„Behav Brain Res“. Autoriaus rankraštis; galima įsigyti PMC 2015 birželį 5.
Paskelbta galutine redaguota forma:
„Behav Brain Res“. 2014 balandis 1; 262: 101 – 108.
Paskelbta internete 2014 Jan 7. doi: 10.1016 / j.bbr.2013.12.014
PMCID: PMC4457313
NIHMSID: NIHMS554276
Abstraktus
Šis tyrimas nustatė paauglių nikotino vartojimo poveikį suaugusiųjų alkoholio pasireiškimui žiurkėms, kurių elgesys reaguoja į naują aplinką labai ar mažai, ir išsiaiškinta, ar nikotinas pakeitė ΔFosB vidurinės žarnos (vStr) ir prefrontalinėje žievėje (PFC) iškart po vaisto vartojimo. po to, kai žiurkės subrendo iki pilnametystės.
Gyvūnams buvo būdingas didelis (HLA) arba žemas (LLA) lokomotorinis aktyvumas naujame atvirame lauke pogimdyminiu dieną (PND) 31, jiems buvo sušvirkšti fiziologinio tirpalo (0.9%) arba nikotino (0.56 mg laisvos bazės / kg) iš PND 35. –42. Etanolio sukeltas sąlyginis vietos pasirinkimas (CPP) buvo įvertintas PND 68 po 8 dienų kondicionavimo esant šališkam paradigmai; ΔFosB buvo matuojamas PND 43 arba PND 68. Po paauglių nikotino ekspozicijos HLA gyvūnams nustatyta CPP, kai jie buvo kondicionuojami etanoliu; LLA gyvūnai nebuvo paveikti. Be to, paauglių nikotino ekspozicija 8 dienomis padidino ΔFosB lygį limbiniuose regionuose tiek HLA, tiek LLA žiurkėms, tačiau šis padidėjimas išliko tik LLA gyvūnams.
Rezultatai rodo, kad paauglių nikotino poveikis palengvina etanolio CPP nustatymą ŽLA žiurkėms ir kad nuolatinis ΔFosB padidėjimas nėra būtinas ar pakankamas etanolio CPP nustatyti suaugus. Šie tyrimai pabrėžia elgesio fenotipo įvertinimo svarbą nustatant paauglių nikotino poveikio elgsenai ir ląstelėms poveikį.
1. Įvadas
Daugybė tyrimų parodė, kad didelis naujovių ieškojimas ir tyrinėjimas yra susijęs su padidėjusiu jautrumu narkotikų premijoms [1-8]. Įrodyta, kad paaugliai labiau ieško ir tyrinėja naujoves nei suaugusieji [9-11], o keli pranešimai rodo, kad paaugliai, labiau nei suaugusieji, labiau linkę į priklausomybę, kai pradeda vartoti narkotikus [12-18]. Taigi paaugliai gali būti jautresni stiprėjančiam ir maloniam piktnaudžiavimo narkotikais poveikiui, o paaugliai, turintys aukštą pojūčių siekio profilį, gali būti pažeidžiamiausi.
Du paauglių dažniausiai vartojami vaistai yra nikotinas ir alkoholis [19, 20], o įrodymai rodo, kad nikotino vartojimas daro įtaką alkoholio vartojimui. Rūkymas ir alkoholio vartojimas dažnai pasireiškia kartu, bet kuris elgesio dažnis yra susijęs su kito elgesio dažnumu [21]. Suteikti [22] pranešė, kad beveik 29% asmenų, kurie pradeda rūkyti nesulaukę 14 amžiaus, tampa priklausomi nuo alkoholio, o 8% procentų per visą gyvenimą piktnaudžiauja alkoholiu. Be to, 19% asmenų, kurie pradeda rūkyti tarp 14 ir 16, tampa priklausomi nuo alkoholio, o 7% šių asmenų progresuoja dėl piktnaudžiavimo alkoholiu. Įdomu tai, kad asmenys, kurie nepradėjo rūkyti iki 17 metų amžiaus, yra pusiau linkę priklausyti nuo alkoholio ar pereiti į priklausomybę. Taigi ankstyvas rūkymas yra puikus gyvenimo per visą gyvenimą gerinimo, priklausomybės nuo alkoholio ir piktnaudžiavimo jais prognozė [22].
Nustatyta, kad paauglių nikotino poveikis padidina teigiamą kelių vaistų, įskaitant nikotino, kokaino ir diazepamo, poveikį suaugusiems laboratoriniams gyvūnams [23-26]. Be to, Riley et al. [27] pademonstravo, kad nikotino skyrimas pelėms paauglystėje, bet ne suaugus, padidina jautrumą etanolio pašalinimui, kai matuojamas suaugus, ir pasiūlė, kad paauglystė rodo kritinį jautrumo nikotinui periodą, sukeliantį smegenų pokyčius, kurie išlieka ir suaugus. Šią idėją palaiko keli tyrimai, įrodantys, kad paauglių nikotino ekspozicija sukelia nerimą sukeliančią būseną suaugus [28-30]. Gali būti, kad ilgalaikiai pakitimai po paaugliško nikotino ekspozicijos apima transkripcijos faktorių ΔFosB, kuris įrodo, kad sukelia nuolatinį mezolimbinio kelio jautrinimą ir padidina jautrumą kelių narkotikų, įskaitant alkoholį, motyvacinėms savybėms.31-34] ir kurių per didelis limbinės sistemos ekspresija sustiprina vaistų pasirinkimą [31, 35]. Įdomu tai, kad paaugliai gyvūnai, gavę kokaino ar amfetamino, ΔFosB padidėja akumuliatorių branduolyje (NAcc) nei suaugusieji [36]; nikotino vartojimo paauglystėje poveikis ΔFosB nebuvo ištirtas. Kadangi paaugliams gyvūnams būdingas padidėjęs ΔFosB reguliavimas, palyginti su suaugusiaisiais, reaguojant į piktnaudžiaujamus vaistus, jie gali būti jautresni pasitenkinimo dirgikliams po pakartotinio poveikio nei panašiai veikiami suaugusieji. Šią mintį palaiko tyrimai, rodantys, kad paauglės žiurkės, kurios po 4 injekcijų nustato nikotino sukeltą sąlygotosios vietos pasirinkimą (CPP), rodo padidėjusį FosB imuninį reaktyvumą (ΔFosB splaisingo variantas nebuvo konkrečiai išmatuotas) ventraliniame pagrindiniame rajone (VTA), NAcc ir prefrontalinė žievė (PFC) iškart po elgesio tyrimo [37].
Nepaisant įrodymų, kad paauglystė yra padidėjęs sensacijos siekimo ir pirmą kartą vartojamo narkotikų laikotarpis, kad nikotino vartojimas susijęs su padidėjusiu etanolio vartojimu ir kad padidėjęs jautrumas piktnaudžiavimo narkotikais yra susijęs su ΔFosB kaupimu [31], paauglių nikotino poveikio ΔFosB lygiui ir jo ilgalaikio poveikio etanolio atlygiui yra neaiškus. Todėl šis tyrimas: 1) nustatė paauglių nikotino vartojimo poveikį suaugusiųjų alkoholio pasireiškimui žiurkėms, kuriam paauglystėje būdingas jų elgesio reakcija į naują aplinką, ty pasižyminčią dideliu ar mažu lokomotoriniu aktyvumu; ir 2) išsiaiškino, ar nikotinas nepakeitė ΔFosB šių gyvūnų žandikaulio venose (vStr) ir PFC iš karto po vartojimo paauglystėje ar po žiurkių subrendimo iki pilnametystės.
2. Metodai
2.1 medžiagos
Etanolis buvo gautas iš „AAPER Alcohol and Chemical Company“ (Shelbyville, KY). Visi kiti reagentai buvo įsigyti iš „Sigma-Aldrich Life Sciences“ (Sent Luisas, MO), jei nenurodyta kitaip.
2.2 subjektai
Tiriamieji buvo naudojami patinų ir patelių palikuonys (n = 89), kuriems nustatytas laikas (n = 10); gimimo diena buvo apibrėžta kaip pogimdyminė diena 0 (PND 0). Kad būtų užtikrintas panašus augimas tarp patelių, visos vados buvo išpjaustytos 10 – 12 jaunikliams (5 – 6 patinams / 5 – 6 patelėms) PND 1 ir buvo laikomos atitinkamose motinose iki PND 21, tuo metu gyvūnai buvo nujunkyti ir apgyvendinti. tos pačios lyties asmenų grupėse 3 standartiniuose polipropileno narvuose su kukurūzų kotletais. Visi gyvūnai buvo laikomi Pietų Floridos universitete vivariume, kuriame kontroliuojama temperatūra ir drėgmė, naudojant ciklą „12: 12-hr“ nuo šviesos iki tamsos (7 am / 7 pm). Eksperimentai buvo atlikti lengvosios fazės metu, o gyvūnai buvo prižiūrimi ir naudojami pagal gaires, kurias nustatė Institucinis gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas ir Nacionalinis sveikatos institutas, skirtas laboratorinių gyvūnų priežiūrai ir naudojimui. Vadovaujantis šiomis gairėmis, eksperimentuose buvo naudojamas kuo mažiau gyvūnų iš grupės, reikalingų reikšmingiems duomenims gauti.
2.3 elgesio reaktyvumo naujoje aplinkoje apibūdinimas
Lokomotorinis aktyvumas buvo naudojamas apibūdinti žiurkių elgesio reakciją į naują aplinką. Norėdami tai padaryti, PND 31 gyvūnai buvo pašalinti iš savo namų narvo ir patalpinti į apskritą areną (100 cm skersmens), vidutiniškai apšviestą (20 lux), 5 min. Visas perkeltas atstumas (TDM) buvo automatiškai užfiksuotas vaizdo kamera ir išanalizuotas naudojant „EthoVision“ programinę įrangą („Noldus Information Technology“, Leesburgas, VA), kaip aprašyta [38]. Gyvūnai buvo klasifikuojami kaip pasižymintys dideliu (HLA) arba mažu (LLA) lokomotoriniu aktyvumu naujame atvirame lauke, naudojant vidutinę dalijimosi strategiją, kai pirmieji aktyvumą rodė viršutiniame 50%, o antrieji - apatiniame 50%, palyginti su jų kraiko draugai [4].
2.4 nikotino injekcijos
Gyvūnams buvo švirkščiama fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS, 0.9%) arba nikotino vandenilio bitartrato pavidalu PBS (0.56 mg laisvos bazės nikotino / kg) injekcijomis (sc) kartą per dieną 4 arba 8 dienomis, pradedant PND 35. Įrodyta, kad ši nikotino dozė geriau reaguoja į sąlygotus dirgiklius [39, 40] ir padidinkite sustiprinto reagavimo ribinius taškus [41] nurodant, kad tai teikia naudos ir stiprina, ir buvo naudojamas ankstesniame paauglių tyrime [38]. Kiekvieną injekciją gyvūnai buvo vežami į savo namų narvą į silpnai apšviestą procedūrų kambarį, paguldyti į naują narvą, išklotą šviežia patalyne, sušvirkšti ir grąžinti į savo namų narvą.
2.5 sąlygotos vietos nuostata (CPP)
CPP matavimui žiurkėms buvo nikotino injekcijos iš PND 35 – 42 ir 18 dienų po paskutinės nikotino injekcijos, PND 60, gyvūnams (n = 40; 4 – 5 vienai grupei) buvo suteikta laisva prieiga prie dviejų tarpusavyje sujungtų Plexiglas kamerų. (kiekviena kamera: 21 cm pločio × 18 cm ilgio × 21 cm aukščio) su skirtingais vizualiaisiais (vertikalios arba horizontalios juodos ir baltos juostos) ir lytėjimo ženklais (guma arba švitriniu popieriumi grindys) trimis 5 minutės intervalais. Vidutinis laikas, praleistas kiekvienoje aparato pusėje, buvo naudojamas nustatant kiekvieno gyvūno pradinę kamerą. Nors kiekvienas gyvūnas, palyginti su pradiniu rodikliu, turėjo šoninę pirmenybę, populiacijoje nebuvo tendencijos, kad tam tikra kamera būtų teikiama pirmenybė. Per kitas 8 dienas, nuo PND 61 iki 68, buvo naudojama šališka kondicionavimo paradigma, kai gyvūnai buvo mokomi susieti nepageidaujamą kamerą su subjektyviu etanolio poveikiu. Kondicionavimui kiekvienam gyvūnui buvo sušvirkšta etanolio (17%; 1.0 g / kg, ip) ir vėliau jis buvo uždarytas į iš pradžių nenaudojamą kamerą 15 min. Įrodyta, kad ši etanolio dozė ir koncentracija sukuria CPP vėlyvoje paauglystėje [42] ir žymiai padidinti dopamino kiekį paauglių ir jaunų suaugusių gyvūnų NAcc [43, 44]. Po fiziologinio tirpalo injekcijos (15%, ip) kontroliniai gyvūnai buvo apriboti 0.9 min. Iki pradžių nenaudojamos kameros. Tiek kondicionuoti gyvūnai, tiek kontroliniai gyvūnai buvo fiziologinio tirpalo injekcijos, prieš tai kiekvieną dieną laikydamiesi iš pradžių pageidaujamoje kameroje 15 min. Taigi kiekvienam gyvūnui buvo rengiamos 2 treniruotės per dieną, viena - iš pradžių negeriamam, o kita - pageidaujamai kamerai. Šių sesijų tvarka buvo keičiama kiekvieną dieną ir vyko ryte ir po pietų, atskirtomis bent 5 valandomis. PND 69, maždaug 16 – 18 valandomis po paskutinės treniruotės, gyvūnams buvo leidžiama laisvai patekti į abi kameras 5 min., O kiekvienoje kameroje praleistas laikas buvo matuojamas norint įvertinti CPP. Pirmenybės balas buvo apskaičiuotas atimant laiką, praleistą iš pradžių pageidaujamoje kameroje, iš laiko, praleisto iš pradžių nepriimtinoje kameroje.
„2.6 Western Blot“ analizė
Atlikdami imunoblotų analizę, žiurkės buvo greitai nukenksmintos, o vStr ir PFC išskiria 24 val. Po atitinkamai 4th arba 8th nikotino injekcijų PND 39 arba 43 (n = 32; 4 vienai grupei) arba 26 dienas po 8th injekcijos PND. 69 (n = 16; 4 vienai grupei), atitinkantis dieną, kai CPP buvo įvertintas atskiroje gyvūnų grupėje. Audinys buvo greitai užšaldytas ant sauso ledo ir laikomas –80 ° C temperatūroje, kol homogenizuotas, kaip aprašyta [38]. Baltymai buvo atskirti natrio dodecilsulfato poliakrilamido gelio elektroforeze (10% poliakrilamidas) ir elektroforetiškai pernešti į polivinilideno fluorido membranas. Membranos 1 valandai buvo blokuojamos Tris buferiniame tirpale, kuriame yra 0.1% Tween 20 ir 5% neriebaus sauso pieno. Vėliau pirminis antikūnas [FosB (5G4) #2251, 1: 4000; Cell Signaling, Danvers, MA], gaminanti patikimą ΔFosB ženklinimą [45], buvo pridėta blokuojančiame tirpale ir membranos buvo inkubuojamos per naktį 4 ° C. Po šešiolikos valandų membranos buvo plaunamos ir inkubuojamos su antriniais antikūnais [ožkos anti-triušio IgG-HRP, 1: 2000, Santa Cruz Biotechnology, Inc., Santa Cruz, CA], blokuojant tirpalą 1 valandą kambario temperatūroje, ir signalai vizualizuojama naudojant sustiprintą chemiliuminescenciją. Po imuniteto nustatymo blotai buvo nuimami, užblokuoti ir inkubuojami kaip pirminis antikūnas, nukreiptas prieš β-tubuliną [H-235, Santa Cruz Biotechnology, Inc., 1: 16,000], kaip įkrovos kontrolę. 35 / 37 kDa juosta, vaizduojanti FosB, ir 50 kDa juosta, atitinkanti β-tubuliną, kiekvienoje dėmėje buvo įvertinta kiekybiškai, naudojant densitometrą ir Un-Scan-It gelio skaitmeninimo programinę įrangą (Silk Scientific Inc., Orem, Juta). Pirmojo tirpalo kiekvieno tirpalo optinis tankis buvo normalizuotas, o kiekvieno mėginio rezultatai išreiškiami atitinkamų druskos kontrolinių bandinių procentais, kad būtų išvengta kintamumo tarp dėmių.
2.7 statistinės analizės
4 faktorių dispersijos analizė (ANOVA) buvo naudojama siekiant nustatyti poveikį CPP [(vyras ar moteris) × (HLA arba LLA) × (druskos ar nikotino poveikis) × (fiziologinis tirpalas arba etanolis)], o Tukey testas buvo naudojamas post hoc nustatyti reikšmingus skirtumus tarp grupių. Norint nustatyti ΔFosB skirtumus tarp vyriškos ir moteriškos lyties HLA ir LLA gyvūnų ((patinas ar patelė) × (HLA arba LLA) × (fiziologinis tirpalas arba nikotinas)], 3 faktorių ANOVA buvo naudojamas studento t-testas, atliktas post hoc, siekiant įsitikinti reikšmingais skirtumai tarp grupių. P <0.05 lygis buvo priimtas kaip reikšmingo poveikio įrodymas. Kadangi šių tyrimų imties dydis buvo mažas, dėl to sumažėjo statistinė galia, efekto dydis
3. Rezultatai
3.1 elgesio reakcija į naują aplinką
Lokomotorinis aktyvumas, kurį paaugliai žiurkės demonstruoja naujame atvirame lauke 5 min, parodytas 1 pav. TDM buvo normaliai pasiskirstęs (Kolmogorovo-Smirnovo D = 0.083, p> 0.05), gyvūnams judant nuo 4339 iki 7739 cm / 5 min. Vidutinis TDM buvo 5936 cm / 5 min. Vidutiniškai vienas gyvūnas (pavaizduotas pilkame apskritime) buvo pašalintas iš tolesnio tyrimo. HLA ir LLA grupių TDM reikšmingai skyrėsi [t (86) = 12.15, p <0.05; Coheno D = 2.56] su 6621 TDM ± 71 cm / 5 min. HLA gyvūnams ir 5499 ± 59 cm / 5 min. LLA gyvūnams. Gyvūnai buvo sistemingai priskiriami eksperimentinėms grupėms, atsižvelgiant į elgesio reaktyvumą į naują aplinką, siekiant užtikrinti, kad visos grupės būtų lygiavertės naujojo atviro lauko aktyvumui ir jose būtų vienodas HLA ir LLA gyvūnų skaičius (Lentelė 1). Be to, kiekvienai grupei buvo paskirta ne daugiau kaip 1 patinų ir 1 patelių iš nurodyto vados.
3.2 etanolio CPP suaugusiems po nikotino ekspozicijos paauglystėje
Pirmasis eksperimentų rinkinys nustatė, ar nikotino poveikis paauglystėje padidino pažeidžiamumą dėl teigiamo alkoholio poveikio suaugus, ir išsiaiškino, ar reakcija priklauso nuo žiurkių elgesio reagavimo į naują aplinką. Suklasifikavus žiurkes kaip HLA ar LLA, gyvūnams buvo sušvirkštas fiziologinis tirpalas arba nikotinas iš PND 35 – 42, o CPP etanoliui buvo nustatytas, kai žiurkės buvo jaunos suaugusios pacientės, naudodamos PND 69. Rezultatai pateikiami 2 pav. ANOVA parodė reikšmingą 3 krypčių sąveiką tarp naujo atvirojo lauko aktyvumo (HLA arba LLA), nikotino poveikio ir etanolio kondicionavimo [F (1,19) = 5.165, p <0.05], pastebėta galia 0.578 ir įvertintas poveikis dydžio
3.3 ΔFosB paauglystėje pakartotinio nikotino poveikio metu
Kadangi ΔFosB padidėjimas limbinėse struktūrose padidina vaistų pasirinkimą [15,16], eksperimentai nustatė, ar paauglių nikotino ekspozicija turėjo skirtingą poveikį šio transkripcijos faktoriaus lygiui HS ir LLA žiurkių vStr ir PFC. Po elgesio klasifikavimo žiurkių patinams ir patelėms buvo švirkščiamas fiziologinis tirpalas arba nikotinas 4 arba 8 dienomis, pradedant nuo PND 35. Smegenų mėginiai buvo išskirti 24 valandomis po paskutinės injekcijos atitinkamai PND 39 arba 43 ir buvo atlikti Western immunoblot tyrimai. ΔFosB matavimų rezultatai „vStr“ (3 pav) nurodė reikšmingą pagrindinį abiejų injekcijų dienų skaičiaus poveikį [F (1, 16) = 4.542, p <0.05;
3.4 ΔFosB suaugusiems po nikotino ekspozicijos paauglystėje
Norėdami nustatyti, ar paauglystėje stebimas nikotino sukeliamas ΔFosB padidėjimas išliko per jauną suaugusįjį, atlikus žiurkių elgesio klasifikaciją, gyvūnams buvo skiriamos fiziologinio tirpalo arba nikotino injekcijos 8 dienomis iš PND 35 – 42 ir po 27 dienų, PND 69, vStr ir PFC buvo išskirti ir ΔFosB kiekybiškai įvertinti. ΔFosB matavimų rezultatai „vStr“ (4 pav) parodė reikšmingą pagrindinį abiejų fenotipų poveikį [F (1, 16) = 14.349, p <0.05;
4. Diskusija
Šis tyrimas rodo, kad nikotino poveikis paauglystėje turi skirtingą poveikį etanolio CPP ir ΔFosB pokyčiams limbiniuose regionuose, palyginti su žiurkėmis, turinčiomis skirtingą elgesio reakciją į naują aplinką. Paauglių nikotino ekspozicija palengvino etanolio CPP nustatymą suaugusiems tik tiems gyvūnams, kuriems paauglystėje buvo būdingas didelis lokomotorinis aktyvumas naujojoje aplinkoje. Be to, nors paauglių nikotino ekspozicija padidino ΔFosB kiekį vStr ir PFC po 8 vartojimo dienų, šis padidėjimas išliko tik suaugusiesiems, tik tiems gyvūnams, kurių naujovės aplinkoje buvo mažas lokomotorinis aktyvumas.
Taigi, rezultatai rodo, kad paaugliško nikotino ekspozicijos poveikis etanolio CPP suaugusiame amžiuje priklauso nuo gyvūnų elgsenos fenotipo, ir rodo, kad nuolatinis ΔFosB padidėjimas limbinėse srityse nėra būtinas arba pakankamas, kad palengvintų etanolio CPP suaugus.
Išvada, kad paauglių nikotino poveikis HLA gyvūnams palengvina etanolio CPP, sutinka su išvadomis, kad asmenys, turintys padidintą elgesio reakciją į naujus dirgiklius, pasižymi didesniu jautrumu piktnaudžiaujančių junginių atliekamam poveikiui nei asmenys, kurių mažesnis reaktyvumas [1-8]. Tačiau reikia pažymėti, kad CPP gali būti sukurtas sustiprinant specifinį elgesį kondicionieriaus metu arba atsirandantis dėl sąlygoto narkotikų poveikio [47], taigi, reikia aiškinti CPP rezultatus kaip padidėjusio atlygio už narkotikus reikšmingumą. Iš tiesų, Smith et al. [48] nepastebėjo padidėjusio etanolio suvartojimo suaugusioms „Sprague-Dawley“ žiurkėms po paauglystės nikotino ekspozicijos, o tai leidžia manyti, kad ankstesnės nikotino vartojimo patirtys nepakeitė apdovanojamųjų etanolio savybių. Tačiau šie autoriai 21 dienomis naudojo nuolatinę ekspozicijos paradigmą ir neišskyrė gyvūnų pagal lokomotorinį aktyvumą naujoje aplinkoje. Šio tyrimo rezultatai rodo, kad kasdieninės nikotino injekcijos gali skirtis nuo tų, kurias sukelia nuolatinis nikotino poveikis, ir parodo, kad svarbu atskirti HLA ir LLA žiurkes - tai skirtumas, kuris gali būti ypač svarbus tiriant paauglius. Nors daugelis tyrėjų pranešė, kad paauglių populiacija gali būti jautresnė maloniam ir stiprinančiam narkotikų poveikiui [49-51], šis pastebėjimas greičiausiai atspindi paauglių polinkį turėti HLA gyvūnų savybes [10]. Iš tiesų, tyrimai su žmonių populiacija parodė, kad pojūčių siekimo pikas per paauglystę ir po to mažėja, o tie, kurie palaiko paaugliams būdingus pojūčius, greičiausiai padidins alkoholio vartojimą [52].
Rezultatai, rodantys skirtingą paauglių nikotino ekspozicijos poveikį ΔFosB smegenyse iš HLA ir LLA žiurkių, pabrėžia būdingus skirtumus tarp šių gyvūnų grupių. Rezultatai rodo akivaizdų ΔFosB lygio padidėjimą vStr ir PFC abiejose žiurkių grupėse po 8 dienų paauglių nikotino ekspozicijos, tačiau šis poveikis išliko tik LLA žiurkių smegenyse. Soderstrom ir kt. [53] parodė, kad 10 dienų nikotino ekspozicija (0.4 mg / kg, ip) iš PND 34 – 43 padidino FosB imunoreaktyvumą NAcc 37 dienomis po paskutinės nikotino injekcijos, tačiau šie autoriai konkrečiai neišmatuojo ΔFosB ar apibūdino elgesio fenotipą. Gyvūnai. Rezultatai, rodantys, kad ilgalaikis ΔFosB padidėjimas po paauglių nikotino ekspozicijos pasireiškia tik LLA paaugliams, rodo, kad LLA paaugliai yra labiau „panašūs į suaugusiuosius“ nei jų HLA kolegos. Iš tiesų, suaugusiems gyvūnams pakartotinai įrodytas ilgalaikis ΔFosB padidėjimas po vaisto vartojimo [31, 33, 34].
Buvo tikimasi, kad HLA gyvūnai, paauglystėje veikiami nikotino, parodys ir etanolio sukeltą CPP suaugus, ir nuolatinį ΔFosB padidėjimą, kuris, kaip spėjama, padidino atlygio kelius. Tačiau rezultatai rodo, kad nuolatinis ΔFosB padidėjimas po paaugliško nikotino ekspozicijos nėra nei būtinas, nei pakankamas norint nustatyti etanolio CPP suaugus. Kadangi šiame tyrime naudojama šališka CPP paradigma yra jautri anksiolitiniam etanolio poveikiui [54, 55], etanolio sukeltas CPP, stebimas po nikotino poveikio paaugliams, gali būti susijęs su jautrumo etanolio anksiolitiniu poveikiu pokyčiais, o ne įjautrinto atlygio kelio rezultatu. Suaugusiems gyvūnams, paauglystėje paveiktiems nikotino, pasireiškia padidėjęs jautrumas stresui ir nerimui suaugus, tai patvirtina padidėjęs kortikosterono kiekis [28], sumažėjo naujojo atviro lauko tyrinėjimai ir sumažėjo laikas padidėjusio pliuso labirinto atvirose rankose [29, 30]. Taigi atrodo, kad suaugusiems gyvūnams, paaugliams veikiantiems nikotinu, etanolio CPP gali pasireikšti šališkai, dėl anksiolitinių etanolio savybių. Įdomu tai, kad gyvūnai, kuriems būdinga padidėjusi ΔFosB ekspresija, gali būti ne tokie jautrūs stresui ir nerimui, kaip rodo padidėjęs laikas, praleistas padidinto pliuso labirinto atvirose rankose [56], padidinkite plaukimo laiką „Porsolt“ priverstiniame plaukimo bandyme [56], padidėjęs atsparumas po socialinio pralaimėjimo streso [57] ir sumažėjęs kortikosteroono atsakas į suvaržymo stresą [58]. Taigi nikotinu paveikti LLA gyvūnai, kuriems būdinga nuolatinė ΔFosB ekspresija kaip suaugusiems, gali nerasti anksiolitinio atlygio, atsirandančio dėl etanolio, ir dėl to šališkos paradigmos metu CPP neparodyti. Tiesą sakant, etanolio sušvirkštus LLA gyvūnus pastebimai sumažino (D = 0.80) laikas, praleistas etanolio porose, palyginti su fiziologinio tirpalo sušvirkštais LLA gyvūnais, ir tai rodo etanolio sukeltą sąlyginą norą vietoje. Tolesni tyrimai yra būtini norint patvirtinti skirtumus tarp HLA ir LLA gyvūnų nerimo jausmo ir jautrumo stresui po paaugliško nikotino ekspozicijos.
Nors statistiškai reikšmingų skirtumų tarp patinų ir patelių nebuvo pastebėta, buvo tam tikras vidutinio sunkumo ar didelis su lytimi susijęs poveikis. Po 25 fiziologinio tirpalo injekcijų PFC ΔFosB matavimai buvo maždaug 4% mažesni nei jų partnerių moterų ir maždaug 19% didesni vyrų nei paauglių moterų po 4 nikotino injekcijų, o tai rodo, kad paaugliams vyrams gali padidėti ΔFosB padidėjimas po mažesnės ekspozicijos. į nikotiną nei paauglės moterys. Be to, ΔFosB matavimai buvo 15 – 17% didesni suaugusių vyrų vStr ir PFC, nei stebimi suaugusioms moterims, nepriklausomai nuo to, ar šie gyvūnai paaugliams buvo veikiami fiziologinio tirpalo ar nikotino. Pastaroji išvada atitinka ataskaitą, parodančią, kad suaugusių vyrų organizmo branduolio branduolio branduolio ir apvalkalo regionuose yra šiek tiek didesnis ΔFosB lygis nei jų moteriškose pačiose dalyse ir kad šis skirtumas yra gyvūnams, kuriems švirkščiamas fiziologinis tirpalas arba kokainas (15 mg / kg). 2 savaites, nurodant, kad šis skirtumas nepriklauso nuo vaisto ekspozicijos [45]. Mūsų žiniomis, jokiais paauglių ar suaugusių gyvūnų tyrimais nebuvo tiriami lyties skirtumai ΔFosB ekspresijoje po nikotino ekspozicijos; šie duomenys pateisina tolesnį tyrimą.
Apibendrinant galima pasakyti, kad paaugliai gyvūnai, pasižymintys elgesio reaktyvumo į naują aplinką skirtumais, taip pat skiriasi: 1) ilgalaikėmis nikotino poveikio pasekmėmis jautrumui etanolio poveikiui suaugus; 2) ΔFosB indukcija pakartotinai veikiant nikotiną; ir 3) ΔFosB patvarumas po pakartotinio nikotino poveikio. Šios išvados suteikia pagrindą tirti būdingų paauglių gyvūnų pažeidžiamumų skirtumus, charakteristikas, kurias galima patikrinti naudojant palyginti paprastas elgesio priemones.
Pabrėžia
- Paauglių nikotino poveikis sukelia alkoholio CPP padidėjusį sensaciją ieškantiems suaugusiesiems
- Paauglių nikotino ekspozicija padidina ΔFosB raišką
- ΔFosB ekspresija po paauglystės nikotino išlieka suaugusiesiems, ieškantiems mažai jutimų
Padėka
Tyrimus parėmė F32AA016449 Floridos valstija ir Nacionalinių sveikatos institutų NIAAA. Už turinį atsakingi tik autoriai ir jis nebūtinai atspindi oficialią Floridos valstijos ar Nacionalinių sveikatos institutų nuomonę.
Išnašos
Leidėjo atsisakymas: Tai PDF failas iš neregistruoto rankraščio, kuris buvo priimtas paskelbti. Kaip paslauga mūsų klientams teikiame šią ankstyvą rankraščio versiją. Rankraštis bus kopijuojamas, užrašomas ir peržiūrimas gautas įrodymas, kol jis bus paskelbtas galutinėje cituotojoje formoje. Atkreipkite dėmesį, kad gamybos proceso metu gali būti aptiktos klaidos, kurios gali turėti įtakos turiniui, ir visi su žurnalu susiję teisiniai atsakymai.
Nuorodos
;
