PLoS One- ը: 2013 Նոյեմ 25; 8 (11): e81245: doi: 10.1371 / journal.pone.0081245:
Nishijima T, Kawakami M, Kita I.
Աղբյուր
Դոկտորային ֆիզիոլոգիայի լաբորատորիա, Մարդկային առողջության գիտությունների բարձրագույն դպրոց, Տոկիոյի մետրոպոլիտենի համալսարան, Տոկիո, Ճապոնիա:
Վերացական
Ֆիզիկական վարժությունը բարելավում է հիպոկամպալ ֆունկցիայի բազմաթիվ ասպեկտները: Նեյրոնային ֆունկցիան խթանող բանալին այն բանի հասկացությանը, որ նախորդ գրականությունը հետեւողականորեն ցույց է տվել, որ վարժությունների սուր խանգարումները հանգեցնում են հիպոկամպի մեջ նեյրոնային ակտիվացման: Կրկնվող ակտիվացման խթանները հանգեցնում են ΔFosB- ի transcriptional factor- ի կուտակումին, որը միջնորդում է երկարատեւ նյարդային պլաստիկության.
Այս ուսումնասիրության մեջ մենք փորձարկեցինք հիպոթեզը, որ երկարաժամկետ կամավոր անիվը հիպոկամպի մեջ ΔFosB արտահայտությունն է առաջացնում եւ ուսումնասիրում է հիպոկամպալ ենթատարածքներում պորտային-վենտրալ առանցքի երկայնքով պոտենցիալ տարածաշրջանի հատուկ ազդեցություն: Արական C57BL / 6 մկները տեղադրվեցին 4 շաբաթվա ընթացքում կամ առանց վազքի անիվի: Երկարաժամկետ անիվի հոսքագիծը զգալիորեն մեծացրել է FosB / ΔFosB իմունտորակտիվությունը չափված բոլոր հիպոկամպալ շրջաններում (այսինքն DG- ում, CA1- ում եւ CA3- ում, այնպես էլ dorsal- ի եւ ventral hippocampus- ի subfields): Արդյունքները հաստատեցին, որ ծղոտե միջավայրում FosB / ΔFosB իմունային դեֆեկտիվության տարածման անջատված տարածաշրջանում հատուկ արտահայտություն է, որը ենթադրում է, որ hippocampus- ի ընթացքում FosB / ΔFosB- ի միասնական աճը ոչ վտանգավոր հետեւանք չէ: Արեւմտյան բլոտի տվյալները ցույց են տվել, որ աճող հիփոկամպալ FosB / ΔFosB իմունտորակտիվությունը հիմնականում պայմանավորված է ΔFosB- ի աճով: Այս արդյունքները ցույց են տալիս, որ երկարատեւ ֆիզիկական վարժությունը ΔFosB- ի ներգրավման համար ուժեղ ձգան է ամբողջ հիպոկամպի ընթացքում, ինչը բացատրում է, թե ինչու զորավարժությունները կարող են բարելավել թե դորալալ, թե վրացական հիպոկամպուսային կախված գործառույթները: Հետաքրքիր է, որ մենք հայտնաբերեցինք, որ DG- ում FosB / ΔFosB արտահայտությունը դրականորեն փոխկապակցված է կրկնակի քորոցային-իմունորակտիվ (նեյրոնիկ) նեյրոնների քանակի հետ:
Թեեւ մեխանիզմները, որոնցով ΔFosB- ն միջնորդում է իրականացնել նեյրոոգենեզը, դեռեւս անորոշ է, այս տվյալները ենթադրում են, որ զորավարժությունների արդյունքում առաջացած նեյրոգենեզը առնվազն ակտիվ կախված է: Հաշվի առնելով, որ մեր ընթացիկ արդյունքները ցույց են տալիս, որ ΔFosB- ն նոր մոլեկուլյար թիրախ է, որն իրականացվում է զորավարժությունների կիրառմամբ հիպոկամպալ պլաստիկության կարգավորման մեջ:
ներածություն
Զորավարժությունները բերում են տարբեր օգուտներ կրծողների հիպոկամպի մոլեկուլային, կառուցվածքային եւ ֆունկցիոնալ կողմերի վրա [1,2], որոնցից ոմանք աջակցում էին մարդկային ուսումնասիրությունների [3,4]: Այնուամենայնիվ, հիպոկամպալ պլաստիկության մեջ իրականացվող զորավարժությունների հիմքում ընկած մեխանիզմները բավականին հասկանալի չեն: Նախորդ գրականությունը հետեւողականորեն ցույց տվեց, որ զորավարժությունները հանգեցնում են կրծողների հիպոկամպալ նեյրոնային ակտիվացմանը: Իմունախիստոկիմիական հետազոտությունները, օգտագործելով անցողիկ նեյրոնային ակտիվացման նշիչը, ցույց են տվել, որ ինչպես հարկադիր, այնպես էլ կամավոր վազքը ավելացնում են c-Fos արտահայտությունը dentate gyrus- ում (DG), CA1- ով եւ կրծող հիպոկամպի CA3 ենթահամակարգերում [5-7]: Բացի այդ, նախորդ ուսումնասիրությունը, օգտագործելով լազերային-դոպլերային հոսքագիծը (LDF), ցույց է տվել, որ մեղմ տրոհման վահանակը առաջացնում է տարածաշրջանային ուղեղային արյան հոսքը (rCBF), նեյրոնային ակտիվացման այլընտրանքային մարկեր, CA1 ենթաբեւեռում,8]: Իմունահիստոկիմիական հետազոտությունները թույլ են տալիս մանրամասն մարզային հատուկ վերլուծություններ անցկացնելուց հետո, երբ LDF- ն հնարավորություն է տալիս իրական ժամանակում դիտարկել rCBF- ի վարժությունների ընթացքում տեղայնացված տարածքում: Չնայած յուրաքանչյուր հետազոտության առավելություններն ու սահմանափակումները, այս ուսումնասիրությունները ցույց են տալիս, որ հիպոկամպալ նեյրոնային ակտիվության վրա կատարված սուր վարժումների ազդեցությունը: Այս արդյունքները ցույց են տալիս մի մեխանիզմ, որով երկարատեւ կանոնավոր զորավարժությունները նպաստում են հիպոկամպալային պլաստիկությանը `բազմիցս առաջացնելով նեյրոնային ակտիվացում [9].
Ընդարձակ FosB- ի ճառագայթումային զուգահեռ isoform- ի արտագրման գործոնը ΔFosB- ն առաջացնում է որոշակի ուղեղի շրջանների տարբեր տեսակի խթաններ, որտեղ այն աստիճանաբար կուտակում է իր բացառիկ կայունության պատճառով (շաբաթների կեսը) [10-12]: Ուսումնասիրության աճող մարմինը ցույց է տալիս, որ ΔFosB- ի աճող մակարդակները միջնորդում են երկարատեւ նյարդային եւ վարքային պլաստիկության որոշակի խթանների հետ [11,13]. Օրինակ, կոկային եւ մորֆինի թմրանյութերի քրոնիկ ախտորոշումը սովորաբար մեծացնում է ΔFosB արտահայտությունը միջուկային հեծանիվների մեջ, որը ներկայացնում է մոլեկուլային մեխանիզմներից մեկը, որն առաջացնում է այս դեղերի նկատմամբ զգայունությունը [11,14,15]: Սիմանալով այլ պարգեւատրման խթանների, այդ թվում `բարձր ճարպային դիետայի եւ սեռական փորձառության [16,17], lանգերազանցելի կամավոր անիվի վազքը նաեւ ավելացրել է FosB / ΔFosB իմունային դեֆեկտիվությունը ռնգային միջուկի ակամեմեններում `առաջարկելով, որ կամավոր վարումը բնական կրելու կրծողների համար [18,19]. Այնուամենայնիվ, մեր գիտելիքների լավագույն համար, ոչ մի գրականություն չի ուսումնասիրել, թե արդյոք ֆիզիկական վարժության կրկնվող ազդեցությունը hippocampus- ում ΔFosB արտահայտությունն է: Քանի որ զորավարժությունները խթանում են նյարդային ակտիվացումը hippocampus- ում, մենք ենթադրում էինք, որ երկարաժամկետ կամավորական անիվի վազքը նաեւ առաջացնում է ΔFosB արտահայտությունը hippocampus- ում: Մինչ ճշգրիտ մեխանիզմները, որոնցով ΔFosB կարգավորում է հիպոկամպալ պլաստիկությունը, մնում են անորոշ, ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ մկները fosB գենոտիպի հիպոքպամպալ նեյրոոգենեզը եւ դեպրեսիաների նման վարքագծի ավելացումը:20,21]: Եսndeed, զորավարժությունները հայտնի են բարձրացնել նեյրոգենեզը եւ ունեն հակադեպրեսանտային հատկություններ [22-25]: Եսf մեր վարկածը ճիշտ է, ΔFosB- ը նոր պոտենցիալ մոլեկուլային թիրախ է, որը կիրառում է զորավարժություններով հիպոկամպալ պլաստիկություն:
Հիպոկամպուսը ունի անատոմիական եւ ֆունկցիոնալ գրադիենտ երկայնքով երկայնքով (դորա-վենտրալ) առանցքի [26]: The dorsal hippocampus- ն առանցքային դեր է խաղում տարածական ուսուցման եւ հիշողության մեջ [27,28], մինչդեռ ventral hippocampus- ը նախընտրելիորեն ներգրավված է զգացմունքային վարքագծի կանոնակարգման մեջ [29,30]: Բացի այդ, ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ ֆիզիոլոգիական խթանները hippocampus- ի դորալալ եւ վրացական հատվածներում առաջացնում են c-Fos արտահայտության տարբեր ձեւեր [31-33]: Քանի որ զորավարժությունները բարելավում են երկուսն էլ,34-37] եւ ventral hippocampus- կախված գործառույթները [24,25,38], կարեւոր է քննել, արդյոք երկարաժամկետ կամավոր վարումը հանգեցնում է հիպոկամպում ΔFosB- ի տարածաշրջանային յուրահատուկ արտահայտությանը:
Այս ուսումնասիրության հիմնական վարկածն այն էր, որ երկարաժամկետ կամավորական անիվի վազքը կարող է առաջացնել ΔFosB արտահայտությունը մկնիկի հիպոկամպուսում: Այս վարկածը հետազոտվել է FosB / ΔFosB իմունոհիստոքիմիզմի կողմից, ցածր եւ նատրիումային հիպոկամպալային ենթատարածքներում, DG, CA1- ում եւ CA3- ում `լրացուցիչ ընդգծելով տարածաշրջանի հատուկ ինդուկցիան որոշելու համար: Արդյունքները հաստատվել են արեւմտյան blotting- ի կողմից, որն օգտագործվում էր իզոֆորտի հայտնաբերման համար fosB հիպոկամպի մեջ ներարկված գենային արտադրանքները: Մենք նաեւ ուսումնասիրեցինք շրջակա միջավայրին հատուկ FosB / ΔFosB ներդիրի համար կորտեքսը, բացառելու համար, որ երկարատեւ վարժանքները ուղեղում FosB / ΔFosB immunoreactivity չի աճել: Վերջապես, FosB / ΔFosB արտահայտության եւ նեյրոոգենեզի միջեւ փոխկապակցված ասոցիացիան հետազոտվել է որպես առաջին քայլ `ձգտելով կիրառել հիպոկամպալ պլաստիկության կարգավորումը վարժեցնող ΔFosB ինդուկցիայի ֆունկցիոնալ հետեւանքները:
Նյութեր եւ մեթոդներ
1- Կենդանիներ եւ էթիկայի հայտարարություն
Առեւտրային սելեկցիոներից (SLC, Shizuoka, Ճապոնիա) ձեռք են բերվել քսան տղամարդ C57BL / 6 մկնիկ (8 շաբաթ): Փորձարկված 1- ի համար տասը մկնիկը, իսկ մյուսը `2 Experiment- ի համար: Մկնիկները տեղադրվեցին ջերմաստիճանի վերահսկվող պայմաններում (22-24 ° C) եւ լույսի (12 / 12-h թեթեւ / մութ ցիկլ, լույս է 0500- ում) եւ տրամադրվել է սննդի եւ ջրի ad libitum. Բոլոր փորձարարական ընթացակարգերը հավանության են արժանացել Տոկիոյի մետրոպոլիտենի համալսարանի կենդանական փորձարարական էթիկայի հանձնաժողովում:
Յուրաքանչյուր փորձարկում, ժամանելուն պես, մկները պատահականորեն հանձնվեցին կամ վերահսկողության խմբին (Control, n = 5) կամ վազող խմբի (Runner, n = 5): Առաջին շաբաթվա ընթացքում բոլոր մկները տեղակայված էին ստանդարտ պլաստիկ խցերում խմբերում (5 մկների / վանդակում) նախնական տեղաշարժման համար: Այնուհետեւ, Runner մկները տեղափոխվեցին վագոնում գտնվող վանդակով (ENV-046, Med Associate Inc., Georgia, VT, ԱՄՆ): Քանի որ սոցիալական մեկուսացումը հայտնի է հիպոկամպուսում ճնշում գործադրվող նեյրոոգենեզը [39], Runner մկները որպես խմբի (5 մկների / վանդակի) տեղադրվեցին լրացուցիչ 4 շաբաթվա ընթացքում: Առավոտյան արձանագրվում է անիվի պտույտի քանակությունը եւ շաբաթական չափվում է մարմնի քաշը (գ):
2: Փորձ 1: FosB / ΔFosB արտահայտության եւ հիպոկամպալ նեյրոոգենեզի իմունհամախոկիմիական հետազոտություն
2.1: Պերֆուսի եւ հյուսվածքների վերամշակում
Առավոտյան (0900-1100) վազքի ժամանակի վերջին օրվանից հետո, մկները խորապես նյարդայինացվում էին pentobarbital նատրիումով եւ transcardially ցրված սառը ջրով: Ուղեղը արագորեն հանվել է եւ տեղադրվել 4% paraformaldehyde- ում 0.1 M ֆոսֆատ բուֆերացված աղիով (PBS, pH 7.4) գիշերում: Այնուհետեւ ուղեղը cryoprotected է 30% sucrose է PBS եւ սառեցված մինչեւ հետագա վերամշակման. Կորոնալ ուղեղի հատվածները (40 μմ) կիսաֆաբրիկայից ստացվել են սառեցման microtome- ի միջոցով եւ հավաքվել PBS- ով 0.01% նատրիումի azide- ով:
2.2- ը, իմունխոստոկիմիա
FosB / ΔFosB- ի իմունային բջիջների համար պատահականորեն ընտրված հատվածների մեկ-ի վեց շարքը: Որպես հարեւան սերիա օգտագործվել է կրկնակի կոկորդին (DCX) մակնշման համար, նեյրոոգենեզը գնահատելու համար վավերացված չմշակված նեյրոնների մարկեր [40,41]: Էնդոկրին պերօքսիդազի ակտիվացումից հետո, 1% H- ով2O2 PBS- ում, ազատ լողացող հատվածները նախընտրվել են PBS- ի 10 ժամի համար 2% նորմալ ձիու շիճուկ պարունակող լուծույթով: PBS- ի հետագա լուծույթները բաժանվեցին PBS- ով 1% Triton X-1000 եւ 48% BSA (PBST) հետ զուգորդված նապաստանի պոլիկլոնալ պան-FosB հակամարմինների (0.5: 100, sc-0.5, Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, ԱՄՆ) -BSA) 24 ժամվա ընթացքում, 4 ° C- ում: Բաժանությունների հերթական շարքը ներառվել են 1 ժամը 500- ում `այծի պոլիկլոնալ հակա-DCX հակամարմինների (8066: 48, sc-4, Santa Cruz) եւ PBST-BSA- ի միջոցով: Բաժինները հետագայում ինկուբացված էին համապատասխան բիոտինիլացված երկրորդական հակաբիոտիկով (anti-rabbit IgG, 1: 1000, AP182B, anti-goat IgG, 1: 1000, AP180B, EMD Millipore, Billerica, MA, համար 2 ժամ սենյակային ջերմաստիճանում: Այնուհետեւ բաժինները վարվել են AVIDIN-biotin-peroxidase համալիրով (Vectastain ABC peroxidase kit, Vector Laboratories Inc, Burlingame, CA, ԱՄՆ) `90 րոպե արտադրողի հրահանգներով: Հակագենները վերջնականապես արտացոլվել են 0.02% 3,3-diaminobenzidine (DAB) 0.1 M Tris-HCl (pH 7.6) պարունակող 0.01% H2O2. FosB / ΔFosB- ի իմունային բարդությունների համար ռեակցիան ակտիվացել է նիկել ամոնիումի սուլֆատով: DCX staining- ի համար բջջային միջուկները հակադարձվել են Նիսլի գույնի հետ: Բաժինները տեղադրվեցին ժելատինապատված սլայդների վրա եւ տեղադրվեցին լապտերներ:
2.3: FosB / ΔFosB իմունային հսկողության քանակականացում, օգտագործելով պատկերային շեմը
Այս հետազոտության մեջ օգտագործված համընդհանուր FosB հակամարմինը բարձրացվել է FosB- ի եւ ΔFosB- ի N-terminal տարածաշրջանի տարածքի դեմ, այնպես որ չի կարող խտրական լինել երկու isoforms- ի միջեւ: Հետեւաբար, իմունային համակարգի կայունությունը նկարագրված է որպես FosB / ΔFosB immunoreactive (FosB / ΔFosB-ir) միջուկները: Անաչառ կույր չափման համար սլայդները կոդավորված էին մինչեւ վերլուծությունը: Մկնիկի ուղեղի ատլաս [42] օգտագործվել է հետեւյալ շրջաններում (ROIs) տեղակայելու համար `DG (3 բաժինների) բջիջների շերտ (GCL), CA1 (3 բաժինների բրգաձեւ բջիջների շերտ) եւ CA3 (2-3 բաժինները), ցածր հիպոկամպում (փակվել է -2.2 մմ-ից bregma- ից); DG (2 բաժիններ), CA1 (2 բաժիններ) եւ CA3 (2 բաժինները) ventral hippocampus- ում (փակված է -3.4 մմ ից bregma) (Նկար 4, ձախ). Կեվալային բաժինները պարունակում են ինչպես հիպոկամպի, այնպես էլ դորալային եւ վրացական հատվածները, սակայն վրացական մասը ուղղված է եղել: DG- ում suprapiramidal (DGsp) եւ infrapyramidal (DGip) շեղբերերը վերլուծվել են առանձին: Շարժիչի կորտեր (2-3 հատվածներ, փակված մինչեւ 0.6 մմ-ից bregma- ից), somatosensory barrel cortex (2-3 բաժիններ, փակված մինչեւ -0.6 մմ bregma- ից), տեսողական խեժ (3 բաժիններ, վերլուծվել են նաեւ բրգմա), լսողական կորտեր (2.9 բաժիններ, փակված `մինչեւ 16 մմ, bregma- ից մինչեւ 3 մմ) եւ խնձորային լապտեր (2.9 հատվածներ, որոնք փակված են + բրգմայից + 3 մմ)Նկար 6, ձախ).
Յուրաքանչյուր ROI- ի թվային պատկերները (2070 × 1548 պիքսել) ստացվել են օպտիկական մանրադիտակի միջոցով (BX-51, Olympus, Tokyo, Ճապոնիա), ապահովված CCD տեսախցիկով (DP-73, Olympus) եւ պատկերային ծրագրավորմանով (cellSens, Olympus): օբյեկտիվ ոսպնյակի խոշորացումն 10 × է hippocampal ROIs եւ 4 × cortical ROIs- ի համար: Որոշակի չափով ուժեղ FosB / ΔFosB իմունտորակտիվությունըՆկար 1D-G), օգտագործելով նախապես մի քանի բաժիններ, այնպես էլ պատկերների ձեռքբերման պարամետրերը (լույսի ինտենսիվությունը, դաշտի կանգառի չափը, ազդեցության ժամանակը եւ սպիտակ հավասարակշռությունը) եւ RGB բաղադրիչներից յուրաքանչյուրի համար շեմային մակարդակները օպտիմալացվել են hippocampal եւ cortical ROI- ների համար: Այնուհետեւ կատարվեց հետեւյալ վերլուծությունը օպտիմիզացված պայմաններում (1): ROI- ն ընտրվել է անկանոն ձեւավորված բազմաշերտով (Նկար 1A, B) (2): Պատկերը խափանվեց, որը փոխակերպեց FosB / ΔFosB-ir միջուկներին կարմիր գույնի (Նկար 1C-G) (3): ROI- ը ավտոմատ կերպով հաշվարկվեց հետեւյալ կերպ. ROI = (փոխարկվող տարածք (կարմիր) / ROI ընդհանուր տարածք) × 100:
Այս պատկերի հավանականությունը վերլուծելու համար 20 մարզերը պատահականորեն ընտրվել են տարբեր տարածաշրջանային չափերի տարբեր ուղեղային տարածքներից: Ի լրումն պատկերային շեմի քանակական քանակի, ընտրված շրջաններում FosB / ΔFosB-ir միջուկների քանակը ձեռքով հաշվարկվել է եւ FosB / ΔFosB-ir միջուկների խտությունը ձեռք է բերվել FosB / ΔFosB-ir միջուկների քանակը բաժանված չափով տարածք (մմ2).
2.4: Դիետատային girus- ում DCX-ir չմոլորված նեյրոնների քանակականացում
DCS- ի չմշակված նեյրոնները, որոնք վազում էին Մկնիկի մկների մեջ, առատ ու համընկնող էին, դարձնելով այն դժվար է ճշգրիտ հաշվարկել DCX-ir soma- ի սկավառակը, օգտագործելով օպտիկական միկրոսկոպ: Այնուամենայնիվ, նախորդ ուսումնասիրության մեջ, Մորֆոլոգիական գնահատման Sholl վերլուծությունը ցույց է տվել, որ յուրաքանչյուր DCX-ir neuron- ն միջինում ունի մեկ դենդիտ, որը չափվում է 40 μմ սոմայի մեջ [43]: Հետեւաբար, DCX-ir neurons- ի տարածաշրջանային կոնկրետ քանակական որոշման համար մշակվել է հետեւյալ բնօրինակը վերլուծություն:
- (1) GCL- ի պատկերն առաջացվեց համակարգչային ցուցադրման վրա, օգտագործելով պատկերային ծրագրային ապահովում եւ 40 × օբյեկտիվ ոսպնյակ (2): Կյանքի վրա պատկերված գծի հատվածը (150 ± 0.1 μմ) կազմել է GCL- ի կեսինՆկար 2) (3): Կենտրոնական խորությունը փոխելու համար թվարկված DCX-d dendrites- ի հատվածի հատվածը հաշվարկվել է (4): ROI- ները (dorsal DGsp, dDGsp, dorsal DGip, dDGip, ventral DGsp, vDGsp, ventral DGip, vDGip) համապատասխանում են այն շրջաններին, որտեղ վերլուծվել է FosB / ΔFosB immunoreactivity (5): Յուրաքանչյուր ROI- ում 2-3 գծի սեգմենտները կազմվել են մեկ բաժնում եւ անցումների քանակը միջինում միջինում 2-3 բաժիններում: Քանի որ GCL- ի հաստությունը մոտավորապես 60-80 μմ է, անցքերի քանակը պետք է արտացոլի սահմանային տարածաշրջանի DCX-ir neurons- ի քանակը:
3. Փորձ 2: FosB / ΔFosB իզոֆորի հայտնաբերում անուղղակի վազքի միջոցով
3.1: Պերֆուսի եւ հյուսվածքների վերամշակում
Մկների լրացուցիչ խմբերը վերը նշված է փորձի 1- ում: 4 շաբաթ անցած միջամտությունից հետո, մկները տրանսկարդորեն սուր ցավազրկում էին խորը անեստեզիայի տակ: Հիպոկամպուսը արագորեն հայտնաբերվեց եւ սառեցրեց հեղուկ ազոտի հետ եւ պահեց -80 ° C- ում: Յուրաքանչյուր մուկի հիպոկոմպիտը հոմոգենացվել է RIPA բուֆերում (150 mM NaCl, 25 mM Tris-HCl pH 7.6, 1% NP-40, 1% նատրիումի դեոդիքքոլատ, 0.1% SDS, #8990, Thermo Scientific, IL, ԱՄՆ) inhibitors (cOmplete Mini, Roche, Manheim, Գերմանիա): The lizates էին centrifuged 15 րոպե 5000 rpm ժամը 4 ° C եւ հավաքվել supernatants. Սպիտակուցի կոնցենտրացիաները չափվել են BCA Protein Assay kit (#23227, Thermo Scientific, IL, ԱՄՆ):
3.2. Արեւմտյան blotting
Սպիտակուցի հավասար քանակները (30 μg / գոտի) էլեկտրաֆոբեզ էին 10% polyacrylamide գելում, այնուհետեւ տեղափոխվում է PVDF մեմբրանի (Immun-Blot, 0.2 μm, Bio-Rad, MD, ԱՄՆ): Անկանխատեսելի կապն արգելափակվել է 1% BSA- ով պարունակող թունաքիմիկատը 0.5- ի համար (20 M NaCl, 7.5 մմ Tris-HCl pH 0.1, 20% Tween-3): Մեմբրանը ինկուբացված է համաժողովրդական FosB հակամարմինը (1: 1000), որն օգտագործվում է վերոհիշյալ իմունոգոստոկիմիայի համար, որը պարունակում է TBST- ով պարունակվող 3% BSA: TBST- ի հետ լվանալուց հետո մեմբրանը ներարկվել է HRP-conjugated հակաբնածին IgG հակամարմինով (1: 5000 in TBST, NA934, GE Healthcare, Buckinghamshire, Մեծ Բրիտանիա) 1 ժամը սենյակային ջերմաստիճանում: TBST- ով լվացվելուց հետո սպիտակուցային բրենդերը արտացոլվել է Enhanced Chemiluminescence- ի (Western Lightning Plus-ECL, PerkinElmer, MA, ԱՄՆ) ինկուբացիայի միջոցով եւ գրավել է Image Quant LAS 4000 mini (GE Healthcare, Buckinghamshire, Մեծ Բրիտանիա) միջոցով: Այնուհետեւ մեմբրանը վերարտադրվել է որպես հակաբորբոքային-դեհիդոիդա-3-ֆոսֆատ դեոդիֆիզի դիդրոդինազ (GAPDH) հակամարմին (#2275, 1: 5000 է TBS-T, Trevigen, MD, ԱՄՆ) որպես բեռնման հսկողություն: Սպիտակուցային բջիջների օպտիկական խտությունը չափվել է Image-J օգտագործելով եւ նորմալացվում է GAPDH մակարդակում:
4: Վիճակագրական վերլուծություն
Մկնիկի մարմնի քաշի փոփոխությունները վերլուծվել են ANOVA- ի կրկնակի միջոցներով (խմբային ժամանակ): Խմբերի միջեւ վիճակագրական տարբերությունները որոշելու համար օգտագործվել է անհամաչափ t-test (Control vs. Runner): Pearson- ի փոխկապակցման վերլուծությունը օգտագործվել է FosB / ΔFosB իմունոթերապեւտության վերլուծության (ձեռքի հաշվարկի, ընդդեմ պատկերի շեմ) ստուգելու համար եւ ուսումնասիրելու FosB / ΔFosB արտահայտության մակարդակի եւ DG- ում DCX անցումների քանակի միջեւ ասոցիացիան: Տվյալները ներկայացվել են որպես միջին ± SEM: Վիճակագրական նշանակության շեմը սահմանվեց P <0.05:
Արդյունքներ
1- ը, մարմնի քաշը եւ հեռավորությունը հեռավորությունը 1- ում եւ 2- ում
1- ի եւ 2- ի Experiments- ում եւ Control- ի եւ Runner- ի մկների մարմնի քաշի փոփոխությունները հավաքվում եւ ցուցադրվում են Նկար 3. Երկկողմանի բազմակողմանի միջոցներ ANOVA- ն նշանակում է զգալի փոխազդեցություն (խումբը × ժամանակ, F(4, 72) = 13.6, P <0.001) և խմբի հիմնական ազդեցությունը F(1, 18) = 6.07, P <0.05) ՝ նշելով Runner մկների մարմնի զգալիորեն ցածր քաշը: Վանդակի մեկ վազքի հեռավորությունը ցույց է տրված նկարում Աղյուսակ 1. Չնայած յուրաքանչյուր մկնիկի ճշգրիտ վազում հեռավորությունը անորոշ էր, քանի որ մկները միասին տեղակայված էին, կանոնավոր դիտարկումը հաստատեց, որ բոլոր մկները հաճախ կատարում են անիվի վազում: Փորձի 2- ի Runner մկները ավելի երկար էին, քան փորձառու 1- ով, բայց միջին հեռավորությունը (մ / օր / վագ) համահունչ էր յուրաքանչյուր փորձի:
2: FosB / ΔFosB իմիթյունաբերության քանակականության ստուգում, օգտագործելով պատկերների շեմը
FosB / ΔFosB-ir տարածության միջեւ զգալի հարաբերակցություն է արձանագրվել ձեռքով ձեռք բերված FosB / ΔFosB-ir միջուկների պատկերային շեմի եւ խտության միջոցով (r = 0.941, P <00001, Նկար 4).
3: Hippocampus- ում FosB / ΔFosB իմունորակտիվությունը
Ֆոսբ / ΔFosB իմիջի պատկերները պատկերված էին ցածր եւ նատրիումային հիպոկամպալային ենթաֆիլներում: Նկար 5. Վերլուծված բոլոր ROI- ներում, FosB / ΔFosB իմուննային ակտիվությունը Runner մկների մեջ (Նկար 5, աջ) որակապես բարձր էր, քան Control mice- ումՆկար 5, կենտրոն): Վազող մկների մեջ քանակական վերլուծությունը ցույց է տվել, որ FosB / ΔFosB-ir- ի զգալի աճը ինչպես երկնային (DGsp: P <0.01; DGip: P <0.01; CA1: P <0.05; CA3: P <0.05) և փորոքային հիպոկամպային ենթադաշտերը (DGsp: P <0.01; DGip: P <0.05; CA1: P <0.05; CA3: P <0.05; Նկար 6).
4: FosB / ΔFosB immunoreactivity է ծղոտե ներքնակ
Ներկայացվում են FosB / ΔFosB- ի քաղված ROI- ներում immunostaining- ի ներկայացուցչական պատկերները Նկար 7. Քվանտային վերլուծությունը ցույց տվեց, որ FosB / ΔFosB- ի իմունտորակտիվության տարածաշրջանում կախված փոփոխությունները երկարաժամկետ վազքով (Նկար 8): Runner մկների մեջ FosB / ΔFosB-ir տարածքը զգալիորեն ավելի բարձր էր շարժիչի ծառի մեջ (P <0.05) և սոմատոսենսորային տակառի կեղևը (P <0.05), բայց ոչ տեսողական կեղևում (P = 0.662) կամ գինու լամպի (P = 0.523): Հավատարմագրային բյուրեղներում FosB / ΔFosB-ir տարածությունը ձգտում է Runner մկների աճըP = 0.105).
5- նուրոգենեզ
ԴՆԹ-ի իմունոֆտինգի ներկայացուցչական պատկերները ներկայացված են Նկար 9. Dorsal hippocampus- ում, DCX- ի իմունգորակտիվությունը Runner մկների մեջ (Նկար 9, աջ) որակապես բարձր էր Control mice- ովՆկար 9, ձախ). Դորալային հիպոկամպուսի համեմատ, DCX- ի իմունտորակտիվությունը խանգարող հիպոկամպում թույլ էր թե Control եւ Runner մկների մեջ: Runner մկների մեջ խաչմերուկների թիվը զգալիորեն բարձր էր dDGsp- ում (P <0.01) և dDGip (P <0.01; Նկար 10): Վենդրալ հիպոկամպուսում, Runner մկների անցումների քանակը աճել է, սակայն խմբերի միջեւ զգալի տարբերություններ չկան (vDGsp, P = 0.101; vDGip, P = 0.257; Նկար 10).
6: FosB / ΔFosB արտահայտության եւ նեյրոոգենեզի միջեւ հարաբերակցությունը
FosB / ΔFosB-ir տարածքի եւ DCX անցումների թվաքանակի միջեւ փոխկապակցված վերլուծություն է իրականացվել (Նկար 11): Քանի որ յուրաքանչյուր տվյալների հավաքածուն (օրինակ, Dorsal DGsp- ի Վերահսկիչ մկների մեջ) բաղկացած է միայն 5 զույգերից, վերլուծությունը առաջին անգամ կատարվում է բոլոր 40 զույգերով: Հետաքրքիր է, որ FosB / ΔFosB-ir տարածքի եւ DCX անցումների թվերի միջեւ զգալի հարաբերակցություն է եղել (r = 0.885, P <0.0001): Բացի այդ, զգալի փոխհարաբերություններ են հայտնաբերվել նաև, երբ մեջքային DG (r = 0.762, P <0.05) և փորոքային DG (r = 0.816, P <0.01) վերլուծվել են առանձին:
7: FosB / ΔFosB- ի նույնականացում, որը առաջանում է երկարաժամկետ վազքով
Վերջապես, իզոֆորմը հայտնաբերելու համար fosB հիպոկամպի մեջ առաջացած գենային արտադրանքները `երկարատեւ հոսանքի արձագանքման համար, հիպոկամպին մկների լրացուցիչ խմբերից ենթարկվել է արեւմտյան բլոտում` օգտագործելով նույն համահայկական FosB հակամարմինը: 35-37 kDa- ի մի քանի տողեր, որոնք ներկայացնում են ΔFosB- ի փոփոխված izoforms [44], զգալիորեն ավելացել են Runner versus Control մկների (Նկար 12, P <0.01): Մյուս կողմից, 48 կԴա FosB իզոֆորմը անթույլատրելի էր որևէ խմբում: 25 կԴա-ից բարձր թույլ տեսանելի մեկ այլ գոտի հավանաբար ներկայացնում է Δ2ΔFosB իզոֆորմը (27 կԴա): Կային եւս երկու ժապավեններ `50 կԴա-ից բարձր և 37 կԴա-ով, որոնք, ամենայն հավանականությամբ, ոչ սպեցիֆիկ կապակցման պատճառով էին: Քանակը չափելիս խմբերի միջև ոչ-ΔFosB տիրույթներում տարբերություններ չեն հայտնաբերվել (տվյալները չեն ցուցադրվում):
Քննարկում
Ընդհանուր առմամբ, սույն ուսումնասիրությունը առաջին անգամ կատարեց իմունոգեւոր քիմիական անալիզ, 1- ին ուսումնասիրելու համար), թե արդյոք երկարաժամկետ կամավորական անջատումը առաջացնում է hospocampus- ում FosB / ΔFosB արտահայտությունը, եւ 2- ը), արդյոք տարածաշրջանի հատուկ արձագանքը առկա է իր դորո-վրացական առանցքի վրա:
Քաղցկեղի չորս շաբաթվա ընթացքում առաջացրեց վերլուծված բոլոր hippocampal շրջաններում (այսինքն, DG, CA1 եւ CA3 ենթահամակարգերը, այնպես էլ hippocampus- ի դորալալ եւ վրացական հատվածները) FosB / ΔFosB իմունորակտիվության զգալի աճ: Մենք հաստատեցինք, որ 35-37kDa ΔFosB isoform- ը խոշոր էր fosB գենային արտադրանքը, որը կուտակվում է երկարաժամկետ վազքի ժամանակ: Այս արդյունքները հստակորեն հաստատում են այն հիպոթեզը, որ երկարատեւ կանոնավոր զորավարժությունը խթան է հանդիսանում ΔFosB ինդուկցիայի համար, հիպոկամպի ընթացքում, եւ դրա ներածումը կարող է լինել նոր մոլեկուլային մեխանիզմ, որով վարժանքը ազդում է հորմոնալ եւ / կամ վրատական հիպոկամպուսային կախված գործառույթների տարբեր տեսակների վրա:
1: FosB / ΔFosB իմունտորակտիվության գնահատման վալիդացիան եւ սահմանափակումները, օգտագործելով պատկերային շեմը
Այս հետազոտության ընթացքում ընդունվել է FosB / ΔFosB immunoreactivity- ի տարածաշրջանային կոնկրետ քանակականացման համար, որը նպատակաուղղված է թիրախային բջիջների քանակի եւ բջջային մորֆոլոգիայի գնահատման համար իմունահիստոկիմիական հետազոտություններում լայնորեն օգտագործված պատկերային շեմի մեթոդը [15,45,46]: Ցուցադրվել է FosB / ΔFosB immunoreactivity մակարդակների միջեւ զգալի հարաբերակցությունը, որը չափվում է պատկերի շեմով եւ ձեռքով հաշվարկով (Նկար 4) Այնուամենայնիվ, քանի որ խտությունը և համընկնումը կանխում էին FosB / ΔFosB-ir միջուկների քանակի հաշվարկը խիստ խիտ տարածքներում, ցուցադրված փոխկապակցվածությունը ենթադրում է միայն պատկերի շեմային մեթոդի ճշգրտություն, երբ FosB / ΔFosB-ir տարածքները ներկայացնում են ընդհանուր ROI- ի <~ 40% տարածք Հետեւաբար, FosB / ΔFosB-ir տարածքների համար հարկավոր է զգույշ մեկնաբանել> ROI- ի ընդհանուր տարածքի 40% -ը:
Մասնավորապես, «Runner» մկների DG- ում (Նկար 4), FosB / ΔFosB արտահայտությունը մեծապես առաջացրեց անիվի վազում եւ FosB / ΔFosB-ir միջուկների մեծ մասը համընկավ: Այս ոլորտներում, FosB / ΔFosB արտահայտության աճի տատանումն առաջացնում է արտահայտության մակարդակի ավելի մեծ թերագնահատում, անկախ կիրառվող քանակական մեթոդի (պատկերների շեմը կամ ձեռքի հաշվարկը): Այնուամենայնիվ, չնայած թերագնահատման ռիսկը, կարեւոր է նշել, որ ներկա հետազոտությունը հաջողությամբ ցույց է տվել FosB / ΔFosB-ir- ի տարածքում, Runner մկների DG- ում: Սա ենթադրում է, որ մեթոդաբանական սահմանափակումները չեն զիջում մեր եզրակացություններին: Փոխարենը, պոտենցիալ թերագնահատում է հիպոկամպի մեջ FosB / ΔFosB իմունային դեֆեկտիվությունը բարձրացրած երկարատեւ վազքի հայտնաբերման հուսալիությունը:
2: Հիպոկամպի մեջ ΔFosB- ի միասնական ներդիրը երկարաժամկետ վազքով
Հիպոկամպում ունի անատոմիական եւ ֆունկցիոնալ կշռադիտակներ իր երկայնական առանցքի երկայնքով [26], ուստի ներկա հետազոտության համար hippocampus- ի դորալային եւ վրացական մասերում FosB / ΔFosB իմունային դեֆեկտիվությունը վերլուծվել է առանձին: Տվյալները ցույց են տվել, որ երկարաժամկետ վազքը համաչափորեն աճեց FosB / ΔFosB արտահայտությունը չափված բոլոր hippocampal ROI- ներում: FosB / ΔFosB- ի իմունտորակտիվության այս միասնական ներարկումը կարող է ոչ կոնկրետ պատճառվել երկարատեւ վազքի հետ կապված համակարգային մետաբոլիկ փոփոխությունների: Այնուամենայնիվ, կարեւոր է նշել, որ կարճատախտակի մեջ կան FosB / ΔFosB իմունային դեֆեկտիվության տարածքի տարածաշրջանային աճ: Այս արդյունքը ապահովվում է վերջին բացահայտումներից, որոնք ցույց են տալիս, որ հեծանվասպորտի հոսպիտալում հոսպիտալացնող հոսպիտալացնող հոսպիտալացնող հոսպիտալում աճում է մարզային ուղեղային հոսքը,8]: Ավելին, Ռոդեսը եւ այլն: (2003) ցույց տվեց, որ 7 օրն անցնում է CG-FOS- ի դրսեւորման մեջ գտնվող վագոնային անիվի 2 օր եւ Hippocampus- ի CA3 / 1- ում (CAXNUMX- ը չի չափվում) եւ զգայական բյուրեղներում, բայց ոչ տեսողական բյուրեղներում [47]: Հավաքված միասին, այս ուսումնասիրությունները ենթադրում են, որ hippocampus- ում FosB / ΔFosB արտահայտության միասնական ներադրումը երկարաժամկետ վազքի ոչ կոնկրետ հետեւանք չէ: Հետաքրքիր է, Hawley et al. վերջերս հաղորդել է, որ քրոնիկ անկանխատեսելի սթրեսը մեծացնում է FosB / ΔFosB արտահայտությունը dorsal- ում, բայց ոչ ventral- ում, DH- ի առնետի հիպոկամպում [48]: Հետագա հետաքննությամբ, FosB / ΔFosB ներդիրի հստակ նախշերը, ինչպիսիք են զորավարժությունները կամ սթրեսը առաջ բերվողները, շարունակական պատկերացում են տալիս հիպոկամպի վրա խթանման կախված ազդեցությունների մեջ:
Այս հետազոտության մեջ օգտագործված հիմնական համ-FosB հակամարմինը հայտնի է ճանաչել FosB սպիտակուցների բոլոր էսոֆորմը: Արեւմտյան բլոտինգի վերլուծության արդյունքում պարզվեց, որ երկարաժամկետ վազքից հետո հիպոկամպում ավելացող միակ էսոֆորմները եղել են ΔFosB- ի (35-37 kDa) փոփոխված izoforms, Fos- ի ընտանեկան սպիտակուցների միակ կայուն izoforms [11]: Այս հայտնագործությունը համապատասխանում է նախորդ աշխատանքին, օգտագործելով Pan-Fos- ի հակամարմին, ցույց տալու համար, որ 35-37 kDa ΔFosB- ը ճարպային քորոցքում առաջացած FOS ընտանիքի հիմնական սպիտակուցը քրոնիկական սթրեսով [44]: Այսպիսով, երկարաժամկետ վազքով առաջացած հիպոկամպալ FosB / ΔFosB իմունային դեֆեկտիվության աճը, ամենայն հավանականությամբ, արտացոլում է ΔFosB մակարդակը:
Հիպոկամպի մոլեկուլային եւ կառուցվածքային ասպեկտների վրա մարզային յուրահատուկ հետեւանքների մասին քիչ հայտնի է: Այնուամենայնիվ, բազմաթիվ վարքագծային հետազոտություններ ցույց են տալիս, որ մեծ ներուժ կա զորավարժությունների, ինչպես նաեւ դորալալ եւ վրացական հիպոկամպալ ֆունկցիաների բարելավման համար: Զորավարժությունները ցույց տվեցին, որ բարելավեն տարածական ուսումը եւ հիշողությունը [34-38] եւ տարածական եւ համատեքստային մշակումը հիմնականում կախված է դորալային հիպոկամպուսից [27,28]: Ի հակադրություն, վարժությունը հայտնի է նաեւ անսխոլիտիկ եւ հակադեպրեսանտային հատկություններով [24,25,38] եւ այդ հուզական պատասխանները հիմնականում կարգավորվում են ventral hippocampus [29,30]: Այս հետազոտության մեջ տեսած ΔFosB- ի միասնական զորակոչը ցույց է տալիս, որ նյարդային պլաստիկ փոփոխությունների որոշ ձեւեր են տեղի ունեցել ամբողջ հիպոկամպուսում: Սա կբացատրի, թե ինչու է զորավարժությունները կարող են ազդել ինչպես դորալային, այնպես էլ վրացական հիպոկամպուսային կախված գործառույթների վրա:
3. Տարածաշրջանային վերլուծություն վարժանքային նեյրոոգենեզի վերլուծություն
Դորալային եւ վենդրիկ հիպոկամպուսի միջեւ նյարդոտվածքի ֆունկցիոնալ տարաձայնությունները նույնպես մեծ ուշադրություն են դարձնում [49]: Այս հետազոտության ընթացքում, օգտվելով DCX- ի անմատչելի նեյրոնների մորֆոլոգիական առանձնահատկություններից [43], մենք համարում էինք DCX- ի dendrites- ի միջեւ խաչմերուկների քանակը եւ GCL- ի կողքին կազմված գծի հատված: Այս չափումը չի ապահովել DG- ի DCX-ir neurons- ի ընդհանուր թիվը, սակայն հնարավորություն տվեց տարածաշրջանային կոնկրետ քանակականացում, որը անհրաժեշտ է FosB / ΔFosB արտահայտության տվյալների հետ համեմատական վերլուծության իրականացման համար (տես ստորեւ): Երկարաժամկետ վազքի արդյունքում DCX-ir նեյրոնների քանակը զգալիորեն ավելացել է դորալում, բայց ոչ վրացական, DG- ով: Սա նշանակում է, որ զորավարժությունները կարող են խթանել նյարդոգենեզը ավելի շոշափելիորեն դեպի դորալ, համեմատած DG- ի վրացական մասի հետ: Այնուամենայնիվ, նախորդ ուսումնասիրությունները հաղորդել են հակասական արդյունքներ, որոնցով անիվի հոսքը ավելացել է նյարդայինացմամբ `ինչպես ցողունային,50,51]: Սույն ուսումնասիրության մեջ ventral DG- ում DCX- ի անցումների քանակը աճել է վազքի հետ, չնայած որ փոքր նմուշի չափը (5 մկնիկը մեկ խմբի համար) կարող էր սահմանափակել խմբերի միջեւ վիճակագրորեն զգալի տարբերություն հայտնաբերելու ունակությունը: Հետեւաբար, թերեւս վաղաժամ է բացառել այն հնարավորությունը, որ կամավոր անիվի վազքը կարող է խթանել վրատային հիպոկամպալ նեյրոոգենեզը: Հետագա ուսումնասիրությունները անհրաժեշտ են հասկանալ տարածաշրջանային առանձնահատկությունը `վարքային նեյրոոգենեզը` իր բազմաշերտ գործընթացների (բջիջների տարածման, տարբերակման, միգրացիայի եւ գոյատեւման) վերաբերյալ:
4. Հիպոկամպալ պլաստիկության կարգավորումը կատարելու համար օգտագործված ΔFosB ինդուկցիայի ֆունկցիոնալ հետեւանքները
Վերջապես, որպես hippocampus- ում կիրառվող զորավարժությունների առաջացման ΔFosB- ի ինդուկցիայի ֆունկցիոնալ հետեւանքների ճանաչման առաջին քայլը, մենք ուսումնասիրեցինք FosB / ΔFosB իմունային դեֆեկտիվության հարաբերությունները DCX- ի անցումների նկատմամբ, այնպես էլ դորալային եւ ventral DG- ով եւ գտել էական, դրական հարաբերակցություն երկու փոփոխական: Չնայած այն հանգամանքին, որ մեխանիզմները, որոնց միջոցով ΔFosB- ն կարգավորում է զորավարժությունների վրա հիմնված նեյրոոգենեզը, մնում են անորոշ, վերջերս ուսումնասիրությունը ցույց տվեց, որ fosB- բաց մկաններ, որոնք չունեն FosB, ΔFosB եւ Δ2ΔFosB (բոլորը fosB արտադրանք), ցուցաբերել են բազային հիպոկամպալային նեյրոոգենեզի դեֆիցիտներ, ներառյալ նվազեցրած նեյրոնային նախածինային բջիջների տարածումը, նորածին նեյրոնների արտանետված արտագաղթը եւ անգիտակից DG կառուցվածքները [20]: Սակայն այդ փոփոխությունները չեն դիտարկվում fosB(դ / դ) մկաններ, որոնք չունեն FosB, բայց ոչ ΔFosB / Δ2ΔFosB: Հետաքրքիր է, որ fosB- առնվազն մկաններ, որոշ նեյրոոգենեզների հետ կապված գեների արտահայտում, ներառյալ Vgf (VGF- ի նյարդային աճի գործակիցը) եւ այլն gal (Galanin prepropeptide) իջեցվել են [20]: Քանի որ VGF- ը եւ GAL- ը գաղտնի մոլեկուլներ են, մեկ առաջարկ, որը խոստանում է, համարում է, որ ΔFosB- ի նեյրոնները կարող են կարգաբերել նեյրոոգենեզ `autocrine / paracrine ակտիվության միջոցով [20].
Բացի այդ, պետք է նշել, որ տարածաշրջանը, որտեղ ΔFosB- ն ներթափանցված է տարածման միջոցով, համընկնում է տարածաշրջանի հետ, որտեղ նյարդային ակտիվությունը բարձր է: Այս եզրակացությունը ենթադրում է, որ վարժանքային նեյրոոգենեզը գտնվում է նվազագույն ակտիվության կախվածությունից: Նյարդային ակտիվացումը բանալին է կենտրոնական նյարդային համակարգի գործառույթը պահպանելու եւ բարելավելու համար [9], մեխանիզմների միջոցով, ներառյալ ուղեղի ծագմամբ նյարդոտրոֆիկ գործոնի (BDNF) արտահայտությունը եւ ազատումը [52,53], արյան ինսուլինի նման աճի գործոնը-1- ի (IGF-1) արյան ուղեղի արգելքի միջոցով ընդունումը [54,55], ապոպտոզի ճնշումը [56], եւ mitochondrial շարժունակության կարգավորումը [57]: Այսպիսով, ներկա հետազոտությունը ցույց է տալիս, որ երկարատեւ վարժությունը կրկնվող նյարդոնային ակտիվացում է առաջացնում, ակնհայտորեն աճող ΔFosB արտահայտության մեջ, որը նպաստում է հիպոկամպալ պլաստիկության բարձրացմանը, պոտենցիալ վերոնշյալ բազմաթիվ մեխանիզմների միջոցով:
Սույն ուսումնասիրությունը գնահատեց միայն զորավարժությունների վրա հիմնված նեյրոոգենեզը եւ դրա հետ DG- ի FosB / ΔFosB արտահայտությունը: Այնուամենայնիվ, FosB / ΔFosB immunoreactivity է նաեւ induced է CA1 եւ CA3 subfields. Այնուամենայնիվ, հետագա ուսումնասիրությունները պահանջվում են ավելի խորը հասկանալ, որ այս ենթաֆիլներում իրականացվող զորավարժությունների վրա հիմնված ΔFosB արտահայտությունը ավելի վաղ հասկացություն է ձեռք բերում, նախորդ գրականությունը առաջարկում է խոստումնալից հնարավորություն: Գուան եւ այլն: (2011) ցույց տվեց, որ CA5 կամ CA5 բրգաձեւ նեյրոնների խանգարված հիշողության համախմբման կամ որոնման մեջ ցիկլինին կախված kinase 1- ի (Cdk3) կոնկրետ բաժանարարությունը [58]: Հետաքրքիր է, որ Cdk5- ը ΔFosB [59եւ ներգրավված է սինապտիկ պլաստիկության կարգավորման մեջ [60]: Հետեւաբար, զորավարժությունների դրսեւորած ΔFosB արտահայտությունը կարող է ներգրավվել CAP- ի համար, Cdk5- ի ակտիվացման միջոցով սինապտիկ պլաստիկության կարգավորմամբ, CA1 եւ CA3 ենթահամակարգերում:
Եզրափակում
Չնայած վարժության սուր խանգարումները հայտնի էին, որ հիպոկամպի մեջ անմիջապես վաղ գենային սպիտակուցների արտահայտությունը առաջ բերվի, սույն ուսումնասիրությունը ցույց է տալիս, որ երկարատեւ կանոնավոր վարժանքը զգալիորեն առաջացնում է ΔFosB արտահայտությունը ամբողջ հիպոկամպուսում: ԹΔFosB- ի միասնական ներարկումը սատարում է ընթացիկ հասկացությանը, որ զորավարժությունը արդյունավետ հիպոկամպալ ֆունկցիաների բարելավման համար կարող է բարելավված ոչ դեղագործական միջամտություն լինել: FosB / ΔFosB արտահայտության եւ նեյրոոգենեզի միջեւ զգալի հարաբերակցության հետ միասին, այդ տվյալները սադրիչ են եւ նշում են, որ ΔFosB- ի դերը բնութագրող հետագա ուսումնասիրությունների անհրաժեշտությունը կիրառում է հիպոկամպալ ֆունկցիայի վրա, ներառյալ նեյրոոգենեզը:
Ֆինանսավորման հաշվետվություն
Սայլակ