CRF – CRF1 receptorių sistema, esanti centrinėje ir bazolinėje Amygdala branduolyje, skirtingai tarpininkauja pernelyg daug valgomojo maisto (2013)

Neuropsychopharmacology. 2013 lapkritis; 38 (12): 2456 – 2466.

Paskelbta internete 2013 liepa 10. Iš anksto paskelbtas internete 2013 birželis 10. doi: 10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Attilio Iemolo,¹ Angelo Blasio,¹ Steponas A Šv,¹ Fanny Jiang,¹ Kenner C ryžiai,² Valentina Sabino,¹ ir Pietro Cottone^1,^*

Abstraktus

Maistas, kurio skonis skanus, ir dietų laikymasis yra pagrindiniai veiksniai, lemiantys kompulsyvų valgymą nutukimo ir valgymo sutrikimų atvejais. Anksčiau įrodėme, kad dėl pertraukiamos galimybės gauti skanaus maisto gaunamas kortikotropiną atpalaiduojantis faktorius 1 (CRF).₁) receptorių antagonistų grįžtamasis elgesys, apimantis per daug geriamo maisto, normalaus čiulpo hipofagiją ir į nerimą panašų elgesį. Tačiau smegenų sritys, sukeliančios šį poveikį, vis dar nežinomos. Patinai „Wistar“ patinai buvo šeriami nepertraukiamai 7 dienas / savaitę (Čiau čiau grupei), arba maitinamas čiaužtukais su pertrūkiais 5 dienas / savaitę, po to sekant sacharozės, skanios dietos 2 dienomis / savaitę (Čiau / skanus grupė). Po lėtinio dietos pakeitimo CRF mikroinfuzijos poveikis₁ Buvo įvertintas receptorių antagonistas R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / pusė) centriniame amigdalos branduolyje (CeA), baziliariniame amigdalos branduolyje (BlA) arba stria terminalis lovos branduolyje (BNST), kai jis buvo vartojamas per daug. malonios dietos, čiau hipofagijos ir į nerimą panašus elgesys. Be to, žiurkių, kurioms buvo maitinamasis raciono, smegenyse buvo įvertintas CRF imuninis dažymas. Intra-CeA R121919 blokavo tiek per daug malonų maisto vartojimą, tiek į nerimą panašų elgesį Čiau / skanus žiurkėms, nepažeidžiant čiau hipofagijos. Intra BlA R121919, atvirkščiai, sumažino chw hipofagiją Čiau / skanus žiurkėms, nepakenkiant per dideliam maistui ar nerimui panašiam elgesiui. BNST gydymas neturėjo jokio poveikio. Gydymas nepakeitė Čiau čiau žiurkės. Imunohistochemija atskleidė padidėjusį CRF teigiamų ląstelių skaičių CeA - bet ne BlA ar BNST - Čiau / skanus žiurkės, palyginus su kontrolinėmis grupėmis, tiek pašalindamos, tiek atnaujindamos skoningą mitybą. Šie rezultatai pateikia funkcinius įrodymus, kad CRF – CRF₁ CeA ir BlA receptorių sistema turi skirtingą vaidmenį tarpininkaujant netinkamam elgesiui, atsirandančiam dėl ramaus dietų vartojimo.

Raktiniai žodžiai: kortikotropiną atpalaiduojantis faktorius, BNST, priklausomybė, nerimas, hipofagija, žiurkė

ĮVADAS

Manoma, kad labai malonus maistas (pvz., Maistas, kuriame gausu cukraus ir (arba) riebalų) yra pagrindinis veiksnys, sukeliantis kompulsyvų valgymą tam tikrose nutukimo formose ir valgymo sutrikimus (Corwin, 2006; Yach et al, 2006). Yra daug analogijų tarp narkomanijos ir besaikio labai skanaus maisto vartojimo, įskaitant narkotikų / maisto kontrolės praradimą, nesugebėjimą nutraukti vartojimo / persivalgymo nepaisant neigiamų padarinių, kančios ir disforijos bandant susilaikyti nuo narkotikų / maisto (Parylak et al, 2011; Volkow ir O'Brien, 2007 m). Siūloma, kad šie bendrieji simptomai atsiranda dėl smegenų kontūrų sutrikimų, kurie sutampa priklausomybės nuo narkotikų ir priverstinio valgymo metu.

Kortikotropiną atpalaiduojantis faktorius, tipas 1 (CRF₁) receptorių antagonistai buvo pasiūlyti kaip nauji priklausomybės ligų terapiniai taikiniai, nes jie gali sumažinti abstinencijos motyvacinį poveikį (Logripas et al, 2011). CRF yra kritinis endokrininių, simpatinių ir elgesio reakcijų į stresą tarpininkas (Bakshi ir Kalin, 2000; Atsisveikinimas et al, 1981). CRF paraventrikuliniame pagumburio branduolyje kontroliuoja pagumburio – hipofizio – antinksčių (ŽPV) atsaką į stresą, tuo tarpu CRF poveikis elgesyje yra nuo ŽPA nepriklausomas ir tarpininkaujant ekstrahipotalaminiams smegenų regionams (Koobas ir Heinrichas, „1999“). Extrahypothalamic CRF – CRF₁ receptorių sistema įdarbinama priklausomai nuo visų žinomų piktnaudžiavimo narkotikais intoksikacijos / abstinencijos ciklų metu, ir ši hiperaktyvacija laikoma įprastu elementu, skatinančiu per didelį narkotikų vartojimą per neigiamai sustiprintą mechanizmą (ty kompulsinį narkotikų vartojimą, kurį sukelia pašalinimas sukelta neigiama emocinė būsena; Heilig ir Koob, 2007; Koob, 2010; Šalevas et al, 2010).

Nors piktnaudžiavimo narkotikais ir maistu panašumai buvo plačiai ištirti atsižvelgiant į jų teigiamąsias stiprinančias savybes (ty, vartojant per daug maisto, gaunamas malonus poveikis; Avižos et al, 2012; Blasio et al, 2013b; Corwin ir Grigson, 2009; Medvilnė et al, 2012; Haganas et al, 2003), hipotezė, kad per didelis maisto vartojimas gali būti „savigydos“ forma, siekiant palengvinti neigiamą emocinę būseną, susijusią su pasitraukimu iš labai skanių maisto produktų, yra gana nepagrįstaRyšelis, 2005; Medvilnė et al, 2009a; Šalevas et al, 2010).

Anksčiau mes parodėme, kad atsisakius lėtinio, su pertrūkiais gaunamo maisto su labai geru maistu, atsiranda ekstrahipotalaminės CRF sistema ir atsiranda CRF.₁ nuo receptorių priklausomo netinkamo elgesio elgesys, apimantis perteklinį maisto vartojimą atnaujinus labai skanios dietos vartojimą, kitaip priimtina čiau dietos hipofagija ir į nerimą panašus elgesys susilaikymo metu (Medvilnė et al, 2009a).

Tačiau tiesioginiai funkciniai įrodymai apie tai, kuri smegenų sritis yra atsakinga už CRF₁ Trūksta priklausomybės nuo receptorių, sąlygojamo tinkamo dietos ciklo. Taigi šiuo tyrimu buvo siekiama išsiaiškinti, ar CRF antagonizmas būdingas konkrečiai vietai₁ receptoriai, esantys centriniame amigdalos branduolyje (CeA), bazolateriniame amigdalos branduolyje (BlA) arba stria terminalis (BNST) lovos branduolyje, galėjo blokuoti per didelį geriamojo skonio maisto vartojimą, nutraukimo sukeltą reguliariosios hipofagijos čiau, ir į nerimą panašus elgesys. Be to, šio tyrimo tikslas buvo išsiaiškinti, ar CRF raiška CeA, BlA ir BNST padidėjo žiurkėms, vartojusiems dietą, palyginus su kontrolinėmis, naudojant imunohistochemiją. Nors anksčiau mes parodėme, kad atsisakymas skanaus maisto yra susijęs su padidėjusia CRF raiška CeA, šiuo metu nežinoma, kaip BlA ir BNST veikia dietos vartojimas.

MEDŽIAGOS IR METODAI

Tematika

Vyriškos Wistar žiurkės (n= 140, iš jų 33 žiurkėms CeA eksperimentams, 46 žiurkėms BlA eksperimentams, 39 žiurkėms BNST eksperimentams ir 22 žiurkėms imunohistochemijos eksperimentui; Papildoma lentelė 1), sveriantys 180 – 230 g ir 41 – 47 dienų amžiaus atvykimo metu (Charles River, Wilmington, MA, JAV), buvo pavieniai laikomi vieliniais plastikiniais narveliais (27 × 48 × 20 cm) ant 12-h atbulinės eigos šviesos ciklas (užsidega 1100 valandomis) AAALAC patvirtintame drėgmės (60%) ir temperatūros (22 ° C) vivariume. Žiurkės turėjo ad libitum prieiga prie kukurūzų pagaminto česnako („Harlan Teklad LM-485“ dieta 7012; 65% kcal angliavandenių, 13% riebalų, 21% baltymų, metabolizuojamos energijos 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, JAV) ir vandens, jei nenurodyta kitaip . Šiame tyrime naudojamos procedūros laikėsi Nacionalinio laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo sveikatos instituto vadovo (NIH leidimo numeris 85-23, pataisytas 1996) ir laboratorinių gyvūnų priežiūros principų, juos patvirtino Bostono universiteto medicinos miestelio institucinė įstaiga. Gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetas.

Narkotikai

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropil-pirazolo [2,3-a] pirimidin-7-aminas, NBI 30775) buvo susintetintas, kaip aprašyta Chen et al (2004). R121919 yra stiprus, nepeptidinis, didelio afiniškumo CRF₁ receptorių antagonistas (K_i= 2 – 5 nM), kuris parodo silpnesnį 1000 kartų aktyvumą CRF₂ receptorių, CRF surišančio baltymo ar kitų rūšių receptorių 70 (Grigoriadis et al, 2000). R121919 buvo ištirpintas naudojant 18: 1: 1 fiziologinio tirpalo: etanolio: kremoforo mišinį.

Elgesio testai

Ad libitum malonus dietos pakaitų prieinamumas

Prieiga prie ad libitum skanus dietos pakaitalas buvo atliktas, kaip aprašyta anksčiau (Medvilnė et al, 2008, 2009a, 2009b; Iemolo et al, 2012). Trumpai tariant, po aklimatizacijos žiurkės buvo suskirstytos į dvi grupes, atitinkančias praėjusių 3 – 4 dienų ėdalo, kūno svorio ir pašaro efektyvumą. Tada vienai grupei buvo parūpinta ad libitum galimybė naudotis čiau dieta (Čiau) 7 dienomis per savaitę (Čiau čiau, šio tyrimo kontrolinė grupė), o antrajai grupei buvo suteikta nemokama prieiga prie čiulpimo 5 dienomis per savaitę, po to sekė 2 dienos ad libitum prie labai skanaus, šokolado skonio, labai sacharozės dietos (skani; Čiau / skanus grupė). Visi elgesio testai buvo atlikti su žiurkėmis, kurios buvo laikomos dietos ciklu mažiausiai 7 savaites. „Chow“ dieta buvo aukščiau aprašyta kukurūzų chow iš „Harlan“, o skanus racionas buvo mitybos požiūriu visavertė, šokolado skonio, daug sacharozės (50% kcal), AIN-76A pagrindu pagaminta dieta, kuri yra panaši į makroelementus. chow dietos proporcijos ir energijos tankis (šokolado skonio formulė 5TUL: 66.7% kcal angliavandenių, 12.7% riebalų, 20.6% baltymų, metabolizuojama energija 344 kcal / 100 g („Test Diet“, Richmond, IN, JAV), suformuluota kaip 45 mg tikslumas maisto granulės, kad padidėtų jo tinkamumas). Trumpumo dėlei kiekvienos savaitės pirmosios 5 dienos (tik čiau) ir paskutinės 2 dienos (čiau arba skanios pagal eksperimentinę grupę) visuose eksperimentuose vadinamos C ir P fazės. Patikima dieta buvo teikiama GPF20 'J' tiektuvuose (Ancare, Bellmore, NY, JAV). Dietos niekada nebuvo vienu metu prieinamos.

Maisto vartojimo eksperimentai

Žiurkėms buvo suteiktas iš anksto pasvertas maistas jų namų narvuose tamsiosios ciklo pradžioje. Gydytojai buvo gydomi žiurkėmis, kurių dieta buvo keičiama mažiausiai 7 savaites atnaujinus galimybę mėgautis skoninga dieta (C→P fazė) arba į čiau dieta (P→C fazė). R121919 buvo mikroinfuzuotas dvišaliu būdu per CeA, BlA ar BNST (0, 0.5 ir 1.5 μg / šonai, 0.5 μl / šonai, 30-min išankstinio apdorojimo laikas), naudojant atsitiktinių imčių objekto lotyniškų kvadratų piešinius.

Šviesos ir tamsos dėžės bandymas

Žiurkėms buvo tiriama 10 min šviesiai tamsioje stačiakampėje dėžutėje (50 × 100 × 35 cm), kurioje aversinis šviesos skyrius (50 × 70 × 35 cm) buvo apšviestas 60 lux lempute. Tamsiosios pusės (50 × 30 × 35 cm) dangtelis buvo nepermatomas ir ∼0 liukso šviesos. Abu skyriai buvo sujungti atviromis durimis, kurios leido tiriamiesiems laisvai judėti tarp dviejų. Bandymai buvo atliekami po mažiausiai 7 dietų kaitos savaičių, 5 – 9 h po perėjimo nuo skanios dietos prie čo dietos (P→C fazė); šis laikas užtikrina nerimą keliantį elgesį, kurį sukelia pasitraukimas iš skanaus maisto Čiau / skanus žiurkės (Medvilnė et al, 2009a, 2009b). Prieš bandymą žiurkės buvo laikomos ramiame, tamsiame prieškambaryje mažiausiai 2 h. Pripratimo ir bandymų metu buvo baltasis triukšmas. Tyrimo dieną žiurkės buvo mikroinfuzuotos kartu su R121919 CeA, BlA ar BNST (0, 0.5 ir 1.5 μg / šonai, 0.5 μl / šonai) 30 min, prieš dedant į tamsų skyrių, nukreiptą priešais durų angą. o elgesys buvo užfiksuotas vaizdo įraše, kad vėliau būtų galima įvertinti. Gydymas buvo atliekamas naudojant skirtingų subjektų dizainą. Laikas, praleistas atvirame skyriuje, buvo matuojamas kaip nerimą primenančio elgesio indeksas. Aparatas švariai nušluostytas vandeniu ir išdžiovintas po kiekvieno tiriamojo.

Intrakranialinės operacijos, mikroinfuzijos procedūra ir kaniulės įdėjimas

Intrakranialinės operacijos

Žiurkėms stereotaksiniu būdu implantuojamos dvišalės, intrakranijinės kaniulės, kaip aprašyta anksčiau (Medvilnė et al, 2007; Iemolo et al, 2012; Sabino et al, 2007). Trumpai tariant, nerūdijančio plieno kreipiamosios kaniulės (24 matuokliai, „Plastics One“, Roanoke, VA, JAV) buvo dvišaliai nuleistos 2.0 mm virš CeA, BlA ar BNST. Keturi nerūdijančio plieno juvelyro varžtai buvo pritvirtinti prie žiurkės kaukolės aplink kaniulę. Buvo dengta dantų atstatomąja derva (Henry Scheinas, Melville, NY, JAV) ir akrilo cementu, formuojant pjedestalą, tvirtai pritvirtinantį kaniulę. CeA naudojamos kaniulės koordinatės iš bregmos buvo: AP +0.2, ML ± 4.2, DV −7 (nuo kaukolės), o smilkinio juosta nustatyta 5.0 mm virš interauralinės linijos, „Pellegrino“ (1979). Kanalų koordinatės, naudojamos BlA, buvo: AP −2.64, ML ± 4.8, DV −6.5 (nuo kaukolės) su plokščia kaukole, remiantis Paxinos ir Watson (2007). BNST naudojamos kaniulių koordinatės: AP –0.6, ML ± 3.5, DV – 4.8 (nuo kaukolės) su plokščia kaukole ir pakreipimo kampu 14 °. Nerūdijančio plieno manekeno stiliukas („Plastics One“) išlaikė kaniulio patentabilumą. Po operacijos žiurkėms buvo leista atsigauti 7 dieną, per kurią jos buvo tvarkomos kasdien.

Mikroinfuzijos procedūra

Vaistas buvo infuzuotas žiurkių smegenyse kaip aprašyta anksčiau (Blasio et al, 2013b; Brangu et al, 2013). Norint atlikti intrakranijinę mikroinfuziją, manekeno stiliukas buvo pašalintas iš kreipiamojo kaniulio ir buvo pakeistas nerūdijančio plieno injektoriaus 31 matuokliu, išsikišančiu 2 mm už kreipiamosios kaniulio galo; injektorius per PE 20 vamzdelius buvo prijungtas prie Hamiltono mikrošvirkšto (Hamiltonas, Renas, Nevada), kurį varė kelių švirkštų mikroinfuzijos pompa (KD Scientific / Biological Instruments, Holliston, MA, JAV). Mikroinfuzijos buvo atliktos 0.5 μl tūriu per 2 min; injektoriai buvo palikti vietoje 1 papildomai minutei, kad būtų sumažintas atgalinis srautas.

Kaniulės įdėjimas

Visų bandymų metu buvo patikrinta kaniulio padėtis (žr 1 pav). Tiriamieji buvo anestezuojami (izofluranas, 2 – 3% deguonies) ir transkardialiai perfuzuojami su lediniu 4% paraformaldehido (PFA) tirpalu vandenyje (pH 7.4) ir mikroinfuzija buvo padaryta krezio violetiniu tirpalu (0.5 μl / pusė). Tuomet smegenys buvo fiksuotos per naktį 4% PFA ir subalansuotos 30% sacharozės kiekiu PFA. 40 μm vainikiniai pjūviai buvo surinkti naudojant kriostatą (Thermo Scientific HM-525), o jų vietos patikrintos mikroskopu. Keturiasdešimt tiriamųjų (14 CeA, 16 BlA ir 10 BNST) buvo pašalinti iš analizės dėl neteisingo kaniulių išdėstymo. Buvo analizuojami neteisingų vietų duomenys, kad būtų galima lengviau suprasti vietos specifiką.

1 pav

Koroninių žiurkių smegenų griežinėlių piešimas. Taškai žymi injekcijos vietas migdolos centriniame branduolyje (CeA) (a), migdolos bazolateraliniame branduolyje (BlA) (b) ir stria terminalis (BNST) (c), įtrauktame į duomenų analizę. ...

CRF imunohistochemija

Elgesio procedūra, perfuzijos ir imunohistochemija

Žiurkės (n= 22) buvo laikomi dietos ciklais 7 savaites, buvo anestezuojami ir perfuzuojami 2 – 4 h, po to, kai jie buvo iškeisti iš skanios dietos į čiau dieta (P→C etapas) arba nuo čiau dietos iki skanaus maisto (C→P fazė). Žiurkės anestezuojamos, o po to transkardialiai perfuzuojamos fiziologiniu tirpalu + 2% (m / v) natrio nitritu (pH = 7.4), o paskui 4% paraformaldehidu, buferiniu Borax (pH = 9.5). Tada žiurkės buvo nukenksminamos, o smegenys iš karto surenkamos, supilamos į ∼20 ml 4% PFA ir laikomos 30% sacharozėje 4% PFA tirpale 4 ° C temperatūroje iki soties.

CRF vizualizavimui smegenys buvo supjaustytos į 40 μm vainikinius pjūvius naudojant kriostatą ir vėliau laikomos krioprotektoriuje -20 ° C temperatūroje. Kiekvienas šeštas visos CeA, BlA ir BNST skyrius (tarp 240 μm atstumu) buvo pasirinktas sistemingai atsitiktinai ir apdorotas imunocitochemijai. Laisvai plaukiojančios dalys buvo plaunamos kalio fosfato buferiniame druskos tirpale (KPBS). Po pirminio plovimo sekcijos buvo inkubuojamos 0.3% vandenilio peroksido KPBS tirpale 30 minučių, kad blokuotų endogenines peroksidazes. Tada sekcijos vėl buvo plaunamos ir dedamos į blokuojantį tirpalą (3% įprasto ožkos serumo, 0.25% Triton X100 ir 0.1% galvijų serumo albumino) 2 valandoms. Tada sekcijos buvo perkeltos į pirminį antikūną (1: 100 praskiedimas, anti-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) blokuojančiame tirpale ir inkubuotos 72 valandas 4 ° C temperatūroje. Po papildomo plovimo sekcijos buvo inkubuojamos 1 valandas kambario temperatūroje į antrinį antikūną (1000: 1000 praskiestas, biotiniluotas anti-triušis (BA-2) Vector Laboratories, Burlingame, Kalifornija) blokuojančiame tirpale. Skyriai buvo plaunami ir po to inkubuojami avidino – biotino krienų peroksidazės ABC tirpale („Vector Laboratories“) blokuojančiame tirpale 1 val. Po to sekcijos buvo inkubuojamos naudojant diaminobenzidino substrato rinkinį („Vector Laboratories“) pagal gamintojo instrukcijas, o kai reakcija buvo baigta, atkarpos buvo nuplaunamos KPBS, pritvirtinamos ant stiklelių ir leidžiamos per naktį išdžiūti. Kitą dieną stikleliai buvo dehidratuoti, naudojant laipsniškas alkoholio koncentracijas, ir užkloti, naudojant DPX montavimo priemonę (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, JAV).

CRF + ląstelių kūnų kiekybinis įvertinimas

CRF + ląstelių kūnų kiekybinis įvertinimas buvo atliktas remiantis nešališku stereologiniu požiūriu. Skyrių serija buvo išanalizuota kiekvienai dažymo partijai. Skyriai buvo analizuojami naudojant „Olympus“ (Center Valley, PA, JAV) BX-51 mikroskopą su Rotiga 2000R tiesioginio vaizdo kamera (QImaging, Surrey, BC, Kanada), trijų ašių MAC6000 XYZ motorizuotą sceną (Ludl Electronics, Hawthorne, Niujorkas, JAV) ir asmeninio kompiuterio darbo vieta. Visi ląstelių skaičiavimai užkoduotose skaidrėse buvo atlikti tyrėjo, aklo pagal gydymo sąlygas. Kiekvienas regionas buvo paryškintas naudojant skaitmeninį kiekvieno atsitiktinai pasirinkto skyriaus atvaizdą, naudojant programinės įrangos Stereo Investigator optinio frakcionatoriaus darbo srauto modulį („MicroBrightField“, Williston, VT, JAV). Visi kontūrai buvo nubrėžti mažu didinimu naudojant „Olympus PlanApo N 2X“ objektyvą su skaitmenine diafragma 0.08 ir suskaičiuoti naudojant „Olympus UPlanFL N 40X“ objektyvą su skaitmenine diafragma 0.75. Tinklelio rėmas ir skaičiavimo rėmas buvo nustatyti 275 × 160 μm. Buvo naudojama 2 μm apsauginė zona ir 20 μm dissektoriaus aukštis. Iš pradžių užšaldytos dalys buvo supjaustytos vardiniu storiu 40 μm. Imuninis dažymas ir tvirtinimas lemia pakitusią pjūvio storį, kuris buvo išmatuotas kiekvienoje skaičiavimo vietoje. Programinė įranga apskaičiavo vidutinį pjūvio storį ir naudojo bendrą mėginio srities tūrį ir bendrą CRF + ląstelių skaičių.

Statistinė analizė

Studentų t-testai buvo naudojami analizuoti veiksnius dviem lygiais. ANOVA buvo atlikti analizuojant veiksnius, turinčius daugiau nei du lygius. Po reikšmingo visuminio ANOVA efekto (p<0.05), Fišerio LSD post-hoc buvo naudojami palyginimo testai. Norint nustatyti, ar R121919 sunormalino suvartojimą, buvo naudojamas Dunnetto testas Čiau / skanus žiurkės buvo apdorotos nešikliu Čiau čiau-fed lygiai. Naudota programinė įranga / grafiniai paketai buvo „Systat 11.0“, „SigmaPlot 11.0“ („Systat Software“, Čikaga, IL, JAV), „InStat 3.0“ („GraphPad“, San Diegas, Kalifornija, JAV), „Statistica 7.0“ („Statsoft“, Talsa, OK, JAV) ir PASW. „18.0“ statistika (SPSS, Čikaga, IL, JAV).

REZULTATAI

R121919 mikroinfuzijos poveikis CeA

Per didelis suvalgomo maisto kiekis

Norėdami nustatyti, ar CRF₁ CeA receptoriai tarpininkauja per dideliam ragaujamo maisto kiekiui žiurkėms, kurioms skirtas dietos ciklas, mes mikroinfuzuojame būtent selektyvų CRF₁ receptorių antagonistas R121919 į šią smegenų sritį ir išmatuotas maisto suvartojimas gydymo pradžioje P fazė. Kaip parodyta 2a pav, su maistu gaunamų skanių dietinių maisto produktų Čiau / skanus žiurkės buvo dvigubai didesnės už kontrolines, kurios buvo maitintos čiaudais Čiau čiau žiurkės. CeA CRF antagonizmas₁ receptoriai visiškai užblokavo šį besaikį skanaus maisto vartojimą Čiau / skanus žiurkėms, nepažeidžiant kontrolinių žiurkių maisto (Čiau čiau, F (2, 20) = 0.72, NS; Čiau / skanus, F (2, 14) = 5.02, p Post hoc palyginimas atskleidė, kad didžiausia R121919 dozė (1.5 μg / pusėje) žymiai sumažino skanaus maisto vartojimą, palyginti su nešikliu Čiau / skanus žiurkės. Vartojimas Čiau / skanus žiurkėms atlikus 1.5 μg / šoninės dozės mikroinfuziją, reikšmingai nesiskyrė nuo nešikliais gydytų Čiau čiau žiurkės. Patvirtindamas CRF poveikio specifiškumą₁ CeA receptoriams, nepastebėta jokio poveikio vartojant maistą tiriamiesiems su netinkamai išdėstytomis kaniulėmis (Čiau / skanus, F (2, 2) = 4.32, NS).

2 pav

Selektyvaus kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus 1 (CRF₁) receptorių antagonistas R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / pusė) centriniame amigdalos branduolyje (CeA) dėl per didelio valgymo skanaus maisto, reguliarios hipofagijos ...

Įprastos čiau dietos hipofagija

Norėdami nustatyti, ar CRF₁ CeA receptoriai tarpina hipofagiją, pasireiškiančią chu dieta, kai žiurkės, kurioms skirtas racionas, mes mikroinfuzijavome R121919 į šią smegenų sritį ir išmatuojome maisto suvartojimą gydymo pradžioje. C fazė. Kaip parodyta 2b pav, transporto priemonės apimties Čiau / skanus žiurkėms buvo sunaudota ∼1 / 3 Čiau čiau žiurkės (hipofagija). Gydymas R121919 nepadarė įtakos įprastos čiulptuko hipofagijai Čiau / skanus žiurkės (Čiau / skanus, F (2, 12) = 0.14, NS). Punkte patvirtintų rezultatų patvirtinimas P fazės metu R121919 mikroinfuzija CeA neturėjo įtakos kontroliuojamo čiulpto suvartojimui Čiau čiau žiurkės (Čiau čiau, F (2, 20) = 0.01, NS).

Ūmus nutraukimo sukeltas nerimą primenantis elgesys

Norėdami nustatyti, ar CeA CRF₁ receptoriai tarpininkauja neigiamoms emocinėms būsenoms, sukeltoms ištraukus malonų maistą žiurkėms, kurių organizmas cikliškas, mes į šią smegenų sritį įpylėme mikroorganizmų, specialiai R121919, ir išmatuojome nerimą primenantį elgesį, naudodami šviesos ir tamsos dėžės testą 5 h. C fazė. Kaip parodyta 2c pav, žiurkėms, kurios buvo akivaizdžiai pašalintos iš lėtinės, su pertraukomis galimybės gauti labai malonų maistą, pastebimai sumažėjo laikas, praleistas šviesos-tamsos dėžutės šviesos skyriuje. Mikroinfuzija 1.5 μg / R121919 šone CeA - dozė, kuri veiksmingai sumažino besaikį skanaus maisto valgymą, visiškai blokuodama į nerimą panašų elgesį, padidindama laiką, praleidžiamą dėžutės šviesoje. Čiau / skanus žiurkėms, nepažeidžiant elgesio su žiurkėmis Čiau čiau žiurkės (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Patvirtinant poveikio CRF specifiškumą₁ CeA receptoriuose, nepastebėta jokio poveikio vartojant maistą tiriamiesiems su netinkamomis kaniulėmis (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

R121919 mikroinfuzijos poveikis BlA

Per didelis suvalgomo maisto kiekis

Norėdami nustatyti, ar BlA CRF₁ receptoriai tarpininkauja per dideliam ragaujamo maisto valgymui su žiurkėmis, kurioms skirtas dietos ciklas, mes į šį smegenų plotą įpylėme mikroorganizmų, specialiai R121919, ir matavome maisto kiekį P fazė. Skirtingai nuo to, kas pastebėta įleidus R1219191 į CeA, kaip parodyta 3a pav dvišalė selektyvaus CRF mikroinfuzija₁ receptorių antagonistas į BlA reikšmingos įtakos nepageidaujamo maisto vartojimui Čiau / skanus žiurkės (Čiau / skanus, F (2, 26) = 1.56, NS). Panašiai, reguliariai naudojant vištieną Čiau čiau žiurkėms nepaveikta R121919 mikroinfuzija (Čiau čiau, F (2, 18) = 0.52, NS).

3 pav

Selektyvaus kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus 1 (CRF₁) receptorių antagonistas R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / pusė) bazolateriniame amigdalos branduolyje (BlA) dėl per didelio valgymo skanaus maisto, reguliarios hipofagijos ...

Įprastos čiau dietos hipofagija

Norėdami nustatyti, ar CRF₁ BlA receptoriai tarpina hipofagiją, kai žiurkės cikliškai veikia chu, mes į šį smegenų plotą įpylėme R121919 ir išmatuojome maisto suvartojimą C fazė. Kaip parodyta 3b pav, po CRF mikroinfuzijos pastebėtas reikšmingas reguliaraus čiulpų suvartojimo padidėjimas₁ receptorių antagonistas Čiau / skanus žiurkės (Čiau / skanus, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Iš tiesų, didžiausia R1.5 dozė (121919 μg) mikroinfuzuota BlA metu C fazė žymiai padidino įprasto šiaudelio dietos vartojimą 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) procentais, palyginti su gydytu tirpalu Čiau čiau žiurkės. R121919 susilpnino, bet ne visiškai užblokavo nutraukimo sukeltą hipofagiją, vartojant didžiausią suleistą dozę. Punkte patvirtintų duomenų patvirtinimas P fazės metu, R121919 mikroinfuzija neturėjo įtakos reguliaraus čiulptuko suvartojimui Čiau čiau žiurkės (Čiau čiau, F (2, 20) = 0.25, NS). Patvirtindamas CRF poveikio specifiškumą₁ BlA receptoriams, nepastebėta jokio efekto vartojant maistą tiriamiesiems su netinkamai išdėstytomis kaniulėmis (Čiau / skanus, F (2, 8) = 0.50, NS).

Ūmus nutraukimo sukeltas nerimą primenantis elgesys

Norėdami nustatyti, ar BlA CRF₁ receptoriai tarpina neigiamą emocinę būseną, kurią sukelia ūmiai išėmus skanų maistą žiurkėms, kurių organizmas cikliškas, mes į šį smegenų plotą įdėjome mikroinfuzijos vietą, konkrečiai R121919, ir išmatuojome nerimą panašų elgesį 5 h. C fazė. Kaip parodyta 3c pav, skanus maistas - išimtas Čiau / skanus žiurkės praleido mažiau laiko šviesos skyriuje, palyginti su Čiau čiau žiurkės (DIENA: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, mikroinfuzuojamas į BlA, reikšmingai nepaveikė laiko, praleisto šviesoje (DOSE: F (1, 39) = 0.01, NS).

R121919 mikroinfuzijos į BNST poveikis

Per didelis suvalgomo maisto kiekis

Norėdami nustatyti, ar BNST CRF₁ receptoriai tarpininkauja per dideliam ragaujamo maisto valgymui su žiurkėmis, kurioms skirtas dietos ciklas, R121919 buvo įterptas į šią smegenų sritį mikroinfuzijos būdu, o maisto suvartojimas buvo matuojamas pradžioje P fazė. Kaip parodyta 4b pav, dvišalė selektyvaus CRF mikroinfuzija₁ receptorių antagonistas į BNST nedaro reikšmingos įtakos skoningo maisto vartojimui Čiau / skanus žiurkės (Čiau / skanus, F (2, 18) = 0.33, NS). Panašiai, reguliariai naudojant vištieną Čiau čiau žiurkėms nepaveikta R121919 mikroinfuzija (Čiau čiau, F (2, 20) = 1.03, NS).

4 pav

Selektyvaus kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus 1 (CRF₁) receptorių antagonistas R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / pusė) stria terminalis (BNST) lovos branduolyje dėl besaikio skonio maisto valgymo, hipofagijos ...

Įprastos čiau dietos hipofagija

Norėdami nustatyti, ar BNST CRF₁ receptoriai tarpina hipofagiją, susijusią su čiu dieta, kai žiurkės ciklinė, mes į šį smegenų plotą įpylėme R121919 ir matavome maisto kiekį C fazė. Kaip parodyta 4a pav, R121919 mikroinfuzija nepadarė įtakos reguliariam čiulptuko vartojimui Čiau čiau žiurkės (Čiau čiau, F (2, 14) = 0.03, NS). Gydymas R121919 taip pat nepaveikė įprastinio čiulptuko hipofagijos Čiau / skanus žiurkės (Čiau / skanus, F (2, 20) = 0.27, NS).

Ūmus nutraukimo sukeltas nerimą primenantis elgesys

Norėdami nustatyti, ar BNST CRF₁ receptoriai tarpina neigiamą emocinę būseną, kurią sukelia ūmiai išėmus skanų maistą žiurkėms, kurioms apžiūrima ciklų trukmė, mes į šį smegenų plotą įpylėme mikroorganizmų specialiai R121919 ir išmatuojome nerimą primenantį elgesį 5 h, pereidami nuo P→C fazė. Kaip parodyta 4c pav, skanus maistas - išimtas Čiau / skanus žiurkės praleido mažiau laiko šviesos skyriuje, palyginti su kontroline Čiau čiau žiurkės (DIENA: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, abipusiai mikroinfuzuojamas 1.5 μg / šonine doze į BNST, reikšmingai nepaveikė laiko, praleisto šviesoje (DOSE: F (1, 33) = 0.47, NS).

CRF imunohistochemija

5 pav iliustruojami CRF + ląstelių, esančių CeA, BlA ir BNST, reprezentatyvūs mikrografai Čiau čiau ir Čiau / skanus žiurkės, sekdamos ad libitum maloni dietos kaitos procedūra. CeA CRF imunoreaktyvumo analizė parodė, kad reikšmingas skirtumas tarp Čiau / skanus ir Čiau čiau žiurkės per abu C ir P fazė (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Statistiškai reikšmingų skirtumų tarp grupių nepastebėta nei BlA (F (2, 17) = 1.13, NS), nei BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

5 pav

Reprezentatyvūs kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus (CRF) imunoreaktyvumo mikrografai amygdalos (CeA) centriniame branduolyje (a – d), amigdalos bazolateraliniame branduolyje (BlA) (e – h) ir stria terminalis lovos branduolyje (BNST) ) (i – l) ...

DISKUSIJA

Šis tyrimas buvo skirtas funkciškai nustatyti smegenų vietą, atsakingą už CRF tarpininkaujantį labai gardų maistą žiurkėms, keičiant racioną. Mūsų išvados įrodo svarbų VT vaidmenį tarpininkaujant per dideliam skaniam maistui. Be to, mes parodome, kad CRF sistema BlA, skirtingai nei CeA, turi reikšmę devalvacijos procese, kuris vyksta keičiantis maisto atlygio dydžiui.

Anksčiau mes parodėme, kad pakartotiniai saldžių, labai skanių dietų prieinamumo ir staigaus pasitraukimo iš jų ciklai sukelia besaikį skanaus maisto valgymą, taip pat prie įprastos čiau dietos ūmios nuo abstinencijos priklausomos hipofagijos ir į nerimą panašų elgesį (Blasio et al, 2013a; Medvilnė et al, 2009a, 2009b). Manoma, kad čia stebimas per didelis valgymas, kurį lemia neigiama emocinė būsena, kurią sukelia pakartotiniai ūminio pasitraukimo iš labai skanaus maisto produktai per ekstrahipotalaminį CRF – CRF epizodai.₁ receptorių sistemos tarpininkaujamas mechanizmas, panašus į priklausomybės sutrikimų „uždegimo“ tipo procesą (Breese et al, 2005; Medvilnė et al, 2009a; Koob, 2008; Parylak et al, 2011).

Šio tyrimo rezultatai rodo, kad CRF₁ CeA ir BlA receptoriai skirtingai tarpina chirurginės žiurkės, maitinančios dietą, adaptaciją ir nerimą. Selektyvaus CRF administravimas₁ receptorių antagonistas CeA blokavo tiek per didelį valgymą, tiek į nerimą panašų elgesį Čiau / skanus žiurkėms, nepažeidžiant neįprastos, įprastos dietos hipofagijos. Įdomu tai, kad įvedus R121919 į BlA, sumažėjo mažiau apetitiškos chow dietos hipofagija (ty padidėjo reguliari či vartojimas) Čiau / skanus žiurkėms, nepakenkiant besaikiam valgymui ar nerimui panašiam elgesiui. Kai R121919 buvo infuzuotas BNST, jis nepadarė jokio iš kintamųjų, išmatuotų Čiau / skanus žiurkės (besaikis valgymas, kai patiekiama labai maloni dieta, reguliarus ėdalo racionas ir ūmus abstinencijos sukeltas nerimą primenantis elgesys). Stebimas farmakologinis poveikis buvo selektyvus Čiau / skanus žiurkėms, nes R121919, mikroinfekuotas CeA, BlA ar BNST iš Čiau čiau kontrolinės žiurkės, nepadarė jokio poveikio. Todėl CRF – CRF₁ Atrodo, kad CeA ir BlA receptorių sistemos skirtingai tarpina elgesio pasekmes, atsirandančias dėl lėtinio tinkamo dietos vartojimo ciklo. Kita vertus, CRF – CRF₁ Atrodo, kad BNST receptorių sistema nedalyvauja elgesio adaptacijose, kurias sukelia malonus dietų pakeitimas.

Mūsų elgesio ir farmakologinius duomenis patvirtino pastebėjimas, kad CRF imunoreaktyvumas CeA serume Čiau / skanus žiurkių skaičius buvo žymiai padidėjęs, palyginti su Čiau čiau kontrolinės žiurkės, atsitraukdamos nuo ir po to, kai atnaujino savo mitybos racioną (Medvilnė et al, 2009a). Įdomu tai, kad reikšmingo CRF imunoreaktyvumo skirtumo tarp grupių nepastebėta nei BlA, nei BNST. Padidėjęs CRF imuninis reaktyvumas, nustatytas CeA Čiau / skanus žiurkės atitinka mūsų ankstesnį atradimą, kad ūmus pasitraukimas iš skonio dietos yra susijęs su padidėjusiu CRF išsiskyrimu CeA (Medvilnė et al, 2009a). Tačiau, priešingai, nei buvo parodyta anksčiau, atnaujinus galimybę mėgautis skania dieta, CRF ekspresija CeA nebuvo grąžinta į kontrolinį lygį. Čia gautų rezultatų ir ankstesnio stebėjimo rezultatų neatitikimas gali būti susijęs su skirtingais smegenų rinkimo laiko momentais ir skirtinga CRT išraiškai matuoti naudojamų metodų anatomine skiriamąja geba. Nepaisant to, pastebėtas CRF išraiškos padidėjimas ceA vartojant abstinencijos metu ir po atnaujintos galimybės mėgautis skanu dieta atitinka selektyvų nerimo tipo elgesio (nutraukimo metu) ir besaikio valgymo (atnaujinto vartojimo) blokadą Čiau / skanus žiurkės. Todėl akivaizdus šių dviejų tyrimų neatitikimas gali būti aiškinamas bendrai taip: ūmaus skonio maisto nutraukimo metu CRF raiška padidėja žiurkėms, kurioms skirtas dietos ciklas, palyginti su kontrolinėmis medžiagomis, ir tai sukelia neigiamą poveikį. CeA CRF išraiška išlieka pakitusi iki pirmųjų labai malonių prieigos valandų, sukeldama besaikį valgymą. Nepaisant gausaus maisto vartojimo, CRF grįžta į kontrolinį lygį (Medvilnė et al, 2009a).

Parodyti elgesio, farmakologiniai ir molekuliniai rezultatai patvirtina hipotezę, kad CRF – CRF₁ CeA receptorių sistema vaidina svarbų vaidmenį tarpininkaujant neigiamoms afektinėms būsenoms ir per dideliam skanaus maisto vartojimui žiurkėms, kurioms skirtas dietos ciklas, panašiai, kaip buvo plačiai įrodyta priklausomybė nuo alkoholio ir narkotikų (Koob, 2010). Iš tikrųjų, atsižvelgiant į etanolio priklausomas žiurkes, padidėja tarpląstelinis CRF išsiskyrimas CeA ištraukimo metu, o CRF receptorių antagonisto paskyrimas CeA gali blokuoti padidėjusį etanolio skyrimą ištraukimo metu (Išsisukinėti et al, 2006; Merlo Pich et al, 1995). Analogiškai gyvūnams, priklausomiems nuo opiatų, padidėja CRF ekspresija CeA nutraukimo metu (Gegužės et al, 2003) ir CRF receptorių blokavimas CeA, bet ne BNST, sumažina elgesio nutraukimo požymius (Heinrichs et al, 1995; McNally ir Akil, 2002). Pagrindinis CRF – CRF vaidmuo₁ CeA sistemoje taip pat įrodyta priklausomybė nuo nikotino. Iš tikrųjų mekamilamino nusodinamas nikotinas nutraukiamas dėl CRF – CRF hiperaktyvacijos.₁ receptorių sistema CeA (george et al, 2007) ir vidinę CeA, bet ne vidinę BlA, CRF mikroinfuziją₁ receptorių antagonistas sumažina nuo nikotino pasišalinimo priklausomą smegenų atlygio slenksčio padidėjimą (Bruijnzeel et al, 2012). Nuo kanabinoidų priklausomoms žiurkėms nusėdimas yra susijęs su žymiai padidėjusia tarpląstelinio CRF koncentracija CeA (Rodriguezas de Fonseca et al, 1997). Visi šie įrodymai tvirtai patvirtina hipotezę, kad CRF – CRF₁ CeA receptorių sistema yra pagrindinis ūmaus abstinencijos sukelto neigiamo poveikio tarpininkas, taip pat per didelis narkotikų ir alkoholio vartojimas priklausomybės metu. Mūsų rezultatai išplėtė šias žinias ir besaikį labai skanaus maisto valgymą, ir tai rodo, kad įvyksta analogiškos neuroadaptikacijos.

Šio tyrimo rezultatai rodo, kad skonio, atsirandančio dėl maisto vartojimo, priklausomybę nuo mažiau apetitiškos čiau dietos hipofagijos sušvelnina mikroinfuzija selektyvaus CRF BlA₁ receptorių antagonistas, o per didelis valgymas ir panašus į nerimą elgesys neturėjo įtakos gydymui vaistais nuo BlA. Skirtingas BlA CRF – CRF dalyvavimas₁ Receptorių sistema dietos ciklo metu rodo, kad chuko hipofagija gali reikšti elgesio procesą, nepriklausomą nuo nerimą primenančio elgesio. Atvirkščiai, šie duomenys atitinka hipotezę, kad BlA tarpininkauja sensoriškai ir skatinamai motyvuojant svarbiausius įvykius. Iš tiesų yra nemažai įrodymų, kad BlA yra kritiškai svarbus tarpininkaujant devalvacijos procesams ir vengiant atsakų į atlygio mažinimą (ty, Crespi efektas, vienas po kito einantis neigiamas kontrastas, atlygio devalvacija ir kt.); Hatfield et al, 1996; Salinas et al, 1996; Wellman et al, 2005), todėl hipofagija, atsirandanti dėl perėjimo nuo ypač skanaus dietos prie mažiau apetitiškos čiau dietos, gali reikšti hedoninį devalvacijos procesą, o ne nuo energijos homeostazės priklausomą mechanizmą (ty nepriklausomą nuo ankstesnio energijos suvartojimo ar kūno svorio padidėjimo). ; Medvilnė et al, 2008, 2009b). CRF blokada₁ Taigi, hipotezė, kad BlA receptoriai sumažina chw hipofagiją (ty padidina čiau suvartojimą), sušvelnina devalvacijos procesą, vykstantį keičiantis nuo ypač skanaus maisto prie mažiau apetitingo čiau. Šiame kontekste svarbus ir akivaizdus neatitikimas tarp BlA gautų molekulinių ir elgesio / farmakologinių rezultatų. Nors CRF₁ receptorių antagonistas sugebėjo sumažinti chw hipofagijos apimtį, kai švirkščiama į BlA, reikšmingų CRF imunoreaktyvumo skirtumų šioje srityje nepastebėta, lyginant su kontrolinėmis ir dietinėmis žiurkėmis. Šį akivaizdų neatitikimą galima paaiškinti atsižvelgiant į tai, kad nuo BlA priklausomi alternatyvių apdovanojimų devalvacijos procesai vyksta fiziologiškai ir turi didelę evoliucinę reikšmę renkantis maisto produktus, kurių nauda / energinė vertė yra didžiausia (Murray et al, 2011). Iš esmės ginčytina, kad tarpininkaujant šiems procesams BlA nereikia CRF sistemos neuroadaptacijų (panašių į tuos, kurie stebimi CeA). Pagrįsdamas šią hipotezę, kad norint suvalgyti besaikį mitybos režimą, reikia nuolat vartoti dietos režimą, rečiau pasirenkamo čiau hipofagija atsiranda jau po pirmojo perėjimo nuo labai malonios dietos prie įprastos čiau (Medvilnė et al, 2008). Be to, svarbu pabrėžti, kad remiantis rezultatais, gautais švirkščiant CRF1 receptorių antagonistą į BlA ir CeA, CRF₁ Čia stebima nuo receptorių priklausoma hipofagija yra kitoks elgesio procesas nei anhedonija, pastebima nutraukiant narkotikus. Nepaisant to, įrodyta, kad ūmus atsitraukimas nuo pertraukiamos galimybės gauti skanų maistą sukelia kitokius į hipoedoninius panašius atsakus, tokius kaip padidėjęs nejudrumas atliekant priverstinio plaukimo testą ir sumažėjęs atsakas progresuojančio stiprinimo grafiko metu (Medvilnė et al, 2008; Iemolo et al, 2012).

Pažymėtina tai, kad nors Čiau / skanus žiurkėms buvo chroniškai taikoma dietos ciklas, čia parodyti elgesio ir neurocheminiai pokyčiai atsiranda ūmaus, o ne lėtinio pasitraukimo iš skanaus raciono metu. Pabrėžti šį aspektą yra ypač svarbu, nes atliekant priklausomybės tyrimus, pastebimi dideli ūminio ūminio elgesio, farmakologinių ir neurocheminių padarinių skirtumai. vs pastebėta užsitęsusi abstinencija (Heilig et al, 2010; Koob ir Le Moal, 2008). Būsimi tyrimai bus vertingi siekiant nustatyti, kaip užsitęsęs abstinencijos gydymas gali paveikti dietos laikymąsi dviračiais.

Svarbus diskusijų momentas yra tai, ar per didelis skanus maisto vartojimas, kurį pastebime šio gyvūnų modelio kontekste, gali būti laikomas „priverstiniu“. Ikiklinikinių priklausomybės tyrimų metu terminas „kompulsinis“ buvo plačiai vartojamas apibūdinant per didelį narkotikų vartojimą nutraukimo metu, kurį lemia neigiama afektinė būsena ir kuris palengvėja atnaujinus prieigą prie narkotikų (Ahmed ir Koob, 2005; Koob ir Le Moal, 2005). Šis terminas „kompulsinis“ pripažinimas grindžiamas konceptualia sistema, pagal kurią kompulsiniams sutrikimams būdingas nerimas ir stresas prieš darant priverstinį elgesį, ir palengvėjimas nuo streso atliekant kompulsinį elgesį (Koob, 2009; Koob ir Volkow, 2010). Atsižvelgiant į čia naudojamą gyvūnų modelį, pernelyg didelis valgymo elgesys gali būti interpretuojamas kaip „priverstinio“ elgesio forma, atsižvelgiant į anksčiau paskelbtus įrodymus, kad žiurkės, turinčios protarpių prieigą prie skanios dietos, pasižymi neigiama emocine būsena, kai pašalinamas skanus maistas. elgesys, panašus į nerimą ir depresiją, kuris palengvėja atnaujinus prieigą (Medvilnė et al, 2009a, 2009b; Iemolo et al, 2012).

Apibendrinant galima pasakyti, kad šio tyrimo rezultatai pateikia svarbius funkcinius įrodymus, kad CRF – CRF₁ CeA ir BlA receptorių sistema vaidina skirtingą vaidmenį tarpininkaujant netinkamam elgesiui, atsirandančiam dėl periodiškos prieigos prie skanaus maisto. CeA, CRF – CRF₁ receptorių sistema yra pagrindinis perdėto skanaus maisto valgymo ir nuo pašalinimo priklausomo neigiamo poveikio tarpininkas, tuo tarpu BlA jis tarpininkauja tarpininkaujančių asmenų neigiamiems atsakams, atsirandantiems mažinant atlygį.

FINANSAVIMAS IR ATSKLEIDIMAS

Autoriai pareiškia, kad nėra interesų konflikto.

Padėka

Dėkojame Duncan Momaney, Aditi R Narayan, Jinai Kwak už techninę pagalbą ir Tamarai Zeric už techninę ir redakcinę pagalbą. Taip pat dėkojame Elenai F Crawford už naudingus pasiūlymus, susijusius su CRF imunohistochemija. Šį leidinį leido suteikti Nacionalinio piktnaudžiavimo narkotikais instituto (NIDA), Nacionalinio psichinės sveikatos instituto (NIMH) ir Nacionalinio piktnaudžiavimo alkoholiu ir alkoholizmo instituto dotacijų numeriai DA023680, DA030425, MH091945, MH093650 ir AA016731. NIAAA), Peterio Pauliaus karjeros plėtros profesoriaus (PC) ir Bostono universiteto bakalauro tyrimų galimybių programos (UROP). Šį tyrimą taip pat palaikė Nacionalinio piktnaudžiavimo narkotikais instituto NIH vidinės tyrimų programos ir Nacionalinis piktnaudžiavimo alkoholiu ir alkoholizmo institutas, NIH, DHHS. Už jo turinį atsako tik autoriai ir nebūtinai atspindi oficialias Nacionalinių sveikatos institutų pažiūras.

Išnašos

Papildoma informacija pridedamas prie pranešimo Neuropsychopharmacology svetainėje (http://www.nature.com/npp)

Papildoma medžiaga

Papildoma informacija

Spauskite čia norėdami gauti papildomą duomenų failą.^{(129K, pdf)}

Nuorodos

Ahmedas SH, „Koob GF“. Perėjimas prie narkomanijos: neigiamas sustiprinimo modelis, pagrįstas aliostatiniu atlygio funkcijos sumažėjimu. Psichofarmakologija (Berl) 2005; 180: 473 – 490. [PubMed]
„Avena NM“, „Bocarsly ME“, „Hoebel BG“. Gyvūniniai cukraus ir riebalų perteklių modeliai: ryšys su priklausomybe nuo maisto ir padidėjęs kūno svoris. Metodai Mol Biol. 2012; 829: 351 – 365. [PubMed]
„Bakshi“ VP, Kalino NH. Kortikosotropiną atpalaiduojantis hormonas ir nerimo modeliai gyvūnams: genų ir aplinkos sąveika. Biolo psichiatrija. 2000; 48: 1175 – 1198. [PubMed]
Ryžių TL. Jautrumas stresui: CRF kelių reguliavimo sutrikimas ir ligos vystymasis. Hormas Behavas. 2005; 48: 1 – 10. [PubMed]
„Blasio A“, „Iemolo A“, „Sabino V“, „Petrosino S“, „Steardo L“, „Rice KC“. 2013aRimonabantas sukelia nerimą žiurkėms, pašalintoms iš skanaus maisto: centrinės amygdalos vaidmuo Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.153 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P. 2013bOpioidinė sistema medialinėje prefrontalinėje žievėje tarpininkauja į pliką panašų valgymą. Narkomanas Bioldoi: 10.1111 / adb.12033 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
Breese GR, Overstreet DH, Knapp DJ. Konceptuali alkoholizmo etiologijos sistema: „užsidegimo“ / streso hipotezė. Psichofarmakologija (Berl) 2005; 178: 367–380. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M ir kt. CRF1 receptorių blokada centriniame amigdalos branduolyje sumažina disforiją, susijusią su nikotino nutraukimu žiurkėms. „Pharmacol Biochem Behav“. 2012; 101: 62 – 68. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR ir kt. 2,5-dimetil-3- (6-dimetil-4-metilpiridin-3-il) -7-dipropilaminopirazolo [1,5-a] py rimidino (NBI 30775 / R121919) dizainas ir stipriai veikiamosios medžiagos struktūros ir aktyvumo santykiai bei serijos stiprus poveikis aktyvūs kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus receptorių antagonistai. J Med. Chem. 2004; 47: 4787 – 4798. [PubMed]
Corwinas RL. Burning žiurkės: protarpinio perteklinio elgesio modelis. Apetitas. 2006; 46: 11 – 15. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Corwinas RL, Grigson PS. Simpoziumo apžvalga - priklausomybė nuo maisto: faktas ar grožinė literatūra. J Nutr. 2009; 139: 617 – 619. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Cottone P“, „Sabino V“, Nagy TR, „Coscina DV“, „Zorrilla EP“. Dietos sukeliamos nutukimui jautrių žiurkių mikrostruktūros, palyginti su atspariomis žiurkėms: pagrindinis urokortino 2 poveikis. J Physiol. 2007; 583 („Pt 2“: 487 – 504. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB ir kt. CRF sistemos įdarbinimas tarpininkauja tamsioje kompulsinio valgymo pusėje. Proc Natl Acad Sci USA. 2009a: 106: 20016 – 20020. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Cottone P“, „Sabino V“, „Steardo L“, „Zorrilla“ EP. Retkarčiais gaunamas pageidaujamas maistas sumažina žiurkių čiulpo veiksmingumą. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008; 295: R1066 – R1076. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Vartojimo, nerimo ir metabolinės adaptacijos patelėms su kintančia prieiga prie pageidaujamo maisto. Psichoneuroendokrinologija. 2009b: 34: 38 – 49. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J ir kt. Sigma-1 receptorių antagonizmas blokuoja kompulsinį valgymą. Neuropsichofarmakologija. 2012; 37: 2593 – 2604. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Dore R“, „Iemolo A“, „Smith KL“, „Wang X“, „Cottone P“, „Sabino V.“. 2013CRF tarpininkauja dėl PACAP Neuropsychopharmacologydoi nerimą sukeliančio ir anti-apdovanojančio, bet ne anorektinio poveikio: 10.1038 / npp.2013.113 [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed] [Kryžiaus nuoroda]
Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Kortikotropino atpalaiduojantis faktorius centrinėje amygdalos branduolyje tarpininkauja su padidėjusiu etanolio savarankišku vartojimu su žiurkėmis, priklausančiomis nuo etanolio. J Neurosci. 2006: 26: 11324 – 11332. [PubMed]
George'as O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, Zorrilla EP, Parsons LH ir kt. CRF-CRF1 sistemos aktyvacija skatina nutraukimo sukeltą nikotino savaiminio vartojimo padidėjimą žiurkėms, priklausomoms nuo nikotino. Proc Natl Acad Sci JAV. 2007; 104: 17198 – 17203. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H ir kt. In vitro R121919 apibūdinimas: naujas nepeptidinis kortikotropiną atpalaiduojantis faktoriaus1 (CRF1) receptorių antagonistas, galimas depresijos ir su nerimu susijusių sutrikimų gydymui. Neuromokslų draugija. 2000; Anotacija 807: 4 – 9.
Hagano MM, „Chandler PC“, „Wauford PK“, „Rybak RJ“, „Oswald KD“. Skanus maistas ir alkis kaip pagrindiniai veiksniai vaidina gyvūno streso sukeltą perpildytą valgymo modelį. Int J Valgymo sutrikimas. 2003; 34: 183 – 197. [PubMed]
Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Neurotoksiniai bazolateralaus, bet ne centrinio amigdala pažeidimai trukdo Pavlovijos antrosios eilės kondicionavimui ir sustiprina devalvacijos poveikį. J Neurosci. 1996; 16: 5256 – 5265. [PubMed]
Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Ūmus pasitraukimas, užsitęsęs susilaikymas ir neigiamas poveikis alkoholizmui: ar jie yra susiję. Narkomanas biol. 2010; 15: 169 – 184. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Heilig M, Koob GF. Pagrindinis kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus vaidmuo priklausomybei nuo alkoholio. Tendencijos Neurosci. 2007; 30: 399 – 406. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Kortikotropino atpalaiduojančio faktoriaus slopinimas amygdaloje mažina morfino pasitraukimo pasekmes. Behav Pharmacol. 1995: 6: 74 – 80. [PubMed]
„Iemolo A“, „Valenza M“, „Tozier L“, „Knapp CM“, „Kornetsky C“, „Steardo L“ ir kt. Nutraukimas nuo lėtinio, su pertrūkiais gaunamo maisto su labai geru maistu sukelia priverstinai valgančių žiurkių depresiją. „Behav Pharmacol“. 2012; 23: 593 – 602. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Koob GF. Smegenų įtampos sistemų priklausomybėje vaidmuo. Neuronas. 2008: 59: 11 – 34. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Koob GF“. Neurobiologiniai substratai, skirti tamsiosios priklausomybės kompulsyvumo pusei. Neurofarmakologija. „2009“; „56“ („1“: „18 – 31“.)PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Koob GF. CRF ir su CRF susijusių peptidų vaidmuo tamsoje priklausomybės pusėje. Brain Res. 2010: 1314: 3 – 14. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Koob GF“, „Heinrichs SC“. Kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus ir urokortino vaidmuo reaguojant į elgesį su stresu. „Brain Res. 1999; 848: 141 – 152. [PubMed]
Koob GF, Le Moal M. Atlygio neurocirkuliacijos plastiškumas ir narkomanijos „tamsioji pusė“. Nat Neurosci. 2005: 8: 1442 – 1444. [PubMed]
Koob GF, Le Moal M. apžvalga. Neurobiologiniai mechanizmai priešų motyvaciniams procesams priklausomybėje. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008: 363: 3113 – 3123. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Koob GF, Volkow ND. Nepriklausomybės neurocirkuliacija. Neuropsichofarmakologija. 2010: 35: 217 – 238. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Logrip ML“, „Koob GF“, „Zorrilla EP“. Kortikotropiną atpalaiduojančio veiksnio vaidmuo priklausomybėje nuo narkotikų: farmakologinės intervencijos galimybė. CNS narkotikai. 2011; 25: 271 – 287. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Maj M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Morfino ir kokaino įtaka CRF biosintezei žiurkės centriniame amygdalos branduolyje. Neuropeptidai. 2003: 37: 105 – 110. [PubMed]
„McNally GP“, Akil H. Kortikotropiną atpalaiduojančio hormono vaidmuo stria terminalis amygdaloje ir lovos branduolyje opioidų pasitraukimo elgesio, skausmą modifikuojančiose ir endokrininėse pasekmėse. Neuromokslas. 2002; 112: 605 – 617. [PubMed]
Merlo Pich E, Lorang M, Yeganeh M, Rodriguez de Fonseca F, Raber J, Koob GF ir kt. Iš tarpląstelinio kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus panašaus imunoreaktyvumo lygio padidėjimas budinčių žiurkių amygdaloje, kai pasireiškia mikrodializė, atliekant suvaržymo stresą ir nutraukiant etanolio vartojimą. J Neurosci. 1995; 15: 5439 – 5447. [PubMed]
Murray E, Wise S, Rhodes S. 2011Ką skirtingos smegenys gali padaryti naudodamos atlygį In Gottfried JA (red. Past.) Sensacijos ir atlygio neurobiologija, 4 CRC skyrius: Boca Raton, FL, JAV [PubMed]
Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. Tamsioji maisto priklausomybės pusė. Physiol Behav. 2011: 104: 149 – 156. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Paxinos G, Watson C. 2007Stearaksinių koordinačių žiurkės smegenys6th edn.Academic Press
Pellegrino A. Stereotaksinis žiurkių smegenų atlasas. Plenumas: Niujorkas; 1979.
Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Kortikotropino atpalaiduojančio faktoriaus aktyvavimas limbinėje sistemoje, kai vartojama kanapių. Mokslas. 1997: 276: 2050 – 2054. [PubMed]
Sabino V, Cottone P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-metoksimetoponas, labai stiprus mu opioidų agonistas, dviem fazėmis veikia etanolio suvartojimą Sardinijos alkoholį teikiančiose žiurkėse. Psichofarmakologija (Berl) 2007; 192: 537 – 546. [PubMed]
Salinas JA, MB tėvas, „McGaugh JL“. Iboteno rūgšties pažeidimai amigdala bazolateriniame komplekse ar centriniame branduolyje diferencijuotai veikia atsaką į atlygio sumažėjimą. „Brain Res. 1996; 742: 283 – 293. [PubMed]
Shalev U, Erb S, Shaham Y. CRF ir kitų neuropeptidų vaidmuo, susijęs su streso sukeltu atstatymu iš naujo. Brain Res. 2010: 1314: 15 – 28. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. 41 liekanų avių hipotalaminio peptido, stimuliuojančio kortikotropino ir beta-endorfinų sekreciją, apibūdinimas. Mokslas. 1981; 213: 1394 – 1397. [PubMed]
Volkow ND, O'Brien CP. DSM-V klausimai: ar nutukimas turėtų būti įtrauktas kaip smegenų sutrikimas. Am J psichiatrija. 2007; 164: 708–710. [PubMed]
Wellman LL, Gale K, Malkova L. GABAA tarpininkaujamas bazolaterinių amigdalų slopinimas blokuoja atlygį makakų devalvacija. J Neurosci. 2005; 25: 4577 – 4586. [PubMed]
Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Epidemiologiniai ir ekonominiai pasekmių ir diabeto epidemijų padariniai. Nat Med. 2006: 12: 62 – 66. [PubMed]