ԴՆԹ-ի, FosB- ի եւ cFos- ի ստերիլալ կարգավորումը կոկաինի ինքնակարգավորման եւ հեռացման ընթացքում (2010)

J Neurochem. Հեղինակային ձեռագիր; հասանելի PMC Oct 1, 2011:
Վերջնական խմբագրված ձեւով տպագրված `
J Neurochem. Հոկ 2010; 115 (1): 112-122:

Հրատարակված է առցանց Aug 3, 2010: doi:  10.1111 / j.1471-4159.2010.06907.x

Այս հոդվածի հրատարակչի վերջնական խմբագրված տարբերակը հասանելի է J Neurochem
Տեսեք նաեւ այլ հոդվածներ PMC- ում մեջբերում հրապարակված հոդվածը:

Վերացական

Քրոնիկ թմրանյութերի ազդեցությունը ենթադրում է գենային արտահայտման պրոֆիլների փոփոխություններ, որոնք ենթադրում են թմրամոլության զարգացման հիմք: Սույն ուսումնասիրությունը ուսումնասիրել է Fos- ընտանիքի transcriptional factors- ի, մասնավորապես cFos, FosB եւ ΔFosB- ի կանոնակարգերը, որոնք քայքայում են քրոնիկական ներերակային կոկաինի կառավարման ժամանակ եւ հետո, ինքնակարգավորվող եւ կծկված առնետներում: Մենք հայտնաբերեցինք, որ cFos, FosB եւ ΔFosB- ն ներկայացնում են տարածաշրջանային եւ ժամանակավորապես արտահայտված արտահայտման ձեւեր, որոնցով ΔFosB սպիտակուցը ավելի մեծ կուտակման է ենթարկվում քրոնիկ կոկաինի կիրառությունից հետո միջուկի accumbens (NAc) խցիկում եւ միջուկում, իսկ ΔFosB- ն աճում է կրծքավանդակի մեջ (CPu) նման կամ սուր կամ քրոնիկ վարչարարության հետ: Ի հակադրություն, հանդուրժողականությունը զարգացել է կոկային-իռացված mRNA- ի համար ΔFosB- ի համար `քնի խնամքի հետ կապված բոլոր 3 ստերիլացիոն ենթաշրջաններում: Հանդուրժողականությունը զարգացել է նաեւ FosB- ի արտահայտությամբ, առավել եւս, հատկապես NAc- ի եւ CPu- ի մեջ: Հետաքրքիր է, որ կոկաինը ենթարկվում է cFos- ի ինդուկցիայի հանդուրժողականությունը կախված է վոկալային, բայց ոչ ցածր ստիատալային շրջաններում կոկաինի ընդունման հսկողության հսկողությունից, մինչդեռ FosB- ի եւ ΔFosB- ի կարգավորումը կոկաինի ինքնագնահատման եւ կեղտոտ կենդանիների նման էր: Այսպիսով, CPU- ում ΔFosB- ի միջամտության նյարդաբորբոքումը կարող է առաջանալ ավելի վաղ, քան նախկինում մտածված է ներարկային կոկաինի օգտագործման նախաձեռնությամբ եւ ԱՔԱ-ում ΔFosB- ի ավելի մեծ կուտակմամբ, կարող է նպաստել կոկաին-փնտրող վարքագծի կախվածության աճին:

Keywords: կոկաինը, ինքնակառավարումը, հեռացումը, ստիատումը, Fos

ներածություն

Հակումային դեղամիջոցների կրկնվող ազդեցությունը առաջացնում է ուղեղի պարգեւատրման ուղիների նեյրոհադապտացիաներ, որոնք ենթադրում են, թե ինչպես են հարկադրաբար թմրամիջոցների ներթափանցումը, ինչպես նաեւ թմրամիջոցների հափշտակման եւ վերացման հետ կապված թմրանյութերի որոնման վարքագծի կայունությունը: Այս նյարդաբորբոքվածքներից շատերը առաջացնում են տառատեսակների գործոնների եւ գենային արտահայտման հաջորդ կարգավորումը, որը կարող է ունենալ երկարատեւ ազդեցություն նեյրոնային կառուցվածքի եւ ֆունկցիայի վրա (Zhang et al. 2006): Հատուկ հետաքրքրություն ներկայացնող Fos- ի ընտանիքը հատկապես հետաքրքրված է, քանի որ այս ընտանիքի անդամները սթրետալ շրջաններում ցուցաբերում են դիֆերենցիալ ինդուկցիոն նախադեպեր `ինչպես սուր, այնպես էլ քրոնիկ կոկաինը: Երբ կոկաինը վարակվում է պասիվ, չկատարված նորաձեւության մեջ (այսինքն, ինտերեփերիոնային (IP) ներարկում), այն մեծացնում է cFos- ի եւ FosB- ի mRNA- ի եւ սպիտակուցի, այնպես էլ dorsal- ի (caudate-putamen, CPu) եւ ventral- ի (միջուկի accumbens, NAc) ստիատում (Գրեյբիել et al. 1990; Երիտասարդ et al. 1991; Հույս et al. 1992), մինչդեռ այս արձագանքի հանդուրժողականությունը տեղի է ունենում քրոնիկական պասիվ կառավարման միջոցով (Հույս et al. 1992, 1994; Alibhai et al. 2007). Ի տարբերություն ΔFosB (35-37 kDa) ստերիլացիոն մակարդակները, fosB գեն, բարձրանում են քրոնիկական, բայց ոչ սուր պասիվ կոկաինը (Հույս et al. 1994; Nye et al. 1995; Chen et al. 1995, 1997): Այս կայուն ΔFosB isoforms- ը կարող է heterodimerize տարբեր Jun ընտանիքի սպիտակուցներ, քան երկու cFos կամ FosB (Chen et al. 1995), եւ կարող է ձեւավորել նաեւ ֆունկցիոնալ հոմոդատորներ (Jorissen et al. 1997), առաջարկելով, որ քրոնիկ կոկաինի հետո ակտիվացնող սպիտակուցի-1 (AP-1) համալիրների դիֆերենցիալ ձեւավորումը կարող է փոխել գենային արտահայտությունը AP-1- ի վայրերում, որը տարբերվում է սուր կոկաինի ազդեցության արդյունքում առաջացած գենային արտահայտությունիցՀույս, 1998Բ) Kelz եւ Nestler, 2000): Գենային արտահայտման պրոֆիլների դիֆերենցիալ փոփոխությունները տեղի են ունենում, անկախ նրանից, ΔFosB- ի բարձրացումները կարճաժամկետ կամ երկարատեւ են, եւ այդ փոփոխությունները կարող են հանգեցնել կոկաինի միջնորդավորված վարքագծի դիֆերենցիալ արտահայտությանը (McClung եւ Nestler, 2003): Քրոնիկ ազդեցություն այլ դեղերի, այդ թվում `ամֆետամին, մորֆին, Δ9-THC, նիկոտին, էթանոլը եւ ֆենկիքիդինը նաեւ հանգեցնում են կայուն տարածքներում ΔFosB isoforms- ի կուտակմանը (McClung- ը et al. 2004; Perrotti et al. 2008): Բացի այդ, վերջին ուսումնասիրությունները ցույց են տալիս, որ բացասական փոխազդեցությունը ΔFosB կուտակման եւ amfetamine- ի հետ կապած cFos- ն է, որը կարող է հաշվի առնել խրոնիկ խթանիչ ազդեցությունից հետո հայտնաբերված cFos ինդուկցիայի հանդուրժողականությունը (Renthal et al. 2008). Միասին, այդ բացահայտումները հանգեցրել են այն վարկածի, որ կայուն ΔFosB isoforms- ը կարող է հանդես գալ որպես «մոլեկուլային փոխարկիչ» եւ նպաստել թմրամիջոցների նախնական օգտագործմանը անցնել ավելի կախված կենսաբանական վիճակներին (Nestler et al. 2001; Nestler, 2008).

Չնայած նախորդ ուսումնասիրությունները օգտագործվել են կրկնակի պասիվ կոկաինային բուժում, ուսումնասիրելու Fos- ի ընտանեկան սպիտակուցների արտահայտությունը եւ կան սույն կարգի համեմատաբար քիչ օրինակներ, երբ կոկաինը ինքնուրույն վարվում է ներարկայինորեն (IV) մարդու օրինախախտման բնորոշ տիպի մի քանի ժամվա ընթացքում: Մեկ ուսումնասիրության արդյունքում պարզվեց, որ CPU- ում cFos mRNA- ն բարձրանում է մկների մեկ քննական ինքնահաշվարկի 30- ի մինիմումից հետո (Կուզմին եւ Յոհանսոն, 1999), մինչդեռ առնետների CPU- ում ոչ մի փոփոխություն չի հայտնաբերվել ենթաճյուղային 3 օր) կամ քրոնիկ (6-12 շաբաթ) կոկաինի ինքնակարգավորումը (Daunais et al. 1993, 1995): Կոկաինի միջնորդավորված ավելացումից հետո cfos սպիտակուցը NAc- ում նվազել է առնետների մեջ, նախկինում կոկաինի ընդունման հետBen-Kent et al. 2004), մինչդեռ cFos- ի բարձր մակարդակները հայտնաբերվել են կոկաինի հետ կապակցված նշումներից հետոNeisewander- ը et al. 2000; Kufahl et al. 2009): Ի տարբերություն cFos- ի, ΔFosB- ի աճող սպիտակուցային մակարդակները ցուցադրվել են striatum- ում `քրոնիկ կոկաինի ինքնակառավարման արդյունքում, եւ այդ կուտակումը կարող է պահպանվել առնվազն 1 օրվա ընթացքում,Pich et al. 1997; Պերոտտի et al. 2008): Այնուամենայնիվ, չկան զեկույցներ, որոնք համեմատում են Fos- ի բազմաթիվ ընտանիքի սպիտակուցների արձագանքման փոփոխությունները, ինչպիսիք են այնպիսի ներերակային կոկաինը, այնպես էլ սուր կամ քրոնիկական ճառագայթման: Հաշվի առնելով ΔFosB- ի եւ cFos- ի պոտենցիալ փոխազդեցությունները, տարբեր դիֆերենցիալ AP-1 համալիրի ձեւավորման ունակությունը գեն արտահայտության վրա տարբեր ազդեցություններ առաջացնելու եւ այդ տարբերությունների հնարավոր ազդեցությունը կոկաինի միջամտության վարքի վրա, նույնպես կարեւոր է հաստատել, որ cFos- ի, FosB- ի եւ ΔFosB- ի արտահայտությունը, որոնք տեղի են ունենում չկատարման ենթարկված վարչարարությունից հետո, հայտնաբերվում են նաեւ այն ժամանակ, երբ կոկաինը ինքնակազմակերպվում է կամավոր կերպով, եւ որոշելու, թե որքան ժամանակ է այդ փոփոխությունները կարող են պահպանվել կոկաինը: Հետեւաբար, սույն ուսումնասիրության ընթացքում մենք համեմատեցինք քրոնիկ IV կոկաինի վարչակազմի ազդեցությունները ΔFosB, FosB եւ cFos- ի արտահայտված ստերիլալ ենթատարածաշրջաններում կոկաինի կառավարման եւ հեռացման ընթացքում: Մենք համեմատեցինք փոփոխական ինքնակառավարման հետ կապված կարգավորումը կենդանիների նույնական քանակությամբ եւ կոկաինի ժամանակային օրինաչափությամբ կենդանիների կարգավորմամբ `ոչ կամավոր կամ կորած կամ քրոնիկ ճառագայթահարումից հետո անուղղակի կեղտոտ infusions- ի միջոցով: Հաշվի առնելով, որ FosB- ը եւ ΔFosB- ը նույնն են, որ միմյանց բեւեռային տարբերակները fosB գեն, մենք նաեւ համեմատեցինք mRNA- ների կարգավորումը FosB- ի եւ ΔFosB- ի հետ `կարգավորելով սպիտակուցի մակարդակը:

Փորձարարական ընթացակարգեր

Առարկաներ եւ վիրաբուժություն

Նախկինում 250-300 գ կշռի չափահաս տղամարդկանց Sprague-Dawley առնետները տեղադրվեցին ջերմաստիճանի եւ խոնավության վերահսկվող միջավայրում, 12 ժամյա լույսի մութ ցիկլով (լույսերը 7- ում `00 AM): Կենդանիները սնվում էին ուտելիքով ու ջրում ad libitum բացառությամբ, բացառությամբ այն դեպքերի, երբ նրանք պահպանում էին ազատ սննդային քաշի 85% -ում, սաքսոզի գնդիկների (45 մգ, BioServ) լիցքաթափման դասընթացների ժամանակ: Lever-press դասընթացը անցկացվել է օդափոխիչ օպերատորի պալատներում (Med Associates, Georgia, VT), մինչեւ ձեռքբերման չափանիշները բավարարված լինեն (100 անընդմեջ նստաշրջանի համար 3 կարկուտ), ֆիքսված հարաբերակցության 1 (FR1) ամրացման ժամանակացույցի ներքո: Այնուհետեւ սնվում էին կենդանիները ad libitum առնվազն 24 ժամ առաջ վիրահատության համար: Վիրահատության համար առնետներին տրվել է ատրոֆին (0.04 մգ / կգ, ենթակետիկ), շնչառական օգնության համար, իսկ քրոնիկական, կաթնաթթվային կաթետերը տեղադրվել է գլխուղեղի գլխուղեղի նատրիումի պենտոբարբիթալով (50 մգ / կգ, IP) անզգայացման մեջ, նախկինում հրապարակված ընթացակարգերի համաձայնEdwards et al. 2007a): Վիրահատությունից հետո առնետներին տրվել է պենիցիլինի ներարկում (200,000 IU / կգ, ներխուժում) կանխելու վարակի կանխարգելման համար, իսկ կաթետերները օրական խառնվում են 0.2 մլ հեպինացված (20 IU / ml) մանրէների սաստիկ քաղցկեղով պարունակող gentamycin sulphate (0.33 մգ / մլ) պարունակությամբ: Բոլոր փորձարարական ընթացակարգերը իրականացվել են Առողջապահության ազգային ինստիտուտի համաձայն Լաբորատոր կենդանիների խնամքի եւ օգտագործման ուղեցույց, եւ հաստատվել է UT Southwestern Medical Center ինստիտուցիոնալ Կենդանիների խնամքի եւ օգտագործման կոմիտեի կողմից (IACUC):

Ապարատային եւ ինքնակառավարման գործընթացները

Հետո 1 վիրաբուժության վերականգնումից հետո կենդանիները բաժանվեցին բազմաթիվ փորձնական խմբերի / դուրս գալու ժամանակ (Նկար 1A), եւ վերադարձել է օպերատիվ թեստային պալատներին ամենօրյա առօրյայում, ինչպես նախկինում նկարագրված (Edwards et al. 2007b): Վերգետնյա հսկողության խմբի աթոռները միասին տեղակայված էին եւ ամեն օր վարվում էին իրենց տան վանդակում առանց ինքնակարգավորման շրջակա միջավայրի ազդեցության: Կոկա ին ինքնակարգավորման (CSA) խմբի աթոռներին թույլատրվել է կամավոր կերպով ինքնուրույն վարել կոկաինը (0.5 մգ / կգ / 50 μL ներարկում), 1 օրացուցային օրացուցային օրացուցային օրացուցային օրացուցային ժամերին ամրագրված 1 (FR4) ֆիքսված հարաբերակցության ժամանակացույցով, 6 օր / wk, ընդհանուր 18 օրվա համար: Յուրաքանչյուր ակտիվ լծակային մամլիչ արտադրում է 2.5- ի կոկաինային ինֆուզիոն, որը կապված էր ակտիվ լծակի վերեւում գտնվող ցիկլի լույսի լուսավորության հետ: Տան լույսը մարվել է կոկաինի ներարկումների ժամանակ, եւ ինֆուզիայից հետո լրացուցիչ 12.5- ի ժամանակի տեւողությունը կար, որի տանիքի լույսը մնաց: Անձրեւն ու ժամանակի ընթացքում արձագանքեց, բայց ոչ մի արդյունք չկար: Պալատներում ներկա էր լրացուցիչ ակտիվ լծակ, սակայն այդ լծակի վրա արձագանքելը առանց հետեւանքների էր: Քրոնիկական լծի (CY) խմբի աթոռները զուգակցված էին առնետների ինքնաբավարարությամբ ակտիվացմամբ եւ ստացան պասիվ կոկաինային ներարկումներ իրենց ինքնասպասարկման գործընկերների համար նույնքան գումարներով եւ ժամանակային ձեւերով: Սուր լծի (AY) խմբի աթոռները նույնպես բաժանվեցին խրոնիկ ՔՍԱ խմբում առնետների վրա, սակայն ստացվում էին կոկաինի փոխարեն պասիվ սալին infusions մինչեւ ինքնակարգավորման վերջին օրը, երբ նրանք ստացան պասիվ կոկաինային infusions- ի առաջին նիստը: ժամը: Վերջապես, Saline SA խմբի թույլատրվել է ինքնուրույն վարակել աղերի ամբողջ ընթացքում `բացահայտելու վիրահատության, թեստավորման կամ այլ փորձարարական ընթացակարգերի հետ կապված պոտենցիալ փոփոխությունները` չվերահսկվող ստուգումների համեմատ: AY եւ CY խմբերի միջեւ համեմատությունները օգտագործվել են cFos- ի, FosB- ի կամ ΔFosB- ի արձագանքման փոփոխությունների բացահայտման համար, երբ կոշտ եւ քրոնիկ կոկաինը ենթարկվում է ՔՀԿ-ի եւ CY խմբերի համեմատությունը cFos, FosB կամ ΔFosB արտահայտության փոփոխությունների բացահայտման համար: մասնավորապես, կապված կոկաինի դեղերի ազդեցության հետ: Հյուսվածքները բոլոր հետազոտական ​​խմբերից հավաքվել են վերջնական 4 h թեստի նիստից անմիջապես հետո, cFos- ի, FosB- ի եւ ΔFosB- ի կոկաինը ներդիրացված կարգավորելու համար եւ կոկաինը ենթարկվելով փոփոխությունների կայունությունը որոշվել է որոշ հետազոտական ​​խմբերով, որոնք հավաքվել են 24- ով կամ 3- ով: վերջնական փորձարկման նիստից հետո: Ստանդարտ արեւմտյան բլոտը եւ RT-PCR կարգերը օգտագործվել են ստերիլալ ենթատարածաշրջանների հայտնաբերման վրա, շրջանցելու հակաբորբոքային խաչաձեւ ռեակտիվության հետ կապված պոտենցիալ խնդիրները եւ բարելավել փոփոխությունների հայտնաբերման զգայունությունը:

Նկար 1  

(Ա) կոկաինի կառավարման եւ հանել (WD) ռեժիմներ նկարագրող ժամանակացույցը: Կոշտ գծերը ցույց են տալիս կոկաինի ինֆուսիների (0.5 մգ / կգ / ներարկում) ներարկային ներարկումը քրոնիկ կոկաինի ինքնակառավարման (CSA) եւ քրոնիկ քաշված (CY) կենդանիների համար ...

Հյուսվածքների հավաքածու

Սաթերը զոհաբերվեցին գլխամասային տարածաշրջանում (5 կՎտ, 1.5, Murimachi Kikai, Տոկիո, Ճապոնիա) միկրոալիքային ճառագայթման միջոցով: Հանգանակները արագորեն բաժանվեցին եւ սառեցվեցին, իսկ միջուկային հեծանիվների (NAc) շերտը, NAc կորունը եւ քաուդատ-պուտամինը (CPu) երկկողմանի հյուսվածքային պատյաններ (14 չափիչ) ձեռք են բերվել 1.5 մմ կորոնալ շերտով, Paxinos եւ Watson (1998, նկարագրված է Նկար 1B): Հյուսվածքների նմուշները homogenized է sonication է լիզի բուֆեր պարունակող protease եւ phosphatase inhibitors. Homogenates այնուհետեւ եռացրեց 5 րոպե, սառույցի վրա դրված եւ հետագայում փորձարկելով Lowry- ի կողմից սպիտակուցների կոնցենտրացիաների որոշման համար: Homogenates- ն այնուհետեւ ալկոհոլի մեջ են 20 μg նմուշներում եւ պահվում է -80 ° C- ում մինչեւ օգտագործումը:

Արեւմտյան բլոտներ

Հյուսվածքների նմուշները բեռնված էին 12% polyacrylamide gels վրա Tris / Glycine / նատրիումի dodecyl sulfate բուֆերացված saline լուծույթում (TGS, Bio-Rad, Hercules, CA) էլեկտրոֆորեզով բաժանման համար: Անջատումից հետո նմուշները փոխանցվել են էլեկտրոֆորեզով (250 mA 18 ժամ), պոլիվինիլիդեն ֆտորիդային թաղանթերին (PVDF, Amersham, Piscataway, NJ) եւ հետագայում արգելափակվել է 3% չմշակված չոր կաթի եւ 1 × Tris / Tween բուֆերացված աղի լուծույթով (TTBS; Bio -Rad, Hercules, CA) գիշերում `4 ° C- ում: 1- ում 1000- ի զննում, 3% կաթով / 1 × TTBS լուծույթում 4 ° C- ում 1 խոնավացում (բժիշկ Michael Iadarola, National Institutes of Health, Bethesda, MD- ի) 4 × TTBS- ով (15 անգամ, 1 րոպե յուրաքանչյուր) եւ ինկուբացված 1 × TTBS- ով պարունակող 25000- ի 1- ի XNUMX- ի լուծույթը, XNUMX- ի համար, հատիկավոր պերօքսիդազի (Bio-Rad, Hercules, CA) խառնված այծի հակա-նապաստակի երկրորդական հակամարմինը ջերմաստիճանը: Մեմբրանները նորից լվացվեցին եւ այնուհետեւ մշակեցին Hyperfilm- ում (ECL plus, Amersham) chemiluminescent-mediated հայտնաբերումը, օգտագործելով Pierce Super Signal West Dura (Thermo Fisher Scientific Inc., Rockford, IL): Նկարագրված է cFos- ի, FosB- ի եւ ΔFosB սպիտակուցի խմբերի տեղայնացումը Նկար 1C. Մենք որոշեցինք ուսումնասիրել միայն ΔFosB- ի կայուն արտահայտված ձեւերը (այսինքն 35-37 kDa), քանի որ այն ձեւերը, որոնք համարվում են կուտակված քրոնիկ թմրամիջոցների օգտագործմամբ եւ արտադրում են նյարդապլաստիկություն,Nestler et al. 2001): Scion Image- ը (Frederick, MD) օգտագործվել է շերտերի բացարձակ իմունտորակտիվությունը հանձնելու համար, եւ սկաների կողմից օգտագործվել է ֆիլմերի թվային պատկերները: Հայտնաբերելուց հետո մեմբրանները հանվել եւ վերաբաշխվել են β-tubulin- ի համար (1: 200000, Cell Signaling, Danvers, MA): β-tubulin մակարդակները օգտագործվել են որպես բեռի հսկողություն, FOS- ի հետ կապված սպիտակուցների մակարդակների նորմալացման համար:

RT-PCR

Քվանտային RT-PCR (qRT-PCR) օգտագործվել է FosB- ի եւ ΔFosB mRNA- ի անմիջապես եւ 24- ի փոփոխությունները որոշելու համար կոկաինը: Կենդանիները euthanized է արագ decapitation եւ NAc core, NAc shell եւ CPu են մեկուսացված են նկարագրված (Graham et al. 2007; Բախտել et al. 2008) Անհատական ​​նմուշներն անմիջապես համասեռացվեցին RNA-STAT-60 (IsoTex Diagnostics Inc, Friendswood, TX) և սառեցվեցին չոր սառույցի վրա, մինչև mRNA- ն արդյունահանվի ըստ արտադրողի ցուցումների: Կարճ ասած, յուրաքանչյուր նմուշին ավելացվեց քլորոֆորմ, և ցենտրիֆուգացումից հետո ջրային շերտը մեկուսացվեց: Ընդհանուր mRNA- ն նստեցվեց իզոպրոպանոլով `գծային ակրիլամիդի (Ambion, Austin, TX) առկայության դեպքում: Նմուշները ցենտրիֆուգացվեցին և արդյունահանված mRNA գնդիկները լվացվեցին 70% էթանոլով և վերակապոնավորվեցին DEPC ջրի մեջ: Ընդհանուր mRNA- ն բուժվել է ԴՆազազազով (Ambion, Foster City, CA) և հետադարձորեն արտագրվել է cDNA պատահական հեքսամերներով ՝ օգտագործելով Superscript III (Invitrogen, Carlsbad, CA): Հիմք հաջորդականությունը օգտագործվում է ընդլայնել FosB, ΔFosB, եւ glyceraldehyde-3-ֆոսֆատ դեհիդրոգենազ (GAPDH) էին 5'-GTGAGAGATTTGCCAGGGTC-3 »եւ 5'-AGAGAGAAGCCGTCAGGTTG-3 ', 5'-AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT-3» եւ 5'-GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG-3 Համապատասխանաբար ′, և 5′-AGGTCGGTGTGAACGGATTTG-3 ′ և 5′-TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA-3: Cyիկլի շեմերը (cT) հաշվարկվել են կրկնակի ռեակցիաներից `օգտագործելով ուժեղացման կորի երկրորդ ածանցյալը: FosB և ΔFosB cT արժեքները նորմալացվել են GAPDH cT արժեքների (ΔcT), քանի որ GAPDH չի կարգավորվել կոկաինով: Փեղկի փոփոխությունները հաշվարկվել են ΔΔcT մեթոդով, ինչպես նկարագրված է նախկինում (Կիրառական կենսահամակարգերի ձեռնարկ):

Վիճակագրական վերլուծություն

Յուրաքանչյուր սպիտակուցի մակարդակը արտահայտվում էր որպես% փոփոխություն ուղեղի յուրաքանչյուր շրջանի և ժամանակի համար չբուժված հսկիչներից, և ուսումնասիրության խմբերը համեմատվում էին շեղման միակողմանի վերլուծության (ANOVA) միջոցով, որի նշանակության մակարդակը սահմանվում էր p <0.05: Ընդհանուր ազդեցություններին հաջորդեցին հետընտրական համեմատություններ ՝ օգտագործելով Fishers LSD թեստերը: Կոկաինի ընդունման և սպիտակուցների մակարդակի փոփոխությունների միջև փոխհարաբերությունները գնահատվել են գծային ռեգրեսիայի միջոցով:

Արդյունքներ

CSA- ի խմբում ապրող կենդանիները, որոնք թույլատրվել էին ինքնուրույն կառավարել կոկաինը, SA- ի երրորդ շաբաթվա ընթացքում ցույց տվեցին կոկաինի ինքնակառավարման կայուն օրինակները (օրեր 13-18): SA- ի վերջնական շաբաթվա ընթացքում CSA առնետների եւ նրանց CY գործընկերների միջին օրգանական քաղցկեղի ընդունումը 46.9 (± 1.8) մգ / կգ / օր էր (օրինակը `37-60 մգ / կգ / օր): Վերջնական փորձարկման օրվա ընթացքում CSA առնետները 0- ի հանել (WD) խմբի ինքնուրույն 44.5 (± 2.5) մգ / կգ կոկաինը (25.5-57.5 մգ / կգ), եւ նույնական քանակությամբ կոկաինը ստացվել է CY- ի կողմից եւ AY գործընկերները:

Ձգվող կամ քրոնիկ կոկաինի հետո ΔFosB սպիտակուցի դիֆերենցիալ կարգավորում

ΔFosB սպիտակուցի դիֆերենցիալ կարգավորումն ստերիլալ ենթաշրջանում հայտնաբերվել է անմիջապես 4 ժամ ներթափանցող կոկաինի (0 ժամ WD) վարման ընթացքում: NAc- ի շերտում միայն քրոնիկ կոկաինը զգալիորեն ավելացել է CSA- ի եւ CY խմբերի (45-61%) համեմատ չպահված ստուգումներիցՆկար 2A, F4,60 = 4.22, p = 0.005): NAc- ի հիմքում ΔFosB- ի (41%) զգալի աճը հայտնաբերվել է AY խմբի մեջ սուր ցնցումներից հետո (Նկարը `2B, F4,60 = 17.04, p <0.001), և նույնիսկ ավելի մեծ աճեր (89-95%) հայտնաբերվել են քրոնիկ կոկաինից հետո: Ի տարբերություն քրոնիկ կոկաինի ընդունմամբ NAc- ում ΔFosB- ի ավելի մեծ կուտակման, CPU- ն ցույց տվեց ΔFosB- ի նմանատիպ աճ (86-102%) ինչպես սուր, այնպես էլ քրոնիկ կոկաինի խմբերի շրջանում (Նկար 2C, F4,78 = 19.09, p <0.001): Strանկացած շերտային ենթաշրջանում CSA- ի և CY խմբերի միջև ΔFosB- ի աճի մեջ տարբերություն չկար, ինչը ցույց էր տալիս, որ կարգավորումը կապված էր կոկաինի ազդեցության հետ `անկախ կամայական կոկաինի սպառումից: ΔFosB- ի կարգավորումը պահպանվել է առնվազն 24 ժամ NAc թաղանթում խրոնիկական կոկաինից հետո (F2,32 = 5.19, p = 0.02), NAc միջուկ (F4,60 = 4.53, p = 0.02) եւ CPu (F2,34 = 12.13, p <0.001), բայց 3 շաբաթից հետո վերադարձել է ելակետային մակարդակ: ΔFosB- ի նմանատիպ աճերը հայտնաբերվել են, երբ կոկաինի խմբերը համեմատվել են Saline SA խմբի հետ, բացառությամբ, որ AY կենդանիների NAc թաղանթի ավելի փոքր աճերը նշանակություն են ունեցել, երբ համեմատել են Saline SA- ի հետ, բայց ոչ բուժված հսկողության հետ: Այնուամենայնիվ, ΔFosB- ի նշանակալի կարգավորում գոյություն չուներ կենդանիների մոտ, որոնք ամբողջ ընթացքում վարվում էին ֆիզիոլոգիական լուծույթով, չբուժված հսկողության համեմատությամբ, ինչը ցույց է տալիս, որ ΔFosB- ի կարգավորումը պայմանավորված էր կոկաինով և ոչ թե վիրաբուժական կամ փորձարկման ընթացակարգերի արդյունքում:

Նկար 2  

ΔFosB- ի կանոնակարգը կոկաինի վարման անմիջապես հետո եւ 24- ին եւ 3 շաբաթ WD- ում: ΔFosB (35-37 kDa) մակարդակները արտահայտված են որպես միջին չափի ± SEM տոկոսային փոփոխություն չվերահսկվող տնային վերահսկումից (Վերահսկում): Հյուսվածք աղիից ...

FosB սպիտակուցի քրոնիկ կոկաինի հետո կարգավորելու հանդուրժողականությունը

Ի տարբերություն ΔFosB- ի, 4- ի IV կոկաինի վարման մեկ առարկա FOSB սպիտակուցի զգալի մեծացումն է առաջացնում բոլոր 3 ստերիլալ ենթաշրջաններում, սակայն այս պատասխանում զգալի հանդուրժողականություն առաջացել է քրոնիկ կոկաինի վարման արդյունքում: NAc- ի շերտում FOSB- ը աճեց (260%) Ա-ի կենդանիների 4 հա կոկաինի վարակման անմիջապես հետո, սակայն այդ մեծությունները կրճատվել էին (142-146%), այնպես էլ CY եւ CSA խմբերում քրոնիկ ախտորոշումից հետոՆկար 3A, F4,77 = 23.16, p <0.001): FosB- ի նմանատիպ աճ (295%) հայտնաբերվել է AY կենդանիների պրոցեսորում, որոնք նույնպես կրճատվել են (մինչև 135-159%) CY և CSA խմբերում քրոնիկ կոկաինը օգտագործելուց հետո (Նկար 3C, F4,69 = 13.362, p <0.001): NAc- ի միջուկում սուր կոկաինի կառավարումը առաջացրեց ավելի քիչ էական աճ FosB- ում (164%) AY կենդանիների համեմատ `ուղեղի մյուս շրջանների համեմատ. այնուամենայնիվ, այդ աճերը դեռ ավելի մեծ էին, քան արտադրված քրոնիկ վարչարարությունից հետո (109-112%) CY և CSA խմբերում (Նկարը `3B, F4,57 = 20.23, p <0.001): Ինչպես հայտնաբերվել է ΔFosB- ի դեպքում, քրոնիկ կոկաինից հետո FosB- ի կարգավորումը չի փոփոխվել կոկաինի ընդունման կամային հսկողության միջոցով: Այնուամենայնիվ, ի տարբերություն ΔFosB- ի, FosB սպիտակուցի բարձրացումը չկարողացավ պահպանվել ինչպես NAc թաղանթում, այնպես էլ միջուկում 24 ժամ հետո, չնայած մնացորդային աճերը (38-52%) պահպանվում էին պրոցեսորում (F2,32 = 3.590, p <0.05): FosB մակարդակի վրա չեն ազդել աղի ինքնակարգավորվող կենդանիների վիրաբուժական կամ փորձարկման ընթացակարգերը:

Նկար 3  

Կոկաինի վարման արդյունքում FOSB- ի կարգավորումը եւ 24- ին եւ 3 շաբաթ WD- ում: FosB- ի սպիտակուցային մակարդակները (46-50 kDa) արտահայտված են որպես չօգտագործված տնային վերահսկումից միջինի ± SEM տոկոսային փոփոխություն (տես ` Նկար 2 լեգենդ հապավումների համար) ...

Կրտսեր կոկաինից հետո ΔFosB- ի եւ FosB mRNA- ի ինդուկցիայի կրճատումը

4- ի քաղցկեղի կոկաինի կիրառման սուր դրսեւորումը նույնպիսի բարձրացումներ է առաջացրել (11-16 անգամ) ΔFosB mRNA- ում, NAc shell- ում (F3,19 = 15.82, p <0.001), NAc միջուկ (F3,19 = 13.275, p <0.001, և պրոցեսոր (F3,11 = 5.78, p = 0.03) Saline SA- ի վերահսկողության համեմատ (0 ժամ WD, Նկար 4A): Այնուամենայնիվ, այս արձագանքը խստորեն ճնշվել է CQ եւ CSA խմբերի կողմից քաղցկեղային կոկաինի վարման արդյունքում, NAc shell (3-4 անգամ), NAc միջուկ (4 անգամ) եւ CPu (3 անգամ): Չնայած այն հանգամանքին, որ սուր IV կոկաինը, FosB- ի սպիտակուցի առաջացման արդյունքում, ΔFosB- ի նկատմամբ ավելի մեծ աճ է արձանագրել, սուր վարքային կոկաինի կառավարումը առաջացրել է FOSB- ի (4-9 անգամ) mRNA- ի համեմատաբար ցածր աճը, քան ΔFosB- ի համար (11-16 անգամ), բոլոր 3 ստերիլալային ենթաշրջաններումՆկարը `4B): Այս պատասխանը գրեթե վերացվել է քաղցկեղային կոկաինի հետո NAc shell- ում (F3,19 = 26.22, p <0.001) և պրոցեսոր (F3,11 = 4.24, p <0.05), չնայած փոքր, բայց զգալի աճերը (2 անգամ) մնացին NA- ի միջուկում գտնվող CY և CSA խմբերում (F3,19 = 11.10, p <0.001): Կոկաինի հարուցած աճերն ինչպես ΔFosB- ում, այնպես էլ FosB- ում AY կենդանիներում չեն պահպանվել 24 ժամ WD- ից հետո, երբ համեմատել են այս նույն Saline SA հսկիչ խմբի հետ: FosB- ի ΔFosB mRNA մակարդակի հարաբերակցության հետագա վերլուծությունը 0 ժամ WD ժամանակային կետում ցույց տվեց, որ կոկաինի կառավարումը զգալիորեն նվազեցրել է FosB- ի Δosf mRNA- ի հարաբերական քանակը NAc թաղանթում (F3,19 = 4.79, p = 0.02), NAc միջուկ (F3,19 = 4.49, p = 0.02) եւ CPu (F3,11 = 5.59, p = 0.03), ΔFosB isoform- ի ավելի մեծ ձեւավորման շնորհիվ եւ անկախ նրանից, թե խտրականությունից հետո երկու mRNA- ներում էլ կոկաինը ներազդեցության հանդեպ զգալի հանդուրժողականությունՆկար 4C): Այս հարաբերություններում զգալի տարբերություն չկար, արդյոք կոկաինը ինքնակառավարման ենթարկվեց կամ պասիվ կերպով ընդունվեց կեղտոտ ինֆուզիոնով, եւ FosB- ի հարաբերական ցուցանիշները. ΔFosB- ը բոլոր երեք ուղեղային շրջաններում նորմալ է վերադարձել 24h WD ժամանակի կետով (տվյալները չեն ցուցադրվում):

Նկար 4  

ԿՕԱ-ի եւ ΔFosB- ի համար mRNA- ի կարգավորումն անմիջապես կոկաինը վարելու եւ 24 ժամ WD- ից հետո: ΔFosB (A), FosB (B) եւ FosB / ΔFosB transcripts (C) հարաբերակցության համար ընդունված գրերի քանակական RT-PCR արտահայտված են որպես միջին ± ...

Կոկաինը ներգրավված cFos- ին ամրապնդող հանդուրժողականությունը NAc- ում

Ի տարբերություն FosB գենային արտադրանքի կարգավորումը, որը ներկայացրեց կոկաինի դեղաբանական պատասխանը `անկախ պասիվ կամ կամավորական վարքագծի, cFos- ի NAc ենթատարածաշրջանում կարգավորումը մեծ ազդեցություն ունեցավ կոկաինի ինքնակառավարման համատեքստում, երբ կոկաինը ստացվեց պասիվ քաշի ենթարկված infusions- ով: Կոկինային ազդեցությունը CFO- ի սպիտակուցների մակարդակն ավելացրեց (109-126%), այնպես էլ AAC եւ CY խմբերում կամ սուր կամ քրոնիկ ախտորոշմամբ NAc շերտում եւ միջուկումՆկար 5A-B- ը): Այնուամենայնիվ, երբ կոկաինը հայտնաբերվել է պատասխանատու կերպով ինքնասպասարկման կենդանիներ, այս պատասխանը կրճատվել է (55%) NAc shell- ում (F4,60 = 9.14, p <0.001), և չկարողացավ զգալիորեն ավելացնել cFos- ը NAc միջուկում (F4,57 = 5.92, p <0.001): CPU- ում կոկաինի հարուցած cFos- ի նկատմամբ հանդուրժողականությունը զարգացավ կամ քրոնիկ պասիվ կամ կամավոր կոկաինի կիրառմամբ (Նկար 5C), իսկ CY կենդանիների մեջ cFos իջեցումը (164%) կրճատվել է (45-57%) եւ CY եւ CSA խմբերի (F4,67 = 13.29, p <0.001), որը նման է բոլոր 3 շտրիատային ենթաշրջաններում FosB սպիտակուցի ինդուկցիայի մեջ հանդուրժողականության զարգացմանը: Այսպիսով, կոկաինի հարուցված cFos- ի նկատմամբ ամրապնդման հետ կապված հանդուրժողականությունը տեղի է ունեցել հատկապես քերծվածքների մերզոլիմբիկ շրջաններում: Բոլոր 3 շտրիատային շրջաններում cFos- ի աճը չի հայտնաբերվել աղակալված ինքնակարգավորվող կենդանիների մոտ և չի կարողացել պահպանվել 24 ժամ տևողությամբ հիվանդությունից հետո:

Նկար 5  

CFos- ի կարգավորումը կոկայի վարման անմիջապես հետո եւ 24 ժամ WD- ում: Հսկվող առնետների (Control, Saline SA) cFos- ի (52-58 kDa) սպիտակուցային մակարդակները, որոնք ստացվում են պասիվ կոկային կոկային (AY) կամ քրոնիկ (CY) եւ առնետների ...

Կոկաինի ընդունման, cFos- ի եւ ΔFosB- ի հարաբերությունները ստիաթում ենթատարածաշրջաններում

Քանի որ կոկաինի ինքնակառավարման չափերը տարբեր էին առանձին կենդանիների եւ նրանց հարվածային գործընկերների միջեւ, մենք համեմատեցինք կոկաինի ընդունման քանակի մասին cFos, FosB եւ ΔFosB սպիտակուցների մակարդակների տարբեր գծային ռեգրեսիոն վերլուծությունների միջոցով (տես Լրացուցիչ աղյուսակ 1 բոլոր պոտենցիալ փոխհարաբերությունների արդյունքների համար): Կոկաինի ընդունման եւ cFos մակարդակների միջեւ զգալի փոխհարաբերություններ են եղել պասիվ ներարկումների միջոցով կոկաինի սուր վարման ստացած առնետների մեջ, եւ այդ հարաբերությունները տարբերվում են դորալային եւ վրացական ստերիլալ ենթաշրջաններում: NAc- ի հիմքում, cFos- ի ներարկումն անմիջապես 4- ի սուր IV կոկաինի վարքից հետո խիստ եւ բացասականորեն կապված է կոկաինի ընդունման հետ, մինչդեռ նմանատիպ, բայց աննշան հարաբերությունները հայտնաբերվել են NAc shell- ում (Նկ. 6): Ի հակադրություն, cFos- ի ինդուկցիան դրականորեն փոխկապակցված էր CPu- ում կոկաինի ընդունման հետ: Ոչ ստիոտիկ ենթաշրջանում կոկաինի ընդունման (ակտիվ կամ պասիվ) եւ FosB- ի կամ ΔFosB- ի սպիտակուցային մակարդակների միջեւ զգալի փոխհարաբերություններ չկային: Այնուամենայնիվ, կոկաինի հետո NAC- ի շերտում 24- ի ընթացքում cFos- ի եւ ΔFosB- ի մակարդակների միջեւ ուժեղ դրական փոխհարաբերություն է եղել, սակայն միայն այնպիսի կենդանիներ, որոնք ստացել են կոկաինը, կամավոր ինքնակարգավորումը (Նկ. 7), եւ չնայած այն հանգամանքին, որ ընդհանուր cFos մակարդակը չի փոխվել 24 ժամ WD- ում: Նմանատիպ միտումները (p <0.07) cFos- ի և ΔFosB սպիտակուցների մակարդակի դրական փոխհարաբերությունների համար հայտնաբերվել են NAc միջուկում 4 ժամ կոկաինի ինքնակազմակերպումից անմիջապես հետո և առաջին անգամ կոկաին ստացող կենդանիների CPU- ում (AY խումբ) անմիջապես հետո:

Նկար 6  

Կոկաինի ընդունման եւ cFos- ի իմունգորակտիվության միջեւ սուր կոկաինի (AY) հետո տարածաշրջանային կոնկրետ հարաբերակցությունը: CFOS- ի իմունէտերակտիվության տոկոսային աճը բացասականորեն կապված է կոկաինի ընդունման հետ, NAc- ի հիմնական (Ա) վերջնական նստաշրջանում եւ դրականորեն փոխկապակցված է ...
Նկար 7  

Ինքնասպասարկումով կենդանիների մեջ NAc շերտում cFos- ի եւ ΔFosB- ի միջեւ զգալի հարաբերակցությունը: CFOS- ի իմունորակտիվության տոկոսային աճը դրականորեն փոխկապակցված է ΔFOSB իմունային դեֆեկտիվության հետ `24 ժամ WD- ից հետո կոկաինի ինքնակարգավորումը ...

Քննարկում

Սույն ուսումնասիրության ընթացքում մենք ուսումնասիրեցինք ΔFosB, FosB եւ cFos մակարդակների կարգավորման վերաբերյալ սուր եւ խրոնիկ ներերակային կոկաինի ազդեցության կամ քրոնիկական ինքնակառավարման ազդեցությունը NAc- ի շերտում, NAc միջուկում եւ CPu ստերիլալ ենթաշրջանում: Նախորդ ուսումնասիրությունները հետեւողականորեն պարզել են, որ ΔFosB- ն ավելանում է միայն կրկնվող ազդեցությունից հետո, եւ ոչ թե կոկայի պարունակությամբ սուր վարվելուց հետո օգտագործելով պասիվ IP կոկայի ներարկումներՀույս et al. 1994, Nye et al. 1995; Chen et al. 1995). Նմանապես, մենք հայտնաբերեցինք, որ քրոնիկական IV կոկաինը ենթարկվում է ΔFosB աճեցված բոլոր ստիատալալ ենթաշրջաններում, անկախ նրանից, թե դա իրականացվել է կամավոր կամ պասիվ կերպով: Այնուամենայնիվ, նախորդ ուսումնասիրություններից խոշոր տարբերությունը այն է, որ կոկաինի սուր վարումը ավելացնում է ΔFosB սպիտակուցի մակարդակը եւ NAc միջուկում եւ CPu- ում եւ մոտեցում է NAc shell- ում (p <0.1): Այս տարբերության հնարավոր բացատրությունը կարող է լինել կոկաինի ազդեցության չափաբաժինը և (կամ) տևողությունը, քանի որ AY խմբի առնետները մեկանգամյա 4 ժամվա ընթացքում ստացել են բազմակի IV կոկային ինֆուզիոն, որի արդյունքում ընդհանուր կոկաինի ընդունումը տատանվել է 25.5-57.5 մգ / կգ միջակայքում: անհատ կենդանիներ, որոնք շատ ավելի են, քան 10-20 մգ / կգ չափաբաժինը, որոնք սովորաբար օգտագործվում են մեկ բոլուս IP ներարկումով (Հույս et al. 1994; Հողմահակառակծ քամուց պաշտպանված կողմը et al. 2006): Բացի այդ, կոկաինը իրականացվել է ավելի ուղղակի IV մեթոդով, որը արտադրում է կոկաինի եւ դոպամինի ավելի բարձր գագաթային ուղեղի մակարդակները, որոնք շարունակում են մնալ նիստի ընթացքում, մինչդեռ այդ ազդեցությունները սովորաբար իջնում ​​են IP ներարկմանը հաջորդող մեկ ժամվա ընթացքումBradberry, 2002): Այսպիսով, ΔFosB- ի ունակությունը կուտակվում է կոկաինի մեկ սուր ցավից հետո, հավանաբար կախված է ներկա հետազոտության համար օգտագործվող կոկաինի խթանման ուժի եւ տեւողության վրա: Ամեն դեպքում, ΔFosB- ը կարող է կուտակվել այն բանից հետո, երբ կոկաինը մեկ ազդեցության ենթարկվելու դեպքում ցույց է տալիս, որ ΔFosB- ն կարող է ավելի արագ ազդեցություն ունենալ, քան նախկինում մտածված է, հնարավոր է առաջանալ ինքնուրույն նախնական ինքնուրույն բինգից:

Հետաքրքիր է, որ ΔFOSB- ի կուտակման գումարը տարբերվում է քրոնիկ կոկաինի վարման ընթացքում ցածր եւ վրացական ստերիլալ շրջանների միջեւ: ԱՀԿ-ի հիմքում ΔFOSB- ի գումարը հայտնաբերվել է քրոնիկական ադմինիստրացիայի վերջնական օրվանից անմիջապես հետո (0 ժամ WD) ավելի քան կրկնակի գումարը, որը հայտնաբերվել է սուր վարման ընթացքում, եւ NAc- ի շերտում ավելի փոքր ΔFosB աճը հասնում է միայն քրոնիկ վարչարարությունից հետո , անկախ նրանից, թե արդյոք կոկաինը ինքնակազմակերպվել է կամ ստացել պասիվ քաշի ենթարկվելով: Կոկաինի քրոնիկ օրգանիզմով ավելանում է, հավանաբար, արտացոլում է բարձր կայուն ΔFosB սպիտակուցի կուտակումը, քանի որ նրանք շարունակում են մնալ առնվազն 24 ժամ անց վերջին ազդեցությունից հետո: Ի տարբերություն CPu- ի ΔFosB- ի մեծ քանակի աճը չի կարողացել տարբերվել սուր կամ քրոնիկ ճառագայթման հետ, որը կարող է արտացոլել այս ուղեղի տարածաշրջանում սուր ցնցումների արդյունքում առաջացած ծածկույթը: Այնուամենայնիվ, նույնիսկ CPU- ում, ΔFosB սպիտակուցի կուտակումը, հավանաբար, նպաստեց խրոնիկական ճառագայթահարությունից հետո ΔFosB- ի մակարդակների համառորեն ավելացմանը, քանի որ խնձորի ի հայտ եկած խրոնիկական մՌՆԿ-ն ΔFosB- ի համար մշակել է 3 ուղեղի բոլոր շրջաններում քրոնիկ ախտորոշմամբ:

IV կոկաինի սուր կառավարումը նաև բարձրացրեց ամբողջ FosB սպիտակուցի մակարդակը `պրոցեսորի և NAc կեղևի ավելի մեծ աճով, քան NAc միջուկը: Այնուամենայնիվ, FosB- ի համար mRNA- ն առաջ բերվեց NAc պատյանում գրեթե 10 անգամ, և պրոցեսորի և NAc միջուկում `5 անգամ պակաս: Էական հանդուրժողականությունը զարգացավ կոկաինի `FosB- ի համար քրոնիկ ընդունմամբ և՛ mRNA, և՛ սպիտակուց ներթափանցելու ունակության համար, չնայած FosB սպիտակուցի ավելի ցածր ինդուկցիան մնաց և կարող էր մրցակցել ΔFosB- ի հետ AP-1 պարտադիր գործընկերների համար: FosB / ΔFosB mRNA- ի հարաբերական հարաբերակցությունը նույնպես կրճատվել է սուր կոկաինի ընդունմամբ `ΔFosB- ի համեմատաբար ավելի մեծ ինդուկցիայի պատճառով, որը համապատասխանում է ամֆետամին օգտագործող նախորդ զեկույցներին (Alibhai et al. 2007): Ի տարբերություն կրկնվող ամֆետամինային բուժման նախորդ բացահայտումների, FosB / ΔFosB mRNA- ի հարաբերական հարաբերակցության սուր կոկաինը կրճատվել է քրոնիկ օրգանիզմից հետո, որը արտացոլում է ΔFosB- ի համեմատաբար բարձր մնացորդային ներադրումը, քան FosB- ն:

Այն փաստը, որ ΔFosB մակարդակը ավելանում է նույնիսկ խիստ կոկաինի դեպքում, օգտագործելով օրգանիզմների ներերակային թմրամիջոցների օգտագործման տիպը եւ կիրառման տեւողությունը, կարեւոր ազդեցություն է ունենում կախվածության գործընթացի համար: Այսպիսով, ΔFosB- ը կարող է նպաստել AP-1- ի պարտադիր գործունեությանը նախնական կոկաինի օգտագործման դեպքում, եթե համապատասխան չափաքանակները ինքնուրույն կիրառվեն: Այնուամենայնիվ, ΔFosB- ը մրցակցելու է FosB- ի եւ cFos- ի հետ, AP-1- ի հետ կապող գործունեության համար, ինչը հանգեցնում է գենային արտահայտման եւ neuroplasticity- ի այն ստորին հոսքի, որը տարբերվում է քրոնիկական ախտահարման ժամանակից, երբ ΔFosB- ն բարձր է զգալիորեն նվազեցված cFos- ի եւ FosB- ի հետ: Այսպիսով, ΔFosB- ը կարող է ավելի մեծ ազդեցություն ունենալ քրոնիկ կոկաինի վարման արդյունքում `վրացական ստրիատում ավելի մեծ կուտակման պատճառով եւ AP-1- ի պարտադիր գործընկերների համար, այնպես էլ դորալային եւ վրացական ստիատում: Հաշվի առնելով, որ ΔFosB- ի ստերիլալային հատուկ արտացոլումը մեծացնում է կոկաինըՔոլբի et al. 2003), ΔFosB- ի նման արագ կուտակումը, նախնական կոկաինը ենթարկելով, կարող է կոկաինի օգտագործումը պահպանել կախվածության գործընթացի վաղ փուլերում: Բացի այդ, այսպիսի հայտնի եւ տարածված ΔFosB արտահայտությունը սթրեցմամբ ստիատումի ամբողջ ընթացքում կփոխի AP-1- ի միացման գործունեությունը, որը կարող է նպաստել դոսարական ստիատալ սխեմաների վաղ ներգրավման միջոցով կոմպոզիտիվ սովորությունների ձեւավորմանըBelin եւ Everitt, 2008).

Հաշվի առնելով ΔFosB isoforms- ի կայունությունը, ΔFosB մակարդակը շարունակում է մնալ խիստ բարձր 24 ժամ կոկաինի կառավարման վերջին նիստից հետո, նախորդ ուսումնասիրությունների հետ, օգտագործելով քրոնիկ ներերակային կոկաինըPich et al. 1997; Պերոտտի et al. 2008): IP- ի կոկաինի ներարկումների պասիվ փորձարարի կիրառման հետ կապված այլ ուսումնասիրությունները ցույց են տվել, որ ΔFosB կուտակումը կարող է պահպանվել 1-2 շաբաթ հեռացնելու համար (Հույս et al. 1994; Brenha եւ Stellar, 2006; Հողմահակառակծ քամուց պաշտպանված կողմը et al. 2006), չնայած որ մենք այդ փոփոխությունների վերաբերյալ ոչ մի ապացույց չենք գտել կոկաինի օգտագործման դադարեցումից 3 շաբաթ անց: Միասին, այս ուսումնասիրությունները ենթադրում են, որ ΔFosB կուտակումը կարող է պահպանվել համեմատաբար կարճ ժամանակահատվածում (<3 շաբաթ) և ուղղակիորեն նպաստել կոկաինի շարունակական օգտագործմանը, բայց կարող է ուղղակիորեն չ նպաստել երկարատև դուրսբերման ռեցիդիվի ավելի մեծ հակումին: Այնուամենայնիվ, ΔFosB իմունաակտիվությունը հայտնաբերվել է D1 ընկալիչ պարունակող շեղանկյունային նեյրոնների մոտ 30 օրվա ընթացքում մկների կրկնվող կոկաինից դուրս գալուց հետո (Հողմահակառակծ քամուց պաշտպանված կողմը et al. 2006): Նման բջջային հատուկ նմուշը կարող է ավելի զգայուն մնալ ΔFosB կուտակման նկատմամբ, քան սույն ուսումնասիրության մեջ օգտագործված ամբողջ հյուսվածքային վերլուծությունը, կամ գուցե ΔFosB փոփոխությունները պարզապես մաթեմատիկայում երկար մնան, քան առնետները: Հնարավոր է նաեւ, որ ΔFosB- ն ներգրավում է transcriptional- ի դեպքերի կասկադ տանող, ինչը հանգեցնում է երկարատեւ մորֆոլոգիական փոփոխությունների, ինչպիսիք են D1 պարունակող շնչողական նեյրոնների դենդրիտային ողնաշարի ձեւավորում (Հողմահակառակծ քամուց պաշտպանված կողմը et al. 2006; Լաբիրինթոս et al. 2010): Այս առումով մի քանի ΔFosB- ի թիրախները, ներառյալ Cdk5- ը եւ NFKB- ը, ավելանում են քրոնիկ կոկաինը հետո, եւ այդ գործոնները կարող են փոփոխել միջուկի սենսորային սխեմաները նեյրոնային կառուցվածքային եւ / կամ ֆունկցիայիAng et al. 2001; Benavides եւ Bibb, 2004; Nestler, 2008): Այսպիսով, հնարավոր է, որ կայուն ΔFOSB- ի կուտակման ժամանակ անհրաժեշտ չէ դրա երկարաժամկետ ազդեցությունը ապագա թմրամիջոցների վերացման կամ առաջացման վարքագծի վրա, սակայն փոխարենը կարող է ներկայացնել «մոլեկուլային փոխարկիչ», որը առաջացնում է բազմաթիվ բջջային պրոցեսներ, որոնք նպաստում են ավելի կախված կենսաբանական պետություններ (Nestler et al. 2001).

Tնա ներկայացրեց ուսումնասիրությունը, որ կոկաինը միջնորդավորված ΔFosB կուտակումը չի ազդում կոկաինի ընդունման անխնա վերահսկողության վրա `նախորդ ուսումնասիրությունների համաձայն ինքնագնահատող կենդանիների օգտագործմամբ` օգտագործելով իմունոգեւոր քիմիական ընթացակարգերը եւ չարաշահումների բազմակի դեղեր (Պերոտտի et al. 2008; Pich et al. 1997): Սա ցույց է տալիս, որ ΔFosB- ի եւ FosB- ի կոկաինը իջեցված աճը, հավանաբար, կապված է կոկաինի կամ մոնոամիրգիկ ընդունիչ ազդանշանների այլ ներքեւի իրադարձությունների դեղաբանական պատասխանի հետ: Ի տարբերություն ΔFosB, մենք հայտնաբերեցինք, որ կոկաինը ներգրավված cFos- ին հանդուրժողականության զարգացումը զգալիորեն ազդել է NAc- ում կոկաինի ընդունման նկատմամբ հսկողության հսկողության տակ, բայց ոչ CPU- ում: Այսպիսով, կոկային-իջեցված cFos- ին հանդուրժողությունը NAc- ում չկարողացավ առաջանալ կոկաինի ընդունված կենդանիների պասիվ քրոնիկական լծակներով, երբ համեմատաբար սուր վարակված ինֆուզիոն. Այս բացահայտումները տարբեր են լինում հանդուրժողականության բազմաթիվ զեկույցներից, որոնք վերաբերում են ԱՀՀ-ում հոգեորսախնդիր ազդեցության ենթարկված cFos- ին, երբ դեղամիջոցները տրվում են պասիվ IP ներարկմանը (Հույս et al. 1994; Nye et al. 1995; Chen et al. 1995, 1997; Alibhai et al. 2007): Հաշվի առնելով, որ կոկաինի ինֆեկցիոն կենդանիների հանդեպ cFos- ին հանդուրժողականությունը զուգահեռներ է պարունակում մի քանի ուսումնասիրություններ, որոնք կրկնակի IP ներարկում են, քրոնիկ ներարկումով տառապող վարքագծի հանդուրժողականության բացակայությունը կարող է կապված լինել բազմաթիվ եւ անկանխատեսելի կոկաինի ներարկումներիGoeders 1997- ը): Վոլտերների հանդեպ հանդուրժողականության կորուստը ոչ թե դորալ ստերիմատով, այլեւ կհամապատասխանի շարժիչային եւ հուզական պատասխանների մեջ ներգրավված լիմբուկային սխեմաների ընտրողական ազդեցությանը: Բացի դրանից, երբ cFos- ի ինդուստրացիան հանդուրժողականությունը տեղի է ունեցել կենդանիների ինքնակառավարման կոկաինը, այնուամենայնիվ, մնացին CFOS- ի սպիտակուցի էական CX- ի պրոտեինի բարձրացում ~ 50% - ի վերջնական ինքնակառավարման նիստից անմիջապես հետո NAc- ի շերտում եւ միտումp <0.1) cFos- ի աճը նույնպես տեղի է ունեցել միջուկում: Այս անհամապատասխանության պատճառները, հավանաբար, արտացոլում են տարբերությունները IP ներարկման և բազմակի IV ներարկումների միջև 4 ժամվա ընթացքում, ինչպես վերը քննարկվեց: Cfos- ի մնացորդային ինդուկցիան NAc- ում քրոնիկ կոկաինի ինքնակառավարումից հետո նոր գտածո է, որը ստիպում է վերանայել կախվածության գործընթացում նրա դերը, որով c-fos, ΔFosB և FosB պարունակող AP-1 համալիրները բոլորը որոշ չափով գոյակցում են քրոնիկ ազդեցությունից հետո: ,

Հաշվի առնելով վերջին ապացույցները, որ cFos- ը անմիջապես կարգավորվում է ΔFosB- ի կուտակման միջոցով,Renthal et al. 2008), հետաքրքիր է, որ CPu- ում կոկաինը ենթարկված cFos- ն զուգահեռ է եղել ΔFosB- ի աճի հետ `սուր կոկաինի ազդեցությամբ: Մեկ հնարավորությունն այն է, որ ΔFosB- ի սուր վարման հետ կապված կուտակումն ուշանում է 4- ի նիստում `ազդելու cFos- ի ինդուկցիայի վրա, մինչդեռ 24- ը քրոնիկ կերպով վարակված կենդանիների համար 0.067 ժամ հետո խանգարում է cFos- ի ինդուկցիան հետագայում կոկաինի ազդեցության հետ: Այս գաղափարը համապատասխանում է միտումներին (p = 0) CFOS- ի եւ ΔFosB մակարդակների միջեւ չափավոր դրական հարաբերակցության համար, CPu- ում `խիստ կոկաինի (24 ժ. Այս հասկացությունը նաեւ համահունչ է CFOS- ի ներարկման եւ կոկաինի ընդունման միջեւ ուժեղ դրական հարաբերակցությանը CPU- ի սուր քաշված կենդանիների հետ: Այս արդյունքները ցույց են տալիս, որ ΔFosB- ի նման, cFos- ի արձագանքը կարող է արտացոլել կոկաինի դոզան: Այնուամենայնիվ, NAc- ում, ΔFosB- ի խրոնիկական քաղցրահամ քաղցկեղով վարակվածության ավելի մեծ կուտակումը չի կարող հաշվի առնել այս կենդանիների cFos արձագանքում հանդուրժողականության բացակայությունը: Ավելին, չնայած հանդուրժողականությունը cFos- ի ինդուկցիան ակնհայտ էր ինքնազբաղված կենդանիների մեջ, XNUMX- ի հանելուց հետո NAc- ի շերտում մնացորդային cFos- ի եւ ΔFosB մակարդակների միջեւ ուժեղ դրական հարաբերակցությունը չի նպաստում cFos- ի եւ ΔFosB- ի ventral striatum- ի միջեւ բացասական փոխազդեցությանը: CPU- ի տվյալների մեկ այլ տարբերությունն այն է, որ NAF- ի միջուկում cFos- ն բացասական էր, քան կոկայի ընդունման հետ կապված դրական կոկաինը, որը կարող էր արտացոլել ներսից թոքային բորբոքում, որը տեղի է ունենում ventral striatum- ում բարձր դոզայի ազդեցության հետ:

Ընդհանուր առմամբ, սույն հետազոտության արդյունքները ցույց են տալիս, որ cFos- ը, FosB- ը եւ ΔFosB- ը սուր եւ քրոնիկ ներերակային կոկաինի վարման արդյունքում անցնում են հստակ տարածաշրջանային արտահայտություններ: Այս արտահայտման ձեւերը բացառապես կախված են թե թմրանյութերի ազդեցության տեւողության եւ քանակի վրա, եւ հանդուրժողականությունը կոկաինի պատճառով CFO- ն մեծապես կախված է կոկաինի ինքնակարգավորումը: Արդյունքները նաեւ ցույց են տալիս, որ ΔFosB- ը կուտակվում է ինչպես կոռուպցիոն, այնպես էլ քրոնիկ քրոնիկական օրգանների միջոցով, ներարկային ներարկումով `աջակցելով գաղափարի, որ ΔFosB կուտակումը կարող է կարեւոր լինել վաղ գործընթացներում, որոնք նպաստում են կոկաինի փնտրտուքի ավելացմանը եւ նպաստում կոկաինի կախվածության զարգացմանը: Ի վերջո, կարեւոր է հասկանալ, թե ինչպես է ΔFosB- ն կարող է անուղղակիորեն ազդել թմրամիջոցների մշտական ​​թելադրանքին, կոկաինի օգտագործման եւ վաղաժամկետ դուրսբերման ժամանակահատվածներում գեն արտահայտության նկատմամբ համեմատաբար կարճաժամկետ ազդեցությունների միջոցով: Նեյրոնային մորֆոլոգիայի եւ / կամ ֆունկցիայի վրա տարբեր հոսանքային թիրախների հայտնաբերման եւ դրանց հետեւանքների բացահայտման ջանքերը ի վերջո կհստակեցնեն ΔFosB- ի եւ այլ Fos- ի հետ կապված հակաթույնների դերը կապվածության կախվածության դրսեւորման մեջ:

Լրացուցիչ նյութեր

Supp աղյուսակ S1

Լրացուցիչ աղյուսակ 1. Գծային հետընթացային վերլուծությունների ընդհանուր փոխկապակցվածության արդյունքները: Ձախ երեք վահանակները պարունակում են փոխկապակցվածություն կոկաինի ընդունման և cFos (վերին վահանակ), FosB (միջին վահանակ) կամ ΔFosB (ստորին վահանակ) մակարդակների միջև: Rightիշտ երեք վահանակները պարունակում են փոխհարաբերություններ cFos- ի և ΔFosB- ի (վերին վահանակ), cFos- ի և FosB- ի (միջին վահանակ) և FosB- ի և ΔFosB- ի (ստորին վահանակ) միջև: Յուրաքանչյուր առանձին վերլուծության համար ուղեղի հարաբերական շրջանները և WՇ ժամանակային կետերը ցուցադրվում են համապատասխան r- և p- արժեքների հետ միասին: * p <0.05, T0.1> պ> 0.05:

Acknowledgments

Հեղինակները հայտարարում են ոչ մի կոնֆլիկտային շահի մասին: Այս աշխատանքը աջակցել է NIH- ի DA 10460- ի եւ DA 08227 դրամաշնորհների, ինչպես նաեւ Վիսլի Գիլիլանդի եւ կենսաբժշկական հետազոտությունների պրոֆեսորադասախոսական կազմի կողմից:

Օգտագործված հապավումները

  • CPu
  • քաուդա-պուտամեն
  • NAc
  • միջուկային հեծանիվներ
  • AY
  • սուր լծի
  • CY
  • քրոնիկ լուծը
  • CSA
  • կոկաինի ինքնակառավարումը
  • WD
  • դուրս գալուց
  • IV
  • ներերակային
  • IP
  • intraperitoneal.

Սայլակ

  • Alibhai IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ: Կարգավորումը fosB և ΔfosB mRNA արտահայտություն. In vivo եւ in vitro հետազոտություններ: Brain Res. 2007; 1143: 22-33: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Հոլանդիա Ջ, Schaeffer E, Nestler EJ: Միջուկային գործոնի ներկառուցումը, κB- ն, քրոնիկ կոկաինի վարչարարությամբ միջուկի հոդի մեջ: J Neurochem. 2001; 79: 221-224: [PubMed]
  • Bachtell RK, Choi KH, Simmons DL, Falcon E, Monteggia LM, Neve LN, Self DW- ն: GluR1 արտահայտության դերը միջուկում accumbens նեյրոնների մեջ կոկաինի սենսիտիզացիայի եւ կոկաինի որոնման վարքագծի մեջ: Eur J Neurosci: 2008; 27: 2229-2240: [PubMed]
  • Belin D, Everitt BJ- ն: Կոկինային փնտրտուքները կախված են դոպամինային կախվածություն ունեցող սերիալային կապից, որը կապում է խոռոչի դորալ ստերիմատով: Նյարդոն: 2008; 57: 432-441: [PubMed]
  • Benavides DR, Bibb JA: Cdk5- ի դերը թմրամոլության եւ պլաստիկության մեջ: Անն Ա. 2004; 1025: 335-344: [PubMed]
  • Ben-Kent O, Ahmed SH, Koob GF, Ettenberg A. Անցումը վերահսկվողից կոմպրեսսիվ թմրանյութերի օգտագործման հետ կապված է կորստի sensitization. Brain Res. 2004; 995: 46-54: [PubMed]
  • Bradberry CW. Կոկաինի սուր եւ խրոնիկական գործողություններում արտատպելային դոպամինի դինամիկան: Նյարդաբան: 2002; 8: 315-322: [PubMed]
  • Brenhouse HC, Stellar JR- ն: c-Fos- ը եւ ΔFosB- ը տարբերվում են կոկաինի զգայուն առնետների ճառագայթների ճառագայթների ճյուղի հստակ subregions- ում: Ահավ Նեյրոսցի: 2006; 137: 773-780: [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Հույս BT, Nestler EJ: Electroconvulsive առգրավման եւ կոկաինի բուժման միջոցով ΔFosB եւ FosB նմանատիպ սպիտակուցների կարգավորումը: Մոլ Pharmacol. 1995; 48: 880-889: [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Հույս BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ: Քրոնիկ ֆոսին առնչվող հակիգենիներ. ΔFosB- ի կայուն տարբերակները, որոնք ուղեկցվում են ուղեղի քրոնիկական բուժումներով: J Neurosci. 1997; 17: 4933-4941: [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW- ն: ΔFosB- ի ստերիլալ բջջային տիպի յուրահատուկ գերբնակեցումը նպաստում է կոկաինի խթանմանը: J Neurosci. 2003; 23: 2488-2493: [PubMed]
  • Edwards S, Whisler KN, Fuller DC, Orsulak PJ, Self DW- ն: Կախվածության հետ կապված փոփոխություններ D- ում1 եւ Դ2 դոֆամինային ընկալիչի վարքային արձագանքները `քրոնիկ կոկաինի ինքնակառավարման արդյունքում: Նեյրոփսիչոֆարմ. 2007a; 32: 354-366: [PubMed]
  • Edwards S, Graham DL, Bachtell RK, Self DW- ն: Տարածաշրջանային հանդուրժողականությունը քրոնիկ կարգավորվող կամպից կախված սպիտակուցի ֆոսֆորալացման հետեւանքով քրոնիկ ինքնակարգավորումը: Eur J Neurosci: 2007b; 25: 2201-2213: [PubMed]
  • Goeders NE- ն: Կոկաինային ուժեղացման մեջ նեյրոէդոկրին դեր: Psychoneuroendocrinol. 1997; 22: 237-259: [PubMed]
  • Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA- ն: Ամֆետամին եւ կոկաինը դրդում են ստիոսոմային-մաթրիկի խցիկներում եւ ստրիատումի առանձին ստորաբաժանումներում c-fos գենի դեղերի հատուկ ակտիվացում: Proc Natl Acad Sci ԱՄՆ. 1990; 87: 6912-6916: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, DiLeone RJ, Rios M, Self DW- ն: Դինամիկ BDNF- ի գործունեությունը կոկաինի օգտագործման հետ կապված միջուկի հագեցվածության մեջ մեծացնում է ինքնակազմակերպումը եւ վերականգնումը: Nat Neurosci. 2007; 10: 1029-1037: [PubMed]
  • Հույս Բ, Կոսոֆսկի Բ, Հայման Ս.Է., Նեստլեր Է.Ջ. Անմիջական վաղ գենի արտանետումների եւ AP-1- ի կապակցումը քրոնիկ կոկաինի կողմից սնուցող կորիզի ակեմբենսներում կարգավորելու համար: Proc Natl Acad Sci ԱՄՆ. 1992; 89: 5764-5768: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Հույսը BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ: Անցում երկարատեւ AP-1 համալիրը բաղկացած փոփոխված Fos- նման սպիտակուցներ ուղեղի քրոնիկ կոկաին եւ այլ քրոնիկ բուժում. Նյարդոն: 1994; 13: 1235-1244: [PubMed]
  • Հույս ունեմ BT- ում: Կոկաինը եւ AP-1- ի transcription factor համակարգը: Անն Նյու Յորքի Ակադ Սի. 1998; 844: 1-6: [PubMed]
  • Jorissen HJMM, Ulery PG, Henry L, Gourneni S, Nestler EJ, Rudenko G. Dimerization եւ DNA- պարտադիր հատկությունները σFosB գործակիցը: Կենսաքիմիա: 2007; 46: 8360-8372: [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr եւ այլն: Ուղեղի աշնանացանի գործակիցը արտահայտում է ուղեղի կառավարումը զգայունություն կոկաինի նկատմամբ: Բնություն: 1999; 401: 272-276: [PubMed]
  • Kufahl PR, Zavala AR, Singh A, Thiel KJ, Dickey ED, Joyce JN, Neisewander JL- ն: c-Fos- ի արտահայտությունը, որը կապված է կոկաինի որոնման վարքագծի հետ, արձագանքելով պայմանավորված պայմանավորված պայմաններով: Synapse- ը: 2009; 63: 823-835: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Lee K, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Կոկաինի կողմից D1- ի եւ D2 dopamin- ի ընկալիչ պարունակող միջուկային նեյրոնների միջուկային հյուսվածքների ձեւավորումը: Proc Natl Acad Sci ԱՄՆ. 2006; 103: 3399-3404: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Լեգեոնի I, Covington HE, III, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, մեխանիկական M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren YH, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakovsky A, Schaefer A, Nestler EJ- ն: Կոկինային ներթափանցված պլաստիկության մեջ հիստոնիային methyltransferase G9a- ի կարեւորագույն դերը: Գիտություն. 2010; 327: 213-216: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ: ΔFosB: ուղեղի երկարաժամկետ ադապտացման համար մոլեկուլային անջատիչ: Mol Brain Res. 2004; 132: 146-154: [PubMed]
  • Neisewander JL, Baker DA, Fuchs RA, Tran-Nguyen LTL, Palmer A, Marshall JF: Ֆոտո սպիտակուցային արտահայտությունը եւ կոկաինը փնտրող վարքը առնետների մեջ կոկաինի ինքնակառավարման միջավայրի ազդեցության հետեւանքով: J Neurosci. 2000; 20: 798-805: [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW- ն: ΔFosB: կախվածության համար կայուն մոլեկուլային փոխարկիչ: Proc Natl Acad Sci ԱՄՆ. 2001; 98: 11042-11046: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Nestler EJ- ն: Կախվածության անդրսահմանային մեխանիզմները. ΔFosB- ի դերը: Ֆիլ Տրանս Ռոկ Բ. Բ. 2008; 363: 3245-3255: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Nye HE, Հույս BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ: Կոդի քրոնիկ FOS- ի հետ կապված հակագենի ներդիրի կարգավորման վերաբերյալ դեղագործական ուսումնասիրությունները ստիաթում եւ միջուկի ակամենսներում: J Pharmacol Exp Ther- ը: 1995; 275: 1671-1680: [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ: Խրոնիկական սթրեսից հետո ΔFosB- ի ներդիրը պարգեւատրման հետ կապված ուղեղի կառուցվածքներում: J Neurosci. 2004; 24: 10594-10602: [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B եւ այլն: ΔFosB- ի ուղեղի հագեցման հստակ օրինաչափություններ `չարաշահման թմրամիջոցներով: Synapse- ը: 2008; 62: 358-369: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson GC- ն: Սաթե ուղեղը ստերեոտաքսիկ կոորդինատներում: 4th. Նյու Յորք. Ակադեմիական մամուլ 1998.
  • Pich EM, Pagliusi SR, Tessari M, Talabot-Ayer D, Van Huijsduijnen RH, Chiamulera C. Նատրիումի եւ կոկաինի կախվածության հատկանիշների ընդհանուր նեյրովային նյութեր: Գիտություն. 1997; 275: 83-86: [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I եւ այլն: ΔFosB- ն միջնորդում է էպիգենետիկ անզգայացմանը c-fos քրոնիկ ամֆետամինի ազդեցությունից հետո գեն: J Neurosci. 2008; 28: 7344-7349: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, եւ այլն: DeltaFosB- ի ազդեցությունը միջուկի հրամայականների վրա բնական պարգեւատրման հետ կապված վարքագծի վրա: 2008; 28: 10272-10277: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Երիտասարդ ST, Porrino LJ, Iadarola MJ: Կոկաինը ներարկում է ստիատալային c-Fos-immunoreactive սպիտակուցներ `դոպամիներգիկ D- ի միջոցով1 ընկալիչները: Proc Natl Acad Sci ԱՄՆ. 1991; 88: 1291-1295: [PMC անվճար հոդվածը] [PubMed]
  • Չժանգ Ջ, Ժանգ Լ, ​​Ջիաո Հ, Ժանգ Ք, Չժանգ Դ, Լու Դ, Կաթզ Ջլ, Քու Մ. C-Fos- ը նպաստում է կոկաինի ենթարկված կայուն փոփոխությունների ձեռքբերմանը եւ վերացմանը: J Neurosci. 2006; 26: 13287-13296: [PubMed]