ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ಗಳು ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಕ್ಸ್ ರೆಸೆಪ್ಟರ್ ಮತ್ತು ಅಟೆನ್ಯುವೇಟ್ಸ್ ಡೌನ್ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ (ಎಕ್ಸ್ನ್ಯುಎನ್ಎಕ್ಸ್)

ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು: ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. ಆಶ್ಚರ್ಯಕರವಾಗಿ, ಅನುವಾದ ಅಂಶ ಡೆಲ್ಟಾಫೊಸ್ಬ್ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಉತ್ಪಾದನೆಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ.

ಜಿಯಾಂಗ್ ಜೆ, ಪಾರ್ಕ್ ಯುಯು, ಕಿಮ್ ಡಿಕೆ, ಲೀ ಎಸ್, ಕ್ವಾಕ್ ವೈ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2013) PLoS ONE 8 (12): e84482. doi: 10.1371 / magazine.pone.0084482

ಅಮೂರ್ತ

ಡೋಪಮೈನ್ D2 ಗ್ರಾಹಕ (DRD2) ಒಂದು ಪ್ರಮುಖ ಗ್ರಾಹಕವಾಗಿದ್ದು, ಇದು ಡೋಪಮೈನ್-ಸಂಬಂಧಿತ ಮೆದುಳಿನ ಕಾರ್ಯಗಳಾದ ಮನಸ್ಥಿತಿ, ಪ್ರತಿಫಲ ಮತ್ತು ಭಾವನೆಯ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ 5 (Cdk5) ಎಂಬುದು ಪ್ರೋಲೈನ್-ನಿರ್ದೇಶಿತ ಸೆರೈನ್ / ಥ್ರೆಯೋನೈನ್ ಕೈನೇಸ್ ಆಗಿದೆ, ಇದರ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರತಿಫಲ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಸೂಚಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, DRD321 (D321i2) ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್‌ನಲ್ಲಿರುವ ಸೆರೈನ್ 2 ಶೇಷ (S3) Cdk5 ನ ಒಂದು ಹೊಸ ನಿಯಂತ್ರಕ ತಾಣವಾಗಿದೆ ಎಂದು ನಾವು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸಿದ್ದೇವೆ. D5i321 ನಲ್ಲಿನ S2 ನ Cdk3- ಅವಲಂಬಿತ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ ಪ್ರನಾಳೀಯ ಮತ್ತು ಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿ ವ್ಯವಸ್ಥೆಗಳು.

S321 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ DRD2 ನ ಅಗೋನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರಚೋದಿತ ಮೇಲ್ಮೈ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಿದೆ ಮತ್ತು DR ಪ್ರೋಟೀನ್ ಜೋಡಣೆಯನ್ನು DRD2 ಗೆ ಇಳಿಸಿದೆ ಎಂದು ನಾವು ಮತ್ತಷ್ಟು ಗಮನಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಇದಲ್ಲದೆ, ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಕಡಿಮೆಯಾಗುವುದರಿಂದ ಭಿನ್ನಲಿಂಗೀಯ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ಮತ್ತು ಪಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ನಾಕ್‌ out ಟ್ ಭ್ರೂಣಗಳಿಂದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ನರಕೋಶ ಸಂಸ್ಕೃತಿಗಳಲ್ಲಿ ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಮಾರ್ಗವು ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಿತು. ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು S5 ನ Cdk321- ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ DRD2 ಕಾರ್ಯವನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ, ಇದು ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್‌ಗೆ ಒಂದು ಹೊಸ ನಿಯಂತ್ರಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ.

ಅಂಕಿ

ಉಲ್ಲೇಖ: ಜಿಯಾಂಗ್ ಜೆ, ಪಾರ್ಕ್ ಯುಯು, ಕಿಮ್ ಡಿಕೆ, ಲೀ ಎಸ್, ಕ್ವಾಕ್ ವೈ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2013) Cdk5 ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್‌ಗಳು ಡೋಪಮೈನ್ D2 ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಮತ್ತು ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಗಮನಿಸುತ್ತದೆ. PLoS ONE 8 (12): e84482. doi: 10.1371 / magazine.pone.0084482

ಸಂಪಾದಕ: ಜೇಮ್ಸ್ ಪೋರ್ಟರ್, ಉತ್ತರ ಡಕೋಟ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯ, ಯುನೈಟೆಡ್ ಸ್ಟೇಟ್ಸ್ ಆಫ್ ಅಮೇರಿಕಾ

ಸ್ವೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ: ಮೇ 20, 2013; ಅಕ್ಸೆಪ್ಟೆಡ್: ನವೆಂಬರ್ 14, 2013; ಪ್ರಕಟಣೆ: ಡಿಸೆಂಬರ್ 31, 2013

ಕೃತಿಸ್ವಾಮ್ಯ: © 2013 ಜಿಯಾಂಗ್ ಮತ್ತು ಇತರರು. ಇದು ನಿಯಮಗಳ ಅಡಿಯಲ್ಲಿ ವಿತರಿಸಲಾದ ಮುಕ್ತ ಪ್ರವೇಶ ಲೇಖನವಾಗಿದೆ ಕ್ರಿಯೇಟಿವ್ ಕಾಮನ್ಸ್ ಅಟ್ರಿಬ್ಯೂಷನ್ ಪರವಾನಗಿ, ಯಾವುದೇ ಮಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಅನಿಯಂತ್ರಿತ ಬಳಕೆ, ವಿತರಣೆ, ಮತ್ತು ಸಂತಾನೋತ್ಪತ್ತಿಗೆ ಅವಕಾಶ ನೀಡುತ್ತದೆ, ಮೂಲ ಲೇಖಕ ಮತ್ತು ಮೂಲವನ್ನು ಸಲ್ಲುತ್ತದೆ.

ನಿಧಿ: ಈ ಕೆಲಸವನ್ನು ಕೊರಿಯನ್ ಸರ್ಕಾರದಿಂದ (ಎಂಎಸ್ಐಪಿ) ಅನುದಾನಗಳು (ಎನ್ಆರ್ಎಫ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಆರ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಎನ್ಆರ್ಎಫ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಆರ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್) ಬೆಂಬಲಿಸಿದೆ ಮತ್ತು ಕೊರಿಯಾದ ಎನ್ಆರ್ಎಫ್ (ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ MSIP (2012-1) ನ ಮೂಲ ಸಂಶೋಧನಾ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮ. ಎಸ್‌ಕೆಪಿ 2 ಮತ್ತು 2 ನ್ಯಾಷನಲ್ ಅಲೈಯನ್ಸ್ ಫಾರ್ ರಿಸರ್ಚ್ ಆನ್ ಸ್ಕಿಜೋಫ್ರೇನಿಯಾ ಮತ್ತು ಖಿನ್ನತೆ (NARSAD) ಯಂಗ್ ಇನ್ವೆಸ್ಟಿಗೇಟರ್ ಪ್ರಶಸ್ತಿಗಳನ್ನು ಪಡೆದಿದೆ. ಅಧ್ಯಯನ ವಿನ್ಯಾಸ, ದತ್ತಾಂಶ ಸಂಗ್ರಹಣೆ ಮತ್ತು ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ, ಪ್ರಕಟಿಸುವ ನಿರ್ಧಾರ ಅಥವಾ ಹಸ್ತಪ್ರತಿ ತಯಾರಿಕೆಯಲ್ಲಿ ನಿಧಿಗಳಿಗೆ ಯಾವುದೇ ಪಾತ್ರವಿರಲಿಲ್ಲ.

ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ಆಸಕ್ತಿಗಳು: ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ಆಸಕ್ತಿಗಳು ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿಲ್ಲ ಎಂದು ಲೇಖಕರು ಘೋಷಿಸಿದ್ದಾರೆ.

ಪರಿಚಯ

ಮೋಟಾರು ಸಮನ್ವಯ, ಮನಸ್ಥಿತಿ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿಫಲ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಸೇರಿದಂತೆ ವಿವಿಧ ಮೆದುಳಿನ ಕಾರ್ಯಗಳಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ತೊಡಗಿಸಿಕೊಂಡಿದೆ [1]. ಕಶೇರುಕಗಳಲ್ಲಿನ ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್‌ನ ಒಂದು ಪ್ರಮುಖ ಅಂಶವೆಂದರೆ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳು (ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳು), ಇದು ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಉಪವಿಭಾಗವನ್ನು ಆಯ್ದವಾಗಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಡೋಪಮಿನರ್ಜಿಕ್ ಇನ್ಪುಟ್ ಅನ್ನು ಮುಖ್ಯವಾಗಿ ವೆಂಟ್ರಲ್ ಟೆಗ್ಮೆಂಟಲ್ ಏರಿಯಾ (ವಿಟಿಎ) ಮತ್ತು ಸಬ್ಸ್ಟಾಂಟಿಯಾ ನಿಗ್ರಾ (ಎಸ್‌ಎನ್) [2]. ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳು ಜಿ ಪ್ರೋಟೀನ್-ಕಪಲ್ಡ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್‌ಗಳು (ಜಿಪಿಸಿಆರ್) ಏಳು ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಮೆಂಬ್ರೇನ್ ಡೊಮೇನ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊಂದಿವೆ ಮತ್ತು ಎರಡು ಉಪವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುತ್ತವೆ, ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್‌ನಲ್ಲಿ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುವ D1 ತರಹದ ಮತ್ತು D2 ತರಹದ ಗ್ರಾಹಕಗಳು [1]. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಡೋಪಮೈನ್ D1 ತರಹದ ಗ್ರಾಹಕಗಳು (D1, D5) G ಮೂಲಕ ಅಡೆನೈಲ್ ಸೈಕ್ಲೇಸ್ ಅನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ.s ಮತ್ತು CAMP ಯ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಡೋಪಮೈನ್ D2 ತರಹದ ಗ್ರಾಹಕಗಳು (D2, D3, D4) ಜಿ ಮೂಲಕ ಅಡೆನೈಲ್ ಸೈಕ್ಲೇಸ್ ಅನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆαi ಮತ್ತು CAMP ಯ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿ [1], [3].

ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳಲ್ಲಿ, ಸ್ಕಿಜೋಫ್ರೇನಿಯಾ ಮತ್ತು ಮಾದಕ ವ್ಯಸನ ಸೇರಿದಂತೆ ಅನೇಕ ಪ್ರಮುಖ ಮನೋವೈದ್ಯಕೀಯ ಅಸ್ವಸ್ಥತೆಗಳ ರೋಗಶಾಸ್ತ್ರದಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗ್ರಾಹಕ (ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್) ಅನ್ನು ಸೂಚಿಸಲಾಗಿದೆ. [4], ಅನೇಕ ಆಂಟಿ ಸೈಕೋಟಿಕ್ drugs ಷಧಿಗಳು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಭಾಗಶಃ ಗುರಿಯಾಗಿಸುತ್ತವೆ. DRD2 ಚಟುವಟಿಕೆಯು ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿನ ದುರುಪಯೋಗದ drugs ಷಧಿಗಳ ವರ್ತನೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳೊಂದಿಗೆ ಉತ್ತಮ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿದೆ ಎಂದು ತಿಳಿದಿದೆ [5]. ಖಿನ್ನತೆ-ಶಮನಕಾರಿಗಳು ಮತ್ತು ಮೂಡ್ ಸ್ಟೆಬಿಲೈಜರ್ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿತ್ವವನ್ನು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಜೀವಕೋಶದ ಮೇಲ್ಮೈ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಅಥವಾ ಪಿಕೆಎ, ಇಆರ್‌ಕೆ ಮತ್ತು ಜಿಎಸ್‌ಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸಿರುವ ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಇಂಟ್ರಾ ಸೆಲ್ಯುಲರ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್‌ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. [1], [4], [6]. ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ DRD2 ಗೆ ಈ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಪಾತ್ರಗಳ ಹೊರತಾಗಿಯೂ, DRD2 ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳಿಗೆ ವೈವಿಧ್ಯತೆ ಮತ್ತು ಸಂಕೀರ್ಣತೆಯನ್ನು ನೀಡುವ ವಿವರವಾದ ನಿಯಂತ್ರಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ಅರ್ಥವಾಗುವುದಿಲ್ಲ.

ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಉತ್ತಮ-ಶ್ರುತಿಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಅನೇಕ ಪೋಸ್ಟ್‌ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಲೇಷನ್ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳು ಒಳಗೊಂಡಿವೆ ಎಂದು ಪುರಾವೆಗಳ ಸಾಲುಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆರಂಭಿಕ ಫೋಟೋ-ಅಫಿನಿಟಿ ಲೇಬಲಿಂಗ್ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ವ್ಯಾಪಕ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಲೇಷನ್ ಬಹಿರಂಗವಾಯಿತು [7], ಮತ್ತು DRD2 ನೊಳಗಿನ ಡೈಸಲ್ಫೈಡ್ ಬಾಂಡ್ ರಚನೆಯನ್ನು ಲಿಗಂಡ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್‌ನ ಪ್ರಮುಖ ಮಾರ್ಪಾಡು ಎಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ [8]. ಇದಲ್ಲದೆ, DRD2 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಸೈಟ್‌ಗಳನ್ನು ಆರಂಭದಲ್ಲಿ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ ಪ್ರನಾಳೀಯ ರೇಡಿಯೊಐಸೋಟೋಪ್‌ಗಳೊಂದಿಗಿನ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ, ವಿವಿಧ ಕೈನೇಸ್‌ಗಳ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ವಿವಿಧ ನಿಯಂತ್ರಕ ಮಾರ್ಗಗಳಿಗೆ ಮಾರ್ಗಗಳನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ [9]. ವಾಸ್ತವವಾಗಿ, ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೈನೇಸ್ ಸಿ (ಪಿಕೆಸಿ) ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಕ್ಯಾಲ್ಸಿಯಂನ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ಸಜ್ಜುಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಸೈಟೋಸ್ಕೆಲಿಟಲ್ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಮಾರ್ಪಡಿಸುತ್ತದೆ. [10]. ಜಿಪಿಸಿಆರ್ ಕೈನೇಸ್ 2 (GRK2) ನಿಂದ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ DRD2 ನ ಅಗೋನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರೇರಿತ ಮರುಹೊಂದಿಸುವಿಕೆಯ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ [11].

ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ 5 (Cdk5) ಎಂಬುದು ಪ್ರೊಲೈನ್-ನಿರ್ದೇಶಿತ ಸೆರೈನ್ / ಥ್ರೆಯೋನೈನ್ ಕೈನೇಸ್ ಆಗಿದ್ದು, ಅದರ ಅಗತ್ಯ ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್‌ಗಳ ಮೆದುಳಿನ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯಿಂದ ಆದ್ಯತೆಯ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ, p35 ಮತ್ತು p39 [12]. ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ನರಕೋಶದ ವಲಸೆ ಮತ್ತು ಆಕ್ಸಾನ್ ಮಾರ್ಗದರ್ಶನ ಸೇರಿದಂತೆ ವಿವಿಧ ನರಕೋಶ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಶೂನ್ಯ ಇಲಿಗಳು ಕಾರ್ಟಿಕಲ್ ಲೇಯರಿಂಗ್ನಲ್ಲಿ ದೋಷಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ [13]. ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನಿಂದ WAVE1 ಮತ್ತು ಎಫೆಕ್ಸಿನ್‌ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ಬೆನ್ನುಮೂಳೆಯ ಮಾರ್ಫೋಜೆನೆಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಇತ್ತೀಚೆಗೆ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ [14]. ಇದಲ್ಲದೆ, ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಎನ್ಎಂಡಿಎ ಗ್ರಾಹಕ, ಎನ್ಆರ್ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಬಿ, ಮತ್ತು ಎನ್ಆರ್ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎ-ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಎನ್ಎಂಡಿಎ ಪ್ರವಾಹಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಸಹ ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. [15], [16]. Cdk5 ಮತ್ತು ಡೋಪಮೈನ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ನಡುವಿನ ನಿಕಟ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ಅನೇಕ ಸಾಕ್ಷ್ಯಗಳು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ ಎಂಬುದು ಗಮನಾರ್ಹ. Cdk5 ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ಗಳು ಟೈರೋಸಿನ್ ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲೇಸ್ (TH), ಅದರ ಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಹೀಗೆ ಡೋಪಮಿನರ್ಜಿಕ್ ಹೋಮಿಯೋಸ್ಟಾಸಿಸ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸುತ್ತದೆ [17]. ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ, ಡೋಪಮೈನ್ ಮತ್ತು ಸೈಕ್ಲಿಕ್-ಎಎಮ್‌ಪಿ ನಿಯಂತ್ರಿತ ಫಾಸ್ಫೊಪ್ರೊಟೀನ್-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಕೆಡಿ (ಡಿಎಆರ್ಪಿಪಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್) ನ ಟಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್‌ನಿಂದ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಆಗಿದ್ದರೆ, ಇದು ಪಿಕೆಎ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಪಿಕೆಎ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ವಿರೋಧಿಸುತ್ತದೆ [18]. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಪರೋಕ್ಷ ಅಗೋನಿಸ್ಟ್ ಕೊಕೇನ್ ಅನ್ನು ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ತೀವ್ರವಾಗಿ ನಿರ್ವಹಿಸಿದಾಗ, ಎಮ್ಆರ್ಎನ್ಎ ಮತ್ತು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಮಟ್ಟಗಳು ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತವೆ [19]. ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ, ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ drug ಷಧ-ಪ್ರೇರಿತ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ರೂಪಾಂತರಗಳಲ್ಲಿ ಭಾಗಿಯಾಗಿದೆ. ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ, ನಾವು DRD5 ಮತ್ತು Cdk2 ನ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತೇವೆ, ಅದು ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್‌ನಲ್ಲಿ Cdk5 ಪಾತ್ರವನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ವಿಸ್ತರಿಸುತ್ತದೆ.

ವಸ್ತುಗಳು ಮತ್ತು ವಿಧಾನಗಳು

ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು

DRD321 (D321i2) ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್‌ನ ಫಾಸ್ಫೋ-ಸೆರಿನ್ 2 (pS3) ಹೊಂದಿರುವ ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಮೊಲ-ವಿರೋಧಿ ಸೀರಮ್‌ಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು. ಫಾಸ್ಫೋ-ಪೆಪ್ಟೈಡ್, ಸಿಎನ್‌ಪಿಡಿಪಿಎಸ್‌ಪಿಎಕೆಪಿಇಕೆ (ಪೆಪ್ಟ್ರಾನ್) ಅನ್ನು ಸಂಬಂಧ ಶುದ್ಧೀಕರಣಕ್ಕಾಗಿ ಪೆಪ್ಟೈಡ್-ಸಂಯೋಜಿತ ಕಾಲಮ್ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಯಿತು (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್, ಪಿಯರ್ಸ್). ಆಂಟಿ-ಪಿಎಸ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ತಯಾರಕರ ಸೂಚನೆಯನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ ಅಫಿನಿಟಿ ಶುದ್ಧೀಕರಣ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಿಂದ ಪುಷ್ಟೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಫಾಸ್ಫೋ-ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಪಿಬಿಎಸ್‌ನಲ್ಲಿ 20401% ಸೋಡಿಯಂ ಅಜೈಡ್ ಮತ್ತು 321% ಜೆಲಾಟಿನ್ ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಗಿದೆ. Cdk0.1 / p0.1 ನ ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಇಮ್ಯುನೊಸೈಟೊಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿಗಾಗಿ ಆಂಟಿ-ಮೌಸ್ ವಿರೋಧಿ Cdk5 ಪ್ರತಿಕಾಯ (sc-249) ಮತ್ತು ಆಂಟಿ-ಮೊಲದ ವಿರೋಧಿ p35 ಪ್ರತಿಕಾಯ (sc-820) ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಆಂಟಿ-ಮೌಸ್ ಆಂಟಿ-ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ಆಂಟಿಬಾಡಿ (ಎಸ್‌ಸಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಅನ್ನು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ನಮ್ಎಕ್ಸ್-ಜಿಎಫ್‌ಪಿಯ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಶನ್ ಮತ್ತು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ಗಾಗಿ ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಆಂಟಿ-ಮೊಲ-ವಿರೋಧಿ ಫ್ಲಾಗ್ ಆಂಟಿಬಾಡಿ (sc-5), ಆಂಟಿ-ಮೊಲದ ವಿರೋಧಿ HA ಪ್ರತಿಕಾಯ (sc-35), ಮೌಸ್ ವಿರೋಧಿ GST ಪ್ರತಿಕಾಯ (sc-9996), ಮತ್ತು ಮೌಸ್ ವಿರೋಧಿ GAPDH ಪ್ರತಿಕಾಯ (sc- 2) ಅನ್ನು ಸಾಂತಾ ಕ್ರೂಜ್ ಜೈವಿಕ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನಗಳಿಂದ ಖರೀದಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಪ್ರಾಣಿಗಳು

ಪಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ನಾಕೌಟ್ ಮೌಸ್ ಜಪಾನ್‌ನ ರಿಕೆನ್ ಬ್ರೈನ್ ಸೈನ್ಸ್ ಇನ್‌ಸ್ಟಿಟ್ಯೂಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಡಾ. ಈ ಹಿಂದೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ 35′- GGTCTCCTCTTCTGTCAAGAAG, 5′-GCTCTGCTAGACACATACTGTAC ಮತ್ತು 5′- TCCATCT GCACGAGACTAGT [20]. ಐಸಿಆರ್ ಇಲಿಗಳು ಮತ್ತು ಸ್ಪ್ರಾಗ್ ಡಾವ್ಲಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಮೆದುಳಿನ ಲೈಸೇಟ್ ತಯಾರಿಕೆಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ಎಲ್ಲಾ ಪ್ರಾಣಿ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಪೊಹಾಂಗ್ ವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ತಂತ್ರಜ್ಞಾನ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯದ ಪ್ರಾಣಿ ಸಂರಕ್ಷಣೆ ಮತ್ತು ಬಳಕೆ ಸಮಿತಿಯು ಅನುಮೋದಿಸಿದೆ.

ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ರಚನೆಗಳು

EGFP-N2 ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ವೆಕ್ಟರ್‌ನಲ್ಲಿನ ಮಾನವ DRD1 ಉದ್ದದ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್ ಮತ್ತು DRF2 ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್ (212 - 373 ಅಮೈನೊ ಆಸಿಡ್ ಅವಶೇಷಗಳು 29 ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಅಮೈನೊ ಆಸಿಡ್ ಅವಶೇಷಗಳು ಸೇರಿದಂತೆ DRF2 ಉದ್ದ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್‌ಗೆ ವಿಶಿಷ್ಟವಾಗಿದೆ) pFLAG-CMV-2 ಪ್ಲಾಸ್ಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಬಳಸಲ್ಪಟ್ಟವು. ಹ್ಯೂಮನ್ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಪಿಸಿಎಂವಿ-ಎಚ್ಎ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ವೆಕ್ಟರ್ನಲ್ಲಿ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಪಿಸಿಡಿಎನ್ಎ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ಲಾಸ್ಮಿಡ್ ವೆಕ್ಟರ್ನಲ್ಲಿ ಮಾನವ ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. ಇಮ್ಯುನೊಸೈಟೊಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿ, ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಇಂಟರ್ನಲೈಸೇಶನ್ ಅಸ್ಸೇ, [35ಎಸ್] -ಜಿಟಿಪಿγಎಸ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇ, ರೇಡಿಯೊಲಿಗ್ಯಾಂಡ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇ ಮತ್ತು ಸಿಎಎಂಪಿ ಕಿಣ್ವ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇ.

ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ಕಿನಾಸೆ ಅಸ್ಸೇ

ಐಪಿ-ಲಿಂಕ್ಡ್ ಪ್ರನಾಳೀಯ ಕೈನೇಸ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವನ್ನು ಈ ಕೆಳಗಿನಂತೆ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಒಂದು ಸಂಪೂರ್ಣ ಮೌಸ್ ಮೆದುಳನ್ನು ಏಕರೂಪದ ಮೆದುಳಿನ ಲೈಸ್ ಪಡೆಯಲು 3 ಸ್ಟ್ರೋಕ್‌ಗಳಿಂದ 50 mL ಎರಿಥ್ರೋಸೈಟ್ಗಳ ಲೈಸಿಸ್ ಬಫರ್ (ELB) (8.0 mM ಟ್ರಿಸ್ (pH 250), 5 mM NaCl, 0.1 mM EDTA, 40% NP-20) ನಲ್ಲಿ ಲೈಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. . 30 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳನ್ನು ಮಂಜುಗಡ್ಡೆಯ ಮೇಲೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು, sonicated ಮತ್ತು 16,000 at ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ g 10 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ. ಸಕ್ರಿಯ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಪಡೆಯಲು ಸೂಪರ್ನಾಟೆಂಟ್ಗಳನ್ನು ಆಂಟಿ-ಮೊಲ-ವಿರೋಧಿ ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. Cdk35 / p5 ಸಂಕೀರ್ಣ ಮತ್ತು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಜಿಎಸ್ಟಿ ಸಮ್ಮಿಳನ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಅಡೆನೊಸಿನ್ 35′- ಟ್ರಿಪೊಸ್ಫೇಟ್, [γ-32P] (NEG-502H, PerkinElmer) ಮತ್ತು ಕೈನೇಸ್ ಬಫರ್ (30 mM HEPES (pH 7.2), 10 mM MgCl2, 0.2 mM DTT) ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ 1 h ಗಾಗಿ [18], [21]. ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ Cdk5 / p25 ಸಂಕೀರ್ಣ (14 - 516, ಮಿಲಿಪೋರ್) ಅನ್ನು ಸಹ ಬಳಸಲಾಯಿತು ಪ್ರನಾಳೀಯ ಮೇಲೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ ಕೈನೇಸ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ. 2 × ಮಾದರಿ ಲೋಡಿಂಗ್ ಬಫರ್ ಅನ್ನು ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮಿಶ್ರಣಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 100 at C ನಲ್ಲಿ ಕುದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಂತರ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು SDS-PAGE ಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಒಣಗಿದ ಜೆಲ್ ಅನ್ನು ಆಟೊರಾಡಿಯೋಗ್ರಫಿಯಿಂದ ನಿರ್ಣಯಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಲಿಕ್ವಿಡ್ ಕ್ರೊಮ್ಯಾಟೋಗ್ರಫಿ (ಎಲ್ಸಿ) -ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿ (ಎಂಎಸ್) / ಎಂಎಸ್ ಅನಾಲಿಸಿಸ್

ಐಪಿ-ಲಿಂಕ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ ಪುನರ್ಸಂಯೋಜಕ ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಎಲ್ಸಿ-ಎಂಎಸ್ / ಎಂಎಸ್ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಿದೆ ಪ್ರನಾಳೀಯ ಕೈನೇಸ್ ಅಸ್ಸೇ. ನಾವು ಎಕ್ಸ್ !! ಟಂಡೆಮ್ (ಆವೃತ್ತಿ ಡಿಸೆಂಬರ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್) ಬಳಸಿ ಎಲ್ಸಿ-ಎಂಎಸ್ / ಎಂಎಸ್ ಡೇಟಾದ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಪ್ರತಿ ರಾ ಡೇಟಾ ಫೈಲ್ ಅನ್ನು ಮೊದಲು ಟ್ರಾನ್ಸ್-ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ ಪೈಪ್‌ಲೈನ್ (ಟಿಪಿಪಿ; ಆವೃತ್ತಿ 01) ಬಳಸಿ mzXML ಗೆ ಪರಿವರ್ತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪರಿವರ್ತಿಸಲಾದ mzXML ಗಳಲ್ಲಿನ MS / MS ಸ್ಕ್ಯಾನ್‌ಗಳನ್ನು ನಂತರ X !! ಟಂಡೆಮ್ ಬಳಸಿ GST-D2008i4.3 ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಂತೆ ಯುನಿಪ್ರೊಟ್ ಮೌಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನುಕ್ರಮ ಡೇಟಾಬೇಸ್ (ಬಿಡುಗಡೆ 2010_07) ವಿರುದ್ಧ ಶೋಧನೆಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು. ಸಹಿಷ್ಣುತೆಯನ್ನು ಪೂರ್ವಗಾಮಿ ಅಯಾನುಗಳಿಗೆ 2 Da ಮತ್ತು ತುಣುಕು ಅಯಾನುಗಳಿಗೆ 3 Da ಗೆ ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ. ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್‌ಗಾಗಿ ಕಿಣ್ವದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಸಿಸ್ಟೀನ್‌ನ ಕಾರ್ಬಮಿಡೋಮೆಥೈಲೇಷನ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಡಾ), ಮೆಥಿಯೋನಿನ್ ಆಕ್ಸಿಡೀಕರಣ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಡಾ), ಶತಾವರಿಯ ಜಲವಿಚ್ is ೇದನೆ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಡಾ) ಮತ್ತು ಸೆರೈನ್‌ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಡಾ) ಗೆ ವೇರಿಯಬಲ್ ಮಾರ್ಪಾಡು ಆಯ್ಕೆಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು.

ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಶನ್

ಇಎಲ್ಬಿ ಲೈಸಿಸ್ ಬಫರ್‌ನಲ್ಲಿನ ಸೆಲ್ ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಶನ್ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಆಂಟಿ-ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳಿಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 3 h ಗೆ 4 at C ನಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. ಪ್ರೋಟೀನ್-ಎ ಅಗರೋಸ್ ಬಳಸಿ ಇಮ್ಯುನೊಕೊಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್‌ಗಳನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. 30 ° C ನಲ್ಲಿ 37 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಎಸ್‌ಡಿಎಸ್ ಸ್ಯಾಂಪಲ್ ಲೋಡಿಂಗ್ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಅವಕ್ಷೇಪಗಳನ್ನು ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು SDS-PAGE ಮತ್ತು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟ್‌ಗಳಿಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು.

ಜಿಎಸ್ಟಿ ಪುಲ್-ಡೌನ್ ಅಸ್ಸೇ

10 µg ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ GST ಮತ್ತು GST-D2i3 ಅನ್ನು 1.5 at C ನಲ್ಲಿ 4 h ಗಾಗಿ ಇಲಿ ಮೆದುಳಿನ ಲೈಸೇಟ್ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. 30 glL ಗ್ಲುಟಾಥಿಯೋನ್ (GSH) - ಸಂಯೋಜಿತ ಸೆಫರೋಸ್ 4B ಮಣಿಗಳು (17-0756-01, GE ಹೆಲ್ತ್‌ಕೇರ್) ಅನ್ನು ಲೈಸಿಸ್ ಬಫರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಮತೋಲನಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಹೆಚ್ಚುವರಿ 1 h ಗಾಗಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ. 2,000 at ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಣದಿಂದ ಮಣಿಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸಲಾಯಿತುg ಮತ್ತು ಲೈಸಿಸ್ ಬಫರ್ 4 ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ [22], [23]. ವಿರೋಧಿ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಆಂಟಿ-ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ನಿಂದ ಅವಕ್ಷೇಪಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ.

ಇಮ್ಯುನೊಸೈಟೊಕೆಮಿಸ್ಟ್ರಿ

ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ HEK 293 ಕೋಶಗಳು ಮತ್ತು ಕವರ್‌ಲಿಪ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳನ್ನು ಒಮ್ಮೆ ಫಾಸ್ಫೇಟ್ ಬಫರ್ಡ್ ಸಲೈನ್ (ಪಿಬಿಎಸ್) ನೊಂದಿಗೆ ತೊಳೆದು ತಣ್ಣನೆಯ 4% ಪ್ಯಾರಾಫಾರ್ಮಲ್ಡಿಹೈಡ್ / ಪಿಬಿಎಸ್‌ನಲ್ಲಿ 30 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಮುಳುಗಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸರಿಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ತಡೆಯುವ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ದುರ್ಬಲಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು (ಪಿಬಿಎಸ್‌ನಲ್ಲಿ 2% ಕುದುರೆ ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು 1% ಟ್ರಿಟಾನ್ X-100). ಅಲೆಕ್ಸಾಫ್ಲೂರ್- 647- ಸಂಯೋಜಿತ ಆಂಟಿ-ಮೌಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯ (A20990, ಇನ್ವಿಟ್ರೋಜನ್) ಮತ್ತು ಅಲೆಕ್ಸಾಫ್ಲೂರ್-568- ಸಂಯೋಜಿತ ಆಂಟಿ-ಮೊಲದ ಪ್ರತಿಕಾಯ (A11011, ಇನ್ವಿಟ್ರೋಜನ್) ಅನ್ನು ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಸ್ಟೇನಿಂಗ್ಗಾಗಿ ಹೂಚ್ಸ್ಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಕಾನ್ಫೋಕಲ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ (ಒಲಿಂಪಸ್, ಫ್ಲೂ ವ್ಯೂ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಮೂಲಕ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.

ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಇಂಟರ್ನಲೈಸೇಶನ್ ಅಸ್ಸೇ

ವರ್ಗಾವಣೆಯ ನಂತರ 24 h, ಕೋಶಗಳನ್ನು 1 min C ಗೆ 102 minM ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್ (Q30, ಸಿಗ್ಮಾ) ಮತ್ತು 90 min C ನಲ್ಲಿ 37 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು. 2 mL ಕೋಲ್ಡ್ ಪಿಬಿಎಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಪುನಃ ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಕ್ರಿಯೆಗೆ 200 alL ಆಲ್ಕೋಹಾಟ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ಕೆಳಗಿನ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳಲ್ಲಿ 3 h ಗಾಗಿ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ treat ಷಧಿ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು; 3 nM [3H] -ಸ್ಪಿರೊನ್ (NET-565, ಪರ್ಕಿನ್ ಎಲ್ಮರ್), 3 µM ​​ಸಲ್ಪಿರೈಡ್ (895, TOCRIS), 10 µM ​​ಹ್ಯಾಲೊಪೆರಿಡಾಲ್ (H1512, ಸಿಗ್ಮಾ). ಹೈಡ್ರೋಫೋಬಿಕ್ [3ಎಚ್] -ಸ್ಪಿಪೆರೋನ್ ಅನ್ನು ಒಟ್ಟು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದ ಗ್ರಾಹಕಗಳನ್ನು ಲೇಬಲ್ ಮಾಡಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು ಮತ್ತು ಮೆಂಬರೇನಸ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್-ಬೌಂಡ್ ಅನ್ನು ಬದಲಿಸಲು ಹೈಡ್ರೋಫಿಲಿಕ್ ಸಲ್ಪಿರೈಡ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು [3ಎಚ್] -ಸ್ಪಿಪೆರೋನ್ ಸಂಕೇತಗಳು. ಮೆಂಬ್ರೇನ್-ಸಂಬಂಧಿತ ಗ್ರಾಹಕ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಒಟ್ಟು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದ ಗ್ರಾಹಕ ಮೌಲ್ಯಗಳಿಂದ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಗ್ರಾಹಕ ಮೌಲ್ಯಗಳನ್ನು ಕಳೆಯುವುದರ ಮೂಲಕ ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಗಿದೆ. ಕೋಶಗಳನ್ನು ಜಿಎಫ್ / ಬಿ (ಮಿಲಿಪೋರ್) ಫಿಲ್ಟರ್‌ನಲ್ಲಿ ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ವಾಷಿಂಗ್ ಬಫರ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಎಂಎಂ ಟ್ರಿಸ್-ಎಚ್‌ಸಿಎಲ್ (ಪಿಹೆಚ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್), ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಎಂಎಂ ನ್ಯಾಕ್ಎಲ್) ನೊಂದಿಗೆ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಫಿಲ್ಟರ್‌ಗಳನ್ನು ಒಣಗಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಉಳಿದಿರುವ ವಿಕಿರಣಶೀಲತೆಯನ್ನು ದ್ರವ ಸಿಂಟಿಲೇಷನ್ ಕೌಂಟರ್ ಬಳಸಿ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ [24].

ಜೀವಕೋಶ ಪೊರೆಯ ತಯಾರಿ

ವರ್ಗಾವಣೆಯ ನಂತರ 100 mm ಸಂಸ್ಕೃತಿ-ಭಕ್ಷ್ಯಗಳಲ್ಲಿನ ಸಂಗಮ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಐಸ್-ಕೋಲ್ಡ್ ಪಿಬಿಎಸ್‌ನಿಂದ ತೊಳೆದು 1 mL HME ಬಫರ್ (25 mM HEPES (pH 7.5), 2 mM MgCl2, 1 mM EDTA). ಏಕರೂಪದ ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳನ್ನು 500 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 15 × g ನೊಂದಿಗೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಅತೀಂದ್ರಿಯಗಳನ್ನು 36,000 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 30 × g ನೊಂದಿಗೆ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎಚ್‌ಎಂಇ ಬಫರ್‌ನಲ್ಲಿ ಮರು ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸಿದ ಉಂಡೆಗಳನ್ನು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನಕ್ಕಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು.

[35ಎಸ್] -ಜಿಟಿಪಿγಎಸ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇ

ಕೋಶ ಪೊರೆಯ ಭಿನ್ನರಾಶಿಗಳನ್ನು ಅಸ್ಸೇ ಬಫರ್ (1 mM HEPES (pH 102), 25 mM MgCl ನಲ್ಲಿ 7.5 quM ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್ (Q1.5, ಸಿಗ್ಮಾ) ನೊಂದಿಗೆ ಮೊದಲೇ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು.2, 100 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 1 mM NaCl, 0.01 mM EDTA ಮತ್ತು 10 mM GDP). [35ಎಸ್] -ಜಿಟಿಪಿγS (NET-030H, PerkinElmer) ಅನ್ನು 3 inL ನಲ್ಲಿ 30 nM ನ ಅಂತಿಮ ಸಾಂದ್ರತೆಗೆ ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 90 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಮತ್ತಷ್ಟು ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. 170 iceL ಐಸ್-ಕೋಲ್ಡ್ ಬಫರ್ (10 mM ಟ್ರಿಸ್-ಎಚ್‌ಸಿಎಲ್ (pH 8.0), 100 mM NaCl, 10 mM MgCl2, ಮತ್ತು 0.1 mM GTP) ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಲು ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪೊರೆಗಳನ್ನು ಜಿಎಫ್ / ಬಿ ಫಿಲ್ಟರ್ (ಮಿಲಿಪೋರ್) ನಲ್ಲಿ ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ವಾಷಿಂಗ್ ಬಫರ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಎಂಎಂ ಟ್ರಿಸ್-ಎಚ್‌ಸಿಎಲ್ (ಪಿಹೆಚ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್), ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಎಂಎಂ ನ್ಯಾಕ್ಎಲ್) ನೊಂದಿಗೆ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಫಿಲ್ಟರ್‌ಗಳನ್ನು ಒಣಗಿಸಿ ವಿಕಿರಣಶೀಲತೆಯನ್ನು ಸಿಂಟಿಲೇಷನ್ ಕೌಂಟರ್ ಬಳಸಿ ಅಳೆಯಲಾಯಿತು [25], [26].

ರೇಡಿಯೊಲಿಗ್ಯಾಂಡ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇ

ಸಿದ್ಧಪಡಿಸಿದ ಜೀವಕೋಶ ಪೊರೆಗಳನ್ನು 0.01 nM ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು [3ಎಚ್] -ಸ್ಪಿರೋನ್ (NET-565, ಪರ್ಕಿನ್ ಎಲ್ಮರ್) ಮತ್ತು ಅಸ್ಸೇ ಬಫರ್‌ನಲ್ಲಿ 102 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್ (Q30, ಸಿಗ್ಮಾ) ಹೆಚ್ಚುತ್ತಿರುವ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು (25 mM HEPES (pH 7.5), 1.5 mM MgCl2, 100 mM NaCl, 1 mM EDTA). ಪೊರೆಗಳನ್ನು ಜಿಎಫ್ / ಬಿ ಫಿಲ್ಟರ್ (ಮಿಲಿಪೋರ್) ನಲ್ಲಿ ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ವಾಷಿಂಗ್ ಬಫರ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಎಂಎಂ ಟ್ರಿಸ್-ಎಚ್‌ಸಿಎಲ್ (ಪಿಹೆಚ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್), ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಎಂಎಂ ನ್ಯಾಕ್ಎಲ್) ನೊಂದಿಗೆ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಬಾರಿ ತೊಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಜಿಎಫ್ / ಸಿ ಫಿಲ್ಟರ್‌ಗಳ ಮೂಲಕ ತ್ವರಿತ ಶೋಧನೆಯಿಂದ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಕೊನೆಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ಉಳಿದಿರುವ ವಿಕಿರಣಶೀಲತೆಯನ್ನು ದ್ರವ ಸಿಂಟಿಲೇಷನ್ ಕೌಂಟರ್ ಬಳಸಿ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ [27]-[29].

cAMP ಕಿಣ್ವ ಇಮ್ಯುನೊಅಸ್ಸೇ

ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ HEK 293 ಕೋಶಗಳನ್ನು 10 h ಗಾಗಿ 6520 µM ​​ರೋಲಿಪ್ರಮ್ (R1, ಸಿಗ್ಮಾ) ನೊಂದಿಗೆ ಪೂರ್ವಭಾವಿಯಾಗಿ ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು ನಂತರ 0.1 forM ಫಾರ್ಸ್ಕೋಲಿನ್ (F6886, ಸಿಗ್ಮಾ) ನೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 102 min ಗಾಗಿ ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್ (Q30, ಸಿಗ್ಮಾ) ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳನ್ನು 10 h ಗಾಗಿ 1 µM ​​ರೋಲಿಪ್ರಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು, ಮತ್ತು ನಂತರ 1 h ಗಾಗಿ 1 µM ​​ಡೋಪಮೈನ್ [22]. ಸೆಲ್ ಲೈಸೇಟ್ ಗಳನ್ನು 0.1 M HCl ನೊಂದಿಗೆ ತಯಾರಿಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು ಮತ್ತು ತಯಾರಕರ ಸೂಚನೆಯನ್ನು ಅನುಸರಿಸಿ CAMP ಕಿಣ್ವ ಇಮ್ಯುನೊಆಸ್ಸೆ ಕಿಟ್ (ನೀಲಮಣಿ ಬಯೋಸೈನ್ಸ್) ನಿಂದ CAMP ಮಟ್ಟವನ್ನು ಕಂಡುಹಿಡಿಯಲಾಯಿತು.

ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್

ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಪ್ರದೇಶವನ್ನು ಮೌಸ್ ಭ್ರೂಣದ ಮೆದುಳಿನಿಂದ (E15) ಪ್ರತ್ಯೇಕಿಸಲಾಯಿತು. 11095% C ನಲ್ಲಿ 0.25% ಟ್ರಿಪ್ಸಿನ್ (T4549-100, ಸಿಗ್ಮಾ) ಮತ್ತು 0.1 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 6% DNase I ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಕನಿಷ್ಠ ಅಗತ್ಯ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ (MEM) (37, ಇನ್ವಿಟ್ರೋಜನ್) ವಿಭಜಿತ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಬೇರ್ಪಡಿಸಲಾಯಿತು. ಲೇಪನ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ (0.01 M HEPES (pH 7.4) ಮತ್ತು 10% (vol / vol) ಕುದುರೆ ಸೀರಮ್ (16050-122, GIBCO) ನೊಂದಿಗೆ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಮತ್ತೆ ಅಮಾನತುಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ. 7 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ನರಕೋಶಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು ಪ್ರನಾಳೀಯ (ಡಿಐವಿ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸಿಎಮ್‌ಪಿ ಕಿಣ್ವ ಇಮ್ಯುನೊಅಸೇಸ್‌ಗೆ ಅನ್ವಯಿಸುವ ಮೊದಲು ಬಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪೂರಕ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್, ಇನ್ವಿಟ್ರೋಜನ್) ನೊಂದಿಗೆ ಎಂಇಎಂನಲ್ಲಿ.

ಫಲಿತಾಂಶಗಳು

ಸಿಆರ್ಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ಗಳು ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್ನಲ್ಲಿ ಸೆರಿನ್ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರನಾಳೀಯ

ಕಾದಂಬರಿ Cdk5 ತಲಾಧಾರಗಳನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು, ನಾವು (S / T) PX (K / H / R) ಅನ್ನು Cdk5 ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ ಒಮ್ಮತದ ಅನುಕ್ರಮಗಳಾಗಿ ಬಳಸಿಕೊಂಡು ವ್ಯವಸ್ಥಿತ ಹುಡುಕಾಟವನ್ನು ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ [30] ಮತ್ತು DRD2 ಅನ್ನು ಅಭ್ಯರ್ಥಿ ತಲಾಧಾರವೆಂದು ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ. ಸೆರೈನ್ 321 ಸೇರಿದಂತೆ ಒಮ್ಮತದ ಅನುಕ್ರಮವು DRD2 (D2i3) ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್‌ನಲ್ಲಿದೆ, ಅಲ್ಲಿ ವಿವಿಧ ನಿಯಂತ್ರಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸಲಾಗಿದೆ [3], [10], [11]. ಈ ಅನುಕ್ರಮವನ್ನು ಕಶೇರುಕಗಳಲ್ಲಿನ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ವಿಕಸನೀಯವಾಗಿ ಸಂರಕ್ಷಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ಶೇಷದ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪ್ರಾಮುಖ್ಯತೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ (ಅಂಜೂರ. 1A).

ಥಂಬ್ನೇಲ್

ಚಿತ್ರ 1. DRD5 ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್‌ನಲ್ಲಿ Cdk321 ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್‌ಗಳು ಸೆರಿನ್ 2 ಇನ್ ವಿಟ್ರೊ.

(ಎ) ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಸಂರಕ್ಷಿತ ಪ್ರದೇಶಗಳನ್ನು ವಿವಿಧ ಜಾತಿಗಳಿಂದ (ಮಬ್ಬಾದ) ತೋರಿಸುವ ಅಮೈನೊ ಆಸಿಡ್ ಅನುಕ್ರಮ ಜೋಡಣೆ. ಸಂಭಾವ್ಯ Cdk2 ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಸೈಟ್ ಅನ್ನು ನಕ್ಷತ್ರ ಚಿಹ್ನೆಯಿಂದ ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. (ಬಿ) ಐಪಿ-ಲಿಂಕ್ಡ್ ಪ್ರನಾಳೀಯ ಪುನರ್ಸಂಯೋಜಕ ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ರೂಪಾಂತರಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಕೈನೇಸ್ ಅಸ್ಸೇ. ವಿರೋಧಿ ಪಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಶನ್‌ನಿಂದ ಮೌಸ್ ಮೆದುಳಿನ ಸಾರದಿಂದ ಪುಷ್ಟೀಕರಿಸಿದ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಪಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಕೈನೇಸ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳಿಗೆ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಅದೇ ಜೆಲ್‌ನ ಕೂಮಸ್ಸಿ ಅದ್ಭುತ ನೀಲಿ ಬಣ್ಣವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳ ಆಟೊರಾಡಿಯೋಗ್ರಾಫ್ ಅನ್ನು ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಬಾಣದ ಹೆಡ್ GST-D2i3 ಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾದ ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ತೆರೆದ ಬಾಣದ ಹೆಡ್ p2 ನಿಂದ ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. (ಸಿ) D3i5 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಪೆಪ್ಟೈಡ್ ತುಣುಕಿನ MS / MS ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರಮ್. ಸೈದ್ಧಾಂತಿಕ ವಿಘಟನೆಯ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ವರ್ಣಪಟಲದ ಕೆಳಗೆ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಎಲ್ಲಾ ತುಣುಕು ಅಯಾನುಗಳಲ್ಲಿ, ಪತ್ತೆಯಾದ ವೈ- ಮತ್ತು ಬಿ-ಅಯಾನುಗಳನ್ನು ವರ್ಣಪಟಲದಲ್ಲಿ ಸೂಚಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ದಿ ವೈ6 ಮತ್ತು y7 ಅಯಾನುಗಳು ಸೆರೈನ್ 321 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಬಲವಾಗಿ ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ. (ಡಿ) ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ GST-D5i25 ಮತ್ತು GST-D2i3 ರೂಪಾಂತರಿತ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ Cdk2 / GST-p3 ಸಂಕೀರ್ಣದೊಂದಿಗೆ ಕೈನೇಸ್ ಅಸ್ಸೇ. ಕೂಮಸ್ಸಿ ಅದ್ಭುತ ನೀಲಿ ಕಲೆಗಳ ಜೊತೆಗೆ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಆಟೊರಾಡಿಯೋಗ್ರಾಫ್‌ನಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಬಾಣದ ಹೆಡ್ ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಅನುಗುಣವಾದ ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ತೆರೆದ ಬಾಣದ ಹೆಡ್ ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನಿಂದ ವಿಕಿರಣಶೀಲ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

doi: 10.1371 / journal.pone.0084482.g001

Cdk5 ನ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ D2i3 ಗೆ ನಿರ್ಣಯಿಸಲು, ನಾವು IP- ಲಿಂಕ್ಡ್ ಅನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿದ್ದೇವೆ ಪ್ರನಾಳೀಯ ಮೌಸ್ ಮೆದುಳಿನ ಲೈಸೇಟ್ನಿಂದ ಪುಷ್ಟೀಕರಿಸಿದ ಸಕ್ರಿಯ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಕೈನೇಸ್ ಅಸ್ಸೇಸ್ ಅನ್ನು ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಪುನರ್ಸಂಯೋಜಕ ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ (ಅಮೈನೊ ಆಸಿಡ್ ಉಳಿಕೆಗಳು ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್) ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ತಲಾಧಾರಗಳಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ GST-D5i35 ಮತ್ತು GST-D35i2 S3A ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ನಾವು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಗಮನಿಸಿದ್ದೇವೆ, ಆದರೆ GST-D212i373 S2A (ಬಳಸಿ ಸಿಗ್ನಲ್ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆಅಂಜೂರ. 1B). GST-D321i2 ನಲ್ಲಿ ಸೆರಿನ್ 3 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ಪರಿಶೀಲಿಸಲು, ನಾವು IP- ಲಿಂಕ್ಡ್‌ನಿಂದ ಮಾದರಿಗಳ LC-MS / MS ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯನ್ನು ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ ಪ್ರನಾಳೀಯ LTQ XL ಮಾಸ್ ಸ್ಪೆಕ್ಟ್ರೋಮೆಟ್ರಿಯನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಕೈನೇಸ್ ಅಸ್ಸೇಸ್. ಸ್ಥಿರವಾಗಿ, ಫಾಸ್ಫೋ-ಸೆರಿನ್ 321 ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳ ದ್ರವ್ಯರಾಶಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾದ ಫಾಸ್ಫೋ-ಪೆಪ್ಟೈಡ್‌ಗಳನ್ನು ಮರುಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ (ಅಂಜೂರ. 1C). ಎಲ್ಸಿ-ಎಂಎಸ್ / ಎಂಎಸ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಡೇಟಾ-ಅವಲಂಬಿತ ಸ್ವಾಧೀನವು ಮಾದರಿಯಲ್ಲಿ ಹೇರಳವಾಗಿರುವ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಪತ್ತೆಹಚ್ಚುತ್ತದೆ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಿ [31], ಈ ಡೇಟಾವು ಸೆರಿನ್ 321 ಶೇಷವು D5i2 ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿನ Cdk3 ನ ಪ್ರಬಲ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ತಾಣವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. Cdk321 ನಿಂದ GST-D2i3 ನಲ್ಲಿ ಸೆರಿನ್ 5 ನ ನೇರ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಸಾಬೀತುಪಡಿಸಲು, ಪ್ರನಾಳೀಯ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಪುನರ್ಸಂಯೋಜಕ ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳೊಂದಿಗೆ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಕೈನೇಸ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. GST-D5i25 S2A (GST-D3i2) ನಲ್ಲಿ ಇಲ್ಲದಿರುವ ಗಮನಾರ್ಹ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಅನ್ನು ನಾವು ಗುರುತಿಸಿದ್ದೇವೆ.ಅಂಜೂರ. 1D). ಒಟ್ಟಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು D2i3 S321 ಶೇಷವು Cdk5- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ಗೆ ಆದ್ಯತೆಯ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ಗಳು ಸೆರಿನ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್

ಸೆರಿನ್ 321 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಗುರುತಿಸಲು, ನಾವು ಫಾಸ್ಫೋ-ಸೆರಿನ್ 321 (pS321) ಗಾಗಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಬೆಳೆಸಿದ್ದೇವೆ. ಐಪಿ-ಲಿಂಕ್ಡ್‌ನಿಂದ ಮಾದರಿಗಳು ಪ್ರನಾಳೀಯ ಆಂಟಿ-ಪಿಎಸ್ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ನಿಂದ ಕೈನೇಸ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. GST-D321i2 (ಅವಲಂಬಿಸಿರುವ ಕೈನೇಸ್ ಕ್ರಿಯೆಯಲ್ಲಿ ಬ್ಲಾಟ್‌ಗಳು ಒಂದು ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಬ್ಯಾಂಡ್ ಅನ್ನು ತೋರಿಸಿದರು (ಅಂಜೂರ. 2A). ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನಿಂದ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಸಿರಿನ್ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನ ಸಂಭಾವ್ಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಲು, ಡಿಎಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಜಿಎಫ್ಪಿ ಮತ್ತು ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ನ್ಯೂಮ್ಎಕ್ಸ್ ಎಸ್ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎ-ಜಿಎಫ್ಪಿ ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಹೆಕ್ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಕೋಶಗಳಿಂದ ಜಿಎಫ್ಪಿ ವಿರೋಧಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ಗಳು ಮತ್ತು ಎಚ್ಎ-ಸಿಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಬಳಸಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ ವಿರೋಧಿ pS321 ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳು. ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಅತಿಯಾದ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಲೇಷನ್ ಕಾರಣ ಎಂದು ತಿಳಿದಿರುವ ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ವಿರೋಧಿ ಪ್ರತಿಕಾಯದಿಂದ ವಿಶಿಷ್ಟವಾದ ಸ್ಮೀಯರ್ಡ್ ಬ್ಯಾಂಡ್ ಸಿಗ್ನಲ್‌ಗಳನ್ನು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ಉಪಸ್ಥಿತಿಯಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ಗಮನಿಸಬಹುದು, ಮತ್ತು ಪಿಎಸ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ವಿರೋಧಿ ಪ್ರತಿಕಾಯವು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಪಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಹ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯೊಂದಿಗೆ ಮಾತ್ರ ಕಂಡುಬರುತ್ತದೆ.ಅಂಜೂರ. 2B) [7]. Cdk321, D5i2 (FLAG-D3i2) ಮತ್ತು D3i2 (FLAG-D3i2 S3A) ನ ರೂಪಾಂತರಿತ ರೂಪದಿಂದ ಸೆರೈನ್ 321 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ಪರಿಶೀಲಿಸಲು. HA-Cdk2 ನೊಂದಿಗೆ ಅಥವಾ ಇಲ್ಲದೆ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದ FLAG-D3i2 ಮತ್ತು FLAG-D3i321 ಮತ್ತು HEK 5 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ p35 ಅನ್ನು SDS- ಜೆಲ್ ಮೊಬಿಲಿಟಿ ಶಿಫ್ಟ್ ಅಸ್ಸೇಯಿಂದ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. FLAG-D293i5 ಗಾಗಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾದ Cdk2- ಅವಲಂಬಿತ ಚಲನಶೀಲತೆಯ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸಲಾಗಿದೆ, ಆದರೆ FLAG-D3i2 S3A (ಅಂಜೂರ. 2C). ಅಗೋನಿಸ್ಟ್ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಮೇಲೆ ನಾವು ಸೆರ್ಕ್ಸ್ನ್ಯೂಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಸಹ ನಿರ್ಣಯಿಸಿದ್ದೇವೆ. DRD2-GFP ಮತ್ತು Cdk321 / p293 ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ HEK 2 ಕೋಶಗಳು ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ನಿಂದ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟವು, ಮತ್ತು ಜೀವಕೋಶದ ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳಿಂದ GFP ವಿರೋಧಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ಗಳನ್ನು ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ಮೂಲಕ GFP ವಿರೋಧಿ ಮತ್ತು pS5 ವಿರೋಧಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. Ser35 ನಲ್ಲಿನ DRD321 ನ Cdk5- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅಗೋನಿಸ್ಟ್ ಪ್ರಚೋದನೆಯಿಂದ ಪ್ರಭಾವಿತವಾಗುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ನಾವು ಕಂಡುಕೊಂಡಿದ್ದೇವೆ, ಇದು GRK- ಮತ್ತು PKC- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ಗಳಿಂದ ಭಿನ್ನವಾಗಿದೆ (ಅಂಜೂರ. 2D) [32], [33]. ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ, ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು Cdk5 ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಪರಿಸರದಲ್ಲಿ DRD321 ನ ಸೆರೈನ್ 2 ಶೇಷವನ್ನು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ ಮಾಡಬಹುದು ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

ಥಂಬ್ನೇಲ್

ಚಿತ್ರ 2. ಜೀವಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ಸ್ ಸೆರಿನ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್.

ಸೆರೈನ್ 5 ನ Cdk321- ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು pS321 ವಿರೋಧಿ ಪ್ರತಿಕಾಯವನ್ನು ಬಳಸಿ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. (ಎ) ಐಪಿ-ಲಿಂಕ್ಡ್‌ನಿಂದ ಮಾದರಿಗಳು ಪ್ರನಾಳೀಯ GST-D2i3 ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸುವ ಕೈನೇಸ್ ಮೌಲ್ಯಮಾಪನವನ್ನು ವೆಸ್ಟರ್ನ್ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ (WB) ಸೂಚಿಸಿದ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಬಾಣದ ಹೆಡ್‌ಗಳು GST-D2i3 ಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ. (ಬಿ) DRD2-GFP ಮತ್ತು DRD2 S321A-GFP ಅನ್ನು HA-Cdk5 ಮತ್ತು HEK 35 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ p293 ನೊಂದಿಗೆ ಅಥವಾ ಇಲ್ಲದೆ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ವಿರೋಧಿ ಮತ್ತು ಪಿಎಸ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ವಿರೋಧಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ವಿರೋಧಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಬ್ರಾಕೆಟ್ DRD321 ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ತೆರೆದ ಬಾಣದ ಹೆಡ್ GFP ವಿರೋಧಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ಗಳಿಂದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. '% ಇನ್ಪುಟ್' ಎನ್ನುವುದು ಐಪಿ ಕ್ರಿಯೆಯ ಒಟ್ಟು ಲೈಸೇಟ್ನ% ಪರಿಮಾಣವಾಗಿದೆ. ದುರ್ಬಲ ಅಂತರ್ವರ್ಧಕ Cdk2 ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ನಕ್ಷತ್ರಾಕಾರದ ಚುಕ್ಕೆಗಳಿಂದ ಸೂಚಿಸಲಾಗಿದೆ. (ಸಿ) ಜೆಲ್ ಮೊಬಿಲಿಟಿ ಶಿಫ್ಟ್ ಅಸ್ಸೇ. ಸೂಚಿಸಿದಂತೆ ವರ್ಗಾವಣೆಯಾದ HEK 5 ಕೋಶಗಳನ್ನು ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. (ಡಿ) ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ HEK 293 ಕೋಶಗಳನ್ನು ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ವಿರೋಧಿ ಮತ್ತು ಪಿಎಸ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ವಿರೋಧಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ಮೂಲಕ ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ವಿರೋಧಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಯಿತು. ತೆರೆದ ಬಾಣದ ಹೆಡ್ ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ವಿರೋಧಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್‌ಗಳಿಂದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

doi: 10.1371 / journal.pone.0084482.g002

Cdk5 / p35 ಕಾಂಪ್ಲೆಕ್ಸ್ ಮತ್ತು DRD2 ದೈಹಿಕವಾಗಿ ಸಂಯೋಜಿತವಾಗಿವೆ

Cdk5 / p35 ಸಂಕೀರ್ಣ ಮತ್ತು DRD2 ನಡುವಿನ ಸಂಭಾವ್ಯ ಭೌತಿಕ ಸಂವಹನವನ್ನು ನಾವು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ ಏಕೆಂದರೆ ಅನೇಕ Cdk5 ತಲಾಧಾರಗಳು Cdk5 / p35 ಸಂಕೀರ್ಣದೊಂದಿಗೆ ಭೌತಿಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧ ಹೊಂದಿವೆ ಎಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ [23], [34], [35]. ಮೊದಲಿಗೆ, ಜಿಎಸ್ಟಿ ಪುಲ್-ಡೌನ್ ಪ್ರಯೋಗವನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಪುನರ್ಸಂಯೋಜಕ ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅನ್ನು ಇಲಿ ಮೆದುಳಿನ ಲೈಸೇಟ್ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ಗಾಗಿ ಜಿಎಸ್ಟಿ ಪುಲ್-ಡೌನ್ ಅವಕ್ಷೇಪಗಳನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಯಿತು. ರಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ ಅಂಜೂರ. 3A, ಎಂಡೋಜೆನಸ್ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಪುಲ್-ಡೌನ್ ಅವಕ್ಷೇಪಗಳಲ್ಲಿ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ, ಇದು ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಂಕೀರ್ಣ (ಅಂಜೂರ. 3A). ಇದಲ್ಲದೆ, DRD5-GFP ಮತ್ತು Cdk35 / p293 (ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ HEK 2 ಸೆಲ್ ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳಿಂದ GFP ವಿರೋಧಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ HA-Cdk5 ಮತ್ತು p35 ಪತ್ತೆಯಾಗಿದೆ.ಅಂಜೂರ. 3B). ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ನಾವು ಇಮ್ಯುನೊಸೈಟೊಕೆಮಿಕಲ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳನ್ನು ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ ಮತ್ತು DRD2-GFP, HA-Cdk5 ಮತ್ತು p35 HEK 293 ಕೋಶಗಳ ಪೊರೆಯ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಸಹ-ಸ್ಥಳೀಕರಣ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತವೆ ಎಂದು ಗಮನಿಸಿದ್ದೇವೆ (ಅಂಜೂರ. 3C, ಮೇಲಿನ ಫಲಕಗಳು). ನರಕೋಶದ ಸಂದರ್ಭದಲ್ಲಿ DRD2 ಮತ್ತು Cdk5 / p35 ನ ಸಹ-ಸ್ಥಳೀಕರಣವನ್ನೂ ನಾವು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ. ಸ್ಥಿರವಾಗಿ, DRD2-GFP ಸಹ ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ (DIV5) ಅಂತರ್ವರ್ಧಕ Cdk35 ಮತ್ತು p7 ನೊಂದಿಗೆ ಗಮನಾರ್ಹವಾದ ಸಹ-ಸ್ಥಳೀಕರಣವನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ, ಇದು DRD2 ಮತ್ತು Cdk5 / p35 (ಅಂಜೂರ. 3C, ಕೆಳಗಿನ ಫಲಕಗಳು). ಫಲಿತಾಂಶಗಳು DRD2 ಮತ್ತು Cdk5 / p35 ಒಂದು ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರೂಪಿಸಬಹುದು ಮತ್ತು ಆದ್ದರಿಂದ, DRD2 ಎಂಬುದು Cdk5 ನ ಶಾರೀರಿಕ ತಲಾಧಾರ ಎಂಬ ಕಲ್ಪನೆಯನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸುತ್ತದೆ.

ಥಂಬ್ನೇಲ್

ಚಿತ್ರ 3. Cdk5 / p35 DRD2 ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಕೀರ್ಣವನ್ನು ರಚಿಸಬಹುದು.

(ಎ) ಇಲಿ ಮೆದುಳಿನ ಸಾರದೊಂದಿಗೆ ಶುದ್ಧೀಕರಿಸಿದ ಪುನರ್ಸಂಯೋಜಕ ಜಿಎಸ್ಟಿ-ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬಳಸಿ ಜಿಎಸ್ಟಿ ಪುಲ್-ಡೌನ್ ಅಸ್ಸೇ. ಜಿಎಸ್ಟಿ ಪುಲ್-ಡೌನ್ ಅವಕ್ಷೇಪಗಳನ್ನು ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಿಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು. 'ಮಣಿ' ಜಿಎಸ್ಟಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ಗಳಿಲ್ಲದೆ ಪುಲ್-ಡೌನ್ ಅವಕ್ಷೇಪವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. (ಬಿ) DRD2 ಮತ್ತು Cdk3 / p2 ಸಂಕೀರ್ಣದ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಶನ್. ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ ಜೀವಕೋಶಗಳಿಂದ ಲೈಸೇಟ್‌ಗಳಿಂದ ಆಂಟಿ-ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ಐಪಿ ಅನ್ನು ಪಾಶ್ಚಾತ್ಯ ಬ್ಲಾಟಿಂಗ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳಿಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು. ಬ್ರಾಕೆಟ್ DRD5 ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ತೆರೆದ ಬಾಣದ ಹೆಡ್ GFP ವಿರೋಧಿ ಇಮ್ಯುನೊಪ್ರೆಸಿಪಿಟೇಟ್ಗಳಿಂದ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಒಳಹರಿವುಗಳಿಗಾಗಿ ಅತಿಯಾದ ಬ್ಲಾಟ್ ಅನ್ನು ಸಹ ಬಲಭಾಗದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ. (ಸಿ) DRD35 ಮತ್ತು Cdk2 / p2 ನ ಇಮ್ಯುನೊಸೈಟೊಕೆಮಿಕಲ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗಳು. DRD5-GFP ಮತ್ತು Cdk35 / p293 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ HEK 2 ಕೋಶಗಳನ್ನು Cdk5 ವಿರೋಧಿ ಮತ್ತು p35 ವಿರೋಧಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ (ಮೇಲಿನ ಫಲಕಗಳು) ಕಲೆ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. DRD5-GFP ಅನ್ನು ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಮಾತ್ರ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು Cdk35 ವಿರೋಧಿ ಮತ್ತು p2 ವಿರೋಧಿ ಪ್ರತಿಕಾಯಗಳೊಂದಿಗೆ (ಕೆಳ ಫಲಕಗಳು) ಕಲೆ ಹಾಕಲಾಗಿದೆ. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಸ್ಟೇನಿಂಗ್ಗಾಗಿ ಹೂಚ್ಸ್ಟ್ ಅನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ಸ್ಕೇಲ್ ಬಾರ್ 5 ism ಆಗಿದೆ. ಎಲ್ಲಾ ಚಿತ್ರಗಳನ್ನು ಕಾನ್ಫೋಕಲ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ (ಒಲಿಂಪಸ್, ಫ್ಲೂ ವ್ಯೂ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಬಳಸಿ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ.

doi: 10.1371 / journal.pone.0084482.g003

ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸುತ್ತದೆ

ಜಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಜೋಡಣೆ, ಗ್ರಾಹಕ ಆಂತರಿಕೀಕರಣ, ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಸ್ಥಳೀಕರಣ ಮತ್ತು ಮಾಡ್ಯುಲೇಟರ್ ಪ್ರೋಟೀನ್‌ಗಳೊಂದಿಗಿನ ಒಡನಾಟದಂತಹ ಜಿಪಿಸಿಆರ್‌ಗಳ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಮಾಡ್ಯೂಲ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ವರದಿಯಾಗಿದೆ. [9], [11], [24]. ಒಂದುಗೋನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರೇರಿತ ಗ್ರಾಹಕ ಆಂತರಿಕೀಕರಣವು ಸಿಗ್ನಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಷನ್‌ನ ನಿರ್ಣಾಯಕ ನಿಯಂತ್ರಕ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿದೆ. ನಾವು DRD5 ಆಂತರಿಕೀಕರಣದ Cdk2- ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಮಾಡ್ಯುಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ. ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಅಥವಾ ಇಲ್ಲದೆಯೇ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಜಿಎಫ್ಪಿ ಮತ್ತು ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಎಸ್ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎ-ಜಿಎಫ್ಪಿ ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಹೆಕ್ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಕೋಶಗಳು ಅಗೋನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರಚೋದಿತ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಆಂತರಿಕೀಕರಣವನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸಲು ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಕ್ವಿನ್ಪಿರೋಲ್ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು.ಅಂಜೂರ. 4A). [3ಎಚ್] -ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಕೋಶಗಳ ಸ್ಪೈರೋನ್ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ನಿಮಿಷದ ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ನಿಮಿಷದಲ್ಲಿ ಮರುಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ಕುತೂಹಲಕಾರಿಯಾಗಿ, [3H] -DRD2-GFP ಮತ್ತು Cdk5 / p35 ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೊಳಿಸುವ ಕೋಶಗಳ ಸ್ಪೈರೋನ್ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು 30 ನಿಮಿಷ ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಆದರೆ 90 ನಿಮಿಷದಲ್ಲಿ ಚೇತರಿಸಿಕೊಳ್ಳಲಾಗಿಲ್ಲ (ಅಂಜೂರ. 4A, ಎರಡನೇ ವಿಭಾಗ). ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, [3ಎಚ್] -ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಎಸ್ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎ-ಜಿಎಫ್ಪಿ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೊಳಿಸುವ ಕೋಶಗಳ ಎಕ್ಸ್‌ಪಿಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ನಿಮಿಷದಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆಯಾಯಿತು ಮತ್ತು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನ ಸಹ-ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಲೆಕ್ಕಿಸದೆ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ನಿಮಿಷದಲ್ಲಿ ಮರುಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ಹಿಂದಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು ಆಂತರಿಕ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಅಗೊನಿಸ್ಟ್ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಮೇಲೆ ಪ್ಲಾಸ್ಮಾ ಮೆಂಬರೇನ್‌ಗೆ ಮರುಬಳಕೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ [11]. ಟಿಅಗೋನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರೇರಿತ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಆಂತರಿಕೀಕರಣದ ನಂತರ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಮರುಹೊಂದಿಸುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರುತ್ತದೆ.

ಥಂಬ್ನೇಲ್

ಚಿತ್ರ 4. Cdk5- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ DRD2 ಮೇಲ್ಮೈ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಗಮನಿಸುತ್ತದೆ.

(ಎ) DRD2 ಮೇಲ್ಮೈ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ [3ಎಚ್] -ಸ್ಪಿಪೆರೋನ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇ. ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ HEK293 ಕೋಶಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸಿದ ಸಮಯಕ್ಕೆ 1 quM ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಚೋದಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಕೊಯ್ಲು ಮಾಡಲಾಯಿತು, ನಂತರ 3 nM [3ಎಚ್] -ಸ್ಪಿಪೆರೋನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆ 3 ಗಂ. ವಿಕಿರಣಶೀಲತೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಮೇಲ್ಮೈ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಲೆಕ್ಕಹಾಕಲಾಯಿತು. ದೋಷ ಬಾರ್‌ಗಳು ಸರಾಸರಿ ± SE ಅನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ (n = 8; * p <0.05, ** p <0.01; ಡನೆಟ್ ಪೋಸ್ಟ್ ಹಾಕ್ ಪರೀಕ್ಷೆಯೊಂದಿಗೆ ಏಕಮುಖ ANOVA: ಎಲ್ಲಾ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಹೋಲಿಸಿ ವರ್ಸಸ್ ಕಂಟ್ರೋಲ್ ಕಾಲಮ್). (ಬಿ) [35ಎಸ್] -ಜಿಟಿಪಿγಎಸ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇ. ಸೂಚಿಸಿದಂತೆ ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ ಜೀವಕೋಶಗಳಿಂದ ಜೀವಕೋಶ ಪೊರೆಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು. ಮೆಂಬರೇನ್ ಸಿದ್ಧತೆಗಳನ್ನು 1 quM ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಂತರ 3 nM [35ಎಸ್] -ಜಿಟಿಪಿγ90 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಎಸ್. ದೋಷ ಪಟ್ಟಿಗಳು ಸರಾಸರಿ ± SE ಅನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ (n = 8; * p <0.05, ** p <0.01, *** p <0.001; ಬಾನ್ಫೆರೋನಿ ನಂತರದ ಪರೀಕ್ಷೆಯೊಂದಿಗೆ ಏಕಮುಖ ANOVA: ಎಲ್ಲಾ ಜೋಡಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು ಹೋಲಿಕೆ ಮಾಡಿ). (ಸಿ) ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್-ಸ್ಪರ್ಧಿಸುವ [3ಎಚ್] -ಸ್ಪಿಪೆರೋನ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇ. ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ ಜೀವಕೋಶಗಳಿಂದ ಪೊರೆಯ ಸಿದ್ಧತೆಗಳನ್ನು 0.01 nM ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು [3ಎಚ್] -ಸ್ಪಿರೊನ್ ಮತ್ತು ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ನ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು 30 ನಿಮಿಷ ಹೆಚ್ಚಿಸುವುದು. ರೇಖಾತ್ಮಕವಲ್ಲದ ಹಿಂಜರಿಕೆಯನ್ನು ಗ್ರಾಫ್‌ಪ್ಯಾಡ್‌ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ದೋಷ ಬಾರ್‌ಗಳು ಸರಾಸರಿ ± SE (n = 3) ಅನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ. (ಡಿ) ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ HEK 293 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ CAMP ಕಿಣ್ವ ಇಮ್ಯುನೊಅಸೇಸ್. ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ ಕೋಶಗಳನ್ನು 10 ಗಂಗೆ 1 µM ರೋಲಿಪ್ರಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪೂರ್ವಭಾವಿಯಾಗಿ ಸಂಸ್ಕರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ತರುವಾಯ 0.1 µM ಫೋರ್‌ಕೋಲಿನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಹ-ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 30 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ನ ಸಾಂದ್ರತೆಯನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುತ್ತದೆ. ರೇಖಾತ್ಮಕವಲ್ಲದ ಹಿಂಜರಿಕೆಯನ್ನು ಗ್ರಾಫ್‌ಪ್ಯಾಡ್‌ನಿಂದ ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ದೋಷ ಪಟ್ಟಿಗಳು ಸರಾಸರಿ ± SE ಅನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆ (n = 4; ** p <0.01; ಎರಡು ಬಾಲದ t-ಟೆಸ್ಟ್‌ಗಳು). (ಇ) ಕಾಡು ಪ್ರಕಾರದಿಂದ ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಪಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ನಾಕೌಟ್ ಭ್ರೂಣಗಳು (ಡಿಐವಿ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಅನ್ನು ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಎಚ್‌ಗಾಗಿ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ರೋಲಿಪ್ರಮ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಂತರ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಎಚ್‌ಗೆ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಡೋಪಾಮೈನ್ ಅನ್ನು ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು. ದೋಷ ಬಾರ್‌ಗಳು ಸರಾಸರಿ ± SE (n = 35; ** ಅನ್ನು ಪ್ರತಿನಿಧಿಸುತ್ತವೆp<0.01; ಎರಡು ಬಾಲದ t-ಟೆಸ್ಟ್‌ಗಳು).

doi: 10.1371 / journal.pone.0084482.g004

ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಗೆ ಅಗೋನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರಚೋದಿತ ಜಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಜೋಡಣೆಯ ಸಂಭಾವ್ಯ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ನಾವು ಮತ್ತಷ್ಟು ಮೌಲ್ಯಮಾಪನ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ [35ಎಸ್] -ಜಿಟಿಪಿγಎಸ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇ [25], [26]. ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ / ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಅಥವಾ ಇಲ್ಲದೆಯೇ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಜಿಎಫ್ಪಿ ಮತ್ತು ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಕ್ಸ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎ-ಜಿಎಫ್ಪಿ ಅನ್ನು ಹೆಕ್ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ. 2 µM ​​ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪೊರೆಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಉತ್ತೇಜಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಮತ್ತಷ್ಟು ಅನುಮತಿಸಲಾಗಿದೆ [35ಎಸ್] -ಜಿಟಿಪಿγಎಸ್ ಸಂಯೋಜನೆ. DRD2-GFP ಮತ್ತು Cdk5 / p35 ಜೀವಕೋಶ ಪೊರೆಯನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವುದು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ದುರ್ಬಲಗೊಂಡಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ [35ಎಸ್] -ಜಿಟಿಪಿγಎಲ್ಲಾ ಇತರ ಜೀವಕೋಶ ಪೊರೆಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಎಸ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ (ಅಂಜೂರ. 4B). ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಅಗೊನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರಚೋದಿತ ಜಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಬಂಧವನ್ನು ಕಡಿಮೆ-ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

ಹೆಚ್ಚುವರಿಯಾಗಿ, ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್-ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ [3ಎಚ್] -ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಮೂಲಕ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಅಗೊನಿಸ್ಟ್-ಅಫಿನಿಟಿಯಲ್ಲಿನ ಯಾವುದೇ ಸಂಭಾವ್ಯ ಬದಲಾವಣೆಯನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲು -ಸ್ಪಿಪೆರೋನ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಅಸ್ಸೇಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು. ಸ್ಪರ್ಧಾತ್ಮಕ ಬಂಧಕ [3ಎಚ್] -ಸ್ವಿಪೆರೋನ್ ಅನ್ನು ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ನ ಸಾಂದ್ರತೆಯ ವರ್ಗಾವಣೆಯಿಂದ ಪೊರೆಯ ತಯಾರಿಕೆಗೆ ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಮೂಲಕ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ. ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್ ಮತ್ತು [3H]-DRD2-GFP ಮತ್ತು DRD2 S321A-GFP ನಲ್ಲಿನ ಸ್ಪಿಪೆರೋನ್ ಇದೇ ರೀತಿಯ ಲಾಗ್‌ಕೆ ಮಾಡಿದೆi ಮೌಲ್ಯಗಳು (DRD9.789-GFP ಗಾಗಿ −2; DRD9.691 S2A-GFP ಗಾಗಿ −321), DRD2 ಗೆ ಲಿಗ್ಯಾಂಡ್‌ನ ಸಂಬಂಧವು DRD5 ನಲ್ಲಿ Cdk2- ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ನಿಂದ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.ಅಂಜೂರ. 4C).

Cdk5- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ DRD2-cAMP ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಹಾದಿಯನ್ನು ಡೌನ್-ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ

ಮುಂದೆ, Cdk2 ನಿಂದ DRD5 ನ ಮಾರ್ಪಾಡು ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಮಾರ್ಗಗಳ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆಯೆ ಎಂದು ನಾವು ತನಿಖೆ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ. ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಕಿಣ್ವ ಇಮ್ಯುನೊಅಸೇ ಬಳಸಿ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ಮತ್ತು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಎಸ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ್ಯುಮ್ಎಕ್ಸ್ಎ-ಜಿಎಫ್‌ಪಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಅಡೆನೈಲ್ ಸೈಕ್ಲೇಸ್‌ನಿಂದ ಫೋರ್‌ಸ್ಕೋಲಿನ್-ಪ್ರಚೋದಿತ ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಉತ್ಪಾದನೆಯ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ನಮ್ಎಕ್ಸ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಪ್ರತಿಬಂಧವನ್ನು ನಾವು ಮೇಲ್ವಿಚಾರಣೆ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ. DRD2- ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಕೋಶಗಳು ಡೋಸೇಜ್-ಅವಲಂಬಿತ ರೀತಿಯಲ್ಲಿ ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್‌ಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ CAMP ಮಟ್ಟ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸಿದೆ. ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ, Cdk2 / p2 ನ ಸಹ-ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ CAMP ರಚನೆಯ ಗರಿಷ್ಠ ಪ್ರತಿಬಂಧವನ್ನು ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿತು (ಅಂಜೂರ 4D, ಎಡ ಫಲಕ). ಮತ್ತೊಂದೆಡೆ, DRD2 S321A-GFP ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೊಳಿಸುವ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ, Cdk5 / p35 (ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ) ಅನ್ನು ಲೆಕ್ಕಿಸದೆ ಕ್ವಿನ್‌ಪಿರೋಲ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ CAMP ರಚನೆಗಳನ್ನು ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾಗಿ ಪ್ರತಿಬಂಧಿಸಲಾಗಿದೆ.ಅಂಜೂರ 4D, ಬಲ ಫಲಕ). ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು DRD5 ನ Cdk2- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ CAMP ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಹಾದಿಯಲ್ಲಿ DRD2 ನ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಗಮನಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಹೆಚ್ಚು ಶಾರೀರಿಕವಾಗಿ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿ ವಿದ್ಯಮಾನಗಳನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ದೃ To ೀಕರಿಸಲು, ಅಗತ್ಯವಾದ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಆಕ್ಟಿವೇಟರ್ ಪಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ನಲ್ಲಿ ಕೊರತೆಯಿರುವ ನಾಕ್ out ಟ್ ಭ್ರೂಣಗಳಿಂದ ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳನ್ನು ನಾವು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಪ್ರಾಥಮಿಕ ಸುಸಂಸ್ಕೃತ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳನ್ನು 35 µM ​​ಡೋಪಮೈನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಚಿಕಿತ್ಸೆ ನೀಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಕಿಣ್ವ ಇಮ್ಯುನೊಆಸ್ಸೆಯಿಂದ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. ಡೋಪಮೈನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪ್ರಚೋದಿಸಿದಾಗ ಕಾಡು-ಮಾದರಿಯ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ p5 ನಾಕ್‌ out ಟ್ ಇಲಿಗಳ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳು ಕಡಿಮೆ ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತವೆ (ಅಂಜೂರ. 4E). ಟಿಒಟ್ಟಾಗಿ, DRD5 ನ Cdk2- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ DRD2 ನಿಂದ ಪ್ರಯೋಗಿಸಲ್ಪಟ್ಟ CAMP ಹಾದಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಸ್ವರದಲ್ಲಿ ಇಳಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ನಾವು ತೀರ್ಮಾನಿಸಿದ್ದೇವೆ.

ಚರ್ಚೆ

ನಾವು DRD2 ಅನ್ನು Cdk5 ನ ಕಾದಂಬರಿ ತಲಾಧಾರವೆಂದು ಗುರುತಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಗ್ರಾಹಕ ಆಂತರಿಕೀಕರಣದ ನಂತರ DRD2 ನ ಭವಿಷ್ಯದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವ ಮೂಲಕ DRD2 ಮೇಲ್ಮೈ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಕಡಿಮೆ-ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಇದರಿಂದಾಗಿ DRD2 Gi-ಕೌಪ್ಲಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಮಾರ್ಗ. ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಶೇಷ ಎಸ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಉದ್ದ ಮತ್ತು ಸಣ್ಣ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಅಸ್ತಿತ್ವದಲ್ಲಿರುವುದರಿಂದ, ಈ ಅಧ್ಯಯನದಲ್ಲಿ ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಲಾದ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್‌ನಲ್ಲಿ ಸಾಮಾನ್ಯ ನಿಯಂತ್ರಣದ ವಿಧಾನವಾಗಿರಬಹುದು.

ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಪ್ರಮುಖ ಡೋಪಮೈನ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಸಬ್ಟೈಪ್ ಎಂದು ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ ಮಾತ್ರವಲ್ಲದೆ ಪರಿಸರ ಪ್ರಚೋದಕಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಲಭ್ಯತೆಯಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಗೆ ಇದು ಒಳಗಾಗುತ್ತದೆ. ಅಗೋನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರೇರಿತ ಡಿಸೆನ್ಸಿಟೈಸೇಶನ್ ಮತ್ತು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಮರುಹೊಂದಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ವ್ಯಾಪಕವಾಗಿ ಅಧ್ಯಯನ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ [11], [24]. ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಸಿನಾಪ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್‌ನ ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸುವ ಕೊಕೇನ್ ಮತ್ತು ಆಂಫೆಟಮೈನ್‌ನಂತಹ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಸೈಕೋಸ್ಟಿಮ್ಯುಲಂಟ್ ಮಾನ್ಯತೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್‌ನ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕಲ್ ಆಗಿರುತ್ತವೆ ಎಂದು ಹಲವಾರು ಅಧ್ಯಯನಗಳು ತೋರಿಸಿವೆ. [36]. ವಾಸ್ತವವಾಗಿ, ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ ಬಳಕೆದಾರರು ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಿದ್ದಾರೆಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ, ಮತ್ತು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ (ಎನ್ಎಸಿ) ಯಲ್ಲಿ ಡಿಆರ್ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಲಭ್ಯತೆಯು ಇಲಿಗಳು ಮತ್ತು ಸಸ್ತನಿಗಳಲ್ಲಿನ ಮಾದಕವಸ್ತು ಮತ್ತು ಬಲವರ್ಧನೆಯ ನಡವಳಿಕೆಗಳೊಂದಿಗೆ ನಕಾರಾತ್ಮಕ ಸಂಬಂಧವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. [37]-[39]. ದೀರ್ಘಕಾಲದ drug ಷಧ ಮಾನ್ಯತೆ ಸೇರಿದಂತೆ ವಿವಿಧ ಪ್ರಚೋದಕಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕತೆಯು ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಅಥವಾ ಸರಿದೂಗಿಸುವ ನಿಯಂತ್ರಣಕ್ಕೆ ಹೆಚ್ಚು ಒಳಗಾಗುತ್ತದೆ ಎಂದು ಈ ಸಂಶೋಧನೆಗಳು ಸೂಚಿಸುತ್ತವೆ. ನಮ್ಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು DRD2 ನ ಮೂರನೇ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೂಪ್‌ನಲ್ಲಿರುವ S321 ಶೇಷವನ್ನು Cdk2 ನಿಂದ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟೆಡ್ ಮಾಡಬಹುದು, ಇದು CAMP ಹಾದಿಯಲ್ಲಿ DRD5 ನ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಪ್ರಭಾವವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಈ ಸಂವಹನವು ಡೋಪಮಿನೋಸೆಪ್ಟಿವ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದ ಒಂದು ಹೊಸ ನಿಯಂತ್ರಕ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನವನ್ನು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸುತ್ತದೆ, ಇದು ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮೇಲ್ಮೈ ಲಭ್ಯತೆಯ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಸ್ವರೂಪಕ್ಕೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿರಬಹುದು.

ನರಕೋಶದ ಪರಿಸರದ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುವಲ್ಲಿ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರಮುಖ ಅಂಶವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಗಮನಿಸಬೇಕು. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಲಿಂಬಿಕ್ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ನ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ಸ್ಪೈನ್‌ಗಳ ರಚನಾತ್ಮಕ ಮತ್ತು ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಸೈಕೋಸ್ಟಿಮ್ಯುಲಂಟ್ ಮಾನ್ಯತೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿದೆ [40]. ಈ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಎಲಿಮೆಂಟ್-ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ (ಸಿಆರ್‌ಇಬಿ) ಮತ್ತು os ಫಾಸ್ಬಿ, ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ ಆಡಳಿತಕ್ಕೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ನಿರಂತರವಾದ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುವ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಅಂಶಗಳು ಸೇರಿದಂತೆ ವಿವಿಧ ಆಣ್ವಿಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಸೇರಿವೆ. [41], [42]. ಮುಖ್ಯವಾಗಿ, Cdk5 ΔFosB ಯ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ [19], ಮತ್ತು ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ಬೆನ್ನುಮೂಳೆಯ ಡೈನಾಮಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಅನೇಕ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಅಂಶಗಳು, ಉದಾಹರಣೆಗೆ PSD-95, p21- ಆಕ್ಟಿವೇಟೆಡ್ ಕೈನೇಸ್ (PAK), β- ಕ್ಯಾಟೆನಿನ್ ಮತ್ತು ಸ್ಪಿನೋಫಿಲಿನ್, ಅನ್ನು Cdk5 ತಲಾಧಾರಗಳಾಗಿ ವರದಿ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ [43]-[46]. ಸತತವಾಗಿ, ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಆನುವಂಶಿಕ ಅಥವಾ c ಷಧೀಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳು ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ಬೆನ್ನುಮೂಳೆಯ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಹೊರಹೊಮ್ಮಿಸುತ್ತವೆ, ಮೆಸೊಲಿಂಬಿಕ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ಗಳ ಆಣ್ವಿಕ ಮತ್ತು ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ಬದಲಾವಣೆಗಳಲ್ಲಿ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಗೆ ನಿರ್ಣಾಯಕ ಪಾತ್ರಗಳನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. [47], [48]. DRD2 ಎಂಬುದು Cdk5 ನ ಒಂದು ಹೊಸ ಗುರಿಯಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುವ ನಮ್ಮ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು ದೀರ್ಘಕಾಲದ drug ಷಧ ಮಾನ್ಯತೆಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಡೋಪಮೈನ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಬದಲಾವಣೆಗಳ ಕುರಿತು ಹೆಚ್ಚುವರಿ ಒಳನೋಟವನ್ನು ಒದಗಿಸುತ್ತದೆ ಏಕೆಂದರೆ Cdk5 ನ ನಂತರದ osFosB- ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ಅಪ್-ರೆಗ್ಯುಲೇಷನ್ DRD2 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ನಲ್ಲಿ ನಾದದ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡಬಹುದು. . ಇದಲ್ಲದೆ, ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಹಲವಾರು ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಗಳ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆ ಎಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ, ಇದರಲ್ಲಿ ಸಿಎಎಮ್‌ಪಿ ಮತ್ತು ಎಂಎಪಿ ಕೈನೇಸ್ ಮಾರ್ಗಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣ ಮತ್ತು ಡೌನ್‌ಸ್ಟ್ರೀಮ್ ಪ್ರತಿಲೇಖನ ಘಟನೆಗಳು ಸೇರಿವೆ [42], [49]. ಆದ್ದರಿಂದ, ಈ ಅಧ್ಯಯನದ ಆವಿಷ್ಕಾರಗಳು ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನಿಂದ ಡಿಆರ್‌ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ನೇರ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಚಿತ್ರಿಸುವುದಲ್ಲದೆ, ದೀರ್ಘಕಾಲದ drug ಷಧ ಮಾನ್ಯತೆಗೆ ಡೋಪಮೈನ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಬಗ್ಗೆ ಒಂದು ಹೊಸ ಒಳನೋಟವನ್ನು ನೀಡುತ್ತದೆ.

ಲೇಖಕ ಕೊಡುಗೆಗಳು

ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ಕಲ್ಪಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ವಿನ್ಯಾಸಗೊಳಿಸಲಾಗಿದೆ: ಜೆಜೆ ಯುಯುಪಿ ಡಿಹೆಚ್ ಎಸ್ಕೆಪಿ. ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಿದರು: ಜೆಜೆ ಯುಯುಪಿ ಡಿಕೆಕೆ ವೈಕೆ. ಡೇಟಾವನ್ನು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ: ಜೆಜೆ ಯುಯುಪಿ ಡಿಕೆಕೆ ಎಸ್ಎಲ್ ವೈಕೆ ಎಸ್ಎಎಲ್ ಎಚ್ಎಲ್ ವೈಎಸ್ಜಿ ಡಿಹೆಚ್ ಎಸ್ಕೆಪಿ. ಕೊಡುಗೆ ನೀಡಿದ ಕಾರಕಗಳು / ವಸ್ತುಗಳು / ವಿಶ್ಲೇಷಣಾ ಸಾಧನಗಳು: YHS. ಕಾಗದ ಬರೆದರು: ಜೆಜೆ ಎಸ್ಕೆಪಿ.

ಉಲ್ಲೇಖಗಳು

  1. 1. ಮಿಸೇಲ್ ಸಿ, ನ್ಯಾಶ್ ಎಸ್ಆರ್, ರಾಬಿನ್ಸನ್ ಎಸ್‌ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಜಾಬರ್ ಎಂ, ಕ್ಯಾರನ್ ಎಂಜಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳು: ರಚನೆಯಿಂದ ಕಾರ್ಯಕ್ಕೆ. ಫಿಸಿಯೋಲ್ ರೆವ್ 1998: 78 - 189.
  2. 2. ವೈಸ್ ಆರ್ಎ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಬ್ರೈನ್ ರಿವಾರ್ಡ್ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್ರಿ: ಅನ್‌ಸೆನ್ಸ್ಡ್ ಪ್ರೋತ್ಸಾಹಕಗಳ ಒಳನೋಟಗಳು. ನ್ಯೂರಾನ್ 2002: 36 - 229. doi: 240 / s10.1016-0896 (6273) 02-00965
  3. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  4. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  5. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  6. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  7. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  8. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  9. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  10. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  11. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  12. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  13. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  14. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  15. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  16. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  17. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  18. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  19. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  20. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  21. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  22. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  23. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  24. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  25. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  26. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  27. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  28. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  29. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  30. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  31. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  32. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  33. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  34. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  35. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  36. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  37. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  38. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  39. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  40. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  41. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  42. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  43. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  44. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  45. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  46. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  47. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  48. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  49. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  50. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  51. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  52. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  53. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  54. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  55. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  56. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  57. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  58. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  59. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  60. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  61. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  62. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  63. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  64. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  65. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  66. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  67. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  68. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  69. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  70. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  71. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  72. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  73. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  74. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  75. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  76. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  77. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  78. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  79. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  80. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  81. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  82. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  83. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  84. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  85. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  86. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  87. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  88. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  89. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  90. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  91. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  92. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  93. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  94. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  95. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  96. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  97. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  98. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  99. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  100. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  101. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  102. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  103. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  104. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  105. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  106. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  107. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  108. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  109. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  110. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  111. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  112. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  113. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  114. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  115. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  116. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  117. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  118. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  119. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  120. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  121. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  122. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  123. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  124. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  125. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  126. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  127. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  128. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  129. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  130. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  131. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  132. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  133. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  134. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  135. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  136. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  137. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  138. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  139. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  140. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  141. ಲೇಖನ ವೀಕ್ಷಿಸಿ
  142. ಪಬ್ಮೆಡ್ / ಎನ್ಸಿಬಿಐ
  143. ಗೂಗಲ್ ಡೈರೆಕ್ಟರಿ
  144. 3. ನೆವ್ ಕೆಎ, ಸೀಮನ್ಸ್ ಜೆಕೆ, ಟ್ರಾಂಥಮ್-ಡೇವಿಡ್ಸನ್ ಎಚ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಡೋಪಮೈನ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್. ಜೆ ರಿಸೆಪ್ಟ್ ಸಿಗ್ನಲ್ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಡಕ್ಟ್ ರೆಸ್ 2004: 24 - 165. doi: 205 / lrst-10.1081
  145. 4. ಅಮರ್ ಎಸ್, ಶಾಲ್ಟಿಯಲ್ ಜಿ, ಮನ್ ಎಲ್, ಶಮೀರ್ ಎ, ಡೀನ್ ಬಿ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2008) ಸ್ಕಿಜೋಫ್ರೇನಿಯಾದ ಪ್ಯಾಥೊಫಿಸಿಯಾಲಜಿಯಲ್ಲಿ ಪೋಸ್ಟ್-ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಘಟಕಗಳ ಸಂಭಾವ್ಯ ಒಳಗೊಳ್ಳುವಿಕೆ. ಇಂಟ್ ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸೈಕೋಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್ 2: 11 - 197. doi: 205 / s10.1017
  146. 5. ಕೇನ್ ಎಸ್‌ಬಿ, ನೆಗಸ್ ಎಸ್‌ಎಸ್, ಮೆಲ್ಲೊ ಎನ್ಕೆ, ಪಟೇಲ್ ಎಸ್, ಬ್ರಿಸ್ಟೋ ಎಲ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2002) ಕೊಕೇನ್ ಸ್ವ-ಆಡಳಿತದಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ D2 ತರಹದ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಪಾತ್ರ: D2 ಗ್ರಾಹಕ ರೂಪಾಂತರಿತ ಇಲಿಗಳು ಮತ್ತು ಕಾದಂಬರಿ D2 ಗ್ರಾಹಕ ವಿರೋಧಿಗಳೊಂದಿಗಿನ ಅಧ್ಯಯನಗಳು. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 22: 2977 - 2988.
  147. 6. ಲೀ ಎಸ್, ಜಿಯಾಂಗ್ ಜೆ, ಪಾರ್ಕ್ ಯುಯು, ಕ್ವಾಕ್ ವೈ, ಲೀ ಎಸ್ಎ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2012) ಪಾರ್-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಪ್ರಚೋದನೆಯೊಂದಿಗೆ ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ವಾಲ್‌ಪ್ರೊಯೇಟ್ ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ. PLoS One 4: e7. doi: 45618 / magazine.pone.10.1371
  148. 7. ಫಿಶ್‌ಬರ್ನ್ ಸಿಎಸ್, ಎಲಜಾರ್ Z ಡ್, ಫುಚ್ಸ್ ಎಸ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಡೋಪಮೈನ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್‌ನ ದೀರ್ಘ ಮತ್ತು ಸಣ್ಣ ಐಸೋಫಾರ್ಮ್‌ಗಳಿಗಾಗಿ ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಗ್ಲೈಕೋಸೈಲೇಷನ್ ಮತ್ತು ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಕಳ್ಳಸಾಗಣೆ. ಜೆ ಬಯೋಲ್ ಕೆಮ್ 1995: 2 - 270. doi: 29819 / jbc.29824
  149. 8. ರೀಡರ್ ಟಿಎ, ಮೊಲಿನಾ-ಹೊಲ್ಗಾಡೊ ಇ, ಲಿಮಾ ಎಲ್, ಬೌಲಿಯಾನ್ನೆ ಎಸ್, ದೆವಾರ್ ಕೆಎಂ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ನಿರ್ದಿಷ್ಟ [ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎಚ್] ರಾಕ್ಲೋಪ್ರೈಡ್ ನಿಯೋಸ್ಟ್ರಿಯಟಲ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ: ಡೈಸಲ್ಫೈಡ್ ಮತ್ತು ಸಲ್ಫೈಡ್ರೈಲ್ ಗುಂಪುಗಳ ಪಾತ್ರ. ನ್ಯೂರೋಕೆಮ್ ರೆಸ್ 1992: 3 - 2. doi: 17 / bf749
  150. 9. ಎನ್‌ಜಿ ಜಿವೈ, ಒ'ಡೌಡ್ ಬಿಎಫ್, ಕ್ಯಾರನ್ ಎಂ, ಡೆನ್ನಿಸ್ ಎಂ, ಬ್ರಾನ್ ಎಮ್ಆರ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (1994) Sf2 ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿನ ಮಾನವನ D9L ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕದ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಮತ್ತು ಪಾಲ್ಮಿಟೊಯ್ಲೇಷನ್. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಕೆಮ್ 63: 1589 - 1595. doi: 10.1046 / j.1471-4159.1994.63051589.x
  151. 10. ಲಿ ಎಂ, ಬರ್ಮಕ್ ಜೆಸಿ, ವಾಂಗ್ W ಡ್‌ಡಬ್ಲ್ಯೂ, ou ೌ ಕ್ಯೂವೈ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಆಕ್ಟಿನ್-ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಪ್ರೋಟೀನ್ (ಎಬಿಪಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ನಿಂದ ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್‌ನ ಮಾಡ್ಯುಲೇಷನ್. ಮೋಲ್ ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್ 2000: 2 - 280.
  152. 11. ಚೋ ಡಿ, ng ೆಂಗ್ ಎಂ, ಮಿನ್ ಸಿ, ಮಾ ಎಲ್, ಕುರೋಸ್ ಎಚ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2010) ಅಗೊನಿಸ್ಟ್-ಪ್ರೇರಿತ ಎಂಡೊಸೈಟೋಸಿಸ್ ಮತ್ತು ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿ (2) ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಮರುಹೊಂದಿಸುವಿಕೆಯನ್ನು ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಮೋಲ್ ಎಂಡೋಕ್ರಿನಾಲ್ 24: 574 - 586. doi: 10.1210 / me.2009-0369
  153. 12. ತ್ಸೈ ಎಲ್ಹೆಚ್, ಡೆಲಾಲೆ ಐ, ಕ್ಯಾವಿನೆಸ್ ವಿಎಸ್ ಜೂನಿಯರ್, ಚೇ ಟಿ, ಹಾರ್ಲೋ ಇ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಪಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್‌ನ ನರ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ನಿಯಂತ್ರಕ ಉಪಘಟಕವಾಗಿದೆ. ನೇಚರ್ 1994: 35 - 5. doi: 371 / 419a423
  154. 13. ಧವನ್ ಆರ್, ತ್ಸೈ ಎಲ್ಹೆಚ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ನಮ್ಎಕ್ಸ್‌ನ ಒಂದು ದಶಕ. ನ್ಯಾಟ್ ರೆವ್ ಮೋಲ್ ಸೆಲ್ ಬಯೋಲ್ 2001: 5 - 2. doi: 749 / 759
  155. 14. ಫೂ ಎಕೆ, ಐಪಿ ಎನ್ವೈ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ಬೆನ್ನುಮೂಳೆಯ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಆಕ್ಟಿನ್ ಸೈಟೋಸ್ಕೆಲಿಟನ್‌ಗೆ ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಸೂಚನೆಗಳನ್ನು ಲಿಂಕ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಸೆಲ್ ಅಧ್ ಮಿಗರ್ 2007: 5 - 1. doi: 110 / cam.112
  156. 15. ವಾಂಗ್ ಜೆ, ಲಿಯು ಎಸ್, ಫೂ ವೈ, ವಾಂಗ್ ಜೆಹೆಚ್, ಲು ವೈ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯು ಎನ್‌ಎಂಡಿಎ ಗ್ರಾಹಕಗಳನ್ನು ನೇರವಾಗಿ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ಹಿಪೊಕ್ಯಾಂಪಲ್ ಸಿಎಎಕ್ಸ್‌ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಜೀವಕೋಶದ ಮರಣವನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುತ್ತದೆ. ನ್ಯಾಟ್ ನ್ಯೂರೋಸಿ 2003: 5 - 1. doi: 6 / nn1039
  157. 16. Ng ಾಂಗ್ ಎಸ್, ಎಡೆಲ್ಮನ್ ಎಲ್, ಲಿಯು ಜೆ, ಕ್ರಾಂಡಾಲ್ ಜೆಇ, ಮೊರಾಬಿಟೊ ಎಮ್ಎ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಟೈರೋಸಿನ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಎನ್ಆರ್ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಬಿ ಮತ್ತು ಎನ್ಎಂಡಿಎ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಮೇಲ್ಮೈ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 2008: 5 - 1472. doi: 2 / jneurosci.28-415
  158. 17. ಮೊಯ್ ಎಲ್ವೈ, ತ್ಸೈ ಎಲ್ಹೆಚ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ಗಳು ಸೆರೈನ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಟೈರೋಸಿನ್ ಹೈಡ್ರಾಕ್ಸಿಲೇಸ್ ಮತ್ತು ಅದರ ಸ್ಥಿರತೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಜೆ ಬಯೋಲ್ ಕೆಮ್ 2004: 5 - 31. doi: 279 / jbc.m54487
  159. 18. ಬಿಬ್ ಜೆಎ, ಸ್ನೈಡರ್ ಜಿಎಲ್, ನಿಶಿ ಎ, ಯಾನ್ Z ಡ್, ಮೈಜರ್ ಎಲ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (1999) Cdk32 ನಿಂದ DARPP-5 ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಅನ್ನು ಮಾಡ್ಯುಲೇಟ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ನೇಚರ್ 402: 669 - 671.
  160. 19. ಬಿಬ್ ಜೆಎ, ಚೆನ್ ಜೆ, ಟೇಲರ್ ಜೆಆರ್, ಸ್ವೆನ್ನಿಂಗ್ಸನ್ ಪಿ, ನಿಶಿ ಎ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2001) ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಮಾನ್ಯತೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ನರಕೋಶದ ಪ್ರೋಟೀನ್ Cdk5 ನಿಂದ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ನೇಚರ್ 410: 376 - 380.
  161. 20. ಓಹ್ಶಿಮಾ ಟಿ, ಒಗಾವಾ ಎಂ, ವೀರಣ್ಣ, ಹಿರಾಸಾವಾ ಎಂ, ಲಾಂಗ್‌ನೆಕರ್ ಜಿ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2001) ಅಭಿವೃದ್ಧಿ ಹೊಂದುತ್ತಿರುವ ಮೌಸ್ ಮೆದುಳಿನಲ್ಲಿ ಕಾರ್ಟಿಕಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಸ್ಥಾನೀಕರಣಕ್ಕೆ ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ 5 / p35 ಮತ್ತು ರೀಲಿನ್ / ಡಬ್ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಸಿನರ್ಜಿಸ್ಟಿಕ್ ಕೊಡುಗೆಗಳು. ಪ್ರೊಕ್ ನ್ಯಾಟ್ ಅಕಾಡ್ ಸೈ ಯುಎಸ್ಎ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್: ಎಕ್ಸ್ನ್ಯೂಮ್ಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್. doi: 1 / pnas.98
  162. 21. ಮೊರಾಬಿಟೋ ಎಮ್ಎ, ಶೆಂಗ್ ಎಂ, ತ್ಸೈ ಎಲ್ಹೆಚ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸೈಕ್ಲಿನ್-ಅವಲಂಬಿತ ಕೈನೇಸ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ಡೆನ್ಸಿಟಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಪಿಎಸ್‌ಡಿ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಎನ್-ಟರ್ಮಿನಲ್ ಡೊಮೇನ್ ಅನ್ನು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 2004: 5 - 95. doi: 24 / jneurosci.865-876
  163. 22. ಪಾರ್ಕ್ ಎಸ್.ಕೆ., ನ್ಗುಯೇನ್ ಎಂಡಿ, ಫಿಷರ್ ಎ, ಲ್ಯೂಕ್ ಎಂಪಿ, ಅಫರ್ ಎಲ್ ಬಿ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2005) ಪಾರ್- 4 ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಖಿನ್ನತೆಯನ್ನು ಸಂಪರ್ಕಿಸುತ್ತದೆ. ಸೆಲ್ 122: 275 - 287. doi: 10.1016 / j.cell.2005.05.031
  164. 23. ನೀತಮ್ಮರ್ ಎಂ, ಸ್ಮಿತ್ ಡಿಎಸ್, ಅಯಲಾ ಆರ್, ಪೆಂಗ್ ಜೆ, ಕೋ ಜೆ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2000) ನುಡೆಲ್ ಒಂದು ಕಾದಂಬರಿ Cdk5 ತಲಾಧಾರವಾಗಿದ್ದು ಅದು LIS1 ಮತ್ತು ಸೈಟೋಪ್ಲಾಸ್ಮಿಕ್ ಡೈನೈನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸಂಯೋಜಿಸುತ್ತದೆ. ನ್ಯೂರಾನ್ 28: 697 - 711. doi: 10.1016 / s0896-6273 (00) 00147-1
  165. 24. ಕಿಮ್ ಕೆಎಂ, ವೇಲೆಂಜಾನೊ ಕೆಜೆ, ರಾಬಿನ್ಸನ್ ಎಸ್ಆರ್, ಯಾವೋ ಡಬ್ಲ್ಯೂಡಿ, ಬರಾಕ್ ಎಲ್ಎಸ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2001) ಜಿ ಪ್ರೋಟೀನ್-ಕಪಲ್ಡ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಕೈನೇಸ್ಗಳು ಮತ್ತು ಬೀಟಾ-ಅರೆಸ್ಟಿನ್ಗಳಿಂದ ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಭೇದಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ. ಜೆ ಬಯೋಲ್ ಕೆಮ್ 2: 3 - 276. doi: 37409 / jbc.m37414
  166. 25. ವಾಲ್ಡ್‌ಹೋರ್ ಎಂ, ಬೋಫಿಲ್-ಕಾರ್ಡೋನಾ ಇ, ಮಿಲ್ಲಿಗನ್ ಜಿ, ಫ್ರೀಸ್‌ಮತ್ ಎಂ, ನ್ಯಾನೊಫ್ ಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸುರಮಿನ್ ಮತ್ತು ಡಿಡೆಮಿಥೈಲೇಟೆಡ್ ಸುರಮಿನ್ (ಎನ್‌ಎಫ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್) ನಿಂದ ಆಕ್ಸ್‌ನಮ್ಎಕ್ಸ್ ಅಡೆನೊಸಿನ್ ಮತ್ತು ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಡಿಫರೆನ್ಷಿಯಲ್ ಅನ್ಕೌಪ್ಲಿಂಗ್. ಮೋಲ್ ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್ 1998: 1 - 2.
  167. 26. ಬೋಫಿಲ್-ಕಾರ್ಡೋನಾ ಇ, ಕುಡ್ಲೆಸೆಕ್ ಒ, ಯಾಂಗ್ ಕ್ಯೂ, ಅಹಾರ್ನ್ ಎಚ್, ಫ್ರೀಸ್‌ಮುತ್ ಎಂ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2000) ಕ್ಯಾಲ್ಮೊಡ್ಯುಲಿನ್ ಅನ್ನು D2- ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಕ್ಕೆ ಬಂಧಿಸುವುದರಿಂದ ಜಿ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಸ್ವಿಚ್ ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುವ ಮೂಲಕ ಗ್ರಾಹಕ ಸಂಕೇತವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಜೆ ಬಯೋಲ್ ಕೆಮ್ 275: 32672 - 32680. doi: 10.1074 / jbc.m002780200
  168. 27. ಪಟ್ಟಿ ಎಸ್‌ಜೆ, ಸೀಮನ್ ಪಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಇಲಿ ಮೆದುಳಿನ ಪ್ರದೇಶಗಳಿಗೆ ಬಂಧಿಸುವ [1981H] ಸ್ಪೈಪೆರಾನ್‌ನ ಡೋಪಮೈನ್ ಮತ್ತು ಸಿರೊಟೋನಿನ್ ಗ್ರಾಹಕ ಘಟಕಗಳ ರೆಸಲ್ಯೂಶನ್. ಪ್ರೊಕ್ ನ್ಯಾಟ್ ಅಕಾಡ್ ಸೈ ಯುಎಸ್ಎ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್: ಎಕ್ಸ್ನ್ಯೂಮ್ಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್. doi: 3 / pnas.78
  169. 28. ಗಾರ್ಡ್ನರ್ ಬಿ, ಸ್ಟ್ರೇಂಜ್ ಪಿಜಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ (ಉದ್ದ) ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳಲ್ಲಿ ಅಗೋನಿಸ್ಟ್ ಕ್ರಿಯೆ: ಲಿಗಂಡ್ ಬೈಂಡಿಂಗ್ ಮತ್ತು ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಪರಿಶೀಲನೆಗಳು. Br J ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್ 1998: 2 - 124. doi: 978 / sj.bjp.984
  170. 29. ಸೀಮನ್ ಪಿ, ಟ್ಯಾಲೆರಿಕೊ ಟಿ, ಕೋ ಎಫ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್) ಡೋಪಮೈನ್ ಡೋಪಮರಿನ್ ಅನ್ನು ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್‌ನ ಹೈ-ಅಫಿನಿಟಿ ಸೈಟ್‌ಗಳಿಂದ ಸ್ಥಳಾಂತರಿಸುತ್ತದೆ, ಆದರೆ ಐಸೊಟೋನಿಕ್ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ [ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್] ರಾಕ್ಲೋಪ್ರೈಡ್ ಅಥವಾ [ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಎಚ್] ಸ್ಪೈಪೆರಾನ್ ಅಲ್ಲ: ಮಾನವ ಪಾಸಿಟ್ರಾನ್ ಹೊರಸೂಸುವಿಕೆ ಟೊಮೊಗ್ರಫಿ. ಸಿನಾಪ್ಸ್ 2003: 3 - 2. doi: 3 / syn.3
  171. 30. ಒಬೆನೌರ್ ಜೆಸಿ, ಕ್ಯಾಂಟ್ಲೆ ಎಲ್ಸಿ, ಯಾಫ್ ಎಂಬಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸ್ಕ್ಯಾನ್‌ಸೈಟ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್: ಶಾರ್ಟ್ ಸೀಕ್ವೆನ್ಸ್ ಮೋಟಿಫ್‌ಗಳನ್ನು ಬಳಸಿಕೊಂಡು ಸೆಲ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಸಂವಹನಗಳ ಪ್ರೋಟೀಮ್-ವೈಡ್ ಪ್ರಿಡಿಕ್ಷನ್. ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಿಕ್ ಆಮ್ಲಗಳು ರೆಸ್ 2003: 2.0 - 31. doi: 3635 / nar / gkg3641
  172. 31. ಲಿಯು ಎಚ್, ಸ್ಯಾಡಿಗೋವ್ ಆರ್ಜಿ, ಯೇಟ್ಸ್ ಜೆಆರ್ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಆರ್ಡಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಶಾಟ್‌ಗನ್ ಪ್ರೋಟಿಯೋಮಿಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿ ಯಾದೃಚ್ s ಿಕ ಮಾದರಿ ಮತ್ತು ಸಾಪೇಕ್ಷ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಸಮೃದ್ಧಿಯನ್ನು ಅಂದಾಜು ಮಾಡಲು ಒಂದು ಮಾದರಿ. ಅನಲ್ ಕೆಮ್ 3: 2004 - 76. doi: 4193 / ac4201
  173. 32. ಇಟೊ ಕೆ, ಹಾಗಾ ಟಿ, ಲಮೆಹ್ ಜೆ, ಸಾದೀ ಡಬ್ಲ್ಯೂ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಅನುಕ್ರಮವು ಜಿ-ಪ್ರೋಟೀನ್-ಕಪಲ್ಡ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ಕೈನೇಸ್‌ಗಳ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಅಥವಾ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನ ಸಹಕಾರವನ್ನು ಅವಲಂಬಿಸಿರುತ್ತದೆ. ಯುರ್ ಜೆ ಬಯೋಕೆಮ್ 1999: 2 - 2. doi: 5 / j.260-112.x
  174. 33. ನಾಮ್‌ಕುಂಗ್ ವೈ, ಸಿಬ್ಲಿ ಡಿಆರ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೈನೇಸ್ ಸಿ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಡೋಪಮೈನ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್‌ನ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್, ಡಿಸೆನ್ಸಿಟೈಸೇಶನ್ ಮತ್ತು ಕಳ್ಳಸಾಗಣೆಗೆ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸುತ್ತದೆ. ಜೆ ಬಯೋಲ್ ಕೆಮ್ 2004: 2 - 279. doi: 49533 / jbc.m49541
  175. 34. ವಾಂಗ್ ಎಎಸ್, ಲೀ ಆರ್ಹೆಚ್, ಚೆಯುಂಗ್ ಎವೈ, ಯೆಯುಂಗ್ ಪಿಕೆ, ಚುಂಗ್ ಎಸ್ಕೆ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2011) ಪಾರ್ಕಿನ್ಸನ್ ಕಾಯಿಲೆಯ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರೇರಿತ ಆಟೊಫ್ಯಾಜಿಗಾಗಿ ಎಂಡೋಫಿಲಿನ್ B5 ನ ಸಿಡಿಕೆಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಷನ್ ಅಗತ್ಯವಿದೆ. ನ್ಯಾಟ್ ಸೆಲ್ ಬಯೋಲ್ 1: 13 - 568. doi: 579 / ncb10.1038
  176. 35. ಕೇಶವಪನಿ ಎಸ್, ಲಾ ಕೆಎಫ್, ಮೆಕ್ಲೌಗ್ಲಿನ್ ಡಿಎಂ, ಬ್ರೌನ್ಲೀಸ್ ಜೆ, ಅಕರ್ಲಿ ಎಸ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2001) p35 / cdk5 ಬೀಟಾ-ಕ್ಯಾಟೆನಿನ್ ಅನ್ನು ಬಂಧಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಫಾಸ್ಫೊರಿಲೇಟ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಬೀಟಾ-ಕ್ಯಾಟೆನಿನ್ / ಪ್ರೆಸೆನಿಲಿನ್- 1 ಪರಸ್ಪರ ಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಯುರ್ ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 13: 241 - 247. doi: 10.1046 / j.1460-9568.2001.01376.x
  177. 36. ಕುಹಾರ್ ಎಮ್ಜೆ, ರಿಟ್ಜ್ ಎಂಸಿ, ಬೋಜಾ ಜೆಡಬ್ಲ್ಯೂ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಕೊಕೇನ್‌ನ ಬಲಪಡಿಸುವ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ಡೋಪಮೈನ್ ಕಲ್ಪನೆ. ಪ್ರವೃತ್ತಿಗಳು ನ್ಯೂರೋಸಿ 1991: 14 - 299. doi: 302 / 10.1016-0166 (2236) 91-g
  178. 37. ವೋಲ್ಕೊ ಎನ್ಡಿ, ಫೌಲರ್ ಜೆಎಸ್, ವುಲ್ಫ್ ಎಪಿ, ಷ್ಲಿಯರ್ ಡಿ, ಶಿಯು ಸಿವೈ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (1990) ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಮೇಲೆ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ ನಿಂದನೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳು. ಆಮ್ ಜೆ ಸೈಕಿಯಾಟ್ರಿ 147: 719 - 724.
  179. 38. ಡಾಲಿ ಜೆಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಫ್ರೈಯರ್ ಟಿಡಿ, ಬ್ರಿಚಾರ್ಡ್ ಎಲ್, ರಾಬಿನ್ಸನ್ ಇಎಸ್, ಥಿಯೋಬಾಲ್ಡ್ ಡಿಇ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2007) ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ D2 / 3 ಗ್ರಾಹಕಗಳು ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳ ಹಠಾತ್ ಪ್ರವೃತ್ತಿ ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್ ಬಲವರ್ಧನೆಯನ್ನು ict ಹಿಸುತ್ತವೆ. ವಿಜ್ಞಾನ 315: 1267 - 1270. doi: 10.1126 / science.1137073
  180. 39. ನಾಡರ್ ಎಮ್ಎ, ಮೋರ್ಗನ್ ಡಿ, ಗೇಜ್ ಎಚ್ಡಿ, ನಾಡರ್ ಎಸ್ಹೆಚ್, ಕ್ಯಾಲ್ಹೌನ್ ಟಿಎಲ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2006) ಕೋತಿಗಳಲ್ಲಿ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಕೊಕೇನ್ ಸ್ವ-ಆಡಳಿತದ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ D2 ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಪಿಇಟಿ ಇಮೇಜಿಂಗ್. ನ್ಯಾಟ್ ನ್ಯೂರೋಸಿ 9: 1050 - 1056. doi: 10.1038 / nn1737
  181. 40. ರಾಬಿನ್ಸನ್ ಟಿಇ, ಕೋಲ್ಬ್ ಬಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಆಂಫೆಟಮೈನ್‌ನೊಂದಿಗಿನ ಹಿಂದಿನ ಅನುಭವದಿಂದ ಉತ್ಪತ್ತಿಯಾದ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಪ್ರಿಫ್ರಂಟಲ್ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ನಿರಂತರ ರಚನಾತ್ಮಕ ಮಾರ್ಪಾಡುಗಳು. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 1997: 17 - 8491.
  182. 41. ರಾಬಿನ್ಸನ್ ಟಿಇ, ಕೋಲ್ಬ್ ಬಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಆಂಫೆಟಮೈನ್ ಅಥವಾ ಕೊಕೇನ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ನಂತರ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಪ್ರಿಫ್ರಂಟಲ್ ಕಾರ್ಟೆಕ್ಸ್‌ನಲ್ಲಿನ ಡೆಂಡ್ರೈಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ಸ್ಪೈನ್‌ಗಳ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳು. ಯುರ್ ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 1999: 11 - 1598. doi: 1604 / j.10.1046-1460.x
  183. 42. ಮೆಕ್‌ಕ್ಲಂಗ್ ಸಿಎ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಸಿಆರ್‌ಇಬಿ ಮತ್ತು ಡೆಲ್ಟಾಫೊಸ್‌ಬಿಯಿಂದ ಜೀನ್ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್ ಬಹುಮಾನದ ನಿಯಂತ್ರಣ. ನ್ಯಾಟ್ ನ್ಯೂರೋಸಿ 2003: 6 - 1208. doi: 1215 / nn10.1038
  184. 43. ಫೆಂಗ್ ಜೆ, ಯಾನ್ Z ಡ್, ಫೆರೆರಾ ಎ, ಟೊಮಿಜಾವಾ ಕೆ, ಲಿಯಾವ್ ಜೆಎ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2000) ಸ್ಪಿನೋಫಿಲಿನ್ ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ಸ್ಪೈನ್ಗಳ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯವನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರೊಕ್ ನ್ಯಾಟ್ ಅಕಾಡ್ ಸೈ ಯುಎಸ್ಎ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್: ಎಕ್ಸ್ನ್ಯೂಮ್ಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್. doi: 97 / pnas.9287
  185. 44. ಪ್ರೆಂಜ್ ಒ, ಮರ್ಫಿ ಟಿಎಚ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ಸಾಂದ್ರತೆ-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಕ್ಲಸ್ಟರ್‌ಗಳ ಮಾಡ್ಯುಲರ್ ಸಾಗಣೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಟಿಕಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಆರಂಭಿಕ ಬೆಳವಣಿಗೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಸ್ಥಿರ ಬೆನ್ನುಮೂಳೆಯ ಪೂರ್ವಗಾಮಿಗಳೊಂದಿಗಿನ ಸಂಬಂಧ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 2001: 95 - 21.
  186. 45. ಮುರೇಸ್ ಎಸ್, ಮೊಸರ್ ಇ, ಶುಮನ್ ಇಎಮ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಡಿಪೋಲರೈಸೇಶನ್ ಬೀಟಾ-ಕ್ಯಾಟೆನಿನ್ ಅನ್ನು ನರಕೋಶದ ಸ್ಪೈನ್ಗಳಾಗಿ ಓಡಿಸುತ್ತದೆ, ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಯದಲ್ಲಿನ ಬದಲಾವಣೆಗಳನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ. ನ್ಯೂರಾನ್ 2002: 35 - 91. doi: 105 / s10.1016-0896 (6273) 02-x
  187. 46. ಹಯಾಶಿ ಎಂಎಲ್, ಚೋಯ್ ಎಸ್‌ವೈ, ರಾವ್ ಬಿಎಸ್, ಜಂಗ್ ಎಚ್‌ವೈ, ಲೀ ಎಚ್‌ಕೆ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2004) ಬದಲಾದ ಕಾರ್ಟಿಕಲ್ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ ಮತ್ತು ಫೋರ್‌ಬ್ರೈನ್‌ನಲ್ಲಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಾದ ಮೆಮೊರಿ ಬಲವರ್ಧನೆ- ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಾಬಲ್ಯ- negative ಣಾತ್ಮಕ ಪಿಎಕೆ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನಿಕ್ ಇಲಿಗಳು. ನ್ಯೂರಾನ್ 42: 773 - 787. doi: 10.1016 / j.neuron.2004.05.003
  188. 47. ಬೆನವಿಡ್ಸ್ ಡಿಆರ್, ಕ್ವಿನ್ ಜೆಜೆ, ong ಾಂಗ್ ಪಿ, ಹವಾಸ್ಲಿ ಎಹೆಚ್, ಡಿಲಿಯೋನ್ ಆರ್ಜೆ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2007) Cdk5 ಕೊಕೇನ್ ಪ್ರತಿಫಲ, ಪ್ರೇರಣೆ ಮತ್ತು ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್ ಎಕ್ಸಿಟಬಿಲಿಟಿ ಅನ್ನು ಮಾಡ್ಯೂಲ್ ಮಾಡುತ್ತದೆ. ಜೆ ನ್ಯೂರೋಸಿ 27: 12967 - 12976. doi: 10.1523 / jneurosci.4061-07.2007
  189. 48. ಮೆಯೆರ್ ಡಿಎ, ರಿಚರ್ ಇ, ಬೆಂಕೋವಿಕ್ ಎಸ್ಎ, ಹಯಾಶಿ ಕೆ, ಕಾನ್ಸಿ ಜೆಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2008) Cdk5 ನ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಡಿಸ್‌ರೆಗ್ಯುಲೇಷನ್ ಕೊಕೇನ್, ಮೋಟಾರು ಕಲಿಕೆ ಮತ್ತು ಡೆಂಡ್ರೈಟಿಕ್ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನಕ್ಕೆ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರೊಕ್ ನ್ಯಾಟ್ ಅಕಾಡ್ ಸೈ ಯುಎಸ್ಎ ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್: ಎಕ್ಸ್ನ್ಯೂಮ್ಎಕ್ಸ್-ಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್. doi: 105 / pnas.18561
  190. 49. ಇಂಪೆ ಎಸ್, ಒಬ್ರಿಯೆಟನ್ ಕೆ, ಸ್ಟಾರ್ಮ್ ಡಿಆರ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಹೊಸ ಸಂಪರ್ಕಗಳನ್ನು ಮಾಡುವುದು: ನರಕೋಶದ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯಲ್ಲಿ ಇಆರ್‌ಕೆ / ಎಂಎಪಿ ಕೈನೇಸ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್ ಪಾತ್ರ. ನ್ಯೂರಾನ್ 1999: 23 - 11. doi: 14 / s10.1016-0896 (6273) 00-80747