булак
Натан Клайн институту, Orangeburg, New York, 10962, АКШ. [электрондук почта корголгон]
жалпылаган
Балдар жана өспүрүмдөр көбүрөөк psychostimulants үчүн, же мыйзамсыз же ушундай жана Hyperactivity жок көңүл тартыштыгы бузулуу катары жалпы neuropsychiatric шарттарда, дарылоо дуушар болушат. жаш курактык топтор арасында психотикалык дүүлүктүрүүчү жайылган пайдалануу карабастан, аз жетиле мээде бул ишенимдүү өнөкөт молекулярдык neuroadaptive жооп байланыштуу белгилүү. Бул жерде биз көрсөтөбүз psychostimulants өнөкөт башкаруу кийин кокаин жана amphetamine, Копиялоо жагдай DeltaFosB ядросу accumbens менен upregulated жатат periadolescent чычкандар Ал эми кийинки чыккан баладай же бойго жеткен эмес, чычкандар. кошулуу DeltaFosB Ошондой эле caudate putamen гана кездешет periadolescent чычкандар кийин amphetamine башкаруу. Бул жыйынтыктар psychostimulant иш-аракетти жөнгө салат жана оор молекуласынын өспүрүм мээде уникалдуу пластикасын көрсөткөн бул neuroadaptive өзгөрүүлөр ортомчулук тартылышы мүмкүн деп божомолдоого болот жакшыртылган улуураак бирөө менен өспүрүм тууганы жаман көрүнүштөр.
тааныштыруу
Psychostimulants мындай көңүл топтоосунун жалпы балалык оорулар, дарылоодо колдонулат. Мындан тышкары, amphetamine жана кокаин, анын ичинде дүүлүктүрүүчү, кыянат пайдалануу, өспүрүмдөр арасында таралган, улууларды салыштырмалуу күчөтүлгөн жаман каалоолорго далил бар бир жаш курагы боюнча (Estroff .Удаалаш., 1989; Myers жана Андерсон, 1991). өнүктүрүүчү жүрүш-аракеттерин жөнгө көрсөтүү маалыматтарга карабай, аз бул каражаттарды башкаруу учурунда пайда жетиле мээде молекулярдык neuroadaptive жооп байланыштуу белгилүү. Кокаин жана amphetamine тинейджер D дем аркылуу жарым-жартылай жүрүм-турумдук өзгөрүүлөрдү узакка созулган таасир бериши мүмкүн1кабылдагычтар жана ΔFosB ичинде копиялоо себептерден, деёгээлден көбөйөт, көкүрөк striatum (башкача айтканда, caudate putamen) жана ventral striatum (б.а., ядро accumbens) (Chen .Удаалаш., 1997). Балким, белок заттарын турукташтыруу аркылуу ΔFosB деӊгээлине өсүшү, кокаин же amphetamine үчүн өнөкөт таасиринен кийин бир нече жума бою туруктуу жана тинейджер сигналдын берилүүсүнүн жолуна тарабынан жарым-жартылай жок дегенде жөнгө жатат (Chen .Удаалаш., 1997; Nestler .Удаалаш., 2001).
тинейджер D, анын ичинде жаш жаныбарлардын борбордук dopaminergic системасы, нормалдуу иштеп чыгуу учурунда оор молекулалардын өзгөрүшү натыйжасында олку-солку бойдон кала берет1кабылдагыч DARPP-32 (тинейджер конуштун жөнгө белок; Mr 32 KDA), конуштун (Ehrlich .Удаалаш., 1990;Teicher .Удаалаш., 1993; Perrone-Capano .Удаалаш., 1996; Tarazi .Удаалаш., 1999;Андерсен, 2002). dopaminergic neurotransmission жогорулатуу psychostimulants, ушул мезгил ичинде таасири, ошондуктан ΔFosB сөз өзгөртүүлөрдү, анын ичинде, сандык жана / же сапаттык жактан ар түрдүү молекулярдык жооп алып келиши мүмкүн. psychostimulants үчүн өнөкөт катнаш учурунда жаш курагы боюнча көз каранды neuroadaptive жооптор бар деген гипотезаны сынаш үчүн, чычкандардын үч топ сериялык тажрыйбаларга талдоо жүргүзүлгөн: чоъдорго (60 ж сайма башталганда эски), periadolescent (33 ж сайма башталганда эски) жана кийинки чыккан баладай (24 д сайынуу башталганда эски). Бул үч курактык топтор өнөкөт psychostimulant таасири менен молекулярдык neuroadaptive жооп биринчи түздөн-түз салыштыруу болуп саналат. Биз окшош дарылоо парадигмалардын кийин, periadolescent чычкан кокаин жана amphetamine да жооп ΔFosB upregulation күчөтүлгөн көрсөтүп, деп табылган.
МАТЕРИАЛДАР ЖАНА ЫКМАЛАР
Жаныбарлар жана дары башкаруу. Эркек CD-1 чычкандар (Charles River лабораторияларга, Кингстон, NY) бир 12 саат жарык / караңгы айланышы бөлмөсүнө алынган (6: 00 AM 6 үчүн: 00 PM) менен ад либитумтамак-аш, суу алуу мүмкүнчүлүгү. Жаныбарлар сайма козгоо алдында 10 д бир минимум мал бөлмөсүнө жайгаштыруу үчүн уруксат берилген. Жаныбарлар жаныбарлар бөлмөсүнө чыккан бир бөлмөдө бардык сайма жасаган эки тергөөчүлөрү тарабынан эзилди. Бардык жаныбарлар жашы 21 д боюнча эмчектен чыккан. Денеге сайма 24 (пост-баладай жоошуткан), 33 (periadolescent) башталып, же 60 (бойго жеткен) жашы ж. 20 жана 5: 4 PM 00 д сайын Жаныбарлар 5 мг / кг кокаин (Sigma, Сент-Луис, MO), 00 мг / кг amphetamine (Сигма), же бирдей наборун көлөмүн intraperitoneally 7 ортосунда кабыл алды. Жаныбарлар CO кыскача таасиринен кийин кесүү менен өлтүрүлдү2 10 боюнча: акыркы сайган күнү 00 AM. Brains дароо баш сөөгү алынып, жана caudate putamen жана ядро accumbens ылдам муз кесилген эле. Бардык ичек бир тергөөчү тарабынан coronal мээ бүдүрчөлөр жүргүзүлүшү, ошондой эле белок үзүндүлөрүн жаңы кыртыштын үшүп эле даярдалган. Бардык мал-жоболору Институттук Animal сактоо жана пайдалануу боюнча комитети тарабынан жактырылган жана Кыргыз Республикасынын Саламаттык сактоо улуттук институтунун ылайык алышкан Лабораториялык жаныбарларды сактоо жана пайдалануу боюнча жетекчилик.
Батыш олдоксон талдоо. Батыш олдоксон анализ үчүн ар бир үлгүдөн (caudate putamen жана 40 ядрону мкг accumbens үчүн 20 мг) протеин бирдей сандагы BCA тамганы менен белок топтолушунун өлчөө (Пирс кийин SDS-polyacrylamide гел бир 10% ар бир көчөсүндө да артып калган, Rockford, IL). Бирдей белок жүктөө да nitrocellulose жана / же каршы актин греч өчүрөм өткөрүп кийин Ponceau Red жалпы белок көрүнүшү тарабынан текшерилсе (1: 500; Сигма). FOS байланыштуу антиген (FRA) ΔFosB isoforms тааныйт antiserum, марттык менен М. Iadarola (Ден соолук улуттук институтунун, Бетезда, MD) менен камсыз болгон жана 1 топтоштурууга колдонулат: 4000. Мурунку изилдөөлөр (Chen .Удаалаш., 1997; Hiroi .Удаалаш., 1997), M-пептиддик immunogen менен FRA antiserum боюнча preadsorption, анын ичинде, бул antiserum өзгөчөлүктөрүн көрсөткөн. DARPP-32 5a monoclonal антитело, 1 колдонулат: 10,000, марттык менен Талас менен камсыз болгон. Hugh Hemmings менен Пабыл Greengard (Сенаттын University, New York, NY). тинейджер Ташуучу (DAT) антитело болгон Chemicon (, CA). Доскада NEN-Dupont (Boston, MA) менен жооп chemiluminescence системасын жана кино дуушар болушкан. ΔFosB immunoreactivity үчүн Densitometric баалуулуктар Apple (Biosoft, атып, MO) үчүн ScanAnalysis аркылуу алынган. Статистикалык маанилүүлүгү, бир жолу ANOVA аркылуу аныкталган кийин Постту туз Тукейдин бир нече жолу салыштыруу тести же жупталбаган, эки куйруктуу Студенттики t көрсөткүч уламыштарга көрсөтүлгөн тест. наркологиялык эксперимент үчүн, ар бир курактык топтогу анализи өзүнчө чийип жүргүзүлгөн, жана, ошондуктан, ар бир туздуу топ жаш курактык топтор арасында салыштыруу үчүн 100% наркын негизсиз дайындалдым. Ontogeny изилдөө үчүн, бардык курактык топтордо үлгүлөрү бир чийип бирге талдоого алынган.
ЖЫЙЫНТЫКТАРЫ
кокаин жана amphetamine кийин ΔFosB кошулуу гана periadolescent чычкандардын ядросу accumbens кездешет
ΔFosB билдирүү amphetamine же кокаин башкаруу 7 д кийин ядро accumbens жана пост-баладай, periadolescent боюнча caudate putamen жана бойго чычкандар менен өлчөнгөн. ядро accumbens psychostimulants акыбеттерин кесепеттерин ортомчулардын үчүн өтө маанилүү деп эсептелген мээ аймак болуп саналат. ΔFosB immunoreactivity (35 KDA) тандап amphetamine өнөкөт башкаруу кийин periadolescent жаныбарлардын ядросу accumbens (сүрөт жасалма болчу. 1 A) Же кокаин (сүрөт. 1 B). Ал эми, ΔFosB (35 KDA) өлчөмү бир кыйла кийинки чыккан баладай же бойго жеткен мал ядросу accumbens (сүрөт өзгөртүлүшү эмес.1 A,B). caudate putamen жылы ΔFosB аздыгы (35 KDA), ошондой эле кыйла өнөкөт amphetamine башкаруу гана periadolescent жаныбарлар (сүрөт кийин upregulated алынган.2 A). Бардык үч курактык топтор ΔFosB (35 KDA) кокаин өнөкөт башкаруу кийин caudate putamen сөз (сүрөт олуттуу өскөн көрсөттү.2 B). кошулуу баллга жеткен, бирок, атап айтканда, пост-weanlings (сүрөт менен салыштырганда, periadolescent жаныбарлардын зор болгон. 2 B). Башка FRA жана FOS isoforms бардык жаш курактык топтор өзгөртүүсүз болгон (маалыматтар көрсөтүлгөн жок).
ядросунда ΔFosB immunoreactivity өнөкөт psychostimulant башкаруу кийин accumbens. CD-1 чычкандар бир жолу күн сайын наборун, amphetamine, же кокаин 7 г күнү башталган 24 куюшуп (P24; кийинки чыккан баладай), күн 33 (P33; periadolescent), же күн 60 (бойго жеткен). ядросу accumbens жылы ΔFosB (35 KDA) immunoreactivity даражалары өнөкөт amphetamine кийин көрсөтүлгөн (A) Же кокаин (B) Башкаруу. saline- өкүлдөрү immunoblots (S), Amphetamine- (A), Жана Кокаин- (C) Пост-баладай сайып (P24), Periadolescent (P33), Ал эми бойго жеткен чычкан көрсөтүлгөн жогорку панелдер. Түпкү панелдер шоу базалдык ΔFosB сөз ± SEM пайызын билдирет. n Ар бир топ үчүн баалуулуктар менен көрсөтүлгөн барлар. ΔFosB олуттуу өсүп гана periadolescent чычкандардын ядросу accumbens табылган. *p <0.05; **p <0.01 (Студенттики t сыноо; туздуу и дары).
өнөкөт psychostimulant башкаруу кийин caudate putamen менен ΔFosB immunoreactivity. CD-1 чычкандар бир жолу күн сайын наборун, amphetamine, же кокаин 7 г күнү башталган 24 куюшуп (P24; кийинки чыккан баладай), күн 33 (P33; periadolescent), же күн 60 (бойго жеткен). caudate putamen жылы ΔFosB (35 KDA) immunoreactivity даражалары өнөкөт amphetamine кийин көрсөтүлгөн (A) Же кокаин (B) Башкаруу. saline- өкүлдөрү immunoblots (S), Amphetamine- (A), Жана Кокаин- (C) Periadolescent чычкандар сайып (P33) Көрсөтүлгөнжогорку панелдер. Түпкү панелдер шоу базалдык ΔFosB сөз ± SEM пайызын билдирет. n Ар бир топ үчүн баалуулуктар менен көрсөтүлгөн барлар. ΔFosB immunoreactivity олуттуу amphetamine айынан көбөйүп гана periadolescent чычкандардын caudate putamen табылган (A). Өнөкөт кокаин башкаруу үч курактык топтордо ΔFosB көбөйөт өндүрүлгөн (B). *p <0.05; **p <0.01 (Студенттики t сыноо; туздуу и дары).
DAT жана DARPP-32 өлчөмү өнөкөт кокаин же amphetamine кийин өзгөргөн эмес,
анын ичинде DARPP-32 dopaminergic жана / же dopaminoceptive клеткалар тарабынан көрсөтүлгөн бир нече негизги молекулалар, D1 тинейджер сезгич жана DAT, psychostimulants катуу кармаган жана өнөкөт жооп салым (Moratalla .Удаалаш., 1996; Fienberg .Удаалаш., 1998; Sora .Удаалаш., 1998; Gainetdinov .Удаалаш., 2001). DARPP-32, D маалыматтары1 сезгич жана DAT күчүн DAT уруп-ылдый чычкандар гээлине арасында татаал мамиледе турат, dopaminergic ишин жөнгө салууну, ошондой эле psychostimulants жооп. Чынында эле, ΔFosB дарстарында жана өнөкөт кокаин кабыл DARPP-32 күчүн чычкандар пайда болгон жок (Fienberg .Удаалаш., 1998). бойго жеткен чычкандардын Бирок, 7 үчүн 20 г таасир мг / кг кокаин DARPP-32 жалпы көлөмүн өзгөртө албайт (Fienberg .Удаалаш., 1998). кээ бир түрлөрдүн маалымдаган элек psychostimulants астында DAT белок жөнгө салуу мурда psychostimulants үчүн өнөкөт дуушар чычкандардын, тинейджер ташуу үчүн милдеттүү radioligand-жылы өзгөртүүлөр да кабарланган эмес (Letchworth .Удаалаш., 2001). Бул жерде биз бул протеиндердин бир сөз айкашы чычкандар үч курактагы ар кандай өнөкөт psychostimulant башкаруу кийин өзгөргөн бар экенин аныктоо DARPP-32 жана DAT белок көлөмүн ченеди. Биздин жыйынтыктар үч курактык топтор кайсы бир кокаин же amphetamine же өнөкөт башкаруу (стол кийин эч кандай олуттуу өзгөрүүлөрдү жалпы DARPP-32 же DAT өтө турган бүткүл caudate putamen же ядро accumbens эле бар экенин көрсөтүп турат 1).
Салыштырмалуу densitometry DARPP-32 жана DAT үчүн amphetamine- жана кокаин мамиле менен P24 баалуулуктар, P33 жана контролдоо салыштырмалуу жеткен чычкандар туздуу баалуулуктар, негизсиз 100% белгиленет
ΔFosB базалык өлчөмү өнүктүрүүчү жөнгө салынат
Биз ΔFosB улам бойго жеткен чычкандар striatum жылы ΔFosB генетикалык жактан даярдалган көбөйгөн сөз менен Ontogeny карап psychostimulants үчүн ого бетер жүрүм-турумдук жооп бар (Kelz .Удаалаш., 1999). Биз ΔFosB базалык өлчөмү caudate putamen жана ядро accumbens да чондорго салыштырмалуу жаш жаныбарлардын бир кыйла тёмён болгон (илл деп табылган.3 A). DARPP-32 ичинде тинейджер системасынын иш-түзөө, системасы (Ehrlich .Удаалаш., 1990), DAT (Perrone-Capano .Удаалаш., 1996), Жана тинейджер кабылдагычтар (Teicher .Удаалаш., 1993; Tarazi .Удаалаш., 1999), Ошондой эле өнүктүрүүчү жөнгө салынат. CD-1 чычкандардын Мурунку отчеттор striatal DARPP-32 боюнча төрөттөн күн 28 чегине көрсөтүп турат (P28) (Ehrlich .Удаалаш., 1990). келемиштей жылы caudate putamen жана ядро, D accumbens1P28 үчүн P40 чейин кабылдагыч этаптары чокусу (Teicher .Удаалаш., 1993; Tarazi .Удаалаш., 1999), Бирок окшош изилдөөлөр чычкан аткарылган эмес. Ал эми, бул жерде биз caudate putamen жана ядро accumbens менен DAT белок этаптары төрөттөн күн 24 жана эр (сүрөт ортосунда дайыма болгон деп тапты. 3 B). Ошентип, D салыштырмалуу катышы1 кабылдагычтар, DAT, DARPP-32 жана ΔFosB курактык топтордун ортосундагы айырмаланган, мүмкүн D айырмачылыктарга алып келген1 кабылдагыч иш ΔFosB кошулуу даражасына таасир калышы мүмкүн.
ΔFosB жана Dat өрчүү сөз. A, ΔFosB (35-37 KDA) caudate putamen жана ишенчээк CD-1 чычкандардын жашка милдети деп ядросу accumbens менен immunoreactivity. Өкүлү immunoblots көрсөтүлгөн жогорку панелдер.Түпкү панелдер шоу топтун үч чычкандардын ± Шемдин билдирет. *p <0.05, чоңдорго карата P24; #p <0.05, чоңдорго каршы P36 (Тукейдин ANOVAдан кийин бир нече жолу салыштырып текшерүүсү). B, Densitometric DAT жаштагы милдети деп ишенчээк CD-1 чычкандардын caudate putamen жана ядро accumbens менен immunoreactivity маанилери. Dat системасы үч курактык топтор арасында бир айырмасы деле жок.
ТАЛКУУЛОО
психотикалык дүүлүктүрүүчү жүрүш таасирлери курактык көз каранды болуп саналат. мыйзамсыз заттарды пайдаланууга камынууда Addictive жакын өспүрүм жогорку болуп саналат (Estroff .Удаалаш., 1989; Myers жана Андерсон, 1991). Чынында эле, жаш балдар көп dysphoric psychostimulants дуушар болгондо, өспүрүмдөр жана алардын ата-энелери балкыткан ээ, ал эми болот (Rapoport .Удаалаш., 1980). грызун моделдер, кээ бир изилдөөлөр periadolescent жаныбарлар ишинин жогорку баштапкы даражаларга ээ (деп ойлоймНайза менен Тормозной, 1983) Жана жаш жана андан улуу жаныбарларга салыштырмалуу psychostimulants үчүн өзгөрүү жооптор. Ошентип, алар чыккан баладай жана бойго жеткен жаныбарларга салыштырмалуу psychostimulants курч аз дозадагы башкаруу жооп аз, таяныч дем жана жаңылык мусулман көрсөтүп, ал эми жогорку дозадагы мамиле кийин Hyperactivity жогорулаган. өнөкөт башкаруу менен кокаин-жасалма Locomotion үчүн маа- stereotypy үчүн маа- төмөн, ал эми кишилер менен салыштырганда periadolescent келемиштер жогору болот. Ошондой эле, microdialysis маалыматтар periadolescent жана бойго келемиштер ортосундагы amphetamine айынан тинейджер бошотуу үчүн сезимталдык жагынан айырмачылыктар ачып бердим (Laviola .Удаалаш., 1995; Ildiko Өлкө .Удаалаш., 1998; Ildiko Өлкө жана Laviola, 2000;Laviola .Удаалаш., 2001). Бирок, өспүрүм келемиштер менен methylphenidate башкаруу кийин кокаин үчүн узак мөөнөттүү Reactivity үчүн карама-каршы изилдөөлөр бар (Брэндон .Удаалаш., 2001; Андерсен .Удаалаш., 2002). Бул акыркы эки отчеттор ар кандай эксперимент парадигма колдонулган учурларда изилдөө салыштыруу кыйын экенин көрүүгө болот. жаш жаныбарлардын жүрүм-изилдөө салыштырууга аракет мындан ары да ар кандай түрлөрдүн жана штаммдарынын пайдалануу менен өзүн маскара кылып жатат.
чычкан пайдалануу жана psychostimulants кыянаттык менен изилдөө абдан маанилүү мал үлгү болуп, бул үч ар башка өрчүү жаштагы чычкан же башка бир түргө менен молекулярдык neuroadaptive жооп биринчи системалуу талдоо болуп саналат. Биз дарылоо парадигмаларды алынган турган Мурунку изилдөөлөр өнөкөт кокаин жана amphetamine башкаруу кийин жапайы түрү жеткен келемиштер алыскы көкүрөк жана ventral striatum менен ΔFosB көбөйтүүнү көрсөттү (Hope .Удаалаш., 1994; Nye .Удаалаш., 1995; Тургеон .Удаалаш., 1997), Бирок бир гана өнөкөт кокаин кийин жапайы түрү жеткен чычкандардын курама көкүрөк жана ventral striatum же обочолонгон көкүрөк striatum менен (Fienberg .Удаалаш., 1998; Zachariou .Удаалаш., 2001).
Биз азыр пост-баладай, periadolescent жана бойго чычкандар менен psychostimulant айынан ΔFosB бир мейкиндик жана сандык айырманы көрсөтүп турат. чоъдорго жана пост-weanlings салыштырмалуу periadolescent жаныбарлар менен ого бетер жооп байкоо жооп Кокаин- жана amphetamine-мамиле чычкандардын окшош экенин бекемдейт. psychostimulants да кокаин жана amphetamine көбөйтүү кичинекей тинейджер, ошондой эле, серотонин жана неадреналин, бирок ар түрдүү механизмдер менен. Кокаин тинейджер, серотонин жана норадреналин үчүн кабыкча жеткирүүчүлөр менен байланышып жана presynaptic терминалдары өздөрүнүн reuptake жайлатат. Ал эми, бул amphetamine өткөргүчтөрдүн бошотууну өбөлгө түзөт. caudate putamen жылы ΔFosB жана стимулдаштыруучу башкаруу жана салыштырмалуу ого бетер кошулуу 7 д кийин гана periadolescent жаш курактык топтун ядросу accumbens жылы ΔFosB иргеп дарстарында бул psychostimulants кыянаттык менен буга чейин жогорулаган белгилешкен жакын бир neurobiological өкүлчүлүгү же себеп болушу мүмкүн курактык топ (Estroff .Удаалаш., 1989; Myers жана Андерсон, 1991) Жана жашы боюнча топтордун ортосундагы айырмаланган башка ген сөз менен узак мөөнөттүү өзгөрүүлөрдү, (Андерсен .Удаалаш., 2002). Мындан тышкары, бул айырмачылыктар бойго бүтүрбөөчү каражаттарды, анын ичинде ΔFosB өзү негизги молекулалар баскычтарда өнүгүү өзгөртүүлөр менен жөнгө салынышы мүмкүн. курактык топтордун ортосундагы ΔFosB базалык баскычтарда ар башка мүмкүн болуучу кесепеттерин чычкан штаммдарынын ортосунда сунуш байланыштуу айырмачылыктар окшош (Хайле .Удаалаш., 2001). Чынында эле, биз да оордук айырмачылыктар бир изденүүгө чычкандардын арасынан табууга болот деп үмүттөнүшөт. Ал ар түрдүү жаштагы чычкандар ядро accumbens башка мээнин аймактарында молекулярдык жасоого ар кандай көрсөтөт да мүмкүн. негизги молекулалар жана мындан ары да ушул гипотезаларды сынайбыз жарыш жүрүш байкоолор баскычтарда генетикалык инженердик өзгөртүүлөрдү менен periadolescent чычкандар менен кошумча талдоо.
Шилтемелер
- кабыл алынган April 8, 2002.
- Revision кабыл алды August 6, 2002.
- кабыл алынган August 8, 2002.
Бул иш Drug Abuse Грант P41871-DA30 (EMU) Улуттук нейрологиялык бузулуу саламаттык / Улуттук институтунун институттары менен болду Грант NS13429 (май жана EMU) жана улуттук институту тарабынан колдоого алынган.
Кат алышуу Dr. Michelle E. Ehrlich, Thomas Jefferson University, Кертис 310, 1025 Ошондой көчөсү, Philadelphia, PA 19107 менен чечилиши керек. E-почта: [электрондук почта корголгон].
- Copyright © 2002 Нейро коому
;