Pasitraukimas sukelia skirtingus FosB / osFosB ekspresijos modelius pašalinėse Šveicarijos pelėse, klasifikuojamoms kaip jautrios ir atsparios etanolio sukeltam lokomotoriniam jautrumui (2014)

Pharmacol Biochem Behav. 2014 Feb; 117: 70-8. doi: 10.1016 / j.pbb.2013.12.007. Epub 2013 Dec 16.

De Pauli RF1, Coelhoso CC2, Tesone-Coelho C2, Linardi A3, Mello LE2, Silveira DX1, Santos-Junior JG4.

Abstraktus

Lėtinis vaisto poveikis ir narkotikų vartojimo nutraukimas sukelia ekspresyvų neuroninį plastiškumą, kuris gali būti laikomas tiek funkciniu, tiek patologiniu atsaku. Nustatyta, kad neuronų plastiškumas limbinėje sistemoje atlieka svarbų vaidmenį atkryčiui, taip pat priklausomybės nuo narkotikų kompulsinėms charakteristikoms. Nors FosB / DeltaFosB ekspresijos padidėjimas yra vienas svarbiausių narkotikų priklausomybės neuronų plastiškumo formų, neaišku, ar jie yra funkciniai, ar patologiniai. Svarbu atkreipti dėmesį į individualius skirtumus pereinant nuo rekreacinio naudojimo prie narkomanijos. Šie skirtumai buvo pastebėti atliekant tyrimus, kuriuose dalyvavo etanolio sukeltas judrumo jautrinimo paradigma. Šiame tyrime tyrėme, ar jautrios ir nejautrintos pelės skiriasi pagal FosB / DeltaFosB ekspresiją. Suaugusiems vyriškiems vyriškiems Šveicarijos pelėms kasdien buvo gydomi etanoliu arba fiziologiniu tirpalu 21days. Pagal lokomotorinį aktyvumą gavimo fazėje jie buvo klasifikuojami kaip jautrinti (EtOH_High) arba nejautrinti (EtOH_Low). Po 18h arba 5days, jų smegenys buvo apdorotos FosB / DeltaFosB imunohistochemijai. 5th pasitraukimo dieną mes galėjome stebėti padidėjusią FosB / DeltaFosB ekspresiją EtOH_High grupėje (motorinėje žievėje), EtOH_Low grupėje (ventralinėje tegmental srityje) ir abiejose grupėse (striatume). EtOH_Low grupėje skirtumai buvo nuoseklesni. Dėl to etanolio sukeltos judrumo jautrumo nustatymo fazės metu pastebėtas elgesio kintamumas buvo susijęs su diferenciniu neuroniniu plastiškumu nutraukimo laikotarpiu. Be to, skirtingi FosB / DeltaFosB ekspresijos modeliai, nustatyti jautriose ir nejautrintose pelėse, labiau susiję su nutraukimo laikotarpiu, o ne su lėtiniu vaisto poveikiu. Galiausiai, FosB / DeltaFosB ekspresijos padidėjimas nutraukimo laikotarpiu gali būti laikomas dėl funkcinio ir patologinio plastiškumo.

 


Pabrėžia

  • DeltaFosB išraiška yra svarbi narkotikų priklausomybės neuronų plastiškumo forma

  • Tačiau neaišku, ar jis yra funkcinis ar patologinis plastiškumas.

  • Čia aptikome DeltaFosB skirtumus tarp jautrių ir nejautrintų pelių.

  • Šie skirtumai labiau susiję su atsitraukimo laikotarpiu, o ne su vaisto poveikiu.

  • Siūlome, kad šie pokyčiai atspindėtų tiek funkcinį, tiek patologinį plastiškumą.


Raktiniai žodžiai

  • FosB;
  • DeltaFosB;
  • Lokomotorinis jautrinimas;
  • Atšaukimas;
  • Elgesio kintamumas;
  • Pelės

1. Įvadas

Dabartinių neurobiologinių tyrimų, susijusių su narkomanija, iššūkis yra suprasti neuronų plastiškumo mechanizmus, kurie tarpininkauja perėjimui nuo rekreacinio naudojimo prie elgesio kontrolės praradimo dėl narkotikų vartojimo ir narkotikų vartojimo. Viena iš svarbiausių narkomanijos teorijų, vadinama „tamsia priklausomybės pusė“, rodo, kad yra impulsyvumas (susijęs su teigiamu sutvirtinimu) iki kompulsyvumo (susijęs su neigiamu sutvirtinimu). Susidūrusio ciklo eigai susideda iš šių valstybių: rūpestis / laukimas, apsinuodijimas ir pasitraukimas / neigiamas poveikis (Koob ir Le Moal, 2005, Koob ir Le Moal, 2008 ir Koob ir Volkow, 2010). Remiantis šiuo scenarijumi, narkomanijos tyrimai buvo sutelkti į neurobiologinius mechanizmus, susijusius su neigiamomis emocinėmis būsenomis, atsirandančiomis tiek dėl ūminio, tiek užsitęsusio susilaikymo. Pagal „tamsos priklausomybės pusės“ teoriją, atrodo, atsiranda ilgalaikių ir nuolatinių plastiškumo pokyčių nervų grandinėse, siekiant apriboti atlygį. Tačiau šie plastiškumo pokyčiai lemia neigiamą emocinę būseną, atsirandančią užkertant kelią prieigai prie vaisto. Šis mechanizmas suteikia stiprią motyvaciją sukurti priklausomybę, o taip pat jos palaikymą (Koob ir Le Moal, 2005 ir Koob ir Le Moal, 2008).

Lokomotorinis jautrinimas yra naudingas gyvūnų modelis, pagrįstas tuo, kad padidėjęs vaistų subjektyvus poveikis jų pakartotinio poveikio metu yra panašus į vaistų sukeltų stimuliatorių lokomotorinio poveikio padidėjimą (Vanderschuren ir Kalivas, 2000 ir Vanderschuren ir Pierce, 2010). Nors lokomotorinis jautrinimas nesimizuoja keleto su narkomanija susijusių elgesių, jo laikinosios morfologinės ir neurocheminės savybės yra lygiagrečios su tuo, kas lemia perėjimą nuo rekreacinio naudojimo prie narkomanijos (Robinson ir Kolb, 1999, Vanderschuren ir Kalivas, 2000 ir Vanderschuren ir Pierce, 2010). Tradiciškai lokomotorinio jautrinimo protokolą sudaro trys fazės: įsigijimas (pakartotinis vaisto poveikis), pasitraukimo laikotarpis ir iššūkis (naujas kontaktas su vaistiniu preparatu po pasitraukimo laikotarpio). Deja, daugelis tyrimų, kuriuose lokomotorinis jautrinimas buvo sutelktas, buvo sutelktos tik įgyti ir išbandyti.

Nustatyta, kad pakartotinis poveikis piktnaudžiavimoPerrotti ir kt., 2008) ir lėtinis stresas (Perrotti ir kt., 2004) padidina transkripcijos faktoriaus fosB / deltafosB ekspresiją kortikoskopinėje sistemoje. FosB / DeltaFosB kaupimasis šiuose regionuose yra hipotetinis, kad vaidins pagrindinį vaidmenį atsparumo stresui (Berton ir kt., 2007 ir Vialou ir kt., 2010) ir už kokaino naudą (Harris ir kt., 2007 ir Muschamp ir kt., 2012), etanolis (Kaste ir kt., 2009 ir Li ir kt., 2010) ir opioidų (Zachariou ir kt., 2006 ir Solecki ir kt., 2008). Todėl gali būti, kad FosB / DeltaFosB moduliuoja kai kuriuos neuroninio plastiškumo įvykius, susijusius su etanolio sukeltu judrumo jautrinimu, taip pat pašalinimą, kuris sukelia lokomotorinio jautrumo nustatymo fazę.

Pažymėtina, kad perėjimas nuo rekreacinio naudojimo prie narkomanijos yra individualūs (Flagel et al., 2009, Džordžas ir Koobas, 2010 ir Swendsen ir Le Moal, 2011). Pavyzdžiui, DBA / 2 J pelės yra labiau linkusios reaguoti į etanolio sukeltą lokomotorinį jautrinimą nei C57BL / 6 J (Phillips ir kt., 1997 ir Melón ir Boehm, 2011a). Ištirtose Šveicarijos pelėse pirmiausia buvo aprašytas etanolio sukeltos judrumo jautrinimo elgesio variabilumas Masur ir dos Santos (1988). Nuo to laiko kiti tyrimai parodė svarbias neurochemines savybes, susijusias su elgsenos kintamumu etanolio sukelto lokomotorinio jautrinimo (Souza-Formigoni ir kt., 1999, Abrahão ir kt., 2011, Abrahão ir kt., 2012, Quadros ir kt., 2002a ir Quadros ir kt., 2002b). Tačiau šiuose tyrimuose neatsižvelgta į elgsenos kintamumo poveikį pasitraukimo laikotarpiu po lokomotorinio jautrumo nustatymo fazės. Neseniai atliktame tyrime laboratorija apibūdino didelį skirtumą tarp jautrių ir nejautrintų Šveicarijos pelių, susijusių su 1 (CB1R) kanabinoidinio receptoriaus ekspresija per ištrauką. Šiame tyrime jautrios (bet ne nejautrintos pelės) padidino CB1R ekspresiją prefrontalinėje žievėje, ventraliniame tegmental srityje, amygdaloje, striatume ir hipokampe (Coelhoso ir kt., 2013).

Atsižvelgiant į nusistovėjusių Šveicarijos pelių gerai nustatytą elgesio kintamumą, susijusį su etanolio sukeltu lokomotoriniu jautrinimu, ir kad šį kintamumą vėlesnio pašalinimo metu lydi aiškios neurocheminės savybės, šiame tyrime pradžioje buvo tiriama FosB / DeltaFosB (18 val.) Ir po 5 dienų atsiėmimo.

2. Medžiaga ir metodai

2.1. Dalykai

Buvo naudojamos paukščių veislės Šveicarijos Webster pelių patinai (EPM-1 kolonija, San Paulas, SP, Brazilija), iš pradžių gautos iš „Albino Swiss Webster“ linijos iš Federalinio de San Paulo universiteto biologinių ir medicininių gyvūnų modelių kūrimo centro. . Tyrimo pradžioje pelės buvo 12 savaičių amžiaus (30–40 g). 10 pelių grupės buvo apgyvendintos narvuose (40 × 34 × 17 cm) su medienos drožlių patalyne. Gyvūnų kolonija, kontroliuojama temperatūra (20–22 ° C) ir drėgmė (50%), buvo palaikoma šviesos / tamsos ciklu (12/12 val.), Žiburiai įjungiami 07:00 val., Su pelės čiulpų granulėmis ir vandens iš čiaupo skelbimu libitum, išskyrus bandymo metu. Pelės tokiose laikymo sąlygose buvo palaikomos mažiausiai 7 dienas iki gydymo vaistais ir elgesio testų pradžios. Gyvūnų priežiūra ir eksperimentinės procedūros buvo vykdomos pagal protokolus, kuriuos patvirtino universiteto Gyvūnų priežiūros ir naudojimo etikos komitetas (protokolo numeris: 2043/09), pagal bandymams su gyvūnais skirtą ES direktyvą 2010/63 / ES (http://ec.europa.eu/environmental/chemicals/lab_animals/legislation_en.htm).

2.2. Lokomotorinis jautrinimas

Lokomotyvų sensibilizacijos protokolas buvo pagrįstas ankstesniu mūsų laboratorijos tyrimu (Coelhoso ir kt., 2013). Protokolo pradžioje visiems gyvūnams į pilvaplėvės ertmę (ip) buvo įpurškiamas fiziologinis tirpalas ir nedelsiant 15 minučių tiriami automatizuoto aktyvumo dėžutėje („Insight“, Brazilija), siekiant nustatyti bazinį judėjimą. Po dviejų dienų gyvūnams kasdien buvo švirkščiamas etanolis (2 g / kg, 15% m / V 0.9% NaCl, ip-EtOH grupė, N = 40) arba fiziologinis tirpalas (panašus tūris, ip, - kontrolinė grupė, N = 12), per 21 dieną. Iškart po 1-os, 7-os, 14-os ir 21-os injekcijos gyvūnai 15 min buvo dedami į aktyvumo narvą. Horizontalus judėjimas kiekvienoje situacijoje buvo matuojamas elgesio analizės sistema (Pan Lab, Ispanija). Kaip tikėtasi ( Masur ir dos Santos, 1988 ir Coelhoso ir kt., 2013), elgesio variabilumas lokomotoriniame aktyvume 21st gavimo dieną leidžia mums paskirstyti EtOH grupės gyvūnus 2 pogrupiuose: EtOH_High (paimtas iš viršutinio 30% pasiskirstymo) ir EtOH_Low (paimtas iš žemesnio 30%). paskirstymas). Taigi į analizę buvo įtraukta tik 60% gyvūnų. Ši strategija yra identiška tiems, kurie buvo naudojami tyrimuose, tiriančiuose individualų kintamumą etanolio jautrinimo paradigmoje ( Masur ir dos Santos, 1988, Souza-Formigoni ir kt., 1999, Quadros ir kt., 2002a, Quadros ir kt., 2002b, Abrahão ir kt., 2011, Abrahão ir kt., 2012 ir Coelhoso ir kt., 2013).

Po klasifikacijos, apibrėžiančios eksperimentines grupes, atlikome 2 nepriklausomus eksperimentus pagal laikinius išlaukos kriterijus: (i) gyvūnai, kuriems buvo suteikta įsigijimo fazė ir kurie buvo paaukoti po 18 valandų nutraukimo, ir (ii) gyvūnai, kuriems buvo suteiktas įsigijimo etapas ir kurie buvo paaukoti po 5 dienų atsisakymo. Taigi, šį tyrimą sudarė 3 eksperimentinės grupės (kontrolinė, EtOH_High ir EtOH_Low), kurios buvo suskirstytos į 2 pogrupius (18 val. Ir 5 dienos nutraukimo) (N = 6 pogrupyje). Šiuos du laikinus ženklus pasirinkus nutraukimo laikotarpį nulėmė kinetiniai FosB ir DeltaFosB ekspresijos aspektai po 18 valandų nutraukimo (kaip paaiškinta diskusijų skyriuje) ir po 5 dienų nutraukimo, remiantis ankstesniais mūsų laboratorijos tyrimais kurie ištyrė kai kuriuos neurocheminius ypatumus, susijusius su nutraukimo periodu lokomotorinio sensibilizavimo paradigmoje ( Fallopa et al., 2012 ir Escosteguy-Neto ir kt., 2012). Galiausiai, norėdami atlikti koreliacijas tarp judesio jautrumo ir FosB / DeltaFosB išraiškos, apskaičiavome kiekvieno gyvūno judesio jautrumo balą pagal formulę: score = (Locomotion in the 21-day - Locomotion in the 1st day) * 100 / Locomotion in the 1 diena.

2.3. Imunohistochemija

Po atitinkamo išlauko gyvūnai buvo giliai anestezuojami kokteiliu, kuriame buvo ketamino (75 mg / kg, ip) ir ksilazino (25 mg / kg, ip). Praradus ragenos refleksą, jie buvo transkardiškai perpilti 100 ml 0.1 M fosfato buferinio tirpalo [fosfatu buferuotas fiziologinis tirpalas (PBS)], po to 100 ml 4% paraformaldehido (PFA). Smegenys buvo pašalintos iškart po perfuzijos, 24 valandas buvo laikomos PFA ir 30 valandas buvo laikomos 48% sacharozės / PBS tirpale. Nuoseklūs koronaliniai pjūviai (30 μm) buvo supjaustyti naudojant užšaldantį mikrotomą ir laikomi priešužšalimo tirpale, kuris buvo naudojamas imunohistochemijos procedūrose, laisvai plaukiant.

Imunohistochemijai atlikti buvo naudojama įprasta avidino – biotino – imunoperoksidazės technika. Visų eksperimentinių grupių smegenų dalys buvo įtrauktos į tą patį tyrimą, 3 minučių prieš tai apdorojant vandenilio peroksidaze (15%), o po to 30 minučių plaunant PBS. Tada visos dalys buvo eksponuojamos 30 minučių PBS-BSA, 5%, kad būtų išvengta nespecifinių reakcijų. Po to sekcijos buvo inkubuojamos per naktį su pirminiu antikūno triušio anti-FosB / DeltaFosB (1: 3,000; Sigma Aldrich, Sent Luisas, MO, JAV, Nr. Kat. AV32519) PBS-T tirpale (30 ml PBS, 300 μl Triton X-100). Vėliau atkarpos buvo inkubuotos 2 valandas biotiniluotame ožkos anti-triušio IgG antriniame antikūne (1: 600; Vector, Burlingame, CA, JAV) kambario temperatūroje. Po to sekcijos 90 min. Buvo apdorotos avidino – biotino kompleksu („Vectastain ABC Standard kit“; „Vector“, Burlingame, CA, JAV) ir reaguota į nikeliu sustiprintą diaminobenzidino reakciją. Tarp etapų atkarpos buvo nuplaunamos PBS ir maišomos rotatoriumi. Skyriai buvo montuojami ant želatina padengtų stiklelių, džiovinti, dehidratuoti ir užkloti.

Analizuojami šie encefaliniai regionai: prefrontalinė žievė [priekinė cingulinė žievė (Cg1), prelimbinė žievė (PrL) ir infralimbinė žievė (IL)], motorinė žievė [pirminė (M1) ir antrinė (M2)], nugaros striatumas [dorsomedial striatum ( DmS) ir dorsolaterinis striatumas (DlS)], ventralinis striatumas [branduolio accumbens branduolys (Acbco) ir lukštas (Acbsh), ventral pallidum (VP)], hipokampas [Cornus Ammong 1 ir 3 piramidinis sluoksnis (CA1 ir CA3), granuliuotas dentato gyrus sluoksnis (DG)], amygdala [bazolaterinis branduolys (BlA) ir centrinis branduolys (CeA)], hipotalamo (VMH) ventromedinis branduolys ir ventralinis tegmentalinis plotas [priekinės (VTAA) ir užpakalinės (VTAP) dalys] ( Pamatyti 1 pav). Prie kompiuterio prijungtas „Nikon Eclipse E200“ mikroskopas buvo naudojamas kiekvienos atkarpos vaizdams fiksuoti didinant 20 kartų. Vaizdai buvo išsaugoti kaip .tiff archyvai užpakalinei FosB / DeltaFosB imunoreaktyvumo analizei. Imunoreaktyvios ląstelės buvo suskaičiuotos naudojant „ImageJ“ programinę įrangą (NIH Image, Bethesda, MD, JAV). Smegenų regionai buvo apibrėžti kiekvienoje nuotraukoje pagal „The Stereotaxic Mouse Brain Atlas“ (Franklinas ir Paksinosas, 1997). Kadangi mikroskopu padarytos fotomikrografijos rodo 2.5 × 103 Μm2 padidinant 20 kartų, FosB / DeltaFosB žymėtų ląstelių kiekybinis įvertinimas išreiškiamas imuninių dažančių ląstelių vidurkiu 2.5 × 103 Μm2. EtOH grupėse gautos vertės buvo normalizuotos pagal kontrolines vertes ir išreikštos%. (Kontrolė = 100%).

  •  
  • 1 pav.  

    Imties smegenų regionų schema. Scheminis pelių smegenų koroninių sekcijų brėžinys, rodantis mėginių paimtus plotus (pritaikytas iš Franklinas ir Paksinosas, 1997). M1 = pirminė variklio žievė; M2 = antrinė variklio žievė, CG1 = priekinė cingulinė žievė, PrL = priekinė žievė, IL = infralimbiška žievė, Acbco = branduolio branduolio šerdis, Acbsh = branduolio branduolio apvalkalas, VP = ventralinis palidumas DmS = dorsomedialinis striatumas, DlS = dorsolateralinis striatas Cornus Ammonis 1, CA1 = Cornus Ammonis 3; DG = granuliuotas dantyto giruso sluoksnis, BlA = migdolos bazolateralinis branduolys, CeA = migdolos centrinis branduolys, VmH = ventromedialinis hipotalamio branduolys, VTAA = ventralinio tegmentalinio ploto priekinė dalis, VTAP = ventralinės tegmentalinės zonos užpakalinė dalis.

2.4. Statistinė analizė

Iš pradžių Shapiro – Wilk buvo naudojami visų kintamųjų pasiskirstymo normalumui patikrinti. Elgesio rezultatai buvo analizuojami vienkrypčiu ANOVA pakartotiniam matavimui, atsižvelgiant į faktorių 5 judėjimo jautrumo periodus: bazinį, 1 dieną, 7 dieną, 14 dieną ir 21 dieną. Histologiniai rezultatai buvo analizuojami dvipusiu ANOVA, atsižvelgiant į kaip veiksniai: nutraukimo laikotarpis (18 val. ir 5 d.) ir eksperimentinė grupė (kontrolė, EtOH_High ir EtOH_Low). Neparametriniai kintamieji buvo standartizuoti į Z balus, siekiant sumažinti duomenų sklaidą, ir vėliau pritaikyti dvipusėje ANOVA, kaip aprašyta anksčiau. Newmanas Keulsas post-hoc buvo naudojamas prireikus. Galiausiai ištyrėme galimas koreliacijas tarp teigiamų FosB / DeltaFosB ląstelių ir judesio jautrumo balų. Šios koreliacijos buvo apskaičiuotos tik tiems branduoliams, kuriuose buvo nustatyti statistiniai skirtumai tarp eksperimentinių grupių. Kadangi šie skirtumai buvo apriboti iki 5 nutraukimo dienų (žr. Skyrių „Rezultatai“), šiose koreliacijose nagrinėjamos FosB / DeltaFosB vertės nurodo šį konkretų nutraukimo laikotarpį. Kadangi šie skirtumai buvo apriboti iki 5 nutraukimo dienų (žr. Rezultatų skyrių), šioje koreliacijoje nagrinėjamos FosB / DeltaFosB vertės nurodo šį konkretų nutraukimo laiką. Nustatytas reikšmingumo lygis buvo 5% (p <0.05).

3. Rezultatai

3.1. Lokomotorinis jautrinimas

ANOVA pakartotiniams matavimams nustatė reikšmingus grupės faktoriaus skirtumus [F(2,32) = 68.33, p <0.001], protokolo laikotarpiu [F(4,128) = 9.13, p <0.001], ir sąveika tarp jų [F(8,128) = 13.34, p <0.001]. Bazinio judesio skirtumų nebuvo, ir abiejose EtOH grupėse pirmąją įsigijimo dieną judėjimas padidėjo panašiai, palyginti su kontroline grupe (p <0.01). Tačiau EtOH_High (bet ne EtOH_Low) parodė progresuojantį judėjimo aktyvumo padidėjimą per įsigijimo fazę (p <0.01, palyginti su kontrolinėmis ir EtOH_Low grupėmis, paskutinę įsigijimo dieną; p <0.01, palyginti su judėjimo aktyvumu pirmąją įsigijimo dieną) ( 2 pav). Šie duomenys patvirtino pirminio tyrimo rezultatus ( Masur ir dos Santos, 1988) ir iš ankstesnės ataskaitos ( Coelhoso ir kt., 2013) dėl elgsenos svyruojančių Šveicarijos pelių, kuriems buvo atliktas etanolio sukeltas judrumo jautrinimas.

  • Etanolis skatina laipsnišką ir tvirtą lokomotyvo padidėjimą lėtiniu ...
  • 2 pav.  

    Etanolis skatina laipsnišką ir tvirtą judėjimo padidėjimą per lėtinį gydymą EtOH_High, bet ne EtOH_Low grupėje. Duomenys buvo išreikšti kaip vidutinis ± SEM N = 12 kontrolinėms, EtOH_High ir EtOH_Low grupėms. ⁎⁎P <0.01, palyginti su kontroline grupe, tuo pačiu laikotarpiu. ##P <0.01, palyginti su EtOH_Low grupe, tuo pačiu laikotarpiu. ‡‡P <0.01, palyginti su bazinio judėjimo aktyvumu, toje pačioje grupėje. ¥¥P <0.01, palyginti su judėjimo aktyvumu 1st įsigijimo dieną toje pačioje grupėje.

3.2. FosB / DeltaFosB išraiška

FosB / DeltaFosB imunoreaktyvumo iliustracinė fotomikrografija pavaizduota 3 pav ir normalizuotos vertės yra rodomos 4 pav, 5 pav, 6 pav ir 7 pav. Dvipusis ANOVA nustatė reikšmingus skirtumus tarp M1, M2, DmS, DlS, Acbco, Acbsh, VP ir VTA (dėl normalizuotos FosB / DeltaFosB imunoreaktyvumo vertės ir statistinės visų struktūrų analizės, žr. Lentelė Suppl1 ir 1 lentelė, atitinkamai). Struktūrose, kur buvo galima pastebėti statistinius skirtumus, buvo keturi skirtingi FosB / DeltaFosB išraiškos modeliai. Pirmojoje, stebėtoje M1 ir M2, FosB / DeltaFosB ekspresija penktąją etanolio pašalinimo dieną padidėjo tik EtOH_High grupėje (palyginti su EtOH_High reikšmėmis 18 valandų nutraukus, taip pat ir su kontroline ir EtOH_Low grupės po 5 pasitraukimo dienų) (žr 4 pav). Pagal antrąjį modelį, pastebėtą VTAA, FosB / DeltaFosB išraiška padidėjo per 5 etanolio vartojimo dienas tik EtOH_Low grupėje (palyginti su EtOH_Low reikšmėmis 18 val. Nutraukus, taip pat į kontrolinę grupę po 5 nutraukimo dienų). ) (matyti 5 pav). Trečiuoju modeliu, pastebėtu DmS, Acbco ir Acbsh, FosB / DeltaFosB išraiška padidėjo 5 dienas po etanolio pašalinimo tiek EtOH_High, tiek EtOH_Low grupėse (palyginti su atitinkamomis jų vertėmis 18 valandų nutraukus), tačiau tik EtOH_Low grupė skyrėsi nuo kontrolinės grupės (žr 6 pav). Galiausiai, pagal ketvirtąjį modelį, pastebėtą DlS ir VP, FosB / DeltaFosB raiška padidėjo per 5 etanolio pašalinimo dienas tiek EtOH_High, tiek EtOH_Low grupėse (palyginti su jų atitinkamomis vertėmis 18 valandų nutraukus), nors šis padidėjimas buvo statistiškai išraiškingesnis EtOH_Low nei EtOH_High grupėje, ir tik EtOH_Low grupė skyrėsi nuo kontrolinės grupės (žr. 7 pav).

  • Iliustracinė FosB / DeltaFosB imunoreaktyvumo fotomikrografija × 20 ...
  • 3 pav.  

    Iliustracinė FosB / DeltaFosB imunoreaktyvumo fotomikrografija esant didinimui × 20. DmS = dorsomedialinis striatumas; DlS = dorsolateralinis striatumas; Acbco = branduolys accumbens šerdis; Acbsh = nucleus accumbens apvalkalas; VP = ventral pallidum; VTAa = priekinė ventralinio tegmentalinio ploto dalis.

  •  
  • 4 pav.  

    FosB / DeltaFosB ekspresija 18 valandų ir 5 dienų išlauka EtOH_High ir EtOH_Low grupėse M1 ir M2. Duomenys buvo išreikšti kaip vidutinis ± SEM ir atspindi normalizuotus duomenis pagal kontrolinių grupių vertes (punktyrinė linija - laikoma 100%). Pilkos juostos = 18 valandų etanolio pašalinimo; Juodos juostos = 5 dienos etanolio pašalinimo. ** P <0.01, palyginti su atitinkama kontroline grupe; ## P <0.01, palyginti su jo atitinkama verte 18 valandų išėmimo metu. ‡‡ P <0.01, palyginti su EtOH_Low grupe per tą patį laikotarpį. M1 = pirminė variklio žievė, M2 = antrinė variklio žievė.

  • FosB / DeltaFosB ekspresija 18h ir 5days ištraukos laikotarpiu EtOH_High ...
  • 5 pav.  

    FosB / DeltaFosB ekspresija 18 valandų ir 5 dienų nutraukimo laikotarpiu EtOH_High ir EtOH_Low grupėse VTA. Duomenys buvo išreikšti kaip vidutinis ± SEM ir atspindi normalizuotus duomenis pagal kontrolinių grupių vertes (punktyrinė linija - laikoma 100%). Pilkos juostos = 18 valandų etanolio pašalinimo; Juodos juostos = 5 dienos etanolio pašalinimo. ** P <0.01, palyginti su atitinkama kontroline grupe; ## P <0.01, lyginant su atitinkama verte 18 val. Atsiėmimo metu. VTA = ventralinis veiksmentinis plotas.

  • FosB / DeltaFosB ekspresija 18h ir 5days ištraukos laikotarpiu EtOH_High ...
  • 6 pav.  

    FosB / DeltaFosB ekspresija 18 valandų ir 5 dienų išlauka EtOH_High ir EtOH_Low grupėse Acbco, Acbsh ir DmS. Duomenys buvo išreikšti kaip vidutinis ± SEM ir atspindi normalizuotus duomenis pagal kontrolinių grupių vertes (punktyrinė linija - laikoma 100%). Pilkos juostos = 18 valandų etanolio pašalinimo; Juodos juostos = 5 dienos etanolio pašalinimo. * P <0.05 ** P <0.01, palyginti su atitinkama kontroline grupe; ## P <0.01, lyginant su atitinkama verte 18 val. Atsiėmimo metu. Acbco = nucleus accumbens šerdis, Acbsh = nucleus accumbens apvalkalas, DmS = dorsomedial striatum.

  • FosB / DeltaFosB ekspresija 18h ir 5days ištraukos laikotarpiu EtOH_High ...
  • 7 pav.  

    FosB / DeltaFosB ekspresija 18 valandų ir 5 dienų nutraukimo laikotarpiu EtOH_High ir EtOH_Low grupėse VP ir DlS. Duomenys buvo išreikšti kaip vidutinis ± SEM ir atspindi normalizuotus duomenis pagal kontrolinių grupių vertes (punktyrinė linija - laikoma 100%). Pilkos juostos = 18 valandų etanolio pašalinimo; Juodos juostos = 5 dienos etanolio pašalinimo. ** P <0.01, palyginti su atitinkama kontroline grupe; # P <0.05 ## P <0.01, lyginant su atitinkama verte 18 val. Atsiėmimo metu. ‡‡ P <0.01, palyginti su EtOH_Low grupe per tą patį laikotarpį. VP = ventral pallidum, DlS = dorsolateral striatum.

  • 1 lentelė. 

    Statistiniai parametrai, gauti dviejų krypčių ANOVA, susiję su FosB / DeltaFosB ekspresijos analize.

  • branduolys Laikotarpio faktorius Gydymo faktorius Laikotarpis * Gydymas
    M1 F(1,30) = 5.61, P = 0.025 F(2,30) = 3.21, P = 0.055 F(2,30) = 2.61, P = 0.089
    M2 F(1,30) = 4.72, P = 0.038 F(2,30) = 1.53, P = 0.233 F(2,30) = 3.45, P = 0.045
    CG1 F(1,30) = 11.08 P = 0.002 F(2,30) = 0.95, P = 0.398 F(2,30) = 3.31, P = 0.050
    PrL F(1,30) = 8.53, P = 0.007 F(2,30) = 1.72, P = 0.197 F(2,30) = 2.74, P = 0.081
    IL F(1,30) = 3.77, P = 0.062 F(2,30) = 1.91, P = 0.167 F(2,30) = 0.98, P = 0.389
    Acbco F(1,30) = 22.23 P <0.001 F(2,30) = 2.63, P = 0.089 F(2,30) = 5.68, P = 0.008
    Acbsh F(1,30) = 50.44 P <0.001 F(2,30) = 4.27, P = 0.023 F(2,30) = 13.18, P <0.000
    VP F(1,30) = 38.01 P <0.001 F(2,30) = 5.07, P = 0.013 F(2,30) = 10.93, P <0.000
    DmS F(1,30) = 28.89 P <0.001 F(2,30) = 3.75, P = 0.035 F(2,30) = 7.71, P = 0.002
    DLS F(1,30) = 13.58 P = 0.001 F(2,30) = 5.41, P = 0.011 F(2,30) = 4.72, P = 0.017
    CA1 F(1,30) = 4.81, P = 0.036 F(2,30) = 7.37, P = 0.002 F(2,30) = 1.62, P = 0.215
    CA3 F(1,30) = 14.92 P = 0.001 F(2,30) = 2.46, P = 0.102 F(2,30) = 3.81, P = 0.034
    DG F(1,30) = 0.59, P = 0.447 F(2,30) = 1.49, P = 0.241 F(2,30) = 0.24, P = 0.785
    BlA F(1,30) = 6.47, P = 0.016 F(2,30) = 0.12, P = 0.884 F(2,30) = 1.71, P = 0.199
    CeA F(1,30) = 2.55, P = 0.121 F(2,30) = 0.22, P = 0.801 F(2,30) = 0.71, P = 0.501
    VmH F(1,30) = 6.51, P = 0.016 F(2,30) = 0.71, P = 0.503 F(2,30) = 1.75, P = 0.192
    VTAA F(1,30) = 9.64, P = 0.004 F(2,30) = 3.76, P = 0.035 F(2,30) = 2.65, P = 0.087
    VTAP F(1,30) = 6.05, P = 0.021 F(2,30) = 1.79, P = 0.184 F(2,30) = 1.64, P = 0.211
  • M1 = pirminė variklio žievė; M2 = antrinė variklio žievė, CG1 = priekinė cingulinė žievė, PrL = priekinė žievė, IL = infralimbiška žievė, Acbco = branduolio branduolio šerdis, Acbsh = branduolio branduolio apvalkalas, VP = ventralinis palidumas DmS = dorsomedialinis striatumas, DlS = dorsolateralinis striatas Cornus Ammonis 1, CA1 = Cornus Ammonis 3; DG = granuliuotas dantyto giruso sluoksnis, BlA = migdolos bazolateralinis branduolys, CeA = migdolos centrinis branduolys, VmH = ventromedialinis hipotalamio branduolys, VTAA = ventralinės tegmentalinės zonos priekinė dalis; VTAP = centrinės tegmentalinės zonos užpakalinė dalis.

Siekiant patvirtinti, kad FosB / DeltaFosB ekspresijos pokyčiai buvo susiję su nutraukimu, o ne su etanolio ekspozicija, mes atlikome koreliaciją tarp lokomotorinio jautrinimo ir FosB / DeltaFosB imunologiškai pažymėtų ląstelių 5th atšaukimo dieną pirmiau minėtuose branduoliuose (M1, M2, Acbco, Acbsh, DmS, DlS, VP, VTAA). Kaip tikėtasi, jokių reikšmingų koreliacijų nė vienam iš šių branduolių (M1 - r2 = 0.027862, p = 0.987156; M2 - r2 = 0.048538, p = 0.196646; Acbco - r2 = 0.001920, p = 0.799669; Acbsh - r2 = 0.006743, p = 0.633991; DmS - r2 = 0.015880, p = 0.463960; DlS - r2 = 0.023991, p = 0.914182; VP - r2 = 0.002210, p = 0.785443; VTAA - r2 = 0.001482, p = 0.823630 XNUMX).

4. Diskusija

Šiame tyrime nustatyti rezultatai rodo, kad padidėjusi FosB / DeltaFosB ekspresija, pastebėta etanolio sukeltame judrumo jautrinimo paradigmoje, greičiausiai bus susijusi su pašalinimu, o ne su lėtiniu vaistų poveikiu. Vis dėlto elgsenos kintamumas vystymosi lokomotorinio jautrinimo metu buvo susijęs su skirtingais FosB / DeltaFosB ekspresijos modeliais nutraukimo metu. Motorinių žievės, ventralinio tegmentalės ir striatumo vaidmuo norint įgyti ir išreikšti lokomotorinio jautrinimo paradigmą yra gerai žinomas (Vanderschuren ir Pierce, 2010). Be to, mezolimbinio kelio dereguliavimas yra vienas iš centrinių neurobiologinių atsiėmimo laikotarpių požymių, kartu su išplėstiniu amygdalu (Koob ir Le Moal, 2005 ir Koob ir Le Moal, 2008). Tačiau tik keli tyrimai ištyrė lokomotorinio jautrinimo paradigmos nutraukimo laikotarpį. Mūsų rezultatai per šį laikotarpį susidūrė su įdomiais FosB / DeltaFosB ekspresijos pokyčiais motorinėje žievėje, ventraliniame tegmentalyje ir striatume.

FosB kDNR koduoja 33, 35 ir 37 kDa baltymų ekspresiją. Ūmus dirgiklių poveikis sukelia stiprią 33 ir atskirą 35 ir 37 kDa Fos baltymų indukciją. Dėl to, esant ūminiam aktyvavimui, vyraujanti FosB ekspresija yra susijusi su 33 kDa (McClung ir kt., 2004 ir „Nestler“, „2008“). Tarp šių baltymų yra dar vienas nepaprastas skirtumas: tik 35–37 kDa baltymai yra labai stabilios izoformos. Dėl šio didelio stabilumo šios sutrumpintos FosB formos, dar vadinamos DeltaFosB, kaupiasi smegenyse ir labai pasireiškia kaip atsakas į lėtinius dirgiklius, tokius kaip psichotropinių vaistų gydymas, lėtiniai elektrokonvulsiniai priepuoliai ir stresas (Kelz ir Nestler, 2000, Nestler ir kt., 2001 ir McClung ir kt., 2004). Dėl šios priežasties DeltaFosB buvo laikomas ilgalaikiu molekuliniu jungikliu, kad būtų galima palaikyti ilgalaikio neuroninio ir elgesio plastiškumo formas. Įdomu tai, kad elegantiškas tyrimas su pelių linijomis, išreiškiančiomis diferencijuotai FosB ir DeltaFosB, parodė, kad FosB yra būtinas norint padidinti streso toleranciją ir neutralizuoti ryšį tarp psichostimuliantų sukeltų judrumo jautrinimo ir DeltaFosB kaupimosi striatume (Ohnishi ir kt., 2011). Todėl šiame tyrime naudojamame eksperimentiniame protokole abu baltymai gali vaidinti svarbų vaidmenį. Pažymėtina, kad naudojami FosB antikūnai atpažįsta ir FosB, ir DeltaFosB. Kadangi po ūmaus dirgiklio FosB sumažėja iki pradinio lygio per 6 valandas (Nestler ir kt., 2001) ir „DeltaFosB“ kaupiasi pakartotinai veikiant dirgiklius. Mes nusprendėme gyvūnus paaukoti praėjus 18 valandų po įsigijimo fazės, kad išvengtume galimo etanolio vartojimo šališkumo, palyginti su FosB ekspresija. Nepaisant to, techniškai tiksliau, šiame tyrime mes nurodysime kaip FosB / DeltaFosB išraišką. Svarbu pažymėti, kad ši strategija buvo naudojama kituose tyrimuose, įskaitant tuos, kuriuose buvo naudojami tie patys pirminiai antikūnai, aprašyti čia (Conversi ir kt., 2008, Li ir kt., 2010, Flak ir kt., 2012 ir García-Pérez ir kt., 2012). Todėl, be šių eksperimentinių apribojimų, aptarsime savo rezultatus, atsižvelgiant į DeltaFosB vaidmenį neuroniniame plastikume.

Nustatyta, kad lėtinis vaisto poveikis didina FosB / DeltaFosB ekspresiją keliose smegenų vietose (Nestler ir kt., 2001 ir Perrotti ir kt., 2008). Įdomu tai, kad šiame tyrime nei etanoliu įjautrintos, nei įjautrintos etanoliu pelės nesiskyrė nuo lėtiniu fiziologiniu tirpalu gydytų pelių FosB / DeltaFosB ekspresijos požiūriu 18 valandų po įsigijimo fazės. Be to, nebuvo reikšmingos koreliacijos tarp FosB / DeltaFosB ekspresijos ir judesio jautrumo balų. Šį skirtumą bent iš dalies galima paaiškinti eksperimento protokole nustatytais skirtumais. Pvz., Atsižvelgiant į etanolio poveikį, dviejuose tyrimuose dvi pertraukiamos gėrimo sesijos buvo naudojamos dviejų butelių pasirinkimo paradigma (Li ir kt., 2010) arba mitybiškai visiškai skysta dieta, automatiškai vartojama per 17 dienų (kai gyvūnai vartoja etanolį nuo 8 iki 12 g / kg per parą) (Perrotti ir kt., 2008). Kitame tyrime, nors autoriai nurodo lėtinį gydymą, protokolas susideda tik iš 4 etanolio ekspozicijos (Ryabininas ir Wangas, 1998). Taigi, kitur naudojami protokolai visiškai skiriasi nuo čia naudojamų, kuriuos sudarė 21 gydymo diena, kai kasdien eksperimentą atlikdavo etanolio injekcijos. Nepaisant šių skirtumų, yra keletas tyrimų, susijusių su intraperitoninėmis injekcijomis, pranešant apie FosB / DeltaFosB ekspresijos padidėjimą po psichostimuliatorių sukelto lokomotorinio sensibilizavimo protokolų„Brenhouse“ ir „Stellar“, „2006“, Conversi ir kt., 2008 ir Vialou ir kt., 2012) ir opioidų (Kaplan ir kt., 2011). Tačiau šiuose tyrimuose lokomotyvų sensibilizacijos protokolai apima daug mažiau nei 21 vaisto ekspozicija, o kai kuriuose iš jų vaistas buvo skiriamas pertrūkiais. Priešingai, mūsų protokole buvo naudojamas toks pat gydymas, kaip aprašyta ankstesniuose 21 etanolio injekcijų tyrimuose.Masur ir dos Santos, 1988, Souza-Formigoni ir kt., 1999, Quadros ir kt., 2002a, Quadros ir kt., 2002b, Abrahão ir kt., 2011 ir Abrahão ir kt., 2012). Yra įrodymų, kad nors lėtinis kokaino vartojimas skatina DeltaFosB ekspresijos kaupimąsi branduolio accumbens, jis taip pat skatina toleranciją DeltaFosB mRNR indukcijai ventralinėje ir dorsalinėje stiatumoje (Larson ir kt., 2010). Todėl hipotezėme, kad mūsų eksperimentinių grupių skirtumų trūkumas įsigijimo etape gali būti dėl tolerancijos FosB / DeltaFosB indukcijai, nes šiame protokole buvo didesnė įsigijimo fazė, palyginti su psichostimuliantų ir opioidų periodais. kitose studijose.

Tyrimai, kuriuose dalyvavo knockout ir transgeninės pelės, parodė, kad FosB mutantinės pelės pagerino elgesio reakciją į kokainą, pvz., Stimuliuojančius lokomotorinius efektus ir kondicionuojamą vietą. Be to, šioje mutantinėje pelėje nėra bazinio ir kokaino indukuojamo DeltaFosB ekspresijos.Hiroi ir kt., 1997). Priešingai, transgeninės pelės, turinčios indukuojamą „DeltaFosB“ ekspresiją, rodo didesnį jautrumą kokaino ir morfino poveikiui (Muschamp ir kt., 2012). Šie rezultatai parodė tiesioginį ryšį tarp DeltaFosB ir naudingo proceso. Be kartotinių vaistų poveikio, lėtinis stresas taip pat padidina DeltaFosB ekspresiją kortikoskopinėse grandinėse (Perrotti ir kt., 2004). Įdomu tai, kad transgeninės pelės, kurios pernelyg išreiškia DeltaFosB, yra mažiau jautrios pro-depresiniam poveikiui kappa-opioidų agonistui, kuris, kaip žinoma, sukelia disforiją ir stresą panašų poveikį graužikams (Muschamp ir kt., 2012). Taigi, be atlygio proceso, „DeltaFosB“ taip pat vaidina pagrindinį vaidmenį emociniuose reiškinių aspektuose. Pagal šį scenarijų pasitraukimas taip pat gali sukelti FosB / DeltaFosB išraišką, nes stresas yra pagrindinis vaisto vartojimo nutraukimo komponentas. Ši perspektyva atitinka mūsų rezultatus, nes nebuvo jokių koreliacijų tarp FosB / DeltaFosB išraiškos ir jautrinimo balų, be to, FosB / DeltaFosB ekspresijos padidėjimas buvo pastebėtas tik penktą nutraukimo dieną.

Įdomu tai, kad kai kuriose struktūrose FosB / DeltaFosB padidėjimas buvo pastebėtas tiek EtOH_High, tiek EtOH_Low grupėje, nors ir buvęs ekspresyvesnis ankstesnėje grupėje, o tai rodo, kad šie padidėjimai gali turėti skirtingas funkcines pasekmes pagal jų intensyvumą. Šią hipotezę galima paaiškinti keliais skirtingais FosB / DeltaFosB funkciniais vaidmenimis. Pavyzdžiui, žiurkės, kurių chroniškai veikiami kokainas, padidino DeltaFosB ekspresiją branduolio accumbens per pašalinimo laikotarpį, o poveikis teigiamai koreliavo su kokaino pasirinkimu, tačiau neigiamai veikė naujumo pirmenybė. Be to, pertraukos metu padidėjęs stresas padidina elgesio reakciją į psichostimuliatorius, padidindamas DeltaFosB ekspresiją kortikoskopinėse neuronuose (Nikulina ir kt., 2012). Taigi, „DeltaFosB“ galėjo numatyti hedoninio apdorojimo disreguliavimą, kuris vyksta užsitęsusio pasitraukimo metu (Marttila ir kt., 2007). Kita vertus, tiek atsparumas stresui, tiek antidepresantai yra susiję su didesne DeltaFosB ekspresija striatume (Vialou ir kt., 2010). Todėl mes spėliojame, kad padidėjęs FosB / DeltaFosB dėl striatumo EtOH_High galėjo padidinti etanolio naudingą poveikį, suteikiant didesnį jautrumą vėlesnėms vaistų ekspozicijoms. Kita vertus, intensyvesnis FosB / DeltaFosB padidėjimas, matomas EtOH_Low grupėje, galėjo sumažinti jautrumą tiek disforijos, tiek streso poveikiui, sumažindamas neigiamo paskesnio vaisto poveikio stiprinimo poveikį ir dėl to paaiškindamas didesnį atsparumą šiame grupę. Įdomu tai, kad šis paradoksas turėjo neurocheminį pagrindą. Pvz., Transgeninės pelės, pernelyg ekspresuojančios FosB vidutinio stuburo GABAerginiuose branduolių accumbens neuronuose, padidino tiek muito, tiek kappa-opioidinių receptorių lygį (Sim-Selley ir kt., 2011), ir šie receptoriai atitinkamai padidina ir slopina mezolimbinį toną (\ tManzanares ir kt., 1991 ir Devine ir kt., 1993). Be to, ląstelių tipo išraiška taip pat gali smarkiai pakeisti padidėjusio FosB / DeltaFosB funkcines pasekmes. Atliekant elegantišką tyrimą naudojant peles, kurios per daug ekspresavo DeltaFosB D1- arba D2-ekspresuojančiuose neuronuose branduolyje accumbens, paaiškėjo, kad DeltaFosB D1- (bet ne D2-) neuronuose padidina elgesio atsaką į kokainą (Grueter ir kt., 2013).

Įdomu, kad motorinės žievės atveju FosB / DeltaFosB ekspresija padidėjo tik EtOH_High grupėje, ir ji buvo apribota iki 5-osios pasitraukimo dienos. Nepakilusį padidėjimą 18 valandų nutraukus, galima paaiškinti galimu FosB / DeltaFosB ekspresijos toleravimo mechanizmu šiame regione po lėtinio etanolio poveikio. Be to, mūsų rezultatai rodo, kad nutraukimo laikotarpiu motorinėje žievėje yra aktyvių neurocheminių pokyčių, nepaisant to, kad gyvūnai šiuo laikotarpiu nebuvo manipuliuojami. Tai įdomu, nes šis plastiškumas bent iš dalies galėtų atlikti svarbų vaidmenį išlaikant judėjimo motorinį jautrinimą. Nors ilgalaikis hiperlokomotyvas po kelių dienų nutraukimo čia nebuvo tiriamas, yra keletas tyrimų, įskaitant ankstesnius iš mūsų laboratorijos, kurie rodo, kad įjautrintos pelės (bet nejautrintos) pasižymėjo didesniu judesiu, kai po tam tikro nutraukimo laikotarpio jos buvo užkrėstos etanoliu (Masur ir dos Santos, 1988, Souza-Formigoni ir kt., 1999, Quadros ir kt., 2002a, Quadros ir kt., 2002b, Abrahão ir kt., 2011, Abrahão ir kt., 2012, Fallopa et al., 2012 ir Coelhoso ir kt., 2013).

Galiausiai pažymėtina, kad tik EtOH_Low grupė parodė padidėjusią FosB / DeltaFosB ekspresiją priekinėje (bet ne užpakalinėje) ventralinio tegmentalio dalyje. Šios dalys turi skirtingas projekcijas ir neurocheminius profilius, o jų dalyvavimas atlygio procese priklauso nuo kelių veiksnių (Ikemoto, 2007). Pvz., Žiurkių savarankiškas etanolio vartojimas yra susijęs su užpakaline, bet ne su ventraline tegmentalinės srities ventraline dalimi (Rodd-Henricks ir kt., 2000 ir Rodd ir kt., 2004). Be to, endokannabinoidų sistema, taip pat GABA-A, dopaminerginiai D1-D3 ir serotoninerginiai 5HT3 receptoriai vaidina svarbų vaidmenį etanolio ieškant elgesio (Linsenbardt ir Boehm, 2009, Rodd ir kt., 2010, Melón ir Boehm, 2011b ir Hauser ir kt., 2011). Tačiau GABA-B priekinėje ventralinio tegmentalio dalyje yra naudingas (Moore ir Boehm, 2009) ir stimuliatoriaus lokomotorinio poveikio (\ tBoehm ir kt., 2002) etanolio. Be to, cholinerginiai nikotino receptoriai, esantys priekinėje dalyje, yra susiję su padidėjusiu dopamino kiekiu, kurį sukelia etanolis (Ericson ir kt., 2008). Todėl, nepaisant skirtingo šių dalių profilio, gali būti, kad EtOH_Low grupės pokyčiai priekinėse dalyse gali būti susiję su apdovanojimo procesu. Lėtinis kokainas, bet ne lėtinis morfinas ar lėtinis streso poveikis padidina DeltaFosB ventralinio tegmentalio srityje, ypač gama aminobutirūgšties (GABA) ląstelių populiacijoje (Perrotti ir kt., 2005). Šis faktas galėtų paaiškinti normalius FosB / DeltaFosB lygius visam ištraukimui, susidūrusiam su EtOH_High pelių ventraliu tegmentaliu plotu, nepaisant galimo didelio streso patirties šiuo laikotarpiu. Be to, šie duomenys bent jau iš dalies patvirtina hipotezę, kad FosB / DeltaFosB ekspresijos padidėjimas per nutraukimą EtOH_Low gali būti apibūdinamas kaip adaptyvus atsakas.

Individualūs skirtumai, pastebėti perėjus nuo rekreacinio naudojimo prie narkomanijos, yra nepaprastai svarbūs (Flagel et al., 2009, Džordžas ir Koobas, 2010 ir Swendsen ir Le Moal, 2011). Todėl būtina ištirti neurobiologines savybes, susijusias su individualiu kintamumu. Elgesio jautrinimas yra gyvūnų modelis, paprastai naudojamas tirti narkomanijos neurobiologines savybes. Šio modelio pagrindas yra tai, kad subjektyvus vaistų poveikis padidėja jų pakartotinio poveikio metu. Įsigijus lokomotorinį jautrumą, jis ilgai trunka ir yra tiesiogiai susijęs su morfologiniais ir neurocheminiais mesolimbinio kelio pokyčiais ir keletu encefalinių branduolių, susijusių su emocionalumu ir motoriniu elgesiu (Robinson ir Kolb, 1999 ir Vanderschuren ir Pierce, 2010). Pionieriaus atliktas tyrimas Masur ir dos Santos (1988) parodė, kad dideli elgsenos Šveicarijos pelių elgsenos pokyčiai yra susiję su etanolio sukeltu judrumo jautrinimu. Nuo tada kiti tyrimai parodė svarbų ryšį tarp neurocheminių savybių ir elgsenos kintamumo, daugiausia susijusių su dopaminerginiu poveikiu (Abrahão ir kt., 2011, Abrahão ir kt., 2012 ir Souza-Formigoni ir kt., 1999) ir glutamaterginių sistemų (\ tQuadros ir kt., 2002a ir Quadros ir kt., 2002b). Be to, ankstesnis mūsų laboratorijos tyrimas, naudojant etanolio sukeltą judesio jautrinimo paradigmą, parodė, kad jautrios (bet ne jautrintos) pelės žymiai padidino 1 (CB1R) kanabinoidų receptorių atpirkimo laikotarpį (Coelhoso ir kt., 2013). Čia mes nustatėme skirtingus FosB / DeltaFosB ekspresijos modelius pasitraukiant iš EtOH_High ir EtOH_Low grupių.

Apibendrinant, etanolio sukeltos lokomotorinio jautrumo nustatymo fazės metu pastebėtas elgesio kintamumas kartu su atskiru neuroniniu plastiškumu nutraukimo laikotarpiu. Įdomu tai, kad mūsų rezultatai rodo, kad skirtingi FosB / DeltaFosB ekspresijos modeliai, nustatyti jautriose ir nejautrintose pelėse, labiau susiję su nutraukimo laikotarpiu, o ne su lėtine vaisto ekspozicija, greičiausiai dėl to, kad toleruojamasis vaistas sukėlė FosB / DeltaFosB transkripciją.

Toliau pateikiami papildomi duomenys, susiję su šiuo straipsniu.

Padėka

RFP ir CCC gavo pagrindinę stipendiją iš CAPES ir FAPESP. CTC, LEM, DXS ir JGSJ suteikia FAPESP ir CNPq.

Nuorodos

  •  
  • Autorius susirašinėjimui: Rua Cesário Mota Jr, 61, 12 andar, San Paulas, SP 01221-020, Brazilija. Tel. / Faksas: + 55 11 33312008.
  • 1
  • Šie autoriai taip pat dalyvavo šiame tyrime.

Autorinės teisės © 2013 Elsevier Inc.