Biol geðdeildarfræði. 2008 Dec 1; 64 (11): 941-50. Epub 2008 Júlí 26.
Teegarden SL, Nestler EJ, Bale TL.
Heimild
Department of Animal Biology, Háskólinn í Pennsylvania, Philadelphia, PA 19104-6046, USA.
Abstract
Inngangur:
Næmi fyrir verðlaun hefur verið í för með sér sem ráðandi þáttur í hegðun sem tengist eiturlyf misnotkun og ofmeta. Hins vegar eru undirliggjandi kerfi sem stuðla að næmi næmni óþekkt. Við gerum ráð fyrir að dysregulering í dópamínviðvörun gæti verið undirliggjandi orsök aukinnar næmnis ágengis þar sem gefandi áreiti gætu virkað til að staðla kerfið.
aðferðir:
Við notuðum erfðafræðilega músar líkan af aukinni næmni fyrir laun, Delta FosB-overexpressing músina, til að kanna umbreytingar á umbreytingarferli til að bregðast við góðu mataræði. Merki verðlaunaauðlinda í þessum músum voru skoðuð bæði í grundvallaratriðum og eftir 6 vikur við mataræði. Mýs voru skoðuð í hegðunarprófum eftir að fitusneyting var hætt með mataræði til að meta viðkvæmni þessa líkans til að fjarlægja verðandi áreiti.
Niðurstöður:
Niðurstöður okkar sýna fram á breytingu á endurheimtarsveiflustöðvun meðfram kjarna accumbens-hypothalamic-ventral tegmental svæði hringrás sem stafar af ofþjöppun Delta FosB í kjarnanum accumbens og striatal svæðum. Stig af fosfórýleruðu hringlaga adenósínmónófosfati (cAMP) svörunarþáttar bindandi próteinum (pCREB), heilaafleiddur taugaveikill þáttur (BDNF), og dópamín og hringlaga adenósínmónófosfat með reglulegu fosfópróteini með sameindaþyngd af 32 kDa (DARPP-32) í kjarnanum var minnkað í Delta FosB músum, sem bendir til þess að dopamínmerki sé dregið úr. Sex vikur af fituskertu mataræði hafa dregið úr þessum munum og sýnt fram á að það er öflugt gefandi hæfileiki á góðu mataræði. Delta FosB mýs sýndu einnig veruleg aukning á virkni og kvíða tengdum svörum 24 klukkustundum eftir að fiturík meðferð var hætt.
Ályktanir:
Þessar niðurstöður koma til grundvallar næmi fyrir breytingum á umbun sem tengist dysregulering Delta FosB og dópamínsmerkis sem hægt er að eðlilegast með góða mataræði og getur verið fyrirbyggjandi svipgerð í sumum offituformi.
Hvernig gengur lífið dag frá degi? Er það í jafnvægi og allt eins og það á að vera? Er jafnvægi hvort sem litið er á veraldlega stöðu eða andlega? Lífið er eins og það er. Það er ekki alltaf sólskyn. Það koma reglulega lægðir með rok og rigningu. Við vitum að í heildar samhenginu er lægð hluti af vistkerfi að leita að jafnvægi. Stundum erum við stödd í miðju lægðarinnar. Þar er logn og gott veður, sama hvað gengur á þar sem stormurinn er mestur. Sama lögmál gildir varðandi þitt eigið líf. Ef þú ert í þinn miðju, þínum sannleik þá heldur þú alltaf jafnvægi átakalaust. Sama hvað gustar mikið frá þér þegar þú lætur til þín taka. Huldufólk hefur gefið okkur hugleiðslu sem hjálpar okkur að finna þessa miðju, finna kjarna okkar og sannleikann sem í honum býr. Þegar þú veist hver þú ert og hvers vegna þú ert hér, mun líf þitt vera í flæðandi jafnvægi. Hugleiðslan virkjar þekkinguna sem er í vitund jarðar og færir hana með lífsorkunni inn í líkama okkar. Þar skoðar hún hugsana og hegðunar munstrið og athugar hvort það myndar átakalausu flæðandi jafnvægi. Hinn möguleikinn er falskt jafnvægi sem hafa þarf fyrir að viðhalda með tilheyrandi striti, áhyggjum og ótta. Síðan leiðbeinir þessi þekking okkur að því jafnvægi sem er okkur eðlilegt. Við blómstrum átakalaust, líkt og planta sem vex átakalaut frá fræi í fullþroska plöntu sem ber ávöxt.
Þrátt fyrir vaxandi þekkingu okkar á taugakerfinu sem stýrir matarlyst og mettun, heldur áfram að hækka hlutfall offitu í Bandaríkjunum. Núverandi lyfjameðferð hefur takmarkaða verkun og breytingar á hegðun verða fyrir lágmarkssvörun (1). Neysla á kalorískt þéttum, miskunnsamlegum matvælum hefur verið tengd breytingum á streitu og umbunarmörkum í heila, sem bendir til þess að verðandi eiginleika slíkra matvæla geti haft áhrif á orkujöfnuðarmerki (2-4). Mataræði sem er mjög feitur virkar eins og náttúruleg verðlaun, virkja heilaverðlaunamiðstöðvar á svipaðan hátt og misnotkunartilkynning, og sem slík hefur verið notuð í sjálfstjórnarháttum (5-8). Þannig er líklegt að hegðun og hvatning fyrir ofmeti og fíkniefnaneyslu hafi sameiginlega undirliggjandi aðferðir, hugsanlega að opna nýjar leiðir til meðferðar við báðar aðstæður.
Í því að rannsaka sambandið milli góða matvæla og leiða sem stjórna verðlaun og streitu í heilanum, Við höfum áður bent á sameinda- og lífefnafræðileg merki um minni laun og aukið streitu eftir að það hefur verið tekið úr hollan hátt fituefnum (HF). Líkur á fíkniefnum misnotkun leiddi til vitsmunalegrar mataræðis í rannsóknum okkar í aukinni þéttni uppskriftarþáttar ΔFosB í kjarnanum (NAc), sem er miðlægur heilauppbygging (9, 10). Mýs sem örva yfirþrýsting ΔFosB sýna aukið verkfæri sem bregðast við matarverðlaun (11), sem gerir þau dýrmætt tól til að kanna hlutverk launagæslu og langtíma dysregulation á launakerfinu í sameinda- og lífefnafræðilegum viðbrögðum á góðu mataræði.
Í þessari rannsókn nýttu við ΔFosB-overexpressing músina til að kanna langvarandi breytingar á merkjum umbuna í NAc-hypothalamus-ventral tegmental area (VTA) neurocircuitry til að bregðast við gleðilegu HF mataræði. Byggt á fyrri rannsóknum á þessum verðmætum músum, sögðum við að ΔFosB-völdum breytingum á næmi næmni feli í sér dysregulering í dópamínmerkjum sem stafar af NAc viðbrögð við VTA. Ennfremur var gert ráð fyrir því að útsetning fyrir náttúrulegum umbun á orkuþéttum HF mataræði myndi þá staðla dopamínvirka kerfið í þessum músum, sem leiðir til ýktar svörun við streitu fráhvarfs frá þessari HF mataræði. Einstakt þáttur í því að nýta sér velþóknanlegt mataræði sem gefandi efni gerir okkur kleift að taka inn í blóðsykursinntakið til að umbuna rafrásir í svipgerð sem getur verið fyrirsjáanlegt af íbúum sem eru á meðferðarsjúkri offitu. Til að kanna þessa tilgátu, rannsakaðum við merki um dópamíntaugaboð, þar á meðal pCREB, BDNF og DARPP-32 í NAc og týrósínhýdroxýlasa og dópamínflutnings í VTA, í kjölfar HF-útsetningar. Við skoðuðum einnig sérstakar vísbendingar um orkujafnvægi sem vitað er að hafa áhrif á dópamínframleiðslu, þ.mt leptín og orexín viðtaka í VTA og orexín tjáningu innan hliðarhimnubólgu.
Efni og aðferðir
Dýr
Mönnum bitransgenic mýs sem framkallað voru ΔFosB í dynorphin jákvæðum taugafrumum í NAc og dorsal striatum (Kelz et al., 1999) voru myndaðar á blönduðum bakgrunni (ICR: C57Bl6 / SJL) við University of Texas Southwestern Medical Center og haldið og prófað við háskólann í Pennsylvaníu. Öll mús voru haldið við doxýsýklíni (100 μg / ml í drykkjarvatninu) þar til komu við háskólann í Pennsylvaníu. Til að örva yfirþrýsting var doxýcýklín fjarlægt (n = 23) (12). Control mýs (n = 26) héldu áfram að fá lyfið. Mýs voru úthlutað til matarhópa átta vikur eftir að doxýkýlín var fjarlægt, þar sem tjáning hefur verið sýnt að ná hámarksþéttni (13). Mýs voru haldið á 12: 12 ljósdimmu hringrás (ljós á 0700) með mat og vatni sem er laus við ad libitum. Allar rannsóknir voru gerðar í samræmi við tilraunaverkefni sem samþykkt voru af háskólanum í Pennsylvaníu, stofnunarstofu fyrir dýravernd og notkun, og öll verklag voru gerð í samræmi við leiðbeiningar stofnana.
Áhrif á mataræði
Mýs voru haldið á húsakynni (n = 16) eða sett á HF (n = 16-17) í sex vikur. House Chow (Purina Lab Diet, St. Louis, MO) innihélt 4.00 kcal / g, sem samanstóð af 28% próteini, 12% fitu og 60% kolvetni. HF mataræði (Rannsóknarþynnur, New Brunswick, NJ) innihéldu 4.73 kcal / g, sem samanstóð af 20% próteini, 45% fitu og 35% kolvetni.
Lífefnafræði og gen tjáning
Mýs voru greindar eftir sex vikna mataræði. Heila var fjarlægt úr höfuðkúpu og annaðhvort fryst heil á þurrís eða NAc dissected (u.þ.b. 0.5 - 1.75 mm frá bregma, á dýpi 3.5 - 5.5 mm) og fryst í fljótandi köfnunarefni. Vefja var geymt við -80 ° C þar til hún var metin.
Lífefnafræðilegar greiningar
Aðferðir til vestrænna blása eru lýst í viðbótarefni. Mótefnin sem notuð voru voru: Cdk5, CREB og BDNF (1: 500, Santa Cruz líftækni, Santa Cruz, CA) og fosfó-CREB (pCREB) (Ser 133) (1: 500, Cell Signal Technology, Danvers, MA).
Upptökutæki sjálfgeislun
Ítarlegar aðferðir við autoradiography eru lýst í viðbótarefni. Lönd sem notuð voru voru 2 nM H3 - SCH 23390 og 5 nM H3 - spiperón (PerkinElmer, Boston, MA).
In situ hybridization
Vefjavinnsla og blendingur voru gerðar eins og áður hefur verið lýst (14). DARPP-32 prófið var vinsamlega veitt af P. Greengard (Rockefeller University) og orexin rannsakað af J. Elmquist (University of Texas Southwestern Medical Center). Skyggnur sem voru greindar fyrir DARPP-32 voru lagðar til kvikmynda fyrir 3 daga og skyggnur sem voru greindar fyrir orexín voru lagðar til kvikmynda fyrir 4 daga. Kvörðun kvikmynda var gerð eins og áður hefur verið lýst (10).
QRT-PCR
RNA var einangrað frá VTA og tjáningu einstakra gena metin með því að nota TaqMan gen tjáningu prófanir (Applied Biosystems, Foster City, CA). Ítarlegar aðferðir og tölfræðilegar greiningar má finna í viðbótarefni.
Hegðunargreiningar
Í því skyni að kanna áhrif næmni launatengslanna á matarskemmda hegðunarbreytingar, var undirhópur músa afturkölluð úr HF eftir fjórar vikur af váhrifum og kom aftur til húsakúðar (n = 9 stjórna, n = 8 ΔFosB). Tuttugu og fjórum klukkustundum eftir að meðferð var hætt, voru músar útsettar fyrir opinn prófun í samræmi við áður útgefnu mataræði (10) mataræði. Í stuttu máli var músin sett í miðju opna svæðisins og fylgst með í fimm mínútur. Samtals lína krossar, fecal boli, tími í miðju, og fer inn í miðju voru mæld.
Tölfræði
Öll gögn nema Western blots voru greind með tvíhliða ANOVA og síðan PLSD próf Fishers með doxýcýklín meðferð (ΔFosB tjáningu) og ástandi mataræði sem sjálfstæðar breytur. Fyrir RT-PCR greiningar var lækkað P gildi notað til að leiðrétta margfeldi samanburð innan hópa af skyldum genum (sjá viðbótarefni). Vestrænir blettir voru greindir með því að nota t-próf nemanda með doxycycline meðferð sem sjálfstæða breytu og bera saman ljósþéttleika innan sama blot. Öll gögn eru sett fram sem meðaltal ± SEM.
Niðurstöður
Breytileg lífefnafræðileg munur
Til að skýra sameindaleiðirnar sem liggja til grundvallar aukinni umbununarnæmi í ΔFosB-oftjáandi músum voru stig nokkurra lykilmerkjasameinda skoðuð í NAc. Þróun var í auknu magni Cdk5 í NAc ΔFosB músa samanborið við dýr sem voru með ruslafélaga sem haldið var á doxycycline (F = 5.1, P = 0.08; mynd 1A). ΔFosB mýs tjáðu marktækt lækkað magn pCREB (F = 7.4, P <0.05; mynd 1B) sem og heildarmagn CREB (F = 5.4, P = 0.05; mynd 1C). Marktæk lækkun á BDNF kom einnig fram í NAc ΔFosB músa (F = 10.6, P <0.05; mynd 1D).
Mynd 1
Mýs sem voru ofþungar ΔFosB sýndu lífefnafræðileg merki um minnkað dópamínmerki í NAc
Maturinntaka og líkamsþyngd á fitusnauðum mataræði
Við skoðuðum næst áhrif náttúrulega gefandi HF mataræðis á breytingar á merkjasameindum í ΔFosB-oftjáandi músum. Enginn munur var á ΔFosB músum og samanburði á fæðuinntöku hvorki í húsi né HF. Samt sem áður var heildarlækkun á kaloríainntöku í eðlilegri líkamsþyngd þegar hún var útsett fyrir HF sem var sértæk fyrir ΔFosB mýsnar (F = 11.2, P <0.01; mynd 2A). Að lokinni sex vikna útsetningu fyrir mataræði vógu mýs sem fengu HF marktækt meira en þær sem voru á mataræði Chow (F = 17.2, P <0.001) og ΔFosB mýs vógu minna samanlagt en samanburðarhópur (F = 5.6, P <0.05; mynd. 2B). Þessi áhrif voru sértæk fyrir mismun milli hópa á mataræði Chow (P <0.05).
Mynd 2
ΔFosB overexpressing mýs sýndi engin munur á fæðuinntöku á annaðhvort Chow eða hár fitu (HF) mataræði
Lífefnafræðilegur munur á fitusnauðum mataræði
Til að ákvarða hvernig basal munur á NAc merkingu gæti verið breytt með HF mataræði, voru sömu merkjunarprótein, sem voru rannsökuð við upphafsgildi, skoðuð hjá dýrum sem höfðu fengið sex vikna HF. Enginn marktækur munur var á Cdk5 stigum (mynd 3A). Stig pCREB og heildar CREB voru ekki lengur mismunandi eftir sex vikna HF (mynd 3B, C). Stig BDNF voru marktækt hækkaðir í ΔFosB músum eftir sex vikna HF útsetningu (F = 6.5, P = 0.05; Mynd 3D).
Mynd 3
Mjög feitur (HF) mataræðisbreyting á skilunarbreytingum sem komu fram í NAc af ΔFosB overexpressing músum
Dópamínviðtaka sjálfgeislun
Við notuðum myndgreiningu viðtaka til að meta hvort breytingar á ΔFosB af völdum dópamínmerkja í NAc tengjast breytingum á tjáningu dópamínviðtaka (mynd 4A). Fitumikið mataræði virtist auka þéttleika bindingar D1 dópamínviðtaka lítillega (P = 0.14) og þessi munur var meiri hjá ΔFosB músum (mynd 4B). Það var einnig þróun í átt að aukningu á D1 bindisvæði í kjölfar HF (P = 0.06) og prófanir eftir hoc sýndu að þetta var marktækt hjá ΔFosB músunum (P <0.05; mynd 4C). Öfugt við D1 viðtaka, engar breytingar á bindiefni D2 viðtaka (stjórn chow = 97.6 ± 6.9, stjórn HF = 101.1 ± 8.2, ΔFosB chow = 91.6 ± 1.0, ΔFosB HF = 94.8 ± 9.5) eða bindisvæði (stjórn chow = 47.3 ± 3.4, stjórn HF = 53.8 ± 6.0, ΔFosB chow = 51.9 ± 3.7, ΔFosB HF = 49.0 ± 3.3) í NAc sást.
Mynd 4
Hár fitueyðing (HF) leiddi til breytinga á D1 dópamínviðtaka bindingu og DARPP-32 tjáningu í kjarnanum accumbens (NAc) af ΔFosB overexpressing mýs
DARPP-32 tjáning í NAc
Blendingur á staðnum var notaður til að ákvarða tjáningarstig DARPP-32 í NAc (mynd 4D). Fitumikið mataræði jók DARPP-32 tjáningu verulega á þessu heila svæði (F = 5.1, P <0.05) og marktæk samspil var milli mataræðis og ΔFosB tjáningar (F = 8.9, P <0.05), þar sem ΔFosB mýs sýndu meiri breyting vegna mataræðis (mynd 4E). Grundvallarmunur á tjáningu DARPP-32 milli stjórnunar og ΔFosB músa kom í ljós með eftirprófi (P <0.01) sem og marktækri aukningu á tjáningu DARPP-32 í ΔFosB músum á HF (P <0.01).
Gene tjáning í VTA
QRT-PCR var notað til að meta breytingar á tjáningu gena í VTA og miða á nokkur lykilgen sem áður höfðu áhrif á stjórnun umbunar. Öll sýni voru eðlileg í β-aktín. Til að tryggja að β-aktín tjáningu væri ekki breytt með meðferð var gerð sérstök próf til að bera saman β-aktín við annað innra eftirlit, GAPDH. Enginn marktækur munur var á tjáningu β-aktíns (ΔCT gildi, β-aktín - GAPDH: stjórn chow = 2.29 ± 0.21, stjórn HF = 2.01 ± 0.04, ΔFosB chow = 2.32 ± 0.49, ΔFosB HF = 2.37 ± 0.10).
Þróun fyrir víxlverkun milli tjáningar ΔFosB og meðferðar með mataræði kom fram varðandi tjáningu týrósínhýdroxýlasa (F = 3.6, P <0.06; mynd 5A). Sex vikna útsetning fyrir HF virtist draga úr tjáningu týrósínhýdroxýlasa í samanburðarmúsum og auka tjáningu hjá ΔFosB músum. Marktæk milliverkun milli tjáningar ΔFosB og útsetningar fyrir mataræði kom fram vegna tjáningar dópamín flutningsaðila (F = 6.7, P <0.03; mynd 5B). Svipað og týrósínhýdroxýlasa, útsetning fyrir HF minnkaði tjáningu dópamínflutninga í samanburðarmúsum og marktækt aukna tjáningu hjá ΔFosB músum (P <0.05). Grunnmunurinn á tjáningu dópamín flutningsaðila milli stjórnunar og ΔFosB músa náði ekki marktækni (P = 0.16), en eftir 6 vikur af HF tjáðu ΔFosB mýs verulega hækkað magn dópamín flutningsaðila samanborið við samanburðarhóp (P <0.05).
Mynd 5
Áhrif á háan fitufæði (HF) og ΔFosB tjáning leiddu til breytinga á tjáningu fjölda lykla sameinda í VTA
Það var stefna sem benti til áhrifa af aukinni ΔFosB tjáningu til að draga úr TrkB stigum í VTA (F = 5.7, P <0.04; mynd 5C). Þrátt fyrir að engin helstu áhrif væru á tjáningu κ-ópíóíðviðtaka var þróun í átt til skertrar tjáningar hjá ΔFosB músum (P = 0.08; mynd 5D). Tjáning leptínviðtakans var einnig ákvörðuð í VTA. Marktæk áhrif útsetningar fyrir mataræði fundust (F = 6.1, P <0.03), þar sem HF lækkaði marktækt magn leptínviðtaka í VTA bæði í ΔFosB og samanburðarmúsum (mynd 5E). Tjáning orexínviðtaka 1 í VTA var einnig skoðuð. Marktæk áhrif voru af mataræði á tjáningu orexínviðtakans (F = 9.0, P <0.02), þar sem mýs sem voru útsettar fyrir HF tjáðu hærri stig í VTA (mynd 5F). Það var einnig þróun hjá ΔFosB músum að tjá hærra magn orexínviðtaka 1 á þessu heila svæði (P <0.05).
Orexín tjáning í hliðarhimnubólgu
Við mældum magn orexíns í lateral undirstúku, uppruna orexinergs taugaveiklunar á VTA, með blendingi á staðnum (mynd 6A). Marktæk samskipti voru milli tjáningar ΔFosB og útsetningar fyrir mataræði á tjáningu orexíns (F = 9.1, P <0.01), þar sem HF hækkaði marktækt orexínmagn í stjórnmúsum (P <0.05) og minnkaði tjáningu í ΔFosB músum (mynd 6B). Þrátt fyrir að enginn marktækur munur væri á tjáningu orexíns í grunnstöðu, eftir 6 vikur af HF, tjáðu ΔFosB mýs verulega minna magn orexíns samanborið við samanburði (P <0.05).
Mynd 6
Hár fitur (HF) mataræði hafði mismunandi áhrif á orexín tjáningu í stjórn (Ctrl) og ΔFosB overexpressing mýs
Behafioral greinir
Til að meta breytingar á örvun og tilfinningasemi vegna mataræðisbreytinga urðu mýs fyrir opnu prófinu 24 klukkustundum eftir að HF mataræði var hætt (10). Heildarlínukrossar, sem voru skoraðir sem mælikvarði á örvun, höfðu veruleg áhrif á ΔFosB tjáningu (F = 6.6, P <0.05) og mataræði (F = 4.6, P <0.05; mynd 7A). ΔFosB mýs voru virkari í nýju umhverfi en samdráttur og eftirprófanir sýndu að mýs sem voru dregnar út úr HF voru marktækt virkari en þær sem fengu chow (P <0.05). Fecal boli voru taldir sem mælikvarði á kvíðalíka hegðun (10). Það voru aðaláhrif ΔFosB tjáningar (F = 10.2, P <0.01), þar sem ΔFosB-oftjáandi mýs mynduðu meira saur boli í nýju umhverfi, sérstaklega í hópsins og HF fráhvarfshópum (mynd 7B). ΔFosB mýs sem haldið var á HF mataræði framkallaði færri saur í bolum en þær sem haldið var við chow og þær sem voru dregnar til baka 24 klst fyrir prófið. Stjórnarmýs virtust ekki hafa áhrif á mataræðið. Það voru engin marktæk áhrif hvorki ΔFosB tjáningar né mataræðis á tíma sem varið var á miðju opna reitsins (stjórn chow = 14.5 ± 3.1 sek, stjórn HF = 18.0 ± 3.2 sek, stjórn W / D = 15.4 ± 1.9 sek, ΔFosB chow = 16.9 ± 2.4 sek, ΔFosB HF = 13.1 ± 3.9 sek, ΔFosB W / D = 19.8 ± 2.6 sek).
Mynd 7
Mýs sem höfðu yfirtjáningu ΔFosB voru næmari fyrir áhrifum háþrýstingsdýmis (HF) afturköllunar
Discussion
Í offitumeðferð er mikilvægt þörf fyrir að bera kennsl á þætti sem hafa áhrif á næmi fyrir ofþyngd og þyngdaraukningu. Brain umbun leiðir gegna mikilvægu hlutverki í hvatningu og viðbrögð við góðu mat og breytingar á mataræði (6, 10, 15, 16). Þar sem orexigenic og anorexigenic merki geta bein áhrif á verðlaunaafhendingu í gegnum hypothalamus-VTA-NAc hringrás, getur lýsing á genum sem svara orkugjafnum velmegandi mataræði innan verðlaunamiðstöðvar veita nýjar lækningarmarkmið við offitumeðferð (17, 18). Þess vegna skoðuðum við lífefnafræðilegar og sameindarmerki verðlauna og orku jafnvægismerkja með því að nota hypothalamus-VTA-NAc hringrásina til að bregðast við HF mataræði í ΔFosB-overexpressing músum sem fyrirmynd um aukið næmi fyrir breytingum á umbunum (13, 19, 20) , og hegðunarnæmisviðbrögð eftir að meðferð er hætt. Við getum gert ráð fyrir að basal dysregulation af dópamínviðvörun í ΔFosB músum væri eðlileg með því að gefandi áhrif af HF mataræði, sem ná yfir gatnamótum orkujafnvægismerkja og dópamínkerfisins.
Til að kanna merki sem gefa til kynna dysregulering við dopamínmerki í NAc, skoðuðum við D1 viðtaka stig og downstream effectors. Þótt engin marktækur munur væri á D1 viðtaka bindingu, Það var tilhneiging fyrir HF útsetningu til að auka bindandi svæði í ΔFosB músum. Þetta er athyglisvert eins og örvun ΔFosB með lyfjum og náttúruleg verðlaun virðast einkennast af dynorphin jákvæðu undirgerðinni af miðlungs hvítum taugafrumum sem fyrst og fremst tjá D1 viðtaka (9, 21). Stig af dopamínmerkjamarkmiðinu pCREB í niðurstöðunni var marktækt minni í FosB músum, sem stuðla að minni D1 viðtaka virkjun á þessu heila svæði (22, 23). Athyglisvert fannst einnig veruleg lækkun á heildarstyrkjum CREB í ΔFosB músum, sem bendir til frekari lækkaðrar getu til að umbreyta dópamínsmerkjum sem geta verið í viðbót við viðbrögð sem stafa af langvarandi lækkun pCREB (24). BDNF tjáning er stjórnað af pCREB, er hækkun með D1 virkjun og er mikilvægur miðill af launatengdum taugaveiklun í NAc (25, 26). Samkvæmt því komu fram veruleg lækkun á BDNF próteini í NAc af ΔFosB músum.
Allir miðlungs spiny taugafrumur í NAc tjá DARPP-32 (27). Fjölmargir downstream effectors hennar gera það ómissandi leikmann í verðlaunahópum (28) og það hefur verið fólgið í fíkniefni og öðrum sjúkdómum sem tengjast dópamínkerfinu, þ.mt geðraskanir og geðklofa (27, 29). Við fundum djúpstæð basal lækkun á DARPP-32 tjáningu í NAc af ΔFosB músum. DARPP-32 tjáning er stjórnað af BDNF og því getur minnkuð tjáning verið í beinum tengslum við lækkun á BDNF stigum sem finnast í ΔFosB músum (27, 29, 30). Jafnvel í meðallagi breytingar á fosfórunarstöðu DARPP-32 geta leitt til verulegra breytinga á innanfrumumerkjum innan NAc (27). Fyrri rannsóknir hafa ekki greint frá neinum breytingum á DARPP-32 próteinum í ΔFosB músum eftir að 12-wk flutningur var fjarlægður úr doxýcýklíni þegar breiðari mælikvarða var gerð (31), sem bendir til þess að áhrif ΔFosB á DARPP-32 megi vera tími og svæðisbundin.
Við gerum ráð fyrir að stórkostlegar lækkun á vísitölum dopamínmerkis í NAc af ΔFosB músum hafi líklega haft áhrif á breytingu á VTA dópamínsprótein taugafrumum, þótt ΔFosB sé ekki ofþétt í þessum taugafrumum. Þess vegna skoðuðum við tjáningu dópamín tengdar gena í VTA, þar á meðal týrósínhýdroxýlasi og dópamínflutningafyrirtækinu. Styrkur týrósínhýdroxýlasasa og dópamínflutnings eru jákvæð í tengslum við dópamínframleiðslu. Það var stefna fyrir ΔFosB músum að sýna minnkað tyrosínhýdroxýlasa og veruleg lækkun dópamínflutnings, í samræmi við dysregulering á dópamínmerkjum í NAc. Þar sem þessar basal lækkun á dópamín-skyldum genum í VTA af ΔFosB músum endurspeglar væntanlega breyttan viðbrögð frá NAc við langtíma ΔFosB yfirþrýsting, við skoðuðum tjáningu BDNF viðtaka, TrkB, sem hugsanlegt kerfi NAc viðbrögð við VTA (32). Líkur á týrósínhýdroxýlasasa og dópamínflutningsaðferð sýndu TrkB tjáning einnig að vera basalt minni í ΔFosB músum sem ekki náðu gildi þegar leiðrétt var fyrir margar samanburður. BDNF-TrkB flókið getur verið retrogradely flutt og starfa innan VTA til að hafa áhrif á staðbundin genþekkingu og stuðla að vaxtarvöxtum og viðhaldi (33). Ennfremur getur BDNF virkjun prótynaptískrar TrkB innan NAc beint örvað dópamínviðtaka (32), sem styður undirliggjandi minnkun dópamínmerkis í þessum músum.
Dynorphin virkjun k-ópíóíðviðtaka stjórnar dopamínmerki og er annar aðferð þar sem NAc veitir endurgjöf á VTA (34). Við komumst að því að κ-ópíóíð viðtaka tjáning í VTA sýndi tilhneigingu til að minnka í ΔFosB músum. Þar sem ΔFosB overexpression hefur verið sýnt fram á að minnka dynorphin tjáningu í NAc (20), ΔFosB mýs hafa líklega verulega lækkun á neti VTA κ-ópíóíðvirkjun. Þrátt fyrir að dynorphin-merki hafi venjulega hamlandi áhrif á dópamín taugafrumur (35), sýna rottur sem sýna aukna lyfjamisnotkun misnotkunar minna magn af dynorphin í NAc og benda á hlutverk basal minnkaðs dynorphin signalis til að auka umbununæmi (36 , 37). Dregregla á dynorphin - κ-ópíóíðkerfinu hefur verið tengd við öflun og viðvarandi lyfjamisnotkun, sem styður mikilvægt jafnvægi ópíóíðmerkja við eðlilegt horf dópamíns (38).
Á grundvelli gefandi getu orkugjafar HF mataræði sögðum við að dysregulering í dópamín- og ópíóíðbónusmerkjum í ΔFosB músum myndi ráðleggja þessar mýs að auka endurgjaldsvörun við slíkt mataræði og þannig að staðla launakerfið með virkjun á blóðþrýstingslækkunum -VTA-NAc hringrás. Á sex vikna mataræðisáhrifum komst ekki fram nein munur á fæðuupptöku milli ΔFosB og stjórnarmúsa, sem bendir til þess að breytingar sem fundust í lífefnafræðilegum og sameindamerkjum merkisverðlauna í ΔFosB músum voru ekki vegna mismunar á hitaeiningum sem neytt er. Eins og búist var við, dregið úr basal munur sem fannst í pCREB, heildar CREB, BDNF, DARPP-32 og κ-ópíóíð viðtakaþéttni milli ΔFosB og stjórnmúsar voru dregið úr, líklega vegna aukinnar dópamínframleiðslu í ΔFosB músum á HF (29, 39-41) .
Rannsókn á bæði týrósínhýdroxýlasi og dópamínflutningsaðferðinni í VTA sýndu óvart andstæðar viðbrögð við ΔFosB og stjórnmúsum eftir HF. Stjórntýsir sýndu lækkun týrosínhýdroxýlasa og dópamínflutnings tjáningu, en ΔFosB mýs sýndu aukin tjáningu bæði þessara dópamín tengdar gena. Athyglisvert er að týrósínhýdroxýlasa tjáning er breytt í VTA með langvarandi kókaíni eða metamfetamín gjöf (42-44), sem bendir til þess að ΔFosB mýs megi finna náttúrulegan ávinning af HF meira áberandi en stjórna músum.
Til að kanna hvernig hugsanleg vísbendingar um inntöku vítamíns geta verið að endurspegla merki sem endurspegla orkujafnvægi, voru einnig skoðaðar leptínviðtaka og orexínviðtaka-1. Lyfið í blóðrásinni er aukið með HF, og leptín getur síðan komið fram við VTA til að breyta dópamínmerkjum (18, 45). VTA leptín viðtaka tjáning var samdráttur minnkað með HF bæði í ΔFosB og stjórn músum, í samræmi við svipaðan þyngdaraukning og mataræði meðan á HF stendur. Hár fitu jók einnig tjáningu á orexínviðtaka-1 í VTA af báðum FFB og stjórnmúsum. Orexín virkjar dópamín taugafrumur í VTA, stuðlar að VTA plasticity og eykur dópamínmagn í NAc (46-48). Mikið fitusæði hefur reynst auka orexín tjáningu í músum, í samræmi við athuganir okkar (49, 50). Þannig getur aukin tjáning orexínviðtaka og breytingar á leptínmerki í VTA stuðlað að fæðulaun í bæði ΔFosB og stjórnmúsum, sem styður samhæfingu milli leiða sem miðla orkujöfnuðum og þeim sem eru bundnir beint til verðlauna.
Til að kanna streituvaldandi áhrif á afturköllun launanna, voru mýs skoðuð í opnum vettvangsprófum 24 klst. Eftir að HF var fjarlægt. ΔFosB mýs voru næmari fyrir bráðum áhrifum valinna fæðubótarefna, sem sýndu aukna vökvavirkni og fecal boli framleiðsla á opnum vettvangi í skáldsögu samanborið við alla aðra eftirlit og matarhópa. ΔFosB mýs sýndu einnig áhugavert hegðunarmynstur í þessu prófi sem bendir til verðlauna og streitu næmi, með HF mataræði sem upphaflega lækkaði fecal boli framleiðslu í samanburði við chow og afturköllunin aftur að auka þetta kvíða tengda svörun. Þessi aukning á virkni á opnu sviði fylgdist ekki með breytingum á orexín tjáningu, sem bendir til tengsl við streituvaldandi vökva sem ekki er aðeins áhrif breytinga á orexín miðlaðri merkingu. Á heildina litið styðja þessi gögn tilgátan okkar að ΔFosB mýs myndu vera næmari fyrir bráðum áhrifum ákjósanlegra fæðuupptöku vegna aukinnar næmni þeirra.
Hvernig leiddi langtímabreyting á ΔFosB í NAc til slíkra breytinga á hegðun og verðbótum? Við höfum lagt til fyrirmynd af VTA tilheyrandi uppgötvun þar sem breyting á viðbrögð frá NAc og blóðþrýstingslosunum gefur til kynna um verðlaunastöðu til að ákvarða reglur dópamínkerfisins sem geta stutt tengsl milli dánareglna á endurgreiðsluferli og tilhneigingu til offitu (mynd 8). Við útsetningu HF eru margar inntak sem endurspegla bæði orkujafnvægi og verðlaun ríkissamstæðu á VTA. Aukin leptín- og orexínmerki og breytt ábending frá NAc til hliðarhimnunnar geta haft áhrif á hvernig þessi óexigenísk merki bregðast við HF í ΔFosB músum (17, 18, 45, 47, 51-53). Mikil fituvaldandi hækkun í BDNF getur veitt endurgjald endurgreitt til VTA, frekar að stuðla að breytingum á dópamín-tengdum genþrýstingi.
Mynd 8
Hár fitu (HF) mataræði eðlilegur óreglulegur verðlaunaukning í ΔFosB músum
Þessar niðurstöður afmarka mólmerki af næmi næmanna og benda til þess að langtíma dysregulering dópamínkerfisins gæti ráðstafað einstaklingi til fíkn og offitu. Enn fremur veita þessi gögn mikilvægt skref í átt að því að ákvarða hugsanlega nýja meðferðarmarkmið við meðferð og forvarnir gegn offitu og öðrum sjúkdómum sem geta komið fram á launakerfið. Í framtíðinni verður mikilvægt að rannsaka hvernig þetta kerfi bregst við að fjarlægja HF mataræði, auk þess að kanna hvaða kynlíf munur er á næmi fyrir verðlaun og háu fituáhrifum á mataræði.
Viðbótarefni
Supp. Aðferðir
Smelltu hér til að skoða. (61K, doc)
Acknowledgments
Höfundarnir óska að þakka Cathy Steffen um aðstoð við dýrarækt og flutning. Þessi vinna var studd af styrk frá Háskóla Pennsylvania Diabetes Center (DK019525) og með styrkjum frá National Institute of Mental Health (R01 MH51399 og P50 MH66172) og National Institute on Drug Abuse (R01 DA07359).
Neðanmálsgreinar
Fjármálaeftirlit: Allir höfundar lýsa því yfir að þeir hafi ekki líffræðilegan fjárhagslegan hagsmuni eða hugsanlega hagsmunaárekstra.
Meðmæli
1. Wadden TA, Berkowitz RI, Womble LG, Sarwer DB, Phelan S, Cato RK, Hesson LA, Osei SY, Kaplan R, Stunkard AJ. Randomized trial of lifestyle modification and pharmacotherapy for obesity. N Engl J Med. 2005; 353 (20): 2111-20. [PubMed]
2. Blendy JA, Strasser A, Walters CL, Perkins KA, Patterson F, Berkowitz R, Lerman C. Minni nikótínávinningur í offitu: kross-samanburður í mönnum og músum. Psychopharmacology (Berl) 2005
3. Franken IH, Muris P. Einstök munur á næmi næmsins tengist matarþrá og hlutfallslega líkamsþyngd hjá heilbrigðum konum. Matarlyst. 2005; 45 (2): 198-201. [PubMed]
4. Kelley AE, Berridge KC. The taugafræði náttúrulega umbun: mikilvægi ávanabindandi lyfja. J Neurosci. 2002; 22 (9): 3306-11. [PubMed]
5. Cagniard B, Balsam PD, Brunner D, Zhuang X. Mýs með tímabundið hækkun dópamíns sýna aukna hvatningu, en ekki að læra, til matarverðs. Neuropsychopharmacology. 2006; 31 (7): 1362-70. [PubMed]
6. Liang NC, Hajnal A, Norgren R. Sham fóðrun kornolía eykur dopamín í rottum. Am J Physiol Reglur Integr Comp Physiol. 2006; 291 (5): R1236-9. [PubMed]
7. Mendoza J, Angeles-Castellanos M, Escobar C. Aðlögun með góða máltíð veldur matvælaframleiðslu og c-Fos tjáningu á launasvæðum í heilanum. Neuroscience. 2005; 133 (1): 293-303. [PubMed]
8. Schroeder BE, Binzak JM, Kelley AE. Algengt fyrirbyggjandi meðferð við barkstera eftir að hafa verið útsett fyrir nikótín- eða súkkulaðistengda samhengismerkjum. Neuroscience. 2001; 105 (3): 535-45. [PubMed]
9. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: viðvarandi sameindarrof fyrir fíkn. Proc Natl Acad Sci US A. 2001; 98 (20): 11042-6. [PMC frjáls grein] [PubMed]
10. Teegarden SL, Bale TL. Minnkun á fæðuáhrifum veldur aukinni tilfinningalegni og hættu á mataræði. Biol geðdeildarfræði. 2007; 61 (9): 1021-9. [PubMed]
11. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Nestler EJ, Taylor JR. dFosB í Nucleus Accumbens stjórnar matvælaörvandi hljóðfæraleik og hvatningu. Journal of Neuroscience. 2006; 26 (36): 9196-9204. [PubMed]
12. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Transgenic dýr með örvandi, miðlæga gen tjáningu í heila. Mol Pharmacol. 1998; 54 (3): 495-503. [PubMed]
13. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Tjáning á umritunarþáttinum deltaFosB í heilanum stýrir næmi fyrir kókaíni. Náttúran. 1999; 401 (6750): 272-6. [PubMed]
14. Bale TL, Dorsa DM. Kynjamismunur og áhrif estrógens á oxytósínviðtaka boðbera ribonucleic sýru tjáningu í blóðflagnafæðablóðfalli. Endocrinology. 1995; 136 (1): 27-32. [PubMed]
15. Avena NM, Long KA, Hoebel BG. Sykurháð rottur sýna aukið svar við sykri eftir fráhvarf: vísbendingar um sykursviptingu. Physiol Behav. 2005; 84 (3): 359-62. [PubMed]
16. Mun MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Nucleus accumbens mu-ópíóíða stjórna inntöku á fitusnyrtri mataræði með því að virkja dreifð heila net. J Neurosci. 2003; 23 (7): 2882-8. [PubMed]
17. Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Orexínmerki í ventral tegmental svæðinu er krafist fyrir fitusótt matarlyst sem orsakast af ópíóíð örvun kjarna accumbens. J Neurosci. 2007; 27 (41): 11075-82. [PubMed]
18. Hommel JD, Trinko R, Sears RM, Georgescu D, Liu ZW, Gao XB, Thurmon JJ, Marinelli M, DiLeone RJ. Leptín viðtaka merki í miðgrænu dópamín taugafrumum stjórnar fóðrun. Neuron. 2006; 51 (6): 801-10. [PubMed]
19. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatal frumu-sértæk yfirfækkun DeltaFosB eykur hvata fyrir kókaín. J Neurosci. 2003; 23 (6): 2488-93. [PubMed]
20. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Ómissandi hlutverk DeltaFosB í kjarnanum accumbens í morfín aðgerð. Nat Neurosci. 2006; 9 (2): 205-11. [PubMed]
21. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Kókain-framkölluð dendritic hryggmyndun í D1 og D2 dópamínviðtaka sem inniheldur miðlungs spiny neurons í kjarnanum. Proc Natl Acad Sci US A. 2006; 103 (9): 3399-404. [PMC frjáls grein] [PubMed]
22. Blendy JA, Maldonado R. Erfðafræðileg greining á fíkniefni: hlutverk bindispróteins fyrir cAMP viðbrögð. J Mol Med. 1998; 76 (2): 104-10. [PubMed]
23. Nestler EJ. Molecular kerfi fíkniefni. Neuropharmacology. 2004; 47 1: 24-32. [PubMed]
24. Tanis KQ, Duman RS, Newton SS. CREB Binding og virkni í heila: svæðisbundin sérkenni og innleiðing með rafgreiningu. Biol geðdeildarfræði. 2007
25. Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chromatin remodeling er lykilatriði undirliggjandi kókaín-völdum plasticity í striatum. Neuron. 2005; 48 (2): 303-14. [PubMed]
26. Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, Dileone RJ, Rios M, Sjálf DW. Dynamic BDNF virkni í kjarnanum sem fylgir notkun kókaíns eykur sjálfa gjöf og afturfall. Nat Neurosci. 2007; 10 (8): 1029-37. [PubMed]
27. Svenningsson P, Nairn AC, Greengard P. DARPP-32 miðlar aðgerðir margra fíkniefna um misnotkun. Aaps J. 2005; 7 (2): E353-60. [PMC frjáls grein] [PubMed]
28. Palmer AA, Verbitsky M, Suresh R, Kamens HM, Reed CL, Li N, Burkhart-Kasch S, McKinnon CS, Belknap JK, Gilliam TC, Phillips TJ. Mismunur á kynmyndun á músum sem valin eru mismunandi fyrir metamfetamín næmi. Mamm Genome. 2005; 16 (5): 291-305. [PubMed]
29. Bogush A, Pedrini S, Pelta-Heller J, Chan T, Yang Q, Mao Z, Sluzas E, Gieringer T, Ehrlich ME. AKT og CDK5 / p35 miðla heilaafleidda taugafrumuvirkni framköllun DARPP-32 í miðlungs stækkandi taugafrumum in vitro. J Biol Chem. 2007; 282 (10): 7352-9. [PubMed]
30. Benavides DR, Bibb JA. Hlutverk Cdk5 í misnotkun lyfja og plasticity. Ann NY Acad Sci. 2004; 1025: 335-44. [PubMed]
31. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Áhrif langvarandi útsetningar fyrir kókaíni eru stjórnað af taugafrumum próteininu Cdk5. Náttúran. 2001; 410 (6826): 376-80. [PubMed]
32. Blochl A, Sirrenberg C. Neurotrophins örva losun dópamíns úr mesencephalic taugafrumum úr rottum með Trk og p75Lntr viðtaka. J Biol Chem. 1996; 271 (35): 21100-7. [PubMed]
33. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Mikilvægt hlutverk BDNF í mesólimbískum dópamínferli í félagslegum ósigur álagi. Vísindi. 2006; 311 (5762): 864-8. [PubMed]
34. Nestler EJ, Carlezon WA., Jr The mesolimbic dópamín verðlaun hringrás í þunglyndi. Biol geðdeildarfræði. 2006; 59 (12): 1151-9. [PubMed]
35. Ford CP, Beckstead MJ, Williams JT. Kappa ópíóíð hömlun á díamínhömjandi eftirmyndandi straumum. J Neurophysiol. 2007; 97 (1): 883-91. [PubMed]
36. Nylander I, Vlaskovska M, Terenius L. Brain dynorphin og enkephalin kerfi í Fischer og Lewis rottum: Áhrif morfín umburðar og fráhvarfs. Brain Res. 1995; 683 (1): 25-35. [PubMed]
37. Nylander I, Hyytia P, Forsander O, Terenius L. Mismunur á áfengisfrumum (AA) og áfengisrannsóknum (ANA) rottum í prodynorfín- og próenkefalínkerfum. Áfengislínur Exp Res. 1994; 18 (5): 1272-9. [PubMed]
38. Kreek MJ. Kókain, dópamín og innræna ópíóíðkerfið. J fíkill Dis. 1996; 15 (4): 73-96. [PubMed]
39. Carlezon WA, Jr, Duman RS, Nestler EJ. Mörg andlit CREB. Stefna Neurosci. 2005; 28 (8): 436-45. [PubMed]
40. Dudman JT, Eaton ME, Rajadhyaksha A, Macias W, Taher M, Barczak A, Kameyama K, Huganir R, Konradi C. Dópamín D1 viðtökur miðla CREB fosfórun með fosfórýlerun NMDA viðtakans við Ser897-NR1. J Neurochem. 2003; 87 (4): 922-34. [PubMed]
41. Sjálf DW. Regla um lyfjagjöf og leitarniðurstöður með taugabreytingum í mesólimbísk dópamínkerfinu. Neuropharmacology. 2004; 47 1: 242-55. [PubMed]
42. Beitner-Johnson D, Nestler EJ. Morfín og kókaín eiga sameiginlegar langvinnar aðgerðir á tyrosínhýdroxýlasa í dopamínvirkum heilaávöxtunarsvæðum. J Neurochem. 1991; 57 (1): 344-7. [PubMed]
43. Lu L, Grimm JW, Shaham Y, Hope BT. Molecular neuroadaptations í accumbens og ventral tegmental svæði á fyrstu 90 dagunum aflinn fráhvarf frá kókaín sjálfs gjöf hjá rottum. J Neurochem. 2003; 85 (6): 1604-13. [PubMed]
44. Shepard JD, Chuang DT, Shaham Y, Morales M. Áhrif sjálfs gjöf metamfetamíns á týrósínhýdroxýlasa og dópamín flutningsgildi í mesólimbískum og nigrostriatal dópamínleiðum rottunnar. Psychopharmacology (Berl) 2006; 185 (4): 505-13. [PubMed]
45. Fulton S, Pissios P, Manchon RP, Stiles L, Frank L, Pothos EN, Maratos-Flier E, Flier JS. Leptín reglur um mesóbúpíns dópamínferli. Neuron. 2006; 51 (6): 811-22. [PubMed]
46. Narita M, Nagumo Y, Miyatake M, Ikegami D, Kurahashi K, Suzuki T. Áhrif próteinkínasa C í orexín-völdum hækkun á utanfrumu dópamíngildum og gefandi áhrif þess. Eur J Neurosci. 2007; 25 (5): 1537-45. [PubMed]
47. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Bein þátttaka orexinergic kerfi við virkjun mesólimbísk dópamínferils og tengd hegðun sem morfín veldur. J Neurosci. 2006; 26 (2): 398-405. [PubMed]
48. Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Fields HL, Bonci A. Orexin A í VTA er mikilvægt fyrir örvun sýklalyfjameðferðar og hegðunarvanda við kókaín. Neuron. 2006; 49 (4): 589-601. [PubMed]
49. Park ES, Yi SJ, Kim JS, Lee HS, Lee IS, Seong JK, Jin HK, Yoon YS. Breytingar á orexín-A og taugapeptíði Y tjáningu í blóðþrýstingsfallinu í fastandi og fituskertum mataræði með rottum. J Vet Sci. 2004; 5 (4): 295-302. [PubMed]
50. Wortley KE, Chang GQ, Davydova Z, Leibowitz SF. Peptíð sem stjórna fæðutegund: Orexín genþrýstingur er aukin við ríkjandi þríglýseríðhækkun. Am J Physiol Reglur Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1454-65. [PubMed]
51. Zheng H, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, Berthoud HR. Peptíð sem stjórna matvæli: Matarlyst sem veldur matarlyst, virkjar taugakerfi orexínhormóna í heila og hamlar POMC taugafrumum. Am J Physiol Reglur Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1436-44. [PubMed]
52. Baldo BA, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Daniel RA, Landry CF, Kelley AE. Virkjun á undirhópi orexíns / hypókretínhýdrunarheilahormóna með GABAA viðtakamiðluðum hömlun á kjarnanum, en ekki vegna útsetningar fyrir nýju umhverfi. Eur J Neurosci. 2004; 19 (2): 376-86. [PubMed]
53. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Hlutverk til hliðarhormóns orexín taugafrumna í verðlaunum. Náttúran. 2005; 437 (7058): 556-9. [PubMed]
;