Komentarai: Žiurkės pirmenybę teikė intensyviam cukraus ir sacharino saldumui, palyginti su kokainu. Ši nuostata tęsėsi net padidinus kokaino dozę ir kai žiurkėms reikėjo sunkiau dirbti, kad gautų saldų atlygį. Pašalinimas yra tas, kad žiurkės pirmenybę teikė natūraliam stiprikliui (cukrui), o ne priklausomybę sukeliančiam vaistui. Internetinė pornografija yra prietaringai stimuliuojanti natūralaus pastiprintojo (tikrojo sekso) pakaitalas, panašiai kaip sacharinas yra cukraus pakaitalas.
SANTRAUKA
fonas
Rafinuoti cukrūs (pvz., Sacharozė, fruktozė) daugumos žmonių mityboje nedalyvavo neseniai žmogaus istorijoje. Šiandien per daug suvartojus daug cukrų turinčių dietų kartu su kitais veiksniais, skatinančiais dabartinę nutukimo epidemiją. Cukraus tankių maisto produktų ar gėrimų pernelyg didelį vartojimą iš pradžių skatina saldaus skonio malonumas ir dažnai lyginamas su narkomanija. Nors yra daug biologinių bendrų saldintų mitybų ir piktnaudžiavimo narkotikais, šiuo metu nežinoma, koks yra buvusiojo priklausomybės potencialas, palyginti su pastaraisiais.
Metodika / pagrindinės išvados
Mes pranešame, kad kai žiurkėms buvo leista abipusiai pasirinkti vandenį, pasaldintą sacharinu - intensyvų saldiklį, kuriame nėra daug kalorijų, ir į veną leidžiamą kokainą, kuris sukelia labai didelę priklausomybę ir yra kenksminga medžiaga, - didžioji dauguma gyvūnų (94%) pirmenybę teikė saldžiajam skoniui. sacharino. Sacharinas nebuvo teikiamas dėl nenatūralaus jo sugebėjimo sukelti saldumą be kalorijų, nes toks pat pirmenybė buvo teikiama sacharozei - natūraliam cukrui. Galiausiai, sacharinas nebuvo patenkintas didinant kokaino dozes ir buvo stebimas nepaisant intoksikacijos kokainu, sensibilizacijos ar padidėjusio suvartojamo alkoholio kiekio - pastarosios yra būdingas narkomanijos požymis.
Išvados
Mūsų išvados aiškiai parodo, kad intensyvus saldumas gali viršyti kokaino atlygį, net ir su narkotikais jautrintiems ir nukentėjusiems asmenims. Mes spėliojame, kad intensyvaus saldumo priklausomybės potencialas atsiranda dėl įgimto padidėjusio jautrumo saldiesiems skoniams. Daugeliui žinduolių, įskaitant žiurkes ir žmones, saldūs receptoriai išsivystė į protėvių aplinką, kuriai būdingas mažas cukrų kiekis, todėl jie nėra pritaikyti didelėms saldžiųjų skonių koncentracijoms. Supranormali šių receptorių stimuliacija dėl turtingos cukraus dietos, pvz., Dabar plačiai prieinamos šiuolaikinėje visuomenėje, sukurtų supranormalinį atlygio signalą smegenyse, galinčią nepaisyti savikontrolės mechanizmų ir taip sukelti priklausomybę.
Finansavimas: Šis darbas buvo remiamas iš „Victor-Segalen Bordeaux 2“, Prancūzijos tyrimų tarybos (CNRS), „Conseil Régional Aquitaine“, Nacionalinės tyrimų agentūros (ANR) ir „Fondation pour la Recherche Médicale“ (FRM) subsidijų.
Akademinis redaktorius: Bernhardas Baune, Džeimso Kuko universitetas, Australija
Citacija: „Lenoir M“, „Serre F“, „Cantin L“, „Ahmed SH“ (2007) Intensyvus saldumas pranoksta kokaino apdovanojimą. „PLOS ONE 2“ (8): „e698“. doi: 10.1371 / žurnalas.pone.0000698
Saldaus skonio suvokimas yra įgimtas pajėgumas, priklausantis nuo dviejų su baltymais sujungtų subvienetų receptorių - T1R2 ir T1R3, esančių ant liežuvio [1], [2]. Šių receptorių stimuliavimas dietomis, kuriose gausu saldžių skonių, pavyzdžiui, saldintais gėrimais (gaiviaisiais gėrimais, kola, vaisių gėrimais), sukelia pojūtį, kad daugumai žmonių ir kitiems žinduoliams, įskaitant graužikus, intensyvus atlygis [3 ] - [6]. Kadaise tai buvo skirta tik mažam elitui, labai saldintų dietų vartojimas dabar yra labai paplitęs išsivysčiusiose šalyse ir padaugėja kitur [7], [8]. Nors ir sunku įvertinti, saldūs pojūčiai, kuriuos sukelia cukrumi saldinti maisto produktai ir gėrimai, yra turbūt vienas iš labiausiai ankstyvų, dažnų ir intensyvių jutiminių malonumų šiuolaikiniams žmonėms [7], [9]. Tačiau dabartinis saldžių pojūčių siekimas žymiai viršija medžiagų apykaitos poreikius ir, manoma, kartu su keliais kitais veiksniais [10] - [13] prisideda prie dabartinės nutukimo epidemijos [7], [14].
Pasyvus per didelis cukraus vartojimo saldintų dietų vartojimas dažnai buvo lyginamas su priklausomybe nuo narkotikų, nors ši paralelė dar visai neseniai buvo grindžiama anekdotiniais įrodymais, o ne patikimais moksliniais pagrindais. Visai neseniai gauti eksperimentinių tyrimų su gyvūnais, ypač žiurkėmis, įrodymai atskleidė gilų bendrumą tarp per didelio cukraus vartojimo ir priklausomybės nuo narkotikų [15] - [17]. Pirmiausia, tiek saldieji skanumynai [18], [19], tiek ir piktnaudžiavimo narkotikai [20], [21] stimuliuoja dopamino signalizaciją veniniame viduryje - tai smegenų signalizacijos kelias, kritiškai svarbus atlygio apdorojimui ir mokymuisi [22], [23]. Antra, tarp cukrų ir piktnaudžiavimo narkotikais pastebėtas kryžminis tolerancija [24], [25] ir kryžminė priklausomybė [26] - [28]. Pavyzdžiui, gyvūnai, kurių sacharozė seniai vartojama, tampa tolerantiški analgetiniam morfino poveikiui [25]. Be to, žiurkėms, kurių cukrus yra per didelis, naloksonas - opiatų antagonistas - nusėda kai kurie opioidų vartojimo elgesio ir neurocheminiai požymiai [28]. Pastarasis pastebėjimas yra svarbus, nes parodo, kad per didelis cukraus saldintų gėrimų vartojimas gali sukelti priklausomybę primenančią būseną. Galiausiai, paskutinis neurovaizdis [29], [30].
Apskritai tarp cukraus saldintų gėrimų ir piktnaudžiavimo narkotikais yra daug elgesio ir biologinių ypatumų. Tačiau buvusio giminaičio priklausomybės potencialas pastarojo atžvilgiu yra ne toks aiškus. Ankstesni tyrimai parodė, kad tuo pat metu gaunamas labai saldintas vanduo (sacharinas ir gliukozė) gali sumažinti savarankiškų mažų kokaino dozių vartojimą nepriklausomoms žiurkėms [31], [32], teigdamas, kad saldintas vanduo gali viršyti kokaino atlygį - vienas iš šiuo metu žinoma labiausiai priklausanti ir kenksminga medžiaga [33]. Ar šis poveikis atsirado dėl to, kad iš tikrųjų pasirenkamas stiprus saldumas, ar dėl kitų veiksnių (pvz., Neoptimalios kokaino dozės vartojimas ir (arba) priklausomybės nuo kokaino stoka), dar nenustatyta. Ši eksperimentų serija buvo sukurta tiesiogiai spręsti šį klausimą. Mes sukūrėme atskirų tyrimų pasirinkimo procedūrą, skirtą įvertinti intensyvaus saldaus skonio naudos vertę, palyginti su į veną leidžiamu kokainu. Ši procedūra pirmiausia buvo išbandyta neribotoms, naivioms žiurkėms, siekiant nustatyti, kaip be išankstinės patirties su kokainu ar stipraus saldumo gyvūnai išmoksta skirtingai vertinti abi atlygio rūšis. Tada ta pati procedūra buvo taikoma žiurkėms po ilgesnės galimybės savarankiškai vartoti kokainą. Ankstesni tyrimai parodė, kad ilgai vartojant kokainą, daugumai žiurkių pasireiškia pagrindiniai priklausomybės požymiai, įskaitant narkotikų vartojimo padidėjimą [34], smegenų atlygio perdirbimą [35] ir sunkumus sustabdyti narkotikų paiešką nepaisant neigiamų padarinių [36].
rezultatai
Narkomanams, neturintiems išankstinės patirties su rafinuotu cukrumi ar dirbtiniu saldikliu, buvo leista pasirinkti 8 kartus per dieną tarp dviejų viena kitą paneigiančių svirtelių (1a pav.): Reaguojantiems ant vienos svirties (svirtis C) buvo apdovanota elgesio požiūriu efektyvia kokaino doze. (0.25 mg, iv), reaguodamas į kitą svirtį (svirtį S), buvo apdovanotas 20 prieiga prie vandens, pasaldinto sacharinu (0.2%) (žr. Medžiagos ir metodai). Svarbu tai, kad kiekvieną dieną prieš pasirenkant, žiurkėms buvo leista pakaitomis imti kiekvieną svirtį 2 kartus, kad būtų galima sužinoti jų atitinkamą atlygio vertę (1a pav.). Įvairios gyvūnų grupės buvo tiriamos 3 apdovanojimo sąlygomis. Esant S- / C + sąlygoms (N = 30), tik reaguojantys į svirtį C buvo apdovanoti (+) už kokaino pristatymą; atsakydamas už svirties S nebuvo apdovanotas (-). Esant S + / C sąlygai (N = 9), tik atsakiusiems ant svirties S, buvo suteikta teisė naudotis sacharinu; atsakant už svirties C nebuvo atlyginta. Galiausiai, esant S + / C + sąlygoms (N = 43), abi svirtys buvo apdovanotos atitinkamais apdovanojimais. S- / C + arba S + / C + būklėje buvo daugiau žiurkių nei S + / C- būklėje, nes šiomis ankstesnėmis sąlygomis buvo atlikta daugiau eksperimentų, siekiant įvertinti pasirinkimo veiksnius tarp sacharino ir kokaino (dozė, vėlavimas, pastangos, atvirkštinis keitimas). , kalorijų sąnaudos, troškulys).
1 dieną ir nepriklausomai nuo atlygio sąlygų, žiurkės buvo abejingos abiem svirtims, parodydamos, kad mūsų aplinkoje nebuvo jokio išankstinio šališkumo ar pirmenybės. Kaip ir tikėtasi, pakartotinai bandant, atlygio sąlygos labai paveikė svertų pasirinkimo raidą [Sąlyga × diena: F (28,1106) = 8.71, P <0.01] (1b pav.). Esant S- / C + sąlygoms, žiurkėms nebuvo teikiama pirmenybė iki 9 dienos, kai jie pasisuko link pirmenybės C svertui. Ši nuostata statistiškai patikima tapo 11 dieną. Panašiai, esant S + / C- sąlygoms, žiurkės greitai įgijo pirmenybę svirčiai S, kuris tapo statistiškai patikimas 7 dieną. Nenuostabu, kad esant S + / C + sąlygoms, žiurkės iškart sukūrė tvirtą ir stabilų svertų S pirmenybę, kuri 2 dieną tapo statistiškai reikšminga. Ši pirmenybė nebuvo galima atskirti nuo žiurkių S + / C- sąlyga [F (14,700 0.41) = 1, NS] (14.5b pav.). Be to, stabilizavus elgesį, vėlavimas pasirinkti svirtį S S + / C + sąlygomis (5.0 ± 3 s, vidurkis ± SEM iš paskutinių 6.5 stabilių dienų) buvo panašus į S + / C- būklę (2.4 ± 50 s) [t (1) <XNUMX], parodydamas, kad žiurkės nedvejodamos pasirinko sachariną, o ne kokainą, tarsi svirtis C nebūtų apdovanota kokainu.
Sacharino pirmenybė teikiama S + / C + sąlygomis nebuvo dėl to, kad nepavyko sužinoti svirties C vertės. Iš tikrųjų nuo 7 dienos žiurkės beveik maksimaliai atrinko svirtį C, nors šiek tiek mažiau nei svirtis S, prieš tai padaryti savo pasirinkimus (1c pav.). Taigi, nepaisant beveik maksimalaus kokaino mėginių ėmimo, žiurkės, turinčios S + / C + sąlygą, pirmenybę svirčiai S įgijo taip greitai, kaip žiurkės, esant S + / C- sąlygoms. Ši išvada taip pat rodo, kad kokainas neturėjo jokios teigiamos ar neigiamos įtakos sacharino priėmimui ir (arba) pirmenybei pasirinkimo metu. Galiausiai, stabilizavus elgesį, latentinė imties svirtis C (48.5 ± 10.2 s, vidutinė ± paskutinių 3 stabilių dienų ± SEM) buvo žymiai didesnė nei vėlavimo laikas imant svirtį S (5.6 ± 1.7 s) [F (1,42, 17.44) = 0.01, P <XNUMX]. Šis skirtumas rodo, kad gyvūnai iš tikrųjų sužinojo, kad kiekvienas svertas yra susijęs su skirtingu rezultatu.
Svarbu pažymėti, kad sacharinas nebuvo teikiamas dėl troškulio ar gėrimo per se, nes žiurkės pirmenybę teikė kokainui, o ne paprastam vandeniui (2 pav.). Galiausiai, sacharinas nebuvo teikiamas dėl nenatūralių savybių sukelti saldumą be kalorijų, nes toks pat pasirinkimas buvo laikomasi ir ekvipotencinėje sacharozės koncentracijoje (4%) (2 pav.).
Norėdami tiesiogiai įvertinti kokaino elgesio veiksmingumą atliekant atskirų bandymų pasirinkimo procedūrą, mes išmatavome pirmosios dienos kokaino savęs injekcijos gebėjimą sukelti judėjimą 1, 5 ir 15 dienomis. Kaip ir tikėtasi, žiurkėms, kurios įgijo pirmenybę C svirtelei esant S- / C + sąlygai, kokainas sukėlė greitą judesio padidėjimą, kuris pasiekė aukščiausią tašką 1 minutę po injekcijos, o po to per 10 minučių tarpinių bandymų intervalą palaipsniui grįžo į pradinį lygį (3a pav.). Šis psichomotorinis efektas dar labiau sustiprėjo po pakartotinio kokaino poveikio [Dienos × intervalai: F (40,1160) = 5.06, P <0.01] - gerai žinomas reiškinys, vadinamas elgesio jautrinimu.
Jautrumas kokainui buvo maksimalus vos 5 dieną ir išliko stabilus iki eksperimento pabaigos, nepaisant papildomo kokaino poveikio (3a pav.). Svarbu tai, kad panašaus dydžio elgesio sensibilizacija taip pat buvo stebima žiurkėms, kurios S + / C + sąlygomis įgijo didelį pirmenybę svirčiai S [Dienos × intervalai: F (40,1680) = 6.57, P <0.01] (3b pav.) ). Norint patikrinti specifinį sacharino vartojimo indėlį į sensibilizacijos sukėlimą S + / C + būklėje, iš pradžių S + / C- sąlygomis išbandytos žiurkės buvo išbandytos S + / C + sąlygomis 16 dieną. Šios žiurkės buvo daug mažiau jautrios kokainui nei žiurkės, iš pradžių treniruotos esant S + / C + sąlygai [Grupės × intervalai: F (20, 1000) = 1.66, P <0.05] (3c pav.). Šis pastebėjimas aiškiai parodo, kad sacharino vartojimas per se turi mažai įtakos sensibilizacijai esant S + / C + sąlygai, taigi labai nedaug kokaino dozių, suvartotų S + / C + sąlygomis (dažniausiai mėginių ėmimo metu), savaime buvo pakankamos, kad paskatintų jautrinti atsaką. Taigi žiurkės pirmenybę teikė sacharinui, o ne kokainui, nepaisant to, kad buvo visiškai jautrios ir jautrios (ir) kokainui.
Gali būti, kad nors kokaino dozė buvo veiksminga sukeliant judesį ir įjautrinimą, ji vis dėlto buvo per maža, kad viršytų naudingą sacharino poveikį. Siekiant išspręsti šį klausimą, buvo tiriamas žiurkių (N = 11) pogrupis, mokytas S + / C + sąlygomis, didinant kokaino iv dozes (0.25-1.5 mg). Didžiausia dozė mūsų sąlygomis buvo artima, bet mažesnė už konvulsinę dozę (ty 3 mg). Kaip ir tikėtasi, padidinus kokaino dozę, padidėjo nuo dozės priklausantis judesio judėjimas, matuojamas 10 minučių po pirmojo kokaino savęs injekcijos pirmosios kiekvienos dozės pakaitalo dienos metu [F (2,20) = 18.77, P <0.01 ] (4a pav.). Tačiau, nepaisant turimos dozės, žiurkės ir toliau pirmenybę teikė svirtžiui S, o ne svertui C [F (2,20) = 0.07, NS] (4b pav.). Taigi žiurkės pirmenybę teikė sacharinui, nepaisant beveik maksimalaus kokaino stimuliacijos lygio. Nors į veną vartojamas būdas leidžia greitai ir intensyviai paveikti narkotikus - o tai paaiškina, kodėl šį būdą dažnai renkasi sunkieji narkotikų vartotojai, - vis tiek yra trumpas, nesusijęs uždelsimas tarp svirties paspaudimo ir kokaino poveikio pasireiškimo. Šis tyrimo uždelsimas šiame tyrime buvo įvertintas 6.2 ± 0.2 s (žr. Medžiagos ir metodai). Panašiai neurocheminis kokaino poveikis būna didžiausias nuo 4 iki 20 s po injekcijos į veną pradžios [37]. Priešingai, vėlavimas tarp atsako ir sacharino vartojimo pradžios buvo mažesnis nei 2 s. Šis vėlavimo skirtumas, nors ir nedidelis, vis dėlto galėtų paaiškinti pirmenybę sacharinui, kurio naudingas poveikis yra greitesnis nei kokaino. Norint patikrinti šio veiksnio įtaką, sacharino tiekimas buvo sistemingai atidėtas pasirinkus svirtį S (0–18 s) žiurkių pogrupyje (N = 11), o kokaino atidėjimo vėlavimas išliko pastovus. Padidėjęs sacharino pristatymo uždelsimas šiek tiek sumažino svirties S pasirinkimą [F (3,30) = 6.58, P <0.01] (4c pav.). Tačiau šis padidėjimas nebuvo pakankamas, kad būtų galima pakeisti svertą S pirmenybę svirties C naudai. Taigi, žiurkės pirmenybę teikė sacharinui, net jei jo vėlavimas buvo lygus ar didesnis už kokaino poveikio vėlavimą. Galiausiai kitame žiurkių pogrupyje (N = 10) įvertinome atlygio kainos (t. Y. Paspaudimų, reikalingų atlygiui gauti, skaičių) poveikį pasirinkimui. Kai kuriais atvejais didėjanti atlygio kaina gali sukelti privilegijų pasikeitimą [38]. Tačiau padidinus atlygio kainą nuo 2 iki 8 atsakymų / atlygio, tai nepasikeitė, o padidėjo pirmenybė svertui S [F (2,18) = 8.04, P <0.01] (4d pav.). Taigi, nepaisant kainos, žiurkės pirmenybę teikė sacharinui, o ne kokainui.
Ankstesnėse eksperimentų serijose iš pradžių dalyvavo nevartojantys narkotikų asmenys, kurie anksčiau nebuvo vartoję kokaino. Norint nustatyti, ar narkotikų istorija daro įtaką pasirinkimui tarp sacharino ir kokaino, žiurkių pogrupis (N = 24), kurie S- / C + sąlygomis įgijo stabilų pirmenybę svertui C, vėliau buvo išbandyti S + / C + per 10 dienų. Nepaisant pradinio, stabilaus C svirties pirmenybės, žiurkės greitai pakeitė pirmenybę svirties S naudai, kai buvo apdovanoti abu svertai (5a pav.). Žiurkių, pasirinkusių svirtį C (ty vidutinis svertų C pasirinkimas per paskutines 3 dienas> 60%), dalis pakeitus pirmenybę, reikšmingai nesiskyrė nuo tų, kurios buvo užregistruotos anksčiau nevartojusių vaistų (8.3, palyginti su 2.3%, z <1.96 ). Be to, pirmenybė sacharinui atsirado net žiurkėms (N = 11), kurios ilgai vartojo kokainą (6 val. Per dieną, per 3 savaites). Šiame tyrime, nepaisant 3 savaites ilgesnės galimybės savarankiškai vartoti kokainą ir didėjant kokaino vartojimui [nuo 7.34 ± 2.50 iki 26.04 ± 1.21 mg per parą; F (16,160) = 15.98, P <0.01], žiurkės greitai įgijo stiprią ir stabilią svirties S pirmenybę, palyginti su svirtimi C (5b pav.). Žiurkių, turinčių ilgalaikę prieigą prie kokaino, dalis, pasirinkusi C svirtį po 10 dienų pasirinkimo, nesiskyrė nuo užregistruotų iš pradžių nevartojusių žiurkių (0.0 prieš 2.3%, z <1.96). Nepaisant šiek tiek sumažėjusio svirties S, vartojant didžiausią dozę, pirmenybė svirties S naudojimui žiurkėms, kurioms prieš tai buvo ilgai vartojamas kokainas, nebuvo įveikiama didinant kokaino dozes (5b pav., Intarpas). Galiausiai pirmenybė svirčiai S buvo tokia stipri, kad pasirinkimo metu ji atsirado ir žiurkėms, veikiamoms kokaino (N = 10). Šio eksperimento metu žiurkėms 3 valandas per dieną buvo nuolat prieinama tik svirtis C. Įsigiję svirties paspaudimą (> 20 atsakymų per seansą), jie buvo išbandyti modifikuota diskretiško pasirinkimo procedūra, kurią sudarė nepertraukiama prieiga tik prie svirties C 1 valandą, po to atlikta 8 atskiro pasirinkimo bandymai S + / C + sąlygomis. Nors žiurkės kiekvieną dieną ant C svirties reagavo į kokaino vartojimą per valandą prieš pasirinkimą (5c pav.), Vis dėlto jos greitai įgijo tvirtą pirmenybę S svirtelei (5d pav.). Kaip parodyta 3 tipiškiems asmenims, pasirinkimo metu įvyko staigus elgesio poslinkis nuo svirties C iki svirties S (5e pav.).
Diskusija
Praktiškai visos žiurkės pirmenybę teikė sacharinui, o ne intraveniniam kokainui, kuris sukelia didelę priklausomybę. Sakharino teikiama pirmenybė nepriskiriama jo nenatūraliam sugebėjimui sukelti saldumą be vėlesnės kalorijų sąnaudos, nes tokia pati pirmenybė buvo stebima ir ekvipotencinėje sacharozės - natūralaus cukraus - koncentracijoje. Svarbu tai, kad saldaus sacharino skonio pasirinkimas nebuvo panaikinamas didinant kokaino dozes ir buvo stebimas nepaisant intoksikacijos kokainu, sensibilizacijos ar padidėjusio suvartojimo - pastarieji yra priklausomybės nuo narkotikų požymis [22], [34].
Be to, keliais atvejais pirmenybė sacharinui pasireiškė žiurkėms, kurioms iš pradžių pasireiškė pirmenybė svertui, už kurį skiriama kokainas.
Tokie pirmenybių pakeitimai aiškiai parodo, kad mūsų aplinkoje gyvūnai nėra įsitvirtinę pradinėse nuostatose ir gali juos pakeisti atsižvelgiant į naujus atlygio atvejus. Galiausiai, sacharinas buvo išlaikytas atsižvelgiant į didėjančią atlygio kainą ar sąnaudas, o tai rodo, kad žiurkės ne tik teikė pirmenybę sacharinui, o ne kokainui („patinka“), tačiau jos taip pat labiau norėjo dirbti už jį, o ne dėl kokaino („nori“). ). Apskritai šios išvados praplečia ankstesnius tyrimus [31], [32], parodydamos, kad intensyvus saldumo pojūtis pranoksta maksimalų kokaino stimuliavimą, net ir narkotikų jautrumo ir priklausomybės vartotojams. Absoliučiai teikiant pirmenybę skonio saldumui, gali prireikti pakeisti priklausomybės dirgiklių hierarchiją, kai saldintos dietos (ty turinčios natūralaus cukraus ar dirbtinių saldiklių) turi viršenybę prieš kokainą ir galbūt kitus narkotikus.
Nors sacharinas buvo labai ryškus, S + / C + sąlygomis jis nebuvo išskirtinis. Vidutiniškai žiurkės pasirenka svirtį C maždaug 15.6% atvejų (diapazonas tarp eksperimentų: nuo 7 iki 23%), kurios kartu su mėginių ėmimo dozėmis sudaro bendrą 3 į veną leidžiamo kokaino dozę per dieną. Šis kokaino savaiminis vartojimas per parą yra labai mažas, palyginti su tuo, ką žiurkės savarankiškai suleis per tą patį laiką (ty, apie 30 dozes). Įdomu tai, kad šio labai mažo kokaino kiekio vis dėlto pakako greitai ir stipriai sensibilizuoti narkotikus (žr. Toliau). Tiesą sakant, net esant S + / C būklei, žiurkės kartais reagavo į svirtį C (8.3% laiko), kuriai kokainas nebuvo atlygintas už tokią būklę. Šis likęs reagavimo į svirtį C lygis nestebina ir jį prognozuoja atitikimo įstatymas, kuriame nurodomas gerai dokumentuotas gyvūnų ar žmonių polinkis paskirstyti savo elgesį proporcingai galimų galimybių atlygio vertei [39]. Šis aiškinimas rodo, kad net ir esant S + / C būklei, reagavimas į svirtį C turi tam tikrą, nors ir palyginti silpną, atlygio vertę. Šiame tyrime sverto C atlygio vertė esant S + / C būklei tikriausiai atsiranda dėl tam tikro dalinio dirgiklio apibendrinimo tarp svirties S ir svirties C, tuo tarpu S + / C + būklės atveju tai greičiausiai daugiausia lemia pats kokainas. Nepaisant šio likusio polinkio pasirinkti svirtį C, šis tyrimas vis dėlto aiškiai parodo, kad žiurkės dažniausiai renkasi svirtį S, kai ją apdovanoja skonio saldumas.
Iš pirmo žvilgsnio atradimą, kad stiprus saldumas pranoksta į veną leidžiamą kokainą, sunku suderinti su ankstesniais empiriniais ir teoriniais priklausomybės nuo kokaino tyrimais. Pirma, atrodo, kad mūsų išvados prieštarauja sėklinių beždžionių tyrimams, kurie rodo, kad didžioji dauguma asmenų renkasi dideles intraveninio kokaino dozes, o ne sausą maistą, nepaisant turimo maisto kiekio [40], [41] ir net nepaisant sunkaus svorio [42]. Tačiau daugumoje ankstesnių tyrimų, išskyrus vieną [43], maisto variante nebuvo arba buvo tik nedidelė saldžiųjų skanumynų koncentracija, ir tai tikriausiai paaiškina, kodėl jis buvo pamirštas už didelę kokaino dozę. Be to, tuose tyrimuose, kuriuose buvo naudojamos nestipriai saldintos maisto granulės [41], pastangų, reikalingų norint gauti maisto variantą, reikėjo dešimt kartų daugiau nei norint gauti kokaino, taigi buvo teikiama pirmenybė narkotikų pasirinkimui. Tačiau vieno pasirinkimo tyrime visos beždžionės, ceteris paribus, aiškiai pirmenybę teikė didžiausiai kokaino dozei, palyginti su 1-g sacharozės granulėmis [43]. Pastarojo ir šio tyrimo neatitikimas gali leisti teigti, kad saldinti gėrimai yra labiau naudingi nei saldinti sausi maisto produktai (kurie, be atlygio, gali sukelti troškulį), ir (arba) kad vieno 1-g sacharozės nuosėdų nepakanka apdovanojimas už didžiausią kokaino dozę. Galiausiai negalima atmesti galimybės, kad šis neatitikimas gali atspindėti ir specifinį atotrūkį tarp graužikų ir primatų, nes pastarieji hipotetiškai yra labiau linkę į atlygį už kokainą nei pirmieji. Ateities tyrimai reikalingi norint atskirti šias skirtingas hipotezes. Nepaisant to, šis tyrimas aiškiai parodo žiurkėms - gyvūnų rūšims, kurios savarankiškai vartoja kokainą ir kurioms pasireiškia daugiausiai priklausomybės požymių, išplečiant ilgesnį narkotikų vartojimą [34] - [36] - kad kokaino atlygio vertė yra ribota ir ji nepralenkia skonio saldumo - jausmais grindžiamas atlygis.
Mūsų išvadas taip pat sunku numatyti remiantis dabartinėmis teorijomis apie priklausomybės nuo kokaino neurobiologiją. Nepaisant reikšmingų skirtumų, įtakingiausios priklausomybės nuo kokaino teorijos (įskaitant naujausius neurokomutacinius modelius [44], [45]) teigia, kad kokainas iš pradžių sukelia priklausomybę tiesiogiai ir supranormaliai stimuliuodamas dopamino signalizaciją veniniame striatyje [15], [22], [46] - [49]. Pakartotinis supranormalus aktyvinimas pakartotinai vartojant kokainą padidins kokaino vertę, palyginti su kitomis dovanomis, neatsižvelgiant į jo pradinę vertę, todėl sprendimų priėmimo procesas bus nukreiptas į per didelį kokaino pasirinkimą. Ši prognozė, matyt, prieštarauja dabartiniam tyrimui. Meteorologinė literatūros analizė (žr. Medžiaga ir metodai) parodė, kad į veną leidžiamas kokainas buvo daug stipresnis nei sacharozės ar sacharino vartojimas, sukeliant dopamino lygį venų žandikaulyje (6 pav.). Nepaisant žymiai didesnės neurocheminės galios, vis dėlto mes nustatėme, kad kokaino atlygis yra mažesnis nei saldus. Be to, pirmenybė sacharinui vystėsi nepaisant greito ir stipraus jautrumo kokaino stimuliuojančiam poveikiui - tai gerai dokumentais patvirtintas elgesio reiškinys, susijęs su ilgalaikiais striatos dopamino signalizacijos pokyčiais [46], [47]. Taigi kokaino gebėjimas tiesiogiai padidinti vidurinės smegenų dopamino neuronus ir ilgam laikui juos sujaudinti nėra akivaizdus, kad kokainas taptų nenugalimas. Ši išvada gali kažkaip pakeisti tam tikras pagrindines prielaidas, kuriomis grindžiami dabartiniai neurobiologiniai priklausomybės nuo kokaino modeliai.
Pirma, mūsų tyrimas gali leisti manyti, kad nors daug mažiau veiksmingas indukuojant presinapsinius dopamino kiekius vidurinėje žarnoje, saldžiųjų gėrimų vartojimas vis dėlto gali generuoti bendrą postsinapsinį dopamino signalą, intensyvesnį nei kokainas. Kokaino sukeltas supranormalus dopamino lygio postsinapsinis poveikis iš tikrųjų greičiausiai yra ribojamas trumpalaikio receptorių nejautrumo ir (arba) tarpląstelinių ar tarpląstelinių priešininkų procesų [15], [22]. Taigi absoliutus strijato dopamino lygis, reaguojant į įvairius apdovanojimus, gali tiksliai nenuspėti jų priklausomybės. Ateityje, norint patikrinti šią hipotezę, prireiks daugiau tiesioginių postinapsinio dopamino signalizacijos priemonių. Kaip alternatyva, absoliutus saldaus saldumo pasirinkimas taip pat gali nurodyti, kad yra smegenų signalizacijos keliai, galingesni už mezostriatalinį dopamino kelią, kontroliuojant į atlygį orientuotą elgesį ir kad skonio saldumas suaktyvėja stipriau nei kokainas. Šiuo metu geriausi kandidatai šiai funkcijai atlikti yra striatos opioidiniai peptidai. Opioidinių peptidų striatinę genų raišką keičia per didelis saldinto vandens [50], [51] vartojimas, o ventralinių striatos opioidų receptorių, ypač mu receptorių, farmakologinis aktyvinimas padidina saldinto vandens [52], [53] suvartojimą ir skonį. Tačiau šiuo metu ne tokia aiški yra tai, ar striatinės opioidinės signalizacijos aktyvavimas gali nepaisyti signalų apie dopamino vartojimą kontroliuojant elgesį. Vienas iš būdų išspręsti šį klausimą būtų leisti žiurkėms pasirinkti kokainą ir manipuliavimą narkotikais, kurie selektyviai padidina striatos opioidų signalus. Bendresnis požiūris būtų smegenų vaizdavimo technologijų naudojimas ieškant regionų ar tinklų, kurie labiau reaguoja į skonio saldumą nei į veną leidžiamo kokaino. Galiausiai taip pat įmanoma, kad skonio saldumas pranoksta kokainą vien todėl, kad jis turi daugiau neigiamo šalutinio poveikio ir todėl yra labiau konfliktiškas ar prieštaringas nei buvęs [54]. Iš tiesų, ne tik suaktyvinantis signalą apie striatos dopamino signalus, kokainas taip pat suaktyvina smegenų streso kelius, pvz., Ypač hipotalaminį kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus kelius, kurie vaidina kritinį vaidmenį baimėje ir nerime [55]. Kartu suaktyvinęs smegenų streso kelius kokainas galėtų paaiškinti, kodėl iš pradžių negydyti žiurkės šiame tyrime labiau nesiryžo imti kokaino apdovanoto sverto nei sacharinu apdovanoto sverto. Be to, ambivalentiškas kokaino poveikis taip pat gali padėti paaiškinti, kodėl S + / C + būklės žiurkėms greičiau atsirado patikimas svirties S pasirinkimas nei S + / C būklės žiurkėms (2 diena, palyginti su 7 diena).
Kad ir kokie būtų mechanizmai, atradimas, kad stiprus saldumas turi viršenybę prieš kokainą, vieną iš labiausiai priklausomybę sukeliančių ir kenksmingų medžiagų, šiuo metu žinomą [33], rodo, kad labai saldinti gėrimai, tokie, kokie plačiai prieinami šiuolaikinėse žmonių visuomenėse, gali veikti kaip nenormalūs dirgikliai. [56]. Iš esmės supernormalus dirgiklis yra veiksmingesnis už natūraliai pasireiškiančius dirgiklius kontroliuojant elgesį, todėl gali nepaisyti įprasto elgesio (pvz., Tėvai-paukščiai-tėvai, pasidavę nepageidaujamo lizdo-gegutės supernormaliam elgesiui, kenkdami savo atžaloms [57] ). Saldaus skonio suvokimas priklauso nuo dviejų su baltymais sujungtų subvienetų receptorių: T1R2 ir T1R3 [1], [2]. Daugelyje žinduolių, įskaitant graužikus ir primatus, šie receptoriai išsivystė protėvių aplinkoje, kurioje trūksta cukraus, todėl jie nėra pritaikyti didelėms saldžiųjų skonių koncentracijai [1], [2]. Mes spėjame, kad supranormalus šių receptorių stimuliavimas labai saldintomis dietomis sukuria supranormalų atlygį, galintį nepaisyti homeostatinių ir savikontrolės mechanizmų ir tokiu būdu sukelti priklausomybę [58]. Galiausiai, šis tyrimas taip pat gali parodyti, kad dabartinis platus dietų, kuriose gausu cukraus, racionas šiuolaikinėje žmonių visuomenėje, gali sukelti netikėtą, nors ir labai brangų, skydą nuo tolesnio narkomanijos plitimo. Būsimi tyrimai su gyvūnais, auginamais praturtintoje cukrumi aplinkoje, kad būtų geriau suderinta šiuolaikinė žmogaus būklė, gali suteikti svarbių įkalčių šiam svarbiam klausimui spręsti.
Medžiagos ir metodai
Tematika
Šiame tyrime buvo naudojami naivūs, jauni suaugę žmonės (221 – 276 g), patinai, Wistar žiurkės (N = 132) (Charles River, Prancūzija). Žiurkės buvo laikomos grupėse po dvi ar tris ir buvo palaikomos šviesiame (12-h atvirkštiniame šviesos-tamsos cikle) ir kontroliuojamame temperatūros vivariume (22 ° C). Visi elgesio testai buvo atlikti tamsiuoju šviesos-tamsos ciklo etapu. Maistas ir vanduo buvo laisvai prieinami namų narvuose. Maistą sudarė standartinis žiurkių čiulpimas A04 (SAFE, Mokslinis gyvūnų maistas ir inžinerija, Augy, Prancūzija), kuriame buvo 60% angliavandenių (daugiausia kukurūzų krakmolo), 16% baltymų, 12% vandens, 5% mineralų, 3% riebalų ir 4% celiuliozės. Nebuvo pridėta jokio sintetinio ar rafinuoto cukraus. Visi eksperimentai buvo atlikti vadovaujantis instituciniais ir tarptautiniais laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo standartais [JK gyvūnų įstatymas (mokslinės procedūros), 1986; ir susijusios gairės; Europos Bendrijų Tarybos direktyva (86 / 609 / EEB, 24, lapkričio 1986) ir Prancūzijos direktyvos dėl laboratorinių gyvūnų naudojimo (décret 87-848, 19 spalio 1987)].
Aparatūra
Visiems elgesio mokymams ir testavimui buvo naudojama dvylika identiškų operacijų kamerų (30 × 40 × 36 cm) („Imétronic“, Prancūzija). Visos kameros buvo išdėstytos atokiau nuo kolonijos kambario, silpnai apšviestame kambaryje. Jie buvo atskirai uždaromi medinėse spintelėse su baltojo triukšmo garsiakalbiu (45 ± 6 dB) garso slopinimui ir oro ištraukimo ventiliatoriumi ventiliacijai. Kiekvienoje kameroje buvo nerūdijančio plieno tinklelio grindys, kurios leido atliekas rinkti išimamoje dėžutėje, kurioje buvo kukurūzų pjuvenos. Kiekvieną kamerą sudarė dvi nepermatomos veikiančios plokštės iš dešinės ir kairės pusės ir dvi skaidrios pleksiglas sienelės iš galinės ir priekinės pusės (priekinė pusė atitinka kameros įėjimą / išėjimą). Kiekviename operaciniame skydelyje buvo automatiškai ištraukiama svirtis, pritvirtinta prie vidurinės linijos ir 7 cm virš tinklelio. Kairiajame operatyviniame skydelyje taip pat buvo ištraukiamas cilindro formos geriamasis snapelis, 9.5 cm kairėje nuo svirties ir 6 cm virš tinklelio. Lickometro grandinė leido stebėti ir užregistruoti laižymą. Baltas šviesos diodas (1.2 cm OD) buvo sumontuotas 8.5 cm virš kiekvienos svirties (nuo diodo centro). Kiekvienoje kameroje taip pat buvo įrengti du švirkštų siurbliai, išdėstyti išorėje, ant kabinos viršaus. Vienas švirkšto siurblys buvo valdomas kairiąja svirtimi ir per silosinį vamzdelį (Dow Corning Corporation, Mičiganas, JAV) į geriamąjį snapelį tiekė vandens arba sacharino (arba sacharozės) tirpalo. Kitas siurblys buvo valdomas dešine svirtimi ir tiekiamas vaisto tirpalas per „Tygon“ vamzdelį (Cole Parmer), sujungtą per vienkanalį skysčio šarnyrą („Lomir“ biomedicinos inc., Kvebekas, Kanada) prie kaniulio jungties („Plastics One“, Roanoke, VA). ) ant gyvūno nugaros. „Tygon“ vamzdeliai buvo apsaugoti nerūdijančio plieno spyruokle (0.3 cm ID, 0.5 cm OD) (Aquitaine Ressort, Prancūzija), kuri kameros centre buvo pakabinta iš pasukamos pririšimo jungties. Gyvūno vertikalūs judesiai buvo kompensuoti naudojant atsvarą sveriantį skriemulį.
Chirurgija
Anestezuotos žiurkės (chloralinis hidratas, 500 mg / kg IP) (JT Baker, Nyderlandai) buvo paruoštos su silastic kateteriais (Dow Corning Corporation, Mičiganas, JAV) dešiniojo žandikaulio venoje, išeinančioje iš odos nugaros viduryje apie 2. cm žemiau kaukolės. Po operacijos kateteriai kasdien buvo praplaunami 0.15 ml sterilaus antibiotiko tirpalo, kuriame buvo heparinizuotas fiziologinis tirpalas (280 TV / ml) (Sanofi-Synthelabo, Prancūzija) ir ampicilinas (Panpharma, Prancūzija). Prireikus kateterio trapumas buvo patikrintas, įtraukus per kateterį 0.15 ml trumpo veikimo ne barbitūratų anestetiko etomidato (Braun Medical, Prancūzija). Elgesio tyrimas pradėtas 7 – 10 dienomis po operacijos.
Diskretinių bandymų pasirinkimas
Kiekvieną dieną žiurkėms buvo leista rinktis iš kokaino poros svirties (svirties C) ir sacharino poros svirtį (svirtis S), pasirinkus atskirą bandymą. Kokaino atlygis sudarė vieną iv dozę 0.25 mg, pristatytą 4 s. Ši dozė plačiai vartojama žiurkėms ir buvo naudojama visuose ankstesniuose savarankiško tyrimo [34], [35] tyrimuose. Sacharino atlygis sudarė 20 prieigą prie geriamojo snapelio, kuris davė atskirus natrio sacharino tirpalo kiekius (0.02 ml), esant beveik optimaliai 0.2% [59], [60] koncentracijai. Pirmieji 3 kiekiai buvo pristatyti laisvai per pirmąsias 3 s, kad būtų užpildytas geriamojo snapelis; vėlesni tūriai buvo gauti lyžiuojant (1 tūris viename 10 liežuvyje apie 1.4 s). Taigi 20 prieigos prie sacharino tirpalo metu galima gauti maksimalų 15 tūrį, atitinkantį 0.3 ml. Žiurkės išmoko gerti šią didžiausią sumą už prieigą per pirmą bandymo savaitę.
Kiekviena pasirinkimo sesija buvo sudaryta iš atskirų 12 bandymų, išdėstytų pagal 10 min, ir suskirstyta į dvi nuosekliąsias fazes, mėginių ėmimą (4 tyrimai) ir pasirinkimą (8 tyrimai). Mėginių ėmimo metu kiekvienas bandymas prasidėjo pateikiant vieną vieną svirtį šioje alternatyvioje eilutėje: C – S – C – S. Pirmas svirtis C buvo pateiktas siekiant išvengti galimo vaisto sukelto skonio ardymo arba neigiamo afektinio kontrasto poveikio. Jei žiurkės per 5 min. Reagavo į turimą svirtį, jos buvo apdovanotos atitinkamu atlygiu. Apdovanojimų pristatymas buvo signalizuotas svirties traukimu ir 40 šviestuvo apšvietimu virš šios svirties. Jei žiurkėms nepavyko reaguoti per 5 min., Svirtis atsitraukė ir nebuvo pristatyta nė viena šviesa ar atlygis. Taigi mėginių ėmimo metu žiurkėms buvo leista atskirai susieti kiekvieną svirtį su atitinkamu atlygiu (svirtis C su kokainu, svirtimi S su sacharinu) prieš pasirinkdami. Pasirinkimo metu kiekvienas bandymas prasidėjo tuo pačiu metu pristatant abi sviras S ir C. Rats turėjo pasirinkti vieną iš dviejų svertų. Pasirinkimo metu atlyginimas buvo perduotas abiejų svertų traukimu ir 40 šviesos diodų apšvietimu virš pasirinktos svirties. Jei žiurkėms nepavyko reaguoti į vieną rankeną per 5 min., Abi svirtys įsitraukė, be to, nebuvo perduodamas švyturėlis ar atlygis.
Svirties pirmenybės įsigijimas
Norint įvertinti, ar pirmenybė teikiama bet kuriam svirteliui, operantas anksčiau negydytas gyvūnas buvo išbandytas per 15 dienas iš eilės pagal 3 atlygio sąlygas, aprašytas pagrindiniame tekste (viena žiurkių grupė iš vienos būklės). Pagal kiekvieną atlygio sąlygą kiekvieno atlygio atsakymo reikalavimas iš pradžių buvo nustatytas kaip atsakas į 1 (pirmosios 10 dienos) ir po to padidėjo iki 2 nuoseklių atsakų, kad būtų išvengta atsitiktinio pasirinkimo (likusi diena). Kai atsakymo reikalavimas buvo 2, atsakymas į bet kurią rankenėlę nustatė atsakymo reikalavimą ant kitos svirties. Atsakymo nustatymas iš naujo įvyko labai retai.
Kokaino poveikis judėjimui
Kiekviena savitarnos kamera taip pat buvo įrengta dviem infraraudonųjų spindulių poromis 2 cm virš tinklelio grindų (Imétronic, Prancūzija). Abi poros kerta kamerą per savo ilgio ašį ir buvo atskirtos viena nuo kitos 16 cm, o dešinėje arba kairėje - 12 cm. Ši vieta leido suskaičiuoti gyvūno horizontalių poslinkių skaičių eiti į ir atgal tarp dviejų ilgio ašies galų (narvelių pervažos).
Kokaino dozių poveikis pasirenkant
Po elgsenos stabilizavimo pagal S + / C + būklę (didėjančios ar mažėjančios tendencijos per 3 iš eilės einančių dienų), žiurkių pogrupis (N = 11) buvo tiriamas su didėjančiomis iv kokaino dozėmis (0.25, 0.75 ir 1.5 mg). Kiekviena dozė buvo gauta didinant vaisto koncentraciją ir buvo tiekiama į veną per 4 s. Nepertraukiamo kokaino savarankiško vartojimo metu spontaniškas intervalas tarp injekcijų, atspindintis kokaino poveikio trukmę, didėja netiesiogiai su turima vienetine doze. Esant mūsų sąlygoms, 4.3, 10.7 ir 17.4 mg vidutinis injekcijų intervalas buvo vidutiniškai 0.25, 0.75 ir 1.5 min. [61]. Taigi, norint išlaikyti tokias pačias pasirinkimo sąlygas per dozes (ty tą patį vėlavimą tarp vaisto poveikio pabaigos ir kito pasirinkimo) ir išvengti vaistų kaupimosi, tarpinis tyrimas buvo padidintas vartojant dozę: 10 (4.3 + 5.7), 16.4 (10.7 + 5.7) ir 23.1 (17.4 + 5.7) min., Atitinkamai 0.25, 0.75 ir 1.5 mg. Kiekviena dozė veikė mažiausiai 5 dienas iš eilės. Vidutinė elgsena kiekvienoje dozėje buvo laikoma stabili, kai 3 iš eilės nepadidėjo ar mažėjo tendencijos.
Kokaino atsiradimo vėlavimo įvertinimas
Nors intraveninis vartojimo būdas leidžia greitai veikti vaistus, vis dėlto tarp atsako ir vaisto poveikio atsiradimo atsiranda trumpas ir nesudėtingas vėlavimas. Šis vėlavimas buvo apskaičiuotas pagal laiką, kai pirmą kartą pastebėta elgesio reakcija į kokainą prasidėjo po vaisto pristatymo. Kiekvienas žiurkė reaguoja į IV kokainą labai būdingais būdais: jis františkai eina aplink narvą, greitai valydamas vibraciją su priekinėmis atramomis, galva ir kaklas nuleidžiami į grindis (Ahmed, nepublikuoti stebėjimai). Šis stebėjimas buvo atliktas žiurkių pogrupyje (N = 12) prieš ir po bandymo pagal S + / C + būklę. Abiem atvejais vidutinis kokaino vartojimo pradžios delsimas buvo 6.2 ± 0.2 s.
Sacharino atlyginimų vėlavimo poveikis pasirinkimui
Po elgesio stabilizavimo pagal S + / C + būklę (didėjančios ar mažėjančios tendencijos per 3 dienas iš eilės), buvo tiriamas žiurkių pogrupis (N = 11), didėjantis vėlavimas tarp elgesio ir sacharino tiekimo (0, 6, 12 ir 18 s) . 6 uždelsimas atitinka kokaino poveikio pradžią, matuojant tiesioginiu stebėjimu (žr. Toliau). Kiekvienas vėlavimas galiojo mažiausiai 5 dienas iš eilės. Vidutinė elgsena kiekvienu uždelsimu buvo laikoma stabilia, kai 3 iš eilės nebuvo didėjančių ar mažinančių tendencijų.
Atlyginimo kainos poveikis pasirinkimui
Po elgesio stabilizavimo pagal S + / C + būklę (ne didėjančios ar mažėjančios tendencijos per 3 iš eilės einančias dienas), žiurkių pogrupis (N = 10) buvo išbandytas didinant atlygio kainas arba reagavimo reikalavimus (2, 4 ir 8 nuoseklūs atsakymai). Kiekvienas atsakymo reikalavimas buvo išbandytas mažiausiai 5 dienas iš eilės. Kiekvieno reikalavimo atveju atsakymas į bet kurią svirti iš naujo nustato kito sverto atsako reikalavimą. Vidutinė elgsena kiekvienai kainai buvo laikoma stabili, kai 3 iš eilės nebuvo didėjančių ar mažėjančių tendencijų.
Kokaino vartojimo didėjimas
Žiurkėms (N = 11) buvo suteikta ilgesnė prieiga prie kokaino savarankiško vartojimo (ty 6 h per dieną 18 dienų metu) prieš leidžiant rinktis tarp kokaino ir sacharino. Kasdienė prieiga prie kokaino priklausė nuo fiksuoto santykio laiko tarpo 40s tvarkaraščio, ty fiksuoto atsakymų skaičiaus (žr. Toliau) reikėjo norint gauti vieneto dozę su mažiausiu 40 dozių intervalu. Vienos kokaino dozės buvo 0.25 mg per pirmą valandą ir 0.75 mg per paskutines 5 valandas. Vienos kokaino dozės padidėjimas per paskutines 5 valandas buvo skirtas pagreitinti ir sustiprinti kokaino vartojimą. Pradinis atsako poreikis buvo nustatytas 1 atsako / dozės (pirmųjų 14 dienų) metu ir po to padidėjo iki 2 atsako / dozės (likusių dienų). Dieną po kokaino vartojimo didėjimo žiurkėms buvo leista pasirinkti iš kokaino ir sacharino per 10 iš eilės einančias dienas diskrečių tyrimų metodu, aprašytu aukščiau (S + / C + būklė).
Pasirinkimas kokaino apsinuodijimo metu
Žiurkės (N = 10) pirmą kartą buvo apmokytos 3 savaitės metu vartoti 1 kokaino valandas per parą, taikant fiksuoto santykio grafiką, o 40 laikas buvo nutrauktas. Pradinis atsako poreikis buvo nustatytas 1 atsako / dozės (pirmųjų 3 dienų) metu ir po to padidėjo iki 2 atsako / dozės (likusių dienų). Tada žiurkės buvo išbandytos taikant pakeistą diskretinių tyrimų metodą. Pradinės procedūros mėginių ėmimo laikotarpis buvo pakeistas 1-h nepertraukiama prieiga prie vien tik C svorio, kurio metu žiurkės galėjo gauti kokainą pagal fiksuoto santykio 2 laiko tarpą 40. Išskyrus tai, naujoji procedūra buvo identiška originalui (aprašyta pagrindiniame tekste). Taigi, kiekvieną dieną žiurkės patyrė kokaino (ty kokaino apsinuodijimo) įtaką prieš 8 pasirinkimą tarp svirties S ir svirties C (S + / C + būklė).
Meta analizė: sacharozės, sacharino ar kokaino vartojimo poveikis striatalo dopamino lygiui
Buvo atlikta „Medline“ paieška, naudojant šiuos raktinius žodžius: žiurkė, kokainas, sacharinas, sacharozė, savarankiškas vartojimas, dopaminas, mikrodialisė, striatumas, akumbenas. Gauti straipsniai buvo patikrinti ir surūšiuoti pagal turinį ir aktualumą. Pabaigoje iš viso buvo saugomi 18 dokumentai [62] - [79]. Kiekvienu atveju buvo įvertintas sacharozės, sacharino ar kokaino vartojimo poveikis ekstraląsteliniams dopamino kiekiams ventralinėje stiatumoje.
Narkotikai
Kokaino hidrochloridas (Coopération Pharmaceutique Française, Prancūzija) ištirpintas 250 ml arba 500 ml steriliuose 0.9% NaCl maišeliuose ir laikomas kambario temperatūroje (21 ± 2 ° C). Vaistų dozės buvo išreikštos druskos svoriu. Natrio sacharinas (Sigma-Aldrich, Prancūzija) buvo ištirpintas vandentiekio vandenyje kambario temperatūroje (21 ± 2 ° C). Sacharino tirpalas buvo atnaujinamas kiekvieną dieną.
Duomenų analizė
Kad būtų patogiau, abejingumo lygis tarp svirties S ir svirties C buvo nustatytas į 0. Vertės, viršijančios 0, rodė, kad pirmenybė teikiama svirčiai S (t. Y. Svirties S pasirinkimas> 50% visų pasirinktų bandymų), o reikšmės, esančios žemiau 0, rodė, kad pirmenybė teikiama svirčiai C (ty svirties C pasirinkimas> 50% atliktų bandymų). Kai kurios žiurkės turėjo būti neįtrauktos į tyrimą, nes joms nepavyko įgyti operantų elgesio (ty 20 iš 132 žiurkių, kurių 16 buvo S- / C + būklėje ir 4 S + / C + būklėje). Konkrečiai, šios žiurkės po 50 dienų bandymų atliko mažiau nei 8% iš 15 kasdienių pasirinkimo bandymų, o pasirinkimas buvo per mažas, kad būtų galima patikimai įvertinti jų pageidavimus. Statistinės analizės buvo atliktos naudojant „Statistica“ 7.1 versiją („Statsoft“, Prancūzija).
Padėka
Dėkojame Anne Fayoux ir Stephane Lelgouach už gyvūnų priežiūrą, Pierre Gonzalez už techninę pagalbą, Marie-Hélène Bruyères už administracinę pagalbą, Caroline Vouillac už logistinę pagalbą, Christian Darrack už pagalbą duomenų išgavimo srityje, Alain Labarriere už namų išlaikymą, ir galiausiai, dr Martine Cador už laboratorijų valdymą. Taip pat dėkojame Dr. Steve Negusui už jo pasiūlymą išbandyti kokaino pasirinkimą kaip atlygio kainos funkciją, dr. Sallouha Aidoudi už jos pastabas dėl ankstesnės rankraščio versijos ir recenzentų už jų konstruktyvią kritiką ir pasiūlymus.
Autoriaus įnašai
Suprojektuoti ir suprojektuoti eksperimentai: SA. Atlikti eksperimentai: ML FS LC. Analizuojami duomenys: SA ML FS. Parašė popierių: SA. Kita: padėjo projektuoti eksperimentus: ML. Pateiktos kritinės pastabos ir pateiktos medžiagos popieriui: ML LC FS.
Nuorodos
1. Chandrashekar J, Hoon MA, Ryba NJ, Zuker CS. (2006) Žinduolių skonio receptoriai ir ląstelės. Gamta 444: 288 – 94. Raskite šį straipsnį internete
2. Scott K. (2005) Skonio pripažinimas: mąstymas. Neuronas 48: 455 – 64. Raskite šį straipsnį internete
3. Steiner JE. (1979) Žmogaus veido išraiškos reaguojant į skonį ir kvapą. Adv Vaiko Dev Behav 13: 257 – 95. Raskite šį straipsnį internete
4. Drewnowski A. (1997) Skonio ir maisto suvartojimas. Annu Rev Nutr 17: 237 – 53. Raskite šį straipsnį internete
5. Berridge KC. (1996) Maisto atlygis: smegenų substratai, kurie nori ir patinka. Neurosci Biobehav Rev 20: 1 – 25. Raskite šį straipsnį internete
6. Sclafani A. (2004) Oraliniai ir postoraliniai maisto atlygio veiksniai. Physiol Behav 81: 773 – 9. Raskite šį straipsnį internete
7. Mintz SW (1985) Londonas: „Penguin Books“. Saldumas ir galia: cukraus vieta šiuolaikinėje istorijoje. 274 p.
8. Popkinas BM, Nielsenas SJ. (2003) Pasaulio dietos saldinimas. Obes Res 11: 1325–32. Raskite šį straipsnį internete
9. Pelchat ML. (2002) Žmogaus vergija: maisto troškimas, manija, prievarta ir priklausomybė. Physiol Behav 76: 347 – 52. Raskite šį straipsnį internete
10. Blundell JE, Gillett A. (2001) Maisto suvartojimo kontrolė nutukusiems. Obes Res 4: 263S – 270S. Raskite šį straipsnį internete
11. Berthoud HR. (2004) Protas prieš medžiagų apykaitą, kontroliuojant maisto suvartojimą ir energijos balansą. Physiol Behav 81: 781 – 93. Raskite šį straipsnį internete
12. Hill JO, Peters JC. (1998) Aplinkosaugos indėlis į nutukimo epidemiją. Mokslas 280: 1371 – 4. Raskite šį straipsnį internete
13. Ulijaszek SJ, Lofink H. (2006) Biokultūrinės perspektyvos nutukimas. Annu Rev Anthropol 35: 337 – 60. Raskite šį straipsnį internete
14. Malik VS, Schulze MB, Hu FB. (2006) Cukraus saldintų gėrimų suvartojimas ir svorio padidėjimas: sisteminė peržiūra. Aš J Clin Nutr 84: 274 – 88. Raskite šį straipsnį internete
15. Volkow ND, Wise RA. (2005) Kaip narkomanija gali padėti mums suprasti nutukimą? Nat Neurosci 8: 555 – 60. Raskite šį straipsnį internete
16. Kelley AE. (2004) Atmintis ir priklausomybė: bendri neuronų grandinės ir molekuliniai mechanizmai. Neuronas 44: 161 – 79. Raskite šį straipsnį internete
17. Levine AS, Kotz CM, Gosnell BA. (2003) Cukrus: hedoniniai aspektai, neuroreguliavimas ir energijos balansas. Aš J Clin Nutr 78: 834S – 842S. Raskite šį straipsnį internete
18. Hajnal A, Smith GP, Norgren R. (2004) Oralinis sacharozės stimuliavimas padidina žiurkių dopamino kiekį. Aš J Physiol Regul Integr Comp Physiol 286: R31 – 7. Raskite šį straipsnį internete
19. Mark GP, Blander DS, Hoebel BG. (1991) Po besimokančio skonio vengimo išsivystymo stimuliuojantis stimuliatorius sumažina ekstraląstelinį dopaminą branduolyje accumbens. Brain Res 551: 308 – 10. Raskite šį straipsnį internete
20. Di Chiara G, Imperato A. (1988) Žmonės, kurie piktnaudžiauja žmonėmis, dažniausiai didina sinaptines dopamino koncentracijas laisvai judančių žiurkių mesolimbinėje sistemoje. Proc Natl Acad Sci JAV 85: 5274 – 8. Raskite šį straipsnį internete
21. Pontieri FE, Tanda G, Orzi F, Di Chiara G. (1996) Nikotino poveikis branduoliui accumbens ir panašumas į priklausomybę sukeliančių vaistų poveikį. Gamta 382: 255 – 7. Raskite šį straipsnį internete
22. Koob GF, Le Moal M. (2006) priklausomybės neurobiologija. San Diego: Akademinė spauda. 490 p. Raskite šį straipsnį internete
23. Išminčius RA. (2004) Dopaminas, mokymasis ir motyvacija. Nat Rev Neurosci 5: 483 – 94. Raskite šį straipsnį internete
24. Lieblich I, Cohen E, Ganchrow JR, Blass EM, Bergmann F. (1983) Morfino tolerancija genetiškai atrinktoms žiurkėms, sukeltoms chroniškai padidėjusio sacharino suvartojimo. Mokslas 221 871 – 3. Raskite šį straipsnį internete
25. d'Anci KE, Kanarek RB, Marks-Kaufman R. (1996) Sacharozės trukmė skirtingai keičia morfino sukeltą analgeziją žiurkėms. Pharmacol Biochem Behav 54: 693–7. Raskite šį straipsnį internete
26. Rudski JM, Billington CJ, Levine AS. (1997) Sacharozės palaikymo dieta padidina jautrumą apetito slopinančiam naloksono poveikiui. Pharmacol Biochem Behav 58: 679 – 82. Raskite šį straipsnį internete
27. Kanarekas RB, Mathes WF, Heisler LK, Lima RP, Monfared LS. (1997) Išankstinis skanių tirpalų poveikis padidina naltreksono poveikį maistui žiurkėms. Pharmacol Biochem Behav 57: 377 – 81. Raskite šį straipsnį internete
28. Colantuoni C, Rada P, McCarthy J, Patten C, Avena NM, et al. (2004) Įrodymai, kad pertrūkis, per didelis cukraus vartojimas sukelia endogeninę priklausomybę nuo opioidų. Obes Res 10: 478 – 88. Raskite šį straipsnį internete
29. Wang GJ, Volkow ND, Thanos PK, Fowler JS. (2004) Nutukimo ir narkomanijos panašumas, įvertintas neurofunkciniu vaizdavimu: koncepcijos peržiūra. J Addict Dis 23: 39 – 53. Raskite šį straipsnį internete
30. Wang GJ, Yang J, Volkow ND, Telang F, Ma Y, et al. (2006) Skrandžio stimuliacija nutukusiems asmenims aktyvina hipokampą ir kitus regionus, dalyvaujančius smegenų apdovanojimo grandinėje. Proc Natl Acad Sci JAV 103: 15641 – 5. Raskite šį straipsnį internete
31. Carroll ME, Lac ST, Nygaard SL. (1989) Tuo pačiu metu prieinamas nondrug sustiprintojas užkerta kelią kokaino sustiprinto elgesio įgijimui arba sumažina jo palaikymą. Psichofarmakologija 97: 23 – 9. Raskite šį straipsnį internete
32. Carroll ME, Lac ST. (1993) Automatinis IV kokaino savarankiško vartojimo žiurkėms formavimas. Psichofarmakologija 110: 5 – 12. Raskite šį straipsnį internete
33. Nutt D, King LA, Saulsbury W, Blakemore C. (2007) Racionalaus masto kūrimas, siekiant įvertinti galimą piktnaudžiavimą narkotikais. Lancet 369: 1047 – 1053. Raskite šį straipsnį internete
34. Ahmed SH, Koob GF. (1998) Perėjimas nuo vidutinio iki pernelyg didelio narkotikų vartojimo: pokyčiai hedoniniame taške. Mokslas 282: 298 – 300. Raskite šį straipsnį internete
35. Ahmed SH, Kenny PJ, Koob GF, Markou A. (2002) Neurobiologiniai hedoninio allostazės įrodymai, susiję su didėjančiu kokaino vartojimu. Nat Neurosci 5: 625 – 6. Raskite šį straipsnį internete
36. Vanderschuren LJ, Everitt BJ. (2004) Po ilgalaikio kokaino savarankiško vartojimo vaistų ieškojimas tampa kompulsinis. Mokslas 305: 1017 – 9. Raskite šį straipsnį internete
37. Mateo Y, Budygin EA, Morgan D, Roberts DC, Jones SR. (2004) Greitas dopamino įsisavinimo slopinimas intraveniniu kokainu. Eur J Neurosci 20: 2838 – 42. Raskite šį straipsnį internete
38. Williams KL, Woods JH. (2000) Kartu veikiančio etanolio ir vandens sustiprinto atsako elgesio ekonominė analizė įvairiomis sąlygomis. Alkoholio klinika Exp Res 24: 980 – 6. Raskite šį straipsnį internete
39. Herrnstein RJ. (1970) Dėl poveikio įstatymo. J Exp Anal Behav 13: 243 – 266. Raskite šį straipsnį internete
40. Nader MA, Woolverton WL. (1991) Poveikis, padidinantis alternatyvos stiprinimo poveikį vaistų pasirinkimui diskretiškų tyrimų metu. Psichofarmakologija 105: 169 – 74. Raskite šį straipsnį internete
41. Negus SS. (2003) Greitas pasirinkimas tarp kokaino ir maisto rhesuso beždžionėse: aplinkos manipuliacijos ir gydymo d-amfetaminu ir flupentiksolu poveikis. Neuropsichofarmakologija 28: 919 – 31. Raskite šį straipsnį internete
42. Aigner TG, Balster RL. (1978) Rezuso beždžionių pasirinkimas: kokainas, palyginti su maistu. Mokslas 201: 534 – 5. Raskite šį straipsnį internete
43. Woolverton WL, Balster RL. (1979) Ličio poveikis kokaino ir maisto pasirinkimui reeso beždžionėje. „Commun Psychopharmacol 3“: 309 – 18. Raskite šį straipsnį internete
44. Redish AD. (2004) Priklausomybė, kaip skaičiavimo procesas dingo. Mokslas 306: 1944 – 7. Raskite šį straipsnį internete
45. Montague PR, Hyman SE, Cohen JD. (2004) Kompiuterinis dopamino vaidmuo elgsenos kontrolėje. Gamta 431: 760 – 7. Raskite šį straipsnį internete
46. Robinson TE, Berridge KC. (2003) priklausomybė. Annu Rev Psychol 54: 25 – 53. Raskite šį straipsnį internete
47. Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ. (2006) Neuriniai priklausomybės mechanizmai: su mokymu ir atmintimi susijęs atlygis. Annu Rev Neurosci 29: 565 – 98. Raskite šį straipsnį internete
48. Robbins TW, Everitt BJ. (1999) Narkomanija: pridedami blogi įpročiai. Gamta 398: 567 – 70. Raskite šį straipsnį internete
49. Di Chiara G. (1999) Narkomanijos priklausomybė nuo priklausomybės nuo dopamino priklausomybės. Eur J Pharmacol 375: 13 – 30. Raskite šį straipsnį internete
50. Kelley AE, Will MJ, Steininger TL, Zhang M, Haber SN. (2004) Ribotai vartojamas labai skanus maistas (šokoladas „Assure“ (R)) keičia striatalo enkefalino genų ekspresiją. Eur J Neurosci 18: 2592 – 8. Raskite šį straipsnį internete
51. Spangler R, Wittkowski KM, Goddard NL, Avena NM, Hoebel BG, Leibowitz SF. (2004) Cukraus opiatų tipo poveikis genų ekspresijai žiurkių smegenų atlyginimų zonose. Brain Res Mol Brain Res 124: 134 – 42. Raskite šį straipsnį internete
52. Kelley AE, Bakshi VP, Haber SN, Steininger TL, Will MJ, Zhang M. (2002) Skonio hedonikų opioidinis moduliavimas ventralinėje stiatumoje. Physiol Behav 76: 365 – 77. Raskite šį straipsnį internete
53. Pecina S, Smith KS, Berridge KC. (2006) Hedoninės karštosios dėmės smegenyse. Neurologas 12: 500 – 11. Raskite šį straipsnį internete
54. Ettenberg A, Geist TD. (1991) Gyvūnų modelis, skirtas savarankiškai vartojamo kokaino anxiogeniniam poveikiui tirti. Psichofarmakologija 103: 455 – 61. Raskite šį straipsnį internete
55. Koob GF. (1999) Stresas, kortikotropino išskyrimo faktorius ir priklausomybė nuo narkotikų. Ann NY Acad Sci 897: 27 – 45. Raskite šį straipsnį internete
56. Tinbergen N (1951) Niujorkas: „Oxford University Press“. Instinkto tyrimas.
57. Kilner RM, Noble DG, Davies NB. (1999) Reikalavimai, susiję su tėvų ir palikuonių bendravimu ir jų panaudojimu bendrame gegle. Gamta 397: 667 – 72. Raskite šį straipsnį internete
58. Williams GC (1966) Prinstonas: Princeton University Press. Adaptacija ir natūrali atranka. 307 p.
59. Collier G, Novell K. (1967) Sacharinas kaip cukraus pakaitalas. J Comp Physiol Psychol 64: 401 – 8. Raskite šį straipsnį internete
60. Smith JC, Sclafani A. (2004) Sacharinas kaip cukraus pakaitalas. Apetitas 38: 155 – 60. Raskite šį straipsnį internete
61. Zittel-Lazarini A, Cador M, Ahmed SH. (2007) Kritinis perėjimas į kokaino savęs administravimą: elgesio ir neurobiologinės pasekmės. Psichofarmakologija 192: 337 – 46. Raskite šį straipsnį internete
62. Avena NM, Rada P, Moise N, Hoebel BG. (2006) Sacharozės šlamšto vartojimas per didelę dozę atpalaiduoja dopaminą ir pašalina acetilcholino sotumo reakciją. Neurosci 139: 813 – 820. Raskite šį straipsnį internete
63. Di Ciano P, Coury A, Depoortere RY, Egilmez Y, Lane JD, Emmett-Oglesby MW, Lepiane FG, Phillips AG, Blaha CD. (1995) Ekstraceliulinės dopamino koncentracijos pokyčių branduolyje accumbens palyginimas su kokaino ar d-amfetamino savarankišku intraveniniu vartojimu. Behav Pharmacol 6: 311 – 322. Raskite šį straipsnį internete
64. Doyon WM, Ramachandra V, Samsonas HH, Czachowski CL, Gonzales RA. (2004) Dumbamino koncentracija, sukaupta sacharozės arba naujų sacharozės su etanolio tirpalu metu. Alkoholis 34: 361 – 371. Raskite šį straipsnį internete
65. Hajnal A. Asmeninis bendravimas su Serge Ahmed Rasti šį straipsnį internete
66. Hajnal A, Norgren R. (2001) Dumbamino mechanizmai sacharozės suvartojimui. Brain Res 904: 76 – 84. Raskite šį straipsnį internete
67. Hajnal A, Norgren R. (2002) Pakartotinė prieiga prie sacharozės padidina dopamino apyvartą branduolyje accumbens. Neuroreportas 13: 2213 – 2216. Raskite šį straipsnį internete
68. Hajnal A, Smith GP, Norgren R. (2004) Oralinis sacharozė padidina žiurkių dopamino kiekį. Amerikos fiziologijos žurnalas. Reguliavimo, integracinė ir lyginamoji fiziologija 286: R31 – R37. Raskite šį straipsnį internete
69. Hemby SE, Co C, Dworkin SI, Smith JE. (1999) Sinergiškai padidėjęs branduolio kiekis padidina ekstraląstelinių dopamino koncentraciją, kai patenka į kokaino / heroino derinius (sparčiai) žiurkėms. J Pharmacol Exp Therap 288: 274 – 280. Raskite šį straipsnį internete
70. Hemby SE, Co C, Koves TR, Smith JE, Dworkin SI. (1997) Ekstraceliulinės dopamino koncentracijos skirtumai branduolio accumbens metu priklausomai nuo reakcijos priklausomo ir nuo reakcijos nepriklausomo kokaino vartojimo žiurkėms. Psichofarmakologija 133: 7 – 16. Raskite šį straipsnį internete
71. Mark GP, Blander DS, Hoebel BG. (1991) Po besimokančio skonio vengimo išsivystymo stimuliuojantis stimuliatorius sumažina ekstraląstelinį dopaminą branduolyje accumbens. Brain Res 551: 308 – 310. Raskite šį straipsnį internete
72. Meil WM, Roll JM, Grimm JW, Lynch AM, žr. RE. (1995) Tolerancijos tipo silpninimas iki galimo ir nekontroliuojamo kokaino sukelto ekstraląstelinio dopamino kiekio padidėjimo ventralinėje striatume po 7 dienų, kai buvo nutrauktas chroncinis gydymas. Psichofarmakologija 118: 338 – 346. Raskite šį straipsnį internete
73. Melendez RI, Rodd-Henricks ZA, Engleman EA, Li TK, McBride WJ, Murphy JM. (2002) Dopamino mikrodializė alkoholio preferuojančių (P) žiurkių branduolyje, kai tikimasi ir operuojasi pats etanolis. Alkoholio klinika Exp Res 26: 318 – 325. Raskite šį straipsnį internete
74. Pettit HO, Teisingumo JB. (1991) Dozės poveikis kokaino savarankiškam vartojimui ir dopamino kiekiui branduolyje accumbens. Brain Res 539: 94 – 102. Raskite šį straipsnį internete
75. Pontieri FE, Tanda G, Di Chiara G. (1995) Intraveninis kokainas, morfinas ir amfetaminas pirmiausia padidina ekstraląstelinį dopaminą „lukštuose“, lyginant su žiurkės branduolio „akumbolo“ branduoliu. Proc Natl Acad Sci JAV 92: 12304 – 12308. Raskite šį straipsnį internete
76. Rada P, Avena NM, Hoebel BG. (2005) Kasdienis cukraus vartojimas cukrui pakartotinai išskiria dopaminą branduolio akumeliuose. Neurosci 134: 737 – 744. Raskite šį straipsnį internete
77. Sizemore GM, Co C, Smith JE. (2000) Ventraliniai palidiniai ekstraceliuliariniai skysčių kiekiai dopamino, serotonino, gama amino-sviesto rūgšties ir glutamato metu, vartojant kokainą savarankiškai. Psichofarmakologija 150: 391 – 398. Raskite šį straipsnį internete
78. Weiss F, Lorang MT, Bloom FE, Koob GF. (1993) Geriamojo alkoholio vartojimas stimuliuoja dopamino išsiskyrimą žiurkių branduolyje: genetiniai ir motyvaciniai veiksniai. J Pharmacol Exp Therap 267: 250 – 258. Raskite šį straipsnį internete
79. Išminčius RA, Newton P, Leeb K, Burnette B, Pocock D, Justice JB. (1995) Atliekant intraveninę kokaino savarankišką įvedimą žiurkėms, branduolio pakitimai dopamino koncentracijoje pakyla. Psichofarmakologija 120: 10 – 20. Raskite šį straipsnį internete
80. Norgren R, Hajnal A, Mungarndee SS. (2006) Skonio atlygis ir branduolys. Physiol Behav 89: 531 – 5. Raskite šį straipsnį internete
;