内分泌学。 2013 3月; 154（3）：1225–1234。
オンラインで公開された2013 Jan 31。 土井： 10.1210 / ja.2012-2042
および 抽象
社会的刺激に対する反応の思春期の成熟は、成人に典型的な社会的性行動に不可欠です。 顕著な社会的キュー、女性のハムスターの膣分泌物（VS）に対する男性のシリアンハムスターの応答で自然に発生する発達の変化は、社会的報酬の青年期の変化の神経内分泌メカニズムを調査するための良いモデルシステムを提供します。 性的にナイーブな大人であるが、少年ではない男性は、VSより条件付けられた場所の好み（CPP）を示し、VSは思春期前に報酬を与えられないことを示します。 この一連の実験では、著者らはVSの陽性価の青年期の増加を媒介する際のテストステロンおよびドーパミン受容体活性化の役割を調べた。 実験1は、性腺切除された成体ハムスターがVSにCPPを形成するためにテストステロンの交換が必要であることを示しました。 実験2は、テストステロン治療が幼若ハムスターがVSに対してCPPを形成するのに十分であり、ドーパミン受容体拮抗薬ハロペリドールがこれらの動物のVSに対してCPPの形成をブロックすることを示しました。 実験3と4は、低用量のハロペリドールによるVS CPPの破壊は、VSの魅力的な特性の低下の結果であり、ハロペリドールの嫌悪特性に起因しないことを示しました。 一緒に、これらの研究は、成功した成人の社会性的相互作用に必要な社会的手がかりの無条件の報酬特性が、雄ハムスターの循環テストステロンの思春期の増加の結果として生じることを示しています。 さらに、この社会的報酬はドーパミン受容体拮抗作用により防止することができ、視床下部および/または中皮質辺縁系ドーパミン作動性回路が社会的報酬のホルモン活性化の標的であることを示しています。
成功した成人の社会的相互作用と生殖の健康における社会的刺激を適切に解釈する必要性を考えると、発達心理生物学の基本的な問題は、社会情報処理の青年期の成熟の根底にある神経内分泌メカニズムの同定です。 男性のシリアンハムスターは、性的行動が女性のハムスターの膣分泌物（VS）の神経処理に依存しているため、社会的手がかりの知覚と反応の発達的変化を研究するための有用なモデルを提供します（1, 2）、およびVSに対する内分泌、神経、および行動の反応は、出生後2か月目に成熟します。これは、この種の思春期および青年期に対応します（3, 4）。 若年雄のハムスターは、VSに大人に典型的な魅力を示さない（5）。 さらに、VSは思春期後の無条件の報酬です。なぜなら、性的ナイーブな大人ではなく、若い雄のハムスターは、条件付きの場所の好み（CPP）を形成するからです（6, 7）。 VSへの魅力は、男性の性的行動のパフォーマンスと同様に、成人のテストステロンの活性化効果に依存しています（8, 9）、VSへの誘引は、若年男性のテストステロン治療によって誘発されます（5）。 ただし、VSの強化値が大人または少年ハムスターのいずれかで同様にテストステロン依存性であるかどうかは不明です。
げっ歯類の化学感覚刺激および交尾に対する重要な神経反応は、内側視索前野（MPOA）および側坐核（Acb）でのドーパミンの放出です（10–20）。 特に、ドーパミンは性的報酬の複数の側面に関係している。 たとえば、主にD2ドーパミン受容体拮抗薬であるハロペリドールの全身投与（NIMH Psychoactive Drug Screening Program、 http://pdsp.med.unc.edu）、性的にナイーブなオスのラットにおける主要な女性の視覚、聴覚、および化学感覚の手がかりに対する無条件の動機、および以前に性的行動に関連した嗅覚の手に対する条件付きの動機21, 22）。 さらに、雌のハムスターの性行動に対するCPPの形成は、D2受容体拮抗薬（23）。 しかし、他の研究では、オスのラットとマウスの性的報酬のために、CPPにはドーパミン受容体の活性化は必要ないことがわかっています（24–26）。 ドーパミン受容体の活性化がオスのハムスターのCPPからVSに必要であるかどうかは未定です。 しかし、性腺刺激を受けていない幼若ハムスターと成体ハムスターの行動の違いは、VSに対するドーパミン作動性の反応によって反映されることを知っています。 大人のハムスターは、幼若ではありませんが、MPOAのVSに応答してドーパミン放出と代謝の増加を示します（18）。 同様に、成体のハムスターは、幼若ではなく、Acb、腹側被蓋野、および内側前頭前野のVSに応答してFosを発現します（7）。 したがって、思春期全体のドーパミン作動性機能の獲得は、VS報酬と魅力に必要かもしれません。
性的報酬へのドーパミン作動性の関与は、げっ歯類のテストステロンによって規制されています。 去勢は、2から8 wk後に性行動の低下を引き起こします。これは、基底ドーパミンレベルの低下とAcbおよびMPOAの代謝回転の低下と一致します（27）。 刺激女性に対する交尾前MPOAドーパミン作動性反応の有無は、それぞれ、性腺摘出およびその後のテストステロン置換後の交尾行動の絶滅または回復を予測します（11, 28）。 さらに、ドーパミン作動薬であるアポモルフィンの全身およびMPOA内注射により、長期去勢雄ラットの性的行動を部分的に回復させることができます（29）。 最後に、テストステロン濃度とドーパミン回路は思春期に変化します（30, 31）。 したがって、この一連の研究では、テストステロンがドーパミン作動性報酬回路への影響を介して社会的報酬を活性化するという仮説をテストしました。
材料と方法
動物
シリアのハムスター（Mesocricetus auratus）はHarlan Laboratories（ウィスコンシン州マディソン）から入手し、温度と湿度が制御されたvivariaに収容され、明暗サイクルは14時間明：10時間暗で、餌は自由に摂取できます（Teklad Rodent Diet 8640; Harlan Laboratories）と水。 到着すると（年齢に関する特定の実験を参照）、幼いオスは、P18で離乳するまで、オスの同腹仔と生物学的母親と一緒に飼育されました。 離乳期のオスと成体のオスは、透明なポリカーボネート製のケージ（30.5×10.2×20.3 cm）に単独で収容されました。 すべての男性は、研究の時点で性的にナイーブであり、12つの実験でのみ使用されました。 約10ヶ月齢の500匹の成体雌ハムスターを同様の条件下で別々のビバリウムに収容し、VSの供給源として使用した。 VS分泌が最大であるホルモン誘発性発情の日の実験的制御のために、ホルモン投与の数週間前に雌ハムスターを卵巣切除した。 それらは、穏やかな膣触診によるVSの収集の前に、ゴマ油中の52μgの安息香酸エストラジオールおよび4μgのプロゲステロンをそれぞれ4時間および1時間皮下注射された。 すべての実験は、暗期の5〜XNUMX時間後にXNUMXルクス未満の赤色光の下で実施されました。 ハムスターは国立衛生研究所に従って扱われました 実験動物の世話と使用のためのガイドおよびプロトコルは、ミシガン州立大学の施設内動物管理使用委員会によって承認されました。
手術とホルモン移植
性腺切除（GDX）実験グループのハムスターは、イソフルラン麻酔による手術を受けました。 両側の縦方向の陰嚢切開を行い、結紮（成人）または焼ization（若年者）から遠位に切断して精巣を摘出しました。 GDX + 0およびGDX + Tグループにも、それぞれ2ブランクまたはテストステロン含有シラスティックカプセルを皮下に移植しました（1 5 mmおよび1 13 mmのテストステロン[Sigma-Aldrich、St. Louis、Missouri]でシールし、 4 mmシラスティック接着剤、内径1.98 mm、外径3.18 mm）。 これらのカプセルは、成人の生理学的レベルの循環テストステロンを生成します（〜2〜7 ng / ml、 テーブル1）。 被験者は手術時にケトプロフェン鎮痛剤の皮下注射を受け、再び24時間後に注射を受けました。
血漿テストステロン対策
CPP試験または最後の嗅覚試験の完了から1時間後に、ハムスターをペントバルビタールナトリウムの過剰投与（150 mg / kg、腹腔内）で安楽死させ、循環血中テストステロンの放射免疫測定のために心臓穿刺により最終血液サンプルを採取しました。 血漿テストステロンの重複した50–μlサンプルは、Coat-A-Count Total Testosterone Kit（Diagnostic Products、Los Angeles、California）を使用した単一のアッセイで分析されました。 最小検出可能濃度およびアッセイ内変動係数は、実験0.08および7.9で1 ng / mlおよび2％、実験0.12および5.8でそれぞれ3 ng / mlおよび4％でした。 5匹（実験2）および2（実験3）ハムスターは、テストステロンカプセルの中間実験を削除し、行動分析またはテストステロン分析から除外されました。 最終的なグループサイズは テーブル1.
CPPテスト
前に説明したように、場所の優先条件付けが行われました（6, 7）1中央コンパートメントと2外側コンパートメント（Med Associates、St。Albans、Vermont）を備えた装置内。 これらの外側のコンパートメントは、明確な視覚的、触覚的、嗅覚的な手がかりとコンパートメント固有の関連付けを可能にするように設計されました。 CPPレジメンが開始される前に、動物は2 dの取り扱いと新しいチャンバーに順応しました。 CPPレジメンには、事前テスト、10コンディショニングセッション、およびテストが含まれていました。これらはすべて、各ハムスターの同じ時刻（±1 h）に行われました。 必要なコホートの数を減らし、対照動物を刺激の匂いにさらさないようにするため、対照動物は別の部屋に収容し、暗室は8：00 amから始まり、9：00 amでテストしました。 実験動物は、暗期が午後2：00に始まり、試験が午後3：00に始まる部屋に収容されました。
事前テスト（中央のコンパートメントで2分間、その後すべてのコンパートメントに15分間アクセス）を使用して、刺激が存在しない状態で各ハムスターの最初のコンパートメントの好みを決定しました。 ハムスターがより多くの時間を費やした外側の区画は、最初に好まれた区画として定義されました。 [最初に優先されないコンパートメントでの時間/（最初に優先されるコンパートメントでの時間+最初に優先されないコンパートメントでの時間）]として定義される優先スコア、および[最初に優先されるコンパートメントでの時間-最初に優先されるコンパートメントでの時間]として定義される差異スコア好ましくない区画]は各動物について計算された（6）。 各ハムスターが十分な情報に基づいて選好する機会を確保するために、少なくとも5回各コンパートメントに入らなかったハムスターは、今後のトレーニングから除外されました。 動物は実験群と対照群に割り当てられ、異なる部屋の初期房室の好みと好みのスコアおよび同腹児の表現についてグループを同一視した。
事前テストの後、ハムスターは、サイドコンパートメントで合計10 30分のコンディショニングセッション、連続した日に1日あたり1セッション、5無刺激セッションと5刺激ペアセッションを交互に受け取りました。 無刺激条件付けセッション中、実験群と対照群の両方のハムスターは、最初に好まれた区画に置かれ、そこで単独で留まった。 刺激ペアのコンディショニングセッション中、実験グループのハムスターは、刺激のある最初は好ましくないコンパートメントに配置されました。 対照群のハムスターも最初は好ましくない区画に入れられたが、刺激は与えられなかった。 このグループは、コンディショニング中の慣れに起因するテスト全体の好みや差のスコアの変化を定量化するのに役立ちました。 CPP装置は、各動物の間に25％エタノールを使用し、各調整日の終わりに75％エタノールを使用して徹底的に洗浄しました。
1および2の実験では、VSがコンディショニングセッションの刺激として使用されました。 使用の1時間前に、約500μlVSを30の雌から収集し、混合して、各雄が同じ刺激にさらされるようにしました。 約15μlVSを、2-mlエッペンドルフチューブ、各男性用の1チューブに詰めた水で湿らせた綿ガーゼに適用しました。 テストの直前に、VSグループのVSペアコンディショニングセッションで、最初は好ましくないコンパートメントの背面壁の上部にある男性からチューブを手の届かないところに配置しました。 空のエッペンドルフチューブは、すべてのコンディショニングセッションのコントロールグループと無刺激コンディショニングセッションのVSグループに使用されました。 VSの不揮発性成分への曝露を確実にするために、残りの〜200μlVSを1.5 mlの鉱油と混合し、この混合物の約10μlを金属スパチュラでVSグループのハムスターの鼻に直接適用しましたハムスターは、VSペアコンパートメントに配置されました。 すべてのコンディショニングセッションではコントロールグループのハムスターの鼻に、刺激なしのコンディショニングセッションではVSグループのハムスターの鼻にきれいな油を塗りました。
最後の条件付けセッションの24時間後、事前テストに使用したのと同じ手順に従って、ハムスターの場所の好みをテストしました。 事前テストの場合と同様に、刺激は存在せず、各動物の選好度と差のスコアが計算されました。
実験1：成体ハムスターのVSに対するCPPの形成に精巣ホルモンは必要ですか？
この実験では、成体ハムスターのCPPからVSへの表示に循環精巣ホルモンが必要かどうかをテストしました。 この研究室でのパイロット研究により、性腺切除後のコンディショニングが1週に開始されたときに、オスのハムスターがVSに対してCPPを形成したことが示されました（32）、精巣ホルモンの推定活性化効果は、男性のげっ歯類の生殖腺摘出後何週間にもわたって起こる性行動の漸進的な低下と同様に、急性に洗い流されないことを示唆している（33）。 したがって、この実験では、コンディショニングの開始前にGDX 10 wkであったハムスターを調べました。 成人は全員、出産後のP56-63に実験室に到着しましたが、到着をずらしてグループを同時にテストできるようにしました。 刺激のない対照動物は生殖腺に無傷で放置し、P64–71で事前にテストしました。 GDX + 0グループのハムスターは、P57–64でGDXであり、10 wkでは操作されず、P127–134、1 wkでは空のカプセルで移植され、P134–141で事前テストされました。 GDX + TグループはGDXであり、P57-64、1 wkでテストステロンカプセルを与え、P64-71での事前テストを行い、重要なCPPを実証するためのポジティブコントロールとして使用しました。 この配置では、さまざまな若い大人の年齢で動物の条件付けとテストが必要でしたが、若い大人でこの変数を制御した以前の実験では、テストステロンに対する行動または神経反応の年齢に関連した違いは観察されていません（34）。 さらに、GDX + 0グループと同様の年齢のGDX /テストステロン処理雄ハムスターは、VSに対してCPPを確実に形成します（35）。 したがって、無刺激コントロールとGDX + Tグループを10週間実験室で維持する必要はなく、そのためのコストを正当化できないと考えました。
実験2：幼若ハムスターのCPPからVSへのテストステロンとドーパミン受容体の活性化は必要ですか？
この実験では、テストステロンで促進されたCPPへのドーパミンの関与を、雄のハムスターのVSに対してテストしました。 すべての動物はP12に到着し、P20で事前にテストされ、3コホートで実行されました。 他のグループはGDXであり、テストの1週間前にP13、1でブランクまたはテストステロンカプセルを投与したのに対し、生殖腺無傷のハムスターを刺激なしのコントロールとして使用しました。 GDX + 0グループは、低レベルのテストステロンの幼体（生殖腺無傷の動物のように）がVSに対してCPPを示さないことを確認するために含まれています。 テストステロン治療がCPPをVSに誘導できるかどうかを判断するために、GDX + Tグループが含まれました。 残りのグループはすべてGDX + Tであり、それぞれVSおよび刺激なしのコンディショニングセッションの数分前に、ハロペリドール（0.05、0.15、および0.45 mg / kg）またはプロピレングリコール媒体の30の腹腔内注射を行いました。 ハロペリドールは強力なD2拮抗薬ですが、D1、アドレナリン、シグマの各受容体への結合も効果的ではありません（NIMH Psychoactive Drug Screening Program、 http://pdsp.med.unc.edu/）。 刺激なし、GDX + 0およびGDX + T対照群は、両方のコンディショニングセッションの1分前に30プロピレングリコールビークル注射を受けました。
実験3：ドーパミン受容体拮抗作用だけで、幼若ハムスターの場所の好みが変わりますか？
この実験は、実験2で使用されたハロペリドールの用量が、条件付け場所嫌悪（CPA）を誘発するように、テストステロン処理ハムスターに固有の嫌悪特性があるかどうかを判断するために設計されました。 そうした場合、実験2でのVSのCPPの防止は、ハロペリドール条件の環境の回避に起因する可能性があります。 すべての動物は、P11またはP12に到着し、P13でGDX + Tであり、P20で事前テストされ、2日までにずらされた1コホートで実行されました。 記述されたものと同様の条件付けパラダイムが使用されましたが、ハロペリドールは最初の好みを減らすために最初に好まれるチャンバーで与えられ、VSは使用されませんでした。 ハロペリドールの生理的影響の指標として、運動中の動き（赤外線ビーム切断の変化の数）および調整セッション中の糞便排出も定量化されました。
無条件の誘引力テスト
実験4：ドーパミン受容体拮抗作用は、幼若ハムスターのVSへの誘引に影響しますか？
この実験は、ハロペリドールがVSの魅力的な特性を低下させるかどうかを決定しました。 十分な調査が行われていないために、予備試験後（およびハロペリドールへの暴露前）に実験3から除外された動物がここで使用されました。 したがって、これらのオスはP11–12に到着し、P13でGDXおよびテストステロン処理され、P5–28で32日間にわたってテストされました。 VSは、記載されているように、テストの初日前の刺激女性1から収集されました。 〜14メスのVSを100μlミネラルオイルと一緒に1 Eppendorfチューブの5に混合しました。 毎日、試験開始の4分前に1チューブが解凍されるまで、チューブを30°Cで保管しました。 試験の直前に、金属スパチュラを使用して、約15μlのクリーンミネラルオイルまたはVS混合物をガラススライド（ハムスターあたり1）に塗りつけました。 きれいなVSスミアスライドを、ガラス水槽の両側の壁に沿って約5 cm（51×26×31.5 cm）テープを貼り付け、36, 37）。 匂いの場所は、グループ間および動物内で相殺されました。
1および5日目に、試験の30分前に動物に腹腔内プロピレングリコールビヒクルを注射した。 2から4の日に、動物に0.05、0.15、または0.45 mg / kgハロペリドールを平衡した順序で注射しました。 動物は、試験する直前までコロニールームに残っていました。 テストを開始するために、ハムスターを水槽の真ん中に置き、行動をライブスコアで記録し、5分間ビデオを記録しました。 テストが完了したら、ハムスターをコロニーの部屋に戻し、スライドを取り除き、水槽を75％エタノールで洗浄しました。 ハムスターが各スライドの調査に費やした時間（スライドから0.5 cm未満の鼻の長さ）は、VSチューブの位置を知らないスコアラーによるビデオ録画から定量化されました。 アトラクションスコア（VSスライドの時間-オイルスライドの時間）を各動物について計算しました。
統計分析
すべての対照群と実験群が同様の初期選好度と差のスコアを持っていることを確認するために、一元配置分散分析を使用しました。 実験1から3で刺激がCPPまたはCPAを誘発したかどうかを評価するために、以前に報告されたように（7）。 選好と差異スコアの変化は、各ハムスターのテスト測定値から事前テスト測定値を差し引くことによって決定されました。 対照動物では、無条件の変化の基準を提供するために、選好スコアと差異スコアの平均変化測定値が決定されました。 次に、各実験動物のスコアから選好および差異スコアの対照変化測定値を差し引いて、無条件の変化を補正した。 したがって、管理措置は図に示されていません。 次に、選好と差異スコアの修正された変更が1サンプルで使用されました。 t 各グループ内でテストし、値をゼロと比較して、偶然の好みとの有意差を評価します。 これらの統計的手順は、ペアを使用した以前の研究の手順と同様です。 t グループ内の選好および差異スコアの変化を決定するテスト（6, 38–43）。 さらに、対照動物で観察された無条件の変化を補正することにより、これらのチャンバーに繰り返し同等の曝露を行った後、外部コンパートメントの初期設定が時々減少する可能性があるため、偽陽性結果の可能性が減少します（6, 7）。 CPPが確立されたと結論付けるためには、選好度と差の両方のスコアに大きな変化が必要でした。 実験3、ペアのサンプルの生理学的変数に対するハロペリドールの効果を評価するには t テストを使用して、各ハロペリドール投与群内のハロペリドールおよびビークル対チャンバーでの運動と糞便排出量を比較しました。
ドーパミン受容体拮抗薬ハロペリドールが実験4のVSへの無条件の誘引に影響を与えたかどうかを評価するために、反復測定ANOVAを使用して、誘引スコアに対するハロペリドール投与の効果をテストしました。 t テストのフォローアップとBonferroniの修正。 さらに、1サンプル t テストを使用して、各用量グループの選好スコアと差異スコアが、それぞれ偶然、半分、またはゼロと有意に異なるかどうかを判断しました。 試験の初日と最終日のビヒクル注射からの測定値は異ならなかったし、動物ごとに一緒に平均された。 反復測定ANOVAを使用して、線交差の数に対する薬物の効果を決定し、自発運動に対する薬物の効果を示しました。 すべての分析において、 P <.05は有意であると見なされ、すべての統計分析はSPSSソフトウェア（PASW Statistics 20; SPSS、IBM Company、イリノイ州シカゴ）を使用して行われました。
結果
実験1：成体ハムスターのVSに対するCPPの形成に精巣ホルモンは必要ですか？
長期GDXアダルトハムスターは、VSのCPPを形成できませんでした（図1）。 0-sampleのように、VSでの条件付けの結果として、GDX + 1グループの選好または差スコアの変化は見られませんでした t テストでは、どちらの修正された好みの変更も（t(9) = −1.98、NS）または差（t(9) = 1.19、NS）スコアはゼロとは大きく異なりました。 対照的に、GDX + Tグループは、1-wayとして、VSに対してCPPを示しました。 t テストにより、修正された選好の変化（t(9) = 4.06、 P <.01）と違い（t(9) = - 4.23、 P <.01）スコアはゼロとは有意に異なっていました。 グループは最初の選好スコアに違いはありませんでした（F(2,29) = 2.17、NS）または差分スコア（F(2,29) = 1.95、NS）。 したがって、最近の精巣ホルモンへの曝露は、VS誘発CPPに必要です。
実験2：幼若ハムスターのCPPからVSへのテストステロンとドーパミン受容体の活性化は必要ですか？
テストステロンは、幼若ハムスターのVSのCPPを促進するのに十分でした（図2）。 車両注射を受けたGDX + T VSグループは、1-wayとして、VSに対するCPPを示しました t テストにより、修正された好みの変更（t(5) = 3.11、 P <.05）と違い（t(5) = - 2.77、 P <.05）スコアはゼロとは有意に異なっていました。 GDX + 0 VSグループは、条件付けの結果として、選好スコアまたは差異スコアのいずれにも有意な修正された変化を示しませんでした（t(6) = 0.09 [NS]および t(6) = −1.74 [NS]、それぞれ）同様の濃度の循環ホルモンを含む生殖腺無傷の少年に見られる複製効果（7）。 さらに、ドーパミン受容体拮抗作用は、T処理したハムスターのVSに対するCPPをブロックしました（図2）。 CPPは、すべての3用量でハロペリドールによってブロックされました：0.05-、0.15-、および0.45-mg / kg GDX + T VSグループは、嗜好スコアの修正された変更を示しませんでした（t(7) = 0.35 [NS]、 t(6) = 0.52 [NS]、および t(7) = −0.10 [NS]、または差スコア（t(7) = −0.44 [NS]、 t(6) = −0.18 [NS]、および t(7) = 0.31 [NS]、それぞれ）条件付けの結果としてゼロとは著しく異なっていました。 グループの初期選好度スコアに違いはありませんでした（F(5,47) = 0.27、NS）または差分スコア（F(5,47) = 0.26、NS）。
実験3：ドーパミン受容体拮抗作用だけで、幼若ハムスターの場所の好みが変わりますか？
ハロペリドールの低用量の2は嫌悪的ではなかった（図3）。 0.05または0.15 mg / kgのいずれのグループも、1-wayとしてハロペリドールに対するCPAを示しませんでした t テストでは、どちらの修正された好みの変更も（t(7) = −0.23 [NS]および t(8) = 0.55 [NS]、それぞれ）または差（t(7) = −0.02 [NS]および t(9) = −0.54 [NS]、それぞれ）スコアはゼロとは有意に異なっていました。 ハロペリドールの最高用量に対するCPAが検出されました。 一方通行 t テストでは、修正された選好度スコアの変化がゼロと有意に異なることが示されましたt(7) = 2.55、 P <.05）、しかし差スコアの修正された変化はそうではありませんでした（t(7) = −1.88、NS）。 グループの初期選好度スコアに違いはありませんでした（F(3,32) = 0.01、NS）または差分スコア（F(3,32) = 0.14、NS）。 ハロペリドールは運動活動と糞便の数にほとんど影響を与えなかった（図4）。 ペアのサンプル t テストでは、0.00-、0.05-、0.15-、または0.45-mg / kgの用量でハロペリドールが運動に影響を及ぼさないことが実証されました（t(8) = −0.26 [NS]、 t(8) = 0.28、[NS]、 t(8) = 0.26 [NS]、および t(8) = 1.21 [NS]、それぞれ）。 0.45-mg / kgの投与量で糞便排出量が増加しました（t(8) = - 2.67、 P <.05）、ただし0.00、0.05、または0.15 mg / kgの用量ではない（t(8) = −1.10 [NS]、 t(8) = −0.59 [NS]、および t(8) = −1.74 [NS]、それぞれ）。
実験4：ドーパミン受容体拮抗作用は、幼若ハムスターのVSへの誘引に影響しますか？
ドーパミン受容体拮抗作用は、用量依存的にVSへの誘引に影響を与えた（図5）。 反復測定分析では、Greenhouse-Geisser補正によるアトラクションスコアに線量の有意な効果が観察されました。 F(1.42,11.38) = 9.802、 P <.01、フォローアップで t テストでは、車両スコアは0.05-、0.15-、および0.45-mg / kg用量スコアとは著しく異なりました（t(8) = −4.74、−3.46、および−3.80、すべて P <.01、それぞれ）。 ただし、スライド間の偶然の好み（ゼロ）との差スコアを比較する1サンプルのt検定は、VSへの誘引がビヒクルグループのように0.15 mg / kgグループでまだ無傷であることを示しています：0.00-および0.15-。 mg / kgの用量誘引スコアは偶然とは有意に異なっていた（t(8) = 4.22、 P <.01および t(8) = 2.81、 P <.05、それぞれ）、一方、0.05および0.45 mg / kgの用量スコアは偶然と異ならなかった（t(8) = 1.72および-0.11、それぞれNS）。 反復測定ANOVAによる線交差の数に対する線量の影響は見つかりませんでした（F(3,24) = 0.11、NS）、データは表示されていません。 したがって、ハロペリドールは、いくつかの用量でVSへの誘引を有意に減少させた。
生理学的対策
生理学的測定値は テーブル1 両方の年齢で循環テストステロンを増加させるテストステロンカプセルの有効性を確認します。 同じ年齢のグループでは、体重に違いはありませんでした。
議論
これらの研究は、種固有の化学感覚刺激の報酬としての知覚がテストステロン依存性であり、ドーパミン受容体の活性化を伴うことを示しています。 具体的には、長期GDX成体雄ハムスターはVSに対してCPPを形成しないが、少年のテストステロン治療はVSに対してCPPを形成するのに十分であることがわかった。 さらに、主にD2受容体拮抗薬のハロペリドールは、テストステロン処理された幼若ハムスターのVSに対するCPPの発現を妨げました。 これらの発見から、社会情報処理の思春期の成熟は、循環テストステロンの思春期の増加の結果であり、ドーパミン作動性回路へのまだ正体不明の影響を介して、女性の化学感覚刺激およびそれらの刺激に関連する環境が報酬として認識される結果になると推測します。
テストステロンと社会的報酬
成人期のVS報酬にテストステロンが必要であり、幼若動物のVS報酬を促進するテストステロンの能力を考えると、1）循環テストステロンの思春期の増加と2のおかげで、VSに対する大人のような報酬反応が正常に起こると推測されます）VS報酬には、他のホルモン依存性または非依存性の青年期の発達プロセスは必要ありません。 実際、思春期中のテストステロンの組織効果は、VS報酬に必要ではありません。なぜなら、思春期中に生殖腺ホルモンを奪われ、成人期にテストステロンで治療された動物は、VS35）。 VS CPPのテストステロンの活性化効果は、青少年と成人の両方でのVSへの誘引と、思春期に通常増加する性的反応行動の研究で見られる効果を反映しています（5, 9, 44）。 テストステロンがVSに対する報酬反応を促進するメカニズムは特に特定されていませんが、D2受容体の活性化を介してドーパミン作動性トーンを促進することを提案します。
ドーパミンと社会的報酬
主にD2受容体拮抗薬ハロペリドールがVSに対するCPPをブロックしたため、本研究では、VSの価値ある解釈におけるD2受容体活性化の役割を実証しています。 この封鎖は、無条件の引力テストで示されるように、VSの魅力的で価値のある特性の低下によるものです。 これらの効果は理論的にはハロペリドールによって誘発される嗅覚能力の低下に起因する可能性があるが（45）、D2受容体の活性化は、嗅覚感度と差別を減少させることが以前に示されています（46–48）。 さらに、パイロット研究では、最高用量のハロペリドールにさらされたハムスターでも、食物嗅覚キューを容易に検出できました（49）。 さらに、実験3は、2のハロペリドールの低用量0.05および0.15 mg / kgが嫌悪的ではないことを実証したため、CPPの遮断は、動物にハロペリドール関連CPPコンパートメントを回避させるハロペリドールの嫌悪特性に起因するものではありませんでした。 さらに、ハロペリドールは運動に影響を及ぼさず、最高用量でのみ糞便排出に影響を与えました。 糞便の排泄物は古典的に不安と嫌悪感の指標として使用されてきたため（50）、これらの所見はハロペリドールの最高用量に対するCPAの形成と並行していますが、1つの注意点は、D2受容体の活性化が腸神経系の腸の運動性を阻害することです（51）。 まとめると、ハロペリドールがVSの感覚的検出を妨害した、またはこの研究で使用された低用量でそれ自体が嫌悪的であるとは考えにくい。 したがって、VSが報酬として認識されるためには、D2受容体の活性化が必要であると結論付けました。
ドーパミンは、以前、予期的または欲求的行動を含む、性的行動の複数の側面に関係してきました（52）、交尾または消費行動（53）、および性的相互作用に対する強化された応答（23）。 さらに、D2受容体でのドーパミン作動性作用は、社会的性的刺激を環境またはその他の手がかりと関連付けるために重要である可能性が高い。 非特異的ドーパミン拮抗薬の全身低用量は、雌ラットの条件付き配偶者選好をブロックする（54）、および香りのある同性パートナーとの同居中のD2アゴニストは、雄ラットの同様の香りの雄に対して同性パートナーの好みを誘発します（55）。 一夫一婦のプレーリーハタネズミでの作業は、D2の全身注射ではなく、オスのハタネズミのパートナーの好みをそれぞれ促進および妨害するため、性的報酬と刺激または個人との関連付けにおけるD2レセプターの重要性をさらにサポートします（56）。 現在の研究は、性的にナイーブな動物の無条件の社会的手がかりに対する応答を強化する際のD2受容体活性化の役割を支持し、性的にナイーブなオスのラットの主要な女性の視覚、聴覚、および化学感覚の手がかりに対する動機付けを減らすハロペリドールの効果に匹敵します（57).
扁桃体、MPOA、Acbを含む複数のドーパミン感受性脳領域がVS（7, 18）、複数の推定作用部位でドーパミン受容体に拮抗するために全身的介入が使用されました。 この研究からドーパミンの作用部位を決定することはできませんが、いくつかの可能性のある候補があります。 MPOAへのドーパミン作動薬および拮抗薬は、それぞれオスおよびメスのラットで性行動のパフォーマンスを促進および低下させます（58–61）。 さらに、MPOAは予期的な性行動と女性の好みに関係しています（62, 63）。 中脳辺縁系は、一般的な運動能力を除いて、交尾行動のパフォーマンスに関与していないようです（63, 64）。 ただし、Acbのドーパミン作動性作用は、運動効果とは無関係に、女性の手がかりに応じた自発運動の増加や勃起などの予期的な性行動に関与する可能性があります（62, 65）。 さらに、ハタネズミでの仕事によって証明されるように、Acbはペア結合と仲間とキューの関連において重要です（66, 67）。 したがって、MPOA、Acb、または両方の領域でのドーパミン作用は、CPPからVSに重要である可能性があります。
ドーパミン作動性システムのテストステロン調節
これまでの研究では、Acbのドーパミン含有量、トランスポーター、受容体、シナプス応答の思春期関連の変化が示されています（68–73）。 これらの変化がテストステロンの思春期の上昇に依存しているかどうかは研究されていませんが、ラットAcbにおけるD1およびD2受容体の初期過剰生産およびその後の剪定の思春期パターンは生殖腺ホルモンの有無に関係なく発生するという注目すべき例外があります（74）。 MPOAドーパミンの発達上の変化は、雌のfemale歯類でよく研究されています75）、男性MPOAのドーパミン作動性緊張の思春期の変化についてはあまり知られていない。 ただし、成人MPOAのホルモン感受性は十分に確立されています。 いくつかの研究では、長期（2–8 wk）性腺摘出により、MPOAのドーパミン作動性緊張のいくつかの測定値が増加することが示されました。これには、組織含有量およびアンフェタミン誘発ドーパミン放出が含まれますが、安静時ラットの細胞外ドーパミンは減少します（27, 76–79）。 重要なことに、成体雄ラットの雌刺激に対するMPOAドーパミン作動性応答は、テストステロンによって同様に調節されます（11, 28）。 腹側線条体の去勢の効果はMPOAの場合よりも一貫性が低くなりますが、28 d性腺摘除術は一般にAcb組織のドーパミンおよびDOPAC濃度を低下させます（27, 80, 81）。 したがって、思春期中の循環テストステロンの規範的増加は、VS、MPOA、Acb、またはその両方に応答したドーパミン作動性放出を促進し、それによってVS報酬を促進することはもっともらしい。 ただし、これらの研究の多くは成体動物で実施されており、幼若動物でのテストステロン暴露の影響は成体とは異なる可能性があるため、脳の発達におけるこの仮説を確認するために、さらなる作業が必要です（34).
総合すると、これらの研究は、条件付けられていない社会的刺激に対する報酬に反応するテストステロンとドーパミンの重要性を示しています。 テストステロンとドーパミンの両方のシステムは、VSの価値のある質が通常獲得される青年期に成熟します。 ドーパミン作動性回路は、CPPをVSに媒介する幼若動物で機能する可能性がありますが、VSの報酬には他の神経回路のテストステロン依存性活性化も必要であることに注意してください。 しかし、裏付けとなる証拠を与えられた最もpar約的な説明は、幼若動物でのテストステロン治療が思春期テストステロンの規範的な上昇を模倣し、それがドーパミン作動性システムに影響を与えてVS報酬を可能にするというものです。
謝辞
著者は、CPPを支援してくれた多くの時間に対して、Jane Venier、Andrew Kneynsberg、Elaine Sinclair、Susie Sonnenschein、Joshua Paasewe、Jennifer Lampen、およびShannonO'Connellに感謝します。 さらに、著者は、Kayla DeLormeとMaggieMohrからの実験計画と執筆に関する有益なフィードバックに感謝しています。
この作業は、国立衛生研究所の助成金R01-MH068764（CSへ）、T32-MH070343（MBへ）、およびT32-NS44928（MBへ）によってサポートされていました。
開示の概要：著者には開示するものは何もありません。
参考文献
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