Mëttelméisseg héich Fett Régime Sucrose Selbstverwaltung an de jonke Ratificatioun (2013)

Dianne P. Figlewicz,^1,2 Jennifer L. Jay,² Molly A. Acheson, Irwin J. Magrisso,⁴ Constance H. West,¹ Aryana Zavosh,² Stephen C. Benoit,³ an Jon F. Davis³

Mir hunn virdru gemellt datt eng mëttelméisseg Fett Diät Motivatioun fir Saccharose bei erwuessene Ratten huet. An dëser Studie testen mir d'motivational, neurochemikalesch a metabolesch Auswierkunge vun der héiger Fett an de männlechen Ratten, déi duerch Pubertéit ëmgewandelt ginn, während 5-8 Wochen vum Alter. Mir hu festgestallt, datt d'héich Fett Ernährung motivéiert huet fir Sucrose ze reagéieren, déi onofhängeg vu metabolesche Verännerungen oder Verännerungen vun den Catecholamin-Neurotransmitter-Metaboliten am Nukleus accumbens war. Allerdings sinn d'AGRP-mRNA-Niveauen am Hypothalamus staark erhöht. Mir weisen datt d'verstäerkte Aktivatioun vun den AGRP-Neuronen mat motivéierte Verhalensmëssbrauch ass, an datt déi exogene (drëtt zerebroventrikuläre) AGRP-Verwaltung e wesentlech erhéierte Motivatioun fir Saccharose huet. Dës Observatioune weisen datt de verstäerkten Ausdrock an d'Aktivitéit vun den AGRP am medialen Hypothalamus kéint d'Erhéijung vun der Sukrose erhéijen, déi duerch d'Fett-Diät-Interventioun verursaacht gëtt. Endlech hu mer d'Motivatioun fir Saccharose bei pubertalem vs. erwuessene Ratten verglach a beobachtet eng erhéicht Motivatioun fir Saccharose an der Pubertal-Ratten, déi konsistent mat virdrun gëtt, datt jonk Déieren a Mënschen eng erhéicht Prioritéit fir séiss Geschmae sinn, verglach mat Erwuessener. Zesumme mat eise Studien suguer datt d'Background Diät eng staark modulatoresch Roll bei der Motivatioun fir séiss Geschmaach an adolescent Déieren spillt.

Themen

D'Themae ware männlech Albino Ratten aus Simonsen (Gilroy, CA). D'Ratte goufen op Chow behalen (Labor Rodent Diet 5001, LabDiet) oder mëttelméisseg Fett Diät (31.8% Research Research Diets) ad libitum. D'Diaken gi mat engem Gesamtkohrhydratgehalt agefouert (58% kcal vs. 51% kcal fir Fett iwwer de Fett). Déi geréng Fett Chow huet 6.23 gm% gratis Zucker an déi héich Fett Diät huet 29 gm% Sucrose. Si goufen op engem 12: 12 h hell-donkel Zyklus mat Liicht um 6 AM gepflegt. Amplaz datt et net anescht uginn, hunn Ratten bei 3 Wochen agefouert, direkt post-weaning, an hu fir Accélatioun bis ënner 5 Wochen agefouert. An dësem Alter sinn d'Ernährung an / oder d'Verhalensbildungs- a Testen ugefaangen. Spezifesch Protokoller ginn am Detail ënnendrënner a beschränkt Table 1. Well männlech Ratten duerch d'Pubertéit am 6 goen^th-7^th Woch vum Alter, d'Zäit vun de Studien gouf fir Ratten studéiert, wéi se dës Entwécklungsphase duerchsetzen. All Prozeduren, déi op de Ratten duerchgefouert goufen, hunn d'NIH Richtlinnen fir Déierfester ugeholl a si vum Animal Care a vum Sub-Comité vum Komitee Research and Development an der VA Puget Sound Health Care System genehmegt.

  

Table 1

Experimental Protokollen

Sucrose Selbstverwaltung

Generalprotokoll. De Procédure baséiert op eiser verëffentlechter Methodik (Figlewicz et al., 2008; Figlewicz et al., 2006). All Trainings- an Testprotokoller goufen tëscht 0700 a 1200 hr. Den Experiment beinhalt d'2-3 Phasen: Autoshaping a fixe Verhältnisser (FR); Operatioun an Erhuelung a spezielle Cohorten (cf. Table 1); a progressiv Verhältnisser (PR) Ausbildung mat dem PR Algorithmus vu Richardson a Roberts (Richardson & Roberts, 1996). De PR-Algorithmus brauch 1, 2, 4, 6, 9, 12, 16, 20, 28, 36, 48, 63, 83, 110, 145, 191, 251, 331, 437 ( etc) Hebelpräisser fir de Suivi belounen an eng Versammlung ze belounen an ass e rigoréis Test fir Motivatioun a Belounung (575). D'Ratte sinn trainéiert fir d'Selbstverwaltung 759% Saccharose (999 ml Belounung) zu engem flëssegen Drëpptfäss geliwwert. D'Operatiounskëschte, déi vun engem Med Associates (Georgia, VT) -System kontrolléiert ginn, haten zwou Heber, awer nëmmen een Hiewel (en aktive Retraffes Hebel) huet d'Infusionspumpe aktivéiert. Presse vum aneren Heber (en onaktiven, stationären Heber) goufen och opgeholl. D'Sucrose Léisung ass an e flëssege Gefaangene Bouss op Oralbrauch (Med Associates) geliwwert. Déi éischt Training gouf während enger h h Sitzunge fir 999 Deeg ënner enger kontinuéierlech Versteesdemech (FR27: all Hebel Press verstäerkt) gemaach, mat engem maximal méiglech 5 Saccharose Beliichtung pro Sessioun geliwwert. All Sessioun ugefaang mat der Insertion vum aktiven Hebel an der Beleidegung vun engem wäisse Haushärel, deen op der ganzer Sëtz bleift. Een 0.5-Ton (10 Hz, 1 dB virun der Hannergrond) + Liicht (50 W wäissen d'Luucht iwwer dem aktive Hebel) diskret verbonne Comic begleet all LIEnnerversuergung, gefollegt vun enger 5-sec aus der Ausschreiwung no all Saccharose Liwwerung. PR Training gouf fir maximal moeglech 2900 h / Tag fir zéng Deeg gemaach. Dageszeitungen hu sech no 20 Ennemaire vun enger aktiver Hebelpresse beäntweren, a wéini d'Punkt vum Haus gouf ausgeschalt an de aktive Heber zréckgezunn.

Effet vum AGRP op der Sucrose Selbstverwaltung

Wéi eis Resultater hunn eng Erhéijung vun der AGRP-mRNA-Expression an der Pubertal-Ratten gehat, déi d'Fett geholl hunn, wollte mir confirméieren datt d'AGRP kéint d'Sucrose-Selbstverwaltung erhéijen. 5-wk al chow-fed Ratten goufen duerch FR trainéiert an hunn dann Cannulas an den drëtten Cerebral Ventrikel (ICV) kritt. No enger Woch vun der Genesung, Bestätegung vu Plaze mat enger Angiotensin II Drénkprüfungstest (cf. Figlewicz et al., [2006]), an eng Sessioun vu FR-Re-Training, Ratten op der PR-Selbstverwaltung paradigma gestart. No PR Day 1 goufen Ratten zu enger vun zwou Gruppen ugesat, déi den PR-Day 1 Performance net ënnerscheet hunn tëschent den zwou Gruppen (kënschtler CSF, ACSF oder AGRP, 2 μl vun 0.01 nmol). Si hunn Injections vu aCSF (n = 8) oder AGRP (n = 7) op PR Deeg 2, 5 a 8 kritt. Den Tagesaage vum Nahrungsergänzungsprodukt ass quantitéiert während der PR-Training.

Effekt vum Alter op d'Sucrose selwer Veruerteelung

Mir vergläichen d'Selbstverwaltung vun de Pubertalen Ratten an déi jonk Erwuessen, gefeelt Chow oder d'31.8% Fett Diät. D'Ratte haten zwou Wochen Acclimatioun beim VAPSHCS Vivarium (3-5wk oder 8-10 wk). Si hunn d'Diät während der gesamten Test / Trainingsphase (4 wk) kritt. Esou wéi am initialen Experiment goufen pubertale Ratten am 5-8 wk vum Alter studéiert. Déi jonk Erwuessen goufen am 10-13 wk agefouert.

Bestëmmung vun der Kierpermassage

D'Kompositioun vum Kierper ass mat quantitativen magnetesche Resonanz Spektroskopie (QMR [Nixon et al., 2010]) fir den Kierpergehalt vun eenzelnen Ratten ze bestëmmen, aus deem sech Relativ Kierperfett berechent. D'Déiere goufen an zylindresch Halter gelagert an net-anästhetiséierend, an dann d'Inhaber gi bei der QMR-Maschinn fir ee 2-Minus-Scan gesaat, deen triplicat Miessunge mécht. D'Donnéeë sinn an engem integréierte Computer (EchoMRI, Echo Medical Systems, Houston, TX) gespäichert fir d'direkt Kalkulatioun vun Ganzkierper Waasser, Fett a Mieremasse.

Intravenous Glukosertoleranz Tests (IVGTT)

Déi bewosst IVGTT waren a Ratschläge mat chronesch implantéiert IV Kanannen duerchgefouert, déi iwwer Nuecht viru Studium befestigt hunn, déi Methodologie baséieren Frangioudakis, Gyte, Loxham, & Poucher (2008). D'bilaterale intravenéis Cannulas goufen 2 Wochen virum Studium implantéiert, wéi pro eis etabléiert Methodik (Figlewicz et al., 2009). Baselineproblemer goufen op t-10 min (0.5 ml fir d'Bestëmmung vu Insulin a Glucose, op all Zäitpunkten) an t0 min gezeechent. Ratten kruten eng Infusioun vu 1 gm Glucose / 2ml / kg iwwer 15-20 Sekonnen, gefollegt vu 0.5 ml Spleack vu Salzsäure. Bluttprobleemer goufen am 5, 15, 30, 60, 90 a 120 min geholl. Duerch d'Verstopzelung vun engem Katheter während der Prozedur (also d'Invaliditéit fir Bluttproblemer ze kréien) sinn final 'n's fir déi Basis / IVGTT-Daten präsentéiert 7-8 fir Chow-Feeder Ratten a 8 fir Ratten, déi 31.8%Table 3). Plasma Insulin ass festgestallt ginn duerch Linco Rass Insulin RIA Kits (# RI-13K a SRI-13K, Linco) a Plasma Glucose gouf op engem YSI Glucose Analyzer ermittelt). Fläche ënner der Kurve (AUC) fir d'Responsabilitéit vun der Baseline gouf am 5-Min an 120 min berechtegt. De HOMA Index gouf berechent als Fasten (Glukos [mM] × Insulinm [U / L]) / 22.5 berechent a gouf mat Klemmfesteprobleemer gemooss, déi fir Insulin a Glukos gemooss goufen.

  

Table 3

Metabolesche Parameter¹

Metabolesche Parameter falen

D'Ratte vum Experiment 1 goufen iwwer Nuecht viru Euthanasie befestigt, e puer Deeg nom Ofbau vun der IVGTT. D'Ratte goufe déif an d'Isofluran Inhalatioun an exsanguinéiert. Brainser goufen schnell an d'Flëssstéckstoff gefroren fir d'Messung vun hypothalamesche Peptid mRNA an den Nukleus accumbens catecholamines. Terminal Plasma oder Serum goufen zur Messung vu séier Insulin, Glucose, Leptin a Triglyceriden benotzt. Fir Triglyceride goufen Point Scientific Triglyceride GPO Kit # T7531-400 (Fisher # 23-666-418) a Standards KIT # 7531-STD (Fisher # 23-666-422) benotzt a gouf 3 μl Serum am Duplikat ass. Plasma Leptin ass mam Millipore Linco RIA Kit # RL 83K gemooss.

Catecholamin HPLC Methoden [Davis et al., 2008]

D'Ratten goufen mat Isofluran-Anästhesie virgestallt, an d'Gehirer goufen séier ofgeschmolt, gefruer an an -80 ° C gelagert. Bilaterielle Mikro-Stécker vum Nukleus accumbens (NAcc) goufen vun all Déieren isoléiert. Obwuel substantiell Hëllef geholl gouf fir d'Verréckung vu benodeelegt Gehirregregiounen ze minimiséieren, wéinst der Natur an der Gréisst vun all Mikro-Punch huet eis Method net erlaabt datt Subregiounen (dh NAcc Core vs Shell) innerhalb de NAcc ënnerscheeden. Fir Hochleistungsflëss Chromatographie (HPLC) Analyse goufen eng Antioxidant Léisung (0.4 N Perchlorat, 1.343 mM Äthylendiamintetraessigsäure (EDTA) an 0.526 mM Natriummetabisulfit zu den Proben addéiert a no homogeniséiert duerch e Ultraschallgewënn Homogeniséierer (Biologics; Gainesville, VA ) Een klengen Deel vum Tissue-Homogenat gouf am 2-% Natriumdodecylsulfat (W / V) fir Protein Bestimmung geliwwt (Pierce BCA Protein Reagenz Kit, Rockford, IL). Déi verbleibend Suspension gouf gespullt bei 14,000 g fir 20 Min vun engem Killschrëft. De Supernatant war reservéiert fir HPLC.

D'Beispiller goufen op enger Microsorb MV C-18 Spalte (5 Am, 4.6_250 mm, Varian, Walnut Creek, CA) getrennt a gläichzäiteg fir DA, 3,4- Dihydroxyphenylessigsäure (DOPAC) an Homovanillinsäure (HVA) unerkannt, vu Dopamindustrialitéit, 5-HT an 5-HIAA. D'Compounds goufen duerch en 12-Kanal koulometresche Array Detektoren fest fonnt (CoulArray 5200, ESA, Chelmsford, MA), deen an engem Waters 2695 Solvent Liwwersystem (Waasser, Milford, MA) befestigt gouf ënnert den folgenden Konditioune: Flowreschter vu 1 ml / min; Erkennungspotentiale vu 50, 175, 350, 400 an 525 mV, a; Scheiwungspotenzial vu 650 mV. D'mobile Phase bestoe sech aus enger 10% Methanol-Léisung an destilléiert H₂O mat 21 g / l (0.1 M) Zitater, 10.65g / l (0.075 M) Na2HPO4, 176 mg / l (0.8 M) heptanesulfonsäure an 36 mg / l (0.097 mM) EDTA bei engem pH vun 4.1. Unbekannte Proben goufen an enger 6-Punkt-Standardkurve quantifizéiert mat engem Minimum R² vun 0.97. Qualitéitskontrollprobleemer goufen duerchgespillt fir all Run ze garantéieren fir HPLC Kalibrierung ze garantéieren.

Orexigenen Peptiden mRNA qPCR

Mir vermëttelen Ausdréck vu hypothalamesche Peptiden, déi d'Ernährung stimuléieren an an der Motivatioun implizéiert goufen a belounen (Figlewicz & Sipols, 2010): Neuropeptid Y (NPY [ Hahn, Breininger, Baskin, & Schwartz, 1998; Jewett et al., 1995; Kelley, Nannini, Bratt, & Hodge, 2001]); Agouti-bezogene Peptid (AGRP [Aponte, Atasoy, & Sternson, 2011; Barnes, Argyropoulos, & Bray, 2010; Broberger et al., 1998; Hagan et al., 2000; Hahn, Breininger, Baskin, & Schwartz, 1998; Kaushik et al., 2011; Krashes et al., 2011; Rossi et al., 1998; Tracy et al., 2008]); an den Erzocker (Cason et al., 2010; Choi, Davis, Fitzgerald, & Benoit, 2010). Ratten goufen mat Isofluran Anästhesie euthaniséiert, a Gehirer goufen séier ewechgeholl, gefruer a bei -80 ° C bis zur Veraarbechtung gelagert. De medialen a lateralen Hypothalamus gouf als ee Block mat engem AHP-1200CPV Gefriessebene (Thermoelektresch Cooling America, Chicago, Il) microdissektéiert, dee während dem Dissektiounsprozess eng konstant Temperatur vun 12 ° C behalen. Total RNS aus microdissected Otemschwieregkeeten war vun Trizol reagent (Invitrogen, Karlsbad, CA) isoléiert a mat der RNeasy Mini Kit (Qiagen, Valencia, CA) laut Fabrikant d'Instruktioune purifizéiert. D'total RNS gouf behandelt fir all potenziell genomesch DNA Kontaminatioun mat RNase gratis DNase (Promega, Madison, WI) ze läschen, a gouf mat engem NanoVue Spektrophotometer (GE Healthcare, Cambridge, UK) quantitéiert. RNS Qualitéit gouf duerch Standard Agarosegel Elektrophorese bestätegt. Ergänzend DNA (cDNA) gouf duerno (RT) vun 1-2 μg vun totaler RNS duerch eng Mëschung aus zoufällegen Hexameren an oligo DT priming mat der iScript cDNA Synthes Kit (Bio-Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA) retrotranskriptéiert. Net-retrotranskriptéiert (keng RT) Reaktioune goufen och vun all Probe preparéiert fir potenziell genomesch DNA Kontaminatioun ze kontrolléieren. D'cDNA a kee-RT Kontrollen goufen verdënnt, a 5-10 NG vun der Schabloun cDNA vun all Probe gouf benotzt fir mRNA Ausdrock vu ausgewielte Genen duerch echt Zäit quantitativ Hinnen alleguer mam MyIQ Real-Time Hinnen alleguer Detektioun System (Bio-Rad, Hercules) ze moossen Triplicate Miessunge fir all Probe goufen op Standard iCycler 96 Wuelplacke gefuer, zesumme mat keng Schablounekontrollen (NTC) fir potenziell Kräizkontaminatioun z'entdecken, an 20 μl Reaktiounsvolumen aus 10 μl 2 × iQ Sybr Green Supermix (Bio- Rad, Hercules, CA), 2 μl vun 0.2-0.5 μM all Primer, 3 μL DEPC Waasser, a 5 μl Template. All qPCR Reaktiounen abegraff eng Schmelzkurve Analyse fir d'Spezifizitéit vum Signal ze garantéieren. Relativen Ausdrock fir all Gentherapie vun Interesse gouf vun Extrapolatioun op eng Standardkurve individuell op all Plack gerannt a vu seriellen Verdënnunge vun enger gesammelter Prouf vun der Referenz cDNA ofgeleet, an normaliséiert zu relativer Ausdrock vu Referenzgenen (sauer ribosomal Phosphoprotein 36B4 fir Gentherapie Ausdrock hypothalamescht Tissu, a mitochondrialt ribosomal Protein L32 fir Ausdrock am Kär accumbens). Déi folgend Primer-Sequenzen (IDT, San Diego, CA) goufen benotzt fir Rat Pre-Orexin, NPY an AGRP ze verstäerken: Prepro-Orexin, Forward: 5'-TTCCTTCTACAAAGGTTCCCT-3 ', 5'-GCAACAGTTCGTAGAGACGGCAG-3'; NPY: Forward, 5- TACTCCGCTCTGCGACACTACATC-3 '; Ëmgedréit: 5'-CACATGGAAGGGTCTTCAAGCC-3 '; AGRP, Forward: 5'-GCAGAAGGCAGAAGCTTTGGC-3 '; Récksäit: 5'-CCCAAGCAGGACTCGTGCAG-3 '.

cFos Immunozytochemie (ICC) a Quantitéit

Fluoreszence ICC gouf benotzt fir Fos-Positiv a AGRP-Positiv Neuronal Zellkierperen am medialen Hypothalamus ze identifizéieren, no eiser etabléierter Methodik (Figlewicz et al., 2011). Um leschten Dag (PR Day 10) goufen Ratten wéi ëmmer an hir Selbstverwaltungskammeren plazéiert, fir 90 min. Direkt no der leschter 90 min Sessioun goufen Ratten déif mat Isofluran Inhalatioun anästheséiert a perfuséiert mat 0.9% NaCl gefollegt mat kaler 4% Paraformaldehyd Léisung. D'timing fir Anästhesie an Euthanasie war op der bekannt Zäitcourse vun Biergspëtzten Ausdrock vun cFos FAQ um 90-120 min-Post Event baséiert. Sou géif d'CFos Ausdrock d'Aktivatioun vun der CNS am Ufank vun der Verhalensaufgab reflektéieren, anstatt d'Resultat vun den Déieren ze sinn, déi d'Aufgab erliewen. Gehirer goufen e puer Deeg am Paraformaldehyd ewechgeholl an no fixéiert, duerno duerno an 20% Saccharose-PBS, duerno 30% Saccharose-PBS Léisung gesat. Gehirer goufen op enger Kryostat (Leica CM 3050S Kryostat) fir Immunhistochemie agedeelt. Mir hunn eis etabléiert Methodik benotzt fir den immunreaktive cFos Protein an de Gehir Sektiounen ze quantifizéieren (Figlewicz et al., 2011). Schiefereglong 12 μm ganz Corollen vun de Corollen hu sech dräimol am phosphatgepufferte Salz (PBS, OXOID, Hampshire, England) gewäsch. D'Sektioune goufen zu 20 min mat 100% Ethanol / DI-Waasser (50%, v / v) gefollegt, gefollegt vu PBS wäschen, duerno blockéiert fir 1 Stonn bei Raumtemperatur an PBS, déi 5% Normalzot oder Esel-Serum hunn. D'Sektioune goufen dann méi oft an PBS gewaschen an iwwer Nuecht bei 4 ° C an primärer Antikörper-Léisungen entwéckelt an PBS. D'Sektioune goufen 3 Mol am PBS gewaschen an duerno an der Dunkelheet bei Raumtemperatur an der sekundärer Antikörper-Léisung an der PBS fir 1 Stonn ukomm. D'Sections goufen duerno nees an PBS gewascht, a montéiert a rutscht am Vectashield Hard Set Mounting Medium (Vector, Burlingame, CA) Mount Medium. D'Digitaliséierunge vun de Sektioune goufen mat engem Nikon Eclipse E-800 Fluoreszenzmikroskop erfëllt mat enger Qimaging Retiga Digital Capture Kamera iwwer NIS-Elements (Nikon) Software.

Baséierend op PCR Studien, déi verstärkt AGRP-mRNA-Niveauen iwwerweisen, konzentréiere mir eis op medial Hypothalamikregiounen, besonnesch de Ventromedialkern an de Buerentkierper (ARC)). Am Atlas mat ugepassten 12 μm Sektioune goufen fir d'Expression an d'Quantifizéierung vu cFos an de respektéierte Rubriken a Regiounen evaluéiert, baséiert op dem Atlas vun Paxinos a Watson [2005]. Fir Quantitéit (bei der 40-Vergréisserung) goufen Atlas-Matcher Regiounen gewielt. NIS Elementer Software (Nikon) gouf benotzt fir e Bild vum gewënschten Quart ze gesin. E Beräich war fir d'Zählung an d'Schwelle fir positiv Zellenzahlen festgeschrauft. Dee identesche Gebitt an den Hannergrond (Schwellen) goufen ausschnëttlech aus de jeweilegen experimentellen Gruppen benotzt. D'Software Zählung vun positiven Zellen (Quantitéit) gouf an der selweschter Sëtzung fir all experimentell Gruppen gemaach, fir tëschent Sessiounsännerungen an der Backgroundplaz ze verhënneren. Fir statistesch Analyse goufen d'Zuelen aus enger individueller Ratschplaz geholl, wann d'Korrespondenz oder komplette Sektiounen an all Beräich verfügbar waren; D'Donnéeë fir ee spezifesche Beräich goufen net vun enger Rass geholl, wann et onerwaart bilateral Vertriedung fir deem Gebitt war.

Nieft der cFos Quantitatioun gouf quantitativ Duebel-Label Immunhistochemie fir cFos an AGRP gemaach. Well mir d'Verhalensleeschtung vun den Déieren net wollte stéieren, ware se net mat Colchicine virbehandelt fir d'Visualiséierung vun AGRP ze optimiséieren. Dofir kéint Visualiséierung vun AGRP-positiven Neuronen ënnerschat ginn. D'duebel staining Prozedur fir AGRP war mat der assay vun cFos-immunoreactivity op seng eege vergläichbar, ausser datt Rubriken fir eng Stonn bei Raumtemperatur an PBS-5% Iesel serum gespaart goufen. Dunn, war eng Mëschung aus fos-Ab an AGRP Primär Antikörper fir Iwwernuechtung bei 4 ° C benotzt; och béid sekundär Antikörper waren an der selwechter Léisung a fir eng Stonn am Däischteren bei Raumtemperatur incubéiert. Éischt Optimiséierungsassays goufen duerchgefouert fir eng entspriechend Verdünnung vun de primären Antikörpern ze bestëmmen. Primär benotzt Antikörper ware Kanéngchen Anti-cFos (1: 500) (sc-52) a Geess Anti-AGRP (1: 100) (18634) (Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA). Sekondär Antikörper benotzt goufen Cy3-konjugéiert Iesel Anti-Kanéngchen (Jackson Immunoresearch; West Grove, PA), an Alexa Fluor 488 Iesel Anti-Geess IgG (Molekular Proben, Eugene, ODER); all sekundär Antikörper goufe bei 1: 500 verdënnt.

Statistesch Analysen

Gruppendate ginn als Mëttel ± Standardfeeler vum Mëttel (SEM) am Text, Dëscher a Figuren duergestallt. Bedeitung ass definéiert als p ≤ 0.05. Statistesch Vergläicher ginn tëscht experimentelle Gruppen gemaach, wéi se ënner "Resultater" presentéiert ginn mat onpaartem Studententest (z. B. Diät, Alter oder Behandlungsverglach). 'Normaliséierung' vun Date gëtt definéiert wéi se benotzt gëtt.

Effet vun mëttelméisseger Fett Ernährung op peri-pubertalen Motivatioun fir Saccharose

Ratten hunn d'31.8% Fett Diät während wx 5-8 gefeiert, an an der Selbstverwaltung sessions eng erhieft Motivatioun fir Saccharose, am Verglach mam Chow-Fed Ratten. Wéi gesitt Figure 1a, gouf et keen Ënnerscheed zu der Performance während der initialer FR Training (gemittelt FRDays 1-10 aktive Hebelpräisser, 38 ± 5 vs. 39 ± 2 fir Chow vs. 31.8% Fett Diät respektiv). Awer wann d'Ratten op eng méi streng PR Aufgabe gewiesselt goufen, koum et zu enger signifikanten Zuel vun aktiven Hebelpräisser, an d'Zuel vu Saccharose belount, awer net an der Gesamtsessiounslängt (Figure 1b). Et war keen Effekt vun der chronescher Diagnosbehandlung op d'Zuel vun inaktiven Hebelpräisser. Wann d'Ratten déi fett Ernärung während WKN 5-8 gefüttert, awer duerno nees an eng Chow Ernährung zréckgefouert hunn, déi duerch FR an PR Training an den Wochen 9-12 getrueden ass, koum et zu Trend awer kee signifikante Differenz vun aktiven Hebelpressen. Esou iwwregens ass et kee Verhalensbeispill iwwer eng mëttelméisseg Fett Diät déi während dem peri-pubertalen Zäitframe verbraucht gouf. PR-Parameterdaten fir dës Kohorten sinn zesummegesat Table 2. Fir de Begleedungsmechanismus ze begleeden, fir d'Ernährung induzéiert Erhéijung vun der Sucrose Motivatioun ze weisen, hunn mir eng Rei vu metaboleschen a CNS-Messungen gemaach.

  

Figure 1

PR fir motivéiert fir Saccharose belount ze reagéieren ass erhéicht an peripubertal Ratten, déi eng 31.8% Fett Diät (n = 8) gefeiert hunn. 1a. Am Laf vun de FR Sessions gouf et keen Effekt vun der Ernährung, mä den Diät-Effekt ass manifestéiert, wann Ratten op de PR-Paradigma geschwat ginn. 1b. Daten ginn ...

  

Table 2

Effet vu Peri-Pubertal High Fat Diät on Progressive Ratios Performance fir Sucrose

Effet vun moderat héich Fett Diät op metabolesche Parameter

Direkt nom Ofschloss vum Verhaltensproblemer war d'Kierstlech Fettzuel op Ratten festgeluegt, déi d'Diätintervention an d'Verhalensparadigma während der Xbox 5 haten. Ratten hunn dann chronesch intravenös Kanülen fir (bewosst) IV Glukosetolertest Tests (IVGTT) kritt. Duerno gouf Terminal Fëllung Plasma a Serum fir extra Stoffwechsel gemaach. Wéi gesitt Table 3, waren et keng Differenzen an der Kierperkompositioun, Gewiicht vum Kierper, Nopesch Insulin oder Glukosemechanismen, Insulinempfindlechkeet (HOMA-Berechnung) oder Äntwerten op d'IVGTT, tëscht der Chow-Fuederecht an der Fett-Diät-Fette Ratten. Terminalnéier Fannt Leptin a Triglycerid Messungen net ënnerschiddlech tëscht deenen zwou Gruppen. Dofir, obwuel d'Diabetes Behandlung e wesentlechen Effekt op d'Motivatioun fir Saccharose huet, spigelt et eng Verhalensreaktioun an héich Fettveruerdeeteren, déi virun ville Bezeechnungen sinn.

Effet vun mëttlereem Fett Diät op ZNS homologesch a belount d'Neurochemie

Zousätzlech zu terminalen metabolesche Mesuren, Gehirnen aus der cohort, déi esouguer Ernärungsinterventionen an Verhalenssammlung während Wochen war 5-8, goufen ausgeriicht fir Nukleus Accumbens-Aminprofile (n = 4 pro Diät-Grupp) oder mRNA-Niveau vun hypothalamesche orexigenen Peptiden. Wéi gesitt Table 4, war et keng signifikativ Auswierkunge vun der Fett Diät op Dopamin, Noradynëmresch oder Serotonin-Metaboliten am Nukleus accumbens, e zentrale Site vun Belounung a motivationaler Aktivitéit (Ikemoto & Panksepp, 1996; Kelley & Berridge, 2002) an deem jidd vun dësen Neurotransmitter Systemer eng wichteg regulatoresch Roll spillt. Bannent hypothalameschen Extraiten goufen mRNA Niveauen vun den orexigenen Peptiden, NPY, AGRP, an Orexin gemooss. E staarken awer net-bedeitenden Trend fir erhéicht AGRP an de fett gefidderte Ratten gouf an dëser Kohort observéiert (n = 8 fir entweder Diät); Mir hunn also d'Diät / Verhalensausbildungsparadigma an engem zousätzleche Kohort widderholl a gemooss NPY, AGRP an Orexin mRNA am Hypothalamus. An de kombinéierte Kohorten hu mir eng bedeitend (p <0.05) Erhéijung vun AGRP mRNA bei Ratten observéiert déi déi héich Fett Diät vs.Figure 2), awer keng signifikant Ännerung am NPY- oder Orexin Ausdrock. Fir méigleche Verbindungen tëschent der AGRP-Expression an dem Selbstverwaltungsverhalten ze evaluéieren, hu mir cFos a AGRP immunopositiven Neuronen am mediobasalem Hypothalamus gemooss. D'Gruppen vu Ratten hu gefeelt d'Chow oder 31.8% Fett Diät; Verschiddener goufen duerch d'Selbstverwaltungprotokoll (Wochen 5-8) geholl an aner goufen als Verhalensregelen behandelt. Figure 3a weist e Beispill vu Co-Lokalisatioun vu cFos a AGRP an engem buereklechen Nukleus Neuron. Wéi zesummegefaasst Table 5, d'Aktivatioun vun den AGRP-Neuronen (Coexpression vu cFos-ICC a AGRP-ICC innerhalb vun den selben Zellen) ass mat der Selbstverwaltung aktivéiert. Dëst gëtt bewisen Figure 3b, wou d'Zuel vun aktivéierten (cFos-Positives) Neuronen als de neuronalen Zellzuch oder als Prozentsatz vun de totale AGRP positiven Neuronen bezeechent gëtt: eng signifikante Aktivatioun vun den AGRP-Neuronen an der Ratifizéierung vun der Sucrose selbstverständlech, géint d'Handhabung Kontrollen , an den kombinéierte Diätgruppen. E Verglach vun der Behandlung vun der Nuecht-Diagnostik fir d'Zuel vun aktivéierten AGRP-Neuronen an der Selbstverwaltungskontrollen géint d'Handhabung vu Kontrollen huet e Trend fonnt, deen net statistesch Bedeitung kritt (chow, p = .078; 31.8% Fett Diät, p = .073) . Wichteg ass net nëmmen dës Datenverbindung AGRP neuronale Aktivatioun mat Selbstverwaltung ze veränneren, mä wéinst dem Timing fir d'cFos-Mesure (90-Minutte no der Ratifizéierung vun de Ratten an hir Selbstverwaltungskameraen) reflektéiert d'cFos-Expression d'Aktivitéit vun den AGRP-Neuronen an d'Erwaardung vun oder am Begrëff vun der Selbstverwaltung Aktivitéit. Et war eng net signifikativ Tendenz fir erhéicht Gesamt AGRP-Positives Neuronen an der Selbstverwaltungsgruppe (vgl. Handling controls, p = 0.16). An deene Ratten, wou Heberpresident tëschent den Diätgruppen agefall ass, gouf d'Zuel vun den AGRP-positiven Neuronen och ugepasst. Et huet keen Effekt vun der Diagnostik eleng iwwer d'Zuel vun den AGRP-positiven Neuronen an de Verhalensreakt Ratten.

  

Figure 2

Effekt vun 31.8% Fett Diät op medialer hypothalamescher Peptid mRNA Ausdrock. D'Donnéeë sinn normaliséiert fir héich fett gefiddert Ratten (n = 17) vs. déi vun Chow Kontrollen (n = 16). AGRP mRNA ass wesentlech erhuewen (p <0.05).

  

Figure 3

D'Aktivatioun vun den AGRP-Neuronen bei der Ofdreiwung vun der Sucrose-Selbstverwaltung. 3a. Ko-Lokaliséierung vu cFos a AGRP am buereklechen Nukleus Neuron, 60x Vergréisserung. 3b. Zuel vun aktivéierten (cFos-immunopositiven) AGRP-immunopositiven Neuronen am mediobasalem Hypothalamus ...

  

Table 4

Nucleus Accumbens Amine Metabolite

  

Table 5

Agrp Neuron Aktivatioun: Diät a Behavioral Behandlung

Effet vun der AGRP Verwaltung op Saccharose Motivatioun

Eis Interpretatioun vun dëser Erklärung ass datt d'Expression vun der AGRP an de Pubertal Ratten e Schlësselmechanismus ass deen de verstäerkte Sucrose-Selbstverwaltung vun den héije Fett diätet. Fir d'Efficacitéit vun der AGRP fir d'Motivatioun fir Saccharose z'erhéijen ze confirméieren, gouf d'AGRP iwwer de drëtte Ventrikel ze verwéckelen fir peri-pubertalen Ratten während de PR-Deel vum Verhalen Paradäis. Dëse Dosis-Regime vum AGRP war Sub-Schwell fir Stimulatioun vum Chow-Inhal iwwer den zwou Wochen vum PR-Paradigma, awer zu enger signifikant erhéierter Saccharose-Selbstverwaltung, wéi et zu Figure 4. (Bedenkt datt all Saccharose Belounung e kaloresche Inhalt vu 0.1 kcal ass, dofir hëlleft d'Sucrose Selbstverwaltung Aktivitéit vu kierperlechen Kalorien zu der totaler alldeeglecher Nahrung.) Table 6 D'Parodigm vun der Selbstadministratioun weist den 9-Dag PR-Paradigma, mat AGRP oder aCSF, deen ICV op Deeg 2, 5 a 8 injizéiert. An der AGRP-behandelt Ratten huet d'Zuel vun aktiven Hebelmaschinn insgesamt am ganzen PR-Deeg 2-10 (p = 0.03) erhéicht an un Injektiounstagen (p = 0.048) mat engem Trend zu enger Erhéijung vun der (gemittelter) Sprëtzen. Zousätzlech ass d'Stopzeit (déi spéider déi Gesamtzäit déi mat der Selbstverwaltungsaarbecht verbruecht spille war) gouf on No-Injection Day (p = 0.02) mat Trends zu enger Erhéijung insgesamt a bei Injektiounstagen erhéicht. D'Zuel vu Saccharose belount gouf am ganzen PR-Deeg 2-10 (p = 0.03) erhéicht. Et huet keen Effekt vun der AGRP Behandlung op onaktiven Hebel dréit, verglach mat aCSF-behandelte Kontrollen, oder tëscht Injektioun- an Injektiounstagen. D'Resultater ënnerstëtzen eng Interpretatioun vun enger nohalteger Auswierkunge vun EEG a Succose Self-Administration: d'Ratten méi op de gudden Heber gedréckt, hunn méi Sucrose belount, an hunn méi Zäit mat der Task beschäftegt.

  

Figure 4

Drëtt ventriculéiert (ICV) AGRP (0.01 nmol) stimuléiert d'Sucrose-Selbstverwaltung an der PR paradigma, huet awer keng Auswierkung op d'alldeeglech Nahrungsaufnahme iwwer d'Studienzäit (PR Days 2-10, mat Injektiounen op Deeg 2, 5, an 8) . AGRP (n = 9) Daten ginn ausgedréckt ...

  

Table 6

Effet vum ICV AGRP vs. aCSF op Progressive Ratios Performance fir Sucrose

Effet vun der Léierbühne Präferenz a Motivatioun fir Saccharose

Am Finale Experiment hu mir beurteelt ob d'Motivatioun fir Saccharose tëscht pubertalem a erwuessene Ratten ënnerscheet. Am Ufank goufen 5- a 10-wk al Ratten enger Präzedenzprobleemt vu Saccharose mat Léisungen vu Solutiounen tëscht 0 an 20% Sucrose geéiert, éier de Begrëff Self-Administration Testing an Ausbildung begéint. Wéi gesitt Figure 5a, a konsequent mat Erkenntnes, déi an der Literatur gemellt sinn, erschéngen d'Pre-Pubertal-Ratten eng méi séisser Léisung wéi d'jonkt erwuesse Ratten: Déi meeschte pre-pubertale Ratten haten eng Peak-Zuel vun 20% Sucrose-Léisung, während d'erwuessene Ratten eng Pepe vun 15% Sucrose. Duerno goufen zwou Alterskategorien tëschent Rattler Chow an eng héich Fett Ernärung während der Ausbildung an der Selektiounsverueraarbecht gespuert. Et war e klengt awer statistesch signifikante Zuel vun der aktiver Hebelpräisser duerch de peri-pubertalen vs erwuessene Ratten (45 ± 3 vs. 37 ± 2, p = 0.05) gemittelt iwwert d'FR Sessions, ouni Ënnerscheed an der Zuel vun Saccharose belount oder d'Zuel vu Presse vum onaktiven Hebel. Wéi gesitt Figure 5bwar et e ganz bedeitend Alldeffekt vum Alter, an de PR Sessions, mat erweiderten aktive Hebel fir d'Puberthal (n = 15) vs. jonk erwuessene (n = 14) Ratten (2-Wee ANOVA, PRDay × age; Effet vum Alter, p = 0.017, keen onofhängegen Effet vum PRDay, keen bedeitend Interaktioun). Tthere war e Trend fir e méi e groussen Effekt vum Alter an der héije Fett diät ginn, awer dat huet statistesch Bedeitung net erzielt (p = .13). Table 7 Lëscht vun PR Verhalensparameter: Zousätzlech zu erhéierten aktiven Hebelpräisser, peri-pubertalen Ratten kréichen erweeglech Saccharose Bedenken, a weist e Tendenz ze erhéichen Stop Time. D'Periubertal-Ratten hunn och e klengen, awer erneitente Präiserhéigung vun den inaktiv (dh net liewend) Heber, obschonn fir peri-pubertalen a erwuessene Ratten d'Zuel vun inaktiven Hebelpressen ongeféier 10% vun der Zuel aktive Hebdopressen. Dës Resultate vermelden datt Periubertal-Ratten virbereeden a wäerten méi avidéiert Séissespräisser genéissen, an den Effekt kann amplifizéiert mat engem Héichwaasser vu fetter Ernährung verstäerkt ginn.

  

Figure 5

Juvenile Ratten hunn d'Motivatioun fir Saccharose belount fir d'Erwuessene Ratten erhéicht. 5a. Präzisenzpräisser Tester fir Juvenil (peri-pubertal, n = 15) a jonk Erwuessenen (n = 14) Ratten. Ratten haten den 30-Min zum Getränk aus der Gamme vu Konzentrationen (0-20% Sucrose). ...

  

Table 7

Effet vum Alter op Progressive Ratios Performance^a fir Sucrose

Dës Recherche gouf vu NIH gewënschten DK40963 ënnerstëtzt. Dianne Figlewicz Lattemann ass e Senior Research Career Wëssenschaftler, Biomedical Laboratory Research Program, Department of Veterans Affairs Puget Sound Health Care System, Seattle, Washington. Stephen Benoit gouf ënnerstëtzt vum NIH DK066223 an der Ethicon Endosurgery Inc. D'Auteur soen dem Dr. Tami Wolden-Hanson fir Ënnerstëtzung mat Kierpermassaminatiounen; Dr. William Banks a Lucy Dillman fir Ënnerstëtzung mat den Triglyceriden Messungen; an Amalie Alver a Samantha Thomas-Nadler fir Hëllef mat der Verhaltensstudien.

• Andersen SL, Teicher MH. Stress, empfindlech Perioden a matgereegen Evenementer bei Adolescent Depressiounen. Trends an der Neurologie. 2008; 31: 183-191. [PubMed]
• Aponte Y, Atasoy D, Sternson SM. AGRP Neuronen sinn genuch fir Orignatioun vum Fütterung schnell an ouni Formatioun ze orchestrieren. Natur Neurologie. 2011; 14: 351-355. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Barnes MJ, Argyropoulos G, Bray GA. Präferenz fir eng fett Ernährung, awer net Hyperphagie no Aktivatioun vu Mu opioid Rezeptoren gëtt an AgRP Knappmaus gespaart. Brain Research. 2010; 1317: 100-107. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Bolaños CA, Barrot M, Berton O, Wallace-Schwaarz D, Nestler EJ. Methylphenidat Behandlung während Pre- a Periadoleszenzen veréiert Verhalensreaktiounen op emotional Reizungen am Adulthood. Biologescher Psychiatrie. 2003; 54: 1317-1329. [PubMed]
• Bolaños CA, Glatt SJ, Jackson D. Subsensitivitéit fir Dopaminergiker an Periadolakraten: eng Verhalens- a Neurochemie-Analyse. Brain Research Developmental Brain Research. 1998; 111: 25-33. [PubMed]
• Brandon CL, Marinelli M, Baker LK, Wäiss FJ. Verbesserte Reaktivitéit a Schwachstelle fir Kokain wéi folgend Methylphenidat Behandlung bei Adoleschen Ratten. Neuropsychopharmacologie. 2001; 25: 651-61. [PubMed]
• Brandon CL, Marinelli M, Wäiss FJ. Adolescent Expositioun zu Methylphenidat verännert d'Aktivitéit vun Ritters Midbrain Dopamin Neuronen. Biologescher Psychiatrie. 2003; 54: 1338-1344. [PubMed]
• Broderger C, Johansen J, Johansson C, Schalling M, Hokfelt T. Den Neuropeptid Y / Agouti Gen-bezogenen Protein (AGRP) Hirnschaltung an normale, anorectic a monosodium Glutamate-behandelt Mais. Proceedings vun der National Academy of Science. 1998; 95: 15043-15048. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Cason AM, Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Moorman DE, Sartor GC, Aston-Jones G. Roll vum Orexin / Hypocretin a Belounungssucht a Sucht: Implikatioune fir Adipositas. Physiologie & Behuelen. 2010; 100: 419-428. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Choi DL, Davis JF, Fitzgerald ME, Benoit SC. D'Roll vun den Orexin-A an der Liewensmotivatioun, d'Belounung vun der Ernährung an d'Liewensmëttelindustrie Neuronale Aktivatioun an Ratten. Neurowissenschaft. 2010; 167: 11-20. [PubMed]
• Cizza G, Braun RJ, Rother KI. Rising Häckler an Erausfuerderunge vu Kandheet vun Diabetes. En Mini Review. Journal of Endokrinologesch Untersuchung. 2012 epub Mee 8, 2012. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Coldwell SE, Oswald TK, Reed DR. E Marker vum Wuesstum ënnerscheet sech tëscht Jugendlecher mat héijer vs. niddereger Zockerpréferenz. Physiologie & Behuelen. 2009; 96: 574-580. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Davis JF, Choi DL, Benoit SC. Insulin, Leptin a belount. Trends an der Endokrinologie an de Metabolismus. 2010; 21: 68-74. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Davis JF, Choi DL, Schurdak JD, Fitzgerald MF, Clegg DJ, Lipton JW, Figlewicz DP, Benoit SC. Leptin regelt d'Energiechancen an d'Motivatioun duerch Handlung op verschiddene neural Circuits. Biologescher Psychiatrie. 2011a; 69: 668-674. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Davis JF, Choi DL, Schurdak JD, Krause EG, Fitzgerald MF, Lipton JW, Sakai RR, Benoit SC. Zentral Melanokortine moduléieren mesokortikolimbesch Aktivitéit a Liewenssich Verhalen an der Rat. Physiologie & Behuelen. 2011b; 102: 491-495. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Davis JF, Tracy AL, Schurdak JD, Tschop MH, Clegg DJ, Benoit SC, Lipton JW. Expositioun zu erhéigen Niveaue vu Diabetesche Fett verschlechtert d'psychostimulante Belounung an d'mesolimbësch Dopamine-Verkéier an der Rass. Verhalen Neurologie. 2008; 122: 1257-1263. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Desor JA, Beauchamp GK. Längsännerunge vu séissen Virléiften am Mënsch. Physiologie & Behuelen. 1987; 39: 639-641. [PubMed]
• Desor JA, Greene LS, Maller O. Präisser fir séiss a salzeg am 9- bis 15-Joer al an erwuessene Mënsch. Wëssenschaft. 1975; 190: 686-687. [PubMed]
• Drewnowski A. D'Energie Dicht, d'Gaasserei an d'Séissheet: Auswierkungen op d'Gewiicht Kontroll. Ernährungsrevisioun. 1998; 56: 347-353. [PubMed]
• Figelwicz DP, Bennett JL, Aliakbari S, Zavosh A, Sipols AJ. Insulin ass an verschidden CNS-Siten fir d'akute Saccharose Fësch an d'Sucrose d'Selbstverwaltung an de Ratten z'erméiglechen. Amerikan Journal of Physiology. 2008; 295: R388-R394. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Figlewicz DP, Bennett JL, Naleid AM, Davis C, Grimm JW. Intraventrikulär Insulin a Leptin reduzéieren Saccharose Selbstverwaltung bei Ratten. Physiologie & Behuelen. 2006; 89: 611-616. [PubMed]
• D'Figelwicz DP, Bennett-Jay JL, Kittleson S, Sipols AJ, Zavosh A. Sucrose Selbstverwaltung an ZNS Aktivatioun an der Rass. Am J Physiol. 2011; 300: R876-R884. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Figlewicz DP, Ioannou G, Bennett Jay J, Kittleson S, Savard C, Roth CL. Effekt vun enger moderéierter Intake vu Séisser op de metabolesche Gesondheetszoustand an der Rat. Physiologie & Behuelen. 2009; 98: 618-624. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Figlewicz DP, de Sipols AJ. Energie Reguléierung Signaler a Liewensmëttelhaltem. Pharmakologie, Biochemie an Behaviour. 2010; 97: 15-24. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Frangioudakis G, Gyte AC, Loxham SJ, Poucher SM. Den intravenösen Glukosertoleranztest an de Kanal Wistar-Ratten: Eng robust Methode fir d'In-vivo-Evaluatioun vun der Glucose-stimuléierter Insulinsekretioun. Journal of Pharmacologesch a Toxikologesch Methoden. 2008; 57: 106-113. [PubMed]
• Hagan MM, Rushing PA, Pritchard LM, Schwartz MW, Strack AM, Van Der Ploeg LHT, Woods SC, Seeley RJ. Langfristeg orexigene Effekter vum AgRP- (83-132) beaflossen aner Mechanismen ausser Melanocortin-Rezeptorblockaden. Amerikan Journal of Physiology. 2000; 279: R47-R52. [PubMed]
• Hahn TM, Breininger JF, Baskin DG, Schwartz MW. Coexpression vun der Agrp an NPY bei Nopeschaktivitéit Hypothalamesch Neuronen. Natur Neurologie. 1998; 1: 271-272. [PubMed]
• Hodos W. Progressiv Verhältnisser als Maß vu Belounstäerkt. Wëssenschaft. 1961; 134: 943-944. [PubMed]
• Ikemoto S, Panksepp J. Dissociatiounen tëschent appetitiv a konsummative Responsen duerch pharmakologesch Manipulatioun vu belount-relevant Gehirnregiounen. Verhalen Neurologie. 1996; 110: 331-345. [PubMed]
• De Jousef, de Cleary J, d'Levine AS, d'Schaal DW, d'Thompson T. Effekte vum Neuropeptid Y, Insulin, 2-Deoxyglucose a Nahrungseenhuelung op Liewensmotivéiert Verhalen. Psychopharmacologie. 1995; 120: 267-271. [PubMed]
• Kaushik S, Rodriguez-Navarro JA, Arias E, Kiffin R, Sahu S, Schwartz GJ, Cuervo AM, Singh R. Autophagie bei hypothalamesche AgRP Neuronen reguléiert d'Ernährung an d'Energie. Zelle Metabolismus. 2011; 14: 173-183. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Kelley AE, Berridge KC. D'Neurologie vun natierlechen Bedenken: Relevanz fir Suchtproblemer. Journal of Neurologie. 2002; 22: 3306-3311. [PubMed]
• Kelley SP, Nannini MA, Bratt AM, Hodge CW. Neuropeptid-Y am paraventreschkären Niwwel erhéicht d'Ethanol Selbstverueregung. Peptiden. 2001; 22: 515-522. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Kohli R, Boyd T, Lake K, Dietrich K, Nicholas L, Balistreri WF, Ebach D, Shashidkar H, Xanthakos SA. Rapid Progressioun vum NASH am Kand. Journal of Pediatric Gastroenterologie an Ernährung. 2010; 50: 453-456. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Krashes MJ, Koda S, Ye CP, Rogan SC, Adams AC, Cusher DS, Maratos-Flier E, Roth BL, Lowell BB. Rapid reversibel Aktivéierung vun AgRP Neuronen féiert d'Verhale vu Verhënnerungen a Mais. Journal of Clinical Investigatioun. 2011; 121: 1424-1428. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Mennella JA, Pepino MY, Reed DR. Genetesch a ökologesch Determinanten vun enger bitterer Perceptioun a séiss Preferenzen. Pediatrie. 2005; 115: 216-222. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Myers KP, Sclafani A. Entwécklung vun erfollegten Aroma Viraussetzungen. Entwécklungs Psychobiologie. 2006; 48: 380-388. [PubMed]
• National Cancer Institute Applied Research Programm. Quellen vun Kalorien aus Zousatzstécker ënnert der US Population, 2005-06. Aktualiséiert 21 Dezember 2010. [Zougang 21 September 2011]; 2010 Disponibel vun: http://riskfactor.cancer.gov/diet/foodsources/added_sugars/
• Nixon JP, Zhang M, Wang CF, Kuskowski MA, Novak CM, Levine JA, Billington CJ, Kotz CM. D'Evaluatioun vun engem quantitativen magnetesche Resonanz-Bildgebittsystem fir eng Gesamtkomponentanalyse bei Nagetieren. Obesitéit. 2010; 18: 1652-1659. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Ogden CL, Carroll MD. Divisioun vun Gesondheets- an Ernährungsprüfung. Prävalenz vun der Ongewässer bei Kanner a Jugendlecher: d'USA, Trends 1963-1965 duerch 2007-2008. [Zougang 21 September 2011]; Gesondheet E-Stat. 2010 2010 Verfügbar: http://www.cdc.gov/nchs/fastats/overwt.htm.
• Paxinos G, Watson C. Atlas vum Rassehnéiss bei stereotaxeschen Koordinaten. 5th. San Diego CA: Elsevier Academic Press; 2005.
• Richardson NR, Roberts DC. Progressiv Verhältnissespläng am Drogen-Selbstverwaltungsstudium an Ratten: eng Method fir d'Verstärkungseffizienz ze evaluéieren. Journal of Neuroscience Methoden. 1996; 66: 1-11. [PubMed]
• Roitman MF, Stuber GD, Phillips PE, Wightman RM, Carelli RM. D'Dopamine bedéngt als Deelmeedecher Modulator vu Liewensmëttel. Journal of Neurologie. 2004; 24: 1265-1271. [PubMed]
• Rossi M, Kim M, Morgan D, Kleng C, Edwards C, Sunter D, Abusnana S, Goldstone A, Russell S, Stanley S, Smith D, Yagaloff K, Ghatei M, Bloom S. Een C-terminale Fragment vun Agouti- Dee betreffende Protein vergréissert d'Ernährung an deitéiert den Effekt vum α-Melanozyte stimuléiere Hormon a vivo. Endokrinologie. 1998; 139: 4428-4431. [PubMed]
• Stanhope KL. Roll vun de Fruktose-Zirkeren an der Epidemie vun der Adipositas a metabolescher Syndrom. Jorespräisser vun der Medizin. 2012; 63: 329-343. [PubMed]
• Sturman DA, Mandell DR, Moghaddam B. Jugendleche weisen Verhalensregelen vun Erwuessenen während Insturmnational Léierin an Aussterneendung. Verhalen Neurologie. 2010; 124: 16-25. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Tracy AL, Clegg DJ, Johnson JD, Davidson TL, Woods SC. De Melanocortin Antagonist AgRP (83-132) erhéijen appetitiv op eng Fett reagéiert, awer net een Kohleraag, Verstärker. Pharmakologie Biochemie, a Behaviour. 2008; 89: 263-271. [PMC gratis Artikel] [PubMed]
• Vartanesch LR, Schwartz MB, Brownell KD. Effet vum Soft Drénk Konsum op Ernährung an Gesondheet: eng systematesch Iwwerpréiwung an Metaanalyse. Amerikan Journal of Public Health. 2007; 97: 667-75. [PMC gratis Artikel] [PubMed]