FosB baltymų ir potencialių tikslinių genų diferencinė raiška priklausomybės ir depresijos pacientų pasirinktuose smegenų regionuose (2016)

Paula A. Gajewski,
Gustavo Turecki,
Alfredas J. Robisonas

Paskelbta: rugpjūčio 5, 2016

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355

Abstraktus

Lėtinis streso ar piktnaudžiavimo narkotikais poveikis yra susijęs su pakitusiu genų ekspresija visame kūne, ir manoma, kad genų ekspresijos pokyčiai atskiruose smegenų regionuose yra daugelio psichinių ligų, įskaitant didelę depresiją ir priklausomybę nuo narkotikų, priežastis. Ikiklinikiniai šių sutrikimų modeliai pateikė įrodymų apie šio pakitusio genų ekspresijos mechanizmus, įskaitant transkripcijos veiksnius, tačiau įrodymai, pagrindžiantys šių veiksnių vaidmenį žmonėms, lėtai atsirado. Transkripcijos faktorius ΔFosB indukuojamas graužikų prefrontalinėje žievėje (PFC) ir hipokampyje (HPC), reaguojant į stresą ar kokainą, ir manoma, kad jo išraiška šiuose regionuose reguliuoja jų „viršaus į apačią“ atlygio grandinės, įskaitant branduolį, kontrolę. akumulbenai (NAc). Čia mes naudojame biochemiją, norėdami ištirti FosB transkripcijos veiksnių šeima ir jų galimas genų taikinys PFC ir HPC postmortemo mėginiuose iš depresijos sergančių pacientų ir kokaino priklausomybių. Mes parodėme, kad ΔFosB ir kitos FosB izoformos yra sureguliuojamos HPC, bet ne PFC tiek depresinių, tiek priklausomų asmenų smegenyse. Be to, mes parodome, kad galimi ΔFosB transkripcijos taikiniai, įskaitant GluA2, taip pat yra sureguliuojami priklausomybės nuo kokaino priklausomybės nuo HPC, bet ne PFC. Taigi mes pateikiame pirmuosius įrodymus FosB genų ekspresija žmogaus HPC ir PFC sergant šiais psichikos sutrikimais ir atsižvelgiant į naujausius atradimus, įrodančius kritinį HPC ΔFosB vaidmenį graužikų mokymosi ir atminties modeliuose, šie duomenys rodo, kad sumažėjęs ΔFosB ŽPC gali sukelti kognityvinius trūkumus, lydimus lėtinio kokaino vartojimo arba depresija.

citavimo: „Gajewski PA“, „Turecki G“, „Robison AJ“ (2016). „FosB“ baltymų ir galimų tikslinių genų diferencinė išraiška tam tikruose priklausomybės ir depresijos pacientų smegenų regionuose. „PLOS ONE 11“ (8): „e0160355“. doi: 10.1371 / žurnalas.pone.0160355

Redaktorius: Ryanas K. Bachtellis, Kolorado Boulderio universitetas, JUNGTINĖS VALSTIJOS

Gauta: Vasaris 29, 2016; Priimta: Liepos 18, 2016; Paskelbta: Rugpjūtis 5, 2016

Autorinės teisės: © 2016 Gajewski ir kt. Tai yra atviros prieigos straipsnis, platinamas pagal „Creative Commons“ priskyrimo licencija, kuris leidžia neribotai naudoti, platinti ir atgaminti bet kokioje terpėje, jei įskaitomas originalus autorius ir šaltinis.

Duomenys Prieinamumas: Visi svarbūs duomenys yra popieriuje.

Finansavimas: Autorius PAG gavo tam tikrą atlyginimo paramą iš dotacijos autoriaus AJR iš Whitehall fondo. Rėmėjai neturėjo vaidmens rengiant studijas, renkant ir analizuojant duomenis, priimant sprendimus skelbti ar rengiant rankraštį.

Konkuruojantys interesai: Autoriai pareiškė, kad nėra konkuruojančių interesų.

Įvadas

Psichiatrinių ligų, tokių kaip depresija ir priklausomybė, molekuliniai ir grandinės lygmens mechanizmai nėra visiškai suprantami, ir šios žinios yra labai svarbios racionaliam naujų ir geresnių gydymo būdų kūrimui. Atliekant priklausomybės ir depresijos patogenezę, genų ekspresijos pokyčiai branduolių akumuliatoriuose (NAc) ir smegenų regionuose, kurie kontroliuoja NAc funkciją iš viršaus į apačią, kaip antai priešakinė žievė (PFC) ir hipokampas (HPC), buvo įtraukti į priklausomybės ir depresijos patogenezę. abiejų modelių organizmuose ir pomirtinių žmonių smegenyse [1-5]. Daugybė dabartinių depresijos gydymo būdų yra lėtinis serotonerginių ir (arba) dopaminerginių signalų stiprinimas, o praktiškai visi narkotikai, skirti piktnaudžiauti, turi įtakos NAc dopamino signalizavimui. Be to, priklausomybė ir depresija yra labai gretutiniai - beveik trečdalis pacientų, sergančių didžiausia depresija, taip pat turi narkotikų vartojimo sutrikimų ir gretutinių ligų, todėl padidėja savižudybės rizika ir didesnė socialinė bei asmeninė negalia [6, 7]. Visi šie duomenys leidžia manyti, kad lėtinis netinkamas mezolimbinio dopamino kontūro ir susijusių struktūrų pažeidimas gali lemti priklausomybę ir depresiją, o genų ekspresijos pokyčiai greičiausiai vaidins lemiamą reikšmę šiuose netinkamame adaptacijose.

Laikui bėgant ir depresija, ir priklausomybė gali būti susieti su lėtiniu streso ir (arba) piktnaudžiavimo narkotikais poveikiu [8, 9], ir todėl, kad tipiniams antidepresantams, nukreipiantiems į serotonerginius ir dopaminerginius signalus, reikia gydymo savaičių, kad jie būtų veiksmingi [10], panašu, kad šių ligų patogenezė ir jų gydymo mechanizmai gali būti susiję ilgalaikis genų ekspresijos pokyčiai. Tokie pokyčiai gali atsirasti dėl epigenetinių genų struktūros modifikacijų, ir iš tikrųjų yra įrodymų, kad pagrindinis vaidmuo tenka DNR metilinimui ir histono modifikavimui priklausomybei ir depresijai [11-14]. Tačiau tai neatmeta galimo transkripcijos veiksnių vaidmens šiuose procesuose, ypač stabilių transkripcijos veiksnių, kuriuos sukelia lėtinė neuronų aktyvacija. Vienas iš tokių transkripcijos faktorių yra ΔFosB [1, 15, 16, sujungimo variantas, pagamintas iš FosB genas. Skirtingai nuo pilnojo FosB baltymo, ΔFosB yra nepaprastai stabilus, palyginti su kitais neatidėliotinais ankstyvųjų genų produktais (pusinės eliminacijos laikas smegenyse iki 8 dienų [17]), pirmiausia dėl dviejų degrono domenų sutrumpinimo c-gale [18], taip pat stabilizuojantis fosforilinimas „Ser27“ [19, 20]. ΔFosB streso metu sukelia graužikų smegenyse, įskaitant NAc ir susijusias struktūras [21-23], antidepresantai [22] ir piktnaudžiavimo narkotikais [24]. Be to, graužikų modeliai sukelia ΔFosB ekspresiją NAc abiejose priklausomybėse [20, 25] ir depresija [26, 27], o naujausi tyrimai rodo ΔFosB vaidmenį sergant PFC šiomis ligomis [21] ir HPC [28]. NAc, ΔFosB ekspresija skatina padidėjusį psichomotorinį sensibilizavimą ir atsilyginimą nuo graužikų psichostimuliatorių [20, 25]. NAc ΔFosB taip pat veikia kaip pelių chroniškos depresijos depresijos modelio pakenkimo faktorius, todėl jo išraiška reikalinga antidepresantui veikti [26]. Priešingai, ΔFosB ekspresija PFC skatina pelių jautrumą socialiniam nugalėjimo stresui [21], leidžia daryti prielaidą, kad ΔFosB vaidina labai skirtingą vaidmenį atlygio grandinėje ir ją inervuojančiose smegenų srityse. Galiausiai ΔFosB sukeliamas pelės dorsaliniame HPC mokantis ir jo funkcija reikalinga normaliam erdvinės atminties formavimuisi [28], pateikdamas galimą pažinimo deficito, dažnai lydinčio lėtinį narkotikų poveikį ir (arba) depresiją, mechanizmą [29-31].

Kadangi ΔFosB yra transkripcijos veiksnys, paprastai manoma, kad jis daro savo biologinį poveikį moduliuodamas pasirinktų tikslinių genų ekspresiją, ir daugelis tų tikslinių genų yra susiję su depresija ir priklausomybe. ΔFosB reguliuoja kelių subvienetų α-amino-3-hidroksi-5-metil-4-izoksazolopropiono rūgšties (AMPA) ir N-metil-D-aspartato (NMDA) tipo gliutamato receptorių ekspresiją [25, 26, 32], ir šie receptoriai buvo tiesiogiai susiję su priklausomybe [33, 34], depresija [35, 36] ir antidepresantų funkcija [36, 37]. ΔFosB taip pat reguliuoja signalinių molekulių, tokių kaip nuo kalcio / kalmodulino priklausomo baltymo kinazės II α (CaMKIIα), kuri buvo susijusi su daugeliu psichinių sutrikimų, raišką.38], ir mes parodėme, kad šis CaMKII išraiškos pelėse reguliavimas sukelia psichomotorinį kokaino jautrinimą [20] ir antidepresantų funkcija [27]. Be to, ΔFosB reguliuoja nuo ciklino priklausomos kinazės 5 (cdk5) raišką [39], kurį striatumoje sukelia psichostimuliatorių veikimas ir stresas [40-42] ir reguliuoja psichomotorinius bei motyvacinius atsakus į kokainą [43]. Taigi, graužikų modeliuose yra tvirtų įrodymų, kad ΔFosB indukcija keliuose smegenų regionuose streso, antidepresantų ir piktnaudžiavimo narkotikais būdu gali reguliuoti elgesį, susijusį su depresija ir priklausomybe, moduliuodama pasirinktų taikinių genų ekspresiją diskretiniuose smegenų regionuose.

Nors ikiklinikiniai priklausomybės ir depresijos modeliai buvo gana vaisingi, labai svarbu pagrįsti gyvūnų modelių išvadas ir įrodymus iš žmonių tyrimų, jei tikimės potencialius molekulinius mechanizmus paversti naujomis gydymo galimybėmis. Anksčiau mes parodėme, kad ΔFosB yra padidintas reguliuojantis žmonių, priklausančių kokainą, NAc.20] ir sumažėjęs depresija sergančių žmonių NAc26]. Tačiau FosB genų produkto ekspresija HPC ir PFC, kritiniuose NAc neuronų aktyvacijos reguliatoriuose, anksčiau nebuvo tirta žmogaus smegenyse, taip pat nebuvo kontroliuojamas galimas ΔFosB taikinio genų ekspresija. Todėl mes ištyrėme FosB genų produktai, taip pat galimų ΔFosB taikinių genų ekspresija PFC ir HPC pacientams, kenčiantiems nuo depresijos ar priklausomybės nuo kokaino.

Medžiagos ir metodai

Žmogaus mėginiai

Žmogaus smegenų audiniai po mirties buvo gauti iš Douglas Bell-Canada Brain Bank (Douglas psichinės sveikatos universiteto institutas, Monrealis, Kvebekas, Kanada). Informaciją apie narkotikų priklausomybę nuo kokaino turinčius narkomanus, depresija sergančius pacientus ir atitinkamą kontrolinę medžiagą galite rasti tinklalapyje Lentelė 1. Audiniai buvo išsaugomi iš esmės taip, kaip aprašyta [44]. Trumpai tariant, smegenys dedamos ant šlapio ledo į polistirolo putplasčio dėžutę ir skubamos į „Douglas Bell-Canada“ smegenų banko patalpas. Pusrutuliai iškart atskiriami sagitaliniu pjūviu smegenų, smegenų kamieno ir smegenų viduryje. Kraujagyslės, kankorėžinė liauka, choroidinis rezginys, pusiau smegenėlės ir pusiau smegenų kamienas paprastai yra išpjaustomos iš kairiojo pusrutulio, kuris prieš užšaldant vainikiniu būdu supjaustomas 1 cm storio griežinėliais. Pastaroji smegenėlių pusė prieš užšaldant sagitališkai supjaustoma 1cm storio griežinėliais. Audiniai greitai užšaldomi 2-metilbutane -40 ° C temperatūroje ~ 60 sek. Visi užšaldyti audiniai yra laikomi atskirai plastikiniuose maišeliuose -80 ° C temperatūroje, kad būtų galima ilgai laikyti. Tam, kad būtų kontroliuojama aplinkos temperatūra, nerūdijančio plieno plokštelėje su sausu ledu išpjaustomi specifiniai smegenų regionai iš užšaldytų vainikinių lazdelių. PFC mėginiai yra iš Brodmanno srities 8 / 9, o HPC mėginiai imami iš hipokampo formavimosi centro masės (Pav 1).

Download:

PPT

„PowerPoint“ skaidrė

PNG

didesnis vaizdas (1.61MB)

TIFF

originalus vaizdas (1.59MB)

1 pav. Žmogaus smegenų mėginių išpjaustymo sričių diagrama.

Brėžiniai parodo žmogaus smegenų priekinius (A) ir užpakalinius (B) vainikinius pjūvius, naudojamus PFC mėginių ir (C) HPC mėginių išpjaustymui. Raudonos spalvos langeliai pabrėžia skilimo sritis. SFG: viršutinis priekinis gyrus; MFG: priekinis vidurinis priekinis gyrus; IG: izoliuotas gyrus; FuG: fusiform gyrus.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g001

Download:

PPT

„PowerPoint“ skaidrė

PNG

didesnis paveikslėlis (529KB)

TIFF

originalus vaizdas (1.02MB)

1 lentelė. Priklausomybė nuo medžiagų, toksikologija ir antidepresantų vartojimas priklausomiems nuo kokaino priklausomiems žmonėms, pacientams, sergantiems depresija, ir panašioms kontrolinėms grupėms.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.t001

Pelės pavyzdžiai

Tyrime buvo laikomasi gairių, aprašytų Laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo vadovas, aštuntasis leidimas (Laboratorinių gyvūnų išteklių institutas, 2011). Prieš atliekant bet kokius bandymus, visas eksperimentines procedūras patvirtino Mičigano valstijos universiteto institucinis gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas. Jei kuriam nors gyvūnui trūksta viliojimo, infekcijos, smarkiai netenkama svorio ar jis nejudrus, gyvūnas pašalinamas. Nebuvo reikalaujama, kad atliekant dabartinį tyrimą eksperimento rezultatas būtų eutanazuotas. Atvykę į įstaigą, 7 savaitės amžiaus C57BL / 6 patinai (Džeksono laboratorija, Bar Harbor, ME, JAV) buvo grupuojami 4 kiekviename narve kolonijos kambaryje, nustatytoje pastovioje temperatūroje (23 ° C) bent 3 dienos prieš eksperimentavimą 12 h šviesos / tamsos cikle su ad libidum maistas ir vanduo. Pelėms buvo švirkščiamas lėtinis (7 dienos) arba ūmus (vienos injekcijos) kokainas (15 mg / kg) arba sterilus fiziologinis tirpalas (0.9% fiziologinis tirpalas) į pilvaplėvės ertmę (ip), ir jos buvo paaukotos atlikus gimdos kaklelio išnirimą valandą po paskutinės injekcijos. Audiniai buvo nuimti nedelsiant (Pav 2) arba skirtingais laiko momentais po aukojimo (Pav 3).

Download:

PPT

„PowerPoint“ skaidrė

PNG

didesnis paveikslėlis (649KB)

TIFF

originalus vaizdas (878KB)

2 pav. Žmogaus ir pelės FosB baltymų palyginimas.

(A) Hipokampo baltymų su FosB antikūnu Western blot atskleidžia daug papildomų juostų tipiško žmogaus, priklausančio nuo kokaino, HPC mėginyje, palyginti su lėtiniu kokainu gydytų (15 mg / kg 7 dienų) pelės HPC. Naujos juostos yra matomos 20 kDa, 23 kDa (balta rodyklė) ir 30 kDa (juoda rodyklė). (B) Kiekvienos žmogaus mėginių juostos baltymų ekspresijos koreliacijos ir tiesinės regresijos grafikai su kiekvieno žmogaus mėginio postmortemo intervalu (laikas nuo mirties iki smegenų užšalimo). Punktyrinės linijos žymi 95% pasikliovimo intervalą; nė vienas tiesinis regresijos nuolydis reikšmingai nesiskyrė nuo 0.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g002

Download:

PPT

„PowerPoint“ skaidrė

PNG

didesnis paveikslėlis (214KB)

TIFF

originalus vaizdas (317KB)

3 pav. FosB baltymų ekspresija pelių HPC po ilgesnių postmortem intervalų.

Pelių smegenys, kurioms buvo sušvirkšta ūmi kokaino dozė (15 mg / kg ip), liko vietoje 0, 1 ar 8 valandai po paaukojimo prieš nuimant HPC. „Western blot“ rodo 23 kDa juostos susikaupimą 8 hr gyvūnams, tačiau nerodo kitų juostų, rastų žmogaus HPC mėginiuose.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g003

"Western Blotting"

Pelės smegenys buvo greitai išgaunamos ant ledo, po to supjaustomos į 1 mm dalis, o nugaros hipokampas buvo pašalintas 12 matuokliu ir iškart užšaldytas ant sauso ledo. Tiek žmogaus, tiek pelės mėginiai buvo homogenizuoti ultragarsu ultragarsu modifikuotame RIPA buferyje (10 mM Tris bazė, 150 mM natrio chloridas, 1 mM EDTA, 0.1% natrio dodecilsulfato, 1% Triton X-100, 1% natrio dezoksicholato, pH 7.4, proteazės ir fosfatazės inhibitoriai [Sigma Aldrich]). Koncentracija buvo matuojama naudojant DC Protein Assay (BioRad), o gelio mėginiai buvo normalizuoti, kad būtų nustatytas visas baltymas. Baltymai buvo atskirti 4 – 15% poliakrilamidinio gradiento geluose (Criterion System, BioRad), ir Western blot buvo atliktas naudojant chemiliuminescenciją (SuperSignal West Dura, Thermo Scientific). Bendras baltymų kiekis buvo ištirtas naudojant „Swift Membrane Stain“ („G Biosciences“), o baltymai buvo kiekybiškai įvertinti naudojant „ImageJ“ programinę įrangą (NIH). Pirminiai antikūnai buvo naudojami aptikti FosB izoformas (5G4; 1: 500; ląstelių signalizavimas, 2251), GluA2 / 3 (1: 1,000; Millipore, 07 – 598), CaMKIIX, 1, 1,000: 05: 532: 5; (1: 1,000; „Santa Cruz“, sc-173), GAPDH (1: 20,000; ląstelių signalizavimas, 21185).

Statistika

Visos statistinės analizės buvo atliktos naudojant „Prism 6“ programinės įrangos paketą (GraphPad). Linijinės regresijos analizė buvo naudojama siekiant nustatyti, ar FosB genų produktai buvo koreliuojami su postmortemo intervalu. Tikrintas kiekvienos tiesinės regresijos linijos nuolydis, kad būtų reikšmingas skirtumas nuo nulio. Studentų t-testai buvo naudojami visais palyginimais tarp kontroliuojamų ir nuo kokaino priklausomų asmenų (nurodytas Rezultatuose, kur nurodoma t vertė). Vieno krypčio ANOVA buvo naudojami atliekant visus kartotinius palyginimus tarp kontrolinių asmenų, depresijos atvejų turinčių asmenų, kurių laive yra antidepresantų, ar depresijos atvejų neturinčių asmenų, neturinčių antidepresantų (nurodyta Rezultatuose, kur pateikiama F vertė). Į vieną pusę ANOVA pasekė Tukey post-hoc testas. P <0.05 buvo laikoma reikšminga.

rezultatai

Naujausi mūsų tyrimai rodo, kad trys pagrindiniai FosB genas smegenyse, viso ilgio FosB (~ 50 kDa), ΔFosB (~ 35 – 37 kDa) ir Δ2ΔFosB (~ 25 kDa), skirtingai indukuojamos pelių smegenų apdovanojimų susijusiose srityse, reaguojant į stresą ir gydymą antidepresantais [22] ir kitus su Fos susijusius antigenus, kuriuos greičiausiai gamina FosB genas taip pat pastebėtas pelių smegenyse [45-47]. Todėl pirmiausia mes siekėme išsiaiškinti, ar žmogaus smegenys išreiškia FosB genų produktai, panašūs į tuos, kurie randami pelių smegenyse. Palyginome tipišką HPC mėginį iš narkomano iš kokaino (Lentelė 2) į HPC iš pelės, kuriai buvo duotas lėtinis kokainas (15 mg / kg, ip 7 dienomis). Visi trys pagrindiniai FosB genų produktai buvo rasti tiek pelės, tiek žmogaus smegenų audinyje, tačiau žmogaus mėginyje buvo pastebėtos papildomos juostos, palyginti su pele (2A pav). Labiausiai matėsi, kad juostos ties ~ 30 kDa, ~ 23 kDa ir ~ 20 kDa atsirado žmonių mėginiuose, tačiau pelių mėginiuose jų nebuvo pastebėta. Mes postuluojame, kad šios juostos gali atstovauti proteolitinius produktus, atsirandančius dėl FosB ar ΔFosB skilimo dėl prailginto postmortem intervalo (PMI) mūsų žmonių mėginiuose (Lentelė 2). Tačiau nebuvo nustatyta koreliacijos tarp šių naujų juostų intensyvumo ir PMI (2B pav) arba tarp PMI ir pagrindinių genų produktų, FosB, ΔFosB ir Δ2ΔFosB (2B pav), ty nė vienos iš regresijos linijų nuolydis reikšmingai nesiskyrė nuo nulio. Taigi šios naujos juostos negali būti proteolitinio skilimo produktai, atsirandantys dėl ilgo laiko tarpo tarp mirties ir audinių užšalimo.

Download:

PPT

„PowerPoint“ skaidrė

PNG

didesnis paveikslėlis (279KB)

TIFF

originalus vaizdas (504KB)

2 lentelė. Žmonių, priklausančių nuo kokaino, depresija sergančių pacientų ir panašių kontrolinių grupių demografiniai rodikliai.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.t002

Norėdami tai papildomai ištirti, pelėms atlikome vieną kokaino (15 mg / kg, ip) arba fiziologinio tirpalo injekciją ir paaukojome jas atlikdami gimdos kaklelio išnirimą po valandos. Tuomet liko smegenys vietoje prieš imant mėginius - nulį, vieną ar aštuonias valandas. Mes pažymėjome kai kuriuos skilimo produktus (Pav 3), iš kurių ryškiausias yra ~ 23 kDa, tačiau gautas modelis nesilygino žmogaus HPC mėginiuose. Visi šie duomenys rodo, kad žmogaus smegenyse yra papildomų su Fos susijusių antigenų, kurie gali būti nauji FosB genų produktai ir mažai tikėtina, kad tai bus FosB ar ΔFosB proteolizės rezultatas.

Toliau siekėme išsiaiškinti, ar priklausomybė nuo kokaino, negydoma depresija ar depresija kartu su antidepresantų vartojimu yra susijusi su pokyčiais FosB genų produktai žmogaus HPC arba PFC. Pacientai ir kontroliniai tiriamieji buvo parinkti taip, kad reikšmingų skirtumų tarp vidutinio amžiaus, lyties, smegenų pH ar PMI (Lentelė 1). Iš kokaino priklausomų pacientų mėginiuose „Western blot“ nerodė jokių FosB izoformų išraiškos PFC skirtumų, palyginti su kontroliniais (4A ir 4B). Tačiau pastebėjome, kad nuo kokaino priklausomų asmenų HPC sumažėjo per visą ilgį FosB (t(35) = 2.67, p = 0.012), ΔFosB (t(31) = 2.81, p = 0.009), taip pat visose trijose naujose juostose, 30 kDa (t(34) = 2.71, p = 0.011), 23 kDa (t(15) = 2.7, p = 0.016) ir 20 kDa (t(13) = 2.43, p = 0.031) ir Δ2ΔFosB mažėjimo tendencija (t(29) = 2.03, p = 0.052). Panašiai pacientų, kenčiančių nuo depresijos, mėginiuose nesiskyrė nei vienos FosB izoformos išraiška PFC, o HPC parodė, kad sumažėjo viso ilgio FosB (F (2,35) = 1.98, p = 0.048) ir ΔFosB ( F (2,30) = 1.38, p = 0.027), taip pat 23 kDa juostoje (F (2,21) = 2.05, p = 0.022) ir 20 kDa juostoje (F (2,18) = 0.97, p = 0.028) (4C ir 4D pav). Šie duomenys rodo, kad FosB genų ekspresija HPC sumažėja esant įvairioms psichinėms ligoms, tuo tarpu PFC ekspresija neturi įtakos.

Download:

PPT

„PowerPoint“ skaidrė

PNG

didesnis vaizdas (1.19MB)

TIFF

originalus vaizdas (1.98MB)

4 pav. FosB baltymų ekspresija sergantiesiems priklausomybe nuo kokaino ir depresija sergantiems HPC ir PFC.

(A) FosB baltymų Western blot iš žmogaus kokaino narkomanų HPC ir PFC (Coc) ir kontrolinės grupės (Con). (B) Kiekybinis tyrimas atskleidžia nuo kokaino priklausantį daugelio FosB baltymų sumažėjimą HPC, bet ne PFC (*: p <0.05, #: p = 0.05). (C) FosB baltymų Western blot iš žmonių, sergančių depresija, HPC ir PFC (Dep) arba antidepresantų (Dep + AD) ir kontrolinių (Con). (D) Kiekybinis tyrimas atskleidžia nuo depresijos priklausantį kai kurių FosB baltymų sumažėjimą HPC, bet ne PFC (*: p <0.05). Klaidų juostos rodo vidutinį +/- SEM.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g004

Tiesioginių įrodymų apie ΔFosB transkripcijos reguliavimą genų taikiniais ŽPC yra nedaug, o tik nuo ciklino priklausoma baltymų kinazė 5 (cdk5) yra patvirtintas taikinys po elektrokonvulsinio stimuliavimo pelėms [39]. Tačiau daugeliui kitų genų yra žinomi ΔFosB transkripcijos reguliavimo taikiniai kituose smegenų regionuose, ypač NAc. Tai apima daugybę genų, būtinų hipokampinės ląstelių funkcijai ir sinapsiniam plastiškumui, pavyzdžiui, GluA2 [48] ir „CaMKII“20]. Todėl mes panaudojome Western blot vertindami galimų ΔFosB genų taikinių lygius nuo kokaino priklausomų ir depresija sergančių pacientų HPC ir PFC. Nerasta jokių reikšmingų tikslinių genų baltymų lygio skirtumų kokaino priklausomų asmenų PFC, tuo tarpu HPC parodė reikšmingą GluA2 sumažėjimą (t (34) = 2.31, p = 0.027) ir stiprią tendenciją mažėti CaMKII lygiai (t (35) = 1.99, p = 0.053) išraiška, o cdk5 išliko nepakitęs (5A ir 5B). Pacientų, sergančių depresija, PFC ir HPC, ΔFosB tikslinių genų ekspresijos pokyčių nebuvo (5C ir 5D pav). Šie duomenys rodo, kad ΔFosB gali reguliuoti potencialių taikinių genų ekspresiją žmogaus HPC, ir šis reguliavimas gali būti būdingas smegenų sričiai ir ligai.

Download:

PPT

„PowerPoint“ skaidrė

PNG

didesnis paveikslėlis (546KB)

TIFF

originalus vaizdas (1.01MB)

5 pav. Galimų ΔFosB geno tikslinių baltymų ekspresija sergantiesiems priklausomybe nuo kokaino ir depresija sergantiems HPC ir PFC.

(A) Western blot potencialių ΔFosB geno taikinių baltymų iš piktnaudžiavusių žmogaus kokainu HPC ir PFC (Coc) ir kontrolinių (Con). (B) Kiekybinis tyrimas atskleidžia nuo kokaino priklausantį viso GluA2 ir CaMKII sumažėjimą HPC, bet ne PFC (*: p <0.05, #: p = 0.05). (C) Galimų ΔFosB genų taikinių baltymų, gautų iš žmogaus depresijos pacientų HPC ir PFC, Western blot išjungta (Dep) arba antidepresantais (Dep + AD) ir kontrolinė (Con). (D) Kiekybiškai neatskleidžia nuo depresijos priklausančių pokyčių. Klaidų juostos rodo vidutinį +/- SEM.

http://dx.doi.org/10.1371/journal.pone.0160355.g005

Diskusija

Pateikiame pirmąjį rinkinį FosB geno produkto ir ΔFosB-tikslinių baltymų analizė hipokampo ir prefrontalinėje žievėje, priklausomose nuo kokaino ir priklausomiems nuo depresijos. Yra žinoma, kad šie smegenų regionai vaidina pagrindinį vaidmenį nustatant šių ligų patofiziologiją, o žmogaus pomirtinių mėginių panaudojimas leidžia mums: 1) nustatyti, ar gerai tirtų šių ligų graužikų modeliuose nustatyti molekuliniai pakitimai pakartojami žmonėms ; 2) nustato naujus tyrimų būdus, susijusius su graužikų modeliais, siekiant galimos terapinės intervencijos. Mūsų analizė sutelkė dėmesį į FosB genų produktai, nes buvo teigiama, kad jų raiška šiuose regionuose vaidina depresiją ir yra sukeliama kokaino poveikio graužikų modeliuose [21, 22, 24]. Iš pradžių tiriant FosB baltymų kiekį mūsų žmonių mėginiuose, buvo aišku, kad mūsų FosB antikūnai aptiko daugiau juostų, nei anksčiau buvo pranešta graužikų smegenų mėginiuose iš mūsų grupės ir daugelio kitų [1, 22]. Kadangi žmonių smegenys užšaldomos valandomis po mirties, o pelių mėginiai išimami ir užšaldomi per dvi minutes po paaukojimo, palikome pelių smegenis vietoje po aukojimo iki aštuonių valandų, siekiant nustatyti, ar neatsiras panašių juostų. Kadangi mes nepastebėjome to paties FosB baltymų modelio, kuris buvo rastas žmogaus mėginiuose, ir kadangi taip pat neradome koreliacijos tarp PMI ilgio ir įvairių juostų lygio žmonių mėginiuose, padarėme išvadą, kad daugelis juostų žmogaus smegenų mėginiai greičiausiai nebus didesnių FosB izoformų proteolitinio skilimo rezultatas. Nors negalime atmesti rūšių proteolitinės struktūros skirtumų, manytume, kad kai kurios žmonių juostos gali atsirasti dėl skirtingo FosB mRNR susiuvimo, o būsimi mūsų grupės tyrimai padės spręsti šį klausimą.

Ankstesniuose graužikų tyrimų rezultatuose nustatyta, kad po lėtinio kokaino padidėjo FosB izoformų kiekis HPC ir PFC [24]. Tačiau iš mūsų priklausomybės nuo kokaino grupių nustatyta, kad visos FosB izoformos sumažėjo HPC, PFC nepakito, palyginti su kontroliniais asmenimis. Manome, kad taip gali būti dėl būdingų skirtumų tarp graužikų tyrimų ir žmonių priklausomybės atvejų. Priklausomybės nuo kokaino tyrimai trunka tik nedidelę graužikų gyvenimo dalį, ir jokie ΔFosB indukcijos tyrimai iki šiol neviršijo 14 dienų nuolatinio kokaino poveikio [1, 20]. Žmonės nuo kokaino gali būti narkomanai daug ilgesnį laiką, o tai gali sukelti homeostatinį poveikį, sukeliantį FosB geną, kuris bus represuotas HPC. Be to, daugelis tyrimų parodė, kad ilgalaikę priklausomybę nuo psichostimuliatorių mažina pažintinė funkcija [9, 49]. Naujausias mūsų darbas rodo, kad HPC ΔFosB vaidina svarbų vaidmenį mokantis [28], taigi ir HPC sumažėjimas FosB Čia parodyta, kad kokaino narkomanų genų ekspresija gali reikšti priklausomybės nuo psichostimuliatorių pažinimo sumažėjimą. Su sumažėjusia FosB geną HPC, mes taip pat pastebėjome, kad sumažėjo ΔFosB tikslinių genų GluA2 ir CaMKII baltymų lygis, ir abi šios molekulės taip pat yra svarbios HPC funkcijai ir mokymuisi [50] ir anksčiau buvo susieti su priklausomybe [38, 51].

Pacientų, sergančių depresija, HPC metu stebėjome kelių FosB baltymų sumažėjimą, atsižvelgiant į tai, ar pacientai vartojo antidepresantus. Tai gali reikšti, kad antidepresantai turi skirtingą poveikį FosB genų produktai, nors ankstesni mūsų tyrimai su graužikais tokių skirtumų nerodė [22]. Tačiau šių pacientų galimo taikinio genų raiškos skirtumų nei HPC, nei PFC nebuvo. Nors didelę depresiją dažnai lydi pažinimo problemos [52], tikėtina, kad HPC ΔFosB nėra vienintelis veiksnys, pakitęs reaguojant į depresiją. Nors narkomanai nuo kokaino rodė pokyčius HPC FosB ir tikslinio geno ekspresijoje, depresija gali sukelti skirtingus kompensacinius mechanizmus, kurie neleidžia sumažinti GluA2 ar CaMKII ekspresijos. Taigi būsimi tyrimai išsiaiškins, ar HPC genų ekspresijos pokyčiai sergant depresija ir priklausomybe atsiranda dėl panašių mechanizmų.

Svarbu pažymėti, kad šiam tyrimui naudojamos žmonių populiacijos neturi ikiklinikinių graužikų ar primatų modelių homogeniškumo. Pavyzdžiui, penki pacientai, sergantys depresija, sirgo alkoholizmu, o du mirties metu turėjo opiatų. Panašiai šeši iš kokaino priklausomi asmenys vartojo antidepresantus per tris mėnesius prieš mirtį. Nors tai nenuostabu, nes depresija ir priklausomybės turi didelę gretutinių ligų riziką [6, 7], tai apsunkina rezultatų aiškinimą. Nepastebime reikšmingų biocheminių priemonių skirtumų tarp kokaino priklausomų asmenų, turinčių antidepresantų, ir tų, kurie neturėjo, taip pat nestebime skirtumų tarp depresiją patyrusių pacientų, kurie turėjo priklausomybę nuo medžiagų, ir tų, kurie neturėjo (duomenys nepateikti) ). Tačiau tai neleidžia sutapti ar sinergetiškai paveikti depresijos ir priklausomybės priemones mūsų priemonėms. Atvirkščiai, kai mes pastebime panašų HPC FosB izoformos ekspresijos sumažėjimą kartu su depresija ir priklausomybe, gali būti, kad sumažėjęs HPC FosB genų ekspresija yra bendras dviejų sąlygų mechanizmas ir gali prisidėti prie gretutinių ligų. Norint ištirti šią hipotezę, prireiks daug platesnių žmonių grupių ir papildomų ikiklinikinių tyrimų.

Pabaigoje pastebime, kad daugkartinė FosB žmonių, kenčiančių nuo priklausomybės ir depresijos, genų produktai yra nepakankamai sureguliuojami, bet ne PFC. Nors negalime užmegzti etiologinio ryšio tarp šio reiškinio ir ligos būsenų, gali būti, kad sumažėjęs HPC ΔFosB ir (arba) kitų FosB izoformų kiekis iš dalies gali sukelti kognityvinį deficitą, susijusį su depresija ir priklausomybe, arba prisidėti prie šių psichinių ligų sutrikimai.

Padėka

Autoriai norėtų padėkoti Kenneth Moon už puikią techninę pagalbą.

Autoriaus įnašai

Sukurta ir suprojektuota eksperimentai: AJR PAG.
Atlikti eksperimentai: AJR GT PAG.
Analizavo duomenis: PAG AJR.
Pateikti reagentai / medžiagos / analizės įrankiai: GT.
Parašė popierių: PAG AJR.

Nuorodos

1. Robison AJ, Nestler EJ. Transkripciniai ir epigenetiniai priklausomybės mechanizmai. Nat Rev Neurosci. 2011; 12 (11): 623 – 37. „Epub 2011“ / „10“ / „13“. doi: 10.1038 / nrn3111 nrn3111 [pii]. pmid: 21989194; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3272277.
- Žiūrėti straipsnį
- PubMed / NCBI
- "Google Scholar"
2. „Fass DM“, „Schroeder FA“, „Perlis RH“, „Haggarty SJ“. Epigenetiniai nuotaikos sutrikimų mechanizmai: nukreipimas į neuroplastiškumą. Neuromokslas. 2014; 264: 112 – 30. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2013.01.041 pmid: 23376737; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3830721.
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
3. „Menard C“, „Hodes GE“, „Russo SJ“. Depresijos patogenezė: tyrimų su žmonėmis ir graužikais įžvalgos. Neuromokslas. 2015. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2015.05.053 pmid: 26037806.
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
Žiūrėti straipsnį
PubMed / NCBI
"Google Scholar"
4. Keralapurath MM, Briggs SB, Wagner JJ. Savarankiškas kokaino vartojimas sukelia sinapsinio perdavimo ir plastiškumo pokyčius ventraliniame hipokampe. Priklausomybių biologija. 2015. doi: 10.1111 / adb.12345 pmid: 26692207.
5. „Loureiro M“, „Kramar C“, „Renard J“, „Rosen LG“, „Laviolette SR“. Kanabinoidų perdavimas hipokampo aplinkoje suaktyvina branduolio akumuliatorių neuronus ir moduliuoja emocinį jaudulį, susijusį su atlygiu ir baime. Biologinė psichiatrija. 2015. doi: 10.1016 / j.biopsych.2015.10.016 pmid: 26681496.
6. Davis L, Uezato A, Newell JM, Frazier E. Pagrindinė depresija ir gretutinių medžiagų vartojimo sutrikimai. Dabartinė nuomonė psichiatrijoje. 2008; 21 (1): 14 – 8. doi: 10.1097 / YCO.0b013e3282f32408 pmid: 18281835.
7. Gydymas: priklausomybė ir kitos psichinės ligos. In: Paslaugos USDoHaH, redaktorius: Nacionalinis kovos su narkotikais institutas; 2010.
8. „Tafet GE“, Nemeroff CB. Streso ir depresijos sąsajos: psichoneuroendokrinologinė, genetinė ir aplinkos sąveika. Žurnalas apie neuropsichiatriją ir klinikinius neuromokslus. 2015: „appineuropsych15030053“. doi: 10.1176 / appi.neuropsych.15030053 pmid: 26548654.
9. Kariūnas JL, Bisagno V. Lėtinio narkotikų vartojimo neuropsichologinės pasekmės: svarba gydymo metodams. Psichiatrijos ribos. 2015; 6: 189. doi: 10.3389 / fpsyt.2015.00189 pmid: 26834649; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC4713863.
10. Blier P. Tariamų ankstyvų antidepresantų strategijų farmakologija. Eur neuropsichofarmakolo. 2003; 13 (2): 57 – 66. pmid .: 12650947. doi: 10.1016 / s0924-977x (02) 00173-6
11. Januar V, Ancelin ML, Ritchie K, Saffery R, Ryan J. BDNF promotoriaus metilinimas ir genetinė variacija vėlyvojo gyvenimo depresijoje. Vertimo psichiatrija. 2015; 5: e619. doi: 10.1038 / tp.2015.114 pmid: 26285129; „PubMed“ centrinis PMCID: PMCPMC4564567.
12. Covington HE 3rd, „Maze I“, „LaPlant QC“, „Vialou VF“, „Ohnishi YN“, „Berton O“ ir kt. Histonedecetilazės inhibitorių antidepresantai. J Neurosci. 2009; 29 (37): 11451 – 60. „Epub 2009“ / „09“ / „18“. 29 / 37 / 11451 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1758-09.2009 pmid .: 19759294; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC2775805.
13. „Maze I“, „Covington HE 3rd“, „Dietz DM“, „LaPlant Q“, „Renthal W“, „Russo SJ“ ir kt. Esminis histono metiltransferazės G9a vaidmuo kokaino sukeltame plastiškume. Mokslas. 2010; 327 (5962): 213 – 6. „Epub 2010“ / „01“ / „09“. 327 / 5962 / 213 [pii] doi: 10.1126 / mokslas.1179438 pmid .: 20056891; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC2820240.
14. Massart R, Barnea R, Dikshtein Y, Suderman M, Meir O, Hallett M ir kt. DNR metilinimo vaidmuo kaupiasi branduolyje inkubuojant kokaino potraukį. Neuromokslų žurnalas: oficialus Neuromokslų draugijos žurnalas. 2015; 35 (21): 8042 – 58. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.3053-14.2015 pmid .: 26019323.
15. Ruffle JK. Molekulinė priklausomybės neurobiologija: kas yra visa (Delta) FosB? Amerikos žurnalas apie piktnaudžiavimą narkotikais ir alkoholiu. 2014; 40 (6): 428–37. doi: 10.3109 / 00952990.2014.933840 pmid: 25083822.
16. „Nestler“ EJ. „FosB“: transkripcinis streso ir antidepresantų reakcijų reguliatorius. Eur J „Pharmacol“. 2014. doi: 10.1016 / j.ejphar.2014.10.034 pmid: 25446562.
17. „Ulery-Reynolds PG“, „Castillo MA“, „Vialou V“, „Russo SJ“, „Nestler EJ“. Fosforilinant DeltaFosB tarpininkauja jo stabilumas in vivo. Neuromokslas. 2009; 158 (2): 369 – 72. „Epub 2008“ / „12“ / „02“. S0306-4522 (08) 01596-0 [pii] doi: 10.1016 / j.neuroscience.2008.10.059 pmid: 19041372; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC2734485.
18. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A ir kt. Nuo proteasomų priklausomi ir nepriklausomi FosB destabilizacijos mechanizmai: FosB degrono domenų identifikavimas ir poveikis DeltaFosB stabilumui. Eur J Neurosci. 2007; 25 (10): 3009 – 19. „Epub 2007“ / „06“ / „15“. EJN5575 [pii] doi: 10.1111 / j.1460-9568.2007.05575.x pmid .: 17561814.
19. „Ulery PG“, „Rudenko G“, „Nestler EJ“. DeltaFosB stabilumo reguliavimas fosforilinant. J Neurosci. 2006; 26 (19): 5131 – 42. „Epub 2006“ / „05“ / „12“. 26 / 19 / 5131 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4970-05.2006 pmid .: 16687504.
20. Robison AJ, Vialou V, Mazei-Robison M, Feng J, Kourrich S, Collins M ir kt. Elgesio ir struktūriniams atsakams į lėtinį kokainą reikalinga pirminė kilpa, įtraukianti „DeltaFosB“ ir nuo kalcio / kalmodulino priklausomą baltymo kinazę II branduolio branduolio apvalkale. J Neurosci. 2013; 33 (10): 4295 – 307. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.5192-12.2013 pmid .: 23467346.
21. „Vialou V“, „Bagot RC“, „Cahill ME“, „Ferguson D“, „Robison AJ“, „Dietz DM“ ir kt. Prefrontalinė žievės grandinė, skirta su depresija ir nerimu susijusiam elgesiui, kurį sukelia cholecistokininas: „DeltaFosB“ vaidmuo. J Neurosci. 2014; 34 (11): 3878 – 87. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1787-13.2014 pmid .: 24623766; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3951691.
22. „Vialou V“, „Thibault M“, „Kaska S“, „Cooper S“, „Gajewski P“, „Eagle A“ ir kt. Diferencinė FosB izoformų indukcija smegenyse dėl fluoksetino ir lėtinio streso. Neurofarmakologija. 2015; 99: 28 – 37. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2015.07.005 pmid: 26164345.
23. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS ir kt. DeltaFosB indukcija su atlygiu susijusiose smegenų struktūrose po lėtinio streso. J Neurosci. 2004; 24 (47): 10594 – 602. „Epub 2004“ / „11“ / „27“. 24 / 47 / 10594 [pii] doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004 pmid .: 15564575.
24. „Perrotti LI“, „Weaver RR“, „Robison B“, „Renthal W“, „Maze I“, „Yazdani S“ ir kt. Skirtingi „DeltaFosB“ indukcijos smegenims narkotikai, vartojami piktnaudžiaujant. Sinapsė. 2008; 62 (5): 358 – 69. „Epub 2008“ / „02“ / „23“. doi: 10.1002 / syn.20500 pmid: 18293355; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC2667282.
25. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA Jr., Whisler K, Gilden L, Beckmann AM ir kt. Transkripcijos faktoriaus deltaFosB ekspresija smegenyse kontroliuoja jautrumą kokainui. Gamta. 1999; 401 (6750): 272 – 6. „Epub 1999“ / „09“ / „28“. doi: 10.1038 / 45790 pmid: 10499584.
26. „Vialou V“, „Robison AJ“, „Laplant QC“, „Covington HE 3rd“, „Dietz DM“, „Ohnishi YN“ ir kt. „DeltaFosB“ smegenų atlygio grandinėse tarpininkauja atsparumui stresui ir antidepresantams. Nat Neurosci. 2010; 13 (6): 745 – 52. „Epub 2010“ / „05“ / „18“. nn.2551 [pii] doi: 10.1038 / nn.2551 pmid .: 20473292; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC2895556.
27. Robison AJ, Vialou V, Sun Sun, Labonte B, S AG, Dias C ir kt. Fluoksetinas epigenetiniu būdu keičia CaMKIIalpha promotorių branduolio kaupikliuose, kad būtų reguliuojamas „DeltaFosB“ surišimo ir antidepresantų poveikis. Neuropsichofarmakologija. 2013. doi: 10.1038 / npp.2013.319 pmid: 24240473.
28. Eagle AL, Gajewski PA, Yang M, Kechner ME, Al Masraf BS, Kennedy PJ ir kt. Nuo patirties priklausomas hipokampo „DeltaFosB“ valdymo įvedimas. J Neurosci. 2015; 35 (40): 13773 – 83. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2083-15.2015 pmid .: 26446228.
29. Papakosto GI, Culpepper L. Depresuoto paciento pažinimo supratimas ir valdymas. J Clin psichiatrija. 2015; 76 (4): 418 – 25. doi: 10.4088 / JCP.13086ah1c pmid .: 25919832.
30. „Evans VC“, „Iverson GL“, „Yatham LN“, „Lam RW“. Ryšys tarp neurokognityvinio ir psichosocialinio funkcionavimo esant didžiausiam depresijos sutrikimui: sisteminė apžvalga. J Clin psichiatrija. 2014; 75 (12): 1359 – 70. doi: 10.4088 / JCP.13r08939 pmid: 25551235.
31. „Wood S“, „Sage JR“, „Shuman T“, „Anagnostaras SG“. Psichostimuliatoriai ir pažinimas: elgesio ir pažinimo aktyvinimo tęsinys. 2014 (66): 1 – 193. doi: 221 / pr.10.1124 pmid: 112.007054; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC24344115.
32. Hiroi N, Marekas G. J., Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA ir kt. Esminis fosB geno vaidmuo atliekant lėtinius elektrokonvulsinius traukulius molekuliniuose, ląsteliniuose ir elgesio veiksmuose. J Neurosci. 1998; 18 (17): 6952 – 62. „Epub 1998“ / „08“ / „26“. pmid .: 9712664.
33. Pierce RC, Vilkas ME. Psichostimuliatorių sukeltos neuroadapcijos branduolyje kaupia AMPA receptorių perdavimą. Šaltojo pavasario uosto medicinos perspektyvos. 2013; 3 (2): a012021. doi: 10.1101 / cshperspect.a012021 pmid: 23232118; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3552338.
34. Luscher C. Kokaino sukeltas sinapsinis plastinis sužadinimo perdavimas ventralinėje pagrindinėje srityje. Šaltojo pavasario uosto medicinos perspektyvos. 2013; 3 (5): a012013. doi: 10.1101 / cshperspect.a012013 pmid: 23637310; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3633178.
35. Pelėsinis C, Kiselčenikas C, Holmesas A. Streso sukelti pažinimo ir emocingumo trūkumai: gliutamato vaidmuo. „Curr Top Behav Neurosci“. 2012; 12: 189 – 207. doi: 10.1007 / 7854_2011_193 pmid: 22261703; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3877736.
36. „Duman RS“. Depresijos patofiziologija ir novatoriški gydymo būdai: glutamaterginių sinapsinių jungčių rekonstravimas. Dialogai „Clin Neurosci“. 2014; 16 (1): 11 – 27. pmid: 24733968; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3984887.
37. Zarate C, Duman RS, Liu G, Sartori S, Quiroz J, Murck H. Naujos gydymo atsparios depresijos paradigmos. Ann NY Acad Sci. 2013; 1292: 21 – 31. doi: 10.1111 / nyas.12223 pmid: 23876043; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3936783.
38. Robisonas AJ. Atsirandantis CaMKII vaidmuo neuropsichiatrinėje ligoje. Tendencijos Neurosci. 2014; 37 (11): 653 – 62. doi: 10.1016 / j.tins.2014.07.001 pmid: 25087161.
39. Chen J, Zhang Y, Kelz MB, Steffen C, Ang ES, Zeng L ir kt. Nuo ciklino priklausomos kinazės 5 indukcija hipokampyje lėtiniais elektrokonvulsiniais priepuoliais: [Delta] FosB vaidmuo. J Neurosci. 2000; 20 (24): 8965 – 71. „Epub 2000“ / „01“ / „11“. 20 / 24 / 8965 [pii]. pmid .: 11124971.
40. Mlewski EC, Krapacher FA, Ferreras S, Paglini G. Laikinai sustiprinta Cdk5 aktyvatoriaus p25 raiška po ūmaus ir lėtinio d-amfetamino vartojimo. Ann NY Acad Sci. 2008; 1139: 89 – 102. doi: 10.1196 / annals.1432.039 pmid: 18991853.
41. „Bignante EA“, Rodriguez Manzanares PA, „Mlewski EC“, „Bertotto ME“, „Bussolino DF“, „Paglini G“ ir kt. Septalinio Cdk5 įtraukimas į streso sukeltą per didelį nerimą. Europos neuropsichofarmakologija: Europos neuropsichofarmakologijos kolegijos žurnalas. 2008; 18 (8): 578 – 88. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2008.02.007 pmid: 18406108.
42. „Seiwell AP“, „Reveron ME“, „Duvauchelle CL“. Padidėjusi Cdk5 akumuliatorių ekspozicija žiurkėms po trumpalaikio savarankiško vartojimo kokaino vartojimo, bet ne po ilgo prisijungimo. „Neurosci Lett“. 2007; 417 (1): 100 – 5. doi: 10.1016 / j.neulet.2007.02.043 pmid: 17339080; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC1876973.
43. Taylor JR, Lynch WJ, Sanchez H, Olausson P, Nestler EJ, Bibb JA. Cdk5 slopinimas akumuliatorių branduolyje sustiprina kokaino lokomotorinį ir stimuliuojamąjį bei motyvacinį poveikį. „Proc Natl Acad Sci“, JAV A. 2007; 104 (10): 4147 – 52. „Epub 2007“ / „03“ / „16“. 0610288104 [pii] doi: 10.1073 / pnas.0610288104 pmid: 17360491; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC1820723.
44. Quirion R, Robitaille Y, Martial J, Chabot JG, Lemoine P, Pilapil C ir kt. Žmogaus smegenų receptorių autoradiografija naudojant ištisus pusrutulio skyrius: bendras metodas, iki minimumo sumažinantis audinių artefaktus. Sinapsė. 1987; 1 (5): 446 – 54. „Epub 1987“ / „01“ / „01“. doi: 10.1002 / syn.890010508 pmid: 2850625.
45. „Hope BT“, „Nye HE“, „Kelz MB“, „Self DW“, „Iadarola MJ“, „Nakabeppu Y“ ir kt. Ilgalaikio AP-1 komplekso, sudaryto iš pakitusių į fosą panašių baltymų, indukcija smegenyse lėtiniu kokainu ir kitomis lėtinėmis procedūromis. Neuronas. 1994; 13 (5): 1235 – 44. „Epub 1994“ / „11“ / „01“. 0896-6273 (94) 90061-2 [pii]. pmid .: 7946359. doi: 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2
46. „Nye HE“, „Hope BT“, „Kelz MB“, „Iadarola M“, „Nestler EJ“. Koksino lėtinio su FOS susijusio antigeno indukcijos reguliavimas striatumoje ir branduolio akumuliatoriuose farmakologiniai tyrimai. J Pharmacol Exp Ther. 1995; 275 (3): 1671 – 80. „Epub 1995“ / „12“ / „01“. pmid .: 8531143.
47. Chen J, Kelz MB, Hope BT, Nakabeppu Y, Nestler EJ. Lėtiniai su Fos susiję antigenai: stabilūs deltaFosB variantai, kuriuos sukelia lėtinis gydymas smegenyse. J Neurosci. 1997; 17 (13): 4933 – 41. „Epub 1997“ / „07“ / „01“. pmid .: 9185531.
48. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM ir kt. Transkripcijos faktoriaus [Delta] išraiška smegenyse kontroliuoja jautrumą kokainui. Gamta. 1999; 401 (6750): 272 – 6. http://www.nature.com/nature/journal/v401/n6750/suppinfo/401272a0_S1.html. pmid .: 10499584
49. „Buchta“ tualetas, „Riegel AC“. Lėtinis kokainas sutrikdo mezokortikinio mokymosi mechanizmus. „Brain Res. 2015; 1628 (Pt A): 88 – 103. doi: 10.1016 / j.brainres.2015.02.003 pmid: 25704202; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC4739740.
50. „Shonesy BC“, „Jalan-Sakrikar N“, „Cavener VS“, „Colbran RJ“. CaMKII: molekulinis sinapsinio plastiškumo ir atminties substratas. Molekulinės biologijos ir vertimo mokslo pažanga. 2014; 122: 61 – 87. doi: 10.1016 / B978-0-12-420170-5.00003 – 9 pmid .: 24484698.
51. Žemas JA, „Tseng KY“, „Wolf ME“. AMPA receptorių perdavimo branduolių akumuliatoriuose adaptacijos prisideda prie kokaino potraukio inkubacijos. Neurofarmakologija. 2014; 76 Pt B: 287 – 300. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2013.04.061 pmid: 23727437; „PubMed“ centrinis PMCID: PMC3836860.
52. Culpepper L. Negydyto pagrindinio depresinio sutrikimo įtaka pažinimui ir kasdienei funkcijai. J Clin psichiatrija. 2015; 76 (7): e901. doi: 10.4088 / JCP.13086tx4c pmid .: 26231021.