդանիները ենթարկվում են ստանդարտ հետվիրահատական խնամքի եւ թույլատրվում է վերականգնել 5 դ- ի ցանկացած փորձի մեկնարկից առաջ:
Infusions.
Վիրուսային վեկտորների ներգրավված բորբոքումները կատարվել են կրկնակի 40 ժամ առաջ `վերապատրաստման սկսվելուց առաջ (տես ստորեւ): Ներարկման սինգլներ (31 չափիչ), որը ուղեկցող թնդանոթի տողից ցածր 1 մմ-ից ցածր էր, դանդաղորեն իջեցվել է ձախ եւ աջ ԱՔՔ-ներում, իսկ 1.0 μl / կողմը ներարկվել է 4 μL / ժամի ընթացքում 0.25 μL / min օգտագործելով միկինֆուզիոն պոմպ (PHD-5000, Harvard Apparatus, Holliston, MA): Ինֆուզիոն ասեղները մնացին տեղում 1 րոպե հետո ինֆուզիոն ավարտվել է, եւ կողոպտիչ cannulas փոխարինվել. Cannula placements histologically հաստատվել վարքագծային փորձարկումների ավարտից հետո (տես Նկար 6B), եւ փորձարարական տվյալների վիճակագրական վերլուծության մեջ ընդգրկվել են միայն ճիշտ տեղադրվող կանունների կենդանիները:
Հիստոլոգիական վերլուծություններ եւ իմունոստաինացում:
Փորձերի ավարտից հետո փորձարկումների արդյունքում վիրահատություններ ստացող կենդանիները անզգայացվում էին Equithesin- ով եւ transcardially հետ 0.1 մ PBS (5 րոպե) եւ 10% formalin (10 րոպե), ըստ ստանդարտ ընթացակարգերի: Բեկոնները ֆոսֆալինով հետաձգվեցին եւ հետագայում տեղադրվեցին ֆոսֆատ-բուֆերացված լուծույթի լուծույթում (30%): Բոլոր ուղեղները այնուհետեւ կտրված են 40 μm բաժնում միկրատոմի վրա եւ օգտագործվում են գլխուղեղի տեղաբաշխման եւ սպիտակուցի արտահայտման հիստոլոգիական վերլուծության համար:
Cannula- ի տեղադրումը կատարվել է չեզոք կարմիրով եւ տեղադրվել է էթանոլի ջրազրկումից հետո քրիլենային եւ քլիլենի (DPX) մանրադիտակի սլայդների վրա: Իմունխիստոկիմիան կատարվել է նախկինում նկարագրվածHommel եւ այլն, 2003): Մի խոսքով, β-գալակտոսիդազի արտահայտությունը HSV-LacZ ինֆուզիոնից հետո որոշվել է այծի հակա-β-գալակտոսիդազ առաջնային հակամարմինների միջոցով (1: 5000, Biogenesis, Kingston, NH) `օգտագործելով իմունֆլյորեսցենտային գունավորումը: Գիշատիչ ինկուբացիայից հետո բաժինները լվացվեցին եւ հետագայում ինկուբացվեցին Cy2- ին (1: 200, Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA) միկրոօրգանիզմային էշի հակածանցային երկրորդային հակամարմին: Բաժինները նորից լվացվեցին, հետեւաբար, էթանոլի ջրազրկումը եւ մոնտաժումը DPX- ում: Հատուկ վերահսկողության բաժինները միանգամայն վերաբերվում էին առանց առաջնային հակամարմինների ներգրավման: Immunofluorescence- ը գնահատվել է 520 նմ-ով, օգտագործելով a Zeiss (Oberkochen, Գերմանիա) մանրադիտակի FITC ֆիլտրով եւ նույնական ազդեցության ժամանակ գրված պատկերները Zeiss Axiovision թվային պատկերման համակարգը:
Վիճակագրություններ
Բոլոր փորձերի տվյալները գնահատվել են մեկ, երկու կամ երեք եղանակով ANOVA- ի միջոցով, որին հաջորդել է Շեֆեի կամ Դանետի հետընտրական թեստը, անհրաժեշտության դեպքում շտկելով բազմաթիվ համեմատություններ ՝ օգտագործելով Հոլմի հաջորդականության մերժման թեստը: P ≤ 0.05 արժեքը վիճակագրորեն նշանակալի է համարվել:
Արդյունքներ
1- ի փորձարկում. Կրկնակի թմրանյութերի ազդեցության ազդեցությունը գործիքային կատարման եւ առաջադիմական արձագանքի վրա
Ապացուցելու համար, որ մեր կրկնվող թմրամիջոցների բացահայտման պարադիգմը գործնականորեն նշանակալի նեյրոհադապտացիաներ է արտադրում, մենք առաջին հերթին գնահատեցինք locomotor sensitization- ի որպես քրոնիկ դեղերի գործողությունների նախատիպային վարքագիծը: Rats- ին տրվել են օրական երկու անգամ նիկոտինի ներարկում (0.35 մգ / կգ), MDMA (5 մգ / կգ), կոկաին (15 մգ / կգ) կամ amfetamine (2.5 մգ / կգ), եւ շարժիչային ակտիվությունը փորձարկվել է 1- ի եւ 15- ի բուժման օրերը (լրացուցիչ 1A-E, հասանելի է www.jneurosci.org որպես հավելյալ նյութ): Վիճակագրական վերլուծությունը ցույց է տվել, որ օրվա ընթացքում փոխազդեցության զգալի վերաբերմունքը (F.(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001): MDMA- ի (p = 0.62) բացառությամբ, բոլոր թմրանյութերը զգալիորեն մեծացրել են լոկոմոտիվային ակտիվությունը (այսինքն, sensitization) օրը 15- ի օրվա համեմատությամբ `1 (նիկոտին, p ≤ 0.001, կոկաին, p ≤ 0.001, amphetamine, p ≤ 0.01) օրվա համեմատ: Կրկնվող շնչեղի ներարկումները որեւէ ազդեցություն չեն ունեցել: Թմրանյութերի բուժման ոչ մեկը չի փոխել բազային շարժիչային ակտիվությունը, որը չափվում է օրվա ընթացքում HNUMX- ին (լրացուցիչ 15A, հասանելի է www.jneurosci.org որպես հավելյալ նյութ):
Դեղերի ներարկման վերջին օրվանից հինգ օր անց մենք ուսումնասիրեցինք նախորդ կրկնվող նիկոտինի, MDMA- ի, կոկաինի կամ ամֆետամինի ազդեցությունը սննդի ուժեղ գործիքային վարքի վրա: Տվյալները ներկայացված են յուրաքանչյուր դեղամիջոցի առանձին Նկար 1A-H օգտագործելով նույն աղիքային հսկողության խումբը համեմատության համար: Մենք հայտնաբերեցինք, որ այս դեղերից յուրաքանչյուրը նախապես ազդեցություն է ունեցել զգայուն եւ ընտրովիորեն ավելացված սննդի ուժեղացված գործիքային արձագանքման (բուժման լծակով վերապատրաստման օրը, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; post hoc վերլուծություն. նիկոտին, p ≤ 0.01; MDMA, p ≤ 0.05; կոկաինը, p ≤ 0.01; ամֆետամին, p ≤ 0.001): Ասեմպտոտիկ կատարման մեջ դիտարկվող գործիքային արձագանքի համառ բարձրացումը առաջարկել է մոտիվացիայի հնարավոր խթանումը, որը համապատասխանում է նախկինում արձանագրված աճին `կրկնվող հոգեբանական խթանման հետեւանքով (տես Քննարկում): Հետեւաբար, մենք փորձարկեցինք, թե արդյոք նախկինում կրկնվող թմրանյութերի ազդեցությունը բարձրացնող մոտիվացիան, օգտագործելով պրոգրեսիվ հարաբերակցության ժամանակացույց: Նախկինում դեղերի ազդեցության վիճակագրական ազդեցությունը եղել է ակտիվ լծակի վրա արձագանքելու (լծակային փոխազդեցության բուժում, F.(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Նկ. 2A), ինչպես նաեւ վերջնական ընդմիջման կետը (F.(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Նկ. 2Բ): Լրացուցիչ վերլուծությունը ցույց է տվել, որ բոլոր բուժումները ավելացրել են ինչպես ակտիվ պատասխանների քանակը (նիկոտին, p ≤ 0.001, MDMA, p ≤ 0.05, կոկաինը, p ≤ 0.001, amfetamine, p ≤ 0.001) եւ ընդմիջման կետը (նիկոտին, p ≤ 0.001, MDMA , p ≤ 0.01, կոկաին, p ≤ 0.0001, ամֆետամին, p ≤ 0.0001), որոնք համապատասխանում են այդ բուժման շարժառիթների ազդեցությանը: Հաշվի առնելով թմրամիջոցների բազային լոկոմոտիվային գործունեության վրա ազդեցության բացակայությունը եւ անգործուն լծակային սեղմիչների վրա ազդեցության բացակայությունը, հավանական է, որ այս պայմաններում սննդամթերքի աճի արձագանքումը արտացոլում է շարժիչային գործունեության ոչ հատուկ աճը:
Նկար 1.
Հին օրվա կրկնակի նիկոտինի ներարկումը (0.35 մգ / կգ), MDMA (2.5 մգ / կգ), կոկաինը (15 մգ / կգ) կամ amphetamine (2.5 մգ / կգ) օրեցօր երկու անգամ 15 d- ի հետագա գործիքային վարքի վրա: Կենդանիները փորձարկվում էին միասին, բայց պարզ հասկացողության համար, յուրաքանչյուր թմրանյութի ազդեցությունը ներկայացվում է առանձին, օգտագործելով նույն աղտոտված բուժիչ խումբը: A (ակտիվ պատասխաններ) եւ B (ակտիվ արձագանքներ) ցույց են տալիս նախորդ նիկոտինի ազդեցության հետեւանքները. C, D, MDMA; E, F, կոկաին; G, H, ամֆետամին: Տվյալները ներկայացված են որպես ± SEM միջոց:
Նկար 2.
Նախկին կրկնվող բուժման ազդեցությունը (օրական երկու անգամ, 15 դ) աղի, նիկոտինի (0.35 մգ / կգ), MDMA (2.5 մգ / կգ), կոկաինի (15 մգ / կգ) կամ ամֆետամինի (2.5 մգ / կգ) հետ գործիքային արձագանքման վրա ուժեղացման առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի վրա: Տվյալները ներկայացվում են որպես միջոցներ ± SEM: *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05: Sal, Saline; Nic, նիկոտին; Կոկ, կոկաին; Ամֆ, ամֆետամին; PR, առաջադեմ հարաբերակցություն:
Նախկինում թմրանյութերի ազդեցությունը ոչ մի ազդեցություն չի ունեցել մարմնի քաշի առաջ, նախքան սննդի սահմանափակումը, գործիքային դասընթացի առաջին կամ վերջին օրը կամ անմիջական առաջընթացի հարաբերակցության փորձը (լրացուցիչ 2B, հասանելի է www.jneurosci.org որպես հավելյալ նյութ): 3- ի սահմանափակումով պարունակվող պարունակությունը նախնականում նվազեցրել է մարմնի քաշը միջին 91-92% անվճար սննդի կշիռներով: Հետախույզի փորձարկման վերջում կշիռները վերադարձան նախնական քաշի 97-99% եւ թմրանյութերի ազդեցության ենթարկված եւ աղիքային բուժվող կենդանիների միջեւ տարբերություն չի նկատվել: Դիակի քաշի փոփոխությունները եւ սովի ու ախորժակի տարբերությունները չպետք է զգալիորեն նպաստեն գործիքային կատարման կամ մոտիվացիայի բարձրացման դիտարկմանը:
2- ի փորձարկում. ΔFosB- ի կրկնակի փոխանցման մկների մեջ հագեցած գերազանց արտացոլում; գործիքային կատարումը
Հետագայում մենք ուսումնասիրեցինք, թե արդյոք գործիքային կատարումը ավելացել է նաեւ կրկնակի տրանսգենային մկների մեջ, որը հստակորեն գերազանցում է ΔFosB- ին, որը զգալիորեն ընտրովի է դառնում NAc եւ dorsal striatum- ում (Kelz եւ այլն, 1999): Այս փորձարկումում ΔFosB- գերազանցող ճնշման մկները համեմատվել են աշտարակի վերահսկողության հետ, որոնք չեն գերազանցում ΔFosB- ին, քանի որ դրանք պահպանվում են դոկիքսիքցլինի վրա (տես նյութեր եւ մեթոդներ): Մենք հայտնաբերեցինք, որ ΔFosB- ի գերբնակեցումը զգալիորեն մեծացրել է սննդամթերքի ամրապնդման արձագանքումը (գենը արտահայտիչը լծակով ուսուցման օրով, F- ով):(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Նկ. 3A): Ակտիվ բացվածքով կատարված nosepoke արձագանքների քանակը չի տարբերվում երկու խմբերի միջեւ (Նկ. 3Բ): Միասին, այս տվյալները ցույց են տալիս, որ ΔFosB- ի գերբնակեցումը NAc- ում եւ dorsal striatum- ում ընտրովիորեն մեծացնում է գործիքային կատարումը
Նկար 3
ΔFosB- ի կրճատվող ստիատալային արտերկրպրեսիայի ազդեցությունը գործիքային կատարման վրա ցնցող մկների վրա: A, Ակտիվ պատասխաններ: B, Անգործուն պատասխաններ: Տվյալները ներկայացված են որպես ± SEM միջոց:
Բացառում է, որ ΔFosB-overexpressing կենդանիների գործիքային գործողության կատարելագործումը կարող է բացատրվել ախորժակի կամ սովի մեջ փոփոխություններով, մարմնի քաշը գրանցվել է սննդի սահմանափակումից եւ վերապատրաստման առաջին եւ վերջին օրերից: ΔFosB- ը սննդի սահմանափակումից առաջ ոչ մի ազդեցություն չի ունեցել մարմնի քաշի վրա, ինչպես նաեւ վարքային փորձարկման ժամանակ մարմնի քաշի վրա ազդեցություն չի ունեցել: Այստեղ, 3 d- ի սննդի մատչելիության սահմանափակումը մարմնի քաշի նվազեցումն է միջինը 87-89% անվճար սնուցող կշիռներին: Հետազոտության վերջում կենդանական ծանրաբեռնվածությունը եղել է 97-99% նախահրթիռային մարմնի կշիռների, ինչպես նաեւ ΔFosB- ի եւ հսկողության մկների մեջ եղած համարժեք փոփոխություններ (լրացուցիչ Նկար 3A, հասանելի է www.jneurosci.org որպես հավելյալ նյութ): Այսպիսով, հավանական է, որ ΔFosB- ի բացասական կամ ախորժակի վրա բացասական ազդեցությունը կարող է հաշվի առնվել գործիքային արձագանքման կատարելագործման համար:
Գործիքային կատարման փորձարկումը ավարտվել է, ΔFosB գերբնակեցումը չի փոխել 30 րոպե ժամանակահատվածում չափված բազային լոկոմոտիվային ակտիվությունը (լրացուցիչ 3B, հասանելի է www.jneurosci.org որպես հավելյալ նյութ): Այս դիտարկումը պաշտպանում է այն տեսակետը, որ գործունեության մեջ անհատական փոփոխությունը չի նպաստում այդ կենդանիների նկատելի գործիքային կատարմանը: Այնուամենայնիվ, ΔFosB-overexpressing bitransgenic mice- ը հայտնաբերվել է սուր եւ կրկնվող կոկաինի (Kelz եւ այլն, 1999): Քանի որ մենք օգտագործեցինք դոկիքսիքցլինից դուրս գալու մի փոքր այլ գրաֆիկ, որպեսզի գենը արտահայտելու համար (6 շաբաթ սնունդ սահմանափակումով), մենք հաստատեցինք այս ֆենոտիպը հաստատելու համար: Իրոք, ΔFosB-overexpressing մկները ցույց տվեցին, որ կոկային ներթափանցելիս լոկոմոտիվի ակտիվության զգալի աճ է նկատվում, համեմատած դոքսիկսլինում պահպանվող ծեփամածիկ ստուգումների հետ(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (լրացուցիչ Նկար 3C, հասանելի է www.jneurosci.org որպես հավելյալ նյութ):
3- ի փորձարկում. ΔFosB- ի կրկնակի փոխանցման մկների մեջ հագեցած գերազանց արտացոլում; առաջադեմ հարաբերակցություն
Հաշվի առնելով, որ նախորդ դեղերի ազդեցությունը induces striatal ΔFosB (Nestler եւ այլն, 2001) եւ այստեղ հայտնաբերվել է առաջադեմ հարաբերակցությունը արձագանքելու համար, որից հետո մենք փորձարկեցինք, թե արդյոք ΔFosB- ի transgenic striatal overexpression- ը նաեւ մեծացնում է ուժեղացման առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի կատարողականը: Մկների նոր խումբը սովորել է գործիքային արձագանքման պայմաններում (տես Նյութեր եւ մեթոդներ), որոնք առաջ են բերում առաջադիմական արձագանքման (F(1,16) <1) Այնուամենայնիվ, պրոգրեսիվ հարաբերակցության թեստում մենք նկատեցինք գենի նշանակալի արտահայտություն լծակի փոխազդեցության միջոցով (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Նկ. 4A) եւ պարզել, որ ΔFosB- գերազանցող ճնշման մկները, համեմատած դոքսիկիցլինի վրա պահպանված ծծմբային հսկողության մկների հետ, ավելի մեծ քանակությամբ ակտիվ պատասխաններ են կատարել (p ≤ 0.05), մինչդեռ ակտիվ լծակային արձագանքների թիվը տարբեր չէ: ΔFosB-overexpressing մկները նույնպես հասել են ավելի բարձր ընդմիջման կետ (F.(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Նկ. 4Բ): Այս տվյալները ցույց են տալիս, որ ինչպես նախկին հոգեբանական խթանումը, ΔFosB- ի ստերիլալ արտերկրումը մեծացնում է մոտիվացիան: Քանի որ ΔFosB-overexpressing մկների մեջ չօգտագործված արձագանքների քանակը չի փոփոխվել, գործունեության մեջ անհասկանալի մեծությունները չեն կարող նպաստել այդ ազդեցությանը: Այս տեսակետը հետագայում եւս օժանդակվեց բազային լոկոմոտիվային գործունեության գնահատումների միջոցով, որի ընթացքում մկների գերբնակեցման ΔFosB- ի եւ դիսցիկցլինի վրա պահպանվող մշտապես վերահսկվող մկների միջեւ տարբերություն չկար: ΔFosB-overexpressing- ի եւ վերահսկվող կենդանիների միջեւ մարմնի քաշի ոչ մի ընդհանուր տարբերություն ակնհայտ չէր, քանի որ փորձարկման օրը չափվում էր: Այսպիսով, չնայած ΔFosB-overexpressing կենդանիները կցուցադրեն ավելի սննդի շարժիչ գործիքային պատասխաններ, նրանք չեն երեւում ավելի շատ սնունդ, երբ այն ազատորեն մատչելի է: Այս դիտարկման համար ամենայն հավանական բացատրությունն այն է, որ չնայած որ մոտիվացիան որոշում է, թե որքան դժվար է կենդանին աշխատելու ուժեղացնելու համար, շատ լրացուցիչ գործոններ (ախորժակի, հագեցվածության, մետաբոլիկ վիճակ եւ այլն) ազդում են կերակրման վարքի եւ սննդի փաստացի սպառման վրա:
Նկար 4.
FosB- ի ինդուկցիոն գերարտահայտման ազդեցությունը բիտրանսգենական մկների վրա գործիքային արձագանքման վրա `ուժեղացման առաջադեմ հարաբերական գրաֆիկով, հագեցածությամբ պայմանավորված ուժեղացուցիչի արժեզրկումից առաջ և հետո: A, B, բազային. Լծակի պատասխանները (A), ճեղքման կետը (B): C, D, Ամրապնդողի արժեզրկումից հետո. Լծակի պատասխաններ (C), ճեղքման կետ (D): Տվյալները ներկայացվում են որպես միջոցներ ± SEM: * p <0.05:
Այստեղ օգտագործված ΔFosB կրճատիչ մկները արտահայտում են ΔFosB ամբողջ ստիաթում: Մինչդեռ վրացական շերտը (ներառյալ NAc- ը) ենթարկվել է մոտիվացիոն գործընթացներում, դորալիստական շերտը պնդում է, որ ներգրավված լինի գործիքային սովորությունների ձեռքբերման մեջ (Yin եւ այլն, 2004; Faure et al., 2005): Չնայած մենք չենք նկատել տարբեր մակարդակներում գործիքային կատարման տարբերությունները, օգտագործելով ցածր հաճախականության գրաֆիկ, առավելագույն ամրապնդման սահմանաչափերով, համեմատաբար դիմացկուն է գործիքային սովորությունների զարգացմանը (Dickinson, 1985), հնարավոր է, որ սովորությունների ստեղծումը կարող է ազդել առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի վրա: Այս հնարավորությունը փորձարկվել է անմիջականորեն `գնահատելով առաջադեմ հարաբերակցության արձագանքման միջոցով ամրապնդվող արժեզրկման ազդեցությունը: Նման prefeeding- ը դադարեցրեց ΔFosB- ի ազդեցությունը առաջադիմական արձագանքման վրա, առանց ΔFosB-overexpressing- ի եւ վերահսկվող մկների (F(1,16) <1) (Նկ. 4C, D): Միեւնույն ժամանակ, այս տվյալները ցույց են տալիս, որ ΔFosB- ի ստերիլալ գերբնակեցումը չի փոխել զգայունությունը տվյալ փորձարկման ժամանակացույցի օգտագործման արդյունքում ստացված արդյունքների արժեքի փոփոխությունների նկատմամբ: Փոխարենը, առաջադեմ հարաբերակցության թեստի մեջ նկատված գործիքային պատասխանը կարծես նպատակաուղղված է եւ ΔFosB-overexpressing- ի մկների մեջ նկատված ընդմիջման կետը, ամենայն հավանականությամբ, կարող է վերածվել աճող դրդապատճառի եւ ոչ թե բարձրակարգ սովորույթների արձագանքման:
4- ի փորձարկում. ΔFosB- ի վիրուսային միջամտության գերակշռում, NAc- ի առանցքում. Գործիքային կատարում
Որպեսզի գնահատենք, թե արդյոք ΔFosB- ն գերազանցապես արտացոլված է NAc- ում, կարող է հաշվի առնել կրկնակի սինթետիկ մկների մեջ դիտվող վարքագիծը, մենք զարկեցինք HSV-ΔFosB- ին կամ HSV-LacZ- ին որպես վերահսկողություն, ընտրելով առնետների NAc միջուկը եւ ուսումնասիրեցինք այդ մանիպուլյացիայի ազդեցությունը սննդի վրա հզոր գործիքային կատարում (Նկ. 5A, B): Դասընթացի ավարտից հետո HSV-ΔFosB կամ HSV-LacZ- ը վարվել է վարակի փորձարկման նախապատրաստությունից առաջ NAc- ի հիմնական 40 ժամ: Ինֆուզիայի տեղադրությունը եւ վիրուսային միջնորդավորված գենի արտահայտման աստիճանը ներկայացված են Նկար 6, A եւ B. HSV-ΔFosB- ի NAc infusions- ն առաջացրել է ակտիվ արձագանքների քանակի կայուն աճ (լանդշաֆտի գենային արտահայտություն, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Նկ. 5A), որը շարունակեց փորձի ողջ ընթացքում: Այս ազդեցությունները ընտրողական էին, քանի որ ΔFosB բացասական արտահայտությունը զգալի ազդեցություն չի ունեցել NAc հանգույցում ոչ ակտիվ արձագանքների քանակի վրա (Նկ. 5B) կամ ելակետային լոկոմոտիվային գործունեության վրա արձանագրված փորձարկումն ավարտելուց հետո (տվյալները չեն ցուցադրվում): ԱՔԴ-ում ΔFosB- ի գերբարձրացումն այսպիսով մեղմեց նախորդ թմրամիջոցների ազդեցության կամ ΔFosB- ի ստերիլալ գերբնակեցման վարքային ազդեցությունները:
Նկար 5.
HSV-ΔFosB- ի infusions- ի ազդեցությունը NAc միջուկի մեջ, նախքան գործիքային արձագանքման դասընթացը: A, Ակտիվ պատասխաններ: B, Անգործուն պատասխաններ: Տվյալները ներկայացված են որպես ± SEM միջոց:
Նկար 6.
A, վիրուսային վեկտորի փորձերի համար ինֆուզիոն կայքերի տեղաբաշխում: Վերեւ, լցված սեւ շրջանակները համապատասխանում են նախատեսված ինֆուզիոն կայքում: Միայն ներսում կատարված infusionsԱյս տարածքի 0.5 մմ-ը (այսինքն `NAc միջուկի շրջանակում), ինչպես նշված է շրջանագծով, ընդունելի համարվեց: Այս տարածքի դրսից դուրս եկած կենդանատեսակները հանվել են վիճակագրական վերլուծություններից: Ներքեւում, Ներկայացվող կայքը NAc- ի ներսում ներկայացված կենդանիների մեջ: B, HSV-LacZ- ի ներարկումից հետո սպիտակուցային արտահայտման իմունոգեւոր քիմիական ստուգում: Վերին վահանակները ցույց են տալիս β-galactosidase արտահայտությունը NAc միջուկում (2.5 եւ 10 × խոշորացում): Ստորին վահանակները ցույց են տալիս, որ նույն իմունոգեւոր քիմիական ընթացակարգը կիրառելով հարակից հսկողության բաժանում իմունֆլյորեսցենիայի բացակայությունը `առանց առաջնային հակամարմինների ներգրավման:
5- ի փորձը. ΔFosB- ի վիրուսային միջնորդավորված գերբնակեցումը NAc- ի ներսում. Պրոգրեսիվ հարաբերակցություն
Վերջնական փորձը ուղղակիորեն որոշեց, թե արդյոք ΔFosB- ի սահմանափակումն է, որ NAc- ի միջուկում օգտագործվում է վիրուսով միջնորդավորված գեների փոխանցման մոտեցումը, բավարար է առնետների մոտիվացիայի բարձրացման համար: Այստեղ HSV-ΔFosB- ը ներծծվել է միայն գործիքային վերապատրաստման ավարտից հետո, վերացնելով ΔFosB գերազանց հսկողության ցանկացած հնարավոր ազդեցությունը հետագա առաջադեմ հարաբերակցության թեստի վրա: Նոր ատրճանակ խումբը, ինչպես եւ նախկինում, վերապատրաստվել է եւ բաժանվել հավասարակշռված փորձարարական խմբերի, ելնելով դրանց կատարման վերջնական օրերին: Կենդանիները հետագայում ստացան HSV-ΔFosB կամ HSV-LacZ երկկողմանի ինֆուսացիաները NAc միջուկում եւ փորձարկվում էին 5 դ գերազանցող արտահայտությունից հետո առաջացող առաջադեմ հարաբերակցության վրա: Վիճակագրական վերլուծությունը ցույց է տվել,(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Նկ. 7A): HSV-ΔFosB- ի հետ բորբոքված ողերները ավելի ակտիվ պատասխաններ են արել (p ≤ 0.01) համեմատ HSV-LacZ- ով ներարկվողների հետ, մինչդեռ արձագանքելով ոչ ակտիվ լծակին: Այս աճի հետ մեկտեղ, HSV-ΔFosB- ի հետ բորբոքված առնետները նույնպես ավելի բարձր ընդմիջում ունեն (F.(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Նկ. 7B), քան HSV-LacZ- ով ներարկվող կենդանիները: ΔFosB- ի ազդեցությունը ոչ մի առաջադեմ հարաբերակցության թեստից առաջ 1 ժամ առաջ փորձարկված բազային լոկոմոտիվի գործունեության վրա (լրացուցիչ 4A, հասանելի է www.jneurosci.org որպես հավելյալ նյութ): Առաջադեմ հարաբերակցության փորձարկման օրվա ընթացքում մարմնի քաշի միջեւ տարբերություն չկար (լրացուցիչ 4B, հասանելի է www.jneurosci.org որպես հավելյալ նյութ): Այս արդյունքները ցույց են տալիս, որ մեր դիտարկումները transgenic ΔFosB-overexpressing մկների հետ եւ ցույց են տալիս, որ ԱՀ-ում ΔFosB- ի ընտրովի գերբնակեցումը բավարար է սննդի հետ կապված մոտիվացման համար:
Նկար 7.
HSV-ΔFosB 5 d- ի ինֆուզիոն ազդեցությունը նախքան փորձարկումը գործիքային արձագանքման վրա `ամրապնդման առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի վրա: Ա, լծակը պատասխանում է: B, Break point. Տվյալները ներկայացվում են որպես միջոցներ ± SEM: *** p <0.001; ** p <0.01.
Քննարկում
Սույն ուսումնասիրությունը ցույց է տալիս, որ ԱՀ-ում ΔFosB- ի գերբնակեցումը ուժեղացնում է սննդի ամրապնդվող գործիքային վարքագիծըr. Կոկաինի, ամֆետամինի, MDMA- ի կամ նիկոտինային նախորդ ազդեցությունը առաջացրել է հետագա գործիքային կատարման երկարատեւ աճ: Այս թմրամիջոցների ազդեցությունները նույնպես ավելացնում էին սննդամթերքի շարժիչ վարքագիծը ամրապնդման առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի ներքո. Նախորդ դեղերի ազդեցության այս ազդեցությունները մանրեցվել են ΔFosB- ի սահմանափակ չափով գերբնակեցման միջոցով striatum- ում `օգտագործելով սեղմվող բուսական փոխանցման (NSE-tTA × TetOP-ΔFosB) մկները կամ օգտագործելով նոր վիրուսային վեկտորը, որն արտահայտում է ΔFosB- ի ընտրությունը NAc- ում. Հատկանշական է, որ ΔFosB- ի գերբնակեցումը NAc- ի միջուկում, գործիքային պատասխանից հետո արդեն ձեռք է բերվել, առաջադեմ հարաբերակցության ժամանակացույցի պարունակության մեջ սննդի ուժեղացված մոտիվացիա: Միասին մեր հայտնաբերումները բացահայտում են ΔFosB- ը NAc- ի ներսում, որպես թմրամիջոցների ներգրավված նեվերադաստատների հնարավոր միջնորդ, որը կարող է խթանել գործիքային վարքագիծը, ընդլայնել այս transcription գործոնի դերը սննդի ամրապնդման վարքագծի վրա մոտիվացիայի ազդեցության ենթարկվող գործընթացները ներառելու համար: Նրանք նաեւ բարձրացնում են այն հնարավորությունը, որ ԱՀԱ-ում ΔFosB արտահայտությունը առաջ բերելու պայմանները կարող են ազդել թե բնական եւ թմրամիջոցների ուժեղացուցիչների մոտիվացիոն հատկությունների վրա:.
ΔFosB- ն կուտակում է դինորֆինային արտահայտիչ միջին ցողունային նեյրոններ, այնպես էլ NAc- ի եւ դորալ ստերիմատից քրոնիկ, բայց ոչ սուր օրգանիզմից հետո, շագանակագեղձի թմրանյութերի ազդեցության տակ: Այս տարածաշրջանային արտահայտման ձեւը վերարտադրվում է այստեղ օգտագործվող սեղմված կրճատիչ ΔFosB-overexpressing մկների մեջ: Այս մկների մեջ, ΔFosB- ի ստրիատային մակարդակների բարձրացումը մեծացնում է կենդանիների զգայունությունը կոկաինի և մորֆինի նկատմամբ, ինչպես չափվում է պայմանավորված տեղանքի նախապատվությամբ: (Kelz եւ այլն, 1999; Zachariou et al., 2006): Այն նաեւ մեծացնում է կոկաինի համար արձագանքող առաջադեմ հարաբերակցությունը, որը ենթադրում է, որ կոկաինի ինքնակառավարման մղումը խթանվում է ստերիլալ ΔFosB overexpression (Colby եւ այլն, 2003): Այստեղ մենք հայտնաբերեցինք, որ այս մկների մեջ ΔFosB գերբնակեցումը նույնպես ավելացնում է առաջադեմ հարաբերակցությունը սննդամթերքի ամրապնդման համար, եւ այդ ազդեցությունները վերարտադրվել են ΔFosB- ի վիրուսով միջնորդավորված սահմանափակ արտերկրում: Մեր տվյալները ցույց են տալիս, որ ΔFosB- ն կարող է հանդես գալ որպես առաջնային ուժեղ կողմերի համար դրդապատճառի transcriptional modulator, լինեն սննդամթերք, թմրամիջոցներ կամ թերեւս վարժություններ, գաղափար, նախնական դիտարկումների համաձայն, որ ΔFosB- ի ստերիալալ արտահայտությունը ավելանում է քրոնիկական անիվի վազումից կամ սահոսկով խմելուիցMcClung et al., 2004). Այս տվյալները ցույց են տալիս, որ ΔFosB- ի NAc արտագնահատումը կարող է բարելավել բնական եւ թմրամիջոցների ուժեղացուցիչների մոտեցման ազդեցությունը:
ԱԱ ենթատարածաշրջանները պնդում են, որ տարբեր կերպ են միջամտում պավլովյան կամ գործիքային խթանման գործընթացների գործիքային կատարման վրա: (Corbit եւ այլն, 2001; դե Բորչգրավ եւ այլն, 2002), մինչդեռ գործիքային գործունեության ավելի ընդհանուր մոտիվական ազդեցությունները կարող են կոդավորվել այլ տարածաշրջաններում, ինչպիսիք են amygdala- ի կենտրոնական միջուկը (Corbit եւ Balleine, 2005): Այնուամենայնիվ, ԱՀԿ-ն առաջարկվում է լինել գիրքային գործիքային ուսուցման ձեռքբերման համար կարեւոր տեղ:Սմիթ-Ռո եւ Քելլի, 2000; Baldwin et al., 2002a,b; Kelley, 2004): Մենք ցույց ենք տալիս, որ նախորդ դեղերի ազդեցությունները եւ transgenic striatal ΔFosB overerexpression- ի համարժեք էֆեկտներ գործիքային վարքագծի բարձրացման վերաբերյալ: HSV-ΔFosB- ի վարակները, որոնք սահմանափակված են NAc- ի միջուկի հետ, նույնպես մեծացնում են սննդամթերքի ամրապնդման գործիքային արձագանքը: Թեեւ այս փորձարկումները չեն բացառում դանդաղային ստերիմատների ներդրումը այդ վարքագծում, նրանք հստակորեն առաջարկում են, որ NAc- ի շրջանակներում գենային արտահայտման մեջ ΔFosB- ի դրսեւորվող փոփոխությունները բավարար են սննդի մոտիվացված արձագանքի բարձրացման համար: Քանի որ առաջադիմական հարաբերակցությունը պատասխանում էր նաեւ այն դեպքում, երբ ΔFosB- ը արտահայտվել էր կայուն գործիքային առաջադրանքից առաջ, երբեմն հասնելը, հավանական է, գործիքային պահվածքի վրա մոտիվացիոն ազդեցությունների դերը: Հնարավորությունը, որ մեր մանիպուլյացիաները կարող են ազդել նաեւ գործիքային ուսուցման գործընթացների վրա, այնուամենայնիվ, չի կարող ամբողջությամբ բացառվել: Մեր եզրակացություններին համահունչ, նախորդ բանավոր կոկաինը ենթարկվելուց հետո նկատվել է գործիքային կատարողականի աճ (Miles et al., 2004), պնդել է, որ ներգրավված լինեն խրախուսական փոփոխություններով, որոնք համապատասխանում են քրոնիկ նիկոտինի բուժման ունակությանը `մկների մեջ առաջացող առաջադեմ հարաբերակցությունըԲրունցել եւ այլք, 2006). Բացի դրանից, դոպամինային տրանսպորտային բեռնախցիկի մկաններն են, որոնք աճում են արտազատվող դոպամինային մակարդակները, ցուցադրվում են ինչպես ընդլայնված ΔFosB immunoreactivity եւ սննդի ուժեղացված մոտիվացիան,Cagniard et al., 2006). Դեռ ավելին, մենք պարզեցինք, որ մկների վրա ΔFosB- ի ստերիլալային արտերկրումը չի ազդել կատարման վրա, երբ սնունդը «արժեզրկվել է» նախաուղղմամբ. Այս տվյալները ցույց են տալիս, որ կենդանիները զգայուն են ամրապնդողի մոտիվացիայի արժեքի նկատմամբ եւ պատասխանը նպատակն էր ուղղված.
Նախորդ կրկնակի թմրանյութերի ազդեցությունը կարող է նաեւ բարելավել վարքագծային հսկողությունը, որը պայմանավորված է պայմանավորված խթանների միջոցով, կապված բնական հենարանների հետ, չափվելով պավլովյան մոտեցմամբ (Harmer եւ Phillips, 1998; Taylor եւ Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), պայմանավորված ուժեղացում (Taylor եւ Horger, 1999; Olausson et al., 2004), եւ pavlovian-to-instrumental փոխանցումը (Wyvell եւ Berridge, 2001): Այժմ կա համոզիչ վկայություն, որ NAc- ի հիմքը, ի տարբերություն shell- ի, ներգրավված է թմրամիջոցների վրա հիմնված վարքագծի վերահսկողության մեջ `պավլովյան պայմանավորված խթանների միջոցով (Պարկինսոն եւ այլք, 1999, 2002; Hall եւ այլն, 2001; Dalley et al., 2002; Ito et al., 2004): Մեր արդյունքները կարող են ենթադրել, որ ԱԱ-ում ΔFosB- ի թմրամիջոցների ներածված դրսեւորումը կարող է լինել մի մեխանիզմ, որի միջոցով վարվելակերպը վերահսկվում է այս ընթացակարգերում: Հնարավոր է նաեւ, որ պավլովյան պայմանավորված խթանները, որպես պայմանավորված ամրապնդողներ, նպաստեն ներկայիս վարքային ազդեցություններին: Արտադրված վարվելակերպի վարքագիծը նման պայմանավորված խթանիչով, որը միջնորդավորված է ստիատալային ΔFOSB- ի ավելացմամբ, կարող է նաեւ նպաստել սպիտակուցի ազդեցությանը թմրանյութերի ներածված պայմանավորված տեղում նախապատվության վրա (Kelz եւ այլն, 1999; Zachariou et al., 2006) եւ կոկաինի համար պատասխանող առաջադեմ հարաբերակցությունը (Colby եւ այլն, 2003): Մոտիվացիոն գործընթացներում փոփոխությունները ենթադրվում են, որ նպաստում են կախվածության վարքագծի զարգացմանը եւ պահպանմանը (Robinson եւ Berridge, 1993; Jentsch եւ Taylor, 1999; Robbins եւ Everitt, 1999; Nestler, 2004): Ներկայացված տվյալները նաեւ համահունչ են այլ տեսությունների, որոնք շեշտադրում են բազմաթիվ գործիքային եւ պավլովյան գործընթացները,Everitt եւ Robbins, 2005): Այժմ անհրաժեշտ է լրացուցիչ աշխատանք սահմանել NAc- ի եւ այլ լիմբիկ-ճառագայթային ենթատարածքներում թմրամիջոցների եւ ΔFosB- ի դրսեւորած նեվերադամակարգերի դերը կոնկրետ ասոցիացիայի կամ մոտիվացիոն գործոնների վերաբերյալ, որոնք կարող են նպաստել գործիքային աշխատանքի եւ հարկադրաբար վարվելակերպին:
Չնայած այն հանգամանքին, որ ճշգրիտ մոլեկուլային մեխանիզմները, որոնք փոփոխություններ են կատարում NAc- ի ազդեցության մեջ, հիմնական կամ պայմանավորված ուժերի կողմից հիմնավորված վարքագիծը հայտնի չէ (Քելլի եւ Բերրիջ, 2002), NAA- ի GABAergic միջին ցողունային նեյրոնները համարվում են թմրանյութերի եւ փորձի կախվածության պլաստիկության կարեւոր բաղադրիչ: Այստեղ, դիֆամիներգիկ ներածումը վրացական tegmental տարածությունից եւ կորտիկոլիմիկալ օֆերենտներից գլուտամերգիկ ներթափանցումը համընկնում են ընդհանուր dendrites եւ dendritic spines (Sesack եւ Pickel, 1990; Սմիթն ու Բոլմանը, 1990): Քրոնիկ հոգեբանական խանգարումներ բարձրացնում է Նարկերի միջուկում եւ միջուկում նեյրոնների վրա այդպիսի օղակների խտությունը (Robinson եւ Kolb, 1999; Ռոբինսոն եւ այլք, 2001; Li եւ այլն, 2003, 2004): Վերջերս վարքագծային սենսիտիզացիայի դրսեւորումը կապված է մասնավորապես NAc- ի ներսում դենդրիտիկ ողնաշարերի ավելացման հետ (Li եւ այլն, 2004): Հատկանշական է, որ ածխի խտության կոկաինը հարստացված աճը շարունակում է մնալ միայն D- ում1- դրական նեյրոններ, որոնք coexpress ΔFosB (Robinson եւ Kolb, 1999; Լի եւ այլն, 2006). ԱԴՖ-ն կարող է դրանով նպաստել երկարատեւ սինապտիկ պլաստիկությանը, որը կարող է ազդել գործիքային վարքագծի վրա. Իրոք, դոպամին-գլյուտամատային նյարդոտմանՍմիթ-Ռո եւ Քելլի, 2000), սպիտակուցային kinase A գործունեությունըBaldwin et al., 2002a) եւ դե novo սպիտակուցի սինթեզ (Hernandez et al., 2002) ԱՀԿ-ի շրջանակներում գործիքային կատարման մասին նախկինում հաղորդվել է: Այժմ մենք հայտնագործում ենք ΔFosB- ը որպես արտագրման գործոն, որը կարող է համառորեն բարձրացնել սննդամթերք-ամրապնդվող արձագանքումը, երբ ԱՀԿ-ում գերակշռված է: Այս ազդեցության մեջ ներգրավված կոնկրետ գեները կամ սպիտակուցները մնում են հստակ սահմանված: ΔFosB- ն կարգավորում է նեյրապլաստիկության մեջ ներգրավված NAc- ում բազմաթիվ սպիտակուցների արտահայտությունը (McClung եւ Nestler, 2003): Վերջերս կատարված միկրոավտոբուսային վերլուծությունը բնութագրում է այստեղ ΔFosB- ի արտահայտած բուսական աշտարակի մկների NAc- ում գենային արտահայտման ձեւերը եւ բացահայտեցին գեների ենթաբազմություն, որոնք կարգավորվել են ΔFosB- ի համեմատաբար կարճ արտահայտությամբ (McClung եւ Nestler, 2003): BDNF- ն այսպիսի մի գեն էր, եւ BDNF- ն այս նեյրովային միացումում գիտակցում է, որ բարձրացնի դեղորայքի եւ սննդի հետ կապված տիպերի (Horger et al., 1999; Grimm եւ այլն, 2003; Lu եւ այլն, 2004): Հետաքրքիր լրացուցիչ գեն է ցիկլին-կախված kinase 5 (Bibb եւ այլն, 2001), որը նույնպես induced by ΔFosB, եւ կարող է կանոնակարգել ինչպես կոկաինը, այնպես էլ կառուցվածքային պլաստիկությունը (Norrholm et al., 2003) եւ մոտիվացիան, որը չափվում է բնական կամ թմրամիջոցների հսկողներին (JR Taylor, չնախատեսված դիտարկումներ) պատասխանող առաջադեմ հարաբերակցությամբ: Դեռեւս լրացուցիչ թեկնածուներ են AMPA glutamate ընկալիչների GluR2 ենթաբաժանումը (Kelz եւ այլն, 1999) եւ NFκB (միջուկային գործոն KB) (Անգ եւ այլն, 2001): Անհրաժեշտ է գնահատել այս եւ այլ կարգավորվող սպիտակուցները NAc ենթատարածաշրջաններում, որպես ΔFosB- ի վարքային ազդեցությունների միջամտելու թեկնածուներ, գործիքային կատարման եւ մոտիվացիան:
The ներկա սերտիֆիկատների շարքը ցույց է տալիս, որ ԱՀ-ում ΔFosB- ի գերբեռնվածությունը կարող է բարձրացնել սննդի շարժիչ վարքը եւ դրանով կարգավորել գործիքային կատարումը, ինչպես նախկինում ցուցադրվել է թմրամիջոցների պարգեւների համար: Այս տվյալները բերում են նոր ապացույցներ, որ ΔFosB- ը կարող է հանդես գալ որպես ընդհանուր մոլեկուլային անջատիչ, որը կապված է նպատակային վարքագծի ամրապնդողների մոտիվացիայի տեսանկյունից: Մեր բացահայտումները բարձրացնում են այն հնարավորությունը, որ NAF ΔFosB- ի ինդուկցիան, օրինակ, կախվածություն ունեցող թմրադեղերի, սթրեսի կամ թերեւս բարձր վարձատրվող սննդի միջոցով, կարող է լինել ճգնաժամային մեխանիզմ, որով դիսֆունկցիոնալ մոտիվացիոն վիճակները հանգեցնում են հոգեբուժական խանգարումների, որոնք կապված են պարտադիր վարքագծի հետ.
Հղումներ
o Ստացվել է մարտին, 15, 2006:
o Վերանայումը ստացել է հունիսի 23, 2006:
o Ընդունվեց օգոստոս 2, 2006:
Այս աշխատանքը ֆինանսավորվել է Թմրամիջոցների չարաշահման ազգային ինստիտուտի, Հոգեկան առողջության ազգային ինստիտուտի եւ Ալկոհոլի չարաշահման եւ ալկոհոլիզմի ազգային ինստիտուտի դրամաշնորհներով: Մենք երախտապարտ ենք Դիլիջան Քրյուգերի, Դրու Կիրալիի, Դալ Ռալֆ Դի Լեոնեի, Ռոբերտ Սիրսի եւ դոկտոր Ջոնաթան Հոմելի արժեքավոր օգնությանը, Յեյլի համալսարանի հոգեբուժության ամբիոնում: Մենք նաեւ շնորհակալ ենք դոկտոր Ջենիֆեր Քուինին եւ դոկտոր Փոլ Հիչքոթին այս ձեռագրով օգտակար մեկնաբանություններ տրամադրելու համար:
Նամակագրությունը պետք է հասցեագրվի Ջեյն Ռ. Թեյլորի, Հոգեբուժության բաժնի, Մոլեկուլային հոգեբուժության բաժանմունքի, Յեյլի բժշկական համալսարանի բժշկության դպրոցի, Ռիբիոֆի հետազոտական կենտրոնի, Կոնեկտիկուտի հոգեկան առողջության կենտրոնի, 34 Park Street- ի, New Haven- ից, CT 06508- ից:[էլեկտրոնային փոստով պաշտպանված]
Հեղինակային իրավունքի © 2006 Neuroscience հասարակություն 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
Սայլակ
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Զագուրաս Պ,
4. Magna H,
5. Հոլանդիա J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ- ն
(2001) Քրոնիկ կոկաինի վարման կողմից NFKB- ի ներարկումը միջուկային հոդերի մեջ: J Neurochem 79- ը `221-224:
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Սադեյան Կ,
3. Հոլախան Մ.Ռ.,
4. Քելլի Ա
(2002a) ախտանիշային գործիքային ուսումը խանգարում է ճարպային հոդակապների մեջ cAMP- կախված սպիտակուցային քնազի իջեցմամբ: Նեյմուրիալը սովորել Mem 77- ը `44-62:
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Սադեյան Կ,
3. Քելլի Ա
(2002b) ախտանիշային գործիքային ուսումը պահանջում է NMDA- ի եւ դոպամինի D- ի համադրելի ակտիվացում1 ընկալիչները միջակային prefrontal ծղոտե ներքնակում: J Neurosci 22- ը `1063-1071:
4. ↵
1. Բալլին Բ,
2. Killcross S- ն
(1994) Միջուկային ականջի հոդակապի իբոթենիկ թթվային վնասվածքների ազդեցությունը գործիքային գործողությունների վրա: Behav Brain Res 65- ը `181-193:
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE- ն
(2000) Addiction, dopamine եւ հիշողության մոլեկուլային մեխանիզմները: Neuron 25- ը `515-532:
6. ↵
1. Բերրիֆ Քերրին,
2. Robinson TE
(2003) Փնտրեք վարձը: Թրենդներ Neurosci 26: 507-513:
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson P,
5. Նիշի Ա,
6. Snyder GL,
7. Յան Զ,
8. Սագավա ԶԿ,
9. Ouimet CC,
10: Nairn AC,
11: Nestler EJ,
12: Գրենգարդ Պ
(2001) Քրոնիկ ազդեցության ազդեցությունը կոկաինի վրա կարգավորվում է Cdk5 նեյրոնային սպիտակուցով: Բնություն 410- ը `376-380:
8. ↵
1. Բրունսել DH,
2. Chang JR,
3. Schneider B,
4. Օլաուսոն Պ,
5. Taylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) beta2-Սուբունիտ պարունակող նիկոտինային ացետիլքոլինային ընկալիչները ներգրավված են նիկոտինային բջիջների աճի պայմանավորված ամրապնդման մեջ, բայց ոչ C57BL / 6 մկների սննդի համար առաջացող առաջադեմ հարաբերակցության մեջ: Psychopharmacology (Berl) 184: 328-338:
9. ↵
1. Կագնիարդ Բ,
2. Balsam PD,
3. Բրուններ Դ,
4. Zhuang X- ը
(2006) Խրոնիկ բարձրացված դոպամինով մկները ցուցադրում են ուժեղացված մոտիվացիա, բայց ոչ սովորում, սննդի պարգեւի համար: Նեյրոփսիֆոֆարմոլոգիա 31: 1362-1370:
10: ↵
1. Carlezon WA Jr.,
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB- ը,
5. Brodkin ES,
6. Հիրոյ Ն,
7. Դուման RS,
8. Neve RL,
9. Nestler EJ- ն
(1998) ԿԿԱ-ի կողմից կոկաինի պարգեւի կարգավորումը: Գիտություն 282- ը `2272-2275:
11: ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Հուսով եմ,
4. Nakabeppu Y,
5. Nestler EJ- ն
(1997) քրոնիկ ֆոսին առնչվող հակիգենիներ `ΔFosB- ի կայուն տարբերակները, որոնք առաջացրել են ուղեղի քրոնիկական բուժում: J Neurosci 17- ը `4933-4941:
12: ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Զանգ Գ,
4. Սաքայ Ն,
5. Steffen C,
6. Shockett PE,
7. Picciotto MR,
8. Դուման RS,
9. Nestler EJ- ն
Տրանսգենային կենդանիներ, որոնք ուղեկցվում են ընկճված, նպատակային գենային արտահայտությամբ: Մոլ Pharmacol 54- ը `495-503:
13: ↵
1. Colby CR,
2. Ուիսլեր Կ,
3. Steffen C,
4. Nestler EJ,
5. Self DW- ն
(2003) ΔFosB- ի ստերիալալ բջջային տիպի յուրահատուկ գերբնակեցումը խթանում է կոկաինը: J Neurosci 23- ը `2488-2493:
14: ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) Պավլովյան-գործիքային փոխանցման ընդհանուր եւ ելքային ձեւերի վրա բազոլարային եւ կենտրոնական ամիգդալային վնասվածքների կրկնակի դիսոցացիա: J Neurosci 25- ը `962-970:
15: ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) Միջուկային սարքավորման դերը գործիքային պայմաններում. Ֆունկցիոնալ դիսոցացիայի ապացույցներ, որին հետեւում են մեղվաբջջային միջուկը եւ ռումբը: J Neurosci 21- ը `3251-3260:
16: ↵
1. Dalley JW,
2. Չուդասամա Յ,
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL,
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens dopamine եւ խտրական մոտեցման ուսուցում. 6-hydroxydopamine lesions- ի եւ համակարգային apomorphine- ի ինտերակտիվ ազդեցությունները: Psychopharmacology (Berl) 161: 425-433:
17: ↵
1. դե Borchgrave R,
2. Rawlins JN,
3. Դիկկինսոն Ա,
4. Balleine BW
(2002) Առնետների գործիքային կոնդենսացիայի վրա ցուտոիդային միջուկի accumbens lesions- ի ազդեցությունը: EXB- ի Brain Res 144- ը `50-68:
18: ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ- ն
(2004a) Բազոլարյան ամիգդալայի եւ միջուկի accumbens- ի միջեւ անմիջական փոխազդեցությունը առնետների կողմից կոկաինը փնտրելու վարքագիծն է: J Neurosci 24- ը `7167-7173:
19: ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ- ն
(2004b) Կարգավորվող ուժեղացուցիչ հատկություններ, որոնք խթանում են ինքնակարգավորվող կոկաինը, հերոինը կամ sucrose- ը: ազդեցությունները կախվածության վարքի համառության վրա: Նեվրոֆարմոլոգիա 47 ([Հավելում 1]) 202-213:
20: ↵
1. Դիկկինոն Ա
(1985) Գործողություններ եւ սովորություններ. Վարքագծային ինքնավարության զարգացում: Փենսիլվանիդ Բոնդ Բ Բոլ Սի 308: 67-78:
21: ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) թմրամոլության ամրապնդման նյարդային համակարգեր `գործողություններից մինչեւ սովորույթներ հարկադրելու համար: Nat Neurosci 8- ը `1481-1489:
22: ↵
1. Ֆաուր Ա,
2. Նորվեգիա,
3. Conde F,
4. Էլ Մասիուի Ն
(2005) Նիզրոստրիալալ դոպամինային համակարգի լյարդը խաթարում է խթանիչ արձագանքման սովորույթը: J Neurosci 25- ը `2771-2780:
23: ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Հայաշի Թ,
4. Հուսով եմ,
5. Su TP,
6. Շահամ Յ
(2003) Կոկաինից դուրս գալուց հետո մազոլիմիկ դոպամինային համակարգում ժամանակի կախյալ ավելացում է ուղեղի ծագում ունեցող նեյրոտրոֆիկ գործոնային սպիտակուցի մակարդակների աճը. Կոկաինի փափագի ինկուբացիայի հետեւանքները: J Neurosci 23- ը `742-747:
24: ↵
1. Hall J,
2. Պարկինսոն Ջա,
3. Կոննոր TM,
4. Դիկկինսոն Ա,
5. Everitt BJ- ն
(2001) Ամիգդալայի կենտրոնական միջուկի ներգրավումը եւ միջուկի մեղվաբուծական միջուկը ներգրավելով Պավլովի ազդեցությունը գործիքային վարքագծի վրա: Eur J Neurosci 13- ը `1984-1992:
25: ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD- ն
(1998) Ընդլայնված ախորժակի պայմանավորում, որը կրկնակի նախաբեդրումից հետո, դ-ամֆետամինով: Behav Pharmacol 9- ը `299-308:
26: ↵
1. Հերնանդես Պ.Ջ.,
2. Սադեյան Կ,
3. Քելլի Ա
(2002) Գործիքային ուսումնառության վաղ ձեւավորումը պահանջում է սպիտակուցների սինթեզ `միջուկային հեծանիվների մեջ: Nat Neurosci 5- ը `1327-1331:
27: ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM,
3. Ժորժեսկու Դ,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ- ն
(2003) Ուղեղի տեղային գենը նյարդայնացնում է վիրուսով միջնորդավորված ՌՆԹ միջամտության միջոցով: Nat Med 9- ը `1539-1544:
28: ↵
1. Horger BA,
2. Շելտոն Կ,
3. Շենկ Ս
(1990) Preexposure զգայուն է առնետները կոկաինի հատուցող հետեւանքների համար: Pharmacol Biochem Behav 37: 707-711:
29: ↵
1. Horger BA,
2. Giles MK,
3. Շենկ Ս
(1992) Ամպետամինի եւ նիկոտինի նախնական շփումը առնետների ինքնուրույն կառավարում է կոկաինի ցածր դոզան: Psychopharmacology (Berl) 107: 271-276:
30: ↵
1. Horger BA,
2. Iyasere CA,
3. Բերեւ MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ,
6. Թեյլոր Ջ
(1999) Ուղիղ շարժիչի ակտիվության բարձրացում եւ կոկաինին պայմանավորված վարձատրություն ուղեղի ստացվող նյարդոտրոֆիկ գործոնով: J Neurosci 19- ը `4110-4122:
31: ↵
1. Իտո Ռ,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ- ն
(2004) Դիֆերենցիալ հսկողություն կոկաինի որոնման վարքագծի միջուկի accumbens core եւ shell- ի կողմից: Nat Neurosci 7- ը `389-397:
32: ↵
1. Jentsch JD,
2. Թեյլոր Ջ
(1999) Թմրամիջոցների չարաշահումից առաջացած ճակատամարտային դիսֆունկցիայի հետեւանքով առաջացող իմպուլսիվությունը `վարձատրության հետ կապված խթանների միջոցով վարքի վերահսկման հետեւանք: Psychopharmacology (Berl) 146: 373-390:
33: ↵
1. Քելլի Ա
(2004) ախորժակի դրդապատճառի վրացական ստիատալ հսկողություն. Սննդային վարքի դերը եւ վարձատրության հետ կապված ուսուցում: Neurosci Biobehav Rev 27- ը `765-776:
34: ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC- ն
(2002) բնական պարգեւների նեվոլիզմը `կապված է թմրադեղերի հետ: J Neurosci 22- ը `3306-3311:
35: ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.,
4. Ուիսլեր Կ,
5. Գիլդեն Լ,
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Ժանգ Յ.Ջ.,
9. Մարոտտի Լ,
10: Ինքն DW,
11: Tkatch T,
12: Baranauskas G,
13: Surmeier DJ,
14: Neve RL,
15: Դուման RS,
16: Picciotto MR,
17: Nestler EJ- ն
(1999) Անթվակիչ գործոնի արտահայտումը ΔFosB ուղեղում վերահսկում է կոկաինի զգայունությունը: Բնություն 401- ը `272-276:
36: ↵
1. Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE- ն
(1994) Ամֆետամինը կարգավորում է գենային արտահայտությունը շառավղային ստատաթում CREB- ի transcriptional factor- ի միջոցով: J Neurosci 14- ը `5623-5634:
37: ↵
1. Lee KW,
2. Քիմ Յ,
3. Քիմ Ա,
4. Հելմին Կ,
5. Nairn AC,
6. Գրենգարդ Պ
(2006) D1- ի եւ D2 dopamine- ի բաղադրիչները պարունակող միջուկային նեյրոնների մեջ կոկաինի կողմից առաջացած դենդրիտային ողնաշարի ձեւավորում: Քրեական դատավարություն ԱՄՆ-ի 103- ում `3399-3404:
38: ↵
1. Li Y,
2. Կոլբ Բ,
3. Robinson TE
(2003) Դենդրիկ կծիկների խտության մեջ կայուն ամֆետամինային փոփոխությունների տեղակայումը միջուկային հոդի եւ կոյադատատման մեջ միջին ճնշող նեյրոնների վրա: Նեյրոփսիֆոֆարմոլոգիա 28: 1082-1085:
39: ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) վարքագծային սենսիտիզացիայի ներածինացումը կապված է կորպուսի ներդիրված կառուցվածքային պլաստիկության հետ միջուկի հեծանիվների առանցքային (բայց ոչ շերտ) մեջ: Eur J Neurosci 20- ը `1647-1654:
40: ↵
1. Lu L,
2. Դեմփսեյ Ջ,
3. Լյու Սի,
4. Bossert JM,
5. Շահամ Յ
(2004) Ուղեղի վրա հիմնված նեյրոտրոֆիկ գործոնի մեկ ներարկումը վրացական թմբուկի տարածքի մեջ ներթափանցում է կոկաինի երկարատեւ կայունացմանը, ձգտելով հեռանալուց հետո: J Neurosci 24- ը `1604-1611:
41: ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ- ն
(2003) Գենային արտահայտման եւ կոկաինի պարգեւի կարգավորում, CREB- ի եւ ΔFosB- ի կողմից: Nat Neurosci 6- ը `1208-1215:
42: ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Զաչարիո Վ,
5. Բերտոն Օ,
6. Nestler EJ- ն
(2004) ΔFosB: մոլեկուլային անջատիչ ուղեղի երկարատեւ հարմարվողականության համար: Brain Res Mol Brain Res 132- ը `146-154:
43: ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Դիկկինոն Ա
(2004) Հարստացված ակտիվություն եւ գործիքի ուժեղացում, ցիցի կողմից կոկաինի երկարատեւ օգտագործման համար: Behav Neurosci 118- ը `1331-1339:
44: ↵
1. Nestler EJ- ն
(2004) Թմրամոլության մոլեկուլային մեխանիզմները: Նեվրոֆարմոլոգիա 47 ([Հավելում 1]) 24-32:
45: ↵
1. Nestler EJ,
2. Barrot M,
3. Self DW- ն
(2001) ΔFosB: կայուն մոլեկուլային փոխարկիչ կախվածության համար: Քրեական դատավարություն ԱՄՆ-ի 98- ում `11042-11046:
46: ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ,
4. Ouimet CC,
5. Taylor JR,
6. Գրենգարդ Պ
(2003) Քաղցկեղից կախված նրբերշիկների հոդերի կոկաինը հարստացված տարածումը կախված է ցիկլին-կախված kinase-5- ի ակտիվությունից: Neuroscience 116- ը `19-22:
47: ↵
1. Nye HE,
2. Հուսով եմ,
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ- ն
(1995) Քրոնիկ FOS- ի հետ կապված հակաթույնի ներդիրի կարգավորման համար դեղագործական ուսումնասիրություններ կոկաինի կողմից, ստիատում եւ միջուկային accumbens- ում: J Pharmacol Exp Ther 275- ը `1671-1680:
48: ↵
1. Օլաուսոն Պ,
2. Jentsch JD,
3. Թեյլոր Ջ
(2003) Կրկնվող նիկոտինի ազդեցությունը խթանում է առնանդամի հետ կապված վարձատրության հետ կապված ուսումը: Նեյրոփսիֆոֆարմոլոգիա 28: 1264-1271:
49: ↵
1. Օլաուսոն Պ,
2. Jentsch JD,
3. Թեյլոր Ջ
(2004) Կրկնվող նիկոտինի ազդեցությունը խթանում է պայմանավորված ամրացմամբ պատասխանելը: Psychopharmacology (Berl) 173: 98-104:
50: ↵
1. Պարկինսոն Ջա,
2. Olmstead MC,
3. Բեռնս Լ.Հ.,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ- ն
(1999) Dissociation է ճառագայթում accumbens core եւ shell է lesions վրա ախորժելի pavlovian մոտեցման վարքի եւ պայմանական ամրապնդման եւ շարժիչ ուժի potentiation է d-amfetamine. J Neurosci 19- ը `2401-2411:
51: ↵
1. Պարկինսոն Ջա,
2. Dalley JW,
3. Կարդինալ ՌՆ,
4. Bamford A,
5. Fehnert B,
6. Լաչենալ Գ,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10: Everitt BJ- ն
(2002) Nucleus accumbens dopamine- ի կորուստը վնասում է ինչպես ագրեսիայի պավլովյան մոտեցման վարքի եւ կատարման հետեւանքների, այնպես էլ մեսոակցեմենսների դոպամինի ֆունկցիայի հետեւանքների համար: Behav Brain Res 137- ը `149-163:
52: ↵
1. Paxinos G,
2. Վաթսոն Ջ
(1986) Սաթե ուղեղը ստերեոտաքսիկ կոորդինատներում (Ակադեմիական, Սիդնեյ):
53: ↵
1. Perrotti LI,
2. Հադիշի Յ,
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Մոնտեգգիա Լ,
6. Դուման RS,
7. Nestler EJ- ն
(2004) Խրոնիկ սթրեսից հետո ΔFosB- ի ներդիրը պարգեւատրման հետ կապված ուղեղի կառուցվածքներում: J Neurosci 24- ը `10594-10602:
54: ↵
1. Պիացա ՖՎ,
2. Deminiere JM,
3. le Moal M,
4. Սիմոն Հ
(1990) Սթրես- եւ դեղաբանորեն ենթարկված վարքային սենսիտիզացիան ավելացնում է խոցելիությունը ամֆետամինային ինքնակառավարման ձեռքբերման համար: Brain Res 514- ը `22-26:
55: ↵
1. Պիչ Էմ,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Թալաբոտ-Այեր Դ,
5. Hooft van Huijsduijnen R,
6. Chiamulera C
(1997) Նիկոտինի եւ կոկաինի կախվածության հատկանիշների ընդհանուր նեյրովային նյութերը: Գիտություն 275- ը `83-86:
56: ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ- ն
(1999) Թմրամոլություն. Վատ սովորություններ ավելացնեք: Բնություն 398- ը `567-570:
57: ↵
1. Robinson TE,
2. Berridge KC- ն
(1993) Թմրամոլության նյարդային հիմքը `կախվածության խթանման- sensitization տեսություն: Brain Res Brain Res Rev 18- ը `247-291:
58: ↵
1. Robinson TE,
2. Կոլբ Բ
(1999) Դենդրիտների եւ դենդրիտիկ հոդերի մորֆոլոգիայի փոփոխությունները միջուկում accumbens- ում եւ prefrontal cortex- ից հետո, կրկնակի բուժում ստանալով ամֆետամին կամ կոկաինը: Eur J Neurosci 11- ը `1598-1604:
59: ↵
1. Robinson TE,
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. Կոլբ Բ
(2001) Կոկաինի ինքնակարգավորումը փոխում է դենդրիտների եւ դենդրիտիկ ողնաշարի morphology է միջուկի accumbens եւ neocortex. Synapse 39- ը `257-266:
60: ↵
1. Sesack SR,
2. Պիկել Վ
(1990) Սրտի միջուկային ճառագայթների մեջ, հիպոկամպալային եւ կաթեոլոլինամիկ տերմինալները միմյանց են շաղախ նեյրոնների վրա եւ գտնվում են միմյանց նկատմամբ: Brain Res 527- ը `266-279:
61: ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Storm D,
4. Nestler EJ- ն
(2003) Ամֆետամինի միջոցով մկնիկի ուղեղում CRE-mediated transcription կարգավորումը: Synapse 48- ը `10-17:
62: ↵
1. Սմիթը,
2. Բոլամ Ջ
(1990) Բազալային գանգլիայի նեյրոնային ցանցը, որը հայտնաբերվել է հայտնաբերված նեյրոնների սինթետիկ կապերի ուսումնասիրությամբ: Թրենդներ Neurosci 13: 259-265:
63: ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Քելլի Ա
(2000) NMDA- ի եւ դոպամինի D- ի համադրելի ակտիվացում1 ընկալիչները միջուկում accumbens միջուկում պահանջվում են ախորժելի գործիքային ուսուցման համար: J Neurosci 20- ը `7737-7742:
64: ↵
1. Taylor JR,
2. Horger BA
(1999) Ընդլայնված պատասխան `կոկաինի սենսիտիզացիայի արդյունքում խթանված ներծծող ամպետամինի կողմից պայմանավորված վարձատրության համար: Psychopharmacology (Berl) 142: 31-40:
65: ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD- ն
(2001) Կրծքագեղձի խթանիչ դեղամիջոցների կրճատումն իրականացվում է ադապտացված պավլովյան մոտեցման վարքագծի ձեռքբերումից. Կոկաինի, դ-ամֆետամինի եւ 3,4-methylenedioxymethamphetamine- ի («Ecstasy») դիֆերենցիալ ազդեցությունները Biol Psychiatry 50: 137-143:
66: ↵
1. Վեզինա Պ,
2. Լորենայն DS,
3. Առնոլդ Գ.
4. Օսթին Ջդ,
5. Սուտո Ն
(2002) Midbrain դոպամինի նեյրոնային ռեակտիվության զգայունությունը նպաստում է ամպետամինի հետապնդմանը: J Neurosci 22- ը `4654-4662:
67: ↵
1. Ուերմե Մ,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Գիլդեն Լ,
5. Thoren P,
6. Nestler EJ,
7. Բրենե Ս
(2002) ΔFosB կարգավորում է անիվի վազում: J Neurosci 22- ը `8133-8138:
68: ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC- ն
(2001) Նախորդ ամֆետամինի ազդեցության խթանման զգայունացումը. Աճող թիրախային «ձգտող» համարձակության պարգեւի համար: J Neurosci 21- ը `7831-7840:
69: ↵
1. Yin HH,
2. Իմանալով,
3. Balleine BW
(2004) Dorsolateral striatum- ի լոսյոնները պահպանում են արդյունքների սպասում, բայց գործիքային սովորում սովորաբար ձեւավորում են սովորույթը: Eur J Neurosci 19- ը `181-189:
70: ↵
1. Զաչարիո Վ,
2. Բոլանոս CA,
3. Սելլի Դե,
4. Theobald D,
5. Կասիդի պատգամավոր,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Բերտոն Օ,
9. Սիմ-Սելլի LJ,
10: Dileone RJ,
11: Կումար Ա,
12: Nestler EJ- ն
(2006) Մորֆինային գործողության մեջ էական դերակատարում ΔFosB- ի համար: Nat Neurosci 9- ը `205-211:
;