Перинатальды Батыс диеталық тұтыну гипоталамус пен тұқымның жыныстық жетілуіне дейін (2017) туғаннан гөрі ГАААрик фенотипінің өзгеруіне әкеледі.

дерексіз

Энергияның тығыз тамақтанатын перинаталдық аналық тұтынуы балалардың семіздік тәуекелін арттырады. Бұл гидоналық меншікке жұмсалатын дәмді тағамды асықтырумен байланысты. Перинаталды аналық диетаны және майға арналған ұрпақ преференциясын байланыстыратын негізгі механизм әлі де түсініксіз. Бұл зерттеуде ана мен баланың жыныстық жетілуден егеуқұйрықтарды тамақтандыруды бақылайтын марапаттау жолдарында жүктілік және лактация кезінде ана майы / жоғары қантты диетаны (батыс диетасын) азықтандыру әсерін зерттеуге бағытталған. Біз үш қиын уақыт кезеңінде (балалық, жасөспірім және ересек адам) бойында WD және Control ұрпақтарының бойлық қадағалауын жүргіздік және перинаталдық әсердің дәмді диетаға әсерін (i) майдың артықшылықтарына, (ii) гендік экспрессия профиліне , және (iii) мезолимикалық допаминергиялық желілердің нейроанатомиялық / сәулеттік өзгерістері. Біз перинаталды кезеңде шектелген ВД тамақтандыру Гомеостатикалық және гедоникалық ми схемаларын ұйымдастыруда, бірақ майдың артықшылықтарына емес, айқын ұзақ әсер ететіндігін көрсеттік. Біз майы майы молекулярлық қолдарымен байланысқан майдың артықшылығын нақты эволюция кезеңін көрсеттік. WD тамақтандырылған бөгеттердің ұрпақтарында біз бала кезіндегі допамин (ДА) жүйелеріне қатысатын негізгі геннің жоғары экспрессиясына байланысты майдың артықшылықтарын байқадық; жасөспірімдерде екі топқа арналған жоғары май қоспасы WD тобына 3 күндік сынақ кезінде бірте-бірте азаяды және WD топтарына арналған DA жүйесінде қолданылатын кілт генінің экспрессиясын азайтады, ол оларды қорғау үшін өтемақы механизмін ұсынуы мүмкін одан әрі жоғары май әсерінен; және ақырында, егеуқұйрықтарды басқаруға ұқсас, бірақ γ-аминобутиралық қышқыл желісіне, серотонинді рецепторларға және гипоталамустың полисал қышқылы-НКАМ тәуелді рецептурасына қатыстырылған негізгі гендердегі терең өзгерістерге байланысты майдың артықшылығы. Жалпы алғанда, бұл деректер, перинаталды кезеңде шектелген ана ВД, тамақтану әрекеттеріне тартылған гипоталамикалық гомеостатикалық және марапаттау жолының күшті қайта құрылуына қарамастан, өмірдің кейінгі кезеңінде энергияның гомеостазына және майдың артықшылықтарына тұрақты әсер етпейтінін көрсетеді. Осы схемаларды қайта құрудың өзектілігін түсіну үшін қосымша функционалдық эксперименттер қажет болды.

Түйінді сөздер: сыйақы, DOHaD, азық-түлік преференциялары, тамақтану, γ-аминобутир қышқылы, TaqMan төмен тығыздығы массиві

кіріспе

Ерте өмір сүру ортасы мен оқиғалар енді өмірде денсаулық пен аурудың бейімділігін арттыруға үлес қосады-). Метаболикалық басып шығару тұжырымдамасы перинаталды кезеңдегі қоректік және гормоналды ортадағы өзгерістердің ұрпақтың семіздікке және оның кейінгі патологияларына қалайша бейімделуін сипаттау ұсынылды. Біздің батыл өмір сүруіміздің маңызды мәселесі энергияны тығыз тамақтанудың салдары ретінде артық тамақтану болып табылады. Шынында да, тамақтанудың осы түрін аналық қабылдауға ұшыраған адамдар семіздік пен метаболикалық синдромды дамыту үшін жоғары тәуекелге ие (, ). Көптеген зерттеулерде ана мен майлылығы жоғары емшек сүтімен (GFD) жүктілік пен емізу арқылы ұрықтың метаболизміне ұзақ уақыт әсер етеді-). Метаболизмді реттеуге қатысты жолдардан басқа, ми сыйақы жүйелері тамақтандыру мінез-құлығында да маңызды рөл атқарады (, ). Месолимик допамині (DA) нерв тасымалдау, сыйақы мен тәуелділік жағдайында қарқынды зерттелген, адамдарда диеталық семіздікке ауысады (-) және жануарлар (-). DA проекциясы көбінесе постнатальды түрде дамиды (), сондықтан оларды дамыту ерте рационға әсер етуі мүмкін. Соңғы бірнеше жылда кеміргіштерде жүргізілген эксперименттер ана мен баланың жұғуы ГФР-ны сатып алу ұрпақтардағы гидоналық азықтандыруды күшейтеді, ). Дегенмен бұл байқау DA жүйесінің жұмысындағы кейбір өзгерістерді-), онтогенезге және ерте өмірде марапат жолдарын қайта құруға қатысты шектеулі деректер бар (). Сонымен қатар, GABA (γ-аминобутиралық қышқыл) жүйесі сияқты маркетинг жүйесінің сигнализациясыз бөлігі перинаталдық тағамдық стресспен зардап шеккеніне қарамастан, құжатталмаған. Шынында да, GABA нейрондары сыйақылар мен бас тартуға маңызды рөл атқарады. Ventral tegmental area (VTA) GABA нейрондары әртүрлі ми аймағынан келетін ұқсас үлгіні алады (), ал жақында оптогенетикалық негізделген мінез-құлық зерттеулерінде шартты түрде орын алуы (VTA GABA)) және тұтынушылық мінез-құлықта (). Nucleus accumbens (NAc) негізінен ГАБАиргический ортаңғы нейрондардың проекциясы арқылы құрылады және лимбиялық жүйеден туындайтын және оларды әрекетке айналдыратын лимбикалық-мотор интерфейсі ретінде әрекет етеді арқылы ventral pallidum (VP) және басқа қозғалтқышты эффекторларға). Және, ақырында, LH-те көптеген GABA байланыстары бар гипоталамус () және аркаваттық ядро, аштық пен қанықтылық сигналдарын біріктіреді ().

Бұл зерттеу ана мүшелерінде анадан ұрықтың босанудан жыныстық жетілуіне (i) майдың артықшылықтарына (ii) DA жүйесінің гендік экспрессиялық профиліне, GABAergic жүйесінің және гипоталамустың пластикалық әсеріне әсерін анықтауға бағытталған. және (iii) сол мезолимикалық допаминергиялық желілердің нейроанатомиялық / сәулеттік өзгерістеріне қатысты. Осылайша, бойлық зерттеу барысында (Pasteus, P25, жыныстық жетілуден, P45 және ересектерге арналған, P95) бойкүйездік зерттеу кезінде, ананың ВД-нің дене салмағының өсуіне және ұрықтың майлы тіндерінің дамуына әсері әдеттегі дәмдеуден кейін қалып қойды. Бірлесе отырып, біз майлы преференциялар сынағын өткіздік, кейіннен тағамдық тұтыну, таңдау және мотивацияны реттеуші жүйелер үшін таңбалардың іріктелуіне арналған арнайы транскриптомиялық талдау және кейіннен негізгі компонентті талдау (ПКА) жасадық. Біздің нәтижелеріміз ДА жүйесіндегі тағамдық бағдарламалауға бағытталған соңғы нәтижелерді айтарлықтай байытты.

Материалдар мен әдістер

Этика туралы мәлімдеме

Барлық эксперименттер жергілікті жануарларды қорғау комитетінің, ЕО (директива 2010 / 63 / EU), National de la Recherche Agronomique (Париж, Франция) және Францияның ветеринария департаментіA44276). Эксперименттік хаттама институционалдық этикалық комиссиямен мақұлданды және APAFIS 8666 сілтеме бойынша тіркелді. Стресті азайту және әр эксперимент сериясында қолданылатын жануарлардың санын азайту үшін әрбір сақтық шарасы қабылданды.

Жануарлар мен диеталар

Жануарларға 12-ғы 12 сағ / кинозалдағы ашық / қараңғы циклда 22 ± 2 ° C-де азық-түлік және су ad libitum. Жүктіліктегі 240 (G290) ұрғашысында отыз екі Sprague-Dawley егеуқұйрықтары (дене салмағы: 1-1 г) Janvier-ден (Le Genest Saint-Isle, Франция) сатып алынды. Олардың әрқайсысы жеке орналастырылды және олардың ішінен 5 үшін бақылау диеталары (CD) (0% сиыр еті және 16% сахароза) немесе олардың 21 үшін WD (30% сиыр еті және 16% сахарозасы) тамақтандырылды және жүктілік және лактация кезеңдерінде (кестені қараңыз Table1: 1: Адиси Воерден, Нидерланды) диеталық құрамы пайыздық ккал. Туған кезде қоқыс мөлшері 1: 1 еркек-әйел қатынасы бар қоқыс үшін сегіз ілмекке теңшелген. Біз 12-ны 16 бөгеттерден 4 ерлер мен 4 әйелдерден тұратын қоқысымен ұстадық. Секіру кезінде (P21), CD және WD бөгеттерінен туған ұрпақтар эксперимент аяқталғанға дейін стандартты шошқада сақталған (Суреттер (Суреттер1A, B) .1A, B). Pup дене салмағы туған кезде жазылады және кейіннен күн сайын 10: 00 дейін P21 (сығу) дейін жазылады. Сепкеннен кейін және тәжірибе аяқталғанға дейін егеуқұйрықтар әрбір 3 күнде өлшенді. Біз тек ер балалар туралы деректерді ұсынамыз. Әйелдер егеуқұйрықтары басқа зерттеу үшін қолданылған (сурет (Сурет 11).

Кесте 1 

Гемация және лактация кезінде және баланың әдеттегі диетасы кезінде қолданылатын аналық диеталардың әр компонентінен пайыздық ккал құрайды.
Сурет 1 

Эксперименттік дизайн. (A) Зерттеу дизайнының схемалық диаграммасы. Жүктіліктегі 1 (G1) егеуқұйрығында 32 әйелдің SPD егеуқұйрықтары немесе олардың 16 үшін бақылау диетпиясы немесе жүкті және лактация кезеңінде басқалар үшін батыс диетасы берілді. Отау кезінде, ұрпақ ...

Мінез-құлық (екі шөлмектегі таңдау сынағы)

Үш критикалық даму кезеңі зерттелді (P21 P25: жасөспірім, P41 қойылатын P45: жасөспірім және P91 қойылатын P95: жас ересек). 24 еркектер (n = Бір топқа 12) кездейсоқ таңдалып, екі бөтелкені таңдау тегін сынау үшін жеке торға орналастырылды (суреттер) (Суреттер1A, B) 1A, B) (-). Бұл сынақ майдың дәмі бойынша тартымдылығын тәтті дәмі мен мүмкіндігінше калорияларды қабылдаудың метаболикалық әсерінен диссоциациялау арқылы зерттеу үшін қолданылған. Шынында да, 1% жүгері майының ерітіндісін тұтыну тек 0.09 ккал / мл тұтынумен байланысты. Екі шөлмектің болуына бір күн өткен соң, тест P2 және 25 күндерінде 4 күн ішінде орындалды және P41 және P91 (Сурет (Сурет1A) .1A). Мәліметтер бойынша, сеуіп кету кезінде (P21) 24 түйіршіктер 2 күн үшін жеке орналастырылған (сурет (Сурет1A): 1A): күн 1, әдеттегі саты, күн 2, егеуқұйрықтарға 1% қышқыл сығындысы (Sigma Aldrich, St. Quentin Fallavier, Франция) және Xanthan ерітіндісіндегі 0.3% жүгері майының эмульсиясы арасында екі бөтелкеден еркін таңдау берілді 0.3%). P41 және P91-де 24 түйреуіштер пайдаланылып, екі бөтелкеден тегін таңдау үш күн қатарынан ұсынылған. Xanthan сұйық ерітіндісін және дәмдік ерітіндісін (1% жүгері майы) күн сайын 11: 00 күні 3 күн ішінде (P45 және P95) жазылады. Екі шөлмектің орны позициялық басымдықты алдын алу үшін күнделікті болды. Майлылық артықшылығы көрсеткіші «майдың ерітіндісінің» көлемі тұтынылған жалпы көлемге ХНУМХ сағ қатынасында есептелді. Барлық егеуқұйрықтарды мінез-

Тіндерді жинау және қан іріктеу

Екі бөтелкеге ​​арналған еркін таңдау сынағының соңғы күні, егеуқұйрықтардың жартысы (n = Бір топқа 6) CO арқылы таңғы 09: 00-ден 12: 00-ге дейін эвтанизацияланған2 ингаляция Қан EDTA бар түтіктерге жиналды (Laboratoires Léo SA, St Quentin en Yvelines, Франция) және 2,500 центрифугаланды g 15 ° C кезінде 4 мин. Плазма -20 ° C температурада қатып қалды. Органдар мен жекелеген ретроперитональды май қоймасы бөлінді және салмақталды. Миы тез жойылып, ми матрицасына орналастырылды (WPI, Sarasota, FL, АҚШ рагы 300-600 г). Алдымен гипоталамус бөлінді [Paxinos's atlas координаттары бойынша: -1.0 дейін -4.5 мм-ден Bregma ()), содан кейін әрбір егеуқұйрық үшін NAN деңгейінде 2 мм қалыңдығынан екі короникалық тілік және VTA деңгейінде тағы бір алынды. Оң және сол жақ НС және оң және сол VTA үлгілері (жануарлардың жалпы санындағы төрт үлгіні) екі түрлі биопсияның көмегімен (Stiefel Laboratories, Nanterre, Франция) жылдам алынды (диаметрі 4 мм үшін NAc және 3 мм вендральді ортаңғы мотор үшін). Сынамалар сұйық азотта мұздатып, TaqMan төмен тығыздық массивінде (TLDA) геннің өрнегін анықтау үшін -80 ° C температурасында сақталды.

Басқа егеуқұйрықтар (n = Бір топқа 6) пентобарбиталмен (150 мг / кг ip) терең анестезияға ұшырады және фосфат буферіндегі (PB) мұздай 4% параформальдегид, рН 7.4 арқылы жүретін физиологиялық тұзды перфузиямен перфузияланды. Миды тез алып тастап, сол фиксацияға 1 ° C температурада 4 сағ батырып, соңында 25% PB сахарозада 24-48 сағ сақтады. Содан кейін ми изопентанда -60 ° C-та тоңазытылып, соңында -80 ° C температурада қолданылғанға дейін сақталды. NAc, гипоталамус және VTA криостатпен 20 мкм сериялық корональды секцияларға кесілген (Microm, Microtech, Francheville, Франция). Әр ми аймағына 10-4 бөлімді қамтитын 6 шыны слайдтан екі-үш серия орындалды. Әрбір шыны слайд үшін сериялық бөлімдер 200 мкм қашықтықта орналасқан (сурет) (Сурет 66).

Сурет 6 

Батыс диеталардан (WD) немесе бақылау диеталарынан (CD) тамақтандырылған бөгеттерден ұрықтан бастап егуден бастап, ядро ​​акументіндегі (NAc) венеральді тикеальдық аймақта (VTA) және TH тығыздығы талшықтарындағы TH / NeuN позитивті нейрондарын сандық бағалау. (A) Паксинос пен Уотсонның сұлбасы ...

Биохимиялық плазмалық талдау

Плазма глюкозасын, NEFA (этерифицирленген май қышқылдары), инсулинді және лептинді өлшеу үшін P25, P45 және P95 егеуқұйрықтарында жиналған ЭДТА плазмасы пайдаланылды. Глюкоза және Нефа арнайы жиынтықтармен (глюкоза және NEFA PAP 150 жинақтары, BioMérieux, Marcy-l'Etoile, Франция) колориметрлік ферментативті реакциялармен өлшенді. Гормондар инсулин және лептин (егеуқұйрықтарды / тінтіуір инсулін ELISA жинағы, егеуқұйрықтарды липтина ELISA жинағы, Linco Research, Сент-Чарльз, MO, АҚШ) бойынша өндірушінің нұсқауларынан кейін арнайы ELISA жинақтарымен талданды.

Иммуногистохимия

Сериялық VTA және NAc бөлімдерін қамтитын әйнек слайдтары алдымен 3-4 сағ үшін жабылып, содан кейін 4 ° C температурасында келесі антиденелердің қоспасы арқылы инкубацияланды: тінтуірдің анти-НеН (1: 500; IgM, Millipore Bioscience Research Reagents, Merk, АҚШ) және қоян анти-TH (1: 1,000, Millipore Bioscience Research Reagents, Мерк, АҚШ). Алғашқы антиденелермен инкубациядан кейін және ПБ-мен кейіннен жуудан кейін секциялар екінші антиденелердің қоспасында инкубацияланды: Alexa 488 ангионикалық IgM және Хекс 568-түйісілген есекке қарсы ангигон IgG (1: 500; Invitrogen, ThermoFisher Scientific, Waltham , MA, АҚШ) 2 сағ. Бөлімдер суперқосымша плюс алтын слайдтарға (ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, АҚШ) орнатылып, ауамен кептірілген және ProLong ™ Gold антифаидті реагенттерімен (Invitrogen, ThermoFisher Scientific, Waltham, MA, АҚШ) лезде басылған.

TH Нейрондар VTA-да саналады

Əр егеуқұйрық үшін TH-позитивті жасушалар бұрын сипатталғандай) VTA үш түрлі рострокадальдық деңгейде: үшінші нервтің шығу деңгейінде (Bregma: X5.3 мм қатысты), 200 μm rostral және 200 мкм деңгейінде осы деңгейге (Сурет (Суреттер6A) .6A). Сол және оң жағында, NANSOZOMER-XR сандық сканерлеу сканерін × 40 ұлғайту арқылы, толық МТҚ-ны қосалқы терминалдың ортасынан бастап, C12000 (Хамамату, Жапония). Әрбір секция үшін VTA периметрі бойынша сызық жасалды. Шекаралар жасушалардың пішінін зерттеп, Paxinos және Watson атластарына сілтеме жасай отырып таңдалған. Допаминергический нейрон айқын көрінетін ядроны бар NeuN (+) / TH (+) иммунореактивті жасушалық денесі ретінде анықталды. NIH Image J бағдарламалық жасақтамасын (Cell counter plugin) пайдалану арқылы NeuN (+) / TH (+) жасушалары жануарлар топтарын білмейтін екі түрлі адаммен есептеледі. Split-cell counting errors Abercrombie формуласы арқылы түзетілген (), мұнда N = n[t/(t + d)] (N = ұяшықтардың жалпы саны; n = есептелген ұяшықтар саны; t = қиманың қалыңдығы; және d = ұяшық диаметрі), ал бұл түзету коэффициенті 0.65 құрады. Деректер орташа [NeuN (+) / TH (+) сол және оң VTA-да] ± SEM түрінде көрсетіледі.

NAc ішінде TH талшықты тығыздығы

NAc допаминергическая жүйке терминалдарындағы TH протеинінің мазмұны TH иммунолабелді бөлімдерінің анатомиялық дензитометриялық талдауымен бағаланды. TH талшықтарының тығыздығы NAc (Bregma 2.20, 1.70 және 1.20 мм) рострокадальді осінің бойында үш ерікті деңгейде сандық түрде анықталды (Сурет (Сурет6B) .6B). Қысқаша, бүкіл стриатум мен НЦ-дан тұратын цифрланған сурет NanoZoomer-XR Digital слайд сканерін × 40 ұлғайту арқылы алынған C12000 (Хамамату, Жапония) алынған. Осы NAc үшін оптикалық тығыздықты (OD) өлшеу аймағын анықтау үшін бүкіл ядроның айналасында сызық жасалды (Сурет (Сурет6B) .6B). Алынған мән NIH Image J бағдарламалық жасақтамасы арқылы сол секциядағы корпус қасқосумында (аймақ TH иммунохимиясы үшін боялған аймақ) жасалған шеңбердің аймағынан өлшенген OD мәнімен қалыпты болды. Деректер OD коэффициентінің орташа мәні ретінде көрсетілген (OC мәні үш бөліктің корпус касловозындағы NAc / OD мәндерінде) ± SEM.

TLDA және TaqMan арқылы гендік түсінік

РНК NucleoSpin RNA / ақуыз жинағын (Macherey-Nagel, Hoerdt, Франция) пайдаланып, мұздатылған NAc, VTA-байытылған үлгілерден және гипоталамустан оқшауланған. Жалпы RNA DNase сіңуіне өндірушінің нұсқауларынан кейін ұсынылды, оның мөлшері 260 / 280 нм УК сіңіруімен бағаланды және сапасы Agilent 2100 Bioanalyzer System көмегімен есептелді, содан кейін RNA тұтастығы (RIN) есептелді. 8 төмендегі RIN бар үлгілер тасталды. РНК-нің бір микрограммы 10 мкл жалпы көлемінде High RT жиынтығы (Applied Biosystems, Foster City, CA, АҚШ) көмегімен cDNA-ға қарсы кері айналды.

Жоғарыда сипатталғандай (), TLDA - бұл 384 бір уақытта нақты уақыт режиміндегі ПТР орындалатын 384-ұңғымалы микроұзықтығы (Applied Biosystems, Foster City, CA, АҚШ). Біз тағамдық тұтынуды реттеуге және реттеуге қатысты әртүрлі гендік отбасыларды қамтуға арналған арнайы жасалған TLDA-ды қолдандық. Әрбір теңшелетін карта 2 × 4 реакциялық камералары бар 2 × 48-үлгі жүктеу сызықтары ретінде теңшелген (сілтеме: 96a). 92 генінің жиынтығы (кесте S1 қосымша материалдарда) және төрт үй шаруашылығы генін (18S, Gapdh, Polr2a және Ppia) зерттеді. Нақты уақыттағы ПТР Life Technologies TaqMan реагенттерін қолданып, ABI Prism 7900HT жүйелі жүйені (Applied Biosystems, Foster City, CA, АҚШ) іске қосылды. Шикізатты флуоресценттік деректер ПСР арқылы SDS 2.3 бағдарламалық жасақтамасы (Applied Biosystems, Foster City, CA, АҚШ) арқылы жиналды, ол одан әрі базалық және шекті мәндерді автоматты түрде анықтайтын Ct шекті циклдарын құрады. ThermoFisher бұлтты қосымшасы (ThermoFisher, АҚШ) арқылы сүзгіден өтіп, ашыған ПТР жұмысын кемсітеді. n = 6 (n = 5 үшін WD тобы үшін P25). Содан кейін деректер салыстырмалы кванттау үшін ThermoFisher Cloud App (ThermoFisher, АҚШ) көмегімен талданды. Гендердің экспрессиясының салыстырмалы квантациясы (RQ) RQ = 2 теңдеуін қолданып, Ct салыстырмалы әдісіне негізделген-ΔΔCt, онда бір гендік мақсат үшін ΔΔCt калибратор үлгісінен шығарылып, эндогендік бақылаумен қалыпқа келтірілген өзінің Ct вариациясы болды. Дәлірек, біз GeNorm алгоритмін қолдану арқылы ең тұрақты үй шаруашылығы генін анықтадық (ThermoFisher Cloud App RQ, ThermoFisher, АҚШ). Төрт үй шаруашылығы гендерінің ішінде Гапд NAc және гипоталамустың эндогендік бақылауы, ал VPA үшін Ppia деп анықталды және бұл үш уақыттық кезеңдердің барлық үлгілеріне қатысты болды. Гендердің экспрессиясының графикалық көрінісі CD тобының тобына қатысты геннің өрнегінің 10% өсуі үшін бір түсті тағайындау үшін қолмен жасалды. Параметрлік емес Wilcoxon қолтаңбалық сынағын қолдана отырып айтарлықтай өзгеріс жұлдызшамен белгіленді.

Статистикалық талдау

Нәтижелер кестелерде және сандардағы орта ± SEM ретінде көрсетіледі. Манн-Уитни параметрлік емес тесті дене салмағын әртүрлі уақыт нүктелерінде, майдың артықшылықтары мен иммуногистохимиядан алынған OD қатынасын талдау үшін пайдаланылды.

3 күндік майдың артықшылықтарын бағалау үшін біз әр күн үшін бағанды ​​статистикалық талдау жасадық. Әр топ үшін майдың ерітіндісін және бақылау ерітіндісін тұтыну параметрлік емес Wilcoxon-ның қолтаңбалық сынағы арқылы сыналды. Біз артықшылықты орташа мәнді 50% (нүктелі қызыл сызық) гипотетикалық мәнімен салыстырдық. Айтарлықтай өзгерістер қызыл жұлдызшамен белгіленді. QPCR RQ мәнін талдау үшін бірдей сынақты қолдандық; біз орта RQ шамасын 1 гипотетикалық мәнімен салыстырдық. Жұлдызшамен елеулі өзгерістер байқалды (Сурет (Сурет 44).

Сурет 4 

Үш уақыт кезеңінде егеуқұйрықтарды егеуқұйрықтарды және егеуқұйрықтарды тамақтандыратын перинаталды-батыстық диеталардан алынған ядро ​​акumbens (NAc), вентральдік тикеальдық аймақ (VTA) және гипоталамидегі салыстырмалы гендік өрнектер. Гендердің экспрессиясын бір мезгілде анықтау ...

Плазмадағы үлгіні талдау үшін біз Параметрлік емес Mann және Whitney тестін орындадық. TH-позитивтік жасушалардың саны екі жақты ANOVA және p шамасы есептелді. Өткізілген сынақтардың көптігіне байланысты, Bonferroni post hoc түзету тек осы сынақтан кейін қолданылған. Статистикалық талдау Prism 6.0 бағдарламалық жасақтамасы (GraphPad Software Inc., La Jolla, CA, АҚШ) арқылы орындалды.

Бақыланбаған ДКА алғаш рет 130 параметрлері (TLDA, мінез-құлық және плазма деректері) бойынша деректер жинағының жалпы құрылымын бейнелеу үшін әрбір ми биопсиясы (VTA, NAc және гипоталамус) үшін түрлі уақыт кездерінде орындалды (яғни, үш жаһандық PCA уақыт кезіне). PCA деректердің ортогоналды проекциясы ретінде төменгі өлшемді сызықтық кеңістікке анықталуы мүмкін, осылайша жобаланған деректердің дисперсиясы подпространствода барынша кеңейтіледі. Біз алдымен анықталмаған немесе сәл көрінбейтін гендерді сүздік (сурет (Сурет5) .5). CD-ті берілетін бөгеттерден және WD-ті берілетін бөгеттерден алынған ұрпақтар үшін құндылықтар осы екі экспериментальды топтардың бақылаусыз PCA құрамдас бөліктерімен жақсы бөлінген-көрмейтінін көрсету үшін жеке ЖСҚ-ның әр түрлі түстерінде пайда болды. Бұл талдау ұрпақтың екі топтары арасында дифференциалды түрде көрсетілген гендердің топтарын бөледі. Кейіннен, ПТҚ-ның әрқайсысы мРНА маркерлерінің әртүрлі кластерлерінде жасалды: пластика (жасуша адгезиясы, цитоскальтондық, нейротрофиялық фактор, синаптогенез және транскрипцияны реттеу), DA жолдары, GABАергическая жол, эпигенетикалық модуляторлар (гистон деацетилазы және гистон ацетил-трансфераза). Бұл бағдарланған ПКА бір мезгілде аналық диеталар мен кейбір маркерлер арасындағы корреляцияны және отбасылық гендер арасындағы корреляцияны көруге мүмкіндік береді. ПКА мен ПКА-ны талдау үшін сапалы ауқым пайдаланылды: +++: өте жақсы бөлу; ++: ПХД-ны бөлудің бір жағында бір егеуқұйрықпен жақсы ажырату; +: екі егеуқұйрықпен (әрбір топтың біреуі) дұрыс емес бөлумен өте жақсы бөлінуі -: нақты бөліну жоқ.

Сурет 5 

Негізгі компонентті талдау (ПКА). PCA-ның шашыраңқы учаскесі (A, B). (A) P95 егеуқұйрықтардың ядросының акумбензынан (NAc) алынған үлгілері. Қара үшбұрыштар диеталардан (CD) берілетін бөгеттерден және қызыл үшбұрыштардан ұрпаққа сәйкес келеді ...

нәтижелері

Дене салмағы мен өсуі

Жүктілік кезінде ана героинді қабылдау (G1-ден G21-ға дейін) туған кезде жасөспірімдердің дене салмағына әсер етпеді (сур. (Сурет2) 2) (CD: 6.55 ± 0.07 г және WD: 6.54 ± 0.05 г p = 0.9232) (Суреттер (Суреттер2A, B) .2A, B). WD бөгеттерінен туған ұрпақтарда (21 ± 36.19 г 0.90 ± 47.32 грамммен салыстырғанда) ұрықтан салмақпен дене салмағымен CD бөгеттерінен ұрпаққа қарағанда WD бөгеттерінен туған ұрпақтарда туа біткенге дейін дене салмағының өсуі 1.48% жоғары болды p <0.001) (сурет (Сурет2C) .2C). Сегізден эксперименттің соңына дейін (P95), егеуқұйрықтарды стандартты шие диетімен тамақтандырды және CD дискілерінің бөгеттеріне қарағанда WD бөгеттерінің ұрпақтары үшін дене салмағы жоғарылады. Толығырақ: жасөспірім кезінде (P39) (Fig (Суреттер2A, D), 2A, D), CD: 176.8 ± 3.3 г және WD: 192.2 ± 3.3 г p = 0.0016 және P93 кезінде (жас ересек адам) (суреттер) (Суреттер2A, E) 2A, E) CD: 478 ± 9.9 г WD-ге қарсы: 508.6 ± 10.3 г p = 0.0452.

Сурет 2 

Туғаннан бастап ересекке дейін ұрпақтың дене салмағының эволюциясы. (A) 0 дене салмағының күні 100 күніне дейін. Қызыл және кейінгі кезеңдердегі емделу кезеңі (с) балалық шақ, (d) жасөспірім, және (е) сұр жастағы жастар. Өсу қисықтары бойынша, бақылау диеталарынан ерлер ұрпағы ...

Гормондар және метаболические маркеров түрлі уақыт кезеңі

Плазма лептині, инсулин, глюкоза және NEFA концентрациясы P25, P45 және P95 кезінде өлшенді. Барлық жастағы, плазмалық глюкоза, NEFA және лептиннің WD ұрпақтарының деңгейлері CD ұрпақтарынан статистикалық түрде ерекшеленбеді (кесте (Table2,2, n = Бір топқа 6). Біз тек Р25 температурасында WD қорғаныс дамбаларынан ұрпақтарға май тұндыруының (ретроперитонеальды май массасының қатынасы) айтарлықтай өсуін байқадық (p = 0.0327, Манн және Уитни тесті).

Кесте 2 

Ретро-перитальдық майдың массасы және плазмадағы дозасы: глюкоза; инсулин, NEFA және лептин.

Перинатальды ВД-нің ересек ересекке дейінгі майдың артықшылықтарына әсері

ВД-нің майдың артықшылықтарына ықпалын зерттеу үшін өсу кезінде үш түрлі уақыт нүктелерінде екі бөтелке таңдау парадигмасын қолдандық. Бұл тест майдың дәмінің артықшылығын мүмкіндігінше қаншалықты мүмкін болатындығын болдырмау арқылы зерттеу үшін қолданылған. Біз оның құймасынан метаболический әсерін болдырмаймыз. Бөтелкеден (P25, P45 және P95 кезінде) «қосымша» калориялардың айырмашылықтары статистикалық маңызды емес екенін көрсеттік топтар арасында (сурет S1Қосымша материалдардағы A-C). Сонымен қатар, 1% жүгері майы ерітіндісін тұтыну айырмашылығы P1 (WD: 25% vs CD: 4.9% калориялары алынған) және 3.9% P0.5 (WD: 45% vs CD: кальматтардың 2% -ы) (суреттер S1D-F қосымша материалдарда). P25-де CD бөгеттерінен алынған түймелер майға артық емес (44.87 ± 9.8% p = 0.339); қарама-қарсы WD егеуқұйрықтары майға артықшылық береді (75.12 ± 8.04%, p = 0.039 Уилкоксон қол қойылған дәрежелі тесттен кейін, қызыл жұлдызша). Сонымен бірге екі топ арасында статистикалық айырмашылық бар p = 0.0347 (Манн мен Уитни тесті, қара хэш-тег) (сурет) (Сурет 33A).

Сурет 3 

Сүюден ересекке дейінгі майдың артықшылықтарын дамыту эволюциясы. (A) P25, P45 және P95-дегі бірінші күні май параметрі. Әр уақытта жануарлардың түрлі жиынтығы пайдаланылды (n = 6 / топ / уақыт нүктесі). (B) Мықты үш күн бойы ...

P45 және P95 кезінде екі топтың майы үшін маңызды артықшылығы бар, яғни 50% -тен (P45, CD: 80.68 ± 2.2% p = 0.0005 және WD: 78.07 ± 3.25% p = 0.0005; P95, CD кезінде: 74.84 ± 8.4% p = 0.0425 және WD: 69.42 ± 8.9% p = 0.109 Уилкоксон қол қойылған дәрежелі тесттен кейін, қызыл жұлдызша) (сурет) (Сурет3A) .3A). Екі топқа арналған мәндер дәмді ұсынудың бір күнінен кейін (P45 кезінде) ажыратылмайтын болды p = 0.7857 және P95 кезінде p = 0.9171 Манн-Уитни тесті (сурет) (Сурет 33A).

Уақыт өте егеуқұйрықтар майдың тұтынылуын қалай реттейтінін білу үшін P45 жəне P95-та үш күн қатарынан майлы презентация қайталанды (Суреттер (Суреттер3B, C) .3B, C). Бір қызығы, P45-да тек WD бөгеттерінің еркектері майдың ерітіндісін біртіндеп жоғалтты (сурет (Сурет3B) 3B) (үшінші күні: 53.12 ± 8.36% p = Уилкоксонның қол қою дәрежесіндегі сынақтан кейін 0.851). Алайда, P95 кезінде (ересек жаста) барлық жануарлар 3 күндік сынақ кезінде эволюциясы жоқ майды жақсы көрді (сурет) (Сурет 33C)

Қысқаша айтқанда, осы модельде ерте кезеңде (балалық шақта) WD бөгеттерімен тамақтандырылған егеуқұйрықтың майын артықшылығы жасөспірім кезіндегі прогрессивті немқұрайлығы байқалды. Біз ересектердегі егеуқұйрықтардың екі тобы арасында ешқандай айырмашылықты байқадық.

Гипоталамуста және марапаттау жолдарындағы мидың пластикалық және GABA тізбектерін молекулярлық қолтаңбасы

Гепатальды және лактация кезеңінде ана героинді қабылдау кезінде ұрықтың гипоталамусына және марапаттау жолдарына ықпал ететіндігін анықтау үшін біз мидың пластикасы, мидың модельдеуі және тағамдық және эпигенетикалық заттарға қатысты нейрондық тізбектердің маркерлері реттеуші органдар. Біз түрлі ми аймағында (яғни гипоталамус, VTA және NAc) молшылықты талдауға арналған TLDA-ды қолдандық (кесте S1 Қосымша материалдарда) үш кезеңде. Скрининг P25, P45 және P95 екі бөтелкесін таңдау бойынша сынақтардан кейін орындалды (сурет (Сурет1) 1) WD тамақтандырылған бөгеттерден туылған алты ер адам мен CD-ті берілетін бөгеттерден туылған алты ер бала.

Гипоталамуста P25-де 13 түрлі категориядан бес ген, негізінен пластиктегі маркерлерде және GABA маркерлерінде, WD-ті берілетін бөгеттерден алынған егеуқұйрықтармен салыстырғанда, -20% (Gfap) және -40% (Gabra5) аралығындағы мРНК деңгейін айтарлықтай төмен деңгейде көрсетті CD тамақтандырылған бөгеттер. Марапаттау жолдарының биопсияларында (VTA және NAc) екі ген генді статистикалық жоғары мРНК білдіру деңгейлері (D2R және Gabra1), яғни DA сигналы және GABA рецепторлары және бір ген NSc-де төменгі өрнек (Hcrtr2) (яғни орексин 2 рецепторы) көрсетілді , алайда төрт генте VTA-де (Map2, Gabara1, Hcrtr1 және Hcrtr2) (яғни, пластикалық белгілер, GABA рецепторлары және серотонинергический рецепторлар) (Сурет 44).

Гипоталамуста P45-де 13 түрлі категориядан шыққан бес ген WD тамақтандырылған бөгеттердің егеуқұйрықтарымен салыстырғанда WD-ті берілетін бөгеттерден -20% (Fos) және -50% (FosB) арасында төменгі мРНК деңгейін көрсетеді. P45 марапаттау жолындағы биопсияларда төрт ген генді MRNA білдіру деңгейін (Gfap, Dat, Cck2r және Kat5) көрсетті және NAc ішінде төменгі өрнек (Fos және FosB) екі генді көрсетті, алайда үш ген төменгі мРНК білдіру деңгейін көрсетті (Arc, FOSB және Th) және бір ген жоғары деңгейін (Gabrg2) в VTA.

Гипоталамуста P95 кезінде 13 түрлі санаттан 20 гендері + 20 және + 40% (Syt4 - Gjd2) және 3 гендері арасында жоғары MRNA экспрессия деңгейін көрсетті, ал WN - дан төменгі деңгейдегі mRNA (FosB, D1r және Gabarb1) тамақтандырылған бөгеттерді егеуқұйрықтардан CD тамақтандырылған бөгеттерге қарағанда. P95 марапат жолындағы биопсияларда, 12 гендерінде + 20 және + 40% (Syn1 - Hcrt1) және 1 генінде төменгі өрнек (Th) арасында NAc, 6 гендерінде жоғары mRNA экспрессиясының деңгейін көрсететін жоғары mRNA экспрессия деңгейін көрсетті (Ncam1 , GCA1, Gjd2, Gabra5, Htr1a және Htr1b) және 6 гендері VTA-де төменгі мРНК білдіру деңгейін көрсетті (Cntf, Igf1, Fos, Socs3, Gabrb2 және Hdac3).

Содан кейін барлық сандық параметрлерді (яғни, плазма дозасы, мінез-құлық деректері және мРНК өрнектерінің вариациясы) пайдалана отырып, үш ми биопсиясына сәйкес келетін үш бақылаусыз ПКА жасадық. Екі топтың нақты бөлінуі тек NAX және VTA үшін P95 кезінде алынған (кесте (Table33).

Кесте 3 

Негізгі компонентті талдау (PCA) синтезі: жаһандық PCA және PCA-ның шоғырлануы үшін PCA топтарының бөлінуін сапалы талдау.

PCA корреляция шеңбері және TLDA деректері (осы ПХД құрамына кіретін айнымалылардың көпшілігін білдіретін) сәйкес, біз сегрегацияға жауапты болатын гендерлік отбасыларды анықтап, (Суреттер5A, B, 5А, В, мысалы). Фокусты PCA көрсеткендей, P25 DA маркерінде NAc және пластикалық белгілерінде гипоталамуса екі топты ажырата алады (кесте (Table33 қорытынды үшін). Мұндай P45-де мұндай дискриминация жоқ. Алайда, P95-дегі осындай талдау НЦ және гипоталамустағы GABA жүйесінің әртүрлі маркерлері, сонымен қатар пластикалық белгілер (гипоталамус, NAc және VTA) және эпигенетикалық реттегіштер (тек NAc) екі топты бөлуге көмектеседі Сурет (Сурет5; 5; Кесте Table33).

Бұл талдау перинатальды диетаның GABAergic маркерлеріне ұзақ мерзімді әсерін, сондай-ақ гомеостатикалық және тамақтану мінез-құлқына байланысты марапаттау жолындағы пластикалық және эпигенетикалық маркерлерді көрсетеді.

TH Cells иммуногистохимиясы бекітілген транскрипт талдауы

Біз әртүрлі даму кезеңдерінде NAc және VTA-гі TH mRNA-лерінде кейбір өзгерістер байқалғандықтан, біз осы нәтижелерді ТМ иммундауымен байланыстырдық. TH / NeuN позитивтік жасушаларының саны ВТС-да талданды, онда допаминергиялық жасушалар орналасқан және ТН иммунолабелдеудің ОД-ны NAc-да орналасқан нервтік санды өлшеуге болады. TH (+) клеткалары WD-ның VTA-інде тек P45-дегі CD егеуқұйрықтарымен салыстырғанда анағұрлым аз болды (Суреттер (Суреттер6A, C, E; 6A, C, E; Сурет S2A Қосымша материалдарда). Үш кезеңде бөлімнің деңгейі мен TH / NeuN сандық бағалауы арасындағы маңызды өзара әрекеттесу болмады (P25 p = 0.9991, P45 p = 0.9026 және P95 p = 0.9170). Тек P45 кезінде екі ұрпақ тобы арасында статистикалық айырмашылық алынды (p = 0.0002) (сурет (Сурет6E) .6E). Бұдан басқа, біз P25 және P45-да NAc-да екі топ арасында P25: 1.314 ± 0.022 кезінде OD коэффициентінің мәндері WD-ден 1.351 ± 0.026-де, p = 0.2681; O45 коэффициентінің мәні P1.589: CD-де 0.033 ± 1.651 және 0.027 ± XNUMX, WD, p = 0.1542). Алайда, TH нервтік ұштарының OD-нің айтарлықтай төмендеуі P95 кезінде WD тобынан NAc-та анықталды (p95 кезінде OD коэффициентінің мәні: CD-де 1.752 ± 0.041 және WD-де 1.550 ± 0.046, p = 0.0037) (Суреттер (Суреттер6B, D, F; 6B, D, F; Сурет S2Қосымша материалдарда B).

талқылау

Бұл зерттеуде біз ана перинатальды асыра тамақтану энергетикалық гомеостазбен, азық-түлікті таңдауда және ұрпақтың азық-түлік тұтынуымен байланысты сыйақы беру жолдарын дамыту бағдарламасына ықпал ететінін болжадық. Бала кезінен бастап ересекке дейін анадағы ВД тұтынуынан туа біткенге дейін GABA, serotonin және DA ми бөлімдерінің (VTA, NAc және гипоталамус) DA жолдарына әсерін кеңінен қарастырдық. Біздің нәтижелеріміз, перинаталды кезеңде қатаң шектелген май және тәтті диетаны қолдану ұрықтың ерте майлылығы (балалық шақта), гендік экспрессия профилінің өзгеруімен және мезолимиктің нейроанатомиялық / сәулеттік өзгерістерінің өзгеруіне әсерін тигізеді допаминергиялық желілер. Дегенмен, ұрпақ сиырлық диетада сақталған кезде, жасөспірім WD егеуқұйрықтарында майдың тартымдылығын жоғалтуы байқалды, ол ДА жүйесіндегі гендердің төменгі экспрессиясымен және ВТА-да TH-позитивті нейрондардың . Кейінірек өмірде майлы іріктеу топтар арасында айырмашылық болмады, бірақ GABAergic желілерінің маңызды гипликасы және гипоталамустың энергетикалық гомеостаздық желісі WD тамақтандырылған бөгеттерден егеуқұйрықта анықталды (суретті қараңыз). (Сурет 77).

Сурет 7 

Графикалық реферат. NAc, ядро ​​accumbens; VTA, вентральдық тергеальді аймақ.

Осы зерттеуде байқаған перинаталдық-ВД қабылдаудың алғашқы әсері ұрықтың ұрпақтарының дене салмағының жоғарылауы болып табылады, бірақ туған кезде ешқандай айырмашылық жоқ. Шынында да, WD тобындағы жануарлар сүт кезеңінің соңында компакт-дискке қарағанда 21% салмақты жоғарылатады. Алдыңғы зерттеулер WD-ті берілетін бөгеттерден ұрпақ үшін туудың салмағын өзгертуге қатысты қайшы нәтижелер берді: жоғары дене салмағы (, ), төменгі дене салмағы (, , ) немесе ешқандай айырмашылық (, ). Біздің деректеріміз жақында мета-регрессиялық талдауға сәйкес келеді () 171 эксперименталдық басылымдарында жүргізілген, ол аналық HFD экспозициясының бала ұрпағының салмағына әсер етпейтінін, бірақ лактация кезеңінің соңында дене салмағының жоғарылауына себеп болғанын анықтады. WD ұрпақтарының дене салмағының жоғарылауы бұрынғы басылымдарда суреттелген сүт құрамын және / немесе сүт өнімдерін өзгертуді көрсетеді (, ). Дене салмағының жоғарылығына қарай WD ұрпақтарының ретроперитонеальді майы сүт емдеу кезеңінің соңында CD-нің ұрпағынан айтарлықтай жоғары болды (P25, Table Table2), 2), ол бұрынғы зерттеулерге сәйкес келеді (, ). Алайда, жоғары семіздік P45 және P95 кезінде сақталмады, ал инсулин, NEFA және глюкоза сияқты басқа метаболикалық параметрлер топтар арасында өзгеше болмады. Біздің нәтижелеріміз көрсеткендей, жүктілік пен лактация кезінде айқын ана мен бала семіздіксіз, диета ұрпақтарда тұрақты метаболизм әсерін тудыру үшін жеткіліксіз, , ).

Перинатальды ГФР-дің тұтынуы дәмді тағамға арналған ұрпақ қалауымен оң). Зерттеу барысында біз әдеттегі шошқалардан алынған отбасында майдың артықшылықтарын сынауға бағытталған бойлық зерттеу жүргіздік.

Балалық шақтағы перинаталды жасушаның әсері (сепарациядан кейін)

Кеміргіштер туғаннан кейінгі қатты тағамды 19-20 күннен кейін тамақтандырады (), олардың церебральды марапат жолдары әлі жетілмеген кезде (). Сондықтан олардың майлылыққа деген ертеректегі артықшылықтарын зерттеп, бұл басымдылықты ми транскрипті талдауымен байланыстырды. Сепкеннен кейін, CD егеуқұйрықтарында көрсетілмеген WD ұрпақтарында майдың артықшылығы байқалды. Бұл перинаталды тамақтанудан және тамақтанудың артықшылықтарынан және егеуқұйрықтарды егеуқұйрықтарды ерте жастағы майлардан төмен таңдаудан туындаған байланыстарды көрсететін басқа есептерге сәйкес келеді ().

Жаһандық ДКА осы жастағы аналар диетасына қатысты індеттер тобын дискриминациялауға мүмкіндік бермеді. Дегенмен, ДБ маркерлерімен шектелген мақсатты ДКА орындалды, біз топтардың жақсы сегрегациясын алдық. Шынында да, D2 рецепторлық мРНК-нің NV-дегі WD-ны өрнекте айтарлықтай өсуі байқалады. NAc ішіндегі postsynaptic D2-нен асқан экспрессиясы майдың жоғары мотивациясына қатысты болуы мүмкін). ND және VTA альфа 1 GABAA бөлімшесінің жоғарылауы және гипоталамуста альфа 5 GABAA бөлімшесінің төмендеуі сияқты ядродағы GABAA рецепторларын қайта құруды болжайтын CD дискілерімен салыстырғанда, WD пупсттарында бірнеше басқа транскриптер өзгертілген.

Перинаталды жасөспірімдердің жасөспірімдікке әсері

P45-де біз екі топқа ұқсас жоғары майдың артықшылықтарын таныстырудың алғашқы күнінде байқадық, бірақ, қызықты, WD егеуқұйрықтары қайтадан ұсынылғаннан кейін майға деген қызығушылығын біртіндеп жоғалтты. Жасөспірім өмір бойы когнитивтік өңдеуге қажетті нейробекітті қайта құрудың маңызды кезеңі болып табылады () және әртүрлі зерттеулер майдың диетасының зиянды когнитивті әсеріне айқын осалдығын көрсетті (-). Бұл нәтиже Мухльхейзлер тобының бұрынғы жұмысымен қайшы келеді (, ), онда жас аналық егеуқұйрықтар (6 аптасында) қалаусыз тағамға айқын артықшылық көрсетті. Алайда, олардың басылымдарында эксперименталды парадигма басқаша болды, себебі егеуқұйрықтар құрбандыққа (6 аптаға) сепкілеуден стандартты шошқа және қалдықсыз тағамға еркін қол жеткізді.

Сонымен бірге, біз NAc-де Dat mRNA-ның жоғарылауын өлшедік және ВТ-да ВТ-нің VTA-інде төмендеген TH (+) жасушаларының саны көрсетілген иммуногистохимиямен расталған ВТҚ-ның Th mRNA-ның төмендеуі байқалды. ДА жүйесіндегі сепарация кезінде жоғары транскриптомиялық белсенділіктен кейін, P45-дегі белсенділіктің төмендеуі біздің WD егеуқұйрықтарында байқалған дәмді тағамның төмен қызығушылығын түсіндіре алады. Сондай-ақ, талдаған әртүрлі ядролардағы Fos және FosB mRNA экспрессиясының жүйелік төмендеуі ана героин әсерінен кейінгі церебралды белсенділіктің төмендеуі болуы мүмкін.

Жасөспірім WD егеуқұйрықтары бұрынғы жүріс-тұрысына қайшы келетін майға жылдам араласпайды. Бала кезіндегі «қалыпты» диетаны пайдалану жасөспірімдердің жастық шағындағы майдың артықшылықтарына қарсы «қорғау» сияқты. Керісінше, егеуқұйрықтардың дәмді тағамға еркін қол жеткізуі кезінде, мысалы, Ref. (, ), олар жасөспірімдерде майдың күшті артықшылығын көрсетеді. Бұл нәтиже 3 аптасында сиырдан кейінгі сиыр диетасы тізбектерді қайта бағдарламалауға және жасөспірім ұрпақтарын өткір май мәселесіне сезімтал етуге әкелуі мүмкін екенін көрсетеді.

Перинаталдық ересектердің ересектерге әсері

Ересек егеуқұйрықтар майға арналған артықшылықты айырмашылығы жоқ, тіпті бұрын сипатталғандай майланған презентациядан кейін де, ). Сонымен бірге біз NAc-да Th mRNA және ақуыздың төмендеуін және VTA-дегі Dat mRNA-ның азаю үрдісін байқадық. Наф және әріптес () ертеде егеуқұйрықтардың төменгі белсенділігі туралы хабарлады, бұл перфенатальды кезеңде HFD арқылы беріліп, микродиализмен өлшенген амфетаминге жауапты Д.А. жауапты және май сыйлығы үшін ынталандыруды арттырады (осы модель бойынша соңғы qPCR деректерін жинақтаған кестені қараңыз, Кесте S2 Қосымша материалдарда). NAc-да TH сандық анықтаудың (mRNA және иммуногистохимия) бір шектеуі NAc жасушаларының Th mRNA мен ақуызды білдіруі мүмкін және одан кейін DA талшықтарының сандық мәнін (, ). Дегенмен, NAc-да иммуностринальды көмірсутектерді қолдану негізінен ортаңғы DA DA нейрондарынан (VTA және SNc) келген тығыз аксон терминалдарын анықтады. Әдетте, стриатумда және NAc-дағы нейрондарды білдіретін TH-ды тек жоғары жасушалы зақымданған жануарларда) және, демек, біздің иммундық секцияларда анықталуы мүмкін. Бұл зерттеуде біз NAc-да муиопоидты рецепторлардың күшеюін байқадық, әртүрлі модельдерде HFD (лактация және гестациялық кезеңде) кезінде егеуқұйрықтардың вентральдік стриатомында төмендегенін көрсеткен кезде, ) немесе өзгеріссіз (). Бұл модификациялар тек mRNA деңгейінде өлшенетін, жоғары апиоид сезімталдығымен байланысты DA тізбектерінің аз гипо белсенділігін), ол біз жүргізген мінез-құлық тестіне әсер етуі мүмкін. Бұл жорамалдарды функционалдық тәсілдермен растау қажет. Жақында жасалған ұқсас мақалада Романи-Перес және басқалар HFD ұрпақтарына арналған оперативті жәшіктердегі мотивацияның айтарлықтай өсуін байқай алмады, бірақ ұшу-қону жолындағы тест парадигмасында мақсатты қорапқа жету үшін қысқа кідіріс байқалды). Біздің эксперименттік жағдайларда ұзақ мерзімді майлылықтың болмауына қарамастан, біз перинаталдық аналық WD қабылдаудың басқа церебральды тізбектерге ұзақ уақыт бойы әсер еткенін анықтадық, негізінен NAc және Hypothalamus ішіндегі GABA қайта жасалуы. NAc тұтынушылық мінез-құлық үшін «сенсорлық сенсор» деп қарастырылады (). Жақында жүргізілген зерттеулер GABA-шығаратын LH нейрондарының). O'Connor және т.б. көрсеткендей, NAc D1R нейрондары (GABAergic projecting neurons) LH VGAT нейрондарын тағамдық тұтынуды тоқтату үшін таңдайды). Бұл эксперименттер мінез-құлықты жоюға жауапты болуы мүмкін GABA тізбегін (NAc / Hypothalamus) ашады. Бұл вентальдік стриатум-гипоталамикалық жүйе кереует ядросы стрии терминалының GABA-шығаратын VGAT проекциялаушы нейронды Vglut LH нейрондарын шығаратын глутаматқа және LH vglut2-тің тікелей ингибируетіне байланысты басқа тізбені толтырады). NAc қабықшасын қамтитын аппетит-реттеуші тізбектің тағы бір маңызды құрамдас бөлігі VP-ге (GABA-шығаратын ингибиторлық проекция)). Бұл деректер ГИБА сигнализациясының шешуші рөлін гипоталамус пен НКК арасында азықтандыруды дамытуға ықпалдасады. Зерттеу барысында біз GABA-ның қайта құрылуына қатысатын нейрондық популяцияларды және осы өзгерістерді желілерді қалай өзгерте алатындығын біле алмадық. Алайда GABA тізбектерінің орталық рөлі үлкен қызығушылық тудырады. Атап айтқанда, осы GABA схемаларының функционалды эксперименттерін электрофизиологиялық тәсілдерді қолданумен өте қызықтырады (). Біз сондай-ақ зерттелген үш ядрода 5HT1a және 5HT1b рецепторлары үшін мРНК транскрипті жаһандық көтерілуін байқадық. Көптеген серотонин талшықтарының доральді рэп ядросы (DRN) және медианалық репе ядросы (MRN). Соңғы деректер in vivo жазба және бейнелеу зерттеулері 5HT-тің сыйақының оң рөлін көрсетті (). ДНК-дан алынған 5HT талшықтары диспассвитті бақылауға қатысады (). VTA және NAc ішіндегі 5HT1а үлкейтуді импульстілықты басқаратын компенсаторлық механизм болуы мүмкін. Гипоталамуста фармакологиялық зерттеулер 5HT1a рецепторлардың субтитрлері серотонинді ынталандыру арқылы туындаған қоректік мінез-құлықты бәсеңдетуі мүмкін, ). Гипоталамустағы 5HT1a және b рецепторларының көбеюі серотониннің азықтандырғыш-штамды әсерін күшейте алады, сондықтан компенсаторлық механизм болуы мүмкін. Бұл жорамалдар тиісті функционалдық эксперименттерді орындау арқылы тексерілуі керек.

Бұл желілердің өзгерістері Ncam mRNA ретінде пластика белгілерінің өзгеруімен байланысты. Ересек егеуқұйрықтардың гипоталамусында біз NSC1 және St8sia4 транскрипттерінде полисал қышқылының (PSA) сигнализациясын ұсынатын және көбейтетінін байқадық. PSA - жасуша-жасушалық өзара әрекеттесуді модуляциялайтын ұяшыққа арналған гликан. Жасуша адгезиясы белоктарының полисалиляциясы орталық жүйке жүйесіндегі түрлі синаптической пластикаға тәуелді процестерге қатысады және өткір оң энергия теңгерімі кезінде азықтандырғыш тізбектердің бейімделген синаптиктік пластикасы үшін талап етіледі, ). Бұдан басқа, осы гипоталамустық пластикаға жасушалық өзара әрекеттесудің басқа синтезаторлары және синаптогенез қатысуы мүмкін.

Қорытындыда (сурет (Сурет7), 7), аналық ВД тұтынуы ұрпақтарда тамақтану тәртібін реттейтін гомеостатикалық және гедониялық тізбектерді ұйымдастыруда ұзақ уақытқа ықпал етеді. Маңызды үш кезеңнің талдауы бойынша біз майды мольдік молекулярлық қолдармен салыстырылған майдың артықшылықтары үшін айқын эволюцияны көрсеттік. Бала кезінде майдың артықшылығы DA жүйесінің жоғары белсенділігіне байланысты болуы мүмкін. Майлы преференциялардың инверсиясымен сипатталатын жасөспірім, компенсаторлық механизмді ұсынатын DA жүйе маркерлерінің төменгі білдіруімен байланысты болды. Бұл модельде сепарациядан кейін теңдестірілген диета жасөспірім егеуқұйрықтарды майға деген ықыласын азайтып, зиянды азықтандыру әдеттерінен қорғауы мүмкін екенін ескерту өте қызықты. Дегенмен ересектерде екі топтың майға ұқсас жоғары артықшылықтары болса да, WD берілетін бөгеттерден шыққан егеуқұйрықтар GABA тізбектерін терең қайта құруды көрсетті. Бұл тұрақты пластиканың салдары қандай? Жасөспірім кезіндегі шамадан тыс обезогенді диета қабылдау осы нәзік сыйақы жүйесін қайта іске қосады ма? Мұндай мәселелер батыстық елдерде туылған жаңа туылған балалар мен балалардың тамақтануына қатысты болуы мүмкін.

Этика туралы мәлімдеме

Барлық эксперименттер жергілікті жануарларды қорғау комитетінің, ЕО (директива 2010 / 63 / EU), National de la Recherche Agronomique (Париж, Франция) және Францияның ветеринария департаментіA44276). Эксперименттік хаттама институционалдық этикалық комиссиямен мақұлданды және APAFIS 8666 сілтеме бойынша тіркелді. Стресті азайту және әр эксперимент сериясында қолданылатын жануарлардың санын азайту үшін әрбір сақтық шарасы қабылданды.

Автор жарналары

JP және PB эксперимент жүргізді және талқылауға және жазуға қатысады. ТМ АТК-ны орындады және талқылауға және жазуға қатысады. С.Н. эксперимент жобалауға үлес қосып, талқылауға қатысты. ПП эксперименттің жобалауына ықпал етті, пікірталастарға қатысып, қолжазбаны жазды. В.П. эксперименттерді әзірледі және орындады, деректерді талдап, қолжазбаны жазды.

Мүдделер қақтығысы туралы мәлімдеме

Авторлар бұл зерттеулер коммерциялық немесе қаржылық қатынастар болмаған жағдайда, мүдделер қақтығысы деп түсіндірілуі мүмкін екендігін мәлімдейді.

Алғыс

Авторлар Гриум Пупо мен Бландэн Кастелланоды зерттеу барысында жануарларға күтім жасау үшін Антони Пагниезді мРНҚ алу және TLDA, Изабель Гресттің плазмалық үлгілерді талдаудағы көмегі үшін және Alexandre Benani және Marie-Chantal Canivenc олардың пайдалы талқылауы және TLDA дизайны үшін.

Сілтемелер

 

Қаржыландыру. Бұл зерттеуді аймақ дель-ло-ло-ла-гран-при ПАРИМАД (VP), LCL негізі грант (VP және PP), SanteDige негізі (VP) және INRA Metaprogram DIDIT (SN, VP, PP) қолдау көрсетті.

 

 

Қосымша материалдар

Осы мақаланың қосымша материалын онлайн режимінде табуға болады http://journal.frontiersin.org/article/10.3389/fendo.2017.00216/full#supplementary-material.

Сурет S1

Бөтелкесі бар жүгері майынан жалпы энергия алу. (A) Батыс диеталардан (WD) тамақтандырылған бөгеттерден және бақылау диеталарынан (CD) берілетін бөгеттерден алынған жүгері май бөтелкесінен 24 сағ үшін P25-дегі калорияларды қабылдау. (B) P24-де (бөтелкедегі сынақтың үшінші күні) жүгері май бөтелкесінен кальцийді қабылдау 45 сағ. (C) P24-де (бөтелкедегі сынақтың үшінші күні) жүгері май бөтелкесінен кальцийді қабылдау 95 сағ. Панельдер үшін (A-C), деректер орта ± SEM ретінде көрсетіледі, статистикалық айырмашылық жоқ (p > 0.05) Манн және Уитни параметрлік емес тесттен кейін барлық жаста байқалды. (D) Жүгері майы бөтелкелерінен калорияларды қабылдау пайызы калориялардың жалпы тұтынуына (жүгері майы бөтелкесі + стандартты шок пішіні) 24 сағ үшін P25-те WD-ларында және CD-щеткалармен салыстырылады. (E) Жүгері майының бөтелкесінен калорияларды алу пайызы калориялардың жалпы мөлшеріне (жүгері майының бөтелкесі + стандартты шок пішіні) P24-де (бөтелкедегі сынаудың үшінші күні) 45 сағ үшін WD пупптары мен CD-щеткаларымен салыстырылады. (F) Жүгері майы бөтелкелерінен калорияларды қабылдау пайызы калориялардың жалпы мөлшеріне (жүгері майы бөтелкесі + стандартты шок пішіні) P24-де (бөтелкедегі сынаудың үшінші күні) 95 сағ үшін WD пупс және CD-щеткаларымен салыстырылады. Панельдер үшін (D, E), деректер калориялардың жалпы тұтынуының пайыздық қатынасында көрсетілген статистикалық айырмашылық жоқ (p > 0.05) барлық жасында Йейтс түзетумен хи-квадраттан кейін байқалды.

Сурет S2

Үш түрлі уақыт нүктесіндегі ядролардың акумбензияларында (NAc) және вентальдік тикальді аймақта (VTA) TH иммундауының өкілдік фотомикрографиясы. (A) Bregma жылғы VTA, -5.30 мм деңгейінде TH / NeuN иммуностаздауының фотомикрографиясы. Қызыл таңбалау NeuN үшін, ал жасыл түсті TH үшін. Ақ көрсеткі үшінші нервтің шығуын көрсетеді. (B) NAc, + 1.70 мм-ден Bregma деңгейінде ТМ иммундауының фотомикрографиясы. Жасыл таңбалау TH үшін. Ақ көрсеткі алдыңғы комиссарын көрсетеді.

S1 кестесі

Өмірлік технологияларға сәйкес TaqMan төмен тығыздық массивінің гендік тізбесі инвентаризация кодтары.

S2 кестесі

Допамин жолының транскрипттерінің экспрессиясы туралы жарияланған деректердің қысқаша мазмұны. Қызыл түсті кейіпкерлер балалық кезеңге, көгілдір жасөспірімдерге, ересектерге қара. =: топтар арасында ұқсас транскрипт білдіруге сәйкес келеді, +: жоғары калориялық диеталардан [кәмелетке толмаған тамақтану, батыс диеталар (WD) немесе жоғары майлы диеталардан (HFD)) тамақтандырылған бөгеттерден алынған жәшіктердегі жоғары транскриптіне сәйкес келеді және -: жоғары сапалы тамақтанудан (кәдімгі азық-түлік, WD немесе HFD) аналықтардың төменгі транскриптіне сәйкес келеді.

Әдебиеттер тізімі

1. Баркер DJ. Қарттар ауруларының ұрықтың шығу тегі. Eur J Clin Nutr (1992) 46 (Supple 3): S3-9. [PubMed]
2. Десай М, Гэйл Д, Хан Г, Росс М.Г. Intrauterine growth-restricted ұрпақтарында анорексигенді механизмдердің азаюына байланысты бағдарламаланған гиперфагия. Reprod Sci Thousand Oaks Calif (2007) 14: 329-37.10.1177 / 1933719107303983 [PubMed] [Кросс реф]
3. Горан М И, Думке К, Брут С.Г., Кайзер Б, Уолкер Р.В., Блумберг Б. Ерте даму кезінде жоғары фруктоза әсерінің эффективті әсері. Nat Rev Endocrinol (2013) 9: 494-500.10.1038 / nrendo.2013.108 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
4. Левин Б.Е. Metabolic imprinting: перинаталдық ортаны энергетикалық гомеостазды реттеуге сыни әсері. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci (2006) 361: 1107-21.10.1098 / rstb.2006.1851 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
5. Olson CM, Strawderman MS, Dennison BA. Жүктіліктегі және бала салмағындағы ана салмағының өсуі 3 жыл. Matern Child Health J (2009) 13: 839.10.1007 / s10995-008-0413-6 [PubMed] [Кросс реф]
6. Чен Х, Симар Д, Моррис М.Ж. Гипоталамикалық нейроэндокриндік схема аналық семіздікпен бағдарламаланған: босанғаннан кейінгі тамақтану ортасымен өзара әрекеттеседі. PLoS One (2009) 4: e6259.10.1371 / journal.pone.0006259 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
7. Мухльхейлер Б.С., Адам Кл., Findlay PA, Дафилд Дж.А., McMillen IC. Аналық тамақтанудың артуы мидағы тәбет-реттеу желісін дамытуды өзгертеді. FASEB J (2006) 20: 1257-9.10.1096 / fj.05-5241fje [PubMed] [Кросс реф]
8. Samuelsson AM, Matthews PA, Argenton M, Christie MR, McConnell JM, Jansen EHJM және т.б. Әйелдер тышқандарындағы диеталық семіздік ұрпақ гиперфагиясына, семіздікке, гипертонияға және инсулиннің төзімділігіне әкеледі. Гипертония (2008) 51: 383-92.10.1161 / HYPERTENSIONAHA.107.101477 [PubMed] [Кросс реф]
9. Кенни П.Ж. Семіздік пен нашақорлықтағы жалпы ұялы және молекулалық механизмдер. Nat Rev Neurosci (2011) 12: 638-51.10.1038 / nrn3105 [PubMed] [Кросс реф]
10. Денис Р.Г., Джоли-Амадо А, Веббер Э, Ланглет Ф., Шаеффер М., Падилла С.Л. және т.б. Ұрықтылық AgRP нейрондарына тәуелсіз тамақтануды жүргізе алады. Cell Metab (2015) 22: 646-57.10.1016 / j.cmet.2015.07.011 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
11. Stice E, Spoor S, Bohon C, Small DM. Семіздік пен тамаққа төзімді стрикатальдық реакция арасындағы байланыс TaqIA A1 аллелін басқарады. Ғылым (2008) 322: 449-52.10.1126 / science.1161550 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
12. Фрэнк Г.К., Рейнольдс Дж.Р., Шотт Мэ, Джаппе Л, Янг ТТ, Трегелас Дж.Р. және т.б. Анорексия нервтері және семіздік ми сыйақыларына қарсы әрекетпен байланысты. Нейропсихофармакология (2012) 37: 2031-46.10.1038 / npp.2012.51 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
13. Жасыл E, Jacobson A, Haase L, Murphy C. Жақсартылған ядрода акумент және каудиттің ядросы жағымды дәмге жандандыру ересектердегі семіздікпен байланысты. Brain Res (2011) 1386: 109-17.10.1016 / j.brainres.2011.02.071 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
14. Дэвис Дж.Ф., Трейси А.Л., Шурдк Дж.Д., Цхоп М.Х., Липтон Дж.В., Клегг DJ, және т.б. Жоғары деңгейдегі диеталық майдың әсері егеуқұйрықта психостимулярлық сыйақыны және мезолимикалық допаминнің айналымын төмендетеді. Behav Neurosci (2008) 122: 1257-63.10.1037 / a0013111 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
15. Гейгер Б.М., Хабурак М, Авена Н.М., Мойер М.К., Хоебель Б.Г., Потос Е.Н. Емізік диеталық семестрде мезолимиктің допаминді нейротрансфузиттің тапшылығы. Неврология (2009) 159: 1193-9.10.1016 / j.neuroscience.2009.02.007 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
16. Ривера Х.М., Киевит П, Киригити М.А., Бауман Л.А., Бакеро К, Блунделл П және т.б. Аналық майлы май мен семіздік адамға тән емес приматтың ұрпақтарында дәмдік тамақ қабылдау мен допаминдік сигнал беру әсер етеді. Семіздік (2015) 23: 2157-64.10.1002 / oby.21306 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
17. Gugusheff JR, Ong ZY, Muhlhausler BS. Азық-түлік преференцияларының ерте шығу тегі: дамудың сыни терезелеріне бағытталған. FASEB J (2015) 29: 365-73.10.1096 / fj.14-255976 [PubMed] [Кросс реф]
18. Bayol SA, Farrington SJ, Stickland NC. Жүктіліктегі және лактациядағы аналық «тамақ өнімдері» диетасы «тамақ өнімдері» мен егеуқұйрықтардың семіздікке көбірек бейімділігін арттырады. Br J Nutr (2007) 98: 843-51.10.1017 / S0007114507812037 [PubMed] [Кросс реф]
19. Vucetic Z, Kimmel J, Totoki K, Hollenbeck E, Reyes TM. Аналық майлылығы жоғары диета метилирование және допамин және опиоидпен байланысты гендердің гендік көрінісін өзгертеді. Эндокринология (2010) 151: 4756-64.10.1210 / en.2010-0505 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
20. Naef L, Moquin L, Dal Bo G, Giros B, Gratton A, Walker CD. Аналық майлануды қабылдау ядроның акументіндегі допаминді преснаптическая реттеуді өзгертеді және ұрпақтарда майлы сіңірілуді ынталандырады. Неврология (2011) 176: 225-36.10.1016 / j.neuroscience.2010.12.037 [PubMed] [Кросс реф]
21. Ong ZY, Mühlhausler BS. Ана тамақ өнімдерін тамақтандырудың аналық «азық-түлік тағамдары» азық-түлік таңдауын және ұрпақтарда мезолимикалық сыйлық жолын дамытуды өзгертеді. FASEB J (2011) 25: 2167-79.10.1096 / fj.10-178392 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
22. Романин-Перес М, Лепинай А.Л., Алонсо Л, Ринсел М, Ся Л, Фанет Х және т.б. Перинаталдық әсердің майсыз диета мен стресске әсер етуі тағамдық проблемаларға жауап беру, тамақтану-негізделген мінез-құлық және мезолимикалық допаминнің қызметі. Int J Obes (Lond) (2017) 41 (4): 502-9.10.1038 / ijo.2016.236 [PubMed] [Кросс реф]
23. Beier KT, Steinberg EE, DeLoach KE, Xie S, Miyamichi K, Schwarz L және т.б. VTA допаминдік нейрондарының схемалық сәулеті жүйелі кіріс-шығыс картасынан анықталады. Ұяшық (2015) 162: 622-34.10.1016 / j.cell.2015.07.015 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
24. Tan KR, Yvon C, Turiault M, Mirzabekov JJ, Doehner J, Labouie G және т.б. VAB драйвының GABA нейрондары орын алуы мүмкін. Нейрон (2012) 73: 1173-83.10.1016 / j.neuron.2012.02.015 [PubMed] [Кросс реф]
25. ван Зессен Р, Филлипс Дж.Л., Будыгин Е.А., Стюбер Г.Д. VTA GABA нейрондарын белсендіру сыйақыны тұтынуды бұзады. Нейрон (2012) 73: 1184-94.10.1016 / j.neuron.2012.02.016 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
26. Ху Х. Сыйлық және құтқару. Annu Rev Neurosci (2016) 39: 297-324.10.1146 / annurev-neuro-070815-014106 [PubMed] [Кросс реф]
27. Стенли Б.Г., Urstadt KR, Charles JR, Kee T. Glutamate және GABA азық-түлікті қабылдауды басқаратын жанама гипоталамикалық механизмдерде. Physiol Behav (2011) 104: 40-6.10.1016 / j.physbeh.2011.04.046 [PubMed] [Кросс реф]
28. Ансел Д, Бернар А, Субраманиам С, Хирасава А, Цуджимото Г, Хашимото Т, және т.б. Ауызша lipid сенсоры GPR120 тышқандардағы диеталық липидтердің оросенсорлық анықтауы үшін қажет емес. J Lipid Res (2015) 56: 369-78.10.1194 / jlr.M055202 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
29. Экрофф К, Лукас Ф., Склафани А. Флавинфорттың майлылық көзі функциясы ретінде жайландыруы. Physiol Behav (2005) 85: 448-60.10.1016 / j.physbeh.2005.05.006 [PubMed] [Кросс реф]
30. Camandola S, Mattson MP. Toll-like рецепторы 4 майы, қант және umami дәмі мен тағамның тұтынылуына және дене салмағының реттелуіне ықпал етеді. Семіздік (2017) 25: 1237-45.10.1002 / oby.21871 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
31. Coupé B, Amarger V, Grit I, Benani A, Parnet P. Тамақтану бағдарламалары гипоталамикалық ұйымдастыруды және лептинді ертерек реакцияға әсер етеді. Эндокринология (2010) 151: 702-13.10.1210 / en.2009-0893 [PubMed] [Кросс реф]
32. Paillé V, Brachet P, Damier P. Паркинсон ауруының егеуқұйрықтағы дискинезиялар генезінде нигральді зақымданудың рөлі. Нейоропорт (2004) 15: 561-4.10.1097 / 00001756-200403010-00035 [PubMed] [Кросс реф]
33. Бенани А, Гриорчук С, Гуазе А, Фьорамонти X, Бреначот Х, Гиссард С және т.б. Тамақтанудың диеталық майына бейімделуі тышқандардағы аркациялық меланокортиннің PSA-тәуелді рециркуляциясын қамтиды. J Neurosci (2012) 32: 11970-9.10.1523 / JNEUROSCI.0624-12.2012 [PubMed] [Кросс реф]
34. Kirk SL, Samuelsson AM, Argenton M, Dhonye H, Kalamatianos T, Poston L және т.б. Егеуқұйрықта диета тудырған аналық семіздік ұрпаққа тағам қабылдауды реттейтін орталық процестерге түбегейлі әсер етеді. PLoS One (2009) 4: e5870.10.1371 / journal.pone.0005870 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
35. Ong ZY, Mühlhausler BS. Ажыратылғаннан бастап ересекке дейінгі аз майдың диетасын тұтыну еркектегі тағамдық преформаларды бағдарламалауды қалпына келтіреді, бірақ әйелде емес, «қоқыс тамақ» ұрпақтары - егеуқұйрықтар. Acta Physiol Oxf Engl (2014) 210: 127-41.10.1111 / apha.12132 [PubMed] [Кросс реф]
36. Ribaroff GA, Wastnedge E, Drake AJ, Sharpe RM, Chambers TJG. Жануарлардағы метаболизмге анадан жоғары майдың диеталық әсері мен әсер етуінің жануарлар үлгілері: мета-регрессиялық талдау. Obes Rev (2017) 18 (6): 673-86.10.1111 / obr.12524 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
37. Bautista CJ, Montaño S, Ramirez V, Morales A, Nathanielsz PW, Bobadilla NA және т.б. Майсыз диетаны пайдаланатын семіздік егеуқұйрықтарындағы сүт құрамының өзгеруі. Br J Nutr (2015) 115: 538-46.10.1017 / S0007114515004547 [PubMed] [Кросс реф]
38. Rolls BA, Gurr MI, Van Duijvenvoorde PM, Rolls BJ, Rowe EA. Лейкозды және семіздік егеуқұйрықтардағы лактация: асханалық тамақтандыру және диеталық семіздік сүт құрамына әсері. Physiol Behav (1986) 38: 185-90.10.1016 / 0031-9384 (86) 90153-8 [PubMed] [Кросс реф]
39. Ақ CL, Purpera MN, Morrison CD. Аналық семіздік - ұрғашы майы бойынша майдың жоғары мөлшерін бағдарламалау үшін қажет. Am J Physiol Регулының Интегралды Comp Physiol (2009) 296: R1464.10.1152 / ajpregu.91015.2008 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
40. Sun B, Purcell RH, Терриллон CE, Yan J, Moran TH, Tamashiro KLK. Емшектегі немесе эмбрионда ана мен майдың жоғары диеталық мөлшері дифференциалды түрде лептина сезімталдығына және семіруге әсер етеді. Қант диабеті (2012) 61: 2833-41.10.2337 / db11-0957 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
41. Berthoud HR. Метаболиттік және гедитоналық қозғалыс: тәбет нервтердің бақылауында: басшы кім? Curr Opin Neurobiol (2011) 21: 888-96.10.1016 / j.conb.2011.09.004 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
42. Henning SJ, Chang SS, Gisel EG. Емшек пен егеуқұйрық егеуқұйрықтарында азықтандыруды бақылаудың онтогениясы. Physiol (1979) 237: R187-91. [PubMed]
43. Лейбовиц СФ, Лукас DJ, Лейбовиц КЛ, Джанвар Ю.С. Әйелдер мен ерлер егеуқұйрықтарында емізуден бастап жетілуіне дейінгі макронутриентпен емдеудің даму заңдылықтары. Physiol Behav (1991) 50: 1167-74.10.1016 / 0031-9384 (91) 90578-C [PubMed] [Кросс реф]
44. Trifilieff P, Feng B, Urizar E, Winiger V, Ward RD, Taylor KM және т.б. Ересек ядросы акументіндегі DPAMIN D2 рецепторлық өрнегін арттыру мотивацияны күшейтеді. Mol психиатриясы (2013) 18: 1025-33.10.1038 / mp.2013.57 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
45. Spear LP. Жасөспірім миы және жасқа байланысты мінез көріністері. 2000: 24-417 / S63.10.1016-0149 (7634) 00-00014 [PubMed] [Кросс реф]
46. Vendruscolo LF, Gueye AB, Darnaudéry M, Ahmed SH, Cador M. Sugar жасөспірімдік кезінде шамадан тыс тұтыну ересек егеуқұйрықтарда мотивацияны және сыйақы функциясын таңдауды өзгертеді. PLoS One (2010) 5: e9296.10.1371 / journal.pone.0009296 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
47. Boitard C, Parkes SL, Cavaroc A, Tantot F, Castanon N, Layé S және т.б. Ересектерге арналған жоғары деңгейлі ересектерге арналған диетаны ересектерге арналған диетаға ауыстыру нейрокогнитикалық өзгерістерді қалпына келтіреді. Front Behav Neurosci (2016) 10: 225.10.3389 / fnbeh.2016.00225 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
48. Naneix F, Darlot F, Coutureau E, Cador M. Gedonic және ядро ​​акументінің ұзартылған тапшылығы жасөспірімдер кезінде қанттың артық тамақтануы арқылы тәтті сыйлықтарға әсер етеді. Eur J Neurosci (2016) 43: 671-80.10.1111 / ejn.13149 [PubMed] [Кросс реф]
49. Бейкер Х, Кобайаши К, Окано Х, Саино-Саито С. Туырлы және ересек тышқандарда тирозин гидроксилазасы мРНК-ның кортикальды және стриальды экспрессиясы. Cell Mol Neurobiol (2003) 23: 507-18.10.1023 / A: 1025015928129 [PubMed] [Кросс реф]
50. Джабер М, Думартин Б, Сагне С, Хайрок Дж.В., Рубер С., Гирос Б. және т.б. Допаминді тасымалдаушысы жоқ тышқандардың негізгі ганглиитарында тирозин гидроксилазасын дифференциалды реттеу. Eur J Neurosci (1999) 11: 3499-511.10.1046 / j.1460-9568.1999.00764.x [PubMed] [Кросс реф]
51. Клиец М, Кибер У, Карлссон Т, Чиу У.Х., Гёглингер Г.В., Вейхе Э. және т.б. l-DOPA инжинирленген дискинезиясы стринатальды тирозин гидроксилазасының мРНК-экспрессияланатын нейрондарының сандық төмендетуімен байланысты. Неврология (2016) 331: 120-33.10.1016 / j.neuroscience.2016.06.017 [PubMed] [Кросс реф]
52. Келли А.Е., Балдо Б.А., Патт Б.В., Уилл Мэй. Кортикостатикалық-гипоталамикалық схемотехника және тағамдарды ынталандыру: энергияны интеграциялау, әрекеттер және сыйақы. Physiol Behav (2005) 86: 773-95.10.1016 / j.physbeh.2005.08.066 [PubMed] [Кросс реф]
53. Jennings JH, Ung RL, Resendez SL, Stamatakis AM, Taylor JG, Huang J және т.б. Тәбет және тұтынушылық мінез-құлық үшін гипоталамус желісінің динамикасын бейнелеу. Ұяшық (2015) 160: 516-27.10.1016 / j.cell.2014.12.026 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
54. O'Connor EC, Kremer Y, Lefort S, Harada M, Pascoli V, Rohner C және т.б. Бүйір гипоталамусқа бағытталған акумбальды D1R нейрондары тамақтануға рұқсат береді. Нейрон (2015) 88: 553-64.10.1016 / j.neuron.2015.09.038 [PubMed] [Кросс реф]
55. Jennings JH, Rizzi G, Stamatakis AM, Ung RL, Stuber GD. Бүйірлік гипоталамус оркестрлерін тамақтандырудың ингибиторлық схемасы. Ғылым (2013) 341: 1517-21.10.1126 / science.1241812 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
56. Stratford TR, Wirtshafter D. Вентральдік палидумдан алынған тамақтану кезінде гитаральды гитаральды қатысу. Eur J Neurosci (2013) 37: 648-53.10.1111 / ejn.12077 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]
57. Paille V, Fino E, Du K, Morera-Herreras T, Perez S, Kotaleski JH және т.б. GABAergic схемалары қысқа уақытқа тәуелді пластиканы басқарады. J Neurosci (2013) 33: 9353-63.10.1523 / JNEUROSCI.5796-12.2013 [PubMed] [Кросс реф]
58. Фонсека М.С., Мураками М., Майнен З.Ф. Серотонергические нейрондардың доральді репрессиясын белсендіру күтуге ықпал етеді, бірақ оны күшейтпейді. Curr Biol (2015) 25: 306-15.10.1016 / j.cub.2014.12.002 [PubMed] [Кросс реф]
59. Дойя К. Металлургия және нейромодуляция. Нейрондық желі (2002) 15: 495-506.10.1016 / S0893-6080 (02) 00044-8 [PubMed] [Кросс реф]
60. Лейбовиц СФ, Александр Ж.Т. Тамақтану, тағам мөлшерін және дене салмағын бақылауға арналған гипоталамикалық серотонин. Biol Psychiatry (1998) 44: 851-64.10.1016 / S0006-3223 (98) 00186-3 [PubMed] [Кросс реф]
61. Voigt JP, Fink H. Серотонин тамақтандыру және қанықтыруды бақылайды. Behav Brain Res (2015) 277: 14-31.10.1016 / j.bbr.2014.08.065 [PubMed] [Кросс реф]
62. Бреначот Х, Ригауль С, Неделес Е, Ладерриер А, Ханам Т, Гуазе А және т.б. Гистон ацетилтрансферазы MOF тышқандардағы семіздікке жол бермеу үшін гипоталамикалық полисалиляцияны белсендіреді. Mol Metab (2014) 3: 619-29.10.1016 / j.molmet.2014.05.006 [PMC тегін мақаласы] [PubMed] [Кросс реф]