J Neurochem. 2014 հուն; 128 (1): 173-85: doi: 10.1111 / jnc.12381: Epub 2013 օգոստոս 21:
Liu QR1, Ռուբիո Ֆ. Ջ, Bossert JM, Մարտական Ն.Ջ., Fanous Ս, Hou X- ը, Շահամ Յ, Հույս ունեմ BT- ում.
Վերացական
Մետամֆետամինը եւ այլ դեղամիջոցները ակտիվացնում են ուղեղի բոլոր նեյրոնների փոքր մասնիկը: Մենք նախապես մշակել ենք ֆլուորեսցենտային ակտիվացված բջիջների դասակարգում (FACS) -հիմնավորված մեթոդ, որը բնութագրում է մոլեկուլային փոփոխությունները ընտրովիորեն ակտիվացված նեյրոններում, որոնք արտահայտում են նյարդային ակտիվության նշիչը Fos: Այնուամենայնիվ, այս մեթոդը պահանջում է բազմաթիվ առնետների նմուշներ: Մենք այժմ նկարագրում ենք փոփոխված FACS- ի վրա հիմնված մեթոդ, Fos- ի ձեւափոխման մոլեկուլային փոփոխությունների բնութագրման համար, որը օգտագործում է բազմակի նախաստուգման ռազմավարությունը, օգտագործելով մի ստարտից:
Fos եւ NeuN (մի նեյրոնալ մարկեր) իմունահիստոկիմիա ցույց են տալիս, որ 5-6% dorsal striatum նեյրոնների ակտիվացված են 90 րոպե սուր մետամֆետամինի ներարկումից հետո (5 մգ / կգ, ip), իսկ նեյրոնների 0.5% -ից պակաս ակտիվացված են շիլային ներարկումներով:
FACS- ն օգտագործեց NeuN- պիտակավորված նեյրոնների բաժանել Fos- դրական եւ Fos- բացասական նեյրոնների եւ գնահատել mRNA արտահայտությունը, օգտագործելով RT-qPCR- ից առնվազն հինգ Fos- դրական նեյրոններ: Methamphetamine- ն առաջացրել է 3-20-ի բարդության վաղ վաղ հայտնաբերված գագերի, homer-2, c-fos, fosB եւ նրա isoformsΔfosB եւ վեպի isoform ΔfosB-2), Fos- ի դրական, բայց ոչ Fos- բացասական նեյրոններ: Անմիջապես վաղ գենային mRNA ինդուկցիան 10 անգամ ավելի ցածր էր կամ բացակայում է, երբ գնահատվում է չմոլորված նմուշներում, միայնակ խոռոչի ստիաթումի homogenates- ից: Մեր փոփոխված մեթոդը հնարավոր է դարձնում այնպիսի նյարդային համակարգում, որոնք ակտիվացնում են թմրամիջոցների կամ թմրամիջոցների հետ կապված բարդություններով բարդ հակում ունեցող մոդելների յուրահատուկ մոլեկուլային փոփոխությունները:
Մետամֆետամինը եւ այլ դեղամիջոցները ակտիվացնում են ուղեղի բոլոր նեյրոնների փոքր մասնիկը: Մենք այստեղ զեկուցում ենք բարելավված մեթոդի մոլեկուլային փոփոխությունների բնութագրման համար, որոնք նպաստում են ակտիվացված նեյրոնների մեջ, որոնք արտահայտում են նյարդային ակտիվության նշիչը Fos: Մենք FACS- ի հետ միասին նպատակային PCR- ի նախընտրական ուժեղացման հետ միասին օգտագործեցինք սինթետամետամինային-ինդունվող գեների արտահայտությունը գնահատելու համար, քանի որ առնվազն 5 Fos- ի արտահայտիչ նեյրոններ միայն մեկ առնետի դորալ ստերիմատից: Methamphetamine- ը առաջացրել է անմիջական վաղ գեների (IEGs) 3-20-ի բջիջները Fos- ի դրական, բայց ոչ Fos- բացասական նեյրոններ: Թիրախավորված ՊՇՌ-ի նախաբարձրացմանը հնարավորություն է ընձեռում ուսումնասիրել թմրամիջոցների կամ թմրամիջոցների հետ կապված բարդություններով բարդացված կախվածության մոդելներում ակտիվացված նեյրոնների յուրահատուկ մոլեկուլային փոփոխությունները:
Հրատարակված է 2013: Այս հոդվածը ԱՄՆ կառավարության գործն է եւ գտնվում է ԱՄՆ-ում հանրային տիրույթում:
;