MicroRNA Expression Levels zirkuléiert mat Internet Gaming Stress (2018)

. 2018; 9: 81.

Verëffentlecht online 2018 Mar 12. doi:  10.3389 / fpsyt.2018.00081

PMCID: PMC5858605

PMID: 29593587

mythologesch

Hannergrond

Suchtbar Benotzung vum Internet an Online Spiller ass eng potenziell psychiatresch Stéierung mam Internet Internet Disorder (IGD). Geännert MicroRNA (miRNA) Ausdrock Profiler goufen a Blutt a Gehir Tissue vu Patiente mat bestëmmten psychiatresche Stéierunge gemellt a proposéiert als Biomarker. Wéi och ëmmer, et goufen keng Berichter iwwer Blutt miRNA Profiler an IGD.

Methoden

Fir IGD-assoziéiert miRNAs z'entdecken, analyséiere mir de miRNA Ausdrockprofile vun 51 Proben (25 IGD an 26 Kontrollen) mat der TaqMan Low Density miRNA Array. Fir Validatioun hu mir quantitativ Récktransskriptioun PCR mat 36 onofhängege Proben gemaach (20 IGD an 16 Kontrollen).

Resultater

Duerch Entdeckung an onofhängeg Validatioun identifizéiert mir dräi miRNAs (hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p, hsa-miR-652-3p) déi wesentlech an der IGD Grupp erofreguléiert goufen. Persounen mat allen dräi miRNA Verännerunge haten e vill méi héicht Risiko vun IGD wéi déi ouni Ännerung [Oddsverhältnis (ODER) 22, 95% CI 2.29 – 211.11], an d'ORS erhéijen Dosis ofhängeg mat Zuel vu verännerter MiRNAs. Déi virausgesot Zilgen vun den dräi miRNAs goufe mat neurale Weeër verbonne. Mir hunn de Proteinausdrock vun den dräi downstream Zilergener duerch Western blot exploréiert a bestätegt datt den Ausdrock vun GABRB2 an DPYSL2 wesentlech méi héich an der IGD Grupp war.

Konklusioun

Mir observéiert datt Ausdréck vun hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p, an hsa-miR-652-3p an den IGD Patienten erofreguléiert goufen. Eis Resultater wäerten hëllefe fir d'Pathophysiologie vun der IGD ze verstoen.

Schlësselwieder: Internet Spillstörung, MicroRNA, Biomarker, Sucht, Western blot

Aféierung

Suchtbar Benotzung vum Internet an Internet-baséiert Spiller ass net nëmmen e soziale Phänomen an Länner mat enger extensiver Internetzougangsinfrastruktur, awer eng potenziell psychiatresch Stéierung bezeechent den Internet Gaming Disorder (IGD) (-). Geméiss den epidemiologeschen Berichter, variéieren d'Prevalenzraten vun IGD bei Jugendlechen uechter Länner, rangéiert vun 0.8 bis 26.7% (). Besonnesch, Studien weisen Prävalenzzuelen iwwer 10% bei Jugendlechen a ville asiatesche Länner wéi Südkorea, China, Taiwan, Hong Kong, a Singapur (). IGD ass verbonne mat Behënnerung an der Erkenntnis, psycho-sozialer Bezéiung, an alldeeglecht Liewen; zum Beispill, akademesch oder berufflech Leeschtung géif erof goen (-). IGD ass elo an der Sektioun III (Konditioune fir Weider Etude) vun der fënnefter Revisioun vun der Diagnostic a Statistical Manual of Mental Disorders (DSM-V) abegraff (). Trotz senger klinesch-soziale Wichtegkeet, ass wéineg iwwert de molekulare genetesche Mechanismus hannert IGD bekannt.

Rezent grouss-Skala Zwillingstudien hunn e geneteschen Hannergrond zu IGD proposéiert (, ). Vink et al. ënnersicht individuell Differenzen am compulsive Internet Benotzung mat 5,247 monozygoteschen an dizygoteschen adolesente Zwillingen am hollänneschen Zwillingregister a berichten datt 48% vun den Ënnerscheeder duerch genetesch Faktoren erkläert goufen (). Li et al. observéiert 825 Puer Chinese adolescent Zwillingen a bericht datt genetesch Faktoren 58 – 66% vun den Ënnerscheeder erkläert hunn (). Deementspriechend Polymorphismen vun de Genen, déi an Neurotransmissioun involvéiert sinn, Erkenntnis, an Opmierksamkeet wéi Dopamin Rezeptor D2 Gen (DRD2), catecholamine-O-methyltransferase Gen (COMT), Serotonin Transporter Gen (5HTTLPR), a cholinergesche Rezeptor nikotineschen Alpha 4 Gen (CHRNA4) goufen gemellt datt se wesentlech mat der Internet Sucht verbonne sinn (-). Viru kuerzem huet de Kim et al. gescannt Varianten vu méi wéi 100 Kandidatgenen am Zesummenhang mat der Produktioun, Handlung, an de Stoffwiessel vun Neurotransmittere vun der nächster Generatioun Sequenzenéierungsanalyse a bericht dat rs2229910 vun NTRK3 Gen ass mat IGD verbonne ().

Zousätzlech zu den geneteschen Faktoren ass et och bekannt datt neurobehythmus Phenotypen epigenetesch kontrolléiert ginn duerch net-kodéierend RNAs inklusive MicroRNAs (miRNAs) (, ). miRNAs si kleng net-kodéierend eenzelstreng RNA Molekülle (ongeféier 20 – 23 Nukleotiden an der Längt), déi negativ Ausdrock vun Protein-kodéierende Genen reguléieren andeems mRNAs ofgeschnidden sinn an eng kritesch Roll spillen am pathophysiologesche Prozess vu verschiddenen Krankheeten (). Beweiserlinn hu bewisen datt miRNAs am mënschlechen Zentralnervensystem (CNS) reichend sinn an handelen fir den Ausdrockniveau vun hiren Zilgenen ze finanzéieren, déi an der Entwécklung a Reifung vum CNS System involvéiert sinn (). Tatsächlech hunn déi rezent Studien opgedeckt datt miRNA Ausdrockprofile am Gehirngewebe vu Patienten mat psychiatresche Stéierunge verännert ginn, wat suggeréiert datt hir Ausdrocksprofile kéint Biomarker fir psychiatresch Stéierunge ginn (, , ). Zum Beispill, duerch Postmortem Analyse, huet Lopez et al. huet gemellt datt den Ausdrock vu miR-1202, deen den Ausdrock vum metabotropesche Glutamat Rezeptor-4 Gen regléiert an d'Äntwert op Antidepressiva virausgesäit, a prefrontale Cortex Tissue vu grousse Depressiounsstéierunge Patienten downreguléiert gouf (). Wat de Biomarker Screening ugeet, huet dës Approche eng kloer Begrenzung well eng Biopsie vum CNS Tissu fir Screening auszeféieren ass onméiglech. Zënter miRNAs kënne a Blutt (Plasma oder Serum) festgestallt ginn, hunn miRNA zirkuléierend e definitive Virdeel wéi net-invasiv Biomarker bei neuropsychiatresche Stéierungen. Awer bis haut gouf et keng Etuden iwwer zirkuléierend MiRNA Profiler an IGD. Besser Verständnis vun zirkuléierende miRNA Ausdrock Profiler kéinte hëllefen de Mechanismus vun der IGD Entwécklung ze klären an d'klinesch Iwwersetzung ze erliichteren.

An dëser Studie zielen mir d'IGD-assoziéiert miRNA Marker z'identifizéieren andeems differentiell ausgedréckte Plasma miRNAs tëscht der IGD a Kontrollgruppen observéiert goufen an hir biologesch Implikatioune exploréiert hunn.

Materialien an Methoden

Studie Sujeten

Mir hunn 3,166 Jugendlecher (Alter 12 – 18 Joer) ausgedréckt mat DSM-V IGD Scoring. Ënner hinne goufen 251 (168 Männercher an 83 Weibchen) als IGD diagnostizéiert no den DSM-V Kritären (). E Gesamt 91 Individuen (49 IGDs an 42 Kontrollen) hunn d'informéiert Zoustëmmung fir dës Studie geliwwert. Dorënner goufen véier Persounen ausgeschloss no den Exklusiounskriterien. Endlech goufen 87 Individuen (45 IGD Sujeten an 42 gesond Kontroll Individuen) fir dës Etude ageschriwwen. Ënner hinnen, 51 Participanten (25 IGD Patienten an 26 Kontrollen) goufen als Entdeckungsset vun 2014 op 2016 rekrutéiert. Déi aner 36 Participanten (20 IGD Patienten an 16 Kontrollen) goufen als onofhängeg Validatiounsset aus 2016 rekrutéiert. All Participanten ware Koreanesch Eenzelpersounen, ageschriwwen aus Seoul St. Mary's Hospital (Seoul, Südkorea) a Seoul National University Boramae Hospital (Seoul, Südkorea). All Participanten hunn e strukturéierte Interview vun engem Psychiater gemaach op Basis vum koreanesche Kiddie-Zäitplang fir affektiv Stéierungen a Schizophrenia (K-SADS-PL) (). All Participanten hunn de Block Design a Vocabulary Subtests vun der Koreanesch-Wechsler Intelligenz Skala fir Kanner ofgeschloss, 4th Editioun (K-WISC-IV) (). Impulsivitéit gouf duerch Barratt Impulsivitéit Skala (BIS) bewäert (). Behavioral Inhibition System (BInS) a Behavioral Activation System (BAS) Skalen goufen gemooss fir d'Perséinlechkeet Dimensioun ze bewäerten (). Ausgrenzungskriterien abegraff vergaang oder aktuell gréisser medizinesch Stéierunge (z. B. Diabetis mellitus), neurologesch Stéierungen (z. B. Krampfwiesselungen, Kappverletzung), psychiatresch Stéierungen (z. B. gréisser Depressiounsstörung, Besuergnëssstéierunge), mental Retardatioun, oder iergendeng Substanzmëssbrauch (z. B. , Tubak, Cannabis, Alkohol). Déi allgemeng Charakteristike vun de Studien Themen sinn an der Tabell zesummegefaasst Table1.1An. Dës Studie gouf vum Institutional Review Board vum Katholike University Medical College vu Korea (MC16SISI0120) guttgeheescht. All Participanten an hir Elteren hu schrëftlech Erlaabnes kritt.

Table 1

Allgemeng Charakteristike vun de Studien Themen.

 EntdeckungValidatiounKombinéiert
 
 KontrollIGDPgewisenKontrollIGDPgewisenKontrollIGDPgewisen
N2625 1620 4245 
Alter (Joer)
Median (min – max)13 (12 - 17)13 (12 - 15)0.75915 (13 - 18)14.5 (12 - 18)0.62814 (12 - 18)14 (12 - 18)0.509
Deeglech Internet Spillstonnen (h)
Median (min – max)5.25 (2 - 17)18 (6 - 46)1.27E − 6a5.5 (2 - 23)8 (1 - 112)0.3745.5 (2 - 23)14 (1 - 112)1.63E − 5a
Mountlecht Stot Akommes (Milliounen KRW)
Median (min – max)5 (1 - 9)3 (1 - 9)0.5884 (4 - 4)2 (2 - 2)1.0005 (1 - 9)3 (1 - 9)0.460
Edukatioun (Joer)
Median (min – max)8 (7 - 9)8 (7 - 9)0.58412 (12 - 12)6 (6 - 13)0.3058 (7 - 12)8 (6 - 13)0.269
K-WISC: Block Design
Median (min – max)10.5 (4 - 17)10 (4 - 16)0.54410 (3 - 16)12.5 (4 - 15)0.12510 (3 - 17)11 (4 - 16)0.598
K-WISC: Vocabulaire
Median (min – max)9 (5 - 17)7 (5 - 13)0.1749.5 (8 - 15)11.5 (5 - 15)0.5959 (5 - 17)9 (5 - 15)0.527
KS
Median (min – max)24 (17 - 36)37 (22 - 51)3.81E − 6a29 (17 - 34)59 (22 - 108)1.2E − 5a25 (17 - 36)40 (22 - 108)2.05E − 10a
BIS
Median (min – max)63 (35 - 75)67.5 (45 - 81)0.08061 (45 - 79)63 (32 - 82)0.83562 (35 - 79)65 (32 - 82)0.240
BAS
Median (min – max)31 (15 - 40)31 (13 - 51)0.55836.5 (22 - 48)34 (27 - 52)1.00032 (15 - 48)34 (13 - 52)0.637
BInS
Median (min – max)18 (10 - 26)17.5 (13 - 27)0.64218.5 (12 - 25)20 (13 - 21)0.13818 (10 - 26)19 (13 - 27)0.302
 

IGD, Internet Spillstéierunge Patienten; KS, Koreanesch Internet Sucht Proneness Skala; BIS, Barratt Impulsivitéit Skala; BAS, Verhalensaktivéierungssystem; BInS, Verhalensinhibitioun System; KRW, Koreanesch Won.

aP <0.05 (Mann – Whitney – Wilcoxon Test).

TaqMan Low Density miRNA Array (TLDA) Experimenter

Periphere Blutt gouf vun all Participant gesammelt an an de Laboratoire bannent 4 h transferéiert fir d'Blutt Zell Lysis ze minimiséieren. D'Spuer gouf bei 3,000 rpm fir 10 min bei Raumtemperatur centrifugéiert. Duerno gouf Supernatant (Plasmaschicht) gesammelt ouni d'Bluttzellen ze kontaminéieren. Circuléierend miRNAs goufe mat TaqMan miRNA ABC Purification Kit (Human Panel A; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) extrahéiert no der Instruktioun vum Hiersteller. Kuerz gesot, 50 µL Plasma Echantillon an 100 µL ABC Puffer goufen gemëscht. No Hybridiséierung mat zielspezifeschen Anti-miRNA magnetesche Perlen, goufen ofgeschnidden zirkuléierend miRNAs aus de Perlen mat 100 µL Elusiounsbuffer eluéiert. An der Entdeckungsphase goufen 381 miRNAs aus 51 Plasma Proben (25 IGDs an 26 Kontrollen) iwwerpréift mat dem TaqMan miRNA ABC Purification Kit (Human Panel A; Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) no den Instruktioune vum Hiersteller. Megaplex Récktranscriptioun a Pre-Amplifikatiounsreaktiounen goufen ausgefouert fir d'Quantitéit vun cDNA fir miRNA Ausdrock Analyse ze erhéijen andeems MegaplexPreAmp Primers Human Pool A an TaqManPreAmp Master Mix (Thermo Fisher Scientific) benotzt goufen. Den TLDA-Panel A v2.0 (Thermo Fisher Scientific) gouf am ViiA7 Echtzäit PCR System (Thermo Fisher Scientific) ausgefouert fir den Ausdrock vun de miRNAs ze bewäerten. Raw data goufe mat ExpressionSuite Software v1.0.4 (Thermo Fisher Scientific) veraarbecht fir Ct Wäerter fir all miRNA ze bestëmmen.

Donnéeën Analyse fir TLDA

Mir hunn d'éischt Schwellenzyklen (CT-Wäert) vun all miRNA gemooss. miRNAs mat engem CT Wäert & GT; 35 goufen als undetectable considéréiert an aus Kierzunge Analyse ausgeschloss. All CT Wäerter goufen op de CT Wäert vum Mir-374b (ΔCt Wäert) normaliséiert, ee vun de stabelsten ausgedréckte miRNAs déi am mënschleche Plasma zirkuléieren (). E log2 Fold-Change-Verhältnis (ΔΔCt-Wäert) vun der Ausdrock gouf mat mëttel Wäerter vu Kontroll Echantillon als Kalibrator am HTqPCR Package am Bioconductor berechent (). Der relativer Quantification (RQ) vun all miRNA Zil war als 2 definéiert−ΔΔCtAn. Fir hypothetesch Tester vum Ënnerscheed am Ausdrock tëscht zwou Gruppen hu mir surrogat Variabel Analyse (SVA) ugewannt fir heterogeneities wéi Batch Effekter an den Experimenter mat der sva Package a Bioconductor (). miRNAs mat engem P-Wäert & Si besteet; 0.05 als bedeitend anescht tëscht zwou Gruppen ze ginn.

Gene Set Beräicherung Analyse

Fir Gene Set Anrikungsanalyse hu mir ToppFun an ToppGene Suite benotzt () fir bedeitend beräichert Gene Ontologie (GO) ze soen.) Begrëffer, Werdegang, a Krankheetsbedingunge. Als Input fir dës Approche hu mir 1,230 virausgesot Zilgen vun de Kandidat miRNAs benotzt. Pathway Analyse gouf benotzt fir bedeitend Weeër vun de virausgesaten Zilgen no de KEGG, BioCarta, Reactome, GeneMAPP, an MSigDBin den ToppGene Weeër ze fannen. D'Bedeitung vu funktionelle Beräicherungsbedingunge gouf op der Bonferroni-ugepasst bestëmmt P-Wäertung.

Quantitative Reverse Transkriptiouns PCR (qRT-PCR) Validatioun a Replikatioun

Fir d'10 miRNAs ze validéieren, déi anescht an der Entdeckungsstadie ausgedréckt goufen, gouf qRT-PCR mat dem TaqMan MicroRNA Assay (miR-15b-5p, #000390; miR-26b-5p, #000407; miR-29, miR-3, 000413; miR-125b-5p, #000449; miR-200c-3p, #002300; miR-337-5p, #002156; miR-411-5p, #001610; miR-423 # 5-002340 -483p, #5; a miR-002338-652p, #3) an de ViiA002352 System (Life Technologies) no dem Protokoll vum Hiersteller. Zéng Nanogramm vun insgesamt RNA goufen zum éischten-Strang cDNA mat miRNA-spezifesche Primeren ëmgerechent mat dem TaqMan MicroRNA Reverse Transkriptiouns Kit (#7, Life Technologies), gefollegt vun Echtzäit PCR mat TaqMan Proben. De RQ vun all miRNA war als 4366596 definéiert−ΔCt, wou ΔCt den Ënnerscheed an der Schwellzyklus fir d'Muster ass an der Fro, normaliséiert géint d'endogene miRNA (miR-374b-5p, #001319). All PCR Reaktiounen goufen am Triplikat duerchgefouert, an hir Ct Wäerter goufen averaged. Mir hunn e log2 Fold-Change-Verhältnis (ΔΔCt) vun all miRNA op déi selwecht Manéier berechent wéi an der Array-baséiert Analyse. En net-parametresche Mann-Whitney-Wilcoxon Test gouf gemaach fir d'Ënnerscheeder an den Ausdrockniveauen vu miRNAs an zwou Gruppen mat enger Schwellzäit ze testen P-Wäerter vum 0.05.

Western Blot Analyse

All Serum Probe gouf fir d'éischt aus den Top 14 High-Heefegkeet-Proteinen depletéiert (Albumin, Immunoglobulin G, Immunoglobulin A, Serotransferrin, Haptoglobin, alpha-1 Antitrypsin, Fibrinogen, Alpha-2 Macroglobulin, Alpha-1 Sauer Glycoprotein Immun, , apolipoprotein A-II, komplementär C3, an transthyretin) mat der MARS-14 Kolonn (4.6 × 50 mm, Agilent Technology, Santa Clara, CA, USA) virun der Western blot Analyse benotzt. Déi ongebonnen Fraktioun kritt aus der MARS-14 Kolonn gouf mat engem Amicon Ultracel-3 Zentrifugalfilter (3 kDa Ausschnëtt) konzentréiert, an dann ass d'Protein Konzentratioun mat der Bicinchonininsäure Method bestëmmt. Déiselwecht Quantitéiten (vu 10 bis 30 µg) vu Kontroll- an IGD Serum Echantillon goufen op enger 4 – 20% Mini-PROTEAN TGX Pre-Gel (Bio-Rad, CA, USA) getrennt a se op eng Polyvinylidendiffluoridmembran transferéiert. Als nächst gouf d'Membran an TBS-T (190 mM NaCl, 25 mM Tris – HCl, pH 7.5, an 0.05% Tween 20) mat 5% net-fett trocken Mëllech bei Raumtemperatur fir 30 min blockéiert. D'Membranen goufen duerno mat primäre Antikörper géint DPYSL2 (1: 500, Novus Biologs, Littleton, CO, USA), GABRB2 (1: 1000, 1: 1, XzUMX: 100, Xz , Inc., Santa Cruz, CA, USA), DUSP4 (1: 500, MybioSource, San Diego, CA, USA), a PI15 (1: 500, MybioSource, San Diego, CA, USA) an TBS-T mat 5 % net-fett trocken Mëllech bei 4 ° C Iwwernuechtung, an dann mat passenden sekundären Antikörper entweder bovin Anti-Maus (1: 1,000, Santa Cruz Biotechnology) oder Geess Anti-Kanéngchen (1: 1,000, Cell Signaling, Beverly, MA, USA ) konjugéiert mat Meerrettich Peroxidase bei Raumtemperatur fir 1 h. Signal Detektioun gouf mat Chemilumineszenz mat ECL Reagens gemaach (GE Gesondheetswiesen, Piscataway, NJ, USA). Mir quantifizéiert déi westlech blot Resultater mat der TotalLab 1D Analysesoftware (Non-linear Dynamics, Newcastle upon Tyne, UK). Dunn, war den densitometry Verhältnis Wäert berechent andeems Dir d'Densitometry Wäert vun all Echantillon huet wéi soss anzwëschen beschriwwen (). Als Kontroll fir d'Normaliséierung gouf e serum Probe aus 46 IGD a Kontroll Proben fir all Experiment benotzt. Statistesch Bedeitung gouf mat engem net-parametresche Mann-Whitney-Wilcoxon Test mat enger Schwellbunn festgeluecht P-Wäerter vum 0.05.

Resultater

Charakteristike vun de Studie Sujete

D'demographesch a klinesch Charakteristike vun de Studien Themen sinn an der Tabell gewisen Table1.1An. Wa mir d'IGD a Kontrollgruppen vergläichen no der koreanescher Internet Sucht Proneness Skala (K-Skala) wéi soss beschriwwen (, ), huet d'IGD Grupp e wesentlech méi héije Median K-Skala Wäert gewisen wéi d'Kontrollgrupp (37 vs. 24, P = 3.81 × 10-6) (Tabelle (Table1) .1). Median wöchentlech Zäit fir Internetgaming am IGD Grupp verbruecht war wesentlech méi laang wéi déi vu Kontrollen (18 vs. 5.25 h, P = 1.27 × 10-6). Woubäi et kee wesentlechen Ënnerscheed tëscht zwou Gruppen am Alter, monatlecht Haushalt Akommes, Dauer vun der Ausbildung, Block Design, a Vokabulär Subtest Resultater vun der K-WISC, BIS, BInS, a BAS.

Differenziell ausgedréckt miRNAs tëscht IGD a Kontrollen

Fir IGD-assoziéiert miRNAs z'entdecken, hu mir eng zwee-Etapp (Entdeckung an Onofhängeg Validatioun) Approche ugeholl. De Studie Design an d'Gesamtstrategie ginn an Figur S1 an Zousazmaterial illustréiert. An der Entdeckungsstuf, analyséiere mir miRNA Ausdrock Profiler vun 51 Echantillon (25 IGDs an 26 Kontrollen) mat der miRNA Array mat 384 miRNAs. Ausdrockniveau vun 10 miRNAs goufen fonnt wesentlech anescht tëscht der IGD a Kontrollgruppen (Table.) (Table2) .2). Relative Ausdrockniveauen vun dësen 10 miRNAs ginn an Figur gewisen Figure1.1An. Ënner hinne goufen zwee (hsa-miR-423-5p an hsa-miR-483-5p) upreguléiert an aacht (hsa-miR-15b-5p, hsa-miR-26b-5p, hsa-miR-29b-XNX, hsa-miR-3b-125p, hsa-miR-5c-200p, hsa-miR-3c-337p, hsa-miR-5-411p, an hsa-miR-5-652p) goufen am IGD Grupp erofreguléiert.

Table 2

Differenziell ausgedréckt MicroRNAs (miRNAs) a klappt Ännerungen.

miRNAEntdeckungValidatiounKombinéiert
 
 PgewisenFold ÄnnerungPgewisenFold ÄnnerungPgewisenFold Ännerung
hsa-miR-15b-5p0.0330.8290.6941.1190.3810.947
hsa-miR-26b-5pa0.0080.8710.0490.8410.0130.857
hsa-miR-29b-3p0.0050.4000.5601.1870.0890.647
hsa-miR-125b-5p0.0210.5820.2900.9500.0690.723
hsa-miR-200c-3pa0.0110.3360.0030.5422.93 × 10-50.415
hsa-miR-337c-5p0.0090.3850.5820.8720.0200.553
hsa-miR-411-5p0.0040.3220.3361.2820.1580.595
hsa-miR-423-5p0.0261.3870.1890.9550.5181.175
hsa-miR-483-5p0.0181.8610.7651.4130.2111.647
hsa-miR-652-3pa0.0190.7150.0490.8770.0110.782
 

amiRNAs bedeitend a béid Entdeckung a Validéierungssets op eng konsequent Manéier geännert.

 

Eng extern Datei, déi e Bild, Illustratioun uschwätzen hält. Objektnumm ass fpsyt-09-00081-g001.jpg

Relative Ausdrock Niveauen vun 10 differentiell ausgedréckt miRNAs. Relative Quantification (RQ) war zu miR-374b-5p normaliséiert.

qRT-PCR Validatioun vun de Kandidat miRNAs

Fir d'10 Kandidat miRNAs ze validéieren, hu mir qRT-PCR mat engem onofhängege Confirmatiouns-Set (20 IGDs an 16 Kontrollen) (Table S1 an Zousazmaterial) gemaach. Dräi vun dësen miRNAs (hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p, an hsa-miR-652-3p) goufen bedeitend an der IGD Grupp vun der Confirmatiouns Set (Table) (Table2) .2). Dräi aner miRNAs (hsa-miR-337c-5p, hsa-miR-125b, an hsa-miR-423-5p) goufen och an der IGD Grupp downreguléiert awer net signifikant. Rescht véier miRNAs (hsa-miR-15b-5p, hsa-miR-29b-3p, hsa-miR-411-5p, an hsa-miR-423-5p) goufen oppositely ausgedréckt an de Confirmatiouns-Set. Wa mir d'Entdeckungs- an d'Validatiounssets kombinéiert hunn (insgesamt 45 IGD Sujeten an 42 Kontrollen), waren déi dräi validéiert miRNAs konsequent bedeitend (Table (Table2) .2). Detailléiert Informatioun, chromosomal Lokatiounen, reife Sequenzen, an Ausdrockniveauen an der CNS vun dësen dräi miRNAs sinn an der Table S2 an Zousazmaterial verfügbar.

Synergisteschen Effekt vun der Simultaner Verännerung vun den Dräi miRNAs op IGD Risiko

Fir de kombinéierten Effekt vun den dräi miRNAs ze bewäerten, hu mir d'Chanceverhältnesser (ODER) vun de véier Ënnergruppen (mat 0, 1, 2, oder 3 miRNA Ännerungen) beobachtet. miRNA Ännerung war vum RQ Wäert definéiert wéi an der Rubrik beschriwwen "Materialien an Methoden. “Well all dräi MiRNA Markéierer am IGD Grupp erofreguléiert goufen, gouf e miRNA deem säi RQ Wäert ënner engem war als verännert een definéiert. Detailléiert Informatioun vun all RQ-Wäert vum Renseignement fir déi dräi miRNAs ass an der Tabell S3 an Zousazmaterial verfügbar. Fir all Ënnergrupp goufen Quoten als de Verhältnis vun der Unzuel u Kontrollen zu deem vun IGDs berechent, da gouf all ODER duerch d'Codéier vun all Ënnergrupp mat odds vun der Ënnergrupp berechent ouni miRNA Ännerungen. Perséinlech mat dräi miRNA Ännerunge weisen e Risiko 22 Mol méi héich wéi déi ouni miRNA Ännerung (ODER 22, 95% CI 2.29 – 211.11). OR huet en ëmmer méi Trend mat der Zuel vun de verännerte miRNAs vun 0 bis 3 gewisen (r2 = 0.996) (Figure (Figure22).

Eng extern Datei, déi e Bild, Illustratioun uschwätzen hält. Objektnumm ass fpsyt-09-00081-g002.jpg
Odds Verhältnisser (ODER) no Zuel vun downregulated MicroRNA (miRNA) Markéierer. Wäerter iwwer Punkt Schätzunge sinn den OR (95% Vertrauensintervall).

GO a Passerelle Analyse vun Zilgenen vun de Kandidat miRNAs

Fir Asiicht an d'Funktioune vun den dräi miRNA Marker wesentlech erof ze regléieren an der IGD Grupp, goufen hir Zilgenen mat der miRWalk 2.0 Datebank virausgesot (). Eng Gesamt 1,230 Gene goufe konsequent als downstream Ziler vu véier Algorithmen (miRWalk, miRanda, RNA22, an Targetscan) virausgesot mat der miRWalk Datebank (-) (Table S4 an Zousazmaterial). Gene Set Beräicherung Analyse mat ToppFun an ToppGene Suite benotzt huet gewisen datt d'Zilgenen vun deenen miRNAs wesentlech mat neuralen Entwécklungsweeër verbonne waren, wéi "Axon Leedung" a GO Begrëffer wéi "Neurogenese" (Table S5 an Zousazmaterial).

Ausdrock vun de virausgesaten Zilgenen

Ënnert de Stroumziler Genen vun den dräi miRNAs goufen 140 gläichzäiteg fir zwee oder méi miRNAs virausgesot (Table S4 an Zousazmaterial). Fir ze entdecken ob hir Proteinausdréckniveauen vun den ënneschten Zilergener tëscht der IGD a Kontrollgruppen ënnerschiddlech sinn, hu mir 2 Genen (DUSP4 an PI15), déi als downstream Ziler vun all 3 miRNAs an zousätzlech 3 Genen virausgesot ginn (GABRB2, DPYSL2, an CNR1) vun deenen virausgesot fir 2 miRNAs an hunn Western blot Analyse mat de Plasma Echantillonen aus 28 IGDs an 28 Kontrollen zur Verfügung gestallt fir den Experiment. Mir vergläichen d'Ausdrock vun de fënnef Ziler tëscht der IGD a Kontrollgruppen andeems d'Bandintensitéit an d'Gebitt gemooss goufen wéi soss beschriwwen (). Ënner hinnen hunn d'Expressiounsniveauen vun DPYSL2 (28 IGDs an 28 Kontrollen, P = 0.0037) an GABBR2 (27 IGDs an 28 Kontrollen, P = 0.0052) ware wesentlech méi héich an der IGD Grupp (Figure (Figure3) .3). Mir konnten awer d'Differenziell Ausdréck vum CNR1 net observéieren (P = 0.0853), DUSP4 (P = 0.5443), an PI15 (P = 0.6346).

 

Eng extern Datei, déi e Bild, Illustratioun uschwätzen hält. Objektnumm ass fpsyt-09-00081-g003.jpg

Western blot Biller a Box-Dot-Plots Ausdrock vun (A) DPYSL2 an (B) GABRB2. Béid DPYSL2 a GABRB2 Proteine ​​weisen bedeitend Differenzen an hiren Ausdrockniveauen tëscht dem Internet Gaming Stéierung (IGD) a Kontroll Echantillon (P-Wäerter <0.05). Déi zwee Proteine ​​goufen op méi héijen Niveauen an den IGD Proben ausgedréckt.

Diskussioun

Et gouf bericht datt miRNAs an der neuronaler Entwécklung involvéiert sinn (, ), an Differentialausdrock vu Gehir miRNAs ginn a psychiatresche Krankheeten beobachtet wéi Schizophrenia (). Dofir ass et plausibel datt zirkuléiere miRNA Profiler nëtzlech Biomarker fir IGD sinn. Circuléierend miRNAs goufen als Biomarker virgeschloen fir neuropsychiatresch Stéierungen (-); awer déi molekulare Mechanismen hannert der IGD Entwécklung sinn nach ëmmer gréisser onbekannt trotz senger klinescher a sozialer Wichtegkeet. Speziell goufen et keng Studien iwwer IGD-assoziéiert miRNAs. D'Zil vun dëser Etude war zweedäiteg. Als éischt hu mir probéiert Plasma miRNAs mat IGD assoziéiert ze entdecken. Zweetens hu mir d'biologesch Implikatioun vun de miRNA Kandidaten evaluéiert andeems mir Proteinausdrock an GO vun downstream Zilgenen ermëttelen. Duerch Genome-breet Duerchmusterung vu miRNA Ausdrock Profiler an Downstream Validatioun vun de Kandidaten, entdeckt mir dësen Ausdrock vun dräi miRNAs (hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p, an hsa-miR-652-3p) wesentlech méi déif bei IGD Patienten wéi Kontrollen. Och wann den Ausdrock Musteren vun anere siwe miRNA Kandidaten net an der Confirmatioun replizéiert goufen, kann et falsch negativ sinn duerch kleng Probe Gréisst an dëser Etude. Fir eis Wëssen, ass dëst deen éischte Bericht iwwer d'Méiglechkeet datt Blutt miRNA Ausdrock Profiler nëtzlech Biomarker fir IGD kéinten. Kombinatioun vun den dräi miRNA Markéierer kéint als minimally invasiv Mëttel fir fréi Identifikatioun vu Leit mat Risiko fir IGD déngen.

D'MYRNAs, déi an dëser Etude identifizéiert goufen, goufen bericht an verschidden neuropsychiatresch Stéierunge involvéiert. Ausdrock vun hsa-miR-200c a Blutt ass gemellt ginn a verschidde psychiatresch Stéierunge wéi Schizophrenie erofreguléiert ze ginn () a gréisser depressiv Episoden (). miR-200c gouf gemellt fir méi héich ausgedréckt a synaptesche Fraktiounen wéi am Ganzen Forebrain () an och mam neuronalen Zell Doud verbonne ginn (). Baséierend op dëse fréiere Berichter ass miR-200c an Neurodevelopment involvéiert a kann mat neuropsychiatresche Stéierunge verbonne sinn, wann säin Ausdrock verletzt ass. Verschidde Studien hunn eng Associatioun tëscht miR-652 a Risiko fir neuropsychiatresch Stéierunge proposéiert. Ähnlech mat eiser Approche, Bluttbiomarkéierer fir Schizophrenie z'identifizéieren, Lai et al. duerchgefouert TLDA Analyse mat schizophrenia Patienten an normalen Kontrollen, a fonnt datt siwe miRNAs dorënner hsa-miR-652 anescht a schizophrenia Patienten ausgedréckt goufen (). An der spéiderer Studie hunn se e Prognostismodell mat der miRNA Ausdrock Daten entworf an erfollegräich Schizophrenie vun der normaler Kontroll ënnerscheet (). Geännert Ausdrock vun hsa-miR-652 gouf och bei Alkoholiker observéiert (). Hsa-miR-26b gouf fonnt fir aktivéiert ze ginn während neuronal Zell-Differenzéierung (). Perkins et al. huet gemellt datt hsa-miR-26b an der prefrontaler Cortex vu schizophrenie Patienten downreguléiert gouf ().

Och wann et keen direkten Beweis ass fir d'Bezéiung tëscht dem perturbed Ausdrock vun dësen miRNAs an der Pathophysiologie vun IGD z'ënnerstëtzen, kënne mir ofleeden datt Dysreguléierung vun dësen miRNAs mat der Pathophysiologie vun IGD verbonne kënne ginn op Basis vu verschiddene fréiere Berichter iwwer den Downstream Genen, déi mir virausgesot hunn An. E puer vun den Downstream Genen vun den dräi miRNAs wéi GABRB2, CNR1, NRXN1, an DPYSL2 ginn gemellt mat neuropsychiatresche Stéierungen ze hunn. Gamma-Aminobutyrinsäure (GABA) ass e wichtegen hemmende Neurotransmitter an der ZNS. Dysreguléierung vum GABA Rezeptor, ass implizéiert bei neuropsychiatresche Stéierungen abegraff Sucht, Angscht an Depressioun (), déi och d'Haaptmerkmale vun der IGD sinn (). Genetesch Polymorphismen am GABA Rezeptor Genen gi gemellt mat Alkoholsucht a Schizophrenie verbonne ginn (, ). Dihydropyrimidinase-ähnlech 2 (DPYSL2) ass e Member vun der Kolpspsin-Äntwert Mediatiounsprotein Famill, déi eng Roll spillt an der microtubule Versammlung, synaptescher Signalisatioun, a Reguléierung vum axonale Wuesstum. Dofir ass dëse Molekül als Biomarker fir psychiatresch Stéierunge proposéiert ginn (, ). Polymorphismus an der DPYSL2 gen war och gemellt mat der Alkoholverbraucherkrankung verbonne sinn (). Virdru Berichter an eis Daten suggeréieren datt Iwwerausdrockung vu GABRB2 an DPYSL2, downstream Ziler vun den downreguléierte miRNAs, Implikatioune fir d'Pathogenese vun neuropsychiatresche Stéierungen abegraff IGD. Cannabinoid Rezeptor Typ 1 (CNR1) ass e presynaptesche heteroreceptor deen Neurotransmitter Verëffentlechung a Stéierunge bei der Cannabinoid Signalisatioun moduléiert mat verschidden neuropsychiatresche Stéierungen assoziéiert (). Genetesch Polymorphismus vun CNR1 gen ass bekannt mat der Substanzabhängegkeet bei de Kaukaser verbonne ginn (). An engem Ratmodell, Aktivéierung vum ventralen Hippocampus CNR1 stéiert normal sozialt Verhalen a Erkenntnis (). Genetesch Verännerung an der NRXN Famill ass bekannt fir verschidden neuropsychiatresch Stéierunge mat abegraff Sucht involvéiert ze sinn ().

Fir d'biologesch Implikatioun vun den dräi miRNA Kandidaten op eng méi direkt Manéier ze ënnersichen, hu mir Proteinausdrock vun hiren downstream Zilgenen exploréiert. Wéinst der limitéierter Disponibilitéit vu Plasma Echantillonen, vun den 140 gemeinsame Kandidaten (virausgesot wéi ënnen vum 2 oder méi miRNAs), hu mir 5 Ziler (GABRB2, DPYSL2, CNR1, DUSP4, a PI15) duerch Western blot ënnersicht a bestätegt deen Ausdrock vun GABRBXN an DPYSL2 war wesentlech méi héich an der IGD Grupp. Virdru Berichter an eis Daten suggeréieren datt Iwwerausdrockung vu GABRB2 an DPYSL2, downstream Ziler vun den downreguléierte miRNAs, kann Implikatioune fir d'Pathogenese vun neuropsychiatresche Stéierunge mat IGD hunn. D'Resultater vun GO a Wee Analyse vun neuralen Entwécklungsweeër ënnerstëtzen och déi neurobiologesch Implikatioun vun den miRNA Markéierer. Eng aner interessant Sich war de synergisteschen Effekt vun der simultaner Verännerung vun de miRNAs. Perséinleche mat Downreguléierung vun all 2 miRNAs hunn 3 Mol méi héich Risiko gewisen wéi déi ouni Downregulatioun, an d'OR ginn op eng Dosis-ofhängeg Manéier eropgaang. Och wa CI fir dës dräi Ännerunge breet sinn duerch eng limitéiert Probe Gréisst, ass déi kloer positiv Korrelatioun (r2 = 0.996) ënnerstëtzt de synergisteschen Effekt vun den dräi miRNAs.

Och wa mir d'IGD-assoziéiert miRNA Markéierer entdeckt hunn an Individuen mat allen dräi miRNA Verännerungen e Risiko haten 22 Mol méi héich wéi déi ouni miRNA Verännerungen, ginn et e puer Aschränkungen an dëser Etude. Als éischt huet déi kleng Probe Gréisst d'Geleeënheet erhéicht fir aner bedeitend MiRNA Marker ze fehlen. Zweetens, well eis Daten net genuch waren fir ze klären ob de Plasma miRNA Profiler entweder Ursaach oder Effekt sinn, kënne mir d'biologesch Rollen vun dësen net-invasiv Markéierer an engem klineschen Ëmfeld bestätegen. Weider MiRNA-Profiling an hir downstream Genanalyse mat mënschlecher Gehirngewebe aus Gehirngewebe Bank mat enger méi direkter Äntwert ginn. Gehir Tissue Analyse mat engem Spillstéierunge Déiermodell wier och hëllefräich. Drëttens, wéinst der limitéierter Disponibilitéit vu Plasma Echantillon, hu mir nëmme fënnef downstream Kandidat Molekülle iwwerpréift. Méi Downstream Ziler mat engem méi groussen Echantillon erfuere géifen hëllefe fir de molekulare Mechanismus vun IGD weider ze verstoen.

Zesummefaassend, duerch Genome-breet Duerchmusterung vu miRNA Ausdrock Profiler an onofhängeger Validatioun, entdeckt mir dräi IGD-assoziéiert miRNAs (hsa-miR-200c-3p, hsa-miR-26b-5p, an hsa-miR-652-3p). Vill vun hiren Downstream Genen ginn bericht an verschidden neuropsychiatresch Stéierunge involvéiert ze sinn, an experimenteller Validatioun vun verännerter Ausdrock vun dësen Downstream Genen ënnerstëtzt d'Implikatioun vun de miRNAs, déi an dëser Etude identifizéiert goufen. Mir hu festgestallt datt Personnagen mat Downregulatioun vun allen dräi miRNA mat héije Risiko fir IGD sinn. Zesumme mat de bekannte klineschen oder ökologeschen Risikofaktoren an diagnostesche Kritären, kënnen eis Resultater fréi Interventioun erliichteren fir Leit mat engem méi héije Risiko vun IGD ze hëllefen.

Ethik - Erklärung

Dës Studie gouf vum Institutional Review Board vum Katholike University Medical College vu Korea (MC16SISI0120) guttgeheescht. All Participanten an hir Elteren hu schrëftlech Erlaabnes kritt.

Autor Contributeuren

ML an HC bäidroen gläich zu dësem Pabeier. ML, D-JK, an Y-JC hunn d'Etude entworf. SJ, S-MC, YP, DC, a JL hunn Experimenter an Daten Generatioun gemaach. J-WC, S-HP, J-SC, an D-JK hu Bluttprouwen a klinesch Informatioun gesammelt. ML, HC, S-HY, an Y-JC analyséiert Daten. ML, HC, S-HY, an Y-JC beschriwwen d'Manuskript. Y-JC huet de Projet iwwerwaacht.

Konflikt vun der Zënssazéierung

D'Auteuren deklaréieren datt d'Fuerschung an der Verôffentlechung vu kommerziellen oder finanzielle Bezéiungen, déi als potenzielle Konflikt vun Interesse entwéckelt ginn kënne gemaach ginn.

Noten

 

Finanzéierungen. Dës Aarbecht gouf mat engem Zouschlag vum Brain Research Programm duerch d'National Research Foundation of Korea (NRF) ënnerstëtzt, finanzéiert vum Ministère fir Wëssenschaft an ICT an Zukunftsplanung (NRF-2015M3C7A1064778).

 

 

Ergänzungsmaterial

Den Ergänzungsmaterial fir dësen Artikel fannt Dir online http://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fpsyt.2018.00081/full#supplementary-material.

Referenze

1. Jonk KS. Internet Sucht: D'Entstoe vun enger neier klinescher Stéierung. Cyber ​​Psychol Behav (1998) 1 (3): 237 – 44.10.1089 / cpb.1998.1.237 [Kräiz Ref]
2. Petry NM, Rehbein F, Ko CH, O'Brien CP. Internet Spillstéierung am DSM-5. Curr Psychiatry Rep (2015) 17 (9): 72.10.1007 / s11920-015-0610-0 [PubMed] [Kräiz Ref]
3. Cho H, Kwon M, Choi JH, Lee SK, Choi JS, Choi SW, et al. Entwécklung vun der Internet Sucht Skala baséiert op den Internet Gaming Stéierunge Critèren, déi an DSM-5 proposéiert ginn. Addict Behav (2014) 39 (9): 1361 – 6.10.1016 / j.addbeh.2014.01.020 [PubMed] [Kräiz Ref]
4. Kuss DJ, Griffiths MD, Karila L, Billieux J. Internet Sucht: eng systematesch Iwwerpréiwung vun der epidemiologescher Fuerschung fir déi lescht Dekade. Curr Pharm Des (2014) 20 (25): 4026 – 52.10.2174 / 13816128113199990617 [PubMed] [Kräiz Ref]
5. Park M, Choi JS, Park SM, Lee JY, Jung HY, Sohn BK, et al. Dysfunktionnel Informatiounsveraarbechtung während enger auditive Event-relatéierter potenzieller Aufgab bei Persounen mat Internet Gaming Stéierung. Iwwersetze Psychiatrie (2016) 6: e721.10.1038 / tp.2015.215 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
6. Lim JA, Lee JY, Jung HY, Sohn BK, Choi SW, Kim YJ, et al. Ännerunge vun der Liewensqualitéit an der kognitiver Funktioun bei Individuen mat Internet Spillstéierunge: e 6-Mount Suivi. Medizin (Baltimore) (2016) 95 (50): e5695.10.1097 / MD.0000000000005695 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
7. van Rooij AJ, Van Looy J, Billieux J. Internet Spillstéierung als formativ Konstrukt: Implikatioune fir Konzeptualiséierung a Messung. Psychiatrie Clin Neurosci (2016) 71 (7): 445 – 58.10.1111 / pcn.12404 [PubMed] [Kräiz Ref]
8. American Psychiatric Association, Editeur. , Editeur. Diagnostesch a statistesch Handbuch vu mentaler Stéierungen: DSM-5. 5th ed Arlington, VA: American Psychiatric Association; (2013).
9. Vink JM, van Beijsterveldt TC, Huppertz C, Bartels M, Boomsma DI. Heritabilitéit vu compulsive Internet Benotzung bei Jugendlechen. Addict Biol (2016) 21 (2): 460 – 8.10.1111 / adb.12218 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
10. Li M, Chen J, Li N, Li X. Eng Zwillingstudie vu problematescher Internetnotzung: seng Ierfbarkeet a genetesch Associatioun mat gewëssenhaftem Kontroll. Zwilling Res Hum Genet (2014) 17 (4): 279 – 87.10.1017 / thg.2014.32 [PubMed] [Kräiz Ref]
11. Han DH, Lee YS, Yang KC, Kim EY, Lyoo IK, Renshaw PF. Dopamin Genen a Belounungsofhängegkeet bei Jugendlechen mat exzessiver Internet Video Spill. J Addict Med (2007) 1 (3): 133 – 8.10.1097 / ADM.0b013e31811f465f [PubMed] [Kräiz Ref]
12. Lee YS, Han DH, Yang KC, Daniels MA, Na C, Kee BS, et al. Depressioun wéi Charakteristike vum 5HTTLPR Polymorphismus an Temperament bei exzessive Internet Benotzer. J Affekt Stéierung (2008) 109 (1 – 2): 165 – 9.10.1016 / j.jad.2007.10.020 [PubMed] [Kräiz Ref]
13. Montag C, Kirsch P, Sauer C, Markett S, Reuter M. D'Roll vum CHRNA4-Gen an der Internet Sucht: eng Fallkontrollstudie. J Addict Med (2012) 6 (3): 191 – 5.10.1097 / ADM.0b013e31825ba7e7 [PubMed] [Kräiz Ref]
14. Kim JY, Jeong JE, Rhee JK, Cho H, Chun JW, Kim TM, et al. Gezielt exome Sequenzenéierung fir d'Identifikatioun vun enger Schutzvariant géint Internet Spillstéierunge bei rs2229910 vum neurotrophesche Tyrosinkinase Rezeptor, Typ 3 (NTRK3): eng Pilotstudie. J Behav Addict (2016) 5 (4): 631 – 8.10.1556 / 2006.5.2016.077 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
15. Issler O, Chen A. Bestëmmen d'Roll vun de MicroRNAs bei psychiatresche Stéierungen. Nat Rev Neurosci (2015) 16 (4): 201 – 12.10.1038 / nrn3879 [PubMed] [Kräiz Ref]
16. Kocerha J, Dwivedi Y, Brennand KJ. Noncoding RNAs an neurobehavioral Mechanismen a psychiatrescher Krankheet. Mol Psychiatrie (2015) 20 (6): 677 – 84.10.1038 / mp.2015.30 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
17. Ambros V. MicroRNAs: kleng Reguléierer mat groussem Potenzial. Zell (2001) 107 (7): 823 – 6.10.1016 / S0092-8674 (01) 00616-X [PubMed] [Kräiz Ref]
18. Hollins SL, Cairns MJ. MicroRNA: kleng RNA Mediators vun der Gehir-genomescher Äntwert op Ëmweltstress. Prog Neurobiol (2016) 143: 61 – 81.10.1016 / j.pneurobio.2016.06.005 [PubMed] [Kräiz Ref]
19. Lopez JP, Lim R, Cruceanu C, Crapper L, Fasano C, Labonte B, et al. miR-1202 ass eng primatspezifesch a Gehir-beräichert MicroRNA involvéiert an der Major Depressioun an Antidepressiva. Nat Med (2014) 20 (7): 764 – 8.10.1038 / nm.3582 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
20. Kim YS, Cheon KA, Kim BN, Chang SA, Yoo HJ, Kim JW, et al. D'Zouverlässegkeet an d'Validitéit vum Kiddie-Zäitplang fir affektiv Stéierungen a schizophrenia-präsent a Liewensdauer Versioun Koreanesch Versioun (K-SADS-PL-K). Yonsei Med J (2004) 45 (1): 81 – 9.10.3349 / ymj.2004.45.1.81 [PubMed] [Kräiz Ref]
21. Kwak K, Oh S, Kim C. Handbuch fir Koreanesch Wechsler Intelligenz Skala fir Kanner-IV (K-WISC-IV) -Manual. Seoul, Südkorea: Hakjisa; (2011).
22. Patton JH, Stanford MS, Barratt ES. Faktor Struktur vun der Barratt Impulsivitéit Skala. J Clin Psychol (1995) 51 (6): 768-74.10.1002 / 1097-4679 (199511) 51: 6 <768 :: AID-JCLP2270510607> 3.0.CO; 2-1 [PubMed] [Kräiz Ref]
23. Carver C, Wäiss TL. Verhalensinhibitioun, Verhalensaktivéierung, a affektiv Äntwerte op envirhuelend Belounung a Strof: d'BIS / BAS Skalen. J Pers Soc Psychol (1994) 67 (2): 319 – 33.10.1037 // 0022-3514.67.2.319 [Kräiz Ref]
24. Weiland M, Gao XH, Zhou L, Mi QS. Kleng RNAs hunn e groussen Impakt: Zirkuléiere MikroRNAs als Biomarker fir mënschlech Krankheeten. RNA Biol (2012) 9 (6): 850 – 9.10.4161 / rna.20378 [PubMed] [Kräiz Ref]
25. Dvinge H, Bertone P. HTqPCR: High-Throughput Analyse a Visualiséierung vu quantitativen Echtzäit PCR Daten an R. Bioinformatik (2009) 25 (24): 3325 – 6.10.1093 / Bioinformatik / btp578 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
26. Leek JT, Storey JD. Fangend Heterogenitéit an Genexpressiounsstudien duerch surrogat Variabel Analyse. PLoS Genet (2007) 3 (9): 1724 – 35.10.1371 / journal.pgen.0030161 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
27. Chen J, Bardes EE, Aronow BJ, Jegga AG. ToppGene Suite fir Genel Beräicherung Analyse a Kandidat Gen Prioritéit. Nukleinsäure Res (2009) 37 (Webserver Ausgab): W305 – 11.10.1093 / nar / gkp427 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
28. Ashburner M, Ball CA, Blake JA, Botstein D, Butler H, Cherry JM, et al. Gene Ontologie: Mëttel fir d'Unifikatioun vun der Biologie. De Genontologie Konsortium. Nat Genet (2000) 25 (1): 25 – 9.10.1038 / 75556 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
29. Cheon DH, Nam EJ, Park KH, Woo SJ, Lee HJ, Kim HC, et al. Komprehensiv Analyse vum mënschleche Plasma-Proteome mat wéineg molekulare Gewiicht mat Top-down Mass Spektrometrie. J Proteome Res (2016) 15 (1): 229 – 44.10.1021 / acs.jproteome.5b00773 [PubMed] [Kräiz Ref]
30. Park CH, Chun JW, Cho H, Jung YC, Choi J, Kim DJ. Ass den Internet-gaming-Sucht Gehir no bei engem pathologeschen Zoustand? Addict Biol (2017) 22 (1): 196 – 205.10.1111 / adb.12282 [PubMed] [Kräiz Ref]
31. Dweep H, Gretz N. miRWalk2.0: eng ëmfaassend Atlas vu microRNA-Zilinteraktiounen. Nat Methods (2015) 12 (8): 697.10.1038 / nmeth.3485 [PubMed] [Kräiz Ref]
32. Enright AJ, John B, Gaul U, Tuschl T, Sander C, Marks DS. MicroRNA zielt an DrosophilaAn. Genome Biol (2003) 5 (1): R1.10.1186 / gb-2003-5-1-r1 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
33. Miranda KC, Huynh T, Tay Y, Ang YS, Tam WL, Thomson AM, et al. Eng Musterbaséierter Method fir d'Identifikatioun vu microRNA-Bindungsplazen an hir entspriechend Heteroduplexen. Zell (2006) 126 (6): 1203 – 17.10.1016 / j.cell.2006.07.031 [PubMed] [Kräiz Ref]
34. Lewis BP, Burge CB, Bartel DP. Konservéiert Séi-Pairing, dacks duerch Adenosine geflankert, beweist datt Dausende vu mënschleche Genen microRNA Ziler sinn. Zell (2005) 120 (1): 15 – 20.10.1016 / j.cell.2004.12.035 [PubMed] [Kräiz Ref]
35. Schratt GM, Tuebing F, Néi EA, Kane CG, Sabatini ME, Kiebler M, et al. E Gehirspezifesch MicroRNA reguléiert dendritesch Wirbelsäule Entwécklung. Natur (2006) 439 (7074): 283 – 9.10.1038 / nature04367 [PubMed] [Kräiz Ref]
36. Sempere LF, Freemantle S, Pitha-Rowe I, Moss E, Dmitrovsky E, Ambros V. Ausdrockprofiléierung vu Mamendéieren microRNAs entdeckt eng Ënnerdeelung vu Gehir-ausgedréckte MicroRNAs mat méiglech Rollen an der murescher a mënschlecher neuronaler Differenzéierung. Genome Biol (2004) 5 (3): R13.10.1186 / gb-2004-5-3-r13 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
37. Beveridge NJ, Tooney PA, Carroll AP, Gardiner E, Bowden N, Scott RJ, et al. Dysreguléierung vu miRNA 181b an der temporaler Cortex bei der Schizophrenie. Hum Mol Genet (2008) 17 (8): 1156 – 68.10.1093 / hmg / ddn005 [PubMed] [Kräiz Ref]
38. Wei H, Yuan Y, Liu S, Wang C, Yang F, Lu Z, et al. Detectioun vun zirkuléierende miRNA Niveauen bei der Schizophrenie. Am J Psychiatry (2015) 172 (11): 1141 – 7.10.1176 / appi.ajp.2015.14030273 [PubMed] [Kräiz Ref]
39. Dwivedi Y. Pathogenetesch an therapeutesch Uwendunge vu MikroRNAs bei enger grousser depressiver Stéierung. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatrie (2016) 64: 341 – 8.10.1016 / j.pnpbp.2015.02.003 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
40. Hara N, Kikuchi M, Miyashita A, Hatsuta H, Saito Y, Kasuga K, et al. Serum microRNA miR-501-3p als potenziell Biomarker am Zesummenhang mat der Progressioun vun der Alzheimer Krankheet. Acta Neuropathol Commun (2017) 5 (1): 10.10.1186 / s40478-017-0414-z [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
41. Gardiner E, Beveridge NJ, Wu JQ, Carr V, Scott RJ, Tooney PA, et al. Impresséiert DLK1-DIO3 Regioun vun 14q32 definéiert eng schizophrenia-assoziéiert miRNA Ënnerschrëft an periphere Blutt mononuclear Zellen. Mol Psychiatrie (2012) 17 (8): 827 – 40.10.1038 / mp.2011.78 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
42. Belzeaux R, Bergon A, Jeanjean V, Loriod B, Formisano-Treziny C, Verrier L, et al. Responder an Net-responder Patienten weisen verschidden periphere transkriptiouns Ënnerschrëften während der gréisser depressiver Episode. Iwwersetze Psychiatrie (2012) 2: e185.10.1038 / tp.2012.112 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
43. Lugli G, Torvik VI, Larson J, Smalheiser NR. Ausdrock vu MicroRNAs an hir Virgänger a synaptesche Fraktiounen vun erwuessene Maus Virbild. J Neurochem (2008) 106 (2): 650 – 61.10.1111 / j.1471-4159.2008.05413.x [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
44. Stary CM, Xu L, Sonn X, Ouyang YB, Wäiss RE, Leong J, et al. MicroRNA-200c dréit zur Verletzung vu transiente fokaler zerebraler Ischämie duerch Zielung vun der Reelin. Stroke (2015) 46 (2): 551 – 6.10.1161 / STROKEAHA.114.007041 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
45. Lai CY, Yu SL, Hsieh MH, Chen CH, Chen HY, Wen CC, et al. MicroRNA Ausdrock Aberratioun als potenziell periphere Bluttbiomarkéierer fir Schizophrenie. PLoS One (2011) 6 (6): e21635.10.1371 / journal.pone.0021635 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
46. Lai CY, Lee SY, Scarr E, Yu YH, Lin YT, Liu CM, et al. Aberrant Ausdrock vu MicroRNAs als Biomarker fir Schizophrenie: vum akuten Zoustand bis deelweis Remission, a vu periphere Blutt bis cortikal Tissu. Iwwersetze Psychiatrie (2016) 6: e717.10.1038 / tp.2015.213 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
47. Lewohl JM, Nunez YO, Dodd PR, Tiwari GR, Harris RA, Mayfield RD. Up-Reguléierung vu MicroRNAs am Gehir vu mënschlechen Alkoholiker. Alkohol Clin Exp Res (2011) 35 (11): 1928 – 37.10.1111 / j.1530-0277.2011.01544.x [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
48. Dill H, Linder B, Fehr A, Fischer U. Intronic miR-26b kontrolléiert neuronal Differenzéierung duerch Repressioun vu sengem Hosttranskript, ctdsp2. Genes Dev (2012) 26 (1): 25 – 30.10.1101 / gad.177774.111 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
49. Perkins DO, Jeffries CD, Jarskog LF, Thomson JM, Woods K, Newman MA, et al. MicroRNA Ausdrock an der prefrontaler Cortex vun Individuen mat Schizophrenie a schizoaffektiv Stéierung. Genome Biol (2007) 8 (2): R27.10.1186 / gb-2007-8-2-r27 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
50. Kumar K, Sharma S, Kumar P, Deshmukh R. Therapeutescht Potenzial vu GABA (B) Rezeptor Liganden an der Drogenofhängeger, Besuergnëss, Depressioun an aner CNS Stéierungen. Pharmacol Biochem Behav (2013) 110: 174 – 84.10.1016 / j.pbb.2013.07.003 [PubMed] [Kräiz Ref]
51. McCracken ML, Borghese CM, Trudell JR, Harris RA. Eng transmembrane Aminosaier am GABAA Rezeptor Beta2 Ënnerdeelung kritesch fir d'Aktiounen vun Alkoholen an Anästhesie. J Pharmacol Exp Ther (2010) 335 (3): 600 – 6.10.1124 / jpet.110.170472 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
52. Zong L, Zhou L, Hou Y, Zhang L, Jiang W, Zhang W, et al. Genetesch an epigenetesch Reguléierung op der Transkriptioun vu GABRB2: genotyp-ofhängeg Hydroxymethyléierung an Methyléierungsännerungen an der Schizophrenie. J Psychiatr Res (2017) 88: 9 – 17.10.1016 / j.jpsychires.2016.12.019 [PubMed] [Kräiz Ref]
53. Fukata Y, Itoh TJ, Kimura T, Menager C, Nishimura T, Shiromizu T, et al. CRMP-2 bindt zu tubulin Heterodimerer fir Mikrotubule Versammlung ze förderen. Nat Cell Biol (2002) 4 (8): 583 – 91.10.1038 / ncb825 [PubMed] [Kräiz Ref]
54. Kekesi KA, Juhasz G, Simor A, Gulyassy P, Szego EM, Hunyadi-Gulyas E, et al. Geännert funktionnéiert Protein Netzwierker an der prefrontaler Cortex an Amygdala vun Affer vu Suizid. PLoS One (2012) 7 (12): e50532.10.1371 / journal.pone.0050532 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
55. Taylor A, Wang KS. Associatioun tëscht DPYSL2 Genpolymorphismen an Alkoholabhängegkeet bei kaukasesche Proben. J Neural Transm (Wien) (2014) 121 (1): 105 – 11.10.1007 / s00702-013-1065-2 [PubMed] [Kräiz Ref]
56. Hua T, Vemuri K, Pu M, Qu L, Han GW, Wu Y, et al. Kristallstruktur vum mënschleche Cannabinoid Rezeptor CB1. Zell (2016) 167 (3): 750 – 62.e14.10.1016 / j.cell.2016.10.004 [PMC gratis Artikel] [PubMed] [Kräiz Ref]
57. Benyamina A, Kebir O, Blecha L, Reynaud M, Krebs MO. CNR1 Gen Polymorphismen an Suchtkrankheeten: eng systematesch Iwwerpréiwung an eng meta-Analyse. Addict Biol (2011) 16 (1): 1 – 6.10.1111 / j.1369-1600.2009.00198.x [PubMed] [Kräiz Ref]
58. Loureiro M, Kramar C, Renard J, Rosen LG, Laviolette SR. Cannabinoid Iwwerdroung am Hippocampus aktivéiert den Nucleus accumbens Neuronen a moduléiert d'Belounung an d'Aversiouns-verbonne emotional Salience. Biol Psychiatrie (2016) 80 (3): 216 – 25.10.1016 / j.biopsych.2015.10.016 [PubMed] [Kräiz Ref]
59. Kasem E, Kurihara T, Tabuchi K. Neurexins an neuropsychiatresch Stéierungen. Neurosci Res (2017) 127: 53 – 60.10.1016 / j.neures.2017.10.012 [PubMed] [Kräiz Ref]