PLoS ಒಂದು. 2013 ನವೆಂಬರ್ 25; 8 (11): e81245. doi: 10.1371 / journal.pone.0081245.
ನಿಶಿಜಿಮಾ ಟಿ, ಕವಾಕಾಮಿ ಎಂ, ಕಿಟಾ I..
ಮೂಲ
ಬಿಹೇವಿಯರಲ್ ಫಿಸಿಯಾಲಜಿ ಪ್ರಯೋಗಾಲಯ, ಮಾನವ ಆರೋಗ್ಯ ವಿಜ್ಞಾನಗಳ ಪದವಿ ಶಾಲೆ, ಟೋಕಿಯೊ ಮೆಟ್ರೋಪಾಲಿಟನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯ, ಟೋಕಿಯೊ, ಜಪಾನ್.
ಅಮೂರ್ತ
ದೈಹಿಕ ವ್ಯಾಯಾಮವು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಕ್ರಿಯೆಯ ಅನೇಕ ಅಂಶಗಳನ್ನು ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ. ನರಕೋಶದ ಚಟುವಟಿಕೆಗಳನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಲು ನರಕೋಶದ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಪ್ರಮುಖವಾದುದು ಎಂಬ ಕಲ್ಪನೆಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ, ಹಿಂದಿನ ಸಾಹಿತ್ಯವು ವ್ಯಾಯಾಮದ ತೀವ್ರವಾದ ಸ್ಪರ್ಧೆಗಳು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ನರಕೋಶದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತವೆ ಎಂದು ಸತತವಾಗಿ ತೋರಿಸಿಕೊಟ್ಟಿವೆ. ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಪ್ರಚೋದನೆಗಳು osFosB ಎಂಬ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶದ ಶೇಖರಣೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತವೆ, ಇದು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ನರ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುತ್ತದೆ.
ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬ othes ಹೆಯನ್ನು ನಾವು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ಡಾರ್ಸೊ-ವೆಂಟ್ರಲ್ ಅಕ್ಷದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ಸಂಭಾವ್ಯ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಗಂಡು C57BL / 6 ಇಲಿಗಳನ್ನು 4 ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಚಕ್ರದೊಂದಿಗೆ ಅಥವಾ ಇಲ್ಲದೆ ಇರಿಸಲಾಗಿತ್ತು. ಅಳತೆ ಮಾಡಿದ ಎಲ್ಲಾ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ (ಅಂದರೆ, ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ಎರಡರ DG, CA1, ಮತ್ತು CA3 ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ). ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿನ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯ ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಎಂದು ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ದೃ confirmed ಪಡಿಸಿದವು, ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನೊಳಗಿನ FosB / osFosB ಯಲ್ಲಿ ಏಕರೂಪದ ಹೆಚ್ಚಳವು ಚಾಲನೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಪರಿಣಾಮವಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚಿದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿದ osFosB ಕಾರಣ ಎಂದು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್ ಡೇಟಾ ಸೂಚಿಸಿದೆ. ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ದೈಹಿಕ ವ್ಯಾಯಾಮವು ಇಡೀ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಾದ್ಯಂತ osFosB ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಪ್ರಬಲ ಪ್ರಚೋದಕವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ವ್ಯಾಯಾಮವು ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ಏಕೆ ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ಡಿಜಿ ಯಲ್ಲಿನ FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಡಬಲ್ಕಾರ್ಟಿನ್-ಇಮ್ಯುನೊಆರಿಯಾಕ್ಟಿವ್ (ಅಂದರೆ, ಅಪಕ್ವ) ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯೊಂದಿಗೆ ಸಕಾರಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ.
Δ ಫಾಸ್ಬಿ ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಇನ್ನೂ ಅನಿಶ್ಚಿತವಾಗಿದ್ದರೂ, ಈ ಡೇಟಾವು ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಕನಿಷ್ಠ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಒಟ್ಟಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ನಮ್ಮ ಪ್ರಸ್ತುತ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಹೊಸ ಆಣ್ವಿಕ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ಫಾಸ್ಬಿ ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
ಪರಿಚಯ
ದಂಶಕಗಳಲ್ಲಿನ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಆಣ್ವಿಕ, ರಚನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಅಂಶಗಳ ಮೇಲೆ ವ್ಯಾಯಾಮವು ವೈವಿಧ್ಯಮಯ ಪ್ರಯೋಜನಗಳನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ [1,2], ಅವುಗಳಲ್ಲಿ ಕೆಲವು ಮಾನವ ಅಧ್ಯಯನಗಳಿಂದ ಬೆಂಬಲಿತವಾಗಿದೆ [3,4]. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯಲ್ಲಿನ ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಆಧಾರವಾಗಿರುವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಸಾಕಷ್ಟು ಅರ್ಥವಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ವ್ಯಾಯಾಮವು ದಂಶಕಗಳಲ್ಲಿ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ನರಕೋಶದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ಹಿಂದಿನ ಸಾಹಿತ್ಯವು ಸತತವಾಗಿ ತೋರಿಸಿಕೊಟ್ಟಿದೆ. ಅಸ್ಥಿರ ನರಕೋಶದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಗುರುತು ಸಿ-ಫಾಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುವ ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೋಕೆಮಿಕಲ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ದಂಶಕ ಗೈರಸ್ (ಡಿಜಿ), ಸಿಎಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ದಂಶಕ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಸಿಎಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ-ಫಾಸ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿಕೊಟ್ಟಿದೆ.5-7]. ಇದರ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ, ಲೇಸರ್-ಡಾಪ್ಲರ್ ಫ್ಲೋಮೆಟ್ರಿ (ಎಲ್ಡಿಎಫ್) ಅನ್ನು ಬಳಸುವ ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನವು ಸೌಮ್ಯವಾದ ಟ್ರೆಡ್ಮಿಲ್ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಸೆರೆಬ್ರಲ್ ರಕ್ತದ ಹರಿವನ್ನು (ಆರ್ಸಿಬಿಎಫ್) ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ನರಕೋಶದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಪರ್ಯಾಯ ಗುರುತು, ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ ಸಿಎಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಉಪಕ್ಷೇತ್ರದಲ್ಲಿ [8]. ವ್ಯಾಯಾಮವನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಿದ ನಂತರ ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೋಕೆಮಿಕಲ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ವಿವರವಾದ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಶಕ್ತಗೊಳಿಸುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಎಲ್ಡಿಎಫ್ ವ್ಯಾಯಾಮದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸ್ಥಳೀಕರಿಸಿದ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಆರ್ಸಿಬಿಎಫ್ನ ನೈಜ-ಸಮಯದ ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆಯನ್ನು ಶಕ್ತಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿ ಅಧ್ಯಯನದ ಅನುಕೂಲಗಳು ಮತ್ತು ಮಿತಿಗಳ ಹೊರತಾಗಿಯೂ, ಈ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ನರಕೋಶದ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮೇಲೆ ತೀವ್ರವಾದ ವ್ಯಾಯಾಮದ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ತೋರಿಸಿಕೊಟ್ಟವು. ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ನಿಯಮಿತ ವ್ಯಾಯಾಮವು ನರಕೋಶದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಪದೇ ಪದೇ ಪ್ರಚೋದಿಸುವ ಮೂಲಕ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ [9].
ಪೂರ್ಣ-ಉದ್ದದ FosB ಯ ಮೊಟಕುಗೊಳಿಸಿದ ಸ್ಪ್ಲೈಸ್ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ ಎಂಬ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಪ್ರಚೋದಕಗಳಿಂದ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಡುತ್ತದೆ, ಅಲ್ಲಿ ಅದು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಸ್ಥಿರತೆಯಿಂದಾಗಿ ಕ್ರಮೇಣ ಸಂಗ್ರಹಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ (ವಾರಗಳ ಅರ್ಧ-ಜೀವಿತಾವಧಿ) [10-12]. ಹೆಚ್ಚುತ್ತಿರುವ ಸಾಕ್ಷ್ಯಾಧಾರಗಳು ΔFosB ಯ ಹೆಚ್ಚಿನ ಮಟ್ಟವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಚೋದಕಗಳಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ನರ ಮತ್ತು ನಡವಳಿಕೆಯ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ [11,13]. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಕೊಕೇನ್ ಮತ್ತು ಮಾರ್ಫೈನ್ನಂತಹ ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಆಡಳಿತವು ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಗಳಲ್ಲಿ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಈ drugs ಷಧಿಗಳಿಗೆ ಹೆಚ್ಚಿದ ಸಂವೇದನೆಗೆ ಆಧಾರವಾಗಿರುವ ಆಣ್ವಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ [11,14,15]. ಎಸ್ಹೆಚ್ಚಿನ ಕೊಬ್ಬಿನ ಆಹಾರ ಮತ್ತು ಲೈಂಗಿಕ ಅನುಭವ ಸೇರಿದಂತೆ ಇತರ ಪ್ರತಿಫಲ ಪ್ರಚೋದಕಗಳಿಗೆ ಸಮಾನವಾಗಿ [16,17], ಎಲ್ಒಂಗ್-ಟರ್ಮ್ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ಇಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಗಳಲ್ಲಿ ಫೋಸ್ಬಿ / os ಫಾಸ್ಬಿ ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿತು, ಇದು ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಓಟವು ದಂಶಕಗಳಿಗೆ ನೈಸರ್ಗಿಕ ಪ್ರತಿಫಲವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ [18,19]. ಹೇಗಾದರೂ, ನಮ್ಮ ಜ್ಞಾನದ ಅತ್ಯುತ್ತಮವಾಗಿ, ದೈಹಿಕ ವ್ಯಾಯಾಮಕ್ಕೆ ಪದೇ ಪದೇ ಒಡ್ಡಿಕೊಳ್ಳುವುದರಿಂದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆಯೇ ಎಂದು ಯಾವುದೇ ಸಾಹಿತ್ಯವು ಪರೀಕ್ಷಿಸಿಲ್ಲ. ವ್ಯಾಯಾಮವು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ನರಕೋಶದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸುತ್ತದೆ, ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು hyp ಹಿಸಿದ್ದೇವೆ. IssFosB ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ನಿಖರವಾದ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಅನಿಶ್ಚಿತವಾಗಿದ್ದರೂ, ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಇಲಿಗಳ ಕೊರತೆಯನ್ನು ತೋರಿಸಿವೆ fosB ಜೀನ್ ಶೋ ದುರ್ಬಲಗೊಂಡ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿದ ಖಿನ್ನತೆಯಂತಹ ವರ್ತನೆ [20,21]. ನಾನುಅಂದರೆ, ವ್ಯಾಯಾಮವು ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಖಿನ್ನತೆ-ಶಮನಕಾರಿ ಗುಣಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ [22-25]. ನಾನುf ನಮ್ಮ hyp ಹೆಯು ಸರಿಯಾಗಿದೆ, osFosB ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುವ ಹೊಸ ಸಂಭಾವ್ಯ ಆಣ್ವಿಕ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ.
ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ಅದರ ರೇಖಾಂಶದ (ಡಾರ್ಸೊ-ವೆಂಟ್ರಲ್) ಅಕ್ಷದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಅಂಗರಚನಾ ಮತ್ತು ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಗ್ರೇಡಿಯಂಟ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ [26]. ಡಾರ್ಸಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಕಲಿಕೆ ಮತ್ತು ಸ್ಮರಣೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರ ವಹಿಸುತ್ತದೆ [27,28], ಆದರೆ ಭಾವನಾತ್ಮಕ ನಡವಳಿಕೆಗಳನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವಲ್ಲಿ ಕುಹರದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ಆದ್ಯತೆ ನೀಡುತ್ತದೆ [29,30]. ಇದಲ್ಲದೆ, ದೈಹಿಕ ಪ್ರಚೋದನೆಗಳು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಭಾಗಗಳಲ್ಲಿ ಸಿ-ಫಾಸ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ವಿಭಿನ್ನ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಿವೆ [31-33]. ಏಕೆಂದರೆ ವ್ಯಾಯಾಮವು ಡಾರ್ಸಲ್ ಎರಡನ್ನೂ ಸುಧಾರಿಸುತ್ತದೆ [34-37] ಮತ್ತು ಕುಹರದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕಾರ್ಯಗಳು [24,25,38], ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಾಲನೆಯು ΔFosB ಯ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗಿದೆಯೇ ಎಂದು ಪರೀಕ್ಷಿಸುವುದು ಮುಖ್ಯ.
ಈ ಅಧ್ಯಯನದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ othes ಹೆಯೆಂದರೆ, ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ಮೌಸ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ. ಈ hyp ಹೆಯನ್ನು ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳಾದ ಡಿಜಿ, ಸಿಎಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಸಿಎಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿನ ಫಾಸ್ಬಿ / os ಫಾಸ್ಬಿ ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೊಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿ ತನಿಖೆ ಮಾಡಿದೆ, ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಚೋದನೆಯನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ಒತ್ತು ನೀಡಿತು. ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ದೃ were ಪಡಿಸಲಾಯಿತು, ಇದನ್ನು ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು fosB ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಜೀನ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು. ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ವ್ಯಾಯಾಮವು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿಸದ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ತಳ್ಳಿಹಾಕಲು ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ FosB / osFosB ಪ್ರಚೋದನೆಗಾಗಿ ನಾವು ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ΔFosB ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಹುಡುಕುವ ಮೊದಲ ಹೆಜ್ಜೆಯಾಗಿ FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ.
ವಸ್ತುಗಳು ಮತ್ತು ವಿಧಾನಗಳು
1: ಪ್ರಾಣಿಗಳು ಮತ್ತು ನೈತಿಕ ಹೇಳಿಕೆ
ವಾಣಿಜ್ಯ ತಳಿಗಾರರಿಂದ (ಎಸ್ಎಲ್ಸಿ, ಶಿಜುವಾಕಾ, ಜಪಾನ್) ಇಪ್ಪತ್ತು ಪುರುಷ ಸಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಬಿಎಲ್ / ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಇಲಿಗಳನ್ನು (ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ವಾರಗಳ ವಯಸ್ಸು) ಖರೀದಿಸಲಾಗಿದೆ. 57 ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ ಹತ್ತು ಇಲಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗಿದ್ದರೆ, ಉಳಿದ ಹತ್ತು ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು 6 ಪ್ರಯೋಗಕ್ಕಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ತಾಪಮಾನ (8-1 ° C) ಮತ್ತು ಬೆಳಕು (2 / 22-h ಬೆಳಕು / ಗಾ cycle ಚಕ್ರ, 24 ನಲ್ಲಿ ಬೆಳಕು) ನಿಯಂತ್ರಿತ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಇರಿಸಲಾಗಿತ್ತು, ಮತ್ತು ಅವರಿಗೆ ಆಹಾರ ಮತ್ತು ನೀರು ಒದಗಿಸಲಾಯಿತು ಜಾಹೀರಾತು ದ್ರಾವಣ. ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಟೋಕಿಯೊ ಮೆಟ್ರೋಪಾಲಿಟನ್ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಪ್ರಾಣಿ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ನೈತಿಕ ಸಮಿತಿಯು ಅನುಮೋದಿಸಿದೆ.
ಪ್ರತಿ ಪ್ರಯೋಗದಲ್ಲಿ, ಆಗಮನದ ನಂತರ, ಇಲಿಗಳನ್ನು ಯಾದೃಚ್ ly ಿಕವಾಗಿ ನಿಯಂತ್ರಣ ಗುಂಪು (ನಿಯಂತ್ರಣ, n = 5) ಅಥವಾ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಗುಂಪಿಗೆ (ರನ್ನರ್, n = 5) ನಿಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮೊದಲ ವಾರದಲ್ಲಿ, ಎಲ್ಲಾ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಆರಂಭಿಕ ಒಗ್ಗೂಡಿಸುವಿಕೆಗಾಗಿ ಸ್ಟ್ಯಾಂಡರ್ಡ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್ ಪಂಜರಗಳಲ್ಲಿ ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ (5 ಇಲಿಗಳು / ಪಂಜರ) ಇರಿಸಲಾಗಿತ್ತು. ನಂತರ, ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಚಕ್ರವನ್ನು ಹೊಂದಿದ ಪಂಜರಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು (ENV-046, ಮೆಡ್ ಅಸೋಸಿಯೇಟ್ ಇಂಕ್., ಜಾರ್ಜಿಯಾ, ವಿಟಿ, ಯುಎಸ್ಎ). ಸಾಮಾಜಿಕ ಪ್ರತ್ಯೇಕತೆಯು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಿಗ್ರಹಿಸಲು ತಿಳಿದಿದೆ [39], ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಹೆಚ್ಚುವರಿ 5 ವಾರಗಳವರೆಗೆ ಒಂದು ಗುಂಪಾಗಿ (4 ಇಲಿಗಳು / ಪಂಜರ) ಇರಿಸಲಾಗಿತ್ತು. ಪ್ರತಿ ದಿನ ಬೆಳಿಗ್ಗೆ ಚಕ್ರ ತಿರುಗುವಿಕೆಯ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ದಾಖಲಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ದೇಹದ ತೂಕವನ್ನು (ಗ್ರಾಂ) ವಾರಕ್ಕೊಮ್ಮೆ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.
2: ಪ್ರಯೋಗ 1. FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ನ ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೋಕೆಮಿಕಲ್ ಪರೀಕ್ಷೆ
2.1: ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶ ಸಂಸ್ಕರಣೆ
ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಅವಧಿಯ ಕೊನೆಯ ದಿನದ ನಂತರ ಬೆಳಿಗ್ಗೆ (0900-1100), ಇಲಿಗಳನ್ನು ಪೆಂಟೊಬಾರ್ಬಿಟಲ್ ಸೋಡಿಯಂನೊಂದಿಗೆ ಆಳವಾಗಿ ಅರಿವಳಿಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ತಣ್ಣನೆಯ ಲವಣಯುಕ್ತವಾಗಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್ಕಾರ್ಡಿಯಲ್ ಆಗಿ ಸುಗಂಧಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ಮೆದುಳನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 4 M ಫಾಸ್ಫೇಟ್ನಲ್ಲಿ 0.1% ಪ್ಯಾರಾಫಾರ್ಮಲ್ಡಿಹೈಡ್ನಲ್ಲಿ ರಾತ್ರಿಯಿಡೀ ಸ್ಥಿರಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ನಂತರ ಮೆದುಳನ್ನು ಪಿಬಿಎಸ್ನಲ್ಲಿ 7.4% ಸುಕ್ರೋಸ್ನಲ್ಲಿ ಕ್ರಯೋಪ್ರೊಟೆಕ್ಟ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಮುಂದಿನ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯವರೆಗೆ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುತ್ತದೆ. ಒಂದು ಗೋಳಾರ್ಧದ ಕರೋನಲ್ ಮೆದುಳಿನ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು (30 μm) ಘನೀಕರಿಸುವ ಮೈಕ್ರೊಟೋಮ್ ಬಳಸಿ ಪಡೆಯಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 40% ಸೋಡಿಯಂ ಅಜೈಡ್ನೊಂದಿಗೆ ಪಿಬಿಎಸ್ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತು.
2.2: ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೊಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿ
FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಸ್ಟೈನಿಂಗ್ಗಾಗಿ ಒಂದು-ಆರು-ಸರಣಿಯ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಯಾದೃಚ್ ly ಿಕವಾಗಿ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಲು ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಿದ ಅಪಕ್ವವಾದ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ ಗುರುತು ಡಬಲ್ಕಾರ್ಟಿನ್ (ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್) ಅನ್ನು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲು ಪಕ್ಕದ ಸರಣಿಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು [40,41]. 1% H ನೊಂದಿಗೆ ಅಂತರ್ವರ್ಧಕ ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ತಣಿಸಿದ ನಂತರ2O2 ಪಿಬಿಎಸ್ನಲ್ಲಿ, ಮುಕ್ತ-ತೇಲುವ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಎಕ್ಸ್ಬಿಎನ್ಯುಎಕ್ಸ್ಎಚ್ಗಾಗಿ ಪಿಬಿಎಸ್ನಲ್ಲಿ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್% ಸಾಮಾನ್ಯ ಕುದುರೆ ಸೀರಮ್ ಹೊಂದಿರುವ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ತಡೆಯುವುದರೊಂದಿಗೆ ಪೂರ್ವಭಾವಿಯಾಗಿ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಪಿಬಿಎಸ್ನಲ್ಲಿ ತೊಳೆಯುವ ನಂತರ, ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಮೊಲ ಪಾಲಿಕ್ಲೋನಲ್ ಪ್ಯಾನ್-ಫಾಸ್ಬಿ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ (10: 2, sc-1, ಸಾಂತಾ ಕ್ರೂಜ್ ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ, ಡಲ್ಲಾಸ್, TX, USA) ಪಿಬಿಎಸ್ನಲ್ಲಿ 1000% ಟ್ರಿಟಾನ್ X-48 ಮತ್ತು 0.5% BSA (PBST) ನೊಂದಿಗೆ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. -ಬಿಎಸ್ಎ) 100 h ನಲ್ಲಿ 0.5. C ನಲ್ಲಿ. ಮತ್ತೊಂದು ಸರಣಿಯ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಮೇಕೆ ಪಾಲಿಕ್ಲೋನಲ್ ಆಂಟಿ-ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ (24: 4, sc-1, ಸಾಂತಾ ಕ್ರೂಜ್) PBST-BSA ಯಲ್ಲಿ 500 h ಗಾಗಿ 8066 at C ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. ಪಿಬಿಎಸ್ಟಿ-ಬಿಎಸ್ಎದಲ್ಲಿ ಸೂಕ್ತವಾದ ಬಯೊಟೈನೈಲೇಟೆಡ್ ಸೆಕೆಂಡರಿ ಆಂಟಿಬಾಡಿ (ಆಂಟಿ-ಮೊಲ ಐಜಿಜಿ, ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್: ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್, ಎಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಬಿ; ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ 48 h ಗಾಗಿ. ನಂತರ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಎವಿಡಿನ್-ಬಯೋಟಿನ್-ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ (ವೆಕ್ಟಾಸ್ಟೇನ್ ಎಬಿಸಿ ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ ಕಿಟ್, ವೆಕ್ಟರ್ ಲ್ಯಾಬೊರೇಟರೀಸ್ ಇಂಕ್, ಬರ್ಲಿಂಗೇಮ್, ಸಿಎ, ಯುಎಸ್ಎ) ಯೊಂದಿಗೆ 4 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ತಯಾರಕರ ಸೂಚನೆಗಳನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು. 1% H ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ 1000 M Tris-HCl (pH 182) ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಜನಕಗಳನ್ನು ಅಂತಿಮವಾಗಿ 1% 1000- ಡೈಮಿನೊಬೆನ್ಜಿಡಿನ್ (DAB) ನೊಂದಿಗೆ ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು.2O2. FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಸ್ಟೈನಿಂಗ್ಗಾಗಿ, ನಿಕಲ್ ಅಮೋನಿಯಂ ಸಲ್ಫೇಟ್ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ತೀವ್ರಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್ ಸ್ಟೇನಿಂಗ್ಗಾಗಿ, ಕೋಶಕ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳನ್ನು ನಿಸ್ಲ್ ಸ್ಟೈನಿಂಗ್ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ರತಿರೋಧಿಸಲಾಯಿತು. ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಜೆಲಾಟಿನ್-ಲೇಪಿತ ಸ್ಲೈಡ್ಗಳಲ್ಲಿ ಜೋಡಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಕವರ್ಲಿಪ್ಗಳನ್ನು ಇರಿಸಲಾಯಿತು.
2.3: ಇಮೇಜ್ ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣ
ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಪ್ಯಾನ್-ಫಾಸ್ಬಿ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಫೋಸ್ಬಿ ಮತ್ತು os ಫಾಸ್ಬಿ ಎನ್-ಟರ್ಮಿನಲ್ ಪ್ರದೇಶವು ಹಂಚಿಕೊಂಡ ಆಂತರಿಕ ಪ್ರದೇಶದ ವಿರುದ್ಧ ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು, ಇದರಿಂದಾಗಿ ಎರಡು ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ಗಳ ನಡುವೆ ತಾರತಮ್ಯ ಮಾಡಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಆದ್ದರಿಂದ, ಇಮ್ಯುನೊಸ್ಟೇನ್ಡ್ ರಚನೆಗಳನ್ನು FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರಿಯಾಕ್ಟಿವ್ (FosB / osFosB-ir) ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳು ಎಂದು ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪಕ್ಷಪಾತವಿಲ್ಲದ ಕುರುಡು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ, ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಮೊದಲು ಸ್ಲೈಡ್ಗಳನ್ನು ಸಂಕೇತಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮೌಸ್ ಮೆದುಳಿನ ಅಟ್ಲಾಸ್ [42] ಈ ಕೆಳಗಿನ ಆಸಕ್ತಿಯ ಪ್ರದೇಶಗಳ (ಆರ್ಒಐ) ಸ್ಥಳವನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು: ಡಿಜಿಯ ಗ್ರ್ಯಾನ್ಯೂಲ್ ಸೆಲ್ ಲೇಯರ್ (ಜಿಸಿಎಲ್) (ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ವಿಭಾಗಗಳು), ಸಿಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ನ ಪಿರಮಿಡಲ್ ಸೆಲ್ ಲೇಯರ್ (ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ವಿಭಾಗಗಳು) ಮತ್ತು ಡಾರ್ಸಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ಸಿಎಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ (ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ವಿಭಾಗಗಳು) (ಬ್ರೀಗ್ಮಾದಿಂದ -3 ಮಿ.ಮೀ.ಗೆ ಮುಚ್ಚಲಾಗಿದೆ); ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ಡಿಜಿ (1 ವಿಭಾಗಗಳು), CA3 (3 ವಿಭಾಗಗಳು), ಮತ್ತು CA2 (3 ವಿಭಾಗಗಳು) (ಬ್ರೀಗ್ಮಾದಿಂದ -2.2 ಮಿ.ಮೀ.ಗೆ ಮುಚ್ಚಲಾಗಿದೆ) (ಚಿತ್ರ 4, ಎಡ). ಕಾಡಲ್ ವಿಭಾಗಗಳು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಭಾಗಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ, ಆದರೆ ಕುಹರದ ಭಾಗವನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸಲಾಗಿತ್ತು. ಡಿಜಿ ಯಲ್ಲಿ, ಸುಪ್ರೊರಮಿಡಲ್ (ಡಿಜಿಎಸ್ಪಿ) ಮತ್ತು ಇನ್ಫ್ರೊಪಿರಮಿಡಲ್ (ಡಿಜಿಪ್) ಬ್ಲೇಡ್ಗಳನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮೋಟಾರು ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ (2-3 ವಿಭಾಗಗಳು, ಬ್ರೀಗ್ಮಾದಿಂದ -0.6 ಮಿ.ಮೀ.ಗೆ ಮುಚ್ಚಲಾಗಿದೆ), ಸೊಮಾಟೊಸೆನ್ಸರಿ ಬ್ಯಾರೆಲ್ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ (2-3 ವಿಭಾಗಗಳು, ಬ್ರೀಗ್ಮಾದಿಂದ -0.6 ಮಿ.ಮೀ.ಗೆ ಮುಚ್ಚಲಾಗಿದೆ), ದೃಶ್ಯ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ (3 ವಿಭಾಗಗಳು, -2.9 ಮಿ.ಮೀ.ಗೆ ಮುಚ್ಚಲಾಗಿದೆ ಬ್ರೀಗ್ಮಾ), ಶ್ರವಣೇಂದ್ರಿಯ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ (3 ವಿಭಾಗಗಳು, ಬ್ರೀಗ್ಮಾದಿಂದ -2.9 ಮಿ.ಮೀ.ಗೆ ಮುಚ್ಚಲಾಗಿದೆ), ಮತ್ತು ಘ್ರಾಣ ಬಲ್ಬ್ (3 ವಿಭಾಗಗಳು, ಬ್ರೀಗ್ಮಾದಿಂದ + 4.3 ಮಿ.ಮೀ.ಗೆ ಮುಚ್ಚಲಾಗಿದೆ) ಸಹ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 6, ಎಡ).
ಪ್ರತಿ ROI ಯ ಡಿಜಿಟಲ್ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು (2070 × 1548 ಪಿಕ್ಸೆಲ್ಗಳು) ಸಿಸಿಡಿ ಕ್ಯಾಮೆರಾ (ಡಿಪಿ-ಎಕ್ಸ್ನ್ಯೂಎಮ್ಎಕ್ಸ್, ಒಲಿಂಪಸ್) ಮತ್ತು ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸಾಫ್ಟ್ವೇರ್ (ಸೆಲ್ಸೆನ್ಸ್, ಒಲಿಂಪಸ್) ಹೊಂದಿದ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ (ಬಿಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್, ಒಲಿಂಪಸ್, ಟೋಕಿಯೊ, ಜಪಾನ್) ಬಳಸಿ ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಗಿದೆ. ವಸ್ತುನಿಷ್ಠ ಮಸೂರ ವರ್ಧನೆಯು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ROI ಗಳಿಗೆ 51 and ಮತ್ತು ಕಾರ್ಟಿಕಲ್ ROI ಗಳಿಗೆ 73 was ಆಗಿತ್ತು. ಮಧ್ಯಮದಿಂದ ಬಲವಾದ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು (ಚಿತ್ರ 1D - G.), ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಹಲವಾರು ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ, ಇಮೇಜ್ ಸ್ವಾಧೀನ ಸೆಟ್ಟಿಂಗ್ಗಳು (ಬೆಳಕಿನ ತೀವ್ರತೆ, ಫೀಲ್ಡ್ ಸ್ಟಾಪ್ನ ಗಾತ್ರ, ಮಾನ್ಯತೆ ಸಮಯ ಮತ್ತು ಬಿಳಿ ಸಮತೋಲನ) ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಆರ್ಜಿಬಿ ಘಟಕಗಳಿಗೆ ಮಿತಿ ಮಟ್ಟಗಳು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಟಿಕಲ್ ಆರ್ಒಐಗಳಿಗೆ ಹೊಂದುವಂತೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಕೆಳಗಿನ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಂತರ ಆಪ್ಟಿಮೈಸ್ಡ್ ಷರತ್ತುಗಳಲ್ಲಿ (1) ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ROI ಗಳನ್ನು ಅನಿಯಮಿತ ಆಕಾರದ ಬಹುಭುಜಾಕೃತಿಯಿಂದ ಆಯ್ಕೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 1A, B) (2). ಚಿತ್ರವನ್ನು ಮಿತಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ, ಇದು FosB / osFosB-ir ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳನ್ನು ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣಕ್ಕೆ ಪರಿವರ್ತಿಸಿತು (ಚಿತ್ರ 1C-G) (3). ನಂತರ% ROI ಅನ್ನು ಸ್ವಯಂಚಾಲಿತವಾಗಿ ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ:% ROI = (ಪರಿವರ್ತಿಸಲಾದ ಪ್ರದೇಶ (ಕೆಂಪು ಬಣ್ಣದಲ್ಲಿ) / ಒಟ್ಟು ROI ಪ್ರದೇಶ) × 100.
ಈ ಚಿತ್ರದ ಮಿತಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಲು, 20 ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ಯಾದೃಚ್ ly ಿಕವಾಗಿ ವಿಭಿನ್ನ ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಂದ ವಿಭಿನ್ನ ಪ್ರದೇಶದ ಗಾತ್ರಗಳೊಂದಿಗೆ ಆಯ್ಕೆಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಇಮೇಜ್ ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡಿಂಗ್ ಪರಿಮಾಣದ ಜೊತೆಗೆ, ಆಯ್ದ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿನ FosB / osFosB-ir ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಕೈಯಾರೆ ಎಣಿಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು FosB / osFosB-ir ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು FosB / osFosB-ir ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಅಳೆಯುವ ಮೂಲಕ ಭಾಗಿಸಿ ಪಡೆಯಲಾಯಿತು. ಪ್ರದೇಶ (ಮಿಮೀ2).
2.4: ಡೆಂಟೇಟ್ ಗೈರಸ್ನಲ್ಲಿ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಐಆರ್ ಅಪಕ್ವವಾದ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣ
ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳ ಡಿಜಿ ಯಲ್ಲಿರುವ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಐಆರ್ ಅಪಕ್ವವಾದ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳು ಹೇರಳವಾಗಿ ಮತ್ತು ಅತಿಕ್ರಮಿಸುತ್ತಿದ್ದವು, ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ ಬಳಸಿ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಇರ್ ಸೋಮಾದ ಪ್ರತ್ಯೇಕ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ನಿಖರವಾಗಿ ಎಣಿಸಲು ಕಷ್ಟವಾಯಿತು. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನವೊಂದರಲ್ಲಿ, ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಕ್ಕಾಗಿ ಶೋಲ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಪ್ರತಿ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಇರ್ ನ್ಯೂರಾನ್, ಸೋಮಾದ 40 μm ಒಳಗೆ ಅಳೆಯುವಾಗ ಸರಾಸರಿ ಒಂದು ಡೆಂಡ್ರೈಟ್ ಅನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ [43]. ಆದ್ದರಿಂದ, ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಐಆರ್ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಮಾಣವನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸಲು ಈ ಕೆಳಗಿನ ಮೂಲ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಅಭಿವೃದ್ಧಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ.
- (1) ಇಮೇಜಿಂಗ್ ಸಾಫ್ಟ್ವೇರ್ ಮತ್ತು 40 × ಆಬ್ಜೆಕ್ಟಿವ್ ಲೆನ್ಸ್ (2) ಬಳಸಿ ಕಂಪ್ಯೂಟರ್ ಪ್ರದರ್ಶನದಲ್ಲಿ GCL ನ ಚಿತ್ರವನ್ನು ಯೋಜಿಸಲಾಗಿದೆ. ಲೈವ್ ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ, ಜಿಸಿಎಲ್ ಮಧ್ಯದಲ್ಲಿ ಒಂದು ರೇಖೆಯ ವಿಭಾಗವನ್ನು (150 ± 0.1 μm) ಎಳೆಯಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 2) (3). ಫೋಕಲ್ ಆಳವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುವಾಗ, ರೇಖೆಯ ವಿಭಾಗವು ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಇರ್ ಡೆಂಡ್ರೈಟ್ಗಳನ್ನು ದಾಟಿದ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಎಣಿಸಲಾಗಿದೆ (ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ROI ಗಳು (ಡಾರ್ಸಲ್ DGsp, dDGsp; ಡಾರ್ಸಲ್ DGip, dDGip; ವೆಂಟ್ರಲ್ DGsp, vDGsp; ವೆಂಟ್ರಲ್ DGip, vDGip) FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಗೆ (4) ಅನುರೂಪವಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿ ROI ಯಲ್ಲಿ, ಪ್ರತಿ ವಿಭಾಗಕ್ಕೆ 5-2 ರೇಖೆಯ ಭಾಗಗಳನ್ನು ಎಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಮೌಸ್ಗೆ 3-2 ವಿಭಾಗಗಳಿಗಿಂತ ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಸರಾಸರಿ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. GCL ನ ದಪ್ಪವು ಸರಿಸುಮಾರು 3-60 μm ಆಗಿರುವುದರಿಂದ, ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾದ ನಿರ್ಬಂಧಿತ ಪ್ರದೇಶದ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಐಆರ್ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸುತ್ತದೆ.
3. ಪ್ರಯೋಗ 2. ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯಿಂದ ಪ್ರೇರಿತವಾದ FosB / osFosB ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ನ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ
3.1: ಪರ್ಫ್ಯೂಷನ್ ಮತ್ತು ಅಂಗಾಂಶ ಸಂಸ್ಕರಣೆ
ಪ್ರಯೋಗ 1 ನಲ್ಲಿ ಮೇಲಿನಂತೆ ಇಲಿಗಳ ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಸಮೂಹವನ್ನು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ. 4 ವಾರಗಳ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪದ ನಂತರ, ಆಳವಾದ ಅರಿವಳಿಕೆ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು ತಣ್ಣನೆಯ ಲವಣಯುಕ್ತವಾಗಿ ಸುಗಂಧಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ಅನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ected ೇದಿಸಿ ದ್ರವ ಸಾರಜನಕದೊಂದಿಗೆ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿ, -80 at C ನಲ್ಲಿ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರತಿ ಇಲಿಯ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಿಯನ್ನು RIPA ಬಫರ್ನಲ್ಲಿ ಏಕರೂಪಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು (150 mM NaCl, 25 mM Tris-HCl pH 7.6, 1% NP-40, 1% ಸೋಡಿಯಂ ಡಿಯೋಕ್ಸಿಕೋಲೇಟ್, 0.1% SDS, #8990, ಥರ್ಮೋ ಸೈಂಟಿಫೇಸ್ ಪ್ರೊಟೀಲ್, IL) ಪ್ರತಿರೋಧಕಗಳು (ಪೂರ್ಣಗೊಂಡ ಮಿನಿ, ರೋಚೆ, ಮ್ಯಾನ್ಹೇಮ್, ಜರ್ಮನಿ). 15 ° C ನಲ್ಲಿ 5000 rpm ನಲ್ಲಿ 4 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಲೈಸೇಟ್ಗಳನ್ನು ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಸೂಪರ್ನೇಟೆಂಟ್ಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು BCA ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಸ್ಸೇ ಕಿಟ್ (#23227, ಥರ್ಮೋ ಸೈಂಟಿಫಿಕ್, IL, USA) ನೊಂದಿಗೆ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.
3.2: ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್
30% ಪಾಲಿಯಾಕ್ರಿಲಾಮೈಡ್ ಜೆಲ್ನಲ್ಲಿ ಸಮಾನ ಪ್ರಮಾಣದ ಪ್ರೋಟೀನ್ (10 μg / ಲೇನ್) ಅನ್ನು ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫೊರೆಸ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು, ನಂತರ ಅದನ್ನು ಪಿವಿಡಿಎಫ್ ಮೆಂಬರೇನ್ಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು (ಇಮ್ಯೂನ್-ಬ್ಲಾಟ್, 0.2 μm, ಬಯೋ-ರಾಡ್, MD, USA). 1% BSA ಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ TBST (0.5 M NaCl, 20 mM Tris-HCl pH 7.5, 0.1% Tween-20) ನಲ್ಲಿ 3 h ಗಾಗಿ ಮೆಂಬರೇನ್ ಅನ್ನು ಪೂರ್ವಭಾವಿ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ನಾನ್ಸ್ಪೆಸಿಫಿಕ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ಬಂಧಿಸಲಾಗಿದೆ. ಮೆಂಬರೇನ್ ಅನ್ನು ಪ್ಯಾನ್-ಫಾಸ್ಬಿ ಆಂಟಿಬಾಡಿ (1: 1000) ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು, ಇದು ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೊಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿಗಾಗಿ ಮೇಲೆ ಬಳಸಲ್ಪಟ್ಟಿತು, ಇದು 3% BSA ಹೊಂದಿರುವ ಟಿಬಿಎಸ್ಟಿಯಲ್ಲಿ ಕರಗಿತು. ಟಿಬಿಎಸ್ಟಿ ಯೊಂದಿಗೆ ತೊಳೆಯುವ ನಂತರ, ಮೆಂಬರೇನ್ ಅನ್ನು ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ಎಚ್ಗಾಗಿ ಎಚ್ಆರ್ಪಿ-ಸಂಯೋಜಿತ ಆಂಟಿ-ಮೊಲ ಐಜಿಜಿ ಆಂಟಿಬಾಡಿ (ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್: ಟಿಬಿಎಸ್ಟಿಯಲ್ಲಿ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್, ನ್ಯಾಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್, ಜಿಇ ಹೆಲ್ತ್ಕೇರ್, ಬಕಿಂಗ್ಹ್ಯಾಮ್ಶೈರ್, ಯುಕೆ) ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. ಟಿಬಿಎಸ್ಟಿಯೊಂದಿಗೆ ತೊಳೆಯುವ ನಂತರ, ವರ್ಧಿತ ಕೆಮಿಲುಮಿನೆನ್ಸಿನ್ಸ್ (ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಲೈಟ್ನಿಂಗ್ ಪ್ಲಸ್-ಇಸಿಎಲ್, ಪರ್ಕಿನ್ ಎಲ್ಮರ್, ಎಮ್ಎ, ಯುಎಸ್ಎ) ಯೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡುವ ಮೂಲಕ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬ್ಯಾಂಡ್ಗಳನ್ನು ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಇಮೇಜ್ ಕ್ವಾಂಟ್ ಲಾಸ್ ಎಕ್ಸ್ನ್ಯೂಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮಿನಿ (ಜಿಇ ಹೆಲ್ತ್ಕೇರ್, ಬಕಿಂಗ್ಹ್ಯಾಮ್ಶೈರ್, ಯುಕೆ) ಬಳಸಿ ಸೆರೆಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು. ಮೆಂಬರೇನ್ ಅನ್ನು ಆಂಟಿ-ಗ್ಲೈಸೆರಾಲ್ಡಿಹೈಡ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್-ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಡಿಹೈಡ್ರೋಜಿನೇಸ್ (ಜಿಎಪಿಡಿಹೆಚ್) ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ (#1, 5000: ಟಿಬಿಎಸ್-ಟಿ, ಟ್ರೆವಿಜೆನ್, ಎಂಡಿ, ಯುಎಸ್ಎ) ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಲೋಡಿಂಗ್ ನಿಯಂತ್ರಣವಾಗಿ ಖಂಡಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬ್ಯಾಂಡ್ಗಳ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಇಮೇಜ್-ಜೆ ಬಳಸಿ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಜಿಎಪಿಡಿಎಚ್ ಮಟ್ಟಕ್ಕೆ ಸಾಮಾನ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು.
4: ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ
ಮೌಸ್ ದೇಹದ ತೂಕದಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಎರಡು-ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿತ-ಅಳತೆಗಳ ANOVA (ಗುಂಪು × ಸಮಯ) ಮೂಲಕ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವಿನ ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು ಜೋಡಿಯಾಗದ ಟಿ-ಪರೀಕ್ಷೆಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು (ಕಂಟ್ರೋಲ್ ವರ್ಸಸ್ ರನ್ನರ್). ಪಿಯರ್ಸನ್ರ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ (ಹಸ್ತಚಾಲಿತ ಎಣಿಕೆ ಮತ್ತು ಚಿತ್ರ ಮಿತಿ) ಅನ್ನು ಮೌಲ್ಯೀಕರಿಸಲು ಮತ್ತು FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಮಟ್ಟ ಮತ್ತು DG ಯಲ್ಲಿನ DCX ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯ ನಡುವಿನ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಡೇಟಾವನ್ನು ಸರಾಸರಿ ± SEM ಎಂದು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಪ್ರಾಮುಖ್ಯತೆಯ ಮಿತಿಯನ್ನು ನಿಗದಿಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ P <0.05.
ಫಲಿತಾಂಶಗಳು
1: 1 ಮತ್ತು 2 ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ ದೇಹದ ತೂಕ ಮತ್ತು ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ದೂರ
1 ಮತ್ತು 2 ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿನ ಕಂಟ್ರೋಲ್ ಮತ್ತು ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳ ದೇಹದ ತೂಕದಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಚಿತ್ರ 3. ದ್ವಿಮುಖ ಪುನರಾವರ್ತಿತ-ಕ್ರಮಗಳು ANOVA ಗಮನಾರ್ಹವಾದ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ (ಗುಂಪು × ಸಮಯ, F(4, 72) = 13.6, P <0.001) ಮತ್ತು ಗುಂಪಿನ ಮುಖ್ಯ ಪರಿಣಾಮ F(1, 18) = 6.07, P <0.05), ಇದು ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ದೇಹದ ತೂಕವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರತಿ ಪಂಜರಕ್ಕೆ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ದೂರವನ್ನು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಟೇಬಲ್ 1. ಪ್ರತಿ ಇಲಿಯ ನಿಖರವಾದ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಅಂತರವು ಅನಿಶ್ಚಿತವಾಗಿದ್ದರೂ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಒಟ್ಟಿಗೆ ಇರಿಸಲಾಗಿತ್ತು, ನಿಯಮಿತ ಅವಲೋಕನವು ಎಲ್ಲಾ ಇಲಿಗಳು ಆಗಾಗ್ಗೆ ಚಕ್ರ ಓಟವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತಿರುವುದನ್ನು ದೃ confirmed ಪಡಿಸಿತು. ಪ್ರಯೋಗ 2 ನಲ್ಲಿನ ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳು ಪ್ರಯೋಗ 1 ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು ಉದ್ದವಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ಪ್ರತಿ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿ ಸರಾಸರಿ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ದೂರ (m / day / cage) ಸ್ಥಿರವಾಗಿರುತ್ತದೆ.
2: ಇಮೇಜ್ ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣದ ಕ್ರಮಬದ್ಧಗೊಳಿಸುವಿಕೆ
ಹಸ್ತಚಾಲಿತ ಎಣಿಕೆಯ ಮೂಲಕ ಪಡೆದ (r = 0.941, ಚಿತ್ರದ ಮಿತಿ ಮತ್ತು FosB / osFosB-ir ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳ ಸಾಂದ್ರತೆಯಿಂದ ಪಡೆದ FosB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶದ ನಡುವೆ ಮಹತ್ವದ ಸಂಬಂಧವಿದೆ. P <00001, ಚಿತ್ರ 4).
3: ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ
ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿನ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಸ್ಟೈನಿಂಗ್ನ ಪ್ರತಿನಿಧಿ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಚಿತ್ರ 5. ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದ ಎಲ್ಲಾ ROI ಗಳಲ್ಲಿ, ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ (ಚಿತ್ರ 5, ಬಲ) ಕಂಟ್ರೋಲ್ ಇಲಿಗಳಿಗಿಂತ ಗುಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 5, ಕೇಂದ್ರ). ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ, ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ಡಾರ್ಸಲ್ (ಡಿಜಿಪಿಎಸ್: ಎರಡರಲ್ಲೂ FosB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. P <0.01; ಡಿಜಿಪ್: P <0.01; ಸಿಎ 1: P <0.05; ಸಿಎ 3: P <0.05) ಮತ್ತು ಕುಹರದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳು (ಡಿಜಿಎಸ್ಪಿ: P <0.01; ಡಿಜಿಪ್: P <0.05; ಸಿಎ 1: P <0.05; ಸಿಎ 3: P <0.05; ಚಿತ್ರ 6).
4: ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ
ಕಾರ್ಟಿಕಲ್ ROI ಗಳಲ್ಲಿನ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಸ್ಟೈನಿಂಗ್ನ ಪ್ರತಿನಿಧಿ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಇಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಚಿತ್ರ 7. ಪರಿಮಾಣಾತ್ಮಕ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯೊಂದಿಗೆ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರದೇಶ-ಅವಲಂಬಿತ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ 8). ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ, ಮೋಟಾರು ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ FosB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶವು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಿತ್ತು (P <0.05) ಮತ್ತು ಸೊಮಾಟೊಸೆನ್ಸರಿ ಬ್ಯಾರೆಲ್ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ (P <0.05), ಆದರೆ ದೃಶ್ಯ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿಲ್ಲ (P = 0.662) ಅಥವಾ ಘ್ರಾಣ ಬಲ್ಬ್ (P = 0.523). ಶ್ರವಣೇಂದ್ರಿಯ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ, FosB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶವು ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳ ಹೆಚ್ಚಳಕ್ಕೆ ಒಲವು ತೋರಿತು (P = 0.105).
5: ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್
ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್ ಇಮ್ಯುನೊಸ್ಟೈನಿಂಗ್ನ ಪ್ರತಿನಿಧಿ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಇಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ ಚಿತ್ರ 9. ಡಾರ್ಸಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ, ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್ ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ (ಚಿತ್ರ 9, ಬಲ) ನಿಯಂತ್ರಣ ಇಲಿಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಗುಣಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 9, ಎಡ). ಡಾರ್ಸಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ, ಕಂಟ್ರೋಲ್ ಮತ್ತು ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿನ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್ ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ ದುರ್ಬಲವಾಗಿತ್ತು. ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ, ಡಿಡಿಜಿಎಸ್ಪಿಯಲ್ಲಿ ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ (P <0.01) ಮತ್ತು ಡಿಡಿಜಿಪ್ (P <0.01; ಚಿತ್ರ 10). ಕುಹರದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ, ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯು ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವೆ ಯಾವುದೇ ಮಹತ್ವದ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿಲ್ಲ (vDGsp, P = 0.101; vDGip, P = 0.257; ಚಿತ್ರ 10).
6: FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ನಡುವಿನ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧ
FosB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶ ಮತ್ತು DCX ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯ ನಡುವೆ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು (ಚಿತ್ರ 11). ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಡೇಟಾ ಸೆಟ್ (ಉದಾ., ಕಂಟ್ರೋಲ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ ಡಾರ್ಸಲ್ ಡಿಜಿಎಸ್ಪಿ) ಕೇವಲ 5 ಜೋಡಿಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತದೆ, ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಮೊದಲು ಎಲ್ಲಾ 40 ಜೋಡಿಗಳೊಂದಿಗೆ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, FosB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶ ಮತ್ತು ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್ ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯ ನಡುವೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾದ ಸಂಬಂಧವಿದೆ (r = 0.885, P <0.0001). ಇದರ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ, ಡಾರ್ಸಲ್ ಡಿಜಿ (ಆರ್ = 0.762, P <0.05) ಮತ್ತು ಕುಹರದ ಡಿಜಿ (ಆರ್ = 0.816, P <0.01) ಅನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ.
7: ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯಿಂದ ಪ್ರೇರಿತವಾದ FosB / osFosB ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ನ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ
ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ನ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು fosB ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಜೀನ್ ಉತ್ಪನ್ನಗಳು, ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಇಲಿಗಳ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಿಯನ್ನು ಅದೇ ಪ್ಯಾನ್-ಫಾಸ್ಬಿ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು. 35-37 kDa ನ ಬಹು ಬ್ಯಾಂಡ್ಗಳು, ΔFosB ಯ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ಗಳನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ [44], ರನ್ನರ್ ವರ್ಸಸ್ ಕಂಟ್ರೋಲ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ 12, P <0.01). ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, 48 ಕೆಡಿಎ ಫಾಸ್ಬಿ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ ಎರಡೂ ಗುಂಪಿನಲ್ಲಿ ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಗಲಿಲ್ಲ. 25 kDa ಗಿಂತ ಮಸುಕಾಗಿ ಗೋಚರಿಸುವ ಮತ್ತೊಂದು ಬ್ಯಾಂಡ್ Δ2ΔFosB ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ (27 kDa) ಅನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತದೆ. 50 kDa ಮತ್ತು 37 kDa ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಎರಡು ಬ್ಯಾಂಡ್ಗಳು ಇದ್ದವು, ಅವುಗಳು ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಬಂಧನದ ಕಾರಣದಿಂದಾಗಿರಬಹುದು. ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಿದಾಗ, ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವಿನ ಈ-ಫಾಸ್ಬಿ ಅಲ್ಲದ ಬ್ಯಾಂಡ್ಗಳಲ್ಲಿ ಯಾವುದೇ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳು ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ (ಡೇಟಾ ತೋರಿಸಿಲ್ಲ).
ಚರ್ಚೆ
ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನವು ಮೊದಲು 1 ಅನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೋಕೆಮಿಕಲ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಮಾಡಿತು) ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆಯೇ; ಮತ್ತು 2) ಅದರ ಡಾರ್ಸೊ-ವೆಂಟ್ರಲ್ ಅಕ್ಷದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿದೆಯೇ.
ನಾಲ್ಕು ವಾರಗಳ ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಎಲ್ಲಾ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ (ಅಂದರೆ, ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಭಾಗಗಳ ಡಿಜಿ, ಸಿಎಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಸಿಎಎಕ್ಸ್ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳು) ಫಾಸ್ಬಿ / os ಫಾಸ್ಬಿ ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಿದೆ. 1 - 3kDa osFosB ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ ಪ್ರಮುಖವಾದುದು ಎಂದು ನಾವು ದೃ confirmed ಪಡಿಸಿದ್ದೇವೆ fosB ಜೀನ್ ಉತ್ಪನ್ನವು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಸಂಗ್ರಹಗೊಳ್ಳುತ್ತದೆ. ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ನಿಯಮಿತ ವ್ಯಾಯಾಮವು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಾದ್ಯಂತ osFosB ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಪ್ರಬಲ ಪ್ರಚೋದಕವಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಅದರ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ಒಂದು ಹೊಸ ಆಣ್ವಿಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವಾಗಿರಬಹುದು, ಇದರ ಮೂಲಕ ವ್ಯಾಯಾಮವು ವಿವಿಧ ರೀತಿಯ ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು / ಅಥವಾ ಕುಹರದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕಾರ್ಯಗಳ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ.
1: ಇಮೇಜ್ ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸುವ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮತ್ತು ಮಿತಿಗಳು
ಗುರಿ ಕೋಶಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಎಣಿಸಲು ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶದ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನವನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಲು ಇಮ್ಯುನೊಹಿಸ್ಟೋಕೆಮಿಕಲ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುವ ಇಮೇಜ್ ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡಿಂಗ್ ತಂತ್ರವನ್ನು ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಅಳವಡಿಸಲಾಗಿದೆ.15,45,46]. ಇಮೇಜ್ ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಹಸ್ತಚಾಲಿತ ಎಣಿಕೆಯ ಮೂಲಕ ಪ್ರಮಾಣೀಕರಿಸಲ್ಪಟ್ಟ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿ ಮಟ್ಟಗಳ ನಡುವಿನ ಮಹತ್ವದ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಯಿತು (ಚಿತ್ರ 4). ಆದಾಗ್ಯೂ, ಸಾಂದ್ರತೆ ಮತ್ತು ಅತಿಕ್ರಮಣವು ಹೆಚ್ಚು ದಟ್ಟವಾದ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ FosB / osFosB-ir ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಎಣಿಸುವುದನ್ನು ತಡೆಯುವುದರಿಂದ, ಪ್ರದರ್ಶಿತ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧವು FOSB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶಗಳು ಒಟ್ಟು ROI ಯ <~ 40% ಅನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸಿದಾಗ ಚಿತ್ರ ಮಿತಿ ವಿಧಾನದ ನಿಖರತೆಯನ್ನು ಮಾತ್ರ ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರದೇಶ. ಆದ್ದರಿಂದ, FOSB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶಗಳಿಗೆ> ಒಟ್ಟು ROI ಪ್ರದೇಶದ 40% ಗೆ ಎಚ್ಚರಿಕೆಯ ವ್ಯಾಖ್ಯಾನ ಅಗತ್ಯ.
ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ, ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳ ಡಿಜಿ ಯಲ್ಲಿ (ಚಿತ್ರ 4), ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯಿಂದ FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಹೆಚ್ಚು ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿತು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚಿನ FosB / osFosB-ir ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ಗಳು ಅತಿಕ್ರಮಿಸಲ್ಪಟ್ಟವು. ಈ ಪ್ರದೇಶಗಳಲ್ಲಿ, FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಹೆಚ್ಚಿದ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ಬಳಸಿದ ಪರಿಮಾಣೀಕರಣದ ವಿಧಾನವನ್ನು ಲೆಕ್ಕಿಸದೆ (ಇಮೇಜ್ ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡಿಂಗ್ ಅಥವಾ ಹಸ್ತಚಾಲಿತ ಎಣಿಕೆಯ) ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಮಟ್ಟವನ್ನು ದೊಡ್ಡದಾಗಿ ಅಂದಾಜು ಮಾಡಲು ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಕಡಿಮೆ ಅಂದಾಜು ಮಾಡುವ ಅಪಾಯದ ಹೊರತಾಗಿಯೂ, ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನವು ರನ್ನರ್ ಇಲಿಗಳ ಡಿಜಿ ಯಲ್ಲಿ FosB / osFosB-ir ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಯಶಸ್ವಿಯಾಗಿ ತೋರಿಸಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಬೇಕು. ಕ್ರಮಶಾಸ್ತ್ರೀಯ ಮಿತಿಗಳು ನಮ್ಮ ಆವಿಷ್ಕಾರಗಳಿಗೆ ಹೊಂದಾಣಿಕೆ ಮಾಡಿಕೊಳ್ಳುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಇದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಬದಲಾಗಿ, ಸಂಭಾವ್ಯ ಕಡಿಮೆ ಅಂದಾಜು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ ಎಂದು ಕಂಡುಹಿಡಿಯುವ ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ.
2: ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯಿಂದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನೊಳಗೆ osFosB ಯ ಏಕರೂಪದ ಇಂಡಕ್ಷನ್
ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ಅದರ ರೇಖಾಂಶದ ಅಕ್ಷದ ಉದ್ದಕ್ಕೂ ಅಂಗರಚನಾ ಮತ್ತು ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಇಳಿಜಾರುಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ [26], ಆದ್ದರಿಂದ ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನಕ್ಕಾಗಿ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಭಾಗಗಳಲ್ಲಿನ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಅಳತೆ ಮಾಡಲಾದ ಎಲ್ಲಾ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ROI ಗಳಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯು ಏಕರೂಪವಾಗಿ FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಡೇಟಾ ತೋರಿಸಿದೆ. FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯ ಈ ಏಕರೂಪದ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ವ್ಯವಸ್ಥಿತ ಚಯಾಪಚಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಂದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಉಂಟಾಗುವುದಿಲ್ಲ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಹೆಚ್ಚಳ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸುವುದು ಮುಖ್ಯ. ಟ್ರೆಡ್ಮಿಲ್ ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ತೀವ್ರವಾದ ಪಂದ್ಯವು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಸೆರೆಬ್ರಲ್ ರಕ್ತದ ಹರಿವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದ ಇತ್ತೀಚಿನ ಫಲಿತಾಂಶಗಳಿಂದ ಈ ಫಲಿತಾಂಶವನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಘ್ರಾಣ ಬಲ್ಬ್ನಲ್ಲಿ ಅಲ್ಲ [8]. ಇದಲ್ಲದೆ, ರೋಡ್ಸ್ ಮತ್ತು ಇತರರು. (2003) ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯ 7 ದಿನಗಳು ಡಿ-ಜಿ ಮತ್ತು CA2 / 3 ನಲ್ಲಿ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ (CA1 ಅನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಗಿಲ್ಲ) ಮತ್ತು ಸಂವೇದನಾ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಸಿ-ಫಾಸ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಪ್ರೇರೇಪಿಸಿತು ಎಂದು ತೋರಿಸಿಕೊಟ್ಟಿತು, ಆದರೆ ದೃಶ್ಯ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಅಲ್ಲ [47]. ಒಟ್ಟಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ಈ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿನ FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಏಕರೂಪದ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಪರಿಣಾಮವಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ಹಾಲೆ ಮತ್ತು ಇತರರು. ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಅನಿರೀಕ್ಷಿತ ಒತ್ತಡವು ಡಾರ್ಸಲ್ನಲ್ಲಿ FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ ಎಂದು ಇತ್ತೀಚೆಗೆ ವರದಿ ಮಾಡಿದೆ, ಆದರೆ ಇಲಿ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಡಿಜಿ, ವೆಂಟ್ರಲ್ನಲ್ಲಿ ಅಲ್ಲ [48]. ಹೆಚ್ಚಿನ ತನಿಖೆಯೊಂದಿಗೆ, ವ್ಯಾಯಾಮ ಅಥವಾ ಒತ್ತಡದಿಂದ ಹೊರಹೊಮ್ಮುವಂತಹ FosB / osFosB ಪ್ರಚೋದನೆಯ ವಿಭಿನ್ನ ಮಾದರಿಗಳು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಮೇಲೆ ಪ್ರಚೋದಕ-ಅವಲಂಬಿತ ಪರಿಣಾಮಗಳ ಬಗ್ಗೆ ನಿರಂತರ ಒಳನೋಟಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ.
ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ಯಾನ್-ಫಾಸ್ಬಿ ಪ್ರತಿಕಾಯವು ಫಾಸ್ಬಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಎಲ್ಲಾ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುತ್ತದೆ. ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ನಂತರ, ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯ ನಂತರ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿದ ಏಕೈಕ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ಗಳು osFosB (35-37 kDa) ನ ಮಾರ್ಪಡಿಸಿದ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ಗಳು, ಫಾಸ್ ಫ್ಯಾಮಿಲಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಲ್ಲಿನ ಏಕೈಕ ಸ್ಥಿರ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ಗಳು [11]. 35-37 kDa osFosB ಎಂಬುದು ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಒತ್ತಡದಿಂದ ಮುಂಭಾಗದ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಪ್ರಧಾನ ಫಾಸ್ ಕುಟುಂಬ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಎಂದು ನಿರೂಪಿಸಲು ಪ್ಯಾನ್-ಫಾಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಬಳಸುವ ಹಿಂದಿನ ಕೆಲಸಕ್ಕೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಈ ಶೋಧನೆ ಇದೆ [44]. ಆದ್ದರಿಂದ, ದೀರ್ಘಾವಧಿಯ ಚಾಲನೆಯಿಂದ ಇಲ್ಲಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯ ಹೆಚ್ಚಳವು FosB ಮಟ್ಟವನ್ನು ಪ್ರತಿಬಿಂಬಿಸುತ್ತದೆ.
ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನ ಆಣ್ವಿಕ ಮತ್ತು ರಚನಾತ್ಮಕ ಅಂಶಗಳ ಮೇಲೆ ವ್ಯಾಯಾಮದ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಿಣಾಮಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಕಡಿಮೆ ತಿಳಿದಿದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಹಲವಾರು ನಡವಳಿಕೆಯ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಕಾರ್ಯಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ಸುಧಾರಣೆಗಳಿಗೆ ಉತ್ತಮ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ. ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಕಲಿಕೆ ಮತ್ತು ಸ್ಮರಣೆಯನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ವ್ಯಾಯಾಮವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಗಿದೆ [34-38] ಮತ್ತು ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಮತ್ತು ಸಂದರ್ಭೋಚಿತ ಸಂಸ್ಕರಣೆಯು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಡಾರ್ಸಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ಅನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ [27,28]. ಇದಕ್ಕೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, ವ್ಯಾಯಾಮವು ಆಂಜಿಯೋಲೈಟಿಕ್ ಮತ್ತು ಖಿನ್ನತೆ-ಶಮನಕಾರಿ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತದೆ [24,25,38] ಮತ್ತು ಈ ಭಾವನಾತ್ಮಕ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ಕುಹರದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ [29,30]. ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಕಂಡುಬರುವ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯಿಂದ osFosB ಯ ಏಕರೂಪದ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ಇಡೀ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಾದ್ಯಂತ ಕೆಲವು ರೀತಿಯ ನ್ಯೂರೋಪ್ಲಾಸ್ಟಿಕ್ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಸಂಭವಿಸಿವೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ವ್ಯಾಯಾಮವು ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕಾರ್ಯಗಳ ಮೇಲೆ ಏಕೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಇದು ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ.
3: ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ನ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ
ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ ನಡುವಿನ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ನ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ವಿಘಟನೆಯು ಹೆಚ್ಚಿನ ಗಮನವನ್ನು ಪಡೆಯುತ್ತಿದೆ [49]. ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಐಆರ್ ಅಪಕ್ವವಾದ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ಲಾಭವನ್ನು ಪಡೆದುಕೊಳ್ಳುವುದು [43], ನಾವು ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಇರ್ ಡೆಂಡ್ರೈಟ್ಗಳ ನಡುವಿನ ers ೇದಕಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯನ್ನು ಮತ್ತು ಜಿಸಿಎಲ್ನ ಮಧ್ಯದಲ್ಲಿ ಎಳೆಯಲಾದ ರೇಖೆಯ ವಿಭಾಗವನ್ನು ಎಣಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಈ ಮಾಪನವು ಡಿಜಿ ಯಲ್ಲಿನ ಒಟ್ಟು ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಐಆರ್ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸಲಿಲ್ಲ, ಆದರೆ ಇದು ಫಾಸ್ಬಿ / os ಫಾಸ್ಬಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಡೇಟಾದೊಂದಿಗೆ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧದ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲು ಅಗತ್ಯವಾದ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪರಿಮಾಣವನ್ನು ಶಕ್ತಗೊಳಿಸಿತು (ಕೆಳಗೆ ನೋಡಿ). ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ಚಾಲನೆಯ ನಂತರ, ಡಾರ್ಸಲ್ನಲ್ಲಿ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಐಆರ್ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಹೆಚ್ಚಾಗಿದೆ, ಆದರೆ ವೆಂಟ್ರಲ್, ಡಿಜಿ ಅಲ್ಲ. ಡಿಜಿಯ ಕುಹರದ ಭಾಗಕ್ಕೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ವ್ಯಾಯಾಮವು ಡಾರ್ಸಲ್ನಲ್ಲಿ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಪ್ರಚೋದಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಇದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಸಂಘರ್ಷದ ಫಲಿತಾಂಶಗಳನ್ನು ವರದಿ ಮಾಡಿವೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಡಿಜಿ ಎರಡರಲ್ಲೂ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಿದೆ [50,51]. ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, ವೆಂಟ್ರಲ್ ಡಿಜಿಯಲ್ಲಿನ ಡಿಸಿಎಕ್ಸ್-ಐಆರ್ ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳ ಸಂಖ್ಯೆಯು ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತದೆ, ಆದರೂ ಸಣ್ಣ ಮಾದರಿ ಗಾತ್ರ (ಪ್ರತಿ ಗುಂಪಿಗೆ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಇಲಿಗಳು) ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವೆ ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯವಾಗಿ ಮಹತ್ವದ ವ್ಯತ್ಯಾಸವನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯುವ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸೀಮಿತಗೊಳಿಸಬಹುದು. ಆದ್ದರಿಂದ, ಸ್ವಯಂಪ್ರೇರಿತ ಚಕ್ರ ಚಾಲನೆಯು ಕುಹರದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ತಳ್ಳಿಹಾಕುವ ಸಾಧ್ಯತೆಯಿದೆ. ಅದರ ಮಲ್ಟಿಸ್ಟೆಪ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗೆ (ಕೋಶ ಪ್ರಸರಣ, ವ್ಯತ್ಯಾಸ, ವಲಸೆ ಮತ್ತು ಬದುಕುಳಿಯುವಿಕೆ) ಸಂಬಂಧಿಸಿದಂತೆ ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ನ ಪ್ರದೇಶ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಅರ್ಥಮಾಡಿಕೊಳ್ಳಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ವಿವರವಾದ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಅವಶ್ಯಕ.
4: ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲು ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ΔFosB ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪರಿಣಾಮಗಳು
ಅಂತಿಮವಾಗಿ, ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿನ ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ osFosB ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸುವ ಮೊದಲ ಹೆಜ್ಜೆಯಾಗಿ, ಡಾರ್ಸಲ್ ಮತ್ತು ವೆಂಟ್ರಲ್ ಡಿಜಿ ಎರಡರಲ್ಲೂ DCX-ir ಕ್ರಾಸಿಂಗ್ಗಳಿಗೆ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ನಾವು ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು ಅವುಗಳ ನಡುವೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾದ, ಸಕಾರಾತ್ಮಕ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ ಎರಡು ಅಸ್ಥಿರ. ΔFosB ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ನಿಖರವಾದ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಅನಿಶ್ಚಿತವಾಗಿದ್ದರೂ, ಇತ್ತೀಚಿನ ಅಧ್ಯಯನವು ಅದನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ fosB-ಒಂದು ಇಲಿಗಳು, ಇದರಲ್ಲಿ FosB, osFosB, ಮತ್ತು Δ2ΔFosB (ಎಲ್ಲ fosB ಉತ್ಪನ್ನಗಳು), ನರಕೋಶದ ಮೂಲಜನಕ ಕೋಶಗಳ ಪ್ರಸರಣ ಕಡಿಮೆಯಾಗುವುದು, ನವಜಾತ ನರಕೋಶಗಳ ಅಪಸ್ಥಾನೀಯ ವಲಸೆ ಮತ್ತು ಅಸಹಜ ಡಿಜಿ ರಚನೆಗಳು ಸೇರಿದಂತೆ ತಳದ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ನಲ್ಲಿನ ಕೊರತೆಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಲಾಗಿದೆ.20]. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಈ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ fosB(d / d) ಇಲಿಗಳು, ಇದರಲ್ಲಿ FosB ಕೊರತೆಯಿದೆ, ಆದರೆ butFosB / /2ΔFosB ಅಲ್ಲ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ರಲ್ಲಿ fosB-ನೂಲ್ ಇಲಿಗಳು, ಕೆಲವು ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್-ಸಂಬಂಧಿತ ವಂಶವಾಹಿಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ, ಸೇರಿದಂತೆ ವಿಜಿಎಫ್ (ವಿಜಿಎಫ್ ನರಗಳ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಅಂಶವು ಪ್ರಚೋದಿಸಲಾಗುವುದಿಲ್ಲ) ಮತ್ತು ಗಾಲ್ (ಗ್ಯಾಲನಿನ್ ಪ್ರಿಪ್ರೊಪೆಪ್ಟೈಡ್) ಅನ್ನು ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು [20]. ವಿಜಿಎಫ್ ಮತ್ತು ಜಿಎಎಲ್ ಸ್ರವಿಸುವ ಅಣುಗಳಾಗಿರುವುದರಿಂದ, ಭರವಸೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಒಂದು ಪ್ರಸ್ತಾಪವು osFosB ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳು ಆಟೊಕ್ರೈನ್ / ಪ್ಯಾರಾಕ್ರಿನ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮೂಲಕ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಬಹುದು ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸುತ್ತದೆ [20].
ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಚಾಲನೆಯಲ್ಲಿರುವ ಮೂಲಕ osFosB ಅನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸುವ ಪ್ರದೇಶವು ನರಜನಕ ಚಟುವಟಿಕೆ ಹೆಚ್ಚಿರುವ ಪ್ರದೇಶದೊಂದಿಗೆ ಅತಿಕ್ರಮಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದನ್ನು ಗಮನಿಸಬೇಕು. ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಕನಿಷ್ಠ ಚಟುವಟಿಕೆ-ಅವಲಂಬಿತವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಈ ಸಂಶೋಧನೆಯು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ನರಮಂಡಲದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯು ಕೇಂದ್ರ ನರಮಂಡಲದ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲು ಮತ್ತು ಸುಧಾರಿಸಲು ಪ್ರಮುಖವಾಗಿದೆ [9], ಮೆದುಳು-ಪಡೆದ ನ್ಯೂರೋಟ್ರೋಫಿಕ್ ಫ್ಯಾಕ್ಟರ್ (ಬಿಡಿಎನ್ಎಫ್) ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಬಿಡುಗಡೆ ಸೇರಿದಂತೆ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಮೂಲಕ [52,53], ರಕ್ತ-ಮಿದುಳಿನ ತಡೆಗೋಡೆ ಮೂಲಕ ಸೀರಮ್ ಇನ್ಸುಲಿನ್ ತರಹದ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಅಂಶ- 1 (IGF-1) ಅನ್ನು ತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವುದು [54,55], ಅಪೊಪ್ಟೋಸಿಸ್ ನಿಗ್ರಹ [56], ಮತ್ತು ಮೈಟೊಕಾಂಡ್ರಿಯದ ಚಲನಶೀಲತೆಯ ನಿಯಂತ್ರಣ [57]. ಆದ್ದರಿಂದ, ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನವು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ವ್ಯಾಯಾಮವು ಪುನರಾವರ್ತಿತ ನರಕೋಶ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಹೆಚ್ಚಿದ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿದೆ, ಇದು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಕೊಡುಗೆ ನೀಡುತ್ತದೆ, ಮೇಲೆ ವಿವರಿಸಿದ ಈ ಬಹು ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ಮೂಲಕ.
ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನವು ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಮತ್ತು ಡಿಜಿ ಯಲ್ಲಿನ FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯೊಂದಿಗಿನ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಮಾತ್ರ ನಿರ್ಣಯಿಸುತ್ತದೆ. ಆದಾಗ್ಯೂ, CA1 ಮತ್ತು CA3 ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ FosB / osFosB ಇಮ್ಯುನೊಆರೆಕ್ಟಿವಿಟಿಯನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸಲಾಯಿತು. ಈ ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪಾತ್ರಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಹೆಚ್ಚಿನ ತಿಳುವಳಿಕೆಯನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಅಗತ್ಯವಿದ್ದರೂ, ಹಿಂದಿನ ಸಾಹಿತ್ಯವು ಭರವಸೆಯ ಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ. ಗುವಾನ್ ಮತ್ತು ಇತರರು. (2011) CA5 ಅಥವಾ CA5 ಪಿರಮಿಡಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳಲ್ಲಿನ ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ 1 (Cdk3) ನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಸ್ಥಗಿತಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯು ಕ್ರಮವಾಗಿ ಮೆಮೊರಿ ಬಲವರ್ಧನೆ ಅಥವಾ ಮರುಪಡೆಯುವಿಕೆಗೆ ದುರ್ಬಲವಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ [58]. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, Cdk5 ಎಂಬುದು XFosB ಯ ಡೌನ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ [59] ಮತ್ತು ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ [60]. ಆದ್ದರಿಂದ, ವ್ಯಾಯಾಮ-ಪ್ರೇರಿತ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ CA5 ಮತ್ತು CA1 ಉಪಕ್ಷೇತ್ರಗಳಲ್ಲಿ Cdk3 ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವಲ್ಲಿ ತೊಡಗಬಹುದು.
ತೀರ್ಮಾನ
ತೀವ್ರವಾದ ವ್ಯಾಯಾಮವು ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ ತಕ್ಷಣದ ಆರಂಭಿಕ ಜೀನ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ತಿಳಿದಿದ್ದರೂ, ಪ್ರಸ್ತುತ ಅಧ್ಯಯನವು ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ನಿಯಮಿತ ವ್ಯಾಯಾಮವು ಇಡೀ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಸ್ನಲ್ಲಿ osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ ಎಂಬುದಕ್ಕೆ ಮೊದಲ ಸಾಕ್ಷ್ಯವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ. ನೇΔFosB ಯ ಏಕರೂಪದ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ವ್ಯಾಯಾಮವು ಅನೇಕ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಕಾರ್ಯಗಳನ್ನು ಸುಧಾರಿಸಲು ಸಮರ್ಥವಾದ -ಷಧೇತರ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪವಾಗಿದೆ ಎಂಬ ಪ್ರಸ್ತುತ ತಿಳುವಳಿಕೆಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತದೆ. FosB / osFosB ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ನಡುವಿನ ಮಹತ್ವದ ಪರಸ್ಪರ ಸಂಬಂಧದೊಂದಿಗೆ, ಈ ಡೇಟಾವು ಪ್ರಚೋದನಕಾರಿ ಮತ್ತು ನ್ಯೂರೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಸೇರಿದಂತೆ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಕ್ರಿಯೆಯ ಮೇಲೆ ವ್ಯಾಯಾಮದ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುವಲ್ಲಿ osFosB ಯ ಪಾತ್ರವನ್ನು ವಿವರಿಸುವ ಹೆಚ್ಚಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳ ಅಗತ್ಯವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.
ಹಣಕಾಸಿನ ಹೇಳಿಕೆ
ಉಲ್ಲೇಖಗಳು