DeltaFosB ekspresija branduoliuose accumbens imituoja apsauginį priklausomybės fenotipą, bet ne aplinkosauginio sodrinimo (2014) apsauginį depresijos fenotipą.

PMCID: PMC4148937

Abstraktus

Aplinkos sodrinimas žiurkėms sukelia apsauginę priklausomybę ir depresijos fenotipus. ΔFosB yra transkripcijos faktorius, reguliuojantis atlygį smegenyse ir kurį sukelia psichologinis stresas bei piktnaudžiavimo vaistais. Tačiau ΔFosB vaidmuo apsauginiuose aplinkos sodrinimo fenotipuose nebuvo gerai ištirtas. Čia parodome, kad ΔFosB yra skirtingai reguliuojamas žiurkėms, auginamoms izoliuotoje būsenoje (IC), palyginti su tomis, kurios yra praturtintoje būsenoje (EB), reaguojant į suvaržymo stresą ar kokainą.

Lėtinis stresas arba lėtinis gydymas kokainu padidina ΔFosB baltymo kiekį IC žiurkių branduolyje (NAc), bet ne EC žiurkių dėl jau padidėjusio bazinio ΔFosB kaupimosi EB sąlygomis..

Virusų sukelta per didelė ΔFosB ekspresija porose laikomų žiurkių NAc apvalkale (ty nepriklausomai nuo aplinkos sodrinimo / izoliacijos) padidina operacinį atsaką į sacharozę, kai jį skatina alkis, bet sumažina sočiųjų gyvūnų atsaką. Be to, per didelis ΔFosB ekspresija sumažina savarankišką kokaino vartojimą, padidina kokaino ieškojimo išnykimą ir sumažina kokaino sukelto intraveninio kokaino vartojimo atkūrimą; visi elgesio duomenys, atitinkantys sodrinimo fenotipą.

Tačiau, priešingai, ΔFosB per didelė ekspresija nepakeitė porose laikomų žiurkių atsako keliuose su nerimu ir depresija susijusio elgesio testuose.

Taigi, ΔFosB NAc apvalkalo imitacija apsauginis priklausomybės fenotipas, bet ne apsauginės depresijos fenotipas, susijęs su aplinkos praturtėjimu.

Raktiniai žodžiai: [prieaugis]FosB, aplinkos sodrinimas, depresija, savarankiškas kokaino vartojimas, adeno-associated virusas (AAV), per didelė ekspresija

Įvadas

Gyvenimo patirtis, ypač ankstyvaisiais gyvenimo tarpsniais, daro didelę įtaką gyvūnų elgesiui visą gyvenimą. Aplinka vaidina esminį vaidmenį žmonių pažeidžiamumui ir atsparumui psichikos sutrikimams (Elisei ir kt., 2013; Akdeniz ir kt., 2014; Kato ir Iwamoto, 2014; van Winkel ir kt., 2014). Buvo pranešta, kad graužikų modeliuose gyvenimas turtingoje aplinkoje nuo nujunkymo iki jauno pilnametystės sukelia apsauginę priklausomybę ir depresijos fenotipus. (Green ir kt., 2002, 2003, 2010; Laviola ir kt. 2008; Solinas ir kt., 2008, 2009; El Rawas ir kt., 2009; Thiel ir kt., 2009, 2010). Pagal šią paradigmą gyvūnams priskiriama arba praturtinta sąlyga (EB), kai gyvūnai laikomi grupėse ir kasdien gali prieiti prie naujų objektų, arba izoliuota sąlyga (IC), kai gyvūnai laikomi pavieniui be naujovių ar socialinio kontakto. Gyvūnai, auginami praturtintomis sąlygomis, apimančiomis socialinius kontaktus, mankštą ir naujumą, mažiau sustiprina ir ieško kokaino ar amfetamino pagal savarankiško intraveninio narkotikų vartojimo paradigmą. (Green ir kt., 2002, 2010). Be priklausomybės fenotipo, toks sodrinimo poveikis sukelia į antidepresantus panašų poveikį gyvūnų depresijos modeliuose. (Green ir kt., 2010; Jha ir kt., 2011). Konkrečiai, praturtinti gyvūnai pasižymi sumažėjusiu į anhedoniją panašiu elgesiu atliekant sacharozės pirmenybės testą, mažesnį socialinį atsiribojimą atliekant socialinės sąveikos testą ir mažiau nejudrumo atliekant priverstinio plaukimo testą (FST). Nepaisant anti-priklausomybės ir į antidepresantus panašaus sodrinimo poveikio, mechanizmai, kuriais grindžiami šie apsauginiai aplinkos sodrinimo fenotipai, tebėra nevisiškai suprantami, nors mūsų ankstesni tyrimai turėjo įtakos sumažėjusiam transkripcijos faktoriaus, CREB, aktyvumui nucleus accumbens (NAc). ) tarpininkaujant tam tikram aplinkos sodrinimo poveikiui (Green ir kt., 2010; Larson ir kt. 2011). Taigi šių diferencijuoto auginimo tyrimų tikslas yra naudoti pagrindinį mokslo metodą, siekiant nustatyti molekulinius atsparumo mechanizmus, kurie vėliau gali būti panaudoti klinikoje. Šis metodas yra aplinkosaugos lygis nusistovėjusioms genetinėms strategijoms, tokioms kaip selektyvus veisimas (McBride ir kt., 2014).

Čia mes sutelkiame dėmesį į kitą transkripcijos faktorių ΔFosB, kurį NAc sukelia tam tikros streso formos arba beveik visi piktnaudžiavimo vaistai, įskaitant kokainą, morfiną, alkoholį, nikotiną ir amfetaminą (Hope ir kt., 1992; Kelzas ir Nestleris, 2000; Perrotti ir kt. 2004, 2008). Kaip transkripcijos faktorius, ΔFosB dimerizuojasi su Jun šeimos baltymais, pirmiausia JunD, sudarydamas aktyvų AP-1 kompleksą, kuris prisijungia prie AP-1 atsako elemento, kad sustiprintų arba slopintų tikslinių genų transkripciją (Nestler, 2001), nors nauji tyrimai rodo, kad ΔFosB taip pat gali veikti kaip homodimeras (Wang ir kt., 2012). ΔFosB baltymas yra sutrumpintas sandūros dispersija FosB genas, dėl kurio ΔFosB baltymui trūksta dviejų C-galo degrono domenų, užkertant kelią ΔFosB baltymui nuo greito skilimo, pastebėto naudojant FosB ir visus kitus Fos šeimos baltymus. Kadangi ΔFosB yra nepaprastai stabilus NAc, ΔFosB veikia labai skirtingai, reaguodamas į ūminius ir lėtinius dirgiklius, palyginti su kitais Fos baltymais. Pakartotinai veikiant piktnaudžiavimo ar streso vaistais, ΔFosB baltymas palaipsniui kaupiasi ir išlieka kelias dienas ar savaites, o FosB ir kiti Fos baltymai indukuojami tik trumpą laiką (valandas), o vėlesnio poveikio metu susidaro susilpnėjusi indukcija (Nestler ir kt., 2001; „Nestler“ 2008).

ΔFosB svarba yra ne tik tai, kad jį labai sukelia piktnaudžiavimo ir streso vaistai, bet ir tai, kad buvo įrodyta, kad manipuliavimas ΔFosB smegenyse turi įtakos gyvūnų elgesiui. Selektyviai indukuojant ΔFosB suaugusių pelių dinorfino terpės spygliuotuose neuronuose, padidėja lokomotorinis jautrumas reaguojant į ūminį ir pasikartojantį kokainą, taip pat pasitenkinimas kokainu pagal sąlyginės vietos pasirinkimo paradigmą ir sustiprinimas savarankiško administravimo paradigmoje. (Kelzas ir kt., 1999; Kelzas ir Nestleris, 2000; Colby ir kt. 2003).

Nors apsauginės priklausomybės ir depresijos fenotipai buvo išsamiai aprašyti aplinkai praturtintoms žiurkėms, galimas ΔFosB vaidmuo tarpininkaujant šiems apsauginiams fenotipams nebuvo iki galo įvertintas. Ankstesni aplinkos sodrinimo tyrimai parodė, kad, palyginti su standartine aplinka (SE), praturtinta aplinka padidina bazinį ΔFosB lygį tiek D1, tiek D2 vidutiniuose spygliuotuose pelių striatalinių regionų neuronuose. (Solinas ir kt., 2009; Lobo ir kt. 2013). Be to, praturtintoms Wistar žiurkėms buvo padidėjęs ΔFosB teigiamų ląstelių kiekis NAc ir prefrontalinėje žievėje, palyginti su SE žiurkėmis, o tai rodo galimą ΔFosB vaidmenį apsauginiame priklausomybės nuo nikotino fenotipe. (Venebra-Muñoz ir kt., 2014). Be to, per didelis ΔFosB ekspresija visame pelių striatumoje padidina kasdienį ratų važiavimą, o tai gali būti analogiška padidėjusiam žiurkių aktyvumui praturtintoje aplinkoje. (Werme ir kt., 2002).

Šiame tyrime iškėlėme hipotezę, kad: (1) aplinkos praturtinimas padidintų bazinių ΔFosB lygių kaupimąsi NAc; ir (2) šis ΔFosB kaupimasis prisidėtų prie apsauginio aplinkos sodrinimo poveikio.

medžiagos ir metodai

Gyvūnai

Siekiant pagerinti aplinką, Sprague-Dawley žiurkių patinai (Harlanas, Hiustonas, Teksasas, JAV) buvo atsitiktinai suskirstyti į EC arba IC laikymo vietas nuo 21 dienos po gimdymo iki 51 dienos. EB žiurkės buvo laikomos grupėse (20 narve) dideliame metaliniame bute. narvas (70 × 70 × 70 cm) su keliais kietais plastikiniais daiktais (vaikiškais žaislais, plastikiniais indeliais, PVC vamzdeliais ir kt.). Šie objektai buvo pakeisti naujais objektais ir kasdien pertvarkomi į naują konfigūraciją. IC žiurkės buvo atskirai laikomos standartiniuose polikarbonato narveliuose. Žiurkės tokiomis sąlygomis išliko viso eksperimento metu, o visi elgesio testai ir biocheminiai testai buvo pradėti po 51 dienos amžiaus (ty mažiausiai 30 dienų sodrinimo/izoliavimo). Dėl per didelio ΔFosB ekspresijos 225–250 g svorio Sprague-Dawley žiurkių patinai (Harlan, Hiustonas, Teksasas, JAV) buvo laikomi poromis standartiniuose polikarbonato narveliuose, prieš juos stereotaktiškai sušvirkščiant su adeno susietu virusiniu vektoriumi (AAV2). per daug ekspresuojantis ΔFosB su žaliu fluorescenciniu baltymu (GFP) arba tiesiog GFP kaip kontrolė (žr. toliau). Standartinis žiurkių maistas ir vanduo buvo laisvai prieinami visoms žiurkėms, išskyrus elgesio testus ir maisto reguliavimą. Visos žiurkės buvo laikomos kontroliuojamoje aplinkoje (temperatūra, 22 °C; santykinė drėgmė 50%; ir 12 h šviesos/tamsos ciklas, šviesa įjungta 600 val.) Laboratorinių gyvūnų priežiūros vertinimo ir akreditavimo asociacijos (AAALAC) patvirtintoje kolonijoje. . Visi eksperimentai atitiko NIH laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo vadovą ir Teksaso universiteto medicinos skyriaus institucinį gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetą.

Aplinkos praturtinimas yra sudėtingas manipuliavimas, susidedantis iš naujumo, socialinio kontakto ir mankštos. Porinis būstas suteikia socialinį kontaktą ir taip yra EB (žr. NIH vadovą). Taigi, tinkama kontrolinė grupė būsenai su naujumu, socialiniu kontaktu ir mankšta būtų grupė be naujumo, socialinio kontakto ar mankštos, IC būklė. IC žiurkėms pasireiškia mažiau lėtinio streso požymių nei EB žiurkėms. Tiksliau, EB žiurkėms yra padidėję antinksčiai (Mlynarik ir kt., 2004), neryškūs CORT atsakai (Stairs ir kt., 2011), susilpnino tiesioginę ir ankstyvą genų indukciją (Zhang ir kt., rankraštis ruošiamas) ir ΔFosB kaupimąsi (Solinas ir kt., 2009; Lobo ir kt. 2013), visi lėtinio streso požymiai (Crofton ir kt., apžvalgoje).

Psichologinis stresas

Praturtintos ir izoliuotos žiurkės buvo dedamos į vienkartinius minkštus plastikinius graužikų suvaržymus (DecapiCone®, Braintree Scientific Inc., MA, JAV) 60 minučių 1 dienai (ūmiai) arba 9 dienoms (pakartotinai). Atliekant trumpo poveikio mRNR testus, 30 žiurkių (5 žiurkės grupėje) buvo nupjautos praėjus 30 minučių nuo paskutinio suvaržymo streso laikotarpio pradžios, žiurkių smegenys buvo išskirtos ir NAc išpjaustytas mRNR analizei. Imunohistochemijai 12 žiurkių buvo perfuzuotos fiziologiniu tirpalu ir 4% paraformaldehidu, smegenys ekstrahuotos, fiksuotos 4% paraformaldehidu ir laikomos 20% glicerolyje 1xPBS 4 °C temperatūroje. Žiurkių smegenys buvo supjaustytos 40 μm griežinėliais užšaldomu mikrotomu. Smegenys buvo nuimamos praėjus 24 valandoms po galutinio streso, kad viso ilgio FosB baltymas galėtų suskaidyti (Perrotti ir kt., 2008).

Intraveninis kokaino vartojimas, praturtinant aplinką

Intraveninis kateterio implantavimas

Žiurkės buvo anestezuotos naudojant ketaminą (100 mg / kg IP) ir ksilaziną (10 mg / kg IP), o Silastic kateteris buvo įdėtas ir pritvirtintas į jungo veną, išeinant iš gyvūno nugaros odos. Kiekvieną dieną kateteriai buvo infuzuojami 0.1 ml sterilaus fiziologinio tirpalo, kurio sudėtyje yra heparino (30.0 V/ml), penicilino G kalio (250,000 8000 V/ml) ​​ir streptokinazės (XNUMX TV/ml), kad būtų išvengta infekcijos ir išlaikytas kateterio praeinamumas visą laikotarpį. eksperimentų.

Savarankiškas kokaino vartojimas su aplinkos gerinimu

Dvidešimt praturtintų ir 20 izoliuotų žiurkių buvo patalpintos į 30 × 24 × 21 cm operacines kameras (Med-Associates, St. Albans, VT) ir leista paspausti kokaino infuzijos svirtį (0.5 mg/kg/infuzija, NIDA vaistų tiekimas, Tyrimų trikampio institutas, NC, JAV) arba fiziologinis tirpalas pagal fiksuoto santykio 1 (FR1) grafiką 2 valandas per dieną iš viso 14 dienų. Siekiant išlaikyti panašų kokaino suvartojimą tarp EB ir IC grupių, per seansą buvo suleidžiama daugiausia 30 infuzijų. Audinių apdorojimo pajėgumas buvo apribotas iki 30 mėginių, todėl mažiausiai reaguojančios žiurkės iš kiekvienos grupės nebuvo apdorotos, todėl kokaino grupėms liko 8, o fiziologinio tirpalo grupėms – 7. Taigi, tarp EB ir IC žiurkių bendro kokaino suvartojimo ar infuzijų trukmės EB / IC skirtumų nebuvo. Žiurkių smegenys buvo išskirtos praėjus 3 valandoms nuo paskutinės savarankiško vartojimo sesijos pradžios, o NAc buvo išpjaustytas mRNR ir baltymų analizei. Viena NAc pusė buvo naudojama Western blot, kita pusė naudojama qPCR.

Neatsižvelgiant į sąlyginį kokaino vartojimą su aplinkos gerinimu

Tiesioginiam palyginimui su anksčiau paskelbta literatūra (Hope ir kt., 1994; Chen ir kt. 1995), EB (N = 12) ir IC žiurkės (N = 12) buvo švirkščiama fiziologinio tirpalo arba 20 mg/kg kokaino intraperitoniniu būdu (IP) 1 dieną (ūmus) arba 9 dienas (pakartotinai). Apdorojant buvo prarastas vienas EB mėginys. Ūminė grupė gavo fiziologinio tirpalo injekcijas 8 dienas ir vieną kokaino injekciją 9 dieną, todėl visos žiurkės gavo tiek pat injekcijų. Smegenys buvo ekstrahuotos praėjus 30 minučių po paskutinės injekcijos, o NAc išpjaustytas mRNR analizei.

MRNR kiekybinis nustatymas naudojant qPCR

RNR buvo ekstrahuota homogenizuojant RNR STAT-60 (Teltest, Friendswood, TX), atskiriant RNR nuo DNR ir baltymų naudojant chloroformą ir nusodinant visą RNR izopropanoliu. Užteršianti DNR buvo pašalinta (TURBO DNA-Free, Life Technologies, CA, JAV) ir 5 ug išgrynintos RNR buvo atvirkštinė transkribuota į cDNR (SuperScript III First Strand Synthesis: Invitrogen katalogas Nr. 18080051). ΔFosB mRNR buvo kiekybiškai įvertinta naudojant kiekybinę realaus laiko PGR (SYBR Green: Applied Biosystems, Foster City, CA) Applied Biosystems 7500 greitajame termocikleryje su pradmenimis, skirtais aptikti tik ΔFosB (pirmyn: AGGCAGAGCTGGAGTCGGAACCCG; suprojektuotas normalizuotas GACTCGATGACG) aptikti žiurkės GAPDH (pirmyn: AACGACCCCTTCATTGAC; atvirkščiai: TCCACGACATACTCAGCAC). Prieš eksperimentus visi pradmenys buvo patvirtinti ir išanalizuoti dėl specifiškumo ir tiesiškumo (Alibhai ir kt., 2007).

Vakarų dėmė

Dešinė kokainą arba fiziologinį tirpalą vartojančių EC ir IC žiurkių NAc pusė buvo homogenizuota buferyje, kuriame yra sacharozės, Hepes buferio, natrio fluorido, 10% SDS ir proteazės bei fosfatazės inhibitorių (Sigma-Aldrich: P-8340, P). -2850, P-5726). Baltymų koncentracija buvo įvertinta naudojant Pierce BCA Protein Assay Kit (Thermo Scientific, IL, JAV). Kadangi iš vienos žiurkės išgautų baltymų nepakako analizei, 2 tos pačios grupės mėginiai buvo sujungti ir kiekvienai grupei buvo gauti 4 mėginiai. Baltymų mėginiai buvo denatūruojami 95° temperatūroje 5 min. ). Membrana buvo užblokuota blotingo laipsnio blokatoriumi (neriebiu sausu pienu), inkubuojama su ΔFosB pirminiu antikūnu (triušis, 10:20, #1, Cell Signaling Technology, MA, JAV) ir β-aktino pirminiu antikūnu (pelė, 1000:2251). , Cell Signaling Technology, MA, JAV), plaunamas TBST ir inkubuojamas su fluorescenciniais antriniais antikūnais (asilo anti-triušis (1 nm), asilas prieš pelę (1000 nm), 780:680, Li-Cor Biosciences, NE, JAV). Tada buvo vaizduojami Western blotai (Odyssey, Li-Cor Biosciences, NE, JAV) ir baltymų kiekis buvo kiekybiškai įvertintas naudojant Odyssey programinę įrangą.

Imunohistochemistry

Figūrai Figure11 (N = 3), ląstelės, kuriose yra ΔFosB, buvo vizualizuotos ir suskaičiuotos imunohistocheminiu būdu ženklinant ΔFosB NAc griežinėliais, nudažytuose DAB (DAB peroksidazės substrato rinkinys, Vector Laboratories, CA, JAV). Smegenys buvo ekstrahuotos, fiksuotos, apsaugotos nuo krio ir suskirstytos į 40 μm griežinėlius, turinčius NAc ant slankiojančio užšaldymo mikrotomo (Leica Biosystems, IL, JAV). Pjūviai liko plūduriuoti ir buvo nuplauti 1xPBS prieš gesinant endogenines peroksidazes, prieš blokuojant 3% normaliu ožkos serumu (Jackson ImmunoResearch, PA, JAV) su 0.3, 1% tritonu ir avidinu D (Vector Laboratories, CA, JAV). NAc griežinėliai buvo inkubuojami su FosB pirminiu antikūnu per naktį (1000:3, Santa Cruz Biotechnology, Dalasas, TX, JAV) su 0.3% ožkos serumu, 1% tritonu, 24xPBS ir biotino tirpalu (Vector Laboratories, CA, JAV). Nors šis antikūnas atpažįsta ir FosB, ir ΔFosB, ankstesni Western blot tyrimai parodė, kad praėjus 24 valandoms po stimuliacijos didžiąją imunohistocheminio signalo dalį sudaro ΔFosB, nes FosB suyra gerokai prieš XNUMX valandas (Perrotti ir kt., 2008). Po plovimo griežinėliai buvo inkubuojami su biotiniluotu ožkos anti-triušio antriniu antikūnu IgG (Vector Laboratories, CA, JAV), ožkos serumu ir 1xPBS. Tada griežinėliai 15 minučių buvo inkubuojami su avidino-biotino komplekso (ABC) peroksidazės dėme (Thermo Scientific, IL, JAV). Galiausiai, griežinėliai buvo sumontuoti, dehidratuoti naudojant etanolį ir CitriSolv (Fischer Scientific, MA, JAV) ir padengti DPX (Fisher Scientific). Ląstelių skaičiavimui iš kiekvieno gyvūno buvo paimti mėginiai nuo Bregma +1.80 iki +1.44. Bendras ΔFosB imunopozityvių ląstelių skaičius buvo skaičiuojamas iš keturių NAc sekcijų iš kiekvienos žiurkės šerdies ir apvalkalo.

1 pav  

stresas ir [prieaugis]FosB EB ir IC žiurkėse. (REKLAMA) Reprezentatyvus imunohistocheminis DAB dažymas ΔFosB NAc apvalkale ir IC šerdyje (A ir B) ir EB (C ir D) žiurkės su (B ir D) ir be (A ir C) pasikartojantis stresas (N = 3). (E) Kiekybinis nustatymas ...

Pernelyg didelis su adenovirusu susijęs virusas [prieaugis]FosB

AAV2 pagrindu sukurtas vektorius, išreiškiantis ΔFosB ir humanizuotą renilės GFP (hrGFP; Winstanley ir kt., 2007, 2009a,b) arba hrGFP valdymo vektorius (N = po 10) buvo sušvirkšta abipusiai į žiurkės NAc. Kadangi nėra IC žmonių, šiame tyrime vietoj IC žiurkių buvo naudojamos porose laikomos žiurkės, siekiant padidinti svarbą mokslo bendruomenei, įrodant ΔFosB poveikį. nepriklausomas EB/IC paradigma. Kaip kontrolė buvo naudojamas AAV, išreiškiantis hrGFP, bet nepersistengiantis ΔFosB. ΔFosB išraiška in vivo buvo patvirtintas imunofluorescenciniu dažymu FosB pirminiu antikūnu (1:200, Rabbit, Cell Signaling Technology, MA, JAV). AAV vektoriai buvo švirkščiami į NAc apvalkalą abipusiai (1 μl / pusėje per 10 min.), naudojant koordinates (AP = 1.7, L = 2.0, D = −6.5). Elgesio testai pradėti praėjus 3 savaitėms po stereotaksinės operacijos. Tiksli vieta buvo nustatyta imunohistochemiškai po elgesio tyrimo pabaigos.

Sacharozės neofobija

ΔFosB per daug ekspresuojančios žiurkės (N = 10) ir kontrolinės žiurkės (N = 8) buvo tvarkomi 1 savaitę iki elgesio testų pradžios. Siekiant patikrinti, ar elgesys yra panašus į nerimą, žiurkėms buvo įvertintas neofobijos skonis (sacharozė). Žiurkės buvo atskirtos į atskirus narvus ir vanduo pašalintas 1600 val. Standartiniai žiurkių vandens buteliai buvo pripildyti 1% w/v sacharozės tirpalo įprastu žiurkių „čiaupo“ vandeniu ir pasverti prieš dedant į kiekvieną narvą 1800 val. Po 30 minučių buteliai buvo išimti ir pakartotinai pasverti bei apskaičiuotas sacharozės butelių svorio skirtumas prieš ir po tyrimo. Tada sacharozė buvo pakeista narvuose dar 2 dienas, kad žiurkės susipažintų su sacharozės skoniu prieš atliekant sacharozės pirmenybės testą.

Padidėjęs plius labirintas

Kitas į nerimą panašaus elgesio testas, padidėjęs plius labirintas (EPM), buvo išbandytas praėjus 2 dienoms po sacharozės neofobijos. EPM matuoja vektorių modifikuotą tiriamąjį elgesį naujoje ir nerimą sukeliančioje aplinkoje (Green ir kt., 2008). Dvi uždaros ir dvi atviros rankos (Med Associates Inc., VT, JAV), kurių matmenys 12 × 50 cm, buvo 75 cm virš grindų ir turėjo fotospindulius prie kiekvienos rankos įėjimo. Laikas, praleistas ant atvirų rankų, buvo stebimas 5 minutes fotospindulių pertraukomis naudojant Med-PC programinę įrangą.

Šalčio streso sukeltas tuštinimasis

Kitą dieną po EPM buvo atliktas trečiasis nerimo testas: tuštinimasis reaguojant į nežymiai įtemptą aplinką (šaltį). Polikarbonato pelės narvai (33 × 17 × 13 cm) buvo iš anksto atšaldyti ant ledo 10 minučių. Žiurkės buvo dedamos į narvus ant ledo 30 minučių, o išmatų skaičius buvo registruojamas kas 5 minutes.

Socialinis kontaktas

Kitą dieną į depresiją panašus elgesys buvo matuojamas naudojant socialinės sąveikos testą. Žiurkės buvo atskirtos 24 valandas prieš tyrimą. Bandymo dieną žiurkės buvo patalpintos į naują aplinką (plastikinis indas, 45 × 40 × 45 cm) su narvelio draugu, o elgesys buvo užfiksuotas 30 minučių. Laiką, kurį žiurkių pora praleido tvarkydamos viena kitą, išmatavo tyrėjas, nematantis žiurkių būklės.

Sacharozės pirmenybė

Po socialinio kontakto sacharozės pirmenybės testas buvo naudojamas kaip anhedonijos modelis. Porose laikomos žiurkės buvo atskirtos 1600 val. su maistu, bet neleista prieiti prie vandens 2 valandas. 1800 val. ant kiekvieno narvelio buvo dedami du iš anksto pasverti vandens buteliai, kurių viename buvo vanduo, kitame - 1% sacharozės tirpalas vandenyje. Vandens buteliai buvo padėti įprastoje padėtyje, o sacharozė buvo dedama maždaug 10 cm atstumu. Buteliai buvo išimti ir vėl pasverti po 15 min.

Lokomotorinis aktyvumas

Praėjus trims dienoms po sacharozės pasirinkimo, lokomotorinis aktyvumas buvo įvertintas esant normalioms apšvietimo sąlygoms, žiurkes patalpinus į skaidrias plexiglas kameras (40 × 40 × 40 cm) su plonu patalynės sluoksniu, apsuptas dviem 4 × 4 fotospindulių matricomis, viena 4 cm aukščiau. ant žemės ir vieną 16 cm virš žemės, kad būtų fiksuojamas horizontalus judėjimas ir vertikalioji (augimosi) veikla. Fotospindulių pertraukos buvo stebimos 2 valandas modifikuota atviro lauko veiklos sistema (San Diego Instruments, CA, JAV).

Priverstinis plaukimo bandymas

Paskutinis spontaniškas elgesio testas buvo FST, antidepresantams jautrus modelis. Žiurkės buvo dedamos į plexiglas cilindrą, užpildytą maždaug 14 l kambario temperatūros (24 ± 0.5 °) vandens, 15 minučių 1 seanso metu ir 5 minutes 2 seansą kitą dieną. Žiurkės buvo išdžiovintos ir grąžinamos į savo namų narvus. Plaukimo veikla buvo užfiksuota vaizdo įrašu, o tyrėjas, apakęs nuo sąlygų, 1 seansui nustatė delsą iki pirmojo nejudrumo laikotarpio (2 s) ir bendrą nejudėjimo laiką.

Sacharozės operantas reaguoja

Kontrolinės AAV žiurkės ir ΔFosB per daug ekspresuojančios žiurkės buvo reguliuojamos iki 85% laisvai maitinamo svorio per 7 dienas. Visos žiurkės buvo mokomos spausti sacharozės granules (Bio-Serv, NJ, JAV) pagal FR1 sutvirtinimo grafiką 15 minučių seansus 5 dienas iš eilės. Tada žiurkėms buvo suteikta laisva prieiga prie maisto 3 dienas ir vėl leista 1 minučių spausti sacharozės granules pagal FR15 grafiką, šį kartą 100% pašarų svorio.

Kokaino savęs administravimas

Įsigijimas

Praėjus vienai savaitei po kateterio operacijos (kaip aprašyta aukščiau), visos žiurkės (7 kontrolinės žiurkės ir 10 ΔFosB per daug ekspresuojančių žiurkių, po kateterio operacijos buvo prarasta viena kontrolinė žiurkė) buvo patalpintos į 30 × 24 × 21 cm operacines kameras (Med-Associates, St. Albans, VT) ir leista pačiam leisti 0.2 mg/kg/infuzijos vieneto kokaino dozę 2 valandas per seansą 4 dienas; tada 0.5 mg/kg/infuzija 3 dienas pagal FR1 grafiką. Kiekviena infuzija buvo švirkščiama į veną 0.01, 5.8 ml tūrio per 20, XNUMX s. Apie infuziją buvo pranešta XNUMX s užsidegus dviem signalinėmis lemputėmis, kurios rodė skirtąjį laikotarpį, per kurį daugiau infuzijų nebuvo galima atlikti.

Gesinimas

Kadangi lėtinis kokaino poveikis greičiausiai paskatintų ΔFosB kaupimąsi kontrolinėse žiurkėse, dėl kurių abiejose vektoriaus sąlygomis žiurkių smegenyse būtų didelis ΔFosB kiekis, žiurkės buvo uždarytos į savo namų narvus 4 dienas be savęs. ΔFosB baltymo lygis sumažės kontrolinių vektorių žiurkėms. Po 4 dienų abstinencijos žiurkės buvo patalpintos į operacinę kamerą ir joms leista savarankiškai leisti fiziologinį tirpalą vietoj kokaino pagal FR1 grafiką 1 valandos seansus 3 dienas iš eilės.

Fiksuoto santykio dozės atsakas

Kiekvienai žiurkei (kontrolinei ir ΔFosB per daug ekspresuojančiai) buvo leista savarankiškai leisti 0.00325, 0.0075, 0.015, 0.03, 0.06, 0.125, 0.25, 0.5 mg/kg per infuziją kokaino didėjančia tvarka FR1 dienas iš eilės. Žiurkės kiekvieną kokaino dozę vartojo pačios 5 min.

Kokaino sukeltas atkūrimas

Žiurkėms per sesiją buvo atlikta atkūrimo procedūra. Žiurkės gavo 0.5 mg/kg/kg infuziją pagal FR1 grafiką 60 min., po to 3 valandas išnyko (su atsitiktiniais kokaino signalais). Tada jie gavo IP injekciją (Green ir kt., 2010) viena iš penkių kokaino dozių (0, 2.5, 5, 10 arba 20 mg/kg) atsitiktine tvarka kiekvienai žiurkei per 5 atkūrimo seansus. Paskutinį 3 valandų seanso etapą buvo atnaujintas atsakas, vėlgi su kokaino signalais, bet vis tiek be kokaino infuzijų. Po kiekvieno kokaino sukelto atkūrimo seanso žiurkės 2 dienas gaudavo didelės dozės (0.5 mg/kg/infuzijos) kokaino pagal FR1 grafiką 2 val. Savarankiško kokaino vartojimo metu kai kurių žiurkių kateteriai palaipsniui prarado pralaidumą; todėl šioje analizėje buvo naudojami 6 kontrolinių žiurkių ir 7 ΔFosB per daug ekspresuojančių žiurkių duomenys.

Statistinė analizė

Dviejų krypčių dispersijos analizė (ANOVA) ir dvipusė kartotinių matavimų ANOVA buvo atlikta siekiant palyginti keturias gydymo grupes, o planiniai palyginimai buvo naudojami skirtumams tarp sąlygų palyginti. Tik dviejų sąlygų reikšmė buvo analizuojama naudojant Studento t-testas. Viskas t-testo duomenys išlaikė Shapiro-Wilk normalumo testą. Visi duomenys išreiškiami kaip vidurkis ± SEM. Statistinis reikšmingumas buvo nustatytas ties p < 0.05. Visos praturtintos žiurkės vienam eksperimentui buvo laikomos viename narve, bet laikomos atskirais subjektais, o tai turėjo įtakos galimos pseudoreplikacijos klausimui.

rezultatai

EB žiurkėms būdingas didesnis bazinis lygis [prieaugis]FosB NAc nei IC žiurkės

Palyginti su IC žiurkėmis, EC žiurkės turi žymiai didesnį ΔFosB teigiamų ląstelių skaičių abiejose NAc šerdyje (t(4) = −3.31, p < 0.05) ir apvalkalu (t(4) = −6.84, p < 0.05) (Skaičiai 1A, C, E, F), tai rodo, kad bazinis ΔFosB tonas yra didesnis EB žiurkėms, palyginti su IC žiurkėmis. Be to, Western blot rezultatai parodė stiprią tendenciją EB druskos žiurkėms, turinčioms didesnį bazinį ΔFosB baltymo kiekį NAc, palyginti su IC druskos žiurkėmis (t(6) = −2.03, p = 0.089; Pav Fig. 2A) 2A) naudojant dvipusį testą. Tačiau atsižvelgiant į padidintą išraišką paveiksluose 1A–F ir padidėjimas, pastebėtas kituose dokumentuose (Solinas ir kt., 2009), esame įsitikinę šiuo efektu. Western blot rezultatai taip pat patvirtina, kad beveik visas į FosB panašus imunoreaktyvumas, nustatytas imunohistochemijos būdu, buvo ΔFosB, o ne FosB, kuris nebuvo aptiktas 24 val.

2 pav  

Kokainas ir [prieaugis]FosB EB ir IC žiurkėse. (A–B) Vidutinis ΔFosB baltymas () ir mRNR (B) lygis (± SEM) NAc po 14 dienų fiziologinio tirpalo arba kokaino vartojimo IC ir EC žiurkėms (N = 7–8). Raudonos juostos skydelyje a žymi ...

[prieaugis]FosB yra skirtingai indukuojamas EC ir IC žiurkėms dėl streso

Pakartotinio suvaržymo streso poveikis buvo reikšmingas abiejuose korpusuose (F(1, 8) = 16.6, P <0.005) ir šerdis (F(1, 8) = 7.9, P < 0.05) NAc ir pagrindinis aplinkos sodrinimo poveikis apvalkale (F(1, 8) = 22.3, P < 0.005; Figūros 1A–F). Dar svarbiau, kad streso ir aplinkos sodrinimo sąveika taip pat buvo reikšminga abiejuose apvalkaluose (F(1, 8) = 25.6, P <0.01) ir šerdis (F(1, 8) = 6.7, P < 0.05). Sąveika buvo tokia, kad po pakartotinio suvaržymo streso ΔFosB teigiamų ląstelių skaičius žymiai padidėjo IC žiurkėms, o EC žiurkėms šis skaičius nepasikeitė po pakartotinio streso.

Toliau tirti, kaip ΔFosB yra dinamiškai reguliuojamas ūminio ar pasikartojančio streso, ir leisti palyginti su ankstesniais tyrimais (Alibhai ir kt., 2007), ΔFosB indukcija iRNR buvo tiriamas su ūminiu ir pakartotiniu suvaržymo stresu (pav (1G pav.).1G). Buvo reikšmingas pagrindinis streso poveikis (F(2, 24) = 31.9, P < 0.001) ir aplinkos sodrinimas (F(1, 24) = 5.1, P < 0.05). IC žiurkėms ΔFosB mRNR buvo stipriai sukelta po ūminio suvaržymo streso. Tačiau, esant pakartotiniam stresui, ΔFosB mRNR indukcija buvo žymiai susilpnėjusi, palyginti su ūmia indukcija. Taip pat įvyko reikšminga sąveika (F(2, 24) = 4.6, P < 0.05, XNUMX), įrodant, kad ūminė ΔFosB mRNR indukcija EB žiurkėms buvo mažesnė, palyginti su IC žiurkėmis. Taigi, EB žiurkės turi aukštesnį bazinį ΔFosB lygį baltymų NAc, bet mažiau ΔFosB iRNR indukcija reaguojant į ūminį stresorių.

[prieaugis]FosB skirtingai indukuoja kokainas EC ir IC žiurkių NAc

Norėdami nustatyti, ar EC ir IC žiurkės skirtingai reaguoja į kokainą, ištyrėme ΔFosB baltymo ir mRNR reguliavimą žiurkės NAc po kokaino vartojimo (paveikslai 2A, B atitinkamai). Western blot atskleidė reikšmingą pagrindinį kokaino poveikį (F(1, 12) = 24.9, P < 0.001) ir reikšminga sąveika (F(1,12) = 5.5, P < 0.05). Sąveika buvo tokia, kad ΔFosB IC žiurkėms padidėjo daugiau nei EC žiurkėms (Pav (Figure2A) .2A). Tiesą sakant, po kokaino savarankiško vartojimo ΔFosB baltymų kiekis buvo žymiai padidėjęs tik IC žiurkėse. Kalbant apie mRNR lygį, qPCR rezultatai taip pat atskleidė reikšmingą pagrindinį kokaino poveikį (F(1, 26) = 47.1, P < 0.001) ir pagrindinis aplinkos sodrinimo poveikis (F(1, 26) = 13.8, P < 0.005). Nors bendras lygis buvo mažesnis EB žiurkėms, abi grupės padidino ΔFosB mRNR (Pav (Figure2B2B).

Nors baltymų duomenys patvirtino pradinę hipotezę, ji buvo iškelta iš paveikslo ​1G1G pav kad EB žiurkės parodytų mažiau iRNR indukcija nei izoliuotos žiurkės aukščiau minėtame kokaino eksperimente, o tai neįvyko, greičiausiai todėl, kad pav ​1G1G pav naudojo 30 minučių laiko tašką, o kokaino eksperimente – 3 valandų laiko tašką. Norint toliau tirti mRNR hipotezę, buvo naudojamas 30 minučių laiko taškas, skirtas ištirti tiek ūminį, tiek pakartotinį gydymą kokainu, kaip geriau palyginti su paveikslu. ​1G.1G pav. Kadangi ūminis kokaino vartojimas savaime yra problemiškas (ty mokymasis įgyti), EC ir IC žiurkėms buvo suleistos ūminės arba 9 dienas pakartotinės neapibrėžtos kokaino IP injekcijos (20 mg/kg). Kaip buvo iškelta hipotezė, buvo reikšmingas pagrindinis aplinkos sodrinimo poveikis (F(1, 17) = 14.3, P < 0.005), tačiau pagrindinis gydymo kokainu poveikis (F(2, 17) = 3.4, P = 0.057) ir sąveika (F(2, 17) = 3.4, P = 0.055) rodė stiprias tendencijas tik naudojant dvipusį testą. Tačiau, atsižvelgiant į tai, kad iš paveikslo turėjome krypties hipotezes ​1G, 1G pav, mums labai patogu manyti, kad EB žiurkės turi mažesnę indukciją nei IC žiurkės (pav. (Figure2C2C).

Per didelis raiška [prieaugis]FosB NAc apvalkale imituoja apsauginį sodrinimo sukeltą priklausomybės fenotipą

Norint ištirti ΔFosB poveikį žiurkių elgsenai, nepriklausomai nuo aplinkos sodrinimo / izoliacijos (ty, kad šie rezultatai būtų labiau tinkami ne EB / IC tyrimams), buvo naudojamas adeno-associated virusas (AAV), kad per daug ekspresuotų ΔFosB dvišalėje NAc. neprisodrintos porose laikomos žiurkės. Remiantis mūsų ankstesniais tyrimais, NAc apvalkalas yra jautriausias kontroliuojant su depresija ir narkotikų vartojimu / ieškojimu susijusią elgseną, todėl šiame tyrime AAV vektoriai buvo švirkščiami į NAc apvalkalą (Green ir kt., 2006, 2008, 2010). Figūros 3A, B parodykite reprezentatyvią ΔFosB imunohistofluorescenciją su kontroliniu vektoriumi (A skydelis; ty endogeninė ΔFosB ekspresija) ir ΔFosB per daug ekspresuojančiu vektoriumi (B skydelis) NAc apvalkale.

3 pav  

Per didelis raiška [prieaugis]FosB NAc apvalkale imituoja apsauginį priklausomybės fenotipą dėl aplinkos sodrinimo. (A–B) Tipinė ΔFosB imunohistochemija hrGFP kontrolei () ir ΔFosB per daug ekspresuoja (B) AAV vektoriai. ...

Patvirtinus titrą, in vivo raiška ir bendras virusinio vektoriaus išdėstymas, pirmiausia ištyrėme ΔFosB per didelės ekspresijos poveikį nerimo modeliuose. Per didelė ΔFosB ekspresija NAc apvalkale nebuvo pakankama, kad būtų atkurtas nerimą sukeliantis aplinkos sodrinimo poveikis sacharozės neofobijos ir šalto streso sukeltos tuštinimosi paradigmose. (duomenys neskelbtini). Be to, nebuvo jokio poveikio EPM (duomenys nerodomi). Kadangi aplinkos sodrinimas žiurkėms sukelia į antidepresantus panašų poveikį, mes atlikome su depresija susijusius tyrimus su ΔFosB per daug ekspresuojančiomis žiurkėmis. Panašiai kaip ir nerimo modeliai, rezultatai parodė, kad per didelis ΔFosB ekspresavimas NAc apvalkale nebuvo pakankamas, kad būtų sumažintas į depresiją panašus elgesys sacharozės pasirinkimo teste, socialinės sąveikos teste arba FST. (duomenys neskelbtini).

Aplinkos sodrinimo paradigmoje EB žiurkės pasižymi mažesniu baziniu lokomotoriniu aktyvumu nei IC žiurkės (Bowling ir kt., 1993; Boulingas ir Bardo, 1994; Smith et al., 1997; Green et al., 2003, 2010). Norint ištirti pernelyg didelio ΔFosB ekspresijos poveikį NAc apvalkale, spontaniškas lokomotorinis aktyvumas buvo išbandytas 120 min. Naudojant dvipusį testą, rezultatai atskleidė, kad per didelis ΔFosB ekspresija NAc apvalkale sukėlė stiprią žiurkių bazinio lokomotorinio aktyvumo sumažėjimo tendenciją (pav. (3C pav.; 3C pav; t(16) = 1.84, p = 0.084). Nepaisant to, kad naudojant dviejų krypčių testą jie nėra statistiškai reikšmingi, šie duomenys vis dar yra intriguojantys, atsižvelgiant į tai, kad jie atitinka mūsų aiškią krypties hipotezę, pagrįstą Green ir kt. (2010), o tai atitinka aplinkos sodrinimo poveikį.

IPriešingai nei depresijos ir nerimo modeliai, per didelė ΔFosB ekspresija NAc apvalkale galėjo sukurti į EB panašų fenotipą daugelyje priklausomybės / sustiprinimo paradigmų. ašSacharozės granulių operantinio savarankiško vartojimo teste buvo reikšminga sąveika tarp ΔFosB per didelės ekspresijos ir žiurkių alkio motyvacijos (F(1, 16) = 7.4, P < 0.01). Žiurkės, per daug ekspresuojančios ΔFosB NAc apvalkale, gerokai užtruko daugiau sacharozės granulės esant bado sąlygoms (ty esant 85 % laisvo pašaro kūno svorio), bet mažiau granulių esant mažai motyvuotoms sąlygoms (ty 100 % laisvo pašaro svorio; pav. 3D pav.), 3D), kuris puikiai imituoja EB fenotipą (Green ir kt., 2010).

Aplinkos sodrinimo paradigmoje EB žiurkėms pasireiškė sumažėjęs kokaino ieškantis elgesys išnykus ir kokaino sukeltas atkūrimas. (Green ir kt., 2010). Taigi, kokaino vartojimo ir ieškojimo elgesys buvo matuojamas ΔFosB ekspresuojančioms žiurkėms, naudojant intraveninio kokaino savarankiško vartojimo paradigmą. Kaip potraukio modelis, kokaino išnykimo paradigma atskleidė, kad per didelis ΔFosB ekspresija NAc apvalkale sumažino narkotikų ieškojimo elgesį.r (F(1, 15) = 6.7, P <0.05; Pav ​3E pav.).3E). Taip pat buvo reikšmingas pagrindinis seanso poveikis (F(2, 30) = 74.0, P < 0.001). Esant palaikomajam atsakui pagal FR1 grafiką, buvo reikšmingas pagrindinis dozės poveikis (F(7, 105) = 222.6, P < 0.001) ir reikšminga sąveika (F(7, 105) = 2.3, P < 0.05) vartojant kokainą. Sąveikos pobūdis buvo toks, kad skirtumai buvo akivaizdūs tik vartojant didesnes kokaino dozes (Pav (3F pav.).3F). Galiausiai, atkuriant kokaino sukeltą dozę, buvo reikšmingas pagrindinis dozės poveikis (F(4, 44) = 15.5, P < 0.001) ir pagrindinio ΔFosB per didelės ekspresijos poveikio tendencija naudojant dvipusį testą (F(1, 11) = 4.1, P = 0.067). Tačiau, atsižvelgiant į kryptinę hipotezę iš Green ir kt. (2010) ir statistiškai reikšmingus bei nuoseklius rezultatus pav 3D, E, F, tikėtina, kad ΔFosB sumažina atkūrimą (Pav (3G pav.).3G). ΔFosB ekspresuojančių žiurkių atsakas į 10 mg/kg dozę buvo žymiai mažesnis. Visi rezultatai rodo, kad per didelis ΔFosB ekspresija žiurkių NAc apvalkale sumažina kokaino vartojimo ir ieškojimo elgesį, o tai atitinka aplinkos praturtėjimo poveikį elgsenai.

Diskusija

Asmenų pažeidžiamumą priklausomybei ir depresijai labai veikia aplinkos veiksniai. Aplinkos sodrinimas yra paradigma, kuri manipuliuoja gyvūnų gyvenamąja aplinka ir sukuria apsauginį poveikį nuo daugelio psichikos būklių. ΔFosB vaidina pagrindinį vaidmenį reguliuojant atlygio funkciją keliuose smegenų regionuose, įskaitant NAc ir nugaros striatumą (Koob ir kt., 1998; Išminčius, 1998; Wallace ir kt. 2008; Grueter ir kt. 2013; Pitchers ir kt. 2013). Šiame projekte mes ištyrėme dinaminį ΔFosB reguliavimą suvaržymo stresu ir kokainu praturtintose ir izoliuotose žiurkėse. Pagrindinės šio projekto išvados yra:

(1) EB žiurkėms buvo padidėjęs ΔFosB lygis NAc pradžioje, palyginti su IC žiurkėmis;

(2) tik IC žiurkės kaupia papildomą ΔFosB baltymą su pasikartojančiu stresu;

(3) EB žiurkėms pasireiškia susilpnėjusi ΔFosB mRNR indukcija po streso ar kokaino; ir

(4) per didelis ΔFosB ekspresija porose laikomų žiurkių NAc imituoja apsauginės priklausomybės fenotipą, bet ne apsauginės depresijos fenotipą.

Galima tikėtis iš paskelbtos literatūros, kuri rodo, kad transgeninės ΔFosB per daug ekspresuojančios pelės yra jautresnės kokaino atlygiui ir savarankiškam vartojimui mažomis vaistų dozėmis.Kelzas ir kt., 1999; Colby ir kt. 2003; Vialou ir kt. 2010; Robison ir kt. 2013), kad ΔFosB per daug ekspresuojančios žiurkės dabartiniame eksperimente parodytų didesnį polinkį savarankiškai vartoti kokainą ir ieškoti. ITačiau dabartiniuose eksperimentuose per didelis ΔFosB ekspresija NAc apvalkale sumažino kokaino suvartojimą ir kokaino ieškojimą išnykimo ir atkūrimo metu, o tai rodo sumažėjusią kokaino motyvaciją. Neatitikimas gali atsirasti dėl to, kad transgeninės pelės išreiškė ΔFosB visame striatum, bet tik dinorfino + ląstelėse (Colby ir kt., 2003). Dabartiniame eksperimente ΔFosB buvo per daug ekspresuojamas per AAV vektorių, kuris užkrečia dinorfino + ir enkefalino + neuronus. Antra, dabartinis tyrimas buvo sutelktas į NAc apvalkalą, o ne į visą striatalinį regioną.

Be priklausomybės fenotipo, aplinkos sodrinimas žiurkėms sukuria antidepresantus ir anksiogeninius profilius. (Green ir kt., 2010; Vialou ir kt. 2010). Dabartiniame tyrime per didelis ΔFosB ekspresija NAc nesukėlė jokio poveikio nė viename iš trijų depresijos ar trijų nerimo testų.. Nors yra daug galimų veiksnių, galinčių prisidėti prie to, kad ΔFosB imituoja priklausomybę nuo praturtėjimo, bet ne depresijos fenotipą, gali būti, kad NAc apvalkalas yra labiau dominuojantis su priklausomybe susijusiam elgesiui, o su depresija susijusį elgesį gali tvirčiau tarpininkauti kiti regionai. Dabartinės išvados prieštarauja tyrimams pelės kai ΔFosB per didelė ekspresija NAc (kur negalima patikimai atskirti apvalkalo ir šerdies) keliuose elgesio tyrimuose sukėlė stiprų į antidepresantą panašų poveikį (Vialou ir kt., 2010). Viena iš galimų priežasčių yra ta, kad gali būti lengviau pamatyti ΔFosB poveikį dideliems streso elgesio modeliams, tokiems kaip socialinis pralaimėjimo stresas. Dabartinis pernelyg didelės ekspresijos tyrimas ištyrė į depresiją panašus elgesys, kai nėra stipraus stresoriaus.

Nuosekliai viso šio tyrimo metu aukštas bazinis ΔFosB lygis (pvz., dėl sodrinimo, pakartotinio streso ar kokaino) koreliavo su silpnesne vėlesne ΔFosB indukcija. Tai gali reikšti lubų efektą, kai dėl padidėjusio bazinio baltymo kiekio tolimesnė indukcijos negalima. Taip pat gali būti, kad sukaupti ΔFosB kiekiai gali grįžti atgal, kad slopintų tolesnę ΔFosB mRNR indukciją po streso arba kokaino kaip neigiamo grįžtamojo ryšio kilpą. Pavyzdžiui, EC žiurkėms buvo didelis ΔFosB kiekis ir susilpnėjo ΔFosB indukcija po streso ar kokaino. Tai pabrėžia neigiamą koreliaciją tarp ΔFosB baltymų lygio ir jo mRNR indukcijos. Neigiamas sukaupto ΔFosB grįžtamasis ryšys taip pat lemia susilpnėjusią ΔFosB indukciją su pasikartojančiu stresu IC žiurkėms.

Kad būtų aišku, mes neteikiame jokių tvirtinimų, kad aplinkos praturtinimo paradigma turi tiesioginę transliacinę reikšmę, nes labai mažai vaikų, užaugusių tikrame nepritekliuje (reikia pažymėti, kad socialinis ir ekonominis nepriteklius nėra lygus aplinkos nepritekliui). Šios paradigmos naudingumas yra tai, kad tai yra ne narkotikų, nechirurginė, ne genetinė manipuliacija, kuri sukuria apsauginius elgesio fenotipus nuo priklausomybės ir depresijos, kurie gali būti naudojami laboratorijos kontroliuojamoje aplinkoje kaip pagrindinė mokslo priemonė molekuliniams mechanizmams nustatyti. pagrindinis atsparumas psichikos sąlygoms. Ankstesni tyrimai išsamiai apibūdino elgesio fenotipus (Bowling ir kt., 1993; Boulingas ir Bardo, 1994; Bardo ir kt., 1995; Green et al., 2002, 2003; El Rawas ir kt., 2009) ir naujesni tyrimai (Solinas ir kt., 2009; Green et al., 2010; Lobo ir kt. 2013), kartu su dabartiniu tyrimu, pateikia užuominų apie transkripcijos mechanizmus, kuriais grindžiami šie elgesio fenotipai. Šiuo metu tiriami pasroviui esantys transkripcijos tiksliniai genai / baltymai, gaminantys apsauginius fenotipus (Fan ir kt., 2013a,b; Lichti ir kt., 2014).

Mūsų koncepcija apie aplinkos sodrinimą yra ta, kad sodrinimas yra tęstinumas, kai žemesnėje dalyje yra izoliacija, o aukščiausioje - visiškas sodrinimas. “Pilnas“ praturtinimas šiuo atveju apibrėžiamas kaip aplinka, kurioje tiriamieji susiduria su naujumu, nekelia grėsmės socialiniu kontaktu su bendraminčiais, jiems suteikiama erdvė ir objektai mankštai. TVisi šie trys veiksniai yra sudėtinė „sodrinimo“ sąlyga, nes kiekvienas iš jų yra naudingas ir kiekvienas išskiria dopaminą NAc, todėl aktyvuoja bendrą neurobiologinę grandinę. (Louilot ir kt., 1986; Calcagnetti ir Schechteris, 1992; Crowderis ir Hutto, 1992; Rebec ir kt., 1997; Bevins ir kt., 2002). Šiame konceptualizavime izoliacija laikoma kontroline grupe, nes ji reiškia manipuliavimo nebuvimą (ty sodrinimą; Crofton ir kt., apžvalgoje). Tačiau galimos ir kitos konceptualizacijos. Vienoje alternatyvioje konceptualizacijoje kontinuumas yra tas pats, tačiau izoliacinė grupė yra eksperimentinė grupė, o praturtinta grupė yra kontrolinė. aššiuo modeliu, atimant iš tiriamųjų normalų praturtėjimą is tikroji manipuliacija. IŠiuo atveju, užuot sakius, kad praturtėjimas yra apsauginis, galima sakyti, kad izoliacija suteikia jautrumo. Vis dėlto trečioji konceptualizacija teigia, kad nėra tęstinumo ir kad sodrinimas ir izoliacija yra dvi iš esmės skirtingos manipuliacijos. Šiuo požiūriu sodrinimas ir izoliavimas turėtų būti atskirti ir abu lyginami su poroje laikomu kontroliniu. Visuotinio sutarimo dėl sodrinimo pobūdžio trūkumas parodo paradigmos apribojimą, tačiau suteikia kryptį būsimiems tyrimams. Nepaisant to, šių eksperimentų rezultatai išlieka tvirti, nepaisant tolesnio aiškinimo.

Aplinka ir gyvenimo patirtis daro didelę įtaką daugelio psichikos būklių vystymuisi ir raiškai. Apsauginės priklausomybės ir depresijos fenotipų, susijusių su aplinkos praturtėjimu, mechanizmo supratimas sprendžia pagrindinį psichikos sutrikimų tyrimo klausimą – būtent aplinkos indėlį į jautrumą ar atsparumą psichikos ligoms. Šis tyrimas pabrėžia ΔFosB reikšmę reguliuojant su priklausomybe susijusį elgesį. Būsimuose tyrimuose ΔFosB veikimas ir jo aktyvuojantis bei slopinantis poveikis specifiniams tiksliniams genams turi būti toliau tiriamas pagal aplinkos sodrinimo modelį.

Finansavimas ir atskleidimas

Yafang Zhang, nėra; Elizabeth J. Crofton, nėra; Dingge Li, nėra; Mary Kay Lobo, nėra; Xiuzhen Fan, nėra; Ericas J. Nestleris, R37DA007359; Thomas A. Greenas, DA029091.

Interesų konflikto pareiškimas

Autoriai teigia, kad tyrimas buvo atliktas nesant jokių komercinių ar finansinių santykių, kurie galėtų būti laikomi galimu interesų konfliktu.

Padėka

Šie eksperimentai buvo finansuojami iš Nacionalinio piktnaudžiavimo narkotikais instituto DA029091 ir R37DA007359 dotacijos. Kokainas tiekiamas Nacionalinio piktnaudžiavimo narkotikais instituto.

Nuorodos

  1. Akdeniz C., Tost H., Meyer-Lindenberg A. (2014). Šizofrenijos socialinės aplinkos rizikos neurobiologija: besivystanti tyrimų sritis. Soc. Psichiatrija Psichiatras. Epidemiol. 49, 507-517 10.1007/s00127-014-0858-4 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  2. Alibhai IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ (2007). FosB ir DeltafosB mRNR ekspresijos reguliavimas: in vivo ir in vitro tyrimai. Brain Res. 1143, 22–33 10.1016/j.brainres.2007.01.069 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  3. Bardo MT, Bowling SL, Rowlett JK, Manderscheid P., Buxton ST, Dwoskin LP (1995). Aplinkos praturtinimas susilpnina lokomotorinį jautrumą, bet ne in vitro dopamino išsiskyrimą, kurį sukelia amfetaminas. Pharmacol. Biochem. Behav. 51, 397-405 10.1016/0091-3057(94)00413-d [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  4. Bevins RA, Besheer J., Palmatier MI, Jensen HC, Pickett KS, Eurek S. (2002). Naujo objekto vietos kondicionavimas: elgsenos ir dopaminerginiai procesai, išreiškiant naujumo atlygį. Behav. Brain Res. 129, 41–50 10.1016/s0166-4328(01)00326-6 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  5. Bowling SL, Bardo MT (1994). Amfetamino lokomotorinis ir naudingas poveikis praturtintoms, socialinėms ir izoliuotoms žiurkėms. Pharmacol. Biochem. Behav. 48, 459-464 10.1016/0091-3057(94)90553-3 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  6. Bowling SL, Rowlett JK, Bardo MT (1993). Aplinkos sodrinimo poveikis amfetamino skatinamam judėjimo aktyvumui, dopamino sintezei ir dopamino išsiskyrimui. Neurofarmakologija 32, 885-893 10.1016/0028-3908(93)90144-r [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  7. Calcagnetti DJ, Schechter MD (1992). Vietos kondicionavimas atskleidžia naudingą jaunų žiurkių socialinės sąveikos aspektą. Physiol. Behav. 51, 667-672 10.1016/0031-9384(92)90101-7 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  8. Chen J., Nye HE, Kelz MB, Hiroi N., Nakabeppu Y., Hope BT ir kt. (1995). Delta FosB ir FosB panašių baltymų reguliavimas elektrokonvulsiniais traukuliais ir gydymu kokainu. Mol. Pharmacol. 48, 880–889 [PubMed]
  9. Colby CR, Whisler K., Steffen C., Nestler EJ, Self DW (2003). Striatalinių ląstelių tipui būdinga per didelė DeltaFosB ekspresija padidina paskatą kokainui. J. Neurosci. 23, 2488–2493 [PubMed]
  10. Crowder WF, Hutto CW (1992). Operacinės vietos kondicionavimo priemonės ištirtos naudojant du nemedikamentinius stiprintuvus. Pharmacol. Biochem. Behav. 41, 817-824 10.1016/0091-3057(92)90233-6 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  11. Elisei S., Sciarma T., Verdolini N., Anastasi S. (2013). Atsparumas ir depresiniai sutrikimai. psichiatras. Dunojus. 25 (2 priedas), S263–S267 [PubMed]
  12. El Rawas R., Thiriet N., Lardeux V., Jaber M., Solinas M. (2009). Aplinkos sodrinimas sumažina naudingą, bet ne aktyvinantį heroino poveikį. Psychopharmacology (Berl) 203, 561–570 10.1007/s00213-008-1402-6 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  13. Fan X., Li D., Lichti CF, Green TA (2013a). Dinaminė branduolio proteomika, reaguojant į ūminį psichologinį stresą aplinką praturtintose ir izoliuotose žiurkėse. PLoS One 8:e73689 10.1371/journal.pone.0073689 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  14. Fan X., Li D., Zhang Y., Green TA (2013b). Diferencinis fosfoproteominis branduolio reguliavimas aplinką praturtintose ir izoliuotose žiurkėse, reaguojant į ūminį stresą. PLoS One 8:e79893 10.1371/journal.pone.0079893 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  15. Green TA, Alibhai IN, Hommel JD, Dileone RJ, Kumar A., ​​Theobald DE ir kt. (2006). Indukuojamos cAMP ankstyvosios represoriaus ekspresijos indukcija branduolyje accumbens dėl streso arba amfetamino padidina elgesio reakciją į emocinius dirgiklius. J. Neurosci. 26, 8235–8242 10.1523/jneurosci.0880-06.2006 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  16. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG ir kt. (2010). Aplinkos sodrinimas sukuria elgsenos fenotipą, kurį sąlygoja mažas ciklinis adenozino monofosfato atsako elementų surišimo (CREB) aktyvumas nucleus accumbens. Biol. Psychiatry 67, 28–35 10.1016/j.biopsych.2009.06.022 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  17. Green TA, Alibhai IN, Unterberg S., Neve RL, Ghose S., Tamminga CA ir kt. (2008). Aktyvuojančių transkripcijos faktorių (ATF) ATF2, ATF3 ir ATF4 indukcija nucleus accumbens ir jų emocinio elgesio reguliavimas. J. Neurosci. 28, 2025–2032 10.1523/jneurosci.5273-07.2008 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  18. Green TA, Cain ME, Thompson M., Bardo MT (2003). Aplinkos sodrinimas sumažina nikotino sukeltą žiurkių hiperaktyvumą. Psychopharmacology (Berl) 170, 235–241 10.1007/s00213-003-1538-3 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  19. Green TA, Gehrke BJ, Bardo MT (2002). Aplinkos praturtinimas sumažina žiurkių intraveninį amfetamino savarankišką vartojimą: dozės ir atsako funkcijos pagal fiksuoto ir laipsniško santykio grafikus. Psychopharmacology (Berl) 162, 373-378 10.1007/s00213-002-1134-y [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  20. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC (2013). ΔFosB diferencialiai moduliuoja branduolio accumbens tiesioginę ir netiesioginę trajektorijos funkciją. Proc. Natl. Acad. Sci. JAV 110, 1923 – 1928 10.1073 / pnas.1221742110 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  21. Hope B., Kosofsky B., Hyman SE, Nestler EJ (1992). Neatidėliotinos ankstyvos genų ekspresijos ir AP-1 prisijungimo reguliavimas žiurkės branduolyje lėtiniu kokainu. Proc. Natl. Akad. Sci. USA 89, 5764–5768 10.1073/pnas.89.13.5764 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  22. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y. ir kt. (1994). Ilgalaikio AP-1 komplekso, sudaryto iš pakitusių į Fosą panašių baltymų, indukcija smegenyse lėtiniu kokainu ir kitais lėtiniais gydymo būdais. Neuron 13, 1235–1244 10.1016/0896-6273(94)90061-2 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  23. Jha S., Dong B., Sakata K. (2011). Praturtintas aplinkos gydymas pakeičia į depresiją panašų elgesį ir atkuria sumažėjusį hipokampo neurogenezę ir smegenų neurotrofinio faktoriaus baltymų kiekį pelėms, kurioms trūksta jo ekspresijos per IV promotorių. Vertimas Psichiatrija 1:e40 10.1038/tp.2011.33 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  24. Kato T., Iwamoto K. (2014). Išsami DNR metilinimo ir hidroksimetilinimo analizė žmogaus smegenyse ir jos reikšmė psichikos sutrikimams. Neuropharmacology 80, 133–139 10.1016/j.neuropharm.2013.12.019 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  25. Kelz MB, Chen J., Carlezon WA, Whisler K., Gilden L., Beckmann AM ir kt. (1999). Transkripcijos faktoriaus deltaFosB ekspresija smegenyse kontroliuoja jautrumą kokainui. Nature 401, 272–276 10.1038/45790 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  26. Kelz MB, Nestler EJ (2000). deltaFosB: molekulinis jungiklis, kuriuo grindžiamas ilgalaikis nervų plastiškumas. Curr. Nuomonė. Neurol. 13, 715-720 10.1097/00019052-200012000-00017 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  27. Koob GF, Sanna PP, Bloom FE (1998). Priklausomybės neuromokslas. Neuron 21, 467–476 [PubMed]
  28. Larson EB, Graham DL, Arzaga RR, Buzin N., Webb J., Green TA ir kt. (2011). Per didelis CREB ekspresija branduolio accumbens apvalkale padidina kokaino sustiprėjimą savarankiškai vartojančioms žiurkėms. J. Neurosci. 31, 16447–16457 10.1523/JNEUROSCI.3070-11.2011 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  29. Laviola G., Hannan AJ, Macrì S., Solinas M., Jaber M. (2008). Praturtintos aplinkos poveikis neurodegeneracinių ligų ir psichikos sutrikimų gyvūnų modeliams. Neurobiol. Dis. 31, 159–168 10.1016/j.nbd.2008.05.001 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  30. Lichti CF, Fan X., English RD, Zhang Y., Li D., Kong F. ir kt. (2014). Aplinkos sodrinimas keičia baltymų ekspresiją ir proteominį atsaką į kokainą žiurkės branduolyje. Priekyje. Behav. Neurosci. 8:246 10.3389/fnbeh.2014.00246 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  31. Lobo MK, Zaman S., Damez-Werno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA ir kt. (2013). ΔFosB indukcija striataliniuose spygliuočių neuronų potipiuose, reaguojant į lėtinius farmakologinius, emocinius ir optogenetinius dirgiklius. J. Neurosci. 33, 18381–18395 10.1523/JNEUROSCI.1875-13.2013 XNUMX [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  32. Louilot A., Le Moal M., Simon H. (1986). Skirtingas dopaminerginių neuronų reaktyvumas branduolyje, reaguojant į skirtingas elgesio situacijas. In vivo voltamperinis tyrimas su laisvai judančiomis žiurkėmis. Brain Res. 397, 395-400 10.1016/0006-8993(86)90646-3 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  33. McBride WJ, Kimpel MW, Mcclintick JN, Ding ZM, Edenberg HJ, Liang T. ir kt. (2014). Genų ekspresijos pokyčiai išplėstinėje migdolinėje dalyje po to, kai paauglės, mėgstančios alkoholį (P) žiurkės, gėrė alkoholį. Pharmacol. Biochem. Behav. 117, 52–60 10.1016/j.pbb.2013.12.009 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  34. Mlynarik M., Johansson BB, Jezova D. (2004). Praturtinta aplinka įtakoja antinksčių žievės atsaką į imuninį iššūkį ir glutamato receptorių geno ekspresiją žiurkės hipokampe. Ann. NY Akad. Sci. 1018, 273–280 10.1196/metraščiai.1296.032 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  35. Nestler EJ (2001). Molekulinė priklausomybės neurobiologija. Esu. J. Narkomanas. 10, 201–217 10.1080/105504901750532094 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  36. Nestler EJ (2008). Apžvalga. Transkripcijos priklausomybės mechanizmai: DeltaFosB vaidmuo. Filosas. Trans. R. Soc. Londonas. B Biol. Sci. 363, 3245–3255 10.1098/rstb.2008.0067 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  37. Nestler EJ, Barrot M., Self DW (2001). DeltaFosB: ilgalaikis molekulinis jungiklis priklausomybei gydyti. Proc. Natl. Akad. Sci. USA 98, 11042–11046 10.1073/pnas.191352698 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  38. Perrotti LI, Hadeishi Y., Ulery PG, Barrot M., Monteggia L., Duman RS ir kt. (2004). DeltaFosB indukcija su atlygiu susijusiose smegenų struktūrose po lėtinio streso. J. Neurosci. 24, 10594–10602 10.1523/jneurosci.2542-04.2004 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  39. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B., Renthal W., Maze I., Yazdani S. ir kt. (2008). Skirtingi DeltaFosB indukcijos modeliai smegenyse dėl piktnaudžiavimo vaistais. Synapse 62, 358–369 10.1002/sin.20500 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  40. Pitchers KK, Vialou V., Nestler EJ, Laviolette SR, Lehman MN, Coolen LM (2013). Natūralus ir vaistų atlygis veikia bendrus nervų plastiškumo mechanizmus, o ΔFosB yra pagrindinis tarpininkas. J. Neurosci. 33, 3434–3442 10.1523/jneurosci.4881-12.2013 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  41. Rebec GV, Christensen JR, Guerra C., Bardo MT (1997). Regioniniai ir laiko skirtumai realaus laiko dopamino nutekėjimo branduolyje accumbens laisvo pasirinkimo naujovės metu. Brain Res. 776, 61–67 10.1016/s0006-8993(97)01004-4 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  42. Robison AJ, Vialou V., Mazei-Robison M., Feng J., Kourrich S., Collins M. ir kt. (2013). Elgsenos ir struktūrinės reakcijos į lėtinį kokainą reikalauja grįžtamojo ryšio kilpos, apimančios ΔFosB ir nuo kalcio / kalmodulino priklausomą baltymų kinazę II branduolio accumbens apvalkale. J. Neurosci. 33, 4295–4307 10.1523/jneurosci.5192-12.2013 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  43. Smithas JK, Neill JC, Costall B. (1997). Laikymo sąlygos po nujunkymo turi įtakos kokaino ir d-amfetamino poveikiui elgsenai. Psychopharmacology (Berlis) 131, 23–33 10.1007/s002130050261 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  44. Solinas M., Chauvet C., Thiriet N., El Rawas R., Jaber M. (2008). Priklausomybės nuo kokaino panaikinimas sodrinant aplinką. Proc. Natl. Akad. Sci. USA 105, 17145–17150 10.1073/pnas.0806889105 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  45. Solinas M., Thiriet N., El Rawas R., Lardeux V., Jaber M. (2009). Aplinkos praturtinimas ankstyvaisiais gyvenimo tarpsniais sumažina kokaino elgesį, neurocheminį ir molekulinį poveikį. Neuropsychopharmacology 34, 1102–1111 10.1038/npp.2008.51 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  46. Stairs DJ, Prendergast MA, Bardo MT (2011). Aplinkos sukeltas kortikosterono ir gliukokortikoidų receptorių blokados skirtumai, susiję su amfetamino savarankiško vartojimo žiurkėms. Psychopharmacology (Berl) 218, 293–301 10.1007/s00213-011-2448-4 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  47. Thiel KJ, Pentkowski NS, Peartree NA, Painter MR, Neisewander JL (2010). Aplinkos gyvenimo sąlygos, atsiradusios priverstinio abstinencijos metu, keičia kokaino ieškojimo elgesį ir Fos baltymų ekspresiją. Neuroscience 171, 1187–1196 10.1016/j.neuroscience.2010.10.001 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  48. Thiel KJ, Sanabria F., Pentkowski NS, Neisewander JL (2009). Potraukį mažinantis aplinkos praturtinimo poveikis. Tarpt. J. Neuropsychopharmacol. 12, 1151–1156 10.1017/s1461145709990472 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  49. van Winkel M., Peeters F., Van Winkel R., Kenis G., Collip D., Geschwind N. ir kt. (2014). BDNF geno variacijos įtaka socialinio streso jautrumui ir teigiamų emocijų buferiniam poveikiui: geno ir aplinkos sąveikos replikacija ir išplėtimas. Euras. Neuropsichofarmakolas. 24, 930–938 10.1016/j.euroneuro.2014.02.005 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  50. Venebra-Muñoz A., Corona-Morales A., Santiago-García J., Melgarejo-Gutiérrez M., Caba M., García-García F. (2014). Praturtinta aplinka susilpnina savarankišką nikotino vartojimą ir sukelia ΔFosB ekspresijos pokyčius žiurkės prefrontalinėje žievėje ir branduolyje. Neuroreport 25, 694–698 10.1097/wnr.0000000000000157 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  51. Vialou V., Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, Dietz DM, Ohnishi YN ir kt. (2010). DeltaFosB smegenų atlygio grandinėse tarpininkauja atsparumui stresui ir antidepresantų atsakams. Nat. Neurosci. 13, 745–752 10.1038/nn.2551 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  52. Wallace DL, Vialou V., Rios L., Carle-Florence TL, Chakravarty S., Kumar A. ir kt. (2008). DeltaFosB įtaka branduolio kaupimuisi natūraliam elgesiui, susijusiam su atlygiu. J. Neurosci. 28, 10272–10277 10.1523/jneurosci.1531-08.2008 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  53. Wang Y., Cesena TI, Ohnishi Y., Burger-Caplan R., Lam V., Kirchhoff PD ir kt. (2012). Mažų molekulių atranka nustato transkripcijos faktoriaus ΔFosB reguliatorius. ACS Chem. Neurosci. 3, 546–556 10.1021/cn3000235 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  54. Werme M., Messer C., Olson L., Gilden L., Thorén P., Nestler EJ ir kt. (2002). Delta FosB reguliuoja ratų eigą. J. Neurosci. 22, 8133–8138 [PubMed]
  55. Winstanley CA, Bachtell RK, Theobald DE, Laali S., Green TA, Kumar A. ir kt. (2009a). Padidėjęs impulsyvumas pasitraukus nuo kokaino savarankiško vartojimo: DeltaFosB vaidmuo orbitofrontalinėje žievėje. Cereb. Cortex 19, 435–444 10.1093/cercor/bhn094 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  56. Winstanley CA, Green TA, Theobald DE, Renthal W., LaPlant Q., DiLeone RJ ir kt. (2009b). DeltaFosB indukcija orbitofrontalinėje žievėje sustiprina lokomotorinį jautrumą, nepaisant to, kad susilpnėja kokaino sukeltas pažinimo sutrikimas. Pharmacol. Biochem. Behav. 93, 278–284 10.1016/j.pbb.2008.12.007 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  57. Winstanley CA, LaPlant Q., Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI ir kt. (2007). DeltaFosB indukcija orbitofrontalinėje žievėje tarpininkauja tolerancijai kokaino sukeltai pažinimo disfunkcijai. J. Neurosci. 27, 10497–10507 10.1523/jneurosci.2566-07.2007 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Išmintingas RA (1998). Smegenų atlygio būdų aktyvinimas vaistais. Priklauso nuo narkotikų alkoholio. 51, 13–22 10.1016/s0376-8716(98)00063-5 [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]