Cholecistokinino tarpininkaujanti depresijos ir nerimo susijusio elgesio priešpaskutinė grandinė: ΔFosB (2014) vaidmuo

Abstraktus

Sumažėjęs medialinis priešfrontalinės žievės (mPFC) neuronų aktyvumas yra susijęs su pelių socialiniu pralaimėjimu, kurį sukelia depresija ir nerimas. Tačiau molekuliniai mechanizmai, kuriais grindžiamas sumažėjęs mPFC aktyvumas, ir jo prodepresantas vaidmuo išlieka nežinomi. Čia parodyta, kad transkripcijos faktoriaus ΔFosB indukcija mPFC, ypač preliminarioje (PrL) srityje, sukelia jautrumą stresui. ΔFosB indukcija PrL pasireiškė selektyviai jautrioms pelėms po lėtinio socialinio pralaimėjimo streso ir ΔFosB perraiškos šiame regione, bet ne šalia esančioje infralimbinėje (IL) srityje, padidino jautrumą stresui. ΔFosB sukėlė šį poveikį iš dalies indukuodamas cholecistokinino (CCK) -B receptorius: mPFC sukelta CCKB blokada sukelia atsparų fenotipą, tuo tarpu, kai CCK vartojimas į mPFC, imituoja nerimą sukeliantį ir į depresiją panašų socialinio streso poveikį. Anksčiau nustatėme, kad jautrių pelių opiogeninis mPFC neuronų stimuliavimas panaikina keletą elgesio anomalijų, pastebėtų po lėtinio socialinio pralaimėjimo streso. Todėl mes iškėlėme hipotezę, kad optogenetinė žievės projekcijų stimuliacija išgelbės patologinį CCK poveikį mPFC. Po CCK infuzijos mPFC, mes optogenetiškai stimuliavome mPFC projekcijas į bazolaterinę amygdalą ar branduolio akumuliatorius - dvi subkortikines struktūras, dalyvaujančias nuotaikos reguliavime. Kortikoamigdalos projekcijų stimuliavimas blokavo nerimą sukeliantį CCK poveikį, nors jokio poveikio kitiems socialinio pralaimėjimo simptomams nepastebėta. Kortikoakumbenų projekcijų stimuliavimas atvirkščiai panaikino CCK sukeltą socialinį vengimą ir sacharozės pasirinkimo deficitą, bet neturėjo panašaus į nerimą sukeliančio poveikio. Šie rezultatai kartu rodo, kad socialinio streso sukeltas elgesio trūkumas yra iš dalies susijęs su mPFC molekulinėmis adaptacijomis, įtraukiančiomis ΔFosB ir CCK, atliekant žievės projekcijas į atskirą subkortikinį taikinį.s.

Raktiniai žodžiai: akumulbinai, amygdala, nerimas, CCK, depresija, mPFC

Įvadas

Keletas anatomiškai ir funkciškai sujungtų galūnių smegenų regionų, įskaitant medialinę prefrontalinę žievę (mPFC), hipokampą, amygdalą ir branduolio akumuliatorius (NAc), yra tarpininkaujant pagrindiniams depresijos ir nerimo simptomams (; ; ; ; , ; ; ). Pavyzdžiui, žievės grįžtamojo ryšio nebuvimas amygdala yra susijęs su disforinėmis emocijomis ir, sėkmingai gydant, grįžta į normalų lygį. Subgenualinės cingulinės žievės, mPFC srities, giluminių smegenų stimuliacijų antidepresinis poveikis yra susijęs su žievės ir subkortikinių smegenų veiklos atstatymu į normalų lygį (; ). Panašiai, gilus NAc stimuliavimas smegenyse yra antidepresantas ir anksiolitinis ir koreliuoja su pakitusia NAc, amygdala ir mPFC metabolizmu (; ; ). Šie duomenys patvirtina nervinio tinklo hipotezę apie nuotaikos sutrikimus, kai gydymas antidepresantais, neatsižvelgiant į mechanizmus, normalizuoja aktyvumą tiek nedektyviose žievės žievės, tiek hiperaktyviose subortikinėse grandinėse (; ; ; ; ; ).

Gyvūnų modeliai, apimantys nuolatinį fizinio ar psichologinio streso poveikį, pakenkia mPFC neuronų struktūrai ir funkcijai (), amygdala (), hipokampas () ir NAc (; ). Lėtinis socialinis pralaimėjimo stresas, etologiškai pagrįstas depresijos modelis (), sumažina mPFC neuronų aktyvumą, darydamas išvadą dėl sumažėjusios Zif268 ir c-Fos (; ). Be to, optogenetinė mPFC stimuliacija panaikina šiuos trūkumus ir sukelia panašų antidepresantą (), patvirtindama mPFC svarbą su nuotaika susijusiems reiškiniams. Tjis, kaip ir primatai, graužikų mPFC kontroliuoja emocinį elgesį iš dalies per bazolateralinės amigdalos (BLA) ir NAc (; ; ). Nepaisant to, molekuliniai mechanizmai, kurie tarpininkauja šiam mPFC vaidmeniui, lieka nežinomi.

Šis tyrimas iš pradžių sutelkė dėmesį į ΔFosB - stabilų transkripcijos faktorių, kurį sukelia NAc lėtinis socialinis pralaimėjimo stresas, kai jis prieštarauja jautrumui stresui. (). Atlikome smegenų masto ΔFosB indukcijos žemėlapius po pralaimėjimo streso ir nustatėme, panašiai kaip ankstesniuose tyrimuose (; ; ), tvirta indukcija mPFC. Keista, bet mes nustatėme, kad tokia ΔFosB indukcija mPFC skatina jautrumą stresui. Cholecistokinino (CCK) -B receptorius nustatėme kaip molekulinį ΔFosB taikinį mPFC, kur CCKerginis neurotransmisija buvo susijęs tiek su nerimo, tiek su streso sukeltu socialinio streso poveikiu (, ). Mes nustatėme, kad CCK aktyvumas mPFC yra ir būtinas, ir pakankamas socialinio streso poveikiui, panašiam į nerimą ir depresiją. Be to, naudodamiesi optogenetiniais metodais, parodome specifinius CCK veiksmus mPFC subchemose: CCK mPFC-BLA projekcijose tarpina nerimo simptomus, o CCK mPFC-NAc projekcijose tarpina depresijos simptomus.

Medžiagos ir metodai

1 eksperimentas: ΔFosB indukcijos lėtiniu socialiniu pralaimėjimu stresas visame pasaulyje.

Aštuonių savaičių amžiaus C57BL / 6J patinėliai buvo patyrę chronišką socialinį pralaimėjimą 10 iš eilės dienas, kaip aprašyta anksčiau (; ; ) (pamatyti Lentelė 1; Pav 1A). Trumpai tariant, kiekviena pelė buvo veikiama nepažįstamo, agresyvaus patino CD1 patino patinėlio veislės pelės, naudotos 5 min. Per dieną. Po tiesioginio sąveikos su CD1 agresoriumi (5 min), gyvūnai buvo dedami į gretimą to paties narvo skyrių kitam 24 h su jutiminiu, bet ne fiziniu kontaktu. Kontroliniai gyvūnai buvo laikomi lygiaverčiuose narvuose, bet su to paties kamieno nariais. Socialinės sąveikos testai buvo atlikti 24 h po paskutinės pralaimėjimo dienos. Socialinis vengimas nepažįstamam CD1 patinui buvo įvertintas pagal paskelbtus protokolus. Buvo išmatuotas laikas, praleistas „sąveikos zonoje“ (8 cm pločio koridoriuje, supančiame narvą). Pelės, kurių nugalėtos, buvo suskaidytos į jautrias ir atsparias subpopuliacijas, kaip aprašyta anksčiau (; ). Kadangi dauguma kontrolinių pelių praleidžia daugiau laiko sąveikaudami su socialiniu taikiniu, nei su tuščiu taikinio gaubtu, kaip riba naudojamas sąveikos santykis 100 (vienodas laikas praleistas sąveikos zonoje, kai nėra socialinio taikinio): pelės, kurių balai <100, pažymėtos kaip „imlios“, o pelės, kurių balai ≥100, yra „atsparios“. Išsami elgesio, biocheminė ir elektrofiziologinė analizė patvirtina šių skirtingų jautrių ir atsparių pogrupių pagrįstumą (; ; ).

1 lentelė.  

Vidutinis FosB imunoreaktyviųjų branduolių skaičius (± SEM) mm2 kontroliuojamų, jautrių ir atsparių pelių smegenų srityse 24 h po lėtinio (10 d) socialinio pralaimėjimo streso
1 pav.  

ΔFosB indukcija mPFC skatina jautrumą stresui. A, Reprezentatyvios ΔFosB imunohistocheminės fotografijos, padarytos mPFC 24 h po paskutiniojo 10 socialinio pralaimėjimo epizodų. B, ΔFosB indukcija GABAergic nevyksta ...

Iškart po socialinės sąveikos testo pelės buvo anestezuojamos ir intrakardialiai perfuzuotos 4% paraformaldehido / PBS. Ląstelių skaičius ΔFosB+ NAc neuronai buvo atlikti taip, kaip aprašyta anksčiau (). Smegenys buvo apsaugotos nuo kryžminės apsaugos su 30% sacharozės kiekiu, o vainikinės pjūviai (30 μm) buvo supjaustyti ant užšaldančio mikrotomo ir paruošti imunohistochemijai. Laisvai plūduriuojančios sekcijos buvo iš anksto inkubuotos blokuojančiame buferyje, kuriame yra 0.3% Triton ir 3% normalaus ožkos serumo. ΔFosB buvo aptiktas naudojant triušio polikloninius antikūnus, išaugintus prieš N-galinę baltymo dalį (1 / 1000 „Santa Cruz Biotechnology“, katalogas # sc-48), tame pačiame buferyje, po to apdorojant biotiniluotus ožkų anti-triušio IgG antikūnus ir avidin – biotiną. peroksidazės kompleksinis metodas, kurio substratas yra DAB (Vektorių laboratorijos). Diaminobenzidino inkubacijos laikas buvo laikomas pastoviu visomis sąlygomis (100 s). Pjaustomos dalys buvo sumontuotos, dehidratuotos ir uždengtos dangteliais. ΔFosB-imunopozityvios ląstelės turėjo specifinį rudą dažymą branduolyje ir buvo akivaizdžiai įvertintos stebinčiojo, kad mikroskopu apžiūrėtų gydymo sąlygas (20 × padidinimas). Kiekybiškai įvertinti buvo pasirinktos trys pasirinktos smegenų dalys, apimančios kiekvieną smegenų sritį. Kiekvienos smegenų srities anatominis segregacija buvo atliktas palyginus skyrių su Paxinos pelių smegenų atlasu. Imunohistochemijos sąlygos buvo optimizuotos, kad fono lygis būtų kuo mažesnis, kad būtų galima teisingai nustatyti identificationFosB teigiamas ląsteles. Vidutinės vertės buvo apskaičiuotos kiekvienam gyvūnui ir laikomos individualiu stebėjimu statistinei analizei. Nors panaudotas antikūnas atpažįsta ir ΔFosB, ir viso ilgio FosB, atlikdami Western blot tyrimą žinome, kad tiriamomis sąlygomis galima aptikti tik ΔFosB (; ).

2 eksperimentas: socialinio streso sukeltų ΔFosB neuronų fenotipo nustatymas mPFC.

Norėdami ištirti ΔFosB raišką žievės GABAerginiuose neuronuose, mes panaudojome audinius iš GAD2-tdTomato pelių, patyrusių lėtinį socialinį pralaimėjimo stresą ir nuspalvintus ΔFosB, kaip aprašyta aukščiau (žr. Pav 1B). Pelės buvo užaugintos veisiant knockin GAD2-Cre peles (Gad2tm2 (cre) Zjh / J; JAX atsargos numeris 010802) () su (B6.Cg-Gt (ROSA) 26Sortm9 (CAG-tdTomato) Hze / J; JAX atsargos numeris 007908), kurie turi „floxed-stop“ kontroliuojamą tdTomato (RFP variantą).

3 eksperimentas: per didelis ΔFosB ekspresijos elgesys preliminarinėje (PrL) ir infralimbinėje (IL) žievėje.

Stereotaksinė operacija buvo atlikta suaugusiems pelių patinams (8 savaitės), kad HSV-ΔFosB-GFP arba HSV-GFP būtų sušvirkščiama į mPFC PrL ar IL sritis. Trumpai tariant, pelės buvo anestezuojamos naudojant ketamino (10 mg / kg) ir ksilazino (1 mg / kg) mišinį, o viruso perdavimui PrL buvo naudojamos šios stereotaksinės koordinatės: 1.8 mm (priekinė / užpakalinė), 0.65 mm (šoninė) ), −2.2 mm (nugaros / vidurio); o IL: 1.9 mm (priekinis / užpakalinis), 0.75 mm (šoninis), −2.8 mm (nugaros / ventrinis) 10 ° kampu nuo vidurio linijos (atsižvelgiant į bregmą). Iš viso 0.5 μl išgryninto viruso buvo pristatyta dvišaliu būdu per 5 min. Periodą (0.1 μl / min.), Po kurio sekė 5 min. Poilsio laikas. Viruso injekcijos vietos buvo patvirtintos standartiniais histologiniais metodais (žr Pav 1C). Nors neįmanoma tiksliai apibrėžti pelių PrL, palyginti su IL, tiksliu tikslumu, duomenys, pateikti 1 pavC parodyti, kad daugiausia tikslinga nukreipti į vieną ar kitą regioną. Iš tiesų, aiškus elgesio poveikis, gautas nukreipus į du regionus (žr. Rezultatus), patvirtina šį požiūrį. Pirmoji pelių partija buvo naudojama tik submaksimaliame socialinio pralaimėjimo eksperimente (žr Pav 1D). Praėjus trims dienoms po operacijos, tą pačią dieną pelės buvo nugalėtos iš eilės ir vėliau buvo patikrintos dėl socialinės sąveikos 24 h. Ši submaksimali pralaimėjimo procedūra buvo patvirtinta anksčiau, siekiant atskleisti prototipų fenotipus po genetinių manipuliacijų (; ).

Antroji pelių partija buvo naudojama tiriant bazinį nerimą ir į depresiją panašų elgesį (žr Pav 1E – J). Dieną po operacijos pelės buvo pripratusios prie 1% (m / t) sacharozės tirpalo. Kitą dieną pelės galėjo pasirinkti tarp vandens buteliuko ir 1% sacharozės tirpalo buteliuko, keičiamo kasdien. Sacharozės tirpalo suvartojimas 24 h buvo matuojamas ketvirtą ir penktą dieną po operacijos ir išreiškiamas procentais nuo bendro suvartoto skysčio kiekio. Pelės buvo tiriamos atviroje vietoje (diena 3), pakilus plius labirinte (diena 4), socialinė sąveika (dienos 5 rytas) ir priverstinio plaukimo (dienos 5 popietė) bandymai, remiantis paskelbtais protokolais (). Mes nustatėme, kad pagal šią bandymo tvarką ankstesnių bandymų rezultatai neturi įtakos vėlesnių bandymų rezultatams (). Pelių aktyvumas atvirame lauke buvo užfiksuotas 5 min, naudojant vaizdo stebėjimo sistemą (Ethovision) raudonos šviesos sąlygomis. Pakeltą pliusą labirintą sudarė du tiesūs susikertantys takai, išdėstyti 60 cm virš grindų ir padalyti į dvi atviras ir dvi uždaras rankas. Pelės buvo atskirai dedamos į labirinto centrą ir 5 min. Laikotarpiu jiems buvo leidžiama laisvai tyrinėti kiekvieną ranką. Atliekant atviro lauko ir padidinto labirinto testus, laikas, praleistas atitinkamai centre ir atvirose rankose, buvo naudojamas kaip atvirkštinis su nerimu susijusių reakcijų indeksas. Vienos dienos priverstinio plaukimo testas buvo atliekamas 5 min. Laikotarpiu. Padidėjęs nejudrumo laikas per priverstinį plaukimo testą buvo aiškinamas kaip į prodepresiją panašus elgesys. Šis 1 dienos testas buvo plačiai naudojamas pelėms ir patvirtintas kaip numatomo pagrįstumo matas, nes antidepresantai sumažina nejudrumo laiką.

Galiausiai, atskirai pelių grupei buvo įšvirkštas vidinis mOFC su HSV-ΔFosB ir patikrinta jų socialinė sąveika po submaksimaliu pralaimėjimu (žr. Pav 1K).

HSV vektoriai buvo gauti iš Rachael Neve (Masačusetso technologijos institutas). Susidomėję genai (ΔFosB ir GFP) yra CMV promotoriuje. Šie vektoriai buvo plačiai patvirtinti ankstesniuose leidiniuose (pvz., ).

4 eksperimentas: lėtinio socialinio streso poveikis CCKB receptorių lygiui mPFC.

24 h po socialinės sąveikos testo smegenys buvo greitai pašalintos ir nuosekliai supjaustytos, o mPFC buvo greitai išpjaustytas ir užšaldytas ant sauso ledo (žr. Pav 2A,B). RNR išskyrimas, qPCR ir duomenų analizė buvo atlikti, kaip aprašyta anksčiau (; ). RNR buvo išskirta naudojant „TriZol“ reagentą (Invitrogen) ir toliau išgryninta naudojant „RNAeasy“ mikro rinkinius iš „QIAGEN“. Visų RNR mėginių 260 / 280 ir 260 / 230 vertės buvo ≥1.8. Atvirkštinė transkripcija buvo atlikta naudojant „iScript“ („Bio-Rad“). qPCR naudojant „SYBR Green“ („Quanta“) buvo atliktas naudojant „Applied Biosystems 7900HT RT“ PCR sistemą su šiais ciklo parametrais: 2 min, esant 95 ° C; 40 ciklai 95 ° C 15 s, 59 ° C 30 s ir 72 ° C 33 s; ir laipsniškas kaitinimas iki 95 ° C, kad susidarytų disociacijos kreivės, patvirtinančios atskirus PGR produktus. Duomenys buvo analizuojami lyginant Ct apdorojimo būklės vertės (jautrios ar atsparios kontrolinėms pelėms arba HSV-ΔFosB vs HSV-GFP) su ΔΔCt metodas (). qPCR pradmenys yra šie: ΔFosB, pirmyn, AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT ir atvirkščiai, GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG; CCKB, į priekį, ACCCTTTATGCGGTGATCTTTC ir atgal, ATGAGCACGTTTCCGCCAA; CCK, į priekį, AGCGCGATACATCCAGCAG ir atbulinės eigos, ACGATGGGTATTCGTAGTCCTC; GAPDH, į priekį, AGGTCGGTGTGAACGGATTTG ir atvirkščiai, TGTAGACCATGTAGTTGAGGTCA.

2 pav.  

CCKB receptorių blokada turi antidepresantų panašų poveikį. A, Socialinis pralaimėjimas sumažina CCKB receptorių lygį mPFC tik atsparioms pelėms (n = 8 – 10). *p <0.05, palyginti su kontrole (vienpusis ANOVA). **p <0.05 ...
5 eksperimentas: ΔFosB poveikis CCKB receptorių ir cFos lygiams.

Pelėms buvo švirkščiama HSV-FosB į PrL. 72 h po operacijos, esant viruso per daug ekspresijai, injekcijos vietos buvo išpjaustytos fluorescenciniu mikroskopu (žr. Pav 2C). RNR išskyrimas, qPCR ir duomenų analizė buvo atlikti taip, kaip aprašyta aukščiau. qPCR pradmenys yra šie: c-fos, priekinis, AATCCGAAGGGAACGGAATAAGA ir atvirkštinis, TGCAACGCAGACTTCTCATCT.

6 eksperimentas: ΔFosB blokados poveikis streso sukeltų CCKB receptorių lygiui ir atsparumui.

Suaugusioms pelėms buvo įšvirkščiamos dvi pusės HSV-GFP arba HSV-JJunD į PrL (žr. Pav 2D – F). ΔJunD yra N-galo sutrumpintas JunD mutantas, veikiantis kaip dominuojantis-neigiamas ΔFosB antagonistas. Pelėms buvo duotas socialinis pralaimėjimas du kartus per dieną dėl 5 d. Šis pagreitintas socialinio pralaimėjimo protokolas, sutrumpintas, kad sutaptų su maksimalaus HSV transgeno išraiškos periodu, buvo naudojamas anksčiau ir parodytas, kad sukelia maksimalų socialinio vengimo lygį (). Praėjus 24 valandoms po paskutinio streso epizodo, pelės buvo nukirstos be anestezijos, kad būtų išvengta anestetikų poveikio neuronų baltymų lygiui. Užkrėstas audinys pašalintas PBS turinčiomis proteazės (Roche) ir fosfatazės (Sigma-Aldrich) inhibitoriais, naudojant 15 matuoklio štampą, ir iškart užšaldytas ant sauso ledo. Mėginiai homogenizuoti ultragarsu modifikuotame RIPA buferyje: 10 mm Tris bazės, 150 mm natrio chlorido, 1 mm EDTA, 0.1% SDS, 1% Triton X-100, 1% natrio deoksicholato, pH 7.4, ir proteazės bei fosfatazės inhibitorių. aukščiau. Pridėjus Laemmli buferį, baltymai buvo atskirti ant 4–15% poliakrilamido gradiento gelių („Criterion System“; „Bio-Rad“), o Western blotavimas atliktas naudojant „Odisėjos“ sistemą (Li-Cor) pagal gamintojo protokolus. Membranos buvo suteptos CCKB receptorių antikūnais (1/1000, Acris, katalogas # AP01421PU-N). Kitai pelių grupei buvo sušvirkštas AAV-ΔJunD arba AAV-GFP PrL, o po to, praėjus 5 savaitėms po operacijos, kad būtų galima maksimaliai transgeno ekspresiją, pelėms buvo pateiktas submaximalaus pralaimėjimo protokolas. Jie buvo išbandyti socialinei sąveikai praėjus 24 valandoms po paskutinio pralaimėjimo.

7 eksperimentas: vidinio mPFC CI-988, CCKB antagonisto, poveikis socialinio streso sukeltam socialiniam vengimui ir anhedonijai.

Dvipusė kaniulė (1.0 mm kaniulės atstumas nuo kaniulio, 1.8 mm priekinė dalis, injektoriaus −2.2 mm dorsalinė / ventralinė), nukreipta į mPFC, buvo implantuojama jautrioms pelėms (žr. Pav 2G,H). Praėjus savaitei po operacijos, 10 ng CI-988 buvo suleistas tiesiai į mPFC, nukreipiant pirmiausia į PrL. Po to pelės buvo patikrintos dėl jų socialinės sąveikos elgesio. Buvo matuojamas sacharozės pasirinkimas likusiam 24 h. CI-988 (Tocris Bioscience) buvo ištirpintas druskos tirpale, padalintas į dalis ir užšaldytas. Galutinis praskiedimas buvo paruoštas eksperimento dieną. Papildomas eksperimentas su jautriomis pelėmis buvo atliekamas su CI-988, įvestu į pilvaplėvės ertmę (2 mg / kg) 30 min. Prieš socialinės sąveikos testą.

8 eksperimentas: CCKB agonisto poveikis jautrumui socialiniam stresui ir atstatymui optogenetiniu būdu stimuliuojant mPFC projekcijas į BLA ar NAc.

AAV-CaMKII-ChR2-EYFP arba AAV-CaMKII-EYFP buvo sušvirkšta į dešinįjį mPFC, vėl nukreipiant pirmiausia į PrL (žr. Pav 3A – G). Po penkių savaičių optiniai pluoštai buvo implantuoti į dešinįjį NAc (1.4 priekinis / užpakalinis, 2.6 šoninis, −4.7 šoninis / vidurinis 25 ° kampu nuo vidurio linijos) arba BLA (−1.6 priekinis / užpakalinis, 3.1 šoninis, −4.7 šoninis). / ventralinis be kampo nuo vidurio linijos). Tos pačios chirurginės procedūros metu į mPFC buvo implantuojamos dvišalės kaniulės (žr. Aukščiau). Kaniulės ir pluoštai buvo pritvirtinti prie kaukolės dantų cementu. Pelėms buvo leista 1 savaitę pasveikti prieš pradedant elgesio eksperimentus. Pelėms buvo atliktas submaksiminis pralaimėjimas, vėliau buvo patikrinta 24 h, kad būtų galima sąveikauti tiesiogiai, po to seka padidėjęs pliusas labirintas ir ar sacharozė teikia pirmenybę likusiam 24 h. 30 min. Prieš socialinės sąveikos testą pusė pelių buvo suleista CCK-8 (10 ng) į mPFC, o kita pusė gavo nešiklį (fiziologinį tirpalą). Pelės buvo tiriamos poromis (nešikliu ir CCK-8 apdorota pele, turinčia AAV-GFP arba AAV-ChR2). CCK-8 (Sigma) buvo ištirpintas druskos tirpale, padalintas į dalis ir užšaldytas. Galutinis praskiedimas buvo paruoštas eksperimento dieną.

3 pav.  

CCK-8 sukeltas jautrumas stresui priklauso nuo konkrečių žievės projekcijų. A, 24 h po submaximal socialinio pralaimėjimo ir 30 min po CCK-8 infuzijos, mPFC projekcijos sritys buvo stimuliuojamos lazeriu, atliekant socialinės sąveikos testą. CCK-8 infuzija ...

Optinės stimuliacijos buvo atliekamos pagal paskelbtus protokolus (). Optinės skaidulos („Thor Laboratories“) buvo chroniškai implantuojamos ir jungiamos per FC / PC adapterį prie 473 nm mėlynojo lazerio diodo („Crystal Lasers“, BCL-473 – 050-M). Mėlynos šviesos impulsams generuoti buvo naudojamas stimuliatorius (Agilent, #33220A). Visų stimuliacijų metu 40 ms pliūpsniai iš 100 Hz (9.9 ms smaigalio pločio) mėlynos šviesos impulsai buvo perduodami kas 3 į galinius regionus BLA ar NAc tik socialinės sąveikos testo metu, kad būtų imituotas sprogusis žievės žievės modelis. veikla. Šviesolaidžio šviesos intensyvumas buvo patikrintas prieš kiekvieną naudojimą, naudojant šviesos jutiklį (Thor Laboratories, S130A), o šviesos intensyvumas buvo ∼15 mW. Šis stimuliavimo protokolas, kuris anksčiau buvo patvirtintas elektrofiziologiškai (), nesukėlė priepuolių, pagrįstų elgesio stebėjimais ir c-Fos ekspresijos nebuvimu optogenetiškai stimuliuojamose vietose ().

9 eksperimentas: CCKB agonisto poveikis mPFC neuronų aktyvumui, matuojamas c-Fos mRNR lygiais.

Dvišalės kaniulės buvo implantuojamos suaugusioms pelėms, nukreipiančioms į mPFC (žr Pav 3H). Po savaitės poilsio pelėms buvo padarytas submaksimalus pralaimėjimas ir vėliau jos buvo užplikytos CCK-8 24 h. mPFC štampai buvo paimti 30 minutę po vaisto infuzijos, ir mėginiai buvo paruošti mRNR analizei, kaip aprašyta aukščiau.

Gyvūnų laikymas.

Buvo naudojamos aštuonių savaičių amžiaus C57BL / 6J patinėliai (The Jackson Laboratory). Visos pelės buvo pripratintos prie gyvūnų laikymo vietos mažiausiai 1 savaitę prieš eksperimentines manipuliacijas ir buvo palaikomos 23 ° C – 25 ° C temperatūroje 12 h šviesos / tamsos cikle (lemputės dega ties 7: 00 AM) su ad libitum galimybė gauti maisto ir vandens. Eksperimentai buvo atlikti vadovaujantis Neuromokslų draugijos ir Institucinio gyvūnų priežiūros ir naudojimo komiteto, esančio Icahno medicinos mokykloje prie Sinajaus kalno, gairėmis.

Statistinės analizės.

Rodomi duomenys išreiškiami kaip vidurkis ± SEM (pateikiami kaip klaidų juostos). Atliekant imunohistocheminius, biocheminius ir elgsenos analizės metodus, vienkartiniai ANOVA buvo naudojami palyginant kontrolinių, jautrių ir atsparių pelių vidurkius. Vienos krypties ANOVA buvo naudojami norint palyginti GFP kontrolių ir ΔFosB perdėto ekspresijos reikšmes PrL ar IL atvirame lauke, padidėjus plius labirintui, priverstinį plaukimą ir sacharozės testus. Dviejų krypčių ANOVA buvo naudojami norint palyginti GFP kontrolių, ΔFosB-PrL ir ΔFosB-IL, vidurkius socialinės sąveikos teste. Dviejų krypčių ANOVA buvo naudojami siekiant palyginti CCK-8 poveikį su optogenetine stimuliacija arba be jos visuose elgesio eksperimentuose, taip pat ΔFosB perdėtos ekspresijos ar CI-988 infuzijos poveikį socialiniam vengimui. Kai tinkama, post-hoc analizės buvo atliktos naudojant Bonferroni post-hoc testas. Studentų t testai buvo naudojami norint palyginti CI-988 infuzijos poveikio sacharozės pasirinkimui ir priverstinio plaukimo testus, o CCK-8 poveikį c-Fos mRNR lygiai. Statistiškai reikšmingi buvo skirtumai tarp eksperimentinių sąlygų, kai p ≤ 0.05.

rezultatai

Smegenų masto ΔFosB indukcijos žemėlapis dėl lėtinio socialinio pralaimėjimo streso

Pirmiausia ištyrėme ΔFosB indukciją kontroliuojamų, jautrių ir atsparių pelių imunohistocheminiais tyrimais po lėtinio (10 d) socialinio pralaimėjimo streso kurso, daugiausia dėmesio skiriant priekinėms ir vidurinėms smegenų sritims, kurios anksčiau buvo susijusios su streso reakcijomis. Gyvūnai buvo analizuojami 24 h po paskutinio pralaimėjimo epizodo. Lėtinis socialinis stresas sukelia ΔFosB daugelyje smegenų sričių, pasižyminčių skirtingais modeliais tarp atsparių ir jautrių pelių. Kaip parodyta Lentelė 1 ir 1 pavA, IL, BLA, hipokampo dentatyvusis gyrusas, nugaros striatumas ir NAc šerdis parodė, kad atsparios pelės turi aktyvią funkciją; tokie NAc rezultatai atitinka paskelbtas išvadas (). Ryškiai tariant, jautrios pelės parodė didesnę PrL, šoninio pertvaros ir stria terminalis lovos branduolio indukciją. Keletas smegenų sričių parodė panašų ΔFosB indukciją jautrioms ir atsparioms pelėms; tai buvo orbitofrontalinė žievė (OFC, kita PFC sritis), NAc apvalkalas, nugarinė rafė ir pilvaakis kalkinis (PAG).

Norėdami nustatyti neuronų potipį, rodantį ΔFosB indukciją žievės regionuose, „GAD2-tdTomato“ pelėms buvo padarytas lėtinis socialinis pralaimėjimo stresas. GABAerginiuose neuronuose jautrių pelių ΔFosB imuninis reaktyvumas nebuvo aptinkamas (Pav 1B), kuris patvirtina ankstesnius specifinius ΔFosB indukcijos duomenis žievės piramidiniuose neuronuose po kitų lėtinio streso formų (). Kontrolinėms pelėms, kurioms nenugalėtas pradinis ΔFosB lygis smegenyse buvo panašus į ankstesnių tyrimų duomenis (, ), turinčios daug didesnį bazinį lygį NAc ir nugaros striatumose, palyginti su bet kuriuo kitu regionu, išskyrus vieną, išskyrus dantų žandikaulį, kurio lygis yra panašus kaip strijato regionuose (Lentelė 1).

ΔFosB, esantis mPFC, skatina jautrumą stresui

Tęsdami šiuos atradimus, mes sutelkėme dėmesį į PrL, nes anksčiau įrodėme, kad optogenetinis šio regiono aktyvinimas turėjo antidepresantų poveikį socialinio pralaimėjimo paradigmoje (). Norėdami ištirti ΔFosB indukcijos funkcinius padarinius šioje smegenų srityje, mes virusiškai padidinome ΔFosB kontrolinių pelių PrL (Pav 1C) ir pavertė juos pasąmoniniu socialinio pralaimėjimo streso kursu, kuris nesukelia socialinio vengimo normaliems gyvūnams. Pelės, padidinančios ΔFosB reikšmę PrL, buvo jautresnės socialiniam pralaimėjimui nei GFP sušvirkštos kontrolinės pelės, nes po socialinio pralaimėjimo pomaksimalaus elgesio jie elgėsi vengdami socialinio elgesio (sąveika, F(2,38) = 2.847, p > 0.05, pagrindinis viruso poveikis, F(2,38) = 6.013, p <0.05; Bonferroni post testas t = 2.447, p <0.05) (Pav 1D). Šios pelės taip pat parodė didesnį nejudrumą atliekant priverstinį 1 plaukimo testą (F(2,31) = 6.448, p <0.05; Bonferroni post testas t = 3.518, p <0.05) (Pav 1E), priešingas efektui, kurį sukuria antidepresantai. Priešingai, ΔFosB per didelis ekspresija PrL nepakeitė kelių pradinių nerimo tipo elgesio, sacharozės pasirinkimo, socialinės sąveikos ar lokomotorinio aktyvumo rodiklių (Pav 1F – J). Visi šie duomenys patvirtina hipotezę, kad selektyvus ΔFosB indukcija jautrių pelių PrL sukelia pažeidžiamumą stresui ir jo žalingus padarinius. Atvirkščiai, ΔFosB raiška kitame mPFC, IL regione neturėjo jokios įtakos pradiniam emociniam elgesiui ar reakcijai į socialinį pralaimėjimo stresą. (Pav 1D – J), kadangi per didelis ΔFosB raiška medialiniame OFC buvo nukreiptas į atsparumo lėtiniams socialiniams pralaimėjimams skatinti skatinimą, nors šis poveikis neturėjo statistinės reikšmės (sąveika, F(1,31) = 1.741, p > 0.05, pagrindinis sąveikos laiko poveikis, F(1,31) = 14.170, p <0.05; Bonferroni post testas t = 3.860, p <0.05 GFP grupėje; t = 1.960, p <0.05 ΔFosB grupėje; viruso poveikis, t = 2.447, p <0.05) (Pav 1K).

ΔFosB skatina CCKB indukciją mPFC

Daugybė įrodymų patvirtina nuostatą, kad CCK, gausus neuropeptidas smegenyse, vaidina esminį vaidmenį neurozės streso ir nerimo mechanizmuose. (). Visų pirma, CCK išsiskyrimas mPFC atliekant žiurkių socialinį stresą yra susijęs su elgesiu, susijusiu su nerimu (). Nors CCK dalyvavimas žmogaus depresijoje vis dar nėra aiškus, naujausi įrodymai rodo jo vaidmenį socialinio pralaimėjimo sukeltas į depresiją panašus elgesys su žiurkėmis (). Taigi mes sukėlėme hipotezę, kad CCK arba jo CCKB (dar žinomo kaip CCK2) receptorių lygio pokyčiai mPFC gali sukelti skirtumus tarp jautrių ir atsparių pelių. 48 h po paskutinio pralaimėjimo epizodo CCKB mRNR lygis sumažėjo tik atsparių pelių mPFC (F(2,18) = 8.084, p <0.01; Bonferroni post testas, t = 3.104, p <0.05, palyginti su kontrole; t = 5.113, p <0.01 ir jautrus) (Pav 2A). Jokių jautrių ar atsparių pelių CCK mRNR lygio skirtumų nepastebėta (duomenys nepateikti). Pastebėjome Δ padidėjimąFosB mRNR lygis tik jautriose pelėse, atitinkantis aukščiau nurodytus baltymų duomenis (F(2,18) = 5.246, p <0.01; Bonferroni post testas t = 3.336, p <0.05, palyginti su imliais; t testas t(12) = 2.138, p <0.05 prieš kontrolę) (Pav 2B). Kadangi ΔFosB reguliuoja daugybės genų (; ), mes apsvarstėme galimybę, kad tai gali reguliuoti CCKB mRNR raišką. Norėdami išspręsti šį klausimą, pirmiausia padidinome FFosB reikšmę PrL ir nustatėme, kad ši manipuliacija padidina CCKB mRNR lygį šiame regione (t(12) = 2.012, p <0.05, palyginti su GFP) (Pav 2C). Įdomu tai, kad taip pat pastebėjome c-Fos mRNR lygis po ΔFosB perdėtos ekspresijos (t(11) = 3.382, p <0.01) (Pav 2C). Tšie atradimai taip pat rodo, kad ΔFosB indukcija jautrių pelių PrL yra aktyvus jautrumo mechanizmas, užkertant kelią CCKB slopinimui, pastebimam atsparioms pelėms.

Norėdami dar labiau sustiprinti šiuos stebėjimus, mes perdėm išreiškėme ΔJunD, ΔFosB surišančiojo partnerio, kuriam trūksta transaktyvumo srities, kuris veikia kaip dominuojantis neigiamas antagonistas, ir nustatėme jo poveikį streso sukeltai CCKB raiškai. Mes patvirtinome, kad lėtinis socialinis pralaimėjimo stresas padidino jautrių pelių CCLK baltymų kiekį PrL (t testas t(12) = 2.289, p <0.05 prieš kontrolę) (Pav 2D,E). Be to, tokią indukciją visiškai užblokavo ΔJunD perraiškos šiame regione (F(2,20) = 6.306, p <0.01, Bonferroni post testas t = 3.615, p <0.01) (Pav 2D,E), patvirtinančią hipotezę, kad ΔFosB tarpininkauja streso sukeltai CCKB raiškai. Be to, ΔFosB aktyvumo blokavimas PrL per vietinę ΔJunD raišką taip pat skatino atsparumą streso nugalėjimui (t testas t(16) = 2.114, p = 0.05 prieš valdymą) (Pav 2F). Turi būti išaiškintas mechanizmas, kuriuo grindžiamas atsparių pelių CCKB sureguliavimas.

CCKB vaidmuo atsparumui ir jautrumui stresui

Norėdami tiesiogiai patikrinti CCKB reguliavimo įtaką PrL tarpininkaujant jautrumui ir atsparumui, mes infuzėjome selektyvųjį CCKB receptorių antagonistą CI-988 (10 ng) tiesiai į šią jautrių pelių smegenų sritį. CI-988 efektyviai antagonizuoja CCKB receptorius in vivo nes pasižymi nanomoliniu afinitetu ir dideliu selektyvumu CCKB receptorių potipiui (). CCKB veiklos blokada smarkiai padidino socialinę sąveiką (Pav 2G) (sąveika, F(1,20) = 7.795, p <0.05; narkotikas F(1,20) = 5.38, p <0.05, Bonferroni post testas t = 3.615, p <0.01). CI-988 infuzija taip pat panaikino pirmenybę sacharozei, pastebėtą jautrioms pelėms (t(8) = 2.681, p <0.05) (Pav 2H). Abu elgesio rezultatai rodo, kad CCK blokada PrL sukelia stiprų antidepresantų poveikį. Įdomu tai, kad skiriant intraperitoniniu būdu, CI-988 neveiksmingai pakeitė socialinį vengimą (duomenys nepateikti).

Norėdami patikrinti atvirkščiai, kad CCKB aktyvacija PrL gali būti tarpininkavimas dėl socialinio vengimo ir sumažėjusio sacharozės pasirinkimo, kurį sukelia lėtinis socialinis pralaimėjimo stresas, ištyrėme vietinės CCK-8 (10 ng), dominuojančios CCK formos, infuzijos poveikį smegenyse. , dėl elgesio su depresija ir nerimu. Vaisto dozė buvo pasirinkta remiantis ankstesniais literatūros rezultatais (; ; ). Pelėms buvo atliktas submaximalus socialinis pralaimėjimo stresas 24 h prieš atliekant elgesio testus (Pav 3A). CCK-8, prieš bandymą suleidus 30 min., Pakako, kad būtų išvengta socialinės sąveikos testo, taip pat sumažintas laikas, praleistas atvirose rankose, padidintame pliuso labirinte (SI: BLA, sąveika, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; pagrindinis vaisto poveikis, F(1,22) = 11.75, p <0.05; Bonferroni post testas t = 2.957, p <0.05; NAc: sąveika, F(1,26) = 6.688, p <0.05, Bonferroni post testas t = 2.816, p <0.05; EPM: BLA, sąveika, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroni post testas t = 2.509, p <0.05 vaisto poveikis; t = 2.528, p <0.05 viruso poveikis; NAc, t testas t(17) = 1.961; p <0.05 vaisto poveikis eYFP grupėje) (Pav 3B – E, kairėje). Sacharozės pasirinkimo skirtumų nepastebėta (Pav 3F,G, kairėje). Galiausiai, CCK-8 infuzija neturėjo įtakos naivių, nenugalėtų pelių elgesiui (socialinė sąveika ir padidėjęs plius labirintas) atliekant šiuos tyrimus (duomenys nepateikti). TŠie rezultatai rodo, kad ΔFosB sąlygotas CCKB aktyvumo padidėjimas jautrių pelių PrL, palyginti su elastingomis pelėmis, prisideda prie kai kurių streso sukeltų elgesio trūkumų, kuriuos sukelia šie gyvūnai.

CCK sukelto jautrumo stresui blokada suaktyvinant žievės iškyšas į BLA, palyginti su NAc

Sumažėjęs mPFC nervų aktyvumas koreliuoja su į depresiją panašiu pelių elgesiu, su optogenetine jautrių pelių mPFC neuronų stimuliacija, sukeliančia antidepresantų panašų poveikį (). Taigi mes hipotezavome, kad CCK gali veikti PrL slopindamas neuronų aktyvumą ir tokiu būdu sukeldamas į depresiją panašų elgesį. Laikydamiesi šios hipotezės, mes pastebėjome c-Fos mRNR lygis PrL, reaguojant į CCK infuziją į šį smegenų regioną (t(13) = 2.235, p <0.05) (Pav 3H).

Kitas hipotezė buvo tai, kad optogenetinė mPFC stimuliacija veikia antidepresantais, priešindama CCK poveikį neuronų veiklai. Tikrindami šią hipotezę, mes ištyrėme subkortikines struktūras, sukeliančias nerimą keliantį nerimą keliantį CCK poveikį. PiPamidiniai mPFC neuronai smarkiai veikia NAc ir BLA - tai dvi limbinės struktūros, susijusios su elgesio reakcija į stresą. Įrodyta, kad pakitusi abiejų smegenų sričių veikla vaidina esminį nerimo ir depresijos pobūdį (; ). Todėl mes išbandėme, ar glutamaterginių projekcijų stimuliavimas nuo PrL iki NAc ar BLA prieštaraus žalingą CCK mikroinfuzijos į PrL poveikį (Pav 3A). Mes įšvirkštėme AAV-CaMKII-ChR2-EYFP arba AAV-CaMKII-EYFP kaip kontrolę į PrL. Yra žinoma, kad CaMKII promotorius nukreipia viruso ekspresiją į žievės srities glutamaterginius piramidinius neuronus. Tada mes skyrėme pakankamai laiko (6 savaitėms), kad transgenai galėtų būti pernešti į šių piramidinių neuronų nervų galus NAc ir BLA (Pav 3I). Pelės patyrė submaksimalų socialinį pralaimėjimą; Po 24 h mes įpylėme CCK-8 į PrL ir, 30 min. Po to, buvo matuojama socialinė sąveika optogenetiškai stimuliuojant glutamaterginius galus NAc ar BLA. Iškart po socialinės sąveikos testo pelės buvo įvertintos padidintame labirinte, kad būtų galima įvertinti su nerimu susijusį elgesį, o tada - sacharozės pasirinkimą anhedonijai įvertinti.

PrL glutamaterginių projekcijų į NAc optogenetinė stimuliacija visiškai panaikino vidinį PrL CCK-8 sukeltą vengimą (sąveika, F(1,26) = 6.688, p <0.05, vaisto poveikio ChR2 grupėje nėra) (Pav 3C). Atvirkščiai, tokia PrL – NAc stimuliacija neturėjo jokio poveikio į nerimą panašiam elgesiui, matuojant padidintame labirinte (Pav 3E); tačiau tokia stimuliacija padidino sacharozės pasirinkimą, palyginti su nestimuliuotomis pelėmis (sąveika, F(1,20) = 5.77, p <0.05; Bonferroni post testas t = 2.998, p <0.05 stimuliacijos poveikis CCK-8 gydytiems gyvūnams) (Pav 3G).

PrO glutamaterginių projekcijų į BLA optogenetine stimuliacija buvo stebimas labai skirtingas elgesio modelis. Tokia stimuliacija nesutrukdė socialinio vengimo, kurį sukelia vidinė PrL CCK-8 infuzija (sąveika, F(1,22) = 0.79, p > 0.05; pagrindinis vaisto poveikis, F(1,22) = 11.75, p <0.05; jokio poveikio stimuliuojamoje grupėje, t testas t(12) = 2.054, p <0.05) (Pav 3B). Tačiau BLA afferento stimuliacija turėjo anksiolitinį poveikį, kurį rodo padidėjęs laikas, praleistas padidinto pliuso labirinto atvirose rankose (sąveika, F(1,22) = 8.0, p <0.01; Bonferroni post testas t = 2.528, p <0.05 viruso poveikis CCK-8 gydomose grupėse) (Pav 3D). Glutamaterginių projekcijų į BLA stimuliavimas reikšmingo poveikio sacharozės preferencijai neturėjo (sąveika, F(1,22) = 2.08, p > 0.05) (Pav 3F).

Diskusija

Šio tyrimo rezultatai pateikia įrodymų, kad PrL vyksta molekulinės adaptacijos, pagrindžiančios jautrumą socialiniam stresui. Parodyta ΔFosB indukcija šiame mPFC subregione po lėtinio socialinio pralaimėjimo streso, kur ΔFosB perdėta ekspresija skatina jautrumą stresui. Mes nustatėme, kad CCKB receptorius yra vienas tikslinis genas, kurį reguliuoja ΔFosB PrL, matyt, indukuodamas CCKB baltymą jautriose pelėse ir užkertantis kelią CCKB ekspresijos, kuri pasireiškia selektyviai pelėms, reguliavimui. Mes taip pat parodėme, kad CCK agonisto infuzija į PrL skatina į depresiją ir į nerimą panašų elgesio anomaliją reaguojant į socialinį stresą, o CCKB receptorių aktyvumo blokavimas šiame jautrių pelių regione blokuoja šį poveikį. Toliau mes panaudojome optogenetinius įrankius, kad nustatytume mikroschemas, dalyvaujančias panašiame į prokresinį ir panašų į CCK veiksmus PrL. Nors kortikos-NAc glutamaterginės projekcijos tarpininkauja atlygio deficitui, kurį parodo socialinis vengimas ir sumažėjęs sacharozės pasirinkimas, šis mikrocirkuliacija nedaro įtakos nerviniam CCL, įlieto į PrL, poveikiui. Priešingai, žievės projekcija į BLA tarpininkauja su nerimu susijusio elgesio pasireiškime, tačiau neturi jokios įtakos socialinio streso sukeltam socialiniam vengimui ar sacharozės pasirinkimo deficitui. Šie duomenys kartu parodo, kad PrL funkcijos pokyčiai po lėtinio socialinio pralaimėjimo streso tarpininkauja daugeliui elgesio trūkumų per konkrečias subkortikines prognozes.

ΔFosB: limbinio streso tinklo ir vaidmens mPFC aprašymas

ΔFosB imunohistochemija identifikuoja chroniško streso paveiktus neuronus su vienos ląstelės skiriamąja geba ir buvo naudojama streso reguliuojamų neuronų grandinių žemėlapiams (; ; ). Mes panaudojome šią metodiką norėdami parodyti, kad lėtinis socialinis pralaimėjimo stresas sukelia ΔFosB keliose smegenų srityse, pasižyminčiomis skirtingais modeliais tarp atsparių ir jautrių grupių, kai kuriuose regionuose indukcija vyksta tik atsparioms pelėms, kitoms - tik jautrioms pelėms, o dar kitoms - abiem sąlygomis (Lentelė 1). Ankstesnis darbas parodė, kad ΔFosB indukcija NAc arba ventriniame PAG skatina atsparumą lėtiniam stresui ir prisideda prie antidepresantų reakcijų. (; ).

ΔFosB indukcija jautrių pelių PrL, kartu su ankstesniais duomenimis, kad optogenetinė šio regiono stimuliacija sukelia antidepresantą. (), paskatino mus ištirti ΔFosB įtaką šiame žievės regione. Priešingai nei NAc ir ventrinio PAG duomenys, mes nustatėme, kad PrL ΔFosB skatina jautrumą lėtiniam socialiniam pralaimėjimo stresui ir sukelia priverstinio plaukimo testą, panašų į prodepresiją, nedarant įtakos nerimą primenančiam elgesiui ar sacharozės pasirinkimui. Priešingai nei PrL, netolimoje IL neradome jokio ΔFosB ekspressijos poveikio. Neseniai atliktas tyrimas nustatė padidėjusį ΔFosB kiekį IL atsparių pelių organizme ir nurodė, kad šis subregionas yra atsparus socialiniam stresui (). Taigi reikalingi papildomi tyrimai, siekiant išsiaiškinti skirtingus šių dviejų mPFC subregionų vaidmenis, kurie, kaip įrodyta, daro priešingą poveikį kitose elgesio srityse (; ; ). Anksčiau pranešėme, kad depresija sergantiems žmonėms NAc tirtas postmortem rodo mažesnį ΔFosB lygį (), wkadangi aukštesni ΔFosB kiekiai buvo nustatyti depresija sergančių žmonių dorsolateraliniame PFC (Brodmanno srityje 46) (). Kiti žievės regionai nebuvo tiriami pastarajame tyrime. Bet kokiu atveju, šie atradimai kartu patvirtina konkrečiam regionui būdingus ΔFosB raiškos anomalijas žmogaus depresijos metu, kai transkripcijos faktorius daro labai skirtingą poveikį pažeidžiamumui stresui. Būsimuose tyrimuose būtų įdomu ištirti ΔFosB įtaką daugelyje kitų smegenų sričių, kur ji yra sukeliama (Lentelė 1) dėl reakcijų į stresą.

Vienas iš mechanizmų, kuriuo ΔFosB indukcija PrL gali prisidėti prie į depresiją panašaus elgesio, yra PrL aktyvumo slopinimas. Įrodyta, kad ΔFosB slopina AMPA gliutamato atsakus, ir c-Fos ekspresija NAc terpės nerviniuose neuronuose (; ; ). Panašiai nustatėme, kad sumažėjo c-Fos išraiška po ΔFosB perraiškos PrL. Taigi ΔFosB indukcija PrL gali lemti sumažėjusį neuronų aktyvumą šiame regione po lėtinio socialinio pralaimėjimo streso. Tikėtina, kad toks sumažėjęs PrL tonas, palyginti su subkortikiniais tikslais, tokiais kaip BLA ir NAc, padidins baimės išraišką ir nesugebėjimą užgesinti emocinių reakcijų į stresą (, ). Be to, mPFC pažeidimai sukelia įjautrintą reakciją į stresą ir baimės išnykimo stoką (; ; ; ), teigdamas, kad streso sukeltas mPFC susilpnėjimas, iš dalies susijęs su ΔFosB indukcija, gali prisidėti prie depresijos ir kitų su stresu susijusių sutrikimų ().

CCK vaidmuo pažeidžiant stresą

Mes pateikiame įrodymų, kad CCKB receptorius yra ΔFosB taikinys, todėl, kad ΔFosB indukcija PrL jautriai pelėms yra tik vienas iš mechanizmų, per kuriuos ΔFosB daro savo panašų į prodepresiją poveikį šiame regione. Nors specifiniai CCK veiksmai mPFC grandinėse vis dar neaiškūs, graužikams CCK yra lokalizuotas GABAergic interneuronuose (). Manoma, kad jis slopina žievės piramidinių neuronų aktyvumą didindamas vietinį GABA išsiskyrimą ir veikdamas tiesiogiai piramidinių neuronų ekspresuojamus CCKB receptorius (; ; ; ). Taigi, CCKergic neurotransmisija gali prisidėti prie aukščiau paminėto sumažėjusio PrL aktyvumo.

CCK yra nerimą sukeliantis agentas, sistemingai skiriantis CCKB agonistus, sukeliančius panikos priepuolius sveikiems savanoriams. Pacientai, linkę į panikos priepuolius, padidėjusio jautrumo po CCK ekspozicijos (; ). Keletas tyrimų patvirtino CCK anksiogeninį poveikį graužikams (). CCK išsiskyrimas mPFC atliekant stresą su žiurkėmis yra susijęs su nerimu susijusiu elgesiu (); Šiame tyrime PrL ir IL subregionai nebuvo diferencijuoti. Pastaruoju metu sisteminė, lėtinė CCKB ir CI-988 blokada žiurkėms padarė panašų į antidepresantus (). CI-988 normalizavo nejudrumo laiką atliekant priverstinio plaukimo testą. Tai taip pat užkirto kelią hipotalamo, hipofizės ir antinksčių ašies hiperaktyvumui, sumažino hipokampo apimtį ir ląstelių dauginimąsi bei sumažino sacharozės pasirinkimą, kurį paprastai sukelia socialinis pralaimėjimas. Čia mes patvirtiname šiuos rezultatus parodydami į antidepresantus panašų CI-988 poveikį, suleistą jautrių pelių PrL, nors vienkartinė sisteminė injekcija šio efekto nesiekia.

Be ūmių CCK veiksmų PrL, mes nustatėme sumažėjusį CCKB mRNR lygį elastingose ​​pelėse, o tai gali būti molekulinė adaptacija, kuria grindžiamas atsparumas. Iš tiesų, CCKerginio tono pokyčiai, ypač CCKB lygio, yra svarbus nerimo pasireiškimo mechanizmas. Transgeninės pelės, kurios per daug ekspresuoja CCKB priekinėse smegenyse, rodo padidėjusį nerimo ir baimės atsaką (). Mūsų nustatytos pakitusios CCKB koncentracijos tarp atsparių ir jautrių pelių gali prisidėti prie fenotipinių nerimo ir į depresiją panašaus elgesio skirtumų. Čia mes parodome PrL kaip kritinį anatominį substratą CCK anksiogeniniam ir prodepresiniam poveikiui socialinio streso kontekste. Nepaisant to, CCK elgesio veiksmuose dalyvauja keli kiti smegenų regionai, įskaitant BLA, hipokampą, NAc ir PAG (; ; ; ; ). Taip pat mes nustatėme padidėjusį CCKB baltymų kiekį jautriems gyvūnams mPFC, bet ne mRNR lygį. Šios išvados pabrėžia, kad nors mRNR lygis dažnai koreliuoja su baltymų lygiu, tai nebūtinai taikoma ().

Mūsų optogenetiniai eksperimentai rodo, kad didėjantis glutamaterginių projekcijų aktyvumas nuo PrL iki NAc ar BLA prieštarauja CCK poveikiui PrL. Norint nustatyti, ar šį optogenetinės stimuliacijos poveikį daro tie patys PrL neuronai, kuriuos kontroliuoja CCK, reikia papildomų tyrimų. Įdomu tai, kad mūsų duomenys atskleidžia skirtingus šių dviejų mikroschemų vaidmenis tarpininkaujant skirtingoms elgesio anomalijų sritims. Kortikos-NAc projekcija kontroliuoja anhedoniją ir atlygį; faktas, kad jis reguliuoja socialinį vengimą, patvirtina, kad šis simptomas labiau atspindi sumažėjusią motyvaciją ir atlygį už socialinį elgesį, o ne padidėjusį socialinį nerimą. Ši išvada atitinka benzodiazepinų nesugebėjimą ištaisyti šią anomaliją (), o neseniai parodžius, kad mPFC stimuliuojantis NAc padidina atlygį ir motyvaciją vartoti narkotikus (). Kortikos-BLA projekcija kontroliuoja su nerimu susijusius simptomus, suderintus su daugybe graužikų ir žmonių literatūros (žr. Aukščiau).

Taigi, Šio tyrimo rezultatai nustato galūnių smegenų sričių, susijusių su jautriais ir atspariais gyvūnais, modelį ir parodo PrL pokyčius, kurie skatina jautrumą. Šie pokyčiai apima ΔFosB ir jo indukuojamą CCKB receptorių. Priešingai, PrL CCK veiksmų blokavimas skatina antidepresantų ir anksiolitinius vaistus. Mes taip pat nustatome šių žievės piramidinių neuronų, kurie tarpininkauja šiems veiksmams, subkortikinius taikinius, naudojant kortikos-NAc grandinę, būtiną su depresija susijusiam elgesiui, ir kortikos-BLA grandinę, būtiną su nerimu susijusiam elgesiui. Nors klinikiniai CCNB antagonistų tyrimai pacientams, sergantiems depresija 1990, nedavė daug vilčių teikiančių rezultatų, šie atradimai rodo, kad vertėtų peržiūrėti tokių vaistų terapinį potencialą pacientų, kuriuos paveikė didelis stresas, pogrupiuose.

Išnašos

 

Šį darbą parėmė Nacionalinis psichinės sveikatos institutas (ETT) ir „Smegenų ir elgesio tyrimų fondo“ Nacionalinis aljansas šizofrenijos ir depresijos tyrimų jaunųjų tyrėjų apdovanojimui VV

 

 

Autoriai skelbia konkuruojančius finansinius interesus.

 

Nuorodos

  • Akirav I, Maroun M. Medialinės prefrontalinės žievės ir amigdalos grandinės vaidmuo įtampos įtakoje baimės išnykimui. Neuroninis plastikas. 2007; 2007: 30873. doi: 10.1155 / 2007 / 30873. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Barbas H, Blatt GJ. Topografiškai specifinės hipokampinės projekcijos nukreiptos į funkciškai skirtingas prefrontalines rezeuso beždžionės sritis. Hipokampas. 1995; 5: 511 – 533. doi: 10.1002 / hipo.450050604. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Becker C, Thièbot MH, Touitou Y, Hamon M, Cesselin F, Benoliel JJ. Padidėjęs žievės tarpląstelinis cholecistokininą primenančios medžiagos lygis prognozuojant socialinį žiurkių pralaimėjimą. J Neurosci. 2001; 21: 262 – 269. [PubMed]
  • „Becker C“, „Zeau B“, „Rivat C“, „Blugeot A“, „Hamon M“, „Benoliel JJ“. Kartotiniai socialiniai pralaimėjimai, sukelti į depresiją panašų žiurkių elgesį ir biologinius pokyčius: cholecistokinino dalyvavimas. Molinė psichiatrija. 2008; 13: 1079 – 1092. doi: 10.1038 / sj.mp.4002097. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Belcheva I, Belcheva S, Petkov VV, Petkov VD. Asimetrija elgesio reakcijose į cholecistokininą, įpuršktą į žiurkės branduolio akumuliatorius ir amygdalą. Neurofarmakologija. 1994; 33: 995 – 1002. doi: 10.1016 / 0028-3908 (94) 90158-9. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Benoliel JJ, Bourgoin S, Mauborgne A, Pohl M, Legrand JC, Hamon M, Cesselin F. GABA, veikdamas tiek GABAA, tiek GABAB receptorius, in vitro slopina cholecistokininą primenančios medžiagos išsiskyrimą iš žiurkės nugaros smegenų. „Brain Res. 1992; 590: 255 – 262. doi: 10.1016 / 0006-8993 (92) 91103-L. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Esminis BDNF vaidmuo, susijęs su mezolimbiniu dopamino keliu socialiniame pralaimėjime. Mokslas. 2006: 311: 864 – 868. doi: 10.1126 / science.1120972. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Berton O, Covington HE, 3rd, Ebner K, Tsankova NM, Carle TL, Ulery P, Bhonsle A, Barrot M, Krishnan V, Singewald GM, Singewald N, Birnbaum S, Neve RL, Nestler EJ. ΔFosB indukcija periaqueductal pilkoje pagal stresą skatina aktyvų susidorojimą su reakcijomis. Neuronas. 2007; 55: 289 – 300. doi: 10.1016 / j.neuron.2007.06.033. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Bewernick BH, Hurlemann R, Matusch A, Kayser S, Grubert C, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Lemke M, Cooper-Mahkorn D, Cohen MX, Brockmann H, Lenartz D, Sturm V, Schlaepfer TE. Branduolio kaupimas giliai stimuliuodamas smegenis sumažina depresijos ir nerimo laipsnį gydant atsparią depresiją. Biolo psichiatrija. 2010; 67: 110 – 116. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.09.013. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Bradwejn J, Koszycki D, Shriqui C. Padidėjęs jautrumas cholecistokinino tetrapeptidui esant panikos sutrikimui: klinikiniai ir elgesio duomenys. Arch Gen psichiatrija. 1991; 48: 603 – 610. doi: 10.1001 / archpsyc.1991.01810310021005. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Bremner JD“. Ar stresas kenkia smegenims? Biolo psichiatrija. 1999; 45: 797 – 805. doi: 10.1016 / S0006-3223 (99) 00009-8. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Bremner JD“. Trauminis stresas: poveikis smegenims. Dialogai „Clin Neurosci“. 2006; 8: 445 – 461. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  • „Bremner JD“. Neurologinis vaizdas potrauminio streso sutrikimo ir kitų su stresu susijusių sutrikimų atvejais. Neurovaizdžio klinika Šiaurės Am. 2007; 17: 523 – 538. doi: 10.1016 / j.nic.2007.07.003. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Britt JP“, „Benaliouad F“, „McDevitt RA“, „Stuber GD“, „Wise RA“, „Bonci“. Neuronas. 2012: 76: 790 – 803. doi: 10.1016 / j.neuron.2012.09.040. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Burgos-Robles A“, „Bravo-Rivera H“, „Quirk GJ“. Prelimbiniai ir infralimbiniai neuronai signalizuoja apie skirtingus apetitinio instrumentinio elgesio aspektus. „PLoS One“. 2013; 8: e57575. doi: 10.1371 / žurnalas.pone.0057575. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Chen Q, Nakajima A, Meacham C, Tang YP. Padidėjęs cholecistokininerginis tonas yra svarbus molekulinis / neuroninis pelės nerimo pasireiškimo mechanizmas. „Proc Natl Acad Sci“, JAV A. 2006; 103: 3881 – 3886. doi: 10.1073 / pnas.0505407103. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Choi DC“, „Gourley SL“, „Ressler KJ“. Prelimbinis BDNF ir TrkB signalizavimas reguliuoja ir apetitinį, ir aversyvų emocinį mokymąsi. Translio psichiatrija. 2012; 2: e205. doi: 10.1038 / tp.2012.128. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Christoffel DJ, „Golden SA“, Dumitriu D, Robison AJ, Janssen WG, Ahn HF, Krishnan V, Reyes CM, Han MH, Ables JL, Eisch AJ, Dietz DM, Ferguson D, Neve RL, Greengard P, Kim Y, Morrison JH , Russo SJ. IκB kinazė reguliuoja streso sukeltą sinapsinį ir elgesio plastiškumą. J Neurosci. 2011; 31: 314 – 321. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4763-10.2011. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Covington HE, 3rd, Kikusui T, Goodhue J, Nikulina EM, Hammer RP, Jr, Miczek KA. Trumpas socialinis pralaimėjimo stresas: ilgalaikis poveikis kokaino vartojimui pūslelinės metu ir zif268 mRNR raiška amygdaloje ir prieš frontalinėje žievėje. Neuropsichofarmakologija. 2005; 30: 310 – 321. doi: 10.1038 / sj.npp.1300587. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Covington HE, 3rd, Lobo MK, Maze I, Vialou V, Hyman JM, Zaman S, LaPlant Q, Mouzon E, Ghose S, Tamminga CA, Neve RL, Deisseroth K, Nestler EJ. Antidepresinis medialinio prefrontalinio žievės optogenetinio stimuliavimo poveikis. J Neurosci. 2010: 30: 16082 – 16090. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1731-10.2010. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Covington HE, 3rd, Maze I, Sun H, Bomze HM, DeMaio KD, Wu EY, Dietz DM, Lobo MK, Ghose S, Mouzon E, Neve RL, Tamminga CA, Nestler EJ. Represinio histono metilinimo vaidmuo kokaino sukeliamame pažeidžiamume dėl streso. Neuronas. 2011; 71: 656 – 670. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.06.007. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • de Montigny C. Cholecistokinino tetrapeptidas sveikiems savanoriams sukelia panikos priepuolius: preliminarios išvados. Arch Gen psichiatrija. 1989; 46: 511 – 517. doi: 10.1001 / archpsyc.1989.01810060031006. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • De Witte P, Heidbrederis C, Roquesas B, Vanderhaeghenas JJ. Priešingas cholecistokinino oktapeptido (CCK-8) ir tetrapeptido (CCK-4) poveikis švirkščiant į kaukolės branduolio dalį arba į jo rostralinę dalį ir smegenų skilvelius. „Neurochem Int. 1987; 10: 473 – 479. doi: 10.1016 / 0197-0186 (87) 90074-X. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Diorio D, Viau V, Meaney MJ. Medialinės prefrontalinės žievės (cingulate gyrus) vaidmuo reguliuojant pagumburio-hipofizės ir antinksčių reakcijas į stresą. J Neurosci. 1993; 13: 3839 – 3847. [PubMed]
  • Drevets WC. Neurografiniai ir neuropatologiniai depresijos tyrimai: įtaka kognityviniams-emociniams nuotaikos sutrikimų požymiams. Curr Opin Neurobiol. 2001; 11: 240 – 249. doi: 10.1016 / S0959-4388 (00) 00203-8. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Fales CL, Barch DM, Rundle MM, Mintun MA, Snyder AZ, Cohen JD, Mathews J, Sheline YI. Pakeistas emocinių trukdžių apdorojimas afektinės ir kognityvinės smegenų grandinėse esant didžiosioms depresijoms. Biolo psichiatrija. 2008; 63: 377 – 384. doi: 10.1016 / j.biopsych.2007.06.012. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Fales CL“, „Barch DM“, „Rundle MM“, „Mintun MA“, „Mathews J“, „Snyder AZ“, „Sheline YI“. Gydymas antidepresantais normalizuoja dorsolateralinės priekinės smegenų žievės hipoaktyvumą, kai vyksta didžiosios depresijos emociniai trukdžiai. J Įtakos sutrikimas. 2009; 112: 206 – 211. doi: 10.1016 / j.jad.2008.04.027. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Feder A“, „Nestler EJ“, „Charney DS“. Psichobiologija ir atsparumo molekulinė genetika. Nat Rev Neurosci. 2009; 10: 446 – 457. doi: 10.1038 / nrn2649. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Gallopin T, Geoffroy H, Rossier J, Lambolez B. Cortical CRF, NKB ir CCK šaltiniai ir jų poveikis piramidinėms ląstelėms neokortekso srityje. Galūnių žievė. 2006; 16: 1440 – 1452. doi: 10.1093 / cercor / bhj081. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Grubert C, Hurlemann R, Bewernick BH, Kayser S, Hadrysiewicz B, Axmacher N, Sturm V, Schlaepfer TE. Neuropsichologinis branduolio akumuliatorių giliųjų smegenų stimuliavimas esant didelėms depresijoms: 12 mėnesio stimuliacijos poveikis. Pasaulio J Biolo psichiatrija. 2011; 12: 516 – 527. doi: 10.3109 / 15622975.2011.583940. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC. ΔFosB diferencialiai moduliuoja branduolio accumbens tiesioginę ir netiesioginę funkciją. Proc Natl Acad Sci US A. 2013, 110: 1923 – 1928. doi: 10.1073 / pnas.1221742110. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Gygi SP, Rochon Y, Franza BR, Aebersold R. Baltymų ir mRNR gausos mielėse koreliacija. Mol Cell Biol. 1999; 19: 1720 – 1730. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  • Heidbreder CA, Groenewegen HJ. Medialinė priekinės priekinės žievės dalis žiurkėje: įrodymas, kad dorso-ventralinis skirtumas yra paremtas funkcinėmis ir anatominėmis savybėmis. „Neurosci Biobehav“ red. 2003; 27: 555 – 579. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2003.09.003. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Holsonas RR. Mezialiniai prefrontaliniai žievės pažeidimai ir nedrąsumas žiurkėms: I. Reaktingumas prieštaringus dirgiklius. Physiol Behav. 1986; 37: 221 – 230. doi: 10.1016 / 0031-9384 (86) 90224-6. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Keedwell PA, Andrew C, Williams SC, Brammer MJ, Phillips ML. Neuroninis koreliacija su anhedonija sergant pagrindiniu depresijos sutrikimu. Biolo psichiatrija. 2005; 58: 843 – 853. doi: 10.1016 / j.biopsych.2005.05.019. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Kennedy SH, Giacobbe P. Gydymui atspari depresija: somatinių gydymo būdų pažanga. Ann Clin psichiatrija. 2007; 19: 279 – 287. doi: 10.1080 / 10401230701675222. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Kennedy SH, Evans KR, Krüger S, Mayberg HS, Meyer JH, McCann S, Arifuzzman AI, Houle S, Vaccarino FJ. Regioninės smegenų gliukozės apykaitos pokyčiai, išmatuoti pozitronų emisijos tomografija po paroksetino gydymo pagrindine depresija. Am J psichiatrija. 2001; 158: 899 – 905. doi: 10.1176 / appi.ajp.158.6.899. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Krishnan V, Han MH, Graham DL, Berton O, Renthal W, Russo SJ, Laplant Q, Graham A, Lutter M, Lagace DC, Ghose S, Reister R, Tannous P, Green TA, Neve RL, Chakravarty S, Kumar A Eisch AJ, Self DW, Lee FS ir kt. Molekuliniai pritaikymai, kurie yra jautrūs ir atsparūs socialiniam pralaimėjimui smegenų atlygio regionuose. Ląstelė. 2007: 131: 391 – 404. doi: 10.1016 / j.cell.2007.09.018. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Krishnanas V, „Nestler EJ“. Depresijos molekulinė neurobiologija. Gamta. 2008; 455: 894 – 902. doi: 10.1038 / gamta07455. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Lehmann ML, Herkenham M. Aplinkos sodrinimas suteikia streso atsparumą socialiniam pralaimėjimui per infralimbinį žievės priklausomą neuroanatominį kelią. J Neurosci. 2011: 31: 6159 – 6173. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0577-11.2011. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Leistedt SJ, Linkowski P. Smegenys, tinklai, depresija ir kita. Eur neuropsichofarmakolo. 2013; 23: 55 – 62. doi: 10.1016 / j.euroneuro.2012.10.011. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Mayberg HS“, „Lozano AM“, „Voon V“, „McNeely HE“, „Seminowicz D“, „Hamani C“, „Schwalb JM“, Kennedy SH. Gilus smegenų stimuliavimas gydant atsparią depresiją. Neuronas. 2005; 45: 651 – 660. doi: 10.1016 / j.neuron.2005.02.014. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Esminis histono metiltransferazės G9a vaidmuo kokaino sukeltame plastikume. Mokslas. 2010: 327: 213 – 216. doi: 10.1126 / science.1179438. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „McClung CA“, „Nestler EJ“. CREB ir DeltaFosB reguliuoja genų ekspresiją ir atlygį už kokainą. Nat Neurosci. 2003; 6: 1208 – 1215. doi: 10.1038 / nn1143. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Milad MR, Quirk GJ. Medialinės priekinės žievės žievės neuronai signalizuoja apie baimę išnykti. Gamta. 2002; 420: 70 – 74. doi: 10.1038 / gamta01138. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Nahas Z, Anderson BS, Borckardt J, Arana AB, George MS, Reeves ST, Takacs I. Dvipusė epidurinė prieš frontalinė žievės stimuliacija gydant atsparią depresiją. Biolo psichiatrija. 2010; 67: 101 – 109. doi: 10.1016 / j.biopsych.2009.08.021. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Nikulina EM“, „Arrillaga-Romay I“, Miczek KA, „Hammer RP“, Jr. Ilgalaikis mezokortikolimbinių struktūrų pakitimas po pakartotinio žiurkių socialinio pralaimėjimo streso: mu-opioidų receptorių mRNR ir FosB / DeltaFosB imunoreaktyvumas. Eur J Neurosci. 2008; 27: 2272 – 2284. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2008.06176.x. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Noble F“, „Roques BP“. CCK-B receptoriai: chemija, molekulinė biologija, biochemija ir farmakologija. Prog neurobiolis. 1999; 58: 349 – 379. doi: 10.1016 / S0301-0082 (98) 00090-2. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Noble F“, „Wank SA“, „Crawley JN“, „Bradwejn J“, „Seroogy KB“, „Hamon M“, „Roques BP“. Tarptautinė farmakologijos sąjunga: XXI. Cholecistokinino receptorių struktūra, pasiskirstymas ir funkcijos. 1999; 51: 745 – 781. [PubMed]
  • Pérez de la Mora M, Hernandez-Gómez AM, Méndez-Franco J, Fuxe K. Cholecystokinin-8 padidina K (+) - iššaukiamą [3H] gama-aminosviesto rūgšties išsiskyrimas skiltelėmis iš įvairių smegenų sričių. Eur J „Pharmacol“. 1993; 250: 423 – 430. doi: 10.1016 / 0014-2999 (93) 90029-H. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. ΔFosB indukcija su lydinčiais smegenų struktūromis po lėtinio streso. J Neurosci. 2004: 24: 10594 – 10602. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2542-04.2004. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Skirtingi DeltaFosB indukcijos modeliai smegenyse naudojant narkotikus. Sinapsija. 2008: 62: 358 – 369. doi: 10.1002 / syn.20500. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Radley JJ, „Rocher AB“, Miller M, Janssen WG, Liston C, Hof PR, McEwen BS, Morrison JH. Pakartotinis stresas sukelia dendritinį stuburo nykimą žiurkės medialiniame priešfrontaliniame žieve. Galūnių žievė. 2006; 16: 313 – 320. doi: 10.1093 / cercor / bhi104. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Renthal W“, „Carle TL“, „Maze I“, „Covington HE“, „3rd“, „Truong HT“, „Alibhai I“, „Kumar A“, „Montgomery RL“, „Olson EN“, „Nestler EJ“. Po lėtinio amfetamino poveikio „Delta FosB“ tarpininkauja e-genetiškai veikiant c-fos geną. J Neurosci. 2008; 28: 7344 – 7349. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1043-08.2008. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Rezayat M“, „Roohbakhsh A“, „Zarrindast MR“, „Massoudi R“, „Djahanguiri B.“ Cholecistokinino ir GABA sąveika žiurkių nugaros hipokampuose padidėjusio pliusinio labirinto testo metu. Physiol Behav. 2005; 84: 775 – 782. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.03.002. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Richardas J. M., Berridge'o KC. Prefrontalinė žievė moduliuoja norą ir baimę, kurią sukelia branduolio akumuliatorių glutamato skilimas. Biolo psichiatrija. 2013; 73: 360 – 370. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.08.009. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Rotzinger S“, „Vaccarino FJ“. Cholecistokinino receptorių potipiai: vaidmuo modifikuojant su nerimu ir atlygiu susijusį elgesį gyvūnų modeliuose. J psichiatrijos neurosci. 2003; 28: 171 – 181. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  • „Schlaepfer TE“, „Cohen MX“, „Frick C“, „Kosel M“, „Brodesser D“, „Axmacher N“, „Joe AY“, „Kreft M“, „Lenartz D“, „Sturm V.“. Gilus smegenų stimuliavimas apdovanoti grandines palengvina anhedoniją refrakterinės didžiosios depresijos metu. Neuropsichofarmakologija. 2008; 33: 368 – 377. doi: 10.1038 / sj.npp.1301408. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Sierra-Mercado D“, „Padilla-Coreano N“, „Quirk GJ“. Atskirtiniai išankstinės ir infralimbinės žievės, ventralinio hipokampo ir bazolateralinės amigdalos vaidmenys sąlygotos baimės išraiškoje ir išnykime. Neuropsichofarmakologija. 2011; 36: 529 – 538. doi: 10.1038 / npp.2010.184. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Silva MG“, „Boyle MA“, „Finger S“, „Numan B“, „Bouzrara AA“, „Almli CR“. Didelių ir mažų žiurkių medialinės priekinės žievės pažeidimų elgsena. Exp Brain Res. 1986; 65: 176 – 181. [PubMed]
  • Somogyi P, Hodgson AJ, Smith AD, Nunzi MG, Gorio A, Wu JY. Skirtingose ​​kačių regos žievės ir hipokampo GABAerginių neuronų populiacijose yra somatostatino arba cholecistokinino - imunoreaktyviosios medžiagos. J Neurosci. 1984; 4: 2590 – 2603. [PubMed]
  • Surget A, Tanti A, Leonardo ED, Laugeray A, Rainer Q, Touma C, Palme R, Griebel G, Ibarguen-Vargas Y, Hen R, Belzung C. Antidepresantai įdarbina naujus neuronus, kad pagerintų atsako į stresą reguliavimą. Molinė psichiatrija. 2011; 16: 1177 – 1188. doi: 10.1038 / mp.2011.48. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Taniguchi H, He M, Wu P, Kim S, Paik R, Sugino K, Kvitsiani D, Fu Y, Lu J, Lin Y, Miyoshi G, Shima Y, Fishell G, Nelson SB, Huang ZJ. Cre vairuotojo linijų šaltinis, skirtas genetiniam taikymui į GABAerginius neuronus smegenų žievėje. Neuronas. 2011; 71: 995 – 1013. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.07.026. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Teyssier JR, Ragot S, Chauvet-Gélinier JC, Trojak B, Bonin B. DeltaFOSB priklausomo geno ekspresijos modelio aktyvinimas pacientų, sergančių pagrindine depresija, dorsolateralinėje priekinėje priekinėje žievėje. J Įtakos sutrikimas. 2011; 133: 174 – 178. doi: 10.1016 / j.jad.2011.04.021. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Tsankova NM“, „Berton O“, „Renthal W“, „Kumar A“, „Neve RL“, „Nestler EJ“. Tvarus hipokampo chromatino reguliavimas pelių depresijos ir antidepresantų modelyje. Nat Neurosci. 2006; 9: 519 – 525. doi: 10.1038 / nn1659. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Tye KM“, „Prakash R“, Kim SY, „Fenno LE“, „Grosenick L“, „Zarabi H“, „Thompson KR“, „Gradinaru V“, „Ramakrishnan C“, „Deisseroth K.“. „Amygdala“ schema, tarpininkaujanti grįžtamojo ir dvipusio nerimo kontrolei. Gamta. 2011; 471: 358 – 362. doi: 10.1038 / gamta09820. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Vialou V, Robison AJ, Laplant QC, Covington HE, 3rd, Dietz DM, Ohnishi YN, Mouzon E, Rush AJ, 3rd, Watts EL, Wallace DL, Iñiguez SD, Ohnishi YH, Steiner MA, Warren BL, Krishnan V, Bolaños. CA, Neve RL, Ghose S, Berton O, Tamminga CA ir kt. „DeltaFosB“ smegenų atlygio grandinėse tarpininkauja atsparumui stresui ir antidepresantams. Nat Neurosci. 2010; 13: 745 – 752. doi: 10.1038 / nn.2551. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Vogt BA, Finch DM, Olson CR. Funkcinis nevienalytiškumas žievės žievėje: priekinė vykdomoji ir užpakalinė įvertinamosios sritys. Galūnių žievė. 1992; 2: 435 – 443. doi: 10.1093 / cercor / 2.6.435-a. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Wilkinson MB“, „Xiao G“, „Kumar A“, „LaPlant Q“, „Renthal W“, „Sikder D“, „Kodadek TJ“, „Nestler EJ“. Gydymas imipraminu ir atsparumas rodo panašų chromatino reguliavimą pelių branduolių akumuliatoriuose depresijos modeliuose. J Neurosci. 2009; 29: 7820 – 7832. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0932-09.2009. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB indukcija orbitofrontalinėje žievėje yra tolerancija kokaino sukeltai kognityvinei disfunkcijai. J Neurosci. 2007; 27: 10497 – 10507. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.2566-07.2007. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • Yaksh TL, Furui T, Kanawati IS, Go VL. Cholecistokinino išsiskyrimas iš žiurkės smegenų žievės in vivo: GABA ir glutamato receptorių sistemų vaidmuo. „Brain Res. 1987; 406: 207 – 214. doi: 10.1016 / 0006-8993 (87) 90784-0. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
  • „Zanoveli JM“, „Netto CF“, „Guimarães FS“, „Zangrossi H.“, Jr. Cholecistokinino sulfato oktapeptido (CCK-8s) sisteminės ir vidinės dorsalinės periaqueductal pilkos spalvos injekcijos sukelia panikišką atsaką žiurkėms, patekusioms į padidintą T-labirintą. Peptidai. 2004; 25: 1935 – 1941. doi: 10.1016 / j.peptides.2004.06.016. [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]