Int J Biol Sci. 2015; 11 (10): 1150-1159.
Жарыяланган онлайн 2015 Aug 1. чтыкта: 10.7150 / ijbs.12044
PMCID: PMC4551751
Jin Жаш Ким,1 Чен-Ho Lee,1,✉ Doyun Ким,1,2 Soung-Min Ким,1 JaeHyung Коо,2 жана Жонг Won Jahng1,✉
жалпылаган
Бул изилдөө аялдардын келемиштер эрте жашоо стресс тажрыйбасы менен шартталган психо-сезимдик жана нейрон башаламандык боюнча өспүрүм курагында жогорку тоюмдуу тамак таасирлери каралат. С Спрэг-Dawley күчүгүн күн сайын 3 ч үчүн дамбанын төрөлгөндө алгачкы эки жуманын ичинде бөлүнүп (MS) же болбосо бузулбаган (NH) чыгып кетти. MS аялдардын жарымы тышкары шоколад кукилер менен эркин кайрыла алган ад либитум төрөттөн күн 28 тартып чау. Pups жаш жеткенге жүрүү сыноолорго дуушар болушкан. катуу стресске, ΔFosB жана мээнин алынган neurotrophic себеби (BDNF) мээ аймактарда өтө плазма corticosterone жооп талдоого алынган. Бүт эксперимент учурунда жалпы калориялуу алуучу жана дене салмагын пайда эксперименталдык топтордун арасында бир айырмасы деле жок. өспүрүм жана жаштардын учурунда Cookie мүмкүндүк MS тажрыйбасы / депрессия сыяктуу жүрүм-Тынчсыздануу жакшырган. ΔFosB сөздөр төмөндөгөн, ал эми BDNF MS аялдардын ядросу accumbens көбөйдү жана ΔFosB сөз таркады эле BDNF ары куки жетүү төмөнкү көбөйгөн болчу. катуу стресске Corticosterone жооп MS тажрыйбасы буудук жана куки кирүү, аны жакшыртуу эмес. Results куки өспүрүм курагында мүмкүндүк MS аялдардын психо-жан башаламандыкты жакшыртат жана ΔFosB жана / же BDNF ядросу accumbens айтылган анын алдындагы нейрон механизмдерин чечүүчү ролду ойной алат деп ойлойм.
тааныштыруу
бирдей ашка боемочулуктарды жыныстагылардын ортосундагы карама-жооп болушу мүмкүн далилдердин саны өсүп жатат. молекулярдык деёгээлде, ал ошол эле диета кабылган, эркектер менен аялдардын ортосундагы келемиштер кохлеардык transcriptome менен жыныстык денечелеринин жооптор бар экенин көрсөтүп турат 1. метаболизм / Эндокриндик деёгээлде, аял келемиш узак майлуу тамак-аш түрдүү hypothalamic neuropeptide жоопторду көрсөтүү 2 жана жогорку көрбөйбүз келүүсүнө ордун толтуруу үчүн эркек балдарга караганда кубаттуулугу жогору 3. Кыска мөөнөттүү майлуу-семиз бойго жеткен аялдарда Hippocampus менен глюкокортикоид сезгич РНК көлөмүн тёмёндёгён, ал эми алардын hypothalamic-кичинекей-үстү (мбар) огу кийинки стресске эркек башкача жооп жок 4, 5. жүрүм-турум боюнча, ал аялдын карама-каршы таасир этет, ал эми май, тамак-аш менен жеткен келемиштер кыска мөөнөттүү таасирленүү, эркек менен тынчсызданууга жана чалгындоону жогорулатат азайтат 6. Жетилүү көбөйдү эндокриндик пластикалык жана стресс ийкемдүүлүгүн өзгөртүүлөр менен мүнөздөлөт маанилүү өнүгүү мезгили болуп саналат 7. Изилдөөлөр майлуу тамак-пост-эмчектен чыгаргандан базалдык мбар огу ишин жана жыныстык денечелеринин тартипте стресс жана зат медиаторлор да таасир тарабынан катуу стресске эндокриндик жоопторду өзгөртүү мүмкүн деп кооптонушат 8, 9. Биз мурда өспүрүм курагында жогорку тоюмдуу тамак-узак керектөө эркек келемиштер менен Тынчсыздануу жана депрессия сыяктуу жүрүм-жогорулатат, бирок аял келемиштей деп тапканs 10. тамак-аш майы (32% майлуулугу) ушундай энелердин бөлүштүрүү дуушар жүрүм-турумдук кыйынчылыктарды да эркек жана аял келемиштер жакшыртылган жогорку керектөө узартылышы (MS) эркектерге көбүрөөк пайдалуу таасири менен, бул изилдөөдө колдонулган протоколдун 11. Биздин аялдар MS келемиштер байкалган жүрүм-турумдук жана Эндокриндик Кыйынчылыктар 12 эркек MS келемиштер менен кыздан эмнеси менен айырмаланган көрүнгөн 13, 14.
мурунку изилдөөдө, жогорку тоюмдуу тамак-аш менен узак мүмкүнчүлүгү, орточо семиз диета (~ 21% майы) 6, 15, Өспүрүм жана жаш кезинде бир тынчсыздануу менен байланыштуу белгилерин жана эркек MS келемиштер менен мбар огу этикасынын жакшырды 14. Изилдөөлөр стресс огу милдетинин Модулатион жогорку тоюмдуу тамак-аш менен оң маанайда жүрүш аткыланды деп кооптонушат. Ушул; май бийик өтө артык диета таасири стресс сезимталдыкты азайтуу үчүн сунушталган 16; жогорку тоюмдуу тамак-аш менен сунушталган адамдар, мисалы, канааттануу, ырахат, жана каалоо арзуу сыяктуу жагымдуу сезимде болгон 17 жана даамдуу тамак-аш ичүү психологиялык жана иммунологиялык стресске төмөнкү тилектеш жооп азайган 18, Стресс гормондордун төмөнкүдөй коюу 19 жана келемиштер менен бийик плюс лабиринт сыноо учурунда тынчсыздануу сыяктуу жүрүм-туруму 20. Бирок, бул изилдөөдө, өспүрүм жана жаш кезинде орточо семиз диета (~ 21% майы) гана Тынчсыздануу, ошондой эле депрессия сыяктуу жүрүм-жок жакшыртылган да, MS аялдардын бузулушуна огу мбар жакшыртуу эмес.
Биздин MS аялдар жогорку тоюмдуу же диета жетүү психологиялык жактан таасир негизги нейрон механизмдерин изилдөө үчүн, ядронун accumbens (УАК) мээ-алынган neurotrophic ойноорун (BDNF) жана ΔFosB санда токтолдук. УАК, бир mesolimbic dopaminergic жол түзгөн бир базалдык тездик менен түзүлүшү, сыйлык, ниеттерибиз жана күчөтүү бир ролу бар 21. anhedonia, ири чөгүү баш аламандыктын негизги лихорадка, өнүктүрүү НАК абдан маанилүү ролду ойнойт, ал сыйлык жолуна, алардын бузулушуна жана тиешелүү жатат 22, 23. НАК нейрондор жүрүм-стресс парадигмасы жооп жандандырылган болушат 24, 25Жана бузулууларга аткыланды берилди 26, 27. mesolimbic dopaminergic иши жана НАК нейрон стресстин айынан кошуу тынчсыздануу жана депрессия сыяктуу жүрүм-турумун көрсөтүп, биздин эркек MS келемиштер менен макалды жок 13, 28. BDNF mesolimbic тинейджер системасын Модулатион аркылуу гедонисттик тамактандыруу тартылышы керек сунуштады 29, 30Бир даамдуу тамак-аш үчүн таасири жана НАК BDNF жана ΔFosB денгээлдери жана тинейджер кабылдагыч D1 милдеттүү көбөйдү 16, 31, 32.
Материалдар жана ыкмалар
жаныбарлар
Спрэг-Dawley чычкандар сатылып (Samtako Bio, Осан, Корея), ошондой эле температуранын туруктуу контролдоо (22 ± 1 ℃), нымдуулуктун (55%) менен белгилүү бир-патогендик-эркин тоскоолдук аймакта кам көргөн жана 12 / 12 саат жарык / караңгы цикл (чыракты боюнча 07 боюнча: 00 AM). Стандарттык лаборатория тамак-аш (Purina Rodent Чоу, Purina Co., Сеул, Түштүк Корея) жана мембрандык чыпкаланган тазаланып суу бар болчу ад либитум. Жаныбарлар 2000 кайра NIH Лабораториялык жаныбарларды сактоо жана пайдалануу боюнча Колдонмосу менен бирге келет Корея Дары Илимдер академиясынын, түзөтө Animal тажрыйба үчүн Колдонмонун, 1996, ылайык көргөн жок. Бардык жаныбарларга эксперимент Сеул КУУнун боюнча лабораториялык жаныбарлардын сактоо жана пайдалануу боюнча комитети тарабынан кабыл алынган.
эксперименталдык протокол
Никеси бар аялдар жана далилденген баккан эркек мал мекеменин лабораториясында багуу үчүн колдонулган жана күчүгүн көзөмөлгө тартипте тарбияланган алынган азайтуу жана жагымсыз экологиялык стимулдаштыруу стандартташтыруу алынган Utero менен жашоо. Он эки саат жеткирилгенин ырастоочу кийин [төрөттөн күн (PND) 1], күчүгүн биз мурда айтылгандай сүйлөгөндөй болду 13, 14, 33 - 35. Ар бир таштанды энеден бөлүү (MS) тобу үчүн же иштетилбеген (NH) топ үчүн дайындалган. МС күчүктөрүн дамбадан жана үйдүн капасынан алып чыгып, жыгач чөптөрү менен төшөлгөн жаңы капаска тыгыз жайгаштырышты (Аспен кыруу, Animal JS Bedding, Чонгян, Корея) саат 9:00 - 12:00, жана андан кийин өз үйүнө кайтып келишти. капас жана дамба. Бөлүнүү мезгилинде күчүктөрдү жылытуу үчүн кошумча дарылоо сунушталган жок. MS күн сайын PND 1ден 14кө чейин жүргүзүлүп, андан кийин күчүктөр PND 22де эмчектен чыгарганга чейин дамбасын бузушкан жок. NH тобу жумасына эки жолу жүргүзүлгөн кадимки клеткаларды тазалоодон тышкары, эмчектен чыгарганга чейин тынчсызданбай келишкен. Эмчектен чыгарган күнү ар бир NH же MS таштандысынан 2 NH жана 4 MS аял күчүктөр туш келди тандалып алынып, 2 NH же 2 MS күчүктөрүн ар бир торго чогуу жайгаштырышты. Бир жерге жайгаштырылган эки аял MS күчүктөр жогорку даамдуу тамак-ашка (HPF) (Oreo куки, Kraft Foods Global, Inc., East Hanover, NJ, АКШ) акысыз мүмкүнчүлүк алышты. ад либитум PND 28 тартып чау (MS + HPF топ), калган 2 аял MS ар Тооктун менен күчүгүн (MS-топ) жана NH күчүгүн (NH тобу) гана стандарттуу чау кабыл алды. стандарттуу чау жана Oreo Cookie аш болумдуу курамы бисмиллах столдун көрсөтүлгөн Table1.1. Күнүмдүк тамак-аш ичүү жана салмак PND 29 чейин жазылган. Чоу жана кукилер менен 24 ч тамак, premeasured өлчөмүнө баа берүү үчүн берилген, ал эми эртеси күнү, чау жана кукилер калган суммасы таразага тартып, мурунку күнү каралган наркынан чыгарылган болчу. нугуна камтыйт Атайын сактоо кабыл алынган. Тоюмдуулугу алуучу Chow жана кукилер аш болумдуу курамы акысы боюнча эсептелген. Ар бир эсептелинген мааниси ар бир капаска күчүгүн тарабынан керектелген тамак-аш азыктарынын жалпы суммасы ар бир капаска күчүгүн санына бөлүнөт жана алынган н = 1 деп эсептелген. Суу бардык эксперименталдык топторго эркин жеткиликтүү болгон, азык-түлүк жана шарттары бүт эксперименталдык мезгил бою улантылды. эксперименталдык протоколдун схемалык диаграммасы сүрөттө берилген Figure11.
амбулаториялык аракет
NH, MS жана MS + HPF сук (н = ар бир топтун 8 ар литрди тартып 4; 24 ар литрди жалпы 8 күчүгүн) PND 54 боюнча амбулаториялык сыноого дуушар болгон. ар бир сот күнү жөнүндө чычкан иш бөлмөсүнө (узундугу 43.2 см, 42.2 туурасы см жана 30.5 см, бийиктиги, MED Associates, VT, АКШ) жайгаштырылган, эки горизонталдуу учак менен жабдылган ачык зебры бөлмө 16 Infrared photocell-детекторунун түгөй жайгаштырылган x, y өлчөм, 2.5 см аралык менен, анын амбулатордук иши 30 мүн тутумуна мониторинг болгон. тест бөлмөнүн Light абалы күн жарык шартта жаныбарлар бөлмөлөрү менен бирге, ошол эле күчтө сакталып калган. Амбулаториялык иш-аракет ар бир ырааттуу 5 мин сессиянын ичинде горизонталдуу сенсор кыпынды үзгүлтүксүз жалпы пункт катары бааланчу. Заара иш-аракет, Дойдум Чашката салмагы, Ар бир келемиштер ambulation сыноо учурунда, ошондой эле гол болду. Сырткы иш андан ары талдоо; башкача айтканда, forepaw жана башкы сырткы rostral кече, жана дене, буттары, куйрукка / жыныс сырткы куйрук сырткы көрүнүш сыяктуу болуп калды 36. буга чейин келемиштер кандайдыр бир жыт төлөтүүгө жок кылууга ар дайым колдонгондон кийин иш бөлмөсүнүн 70% этил менен тазаланды.
Бийик Plus Maze
амбулаториялык иш сыноо (PND 56) Эки күн өткөндөн кийин, чычкандар бийик плюс ажарына жүрүм-баалоого алынган плюс түрүндөгү зебры лабиринт, эки карама-каршы ачык курал менен (туурасы узундугу 50 см 10 см), эки карама-каршы жабык курал-жарак (узундугу 50 см, 10 туурасы см, бийиктиги 31 см), борбордук сахнадан чыккан (10 см х 10 см). бүт аппараты кабатка жогору 50 см жогору болгон. текшерүү жол-жобосу мурда айтылгандай болду 37. Ар бир чычкан ачык курал-бирин караган катарларын чок ортосунда болгон жана андан кийин 5 мүн катарларын ачык же жабык курал менен таанышууга мүмкүнчүлүк беришти. ар кандай курал-жарак менен өткөргөн убакыт жазылган. Төрт лапы атайын колу канча убакыт баштоого белги ар бир колу менен кириш сызыктын ичинде болушу керек эле, ошондон кийин дүйнөнүн акыры бүт төрт лапы кайрадан сызыктын сыртына кезде жазылган. буга чейин келемиштер таасирине жол бербөө үчүн ар бир сыноо кийин лабиринт 70% этил менен тазаланды.
Аргасыз сүз: Test
бийик плюс лабиринт сыноо (PND 59) үч күн өткөндөн кийин, чычкандар мурда сүрөттөлгөн ыкма боюнча, мажбур сүзүп сыноого дуушар болгон 38. Ар бир чычканга 54 мүнөт ичинде 24 см тереңдикте (40-23 ℃) суу толтурулган айнек цилиндрде (бийиктиги 25 см жана диаметри 5 см) сүзүүгө уруксат берилген жана тест сессиялары видеокамера тарабынан жазылып алынган. цилиндрдин капталы Келемиштин сууда кыймылсыз болушунун узактыгы секундомердин жардамы менен видеотасмадан алынган. Кыймылсыздык деп келемиштер суунун үстүнөн башын көтөрүп туруу үчүн гана кыймылдарды жасашат деп баалашкан.
Радж керексиз стресс таасирин азайтуу үчүн ар бир сыноо үчүн, жок эле дегенде, 2 ч алдын ала сыноо бөлмөдө жайгаштырылган жана бардык жүрүш-баалоо 9 ортосунда ишке ашырылган: 00 AM жана 12: 00 тынч дисперсиясынын таасирине жол бербөө үчүн күнү PM. Жүрүш-туруш гол келемиштер мамиле байкоочу сокур менен болду.
Плазма corticosterone сыноочу
Жүрүм-турум сеанстары аяктагандан бир жумадан кийин, чычкандар чычкандар төрт бутун кыймылдатып, бирок денесинин багытын өзгөртпөй турган чектөө кутусуна 2 саатка жайгаштырылды. Куйрук каны чектөө мезгилинде 0, 30, 60 жана 120 мүнөт убакытта чогултулуп, 2,000 минутада 20 айн / мин центрифугаланды. Плазманын үлгүлөрү суюк азотто тоңдурулган жана анализ жүргүзүү үчүн колдонулганга чейин - 80 ° C температурада сакталган. Кортикостерондун плазмалык деңгээли радиоиммуно анализ аркылуу аныкталды 125I-ачаар Coat-A-Count комплект (Siemens, CA, АКШ). тамганы сезгичтик 5.7ng / мл болгон. өзгөрүү ички пробирдик баасы 4-12.2% ды түзгөн.
Батыш олдоксон талдоо
Жүрүм-турумдук сыноолордон (Н = 6 ар бир топтогу 3 ар кандай таштандыдан; 18 ар кандай таштандыдан 6 күчүктөр) мээ региондорундагы ΔFosB жана BDNF деңгээлдеринин батыш блотторун талдоо үчүн курмандыкка чалынган чычкандар. Ретроперитоналдык семиздик курмандыктары курмандыкка чалынганда чогултулуп, баштары кесилгенден кийин мээлери дароо алынып салынган. Ядролук акумбенттердин (NAc) жана гиппокампанын ткандарынын үлгүлөрү музда тез талкаланып, суюк азотко тоңдурулган жана колдонулганга чейин - 62 ° C температурада сакталган. NAc ткандарын бөлүү мурунку изилдөөлөрдө колдонулган ыкмага ылайык, жакшы бычактын жардамы менен жасалган 28, 39; Бирок, жакын ventro-макулуктардын striatum мүмкүн болгон киргизүү кыйынчылыктан качуу мүмкүн эмес болот. кыртыштар бир жуугучтар lysis туруучу боюнча гомогендүү болгон (50 MM Tris, рН 8.0; 150 мм NaCl; 1% Triton X-100; протеазынын жана phosphatase ингибиторун коктейл 0.5%), андан кийин 13,000 боюнча 20 мүн 4 е ийбөөoC. Жаңы түтүкчөлөргө өткөрүлүп берилген супернатандар протеиндин курамы боюнча өлчөнүп, протеинди анализдөөчү топтомду колдонушкан (Biorad DC, Biorad, Inc., Hercules, CA), лизис буферинде 80 мкг / 20 мкл концентрацияда бөлүнүп, сакталган - 80 ° C, болбосо ошол эле күнү колдонулат. Үлгүлөр жүктөө буфери менен аралаштырылды (100 мм Tris, рН 6.8; 200 мм дититрейтол; 4% SDS; 20% глицерин; 0.2% бромофенол көк) 1: 1 суюлтууда, 5 мүнөт кайнатылды, музга тез муздатылды, андан кийин 12% SDS-полиакриламид Трис-глицин гельдерине электрофорацияланган. Нитроцеллюлоза мембраналарына (Hybond-C, Амерсхем, Бакс, Улуу Британия) өткөн белоктор 5X Tris-буфердик туздуу-Tween (1 mM C) курамында 10% майсыз кургак сүт менен иштетилген.4H11ЖОК3; 0.145 M NaCl; 0.2% SDS; 0.1% жоромолдоп 20) 4 түнөшүбүз0C. Мембраналар поликлоналдык коёнго каршы ∆FosB (1: 1000 суюлтуу; Санта Круз Биотехнология, Даллас, Техас, АКШ) же анти-BDNF (1: 500 суюлтуу; Миллипоре, Темекула, Калифорния, АКШ) менен реакцияга киришкен жана байланган антителолор өндүрүүчүнүн көрсөтмөсүнө ылайык химилюминесценция менен аныкталды (Lumi-light west blotting субстрат; Рош, Индианаполис, IN, АКШ) жана сандык сүрөттү анализдөө тутумунун жардамы менен аныкталды (LAS-1000, Фудзи фильм, Токио, Япония). Ар бир үлгүнүн санариптик мааниси жүктөө контролу β-актинге чейин нормалдаштырылып, андан кийин бардык баалуулуктар салыштырмалуу мааниге NH тобунун орточо маанисине которулган.
статистикалык анализ
Маалыматтар, жабырлануучуларга бир же эки жолу [corticosterone маалыматтар талдоо; дарылоо (туура же тамак-аш абалы, 2 денгээлде ар бир) X мезгилде (4 денгейй)] дисперсиялык талдоо (Дисперс анализи), жана топтордун ортосундагы бермекчи салыштыруу аркылуу ишке ашырылган Постту туз Fisher's PLSD тести зарыл болгон учурда, StatView программасын колдонуп (Абакус, Беркли, Калифорния, АКШ). Дене салмагы жана тамак-аш азыктарын пайдалануу маалыматтары андан ары ANOVA чаралары, андан кийин Bonferroni түзөтүүсү менен анализделди P нарк боюнча оъдоолор. маанидеги деңгээл белгиленген P <0.05, жана бардык баалуулуктар ± SEM каражаттары катары берилген
натыйжалары
Азык-түлүк алуучу жана дене салмагын пайда
MS сук курактык дал PND 39 чейин NH аялдардын жана салмагы айырмасы кийин (Figure байкалган эмес караганда уламдан болуп көрүнгөн (Figure2A) .2A). Статистикалык маанилүү айырмачылыктар (P<0.05) NND менен MS ургаачыларынын ортосунда PND 32-39 учурунда байкалган, PND 36 жана 37ден тышкары. Жагымдуу тамак-ашка жетүү MS тажрыйбасы менен салмак айырмасын төмөндөтүп, NH менен MS + HPF ортосундагы статистикалык мааниси PND 36дан кийин жоголуп кеткен. ANOVA чаралары убакыттын өтүшү менен дене салмагынын өсүшү MS жана MS + HPF ортосунда айырмаланып турарын аныктады [F(1,780) = 2.146; P= 0.0008], NH жана MS ортосунда эмес, бирок. MS аялдардын күнүмдүк чау алуучунун жаш дал NH аялдардын (Figure айырмасы жок, (Figure2B) .2B). Кукиге мүмкүнчүлүк MS ургаачыларынын күнүмдүк чай ичүүсүн баскан, бирок күндөлүк калориялуу тамак-аш статистикалык маанисиз кукилердин жеткиликтүүлүгү менен көбөйгөн. ANOVA чараларын кайталап көрсөткөн калориялуу тамакты талдоодо энелердин бөлүнүп-жарылышына жана тамак-аш абалына эч кандай таасири жок экени аныкталды. Бүткүл эксперименттик мезгилдеги жалпы калориялуу тамак (PND 28 - 62) тажрыйбалык топтордун арасында айырмаланган жок (сүрөт) (Figure2C) .2C). MS + HPF аялдар тарабынан керектелген бардык калория жөнүндө 40% кукилер келип чыгышы (3259.921 ± 211.657 ккал чау, 2184.641 ± 186.077 кукилерди ккал-жылдан тартып). PND 62 боюнча MS аялдардын ичтеги майын тампондук курактык дал NH аялдардын айырмасы жок, статистикалык маанидеги жок куки мүмкүнчүлүгү менен көбөйөт аракет кылышкан (P= 0.0833, MS vs. MS + HPF) (Figure (Figure22D).
Жүрүш-баалоо
NH, MS жана MS + HPF ургаачыларынын амбулатордук иш-аракеттери PND 54 боюнча компьютерлештирилген иш бөлмөсүндө өлчөнгөн. MS аялдардын амбулатордук саны биринчи (0 - 15 мин) жана кийинки сессия (15 - 30 мин) ичинде салыштырмалуу төмөндөгөн. NH аялдар менен; Бирок, олуттуу төмөндөө (P<0.05) NHге салыштырмалуу MS + HPF тобунда кийинки сессиянын жүрүшүндө гана байкалган (сүрөт) (Figure3A) .3A). Бардык расстояние биринчи 15 мин сессиянын ичинде кыдырып олуттуу MS-жылы кыскарган (PNH менен салыштырганда MS + HPFде эмес, <0.05) (сүрөт) (Figure3B) .3B). Сырткы жүрүм-туруму жана заара иш амбулаториялык иш сыноо (Figure учурунда гол (Figure3C3C & D). МС тажрыйбасы ростралдык жасалгалоону кыйла жогорулаткан (P<0.05, NH жана MS) кукиге мүмкүнчүлүк бергенде, аны кыскарткан (P<0.05, MS жана MS + HPF) (сүрөт) (Figure3C) .3C). MS аялдардын Заара иши статистикалык маанидеги жок NH салыштырмалуу көбөйүп, жактап, жана куки мүмкүнчүлүгү кыйла төмөндөткөн (P<0.05, MS жана MS + HPF) (сүрөт) (Figure33D).
андан ары тынчсыздануу сымал жүрүш-баа берүү максатында, чычкандар амбулаториялык иш сыноо (PND 2) кийин бийик плюс лабиринт сыноо 56 күнгө туш болушкан. ачык курал өткөргөн убакыт кыйла MS аялдын тёмёндёгён (P NH менен салыштырганда MS + HPFде эмес, <0.05) (сүрөт) (Figure4A) .4A). Пайызы ачык колу материалдар эксперименталдык топтордун арасында бир айырмасы деле жок (Figure (Figure4B) .4B). депрессия сыяктуу жүрүм-турумуна баа берүү үчүн, чычкандар бийик плюс лабиринт сыноо (PND 3) кийин аргасыз сүзүү сыноо 59 күнгө туш болушкан. аргасыз сүзүү тест сессиянын 5 мүн учурунда кыймылдабай узактыгы кыйла MS аялдардын өстү (P <0.05) NH менен салыштырганда, ал эми MS + HPF аялдарынын кыймылсыздык көрсөткүчү NHдан айырмаланган жок (Figure44C).
Плазма corticosterone этаптары
сүзүү сыноонун бир апта өткөндөн кийин, чычкандар сабырдуу стресс жана куйругу кандар коюу сессиянын 0 ч учурунда 30, 60, 120 жана 2 мин күндүзгү пунктка чогултулду кабыл алып, плазманы corticosterone тамганы үчүн колдонулган (Figure (Figure5) .5). базалдык corticosterone этаптары (0 убакыт пункту) топтор арасында айырмасы жок; Бирок, стресстен келип жеткенден кийинки стресс-жасалма көбөйөт жана corticosterone денгээлде MS 30 боюнча NH караганда аялдар жана 60 мүн убакыт пунктка төмөн болгон (P<0.05, NH менен MS ар бир убакыт пунктунда). MS + HPF плазмалык кортикостерондун деңгээли стресс башталгандан кийин 30 минутада NHдан айырмаланган эмес, бирок 60 мүнөт убакытта NHдан төмөн болгон (P <0.05; 394.29 ± 38.35 нг / мл NH менен 247.48 ± 24.57 нг / мл MS + HPF). Стресстен келип чыккан кортикостерондун деңгээлин 2-жолудагы ANOVA менен талдоодо энелердин бөлүнүүсүнүн негизги натыйжалары аныкталды [F(1,56) = 8.814, P= 0.0045] жана убакыт [F(3,56) = 9.335, P<0.0001], жана азык-түлүк абалынын таасири жок. Энелердин бөлүнүшү менен убакыттын же тамак-аштын абалы менен убакыттын ортосунда олуттуу өз ара аракеттер табылган жок.
ΔFosB жана BDNF батыш доскада
НАК жылы ΔFosB жана BDNF денгээлдери батыш олдоксон талдоо (Figure менен каралды (Figure6) .6). ΔFosB кыйла кыскарды, бирок BDNF MS аялдардын НАК өстү болду (P NH менен салыштырганда (<0.05) (Figure6A6A & B). MS MS ургаачыларынын NAc-де FosB деңгээли кукилерге жетүү жолу менен нормалдаштырылган; б.а. NH менен MS + HPF ортосунда эч кандай айырмачылык жок жана BDNF деңгээли дагы жогорулаган (P <0.05, MS менен MS + HPF). MS аялдардын гиппокампасында BDNF деңгээли NHга салыштырмалуу төмөндөгөн (P <0.05) жана ал кукиге мүмкүнчүлүк алуу менен калыбына келтирилген эмес (сүрөт) (Figure66C).
талкулоо
Тоюмдуу тамак-аш азыктарын алуу MS аялдардын психо-сезимдерге жүрүм-жакшырды
Бул изилдөөдө, мындай иш-аракет сыноо учурунда амбулаториялык иш, rostral сырткы жана заара иш тынчсыздануулар, депрессия, өкүлү жүрүш упайлары; ачык-жарак жогору плюс лабиринт сыноо учурунда калып; аргасыз сүзүп сыноо учурунда ооруудан, MS аялдын өспүрүм жана жаш кезинде Oreo кукилер эркин жеткиликтүүлүк жакшырды. катуу стресске corticosterone жооп MS эркекте билдирди MS аялдардын, анын эч нерсеге жараксыз кылып коёт эле 14. мокотконго corticosterone жооп MS тажрыйбасынын натыйжасы болуп саналат; курч стресстик шек мбар огу жооп, анткени, кайталап стресс б.а. тажрыйбасы өнөкөт нече стресс төмөнкү окуялар камалат көрүнгөн 40, 41. Изилдөөлөр май жогорку артык диета өйдө таасири базалдык мбар огу ишин жана катуу стресске эндокриндик жоопторду өзгөртүү мүмкүн деп кооптонушат 9, Стресс жоопторду жакшыртуу 17, 19 жана тынчсыздануу сыяктуу жүрүм-төмөндөө 18, 20. Ошондой эле, Oreo кукилерди акысыз кирүү (~ 21% майлуулугу; орточо семиз диета) өспүрүм жана жаш кезинде эркек MS келемиштер менен мокотконго мбар огу милдетин жана жакшыртылган тынчсыздануу сыяктуу жүрүм-нормага 14. Башкача айтканда, ал өспүрүм куки мүмкүндүк эрте турмушка MS тажрыйбасы менен, кайталап стресс мокотконго мбар огу милдетин жакшыртуу, ошондой эле жүрүм-турум кыйынчылыктарды кайрадан болушу мүмкүн деп божомолдоого болот. Бирок, бул изилдөөдө, өспүрүм жана жаш кезинде куки мүмкүндүк аял MS келемиштер курч стресс жооп мбар огу ишин жакшыртуу эмес. ал эркек MS келемиштер болгон да, ал аял MS келемиштер менен жаштык куки жетүү anxiolytic жана / же чечмелөө денесинде катылып, мбар огу иштеши менен байланыштуу болушу мүмкүн деп божомолдоого болот. Аларды эркек-аял чычкандар көп Эндокриндик жүрүш-туруш жана параметрлери боюнча айырмаланат жана стресске аялуу көз каранды Гендердик 42, 43. Мурунку изилдөө курч стресстен кийинки 7 күндүк орточо майлуу диетага протокол эркек-тандалма ашыкча corticosterone бошотууга алып келет, деп билдирди 6.
аял келемиштер НАК менен тоюмдуу тамак-аш азыктарын алуу жана нейрондордун кыймыл-милдети
Ушул изилдөө ΔFosB сөз кыскаруу менен BDNF MS тажрыйбасы аял келемиштер НАК жайылып баратканын көрсөттү. Бул НАК же psychologic же зат алмашуу стресс ΔFosB сөздөр жогорулатат деп билдирди келет 44-46. Изилдөөлөр копиялоо себеби ΔFosB NAC нейрондордо BDNF сөз менен байланыштуу деп эсептешет 32, 47-49. Чогуу алганда, ал, балким, УАК нейрондордун кыймыл-милдетин салуучу, ΔFosB жана эрте турмушка MS стресс НАК узак мөөнөттүү натыйжасы болушу мүмкүн BDNF сөздөр көбөйүп азайган сунушталат. НАК нейрондордун милдети жүрүш стресс парадигмасына ызычуулар сунуш болду 24, 25 жана анын начар депрессия жана жиниккен-депрессиялык аткыланды жатат 22, 23, 26, 27. Чынында эле, BDNF NAC менен белги депрессиянын стресс-көндүрүшкөн моделдер билдирилген көбөйдү 50-52, Стресс-азгырган депрессиялык кесепеттерин ΔFosB үстүнөн-билдирүү striatum-жылы чычкандардын мокотконго болду 53. Ошентип, ал depression- жана / же аялдардын MS келемиштер түйшүгү окшош жүрүм-туруму менен байланыштуу ΔFosB кыскаруу менен НАК жылы BDNF сөздөр көбөйүшү мүмкүн деп божомолдоого болот.
Бул макалада өспүрүм мезгилде куки мүмкүндүк аял MS келемиштер менен ΔFosB жана BDNF сөздөрдү жогорулаган. Бул жыйынтык НАК жылы ΔFosB өскөн катмарын даамдуу тамактануу жыйынтыгы деп тобокелдигин көрсөтүү мурдагы отчеттор менен макул 31Жана жогорку семиз диета чычкандардын айтып ашуун-ΔFosB менен НАК жылы BDNF көлөмүн жогорулаган 32. striatum менен ΔFosB сөздөрдү ёткён отчет ачкан эске стресстин айынан депрессиялык таасиринен туруктуулукту күчтүү 53, Ал куки жетүү менен MS аялдардын НАК жылы ΔFosB көбөйүп түзүлөт; башкача айтканда, анын базалдык даражасына нерседей, чечмелөө жана / же жаштык куки жетүү anxiolytic натыйжалуулугун салым кошушу мүмкүн. Бирок, депрессиялык моделдер негизинен НАК жогорулаган BDNF белги билдирди бери MS аялдар куки жетүү менен НАК көбөйгөн BDNF деңгээл аны чечмелөө жана anxiolytic таасири менен катышкан болсо, так эмес, 50-52, Бирок чанда гана чечмелөө моделдер. Андан ары изилдөө кепилдик берилет.
Магистратура жана HPF менен кохлеардык BDNF иштетсе Effects
Hippocampus эркек жана аял келемиштер да билдирилген бир деңгээл BDNF тёмёндёгён, бул изилдөөдө колдонулган окшош MS протоколго дуушар болду 54, 55. Ошону менен бирге, BDNF деңгээл бул изилдөөнүн NH башкаруу салыштырмалуу биздин аял MS келемиштер Hippocampus азайган болчу. Кохлеардык neurogenesis тынчсыздануу жана депрессиянын белгилери аткыланды жатат 56, 57, Жана ошондой эле Hippocampus мбар огу иш-пикир жөнгө тартылган белгилүү. Мбар иши биздин MS аялдын мокотконго экенин эске салып, бул, сыягы, эч нерсеге жараксыз кылып коёт мбар огу ишине байланыштуу, BDNF Hippocampus боюнча жогорку MS тажрыйбасы менен тынчсыздануу жана / же депрессия башаламандыктарга тиешеси бар болушу мүмкүн азайган ыктымал. кохлеардык BDNF деъгээлинин жана MS аялдын мбар огу ишинин ортосунда кандай мамиле мындан ары куки мүмкүнчүлүгү бул изилдөөнүн аларды жакшыртуу эмес, деп тарабынан колдоого алынган. Мурунку изилдөө Бул изилдөөдө колдонулган окшош MS протоколго дуушар эркек MS келемиштер Hippocampus жогорку майлуу тамак-аш (32% майы) көпкө керектөө BDNF сөздөр жогорулатат экенин көрсөттү 58. эркек MS келемиштер кохлеардык BDNF иштетсе өспүрүм курагында куки жетүү таасири (~ 21% майы) иликтөө иши жүргүзүлүүдө.
Oreo Cookie майын / кант мазмунун турумдук таасирлери
Бул изилдөөдө, Oreo кукилерди акысыз кирүү эрте жашоо оор тажрыйбасы менен аялдар келемиштер психо-сезимдерге кыйынчылыктарды жакшырган. Oreo куки столдун көрсөтүлгөндөй майы гана эмес, ошондой эле кант бийик, бир шоколад болбошубуз керек Table1.1. Адам изилдөөдө, жеп шоколад эч кандай таасири нейтралдуу жана оң маанай табылган, ал эми таза сууга салыштырмалуу терс маанайын кыскарган 59. Ал эми шоколаддын таасирин жакшыртуу маанайы Шоколаддын басаĩдатат, (жөнөкөй шоколаддан vs. сүттү шоколад) көз каранды болгон таттуу даамдуу тамак-ашты бир тажрыйбалык терс маанай мамлекет башчыны да жакшыртат деп эсептейт. Бул сахароза каалоо өнөкөт жумшак стресс жана тоюмдуу сүт шоколад каалоолору менен кайгырган жаныбарлар көбөйүп жатат чөгүп маанай менен сабактар боюнча атайын өсүп жатат деп билдирди 60. стресс бардык Chow тышкары кант жана / же чочко эркин тандоо ызычуулар катуу стресске жооп огу 61. Ошондой эле, кыска мөөнөттүү таасир орточо семиз диета үчүн (20% жүгөрү майы; Oreo кукилер менен ушундай семиз мазмун) жыныстык денечелеринин тартипте Нейроэндокринные жүрүш-туруш жана өзгөртүүлөрдү азгырган 4-6. Баары биригип, ал Oreo кукилер кант жана семиз көрүү MS аялдын нейрон жана жүрүм-турум кыйынчылыктарды жакшыртууга өбөлгө болушу мүмкүн деген жыйынтыкка келет. Андан ары изилдөө Oreo куки жеткиликтүүлүк сыяктуу семизби же кант менен камсыз кылуу ошол эле сумма ушул изилдөөдө байкалган MS аялдар ушундай жакшыртууга чыгара турган болсо карап гарантияланат.
Акырында, ичтеги май кампасы MS аялдар бул изилдөөдө куки кирүү көбөйгөн керек болчу. стресс огу милдетин анын тездиги күчүнө тышкары, даамдуу тамак-аш азыктарын алуу байкалаарлык ёскён май топтолуусун менен лептина жана инсулин көлөмүн жүгүртүүдөгү көбөйдү 15, 61. Эки лептина жана инсулин ventral tegmental аймакта ушунчалык-лимбикалык сыйлык системасы, айрыкча, инсулин тинейджер ташуучулардын эркбилдирүүсүнө өскөн бир жөнгө салуучу милдетин талаша сунуштаганыбызда 62, 63. Жогоруда айтылгандай, ушунчалык-лимбикалык системасы сыйлык өтө стресс огу кызматына байланыштуу психологиялык-психикалык оорулар менен аткыланды 22-27. Демек, өсүп, май топтолуусун менен көбөйгөн лептина жана / же инсулин менен ушунчалык-лимбикалык сыйлык системасында болсо, болжолдуу тездиги, даамдуу тамак-аш азыктарын алуу менен маанай бийиктикте бир ролду ойноого сунуш кылынат. Ооба, майлуу тамак-аш (32% майлуулугу) капалуу керектөө бул изилдөөдө колдонулган окшош MS протоколго дуушар аял келемиштер менен кыйла май топтолуусун көбөйгөн менен тынчсыздануу сыяктуу жүрүм-турумуна жана плазмалык лептина жана инсулин көтөрүлүшү кыскарган 11. Бирок, аны менен болгон MS аялдардын байкалган жүрүш жакшыртуу же жокпу, так куки жетүү эмес, (~ 21% майлуулугу менен орточо семиз диета) көбөйгөн май топтолуусун менен байланыштуу, анткени куки жетүү менен ичтеги май топтолуусун өсүшү андан ары статистикалык мааниге жетип, жок, да жүгүртүүдөгү лептина да, инсулин азыркы изилдөөгө өлчөнгөн.
Аягында, Мбар огу менен турган бузулушу, УАК нейрондор жана Hippocampus жаш аял MS келемиштер энелердин бөлүштүрүү тажрыйбасы психо-жан-касыреттерге-жылы туулган биринчи эки жуманын ичинде тиешеси бар болушу көрүнүп турат. жогорку тоюмдуу тамак-аш акысыз кирүү мүмкүнчүлүгү, орточо майлуу тамак-аш, өспүрүм жана жаш кезинде тиешеси жок MS аялдын Тынчсыздануу жана депрессия сыяктуу жүрүм-жакшыртылган дене салмагын, ошондой эле КР УАК нейрондордо иш Модулатион анын алдындагы нейрон механизмдери бир ролду ойношу мүмкүн.
Acknowledgments
Authors статистикалык талдоо жана доктор JY Lee эксперименталдык техникалары менен жардам Dr. SB Йу ырахмат. Бул изилдөө улуттук изилдөөлөр корунун (2013R1A1A3A04-006580) жана Oromaxillofacial Dysfunction изилдөө Карыларга Сеул улуттук борбордун (2014050477) (илим, МКТны жана келечекте пландаштыруу министрлиги) Корея Өкмөтү тарабынан каржыланган аркылуу гранттардын тарабынан колдоого алынды.
шилтемелер