Neurologijos žurnalas, 6 Rugsėjo 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4ir Jane R. Taylor1
1.Korespondencija turėtų būti siunčiama Jane R. Taylor, psichiatrijos katedros, molekulinės psichiatrijos skyriaus, Yale universiteto medicinos mokyklos, Ribicoff tyrimų infrastruktūros, Konektikuto psichikos sveikatos centro, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[apsaugotas el. paštu]
Abstraktus
Motyvacijos pokyčiai buvo susiję su kelių psichikos sutrikimų patofiziologija, įskaitant piktnaudžiavimą ir depresiją. Yra žinoma, kad pakartotinis piktnaudžiavimo ar streso vaistų poveikis nuolat sukelia transkripcijos faktorių ΔFosB branduolių accumbens'e (NAc) ir dorsalinėje stiatumoje, o hipotezė prisideda prie neuroadaptacijų dopamino reguliuojamoje signalizacijoje. Tačiau yra mažai žinoma, kad ΔFosB dalyvauja apetityviai motyvuoto elgesio reguliavime. Čia parodyta, kad indukuojama αFosB pernelyg didelė ekspresija bitų genų pelių NAc ir dorsalinėje striatumoje, arba konkrečiai žiurkių NAc branduolyje, naudojant virusą perduodantį genų perdavimą, sustiprintą maisto sustiprintą instrumentinį efektyvumą ir laipsnišką santykį. Labai panašus elgesio poveikis buvo nustatytas po ankstesnio pakartotinio poveikio kokainui, amfetaminui, MDMA [(+) - 3,4-metilendioxi-metamfetamiinui] arba nikotinui žiurkėms. Šie rezultatai atskleidžia galingą ΔFosB motyvacinių procesų reguliavimą ir pateikia įrodymų, kad narkotikų sukeliami genų ekspresijos pokyčiai, indukuojant ΔFosB per NAc branduolį, gali atlikti svarbų vaidmenį motyvacinio poveikio instrumentiniam elgesiui.
Įvadas
Pakartotinis vaisto poveikis sukelia laikinai dinamiškus genų transkripcijos pokyčius, kurie sukelia ilgalaikius neuroadaptacijas branduolių accumbens (NAc) („Nestler“, „2004“). Šis smegenų regionas vaidina svarbų vaidmenį tiek vaistų, tiek natūralių sutvirtinimų procesuose (Kelley ir Berridge, 2002), nors yra mažai žinoma apie transkripcijos veiksnius, kurie daro įtaką elgesiui, kurį skatina netikri, apetitiniai stiprikliai, pvz., maistas. ΔFosB yra transkripcijos faktorius, aktyvuotas NAc ir dorsal striatum lėtiniu vaisto poveikiu (Konradi ir kt., 1994; Nye ir kt., 1995; Chen ir kt., 1997; Pich ir kt., 1997; Shaw-Lutchman ir kt., 2003) ir priverstinis ratų važiavimas (Werme ir kt., 2002). Šiuose regionuose taip pat sukelia keletas lėtinio streso formų (Perrotti ir kt., 2004). Gydymo stiprinimo procesų, susijusių su striatalo ΔFosB indukcija, stiprinimas yra gerai žinomas (Kelz ir kt., 1999; Colby ir kt., 2003; Zachariou ir kt., 2006). Tačiau nežinoma, kokių pasekmių padidėjęs ΔFosB lygis šiuose regionuose veikia dėl natūralių stiprintuvų motyvuoto elgesio.
Instrumentinių atsakymų atlikimas yra būtinas narkotikų vartojimo elgesio komponentas, kuris gali tapti nereguliuojamas arba nelankstus, nes pereina prie priklausomybės progresavimo (Jentsch ir Taylor, 1999; Berke ir Hyman, 2000; Berridge ir Robinson, 2003; Everitt ir Robbins, 2005). NAc dalyvauja įvairiuose instrumentinio elgesio aspektuose, svarbiuose priklausomybei (Balleine ir Killcross, 1994; Corbit ir kt., 2001; de Borchgrave ir kt., 2002; Di Ciano ir Everitt, 2004b; Everitt ir Robbins, 2005). Todėl tikėtina, kad vaistų sukeltos neuroadaptacijos NAc gali paveikti instrumentinių veiksmų atlikimą. Iš tiesų, lėtinis kokaino poveikis padidina sacharozės sustiprintą instrumentinį veikimą (Miles ir kt., 2004) ir manipuliacijos, kurios, kaip manoma, blokuoja neuroplastiką NAc šerdyje, įskaitant PKA (baltymų kinazės A) arba baltymų sintezės slopinimą, trukdo už atlygį už atlygį gaunamiems instrumentiniams atsakams (Baldwin ir kt., 2002a; Hernandez ir kt., 2002). NAc branduolys taip pat tarpininkauja sąlyginio poveikio motyviniam poveikiui instrumentiniam elgesiui (Parkinson ir kt., 1999; Corbit ir kt., 2001; Hall ir kt., 2001; Di Ciano ir Everitt, 2004a; Ito ir kt., 2004), užtikrinantis neurobiologinį substratą, kuriame ΔFosB indukcija gali stipriai paveikti instrumentinį veikimą ir motyvaciją apetitiniams stiprikliams, pvz., maistui, vandeniui ar piktnaudžiavimui narkotikais.
Čia ištyrėme ΔFosB poveikį maisto motyvuotam elgsenai, naudojant du papildomus genetinius metodus: (1) indukuojamą ΔFosB pernelyg didelę ekspresiją NAc ir bitransgeninių pelių (NSE-tTA × TetOp-ΔFosB) ir (2) viršutinės ekspresijos metu ΔFosB NAc šerdyje, specialiai naudojant virusinį tarpinį genų perdavimą žiurkėms. Mes taip pat įvertinome, ar ankstesnis kartotinis kokaino, amfetamino, (+) - 3,4-metilendioksimetamfetamino (MDMA) arba nikotino poveikis, padidėjusiam ΔFosB, padidintų maisto sustiprintą instrumentinį atsaką ir (arba) motyvaciją, naudojant progresyvaus santykio grafiką. kaip parodyta narkotikų sustiprintam savęs administravimui (Horger ir kt., 1990, 1992; Piazza ir kt., 1990; Vezina ir kt., 2002; Miles ir kt., 2004). Mūsų rezultatai rodo nuolatinį ΔFosB poveikį instrumentiniam elgesiui ir rodo, kad šis transkripcijos faktorius gali veikti NAc branduolyje kaip motyvacinės funkcijos reguliatorius.
Medžiagos ir metodai
Gyvūnai ir gyvūnų priežiūra
Eksperimentiškai naivios Sprague Dawley žiurkės buvo įsigytos iš Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Vyriškos bitransgeniškos 11A pelės buvo gautos iš kryžiaus tarp homozigotinių transgeninių pelių, ekspresuojančių neuronui būdingą enolazės (NSE) -tTA tetraciklino transaktyvatoriaus baltymą (A liniją) ir peles, ekspresuojančias TetOp (tetraciklino reaguojančio promotoriaus) -AFosB (linija 11); tėvų linijos buvo palaikomos mišriame mišriame fone (50% ICR ir 50% C57BL6 × SJL) (Chen ir kt., 1998; Kelz ir kt., 1999). Šios bitransgeniškos 11A pelės ekspresuoja ΔFosB tik tada, kai: (1) abu transgenai yra toje pačioje ląstelėje, ir (2) transkripcijos aktyvacija tTA neslopina tetraciklino antibiotikų, pvz., Doksiciklino, buvimo. Doksiciklino skyrimas šioms pelėms gali turėti laiko kontrolę ΔFosB ekspresijai ir būti naudojamas siekiant išvengti ekspresijos vystymosi metu; iš tiesų, doksiciklino vartojimas nesusijęs su nepastebėta ΔFosB nuotėkio išraiška (Chen ir kt., 1998; Kelz ir kt., 1999). Be to, šiems eksperimentams buvo pasirinkta bitransgeninių pelių 11A linija, nes jie turi ekspresijos modelį, kuris pirmiausia apsiriboja dinamorfinų turinčiais striatalų neuronais (tiek NAc, tiek dorsal striatum), labai panašus į ΔFosB indukcijos chroniško vaisto modelį poveikis (Kelz ir kt., 1999). Be to, šios striatrijos ΔFosB ekspresijos kiekybinis įvertinimas buvo kiekybiškai įvertintas (Chen ir kt., 1998; Kelz ir kt., 1999). Pelės buvo sukurtos Teksaso universiteto Pietvakarių universitete ir prižiūrimos bei išbandytos Yale įrenginiuose. Visų nėštumo ir vystymosi metu visos pelės buvo laikomos doksiciklinu iki 8 – 9 savaitės, kai 100 μg / ml koncentracija geriamajame vandenyje, sąlygos žinomos kaip TetOp varomieji transgenai „išjungimo“ būsenoje ir naudojami pradedant 6 doksiciklino, kai ΔFosB ekspresija tampa maksimali (Kelz ir kt., 1999). Visi eksperimentai apėmė littermate bitransgeninių pelių palyginimą su doksiciklinu, kuris savaime neturi įtakos motyvuotam elgesiui (Kelz ir kt., 1999; McClung ir Nestler, 2003; Zachariou ir kt., 2006).
Visi eksperimentiniai tiriamieji buvo laikomi poromis (žiurkėmis) arba grupėse (pelės; nuo 4 iki 5 viename narve) kontroliuojamomis temperatūros ir drėgmės sąlygomis pagal 12 h šviesos / tamsos ciklą (apšvietimas įsijungė 7: 00 AM ir išjungtas 7: 00 PM). Jiems buvo leista bent 7 d prisitaikyti prie gyvenamųjų patalpų prieš bet kokį tyrimą. Gyvūnai visada turėjo prieigą prie vandens ir turėjo ribotą priėjimą prie maisto, kaip nurodyta toliau. Visi gyvūnai buvo naudojami vadovaujantis Nacionaliniais sveikatos vadovų laboratoriniais gyvūnais priežiūros ir naudojimo institutais, ir juos patvirtino Teksaso universiteto Pietvakarių ir Yalės universiteto Gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetai.
Narkotikai
Kokaino hidrochloridas [maloniai pateikiamas Nacionalinis piktnaudžiavimo narkotikais institutas (NIDA)], d-amfetamino sulfatas (Sigma, Sent Luisas, MO), MDMA hidrochloridas (maloniai pateikiamas NIDA) ir (-) - nikotino vandenilio tartratas (Sigma ) buvo ištirpinti steriliame fiziologiniame fiziologiniame tirpale (0.9%) ir intraperitoniniu būdu švirkščiami 5 ml / kg (pelių) arba 2 ml / kg (žiurkės) tūrio. Prieš injekciją nikotino tirpalo pH buvo sureguliuotas natrio bikarbonatu.
Virusiniai vektoriai
Viruso sukeltas genų perdavimas buvo atliktas kaip aprašyta anksčiau (Carlezon ir kt., 1998; Perrotti ir kt., 2004). Trumpai tariant, cDNA, koduojančios specifinius baltymus, buvo įterpti į herpes simplex viruso (HSV) amplikono HSV-PrPUC ir supakuoti į virusą naudojant pagalbininką 5dl1.2. Vėl vektoriai, vairuojantys HSV-LacZ ekspresiją, koduojantys kontrolinį baltymą β-galaktozidazę, arba HSV-AFosB, koduojantys AFosB, vėliau buvo įvedami į NAc šerdį pagal eksperimentinį protokolą.
Eksperimentinė procedūra
Kontūras.
Eksperimentas 1 ištyrė ankstesnio kartotinio vaisto poveikio poveikį sustiprintam instrumentiniam veikimui ir progresuojančiam santykiui. Žiurkės atsitiktinai suskirstytos į penkias eksperimentines grupes (n = 9 – 10 / grupė). Šios grupės švirkštos du kartus per parą (intraperitoniniu būdu; 9: 00 AM ir 5: 00 PM) su druskos tirpalu arba vienu iš šių vaistų: nikotino, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; kokainas, 15 mg / kg; arba amfetamino, 2.5 mg / kg 15 dienas iš eilės. Dozės buvo parinktos remiantis anksčiau paskelbtais duomenimis (Taylor ir Jentsch, 2001; Olausson ir kt., 2003), o vaisto sukeltas lokomotorinis stimuliavimas buvo stebimas gydymo dienomis 1 ir 15. Po 5 nutraukimo, gyvūnai buvo apmokyti reaguoti į 10 iš eilės einančias dienas, o paskui buvo išbandyti progresuojančiu santykiu, reaguojant kitą dieną. Iš statistinės analizės neįtraukti du gyvūnai, nes jie nesulaukė instrumentinio atsako, todėl kiekviename iš trijų baigiamųjų treniruočių įvyko ne daugiau kaip vienas aktyvus svirtis.
Eksperimentai 2 ir 3 ištyrė indukuojamo ΔFosB pernelyg didelio ekspresijos poveikį bitransgeninių pelių veikimui ir reagavo į laipsnišką sustiprinimo santykį. Iš pradžių buvo įrodyta, kad šiose pelėse indukuojama ΔFosB viršekspresija imituoja pasikartojančio vaisto poveikį lokomotorinio aktyvumo ir kondicionuotų vietų pirmenybės paradigmose (Kelz ir kt., 1999; Zachariou ir kt., 2006). Šios pelės gali suteikti kritinę informaciją apie striatalo ΔFosB indėlį į specifinius elgesio procesus. Genotipais išrinktos pelės buvo laikomos doksiciklinu arba 8 savaitės buvo perjungtos į vandentiekio vandenį. Eksperimentai buvo pradėti po 6 savaitės, kai buvo nutrauktas doksiciklinas, o tada transgeno ekspresija yra maksimali (Kelz ir kt., 1999). Eksperimente 2 gyvūnai (n = 16) buvo maistui riboti ir apmokyti pagal toliau aprašytą instrumentinę procedūrą (žr. Toliau, instrumentinis atsakas ir progresyvaus santykio tyrimas) 10 iš eilės. Baigus instrumentinį tyrimą, šiose pelėse buvo įvertintas kokaino sukeltas lokomotorinis stimuliavimas. Eksperimente 3 atskirai grupei pelių (n = 18) buvo išmokyti instrumentinė reakcija 10 iš eilės einančioms dienoms, kai buvo pristatytos maksimalios 50 stiprintuvai. 11 dieną visos pelės buvo ištirtos progresuojančiu santykiu. 12 dieną nustatėme reinforcero nuvertėjimo poveikį iš anksto nustatant progresinį santykį.
Eksperimentai 4 ir 5 ištyrė viruso pernelyg didelio ΔFosB ekspresijos poveikį konkrečiai NAc. Eksperimentas 4 išbandė ΔFosB pernelyg didelio ekspresijos poveikį instrumentiniam veikimui. Čia žiurkės buvo infuzuojamos su HSV-ΔFosB (n = 8) arba HSV-LacZ (n = 8) NAc šerdyje ir apmokytos instrumentinės procedūros pradžioje, pradedant 40 h vėliau. Po 10 kasdienių treniruočių pradinio aktyvumo lygiai buvo įvertinti visiems gyvūnams lokomotorinio aktyvumo stebėjimo įrangoje, kaip aprašyta toliau (žr. Toliau, lokomotorinis aktyvumas). Eksperimentas 5 įvertino NAc ΔFosB overexpression poveikį, konkrečiai reaguojant į progresinį santykį. Čia žiurkės iš pradžių buvo apmokytos 15 iš eilės einančioms dienoms, priskirtos eksperimentinėms grupėms ir vėliau infuzuojamos su HSV-AFosB (n = 8) arba HSV-LacZ (n = 7) NAc šerdyje. Gyvūnai buvo palikti neišbandyti ir neapdoroti 4 d, kad leistų ΔFosB ekspresijai pailgėti. 5 dieną po infuzijos visi gyvūnai buvo išbandyti paspaudus progresuojančio santykio grafiką. Po paskutinės bandymo dienos visos žiurkės buvo nužudytos ir infuzijos kanulių išdėstymas NAc šerdyje patvirtintas histochemiškai. Remiantis infuzijos kanulių išdėstymu, dvi žiurkės buvo pašalintos iš eksperimento 4 ir vieno žiurkės iš 5 eksperimento.
Genų ekspresijos apibūdinimas buvo atliktas atskiroje gyvūnų grupėje. Čia HSV-LacZ buvo infuzuojamas į NAc šerdį ir gyvūnai nužudyti 3 d vėliau. Β-galaktozidazės ekspresija vėliau buvo įvertinta imunohistochemiškai.
Lokomotorinis aktyvumas.
Lokomotorinis aktyvumas buvo matuojamas naudojant aktyvumo matuoklius („Digiscan“ gyvūnų aktyvumo monitorius; „Omnitech Electronics“, „Columbus“, „OH“). Aktyvumo skaitikliai buvo įrengti dviem infraraudonųjų spindulių fotosensorių eilėmis, kiekviena eilutė susideda iš 16 jutiklių, išdėstytų 2.5 cm atstumu. Veiklos skaitikliai buvo kontroliuojami ir duomenys iš veiklos skaitiklių, kuriuos surinko kompiuterio kompiuteris, naudojo „Micropro“ programinę įrangą („Omnitech Electronics“).
Eksperimentiniai gyvūnai buvo įdėti į permatomas plastikines dėžutes (25 × 45 × 20 cm), kurios buvo įdėtos į aktyvumo matuoklius. Gyvūnams iš pradžių buvo leista priprasti prie lokomotyvo aktyvumo įrašymo įrangos 30 min. Kai kuriais eksperimentais gyvūnai vėliau buvo išimti, švirkščiami pagal kokainą, amfetaminą, nikotiną arba transporto priemonę pagal eksperimentinį planą ir vėl įdėta į dėžes. Lokomotorinis aktyvumas buvo užregistruotas 60 min., Pradedant 5 min. Po vaisto injekcijos, kad būtų išvengta nespecifinio injekcijos sukelto hipermotilumo. Visi eksperimentai buvo atlikti gyvūnų šviesos fazės metu (tarp 9: 00 AM ir 6: 00 PM).
Instrumentinis atsakas ir progresyvaus santykio testavimas.
Instrumentinis atsakas buvo įvertintas naudojant standartines operacines kameras žiurkėms (30 × 20 × 25 cm) arba pelėms (16 × 14 × 13 cm), valdomas MedPC programine įranga (Med Associates, St. Albans, VT). Kiekviena kamera buvo patalpinta į garso slopinančią išorinę kamerą su baltu triukšmo generatoriumi ir ventiliatoriumi, kad būtų sumažintas išorinio triukšmo poveikis. Kamerą apšvietė nugaros sienelė, pritvirtinta ant galinės sienos. Granulių dozatorius tiekė maisto granules (20 arba 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ) kaip laikmeną į žurnalą. Galvos įvedimas buvo aptiktas fotoceliumi, sumontuotu virš tvirtinimo indo. Šiame žurnale buvo stimulas. Žiurkėms viena svirtis buvo įdėta į kiekvieną žurnalo pusę. Pelėms dviejų kamščių angos buvo uždėtos ant galinių kamerų sienelių (ty priešais stendą).
Likus 5 d prieš pat treniruotės pradžią, gyvūnai galėjo apsiriboti 90 min maistu per dieną ir buvo patiekiami grūdų pagrindu (pelėms, 20 mg; žiurkėms, 45 mg) jų narvuose. Tyrimo metu maisto granulės operatyvinėse kamerose buvo periodiškai prieinamos pagal elgesio protokolą (žr. Toliau), taip pat neribotą kiekį namų narve 90 min, pradedant 30 min. Šis maisto prieigos grafikas leidžia kiekvienam atskiram gyvūnui pasiekti savo individualų sotumo tašką ir mažina dominuojančių ir pavaldžių gyvūnų konkurencingumą. Mūsų rankose šis grafikas leidžia sulėtinti svorį po pradinio svorio ∼85 – 90% laisvai maitinamų svorių. Gyvūnų svoriai buvo stebimi per visą eksperimentą.
Visi subjektai iš pradžių buvo pripratę prie 2 d testavimo aparato; šių sesijų metu maisto granulės buvo pristatytos į žurnalą „fixforcer 15 s“ (FT-15). Nuo kitos dienos, subjektai kasdien treniruotės 10 iš eilės. Reagavimas į maistą buvo išbandytas remiantis anksčiau paskelbtomis instrumentinio kondicionavimo procedūromis (Baldwin ir kt., 2002b). Reagavimas į teisingą (ty aktyvią) svirtį / nosepoką buvo sustiprintas, o atsakymas į kitą (neaktyvią) svirtį / nosepoką neturėjo užprogramuotų pasekmių. Aktyvios nosepokso arba svirtelės padėtis (kairė / dešinė) buvo subalansuota visoms eksperimentinėms grupėms. Atsiradus atsako reikalavimui (žr. Toliau), prasidėjo žurnalo stimuliatoriaus šviesa, vėliau 1 s, pristatant vieną maisto granulę. Po dviejų sekundžių stimuliatoriaus šviesa buvo išjungta. Pirmieji 10 stiprintuvai buvo gauti po sėkmingo atsako atlikimo pagal fiksuoto santykio (FR1) grafiką, po kurio granulės buvo prieinamos po reagavimo į kintamą santykį (VR2). Sesija truko 15 min.
Eksperimentai 3 (pelės) ir 5 (žiurkės) naudojo alternatyvius mokymo grafikus, kad būtų išvengta galimo instrumentinio veikimo skirtumų treniruočių metu poveikio tolesniam progresuojančiam santykiui reaguoti (aprašyta toliau). Eksperimente 3 pelės buvo apmokytos FR1 grafiku 2 d ir tada FR2 tvarkaraštyje 8 d. Pirmasis 3 d bandymas naudojo 60 min sesijas. Paskutinėse 7 mokymo dienose sesija buvo nutraukta, kai buvo įsigyti 50 stiprintuvai. Eksperimente 5 žiurkės buvo apmokytos pagal FR1 / VR2 grafiką 15 min sesijose, kaip aprašyta visuose kituose eksperimentuose su dviem išimtimis. Pirma, buvo pristatytas maksimalus 150 granulių / sesijos skaičius. Antra, šie gyvūnai gavo 5 papildomas treniruočių dienas (ty iš viso 15 d), kad būtų galima nustatyti stabilius rezultatus prieš bet kokį eksperimentinį manipuliavimą.
Gyvūnai taip pat buvo tiriami reaguojant į maistą pagal laipsnišką armatūros planą. Šiame bandyme atsako reikalavimas gauti maistą buvo pradėtas kaip FR1 grafikas, bet 2 palaipsniui padidėjo, kad gautų vėlesnį patvirtinimą (ty 1, 3, 5, 7…, X + 2 atsakymus). Tiriant vaistą žiurkėmis, 5 buvo palaipsniui didinamas, todėl 1, 6, 11, 16…, X + 5 buvo galutinai sudarytas. Visi kiti parametrai buvo tokie patys kaip pirmiau aprašyta mokymo procedūra. Bandymas buvo nutrauktas, kai 5 min.
Reinforcero devalvacija.
Reorganizatoriaus devalvacijos poveikis buvo ištirtas naudojant specifinį pirminį tyrimą. Čia 3 h metu pelėms buvo leista valgyti neribotą grūdų pagrindo maisto granules savo namuose.
Chirurginiai metodai.
Gyvūnai anestezuojami naudojant Equithesin [mišinį, turintį pentobarbitalį (35 mg / kg) ir chloro hidratą (183.6 mg / kg) etanolyje (10% v / v) ir propilenglikolį (39% v / v); vartojamas 4.32 ml / kg, ip]. Kanonai (plastikai, Roanoke, VA) buvo chirurgiškai implantuoti, nukreipti virš NAc šerdies, naudojant Kopf stereotaktinę įrangą. Stereotaktinės koordinatės, naudojamos pagal bregmą, buvo tokios: anterior / posterior, + 1.5 mm; šoninė / medialinė, ± 1.5 mm; ventralinis / dorsalinis, –6.0 mm (Paxinos ir Watson, 1986). Kaniulės buvo pritvirtintos prie kaukolės varžtais ir dantų cementu. Apsauginiai kanalai buvo uždėti, kad būtų išvengta blokavimo. Po operacijos gyvūnams buvo atlikta standartinė pooperacinė priežiūra ir jiems buvo leista atsigauti 5 d prieš pradedant bet kokį eksperimentą.
Infuzijos.
Virusinių vektorių intracerebrinės infuzijos buvo atliktos dvišaliai 40 h prieš treniruotės pradžią (žr. Žemiau). Injekciniai švirkštai (31 gabaritas), išilgantys 1 mm žemiau kreipiamųjų kanalų galo, lėtai sumažėjo vienu metu į kairę ir dešinę NAc, o 1.0 μl / pusė buvo infuzuojama per 4 min. Laikotarpį, kai infuzijos greitis buvo 0.25 μl / min. naudojant mikroinfuzijos siurblį (PHD-5000; Harvard Apparatus, Holliston, MA). Po infuzijos pabaigos infuzinės adatos buvo paliktos 1, o manekeno kanulės buvo pakeistos. Cannula išdėstymas buvo histologiškai patikrintas baigus elgsenos eksperimentus (žr. 6B pav.), Ir į eksperimentinių duomenų statistinę analizę buvo įtraukti tik gyvūnai, turintys teisingai padėtų kanulių.
Histologinė analizė ir imuninė spalva.
Baigus eksperimentus, gyvūnai, kurie eksperimento metu buvo operuoti, buvo anestezuoti su Equithesin ir perfuzuoti transcardialiai su 0.1 m PBS (5 min) ir 10% formalinu (10 min) pagal standartines procedūras. Smegenys buvo pofiksuojamos formalinu ir po to įdedamos į fosfatų buferinį sacharozės tirpalą (30%). Tada visos smegenys buvo supjaustytos 40 μm sekcijose ant mikrotomo ir naudojamos histologinėms kanalų išdėstymo ir baltymų ekspresijos analizėms.
Kaniulų išdėstymas buvo atliktas neutraliais raudonais atspalviais, o po etanolio dehidratacijos - ant mikroskopo plokštelių distiliuoto plastifikatoriaus ir ksileno (DPX). Imunohistochemija buvo atlikta kaip aprašyta anksčiau (Hommel ir kt., 2003). Trumpai tariant, β-galaktozidazės ekspresija po HSV-LacZ infuzijos buvo nustatyta imunofluorescentiniu dažymu naudojant ožkos anti-β-galaktozidazės pirminį antikūną (1: 5000; Biogenesis, Kingston, NH). Po inkubacijos per naktį sekcijos buvo nuplaunamos, o po to inkubuojamos su fluorescuojančiu asilo anti-ožkos antriniu antikūnu, konjuguotu su Cy2 (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Sekcijos vėl plaunamos, po to etanolio dehidratacija ir montavimas DPX. Gretimi kontroliniai profiliai buvo gydomi vienodai, neįtraukiant pirminių antikūnų. Imunofluorescencija buvo įvertinta 520 nm, naudojant a Zeiss " (Oberkochen, Vokietija) mikroskopas su FITC filtru ir vaizdais, užfiksuotais vienodais ekspozicijos laikais Zeiss " „Axiovision“ skaitmeninės vaizdo sistemos.
Statistika
Visų eksperimentų duomenys buvo įvertinti naudojant vieno, dviejų ar trijų krypčių ANOVA, po kurio atliktas Scheffe arba Dunnett post hoc testas, prireikus pataisant kelis palyginimus, naudojant nuoseklų Holmo atmetimo testą. Vertė p ≤ 0.05 buvo laikoma statistiškai reikšminga.
rezultatai
Eksperimentas 1: pakartotinio vaisto poveikio poveikis instrumentiniam veikimui ir progresuojančiam santykiui
Kad patvirtintume, kad mūsų pakartotinio vaisto poveikio paradigmoje atsirado funkcionaliai reikšmingų neuroadaptacijų, pirmiausia įvertinome lokomotorinį jautrinimą kaip prototipinį lėtinio vaisto poveikio elgesio matą. Žiurkėms buvo duodamos dvigubos nikotino injekcijos (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), kokainas (15 mg / kg) arba amfetaminas (2.5 mg / kg), o lokomotorinis aktyvumas buvo išbandytas po pirmosios injekcijos. gydymo dienos 1 ir 15 (papildomas 1A – E pav., prieinamas adresu www.jneurosci.org kaip papildoma medžiaga). Statistinė analizė atskleidė reikšmingą gydymą per parą (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). Išskyrus MDMA (p = 0.62), visi vaistai sukėlė žymiai didesnį lokomotorinį aktyvumą (ty jautrinimą) 15 dieną, lyginant su 1 dieną (nikotinu, p ≤ 0.001; kokainu, p ≤ 0.001; amfetaminu, p ≤ 0.01). Pakartotinės druskos injekcijos neturėjo jokio poveikio. Nė vienas iš gydymo vaistais nepakeis pradinio lokomotorinio aktyvumo, išmatuoto 15 (2A papildomas skaičius, XNUMXA diena). www.jneurosci.org kaip papildoma medžiaga).
Praėjus penkioms dienoms po paskutinės narkotikų injekcijos, ištyrėme ankstesnio pakartotinio nikotino, MDMA, kokaino ar amfetamino poveikį maistui sustiprintam instrumentiniam elgesiui. Duomenys pateikiami kiekvienam vaistui atskirai 1 pavA – H, naudojant tą pačią fiziologinę druskos kontrolinę grupę palyginimui. Mes nustatėme, kad ankstesnis poveikis kiekvienam iš šių vaistų buvo žymiai ir selektyviai padidėjęs maisto sustiprintas instrumentinis atsakas (gydymas svirtimi treniruotės dieną, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; post hoc analizė: nikotinas, p ≤ 0.01; MDMA, p ≤ 0.05; kokainas, p ≤ 0.01; amfetamino, p ≤ 0.001). Nuolatinis instrumentinio atsako padidėjimas, pastebėtas asimptotinio veikimo metu, parodė galimą motyvacijos padidėjimą, atitinkantį anksčiau praneštus padidėjimus po pakartotinio psichostimuliatoriaus poveikio (žr. Diskusiją). Todėl išbandėme, ar ankstesnė pakartotinė vaisto ekspozicija padidino motyvaciją, naudodama progresinį santykį. Buvo nustatytas ankstesnio vaisto poveikio statistinis poveikis reaguojant į aktyviąją svirtį (gydymas svirties sąveika, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Pav 2A) ir galutinis pertraukos taškas (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Pav 2B). Papildoma analizė parodė, kad visi gydymo būdai padidino aktyvių atsakų skaičių (nikotinas, p ≤ 0.001; MDMA, p ≤ 0.05; kokainas, p ≤ 0.001; amfetaminas, p ≤ 0.001) ir lūžio tašką (nikotinas, p ≤ 0.001; MDMA , p ≤ 0.01; kokainas, p ≤ 0.0001; amfetaminas, p ≤ 0.0001), atitinkantis šių gydymo poveikį motyvacijai. Atsižvelgiant į tai, kad vaistų poveikis pradiniam lokomotoriniam aktyvumui yra neveiksmingas ir kad neaktyvus poveikis neaktyviems svirtims, mažai tikėtina, kad padidėjęs atsakas į maistą šiomis sąlygomis atspindi nespecifinį variklio aktyvumo padidėjimą.
1 pav.
Ankstesnių pakartotinių nikotino (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokaino (15 mg / kg) arba amfetamino (2.5 mg / kg) injekcijų poveikis dvigubai per parą 15 d po to, kai buvo atliktas kitas instrumentinis elgesys. Gyvūnai buvo tiriami kartu, tačiau aiškumo sumetimais kiekvieno vaisto poveikis pateikiamas atskirai, naudojant tą pačią druskos tirpalo kontrolinę grupę. A (aktyvūs atsakai) ir B (neaktyvūs atsakai) rodo ankstesnio nikotino poveikio poveikį; C, D, MDMA; E, F, kokainas; G, H, amfetaminas. Duomenys pateikiami kaip vidurkis ± SEM.
2 pav.
Ankstesnio pakartotinio gydymo (du kartus per dieną, 15 d.) Druskos tirpalu, nikotinu (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokainu (15 mg / kg) arba amfetaminu (2.5 mg / kg) poveikis instrumentiniam atsakui pagal laipsnišką armavimo grafiką. Duomenys pateikiami kaip priemonės ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Sal, fiziologinis tirpalas; Nik, nikotinas; Coc, kokainas; Amfas, amfetaminas; PR, progresyvus santykis.
Ankstesnė vaisto ekspozicija taip pat neturėjo jokio poveikio kūno svoriui, kuris buvo užregistruotas prieš maistą ribojant, pirmą ar paskutinę instrumentinio mokymo dieną arba prieš pat progresyvaus santykio testą (papildomas 2B pav. www.jneurosci.org kaip papildoma medžiaga). Ribota prieiga prie maisto 3 d iš pradžių sumažino kūno svorį iki vidutiniškai 91 – 92% laisvai maitinamų svorių. Pasibaigus elgsenos bandymams, svoriai grįžo į 97 – 99% iš anksto nustatyto kūno svorio, ir tarp vaistų veikiamų ir druskos tirpalu gydytų gyvūnų nebuvo pastebėta jokių skirtumų. Todėl kūno svorio pokyčiai ir bado ar apetito skirtumai neturėtų reikšmingai prisidėti prie stebimo instrumentinio veikimo ar motyvacijos pagerėjimo.
Eksperimentas 2: indukuojama ΔFosB viršekspresija bitransgeninėse pelėse; instrumentinis pasirodymas
Toliau ištyrėme, ar padidėjęs instrumentinis veikimas padidėjo bitransgeninėse pelėse, kurios indukuotai viršija ΔFosB, turinčios žymią selektyvumą NAc ir dorsal striatum (Kelz ir kt., 1999). Šiame eksperimente ΔFosB-pernelyg ekspresuojančios pelės buvo lyginamos su littermate kontrolėmis, kurios pernelyg neišreiškia ΔFosB, nes jos palaikomos doksiciklinu (žr. Medžiagos ir metodai). Mes nustatėme, kad ΔFosB per didelė ekspresija žymiai padidino sustiprintą maisto reakciją (geno ekspresija svirtimi pagal treniruotės dieną, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Pav 3A). Neaktyvios diafragmos atsakymų, padarytų neaktyvioje angoje, skaičius dviejose grupėse nesiskyrė (Pav 3B). Kartu šie duomenys rodo, kad ΔFosB overexpression NAc ir dorsal striatum selektyviai padidino instrumentinį efektyvumą
3 pav
Indukuojamo ΔFosB pernelyg intensyvios ekspresijos poveikis bitransgeninių pelių veikimui. A, Aktyvūs atsakymai. B, Neaktyvūs atsakymai. Duomenys pateikiami kaip vidurkis ± SEM.
Norint atmesti, kad ΔFosB-ekspresuojančių gyvūnų instrumentinio veikimo stiprinimas gali būti paaiškintas apetito ar alkio pokyčiais, kūno svoris buvo užregistruotas prieš maistą ribojant ir pirmąsias ir paskutines mokymo dienas. ΔFosB iki maisto apribojimo neturėjo jokio poveikio kūno svoriui, o elgesio bandymų metu taip pat nebuvo poveikio kūno svoriui. Čia ribota prieiga prie 3 d sumažino kūno svorį iki 87 – 89 vidurkio, skirto laisvai maitinamiems svoriams. Pasibaigus elgsenos bandymams, gyvūnų svoriai buvo 97 – 99% iš anksto nustatytų kūno svorių, su lygiaverčiais pokyčiais, matomais ΔFosB ir kontrolinėse pelėse (papildomas 3A pav. www.jneurosci.org kaip papildoma medžiaga). Todėl mažai tikėtina, kad galimas ΔFosB pernelyg didelio ekspresijos poveikis alkiui ar apetitui galėtų padėti stebėti instrumentinį atsaką.
Kai buvo atliktas instrumentinių charakteristikų bandymas, ΔFosB viršsekspresija nekeičia pradinio lokomotorinio aktyvumo, matuojamo 30 min periodo metu (papildomas 3B pav. www.jneurosci.org kaip papildoma medžiaga). Šis stebėjimas patvirtina požiūrį, kad nespecifinis aktyvumo pakitimas neprisideda prie padidėjusio instrumentinio efektyvumo, pastebėto šiuose gyvūnuose. Tačiau pranešta, kad ΔFosB-pernelyg ekspresuojančios bitransgeninės pelės turi didesnį lokomotorinį atsaką į ūminį ir kartotinį kokainą (Kelz ir kt., 1999). Kadangi mes vartojome šiek tiek kitokį pasitraukimo iš doksiciklino grafiką, kad sukeltume genų ekspresiją (6 savaitės su maistu apribojus), mes patvirtinome šį fenotipą. Iš tiesų, ΔFosB-pernelyg ekspresuojančios pelės parodė žymiai didesnį lokomotorinio aktyvumo padidėjimą, kai švirkščiama kokainu, palyginti su jų kraujotakos kontrolėmis, palaikomomis doksiciklinu (gydymas genų ekspresija, F(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (papildomas Fig. 3C, prieinamas adresu www.jneurosci.org kaip papildoma medžiaga).
Eksperimentas 3: indukuojama ΔFosB viršekspresija bitransgeninėse pelėse; palaipsniui
Atsižvelgiant į tai, kad ankstesnis vaisto poveikis sukelia striatalų ΔFosB (Nestler ir kt., 2001) ir čia buvo nustatyta, kad būtų padidintas progresinis santykis, ir toliau ištyrėme, ar transgeninė striatų ΔFosB ekspresija taip pat padidina efektyvumą progresuojančiu armavimo planu. Nauja grupė pelių buvo apmokyta, kaip reaguoti esant tokioms sąlygoms (žr. „Medžiagos ir metodai“), dėl kurių nebuvo padaryta reikšmingų instrumentinio veikimo skirtumų prieš pradedant bandymą su laipsnišku santykiu (F(1,16) <1). Tačiau atlikdami progresyvaus santykio testą pastebėjome reikšmingą genų ekspresiją sverto sąveikos būdu (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Pav 4A) ir nustatė, kad ΔFosB-pernelyg ekspresuojančios pelės, lyginant su kraujotakos kontrolinėmis pelėmis, palaikomomis doksiciklinu, padarė daugiau aktyvių atsakų (p ≤ 0.05), tuo tarpu neaktyvių svirtinių atsakų skaičius nebuvo skirtingas. ΔFosB-pernelyg išreiškiančios pelės taip pat pasiekė didesnį lūžio tašką (F(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Pav 4B). Šie duomenys rodo, kad, kaip ir ankstesnėje psichostimulianto ekspozicijoje, ΔFosB pernelyg intensyvi ekspresija padidina motyvaciją. Kadangi neaktyvių atsakų skaičius ΔFosB pernelyg intensyviai ekspresuojančiose pelėse nepasikeitė, nespecifinis aktyvumo padidėjimas greičiausiai neprisidės prie šio poveikio. Šį požiūrį dar patvirtino pradinio lokomotorinio aktyvumo vertinimai, kuriuose nebuvo skirtumų tarp ≥FosB ir littermate kontrolinių pelių, palaikomų doksiciklinu, perteklių. Tyrimo dieną matuojant ΔFosB-viršekspresuojančius ir kontrolinius gyvūnus, bendras kūno svorio skirtumas nebuvo akivaizdus. Taigi, nors ΔFosB-pernelyg intensyviai ekspresuojantys gyvūnai skleidžia daugiau maisto motyvuotų atsakymų, jie, atrodo, nesinaudoja daugiau maisto, kai jie laisvai prieinami. Labiausiai tikėtinas šios pastabos paaiškinimas yra tas, kad, nors motyvacija lemia, kaip sunku gyvulys dirbs, kad įgytų stiprintuvą, daugelis papildomų veiksnių (apetitas, sotumo, medžiagų apykaitos būsena ir kt.) Turi įtakos šėrimo elgsenai ir faktiniam maisto vartojimui.
4 pav.
Indukuojamo per didelio FosB ekspresijos poveikis bitransgeninėse pelėse instrumentiniam reagavimui pagal progresyvų armatūros santykio grafiką prieš ir po sotumo sukelto stiprintuvo devalvavimo. A, B, bazinė padėtis: svirties atsakai (A), lūžio taškas (B). C, D, Po sustiprinto devalvavimo: svirties atsakai (C), lūžio taškas (D). Duomenys pateikiami kaip priemonės ± SEM. * p <0.05.
Naudojamos ΔFosB bitransgeninės pelės išreiškia ΔFosB visoje striatume. Kadangi ventralinė striatum (įskaitant NAc) buvo susijusi su motyvaciniais procesais, manoma, kad nugaros striatumas dalyvauja įsigyjant instrumentinius įpročius (Yin ir kt., 2004; Faure ir kt., 2005). Nors mes nenustatėme instrumentinio veikimo skirtumų treniruočių fazėje, naudojant mažo santykio grafiką su maksimaliomis sustiprinimo ribomis, sąlygoms, kurios yra gana atsparios instrumentinių įpročių plėtrai (Dickinson, 1985), gali būti, kad įpročių nustatymas gali turėti įtakos reagavimui pagal laipsniško santykio grafiką. Ši galimybė buvo išbandyta tiesiogiai, įvertinant pakartotinio devalvacijos poveikį iš anksto nustatant progresinį santykį. Toks išankstinis paruošimas panaikino ΔFosB poveikį, reaguojant į progresyvųjį santykį, neturint skirtumų reaguojant ar pertraukiant taškus, pastebėtus tarp ΔFosB-pernelyg aktyvių ir kontrolinių pelių (F(1,16) <1) (Pav 4C, D). Kartu šie duomenys leidžia manyti, kad ΔFosB pernelyg intensyvi ekspresija nepasikeitė jautrumu apdovanotų rezultatų vertės pokyčiams naudojant šį bandymų grafiką. Atvirkščiai, progresyvaus santykio teste pastebėtas instrumentinis atsakymas atrodo tikslinis, o padidėjęs pertraukos taškas, pastebėtas ΔFosB-pernelyg intensyviai ekspresuojančiose pelėse, greičiausiai yra susijęs su padidėjusia motyvacija, o ne į padidėjusį įpročius.
Eksperimentas 4: virusinė tarpinė ΔFosB ekspresija NAc branduolyje: instrumentinis veikimas
Norint įvertinti, ar ΔFosB overexpression selektyviai NAc gali atsispindėti elgesys, pastebėtas bitransgeninėse pelėse, mes infuzavome HSV-AFosB arba HSV-LacZ kaip kontrolę, selektyviai į žiurkių NAc šerdį, ir ištyrėme šio manipuliavimo poveikį maistui - sustiprintas instrumentinis pasirodymas (Pav 5A, B). Po žurnalo mokymo HSV-ΔFosB arba HSV-LacZ buvo įnešamas į NAc šerdį 40 h prieš pradedant elgsenos tyrimus. Infuzijos vieta ir virusinės medijuojamos genų ekspresijos mastas parodytas 6 pavA ir B. NAC infuzijos HSV-ΔFosB sukėlė ilgalaikį aktyvių atsakų skaičiaus padidėjimą (genų ekspresija svirtimi, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Pav 5A), kuris išliko per visą eksperimentą. Šie poveikiai buvo selektyvūs, nes nebuvo reikšmingo ΔFosB pernelyg didelio pasekmės NAc branduolyje dėl neaktyvių atsakų skaičiaus (Pav 5B) arba pradinio lokomotorinio aktyvumo, užregistruoto kitą dieną po eksperimento pabaigos (duomenys nerodomi). Taigi αFosB perteklinė išraiška NAc tokiu būdu imitavo ankstesnio vaisto ekspozicijos ar ΔFosB viršutinės ekspresijos poveikį.
5 pav.
HSV-ΔFosB infuzijų įtaka NAc branduoliui prieš mokymą, kaip reaguoti. A, Aktyvūs atsakymai. B, Neaktyvūs atsakymai. Duomenys pateikiami kaip vidurkis ± SEM.
6 pav.
A, Infuzijos vietų išdėstymas virusų vektoriaus eksperimentams. Į viršų, užpildyti juodi apskritimai atitinka numatomą infuzijos vietą. Tik infuzijos, padarytos ∼0.5 mm šios srities (ty NAc šerdyje), kaip nurodyta apskritime, buvo laikoma priimtina. Gyvūnai, užsikrėtę už šios srities ribų, nebuvo įtraukti į statistinius tyrimus. Apatinė, infuzijos vieta NAc reprezentatyviam gyvūnui. B, baltymų ekspresijos imunohistocheminis patikrinimas po HSV-LacZ infuzijos. Viršutinės plokštės rodo β-galaktozidazės ekspresiją NAc šerdyje (2.5 ir 10 × padidinimas). Dugno plokštės rodo imunofluorescencijos trūkumą gretimose kontrolinėse sekcijose, naudojant tą pačią imunohistocheminę procedūrą, neįtraukiant pirminio antikūno.
Eksperimentas 5: virusu medijuojama ΔFosB pernelyg išraiška NAc branduolyje: progresinis santykis
Galutinis eksperimentas tiesiogiai nustatė, ar apribota ΔFosB pernelyg didelė ekspresija NAc šerdyje, naudojant virusinį tarpinį genų perdavimo metodą, buvo pakankama motyvacijai didinti žiurkėms. Čia HSV-ΔFosB buvo infuzuojamas tik po to, kai buvo baigtas instrumentinis mokymas, pašalinant bet kokią galimą ΔFosB pernelyg didelio ekspresijos įtaką treniruočių metu tolesniam progresuojančio santykio bandymui. Nauja grupė žiurkių buvo apmokyti, kaip ir anksčiau, ir suskirstyti į subalansuotas eksperimentines grupes pagal jų rezultatus paskutinėse mokymo dienose. Vėliau gyvūnai gavo dvišales HSV-AFosB arba HSV-LacZ infuzijas į NAc šerdį ir buvo ištirtos progresuojančiu santykiu, reaguojančiu po 5 d pernelyg didelio ekspresijos. Statistinė analizė atskleidė reikšmingą genų ekspresiją sverto sąveika (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Pav 7A). HSV-ΔFosB infuzuotos žiurkės aktyviau reagavo (p ≤ 0.01), palyginti su infuzuojamomis HSV-LacZ, o reakcija į neaktyviąją svirtį nebuvo paveikta. Atsižvelgiant į šį padidėjimą, su HSV-ΔFosB infuzuotomis žiurkėmis taip pat buvo didesnis pertraukos taškas (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Pav 7B) nei gyvūnai, užsikrėtę HSV-LacZ. ΔFosB poveikis pradiniam lokomotoriniam aktyvumui 1 h prieš progresinio santykio testą (papildomas 4A pav. www.jneurosci.org kaip papildoma medžiaga). Tuo tarpu progresuojančio santykio testavimo dieną kūno svorio skirtumai taip pat nebuvo (papildomas 4B pav.) www.jneurosci.org kaip papildoma medžiaga). Šie rezultatai patvirtina mūsų stebėjimus su transgeninėmis ΔFosB-ekspresuojančiomis pelėmis, ir rodo, kad selektyvus ΔFosB pernelyg didėjimas NAc yra pakankamas, kad padidintų su maistu susijusią motyvaciją.
7 pav.
HSV-ΔFosB 5 d infuzijų poveikis prieš bandymą su instrumentiniu reagavimu pagal laipsnišką armavimo grafiką. A, svertų atsakymai. B, lūžio taškas. Duomenys pateikiami kaip priemonės ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01.
Diskusija
Šis tyrimas parodė, kad ΔFosB pernelyg didėjantis NAc stiprina maisto sustiprintą instrumentinį elgesįr. Ankstesnis kokaino, amfetamino, MDMA arba sustiprinto nikotino poveikis paskatino tolesnį instrumentinį veikimą. Šios vaisto ekspozicijos taip pat padidino maisto motyvuotą elgesį pagal laipsnišką sustiprinimo planą. Šie ankstesnio vaisto ekspozicijos efektai buvo imituoti ribotą ΔFosB ekspresiją striatume, naudojant indukuojamąsias bitransgenines (NSE-tTA × TetOP-AFosB) peles arba naudojant naują virusinį vektorių, norint ekspresuoti ΔFosB selektyviai NAc. Pažymėtina, kad ΔFosB viršijimas NAc branduolyje, kai jau buvo gautas instrumentinis atsakas, sustiprino maisto produktų motyvaciją pagal laipsniško santykio grafiką. Kartu mūsų atradimai identifikuoja ΔFosB NAc šerdyje kaip galimą medikamento sukeltų neuroadaptacijų, galinčių skatinti instrumentinį elgesį, tarpininką, praplečiant šio transkripcijos faktoriaus vaidmenį įtraukiant procesus, susijusius su motyvaciniu poveikiu maisto sustiprinto elgesio veikimui. Jie taip pat kelia galimybę, kad sąlygos, kurios sukelia ΔFosB ekspresiją NAc, gali paveikti tiek natūralių, tiek ir narkotikų stiprintuvų savybes..
ΔFosB sukaupia dinorfinu ekspresuojančius vidutinio smegenų neuronus, esančius ir NAc, ir nugaros striatume po lėtinio, bet ne ūminio piktnaudžiavimo narkotikais. Šis regioninis ekspresijos modelis atkartojamas indukuojamose bitransgeninėse ΔFosB-ekspresuojančiose pelėse, naudojamose čia. Šiose pelėse, padidėjęs striato ΔFosB lygis padidina gyvūnų jautrumą kokainui ir morfinui, matuojamas pagal sąlygines vietas (Kelz ir kt., 1999; Zachariou ir kt., 2006). Jis taip pat padidina progresuojančią kokaino reakciją, o tai rodo, kad motyvacija savarankiškai vartoti kokainą padidėja striatalų ΔFosB viršijimo (Colby ir kt., 2003). Čia mes nustatėme, kad striatų ΔFosB overexpression šiose pelėse taip pat padidėjo progresuojantis santykis, reaguojantis į maisto stiprintuvą, ir kad šie efektai buvo atkurti ribotai virusu tarpininkaujant AFosB ekspresijai NAc branduolyje žiurkėms. Mūsų duomenys rodo, kad ΔFosB gali veikti kaip transkripcinis motyvacijos moduliatorius pirminiams stiprintuvams, nesvarbu, ar jie yra maistas, vaistai, ar galbūt pratimai, idėja, atitinkanti preliminarias pastabas, kad ΔFosB striatyvinė ekspresija padidėja po lėtinio ratų važiavimo ar sacharozės girdymo (McClung ir kt., 2004). Šie duomenys rodo, kad ΔFosB pernelyg didėjanti NAc gali padidinti tiek natūralių, tiek ir narkotikų stipriklių motyvacinį poveikį.
Valstybės tarnybos subregionai teigia, kad skirtingai tarpininkauja pavlovijos ar instrumentinių skatinamųjų procesų įtaka instrumentiniam veikimui (Corbit ir kt., 2001; de Borchgrave ir kt., 2002), o bendresnius motyvacinius įtaką instrumentiniam veikimui gali užkoduoti kiti regionai, pvz., centrinis amygdalos branduolys (Corbit ir Balleine, 2005). Tačiau NAc branduolys taip pat buvo pasiūlytas kaip svarbi vieta norint įgyti tikslinį mokymąsi (Smith-Roe ir Kelley, 2000; Baldwin ir kt., 2002a,b; Kelley, 2004). Mes parodome lygiavertį ankstesnių vaistų ekspozicijos ir transgeninės striatūros ΔFosB pernelyg didelio ekspresijos poveikį didinant instrumentinį elgesį. HSV-ΔFosB infuzijos, skirtos tik NAc branduoliui, taip pat padidino maisto stiprinimą. Nors šie eksperimentai neužkerta kelio nugaros striatumui šiuose elgesiuose, jie tvirtai teigia, kad ΔFosB sukeltos genų ekspresijos pokyčiai NAc yra pakankami, kad padidintų maisto motyvuotą atsaką. Kadangi progresuojančio santykio atsakas taip pat buvo sustiprintas, kai ΔFosB buvo išreikštas po to, kai anksčiau buvo pasiektas stabilus instrumentinis veikimas, motyvacinio poveikio instrumentiniam elgesiui vaidmuo atrodo tikėtinas. Tačiau negalima visiškai atmesti galimybės, kad mūsų manipuliacijos taip pat veikia instrumentinius mokymosi procesus. Remdamiesi savo išvadomis, padidėjęs instrumentinis veikimas, pastebėtas po ankstesnio gydymo kokainu (Miles ir kt., 2004) buvo teigiama, kad tai susiję su motyvaciniais pokyčiais, atitinkančiais lėtinio nikotino gydymo gebėjimą padidinti progresinį santykį, reaguojantį pelėms (Brunzell ir kt., 2006). Be to, dopamino transporterio išjungimo pelės, kuriose padidėja ekstraląstelinė dopamino koncentracija, rodo ir padidintą ΔFosB imunoreaktyvumą, ir sustiprintą motyvaciją, bet ne pakeistą mokymąsi (Cagniard ir kt., 2006). Be to, mes nustatėme, kad pernelyg didelė striatalo ΔFosB išraiška pelėms neturėjo įtakos veikimui, kai maistas buvo „nuvertintas“ iš anksto. Šie duomenys rodo, kad gyvūnai jautriai reagavo į motyvacinę vertę ir kad atsakymas buvo nukreiptas į tikslą.
Ankstesnis kartotinis vaisto poveikis taip pat gali sustiprinti elgesio kontrolę, kurią sąlygoja su natūraliais stiprintuvais susiję sąlyginiai stimulai, matuojant pavlovijos metodu (Harmer ir Phillips, 1998; Taylor ir Jentsch, 2001; Olausson ir kt., 2003), kondicionuota armatūra (Taylor ir Horger, 1999; Olausson ir kt., 2004) ir pavloviško-instrumentinio perdavimo (Wyvell ir Berridge, 2001). Dabar yra įtikinamų įrodymų, kad NAC branduolys, priešingai nei apvalkalas, dalyvauja kontroliuojant vaistų motyvuotą elgesį su pavloviškomis sąlygomis veikiančiais stimulais (Parkinson ir kt., 1999, 2002; Hall ir kt., 2001; Dalley ir kt., 2002; Ito ir kt., 2004). Mūsų rezultatai gali reikšti, kad vaistų sukelta ΔFosB indukcija NAc gali būti vienas mechanizmas, kuriuo šiose procedūrose pagerėja elgesio kontrolė. Taip pat įmanoma, kad pavlovijos sąlygoti stimulai, veikiantys kaip sąlyginiai stiprikliai, prisideda prie dabartinio elgesio poveikio. Geresnis tokių elgsenos stimuliatorių elgesio valdymas, kurį sąlygoja striatų ΔFosB padidėjimas, taip pat gali prisidėti prie baltymo poveikio vaistų sukeltai sąlyginei vietai. (Kelz ir kt., 1999; Zachariou ir kt., 2006) ir laipsniškai reaguojant į kokainą (\ tColby ir kt., 2003). Motyvacinių procesų pokyčiai buvo hipotetiniai prisidėti prie priklausomybę sukeliančio elgesio vystymosi ir palaikymo (Robinson ir Berridge, 1993; Jentsch ir Taylor, 1999; Robbins ir Everitt, 1999; „Nestler“, „2004“). Šie duomenys taip pat atitinka kitas teorijas, kuriose akcentuojami įvairūs instrumentiniai ir pavlovijos procesai priklausomybę sukeliančiame elgesyje (Everitt ir Robbins, 2005). Dabar reikia papildomo darbo, siekiant apibrėžti narkotikų ir ΔFosB sukeltų neuroadaptacijų vaidmenį NAc ir kituose limbinių-striatų subregionuose, atsižvelgiant į konkrečius asociatyvius ar motyvacinius veiksnius, kurie gali palengvinti instrumentinį veikimą ir prisidėti prie kompulsinio elgesio.
Nors tikslūs molekuliniai mechanizmai, kuriais remiantis NAc įtaką lemia pirminiai ar kondicionuojami stiprintuvai, nėra žinomi (Kelley ir Berridge, 2002), GABAerginiai vidutinio stiprumo NAc neuronai laikomi svarbiu medikamento ir patirties priklausomybės plastiškumo substratu. Čia dopaminerginis įvedimas iš ventralinio tegmentalio srities ir glutamaterginis įvedimas iš kortikoskopinių afferentų susilieja su įprastais dendritais ir dendritiniais spygliais (Sesack ir Pickel, 1990; Smith ir Bolam, 1990). Lėtinis psichostimuliatoriaus poveikis didina tokių spyglių tankį NAc lukšto ir branduolio neuronuose (Robinson ir Kolb, 1999; Robinson ir kt., 2001; Li ir kt., 2003, 2004). Neseniai elgesio jautrinimo indukcija buvo susijusi su dendritinių spyglių padidėjimu NAc šerdyje (Li ir kt., 2004). Pažymėtina, kad kokaino sukeltas stuburo tankio padidėjimas išlieka tik D1- teigiami neuronai, kurie ekspresuoja ΔFosB (Robinson ir Kolb, 1999; Lee ir kt., 2006). NAF šerdyje esantis ΔFosB gali prisidėti prie ilgalaikio sinaptinio plastiškumo, kuris gali turėti įtakos instrumentiniam elgesiui. Iš tiesų, lemiamas dopamino-glutamato neurotransmisijos vaidmuo (Smith-Roe ir Kelley, 2000), baltymų kinazės A aktyvumas (Baldwin ir kt., 2002a) ir de novo baltymų sintezė (Hernandez ir kt., 2002) NAc branduolyje anksčiau buvo pranešta apie instrumentinius rezultatus. Dabar identifikuojame ΔFosB kaip transkripcijos veiksnį, kuris gali nuolat sustiprinti sustiprintą maistą reaguojant, kai išreikštas NAc šerdyje. Konkretūs genai ar baltymai, dalyvaujantys šiuose poveikiuose, dar nėra tiksliai apibrėžti. ΔFosB reguliuoja daugelio baltymų ekspresiją NAc, dalyvaujančią neuroplastikoje (McClung ir Nestler, 2003). Neseniai atlikta „microarray“ analizė apibūdino genų ekspresijos modelius, naudojamus čia naudojamų ΔFosB ekspresuojančių bitransgeninių pelių NAc, ir identifikavo genų pogrupį, reguliuojamą santykinai trumpalaikiu ΔFosB ekspresija (McClung ir Nestler, 2003). BDNF buvo vienas iš tokių genų, ir žinoma, kad BDNF šioje nervų grandinėje didina atsaką į su narkotikais ir maistu susijusius užuominas (Horger ir kt., 1999; Grimm et al., 2003; Lu ir kt., 2004). Papildomas įdomus genas yra nuo ciklino priklausomos kinazės 5 (Bibb ir kt., 2001), kurį taip pat sukelia ΔFosB, ir gali reguliuoti tiek kokaino sukeltą struktūrinį plastiškumą (Norrholm ir kt., 2003) ir motyvacija, matuojama progresuojančiu santykiu, reaguojančiu į natūralius ar narkotikus stiprinančius preparatus (JR Taylor, nepublikuoti stebėjimai). Dar papildomi kandidatai yra AMPA glutamato receptorių GluR2 subvienetas (Kelz ir kt., 1999) ir transkripcijos faktorius NFκB (branduolinis faktorius κB) (\ tAng et al., 2001). Būtų svarbu įvertinti šiuos ir kitus reguliuojamus baltymus NAc subregionuose kaip kandidatus, skirtus ΔFosB elgsenos poveikiui instrumentiniam veikimui ir motyvacijai.
Šios dabartinė eksperimentų serija rodo, kad ΔFosB pernelyg didelė išraiška NAc gali padidinti maisto motyvuotą elgesį ir tokiu būdu reguliuoti instrumentinį veikimą, kaip anksčiau buvo parodyta vaistų naudai. Šie duomenys suteikia naujus įrodymus, kad ΔFosB gali veikti kaip bendras molekulinis jungiklis, susijęs su stiprintuvų motyvacinių aspektų patobulinimu tiksliniu elgesiu. Mūsų rezultatai rodo, kad NAc ΔFosB indukcija, pvz., Priklausomybę sukeliantys vaistai, stresas arba galbūt labai naudingas maistas, gali būti lemiamas mechanizmas, dėl kurio disfunkcinės motyvacijos būsenos sukelia psichikos sutrikimus, susijusius su kompulsiniu elgesiu.
Išnašos
o Gavo kovo 15, 2006.
o Peržiūrėta versija buvo birželio 23, 2006.
o Priimta rugpjūčio 2, 2006.
Šis darbas buvo paremtas Nacionalinio narkotikų vartojimo instituto, Nacionalinio psichikos sveikatos instituto ir Nacionalinio piktnaudžiavimo alkoholiu ir alkoholizmo institutu. Dėkojame už vertingą pagalbą Dilja Krueger, Drew Kiraly, Dr Ralph DiLeone, Robert Sears ir dr. Jonathan Hommel Yale universiteto Psichiatrijos katedroje. Taip pat dėkojame Dr. Jennifer Quinn ir dr. Paul Hitchcott už naudingus komentarus apie šį rankraštį.
Korespondencija turėtų būti siunčiama Jane R. Taylor, psichiatrijos katedros, molekulinės psichiatrijos skyriaus, Yale universiteto medicinos mokyklos, Ribicoff tyrimų infrastruktūros, Konektikuto psichikos sveikatos centro, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[apsaugotas el. paštu]
Copyright © 2006 Neurologijos draugija 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
Nuorodos
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Zagouras P,
4. Magna H,
5. Holland J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ
(2001) NFkB indukcija branduoliuose accumbens lėtiniu kokaino vartojimu. J Neurochem 79: 221 – 224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Holahan MR
4. Kelley AE
(2002a) Pretenzinį instrumentinį mokymąsi sutrikdo cAMP priklausomas baltymų kinazės slopinimas branduolio accumbens viduje. Neurobiol Learn Mem 77: 44 – 62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002b) Prognozuojamam instrumentiniam mokymuisi reikia sutapti NMDA ir dopamino D aktyvavimas1 receptorius medialiniame prefrontaliniame žieve. J Neurosci 22: 1063 – 1071.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
4. ↵
1. Balleine B,
2. Killcross S
(1994) Iboteninės rūgšties pakitimų, atsiradusių dėl branduolio, pasekmės instrumentiniam poveikiui. Behav Brain Res 65: 181 – 193.
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE
(2000) priklausomybė, dopaminas ir molekuliniai atminties mechanizmai. Neuronas 25: 515 – 532.
6. ↵
1. Berridge KC
2. Robinson TE
(2003) Analizavimo atlygis. Tendencijos Neurosci 26: 507 – 513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson P,
5. Nishi A,
6. Snyder GL
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC,
10. Nairn AC,
11. Nestler EJ,
12. Greengard P
(2001) Lėtinio kokaino poveikio reguliuoja neuroninis baltymas Cdk5. Gamta 410: 376 – 380.
8. ↵
1. Brunzell DH
2. Chang JR,
3. Schneider B,
4. Olausson P,
5. Taylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) beta2-subvieneto turintys nikotino acetilcholino receptoriai yra susiję su nikotino sukeltu kondicionuojamo armavimo padidėjimu, bet ne progresuojančiu santykiu reaguojant į maisto produktus C57BL / 6 pelėse. Psichofarmakologija (Berl) 184: 328 – 338.
9. ↵
1. Cagniard B,
2. Balzamas PD,
3. Brunner D
4. Zhuang X
(2006) Pelėms, kurių chroniškai padidėjęs dopaminas turi geresnę motyvaciją, bet ne mokymąsi, už maisto atlygį. Neuropsichofarmakologija 31: 1362 – 1370.
10. ↵
1. Carlezon WA Jr.
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi N,
7. Duman RS,
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) Kokaino atlygio reguliavimas CREB. Mokslas 282: 2272 – 2275.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
11. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. „Hope BT“,
4. Nakabeppu Y
5. Nestler EJ
(1997) Lėtiniai su FOS susiję antigenai: stabilūs ΔFosB variantai, kuriuos sukelia lėtinis gydymas smegenyse. J Neurosci 17: 4933 – 4941.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
12. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G,
4. Sakai N,
5. Steffen C,
6. Shockett PE,
7. Picciotto MR
8. Duman RS,
9. Nestler EJ
Transgeniniai gyvūnai su indukuotu tiksliniu genų ekspresija smegenyse. Mol Pharmacol 54: 495 – 503.
13. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K
3. Steffen C,
4. Nestler EJ,
5. Savarankiškas DW
(2003) Striatyvinė ląstelių tipo specifinė ΔFosB ekspresija padidina kokaino paskatą. J Neurosci 23: 2488 – 2493.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
14. ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) Dvigubas bazolaterinių ir centrinių amygdalos pažeidimų disociacija bendrais ir specifiniais pavloviško instrumentinio perdavimo formomis. J Neurosci 25: 962 – 970.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
15. ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) Branduolio akumbenso vaidmuo instrumentiniame kondicionavime: funkcijų disociacijos tarp akmenų šerdies ir apvalkalo įrodymas. J Neurosci 21: 3251 – 3260.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
16. ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens dopaminas ir diskriminuojamas požiūris į mokymąsi: interaktyvūs 6-hidroksidopamino pažeidimai ir sisteminis apomorfinas. Psichofarmakologija (Berl) 161: 425 – 433.
17. ↵
1. de Borchgrave R
2. Rawlins JN
3. Dickinson A,
4. Balleine BW
(2002) Citotoksinių branduolių akumbų poveikis žiurkių instrumentiniam kondicionavimui. Exp Brain Res 144: 50 – 68.
18. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004a) Tiesioginė sąveika tarp bazolaterinės amygdalos ir branduolio akumbensų yra pagrindas kokaino paieškai. J Neurosci 24: 7167 – 7173.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
19. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004b) Su sąlyga, kad stimuliatoriai sustiprina savybes, siejamas su savarankiškai vartojamu kokainu, heroinu ar sacharoze: tai turi įtakos priklausomybę sukeliančiam elgesiui. Neurofarmakologija 47 ([Suppl 1]) 202 – 213.
20. ↵
1. Dickinson A
(1985) Veiksmai ir įpročiai: elgesio autonomijos plėtra. „Philos Trans R Lond B Biol Sci 308: 67 – 78.
21. ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) Neurinės narkomanijos stiprinimo sistemos: nuo veiksmų iki įpročių iki prievartos. Nat Neurosci 8: 1481 – 1489.
22. ↵
1. Faure A,
2. Haberland U,
3. „Conde F“
4. El Massioui N
(2005) Nigrostriali dopamino sistemos pažeidimas sutrikdo stimulo ir atsako įpročio formavimąsi. J Neurosci 25: 2771 – 2780.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
23. ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi T
4. „Hope BT“,
5. Su TP,
6. Shaham Y
(2003) Laikas priklausantis smegenų neurotrofinio faktoriaus baltymų kiekio padidėjimas mesolimbinėje dopamino sistemoje pasitraukus iš kokaino: poveikis kokaino troškimo inkubacijai. J Neurosci 23: 742 – 747.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
24. ↵
1. J salė,
2. Parkinson JA,
3. Connor TM,
4. Dickinson A,
5. Everitt BJ
(2001) Amygdalos ir branduolio branduolio centrinio branduolio dalyvavimas tarpininkuojant Pavlovijos įtaką instrumentiniam elgesiui. Eur J Neurosci 13: 1984 – 1992.
25. ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) Padidėjęs apetitinis kondicionavimas po pakartotinio gydymo d-amfetaminu. Behav Pharmacol 9: 299 – 308.
26. ↵
1. Hernandez PJ,
2. Sadeghian K,
3. Kelley AE
(2002) Ankstyvam instrumentinio mokymosi konsolidavimui reikia baltymų sintezės branduolyje accumbens. Nat Neurosci 5: 1327 – 1331.
27. ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM
3. Georgescu D,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Vietinis geno nusileidimas smegenyse naudojant virusinę tarpinę RNR trukmę. Nat Med 9: 1539 – 1544.
28. ↵
1. Horger BA,
2. Shelton K,
3. Schenk S
(1990) Preexposure žiurkėms jautrina kokaino naudą. Pharmacol Biochem Behav 37: 707 – 711.
29. ↵
1. Horger BA,
2. Giles MK
3. Schenk S
(1992) Amfetamino ir nikotino ekspozicija sukelia žiurkių patį mažą kokaino dozę. Psichofarmakologija (Berl) 107: 271 – 276.
30. ↵
1. Horger BA,
2. Iyasere CA
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ,
6. Taylor JR
(1999) Lokomotyvinio aktyvumo stiprinimas ir kokaino atlyginimas už galvos smegenų neurotrofinį faktorių. J Neurosci 19: 4110 – 4122.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
31. ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) Branduolio accumbens branduolio ir apvalkalo diferencinė kokaino paieškos elgsenos kontrolė. Nat Neurosci 7: 389 – 397.
32. ↵
1. Jentsch JD,
2. Taylor JR
(1999) Impulsyvumas, atsirandantis dėl piktybinio piktybinio sutrikimo, susijusio su piktnaudžiavimu narkotikais. Psichofarmakologija (Berl) 146: 373 – 390.
33. ↵
1. Kelley AE
(2004) Ventralinė striatalinė apetitinės motyvacijos kontrolė: vaidmuo nurijus elgesį ir mokantis už atlygį. Neurosci Biobehav Rev 27: 765 – 776.
34. ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) Natūralių apdovanojimų neurologija: aktualumas priklausomybę sukeliantiems vaistams. J Neurosci 22: 3306 – 3311.
35. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.
4. Whisler K
5. Gilden L
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L
10. Savarankiškas DW
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ
14. Neve RL,
15. Duman RS,
16. Picciotto MR
17. Nestler EJ
(1999) Transkripcijos faktoriaus ΔFosB ekspresija smegenyse kontroliuoja jautrumą kokainui. Gamta 401: 272 – 276.
36. ↵
1. Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE
(1994) Amfetaminas reguliuoja genų ekspresiją žiurkių striatume per transkripcijos faktorių CREB. J Neurosci 14: 5623 – 5634.
37. ↵
1. Lee KW,
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmin K,
5. Nairn AC,
6. Greengard P
(2006) Kokaino sukeltas dendritinių stuburo formavimasis D1 ir D2 dopamino receptorių turinčiose vidutinio dydžio smailių neuronuose branduoliuose. Proc Natl Acad Sci JAV 103: 3399 – 3404.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
38. ↵
1. Li Y,
2. Kolb B,
3. Robinson TE
(2003) Nuolatinių amfetamino sukeltų dendritinių stuburų tankio pokyčių vieta vidutinio smilkalų neuronuose branduolyje accumbens ir caudate-putamen. Neuropsichofarmakologija 28: 1082 – 1085.
39. ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinson TE
(2004) Elgesio jautrinimo indukcija siejama su kokaino sukeltu struktūriniu plastiškumu branduolio accumbens šerdyje (bet ne lukštuose). Eur J Neurosci 20: 1647 – 1654.
40. ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY,
4. Bossert JM,
5. Shaham Y
(2004) Viena galvos smegenų neurotrofinio faktoriaus infuzija į ventralinį tegmentalą sukelia ilgalaikį kokaino potencialą, kurio reikia po nutraukimo. J Neurosci 24: 1604 – 1611.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
41. ↵
1. McClung CA
2. Nestler EJ
(2003) CREB ir ΔFosB geno ekspresijos ir kokaino atlygio reguliavimas. Nat Neurosci 6: 1208 – 1215.
42. ↵
1. McClung CA
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI
4. Zachariou V,
5. Bertonas O
6. Nestler EJ
(2004) ΔFosB: molekulinis jungiklis ilgalaikiam prisitaikymui smegenyse. Brain Res Mol Brain Res 132: 146 – 154.
43. ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dickinson A
(2004) Kondicionuotas aktyvumas ir instrumentinis sustiprinimas, kai žiurkės vartojo ilgą laiką per burną kokainą. Behav Neurosci 118: 1331 – 1339.
44. ↵
1. Nestler EJ
(2004) Narkomanijos molekuliniai mechanizmai. Neurofarmakologija 47 ([Suppl 1]) 24 – 32.
45. ↵
1. Nestler EJ,
2. Barrot M,
3. Savarankiškas DW
(2001) ΔFosB: ilgalaikis molekulinis jungiklis priklausomybei. Proc Natl Acad Sci JAV 98: 11042 – 11046.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
46. ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ,
4. Ouimet CC,
5. Taylor JR,
6. Greengard P
(2003) Kokaino sukelta dendritinių spyglių proliferacija branduolių akmenyse priklauso nuo ciklino priklausomos kinazės-5 aktyvumo. Neurologija 116: 19 – 22.
47. ↵
1. Nye HE
2. „Hope BT“,
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ
(1995) Farmakologiniai tyrimai, susiję su lėtinio FOS sukeliamo kokaino antigenų indukcijos striatume ir branduolyje. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671 – 1680.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
48. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2003) Pakartotinis nikotino poveikis padidina su žiurkėmis susijusį mokymąsi. Neuropsichofarmakologija 28: 1264 – 1271.
49. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2004) Pakartotinė nikotino ekspozicija pagerina reagavimą su kondicionuotu armavimu. Psichofarmakologija (Berl) 173: 98 – 104.
50. ↵
1. Parkinson JA,
2. Olmstead MC,
3. Burns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) Branduolio akumbenso šerdies ir lukštų pažeidimų poveikio atskyrimas apetitinio pavloviško požiūrio elgsenai ir d-amfetamino sąlygoto sustiprinimo ir lokomotorinio aktyvumo stiprinimas. J Neurosci 19: 2401 – 2411.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
51. ↵
1. Parkinson JA,
2. Dalley JW,
3. Kardinolas RN,
4. Bamford A,
5. Fehnert B,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10. Everitt BJ
(2002) Nucleus accumbens dopamino išeikvojimas pablogina apetitinio pavloviško požiūrio elgseną ir jos veikimą: pasekmes mezoaccumbens dopamino funkcijai. Behav Brain Res 137: 149 – 163.
52. ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) Žiurkės smegenys stereotaksinėse koordinatėse (Academic, Sydney).
53. ↵
1. Perrotti LI
2. Hadeishi Y
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS,
7. Nestler EJ
(2004) ΔFosB indukcija, susijusi su smegenų struktūromis, susijusiomis su lėtiniu stresu. J Neurosci 24: 10594 – 10602.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
54. ↵
1. Piazza PV
2. Deminiere JM,
3. le Moal M,
4. Simonas H
(1990) Streso ir farmakologiškai sukeltas elgesio jautrinimas padidina pažeidžiamumą savarankiško amfetamino vartojimo. Brain Res 514: 22 – 26.
55. ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R
6. Chiamulera C
(1997) Dažni nerviniai substratai, skirti nikotino ir kokaino priklausomybei. Mokslas 275: 83 – 86.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
56. ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Narkomanija: pridedami blogi įpročiai. Gamta 398: 567 – 570.
57. ↵
1. Robinson TE,
2. Berridge KC
(1993) Vaistų troškimo nervų pagrindas: skatinamojo jautrumo priklausomybės teorija. Brain Res Brain Res Rev 18: 247 – 291.
58. ↵
1. Robinson TE,
2. Kolb B
(1999) Dendritų ir dendritinių stuburo morfologijos pokyčiai branduolyje accumbens ir prefrontalinėje žievėje po pakartotinio gydymo amfetaminu ar kokainu. Eur J Neurosci 11: 1598 – 1604.
59. ↵
1. Robinson TE,
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. Kolb B
(2001) Kokaino savęs administravimas keičia dendritų ir dendritinių stuburo morfologiją branduolyje accumbens ir neocortex. „Synapse 39“: „257 – 266“.
60. ↵
1. Sesack SR
2. Pickel VM
(1990) Žiurkių medialiniame branduolyje accumbens, hipokampo ir katecholaminerginiai terminalai susilieja su spiniškais neuronais ir yra vienas kito atžvilgiu. Brain Res 527: 266 – 279.
61. ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Storm D
4. Nestler EJ
(2003) CRE-medijuojamo transkripcijos reguliavimas pelės smegenyse amfetamino pagalba. „Synapse 48“: „10 – 17“.
62. ↵
1. Smith AD,
2. Bolam JP
(1990) Bazinio ganglio neuronų tinklas, atskleidžiamas nustatytų neuronų sinaptinių jungčių tyrime. Tendencijos Neurosci 13: 259 – 265.
63. ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) NMDA ir dopamino D sutapimas1 branduolio accumbens branduolio receptoriai yra būtini apetitiniam instrumentiniam mokymuisi. J Neurosci 20: 7737 – 7742.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
64. ↵
1. Taylor JR,
2. Horger BA
(1999) Po kokaino sensibilizacijos sustiprintas atsakas į sąlyginį atlygį, gautą iš amfetamino. Psichofarmakologija (Berl) 142: 31 – 40.
65. ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) Pakartotinis periodiškas psichomotorinių stimuliuojančių vaistų vartojimas pakeičia pavloviško požiūrio į elgesį žiurkėms: skirtingas kokaino, d-amfetamino ir 3,4-metilendioksimetamfetamino poveikis („ekstazis“) Biol psichiatrija 50: 137 – 143.
66. ↵
1. Vezina P,
2. Lorrain DS
3. Arnoldas GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) Vidutinio smegenų dopamino neuronų reaktyvumo jautrinimas skatina amfetamino naudojimą. J Neurosci 22: 4654 – 4662.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
67. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L
5. Thoren P,
6. Nestler EJ,
7. Brene S
(2002) ΔFosB reguliuoja ratų veikimą. J Neurosci 22: 8133 – 8138.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
68. ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Skatinamasis jautrinimas ankstesniu amfetamino poveikiu: padidėjęs paleidimas sukelia „norą“ už sacharozės atlygį. J Neurosci 21: 7831 – 7840.
Anotacija / NEMOKAMAS Visas tekstas
69. ↵
1. Yin HH
2. Knowlton BJ,
3. Balleine BW
(2004) Dorsolaterinio striatumo pažeidimai išsaugo tikėtiną rezultatą, bet sutrikdo įpročio formavimąsi mokantis mokytis. Eur J Neurosci 19: 181 – 189.
70. ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanos CA
3. Selley DE,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Bertonas O
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar A,
12. Nestler EJ
(2006) Esminis ΔFosB vaidmuo branduolyje accumbens morfino veikloje. Nat Neurosci 9: 205 – 211.
;