ಡೆಲ್ಟಾಫೊಸ್ಬ್ ಪರೋಕ್ಷವಾಗಿ ಸಿಕ್ ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು (2010) ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ

ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. 2010 ಮೇ 6; 1329: 10 - 20.

ಆನ್‌ಲೈನ್‌ನಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟಿಸಲಾಗಿದೆ 2010 ಮಾರ್ಚ್ 11. ನಾನ:  10.1016 / j.brainres.2010.02.081

PMCID: PMC2876727

ಜಾನ್ ಎಫ್. ಎನ್‌ರೈಟ್, III,1 ಮೇಗನ್ ವಾಲ್ಡ್,1 ಮ್ಯಾಡಿಸನ್ ಪ್ಯಾಡಾಕ್,1 ಎಲಿಜಬೆತ್ ಹಾಫ್ಮನ್,1 ರಾಚೆಲ್ ಅರೆ,2 ಸ್ಕಾಟ್ ಎಡ್ವರ್ಡ್ಸ್,2 ಸೇಡ್ ಸ್ಪೆನ್ಸರ್,2 ಎರಿಕ್ ಜೆ. ನೆಸ್ಟ್ಲರ್,3 ಮತ್ತು ಕೊಲೀನ್ ಎ. ಮೆಕ್ಲಂಗ್2, *

ಲೇಖಕ ಮಾಹಿತಿ ► ಕೃತಿಸ್ವಾಮ್ಯ ಮತ್ತು ಪರವಾನಗಿ ಮಾಹಿತಿ ►

ಈ ಲೇಖನದ ಪ್ರಕಾಶಕರ ಅಂತಿಮ ಸಂಪಾದಿತ ಆವೃತ್ತಿ ಲಭ್ಯವಿದೆ ಬ್ರೇನ್ ರೆಸ್

PMC ಯಲ್ಲಿ ಇತರ ಲೇಖನಗಳನ್ನು ನೋಡಿ ಉಲ್ಲೇಖ ಪ್ರಕಟವಾದ ಲೇಖನ.

ಇಲ್ಲಿಗೆ ಹೋಗು:

ಅಮೂರ್ತ

ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಮಾನ್ಯತೆಯಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ಕೆಲವು ಪ್ರಮುಖ ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕ, ರಚನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ನಡವಳಿಕೆಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಹೆಚ್ಚು ಸ್ಥಿರವಾದ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶ ΔFosB ಯಿಂದ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸಿದಂತೆ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ. 2 ವಾರಗಳ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಹಲವಾರು ಜೀನ್‌ಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಹೆಚ್ಚಳಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ಹಿಂದಿನ ಕೃತಿಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ, ಇವುಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿನವು 8 ವಾರಗಳ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ ಅನಿಯಂತ್ರಿತವಾಗಿವೆ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, CREB ಎಂಬ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶವನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಈ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯಲ್ಲಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ಅಧ್ಯಯನದಿಂದ ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಈ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು CREB ಮೂಲಕ ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆಯೇ ಎಂಬುದು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿಲ್ಲ. XFOMB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ 2 ವಾರಗಳ ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ CREB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಇಲ್ಲಿ ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ, ಇದು 8 ವಾರಗಳಿಂದ ಕರಗುತ್ತದೆ. ಆರಂಭಿಕ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ಈ ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶದ ಕೆಲವು ಗುರಿ ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಿದ CREB ಬಂಧನದೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಆಶ್ಚರ್ಯಕರವಾಗಿ, ಹಿಂದಿನ ವರದಿಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ ಶಂಕಿತ CREB ಗುರಿಯಾಗಿದ್ದ ಒಂದು ಜೀನ್, ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ (ಸಿ.ಕೆ), ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ CREB ನಿಂದ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿಲ್ಲ. ನ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲು ಸಿ.ಸಿ. osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ, ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಎರಡನ್ನೂ ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ದೃ confirmed ಪಡಿಸಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. ಇದು ಪುಟ್ಟೇಟಿವ್ CREB ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಸೈಟ್ (CRE) ನಲ್ಲಿ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಸಾಮಾನ್ಯ ತಳದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ CRE ಸೈಟ್ ಅವಶ್ಯಕವಾಗಿದೆ ಸಿ.ಸಿ., ΔFosB ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಇದು ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ.. ಒಟ್ಟಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಪ್ರಚೋದನೆಯು ಕೆಲವು ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕಗಳಲ್ಲಿ CREB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಈ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ಏಕೈಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಲ್ಲ.

ಕೀವರ್ಡ್ಗಳನ್ನು: ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್, ಪ್ರತಿಲೇಖನ, ಚಟ

ಇಲ್ಲಿಗೆ ಹೋಗು:

ಪರಿಚಯ

ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಮಾನ್ಯತೆ ಹಲವಾರು ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕ ಮತ್ತು ರಚನಾತ್ಮಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಈ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಮೆಸೊಲಿಂಬಿಕ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿನ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪ್ರೊಫೈಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ ಎಂದು ಭಾವಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯು ಡೋಪಮಿನರ್ಜಿಕ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಿಂದ ಕೂಡಿದ್ದು, ಇದು ಮಿಡ್‌ಬ್ರೈನ್‌ನಲ್ಲಿನ ವೆಂಟ್ರಲ್ ಟೆಗ್ಮೆಂಟಲ್ ಏರಿಯಾ (ವಿಟಿಎ) ಯಿಂದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ (ಎನ್‌ಎಸಿ) (ವೆಂಟ್ರಲ್ ಸ್ಟ್ರೈಟಮ್) ಮತ್ತು ಇತರ ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿನ ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳವರೆಗೆ ಯೋಜಿಸುತ್ತದೆ. ಎರಡು ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಗಳ ಚಟುವಟಿಕೆಯಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳು, ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಅಂಶ ಬಂಧಿಸುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ (ಸಿಆರ್‌ಇಬಿ) ಮತ್ತು os ಫಾಸ್ಬಿ (ಫಾಸ್ ಫ್ಯಾಮಿಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್), ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಒಡ್ಡಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಕಂಡುಬರುವ ಅನೇಕ ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕ, ರಚನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ನಡವಳಿಕೆಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸಲು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ ( ಇವರಿಂದ ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಗಿದೆ ನೆಸ್ಲರ್, 2005).

CREB ಎಂಬುದು ಸರ್ವತ್ರವಾಗಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶವಾಗಿದ್ದು ಅದು CREB / ATF ಕುಟುಂಬದ ಸದಸ್ಯ. CREB ಹೋಮೋಡಿಮರ್‌ಗಳು ಅನೇಕ ಜೀನ್‌ಗಳ ಪ್ರವರ್ತಕಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ CRE ಅನುಕ್ರಮದ (ಒಮ್ಮತ: TGACGTCA) ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ. CREB ಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ (ಪ್ರಧಾನವಾಗಿ ಸೆರೈನ್ 133 ನಲ್ಲಿ, ಇತರ ಸೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದ್ದರೂ) ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಕೆಳಭಾಗವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ ಹಲವಾರು ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಕ್ಯಾಸ್ಕೇಡ್‌ಗಳಿಂದ ಉತ್ತೇಜಿಸಬಹುದು (ಕೋಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1995). ಸೆರಿನ್ 133 ನಲ್ಲಿ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ನಂತರ, CREB ಸಹ-ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್ CREB ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ (ಸಿಬಿಪಿ) ಅಥವಾ ಸಂಬಂಧಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ನೇಮಕ ಮಾಡುತ್ತದೆ, ಇದು ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ (ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ ಜೋಹಾನ್ಸೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004). ದುರುಪಯೋಗದ ಓಪಿಯೇಟ್ ಅಥವಾ ಸೈಕೋಸ್ಟಿಮ್ಯುಲಂಟ್ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಮಾನ್ಯತೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ CREB ಚಟುವಟಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಅಸ್ಥಿರ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ (ಬ್ಯಾರಟ್ et al., 2002; ಶಾ-ಲಚ್ಮನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002, 2003), ಈ drugs ಷಧಿಗಳ ಲಾಭದಾಯಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಮತ್ತು drug ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯ ಭಾವನಾತ್ಮಕ ಸ್ಥಿತಿಗೆ ಕೊಡುಗೆ ನೀಡುವ ರೂಪಾಂತರ (ನೆಸ್ಲರ್, 2005).

Lದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ಒಂಗರ್-ಶಾಶ್ವತ ರೂಪಾಂತರಗಳು ಫಾಸ್ಬಿಯ ಹೆಚ್ಚು ಸ್ಥಿರವಾದ ಸ್ಪ್ಲೈಸ್ ರೂಪಾಂತರವಾದ os ಫಾಸ್ಬಿ ಯಿಂದ ಭಾಗಶಃ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಭಾವಿಸಲಾಗಿದೆ. (ನೆಸ್ಟ್ಲರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1999; ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ಇತರರು., 2004; ನೆಸ್ಲರ್, 2008). ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ 1 (AP-1) ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸಲು ಫಾಸ್ ಕುಟುಂಬ ಸದಸ್ಯರು ಜೂನ್ ಕುಟುಂಬದ ಸದಸ್ಯರೊಂದಿಗೆ ಡೈಮರೈಜ್ ಮಾಡುತ್ತಾರೆ. AP-1 ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳು ಪ್ರತಿಲೇಖನವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲು AP-1 ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಅಂಶದ (ಒಮ್ಮತ: TGACTCA) ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳೊಂದಿಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ (ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ ಚಿನೆನೊವ್ ಮತ್ತು ಕೆರ್ಪೋಲಾ, 2001). ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ತೀವ್ರವಾದ ಒಡ್ಡುವಿಕೆ ಫೋಸ್-ಕುಟುಂಬ ಸದಸ್ಯರ ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ (ಗಂ) ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ (ಜೊತೆಗೆ ಹೆಚ್ಚಿದ CREB ಚಟುವಟಿಕೆ), ಪುನರಾವರ್ತಿತ drug ಷಧ ಮಾನ್ಯತೆ ಹೆಚ್ಚು ಸ್ಥಿರವಾದ osFosB (ಹೋಪ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1994; ಪೆರೊಟ್ಟಿ et al., 2008), ಇದರ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಇರುತ್ತದೆ.

ವಯಸ್ಕ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ osFosB ಅಥವಾ CREB ಅನ್ನು ದ್ವಿ-ಟ್ರಾನ್ಸ್ಜೆನಿಕ್ ಇಲಿಗಳು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವುದರಿಂದ ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ ಅನೇಕ ಜೀವರಾಸಾಯನಿಕ ಮತ್ತು ನಡವಳಿಕೆಯ ಫಿನೋಟೈಪ್‌ಗಳನ್ನು ಸೈಕೋಸ್ಟಿಮ್ಯುಲಂಟ್‌ಗಳು ಅಥವಾ ಇತರ ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ಪದೇ ಪದೇ ಒಡ್ಡಲಾಗುತ್ತದೆ. ಎಈ ಜೀವಾಂತರ ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿನ ವಂಶವಾಹಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಬದಲಾವಣೆಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ (2 ವಾರಗಳು) osFosB ಯ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದಿಂದ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಹಲವಾರು ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಿದೆ, drug ಷಧಿ ಪ್ರತಿಫಲದಲ್ಲಿ ಏಕರೂಪದ ಇಳಿಕೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಬದಲಾವಣೆಗಳು. ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಯೊಂದಿಗೆ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ನಡವಳಿಕೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳು 2 ಅಥವಾ 8 ವಾರಗಳವರೆಗೆ CREB ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವ ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವಂತೆಯೇ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೋಲುತ್ತವೆ (ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್). ಇದಕ್ಕೆ ತದ್ವಿರುದ್ಧವಾಗಿ, osFosB ಯ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡ (8 ವಾರಗಳು) ಇದೇ ರೀತಿಯ ಅನೇಕ ಜೀನ್‌ಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ಮತ್ತು drug ಷಧಿ ಬಹುಮಾನದ ಹೆಚ್ಚಳಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ (ಕೆಲ್ಜ್ et al., 1999; ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್).

ಈ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಗುರುತಿಸಲಾದ ಒಂದು ಜೀನ್ ಆಗಿದೆ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೋಕಿನಿನ್ (ಸಿ.ಸಿ.), ಸ್ಟ್ರೈಟಮ್ ಸೇರಿದಂತೆ ಹಲವಾರು ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾಗುವ ನ್ಯೂರೋಪೆಪ್ಟೈಡ್ (ಹಾಕ್ಫೆಲ್ಟ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1980). ಸಿಸಿಕೆ ಡೋಪಮಿನರ್ಜಿಕ್ ಪ್ರಸರಣವನ್ನು ಮಾಡ್ಯೂಲ್ ಮಾಡಬಹುದು (ವ್ಯಾಕರಿನೊ, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್), drug ಷಧಿ ಪ್ರತಿಫಲ ಮತ್ತು ಬಲವರ್ಧನೆಯಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿದೆ (ಜೋಸ್ಲಿನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1996; ಜೋಸ್ಲಿನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1997; ಹ್ಯಾಮಿಲ್ಟನ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2000; ಬೀನ್ಫೆಲ್ಡ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002; ರೊಟ್ಜಿಂಜರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002), ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್‌ನಿಂದ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ (ಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಮೊಚೆಟ್ಟಿ, 1992). ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ ಸಿ.ಸಿ. CREB ಮತ್ತು AP-1 ಸಂಕೀರ್ಣಗಳಿಗೆ ಪ್ರವರ್ತಕ ಸ್ಪಂದಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಹಾನ್ ಮತ್ತು ಡಿಕ್ಸನ್, 1990; ಡೆವಾಲ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2000; ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್, 2001). ಅನೇಕ ಜೀನ್‌ಗಳಿಂದ (ಸೇರಿದಂತೆ ಸಿ.ಸಿ.) ಇದು CREB ಮತ್ತು ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಎರಡನ್ನೂ ಅನುಸರಿಸಿ ಹೆಚ್ಚಿದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ ಅಥವಾ CREB ಗುರಿ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ತಿಳಿದಿತ್ತು ಅಥವಾ ಶಂಕಿಸಲಾಗಿದೆ (ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್), ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಈ ಜೀನ್‌ಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆಯೇ ಎಂದು ನಾವು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಬಯಸಿದ್ದೇವೆ (ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಿ ಸಿ.ಸಿ.) CREB ಯ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಮೂಲಕ ಅಥವಾ ಜೀನ್ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಹೆಚ್ಚು ಸಂಕೀರ್ಣ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಮೂಲಕ.

ಇಲ್ಲಿಗೆ ಹೋಗು:

ಫಲಿತಾಂಶಗಳು

OsFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು CREB ಮಟ್ಟವನ್ನು ಅಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ

ΔFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಇಲಿಗಳ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ CREB ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆಯೇ ಎಂದು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲು ನಾವು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಈ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕಾಗಿ, ನಾವು ಎನ್ಎಸ್ಇ-ಟಿಟಿಎ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಜೆನ್ ಮತ್ತು ಟೆಟೊಪ್-ಫಾಸ್ಬಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಜೆನ್ ಎರಡನ್ನೂ ಸಾಗಿಸುವ ದ್ವಿ-ಟ್ರಾನ್ಸ್ಜೆನಿಕ್ ಇಲಿಗಳನ್ನು (ಲೈನ್ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎ) ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಡಾಕ್ಸಿಸೈಕ್ಲಿನ್ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ, ಈ ಇಲಿಗಳು ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿನ ಡೈನಾರ್ಫಿನ್ ಪಾಸಿಟಿವ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯಲ್ಲಿ ದೃ increase ವಾದ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ (ಕೆಲ್ಜ್ et al., 1999). OssFosB ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವ ವಿಧಾನವನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನುಮತಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ಒಡ್ಡಿಕೊಂಡ ಪ್ರಾಣಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ osFosB ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಸಮನಾಗಿರುತ್ತದೆ (ಹೋಪ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1994; ಕೆಲ್ಜ್ et al., 1999). 11A ಇಲಿಗಳನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವ osFosB ಯಲ್ಲಿ, 2 ವಾರಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ CREB ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು 8 ವಾರಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ ಈ ಮಟ್ಟಗಳು ಬೇಸ್‌ಲೈನ್‌ಗೆ ಮರಳಿದವು ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ (ಚಿತ್ರ 1A, n = 8). ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದೊಂದಿಗೆ CREB ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಮತ್ತೊಂದು ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿಸಬಹುದೇ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲು, ನಾವು ಪಿಸಿ 12 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ osFosB ಅನ್ನು ಅಸ್ಥಿರವಾಗಿ ಅತಿಯಾಗಿ ಒತ್ತಿಹೇಳಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದಾಗ CREB ಮಟ್ಟಗಳು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ (p <0.05)ಚಿತ್ರ 1B, n = 4). ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ CREB ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.

ಚಿತ್ರ 1

ಚಿತ್ರ 1

REFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದೊಂದಿಗೆ CREB ಮಟ್ಟಗಳು ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತವೆ. ನಿಂದ ಲೈಸೇಟ್ಗಳ ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (ಎ) 11A ಅಥವಾ 2 ವಾರಗಳವರೆಗೆ 8A ಇಲಿಗಳಿಂದ ಡಾಕ್ಸ್ ಆಫ್ ಮೌಸ್ ಸ್ಟ್ರೈಟಾ ಅಥವಾ (ಬಿ) PC12 ಕೋಶಗಳು ಅತಿಯಾದ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವಿಕೆ osFosB. ಡೇಟಾ A ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಆಫ್ ಡಾಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿನ ಶೇಕಡಾ ಬದಲಾವಣೆಯಂತೆ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ...

OssFosB ಮತ್ತು CREB ಎರಡೂ ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ನಂತರ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಗುರಿ ಜೀನ್‌ಗಳ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ

ಕೆಲವು ಗುರಿ ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕಗಳಲ್ಲಿ osFosB ಅಥವಾ CREB ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯು ಸಂಭವಿಸಿದೆಯೇ ಮತ್ತು ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ನಂತರ ಈ ಬಂಧನವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲಾಗಿದೆಯೆ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ನಾವು ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಅಂಗಾಂಶದ ಚಿಪ್ (ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಶನ್) ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ನಾವು ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದ್ದೇವೆ ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್ ಮತ್ತು ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕರು, ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡ, CREB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡ, ಅಥವಾ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ಎರಡೂ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್). ನಾವು ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದ್ದೇವೆ CDK5 ಪ್ರವರ್ತಕ, ಏಕೆಂದರೆ ಇದು osFosB ಯ ನೇರ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ (ಚೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2000; ಬಿಬ್ ಎಟ್ ಅಲ್., ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್; ಕುಮಾರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2005). ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ನಾವು ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಅಳೆಯುತ್ತೇವೆ ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಪ್ರವರ್ತಕ, ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಇದನ್ನು ವಿಭಿನ್ನ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ osFosB ಮತ್ತು CREB ಎರಡರಿಂದಲೂ ಬಂಧಿಸಬಹುದೆಂದು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿದೆ (ಆಂಡರ್ಸನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2001; ಜಚಾರಿಯು ಮತ್ತು ಇತರರು, 2006).

CREB ಅಥವಾ osFosB ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸುವ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು 11A ಇಲಿಗಳಿಂದ ಅತಿಯಾದ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ಸಿಂಗ್ ΔFosB ಯಿಂದ ಸ್ಟ್ರೈಟಾದಲ್ಲಿ ಚಿಪ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಸಾಮಾನ್ಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, osFosB ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ CDK5 ಮತ್ತು ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಪ್ರವರ್ತಕರು, ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ಯಾವುದೇ ಬಂಧನವಿಲ್ಲದಿದ್ದರೂ ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್ or ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕರು (ಟೇಬಲ್ 1). ಇದಲ್ಲದೆ, osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ΔFosB ಯ ಬಂಧನವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ CDK5 ಪ್ರವರ್ತಕ, ಆದರೆ ನಲ್ಲಿ ಅಲ್ಲ ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಪ್ರವರ್ತಕ. ನಾವು ಮುಂದಿನ ಈ ಪ್ರವರ್ತಕರಲ್ಲಿ CREB ಬಂಧವನ್ನು ಅಳೆಯುತ್ತೇವೆ ಮತ್ತು CREB ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ CDK5, BDNF ಮತ್ತು ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಪ್ರವರ್ತಕರು, ಆದರೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ, ಸಾಮಾನ್ಯ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ, ಮತ್ತು 2 ವಾರಗಳ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು CREB ಬಂಧವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಪ್ರವರ್ತಕರು, ಆದರೆ ಅಲ್ಲ CDK5 ಪ್ರವರ್ತಕ. ಒಟ್ಟಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು osFosB ಮತ್ತು CREB ಎರಡೂ ಕೆಲವು ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ಬಂಧಿಸಬಲ್ಲವು ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಮತ್ತು CDK5ಆದಾಗ್ಯೂ, CREB ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಇತರ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿದೆ ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್. ಇದಲ್ಲದೆ, osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಕೆಲವು ಪ್ರವರ್ತಕರಲ್ಲಿ osFosB ಬಂಧನದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಳಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ನಿರೀಕ್ಷೆಯಂತೆ, ಆದರೆ CREB ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ, ಈ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಗಮನಿಸಿದ osFosB- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ CREB ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತದೆ.

ಟೇಬಲ್ 1

ಟೇಬಲ್ 1

ಎರಡು ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವ osFosB ಯಲ್ಲಿ ವಿವಿಧ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ಪುಟಟಿವ್ ರೆಗ್ಯುಲೇಟರಿ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಂಧಿಸುವುದು.

ಹಿಂದಿನ ಕೃತಿಗಳು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದಿಂದ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿವೆ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕಗಳಲ್ಲಿ ಹಿಸ್ಟೋನ್ H3 ನ ಅಸಿಟೈಲೇಷನ್ (ಕುಮಾರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2005). ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ಮೇಲೆ ಇದು ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದೆ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲು, ನಾವು ಅಸಿಟೈಲೇಟೆಡ್ ಹಿಸ್ಟೋನ್ H3 (ಪ್ರತಿಲೇಖನವಾಗಿ ಸಕ್ರಿಯ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್‌ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಮಾರ್ಪಾಡು), ಅಥವಾ ಮೆಥೈಲೇಟೆಡ್ ಹಿಸ್ಟೋನ್ H3 (Lys9, ಪ್ರತಿಲೇಖನಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಮಾರ್ಪಾಡು) ನಿಷ್ಕ್ರಿಯ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್). 2 ವಾರಗಳವರೆಗೆ osFosB ಯ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಿದ ಯಾವುದೇ ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕಗಳಲ್ಲಿ ಅಸಿಟೈಲೇಟೆಡ್ H3 ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುವಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಲ್ಲ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ (ಟೇಬಲ್ 1). ಮೆಥೈಲೇಟೆಡ್ ಹಿಸ್ಟೋನ್ H3 ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುವಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಇಳಿಕೆ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಪ್ರವರ್ತಕ, ಆದರೆ ಯಾವುದೇ ಬಂಧನವಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಮತ್ತು ಬೈಂಡಿಂಗ್ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಬದಲಾವಣೆ ಇಲ್ಲ CDK5 ಮತ್ತು ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್ ಪ್ರವರ್ತಕರು, ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದರ ಮೂಲಕ osFosB, ಅಲ್ಪಾವಧಿಯಲ್ಲಿ, ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ನಮ್ಮ ಚಿಪ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ ಎಂಬ ಅಂಶದಲ್ಲಿ ನಮಗೆ ಆಶ್ಚರ್ಯ ಮತ್ತು ಆಸಕ್ತಿ ಇತ್ತು ಸಿ.ಸಿ. 11 ವಾರಗಳ ΔFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ 2A ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ mRNA ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಈ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲು ನಿರ್ಧರಿಸಿದೆ.

ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಬಹು ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳಲ್ಲಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ

ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ದ್ವಿ-ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನಿಕ್ 11A ಇಲಿಗಳ ಅತಿಯಾದ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ಸಿಂಗ್ osFosB ಯ ಮೈಕ್ರೊಅರೇ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು ಇದನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡವು ಸಿ.ಸಿ. ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ವಾರಗಳ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ನಂತರ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮಟ್ಟಗಳು ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ನಂತರ ΔFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ದೀರ್ಘಾವಧಿಯೊಂದಿಗೆ ಕ್ರಮೇಣ ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತವೆ (ಚಿತ್ರ 2A, n = 3). ಇದಕ್ಕಾಗಿ ನಾವು ಈ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. 2 ಮತ್ತು 8 ವಾರಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ನೈಜ ಸಮಯದ PCR ಅನ್ನು ಬಳಸುವುದು ಮತ್ತು ಎರಡು ಸಮಯದ ಹಂತಗಳಲ್ಲಿ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಮೈಕ್ರೊರೇ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಹೋಲುತ್ತವೆ (ಡೇಟಾ ತೋರಿಸಿಲ್ಲ).

ಚಿತ್ರ 2

ಚಿತ್ರ 2

OsFosB ಯ ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. (A) ಸಿ.ಸಿ. 11, 1, 2, ಅಥವಾ 4 ವಾರಗಳವರೆಗೆ 8A ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ mRNA ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. ಮೈಕ್ರೊಅರೇ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಸಿ.ಸಿ. ಮಟ್ಟಗಳು ...

ΔFosB ಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲು ಸಿ.ಸಿ. ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ, ನಾವು ಪಿಸಿಎಕ್ಸ್‌ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಅಸ್ಥಿರವಾಗಿ ವರ್ಗಾವಣೆ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ.-ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ವರದಿಗಾರ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಮತ್ತು osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಅಥವಾ ಸಮಾನ ಪ್ರಮಾಣದ ಪಿಸಿಡಿಎನ್‌ಎ. OssFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ಎರಡು (n = 5-9) ಮತ್ತು ಮೂರು (n = 11-13) ಎರಡೂ ದಿನಗಳು ಗಮನಾರ್ಹ ಹೆಚ್ಚಳಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಯಿತು ಸಿ.ಸಿ.-ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಮೂರು ದಿನಗಳ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚು ಕಾರಣವಾಯಿತು ಸಿ.ಸಿ.ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ಎರಡು ದಿನಗಳ ಹೋಲಿಕೆಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ -ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ಇಂಡಕ್ಷನ್ (ಚಿತ್ರ 2B). OsFosB ಯ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಪ್ರವರ್ತಕ ರಹಿತ ಲೂಸಿಫರೇಸ್ ರಚನೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸಲಿಲ್ಲ (ಡೇಟಾ ತೋರಿಸಿಲ್ಲ). ಯಾವುದೇ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಡಿತವಾಗಲಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ.-ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿದೆ. ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ, ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ನಿಗ್ರಹಿಸುವ ಯಾಂತ್ರಿಕ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗೆ ಉತ್ತರಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ.

OsFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು CREB ಬಂಧಿಸುವ ತಾಣದಲ್ಲಿ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ

ನಮ್ಮ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳು ಅದನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಿವೆ ಸಿ.ಸಿ. ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ, ನಮ್ಮ ಚಿಪ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳು CREB ಅಥವಾ osFosB ಗೆ ಬಂಧಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ. ನಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬಂಧನದಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿವೆಯೇ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಸಿ.ಸಿ. osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನುಸರಿಸುವ ಪ್ರವರ್ತಕ, ನಾವು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೊರೆಟಿಕ್ ಮೊಬಿಲಿಟಿ ಶಿಫ್ಟ್ ಅಸ್ಸೇಸ್ (ಇಎಂಎಸ್ಎ) ಅನ್ನು ತನಿಖೆಯೊಂದಿಗೆ ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ. 11A ಇಲಿಗಳ ಅತಿಯಾದ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ಸಿಂಗ್ ΔFosB ಯಿಂದ 2 ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಪರಮಾಣು ಸಾರಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದರಿಂದ, ನಾವು ಪುಟ್ಟೇಟಿವ್ CRE ಸೈಟ್‌ಗೆ ಬಂಧಿಸುವ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ (ಚಿತ್ರ 3 A, C., n = 4). ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, 11A ಇಲಿಗಳು 8 ವಾರಗಳವರೆಗೆ osFosB ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುತ್ತವೆ, ಇದು ಇಳಿಕೆ ತೋರಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ, ಈ ಸೈಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿದ ಬಂಧವನ್ನು ಸಹ ತೋರಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ 3B, ಸಿ, n = 4). ಹೋಲಿಕೆಯಂತೆ, 2 ವಾರಗಳವರೆಗೆ ΔFosB ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವಲ್ಲಿ ನಾವು ಒಮ್ಮತದ CRE ಸೈಟ್‌ಗೆ ಬಂಧಿಸುವುದನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಸಾರಗಳಲ್ಲಿ ದೃ C ವಾದ CRE ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ, ಆದರೆ osFosB ಪ್ರಚೋದನೆಯನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯ ಹೆಚ್ಚಳವಿಲ್ಲ (ಚಿತ್ರ 3F, n = 4). ಆದ್ದರಿಂದ, ಈ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ ಒಟ್ಟು CREB ಮಟ್ಟಗಳಲ್ಲಿ osFosB- ಪ್ರೇರಿತ ಹೆಚ್ಚಳದ ಹೊರತಾಗಿಯೂ, ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ನಮ್ಮ ChIP ಪರಿಶೀಲನೆಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿರುತ್ತವೆ, ಇದು osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ಪ್ರವರ್ತಕರಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿದ CREB ಬಂಧವು ಕೆಲವು ಜೀನ್‌ಗಳಿಗೆ ಮಾತ್ರ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಇದು ಜಾಗತಿಕ ವಿದ್ಯಮಾನವಲ್ಲ . CREB ಗೆ ಬದ್ಧವಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಸಿ.ಸಿ. ನಮ್ಮ ಇಎಂಎಸ್ಎ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರವರ್ತಕ, ನಾವು ಸಿಆರ್‌ಇಬಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಸೂಪರ್‌ಶಿಫ್ಟ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳನ್ನು ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ. ನಮ್ಮ ಚಿಪ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳೊಂದಿಗಿನ ಒಪ್ಪಂದದಲ್ಲಿ, ನಾವು ಸಿಆರ್‌ಇಬಿಯನ್ನು ಯಾವುದೇ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ಇಎಂಎಸ್ಎ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳಲ್ಲಿ ಪುಟ್ಟೇಟಿವ್ ಸಿಆರ್ಇ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ತನಿಖೆ, ಆದರೆ ಸಿಆರ್ಇಬಿ ಒಮ್ಮತದ ಸಿಆರ್ಇ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಮೀರಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ 3D, ಇ, n = 4). ನಲ್ಲಿ ಡಿಎನ್ಎ ಬಂಧಿಸುವ ಚಟುವಟಿಕೆ ಸಿ.ಸಿ. ΔFosB ಅನ್ನು ನಿರ್ಬಂಧಿಸಲು ಹಲವಾರು ಪೂರ್ವ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವ ಷರತ್ತುಗಳ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ osFosB (ಡೇಟಾ ತೋರಿಸಿಲ್ಲ) ಗೆ ಪ್ರತಿಕಾಯದಿಂದ ಪ್ರವರ್ತಕವು ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಲಿಲ್ಲ, ಎಪಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸೈಟ್‌ಗಳಿಗೆ (ಹೋಪ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ಎ, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಬಿ; ಚೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1995, ಹಿರೋಯಿ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1998). 11 ವಾರಗಳ ΔFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ 8A ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಸ್ಟ್ರೈಟಾ ಕುರಿತು ನಾವು ಚಿಪ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳನ್ನು ಸಹ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ಇನ್ನೂ CREB ಅಥವಾ osFosB ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ (ಡೇಟಾ ತೋರಿಸಿಲ್ಲ). ಆದ್ದರಿಂದ, osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯ ಹೆಚ್ಚಳಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. 2 ಮತ್ತು 8 ವಾರಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ ಪ್ರವರ್ತಕ; ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ಅಂಶಗಳ ಗುರುತು ತಿಳಿದಿಲ್ಲ.

ಚಿತ್ರ 3

ಚಿತ್ರ 3

ನಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ. (ಎ, ಬಿ) ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೊರೆಟಿಕ್ ಮೊಬಿಲಿಟಿ ಶಿಫ್ಟ್ ಅಸ್ಸೇ ಸಿ.ಸಿ. 2 ವಾರಗಳು (A) ಅಥವಾ 8 ವಾರಗಳು (B) ΔFosB ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡುವ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಂದ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ CRE- ರೀತಿಯ ಸೈಟ್. (ಎ) ನಲ್ಲಿ, ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡದ ಪ್ರತಿಸ್ಪರ್ಧಿಯೊಂದಿಗೆ ಸ್ಪರ್ಧೆ ...

ನಲ್ಲಿ ಪುಟ್ಟೇಟಿವ್ ಸಿಆರ್ಇ ಸೈಟ್ ಸಿ.ಸಿ. ಹೆಚ್ಚಿದ ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಪ್ರವರ್ತಕ ಜವಾಬ್ದಾರನಾಗಿರುವುದಿಲ್ಲ

ನಾವು ಒಂದು ಭಾಗವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ, ಪುಟಟಿವ್ ಸಿಆರ್ಇ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಪ್ರವರ್ತಕ, ಈ ಸೈಟ್ ಹೆಚ್ಚಳಕ್ಕೆ ಅಗತ್ಯವಿದೆಯೇ ಎಂದು ನಾವು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಬಯಸಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ನಂತರದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. ಈ ಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು, ನಾವು PC12 ಕೋಶಗಳನ್ನು a ನೊಂದಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ.-ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಅದರ ಅಖಂಡ ಸಿಆರ್‌ಇ ತರಹದ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ ಅಥವಾ ಸಿಆರ್‌ಇಬಿಯೊಂದಿಗಿನ ಯಾವುದೇ ಸಂವಹನವನ್ನು ರದ್ದುಗೊಳಿಸುವ ಸೈಟ್‌ನಲ್ಲಿ ರೂಪಾಂತರವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ಸಿಆರ್ಇ ತರಹದ ಸೈಟ್ನ ರೂಪಾಂತರವು ತಳದ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ಸಿ.ಸಿ. 32% ನಿಂದ ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ (ಚಿತ್ರ 4A, n = 9), ಆದರೆ ಇದರ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಲಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದಿಂದ ಪ್ರವರ್ತಕರ ಪ್ರಚೋದನೆ (ಚಿತ್ರ 4B, n = 11-13). ಆದರೂ ಇದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕನಿಗೆ ಪೂರ್ಣ ತಳದ ಚಟುವಟಿಕೆಗಾಗಿ ಅಖಂಡ CRE ತರಹದ ಸೈಟ್ ಅಗತ್ಯವಿದೆ, osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದಿಂದ ಪ್ರೇರಿತವಾದ ಹೆಚ್ಚಿದ ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ CRE ತರಹದ ಅನುಕ್ರಮ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ.

ಚಿತ್ರ 4

ಚಿತ್ರ 4

ನಮ್ಮ ಸಿ.ಸಿ.-ಇಂತಹ CRE ಸೈಟ್ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. osFosB ನಿಂದ ಇಂಡಕ್ಷನ್. (A) ಸಿ.ಸಿ.ವರ್ಗಾವಣೆಯ ನಂತರ 2 ದಿನಗಳ ನಂತರ -ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ.-ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ಅಥವಾ ಸಿಆರ್‌ಇ ತರಹದ ಸೈಟ್ ರೂಪಾಂತರಗೊಂಡ ಒಂದು. * ಪು <0.05 (B) ಸಿ.ಸಿ.-ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ...

cFos ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ

ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಅದನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿದೆ cFos ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯೊಂದಿಗೆ mRNA ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ, ದೀರ್ಘಕಾಲದ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ, ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ cFos ಅನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುವ ಕೊಕೇನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವು ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ (ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್; ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2008). ಆದ್ದರಿಂದ, ಹೆಚ್ಚಳಕ್ಕೆ cFos ಕೊಡುಗೆ ನೀಡುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. ನಾವು ಸಿಎಫ್‌ಒಎಸ್‌ಗೆ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಚಿಪ್ ಅಸೆಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ಸಿಫೋಸ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಅಳೆಯುತ್ತೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯೊಂದಿಗೆ ಮತ್ತು ಇಲ್ಲದೆ ಪ್ರವರ್ತಕ. ಸಿಫೊಸ್ ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ, osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ಈ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಲಿಲ್ಲ (ಚಿತ್ರ 5, n = 5). CFos ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುವುದರಿಂದ ಇದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ, ಇದು ಸಾಮಾನ್ಯ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು ಸಿ.ಸಿ. ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ, ಆದರೆ ಇದು ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ ಭಾಗಿಯಾಗಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. osFosB ನಿಂದ ಪ್ರವರ್ತಕ.

ಚಿತ್ರ 5

ಚಿತ್ರ 5

cFos ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ. ΔFosB ಅತಿಯಾದ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ಸಿಂಗ್ ಇಲಿಗಳಿಂದ ಡಾಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಅಥವಾ 2 ವಾರಗಳ ಡಾಕ್ಸ್ ತೆಗೆಯುವಿಕೆಯ ನಂತರ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸಿಎಫ್‌ಒಎಸ್‌ಗಾಗಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಶನ್ ಅಸ್ಸೇಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ರಿಯಲ್ ಟೈಮ್ ಪಿಸಿಆರ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ ಆಗಿತ್ತು ...

ಇಲ್ಲಿಗೆ ಹೋಗು:

ಚರ್ಚೆ

ಈ ಅಧ್ಯಯನವು ಹಿಂದಿನ ಆವಿಷ್ಕಾರಗಳನ್ನು ದೃ and ಪಡಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವಿಸ್ತರಿಸುತ್ತದೆ showing ಫಾಸ್ಬಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ ಅನೇಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಮೂಲಕ ಅದು ಹಾಗೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ. 2 ವಾರಗಳ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ನಂತರ, osFosB ಕೆಲವು ಜೀನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ನೇರವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ತೋರಿಸುತ್ತೇವೆ, ಅದು ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ (ಅಂದರೆ CDK5). ಇದಲ್ಲದೆ, ಇದು CREB ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ, ಇದು ಇತರ ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕಗಳಲ್ಲಿ CREB ಬಂಧವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ (ಅಂದರೆ ಡೈನಾರ್ಫಿನ್ ಮತ್ತು ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್). ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನವೊಂದರಲ್ಲಿ, ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿನ osFosB ಯ ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು CREB ಅತಿಯಾಗಿ ಒತ್ತಡಕ್ಕೊಳಗಾದಾಗ ಕಂಡುಬರುವ ಒಂದೇ ರೀತಿಯ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್ ಆದ್ಯತೆಯ ಕ್ರಮಗಳಲ್ಲಿ ಇದೇ ರೀತಿಯ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ (ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್). ಆದ್ದರಿಂದ, osFosB CREB ಯ ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು CREB ಯನ್ನು ಕೆಲವು ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ, ಈ ಎರಡು ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಗಳಿಂದ ಅನೇಕ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಏಕೆ ಹಂಚಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ವಿವರಿಸಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡುತ್ತದೆ.

REFosB ಯಿಂದ CREB ಯ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ಆಸಕ್ತಿದಾಯಕವಾಗಿದೆ, ಏಕೆಂದರೆ ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಗಳು ಸೆರೈನ್ 133- ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ CREB ಮಟ್ಟಗಳಲ್ಲಿ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಮ್ಯಾಟ್ಸನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2005) ಮತ್ತು CRE- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಪ್ರತಿಲೇಖನವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿ (ಬ್ಯಾರಟ್ et al., 2002; ಶಾ-ಲಚ್ಮನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002, 2003), CREB ಯ ಒಟ್ಟಾರೆ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸದೆ. CREB ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಅಸ್ಥಿರವಾಗಿರಬಹುದು ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ, ಇತರ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಸುಲಭವಾಗಿ ತಪ್ಪಿಸಿಕೊಳ್ಳುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿದೆ. ನಮ್ಮ ಕೈಯಲ್ಲಿ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ CREB mRNA ಯಲ್ಲಿ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ನಾವು ನೋಡಿದ್ದೇವೆ, ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ಪರಿಣಾಮವು ಹೆಚ್ಚು ವ್ಯತ್ಯಾಸಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ (ಅಪ್ರಕಟಿತ ವೀಕ್ಷಣೆ). 11A ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನಿಕ್ ಇಲಿಗಳು ಮತ್ತು PC-12 ಕೋಶಗಳು ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ನಂತರ CREB ಪ್ರಚೋದನೆಯನ್ನು ತೋರಿಸುವುದರಿಂದ, CREB ನಿಜಕ್ಕೂ ΔFosB (ಅಥವಾ osFosB ಯ ಗುರಿ) ನಿಂದ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಜೀನ್‌ನಲ್ಲಿ drug ಷಧ-ಪ್ರೇರಿತ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ವಿವರಿಸಲು ಮತ್ತೊಂದು ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ.

ಆಶ್ಚರ್ಯಕರವಾಗಿ, CREB ಅಥವಾ osFosB ಎರಡೂ ಬಂಧಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. ಆದರೂ ಪ್ರವರ್ತಕ ಸಿ.ಸಿ. ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಂತರ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಿಕ್ ವಿಟಿಎ ಮತ್ತು ಎನ್ಎಸಿ ಎರಡರಲ್ಲೂ ವ್ಯಕ್ತವಾಗುವ ಹೇರಳವಾದ ನ್ಯೂರೋಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಆಗಿದೆ (ಹಾಕ್ಫೆಲ್ಟ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1980) ಮತ್ತು ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ಭಾಗಿಯಾಗಿರಬಹುದು (ಜೋಸ್ಲಿನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1996; ಜೋಸ್ಲಿನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1997; ಹ್ಯಾಮಿಲ್ಟನ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2000; ಬೀನ್ಫೆಲ್ಡ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002; ರೊಟ್ಜಿಂಜರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002). ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳಲ್ಲಿ, ದಿ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕವನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ನಿರೂಪಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು CREB ಮತ್ತು AP-1 ಕುಟುಂಬ ಸದಸ್ಯರಿಗೆ ಸ್ಪಂದಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಅವರಿಂದ ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಗಿದೆ ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್, 2001). ಹಾನ್ ಮತ್ತು ಡಿಕ್ಸನ್ (1990) AP-1 ಸಂಕೀರ್ಣಗಳು ಇದಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸಬಲ್ಲವು ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ ಸಿ.ಸಿ. CRE ತರಹದ ಸೈಟ್ ಪ್ರನಾಳೀಯ, ಮತ್ತು ನಂತರ ಎಸ್‌ಕೆ-ಎನ್-ಎಂಸಿ ನ್ಯೂರೋಬ್ಲಾಸ್ಟೊಮಾ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ, ಸಿಆರ್‌ಇ ತರಹದ ಸೈಟ್‌ನ ರೂಪಾಂತರವು ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡಕ್ಕೊಳಗಾದ ಸಿಎಫ್‌ಒಎಸ್ / ಸಿಜುನ್‌ಗೆ ಪ್ರವರ್ತಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಯಿತು (ರೂರ್ಕೆ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1999). ವಾಸ್ತವವಾಗಿ, ನಾವು ಕೂಡ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ (ಚಿತ್ರ 2) ಮತ್ತು CRE ತರಹದ ಅಂಶದಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಸುತ್ತಲೂ ಬಂಧಿಸುವುದು (ಚಿತ್ರ 3) ಮತ್ತೊಂದು AP-1 ಕುಟುಂಬದ ಸದಸ್ಯ osFosB ಯ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ಮೇಲೆ, ಆದರೆ ΔFosB ಅನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಜೀವಿಯಲ್ಲಿ or ಪ್ರನಾಳೀಯ, ಅದರ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ಮೇಲೂ ಸಹ.

ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ ಸಿಆರ್‌ಇಬಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ಕೆಲಸವು ಒಂದು ಪಾತ್ರವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ. ದಿ ಸಿ.ಸಿ. CRE ತರಹದ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ಕಶೇರುಕಗಳಾದ್ಯಂತ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ (ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್, 2001) ಮತ್ತು, ಕೆಲವು ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳಲ್ಲಿ, CREB ಮತ್ತು AP-1 ಸಂಕೀರ್ಣಗಳು ಈ ಸೈಟ್‌ಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳಿಗೆ ಅವಶ್ಯಕ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ (ಹಾನ್ ಮತ್ತು ಡಿಕ್ಸನ್, 1990; ಡೆವಾಲ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2000; ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್, 2001). ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ನ ಹಲವಾರು ಪ್ರಸಿದ್ಧ ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್‌ಗಳು ಸಿ.ಸಿ. ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ (bFGF, PACAP, ಪೆಪ್ಟೋನ್ಗಳು ಮತ್ತು ಡಿಪೋಲರೈಸೇಶನ್ ಸೇರಿದಂತೆ) CREB ಮೂಲಕ ಕಾರ್ಯನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 1999; ಡೆವಾಲ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2000; ಬರ್ನಾರ್ಡ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2001; ಗೆವ್ರೆ, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2002; ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004). ನಮ್ಮ ಸಿ.ಸಿ.-ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ವರದಿಗಾರ ಜೀನ್ ಡೇಟಾವು ನಿಯಂತ್ರಣದಲ್ಲಿ ಸಿಆರ್‌ಇ ತರಹದ ಸೈಟ್‌ಗೆ ಅತ್ಯಗತ್ಯ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ, ಏಕೆಂದರೆ ಈ ಸೈಟ್‌ನ ರೂಪಾಂತರವು ತಳವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಸಿ.ಸಿ.ಈ ಸೈಟ್ ರೂಪಾಂತರಗೊಂಡಾಗ (ಅಪ್ರಕಟಿತ ವೀಕ್ಷಣೆ) CREB ಯ ರಚನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿರುವ VP16-CREB ನಿಂದ ಪ್ರೇರಿತವಾದ-ಲೂಸಿಫರೇಸ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಕಳೆದುಹೋಗುತ್ತದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, CREB ಗೆ ಬಂಧಿಸಲು ತೋರುತ್ತಿಲ್ಲ ಎಂದು ನಾವು ಆಶ್ಚರ್ಯಪಟ್ಟಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. CREB ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದಾಗ ಬೇಸ್‌ಲೈನ್‌ನಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ಮೇಲೆ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಸಾರಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರವರ್ತಕ. ಇದು CREB ನ ಮಟ್ಟಗಳು ಎಂದು ವಾದಿಸುತ್ತದೆ ಅದರಿಂದಲೇ ಈ ಸೈಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಬಂಧಿಸುವ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸುವ ಏಕೈಕ ಅಂಶವಲ್ಲ, ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಇತರರ ಕೆಲಸದಿಂದ ಬೆಂಬಲಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಚಾ-ಮೊಲ್ಸ್ಟಾಡ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004). ಇತರ, ಈ ಹಿಂದೆ ಗುರುತಿಸಲಾದ CREB ಗುರಿ ಜೀನ್‌ಗಳ ಪ್ರವರ್ತಕರಿಂದ ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್, CREB ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸಿದ್ದೀರಾ, CREB ಗೆ ಸಂಬಂಧವಿಲ್ಲ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಳ್ಳುವಲ್ಲಿ ನಮಗೆ ವಿಶ್ವಾಸವಿದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯರ್ ಸಾರಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರವರ್ತಕ. ಇದಲ್ಲದೆ, ನ ಪ್ರಚೋದನೆ ಸಿ.ಸಿ.osFosB ಯಿಂದ -ಲುಸಿಫರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಅಖಂಡ CRE ತರಹದ ಸೈಟ್‌ನ ಮೇಲೆ ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿಲ್ಲ, ಇದು osFosB ನಿಯಂತ್ರಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. CREB ಯ ನೇರ ಬಂಧನವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ.

CREB ಯೊಂದಿಗೆ ಸಂವಹನ ನಡೆಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲು ನಮ್ಮ ಅಸಮರ್ಥತೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕರಿಂದ ಬೆಂಬಲಿತವಾಗಿದೆ ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು. (2009), ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ ಮಾನ್ಯತೆಯ ನಂತರ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ CREB (pCREB) ಮತ್ತು ΔFosB ಅನ್ನು ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಬಂಧಿಸುವ ಜಾಗತಿಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ನೋಡಲು ಚಿಪ್-ಚಿಪ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿದವರು. ಈ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ, ಡಿಎನ್‌ಎ-ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳನ್ನು osFosB ಅಥವಾ pCREB ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ ತ್ವರಿತ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅನ್ನು ಪ್ರವರ್ತಕ ಮೈಕ್ರೋಅರೇಗೆ ಹೈಬ್ರಿಡೈಜ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಈ ಹಿಂದೆ ನಿರೂಪಿಸಲಾದ ಅನೇಕ CREB ಗುರಿ ಜೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಈ ವಿಧಾನದೊಂದಿಗೆ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ (ಉದಾ. ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್, ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್), ಸಿ.ಸಿ. ಗುರುತಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ಇದಲ್ಲದೆ, CREB ಅನ್ನು ಒಮ್ಮತದ CRE ಸೈಟ್‌ಗೆ ಬಂಧಿಸುವುದು ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಕೋಶ ರೇಖೆಗಳ ನಡುವೆ ಬಹಳ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಿರೂಪಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಾ-ಮೊಲ್ಸ್ಟಾಡ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004). CREB ಸಂವಹನಗಳನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡ ಹಿಂದಿನ ಎಲ್ಲಾ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕವನ್ನು ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಯಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು (ನಮ್ಮ ಇಎಂಎಸ್ಎ ಮತ್ತು ಚಿಪ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪಡೆದ ಮೆದುಳಿನಿಂದ ಅಲ್ಲ) ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್-ಡಿಎನ್‌ಎ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲು ಜೆಲ್ ಶಿಫ್ಟ್ ಅಸ್ಸೇಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಡಿಎನ್‌ಎ ಅನುಕ್ರಮಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸುವ ಅಂಶದ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಇಎಂಎಸ್‌ಎ ನಿರ್ಣಯಿಸಬಹುದಾದರೂ, ಚಿಪ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳು ಈ ಸಂವಹನಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದು ಹೊಸ ನೋಟವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ ಜೀವಿಯಲ್ಲಿ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಹೆಚ್ಚಿನ ಡೇಟಾವನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ ಅಥವಾ CREB ಗೆ ಬಂಧಿಸುವುದು ಸಿ.ಸಿ. ಪೆಪ್ಟೋನ್ಗಳಂತಹ ಅಂಶಗಳಿಂದ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಕೋಶಗಳಿಂದ ಪ್ರವರ್ತಕವನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ (ಬರ್ನಾರ್ಡ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2001), ಡಿಪೋಲರೈಸೇಶನ್ (ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್, ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004), ಅಥವಾ ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಮತ್ತು ಇಆರ್‌ಕೆ ಸೇರಿದಂತೆ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಕ್ಯಾಸ್ಕೇಡ್‌ಗಳ ವಿವಿಧ ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್‌ಗಳು (ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1999). ನಮ್ಮ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ, ಬಳಸಿದ ಏಕೈಕ “ಪ್ರಚೋದಕ” ΔFosB ಯ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡ, ಇದು ಪ್ರೇರೇಪಿಸಲು ಸಾಕು ಸಿ.ಸಿ. ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. ಒಟ್ಟಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ಇದು CREB ಯ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಬಂಧಿಸುವ (ಮತ್ತು ಸಂಭಾವ್ಯವಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ) ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕವು ಕೋಶ ಪ್ರಕಾರ ಮತ್ತು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಮಾರ್ಗಗಳ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಮೇಲೆ ಹೆಚ್ಚು ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿರುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ದಿ ಸಿ.ಸಿ. CRE- ತರಹದ ಪ್ರವರ್ತಕ ಅಂಶ (ಕನಿಷ್ಠ ಅನಿಯಂತ್ರಿತ PC12 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಮೌಸ್ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ) CREB ಅಥವಾ osFosB ಯ ನೇರ ಗುರಿಯಲ್ಲ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ನಿಯಂತ್ರಣ FosB CREB ಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಕೋಶ ಪ್ರಕಾರ ಮತ್ತು ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಪ್ರಕಾರಕ್ಕೂ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿದೆ. ಆಂಡರ್ಸನ್ ನಡೆಸಿದ ಅಧ್ಯಯನ ಇತರರು. CREB ಆಂಟಿಸೆನ್ಸ್ ಆಲಿಗೊನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ಮೌಸ್ ಸ್ಟ್ರೈಟಮ್‌ಗೆ ಚುಚ್ಚುವುದು ಭಾಗಶಃ ಪ್ರಚೋದನೆಯನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಹಿಡಿದಿದೆ FosB ಕೊಕೇನ್ ಆಡಳಿತವನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ (ಆಂಡರ್ಸನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2001). ಆದಾಗ್ಯೂ, ಎಲ್-ಡೋಪಾವನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಅವರು ಕಂಡುಕೊಂಡರು FosB 6-OHDA- ಲೆಸಿಯಾನ್ಡ್ ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ CREB ಆಂಟಿಸೆನ್ಸ್ ಆಲಿಗೊನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್‌ಗಳ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಿಂದ ಪ್ರಭಾವಿತವಾಗಲಿಲ್ಲ.

CREB ಮತ್ತು osFosB ಪರೋಕ್ಷವಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ΔFosB () ಅನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುವ ವಿವಿಧ ಪ್ರಚೋದಕಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಪ್ರವರ್ತಕ ಮತ್ತು ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ರಚನೆಯಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ.ಸ್ಯಾಂಕೋವಾ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004; ಕುಮಾರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2005; ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2008), ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ರಚನೆಯನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುವ ಮೂಲಕ osFosB ಪರೋಕ್ಷವಾಗಿ ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಮಾರ್ಪಡಿಸಬಹುದು ಎಂದು ನಾವು ವಾದಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, 2 ವಾರಗಳವರೆಗೆ osFosB ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ, ಹಿಸ್ಟೋನ್ H3 ಅಸಿಟೈಲೇಷನ್ ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಬದಲಾವಣೆ ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ (ಟೇಬಲ್ 1). ನ ಚಿಪ್-ಚಿಪ್ ಡೇಟಾ ಇದನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತದೆ ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು. (2009), ಅಸಿಟೈಲೇಟೆಡ್ H3 ಬೈಂಡಿಂಗ್‌ನಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ಒಡ್ಡಿಕೊಂಡ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ ಪ್ರವರ್ತಕ. ರಿಂದ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ ಸಕ್ರಿಯವಾಗಿದೆ, ಯಾವುದೇ ದಮನಕಾರಿ ಮೆತಿಲೇಟೆಡ್ ಹಿಸ್ಟೋನ್ H3 ಬಂಧಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ನಿರೀಕ್ಷಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ ಅಥವಾ ಗಮನಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ಅಸಿಟೈಲೇಟೆಡ್ H3 ಬಂಧಕದಲ್ಲಿ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದಿಂದಾಗಿ ನಾವು ಯಾವುದೇ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಕಂಡಿಲ್ಲ ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್ ಪ್ರವರ್ತಕ (ಇದು ಹೆಚ್ಚಿದ CREB ಬಂಧವನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ) ಅಥವಾ CDK5 ಮತ್ತು ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಪ್ರವರ್ತಕರು (ಇದು ಹೆಚ್ಚಿದ osFosB ಬಂಧವನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ). ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಅಸಂಖ್ಯಾತ ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳು ಇರುವುದರಿಂದ (ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಗಿದೆ ರಾಂಡೋ ಮತ್ತು ಚಾಂಗ್, 2009), ಈ ಜೀನ್‌ಗಳ ಪ್ರಚೋದನೆಯೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸುವ ಇತರ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳಿವೆ. ಯಾವುದೇ ಏಕ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮಾರ್ಪಾಡು, ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಆಗಾಗ್ಗೆ tive ಹಿಸುತ್ತದೆಯಾದರೂ, ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಜೀನ್‌ನ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಬದಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಭವಿಷ್ಯದ ಕೆಲಸದಲ್ಲಿ, ಸುತ್ತಲಿನ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ರಚನೆಯಲ್ಲಿನ ಇತರ ಸಂಭಾವ್ಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ನೋಡುವುದು ಆಸಕ್ತಿದಾಯಕವಾಗಿದೆ ಸಿ.ಸಿ. osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವನ್ನು ಅನುಸರಿಸುವ ಪ್ರವರ್ತಕ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ (ಸಾಧ್ಯತೆ ಮೂಲಕ ΔFosB ಇಂಡಕ್ಷನ್) ಸಿರ್ಟುಯಿನ್ 1 ಮತ್ತು 2, ಕ್ಲಾಸ್ III ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಡೀಸೆಟಿಲೇಸ್‌ಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ನರಕೋಶದ ಶರೀರಶಾಸ್ತ್ರ, ಇಆರ್‌ಕೆ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ (ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2009). ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಡೀಸೆಟಿಲೇಸ್‌ನ ಇಂಡಕ್ಷನ್ ಹೆಚ್ಚಿನ ಸಂಖ್ಯೆಯ ಜೀನ್‌ಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಏಕಕಾಲದಲ್ಲಿ ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೊಂದಿರುತ್ತದೆ ಮೂಲಕ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ರಚನೆಯಲ್ಲಿ ಜಾಗತಿಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳು.

ಭಾಗಿಯಾಗಿರುವ ಒಬ್ಬ ಅಭ್ಯರ್ಥಿ ಸಿ.ಸಿ. osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ನಂತರದ ನಿಯಂತ್ರಣವೆಂದರೆ AP-1 ಕುಟುಂಬ ಸದಸ್ಯ cFos. CFos ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು CREB ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ (ಶೆಂಗ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1990; ಇಂಪೆ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004), ಮತ್ತು cFos ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡ (ಅದರ ಬಂಧಿಸುವ ಪಾಲುದಾರ cJun ನ ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದೊಂದಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾಗುತ್ತದೆ) ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ (ರೂರ್ಕೆ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1999). ಆದ್ದರಿಂದ, ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದಿಂದಾಗಿ CREB ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದರಿಂದ cFos ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಇದರ ಪರಿಣಾಮವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. CRE ತರಹದ ಸೈಟ್. cfos ಎರಡು ವಾರಗಳ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದ ನಂತರ mRNA ಅನ್ನು ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್) ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ ಅಥವಾ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡಕ್ಕೆ ಒಡ್ಡಿಕೊಂಡ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ (ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2008). ಇಲ್ಲಿ ನಾವು ಸಿಫೊಸ್ ಅನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಅಂಗಾಂಶಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರವರ್ತಕ, ಆದಾಗ್ಯೂ, osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಬಂಧವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದಿಲ್ಲ. ಸಿಎಫ್‌ಒಎಸ್ ನಿಯಂತ್ರಿಸುವಲ್ಲಿ ಭಾಗಿಯಾಗಬಹುದು ಎಂದು ಇದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಸಿ.ಸಿ. ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ, cFos ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುವ ಬದಲಾವಣೆಯು ΔFosB ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. ಆದಾಗ್ಯೂ, osFosB cFos ನಲ್ಲಿ ಅನುವಾದದ ನಂತರದ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು (ಉದಾ. ಬದಲಾದ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್) ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ ಅಥವಾ ಬಂಧಿಸುವ ಪಾಲುದಾರ (cJun ನಂತಹ) ಅಥವಾ ಸಹ-ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಅಖಂಡ CRE ತರಹದ ಸೈಟ್ (ಇದು ಹಿಂದೆ AP-1 ಸಂಕೀರ್ಣಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸುವ ತಾಣವೆಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ, ನೋಡಿ ಹಾನ್ ಮತ್ತು ಡಿಕ್ಸನ್, 1990) ಹೆಚ್ಚಿದ ಅಗತ್ಯವಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡದೊಂದಿಗೆ (ನಮ್ಮ ವರದಿಗಾರ ಜೀನ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ನಿರ್ಣಯಿಸಿದಂತೆ) ಕಂಡುಬರುವ ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ, ಇತರ ಟ್ರಾನ್ಸ್-ಆಕ್ಟಿಂಗ್ ಅಂಶಗಳನ್ನು ಸಹ ΔFosB ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬ ಕಾರಣಕ್ಕೆ ಇದು ನಿಂತಿದೆ.

ನಮ್ಮ ಸಿ.ಸಿ. ನಮ್ಮ ಲೂಸಿಫರೇಸ್ ವರದಿಗಾರ ಜೀನ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಪ್ರವರ್ತಕ ತುಣುಕು ಸಂರಕ್ಷಿತ Sp1 ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಸೈಟ್ ಮತ್ತು ಇ-ಬಾಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ (ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್, 2002 ಅವರಿಂದ ವಿಮರ್ಶಿಸಲಾಗಿದೆ). ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಇ-ಬಾಕ್ಸ್ ಅನುಕ್ರಮಗಳು ಹಲವಾರು ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಗಳನ್ನು ಬಂಧಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಅವರಿಂದ ಪರಿಶೀಲಿಸಲಾಗಿದೆ ಫಾರೆಸ್ಟ್ ಮತ್ತು ಮೆಕ್‌ನಮರಾ, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). PC12 ಕೋಶಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದರಿಂದ, ಇ-ಪೆಟ್ಟಿಗೆಯ ರೂಪಾಂತರವು ಕಡಿಮೆಯಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ನೋಡಿದ್ದೇವೆ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ ಚಟುವಟಿಕೆ, ಆದರೆ osFosB ಗೆ ಪ್ರವರ್ತಕನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುವುದಿಲ್ಲ (ಡೇಟಾ ತೋರಿಸಿಲ್ಲ). ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ಎ ಸಿ.ಸಿ.-ಆರ್‌ಇ ಸೈಟ್ ಮತ್ತು ಇ-ಬಾಕ್ಸ್ ಎರಡರಲ್ಲೂ ರೂಪಾಂತರಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ -ಲುಸಿಫೆರೇಸ್ ವರದಿಗಾರ ಯಾವುದೇ ಪತ್ತೆಹಚ್ಚಬಹುದಾದ ತಳದ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿಲ್ಲ ಮತ್ತು osFosB ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡಕ್ಕೆ (ಅಪ್ರಕಟಿತ ವೀಕ್ಷಣೆ) ಸ್ಪಂದಿಸುವುದಿಲ್ಲ. OnFosB ಕ್ರಿಯೆಯ ಮತ್ತೊಂದು ಸಂಭಾವ್ಯ ಮಧ್ಯವರ್ತಿ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕವು ಎಟಿಎಫ್‌ಗಳು, ಇವುಗಳಲ್ಲಿ ಕೆಲವು ರೂಪಗಳು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಸೈಕೋಸ್ಟಿಮ್ಯುಲಂಟ್ ಮಾನ್ಯತೆಯಿಂದ ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ (ಹಸಿರು ಮತ್ತು ಇತರರು, 2008). ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ಎಟಿಎಫ್‌ಗಳ os ಫಾಸ್‌ಬಿ ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಯಾವುದೇ ಪುರಾವೆಗಳು ನಮಗೆ ದೊರೆತಿಲ್ಲ (ಡೇಟಾ ತೋರಿಸಿಲ್ಲ), ಮತ್ತು ಎಟಿಎಫ್‌ಗಳು ರೂಪಾಂತರಿತ ಸಿಆರ್‌ಇ ತರಹದ ಸೈಟ್‌ಗೆ ಬಂಧಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ ಎಂದು ನಿರೀಕ್ಷಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ.

ಈ ಅಧ್ಯಯನದ ಒಂದು ಎಚ್ಚರಿಕೆ ಏನೆಂದರೆ, ನಾವು osFosB ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಪ್ರೆಸ್ ಮಾಡಲು ದ್ವಿ-ಜೀವಾಂತರ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯನ್ನು ಬಳಸುತ್ತಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ ಈ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್‌ನ ಆಡಳಿತದ ನಡುವೆ ಸಮಾನಾಂತರತೆಯನ್ನು ಸೆಳೆಯುವಲ್ಲಿ ಒಬ್ಬರು ಸಂಪ್ರದಾಯವಾದಿಯಾಗಿರಬೇಕು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಅತಿಯಾದ ಒತ್ತಡವು ಈ ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶಕ್ಕೆ ಸೀಮಿತವಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ osFosB ಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ನೋಡುವ ವಿಶಿಷ್ಟ ಅವಕಾಶವನ್ನು 11A ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನಿಕ್ ಇಲಿಗಳು ನೀಡುತ್ತವೆ (ಚೆನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1998), ಕೊಕೇನ್ ಆಡಳಿತವು ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ, ಅದು ನಂತರ ಪರೋಕ್ಷವಾಗಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಮ್ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಬಹುದು. ಇದಲ್ಲದೆ, ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ಪಡೆದ ಜೀವಾಂತರವಲ್ಲದ ಪ್ರಾಣಿಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಹಲವಾರು ಅಧ್ಯಯನಗಳು 11A ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಇದೇ ರೀತಿಯ ವರ್ತನೆ ಮತ್ತು ಆಣ್ವಿಕ ಫಿನೋಟೈಪ್‌ಗಳನ್ನು ದಾಖಲಿಸಿದೆ (ಕೆಲ್ಜ್ et al., 1999; ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್; ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2009). ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಬಿಬ್ ಮತ್ತು ಇತರರು. (2001) ಇದೇ ರೀತಿಯ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಅನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿದೆ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ ಕೊಕೇನ್-ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ, ಜೀವಾಂತರವಲ್ಲದ ಕಸವನ್ನು ಹೋಲಿಸಿದಾಗ, ಮತ್ತು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗುರಿಗಳಾದ ಪಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಡಾರ್ಪಿಪಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದಾಗ ಇದೇ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎ ಸ್ಟ್ರೈನ್‌ನಲ್ಲಿ ಎಂಆರ್‌ಎನ್ಎ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪ್ರಚೋದನೆ.

ತೀರ್ಮಾನಕ್ಕೆ ಬಂದರೆ, ಅಲ್ಪಾವಧಿಯ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಅನೇಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಮೂಲಕ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ ಜೀನ್‌ಗಳ ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ. ಇವುಗಳಲ್ಲಿ ನೇರ ಪ್ರವರ್ತಕ ಬಂಧಿಸುವಿಕೆ, ಸಿಆರ್‌ಇಬಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮತ್ತು ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಪ್ರಚೋದನೆ, ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮಾರ್ಪಾಡು, ಇನ್ನೂ ನಿರ್ಧರಿಸಬೇಕಾದ ಮಾರ್ಗಗಳ ಜೊತೆಗೆ ಸೇರಿವೆ.

ಇಲ್ಲಿಗೆ ಹೋಗು:

ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು

ಪ್ರಾಣಿಗಳು

ಗಂಡು ದ್ವಿ-ಜೀವಾಂತರ 11A ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು (NSE-tTA x TetOP-osFosB) ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು ಮತ್ತು ಇವುಗಳಲ್ಲಿ ನಿರೂಪಿಸಲಾಗಿದೆ ಕೆಲ್ಜ್ et al., 1999. OssFosB ಅನ್ನು ಅತಿಯಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಲು, 3 ಮತ್ತು 6 ವಾರಗಳ ನಡುವಿನ ಡಾಕ್ಸಿಸೈಕ್ಲಿನ್‌ನಿಂದ ಇಲಿಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಯಿತು, ಆದರೆ ನಿಯಂತ್ರಣ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಡಾಕ್ಸಿಸೈಕ್ಲಿನ್‌ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎಲ್ಲಾ ಇಲಿಗಳನ್ನು 12 ನಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಗಿತ್ತು ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗಿದೆ: 12 ಬೆಳಕು / ಗಾ cycle ಚಕ್ರ, 7 ಬೆಳಿಗ್ಗೆ ದೀಪಗಳು ಮತ್ತು 7 pm ನಲ್ಲಿ ದೀಪಗಳು ಆಫ್, ಜಾಹೀರಾತು ಲಿಬ್ ಆಹಾರ ಮತ್ತು ನೀರಿನ ಪ್ರವೇಶ. ಎಲ್ಲಾ ಮೌಸ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳು ಡಲ್ಲಾಸ್‌ನ ದಿ ಯೂನಿವರ್ಸಿಟಿ ಆಫ್ ಟೆಕ್ಸಾಸ್ ನೈ w ತ್ಯ ವೈದ್ಯಕೀಯ ಕೇಂದ್ರದ ಪ್ರಾಣಿ ಸಂರಕ್ಷಣೆ ಮತ್ತು ಬಳಕೆ ಸಮಿತಿಯಿಂದ ಅನುಮೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್‌ಗಳಿಗೆ ಅನುಸಾರವಾಗಿವೆ.

ವರದಿಗಾರ ಮತ್ತು ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್‌ಗಳು

ವೈಲ್ಡ್ಟೈಪ್ (ಡಬ್ಲ್ಯೂಟಿ) ಸಿ.ಸಿ. ಪಿಜಿಎಲ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್-ಲುಕ್ ವೆಕ್ಟರ್ (ಪ್ರೋಮೆಗಾ) ಗೆ ಸರಿಸುಮಾರು 200 ಬಿಪಿ ಪಿಸಿಆರ್ ತುಣುಕನ್ನು ಸೇರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಪ್ರವರ್ತಕ-ಲೂಸಿಫರೇಸ್ ವರದಿಗಾರನನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು. ಈ ತುಣುಕನ್ನು ಮೌಸ್ ಜೀನೋಮಿಕ್ ಡಿಎನ್‌ಎಯಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ (ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು: ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ 'ಟ್ಯಾಟ್‌ಟಿಸಿಟಿಸಿಟಿಸಿಜಿಜಿಎಜಿಜಿಸಿ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಅಪ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್, ಮತ್ತು ಎಕ್ಸ್‌ನ್ಯೂಮ್ಎಕ್ಸ್' ಟಾಕ್ಸಿಟಿಟಿಜಿಜಿಎಜಿಎಜಿಎಎಟಿಎಕ್ಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ನ್ಯೂಮ್ಎಕ್ಸ್ 'ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್) ಮತ್ತು ಆರಂಭದಲ್ಲಿ ಪಿಜಿಇಎಂ-ಟಿ ಈಸಿ ವೆಕ್ಟರ್ (ಪ್ರೋಮೆಗಾ, # ಎಎಕ್ಸ್‌ಎಮ್ಎಕ್ಸ್) ಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ. ನಂತರ ಪ್ರವರ್ತಕ ತುಣುಕನ್ನು pGL3-luc ನ Kpn5 / Xho3 ನಿರ್ಬಂಧದ ಕಿಣ್ವದ ಸೈಟ್‌ಗಳಿಗೆ ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ಮಾಡಲಾಯಿತು.

ನಲ್ಲಿ CRE ಪಾಯಿಂಟ್ ರೂಪಾಂತರವನ್ನು ರಚಿಸಲು ಸಿ.ಸಿ. ಪ್ರವರ್ತಕ, ಈ ಹಿಂದೆ ವರದಿ ಮಾಡಲಾದ ಸಿಆರ್‌ಇ ತರಹದ ಸೈಟ್‌ಗೆ ವಿರುದ್ಧವಾಗಿ ನಿರ್ದೇಶಿಸಲಾದ ಮ್ಯುಟಾಜೆನಿಕ್ ಪ್ರೈಮರ್ (ಸೆನ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್: 5'ಸಿಜಿಟಿಜಿಟಿಸಿಟಿಜಿಸಿಟಿಜಿಎಜಿಟಿಸಿಜಿಜಿಎಜಿಟಿಜಿಎಟಿಎಎಎ 3 ', ಆಂಟಿಸ್ಸೆನ್ಸ್ ಪ್ರೈಮರ್: 5'ಸಿಟಿಜಿಟಿಟಿಎಟಿಸಿಎಸಿಎಜಿಟಿಜಿಜಿಜಿಜಿಟಿಸಿಎಜಿಎಜಿಎಜಿಎಜಿ . ಇದು ವರದಿಯಾದ ಸಿಆರ್‌ಇ ತರಹದ ಸೈಟ್ (ಎಸಿಟಿಜಿಸಿಜಿಟಿಸಿಎಜಿಸಿ) ಅನ್ನು ಎಸಿಟಿಜಿಎಜಿಸಿಟಿಸಿಗೆ ಪರಿವರ್ತಿಸುತ್ತದೆ. ಎಲ್ಲಾ ವರದಿಗಾರ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್‌ಗಳನ್ನು ಡಿಎನ್‌ಎ ಅನುಕ್ರಮದಿಂದ ದೃ were ಪಡಿಸಲಾಯಿತು. OsFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ಪಿಸಿಡಿಎನ್ಎ 3 ರ ಬಹು ಅಬೀಜ ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿ ತಾಣಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾದ ಪೂರ್ಣ-ಉದ್ದ os ಫಾಸ್ಬಿ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ ಮತ್ತು ಇದನ್ನು ಹಿಂದೆ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಉಲೆರಿ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಲರ್, 2007).

ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ಮತ್ತು ಡಿಎನ್‌ಎ ವರ್ಗಾವಣೆ

ಡಲ್ಬೆಕ್ಕೊದ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಈಗಲ್‌ನ ಮಾಧ್ಯಮ ಎಫ್ -12 ನಲ್ಲಿ ಇಲಿ ಫಿಯೋಕ್ರೊಮೋಸೈಟೋಮಾ (ಪಿಸಿ 12) ಕೋಶಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗಿದ್ದು, 10% ಕುದುರೆ ಸೀರಮ್, 5% ಭ್ರೂಣದ ಬೋವಿನ್ ಸೀರಮ್, ಮತ್ತು 1 ° ಪೆನಿಸಿಲಿನ್ / ಸ್ಟ್ರೆಪ್ಟೊಮೈಸಿನ್ 37 ° C ಮತ್ತು 5% CO2. 360 μL ನಲ್ಲಿ ಬಿಟಿಎಕ್ಸ್ 350 ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಪೊರೇಟರ್ (0 ವಿ, 850 ಓಮ್, ಮತ್ತು 800 μ ಎಫ್) ಬಳಸಿ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಪೊರೇಷನ್ ಮೂಲಕ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು. ಡಲ್ಬೆಕ್ಕೊದ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ 4 ಎಂಎಂ ಗ್ಯಾಪ್ ಕುವೆಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಲವಣಾಂಶವನ್ನು 10 μg ವರದಿಗಾರ ಮತ್ತು 5 μg ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ರಚನೆಯೊಂದಿಗೆ ಬಫರ್‌ ಮಾಡಿತು. ಒಟ್ಟು ಪ್ರಮಾಣದ ಡಿಎನ್‌ಎಯನ್ನು ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಲು ಖಾಲಿ ವೆಕ್ಟರ್ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ (ಪಿಸಿಡಿಎನ್‌ಎ) ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ವರ್ಗಾವಣೆಯ ನಂತರ, ಕೋಶಗಳನ್ನು 35 ಎಂಎಂ ಕಾಲಜನ್-ಲೇಪಿತ ಭಕ್ಷ್ಯಗಳಲ್ಲಿ ಸೂಚಿಸಿದ ಸಮಯಕ್ಕೆ ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು.

ಲೂಸಿಫೆರೇಸ್ ಅಸ್ಸೇಸ್

ವರ್ಗಾವಣೆಯಾದ ಎರಡು ಅಥವಾ ಮೂರು ದಿನಗಳ ನಂತರ, ಡಲ್ಬೆಕ್ಕೊದ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಬಫರ್ಡ್ ಲವಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಕೋಶಗಳನ್ನು 3 ಬಾರಿ ತೊಳೆದು, ಲೈಸ್ಡ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ (25 ಎಂಎಂ ಗ್ಲೈಸಿಲ್ಗ್ಲೈಸಿನ್ ಬಳಸಿ, 15 ಎಂಎಂ ಎಂಜಿಎಸ್ಒ4, 4 mM EGTA, 1% ಟ್ರಿಟಾನ್ X-100, pH 7.8, 1 mM DTT), ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಣದ ಮೂಲಕ ತೆರವುಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. 30 lyL ಲೈಸೇಟ್ ಅನ್ನು 140 μL ಲೂಸಿಫರೇಸ್ ಅಸ್ಸೇ ಬಫರ್ (25 mM ಗ್ಲೈಸಿಲ್ಗ್ಲೈಸಿನ್, 15 mM MgSO4, 4 mM EGTA, 1 mM DTT, 1 mM ATP, 1 mM ಪೊಟ್ಯಾಸಿಯಮ್ ಫಾಸ್ಫೇಟ್, 1 mM coenzyme A, pH 7.8). ಪ್ರತಿ ಬಾವಿಗೆ 800 μL 40 mM ಲೂಸಿಫೆರಿನ್‌ನ ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ನಂತರ FLx-1 ಮೈಕ್ರೊಪ್ಲೇಟ್ ಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ರೀಡರ್ ಬಳಸಿ ಲ್ಯುಮಿನಿಸೆನ್ಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಬಯೋರಾಡ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಂತೆ ಲೂಸಿಫೆರೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಒಟ್ಟು ಪ್ರೋಟೀನ್ ವಿಷಯಕ್ಕೆ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು.

ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೊರೆಟಿಕ್ ಮೊಬಿಲಿಟಿ ಶಿಫ್ಟ್ ಅಸ್ಸೇ

ದ್ವಿ-ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನಿಕ್ 11A ಇಲಿಗಳಿಂದ ಸ್ಟ್ರೈಟಮ್‌ನ ದ್ವಿಪಕ್ಷೀಯ ಚೂರುಗಳಿಂದ ಪರಮಾಣು ಸಾರಗಳು (2 ಅಥವಾ 8 ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಡಾಕ್ಸಿಸೈಕ್ಲಿನ್‌ನಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಹೊರಗೆ ನಿರ್ವಹಿಸಲ್ಪಡುತ್ತವೆ) (ಮ್ಯಾಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಮತ್ತು ನೆಸ್ಟ್ಲರ್, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್) ಪ್ರಕಾರ ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು ಹುವಾಂಗ್ ಮತ್ತು ವಾಲ್ಟರ್ಸ್ (1996). 32ಪಿ-ಲೇಬಲ್ ಡಬಲ್-ಸ್ಟ್ರಾಂಡೆಡ್ ಆಲಿಗೊನ್ಯೂಕ್ಲಿಯೊಟೈಡ್ ಪ್ರೋಬ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರೋಮೆಗಾ ಜೆಲ್ ಶಿಫ್ಟ್ ಅಸ್ಸೇ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಪ್ರೊಟೊಕಾಲ್ (#E3300) ಬಳಸಿ ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ರೋಚೆ ಕ್ವಿಕ್ ಸ್ಪಿನ್ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಒಮ್ಮತದ CRE ಮತ್ತು AP-1 ತನಿಖಾ ಅನುಕ್ರಮಗಳು ಪ್ರೋಮೆಗಾ (ಕ್ರಮವಾಗಿ #E328A ಮತ್ತು E320B) ಮತ್ತು ಸಿ.ಸಿ. CRE ಅನುಕ್ರಮಗಳು (Cck-CRE ಅರ್ಥ: CTAGCGAGCTCTGGACTGCGTCAGCACTGGGTGCA; Cck-CRE ಆಂಟಿಸ್ಸೆನ್ಸ್: CCCAGTGCTGACGCAGTCCAGAGCTCGCTAGCTTT).

ಪ್ರೋಮೆಗಾ ಜೆಲ್ ಶಿಫ್ಟ್ ಅಸ್ಸೇ ಸಿಸ್ಟಮ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದ (#E3300) ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು ಮತ್ತು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೋರೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ತನಿಖೆಯ 50,000 ಸಿಪಿಎಂ ಅನ್ನು 10 strig ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯರ್ ಸಾರದೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ. ರೇಡಿಯೊ ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲಾದ ಶೋಧಕಗಳನ್ನು ಪರಿಚಯಿಸುವ ಮೊದಲು ಶೀತ ಪ್ರತಿಸ್ಪರ್ಧಿ ಡಿಎನ್‌ಎ ಅಥವಾ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. ಸೂಪರ್‌ಶಿಫ್ಟ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗಾಗಿ, CREB ಪ್ರತಿಕಾಯದ 2 μg (ಅಪ್‌ಸ್ಟೇಟ್ ಬಯೋಟೆಕ್ನಾಲಜಿ # 06-083) ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು 4% ಪಾಲಿಯಾಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಜೆಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೊರೆಸ್ಡ್ ಆಗಿದ್ದು, ಒಣಗಿಸಿ ಫಿಲ್ಮ್‌ಗೆ ಒಡ್ಡಿಕೊಳ್ಳಲ್ಪಟ್ಟವು (1 ಗಂಟೆಯಿಂದ 2 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ತೀವ್ರಗೊಳಿಸುವ ಪರದೆಗಳನ್ನು ಬಳಸುವುದು).

ಇಮ್ಯುನೊಬ್ಲಾಟಿಂಗ್

ಪಿಸಿ 12 ಕೋಶಗಳಿಗೆ, ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ ಜೀವಕೋಶಗಳ 35 ಎಂಎಂ ಪ್ಲೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಐಸ್ ಕೋಲ್ಡ್‌ನಲ್ಲಿ ತೊಳೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಯಿತು ಡಲ್ಬೆಕ್ಕೊದ ಫಾಸ್ಫೇಟ್-ಬಫರ್ಡ್ ಲವಣಾಂಶವನ್ನು ಐಸ್ ಕೋಲ್ಡ್ ಆರ್‍ಪಿಎ ಲೈಸಿಸ್ ಬಫರ್‌ನಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು (50 ಎಂಎಂ ಟ್ರಿಸ್ ಪಿಹೆಚ್ 7.4, 5 ಎಂಎಂ ನ್ಯಾಕ್ಎಲ್, 5 ಎಂಎಂ ಇಡಿಟಿಎ, 1% ಡಿಯೋಕ್ಸಿಕೋಲೇಟ್, 1 ಪ್ರೋಟಿಯೇಸ್ ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ% ಟ್ರಿಟಾನ್ ಎಕ್ಸ್ -100, 0.1% ಸೋಡಿಯಂ ಡೋಡೆಸಿಲ್ ಸಲ್ಫೇಟ್). Sonication, Clearing ಮತ್ತು ಬ್ರಾಡ್‌ಫೋರ್ಡ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ನಂತರ, ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ನಿರಾಕರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಯ 50 μg ಅನ್ನು 10% SDS ಪಾಲಿಯಾಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಜೆಲ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೊರೆಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಪಿವಿಡಿಎಫ್ ಮೆಂಬರೇನ್‌ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು, 1% ಟ್ವೀನ್ -3 (ಟಿಬಿಎಸ್-ಟಿ ಹಾಲು) ಹೊಂದಿರುವ ಟ್ರಿಸ್-ಬಫರ್ಡ್ ಲವಣಾಂಶದಲ್ಲಿ 0.1% ಕೊಬ್ಬು ರಹಿತ ಒಣ ಹಾಲಿನಲ್ಲಿ 20 ಗಂಟೆ ನಿರ್ಬಂಧಿಸಲಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ (ಸಿಆರ್‌ಇಬಿ- ಅಪ್‌ಸ್ಟೇಟ್ ಬಯೋಟೆಕ್ನಾಲಜಿ # 4-06, 083: 1 ಕ್ಕೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ; ಜಿಎಪಿಡಿಹೆಚ್- ಸಿಗ್ಮಾ # ಜಿ 1,000, 8795: 1 ಕ್ಕೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ) ಟಿಬಿಎಸ್-ಟಿ ಹಾಲಿನಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಟಿಬಿಎಸ್-ಟಿ ಯಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ತೊಳೆಯುವಿಕೆಯ ನಂತರ, ಕ್ಷಾರೀಯ ಫಾಸ್ಫಟೇಸ್-ಸಂಯೋಜಿತ ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು (ಸಿಗ್ಮಾ) ಬಳಸಿ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಒಂದು ಗಂಟೆಯವರೆಗೆ ಟಿಬಿಎಸ್-ಟಿ ಹಾಲಿನಲ್ಲಿ 80,000: 1 ಅನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ಟ್ರಿಸ್-ಬಫರ್ಡ್ ಲವಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ತೊಳೆಯುವಿಕೆಯ ನಂತರ, ಬಯೋರಾಡ್ (# 5,000-170) ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಬಣ್ಣ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಪೊರೆಗಳನ್ನು ರಾತ್ರಿಯಿಡೀ ಒಣಗಿಸಿ, ಫ್ಲಾಟ್‌ಬೆಡ್ ಸ್ಕ್ಯಾನರ್‌ನಲ್ಲಿ ಸ್ಕ್ಯಾನ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಇಮೇಜ್‌ಜೆ ಬಳಸಿ ಡೆನ್ಸಿಟೋಮೆಟ್ರಿಯನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಯಿತು (ಕೆಳಗೆ ನೋಡಿ).

ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಸಾರಗಳಿಗಾಗಿ, ಈ ಹಿಂದೆ ಪ್ರಕಟವಾದಂತೆ ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ ಅಸ್ಸೇಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು (ಹೋಪ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 1994). ಶಿರಚ್ itated ೇದಿತ ಇಲಿಗಳಿಂದ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಯಿತು, ಮಂಜುಗಡ್ಡೆಯ ಮೇಲೆ ಇರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 1 ಮಿಮೀ ದಪ್ಪದಲ್ಲಿ ಮೆದುಳಿನ ಮ್ಯಾಟ್ರಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ವಿಭಾಗಿಸಲಾಗಿದೆ. ನಂತರ ಅಂಗಾಂಶದ ಹೊಡೆತಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಂಡು -80 at C ನಲ್ಲಿ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುತ್ತದೆ. ಫಾಸ್ಫಟೇಸ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟಿಯೇಸ್ ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳನ್ನು (ರೋಚೆ, ಸಿಗ್ಮಾ) ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಡಿಟರ್ಜೆಂಟ್ ಆಧಾರಿತ ಬಫರ್‌ನಲ್ಲಿ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಮಂಜುಗಡ್ಡೆಯ ಮೇಲೆ sonicated. Sonication ನಂತರ, ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಕುದಿಯುವ ನೀರಿನಲ್ಲಿ ಡಿನೇಚರ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 15,000 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ 15xg ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ; ಅತೀಂದ್ರಿಯವನ್ನು ತರುವಾಯ ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಯಿತು; ಬ್ರಾಡ್ಫೋರ್ಡ್ ಅಸ್ಸೇ (ಬಯೋ-ರಾಡ್) ಬಳಸಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ನಂತರ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 10% ಅಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ / ಬೈಸಾಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಜೆಲ್‌ನಲ್ಲಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು, ಇದನ್ನು ಪಿವಿಡಿಎಫ್ ಮೆಂಬರೇನ್‌ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು, 5% ಹಾಲಿನಲ್ಲಿ ನಿರ್ಬಂಧಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ (ಆಂಟಿ-ಸಿಆರ್‌ಇಬಿ, ಅಪ್‌ಸ್ಟೇಟ್, ಲೇಕ್ ಪ್ಲ್ಯಾಸಿಡ್, ಎನ್ವೈ) ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. ಕೆಮಿಲುಮಿನೆನ್ಸಿನ್ಸ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ (ಪಿಯರ್ಸ್) ಬಳಸಿ ಬ್ಲಾಟ್‌ಗಳನ್ನು ತರುವಾಯ ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಎಲ್ಲಾ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು GAPDH (ಫಿಟ್ಜ್‌ಗೆರಾಲ್ಡ್, ಕಾನ್‌ಕಾರ್ಡ್, MA) ಗೆ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ನಾವು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನದ ರೇಖೀಯ ವ್ಯಾಪ್ತಿಯಲ್ಲಿದ್ದೇವೆ ಎಂದು ಖಚಿತಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳಲು ಪ್ರಮಾಣಿತ ವಕ್ರಾಕೃತಿಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು.

ಡೆನ್ಸಿಟೋಮೆಟ್ರಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ

PC12 ಇಮ್ಯುನೊಬ್ಲಾಟ್‌ಗಳಿಗಾಗಿ, ರಾಡ್‌ಬಾರ್ಡ್ ಮಾಪನಾಂಕ ನಿರ್ಣಯದೊಂದಿಗೆ ಇಮೇಜ್‌ಜೆ ಬಳಸಿ ಡೆನ್ಸಿಟೋಮೆಟ್ರಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿ ಮಾಪನದಿಂದ ಸರಾಸರಿ ಹಿನ್ನೆಲೆ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಕಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಗೆ CREB ಯ ಅನುಪಾತವನ್ನು GAPDH ಸಂಕೇತಕ್ಕೆ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ. ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಇಮ್ಯುನೊಬ್ಲಾಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಇಎಂಎಸ್‌ಎ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಾಗಿ, ಹಿನ್ನೆಲೆ ವ್ಯವಕಲನದೊಂದಿಗೆ ಸಿಯಾನ್ ಇಮೇಜ್ 1.62c ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು.

ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪೇಶನ್ (ಚಿಪ್)

ನ ವಿಧಾನಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಚಿಪ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು ಸ್ಯಾಂಕೋವಾ ಮತ್ತು ಇತರರು. (2004) ಮತ್ತು ಕುಮಾರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು. (2005). ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ, ಡಾಕ್ಸಿಸೈಕ್ಲಿನ್‌ನಲ್ಲಿ ಅಥವಾ ಹೊರಗೆ ನಿರ್ವಹಿಸಲ್ಪಟ್ಟ 11 ಎ ಇಲಿಗಳಿಂದ ದ್ವಿಪಕ್ಷೀಯ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು 1% ಫಾರ್ಮಾಲ್ಡಿಹೈಡ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಕ್ರಾಸ್‌ಲಿಂಕ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಗ್ಲೈಸಿನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಕ್ರಾಸ್‌ಲಿಂಕಿಂಗ್ ಅನ್ನು ತಣಿಸಲಾಯಿತು (ಅಂತಿಮ ಸಾಂದ್ರತೆಯು 0.125 ಎಂ). ಈ ಮಾದರಿಗಳು ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕುವುದರೊಂದಿಗೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಮಟ್ಟದಲ್ಲಿ ತೆಗೆದ ಸಂಪೂರ್ಣ ಮೆದುಳಿನ ಚೂರುಗಳಿಂದ ಬಂದವು. ಕ್ರೋಮ್ಯಾಟಿನ್ ಅನ್ನು ಸಿನಿಕೇಶನ್ ಮೂಲಕ ಸರಿಸುಮಾರು 0.2 ರಿಂದ 1 ಕೆಬಿ ತುಣುಕುಗಳಿಗೆ ಕತ್ತರಿಸಲಾಯಿತು, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಜಿ ಮಣಿಗಳಿಂದ (ಥರ್ಮೋ ಸೈಂಟಿಫಿಕ್ # 22852) ತೆರವುಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು ಇನ್ಪುಟ್ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು -80. C ನಲ್ಲಿ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿದವು. ಪ್ರತಿ ಮಳೆಗೆ 60 ರಿಂದ 100 μg ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ನಡುವೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ಪ್ರತಿ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯದ 5-10 μg ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು (CREB: ಅಪ್‌ಸ್ಟೇಟ್ ಬಯೋಟೆಕ್ನಾಲಜಿ # 06-863, osFosB: ಸಾಂತಾ ಕ್ರೂಜ್ ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ # ಎಸ್‌ಸಿ -48 ಎಕ್ಸ್, ಅಸಿಟೈಲೇಟೆಡ್ ಎಚ್ 3: ಅಪ್‌ಸ್ಟೇಟ್ ಬಯೋಟೆಕ್ನಾಲಜಿ # 06-599, ಮೆತಿಲೇಟೆಡ್ ಎಚ್ 3 (ಎಲ್ವೈಎಸ್ 9): ಸೆಲ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ, cFos: ಸಾಂತಾ ಕ್ರೂಜ್ ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ # SC-7202x). ಆಂಟಿಬಾಡಿ-ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಸಂಕೀರ್ಣಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದನೆಯ ಸೂಚನೆಗಳ ಪ್ರಕಾರ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಜಿ ಪ್ಲಸ್ ಮಣಿಗಳೊಂದಿಗೆ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು (ಥರ್ಮೋ ಸೈಂಟಿಫಿಕ್ # 22852). ಇನ್ಪುಟ್ ಮತ್ತು ಅವಕ್ಷೇಪಿತ ಮಾದರಿಗಳ ರಿವರ್ಸ್ ಕ್ರಾಸ್ಲಿಂಕಿಂಗ್ ನಂತರ, ಪ್ರತಿ ಮಾದರಿಯನ್ನು ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ಪಿಸಿಆರ್ (qPCR) ಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು. ಚಿಪ್‌ಗಾಗಿ ಈ ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳ ಬಳಕೆಯನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ (ಸ್ಯಾಂಕೋವಾ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004; ಕುಮಾರ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2005; ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2009).

ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರತಿ ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕದಲ್ಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬಂಧಿಸುವ ಮಟ್ಟವನ್ನು qPCR (ಅಪ್ಲೈಡ್ ಬಯೋಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್ (ಎಬಿಐ) ಪ್ರಿಸ್ಮ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್, ಫೋಸ್ಟರ್ ಸಿಟಿ, ಸಿಎ) ಮೂಲಕ ಸಂಯೋಜಿತ ಡಿಎನ್‌ಎ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಮೂಲಕ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಎಸ್‌ವೈಬಿಆರ್ ಗ್ರೀನ್ (ಅಪ್ಲೈಡ್ ಬಯೋಸಿಸ್ಟಮ್ಸ್, ಸಿಎ) ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಇನ್ಪುಟ್ ಅಥವಾ ಒಟ್ಟು ಡಿಎನ್‌ಎ (ನಾನ್‌ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೆಡ್) ಮತ್ತು ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೆಡ್ ಡಿಎನ್‌ಎಗಳನ್ನು ಮೂರು ಪಟ್ಟು ಹೆಚ್ಚಿಸಲಾಯಿತು. ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಡಿಟೆಕ್ಟರ್ 7700 ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಬಳಸಿ ಪ್ರತಿ ಸ್ಯಾಂಪಲ್‌ನಿಂದ ಸಿಟಿ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ಟೆಂಪ್ಲೇಟ್ ಡಿಎನ್‌ಎದ ಸಾಪೇಕ್ಷ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ΔΔCt ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು (ಸ್ಯಾಂಕೋವಾ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2004). ಬಳಸಿದ ಪ್ರೈಮರ್‌ಗಳು: BDNF ಪ್ರವರ್ತಕ 4: CTTCTGTGTGCGTGAATTTGCT; AGTCCACGAGAGGGCTCCA CDK5 ಪ್ರವರ್ತಕ: GCTGAAGCTGTCAGGAGGTC; GTGCCCCGCTCTTGTTATTA Cck ಪ್ರವರ್ತಕ: CTTGGGCTAGCCTCATTCACTG; TTAAATAGCTCCTCCCGGTTCG ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಪ್ರವರ್ತಕ: GGCTTCCTTGTGCTTCAGAC; GCGCTGTTTGTCACTTTCAA.

ಅಂಕಿಅಂಶಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ

ಎಲ್ಲಾ ಡೇಟಾವನ್ನು ಸಾಧನವಾಗಿ ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ mean ಸರಾಸರಿ ಪ್ರಮಾಣಿತ ದೋಷ. ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳ ಎರಡು ಬಾಲದ ಟಿ-ಪರೀಕ್ಷೆಯಿಂದ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ (ಪು <0.05). ಅನೇಕ ಹೋಲಿಕೆಗಳನ್ನು ಮಾಡಿದಾಗ, ಬಾನ್ಫೆರೋನಿ ತಿದ್ದುಪಡಿಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪಿ-ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಸರಿಹೊಂದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಇಲ್ಲಿಗೆ ಹೋಗು:

ಕೃತಜ್ಞತೆಗಳು

ಸಹಾಯಕವಾದ ಚರ್ಚೆಗಳಿಗಾಗಿ ನಾವು ವಿಲ್ ರೆಂಥಾಲ್ ಮತ್ತು ಅರವಿಂದ್ ಕುಮಾರ್ ಅವರಿಗೆ ಧನ್ಯವಾದ ಅರ್ಪಿಸುತ್ತೇವೆ. ಈ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ಧನಸಹಾಯ ನೀಡಿದ್ದಕ್ಕಾಗಿ ನಾವು ನಿಡಾಗೆ ಧನ್ಯವಾದ ಹೇಳಲು ಬಯಸುತ್ತೇವೆ.

ಇಲ್ಲಿಗೆ ಹೋಗು:

ಅಡಿಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು

ಪ್ರಕಾಶಕರ ಹಕ್ಕುತ್ಯಾಗ: ಪ್ರಕಟಣೆಗಾಗಿ ಸ್ವೀಕರಿಸಲಾದ ಸಂಪಾದಿಸದ ಹಸ್ತಪ್ರತಿಯ PDF ಫೈಲ್ ಆಗಿದೆ. ನಮ್ಮ ಗ್ರಾಹಕರಿಗೆ ಸೇವೆಯಾಗಿ ನಾವು ಹಸ್ತಪ್ರತಿಯ ಈ ಆರಂಭಿಕ ಆವೃತ್ತಿಯನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತಿದ್ದೇವೆ. ಹಸ್ತಪ್ರತಿಯು ಅದರ ಅಂತಿಮ ಸಿಟಬಲ್ ರೂಪದಲ್ಲಿ ಪ್ರಕಟಗೊಳ್ಳುವ ಮೊದಲು ನಕಲು ಮಾಡುವಿಕೆ, ಟೈಪ್ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಫಲಿತಾಂಶದ ಪುರಾವೆಗಳ ವಿಮರ್ಶೆಗೆ ಒಳಗಾಗುತ್ತದೆ. ವಿಷಯದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ಉತ್ಪಾದನಾ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯ ದೋಷಗಳು ಪತ್ತೆಯಾಗಬಹುದು ಮತ್ತು ಜರ್ನಲ್ಗೆ ಅನ್ವಯವಾಗುವ ಎಲ್ಲ ಕಾನೂನು ಹಕ್ಕು ನಿರಾಕರಣೆಗಳು ಎಂಬುದನ್ನು ದಯವಿಟ್ಟು ಗಮನಿಸಿ.

ವರ್ಗೀಕರಣ ನಿಯಮಗಳು:

ವಿಭಾಗ: #1 ನರಮಂಡಲದ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಮತ್ತು ಆಣ್ವಿಕ ಜೀವಶಾಸ್ತ್ರ

ಇಲ್ಲಿಗೆ ಹೋಗು:

ಉಲ್ಲೇಖಗಳು

  1. ಆಂಡರ್ಸನ್ ಎಂ, ಕೊನ್ರಾಡಿ ಸಿ, ಸೆನ್ಸಿ ಎಂ.ಎ. ಡೋಪಮೈನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಸಿಎಎಂಪಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಎಲಿಮೆಂಟ್-ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಗತ್ಯವಾಗಿರುತ್ತದೆ ಆದರೆ ಡೋಪಮೈನ್-ಡಿರ್ನೇಟೆಡ್ ಸ್ಟ್ರೈಟಮ್ ಅಲ್ಲ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2001; 21: 9930 - 43. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  2. ಬ್ಯಾರಟ್ ಎಂ, ಆಲಿವಿಯರ್ ಜೆಡಿ, ಪೆರೊಟ್ಟಿ ಎಲ್ಐ, ಡಿಲಿಯೋನ್ ಆರ್ಜೆ, ಬರ್ಟನ್ ಒ, ಐಶ್ ಎಜೆ, ಇಂಪೆ ಎಸ್, ಸ್ಟಾರ್ಮ್ ಡಿಆರ್, ನೆವ್ ಆರ್ಎಲ್, ಯಿನ್ ಜೆಸಿ, ಜಕಾರಿಯೋ ವಿ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಶೆಲ್‌ನಲ್ಲಿನ CREB ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಭಾವನಾತ್ಮಕ ಪ್ರಚೋದಕಗಳಿಗೆ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಗೇಟಿಂಗ್ ಅನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರೊಕ್ ನ್ಯಾಟ್ ಅಕಾಡ್ ಸೈ ಯುಎಸ್ ಎ. ಎಕ್ಸ್‌ನ್ಯೂಎಮ್ಎಕ್ಸ್; [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  3. ಬೀನ್‌ಫೆಲ್ಡ್ ಎಂಸಿ, ಕೊನೊಲ್ಲಿ ಕೆಜೆ, ಪಿಯರ್ಸ್ ಆರ್ಸಿ. ಕೊಕೇನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಶೆಲ್ನಲ್ಲಿ ಎಚ್ಚರವಾಗಿರುವ, ಮುಕ್ತವಾಗಿ ಚಲಿಸುವ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ (ಸಿಸಿಕೆ) ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ವರ್ತನೆಯಿಂದ ಸಂವೇದನಾಶೀಲವಾಗಿರುವ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ವರ್ಧಿಸುತ್ತದೆ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಕೆಮ್. 2002; 81: 1021 - 7. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  4. ಬರ್ನಾರ್ಡ್ ಸಿ, ಸುಟರ್ ಎ, ವಿನ್ಸನ್ ಸಿ, ರಾಟಿನೌ ಸಿ, ಚೈವಿಯಲ್ ಜೆ, ಕಾರ್ಡಿಯರ್-ಬುಸ್ಸಾಟ್ ಎಂ. ಪೆಪ್ಟೋನ್‌ಗಳು ಸೈಕ್ಲಿಕ್ ಅಡೆನೊಸಿನ್ ಮೊನೊಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಅಂಶ-ಬಂಧಿಸುವ ಅಂಶಗಳ ಮೂಲಕ ಕರುಳಿನ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಜೀನ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನವನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ. ಅಂತಃಸ್ರಾವಶಾಸ್ತ್ರ. 2001; 142: 721 - 9. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  5. ಬಿಬ್ ಜೆಎ, ಚೆನ್ ಜೆ, ಟೇಲರ್ ಜೆಆರ್, ಸ್ವೆನ್ನಿಂಗ್ಸನ್ ಪಿ, ನಿಶಿ ಎ, ಸ್ನೈಡರ್ ಜಿಎಲ್, ಯಾನ್ Z ಡ್, ಸಾಗಾ Z ಡ್‌ಕೆ, u ಯಿಮೆಟ್ ಸಿಸಿ, ನಾಯರ್ನ್ ಎಸಿ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ, ಗ್ರೀನ್‌ಗಾರ್ಡ್ ಪಿ. ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಮಾನ್ಯತೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ನರಕೋಶದ ಪ್ರೋಟೀನ್ ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಕೃತಿ. 5; 2001: 410 - 376. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  6. ಚಾ-ಮೊಲ್‌ಸ್ಟಾಡ್ ಎಚ್, ಕೆಲ್ಲರ್ ಡಿಎಂ, ಯೋಚುಮ್ ಜಿಎಸ್, ಇಂಪೆ ಎಸ್, ಗುಡ್‌ಮ್ಯಾನ್ ಆರ್ಹೆಚ್. CREP- ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಅಂಶಕ್ಕೆ CREB ಎಂಬ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶದ ಕೋಶ-ಪ್ರಕಾರ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಬಂಧ. ಪ್ರೊಕ್ ನ್ಯಾಟ್ ಅಕಾಡ್ ಸೈ ಯುಎಸ್ ಎ. ಎಕ್ಸ್‌ನ್ಯೂಎಮ್ಎಕ್ಸ್; [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  7. ಚೆನ್ ಜೆ, ನೈ ಹೆಚ್ಇ, ಕೆಲ್ಜ್ ಎಂಬಿ, ಹಿರೋಯಿ ಎನ್, ನಕಬೆಪ್ಪು ವೈ, ಹೋಪ್ ಬಿಟಿ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಕಾನ್ವಲ್ಸಿವ್ ಸೆಳವು ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳಿಂದ ಡೆಲ್ಟಾ ಫಾಸ್ಬಿ ಮತ್ತು ಫಾಸ್ಬಿ ತರಹದ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಮೋಲ್ ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್. 1995; 48: 880 - 9. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  8. ಚೆನ್ ಜೆ, ಕೆಲ್ಜ್ ಎಂಬಿ, g ೆಂಗ್ ಜಿ, ಸಕೈ ಎನ್, ಸ್ಟೆಫೆನ್ ಸಿ, ಶಾಕೆಟ್ ಪಿಇ, ಪಿಕ್ಕಿಯೊಟ್ಟೊ ಎಮ್ಆರ್, ಡುಮನ್ ಆರ್ಎಸ್, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲಾಗದ, ಉದ್ದೇಶಿತ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಹೊಂದಿರುವ ಜೀವಾಂತರ ಪ್ರಾಣಿಗಳು. ಮೋಲ್ ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್. 1998; 54: 495 - 503. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  9. ಚೆನ್ ಜೆ, ಜಾಂಗ್ ವೈ, ಕೆಲ್ಜ್ ಎಂಬಿ, ಸ್ಟೆಫೆನ್ ಸಿ, ಆಂಗ್ ಇಎಸ್, g ೆಂಗ್ ಎಲ್, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಕಾನ್ವಲ್ಸಿವ್ ರೋಗಗ್ರಸ್ತವಾಗುವಿಕೆಗಳಿಂದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ 5 ನ ಇಂಡಕ್ಷನ್: osFosB ಯ ಪಾತ್ರ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2000; 20: 8965 - 71. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  10. ಚಿನೆನೋವ್ ವೈ, ಕೆರ್ಪೋಲಾ ಟಿಕೆ. ಅನೇಕ ರೀತಿಯ ಮುಖಾಮುಖಿಗಳು: ಪ್ರತಿಲೇಖನ ನಿಯಂತ್ರಕ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಗೆ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುವ ಫಾಸ್-ಜೂನ್ ಸಂವಾದಗಳು. ಆಂಕೊಜಿನ್. 2001; 20: 2438 - 52. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  11. ಕೋಲ್ ಆರ್ಎಲ್, ಕೊನ್ರಾಡಿ ಸಿ, ಡೌಗ್ಲಾಸ್ ಜೆ, ಹೈಮನ್ ಎಸ್ಇ. ಆಂಫೆಟಮೈನ್ ಮತ್ತು ಡೋಪಮೈನ್‌ಗೆ ನರಕೋಶ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ: ಇಲಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಪ್ರೊಡಿನಾರ್ಫಿನ್ ಜೀನ್ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಆಣ್ವಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು. ನ್ಯೂರಾನ್. 1995; 14: 813 - 23. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  12. ಡಿವಾಲ್ ಡಿಜಿ, ರೇಚೌಧರಿ ಆರ್, ಡಾಕ್ರೇ ಜಿಜೆ, ಡಿಮಾಲೈನ್ ಆರ್. ಎಸ್‌ಟಿಸಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಪಿಎಸಿಎಪಿಯಿಂದ ಸಿಸಿಕೆ ಜೀನ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನದ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಆಮ್ ಜೆ ಫಿಸಿಯೋಲ್ ಗ್ಯಾಸ್ಟ್ರೊಯಿಂಟೆಸ್ಟ್ ಲಿವರ್ ಫಿಸಿಯೋಲ್. 1; 2000: G279 - 605. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  13. ಡಿಂಗ್ ಎಕ್ಸ್‌ Z ಡ್, ಮೊಚೆಟ್ಟಿ I. ಇಲಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಎಮ್‌ಆರ್‌ಎನ್ಎ ವಿಷಯದ ಡೋಪಮಿನರ್ಜಿಕ್ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್ ಮೋಲ್ ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. 1992; 12: 77 - 83. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  14. ಫಾರೆಸ್ಟ್ ಎಸ್, ಮೆಕ್‌ನಮರಾ ಸಿ. ಐಡಿ ಕುಟುಂಬ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಗಳು ಮತ್ತು ನಾಳೀಯ ಲೆಸಿಯಾನ್ ರಚನೆ. ಅಪಧಮನಿಕಾಠಿಣ್ಯದ ಥ್ರೊಂಬ್ ವಾಸ್ ಬಯೋಲ್. 2004; 24: 2014 - 20. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  15. ಗೆವ್ರಿ ಜೆಸಿ, ಕಾರ್ಡಿಯರ್-ಬುಸ್ಸಾಟ್ ಎಂ, ನೆಮೊಜ್-ಗೇಲಾರ್ಡ್ ಇ, ಚೈವಿಯೆಲ್ ಜೆಎ, ಅಬೆಲ್ಲೊ ಜೆ. ಪ್ರೋಟೀನ್ ಹೈಡ್ರೊಲೈಸೇಟ್ಗಳಿಂದ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಜೀನ್‌ನ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಗಾಗಿ ಸೈಕ್ಲಿಕ್ ಎಎಮ್‌ಪಿ- ಮತ್ತು ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಯಂ-ಅವಲಂಬಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೈನೇಸ್‌ಗಳ ಸಹ-ಅವಶ್ಯಕತೆ. ಜೆ ಬಯೋಲ್ ಕೆಮ್. 2002; 277: 22407 - 13. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  16. ಗ್ರೀನ್ ಟಿಎ, ಅಲಿಭಾಯ್ ಐಎನ್, ಅನ್ಟರ್ಬರ್ಗ್ ಎಸ್, ನೆವ್ ಆರ್ಎಲ್, ಘೋಸ್ ಎಸ್, ಟಮ್ಮಿಂಗಾ ಸಿಎ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಗಳ (ಎಟಿಎಫ್‌ಗಳು) ಎಟಿಎಫ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್, ಎಟಿಎಫ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಎಟಿಎಫ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ಭಾವನಾತ್ಮಕ ನಡವಳಿಕೆಯ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2; 3: 4 - 2008. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  17. ಹ್ಯಾಮಿಲ್ಟನ್ ಎಂಇ, ರೆಡಾಂಡೋ ಜೆಎಲ್, ಫ್ರೀಮನ್ ಎಎಸ್. ತೀವ್ರವಾದ drug ಷಧಿ ಆಡಳಿತಕ್ಕೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಇಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ ಮತ್ತು ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್‌ನ ಉಕ್ಕಿ ಹರಿಯುವುದು. ಸಿನಾಪ್ಸೆ. 2000; 38: 238 - 42. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  18. ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್ ಟಿವಿ, ರೆಹಫೆಲ್ಡ್ ಜೆಎಫ್, ನೀಲ್ಸನ್ ಎಫ್‌ಸಿ. ಮೈಟೊಜೆನ್-ಆಕ್ಟಿವೇಟೆಡ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೈನೇಸ್ ಮತ್ತು ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೈನೇಸ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಮಾರ್ಗಗಳು ಸೈಕ್ಲಿಕ್ ಅಡೆನೊಸಿನ್ 3 ′, 5′-ಮೊನೊಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಅಂಶ-ಬಂಧಿಸುವ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಮೂಲಕ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನವನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ. ಮೋಲ್ ಎಂಡೋಕ್ರಿನಾಲ್. 1999; 13: 466-75. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  19. ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್ ಟಿವಿ, ನೀಲ್ಸನ್ ಎಫ್‌ಸಿ. ನರಕೋಶದ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಜೀನ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನದ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಸ್ಕ್ಯಾಂಡ್ ಜೆ ಕ್ಲಿನ್ ಲ್ಯಾಬ್ ಇನ್ವೆಸ್ಟ್ ಸಪ್ಲೈ. 2001; 234: 61 - 7. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  20. ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್ ಟಿವಿ. ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಜೀನ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನ: ಪ್ರವರ್ತಕ ಅಂಶಗಳು, ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಗಳು ಮತ್ತು ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಮಾರ್ಗಗಳು. ಪೆಪ್ಟೈಡ್ಸ್. 2001; 22: 1201 - 11. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  21. ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್ ಟಿವಿ, ರೆಹಫೆಲ್ಡ್ ಜೆಎಫ್, ನೀಲ್ಸನ್ ಎಫ್‌ಸಿ. ಸಿ.ಆರ್.ಇ.ಬಿ ಮತ್ತು ಸಹ-ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್ ಸಿ.ಬಿ.ಪಿ ಯ ಸಮನ್ವಯ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಮೂಲಕ ಕೆ.ಸಿ.ಎಲ್ ಮತ್ತು ಫೋರ್ಸ್ಕೋಲಿನ್ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಸಹ-ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಕೆಮ್. 2004; 89: 15 - 23. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  22. ಹಾನ್ ಆರ್ಎಸ್, ಡಿಕ್ಸನ್ ಜೆಇ. ಇಲಿ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಜೀನ್‌ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಅಗತ್ಯವಾದ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ವರ್ಧಕವು ಮಾನವನ ಸಿ-ಫಾಸ್ ಜೀನ್‌ನ -296 ಅಂಶಕ್ಕೆ ಹೋಲುವ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿದೆ. ಜೆ ಬಯೋಲ್ ಕೆಮ್. 1990; 265: 15455 - 63. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  23. ಹಿರೋಯಿ ಎನ್, ಮಾರೆಕ್ ಜಿಜೆ, ಬ್ರೌನ್ ಜೆಆರ್, ಯೆ ಹೆಚ್, ಸೌದೌ ಎಫ್, ವೈದ್ಯ ವಿಎ, ಡುಮನ್ ಆರ್ಎಸ್, ಗ್ರೀನ್‌ಬರ್ಗ್ ಎಂಇ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಕಾನ್ವಲ್ಸಿವ್ ರೋಗಗ್ರಸ್ತವಾಗುವಿಕೆಗಳ ಆಣ್ವಿಕ, ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಮತ್ತು ನಡವಳಿಕೆಯ ಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ಫಾಸ್ಬಿ ಜೀನ್‌ನ ಅಗತ್ಯ ಪಾತ್ರ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 1998. 1998; 18: 6952 - 62. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  24. ಮೆಕ್ಸೊ-ಲಿಂಬಿಕ್ ನರಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ ಮತ್ತು ಸಿಸಿಕೆ ಸಹಬಾಳ್ವೆಗಾಗಿ ಹೊಕ್ಫೆಲ್ಟ್ ಟಿ, ರೆಹಫೆಲ್ಡ್ ಜೆಎಫ್, ಸ್ಕಿರ್ಬೋಲ್ ಎಲ್, ಐವೆಮಾರ್ಕ್ ಬಿ, ಗೋಲ್ಡ್ ಸ್ಟೈನ್ ಎಂ, ಮಾರ್ಕೆ ಕೆ. ಪ್ರಕೃತಿ. 1980; 285: 476 - 8. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  25. ಹೋಪ್ ಬಿಟಿ, ಕೆಲ್ಜ್ ಎಂಬಿ, ಡುಮನ್ ಆರ್ಎಸ್, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಕಾನ್ವಲ್ಸಿವ್ ಸೆಳವು (ಇಸಿಎಸ್) ಚಿಕಿತ್ಸೆಯು ಬದಲಾದ ಸಂಯೋಜನೆ ಮತ್ತು ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳೊಂದಿಗೆ ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಎಪಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 1; 1994: 14 - 4318. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  26. ಹೋಪ್ ಬಿಟಿ, ನೈ ಹೆಚ್ಇ, ಕೆಲ್ಜ್ ಎಂಬಿ, ಸೆಲ್ಫ್ ಡಿಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಇಡಾರೊಲಾ ಎಮ್ಜೆ, ನಕಬೆಪ್ಪು ವೈ, ಡುಮನ್ ಆರ್ಎಸ್, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ ಮತ್ತು ಇತರ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗಳಿಂದ ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ ಬದಲಾದ ಫಾಸ್ ತರಹದ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳಿಂದ ಕೂಡಿದ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಎಪಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣದ ಇಂಡಕ್ಷನ್. ನ್ಯೂರಾನ್. 1; 1994: 13 - 1235. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  27. ಹುವಾಂಗ್ ಕೆಎಕ್ಸ್, ವಾಲ್ಟರ್ಸ್ ಜೆಆರ್. ಇಲಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ ಎಪಿ-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕ್ರಿಪ್ಷನ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ ಡಿಎನ್ಎ ಬಂಧಿಸುವ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಡೋಪಮಿನರ್ಜಿಕ್ ನಿಯಂತ್ರಣ. ನರವಿಜ್ಞಾನ. 1; 1996: 75 - 757. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  28. ಇಂಪೆ ಎಸ್, ಮೆಕ್ಕಾರ್ಕಲ್ ಎಸ್ಆರ್, ಚಾ-ಮೊಲ್ಸ್ಟಾಡ್ ಎಚ್, ಡ್ವೈರ್ ಜೆಎಂ, ಯೋಚಮ್ ಜಿಎಸ್, ಬಾಸ್ ಜೆಎಂ, ಮೆಕ್ವೀನಿ ಎಸ್, ಡನ್ ಜೆಜೆ, ಮ್ಯಾಂಡೆಲ್ ಜಿ, ಗುಡ್ಮನ್ ಆರ್ಹೆಚ್. CREB ರೆಗ್ಯುಲಾನ್ ಅನ್ನು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸುವುದು: ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶ ನಿಯಂತ್ರಕ ಪ್ರದೇಶಗಳ ಜೀನೋಮ್-ವೈಡ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ. ಸೆಲ್. 2004; 119: 1041 - 54. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  29. ಜೋಹಾನ್ಸೆನ್ ಎಂ, ಡೆಲ್ಘಾಂಡಿ ಸಂಸದ, ಮೊಯೆನ್ಸ್ ಯು. ಸೆಲ್ ಸಿಗ್ನಲ್. 2004; 16: 1211 - 27. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  30. ಜೋಸ್ಲಿನ್ ಎಸ್.ಎ, ವ್ಯಾಕರಿನೊ ಎಫ್ಜೆ. ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ ನಿಯಮಾಧೀನ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಮೇಲೆ ಸಿಸಿಕೆ (ಎ) ಮತ್ತು ಸಿಸಿಕೆ (ಬಿ) ವಿರೋಧಿಗಳ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ವಿರೋಧಿಸುವುದು. ಬೆಹವ್ ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್. 1996; 7: 505 - 512. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  31. ಜೋಸ್ಲಿನ್ ಎಸ್ಎ, ಡಿ ಕ್ರಿಸ್ಟೋಫರೋ ಎ, ವ್ಯಾಕರಿನೊ ಎಫ್ಜೆ. ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಕೊಕೇನ್ ಉತ್ಪಾದಿಸುವ ನಿಯಮಾಧೀನ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಸ್ವಾಧೀನಪಡಿಸಿಕೊಳ್ಳುವಲ್ಲಿ ಸಿಸಿಕೆ (ಎ) ಗ್ರಾಹಕ ಪಾಲ್ಗೊಳ್ಳುವಿಕೆಗೆ ಪುರಾವೆ. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. 1997; 763: 93 - 102. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  32. ಕೆಲ್ಜ್ ಎಂಬಿ, ಚೆನ್ ಜೆ, ಕಾರ್ಲೆಜನ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂಎ, ಜೂನಿಯರ್, ವಿಸ್ಲರ್ ಕೆ, ಗಿಲ್ಡೆನ್ ಎಲ್, ಬೆಕ್ಮನ್ ಎಎಮ್, ಸ್ಟೆಫೆನ್ ಸಿ, ಜಾಂಗ್ ವೈಜೆ, ಮರೋಟ್ಟಿ ಎಲ್, ಸೆಲ್ಫ್ ಡಿಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಟಕಾಚ್ ಟಿ, ಬಾರಾನೌಸ್ಕಾಸ್ ಜಿ, ಸುರ್ಮಿಯರ್ ಡಿಜೆ, ನೆವ್ ಆರ್ಎಲ್, ಡುಮನ್ ಆರ್ಎಸ್, ಪಿಕ್ಕಿಯೊಟೊ ಎಂಆರ್ , ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿನ ಡೆಲ್ಟಾಫೊಸ್ಬಿ ಎಂಬ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರಕೃತಿ. 1999; 401: 272 - 6. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  33. ಕುಮಾರ್ ಎ, ಚೋಯ್ ಕೆಹೆಚ್, ರೆಂಥಾಲ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಸ್ಯಾಂಕೋವಾ ಎನ್ಎಂ, ಥಿಯೋಬಾಲ್ಡ್ ಡಿಇ, ಟ್ರೂಂಗ್ ಎಚ್‌ಟಿ, ರುಸ್ಸೋ ಎಸ್‌ಜೆ, ಲ್ಯಾಪ್ಲಾಂಟ್ ಕ್ಯೂ, ಸಾಸಾಕಿ ಟಿಎಸ್, ವಿಸ್ಲರ್ ಕೆಎನ್, ನೆವ್ ಆರ್ಎಲ್, ಸೆಲ್ಫ್ ಡಿಡಬ್ಲ್ಯೂ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ಮರುರೂಪಿಸುವಿಕೆಯು ಸ್ಟ್ರೈಟಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಗೆ ಆಧಾರವಾಗಿರುವ ಒಂದು ಪ್ರಮುಖ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಾಗಿದೆ. ನ್ಯೂರಾನ್. 2005; 48: 303 - 14. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  34. ಮ್ಯಾಟ್ಸನ್ ಬಿಜೆ, ಬಾಸ್ಸರ್ಟ್ ಜೆಎಂ, ಸಿಮ್ಮನ್ಸ್ ಡಿಇ, ನೊಜಾಕಿ ಎನ್, ನಾಗಾರ್ಕರ್ ಡಿ, ಕ್ರೂಟರ್ ಜೆಡಿ, ಹೋಪ್ ಬಿಟಿ. ಕೊಕೇನ್-ಸಂವೇದನಾಶೀಲ ಇಲಿಗಳ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ಸಿಆರ್‌ಇಬಿ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಸಿಗ್ನಲ್-ಸಂಬಂಧಿತ ಕೈನೇಸ್‌ನ ವರ್ಧಿತ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಿಂದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೈನೇಸ್ ಎ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಕೆಮ್ ಅಲ್ಲ. 2005; 95: 1481 - 94. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  35. ಮೆಕ್ಕ್ಲಂಗ್ ಸಿಎ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. CREB ಮತ್ತು DeltaFosB ಯಿಂದ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್ ಬಹುಮಾನದ ನಿಯಂತ್ರಣ. ನ್ಯಾಟ್ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2003; 6: 1208 - 15. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  36. ಮೆಕ್‌ಕ್ಲಂಗ್ ಸಿಎ, ಉಲೆರಿ ಪಿಜಿ, ಪೆರೊಟ್ಟಿ ಎಲ್ಐ, ಜಕಾರಿಯೋ ವಿ, ಬರ್ಟನ್ ಒ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ಡೆಲ್ಟಾಫೋಸ್ಬಿ: ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ರೂಪಾಂತರಕ್ಕಾಗಿ ಆಣ್ವಿಕ ಸ್ವಿಚ್. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್ ಮೋಲ್ ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. 2004; 132: 146 - 54. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  37. ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ, ಕೆಲ್ಜ್ ಎಂಬಿ, ಚೆನ್ ಜೆಎಸ್. Os ಫಾಸ್ಬಿ: ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ನರ ಮತ್ತು ವರ್ತನೆಯ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯ ಆಣ್ವಿಕ ಮಧ್ಯವರ್ತಿ. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. 1999; 835: 10 - 17. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  38. ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ಚಟಕ್ಕೆ ಸಾಮಾನ್ಯ ಆಣ್ವಿಕ ಮಾರ್ಗವಿದೆಯೇ? ನ್ಯಾಟ್ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2005; 8: 1445 - 9. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  39. ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ವ್ಯಸನದ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು: ಡೆಲ್ಟಾಫೊಸ್ಬಿಯ ಪಾತ್ರ. ಫಿಲೋಸ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್ ಆರ್ ಸೊಕ್ ಲಂಡನ್ ಬಿ ಬಯೋಲ್ ಸೈ. 2008; 363: 3245 - 55. [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  40. ಪೆರೋಟ್ಟಿ ಎಲ್ಐ, ವೀವರ್ ಆರ್ಆರ್, ರಾಬಿಸನ್ ಬಿ, ರೆಂಥಾಲ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಮೇಜ್ ಐ, ಯಾಜ್ದಾನಿ ಎಸ್, ಎಲ್ಮೋರ್ ಆರ್ಜಿ, ನ್ಯಾಪ್ ಡಿಜೆ, ಸೆಲ್ಲಿ ಡಿಇ, ಮಾರ್ಟಿನ್ ಬಿಆರ್, ಸಿಮ್-ಸೆಲ್ಲಿ ಎಲ್, ಬ್ಯಾಚ್ಟೆಲ್ ಆರ್ಕೆ, ಸೆಲ್ಫ್ ಡಿಡಬ್ಲ್ಯೂ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳಿಂದ ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ ಡೆಲ್ಟಾಫೊಸ್ಬಿ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ವಿಭಿನ್ನ ಮಾದರಿಗಳು. ಸಿನಾಪ್ಸೆ. 2008; 62: 358 - 69. [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  41. ರಾಂಡೋ ಒಜೆ, ಚಾಂಗ್ ಎಚ್‌ವೈ. ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ರಚನೆಯ ಜೀನೋಮ್-ವೈಡ್ ವೀಕ್ಷಣೆಗಳು. ಆನ್ಯು ರೆವ್ ಬಯೋಕೆಮ್. 2009; 78: 245 - 71. [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  42. ರೆಂಥಾಲ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಕಾರ್ಲೆ ಟಿಎಲ್, ಮೇಜ್ I, ಕೋವಿಂಗ್ಟನ್ ಹೆಚ್ಇ, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಆರ್ಡಿ., ಟ್ರೂಂಗ್ ಎಚ್‌ಟಿ, ಅಲಿಭಾಯ್ ಐ, ಕುಮಾರ್ ಎ, ಮಾಂಟ್ಗೊಮೆರಿ ಆರ್ಎಲ್, ಓಲ್ಸನ್ ಇಎನ್, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಆಂಫೆಟಮೈನ್ ಮಾನ್ಯತೆಯ ನಂತರ ಡೆಲ್ಟಾ ಫಾಸ್ಬಿ ಸಿ-ಫಾಸ್ ಜೀನ್‌ನ ಎಪಿಜೆನೆಟಿಕ್ ಡಿಸೆನ್ಸಿಟೈಸೇಶನ್ ಅನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 3; 2008: 28 - 7344. [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  43. ರೆಂಥಾಲ್ ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಕುಮಾರ್ ಎ, ಕ್ಸಿಯಾವೋ ಜಿ, ವಿಲ್ಕಿನ್ಸನ್ ಎಂ, ಕೋವಿಂಗ್ಟನ್ ಹೆಚ್ಇ, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಆರ್ಡಿ, ಮೇಜ್ ಐ, ಸಿಕ್ಡರ್ ಡಿ, ರಾಬಿಸನ್ ಎಜೆ, ಲಾಪ್ಲಾಂಟ್ ಕ್ಯೂ, ಡಯೆಟ್ಜ್ ಡಿಎಂ, ರುಸ್ಸೋ ಎಸ್‌ಜೆ, ವಿಯಾಲೌ ವಿ, ಚಕ್ರವರ್ತಿ ಎಸ್, ಕೊಡಾಡೆಕ್ ಟಿಜೆ, ಸ್ಟಾಕ್ ಎ, ಕಬ್ಬಾಜ್ ಎಂ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ಕೊಕೇನ್‌ನಿಂದ ಕ್ರೊಮಾಟಿನ್ ನಿಯಂತ್ರಣದ ಜೀನೋಮ್-ವೈಡ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಸಿರ್ಟುಯಿನ್‌ಗಳಿಗೆ ಒಂದು ಪಾತ್ರವನ್ನು ತಿಳಿಸುತ್ತದೆ. ನ್ಯೂರಾನ್. 3; 2009: 62 - 335. [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  44. ರೊಟ್ಜಿಂಜರ್ ಎಸ್, ಬುಷ್ ಡಿಇ, ವ್ಯಾಕರಿನೊ ಎಫ್ಜೆ. ಮೆಸೊಲಿಂಬಿಕ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಕ್ರಿಯೆಯ ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಮಾಡ್ಯುಲೇಷನ್: ಪ್ರೇರಿತ ವರ್ತನೆಯ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್ ಟಾಕ್ಸಿಕೋಲ್. 2002; 91: 404 - 13. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  45. ರೂರ್ಕೆ ಐಜೆ, ಹ್ಯಾನ್ಸೆನ್ ಟಿವಿ, ನೆರ್ಲೋವ್ ಸಿ, ರೆಹಫೆಲ್ಡ್ ಜೆಎಫ್, ನೀಲ್ಸನ್ ಎಫ್‌ಸಿ. ಕೊಲೆಸಿಸ್ಟೊಕಿನಿನ್ ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕದಲ್ಲಿ ಜಸ್ಟ್‌ಪೋಸ್ಡ್ ಇ-ಬಾಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ / ಟಿಪಿಎ ಸ್ಪಂದಿಸುವ ಅಂಶಗಳ ನಡುವಿನ ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಸಹಕಾರ. ಫೆಬ್ಸ್ ಲೆಟ್. 1999; 448: 15 - 8. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  46. ಶಾ-ಲಚ್‌ಮನ್ ಟಿಜೆಡ್, ಬ್ಯಾರಟ್ ಎಂ, ವ್ಯಾಲೇಸ್ ಟಿ, ಗಿಲ್ಡೆನ್ ಎಲ್, ಜಕಾರಿಯೋ ವಿ, ಇಂಪೆ ಎಸ್, ಡುಮನ್ ಆರ್ಎಸ್, ಸ್ಟಾರ್ಮ್ ಡಿ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ನಾಲ್ಟ್ರೆಕ್ಸೋನ್-ಅವಕ್ಷೇಪಿತ ಮಾರ್ಫಿನ್ ವಾಪಸಾತಿ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸಿಆರ್ಇ-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಪ್ರತಿಲೇಖನದ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಮತ್ತು ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಮ್ಯಾಪಿಂಗ್. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2002; 22: 3663 - 3672. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  47. ಶಾ-ಲಚ್‌ಮನ್ ಟಿ Z ಡ್, ಇಂಪೆ ಎಸ್, ಸ್ಟಾರ್ಮ್ ಡಿ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ಆಂಫೆಟಮೈನ್‌ನಿಂದ ಮೌಸ್ ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ ಸಿಆರ್‌ಇ-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಪ್ರತಿಲೇಖನದ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಸಿನಾಪ್ಸೆ. 2003; 48: 10 - 7. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  48. ಶೆಂಗ್ ಎಂ, ಮೆಕ್‌ಫ್ಯಾಡೆನ್ ಜಿ, ಗ್ರೀನ್‌ಬರ್ಗ್ ಎಂಇ. ಮೆಂಬ್ರೇನ್ ಡಿಪೋಲರೈಸೇಶನ್ ಮತ್ತು ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಯಂ ಸಿಆರ್ಇಬಿಯ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶದ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಮೂಲಕ ಸಿ-ಫಾಸ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನವನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ. ನ್ಯೂರಾನ್. 1990; 4: 571 - 82. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  49. ತ್ಸಾಂಕೋವಾ ಎನ್ಎಂ, ಕುಮಾರ್ ಎ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. ತೀವ್ರ ಮತ್ತು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಕಾನ್ವಲ್ಸಿವ್ ರೋಗಗ್ರಸ್ತವಾಗುವಿಕೆಗಳ ನಂತರ ಇಲಿ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್‌ನಲ್ಲಿನ ಜೀನ್ ಪ್ರವರ್ತಕ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ಹಿಸ್ಟೋನ್ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳು. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2004; 24: 5603 - 10. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  50. ಉಲೆರಿ ಪಿಜಿ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. Ser27 ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಮೂಲಕ ಡೆಲ್ಟಾಫೊಸ್ಬಿ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಯುರ್ ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2007; 25: 224 - 30. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  51. ವ್ಯಾಕರಿನೊ ಎಫ್ಜೆ. ಸೈಕೋಸ್ಟಿಮ್ಯುಲಂಟ್ ಪ್ರತಿಫಲ ಮತ್ತು ಸಂಬಂಧಿತ ನಡವಳಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಡೋಪಮೈನ್-ಸಿಸಿಕೆ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳು. ನ್ಯೂರೋಸಿ ಬಯೋಬೆಹವ್ ರೆವ್. 1992; 18: 207 - 14. [ಪಬ್ಮೆಡ್]
  52. ಜಕಾರಿಯೋ ವಿ, ಬೊಲಾನೋಸ್ ಸಿಎ, ಸೆಲ್ಲಿ ಡಿಇ, ಥಿಯೋಬಾಲ್ಡ್ ಡಿ, ಕ್ಯಾಸಿಡಿ ಎಂಪಿ, ಕೆಲ್ಜ್ ಎಂಬಿ, ಶಾ-ಲುಚ್ಮನ್ ಟಿ, ಬರ್ಟನ್ ಒ, ಸಿಮ್-ಸೆಲ್ಲಿ ಎಲ್ಜೆ, ಡಿಲಿಯೋನ್ ಆರ್ಜೆ, ಕುಮಾರ್ ಎ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ. OsFosB: ಮಾರ್ಫೈನ್ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ osFosB ಗೆ ಅತ್ಯಗತ್ಯ ಪಾತ್ರ. ನೇಚರ್ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2006; 9: 205 - 11. [ಪಬ್ಮೆಡ್]