ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ಸ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ accumbal ಸಾಧಾರಣ ಸ್ಪಿನ್ ನರಕೋಶಗಳ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ (D2 ಗ್ರಾಹಕಗಳು) (2014)

ಶೆಲ್ಲಿ ಸೂಯುನ್ ಹಾಡು,^1,† ಬಿಯಾಂಗ್ ಜುನ್ ಕಾಂಗ್,^1,† ಲೀ ವೆನ್,^2,3,4,† ಹ್ಯೋ ಜಿನ್ ಲೀ,¹ ಹೈ-ರಿ ಸಿಮ್,¹ ಟೇ ಹ್ಯೊಂಗ್ ಕಿಮ್,¹ ಸೆಹೌನ್ ಯೂನ್,¹ ಬಾಂಗ್-ಜೂನ್ ಯೂನ್,¹ ಜಾರ್ಜ್ ಜೆ. ಅಗಸ್ಟೀನ್,^2,3,4 ಮತ್ತು ಜಾ-ಹ್ಯುನ್ ಬೈಕ್^1,*

ಲೇಖಕ ಮಾಹಿತಿ ► ಲೇಖನ ಟಿಪ್ಪಣಿಗಳು ► ಕೃತಿಸ್ವಾಮ್ಯ ಮತ್ತು ಪರವಾನಗಿ ಮಾಹಿತಿ ►

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ (ಎನ್‌ಎಸಿ) ಯೊಳಗಿನ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ, ಮಾದಕವಸ್ತು-ಪ್ರೇರಿತ ರೂಪಾಂತರಗಳು ಮಾದಕವಸ್ತು-ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ವ್ಯಸನಕಾರಿ ನಡವಳಿಕೆಗಳಿಗೆ ಕೊಡುಗೆ ನೀಡಲು ಪ್ರಸ್ತಾಪಿಸಲಾಗಿದೆ. ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆಯಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳನ್ನು (ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಆರ್) ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಎನ್ಎಸಿ ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ (ಎಂಎಸ್ಎನ್) ಪಾತ್ರವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ನಾವು ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಅಡೆನೊ-ಸಂಯೋಜಿತ ವೈರಲ್ ವೆಕ್ಟರ್ಸ್ ಎನ್‌ಕೋಡಿಂಗ್ ಚಾನೆಲ್ ರೋಡೋಪ್ಸಿನ್-ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ (ChR2) ಅನ್ನು ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ಆರ್-ಕ್ರೆ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನಿಕ್ ಇಲಿಗಳ ಎನ್‌ಎಸಿಗೆ ತಲುಪಿಸಲಾಯಿತು. ಇದು NAc ನಲ್ಲಿ D2R-MSN ಗಳನ್ನು ಆಯ್ದ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಟ್ ಮಾಡಲು ನಮಗೆ ಅವಕಾಶ ಮಾಡಿಕೊಟ್ಟಿತು. D2R-MSN ಗಳು ಸ್ಥಳೀಯ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ಗಳನ್ನು ರೂಪಿಸುತ್ತವೆ, ಏಕೆಂದರೆ D2R-MSN ನ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ನೆರೆಯ MSN ಗಳಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ರವಾಹಗಳನ್ನು (ಐಪಿಎಸ್‌ಸಿ) ಪ್ರಚೋದಿಸಿತು. NAc D2R-MSN ನ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಜೀವಿಯಲ್ಲಿ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭ ಅಥವಾ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಗೆ ಯಾವುದೇ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಲಿಲ್ಲ. ಆದಾಗ್ಯೂ, withdraw ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ಸೆಳೆಯಿತು. ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು NAc ಯ D2R-MSN ಗಳು ವಾಪಸಾತಿ-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯಲ್ಲಿ ಪ್ರಮುಖ ಪಾತ್ರವಹಿಸುತ್ತವೆ ಮತ್ತು ಮಾದಕ ದ್ರವ್ಯ ಸೇವನೆಯನ್ನು ನಿಲ್ಲಿಸಿದ ನಂತರ ಮರುಕಳಿಸುವಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಬಹುದು ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.

ಮೈಸ್

ಸಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಬಿಎಲ್ / ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಹಿನ್ನೆಲೆಯಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಕ್ರೆ ಬಿಎಸಿ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನಿಕ್ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಎಂಎಂಆರ್ಆರ್ಸಿ (ರೂಪಾಂತರಿತ ಮೌಸ್ ಪ್ರಾದೇಶಿಕ ಸಂಪನ್ಮೂಲ ಕೇಂದ್ರಗಳು, ಬಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್.ಎಫ್ವಿಬಿ (ಸಿಜಿ) -ಟಿಜಿ (ಡಾಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಕ್ರೆ) ಇಆರ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎಟ್ / ಎಂಎಂಯುಸಿಡಿ) ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. ನಡವಳಿಕೆಯ ಪ್ರಯೋಗಗಳಲ್ಲಿ, ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್-ಕ್ರೀ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನ್ ಕೊರತೆಯಿರುವ ಕಸವನ್ನು ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್-ಕ್ರೀ ಇಲಿಗಳಿಗೆ ನಿಯಂತ್ರಣಗಳಾಗಿ ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ತಾಪಮಾನ ಮತ್ತು ತೇವಾಂಶದ ನಿರಂತರ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ರೋಗಕಾರಕ-ಮುಕ್ತ ತಡೆ ಸೌಲಭ್ಯದಲ್ಲಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು ನಿರ್ವಹಿಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು, ಮತ್ತು 2-h ಬೆಳಕಿನಲ್ಲಿ, 57-h ಡಾರ್ಕ್ ವೇಳಾಪಟ್ಟಿಯಲ್ಲಿ. ಕೊರಿಯಾ ವಿಶ್ವವಿದ್ಯಾಲಯ ಮತ್ತು ಕೆಐಎಸ್‌ಟಿಯ ಸಾಂಸ್ಥಿಕ ಪ್ರಾಣಿ ಸಂರಕ್ಷಣೆ ಮತ್ತು ಬಳಕೆ ಸಮಿತಿಗಳು ಅನುಮೋದಿಸಿದ ಮಾನದಂಡಗಳಿಗೆ ಅನುಗುಣವಾಗಿ ಪ್ರಾಣಿಗಳ ಆರೈಕೆ ಮತ್ತು ನಿರ್ವಹಣೆಯನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು.

ವೈರಸ್ ವೆಕ್ಟರ್ ತಯಾರಿಕೆ

pAAV-EF1a-DIO-hChR2 (H134R) -EYFP-WPRE ಅನ್ನು ಕಾರ್ಲ್ ಡೀಸೆರೋತ್ (ಸ್ಟ್ಯಾನ್‌ಫೋರ್ಡ್ ಯೂನಿವ್.) ಉದಾರವಾಗಿ ಒದಗಿಸಿದ್ದಾರೆ. AAV ತಯಾರಿಕೆಗಾಗಿ, ಪ್ರತಿಜೀವಕಗಳು ಮತ್ತು ಎಫ್‌ಬಿಎಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಡಿಎಮ್‌ಇಎಂ ಮಾಧ್ಯಮದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಸಿಟಿ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಬೆಳೆಸಲಾಯಿತು. ವರ್ಗಾವಣೆಯ ಹಿಂದಿನ ದಿನ, 293-cm ಭಕ್ಷ್ಯಗಳಿಂದ 90% ಸಂಗಮವನ್ನು ಮೀರಿದ ನಾಲ್ಕು ಫಲಕಗಳನ್ನು ಐದು 10-cm ಭಕ್ಷ್ಯಗಳ ಮೇಲೆ ಲೇಪಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 15-18 h ಗಾಗಿ ಅಥವಾ 22 ರಿಂದ 60% ಸಂಗಮದವರೆಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. ಜೆಟ್‌ಪಿಇಐ ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಫೆಕ್ಷನ್ ಕಾರಕ (ಕ್ಯೂಬಿಯೋಜೀನ್) ಬಳಸಿ ಹೆಚ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಸಿಟಿ ಕೋಶಗಳನ್ನು ಪಿಎಎವಿ-ಡಿಒ-ಚಿಆರ್‌ಎಕ್ಸ್‌ನಮ್ಎಕ್ಸ್-ಇವೈಎಫ್‌ಪಿ, ಪಿಎಎವಿ-ಡಿಜೆ ಮತ್ತು ಪಿಹೆಲ್ಪರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು. ಡಿಎನ್‌ಎ / ಡಿಎಂಇಎಂ / ಪಿಇಐ ಕಾಕ್ಟೈಲ್ ಅನ್ನು ಸುಳಿಯಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 70 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಕೋಣೆಯ ಉಷ್ಣಾಂಶದಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. ಕಾವುಕೊಟ್ಟ ನಂತರ, ಪ್ರತಿ 293 ಸೆಂ ಭಕ್ಷ್ಯಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾವಣೆ ಮಿಶ್ರಣವನ್ನು ಸೇರಿಸಲಾಯಿತು. ವರ್ಗಾವಣೆಗೊಂಡ ಜೀವಕೋಶಗಳನ್ನು ವರ್ಗಾವಣೆಯ ನಂತರ 2 ಗಂಗೆ ಕೊಯ್ಲು ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು 20% ಸೋಡಿಯಂ ಡಿಯೋಕ್ಸಿಕೋಲೇಟ್ (ಸಿಗ್ಮಾ; D15) ಮತ್ತು 48 h ಗೆ 0.5 at C ನಲ್ಲಿ 6750 ಘಟಕಗಳು / ಮಿಲಿ ಬೆಂಜೊನೇಸ್ ನ್ಯೂಕ್ಲೀಸ್ (ಸಿಗ್ಮಾ; E50) ನೊಂದಿಗೆ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. 1014 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ 37 × g ನಲ್ಲಿ ಕೇಂದ್ರೀಕರಿಸುವ ಮೂಲಕ ಸೆಲ್ಯುಲಾರ್ ಶಿಲಾಖಂಡರಾಶಿಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಿದ ನಂತರ, ಸೂಪರ್‌ನೇಟೆಂಟ್ ಅನ್ನು 1 mm PVDF ಫಿಲ್ಟರ್ (ಮಿಲಿಪೋರ್) ಮೂಲಕ ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಎಎವಿ-ಡಿಜೆ ಕಣಗಳ ಶುದ್ಧೀಕರಣವನ್ನು ಹೈಟ್ರಾಪ್ ಹೆಪಾರಿನ್ ಅಫಿನಿಟಿ ಕಾಲಮ್‌ಗಳನ್ನು (ಜಿಇ ಹೆಲ್ತ್‌ಕೇರ್) ಬಳಸಿ ನಡೆಸಲಾಯಿತು. AAV ಯ ಸಾಂದ್ರತೆಗಾಗಿ, 3000 ಆಣ್ವಿಕ ತೂಕ ಕಡಿತದೊಂದಿಗೆ ಅಮಿಕಾನ್ ಅಲ್ಟ್ರಾ- 15 ಕೇಂದ್ರಾಪಗಾಮಿ ಫಿಲ್ಟರ್ ಘಟಕಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಕೇಂದ್ರೀಕೃತ ವೈರಸ್ ಆಲ್ಕೋಟ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು −0.45 at C ನಲ್ಲಿ ಶೇಖರಣೆಗಾಗಿ ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟುತ್ತದೆ. ಅಂತಿಮ ವೈರಲ್ ಸಾಂದ್ರತೆಗಳು 15 ~ 100,000 × 80 ಆಗಿತ್ತು¹² ಪ್ರತಿ ಎಎವಿಗಾಗಿ ಪ್ರತಿ ಮಿಲಿಗೆ ವೈರಸ್ ಕಣಗಳು.

ಸ್ಟೀರಿಯೊಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಮತ್ತು ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಫೈಬರ್ ಪ್ಲೇಸ್‌ಮೆಂಟ್

ದೇಹದ ತೂಕದ ಪ್ರತಿ ಗ್ರಾಂಗೆ 1.6 µl ಜೊಲೆಟಿಲ್ ಮತ್ತು 0.05 µl ಕ್ಸೈಲಾಜಿನ್ (ರೊಂಪನ್, ಬೇಯರ್) ಐಪಿ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನಿಂದ ಪ್ರಾಣಿಗಳನ್ನು ಅರಿವಳಿಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಸ್ಟೀರಿಯೊಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಉಪಕರಣದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಯಿತು (ಡೇವಿಡ್ ಕೋಪ್ ಇನ್ಸ್ಟ್ರುಮೆಂಟ್ಸ್, ತುಜುಂಗಾ, ಸಿಎ). ವೈರಸ್‌ಗಳ ಇಂಜೆಕ್ಷನ್‌ಗಾಗಿ, 31-ಗೇಜ್ ಸಿರಿಂಜ್ ಸೂಜಿಯನ್ನು ದ್ವಿಪಕ್ಷೀಯವಾಗಿ 2 ((ಎಪಿ +0; ಎಂಎಲ್ ± 1.7; ಡಿವಿ −1.3) ಕೋನದಲ್ಲಿ 4.5 ul / min ದರದಲ್ಲಿ NAc ಗೆ 0.1 µl ವೈರಸ್ ಅನ್ನು NAc ಗೆ ತುಂಬಿಸಲು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ನಿಧಾನವಾಗಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಮೊದಲು ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ನಂತರ ಸೂಜಿಯನ್ನು 10 ನಿಮಿಷಗಳ ಕಾಲ ಸ್ಥಳದಲ್ಲಿ ಇಡಲಾಗಿತ್ತು. ಇಂಪ್ಲಾಂಟೇಶನ್‌ಗಾಗಿ ಫೈಬರ್-ಆಪ್ಟಿಕ್ ತೂರುನಳಿಗೆ ಜಿರ್ಕೋನಿಯಾ ಫೆರುಲ್ (1.25 ಮಿಮೀ ವ್ಯಾಸ ಮತ್ತು 4.5 ಮಿಮೀ ಉದ್ದ) ಮತ್ತು ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಫೈಬರ್‌ನ ಚಪ್ಪಟೆ ತುದಿ (200 µm ವ್ಯಾಸ) ಒಳಗೊಂಡಿತ್ತು. ವೈರಸ್‌ಗಳನ್ನು ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ನಂತರ ಡಿ 2-ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳ ಪ್ರಕಾಶಕ್ಕಾಗಿ ಫೈಬರ್-ಆಪ್ಟಿಕ್ ಕ್ಯಾನುಲಾವನ್ನು ಎನ್‌ಎಸಿಗೆ ಅಳವಡಿಸಲಾಯಿತು. ಫೈಬರ್-ಆಪ್ಟಿಕ್ ತೂರುನಳಿಗೆ ಅಳವಡಿಸುವ ನಿರ್ದೇಶಾಂಕಗಳು ಎನ್‌ಎಸಿ ಅನ್ನು ಗುರಿಯಾಗಿಸಲು 0 ° (ಎಪಿ +1.7; ಎಂಎಲ್ ± 1.35; ಡಿವಿ −4.2) ಕೋನವಾಗಿತ್ತು. ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಫೈಬರ್ ಅನ್ನು ಲಂಗರು ಹಾಕಲು ಸಹಾಯ ಮಾಡಲು, ಫೈಬರ್-ಆಪ್ಟಿಕ್ ಕ್ಯಾನುಲಾದ ಇಂಪ್ಲಾಂಟೇಶನ್ ಸೈಟ್ನ ಹಿಂಭಾಗಕ್ಕೆ ಎರಡು ಸ್ಕ್ರೂಗಳನ್ನು ತಲೆಬುರುಡೆಗೆ ಲಂಗರು ಹಾಕಲಾಯಿತು. ತಲೆಬುರುಡೆಯ ಮೇಲೆ ಫೈಬರ್-ಆಪ್ಟಿಕ್ ತೂರುನಳಿಗೆ ಸರಿಪಡಿಸಲು, ಸಿ & ಬಿ ಸೂಪರ್‌ಬಾಂಡ್ (ಸನ್ ಮೆಡಿಕಲ್) ಅನ್ನು ತಲೆಬುರುಡೆಯ ಮೇಲ್ಮೈಗೆ ತೂರುನಳಿಗೆ ತಳದಲ್ಲಿ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಯಿತು. ಸಿ & ಬಿ ಸೂಪರ್‌ಬಾಂಡ್ ಗಟ್ಟಿಯಾದ ನಂತರ, ಕ್ಯಾನುಲಾವನ್ನು ಹೋಲ್ಡರ್‌ನಿಂದ ಬಿಡುಗಡೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ದಂತ ಸಿಮೆಂಟ್ (ಪಾಲಿ-ಎಫ್, ಡೆಂಟ್ಸ್‌ಪ್ಲೈ) ಅನ್ನು ತೂರುನಳಿಗೆ ಮತ್ತು ತಿರುಪುಮೊಳೆಗಳ ಸುತ್ತಲೂ ಅನ್ವಯಿಸಲಾಯಿತು. ಕ್ಯಾನ್ಯುಲೇಷನ್ ಸೈಟ್ ಸುತ್ತಲೂ ision ೇದನವನ್ನು ಮುಚ್ಚಲು, ವೆಟ್‌ಬಾಂಡ್ ಟಿಶ್ಯೂ ಅಂಟಿಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯನ್ನು (3 ಎಂ, 7003449) ಬಳಸಲಾಯಿತು. ಅಳವಡಿಸಿದ ನಂತರ, ಇಲಿಗಳಿಗೆ ಸತತ 5 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ಪ್ರತಿಜೀವಕಗಳ (ಎನ್ರೋಫ್ಲೋಕ್ಸಾಸಿನ್, 12 ಮಿಗ್ರಾಂ / ಕೆಜಿ, q 5 ಗಂ) ಮತ್ತು ನೋವು ನಿವಾರಕ (ಕಾರ್ಪ್ರೊಫೇನ್, 24 ಮಿಗ್ರಾಂ / ಕೆಜಿ, q 3 ಗಂ) ಸಬ್ಕ್ಯುಟೇನಿಯಸ್ ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ನೀಡಲಾಯಿತು.

ವೈವೊನಲ್ಲಿ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್

200 µm ಪ್ಯಾಚ್ ಬಳ್ಳಿಯನ್ನು ಸ್ಲೀವ್ ಬಳಸಿ ತೀವ್ರವಾಗಿ ಅಳವಡಿಸಬಹುದಾದ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಫೈಬರ್‌ನ ಬಾಹ್ಯ ಭಾಗಕ್ಕೆ ಸಂಪರ್ಕಿಸಲಾಗಿದೆ. ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಫೈಬರ್‌ಗಳನ್ನು ಎಫ್‌ಸಿ / ಪಿಸಿ ಅಡಾಪ್ಟರ್ ಮೂಲಕ ನೀಲಿ ಲೇಸರ್ ಡಯೋಡ್‌ಗೆ (473 nm, MBL-III 473-150 mW) ಜೋಡಿಸಲಾಗಿದೆ, ಮತ್ತು ಬೆಳಕಿನ ದ್ವಿದಳ ಧಾನ್ಯಗಳನ್ನು ಪ್ರಚೋದಕ (BNC 575) ಮೂಲಕ ಉತ್ಪಾದಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ. ChR2- ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ಗಾಗಿ, ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಮಾದರಿ 20 Hz ಆವರ್ತನ, 5 ms ನಾಡಿ ಅವಧಿ ಮತ್ತು 2-5 mW ಬೆಳಕಿನ ಶಕ್ತಿಯಾಗಿತ್ತು. ಪ್ಯಾಚ್ ಬಳ್ಳಿಯಿಂದ ಹೊರಸೂಸುವ ಬೆಳಕಿನ ಶಕ್ತಿಯನ್ನು S100C ಲೈಟ್ ಸೆನ್ಸಾರ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಪವರ್ ಮೀಟರ್ (PM121D) ಬಳಸಿ ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.

ವರ್ತನೆಯ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ

2-11 ವಾರಗಳ ವಯಸ್ಸಿನಲ್ಲಿ ಪುರುಷ D13-Cre ಇಲಿಗಳೊಂದಿಗೆ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ರಯೋಗಗಳನ್ನು ನಡೆಸಲಾಯಿತು, ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫಿಸಿಯೋಲಾಜಿಕಲ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಗೆ ಒಳಪಟ್ಟ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಹೊರತುಪಡಿಸಿ, ಅವು 5-6 ವಾರಗಳ ವಯಸ್ಸಿನವು. ವಯಸ್ಸಿಗೆ ಹೊಂದಿಕೆಯಾದ D2-Cre ಮತ್ತು Cre negative ಣಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣ ಇಲಿಗಳನ್ನು ವೈರಸ್‌ನಿಂದ ಚುಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಪ್ರತ್ಯೇಕವಾಗಿ ಇರಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ವರ್ತನೆಯ ಪರೀಕ್ಷೆಯವರೆಗೆ ಪಂಜರಕ್ಕೆ ಒಗ್ಗಿಕೊಳ್ಳಲು ಅವಕಾಶ ಮಾಡಿಕೊಡಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿ ಕುಶಲತೆಗಾಗಿ, ಅಭ್ಯಾಸವನ್ನು ಅನುಮತಿಸಲು ಮತ್ತು ಒತ್ತಡವನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡಲು ಪ್ರಯೋಗ ಪ್ರಾರಂಭವಾಗುವ ಮೊದಲು ಇಲಿಗಳನ್ನು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕೋಣೆಗೆ 60 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು (ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಕೋಣೆಯ ಹೊಳಪು 70 ಲಕ್ಸ್ ಆಗಿತ್ತು). ಯಾವುದೇ ಸಂಭಾವ್ಯ ವಾಸನೆಯ ಸೂಚನೆಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲು ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಉಪಕರಣವನ್ನು ಪ್ರಯೋಗಗಳ ನಡುವೆ 70% ಎಥೆನಾಲ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸ್ವಚ್ was ಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು.

ಕೊಕೇನ್ ಸಂವೇದನೆ

ಕೊಕೇನ್ ಸಂವೇದನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭಕ್ಕಾಗಿ, ಇಲಿಗಳನ್ನು ಸತತ ದಿನಗಳವರೆಗೆ ಸಲೈನ್ ಇಂಜೆಕ್ಷನ್‌ಗಳಿಗೆ (ಐಪಿ) ಅಭ್ಯಾಸ ಮಾಡಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು ಮತ್ತು ನಂತರ ಲವಣಯುಕ್ತ ಅಥವಾ ಕೊಕೇನ್ (3 mg kg^-1, ip) ಸತತ 5 ಗೆ. ಕೊಕೇನ್ ಹೈಡ್ರೋಕ್ಲೋರೈಡ್ (ಜಾನ್ಸನ್ ಮ್ಯಾಟ್ನಿ, ಎಡಿನ್ಬರ್ಗ್, ಯುಕೆ) ಯೊಂದಿಗೆ ಲವಣಯುಕ್ತ (0.9% NaCl) ಅಥವಾ 30 G ಸೂಜಿಯೊಂದಿಗೆ ಲವಣಯುಕ್ತವಾಗಿ ಕರಗಿದ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಇಂಟ್ರಾಪೆರಿಟೋನಿಯಲ್ ಆಗಿ (ಐಪಿ) ಚುಚ್ಚಲಾಯಿತು. ಪ್ರತಿ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ನಂತರ, 30 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ತೆರೆದ ಮೈದಾನದ ಕೋಣೆಯಲ್ಲಿ ಸಮತಲ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗಾಗಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು. ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ಪ್ರಾರಂಭ ಮತ್ತು ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಮೇಲೆ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ನ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಅಳೆಯಲು (ಚಿತ್ರ (ಚಿತ್ರThirdThirdThird5), 5), ಮನೆ ಪಂಜರಗಳಲ್ಲಿ 3 ನಿಮಿಷದ ಅವಧಿಗಳಲ್ಲಿ ಇಲಿಗಳಿಗೆ ನಾಲ್ಕು 30- ನಿಮಿಷ ಅವಧಿಗಳಿಗೆ NAc ಗೆ ಡ್ಯುಯಲ್ ಫೈಬರ್-ಆಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ಯಾಚ್ ಹಗ್ಗಗಳ ಮೂಲಕ ದ್ವಿಪಕ್ಷೀಯವಾಗಿ ನೀಲಿ ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಕಾಶವನ್ನು ನೀಡಲಾಯಿತು. ಮೌಸ್ ತಲೆಬುರುಡೆಯ ಮೇಲೆ ಇರುವ ಫೈಬರ್-ಆಪ್ಟಿಕ್ ಕ್ಯಾನುಲಾದ ಪ್ಯಾಚ್ ಹಗ್ಗಗಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಇಲಿಗಳಿಗೆ ಕನಿಷ್ಠ 10 ನಿಮಿಷ ವಿಶ್ರಾಂತಿ ನೀಡಲಾಯಿತು. ನಂತರ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಕೊಕೇನ್ ಅಥವಾ ಸಲೈನ್ (ಕೋಕ್ 1d-coc 5d) ನೊಂದಿಗೆ ಚುಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ. ಸಂವೇದನಾಶೀಲತೆಯ ಪ್ರಾರಂಭದ ನಂತರ, ಯಾವುದೇ ಲವಣಯುಕ್ತ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದು ಇಲ್ಲದೆ ಕೊಕೇನ್ ಅನ್ನು 14 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಯಿತು. ಈ ವಾಪಸಾತಿ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ, ಯಾವುದೇ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಅನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗಿಲ್ಲ. ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ನಂತರ drug ಷಧದ ಚಾಲೆಂಜ್ ಡೋಸ್‌ನ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ಮೂಲಕ ನಿರ್ಧರಿಸಲಾಯಿತು (10 mg kg^-1, ip) ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ NAc ನ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ನಂತರ Figure5A.5A. ಕೊಕೇನ್ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ನ ಪರಿಣಾಮವನ್ನು ಅಳೆಯಲು (ಚಿತ್ರ (Figure6), 6), ಮೇಲೆ ವಿವರಿಸಿದಂತೆ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಗಾಗಿ ಒಂದೇ ಪ್ರೋಟೋಕಾಲ್‌ಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು (ಚಿತ್ರಕ್ಕಾಗಿ) Figure5) 5) ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ನೀಡಲಾಗಿದೆ ಹೊರತುಪಡಿಸಿ. ಕೊಕೇನ್ ಸಂವೇದನಾಶೀಲತೆಯ ಪ್ರಾರಂಭದ ನಂತರ, 1 ದಿನಗಳ ಒಟ್ಟು ವಾಪಸಾತಿ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ 14 h ಗಾಗಿ ಪ್ರತಿದಿನ NAc ಗೆ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಅನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗಿದೆ. 14 ದಿನಗಳ ವಾಪಸಾತಿಯ ನಂತರ, ಎಲ್ಲಾ ಗುಂಪುಗಳ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಕೊಕೇನ್‌ನ ಸವಾಲಿನ ಡೋಸೇಜ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಚುಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ, (10 mg kg^-1).

 

ಚಿತ್ರ 1

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಆಯ್ದ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್. (ಎ) AAV-DIO-ChR2-EYFP ವೈರಲ್ ವಾಹಕಗಳ ವಿತರಣೆಯ ಮೂಲಕ NAc D2R ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ChR2 ನ ಆಯ್ದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ. ಸ್ಕೇಲ್ ಬಾರ್‌ಗಳು: ಹಿನ್ನೆಲೆ ವ್ಯಕ್ತಿ, 1 mm: ಸೇರಿಸಿ, 200 µm. (ಬಿ) ಕಾನ್ಫೋಕಲ್ ಚಿತ್ರಗಳು ...

 

ಚಿತ್ರ 2

D2RCre-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಸ್ಥಳೀಯ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಚಾಲನೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ. (ಎ) ಲೈವ್ NAc ಸ್ಲೈಸ್‌ನ ಕಾನ್ಫೋಕಲ್ ಇಮೇಜ್, ChR2 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸದ ಬಣ್ಣ ತುಂಬಿದ ನ್ಯೂರಾನ್ ಮತ್ತು ChR2 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದ ನೆರೆಯ ಕೋಶ (ಬಾಣದ ಹೆಡ್) ಅನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಅದನ್ನು ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಟೆಡ್ ಮಾಡಬಹುದು. (ಬಿ) ಐಪಿಎಸ್‌ಸಿ ...

 

ಚಿತ್ರ 3

NAc ಕೋಶಗಳ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು. (ಎ) ಅಲೆಕ್ಸಾ 594 ನಿಂದ ತುಂಬಿದ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಎರಡು-ಫೋಟಾನ್ ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಚಿತ್ರ. (A1) ChR2 + / AP ಗುಂಪಿನಿಂದ ನರಕೋಶವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ (A3) ChR2− / IPSC ಗುಂಪಿನಿಂದ ನರಕೋಶವನ್ನು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ. (A2) ಮತ್ತು (A4) ನಿಂದ ಹೆಚ್ಚಿನ-ವರ್ಧಕ ಚಿತ್ರಗಳು ...

 

ಚಿತ್ರ 4

ತಳದ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮೇಲೆ NAc ನಲ್ಲಿ D2-MSN ಗಳ ಇನ್-ವಿವೋ ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳು. (ಎ) AAV-DIO-ChR2-EYFP ಯೊಂದಿಗೆ NAc ನಲ್ಲಿ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ D2 Cre ಇಲಿಗಳ ಧನು ರಾಶಿ ನೋಟ ಮತ್ತು ನಂತರ ಫೈಬರ್ ಆಪ್ಟಿಕ್ ತೂರುನಳಿಗೆ ದ್ವಿಪಕ್ಷೀಯ ಅಳವಡಿಕೆ. 473 nm ನೀಲಿ ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಚೋದನೆ ...

 

ಚಿತ್ರ 5

ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ಸಂವೇದನೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ D2-MSN ಅನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಪರಿಣಾಮಗಳು. (ಎ) ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ಸಂವೇದನಾಶೀಲತೆಯ ಪ್ರಾರಂಭ ಮತ್ತು ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್-ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳ ಫೋಟೋ-ಪ್ರಚೋದನೆಗಾಗಿ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಯೋಜನೆ. ನೀಲಿ-ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಕಾಶವನ್ನು (2 ~ 2 mW, 5 ms, 5 Hz) ನಾಲ್ಕು ಕ್ಕೆ ತಲುಪಿಸಲಾಯಿತು ...

 

ಚಿತ್ರ 6

ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಕೊಕೇನ್ ಮಾನ್ಯತೆಗೆ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ D2-MSN ಅನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವ ಪರಿಣಾಮಗಳು. (ಎ) ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್-ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳ ಫೋಟೋ-ಪ್ರಚೋದನೆಗಾಗಿ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಯೋಜನೆ. ನೀಲಿ-ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಕಾಶ (2 ~ 2 mW, 5 ms, 5 Hz) ಅನ್ನು ಎಂಟು 20- ನಿಮಿಷ ಅವಧಿಗೆ ತಲುಪಿಸಲಾಗಿದೆ ...

ಇಮ್ಯುನೊಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಕಾನ್ಫೋಕಲ್ ಲೇಸರ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪಿ

ಇಮ್ಯುನೊಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್‌ಗಾಗಿ, ಇಲಿಗಳನ್ನು le ೊಲೆಟಿಲ್ (ವಿರ್ಬಾಕ್, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ / ಎಲ್ / ಗ್ರಾಂ, ಇಂಟ್ರಾಪೆರಿಟೋನಿಯಲಿ) ಮತ್ತು ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ / ಎಲ್ / ಗ್ರಾಂ ರೊಂಪನ್ (ಬೇಯರ್) ನೊಂದಿಗೆ ಅರಿವಳಿಕೆ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಫಿಲ್ಟರ್-ಕ್ರಿಮಿನಾಶಕ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಎಂ ಪಿಬಿಎಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ಸುಗಂಧಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಂತರ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್% ಪ್ಯಾರಾಫಾರ್ಮಲ್ಡಿಹೈಡ್ / ಪಿಬಿಎಸ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ಬಳಸಿ ಸ್ಥಿರೀಕರಣಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ನಂತರ ಮೆದುಳನ್ನು ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಮೇಲಿನಂತೆ ಐಸ್-ಕೋಲ್ಡ್ ಫಿಕ್ಸೇಟಿವ್ನೊಂದಿಗೆ 1.6 h ಗೆ ಪೋಸ್ಟ್-ಫಿಕ್ಸ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ನಂತರ ಮಿದುಳುಗಳನ್ನು 0.05% ಸುಕ್ರೋಸ್ / 0.1 M PBS ನಲ್ಲಿ 4 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ನಿರ್ಜಲೀಕರಣಗೊಳಿಸಲಾಯಿತು. ನಂತರ ಮಿದುಳುಗಳನ್ನು ಹೆಪ್ಪುಗಟ್ಟಿ 4-µm- ದಪ್ಪದ ಕರೋನಲ್ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಕ್ರಯೋಸ್ಟಾಟ್ನಲ್ಲಿ ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು (ಲೈಕಾ ಸಿಎಮ್ 30, ಜರ್ಮನಿ). 0.1% ಸಾಮಾನ್ಯ ಮೇಕೆ ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು 2% ಟ್ರಿಟಾನ್ X-40 ಅನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ 1900 M PBS ನಲ್ಲಿ 40 h ಗಾಗಿ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು (1 h) ನಿರ್ಬಂಧಿಸಲಾಗಿದೆ ಮತ್ತು ಮೊಲ ಪಾಲಿಕ್ಲೋನಲ್ ವಿರೋಧಿ D0.1R (5: 0.2, MILLipore, AB100PP) 2% ಟ್ರಿಟಾನ್ X-1 ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪಿಬಿಎಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ತೊಳೆಯುವ ನಂತರ, ಅಲೆಕ್ಸಾ ಫ್ಲೌರ್ 500 ಮೇಕೆ ಆಂಟಿ-ಮೊಲ IgG (5084: 4; ಆಣ್ವಿಕ ಪ್ರೋಬ್ಸ್, ಯುಜೀನ್, OR, USA) ಮತ್ತು 0.2, l / ml 100 ನೊಂದಿಗೆ 1 h ಗಾಗಿ ಮಾದರಿಗಳನ್ನು RT ಯಲ್ಲಿ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. 568% ಸಾಮಾನ್ಯ ಮೇಕೆ ಸೀರಮ್ ಮತ್ತು 1% ಟ್ರಿಟಾನ್ X-500 ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪಿಬಿಎಸ್‌ನಲ್ಲಿ 0.2-diamidino-4-phenyl-indole HCl (DAPI; ಸಿಗ್ಮಾ, ಸೇಂಟ್ ಲೂಯಿಸ್, MO, USA). ನಕಾರಾತ್ಮಕ ನಿಯಂತ್ರಣದಂತೆ, ಮಾದರಿಗಳನ್ನು ಡಿಎಪಿಐ ಮತ್ತು ದ್ವಿತೀಯಕ ಪ್ರತಿಕಾಯದೊಂದಿಗೆ ಮಾತ್ರ ಕಾವುಕೊಡಲಾಯಿತು. ಸಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಪ್ಲಾನ್ ಅಪೊ × ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ / ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ವಾಟರ್ ಕಾನ್ಫೋಕಲ್ ಲೇಸರ್ ಸ್ಕ್ಯಾನಿಂಗ್ ಸಿಸ್ಟಮ್ (ಎಲ್‌ಎಸ್‌ಎಂ ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್, iss ೈಸ್, ಬರ್ಲಿನ್, ಜರ್ಮನಿ) ನಲ್ಲಿ ವಿಭಾಗಗಳನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು.

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಚೂರುಗಳಲ್ಲಿ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫಿಸಿಯಾಲಜಿ ಮತ್ತು ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್

ChR4-EYFP ಯ ಅತ್ಯುತ್ತಮ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಸಾಧಿಸಲು, ವೈರಸ್ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ 2 ವಾರಗಳ ಪ್ರಯೋಗಗಳಿಗೆ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಬಳಸಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು. ತೀವ್ರವಾದ ಮೆದುಳಿನ ಚೂರುಗಳನ್ನು ತಯಾರಿಸಲು ಇಲಿಗಳನ್ನು ನಂತರ ಅರಿವಳಿಕೆ ಮತ್ತು ಶಿರಚ್ itated ೇದ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಮೆದುಳನ್ನು ತ್ವರಿತವಾಗಿ ತೆಗೆದುಹಾಕಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ತಕ್ಷಣವೇ (mM ನಲ್ಲಿ) 250 ಸುಕ್ರೋಸ್, 26 NaHCO ಹೊಂದಿರುವ ಐಸ್-ಕೋಲ್ಡ್ ಕತ್ತರಿಸುವ ದ್ರಾವಣದಲ್ಲಿ ಇರಿಸಲಾಯಿತು₃, 10 ಡಿ-ಗ್ಲುಕೋಸ್, 3 ಮೈ-ಇನೋಸಿಟಾಲ್, 2.5 KCl, 2 ನಾ-ಪೈರುವಾಟ್, 1.25 NaH₂PO₄, 0.5 ಆಸ್ಕೋರ್ಬಿಕ್ ಆಮ್ಲ, 1 ಕೈನುರೆನಿಕ್ ಆಮ್ಲ ಮತ್ತು 7 MgCl₂ ಇದನ್ನು 95% O ನೊಂದಿಗೆ ಬಬಲ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ₂/ 5% CO₂ (pH = 7.4). NAc ಅನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಕರೋನಲ್ ಮೆದುಳಿನ ಚೂರುಗಳನ್ನು (250 thickm ದಪ್ಪ) ವೈಬ್ರಟೋಮ್ (ಲೈಕಾ ವಿಟಿ 1200 S) ಬಳಸಿ ತಯಾರಿಸಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ನಂತರ (ಎಂಎಂನಲ್ಲಿ) ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಗ್ಯಾಸ್ಡ್ ಕೃತಕ ಸೆರೆಬ್ರೊಸ್ಪೈನಲ್ ದ್ರವದಲ್ಲಿ (ಎಸಿಎಸ್ಎಫ್) ಕಾವುಕೊಡಲಾಗುತ್ತದೆ: 11 D- ಗ್ಲೂಕೋಸ್, 125 NaCl, 25 NaHCO₃, 1.25 NaH₂PO₄, 2.5 KCl, 1.25 MgCl₂ ಮತ್ತು 2.5 CaCl₂ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್ ಮಾಡುವ ಮೊದಲು 34 h ಗಾಗಿ 1 at C ನಲ್ಲಿ. ಚೂರುಗಳನ್ನು ನಂತರ ಮುಳುಗುವ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್ ಕೋಣೆಗೆ ವರ್ಗಾಯಿಸಲಾಯಿತು, ಇದರಲ್ಲಿ ಒ₂-ಸ್ಯಾಚುರೇಟೆಡ್ ಎಸಿಎಸ್ಎಫ್ ದ್ರಾವಣವನ್ನು ನಿರಂತರವಾಗಿ ಸೂಪರ್ಫ್ಯೂಸ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. NAc ಮತ್ತು VTA ಯಲ್ಲಿನ ಕೋಶಗಳನ್ನು 2- ಫೋಟಾನ್ ಮೈಕ್ರೋಸ್ಕೋಪ್ (ಒಲಿಂಪಸ್ FV1000 MPE, ಟೋಕಿಯೊ, ಜಪಾನ್) ಬಳಸಿ 25X ವಾಟರ್ ಇಮ್ಮರ್ಶನ್ ಲೆನ್ಸ್ ಮತ್ತು ಅತಿಗೆಂಪು ಡಿಐಸಿ ಆಪ್ಟಿಕ್ಸ್ ಬಳಸಿ ದೃಶ್ಯೀಕರಿಸಲಾಯಿತು. ಮಲ್ಟಿಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ 700B ಆಂಪ್ಲಿಫಯರ್ ಮತ್ತು ಡಿಜಿಡಾಟಾ 1440A ಡಿಜಿಟೈಜರ್ (ಆಣ್ವಿಕ ಸಾಧನಗಳು, LLC) ಯೊಂದಿಗೆ NAc ಕೋಶಗಳಿಂದ ಸಂಪೂರ್ಣ-ಸೆಲ್ ಪ್ಯಾಚ್ ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್‌ಗಳನ್ನು ಪಡೆಯಲಾಗಿದೆ. PCLAMP 10.2 ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ ಬಳಸಿ ಡೇಟಾವನ್ನು ಸ್ಯಾಂಪಲ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್‌ಫಿಟ್ 10.2 ಸಾಫ್ಟ್‌ವೇರ್ (ಆಣ್ವಿಕ ಸಾಧನಗಳು, LLC) ಬಳಸಿ ಮತ್ತಷ್ಟು ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ. 3-5 MΩ ನಡುವಿನ ಪ್ರತಿರೋಧವನ್ನು ಹೊಂದಿರುವ ಪ್ಯಾಚ್ ವಿದ್ಯುದ್ವಾರಗಳು (mM ನಲ್ಲಿ) ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಆಂತರಿಕ ದ್ರಾವಣದಿಂದ ತುಂಬಿವೆ: 130 K- ಗ್ಲುಕೋನೇಟ್, 2 NaCl, 2 MgCl₂, 20 HEPES, 4 Na₂ಎಟಿಪಿ, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ನಾ₃GTP, 0.5 EGTA ಮತ್ತು 10 Na₂- ಫಾಸ್ಫೋಕ್ರೇಟೈನ್, 7.3 N KOH ಬಳಸಿ pH ಅನ್ನು 1 ಗೆ ಹೊಂದಿಸಲಾಗಿದೆ. ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಉಪವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ GABA ಗ್ರಾಹಕಗಳನ್ನು ನಿರ್ಬಂಧಿಸಲು ಬೈಕುಕುಲಿನ್ (10 µM) ಅನ್ನು ಮೆದುಳಿನ ಸ್ಲೈಸ್‌ಗೆ ಸ್ನಾನ ಮಾಡಲಾಯಿತು.

ChR2-EYFP ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ NAc ಕೋಶಗಳನ್ನು ಎಲ್ಇಡಿ ಬೆಳಕಿನ ಮೂಲದಿಂದ (460 ± 27 nm, UHP-Mic-LED-460, Prizmatix) ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಟೆಡ್ ಮಾಡಲಾಗಿದೆ. ಎಲ್ಇಡಿಯಿಂದ ನೀಲಿ ಬೆಳಕನ್ನು ಮತ್ತಷ್ಟು ಫಿಲ್ಟರ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಫಿಲ್ಟರ್ ಕ್ಯೂಬ್ ಎಕ್ಸಿಟೇಷನ್ ಫಿಲ್ಟರ್ (470-495 nm) ಹೊಂದಿತ್ತು; ಬೆಳಕಿನ ಹೊಳಪುಗಳು (10 ms ಅವಧಿ, 0.0366 - 0.354 mW / mm²) 25-5 Hz ಆವರ್ತನಗಳಲ್ಲಿ 40X ಆಬ್ಜೆಕ್ಟಿವ್ ಲೆನ್ಸ್ ಮೂಲಕ ಮೆದುಳಿನ ಸ್ಲೈಸ್‌ಗೆ ತಲುಪಿಸಲಾಯಿತು. ಪ್ರಯೋಗಗಳ ಉಪವಿಭಾಗದಲ್ಲಿ, 2 ನ ಅವಧಿಯ ಬೆಳಕಿನ ಹೊಳಪಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ChR2- ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಕೋಶಗಳಲ್ಲಿ ಫೋಟೊಕರೆಂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಅಂಕಿಅಂಶಗಳ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ

ಡೇಟಾವನ್ನು means ಸೆಮ್ ಎಂದು ಪ್ರಸ್ತುತಪಡಿಸಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಎರಡು ಬಾಲದ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳ ಜೊತೆ ವಿಶ್ಲೇಷಿಸಲಾಗಿದೆ t-ಟೆಸ್ಟ್, ಅಥವಾ ಬಾನ್ಫೆರೋನಿಯ ನಂತರದ ವ್ಯತ್ಯಾಸದ ದ್ವಿಮುಖ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯೊಂದಿಗೆ ಈ ಪೋಸ್ಟ್ ಪರೀಕ್ಷೆ. ಎ P<0.05 ರ ಮೌಲ್ಯವನ್ನು ಸಂಖ್ಯಾಶಾಸ್ತ್ರೀಯವಾಗಿ ಮಹತ್ವದ್ದಾಗಿ ಪರಿಗಣಿಸಲಾಗಿದೆ.

ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಆಯ್ದ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್

ಕೊಕೇನ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥ ವ್ಯಸನಕಾರಿ ನಡವಳಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ NAc D2R-MSN ಗಳ ಪಾತ್ರವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು, ನಾವು NAc D2R ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಲು ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ವಿಧಾನವನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. NAc ನಲ್ಲಿನ D2R-MSN ಗಳ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಬೆಳಕಿನಿಂದ ನಿಯಂತ್ರಿಸಲು, AAV-DIO-ChR2-EYFP ಅನ್ನು ಕೋಡಿಂಗ್ ಮಾಡುವ ವೈರಲ್ ವಾಹಕಗಳನ್ನು ಸ್ಟೀರಿಯೊಟಾಕ್ಸಿಕ್ ಆಗಿ D2R-Cre BAC ಟ್ರಾನ್ಸ್‌ಜೆನಿಕ್ ಇಲಿಗಳ NAc ಗೆ ಚುಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ. ವೈರಲ್ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ 4 ವಾರಗಳ ನಂತರ, NAc ನಲ್ಲಿ ChR2-EYFP ಯ ದೃ expression ವಾದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಕಂಡುಬಂದಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure1A) .1A). D2R-MSN ಗಳಲ್ಲಿನ ChR2 ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ನಿರ್ದಿಷ್ಟತೆಯನ್ನು ಇಮ್ಯುನೊಫ್ಲೋರೊಸೆನ್ಸ್ ಕಾನ್ಫೋಕಲ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆಯಿಂದ ದೃ was ಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ: YFP- ಟ್ಯಾಗ್ ಮಾಡಲಾದ ChR2 ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ NAc ನಲ್ಲಿ D2R ನೊಂದಿಗೆ ಸಹ-ಸ್ಥಳೀಕರಿಸಲ್ಪಟ್ಟಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure1B), 1B), ChR2 ಅನ್ನು NAc ನಲ್ಲಿ D2R- ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಲಾಗಿದೆ ಎಂದು ತೋರಿಸುತ್ತದೆ.

ಅಂತಹ ವಿಧಾನವನ್ನು ಇತರ ಅಧ್ಯಯನಗಳಲ್ಲಿ ಬಳಸಲಾಗಿದ್ದರೂ (ಉದಾ., ಲೋಬೊ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2010), ವೈರಸ್ ಇಂಜೆಕ್ಷನ್ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳ ವಿವರಗಳು ಒಂದು ಲ್ಯಾಬ್‌ನಿಂದ ಇನ್ನೊಂದಕ್ಕೆ ಬದಲಾಗುತ್ತವೆ, ಇದು ನಮ್ಮ ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ದಾಖಲಿಸುವುದು ಮುಖ್ಯವಾಗುತ್ತದೆ. ಎನ್‌ಎಸಿ ಚೂರುಗಳಲ್ಲಿ ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳಿಂದ ಸಂಪೂರ್ಣ-ಸೆಲ್ ಪ್ಯಾಚ್ ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್ ಮಾಡುವ ಮೂಲಕ ನಾವು ChR2 ನ ಕ್ರಿಯಾತ್ಮಕ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯನ್ನು ನಿರ್ಣಯಿಸಿದ್ದೇವೆ. MSN ಗಳನ್ನು ಇವರಿಂದ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ: (1) ತುಲನಾತ್ಮಕವಾಗಿ ಹೈಪರ್ಪೋಲರೈಸ್ಡ್ ರೆಸ್ಟಿಂಗ್ ಮೆಂಬರೇನ್ ಸಂಭಾವ್ಯ (RMP), ಸಾಮಾನ್ಯವಾಗಿ −80 mV ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚು negative ಣಾತ್ಮಕವಾಗಿರುತ್ತದೆ; (2) ಅನ್ವಯಿಕ ಪ್ರಸ್ತುತ ದ್ವಿದಳ ಧಾನ್ಯಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಎಪಿ ಗುಂಡಿನ ನಿಯಮಿತ ಮಾದರಿ; (3) ಪ್ರಸ್ತುತ ನಾಡಿಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಮೊದಲ ಎಪಿ ಗುಂಡು ಹಾರಿಸುವುದಕ್ಕೆ ದೀರ್ಘ ಸುಪ್ತತೆ; (4) ಹೈಪರ್ ಪೋಲರೈಸೇಶನ್ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಹೈಪರ್ ಪೋಲರೈಸೇಶನ್-ಆಕ್ಟಿವೇಟೆಡ್ ಕ್ಯಾಷನ್ ಪ್ರವಾಹದಿಂದ ಉಂಟಾಗುವ ವೋಲ್ಟೇಜ್ “ಸಾಗ್” ಅನುಪಸ್ಥಿತಿ (I_h); ಮತ್ತು (5) ಅವುಗಳ ಜೀವಕೋಶಗಳ ಸಣ್ಣ ಗಾತ್ರ (ಚಾಂಗ್ ಮತ್ತು ಕಿಟೈ, 1985; ಒ'ಡೊನೆಲ್ ಮತ್ತು ಗ್ರೇಸ್, 1993; ಲೆ ಮೊಯಿನ್ ಮತ್ತು ಬ್ಲಾಚ್, 1996; ಟಾವೆರ್ನಾ ಮತ್ತು ಇತರರು. 2008). ನೀಲಿ ಬೆಳಕನ್ನು (470 nm) ಇಡೀ ವೀಕ್ಷಣಾ ಕ್ಷೇತ್ರದ ಮೇಲೆ (0.78 mm) ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗಿದೆ²) −69 mV ಯ ಹಿಡುವಳಿ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದಲ್ಲಿ MSN ಗಳನ್ನು ವೋಲ್ಟೇಜ್-ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಮಾಡುವಾಗ. ಕೆಲವು ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳು ChR2 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿದವು, ಅವುಗಳ ಸೊಮಾಟಾದಲ್ಲಿ YFP ಪ್ರತಿದೀಪಕತೆಯಂತೆ ಸ್ಪಷ್ಟವಾಗಿದೆ (ಫಿಗರ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಬಾಣಗಳು 1C1, C3). ಅಂತಹ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳು ಗಣನೀಯ ಫೋಟೊಕರೆಂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿದವು, ಪ್ರಕಾಶಮಾನವಾದ ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಚೋದನೆಗಳು ದೊಡ್ಡ ಫೋಟೊಕರೆಂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಹೊರಹೊಮ್ಮಿಸುತ್ತವೆ (ಚಿತ್ರ (Figure1D) .1D). ಗರಿಷ್ಠ ದ್ಯುತಿವಿದ್ಯುಜ್ಜನಕ ವೈಶಾಲ್ಯ ಮತ್ತು ಬೆಳಕಿನ ತೀವ್ರತೆಯ ನಡುವಿನ ಸಂಬಂಧ (ಚಿತ್ರ (Figure1E) 1E) 0.054 ± 0.0023 mW / mm ನ ಅರ್ಧ-ಗರಿಷ್ಠ ಬೆಳಕಿನ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಹೊಂದಿದೆ² ಮತ್ತು 1.16 ± 0.16 nA ನ ಗರಿಷ್ಠ ಗರಿಷ್ಠ ವೈಶಾಲ್ಯ (ಸರಾಸರಿ ± sem, n = 4).

ಪ್ರಸ್ತುತ-ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, ಲಘು ದ್ವಿದಳ ಧಾನ್ಯಗಳ ರೈಲುಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ChR2 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ MSN ಗಳು ಎಪಿಗಳನ್ನು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹವಾಗಿ ವಜಾ ಮಾಡಿದೆ (10 ms ಅವಧಿ; ಚಿತ್ರ Figure1F) .1F). ಈ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ, 0.1 mW / mm ಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಿನ ಬೆಳಕಿನ ತೀವ್ರತೆಗಳು² ಎಪಿಗಳನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸಲು ಸಾಕಾಗಿತ್ತು (ಚಿತ್ರ (Figure1G, 1G, n = 5). 20 Hz ವರೆಗಿನ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಆವರ್ತನಗಳಲ್ಲಿ AP ಗಳನ್ನು ವಿಶ್ವಾಸಾರ್ಹವಾಗಿ ಪ್ರಚೋದಿಸಲಾಯಿತು, ಆದರೆ 40 Hz ನಲ್ಲಿ ಬೆಳಕು-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು ಎಪಿಗಳನ್ನು ಪ್ರಚೋದಿಸುವಲ್ಲಿ ಕಡಿಮೆ ಪರಿಣಾಮಕಾರಿಯಾದ ನಿರಂತರ ಡಿಪೋಲರೈಸೇಶನ್ ಅನ್ನು ಉಂಟುಮಾಡುತ್ತವೆ ಎಂದು ಸಂಕ್ಷೇಪಿಸಲಾಗಿದೆ (ಅಂಕಿಅಂಶಗಳು 1F, ಜಿ).

D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಸ್ಥಳೀಯ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಚಾಲನೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ

NAc ನಲ್ಲಿನ ಸ್ಥಳೀಯ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ಗಳಲ್ಲಿ D2R-MSN ಗಳ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ತನಿಖೆ ಮಾಡಲು, ChR2- negative ಣಾತ್ಮಕ MSN ಗಳಲ್ಲಿ ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಅಳೆಯುವಾಗ ನಾವು ChR2 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಪ್ರಿಸ್ನಾಪ್ಟಿಕ್ MSN ಅನ್ನು ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಟೆಡ್ ಮಾಡಿದ್ದೇವೆ (ಚಿತ್ರ (Figure2A) .2A). ನರಕೋಶವನ್ನು ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ Figure2A2A EYFP ಪ್ರತಿದೀಪಕ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಿಂದ ಮತ್ತು ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಿರುವಂತೆ ಅಲ್ಪ-ಲೇಟೆನ್ಸಿ ಫೋಟೊಕರೆಂಟ್‌ಗಳ ಅನುಪಸ್ಥಿತಿಯಿಂದ ಸೂಚಿಸಲ್ಪಟ್ಟಂತೆ ChR2 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲ Figure1D.1D. ಆದಾಗ್ಯೂ, ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳನ್ನು −69 mV ಯ ಸಂಭಾವ್ಯತೆಯಾಗಿ ಇರಿಸಿದಾಗ, 10 ms ಅವಧಿಯ ಬೆಳಕಿನ ಹೊಳಪುಗಳು 9.0 ± 0.42 ms ನ ಸುಪ್ತತೆಯ ನಂತರ ಹೊರಗಿನ ಪ್ರವಾಹಗಳನ್ನು ಹೊರಹೊಮ್ಮಿಸುತ್ತವೆ (ಚಿತ್ರ (Figure2B, 2B, n = 15). ಈ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಸ್ವರೂಪವನ್ನು ನಿರ್ಧರಿಸಲು, ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ಮೆಂಬರೇನ್ ಸಂಭಾವ್ಯತೆಯು −99 mV ರಿಂದ −39 mV ನಡುವೆ ಬದಲಾಗುತ್ತಿತ್ತು, ಆದರೆ ಒಂದು ಬೆಳಕಿನ ಫ್ಲ್ಯಾಷ್ ಅನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure2C) .2C). ಬೆಳಕು-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು ಪೊರೆಯ ಸಂಭಾವ್ಯತೆಯೊಂದಿಗೆ ಬದಲಾಗುತ್ತವೆ (ಚಿತ್ರ (Figure2D, 2D, n = 6) ಮತ್ತು ಧ್ರುವೀಯತೆಯನ್ನು −81 ± 3.4 mV ನಲ್ಲಿ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತಗೊಳಿಸಿದೆ. ನಮ್ಮ ಅಯಾನಿಕ್ ಪರಿಸ್ಥಿತಿಗಳಲ್ಲಿ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಅಯಾನುಗಳ ಸಮತೋಲನ ಸಾಮರ್ಥ್ಯ −80 mV ಆಗಿರುವುದರಿಂದ, ಬೆಳಕು-ಪ್ರೇರಿತ ಬಾಹ್ಯ ಪ್ರವಾಹಗಳು ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ GABA ನಿಂದ ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆ ವಹಿಸಿದ ಕ್ಲೋರೈಡ್ ಹರಿವಿನಿಂದಾಗಿರಬಹುದು_A ಗ್ರಾಹಕಗಳು. ಈ ಸಾಧ್ಯತೆಯನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು, GABA_A ಗ್ರಾಹಕ ವಿರೋಧಿ ಬೈಕುಕುಲೈನ್ (10 µM) ಅನ್ನು ಬಾಹ್ಯ ದ್ರಾವಣಕ್ಕೆ ಸೇರಿಸಲಾಗಿದೆ. ಈ drug ಷಧವು ಬೆಳಕು-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ಸಂಪೂರ್ಣವಾಗಿ ನಿರ್ಬಂಧಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure2B), 2B), ಬೆಳಕು-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳು GABAergic inhibitory postynaptic currents (IPSC ಗಳು) ಎಂದು ದೃ ming ಪಡಿಸುತ್ತದೆ.

ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ಗೆ ಅವರ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಆಧಾರದ ಮೇಲೆ, ನಾವು ರೆಕಾರ್ಡ್ ಮಾಡಿದ ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳನ್ನು ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ಒಂದಾಗಿ ವರ್ಗೀಕರಿಸಬಹುದು: (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್) ಕೋಶಗಳನ್ನು ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಎಪಿಗಳನ್ನು ಬೆಂಕಿಯಿಡಲು ಸಾಕಷ್ಟು ಪ್ರಮಾಣದ ChR4 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುತ್ತದೆ (ChR1 + / AP), ಇವುಗಳನ್ನು ಮೇಲೆ ವಿವರಿಸಲಾಗಿದೆ; (2) ಜೀವಕೋಶಗಳು ಅಲ್ಪ ಪ್ರಮಾಣದ ChR2 ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುತ್ತವೆ, ಇದು ಬೆಳಕಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಸಬ್‌ಥ್ರೆಶೋಲ್ಡ್ ಡಿಪೋಲರೈಸೇಶನ್ ಅನ್ನು ಸ್ಪಷ್ಟಪಡಿಸುತ್ತದೆ (ChR2 + / AP ಇಲ್ಲ); (2) ChR2 ನ ಯಾವುದೇ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಹೊಂದಿರದ ಆದರೆ ChR3 (ChR2− / IPSC) ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವ ಪ್ರಿಸ್ನಾಪ್ಟಿಕ್ MSN ಗಳಿಂದ ಬೆಳಕು-ಪ್ರೇರಿತ IPSC ಗಳನ್ನು ಸ್ವೀಕರಿಸಿದೆ; ಮತ್ತು (2) ಇತರ MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ IPSC ಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸದ ChR2- negative ಣಾತ್ಮಕ ಕೋಶಗಳು (ChR4− / ಇಲ್ಲ IPSC). ಈ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ವಿಭಾಗಗಳಲ್ಲಿನ ಕೋಶಗಳ ಸಾಪೇಕ್ಷ ಅನುಪಾತವನ್ನು ಚಿತ್ರದಲ್ಲಿ ತೋರಿಸಲಾಗಿದೆ Figure2E2E (n = 53). ಒಟ್ಟಾರೆಯಾಗಿ, ಸುಮಾರು ಅರ್ಧದಷ್ಟು ಜೀವಕೋಶಗಳು (45.3%) ChR2 (ಗುಂಪುಗಳ ಮೊತ್ತ (1) ಮತ್ತು (2)) ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸಿವೆ. ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ನಾವು ರೆಕಾರ್ಡ್ ಮಾಡಿದ ಯಾವುದೇ ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳು ಫೋಟೊಕರೆಂಟ್‌ಗಳು ಮತ್ತು ಐಪಿಎಸ್‌ಸಿಗಳನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸಿಲ್ಲ; ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಆರ್-ಪಾಸಿಟಿವ್ ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳು ಎನ್‌ಎಸಿ ಒಳಗೆ ಇದೇ ಜೀವಕೋಶದ ಜನಸಂಖ್ಯೆಯ ಇತರ ಸದಸ್ಯರನ್ನು ಆವಿಷ್ಕರಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಇದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

ಬೆಳಕಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳ ಈ ವರ್ಗೀಕರಣವು ChR2 + / ಇಲ್ಲ ಎಪಿ ಕೋಶಗಳ (ಗುಂಪು 2) ಮತ್ತು ChR2− / ಇಲ್ಲ IPSC ಕೋಶಗಳ (ಗುಂಪು 4) ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್ ಚಟುವಟಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗುವ ಯಾವುದೇ ವಿದ್ಯುತ್ ಸಂಕೇತಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಹೀಗಾಗಿ, ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್ ಕಾರ್ಯದ ಮೇಲೆ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ನ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ವ್ಯಾಖ್ಯಾನಿಸಲು, ನಾವು ChR2 + / AP MSN ಗಳ (ಗುಂಪು 1) ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳನ್ನು ವಿವರವಾಗಿ ನಿರೂಪಿಸಿದ್ದೇವೆ, ಇದು NAc ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಟೆಡ್ ಆಗಿರುವಾಗ AP ಗಳನ್ನು ಉತ್ಪಾದಿಸುತ್ತದೆ, ಮತ್ತು ChR2− / IPSC ಕೋಶಗಳು (ಗುಂಪು 3) ChR2 + / AP MSN ಗಳಿಗೆ ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ಆಗಿರುವುದರಿಂದ ಅವು ಬೆಳಕು-ಪ್ರೇರಿತ ಐಪಿಎಸ್‌ಸಿಗಳನ್ನು ಸ್ವೀಕರಿಸುತ್ತವೆ. NAc ನಲ್ಲಿನ ChR2 + / AP ಮತ್ತು ChR2− / IPSC ಕೋಶಗಳನ್ನು ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳಾಗಿ ಗುರುತಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure3A) .3A). ಈ ಎರಡು ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ರೂಪವಿಜ್ಞಾನ ಅಥವಾ ಎಲೆಕ್ಟ್ರೋಫಿಸಿಯೋಲಾಜಿಕಲ್ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ವ್ಯತ್ಯಾಸಗಳಿಲ್ಲ. ಉದಾಹರಣೆಗೆ, ಆ ಎರಡು ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿನ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಸೊಮಾಟಾ ಗಾತ್ರದಲ್ಲಿ ಹೋಲುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure3B) .3B). ಇದರ ಜೊತೆಯಲ್ಲಿ, ಅವರ RMP ಗಳು (−83.0 ± 1.7 ವರ್ಸಸ್ −85.0 ± 1.8 mV; ಸರಾಸರಿ ± sem; n = 10, ಚಿತ್ರ Figure3C) 3C) ಮತ್ತು ಇನ್ಪುಟ್ ಪ್ರತಿರೋಧಗಳು (113 ± 15 ವರ್ಸಸ್ 133 ± 13 MΩ, n = 6, ಚಿತ್ರ Figure3D) 3D) ಸಹ ಭಿನ್ನವಾಗಿರಲಿಲ್ಲ (p > 0.05 ಎರಡು ಬಾಲದ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳ t-ಟೆಸ್ಟ್) ಪ್ರಸ್ತುತ ದ್ವಿದಳ ಧಾನ್ಯಗಳಿಗೆ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಅವರ ಎಪಿ ಗುಂಡಿನ ಮಾದರಿಗಳು (ಅಂಕಿ 3E, F.) ಸಹ ಹೋಲುತ್ತದೆ (p > 0.05 ಎರಡು ಬಾಲದ ವಿದ್ಯಾರ್ಥಿಗಳ t-ಟೆಸ್ಟ್, n = 6). ಸಂಕ್ಷಿಪ್ತವಾಗಿ ಹೇಳುವುದಾದರೆ, NAc ನಲ್ಲಿನ D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಸ್ಥಳೀಯ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ಗಳನ್ನು ಪೋಸ್ಟ್‌ನ್ಯಾಪ್ಟಿಕ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುತ್ತದೆ, ಅದು D2R-MSN ಗಳಿಗೆ ಹೋಲುತ್ತದೆ ಆದರೆ D2R ಅನ್ನು ವ್ಯಕ್ತಪಡಿಸುವುದಿಲ್ಲ.

ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆಯಲ್ಲಿ NAc D2R-MSN ಗಳ ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ಪ್ರಚೋದನೆ

ಇದರ ನಡವಳಿಕೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ನಾವು ಮುಂದಿನದರಲ್ಲಿ ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ್ದೇವೆ ಜೀವಿಯಲ್ಲಿ NAc D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್. ಏಕೆಂದರೆ ಡಾರ್ಸಲ್ ಸ್ಟ್ರೈಟಮ್‌ನಲ್ಲಿನ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ಆರ್-ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ (ಕ್ರಾವಿಟ್ಜ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2010), ತಳದ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಮೇಲೆ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಡಿಎಕ್ಸ್ಎನ್ಎಮ್ಎಕ್ಸ್ಆರ್-ಎಂಎಸ್ಎನ್ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯ ಪರಿಣಾಮಗಳನ್ನು ನಿರೂಪಿಸುವ ಮೂಲಕ ನಾವು ಪ್ರಾರಂಭಿಸಿದ್ದೇವೆ. ಈ ಉದ್ದೇಶಕ್ಕಾಗಿ, D2R-Cre ಇಲಿಗಳನ್ನು DIO-AAV-ChR2-EYFP ವೈರಸ್‌ನೊಂದಿಗೆ ದ್ವಿಪಕ್ಷೀಯವಾಗಿ NAc (D2-Cre (+) NAc-ChR2) ಗೆ ಚುಚ್ಚಲಾಯಿತು. D2R-MSN ಗಳನ್ನು ನಂತರ ಆಪ್ಟಿಕಲ್ ಫೈಬರ್ ಮೂಲಕ NAc ಗೆ ತಲುಪಿಸಿದ ನೀಲಿ ಬೆಳಕಿನೊಂದಿಗೆ (2 nm, 473 ms ನಾಡಿ ಅವಧಿ, 5 Hz) ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಟ್ ಮಾಡಲಾಯಿತು. ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆ ರೆಕಾರ್ಡಿಂಗ್ ಕೊಠಡಿಯಲ್ಲಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಇರಿಸಿದಾಗ 20 ನಿಮಿಷದ ಅಧಿವೇಶನದೊಳಗೆ ನಾಲ್ಕು 3- ನಿಮಿಷದ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮುಲಿಗಳನ್ನು ಅನ್ವಯಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure4A) .4A). ಸಮಾನಾಂತರವಾಗಿ, ಕಂಟ್ರೋಲ್ ಅಲ್ಲದ ಡಬ್ಲ್ಯೂಟಿ ಲಿಟರ್ಮೇಟ್ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಇದೇ ರೀತಿ ವೈರಸ್‌ನಿಂದ ಚುಚ್ಚಲಾಗುತ್ತದೆ ಮತ್ತು ಇದೇ ರೀತಿಯ ನೀಲಿ ಬೆಳಕಿನ ಬೆಳಕನ್ನು ಪಡೆಯಿತು. D2-Cre (+) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳು ನಿಯಂತ್ರಣ D2R-Cre (-) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳಿಗೆ ಹೋಲಿಸಿದರೆ ಅಂಕಿಅಂಶಗಳನ್ನು ಹೋಲಿಸಬಹುದಾದ ಅಥವಾ ಸ್ವಲ್ಪ ಎತ್ತರದ ತಳದ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಪ್ರದರ್ಶಿಸುತ್ತದೆ. 4B, ಸಿ). D2-Cre (+) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಇಳಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಯಿತು, ಇದು ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಚೋದನೆಯು ನಿಂತ ನಂತರ ಚೇತರಿಸಿಕೊಂಡಿತು (ಚಿತ್ರ (Figure4B) .4B). ನಿಯಂತ್ರಣ D2R-Cre (-) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಅಂತಹ ಯಾವುದೇ ಪರಿಣಾಮಗಳು ಕಂಡುಬಂದಿಲ್ಲ (ಅಂಕಿಅಂಶಗಳು 4B, ಸಿ), ಮೆದುಳಿನ ಅಂಗಾಂಶವನ್ನು ಬಿಸಿ ಮಾಡುವಂತಹ ನಿರ್ದಿಷ್ಟವಲ್ಲದ ಪರಿಣಾಮಗಳಿಗಿಂತ ಹೆಚ್ಚಾಗಿ, ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ನ ಪರಿಣಾಮಗಳು ChR2 ಅನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವುದರಿಂದ ಉಂಟಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ, ನಮ್ಮ ಡೇಟಾವು NAc ನಲ್ಲಿನ D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಇಳಿಕೆಗೆ ಕಾರಣವಾಗಿದೆ ಎಂದು ಸೂಚಿಸಿದೆ.

ಈ ಫಲಿತಾಂಶಗಳು NAc ಯೊಳಗಿನ D2R-MSN ಗಳ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುವ ನಮ್ಮ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಸ್ಥಾಪಿಸಿವೆ ಜೀವಿಯಲ್ಲಿ. ಕೊಕೇನ್‌ನ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಆಡಳಿತಕ್ಕೆ ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಮೇಲೆ D2R-MSN ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಪ್ರಭಾವವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು ನಾವು ಮುಂದಿನ ಈ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಬಳಸಿದ್ದೇವೆ. ಬಿಹೇವಿಯರಲ್ ಸೆನ್ಸಿಟೈಸೇಶನ್ ಎನ್ನುವುದು ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸಲು ನಂತರದ drug ಷಧಿ ಮಾನ್ಯತೆಗಳ ಸಾಮರ್ಥ್ಯವನ್ನು ಹೆಚ್ಚಿಸಲು ಕೊಕೇನ್ ನಂತಹ ಸೈಕೋಸ್ಟಿಮ್ಯುಲಂಟ್‌ಗಳಿಗೆ ಆರಂಭಿಕ ಮಾನ್ಯತೆ ನೀಡುವ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಈ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯನ್ನು ದೀಕ್ಷಾ ಮತ್ತು ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಹಂತಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಬಹುದು: ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಪ್ರೇರೇಪಿಸುವ ತಕ್ಷಣದ ನರ ಘಟನೆಗಳನ್ನು ದೀಕ್ಷೆ ವಿವರಿಸುತ್ತದೆ (ವಾಂಡರ್ಸ್‌ಚುರೆನ್ ಮತ್ತು ಕಾಲಿವಾಸ್, 2000; ಸಿಮ್ ಮತ್ತು ಇತರರು., 2013), ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ drug ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯ ನಂತರವೂ ಮುಂದುವರಿಯುವ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ರೂಪವೆಂದು ತಿಳಿದುಬಂದಿದೆ (ವಾಂಡರ್ಸ್‌ಚುರೆನ್ ಮತ್ತು ಕಾಲಿವಾಸ್, 2000; ಸಿಮ್ ಮತ್ತು ಇತರರು., 2013). ಆದ್ದರಿಂದ ನಾವು ಕೊಕೇನ್‌ನ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಇಂಟ್ರಾಪೆರಿಟೋನಿಯಲ್ (ಐಪಿ) ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆಯನ್ನು ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ್ದೇವೆ, ಆದರೆ ಈ ಪ್ರತಿಯೊಂದು ಹಂತದಲ್ಲೂ ಎನ್‌ಎಸಿ ಯಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ಆರ್-ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸಲು ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ಸ್ ಅನ್ನು ಬಳಸುತ್ತೇವೆ.

3 ದಿನಗಳಲ್ಲಿ ಲವಣಯುಕ್ತ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ಅಭ್ಯಾಸದ ನಂತರ, ಸತತ ದಿನಗಳಲ್ಲಿ ಇಲಿಗಳನ್ನು ಕೊಕೇನ್ (15 mg / kg) ಚುಚ್ಚುಮದ್ದು ಮಾಡಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಪ್ರತಿ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ನಂತರ 5 ನಿಮಿಷಕ್ಕೆ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳನ್ನು ದಾಖಲಿಸಲಾಗಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure5A) .5A). ಕೊಕೇನ್ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ಮೊದಲು 30 ನಿಮಿಷದ ಸೆಷನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮುಲಿಗಳನ್ನು ವಿತರಿಸಲಾಯಿತು, 3 ನಿಮಿಷದ ಬೆಳಕನ್ನು 5 ನಿಮಿಷದ ಅವಧಿಯೊಂದಿಗೆ ಬೆಳಕು ಆಫ್ ಮಾಡಿದ ನಂತರ (ಚಿತ್ರ (Figure5A) .5A). NAc ನಲ್ಲಿನ D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ತಳದ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯನ್ನು ಕಡಿಮೆ ಮಾಡುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure4), 4), ಕೊಕೇನ್ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಗಳೊಂದಿಗೆ ಸಂಭವನೀಯ ಹಸ್ತಕ್ಷೇಪವನ್ನು ತಪ್ಪಿಸಲು ಕೊಕೇನ್ ಆಡಳಿತಕ್ಕೆ ಮುಂಚಿತವಾಗಿ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮುಲಿಗಳನ್ನು ವಿತರಿಸಲಾಯಿತು.

ನಿಯಂತ್ರಣ D2-Cre (-) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳು ಮತ್ತು D2-Cre (+) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳು ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಕೊಕೇನ್ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಗಮನಾರ್ಹ ಹೆಚ್ಚಳವನ್ನು ತೋರಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure5B), 5B), ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ಪ್ರಾರಂಭವನ್ನು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. NAc ನಲ್ಲಿನ D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭದ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತಿಲ್ಲ, ಏಕೆಂದರೆ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆ D2-Cre (+) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಹೋಲುತ್ತದೆ ಮತ್ತು D2-Cre (-) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಹೋಲುತ್ತದೆ.

15 ದಿನಗಳವರೆಗೆ ಕೊಕೇನ್ (5 mg / kg) ಚುಚ್ಚುಮದ್ದನ್ನು ಪುನರಾವರ್ತಿಸುವ ಮೂಲಕ ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ನಂತರ, 14 ದಿನಗಳವರೆಗೆ drug ಷಧಿಯನ್ನು ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳಲಾಯಿತು ಮತ್ತು ಕಡಿಮೆ ಪ್ರಮಾಣದ ಕೊಕೇನ್ (10 mg) ನೊಂದಿಗೆ ಇಲಿಗಳಿಗೆ ಸವಾಲು ಹಾಕುವ ಮೂಲಕ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಮಟ್ಟವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲಾಯಿತು. /ಕೇಜಿ). ಸಂವೇದನೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ drug ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯ ನಂತರವೂ ಮುಂದುವರಿಯುವ ವರ್ತನೆಯ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯ ದೀರ್ಘಕಾಲೀನ ರೂಪವಾಗಿದೆ (ಸ್ಟೆಕೆಟೀ ಮತ್ತು ಕಾಲಿವಾಸ್, 2011; ಸಿಮ್ ಮತ್ತು ಇತರರು., 2013). ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಆರ್-ಎಂಎಸ್‌ಎನ್‌ಗಳ ಪಾತ್ರವನ್ನು ಪರೀಕ್ಷಿಸಲು, ಕೊಕೇನ್ ಆಡಳಿತಕ್ಕೆ ಮುಂಚೆಯೇ ಎನ್‌ಎಸಿ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಟೆಡ್ ಆಗಿತ್ತು (ಚಿತ್ರ (Figure5A) 5A) ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನಿಂದ ಪ್ರಚೋದಿಸಲ್ಪಟ್ಟ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆಯ ಪ್ರಮಾಣವಾಗಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯನ್ನು ಅಳೆಯಲಾಗುತ್ತದೆ.

ಇಲಿಗಳ ಕೊಕೇನ್-ಪೂರ್ವ ಸಂಸ್ಕರಿಸಿದ ಎರಡೂ ಗುಂಪುಗಳಲ್ಲಿ - D2-Cre (-) NAc-ChR2 ಇಲಿಗಳು (D2-Cre (-) :: coc-coc) ಮತ್ತು D2-Cre (+) NAc-ChR2 (D2-Cre (+): : coc-coc) sens ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ದೃ expression ವಾದ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಸಂಭವಿಸಿದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure5C) .5C). ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರಚೋದಿತ ಲೊಕೊಮೊಶನ್ ಬದಲಾವಣೆಗಳ ಸಮಯದ ಕೋರ್ಸ್ ಎರಡು ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವೆ ಹೋಲುತ್ತದೆ (ಚಿತ್ರ (Figure5C), 5C), ಎರಡು ಗುಂಪುಗಳ ನಡುವೆ ಯಾವುದೇ ಮಹತ್ವದ ವ್ಯತ್ಯಾಸವಿಲ್ಲ. ಒಟ್ಟಿಗೆ ತೆಗೆದುಕೊಂಡರೆ, ಈ ಎರಡು ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಪ್ರಯೋಗಗಳು NAc ನಲ್ಲಿ D2R-MSN ಗಳನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವುದರಿಂದ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಪ್ರಾರಂಭ ಅಥವಾ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುವುದಿಲ್ಲ ಎಂದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

Drug ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ NAc D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್

ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಕೊಕೇನ್ ಮಾನ್ಯತೆಯ ನಂತರ drug ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವಿಕೆಯ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಉಂಟಾಗುವ ದೀರ್ಘಕಾಲದ ಒತ್ತಡವು ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಆರ್-ಅವಲಂಬಿತ ರೂಪಾಂತರ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನದ ಆಯ್ದ ನೇಮಕಾತಿಗೆ ಕಾರಣವಾಗುತ್ತದೆ, ಇದು ಎನ್‌ಎಸಿ (ಸಿಮ್ ಮತ್ತು ಇತರರು, 2013). ಮಾದಕವಸ್ತು ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಕಾರ್ಯವಿಧಾನಗಳು ಮಾದಕವಸ್ತು-ಸೂಚಿಸಲಾದ ಸಂವೇದನೆಯಲ್ಲಿ ತೊಡಗಿರುವವರಿಂದ ಭಿನ್ನವಾಗಿವೆ ಎಂದು ಇದು ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ. ಆದ್ದರಿಂದ ಕೊಕೇನ್ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ NAc ನಲ್ಲಿನ D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರುತ್ತದೆಯೆ ಎಂದು ನಾವು ಮುಂದಿನದರಲ್ಲಿ ಪರಿಶೀಲಿಸಿದ್ದೇವೆ.

ಮೇಲಿನಂತೆ ಕೊಕೇನ್ ಅನ್ನು ಪದೇ ಪದೇ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದಿನ ಮೂಲಕ ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ನಂತರ, 2 ದಿನದ ವಾಪಸಾತಿ ಅವಧಿಗೆ D2-Cre (-) ಮತ್ತು D14-Cre (+) ಇಲಿಗಳನ್ನು ಎರಡು ಗುಂಪುಗಳಾಗಿ ವಿಂಗಡಿಸಲಾಗಿದೆ: ಒಂದು ಗುಂಪನ್ನು ದೈನಂದಿನ ನೀಲಿ-ಬೆಳಕಿನ ಪ್ರಚೋದನೆಗೆ ಒಳಪಡಿಸಲಾಯಿತು 1 h ಗಾಗಿ NAC (3 min × 8 ಬಾರಿ), ಆದರೆ ಇತರ ಗುಂಪು ಇರಲಿಲ್ಲ (ಚಿತ್ರ (Figure6A) .6A). ಕೊಕೇನ್ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ NAc ನಲ್ಲಿ D2R-MSN ಗಳ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ D2-Cre (-) :: ಕೋಕ್-ಕೋಕ್ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯ ಮೇಲೆ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರಲಿಲ್ಲ. (Figure6B) .6B). ಇದಕ್ಕೆ ವ್ಯತಿರಿಕ್ತವಾಗಿ, D2-Cre (+) :: coc-coc ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ, drug ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್‌ನಿಂದ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಗಮನಾರ್ಹವಾಗಿ ಗಮನ ಸೆಳೆಯಿತು (ಚಿತ್ರ (Figure6B), 6B), ಲೊಕೊಮೊಶನ್ ನ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ಪ್ರಚೋದನೆಯ ಸಮಯದ ಕೋರ್ಸ್ ಪರಿಣಾಮ ಬೀರದಿದ್ದರೂ (ಚಿತ್ರ (Figure6C) .6C). ಹೀಗಾಗಿ, drug ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ NAc ಯ D2R-MSN ಗಳ ಫೋಟೊಸ್ಟಿಮ್ಯುಲೇಶನ್ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನಡವಳಿಕೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ ಕಡಿಮೆಯಾಗಿದೆ (ಕೊಕೇನ್ × ಫೋಟೋ-ಉದ್ದೀಪನ ಸಂವಹನ F_(1,18) = 11.08, P = 0.0037, ಚಿತ್ರ Figure6B) .6B). Data ಷಧಿ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಅವಧಿಯಲ್ಲಿ D2R-NAc MSN ಗಳನ್ನು ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವುದು ಕೊಕೇನ್-ಬೇಡಿಕೆ ಮತ್ತು ಮರುಕಳಿಸುವ ನಡವಳಿಕೆಗಳನ್ನು ಪ್ರಭಾವಿಸುತ್ತದೆ ಎಂದು ಈ ಡೇಟಾ ಸೂಚಿಸುತ್ತದೆ.

ಮಿದುಳಿನ ಸಂಶೋಧನಾ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮದಿಂದ (ಜಾ-ಹ್ಯುನ್ ಬೈಕ್‌ಗೆ; ಗ್ರಾಂಟ್ ನಂ. 2013M3C7A1056101) ಮತ್ತು ಜೈವಿಕ ಮತ್ತು ವೈದ್ಯಕೀಯ ತಂತ್ರಜ್ಞಾನದಿಂದ ವಿಜ್ಞಾನ, ಐಸಿಟಿ ಮತ್ತು ಭವಿಷ್ಯದ ಯೋಜನಾ ಸಚಿವಾಲಯದಿಂದ ಧನಸಹಾಯ ಪಡೆದ ನ್ಯಾಷನಲ್ ರಿಸರ್ಚ್ ಫೌಂಡೇಶನ್ ಆಫ್ ಕೊರಿಯಾ (ಎನ್‌ಆರ್‌ಎಫ್) ಈ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ಬೆಂಬಲಿಸಿದೆ. ಅಭಿವೃದ್ಧಿ ಕಾರ್ಯಕ್ರಮ (ಜಾ-ಹ್ಯುನ್ ಬೈಕ್‌ಗೆ; ಗ್ರಾಂಟ್ ನಂ. 2013M3A9D5072550) ಮತ್ತು ವಿಜ್ಞಾನ, ಐಸಿಟಿ ಮತ್ತು ಭವಿಷ್ಯದ ಯೋಜನಾ ಸಚಿವಾಲಯದಿಂದ (ಜಾರ್ಜ್ ಜೆ. ಅಗಸ್ಟೀನ್‌ಗೆ) ಕೊರಿಯಾದ ನ್ಯಾಷನಲ್ ರಿಸರ್ಚ್ ಫೌಂಡೇಶನ್ (ಎನ್‌ಆರ್‌ಎಫ್) ನ ವಿಶ್ವ ದರ್ಜೆಯ ಸಂಸ್ಥೆ (ಡಬ್ಲ್ಯುಸಿಐ) ಕಾರ್ಯಕ್ರಮ. ; WCI 2009-003), ಹಾಗೆಯೇ ಕೊರಿಯಾ ಯೂನಿವರ್ಸಿಟಿ ಗ್ರಾಂಟ್ (ಜಾ-ಹ್ಯುನ್ ಬೈಕ್‌ಗೆ) ಮತ್ತು ಸಿಂಗಪುರದ ನ್ಯಾಷನಲ್ ರಿಸರ್ಚ್ ಫೌಂಡೇಶನ್‌ನಿಂದ (ಜಾರ್ಜ್ ಜೆ. ಅಗಸ್ಟೀನ್‌ಗೆ) ಸಿಆರ್‌ಪಿ ಅನುದಾನ.

1. ಬೈಕ್ ಜೆಹೆಚ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಪ್ರತಿಫಲ-ಸಂಬಂಧಿತ ನಡವಳಿಕೆಗಳಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್. ಮುಂಭಾಗ. ನರ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್‌ಗಳು 2013: 7 152 / fncir.10.3389 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
2. ಬೈಕ್ ಜೆಹೆಚ್, ಪಿಕೆಟ್ಟಿ ಆರ್., ಸೈಯಾರ್ಡಿ ಎ., ಥಿಯೆರಿಯಟ್ ಜಿ., ಡೈರಿಚ್ ಎ., ಡೆಪಾಲಿಸ್ ಎ., ಮತ್ತು ಇತರರು. (1995). ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಕೊರತೆಯ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿನ ಪಾರ್ಕಿನ್ಸೋನಿಯನ್ ತರಹದ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ದುರ್ಬಲತೆ. ನೇಚರ್ 2, 377 - 424 428 / 10.1038a377424 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
3. ಬೆರಿಡ್ಜ್ ಕೆಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಪ್ರತಿಫಲದಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್‌ನ ಪಾತ್ರದ ಕುರಿತು ಚರ್ಚೆ: ಪ್ರೋತ್ಸಾಹಕ ಪ್ರಾಮುಖ್ಯತೆಗಾಗಿ ಪ್ರಕರಣ. ಸೈಕೋಫಾರ್ಮಾಕಾಲಜಿ (ಬರ್ಲ್) 2007, 191 - 391 431 / s10.1007-00213-006-x [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
4. ಬೊಕ್ ಆರ್., ಶಿನ್ ಜೆಹೆಚ್, ಕಪ್ಲಾನ್ ಎಆರ್, ಡೋಬಿ ಎ., ಮಾರ್ಕಿ ಇ., ಕ್ರಾಮರ್ ಪಿಎಫ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2013). ಒಟ್ಟುಗೂಡಿಸುವ ಪರೋಕ್ಷ ಮಾರ್ಗವನ್ನು ಬಲಪಡಿಸುವುದು ಕಂಪಲ್ಸಿವ್ ಕೊಕೇನ್ ಬಳಕೆಗೆ ಸ್ಥಿತಿಸ್ಥಾಪಕತ್ವವನ್ನು ಉತ್ತೇಜಿಸುತ್ತದೆ. ನ್ಯಾಟ್. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 16, 632 - 638 10.1038 / nn.3369 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
5. ಬೊಕ್ಲಿಷ್ ಸಿ., ಪ್ಯಾಸ್ಕೋಲಿ ವಿ., ವಾಂಗ್ ಜೆಸಿ, ಹೌಸ್ ಡಿಆರ್, ಯವೊನ್ ಸಿ., ಡಿ ರೂ ಎಂ., ಮತ್ತು ಇತರರು. (2013). ಕುಹರದ ಟೆಗ್ಮೆಂಟಲ್ ಪ್ರದೇಶದಲ್ಲಿ GABA ಪ್ರಸರಣದ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದಿಂದ ಕೊಕೇನ್ ಡೋಪಮೈನ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳನ್ನು ತಡೆಯುತ್ತದೆ. ವಿಜ್ಞಾನ 341, 1521 - 1525 10.1126 / science.1237059 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
6. ಬೌಡ್ರೂ ಎಸಿ, ರೀಮರ್ಸ್ ಜೆಎಂ, ಮಿಲೋವಾನೋವಿಕ್ ಎಂ., ವುಲ್ಫ್ ಎಂಇ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಇಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಜೀವಕೋಶದ ಮೇಲ್ಮೈ ಎಎಮ್‌ಪಿಎ ಗ್ರಾಹಕಗಳು ಕೊಕೇನ್ ಹಿಂತೆಗೆದುಕೊಳ್ಳುವ ಸಮಯದಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಾಗುತ್ತವೆ ಆದರೆ ಮೈಟೊಜೆನ್-ಸಕ್ರಿಯ ಪ್ರೋಟೀನ್ ಕೈನೇಸ್‌ಗಳ ಬದಲಾದ ಸಕ್ರಿಯಗೊಳಿಸುವಿಕೆಯೊಂದಿಗೆ ಕೊಕೇನ್ ಸವಾಲಿನ ನಂತರ ಆಂತರಿಕವಾಗುತ್ತವೆ. ಜೆ. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2007, 27 - 10621 10635 / jneurosci.10.1523-2163 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
7. ಬೌಡ್ರೂ ಎಸಿ, ವುಲ್ಫ್ ಎಂಇ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಕೊಕೇನ್‌ಗೆ ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಹೆಚ್ಚಿದ ಎಎಮ್‌ಪಿಎ ಗ್ರಾಹಕ ಮೇಲ್ಮೈ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯೊಂದಿಗೆ ಸಂಬಂಧಿಸಿದೆ. ಜೆ. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2005, 25 - 9144 9151 / jneurosci.10.1523-2252 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
8. ಚಂದ್ರ ಆರ್., ಲೆನ್ಜ್ ಜೆಡಿ, ಗ್ಯಾನ್‌ಕಾರ್ಜ್ ಎಎಮ್, ಚೌಧರಿ ಡಿ., ಶ್ರೋಡರ್ ಜಿಎಲ್, ಹಾನ್ ಎಂಹೆಚ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2013). ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳನ್ನು ಒಳಗೊಂಡಿರುವ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಆರ್‌ನ ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ಪ್ರತಿಬಂಧವು ಟಿಯಾಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್‌ನ ಕೊಕೇನ್-ಮಧ್ಯಸ್ಥಿಕೆಯ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಬದಲಾಯಿಸುತ್ತದೆ. ಮುಂಭಾಗ. ಮೋಲ್. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 1: 1 6 / fnmol.13 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
9. ಚಾಂಗ್ ಎಚ್‌ಟಿ, ಕಿಟೈ ಎಸ್‌ಟಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್‌ನ ಪ್ರೊಜೆಕ್ಷನ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳು: ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಲೇಬಲಿಂಗ್ ಅಧ್ಯಯನ. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. 1985, 347 - 112 116 / 10.1016-0006 (8993) 85-90894 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
10. ಚೌಸ್ಮರ್ ಎಎಲ್, ಎಲ್ಮರ್ ಜಿಐ, ರುಬಿನ್‌ಸ್ಟೈನ್ ಎಂ., ಲೋ ಎಮ್ಜೆ, ಗ್ರ್ಯಾಂಡಿ ಡಿಕೆ, ಕ್ಯಾಟ್ಜ್ ಜೆಎಲ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ಲೊಕೊಮೊಟರ್ ಚಟುವಟಿಕೆ ಮತ್ತು ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್ ರೂಪಾಂತರಿತ ಇಲಿಗಳಲ್ಲಿ ಕೊಕೇನ್ ತಾರತಮ್ಯ. ಸೈಕೋಫಾರ್ಮಾಕಾಲಜಿ (ಬರ್ಲ್) 2002, 2 - 163 54 / s61-10.1007-00213-y [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
11. ಚೆವಲಿಯರ್ ಜಿ., ಡೆನಿಯೌ ಜೆಎಂ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಕಾರ್ಯಗಳ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಮೂಲ ಪ್ರಕ್ರಿಯೆಯಾಗಿ ಡಿಸ್ನಿಬಿಷನ್. ಟ್ರೆಂಡ್ಸ್ ನ್ಯೂರೋಸಿ. 1990, 13 - 277 280 / 10.1016-0166 (2236) 90-n [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
12. ಕ್ಜುಬೈಕೊ ಯು., ಪ್ಲೆನ್ಜ್ ಡಿ. (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಸ್ಪೈನಿ ಪ್ರೊಜೆಕ್ಷನ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ನಡುವೆ ವೇಗದ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ರಸರಣ. ಪ್ರೊಕ್. ನ್ಯಾಟ್ಲ್. ಅಕಾಡ್. ವಿಜ್ಞಾನ. USA 2002, 99 - 15764 15769 / pnas.10.1073 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
13. ಫರ್ಗುಸನ್ ಎಸ್‌ಎಂ, ಎಸ್ಕೆನಾಜಿ ಡಿ., ಇಶಿಕಾವಾ ಎಂ., ವನಾತ್ ಎಮ್ಜೆ, ಫಿಲಿಪ್ಸ್ ಪಿಇ, ಡಾಂಗ್ ವೈ., ಮತ್ತು ಇತರರು. (2011). ಅಸ್ಥಿರ ನರಕೋಶದ ಪ್ರತಿಬಂಧವು ಸಂವೇದನೆಯಲ್ಲಿ ಪರೋಕ್ಷ ಮತ್ತು ನೇರ ಮಾರ್ಗಗಳ ವಿರುದ್ಧ ಪಾತ್ರಗಳನ್ನು ಬಹಿರಂಗಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ನ್ಯಾಟ್. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 14, 22 - 24 10.1038 / nn.2703 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
14. ಗೊಟೊ ವೈ., ಗ್ರೇಸ್ ಎಎ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಗುರಿ-ನಿರ್ದೇಶಿತ ನಡವಳಿಕೆಯಲ್ಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್‌ನ ಲಿಂಬಿಕ್ ಮತ್ತು ಕಾರ್ಟಿಕಲ್ ಡ್ರೈವ್‌ನ ಡೋಪಮಿನರ್ಜಿಕ್ ಮಾಡ್ಯುಲೇಷನ್. ನ್ಯಾಟ್. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2005, 8 - 805 812 / nn10.1038 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
15. ಗ್ರೊಫೊವ್ I. (1975). ಸಬ್ಸ್ಟಾಂಟಿಯಾ ನಿಗ್ರಾಗೆ ಪ್ರಕ್ಷೇಪಿಸುವ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಮತ್ತು ಪ್ಯಾಲಿಡಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಗುರುತಿಸುವಿಕೆ. ಮುಲ್ಲಂಗಿ ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್‌ನ ಹಿಮ್ಮೆಟ್ಟುವ ಆಕ್ಸೋನಲ್ ಸಾಗಣೆಯ ಮೂಲಕ ಪ್ರಾಯೋಗಿಕ ಅಧ್ಯಯನ. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. 91, 286 - 291 10.1016 / 0006-8993 (75) 90550-8 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
16. ಗ್ರೂಟರ್ ಬಿಎ, ರಾಬಿಸನ್ ಎಜೆ, ನೆವ್ ಆರ್ಎಲ್, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ, ಮಾಲೆಂಕಾ ಆರ್ಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). Os ಫಾಸ್ಬಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ನೇರ ಮತ್ತು ಪರೋಕ್ಷ ಮಾರ್ಗ ಕಾರ್ಯವನ್ನು ವಿಭಿನ್ನವಾಗಿ ಮಾರ್ಪಡಿಸುತ್ತದೆ. ಪ್ರೊಕ್. ನ್ಯಾಟ್ಲ್. ಅಕಾಡ್. ವಿಜ್ಞಾನ. USA 2013, 110 - 1923 1928 / pnas.10.1073 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
17. ಗುಸ್ಟಾಫ್ಸನ್ ಎನ್., ಗಿರೀಶ್-ಧರ್ಮರಾಜ್ ಇ., ಕ್ಜುಬೈಕೊ ಯು., ಬ್ಲ್ಯಾಕ್‌ವೆಲ್ ಕೆಟಿ, ಪ್ಲೆನ್ಜ್ ಡಿ. (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿನ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಮೈಕ್ರೊ ಸರ್ಕಿಟ್‌ನಲ್ಲಿ ಪ್ರತಿಕ್ರಿಯೆ ಮತ್ತು ಫೀಡ್‌ಫಾರ್ವರ್ಡ್ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ರಸರಣದ ತುಲನಾತ್ಮಕ ವೋಲ್ಟೇಜ್ ಮತ್ತು ಪ್ರಸ್ತುತ-ಕ್ಲ್ಯಾಂಪ್ ವಿಶ್ಲೇಷಣೆ. ಜೆ. ನ್ಯೂರೋಫಿಸಿಯೋಲ್. 2006, 95 - 737 752 / jn.10.1152 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
18. ಹಿಕಿದಾ ಟಿ., ಕಿಮುರಾ ಕೆ., ವಾಡಾ ಎನ್., ಫನಾಬಿಕಿ ಕೆ., ನಕಾನಿಶಿ ಎಸ್. (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಪ್ರತಿಫಲ ಮತ್ತು ವಿರೋಧಿ ವರ್ತನೆಗೆ ನೇರ ಮತ್ತು ಪರೋಕ್ಷ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಮಾರ್ಗಗಳಲ್ಲಿ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ರಸರಣದ ವಿಭಿನ್ನ ಪಾತ್ರಗಳು. ನ್ಯೂರಾನ್ 2010, 66 - 896 907 / j.neuron.10.1016 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
19. ಕಾಲಿವಾಸ್ ಪಿಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಡಫ್ಫಿ ಪಿ. (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ನಲ್ಲಿನ ಬಾಹ್ಯಕೋಶೀಯ ಡೋಪಮೈನ್ ಮೇಲೆ ತೀವ್ರ ಮತ್ತು ದೈನಂದಿನ ಕೊಕೇನ್ ಚಿಕಿತ್ಸೆಯ ಪರಿಣಾಮ. ಸಿನಾಪ್ಸ್ 1990, 5 - 48 58 / syn.10.1002 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
20. ಕಾಲಿವಾಸ್ ಪಿಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಪಿಯರ್ಸ್ ಆರ್ಸಿ, ಕಾರ್ನಿಷ್ ಜೆ., ಸೋರ್ಗ್ ಬಿಎ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಕೊಕೇನ್ ಚಟದಲ್ಲಿ ಕಡುಬಯಕೆ ಮತ್ತು ಮರುಕಳಿಸುವಿಕೆಯಲ್ಲಿ ಸೂಕ್ಷ್ಮತೆಗೆ ಒಂದು ಪಾತ್ರ. ಜೆ. ಸೈಕೋಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್. 1998, 12 - 49 53 / 10.1177 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
21. ಕೂಸ್ ಟಿ., ಟೆಪ್ಪರ್ ಜೆಎಂ, ವಿಲ್ಸನ್ ಸಿಜೆ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ನಿಯೋಸ್ಟ್ರಿಯಟಮ್‌ನಲ್ಲಿ ಸ್ಪೈನಿ ಮತ್ತು ಫಾಸ್ಟ್-ಸ್ಪೈಕಿಂಗ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಿಂದ ಹೊರಹೊಮ್ಮಿದ ಐಪಿಎಸ್‌ಸಿಗಳ ಹೋಲಿಕೆ. ಜೆ. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2004, 24 - 7916 7922 / jneurosci.10.1523-2163 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
22. ಕೌರಿಚ್ ಎಸ್., ರೋಥ್‌ವೆಲ್ ಪಿಇ, ಕ್ಲಗ್ ಜೆಆರ್, ಥಾಮಸ್ ಎಮ್ಜೆ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಕೊಕೇನ್ ಅನುಭವವು ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ದ್ವಿಮುಖ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯನ್ನು ನಿಯಂತ್ರಿಸುತ್ತದೆ. ಜೆ. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2007, 27 - 7921 7928 / jneurosci.10.1523-1859 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
23. ಕ್ರಾವಿಟ್ಜ್ ಎವಿ, ಫ್ರೀಜ್ ಬಿಎಸ್, ಪಾರ್ಕರ್ ಪಿಆರ್, ಕೇ ಕೆ., ಥ್ವಿನ್ ಎಂಟಿ, ಡೀಸೆರೋತ್ ಕೆ., ಮತ್ತು ಇತರರು. (2010). ಬಾಸಲ್ ಗ್ಯಾಂಗ್ಲಿಯಾ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್ರಿಯ ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ನಿಯಂತ್ರಣದಿಂದ ಪಾರ್ಕಿನ್ಸೋನಿಯನ್ ಮೋಟಾರ್ ನಡವಳಿಕೆಗಳ ನಿಯಂತ್ರಣ. ನೇಚರ್ 466, 622 - 626 10.1038 / nature09159 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
24. ಕ್ರಾವಿಟ್ಜ್ ಎವಿ, ಟೈ ಎಲ್ಡಿ, ಕ್ರೆಟ್ಜರ್ ಎಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಬಲವರ್ಧನೆಯಲ್ಲಿ ನೇರ ಮತ್ತು ಪರೋಕ್ಷ ಮಾರ್ಗದ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಿಗೆ ವಿಭಿನ್ನ ಪಾತ್ರಗಳು. ನ್ಯಾಟ್. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2012, 15 - 816 818 / nn.10.1038 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
25. ಕ್ರೆಟ್ಜರ್ ಎಸಿ, ಮಾಲೆಂಕಾ ಆರ್ಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿ ಮತ್ತು ಬಾಸಲ್ ಗ್ಯಾಂಗ್ಲಿಯಾ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್ ಕಾರ್ಯ. ನೇಚರ್ 2008, 60 - 543 554 / j.neuron.10.1016 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
26. ಲೆ ಮೊಯಿನ್ ಸಿ., ಬ್ಲಾಚ್ ಬಿ. (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳ ಪೆಪ್ಟಿಡರ್ಜಿಕ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳಲ್ಲಿ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಡೋಪಮೈನ್ ರಿಸೆಪ್ಟರ್‌ನ ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿ: ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಮತ್ತು ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್ಎಕ್ಸ್ ಡೋಪಮೈನ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳೊಂದಿಗೆ ಹೋಲಿಕೆ. ನ್ಯೂರೋಸೈನ್ಸ್ 1996, 3 - 1 2 / 73-131 (143) 10.1016-0306 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
27. ಲೋಬೊ ಎಂಕೆ, ಕೋವಿಂಗ್ಟನ್ ಹೆಚ್‌ಇ, ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಮ್‌ಎಕ್ಸ್‌ಆರ್ಡಿ, ಚೌಧರಿ ಡಿ., ಫ್ರೀಡ್‌ಮನ್ ಎಕೆ, ಸನ್ ಹೆಚ್., ದಮೆಜ್-ವರ್ನೊ ಡಿ., ಮತ್ತು ಇತರರು. (3). BDNF ಸಿಗ್ನಲಿಂಗ್‌ನ ಕೋಶ ಪ್ರಕಾರ-ನಿರ್ದಿಷ್ಟ ನಷ್ಟವು ಕೊಕೇನ್ ಬಹುಮಾನದ ಆಪ್ಟೊಜೆನೆಟಿಕ್ ನಿಯಂತ್ರಣವನ್ನು ಅನುಕರಿಸುತ್ತದೆ. ವಿಜ್ಞಾನ 2010, 330 - 385 390 / science.10.1126 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
28. ಲೋಬೊ ಎಂಕೆ, ನೆಸ್ಲರ್ ಇಜೆ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಮಾದಕ ವ್ಯಸನದಲ್ಲಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಬ್ಯಾಲೆನ್ಸಿಂಗ್ ಆಕ್ಟ್: ನೇರ ಮತ್ತು ಪರೋಕ್ಷ ಮಾರ್ಗ ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ವಿಭಿನ್ನ ಪಾತ್ರಗಳು. ಮುಂಭಾಗ. ನ್ಯೂರೋನಾಟ್. 2011: 5 41 / fnana.10.3389 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
29. ಲೋಷರ್ ಸಿ., ಮಾಲೆಂಕಾ ಆರ್ಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ವ್ಯಸನದಲ್ಲಿ ಡ್ರಗ್-ಎವೋಕ್ಡ್ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿ: ಆಣ್ವಿಕ ಬದಲಾವಣೆಗಳಿಂದ ಸರ್ಕ್ಯೂಟ್ ಮರುರೂಪಿಸುವಿಕೆಗೆ. ನ್ಯೂರಾನ್ 2011, 69 - 650 663 / j.neuron.10.1016 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
30. ಒ'ಡೊನೆಲ್ ಪಿ., ಗ್ರೇಸ್ ಎಎ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ವಿಟ್ರೊದಲ್ಲಿ ದಾಖಲಾದ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್ಸ್ ಕೋರ್ ಮತ್ತು ಶೆಲ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಶಾರೀರಿಕ ಮತ್ತು ರೂಪವಿಜ್ಞಾನದ ಗುಣಲಕ್ಷಣಗಳು. ಸಿನಾಪ್ಸ್ 1993, 13 - 135 160 / syn.10.1002 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
31. ಪ್ಯಾಸ್ಕೋಲಿ ವಿ., ಟುರಿಯಾಲ್ಟ್ ಎಮ್., ಲೋಷರ್ ಸಿ. (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರಚೋದಿತ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಸಾಮರ್ಥ್ಯದ ಹಿಮ್ಮುಖವು drug ಷಧ-ಪ್ರೇರಿತ ಹೊಂದಾಣಿಕೆಯ ನಡವಳಿಕೆಯನ್ನು ಮರುಹೊಂದಿಸುತ್ತದೆ. ನೇಚರ್ 2011, 481 - 71 75 / nature10.1038 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
32. ಪ್ರೆಸ್ಟನ್ ಆರ್ಜೆ, ಬಿಷಪ್ ಜಿಎ, ಕಿಟೈ ಎಸ್ಟಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಇಲಿ ನಿಯೋಸ್ಟ್ರಿಯಟಮ್‌ನಿಂದ ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್ ಪ್ರೊಜೆಕ್ಷನ್: ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಮುಲ್ಲಂಗಿ ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್ ಅಧ್ಯಯನ. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. 1980, 183 - 253 263 / 10.1016-0006 (8993) 80-x [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
33. ರಾಬಿನ್ಸನ್ ಟಿಇ, ಬೆರಿಡ್ಜ್ ಕೆಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಮಾದಕವಸ್ತು ಕಡುಬಯಕೆಯ ನರ ಆಧಾರ: ವ್ಯಸನದ ಪ್ರೋತ್ಸಾಹ-ಸಂವೇದನಾ ಸಿದ್ಧಾಂತ. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. ಬ್ರೈನ್ ರೆಸ್. ರೆವ್. 1993, 18 - 247 291 / 10.1016-0165 (0173) 93-p [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
34. ರಾಬಿನ್ಸನ್ ಟಿಇ, ಬೆರಿಡ್ಜ್ ಕೆಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಚಟ. ಅನ್ನೂ. ರೆವ್ ಸೈಕೋಲ್. 2003, 54 - 25 53 / annurev.psych.10.1146 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
35. ಸ್ಮಿತ್ ಎಚ್ಡಿ, ಪಿಯರ್ಸ್ ಆರ್ಸಿ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಗ್ಲುಟಮೇಟ್ ಪ್ರಸರಣದಲ್ಲಿ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ನ್ಯೂರೋಡಾಪ್ಟೇಶನ್ಸ್: ಕಡುಬಯಕೆ ಮತ್ತು ವ್ಯಸನಕ್ಕೆ ಸಂಭಾವ್ಯ ಚಿಕಿತ್ಸಕ ಗುರಿಗಳು. ಆನ್. NY ಅಕಾಡ್. ವಿಜ್ಞಾನ. 2010, 1187 - 35 75 / j.10.1111-1749.x [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
36. ಸೆಸಾಕ್ ಎಸ್ಆರ್, ಗ್ರೇಸ್ ಎಎ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಕಾರ್ಟಿಕೊ-ಬಾಸಲ್ ಗ್ಯಾಂಗ್ಲಿಯಾ ರಿವಾರ್ಡ್ ನೆಟ್ವರ್ಕ್: ಮೈಕ್ರೋ ಸರ್ಕಿಟ್ರಿ. ನ್ಯೂರೋಸೈಕೋಫಾರ್ಮಾಕಾಲಜಿ 2010, 35 - 27 47 / npp.10.1038 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
37. ಸಿಮ್ ಎಚ್ಆರ್, ಚೋಯ್ ಟಿವೈ, ಲೀ ಎಚ್ಜೆ, ಕಾಂಗ್ ಇವೈ, ಯೂನ್ ಎಸ್., ಹಾನ್ ಪಿಎಲ್, ಮತ್ತು ಇತರರು. (2013). ಒತ್ತಡ-ಪ್ರೇರಿತ ವ್ಯಸನಕಾರಿ ನಡವಳಿಕೆಗಳ ಪ್ಲಾಸ್ಟಿಟಿಯಲ್ಲಿ ಡೋಪಮೈನ್ ಡಿಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್ ಗ್ರಾಹಕಗಳ ಪಾತ್ರ. ನ್ಯಾಟ್. ಕಮ್ಯೂನ್. 2: 4 1579 / ncomms10.1038 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
38. ಸ್ಮಿತ್ ಆರ್ಜೆ, ಲೋಬೊ ಎಂಕೆ, ಸ್ಪೆನ್ಸರ್ ಎಸ್., ಕಾಲಿವಾಸ್ ಪಿಡಬ್ಲ್ಯೂ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). D2013 ಮತ್ತು D1 ನಲ್ಲಿನ ಕೊಕೇನ್-ಪ್ರೇರಿತ ರೂಪಾಂತರಗಳು ಪ್ರೊಜೆಕ್ಷನ್ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳನ್ನು ಸಂಗ್ರಹಿಸುತ್ತವೆ (ನೇರ ಮತ್ತು ಪರೋಕ್ಷ ಮಾರ್ಗಗಳಿಗೆ ಸಮಾನಾರ್ಥಕವಲ್ಲದ ದ್ವಂದ್ವಶಾಸ್ತ್ರ). ಕರ್. ಓಪಿನ್. ನ್ಯೂರೋಬಯೋಲ್. 2, 23 - 546 552 / j.conb.10.1016 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
39. ಸ್ಟೆಕೆಟೀ ಜೆಡಿ, ಕಾಲಿವಾಸ್ ಪಿಡಬ್ಲ್ಯೂ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). Drug ಷಧಿ ಬಯಸುವ: ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆ ಮತ್ತು drug ಷಧ-ಬೇಡಿಕೆಯ ವರ್ತನೆಗೆ ಮರುಕಳಿಸುವಿಕೆ. ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್. ರೆವ್. 2011, 63 - 348 365 / pr.10.1124 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
40. ಟಾವೆರ್ನಾ ಎಸ್., ಇಲಿಜಿಕ್ ಇ., ಸುರ್ಮಿಯರ್ ಡಿಜೆ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಪಾರ್ಕಿನ್ಸನ್ ಕಾಯಿಲೆಯ ಮಾದರಿಗಳಲ್ಲಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಲ್ ಮಧ್ಯಮ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ಪುನರಾವರ್ತಿತ ಮೇಲಾಧಾರ ಸಂಪರ್ಕಗಳು ಅಡ್ಡಿಪಡಿಸುತ್ತವೆ. ಜೆ. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 2008, 28 - 5504 5512 / JNEUROSCI.10.1523-5493 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
41. ಟಾವೆರ್ನಾ ಎಸ್., ವ್ಯಾನ್ ಡೊಂಗನ್ ವೈಸಿ, ಗ್ರೋನ್‌ವೆಗೆನ್ ಎಚ್‌ಜೆ, ಪೆನ್ನಾರ್ಟ್ಜ್ ಸಿಎಮ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಸಿತುದಲ್ಲಿನ ಇಲಿ ನ್ಯೂಕ್ಲಿಯಸ್ ಅಕ್ಯೂಂಬೆನ್‌ಗಳಲ್ಲಿನ ಮಧ್ಯಮ ಗಾತ್ರದ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ಗಳ ನಡುವಿನ ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಸಂಪರ್ಕಕ್ಕೆ ನೇರ ಶಾರೀರಿಕ ಪುರಾವೆಗಳು. ಜೆ. ನ್ಯೂರೋಫಿಸಿಯೋಲ್. 2004, 91 - 1111 1121 / jn.10.1152 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
42. ಥಾಮಸ್ ಎಮ್ಜೆ, ಕಾಲಿವಾಸ್ ಪಿಡಬ್ಲ್ಯೂ, ಶಹಮ್ ವೈ. (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಮೆಸೊಲಿಂಬಿಕ್ ಡೋಪಮೈನ್ ವ್ಯವಸ್ಥೆಯಲ್ಲಿನ ನ್ಯೂರೋಪ್ಲ್ಯಾಸ್ಟಿಕ್ ಮತ್ತು ಕೊಕೇನ್ ಚಟ. Br. ಜೆ. ಫಾರ್ಮಾಕೋಲ್. 2008, 154 - 327 342 / bjp.10.1038 [PMC ಉಚಿತ ಲೇಖನ] [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
43. ಟನ್‌ಸ್ಟಾಲ್ ಎಮ್ಜೆ, ಓರ್‌ಶಾಟ್ ಡಿಇ, ಕೀನ್ ಎ., ವಿಕೆನ್ಸ್ ಜೆಆರ್ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಇಲಿ ಸ್ಟ್ರೈಟಂನಲ್ಲಿ ಸ್ಪೈನಿ ಪ್ರೊಜೆಕ್ಷನ್ ನ್ಯೂರಾನ್ಗಳ ನಡುವಿನ ಪ್ರತಿಬಂಧಕ ಸಂವಹನ. ಜೆ. ನ್ಯೂರೋಫಿಸಿಯೋಲ್. 2002, 88 - 1263 1269 / jn.10.1152 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
44. ವಾಂಡರ್ಸ್‌ಚುರೆನ್ ಎಲ್ಜೆ, ಕಾಲಿವಾಸ್ ಪಿಡಬ್ಲ್ಯೂ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ವರ್ತನೆಯ ಸಂವೇದನೆಯ ಪ್ರಚೋದನೆ ಮತ್ತು ಅಭಿವ್ಯಕ್ತಿಯಲ್ಲಿ ಡೋಪಮಿನರ್ಜಿಕ್ ಮತ್ತು ಗ್ಲುಟಾಮಾಟರ್ಜಿಕ್ ಪ್ರಸರಣಕ್ಕೆ ಬದಲಾವಣೆಗಳು: ಪೂರ್ವಭಾವಿ ಅಧ್ಯಯನಗಳ ವಿಮರ್ಶಾತ್ಮಕ ವಿಮರ್ಶೆ. ಸೈಕೋಫಾರ್ಮಾಕಾಲಜಿ (ಬರ್ಲ್) 2000, 151 - 99 120 / s10.1007 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]
45. ವಿಲ್ಸನ್ ಸಿಜೆ, ಗ್ರೋವ್ಸ್ ಪಿಎಂ (ಎಕ್ಸ್‌ಎನ್‌ಯುಎಂಎಕ್ಸ್). ಇಲಿ ನಿಯೋಸ್ಟ್ರಿಯಟಮ್‌ನ ಸಾಮಾನ್ಯ ಸ್ಪೈನಿ ನ್ಯೂರಾನ್‌ನ ಉತ್ತಮ ರಚನೆ ಮತ್ತು ಸಿನಾಪ್ಟಿಕ್ ಸಂಪರ್ಕ: ಹಾರ್ಸ್‌ರಡಿಶ್ ಪೆರಾಕ್ಸಿಡೇಸ್‌ನ ಅಂತರ್ಜೀವಕೋಶದ ಚುಚ್ಚುಮದ್ದನ್ನು ಬಳಸುವ ಅಧ್ಯಯನ. ಜೆ. ಕಾಂಪ್. ನ್ಯೂರೋಲ್. 1980, 194 - 599 615 / cne.10.1002 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]

• ಬುದ್ಧಿವಂತ RA (2004). ಡೋಪಮೈನ್, ಕಲಿಕೆ ಮತ್ತು ಪ್ರೇರಣೆ. ನ್ಯಾಟ್. ರೆವ್. ನ್ಯೂರೋಸಿ. 5, 483 - 494 10.1038 / nrn1406 [ಪಬ್ಮೆಡ್] [ಕ್ರಾಸ್ ಉಲ್ಲೇಖ]