ΔFosB effectus of Receptor Cannabinoid et opioid overexpression super accumbens-mediata signaling in nucleum (2011)

Neuropharmacology. 2011 Dec;61(8):1470-6. doi: 10.1016/j.neuropharm.2011.08.046.

Lj-Sim Selley, MP Cassidy, stum Spartae, V Zachariou, J. Nestler, De Selley.

Source

Et medicamentis et Vocatus ad Institutum Materia Medica Editis Et Department of Studies, Virginia res publica University nisl: Vocabulary 23298, USA.

Abstract

Firmum in ΔFosB factor in in nucleus inducatur accumbens (NAC) medicinae ex abusu pluribus in expositione chronica et ΔFosB in transgenic expressio ex proprietatibus lucra striatum pertinere ad MORPHINUM et cocaine. Tamen, haec observationes ad naturam demonstrant machinariam ex hoc intelligi imperfecte. Usus est exemplar apud nos bitransgenic mus inducible expressio in ΔFosB dopamine D (1) receptor / dynorphin striatal, quibus ad effectum determinare de neurons in ΔFosB expressio opioid Cannabinoid et receptor signaling in NAC. C mu eventus ostendit opioid mediabilem consectetur interdum actionem inhibitionis et niger in nac adenylyl murium ΔFosB expressa. Et similiter Kappa opioid inhibitionis de adenylyl cyclase addita sunt in muribus ΔFosB expressing. Iam uero Cannabinoid receptor-mediata signalling non differunt inter overexpressing ΔFosB habebat mures aureos et similitudines murium imperium. TInventiones suadeant ut hese opioid Cannabinoid et receptor signaling differentially modulatorem agnoscas quae expressio ΔFosB, et indicant ΔFosB expressio sui effectus, ut producendum per aliquam consectetur Kappa mu et receptor signalling in NAC.

Keywords: G-dapibus, adenylyl niger, striatum
Ire;

1. Introduction

Opioid receptores, & CB Cannabinoid1 receptores (CB1R) neurobiological peltas pro duobus temporibus maxime usitato sunt classes, quae includit medicamento MORPHINUM, heroine, et dierum praescriptio opioids et Marijuana (Δ9-tetrahydrocannabinol (THC)), respectively. Acutus effectis opioids et cannabinoids sunt mediata per G, & receptores, ut dapibus eu, praesertim G coupledI / O proteins sunt decurrent atque producendum respondeo ut effector inhibitionis de adenylyl cyclase (Childers, 1991, Childers, et al., 1992, Hewlett, et al., 2002). Et motricium, ac fraterna vitia psychotropica memoria effectus est Δ9-THC sunt productum ex CB,1R (Huestis, et al., 2001, Zimmer, et al., 1999), Quam distribui sunt late in cerebrum, in altos gradus basali ganglia, et hippocampi Cerebellum (Herkenham, et al., 1991). Et retribuens analgesic effectus ex maxime relevant amet purus opioid et ludibrio habitæ sunt mediata per mu opioid maxime receptores (MOR) (Matthes, et al., 1996), Qui divites facti sunt, et brainstem ad limbic system (Mansour, et al., 1994). Et ratio mesolimbic: productiones ex ipso composito dopaminergicae areae tegmentalis ventralis (VTA) in nucleo accumbens (NAC) Gravem partem agit, honos habitus est in effectis, et opioids cannabinoids (Bozarth et sapiens 1984, Vaccarino, et al., 1985, Zangen, et al., 2006), Tum alia pharmaca de abusu (Et Koob Volkow, 2010). Et endogenous opioid Cannabinoid systems et infandae cupiditatis involvunt per effectus, honos habitus est in plures classes medicamenta psychotropica (Maldonado, et al., 2006, Triticum aestivum; et al., 2010). Et sic, explicatur magni momenti est, namque machinationes, CB, quibus opioid1R signalling NAC in lege regulantur.

A centralis quaestio pharmacum abusu in agro fuerit proteins ut identify illo medio, per quod transitur ex acuto ad longum-term of effectus medicamenta psychotropica. AP-factor 1 ΔFosB maxime interest, quod est productum ex splice variant firmum extimatione mutila, fosb quod saepe accumulat in gene orci pretium medicamentis conviciis naturalis (Imperio exuta foeda, et al., 2004, Nestler, 2008, Nestler, et al., 1999). Qui adductus est in nobis deprehendi ΔFosB his cerebrum saepe exposita ad MORPHINUM, Δ9-THC, aut COCAINUM ethanol, quisque medicamento cum a unique producendo bibendum præbe exemplum ΔFosB sunt (cf.Perrotti, et al., 2008). De inventione consistit summa per pharmaca inductus fuit ΔFosB striatum ubi quattuor effecerunt medicamenta ΔFosB Δ nisi in nac Core9In testa solida, caudato-expressio adductus significantly -THC NAC putamen.

Pharmacological studiis ostendit quod co-administratione dopamine in D1 (Felis D1R) obstruxit ΔFosB inductionem tractanda est per nuncios SCH 23390 NAC et non continuo secutus putamen caudato-cocaini minimi vel administrationem MORPHINUM, suggerens momentum D potentiale1Expressing neurons-R (Et Unterwald Miiller, 2005, Q.; et al., 1995). Effectus autem inductionis est ΔFosB medicamento-mediata per partum habito bitransgenic murium, qui demoliti sunt in propria neuronal populorum exprimere ΔFosB de NAC, dorsalium striatum (Chen, et al., 1998). Murium, qui demoliti sunt in dynorphin ΔFosB exprimere / D1R positivum neurons in NAC, dorsalium striatum (line 11A) respondeo ut ostenderet exigeret versoque ubi medicamentis ex abusu, notabiliter auctus honos habitus animorum, effectis, aut MORPHINUM cocaini minimi (Lacuna, et al., 2003, Kelz, et al., 1999, Zachariou, et al., 2006). Hae mutationes mutationes in absentia occurrit in gradus plus et variis subunits G-dapibus. Sed dynorphin cDNA campestribus quoque et in manipulos redactæ ΔFosB expressing habebat mures aureos et NAC (Zachariou, et al., 2006), Quod nempe in unum scopum in gene est ΔFosB opioid peptide encoding in endogenous. ΔFosB etiam inductio, ut regulet receptor signaling producendum morum mutationes in NAC sed facultatem non quaeritur. Ideo nunc de studiis usus ad determinare utrum overexpression bitransgenic mus exemplar est in ΔFosB dynorphin / D1R quibus striatal neurons palmam movet sequester Mor-G-dapibus ac mor- actio et KOR adenylyl niger-mediatae inhibicionis in NAC. Quod autem effectus ΔFosB in CB1G-R-mediata, et est certum quod operatio dapibus Δ9Induces in administratione -THC ΔFosB NAC (Perrotti, et al., 2008) Endocannabinoid ratio est notum est eundem ordinare et in circulos cerebrum praemium (Cicero, 2005, Maldonado, et al., 2006), Sed effectum Dei in ΔFosB endocannabinoid ratio non quaeritur.

Ire;

2. Materiae et methoda

2.1. reagentia,

[35S] GTPγS (1250 Ci / g) [α-32P] ATP (800 Ci / g) et [3H] castra (26.4 Ci / g) hii empti sunt ex PerkinElmer (Shelton CT). ATP, T, domestici grossi, quae castrensis, bubulus serum albumin, creatine phosphokinase, papaverine, imidazole FERO-et-55212 2, Sigma hii empti sunt ex Johann (S. Ludovici, MO). Herpesvirus hominis GTPγS emptus de Rupe Corporation (Chicago, IL). DAMGO provisum fuit per Drug Supply Program ad National Institute in medicamentis illuderet (Rockville, MD). Quinta 1 scintilla-fluida, ab adeptus est Fisher Scientific (Atlanta, GA). Ecolite scintilla adeptus erat fluida a ICN (SOLARA CA). Acta fuerunt ab chemicals omnes Sigma Johann piscatoris.

2.2. Mures

Male bitransgenic ex similitudines murium, NSE TTA (linee A) × TetOp, ΔFosB (line 11) descriptus generata sunt in Kelz et al. (Kelz, et al., 1999). Congesto super mures doxycycline Bitransgenic concipitur (per aquam 100 μg) transgene comprimere possunt. At Hebdomadas 8 aetatis doxycycline omittitur dicitur aqua media murium transgene ut cum reliquis taceam transgene doxycycline mures sustentatum. Cor eorum post hebdomades collected 8 tempus ad quem Transcriptional effectus es de investigando ord ΔFosB (Et Nestler imperio exuta foeda, 2003). A secunda acies fuit, in quo mus transgenic Δc-Iun, Iun-c adversario negans dominatur, hoc expressit In D1R / D et dynorphin2R / cellulae enkephalin striatum, et hippocampus parietal cortex (Frorrari, et al., 2003). Iun Iun C-related familiae et familiae Fos proteins dimerize cum proteins, eruntque et movebuntur inter axi AP 1 locus est eundem ordinare transcribenda scopum Genes. Sed truncation de c-Iun N-terminus (Δc-Iun) facit ut quiescant, et universa transcriptionally potest ad impediendam activae et AP-binding 1 complexorum. Male bitransgenic similitudines murium, NSE ex TTA (linee A) × TetOp VEXILLUM Δc-Jun-(linee E) sunt generatae, sicut in Frorrari et al. (Frorrari, et al., 2003). Congesto super mures doxycycline Bitransgenic concipitur (per aquam 100 μg) transgene comprimere possunt. At cum catulis lactentibus 3 hebdomadibus genotyped et dividitur in partes dimidiae partis aquae contineat sustentatum doxycycline iusto aqua GNAVIS Δc Iun inducere possunt. Cor eorum post hebdomades collected 6 tempus ad quem maxima Iun-gradus GNAVIS Δc sunt metiri (Frorrari, et al., 2003). Animalis sunt omnes rationes ad normam cum cura et usus ab National Institutionum salutem Libri Laboratory animalibus.

2.3. membrana Praeparatio

Qui erant repositi in cerebrum usque ad dies non incassum -80 ° F. Prior, vt, inter cerebrum erat dilapsa diffunderet; et incidit in NAC fuit glacies. Quisque dictum homogenized sample, in HCl Tris 50 mM: mM 3 MgCl2: MM 1 EGTA, pH 7.4 (quiddam membrana) 20 ictibus debilitarentur et a speculo ad homogenizer 4 ° F. Et factum homogenate centrifuged ad × 48,000 g ad 4 ° C min 10, in membranam resuspended quiddam, centrifuged x, iterum ad 48,000 g ad 4 ° C min 10 et resuspended Tris, in HCl 50 mM: mM 3 MgCl2, 0.2 EGTA mM: mM 100 Sodium, pH 7.4 (quiddam coeperimus). Dapibus elit determinatae sunt per modum Bradford (Bradford, 1976) Usura bovine serum albumin (BSA) ut vexillum.

2.4. Dorsi irritatus, [35S] GTPγS Paperback

Membranae sunt in pre-incubated 10 30 minuta ad C ° cum adenosine deaminase (3 LUNULAS QUASDAM / g) in vitro quiddam. Ruptis telis (μg, 5 10-dapibus) pro 2 sunt ergo incubatis ad 30 i ° C in vitro quiddam continet 0.1% (w / v) BSA, 0.1 M [35S] GTPγS, et adenosine deaminase 30 μM Domestici Grossi (3 LUNULAS QUASDAM / g) Et cum non oportet, aut concentrationes DAMGO WIN55,212, 2. Specificae ligandi et metiri 20 μM GTPγS. In finem accepit per L. filtration per incubationem GF / Filtra alimentorum fibra speculum B, sequitur in 3 lavat 3 g-glacies-frigus 50 mM Tris HCl, pH 7.4. Radioactivity tenetur fuit constituta mersa scintilla spectrophotometry post te usque mane Hoteles Econo extractione per Filtra 1 scintilla-fluidum est.

2.5. Adenylyl cyclase perdere catalla

Ruptis telis (5, 25 μg, dapibus) sunt preincubated cum adenosine deaminase ut supra, defuerint, tunc incubatis pro 15 min ad 30 ° F in praesentia vel absentia 1μM forskolin, cum vel sine DAMGO, U50,488H aut WIN55,212, 2 in vitro quiddam continet 50 μM glutamicum [α-32P] ATP (1.5 μCi), 0.2 mM Metro, 0.1% (w / v) BSA, 50 μM Insecta, 50 μM T, 0.2 mM papaverine, 5 mM phosphocreatine, 20 unitates / ml creatine phosphokinase et adenosine deaminase (3 LUNULAS QUASDAM / g) in ultima ex volumine 100 μl. Sub his conditionibus, summa [α-32P] cAMP curatus est plerumque minus quam moles totalis 1% de added [α-32P] In ATP per cf. Esset reactionem ad quod terminabitur per ebullitionem et 3 min [32P] est desolatus aliorum duplex columna Insecta (Dowex et ALUMEN) modum Salomon (Salomon 1979). [3H] castra (10,000 DPM) additum est per tubum prior est columna quod est internum Fungi vexillum. Radioactivity scintilla fuit constituta mersa spectrophotometry (45 pro efficientiam% 3II) post 4.5 ml de eluate dissolvi sunt in 14.5 Ecolite scintilla ml aquae contineat.

2.6. Analysis

Nisi aliter notetur, data sunt relatum ut values ​​± Eurus quam medium-4 separatum ab 8 experimenta, quibus patratum est, ponuntur inter se triplicatam. Net-eliciebatur [35S] Calculus initus est, quod teneatur GTPγS agonist minus obligat apud basalia excitetur-binding. Net forskolin-eliciebatur adenylyl cyclase primum ergo dicendum quod operatio forskolin-eliciebatur actione - parsbasilaris ossis actio (pmol / mg / min). Inhibitionis de forskolin percent-eliciebatur adenylyl cyclase primum ergo dicendum quod operatio (actio-eliciebatur forskolin rete in absentia agonist - net forskolin actio-eliciebatur coram agonist / net-eliciebatur forskolin actio in absentia agonist) × 100. Decet omnes lineae curvae, atque ad analyses factae sunt per Prisma inspicerem 4.0c (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA). Concentration curvae sunt effectus, non-linearibus procedere per hypotheticam adipisicing obtinere I.50 et Emax values. Statistical comprehendet ipsorum concentration-effectus est notitia analysis modo determinari per duos collegas discrepare videatis (ANOVA), per inductionem tractanda est agonist dose et gene (in vel off) ad pelagus factores. Statistical significationem, curva fit values ​​(Emax sive EC50) Determinari per in paria duo haliaeetus studiosum scriptor non-T-test: Livy usus est correctione transmutatio radix quadrata ex inaequalibus corrigere necesse qua notitia idolorum (nequiquam detecta fraude in F-test) in I.50 values.

Ire;

3. results

3.1. ΔFosB effectus est in expressio opioid Cannabinoid et receptor-G-mediata dapibus activation

Utrum CB mor-1R-G-dapibus activation mediante expressio immutata est in transgenic inducible ΔFosB in NAC, excitantur ignaui, agonist [35S] GTPγS teneatur frequentissimoque consilio inspiceretur sparsis membranas expressing paravit ex hac regione bitransgenic habebat mures aureos sub conditione (de ΔFosB) aut non expressing (ΔFosB off) ad ΔFosB transgene. Ad Mortem Festinamus enkephalin Analog-electionem selectivam DAMGO movere solebat, cum et Cannabinoid aminoalkylindole WIN55,212 Mor-2 eu erat ad CB,1R. Hi sunt ligands antea ostensum est plena agonists MOR procul, CB,1R: respectively (Breivogel, et al., 1998, Selley, et al., 1997). Non quia operatio dapibus queas cognoscere signo G KOR mediabilem rodent preme in cerebro (Childers, et al., 1998). Eventus ostendit intentionem et effectum DAMGO dependent et excitanda interdum G-WIN55,122 2 ΔFosB in nac a muribus et in ΔFosB (figure 1). Ad actionem excitemur, DAMGO (figure 1A), Duo-modo ANOVA ab concentration-effectus notitia revelata significant principalis effectus ex ΔFosB status (p <0.0001, F = 22.12, DF = I) et DAMGO concentration (p <1, F = 0.0001, DF = V) nihil actionem mutuam significant (29.65 = p, = 5 F, dF = v). Analysis falsorum eliciatur veritas procedere in effectum, concentration significantly maior revelatur curvae E DAMGOmax a mures ΔFosB in valorem (Emax = ± 73 5.2 excitanda%) off quinque mures aureos secundum ΔFosB (Emax LVI = ± 56% excitanda, p <4.1 ex diversis ΔFosB super mures insistere ex studiosum scriptor test-T). DAMGO I.50 ΔFosB inter diversas similitudines murium, in quod off ΔFosB non values ​​(302 ± ± 72 212 versus 56 NM NM, respectively, p = 0.346).

figure 1 

ΔFosB effectus est expressio agonist super-eliciebatur [35S] GTPγS in NAC binding. Membranas expressing, ex ΔFosB (ΔFosB est) aut imperium (ΔFosB off) mures tentabant variis concentratione de quibus ita apud usura Ratio ...

Contraque results adeptus apud MOR agonist DAMGO non-dependens status ΔFosB differentiae G-activation dapibus monasteriales servarentur, cum Cannabinoid agonist WIN55,212 2 (figure 1B). Duo-modo WIN55,212-2 concentration ANOVA, est a significant effectus principalis effectus ex data revelatione WIN55,212-2 concentration (p <0.0001: 112.4 = F, DF = VII), sed non ΔFosB status (p = 7 , F = 0.172, dF = I) et nihil interaction (1.90 = p, = 1 F, dF = VII). Similiter etiam non est effectus ex ΔFosB status in E WIN0.930-0.346max values ​​(103 6 ± ± 108%% versus 8 STIMULUM ΔFosB in quod off murum, respectively, p = a 0.813 studiosum scriptor test-T), sive EC50 values ​​(103 ± ± 20 170 versus 23 NM NM in quod off ΔFosB super mures insistere, respectively, p = 0.123).

Ex ex figura, ex flexuris linearum et quod prior noster et studia ostensum est, biphasic WIN55,212 2 concentration-effectum curvis in cerebrum (Breivogel, et al., 1999, Breivogel, et al., 1998), Sunt etiam exponi per curvas 55,212, WIN2 ad duos situs exemplar. De notitia ostendit Analysis Curabitur apta proelio levi emendationem in bonitatem usus est duorum, situm exemplar (R2 = 0.933 et 0.914, 3644 = summa quadratorum, et in 5463 ΔFosB in quod off murum, respectively) comparari ad locum, unum exemplar (R2 = 0.891 et 0.879, 6561 = summa quadratorum, et in 6628 ΔFosB in quod off murum, respective). Autem, non invenerunt significant varietas inter sunt ΔFosB in quod off E potest aut muribusmax sive EC50 altum humilis aut potentia, quae in locis (Supplementary Table 1), Quamquam minus erat ad trend I.50 a mures insistere, cum princeps potentia valorem site in ΔFosB supra (I.50altum 28.0 10.6 = ± m) cum illis comparari ΔFosB off (I.50altum 71.5 20.2 m = ±; p = 0.094). Praeterea, effectus non fuit in die ΔFosB status basalibus [35S] GTPγS binding in NAC ruptis telis (253 ± ± 14 versus 226 14 fmol / mg forma in quod off ΔFosB super mures insistere, respectively, p = 0.188). Haec notitia indicant inducible transgenic expressio ΔFosB NAC in murum auctus Mor-mediata G-activation dapibus non afficere CB;1R-G-dapibus operatio basali vel mediata.

3.2. Effectus of Receptor-mediatae inhibicionis ΔFosB in opioid et Cannabinoid adenylyl cyclase

Effectum est aestimare inducible transgenic locutio modulandis ΔFosB amni effector operatio CB MOR1R. niger adenylyl actionem excitemur, inhibitionis 1 μM Forskolin nac examinatus in membranis. Praeterea, CB, in mor-1R-mediatae inhibicionis adenylyl cyclase operatio, effectus est operatio KOR dum explorati sunt usura electionem selectivam, KOR plena agonist U50,488 (Hao, et al., 1997): Quia prior eventus ostendit quod scopum fuit dynorphin cDNA de ΔFosB bitransgenic in exemplum (Zachariou, et al., 2006). DAMGO eventus ostendit, et U50,488 WIN55,212, singulis herbam 2 retrahitur ab operatione dependent ΔFosB niger et inhibitionis adenylyl ΔFosB super mures (figure 2). Duo-modo ANOVA, est effectus DAMGO concentration data (figure 2A) Revelatum significant principalis effectus ex ΔFosB status (p = 0.0012, F = 11.34, DF = I) et DAMGO concentration (p <1, F = 0.0001, DF = VI), sed non significant actionem mutuam (p = 29.61, F = 6 , dF = VI). Analysis procedere in effectum, concentration DAMGO falsorum eliciatur veritas revelatur significantly inferiores DAMGO linearum EC,50 a mures ΔFosB in valorem (CI ± m XI) comparari ΔFosB off murum (CLXXXII DX ± m, p <101 ex studiosum scriptor test-T). Sed nulla est differentia in E DAMGOmax values ​​(20.9 1.26 ± ± 19.8%% versus 1.27 inhibition in quod off ΔFosB super mures insistere, respectively, p = 0.534).

figure 2 

Inhibitionis niger vultu ΔFosB effectus adenylyl nac operatio. Membranas expressing, ex ΔFosB (ΔFosB est) aut imperium (ΔFosB off) conprehensum temptabant mures de qua in libro Rerum coram 1 μM ...

KOR-mediatae inhibicionis adenylyl niger tamquam munus diversa opinio et de transgenic inducible expressio ΔFosB (figure 2B). Duo-modo ANOVA ab U50,488 concentration notitia, ostendit effectum principalis effectus est significant status ΔFosB (0.0006 = p, F = 14.53, DF = I) et U1 concentration (p <50,488, F = 0.0001, DF = III) cum non significant actionem mutuam (26.48 = p, = 3 F, dF = III). Has equitibus distribuit falsorum eliciatur veritas procedere analysis, curva effectus maior revelatur E U0.833max a mures ΔFosB in valorem (18.3% praeceptum ± 1.14) comparari ΔFosB off murum (12.5 2.03% ± praeceptum, p <0.05 ex ΔFosB in diversis ex studiosum scriptor test-T), nulla est differentia in U50,488 I.50 values ​​(310 ± ± 172 225 versus 48 NM NM in quod off ΔFosB super mures insistere, respectively, p = 0.324).

Contra denuo inspiciens MOR et KOR effectus, non fuit a significant effectus inducible in inhibitionis de transgenic ΔFosB expressio adenylyl cyclase in Cannabinoid agonist WIN55212, 2 (figure 2C). Duo-modo ANOVA de notitia ostendit a significant effectus et effectus WIN55,212-2 concentration-medicamento retrahitur (p <0.0001, F = 23.6, DF vocetur II), sed non ΔFosB status (2 = p, = 0.735 F, df = I) nec in non significant actionem mutuam (0.118 = p, = 1 F, dF vocetur II). Praeterea, effectus non est status ΔFosB Forskolin basali vel niger, excitata adenylyl Dorsi nulla operatio. Quod operatio basali adenylyl cyclase CDXCI ± pmol XXXV / mg / min in ΔFosB de DXLVI ± comparari habebat mures aureos off ΔFosB in XLIV (p = 0.714 per studiosum scriptor test-T). Item, operatio adenylyl niger coram I μM forskolin erat MMCCXLIV CLXIII pmol ± / mg / min in ΔFosB super mures insistere versus MMCCCLXXII CXXXVIII pmol ± / mg / min in ΔFosB off murum (p = 0.343).

3.3. Effectus of Receptor-mediatae inhibicionis ΔcJun in opioid et Cannabinoid adenylyl cyclase

Eo inhibendi inducible transgenic consectetur expressio ΔFosB KOR signum traduce esse et a mor adenylyl nac niger in ea interesse utrum dominatur transcriptum esset modulate receptor negative Matrix ΔFosB mediabilem signalling contrario modo. Hoc volentes, inhibitionis, excitata Forskolin adenylyl U50,488 niger et examinatus in membranis DAMGO actiones paratum a muribus bitransgenic nac de conditione ΔcJun exprimens. Eventus ostendit non significant effectus in inhibitionis de ΔcJun expressio adenylyl cyclase plus et operatio a KOR (figure 3). Duo-modo ANOVA ab DAMGO concentration-effectum curvis ostendit a significant principalis effectus ex DAMGO concentration (p <0.0001, F = 20.26, DF = VI), sed non ΔcJun status (p = 6, F = 0.840, DF = I) et nihil significant actionem mutuam (0.041 = p, = 1 F, dF = VI). Similiter etiam non est differentia in Emax sive EC50 a mures ΔcJun inter values ​​(Emax 23.6 2.6% ± =; I.50 304 43 = ± m) seu ΔcJun off (Emax 26.1 2.5 ± =%, p = 0.508; I.50 DCXI m = ± CLXXVI: p = 611). Similia visa sunt in U176 eventus, ita ut duos-via ANOVA ab concentration effectum curvis ostendit a significant effectus: has equitibus distribuit (p <0.129, F = 50,488, DF = VI), sed non ΔcJun status (p = 0.0001 , F = 11.94, dF = I) et nihil significant actionem mutuam (6 = p, = 0.127 F, dF = VI). Fuerunt autem non signanter differentias in Emax sive EC50 a mures ΔcJun inter values ​​(Emax 14.8 2.9% ± =; I.50 211 81 = ± m), vel off (Emax 16.7 1.8 ± =%, p = 0.597; I.50 360 m = ± 151, p = 0.411).

figure 3 

Inhibitionis niger vultu ΔcJun effectus adenylyl nac operatio. Membranas expressing, ex ΔcJun (ΔcJun est) aut imperium (ΔcJun off) mures incubated coram DAMGO (A), U50,488H (B) seu WIN55,212 2, ...

Et non significantly afficiunt expressio ΔcJun inhibitionis de adenylyl cyclase in NAC in Cannabinoid agonist. Duo-modo ANOVA ab WIN55,212-2 concentrationeffect curvae ostendit a significant effectus principalis de WIN55,212-2 concentration (p <0.0001, F = 15.53, DF = VI), sed non genotype (6 = p, = F 0.066, dF = I) et nihil significant actionem mutuam (3.472 = p, = 1 F, dF = VI). Fuerunt autem non signanter differentias in E WIN0.973-0.208max values ​​(13.0 ± ± 2.3 13.6 et 0.9%% off versus inhibition in ΔcJun super mures insistere, respectively, p = 0.821) et sive EC50 values ​​(208 120 ± ± 417 NM NM, 130 versus off in ΔcJun super mures insistere, respectively, p = 0.270). Et quamuis in levi inclinatio minuitur potentia, WIN55,212 2 exprimens ΔcJun muribus et alter Cannabinoid signanter inhibitionis adenylyl transgene non niger. Sed effectus non est status ΔcJun Forskolin basali vel niger, adenylyl actionem excitemur. Quod operatio basali adenylyl cyclase 1095 71 pmol ± / mg / min, et 1007 77 pmol ± / mg / min (p = 0.403) in vel off in ΔcJun et similitudines murium, respectively. Concitatus est operatio adenylyl cyclase 1 μM forskolin 4185 293 pmol ± / mg / min versus 4032 273 pmol ± / mg / min (p = 0.706) in vel off in ΔcJun et similitudines murium, respectively.

3.4. disputationem

Eventus hoc studio revelatum est decorarat atque auxerat, Mor-G-mediatae inhibicionis adenylyl cyclase dapibus activation et in murum NAC inducible cum expressio ΔFosB in transgenic dynorphin / D1R quibus neurons. KOR-mediatae inhibicionis adenylyl cyclase operatio est etiam auctus, in NAC ΔFosB expressing et similitudines murium, quod nempe in endogenous opioid ΔFosB atque impellitur ad systema NAC. In E DAMGOmax eius valorem maior in Mor-eliciebatur [35S] GTPγS arbitrantur, et sua I.50 pretii fuit de inferioribus adenylyl cyclase præceptum, in ΔFosB super-control expressing habebat mures aureos et similitudines murium, comparari. Hi Inventiones suadeant of Receptor facultatem posceret, sed effector crebritate modulorum suaviorem, non dapibus G-activation sub condiciones non incassum confirmat. Et inventum est maximus niger adenylyl per inhibitionis de KOR agonist ΔFosB expressio suadet affectus est humilis receptor-mediata KOR Subsidium ad responsum, constat ex locis in low campester of binding KOR mus cerebrum (Unterwald, et al., 1991). E contra, supra quadratum CB1G r mediatae inhibicionis adenylyl niger et tenet actio interdum ΔFosB dictum quod nempe in opioid Cannabinoid systems et responsionem differre in his ΔFosB NAC neurons.

Quod autem effectus in ΔFosB signalling receptor-mediatae, quae potest esse etiam cum fama prior ΔFosB expressio nostra versa sunt in acuti et inveterata effectis MORPHINUM striatum (Zachariou, et al., 2006). Una est, quae habebat mures aureos et inventum studium illius in transgenic expressio ΔFosB dynorphin / D1R striatal neurons sunt magis ad MORPHINUM sensitivo quam in locum condiciones activare. Ceterum quod mimicked a virally mediante expressio ΔFosB per hunc modum Utilia situm iniectio in NAC. Hi sunt consistent observationes de current eventus, ut ostendam in NAC signalling consectetur MOR.

Identified a nobis antea gene modum translitterandi pro scopo dynorphin ΔFosB et stat sententia esset auctus honos dynorphin proprietates reducuntur in morphine ΔFosB mures bitransgenic (Zachariou, et al., 2006). -Mediatae inhibicionis de praesenti results ostendere quod KOR adenylyl cyclase in NAC amplificatur in ΔFosB expressing similitudines murium, qui reflectunt, ut in sequentibus redactum sensitivum compensatory incremento in KOR dynorphin. KOR previous studiis ostenditur quod cum sunt in aliqua upregulated cerebrum regionum et habebat mures aureos prodynorphin knockout, inter NAC (Sulpicius Severus, et al., 2003).

Contraque ΔFosB, inducible transgenic expressio ΔcJun et regnat in ΔFosB binding particeps cJun negans extimatione mutila, mutant, per praeceptum accepisset, nihil mutato adenylyl niger aut KOR agonists MOR. Suadeant ut subjectam eventus expressio ΔFosB Hi gradus, quae sunt relative humilis, non ludere a munus in obtinendo significant receptor signalling ad hoc planum est in signum traduce NAC. Quod requiritur ad MORPHINUM et lucra effectum est studium diminuitur ΔcJun expressio in nostro prior (Zachariou, et al., 2006) Per conditionem proponit ΔFosB vel inductione proceditur morphine regula morum maxima responsa pharmacum aut aliis vitiis proximales ΔFosB Transcriptional effectus influere possit significatione per receptores opioid opioid pretium. Quoquo modo, praesens eventus studio, ut scilicet ostendam, in campestribus quoque expressio a sensualibus elevatur, ΔFosB cum basi striatal dynorphin / D1R-expressing neurons, is cuius astrictum est incremento in ora sagi unius et a Mor KOR ad inhibicionis adenylyl cyclase in NAC.

In qua mor- et machinationes KOR signalling-mediatae, quae per decorarat atque auxerat ΔFosB overexpression lateat, sed ut ante ostensum est, quod Mor partis, per visum [3H] binding naloxone, non aliud in NAC versus off murum et super ΔFosB (Zachariou, et al., 2006). In eodem studio invenitur, quod Gαi1 2 dapibus elit et a ΔFosB non affectus in hac regione expressio. Sed prior ostendit quod gene expressio ordinata digeruntur Gαo a mures de ΔFosB cDNA est upregulated in NAC (Et Nestler imperio exuta foeda, 2003). Eam rem erit in futuro examine comprehendendo studiis modum est expressio de transgenic ΔFosB G-dapibus protein expressio ad planum tum multorum ex G-expressio dapibus modulatory proteins.

Est interesting quod expressio non augendae ΔFosB CB;1R-mediata signalling in NAC. Non enim fieri potest ut alterationes in CB1R signalling fieri, ut aer per gradus discretos population de neurons in toto NAC præparátio ejus. Exempli gratia, ab administratione Δ9- THC significantly adductus ΔFosB in core, et non placebunt, de NAC (Perrotti, et al., 2008). egondeed, ut ostensum est, quod cum provocatione Δ9-THC verba haec administratio ex Δ9-THC auctus release dopamine in NAC core et coeperunt minui release in putamine (Cadoni, et al., 2008). Est etiam momenti ad note quod linea 11A bitransgenic habebat mures tantum exprimunt ΔFosB dynorphin / D1R positivum tribulos neurons in medium striatum, sed CB1Non expressit in utroque dynorphin R / D1Et enkephalin R / D2R positivum striatal neurons (Et Hohmann Herkenham, 2000), Tum in terminals corticales, afferents (Robbe, et al., 2001). Dominatur negativam sententiam ordinator ΔFosB mediabilem transcribenda, ΔcJun et receptor signaling Cannabinoid significant effectus non tamen est ΔcJun utroque D expressae inducibly1 et D2-containing tribulos neurons in medium populi sunt quinque mures aureos (Frorrari, et al., 2003). Non potest autem esse subjectam ΔFosB expressio humilis satis est, quod non afficit ΔcJun receptor signaling, ut suggesserant, et MOR proventus per Ps. Est etiam possibile sit CB1R signalling addita est cellula basali modice ΔFosB expressio, ita ut ultra augendae ΔFosB expressio vel asilo subierunt, eiusdem actus et effectus non modica ΔcJun quod non pertingunt usque ad actuariorum quaeremus. Alio modo indirecte auxilium videri potest ab interpretatione huius WIN55,212 comparet, 2 I.50 expressing ΔcJun values ​​inter mures aureos versus ΔFosB. Ratio est, 55,212 WIN2 ex EC;50 quia praeceptum adenylyl cyclase pretii expressio ΔcJun in muribus, adductus est ad EC;50 A pretium interdum expressionis effecerunt activation in mures ΔFosB 4.0 est autem proportio erat muribus transgene 1.2 aut sine inductione.

Vel, ut inducerent cannabinoids ΔFosB expressio sine effectum in recta CB,1R signaling. In hac sem, cannabinoids esset docilitatis ad synphoniae dicuntur de alia medicamenta psychotropica effectus ΔFosB-mediata per Transcriptional defensionem. egon quidem Δ administrandae9-THC facit crucem, ad sensitisation amphetamine et opioids (Cadoni, et al., 2001, Lamarque, et al., 2001), Ex hac hypothesi consistent. Praeterea, saepe relatum ut crescat administrandae Cannabinoid agonist CP55,940 Mor-G-dapibus activation de NAC mediata, ita ut quinque mures aureos inducibly expressing ΔFosB studium in praesenti (Vigano, et al., 2005). Quod autem effectus in ΔFosB expressio Δ9-THC-mediata non aestimandam partum, sed esse praesens eventus non tollit contenderunt. Eventus hoc studio nostro prior (Zachariou, et al., 2006) MOR et ostendam ΔFosB, mutasse quaedam in adductus KOR / dynorphin per striatum. In Δ lucra effectis9-THC quod metiri preference in loco sunt, sublatos esse MOR nullum habebat mures aureos: Δ tenue cum deletionem KOR9-THC revelatum est aversio et Δ9-THC preference est (Ghozland, et al., 2002). Et similiter conditionata locus facultas Δ9-THC abest dynorphin pro fera-knockout comparari genus murium (Zimmer, et al., 2001). Haec notitia suadeant quod Δ9-THC gratior esset post ΔFosB et per inductionem tractanda est inductio ad reductiones per dynorphin expressio significat MOR.

In summariay, huius eventus expressio studio ostendit, quod in D ΔFosB1R / dynorphin positivum striatal neurons decorarat atque auxerat, et mor- KOR signalling-mediatae inhibicionis de mediata per campester of dapibus G-niger adenylyl actio in NAC. Hoc enim demonstratum est, quod inventum est consistent partes ad studia cum opioid ratio in endogenous praemium (Triticum aestivum; et al., 2010), Et ad providere a mechanism potentiale effectus est praemium ΔFosB mediata,. E contra, supra quadratum CB1R-mediata signalling in NAC non significantly affectus striatal ΔFosB expressio examinari sub conditionibus, etsi sunt amplius studiis dignam existimarit determinare modum per inductionem tractanda est per ΔFosB endocannabinoid ratio.

Research Quisque ornare ipsum

  • MOR signalling amplificatur in in nucleus accumbens et similitudines murium, qui exprimunt ΔFosB
  • KOR inhibitionis de adenylyl niger est, et quinque mures aureos auctus expressing ΔFosB
  • ΔFosB expressio C praevaricari non licet1R signaling in in nucleus accumbens
Ire;

accessiones Material

01

Click hic erat.(45K, pdf)
Ire;

Acknowledgements

Gratias ago auctoribus Hengjun et finis, Jordanis est technica auxilium Tomarchio Cox et Aaron cum [35S] GTPγS assays binding. Hoc studium favor aderat: USPHS Grants DA014277 (LJS), DA10770 (DES) et P01 DA08227 (ejn).

Ire;

V.

Publisher scriptor Disclaimer: Et hoc est quod inedita PDF ex manuscripto pro illis quae sunt publication accepit. Quam servitio nostro ipsum sumus mane providing haec versio testamentum. In manuscripto copyediting casum subiturum, condimentum et a review inde probationem ante editis sit in ultima specie citable. Lorem quod per productionem processus non afficit omissi quæ inventa est contentus, et hoc applicare ad iter itineris disclaimers iure pertinent.

Ire;

References

  • Bozarth MA: Sapientes nos R. Anatomically distincta pulvinar arcemque precursor mediavit agros et praemium corporis dependentia. Scientiae. 1984;224: 516, 517. [PubMed]
  • Bradford MM. A celeri et in sensitivo ad modum quantitatis quantitas et microgram dapibus-dapibus nisl rutrum tristique a principle morietur fides. Anal. Mol. 1976;72: 248, 254. [PubMed]
  • Breivogel CS, Childers SR, Deadwyler SA Messa di Gloria: vide RE, n Vogt, Sim Selley n. longos della9-tetrahydrocannabinol curatio fit in tempore, et in proteins dependens damna Cannabinoid receptor-activated cerebrum-G. J. Biol. 1999;73: 2447, 2459. [PubMed]
  • Breivogel CS, Selley DE Childers SR. Cannabinoid receptor agonist efficacia ad concitandos [35S] GTPγS binding ordinem habeat ad membranulas quae ad cerebelli rat-agonist decrementa Domestici Grossi adductus sit matris tuæ. Mol. Sci. 1998;273: 16865, 16873. [PubMed]
  • Cadoni C, A Pisanu, Solinas M, E Acquas, Di G. Chiara sensitisation Disordines morum multis saepe exposita 9-Graecum tetrahydrocannabinol et crucem, ad MORPHINUM sensitisation. Psychopharmacology (Berl) 2001;158: 259, 266. [PubMed]
  • Cadoni C, V Valentini, Di G. Chiara-disordines morum sensitisation 9 tetrahydrocannabinol ad Delta et crucem, ad MORPHINUM sensitisation: differentialium vices traductio accumbal testam, et dopamine core. J. Biol. 2008;106: 1586, 1593. [PubMed]
  • Chen J, Kelz MB, Zeng G, N Sakai, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman ES, Nestler Ed. Transgénica inducible cum animalibus, targeted gene expressio in cerebrum. Mol. Pharmacol. 1998;54: 495, 503. [PubMed]
  • Childers SR. Quorum alterum, receptor nuntiisque temptabat. Sci. 1991;48: 1991, 2003. [PubMed]
  • Childers SR, i Flemyng, Konkoy C, D Marckel, Pacheco M, T Sexton, Daphne S. Opioid Cannabinoid et receptor inhibitionis de adenylyl cyclase in cerebrum. Ann. NY Acad. Sci. 1992;654: 33, 51. [PubMed]
  • Childers, SR, Xiao R: n Vogt, Sim Selley n. Kappa receptor titillatione [35S] GTPγS binding in cerebrum sus Guinea: Nullam enim quod Kappa2G-activation de -selective proteins. Mol. Pharmacol. 1998;56: 113, 120. [PubMed]
  • S Sulpicius Severus, Zimmer A, Zimmer AM, RG Hill: Regio I. Coquina ascendit electionem selectivam, micro- ex ordinacione, et Delta- Kappa, opioid receptores, sed quasi receptor-knockout dynorphin 1 receptores, in cerebella enkephalin et mures inclusi essent. Neuroscience. 2003;122: 479, 489. [PubMed]
  • Lacuna CR, Whisler K, Steffen C, J. Nestler paritur, DW. Striatal cellula genus Utilia DeltaFosB auget overexpression ex iisdem stimulos cocaini minimi. J. Neurosci. 2003;23: 2488, 2493. [PubMed]
  • DE Gardner. Endocannabinoid signalling cerebri rationem mercedis dopamine extollitur. Pharmacol. Mol. Behav. 2005;81: 263, 284. [PubMed]
  • Ghozland S: Matthes HW, Simonin F, D Filliol, BL rivulorum Kieffer, Maldonado R. Motivational effectis cannabinoids sunt mediata per mu-opioid Kappa, et opioid receptoribus. J. Neurosci. 2002;22: 1146, 1154. [PubMed]
  • Herkenham M, Caecilia AB, Mr Johnson, Melvin eadem LS, de Costa Rica BR Rice KC. Lactobacillus Cannabinoid receptores nec libero laoreet ac per cerebrum rat: a studio autoradiographic in vitro generibus quantitatis. J. Neurosci. 1991;11: 563, 583. [PubMed]
  • Hohmann AG, ex libero laoreet Herkenham M. Cannabinoid CB (1) mRNA per striatum neuronal subpopulations de rat: a situ est in aestivum geminus-titulus studium. Sinapsis. 2000;37: 71, 80. [PubMed]
  • Hewlett C, F Barth, Met TI Cabral G, P Casellas, WA Devane, Felder, C, M Herkenham, Mackie K, Martin RB, Mechoulam R: Pertwee KG. Unionis Internationalis de Materia Medica. XXVII. Genus Cannabinoid receptoribus. Pharmacological Review. 2002;54: 161, 202.
  • Huestis MA, Gorelick quacdam DA, Heishman SI, Prestoni ipfarum KL, MNb Cicero, Magistrum Moolchan ET RA D.. Societatem Criseon Internationalium, a Marijuana ¶ CB1-electionem selectivam effectus in Cannabinoid receptor SR141716. Arcus. Gen Psychiatry. 2001;58: 322, 328. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L. Beckmann AM, Steffen C, Zhang Doll, Marotti Dominus paritur, DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier Song: Neve duae RL, Duman ES, Picciotto MR; Nestler Ed. DeltaFosB expressio ad factor in cerebri moderatur anima trahitur duciturque cocaini minimi. Rerum natura. 1999;401: 272, 276. [PubMed]
  • Koob GF, erit ND Volkow. Neurocircuitry de PROCLIVITAS. Neuropsychopharmacology. 2010;35: 217, 238. [PMC libera articuli] [PubMed]
  • Lamarque S: Taghzouti K: Simon H. curatio chronicus cum Delta (9) -tetrahydrocannabinol amphetamine et adducunt locomotor responsio ad heroin. Vulnerability ad effectus pro medicamento PROCLIVITAS. Neuropharmacology. 2001;41: 118, 129. [PubMed]
  • R Maldonado, Valverde Domine, Berrendero F. Nocte Diei implicatur qui in hac endocannabinoid ratio in medicamento PROCLIVITAS. Neurosci trends. 2006;29: 225, 232. [PubMed]
  • A Mansour, CA Fox, Thompson RC II Akil, mi Watson VIII. mu-rat in Opioid mRNA expressio Potis: collatio ad mu-receptor binding. Res cerebrum. 1994;643: 245, 265. [PubMed]
  • Matthes HWD, Maldonado R, F Simonin, Valverde O, S Slowe, Book I, K Befort, Dierich A, LeMeur M: P Dolle, Tzavara E, Hanoune J, Roques fiantque BP, BL rivulorum Kieffer. AAS effecerunt morphine damnum mercedem μ effectu caret, receptor gene muribus recessum docebo. Rerum natura. 1996;383: 819, 823. [PubMed]
  • CA imperio exuta foeda, Nestler Ed. Et merces CREB et gene cocaine DeltaFosB moderatio. Nat. Neurosci. 2003;6: 1208, 1215. [PubMed]
  • CA imperio exuta foeda, Ulery PG, Perrotti LI Zachariou V, Berton Domine, Nestler Ed. DeltaFosB: hypotheticum switch ut longa-term aptationem in cerebrum. Res cerebrum. Mol. Res cerebrum. 2004;132: 146, 154. [PubMed]
  • Miiller DL, EM Unterwald. D1 dopamine receptoribus flectere deltaFosB inductionem in administratione MORPHINUM continuo post rat striatum. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2005;314: 148, 154. [PubMed]
  • Nestler Ed. Review. Transcriptional dubie, viae PROCLIVITAS: DeltaFosB partes. Philos. Trans. Soc. Phil. B. Gen. Sci. 2008;363: 3245, 3255. [PMC libera articuli] [PubMed]
  • Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: hypotheticum et mediator diu terminus neural-disordines morum et MOLLITIA. Res cerebrum. 1999;835: 10, 17. [PubMed]
  • Q. ILLE, spei, BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler Ed. Pharmacological studiis de ordinatione longos FOS gene-related inductionem tractanda est per striatum, et COCAINUM, in nervi accumbens. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1995;275: 1671, 1680. [PubMed]
  • Frorrari MC, Lacuna C, Perrotti LI Tekumalla P: Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia Domino, Allen MR business days JL Duman ES, McNeish JD, Barrot M paritur, DW, Nestler J. : C. Inducible LeConte, regionem cerebri, propria expressio mutant mores negans ex c-Iun deficit anima trahitur duciturque in transgenic mice cocaini minimi. Res cerebrum. 2003;970: 73, 86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, & B nubere malle, Renthal W: Miserere mihi, Yazdani S, RC Vinci, Knapp Song: Selley DE, Martin RB, Sim Selley Dominus: Barthold Bachtell paritur, DW, Nestler Ed. De medicamentis ex abusu cerebrum DeltaFosB inductionis forma distincta. Sinapsis. 2008;62: 358, 369. [PMC libera articuli] [PubMed]
  • Robbe D, G, Alonso, Duchamp F, Bockaert J, Manzoni oj. In machinationes et receptor actio laoreet Cannabinoid glutamatergic synapses nucleum accumbens mus. J. Neurosci. 2001;21: 109, 116. [PubMed]
  • V. Locus niger Salomon primordium. Adv. Triticum Res Insecta. 1979;10: 35, 55. [PubMed]
  • Selley DE SIM lj, Xiao R, Liu Q, Childers SR. M-excitata receptor [35S] rat GTPγS binding per thalamus et polita humanitate praediti cellula lineae: Dicotyledones machinationes agonist underlying virtute. Mol. Pharmacol. 1997;51: 87, 96. [PubMed]
  • Triticum aestivum Babylon, Martin-Garcia E, F Berrendero, Robledo P, Maldonado R. Et endogenous opioid ratio: est enim subiectum commune per medicamento PROCLIVITAS. Alcohol medicamento multum. 2010;108: 183, 194. [PubMed]
  • Unterwald affectibus animi, Knapp C, Zukin SR. Nec libero laoreet ac Neuroanatomical κ1 κ2 opioid rat receptores, in cerebrum et Virus. Res cerebrum. 1991;562: 57, 65. [PubMed]
  • Vaccarino Thomas, Bloom FE, FG Koob. Nucleus obsidione accumbens furva receptores diluit intravenous heroine pretium mus. Psychopharmacology (Berl) 1985;86: 37, 42. [PubMed]
  • Vigano D, Rubino T, A Vaccani, Bianchessi S, P marmorata, Castiglioni C, D. Parolaro M. machinationes involved in asymmetric et mutuam Cannabinoid opioid systems. Psychopharmacology (Berl) 2005;182: 527, 536. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, D Theobaldo Cantuariensi, Cassidy MP, erit MB Kelz, Lutchman T-Shaw, Berton Domine, Sim Selley-lj, Marcus Tullius Dileone, Kumar A, Nestler Ed. Catenae anulus minime omittendus in in nucleus DeltaFosB ad MORPHINUM accumbens in actum. Nat. Neurosci. 2006;9: 205, 211. [PubMed]
  • Zangen A, M Solinas, Ikemoto S: Goldberg, SR: Sapientes nos R. Cerebrum in duo sites Cannabinoid praemium. J. Neurosci. 2006;26: 4901, 4907. [PubMed]
  • Zhu J, Luo LY, C. Li Chen C, Liu-Chen LY. Activation de homine cloned Kappa receptor quod auget per agonists [35S] GTPγS binding autem membranas: determinationes potentiarum animae et virtutum efficacias appellauit ligands. J. Pharmacol. Exp. Ther. 1997;282: 676, 684. [PubMed]
  • Zimmer A, E Valjent, Konig M, Zimmer AM, Robledo P, Hahn n, o Valverde, R. Maldonado, De absentia della -9 tetrahydrocannabinol dysphoric effectus deficientem in dynorphin mures inclusi essent. J. Neurosci. 2001;21: 9499, 9505. [PubMed]
  • A Zimmer, Zimmer AM, Hohmann AG, Herkenham M, Met Ti. Auctus mortalitatis clade premeretur, hypoactivity et hypoalgesia in Cannabinoid CB1 receptor knockout mures inclusi essent. Phil. Kessinger Publishing. Acad. Sci. USA 1999;96: 5780, 5785. [PMC libera articuli] [PubMed]