Oksekso-1 receptorių mechanizmų vaidmuo maistui, vartojančiam moteriškos lyties pateles (2012).

Neuropsichofarmakologija. 2012 rugpjūtis; 37 (9): 1999 – 2011.

Paskelbta internete 2012 Gegužė 9. doi: 10.1038 / npp.2012.48

PMCID: PMC3398727

Laura Piccoli,^1,^4,^5,⁶ Maria Vittoria Micioni Di Bonaventura,^2,^4,^* Carlo Cifani,^2,⁴ Vivian JA Costantini,^1,^5,⁶ Mario Massagrande,^1,^5,⁶ Dino Montanari,^1,^5,⁶ Prisca Martinelli,^1,^5,⁶ Marinella Antolini,^1,^5,⁶ Roberto Ciccocioppo,² Maurizio Massi,² Emilio Merlo-Pich,³ Romano Di Fabio,^1,^5,⁶ ir Mauro Corsi^1,^5,⁶

Autoriaus informacija ► Straipsnio pastabos ► Informacija apie autorių teises ir licencijas ►

Šis straipsnis buvo minimas kiti PMC straipsniai.

Abstraktus

Oreksinai (OX) ir jų receptoriai (OXR) keičia maitinimąsi, susijaudinimą, stresą ir piktnaudžiavimą narkotikais. Neuroninės sistemos, kurios motyvuoja ir sustiprina piktnaudžiavimą narkotikais, taip pat gali lemti kompulsyvaus maisto ieškojimą ir vartojimą. Todėl GSK1059865 (5-bromo-N- [(2S,5S) -1- (3-fluor-2-metoksibenzoil) -5-metilpiperidin-2-il] metil-piridin-2-aminas), selektyvusis OX₁R antagonistas, JNJ-10397049 (N- (2,4-dibromofenilas) -N′ - [(4S,5S) -2,2-dimetil-4-fenil-1,3-dioksan-5-il] karbamidas), selektyvusis OX₂R antagonistas ir SB-649868 (N- [((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide), a dual OX₁/JAUTIS₂R antagonistas buvo vertinamas žiurkių patelėms besaikio valgymo (BE) modeliu. Labai skanaus maisto (HPF) BE sukėlė tris maisto ribojimo ciklus, po kurių sekė stresas, kurį sukėlė žiurkės veikdamos HPF, tačiau neleidžiant joms pasiekti 15 min. Visų junginių farmakokinetiniai įvertinimai buvo gauti tomis pačiomis eksperimentinėmis sąlygomis, kurios buvo naudojamos elgesio eksperimentams. Topiramatas buvo naudojamas kaip etaloninis junginys, nes jis selektyviai blokuoja BE žiurkėms ir žmonėms. Lygiagrečių eksperimentų metu, naudojant polisomnografiją, buvo matuojamos nuo dozės priklausomos OXR antagonistų sukeliamo miego slenksčio ribos. SB-649868 ir GSK1059865, bet ne JNJ-10397049, selektyviai sumažino HPF BE, nepažeisdami įprasto maisto granulių vartojimo, dozėmis, kurios nesukeldavo miego. Šie rezultatai pirmą kartą rodo svarbų OX vaidmenį₁R mechanizmai BE, rodantys selektyvų antagonizmą OX₁R galėtų reikšti naują farmakologinį BE ir galbūt kitų valgymo sutrikimų gydymą kompulsiniu komponentu.

Raktiniai žodžiai: orexin-1 receptorių antagonistas, orexin-2 receptorių antagonistas, besaikis valgymas, žiurkių patelės, kompulsinis maisto vartojimas

ĮVADAS

Žmonių besaikio valgymo (BE) epizodams būdingas kompulsinis, ne homeostatinis, per trumpą laiką suvartojamas neįprastai didelis labai skonio maisto (HPF) kiekis. Nepaisant to, kad nėra alkani, tiriamieji valgo greičiau nei paprastai, kol jaučiasi nemaloniai sotūs. Kaip aprašyta DMS-IV-TR (Amerikos psichiatrijos asociacija, 2000), šiuos epizodus lydi subjektyvus valgymo kontrolės praradimo jausmas ir jie yra siejami su sielvarto, pasibjaurėjimo, depresijos jausmu, kaltu dėl persivalgymo ir valgymu vien dėl gėdos.

BE yra pagrindinis nervinės bulimijos požymis, kai BE epizodus skatina elgesys, kurio metu siekiama išvengti svorio padidėjimo, pavyzdžiui, savaiminis vėmimas. Intensyvūs ir nuolatiniai BE epizodai yra tipiški reiškiniai, atsirandantys ir asmenims, kenčiantiems nuo besaikio valgymo sutrikimo (BED) (Walshas ir Devlinas, „1998“). BED būdingi pakartotiniai BE epizodai, kai nėra kompensuojamojo elgesio, siekiant išvengti svorio padidėjimo. DSM-IV-TR diagnostiniai BED kriterijai rodo, kad BE epizodai 2 mėnesiais turėtų įvykti mažiausiai 6 dienas per savaitę. BED yra susijęs su reikšmingu medicininiu ir psichiatriniu sergamumu (Javaras et al, 2008; Grucza et al, 2007; Fassino et al, 2003). Manoma, kad BE tam tikru gyvenimo metu paveikia maždaug 5% JAV suaugusiųjų gyventojų (Foulds Mathes et al, 2009) ir prisideda prie nutukimo bei susijusių patologijų (Hudson et al, 2007; Heath, 1998; Devlin et al, 2000; Yanovski, 2003).

Dabartiniai vaistai, tokie kaip topiramatas (McElroy et al, 2007; McElroy et al, 2009) arba sibutramino (Appolinario et al, 2000; Wilfley et al, 2008), klinikinių tyrimų metu sumažėjo BE. Tačiau jų vartojimas yra susijęs su daugybe neigiamų šalutinių reiškinių, kurie sukelia rimtų problemų lėtinio gydymo metu (McElroy et al, 2009; Karteris et al, 2003; „Yager“, „2008“). Visų pirma, sibutraminas neseniai buvo pašalintas iš Europos rinkos, o topiramatas yra gerai žinomas dėl pažintinių funkcijų. Labai reikalingi novatoriški nervinės bulimijos ir BED gydymo būdai, neturintys ryškaus šalutinio poveikio.

1998, dvi grupės savarankiškai nustatė naują neuropeptidų klasę, kilusią iš pagumburio branduolių (Sakurai et al, 1998; de Lecea et al, 1998). Šie peptidai, vadinami orexin-A (OXA) ir orexin-B (OXB) (taip pat žymimi hipokretinu 1 ir hypocretin 2), yra gaminami proteolitiškai apdorojant pre-pro-OX peptidą ir jungiasi prie dviejų GPCR, būtent OX- Ir OX-1 receptoriai (OX₁R ir OX₂R) (taip pat žymimas kaip HcrtR1 ir HcrtR2). JAUTIS₁R yra sujungtas su Gq / 11, tuo tarpu tyrimai, naudojant neuronų ląsteles, rodo, kad OX₂R yra sujungtas su Gq, Gs ir Gi baltymais. Centrinėje nervų sistemoje OX₁R ir OX₂R rodo pasiskirstymo modelius, kurie iš dalies sutampa, bet iš esmės skiriasi ir papildo (Sakurai, 2007). Smegenų srityse, tokiose kaip infralimbinė žievė, hipokampas ir lokusas₁R, o OX₂R yra vienintelis receptorius, išreikštas arkadiniame branduolyje, tuberomammaliniame branduolyje ir dorsomedialiniame bei šoniniame pogumburyje (LH). Abu receptoriai yra prefrontalinėje žievėje, amygdaloje, stria terminalis lovos branduolyje, paraventrikuliniame thalamic branduolyje, dorsalinėje rapheje, ventralinėje pagrindinėje srityje (VTA) ir laterodorsaliniame pagrindiniame branduolyje - peduncolo pontine branduolyje (Lu et al, 2000; Marcus et al, 2001; Trivedi et al, 1998). Šie duomenys rodo, kad OX ir jų receptoriai gali vaidinti platų reguliavimo vaidmenį centrinėje nervų sistemoje.

Miego / miego būsenos fiziologija yra viena iš sričių, kurioje labiausiai išstudijuotas OX vaidmuo. Iš tikrųjų, sutrikdžius OX signalizaciją pelėms, gautoms po preso-OX išmušimo, atsirado fenotipas, pasižymintis nepaprastai panašiomis į pacientų, kenčiančių nuo narkolepsijos, lėtinio sutrikimo, kuriam būdingas per didelis mieguistumas, kuris gali būti susijęs su labai sunkiu miego paralyžiumi, hipnagoginėmis haliucinacijomis ir katapleksija, pobūdis. (Chemelli et al, 1999). Atrodo, kad per didelis mieguistumas yra nesugebėjimas išlaikyti prailginto pabudimo.

Be to, tuo pačiu metu prieštaraujantys abu OX₁R ir OX₂R arba selektyvus OX slopinimas₂R sukelia stiprų hipnotizuojantį poveikį (Brisbare-Roch et al, 2007; Dugovičius et al, 2009; Di Fabio et al, 2011).

Literatūros duomenys taip pat patvirtina OX sistemos vaidmenį maitinantis maistu, kontroliuojant tiek homeostatinį, tiek atlygį gaunantį maistą. Be narkolepsijos fenotipo, OX išmuštos pelės taip pat yra hipofagiškos, palyginti su svorio ir amžiaus atitikimo pakratų draugais, rodančios OX vaidmenį modifikuojant šėrimą ir energijos apykaitą (Willie et al, 2001). OXA švirkštimas į žiurkių šoninį skilvelį ankstyvosios šviesos fazės metu sukėlė žiurkių suvartojamo maisto dozės padidėjimą (Sakurai et al, 1998), kurį užblokavo išankstinis apdorojimas OX₁R antagonistas SB-334867 (Haynes et al, 2000; Rodgers et al, 2001). OX vaidmuo atsižvelgiant į atlygį pagrįstą maistą buvo užfiksuotas neseniai paskelbtame dokumente Perello et al (2010), parodant, kad grehlino sukeltas riebios dietos atlygintinos vertės padidėjimas priklauso nuo OX; be to, buvo pranešta, kad SB-334867 slopina savarankiško maisto vartojimą su riebiu maistu (nair et al, 2008). OX įjungimas₁R yra būtinas atsakas į maistą, motyvacija ar abu komponentai (Šaras et al, 2010). Be to, LH OX neuronus suaktyvina užuominos, susijusios su naudingais atlygiais, tokiais kaip maistas (Harris et al, 2005), nurodant galimą OX sistemos vaidmenį reaguojant į išorinius aplinkos nurodymus, susijusius su kognityviniais šėrimo aspektais.

Naujausi pranešimai patvirtina OX signalizacijos reikšmę piktnaudžiavimo narkotikų neuro elgsenos ir motyvaciniu poveikiu (Harris et al, 2005; Borgland et al, 2006; Jupp et al, 2011; peržiūrėti, žr „Bonci and Borgland“, 2009; Martinas-Fardonas et al, 2010). Taigi OX blokada₁R sumažina etanolio kiekį (Lawrence'as et al, 2006) ir nikotino administravimas savimi (olandas et al, 2008), slopina lazerių sukeltą etanolio (Lawrence'as et al, 2006), kokainas (Kalvis et al, 2010) ir morfino ieškantys (Harris et al, 2005) ir sumažina streso sukeltą kokaino (Boutrel et al, 2005) ir etanolio ieškojimas (Richardsas et al, 2008). Be to, naujausi įrodymai taip pat susiejo OX₂R selektyvieji alkoholio apdovanojimo ir elgesio siekimo mechanizmai (Shoblock et al, 2011).

Vis daugėja įrodymų, kad per didelis tam tikrų maisto produktų vartojimas tam tikromis sąlygomis sukelia elgesį ir smegenų pokyčius, panašius į priklausomybę (Auksas et al, 2003; Kenny, 2011; Pelchat et al, 2004; Avižos et al, 2008; Ifland et al, 2009; Gearhardtas et al, 2011a). Taip pat buvo pasiūlyta, kad nervų sistemos, kurios motyvuoja ir sustiprina piktnaudžiavimą narkotikais, yra elgesys, susijęs su kompulsyviu maisto ieškojimu ir jo vartojimu (Johnson ir Kenny, 2010; Hoebel, 1985; Volkow ir Wise, 2005; corwin et al, 2011; Gearhardtas et al, 2011b; Wang et al, 2011). Šie duomenys kelia klausimą, ar OX sistema taip pat gali turėti įtakos valgymo sutrikimams, kuriems būdingi kompulsyvūs apsvaigimo tipo epizodai, tokie kaip nervinė bulimija ir BED.

Todėl šiuo tyrimu buvo siekiama ištirti dvigubo OX poveikį₁/JAUTIS₂R antagonistas SB-649868 (N-[((2S)-1-{[5-(4-fluorophenyl)-2-methyl-1,3-thiazol-4-yl]carbonyl}-2-piperidinyl)methyl]-1-benzofuran-4-carboxamide) (Di Fabio et al, 2011), selektyvusis OX₁R antagonistas GSK1059865 (5-bromo-N- [(2S,5S)-1-(3-fluoro-2-methoxybenzoyl)-5-methylpiperidin-2-yl]methyl-pyridin-2-amine) (Gozzi et al, 2011) ir selektyvusis OX₂R antagonistas JNJ-10397049 (N- (2,4-dibromofenilas) -N′ - [(4S,5S) -2,2-dimetil-4-fenil-1,3-dioksan-5-il] karbamidas) (McAtee et al, 2004; Dugovičius et al, 2009) BE aprašytame modelyje Cifani et al (2009), kurio metu žiurkių patelėms išprovokuojami BE ŽPF epizodai dėl maisto ribojimo / maitinimo ciklų ir ūmaus streso. Pirmiausia buvo įvertinti trys antagonistai in vitro žiurkių rekombinantiniame OX₁R ir OX₂R, siekiant nustatyti jų stiprumą ir patvirtinti jų selektyvumą dviem receptorių potipiais. Tada buvo įvertinta jų farmakokinetika (PK) ir dozės, galinčios sukelti hipnotizuojantį poveikį, buvo nustatytos žiurkėms miegant. Galiausiai junginiai buvo tiriami nustatytomis dozėmis pagal BE modelį.

MEDŽIAGOS IR METODAI

Gyvūnai

Visi tyrimai, kuriuose dalyvavo gyvūnai, buvo atlikti pagal Europos direktyvą 86/609 / EEB, reglamentuojančią gyvūnų gerovę ir apsaugą, kurią pripažįsta Italijos įstatyminis dekretas Nr. 116, 27 m. Sausio 1992 d., Ir pagal „GlaxoSmithKline“ gyvūnų tyrimų ir etikos komiteto (CARE) atliktą vidaus apžvalgą ir bendrovės laboratorinių gyvūnų priežiūros ir naudojimo politiką.

Narkotikai

„SB-649868“ (Di Fabio et al, 2011), GSK1059865 (Gozzi et al, 2011) ir JNJ-10397049 (McAtee et al, 2004) buvo susintetinti GSK laboratorijose. OXA tiekė „California Peptides Research“ (kat. Nr. 471-99, Kalifornija). Myo- [1,2-3H(N)] inozitolis (NET-906, specifinis aktyvumas: 51 Ci / mol) ir itrio silikato RNR rišantys granulės (RPNQ0013) buvo įsigyti iš Perkin-Elmer (Italija). Topiramatas (Topamax; Janssen-Cilag) buvo pirktas iš Janssen-Cilag. Jis buvo tiekiamas tabletėmis, kurios prieš vartojimą buvo supjaustytos į miltelius.

1 eksperimentas: SB-649868, JNJ-10397049 ir GSK1059865 antagonizmas žiurkės OX₁R ir Žiurkė OX₂R

Ląstelių kultūros

Žiurkės bazofilinės leukemijos ląstelės, stabiliai transfekuotos žiurkės OX₁R (rOX₁R) arba žiurkės OX₂R (rOX₂R) buvo auginami α-MEM (Invitrogen / GIBCO), papildytuose 10% vaisiaus galvijų serumu (FBS, PAA), 100 U / ml penicilino G, 100 U / ml streptomicinu (Pen / Strep; Invitrogen / GIBCO) ir 400. μg / ml geneticino (Invitrogen / GIBCO), esant 37 ° C su 5% CO₂ drėgnoje atmosferoje.

Kaupimasis [³H] inozitolio fosfatai (IP)

Kaupimasis [³H] inozitolio fosfatai (IP) buvo išmatuoti taip, kaip aprašyta anksčiau (Brendis et al, 2003) su šiomis modifikacijomis. Ląstelių linijos stabiliai išreiškia rOX₁R arba rOX₂R buvo pasėtos 96 duobutės audinių kultūros plokštelėse 3 × 10⁴ ląstelių viename šulinyje ir 1.5 × 10⁴ ląstelių kiekvienoje duobutėje, atitinkamai, α-MEM, papildytame 10 FBS ir Pen / Strep be genetino. Po 24 h, kultūrinė terpė buvo išsiurbta, o į ląsteles buvo įpilta 100 μl šviežios terpės, papildytos 10 μCi / ml NET-906 (Perkin-Elmer); tokiu būdu kiekvienoje duobutėje buvo naudojamas 1 μCi radioaktyviai paženklinto inozitolio. Po 16 h inkubacijos, prieš pridedant agonistus ar antagonistus, ląstelės buvo du kartus plaunamos tyrimo buferiu (1 × HBSS, 20 mM HEPES (pH 7.4), pridedant 0.1% galvijų serumo albumino ir 10 mM LiCl). Prieš stimuliavimą agonistais, antagonistai buvo inkubuojami 30 min., Esant 37 ° C. Buvo atliktos OXA koncentracijos ir atsako kreivės (CRC) nuo 0.0001 iki 10 μM. Po 1 h inkubacijos esant 37 ° C, tyrimo buferis buvo išsiurbtas, įpilama 80 μl į 0.1 M ledo šaltos skruzdžių rūgšties šulinėlį ir ląstelės buvo paliekamos 30 minutėms inkubuoti kambario temperatūroje. Į 20 μl itrio silikato granulių (YSi SPA; Perkin-Elmer; 80 mg / ml) įpilama 12.5 μl ląstelių ekstrakto dalis, purtoma 1 h kambario temperatūroje ir paliekama 4 ° C temperatūroje 2 h prieš tai. skaičiavimas ant „Packard Top-Count NXT Microplate Scintillation Counter“.

Duomenys buvo išreikšti kaip maksimalaus agonisto atsako procentai, apskaičiuoti taip:% maksimalaus agonisto atsako = ((cpm_antagonistas–Cpm_bazinis) / cpm_{maxagonistresponse}–Cpm_bazinis) × 100.

In vitro duomenų analizė

CRC buvo pritaikytos sigmoidine netiesine regresijos analize, naudojant „GraphPad Prism 5.0“ programinę įrangą („GraphPad Software“, San Diegas, CA), kad būtų gautas agonistinis EC₅₀ (agonisto koncentracija reikalinga norint gauti 50% maksimalaus atsako).

Potencija (K_B= nenugalimų antagonistų antagonistinės disociacijos konstanta) buvo nustatyta taikant nekonkurencinio antagonizmo operacinio modelio lygtį (Kenakinas et al, 2006). K_B įveikiamų antagonistų vertė buvo apskaičiuota pagal Schildo analizę (Arunlakshana ir Schild, 1959). SB-649868 - tik antagonisto IC₅₀ buvo apskaičiuota. Nubraižėme 1 μM OXA sukurtą atsakymą, nesant ir esant keturioms skirtingoms antagonisto koncentracijoms. IC₅₀ yra apibūdinamas kaip antagonisto koncentracija, reikalinga slopinti agonisto sukeliamą atsaką 50%. Rezultatai išreikšti kaip pEC₅₀ (−log₁₀ EC₅₀), pK_B (−log₁₀ K_B) arba PIC₅₀ (−log₁₀ IC₅₀), ir jie pateikiami kaip vidurkis ± SEM arba kaip vidurkis su 95% pasikliovimo ribomis (95% CL) bent iš trijų nepriklausomų eksperimentų. Visi ištirti vaistai buvo ištirpinti dimetilsulfokside (DMSO) ir toliau praskiedžiami tyrimo buferyje, kad galutinė DMSO koncentracija neviršytų 0.5%.

2 eksperimentas: Patinų ir patelių PK nustatymas

Norint įvertinti PK ekspoziciją kraujyje miego ir BE tyrimams, buvo tiriami junginių PK profiliai žiurkių patinams ir patelėms tomis pačiomis eksperimentinėmis miego ir BE eksperimentų sąlygomis. PK profiliai buvo ištirti sušvirkštus 3 mg / kg SB-649868 žiurkių patelėms ir patinams, į pilvaplėvės ertmę patekus 10 mg / kg patelėms ir 5 mg / kg patinams, JNJ-10397049, ir sušvirkštus į veną. žiurkių patelės ir intraperitonealiai žiurkių patinams skiriant 10 mg / kg GSK1059865. Kraujo mėginiai buvo imami per šlaunikaulio veną kas antrą kartą iki 4 h po vartojimo. Smegenų mėginiai buvo paimti eksperimento pabaigoje. SB-649868, JNJ-10397049 ir GSK1059865 koncentracija kraujo ir smegenų mėginiuose buvo nustatyta naudojant metodą, pagrįstą baltymų nusodinimu, po kurio seka HPLC-MS / MS analizė. Nekompartiniai PK parametrai buvo gauti iš kraujo koncentracijos laiko profilių, naudojant programinį paketą WinNonlin v.4.0 („Pharsight“, Mountain View, CA). PK parametrai išreiškiami kaip vidurkis ± SD (Skaitykite ir „Braggio“, 2010).

3 eksperimentas: SB-649868, JNJ-10397049 ir GSK1059865 poveikis žiurkių miego modeliui

Gyvūnai

Patinų Sprague – Dawley žiurkės (275 – 300 g; Charles River, Calco, Como, Italija) buvo laikomos atskirai 12-h šviesos – tamsos cikle (šviesa dega 0300 h) 1 savaitę prieš operaciją. Buvo leista prieiti prie maisto ir vandens ad libitum. Biopotencialių signalų rinkimui gyvūnams į pilvaplėvę buvo implantuotas miniatiūrinis daugiakanalis telemetrinis siųstuvas (TL10M3-F40-EET; Data Sciences Int.). Du elektrodai buvo visam laikui pritvirtinti dantų cementu prie kaukolės, kad būtų užfiksuota žievės elektroencefalograma (EEG). Jie tiesiogiai bendravo su dura mater per dvi išgręžtas skylutes priekinėje-parietalinėje srityje. Kiti du elektrodai buvo pritvirtinti prie kaklo skeleto raumenų, kad būtų galima registruoti elektromiogramą (EMG), arba periorbitalinėje akies srityje, kad būtų galima registruoti elektrokulogramą (EOG).

Užrašymas

Po operacijos gyvūnai buvo laikomi namų narve kontroliuojamos temperatūros aplinkoje (21 ± 1 ° C) su maistu ir vandeniu. ad libitum. Implantuoti gyvūnai parodė normalų elgesio modelį iškart po operacijos. Tačiau norėdami atkurti normalų miego režimą, gyvūnai buvo naudojami po 3 savaitės laikotarpio. Aukščiau aprašytos aplinkos sąlygos buvo palaikomos per visus miego tyrimus. Tyrimo laikotarpiu laisvai judantys gyvūnai liko savo namų narveliuose ant atskirų imtuvų. EEG ir EMG arba EOG signalai buvo nuolat registruojami naudojant DSI Dataquest ART. EEG pėdsakas, suskirstytas į 10 epochas, buvo skaitmeniškai transformuotas (FFT transformacija), kad būtų galima gauti δ, θ, αir β juostos, išskiriančios tris skirtingus žiurkių aktyvumo modelius (pabudimas, NREM miegas ir REM miegas). Žymekliai, kuriuos priskyrė automatizuota balų nustatymo sistema (miego stadija, DSI), buvo perduoti į EEG skaitmeninį signalą ir vėliau patvirtinti vizualiai ištyrus EEG ir EMG / EOG pėdsakus, kuriuos atliko apmokyti operatoriai ir aklai nuo narkotikų. Miego parametrų analizė: latentiškumas iki NREM miego (laiko intervalas iki pirmųjų šešių iš eilės einančių NREM miego epochų po injekcijos), latencija prie REM miego (laiko intervalas iki pirmosios REM miego epochos po injekcijos), NREM miegas, REM miegas ir bendra miego laikas.

Narkotikų gydymas

Gydymas vaistais buvo atliekamas pagal atsitiktinai parinktą suplanuotą kryžminį planą, kai atskirais eksperimento sesijomis kiekvienas gyvūnas buvo gydomas nešikliu ar vaistu. Žiurkės buvo apdorotos eksperimentiniu junginiu arba jo atitinkamu nešikliu 2 ml / kg tūriu, 6 h po šviesos išjungimo (Cirkadijos laikas (CT) 18). Įrašai buvo atlikti per sekantį 3-h bandymo laikotarpį. SB-649868 buvo ištirpintas distiliuotame vandenyje 0.5% HPMC (hidroksi-propil-metil-celiuliozės) (m / t) distiliuotame vandenyje ir dozuojamas 3 ir 10 mg / kg dozėmis. JNJ-10397049 buvo ištirpintas mygliol 812N ir buvo švirkščiamas į pilvaplėvės ertmę 5 ir 25 mg / kg dozėmis. GSK1059865 buvo ištirpintas distiliuotame vandenyje 0.5% HPMC (m / v) ir suleistas į pilvaplėvės ertmę 5 ir 25 mg / kg dozėmis.

Duomenų analizė

Visi duomenys išreiškiami kaip vidurkis ± SEM. Rezultatai buvo analizuojami naudojant vienpusę dispersijos analizę (ANOVA). Post-hoc buvo atlikti palyginimai su Dunnett testu. Statistinė reikšmė buvo nustatyta P

4 eksperimentas: per didelis valgymas

Gyvūnai

Buvo naudojamos patelės Sprague – Dawley (Charles River). Jų kūno svoris eksperimento pradžioje buvo 225 – 250 g. Žiurkės buvo aklimatizuojamos į atskirus narvus pagal 12-h šviesos / tamsos ciklą (apšviečiant 0800 h) su ad libitum varškė ir vanduo 2 savaites prieš eksperimentus. Jie buvo laikomi patalpoje, kurioje buvo pastovi temperatūra (20 – 22 ° C) ir drėgmė (45 – 55%). Žiurkės buvo laikomos atskiruose narveliuose su metalinėmis sienelėmis; grindys ir priekinė siena buvo pagamintos iš metalinių tinklelių. Narvo grindų matmenys buvo 30 cm × 30 cm; narvas buvo 30 cm aukščio. Narvo priekinėje sienoje buvo priekinės durys (30 cm × 20 cm), kurias sudarė metalinis tinklelis, kad būtų galima patekti į narvo vidų. Likusi priekinės sienos dalis buvo aprūpinta geriamuoju biuretu.

dieta

Gyvūnams buvo pasiūlytos standartinės žiurkių maisto granulės, 4RF18 (Mucedola; Settimo Milanese, Milanas, Italija; 2.6 kcal / g). HPF buvo pasta, paruošta maišant Nutella (Ferrero, Alba, Torino, Italija) šokoladinį kremą (atitinkamai 5.33 kcal / g; 56%, 31% ir 7% iš angliavandenių, riebalų ir baltymų), sumaltas žemės granules ( 4RF18; Mucedola; Settimo Milanese) ir vandens masės santykis: 52% Nutella, 33% maisto granulių ir 15% vandens. HPF dietos kalorijų kiekis buvo 3.63 kcal / g. Metalinės tinklelio talpyklos, pakabintos ant narvo priekinės sienos, viduje buvo siūlomos standartinės granulės; jis buvo pašalintas iš narvo, kad būtų galima išmatuoti jo svorį, norint nustatyti maisto granulių suvartojimą. HPF buvo siūlomas kavos puodelyje; puodelio rankena buvo įkišta į narvo priekinės sienos metalinę grotelę ir pritvirtinta prie sienos.

Streso procedūra

„15 min“ metu Kinijos kavos puodelis, kuriame buvo HPF, buvo įdėtas į metalinio tinklelio indą, pakabintą ant narvo priekinės sienos. Šiomis sąlygomis pirmųjų dviejų ciklų dienomis 5, 6, 13 ir 14 dienomis gyvūnas galėjo pamatyti taurę, kurioje gavo HPF, galėjo pamatyti patį HPF, taip pat užuosti savo kvapą. Šiuo 15-min periodu žiurkė atliko pakartotinius priekinių kojų, galvos ir bagažinės judesius, siekdama gauti HPF, tačiau negalėjo jo pasiekti.

Tai sukėlė silpną stresą, dėl kurio smarkiai padidėja kortikosteroono kiekis serume (Cifani et al, 2009). Po 15 min. Taurė buvo įdėta į streso grupių žiurkių narvą, kad HPF taptų prieinama jiems.

Narkotikų gydymas

25 dieną prieš prisijungiant prie HPF, buvo duoti junginiai arba atitinkama nešiklis. SB-649868 buvo ištirpintas distiliuotame vandenyje 0.5% HPMC (m / v) ir buvo sušvirkštas dozuojant 1 ir 3 mg / kg dozes. Topiramatas buvo ištirpintas distiliuotame vandenyje 0.5% HPMC (m / v) ir buvo švirkščiamas atidarant dozę 60 mg / kg doze. JNJ-10397049 buvo ištirpintas distiliuotame vandenyje 0.5% HPMC (m / v) ir buvo suleistas į pilvaplėvės ertmę 1 ir 3 mg / kg dozėmis. GSK1059865 buvo ištirpintas distiliuotame vandenyje 0.5% HPMC (m / v) ir sušvirkštas dozuojant 10 ir 30 mg / kg dozes. Visi vaistai ar jų nešiklis buvo sušvirkšti 1 h prieš pradedant gydyti HPF.

4A eksperimentas: SB-649868 ir topiramato poveikis

Norėdami įvertinti OXR antagonistų vaidmenį BE, mūsų BE modelyje buvo išbandytas neselektyvus OXR antagonistas SB-649868.

Gyvūnai buvo suskirstyti į keturias 27 gyvūnų grupes, kiekviena suderinta su kūno svoriu ir dienos maistu: (1) neribota ir nepaveikta streso (NR + NS) grupė; (2) ribotos ir nepaveiktos streso (R + NS) grupės; (3) neribotos ir veikiamos streso (NR + S) grupės; ir (4) ribotos ir veikiamos streso (R + S) grupės. Priskiriamos vienai iš šių grupių, žiurkės liko toje grupėje per visą tyrimą. Žiurkės, veikiamos streso, buvo aklimatizuojamos kambaryje, kuris skiriasi nuo grupių, kurios nebuvo veikiamos streso. Žiurkėms buvo veikiami trys iš eilės 8 dienos ciklai, po kurių paskutinis tyrimas buvo atliekamas 25 dieną (Lentelė 1):

Tvarkaraštis, priimtas norint išprovokuoti besaikį valgymą

grupė NR + NS turėjo chow ad libitum 4 dienomis, 5 ir 6 dienomis jie gavo čiau + HPF per 2 h; 7 ir 8 dienomis jie būdavo čiau ad libitum; ir 25 dieną jie nebuvo veikiami streso;
antroji grupė turėjo chow ir HPF kaip NR + NS, tačiau bandymo dieną (25 dieną) jie buvo veikiami streso (NR + S);
trečioji grupė (R + NS) turėjo chw riboti iki 66% normalaus suvartojimo 4 dienomis, jiems buvo siūlomas chow ir HPF (2 h) 5 ir 6 dienomis ir tik chow 7 ir 8 dienomis; 25 dieną jie nebuvo veikiami streso.
R + S grupei buvo paršeliai apriboti iki 66% normalaus suvartojamo kiekio 4 dienomis, jiems buvo siūlomas chow ir HPF (2 h) 5 ir 6 dienomis ir jie vargino tik 7 ir 8 dienomis; ir 25 dieną jie buvo veikiami streso.

8 dienos ciklas buvo kartojamas tris kartus, tačiau trečiajame cikle gyvūnai neturėjo galimybės gauti HPF maisto.

25 dieną kiekviena 27 žiurkių grupė buvo suskirstyta į tris pogrupius ir atitinkamai apdorota nešikliu SB-649868, 1 arba 3 mg / kg, duodant 1 h, prieš pradedant naudoti HPF.

HPF suvartojimas buvo išreikštas nurijus vidutinį kcal / kg ± SEM; HPF suvartojimas buvo matuojamas 15, 30, 60 ir 120 minutėmis po prisijungimo pradžios. Maisto granulių suvartojimas buvo matuojamas tik per 120 min., Nes ankstesnių tyrimų duomenys parodė, kad maisto granulių buvo suvartojama labai nedaug, ir bandymo metu gyvūnams nebuvo trukdoma.

Topiramatas, naudojamas kaip etaloninis junginys šioje eksperimentinėje paradigmoje (Cifani et al, 2009), buvo tiriamas tose pačiose žiurkėse 10 dienomis po SB-649868 eksperimento pabaigos. Iš šių 108 gyvūnų 72 buvo suskirstytas į tas pačias keturias grupes (kiekvienos grupės 18 gyvūnai), aprašytas anksčiau. Po vienos poilsio dienos, pasibaigus pirmajam bandymui, šios žiurkių grupės gavo papildomą 8 dienų ciklą: NR + NS ir NR + S grupėse buvo 8 dienų čiau ad libitum, tuo tarpu R + NS ir R + S grupėse 4 dienų paros trukmė buvo ribojama iki 66% normalaus suvartojimo, po to sekė 4 dienos čiau ad libitum. Šiame papildomame cikle visos grupės neturėjo prieigos prie HPF. Kitą dieną NR + S ir R + S grupės buvo veikiamos streso, o NR + NS ir R + NS grupės - ne. Tą dieną topiramatas (60 mg / kg) arba jo nešiklis buvo sušvirkščiamas 1 h., Prieš pradedant naudotis HPF.

4B eksperimentas: JNJ-10397049 ir GSK1059865 poveikis

Norint ištirti OXR, mažinantį BE epizodus, selektyvusis OX₂R antagonistas JNJ-10397049 ir selektyvusis OX₁R antagonistas GSK1059865 buvo išbandytas mūsų BE modelyje.

Papildomai 54 žiurkių patelėms, suskirstytoms į dvi grupes (NR + NS ir R + S) 27 žiurkėms, buvo taikoma ta pati eksperimentinė procedūra kaip ir eksperimente 4A. Šiame eksperimente buvo naudojamos tik dvi žiurkių grupės, nes ir NR + S, ir R + NS žiurkės nerodo BE. Tiriamąją dieną (25 dieną), 1 h prieš pradedant prie HPF, žiurkės buvo gydomos intraperitoniškai JNJ-10397049 (1 ir 3 mg / kg) arba jo nešikliu.

Po vienos poilsio dienos JNJ-10397049 testo pabaigoje ta pati žiurkių grupė gavo papildomą 8 dienos ciklą, po kurio sekė 10 diena (kaip aprašyta ankstesniame eksperimente), naudojant GSK1059865. Prieš pradedant gydymą HPF, GSK1059865 (10 ir 30 mg / kg) arba jo nešiklis buvo švirkščiamas 1 h.

Duomenų analizė

Visi duomenys išreiškiami kaip vidurkis ± SEM, o kiekviena vertė atspindi gyvūnų skaičių vienoje grupėje, kaip aprašyta legendose. Duomenys buvo analizuojami naudojant dvipusį ANOVA, lyginant tiriamuosius tiriamiesiems eksperimentinėmis grupėmis ar gydant vaistais, ir palyginus tiriamuosius tiriamuoju metu. Post-hoc palyginimai buvo atlikti atliekant Bonferroni testą. Statistinė reikšmė buvo nustatyta P

REZULTATAI

1 eksperimentas: SB-649868, JNJ-10397049 ir GSK1059865 antagonizmas esant „rOX“₁R ir rOX₂R

OXA (0.1 nM – 10 μM) padidino [³H] IP kaupimasis priklausomai nuo koncentracijos su PEC₅₀ vertė 7.79 ± 0.04 (n= 16) ir 7.68 ± 0.04 (n= 16) esant rOX₁R ir rOX₂R, atitinkamai. „ROX“₁R, JNJ-10397049 (1 μM – 33 μM; 1a pav) ir GSK1059865 (0.3 nM – 10 nM; 2a pav) sukėlė nenugalimą antagonizmą, atsižvelgiant į nuo dozės priklausomą OXA EC poslinkį į dešinę₅₀ ir tuo pačiu sumažėja maksimalus agonisto atsakas. Apskaičiuotas pK_B vertės buvo 5.73 ± 0.16 (n= 3) ir 8.77 ± 0.12 (n= 3) atitinkamai JNJ-10397049 ir GSK1059865. „SB-649868“ („0.1“, „0.3“, „0.6“ ir „1 nM“) (3a pav) žymiai sumažino maksimalų OXA atsaką, nekeisdamas agonisto EC₅₀. Apskaičiuotas PIC₅₀ vertė buvo 9.46 ± 0.02 (n= 3). „ROX“₂R JNJ-10397049 (10 nM – 0.3 μM) (1b pav) ir GSK1059865 (0.1 – 3.3 μM) (2b pav) pagamino klasikinį įveikiamą profilį su lygiagrečiu „OXA EC“ poslinkiu į dešinę₅₀ nesumažėjus maksimalaus agonisto atsako. Pagal Schildo regresijos analizę gauti nuolydžiai JNJ-1.17 ir GSK95 buvo atitinkamai 0.92 (1.42% CL 0.86–95) ir 0.71 (1.00% CL 10397049–1059865), ir jie statistiškai nesiskyrė nuo vieno (P> 0.05). Apribojus šlaitus viename, pK_B reikšmės buvo 8.49 (95% CL 8.34 – 8.63; n= 3) ir 6.90 (95% CL 6.80 – 6.99; n= 3) atitinkamai JNJ-10397049 ir GSK1059865. „SB-649868“ („0.1 – 3.3 nM“) (3b pav) sukūrė OXA EC nuo dozės priklausomą dešinįjį poslinkį₅₀kartu su maksimalaus agonisto atsako sumažėjimu. Taikant nekonkurencingo antagonizmo analizės veiklos modelį, aprašytą Medžiagos ir metodai, apK_B vertė 9.35 ± 0.15 (n= 3).

1 pav

[³H] inozitolio fosfatų (IP) kaupimasis, kurį sukelia oreksino A (OXA) koncentracijos ir atsako kreivės (CRC) (•) žiurkių bazofilinės leukemijos (RBL) ląstelėse, ekspresuojančiose: žiurkės OX₁R (rOX₁R) (a) esant 1 (Δ), 3.3 (▾), 10 ...

2 pav

[³H] inozitolio fosfatų (IP) kaupimasis, kurį sukelia oreksino A (OXA) koncentracijos ir atsako kreivės (CRC) (•) žiurkių bazofilinės leukemijos (RBL) ląstelėse, ekspresuojančiose: rOX₁R (a) esant 0.3 (▴), 1 (▾), 3.3 (♦) ...

3 pav

[³H] inozitolio fosfatų (IP) kaupimasis, kurį sukelia oreksino A (OXA) koncentracijos ir atsako kreivės (CRC) (•) žiurkių bazofilinės leukemijos (RBL) ląstelėse, ekspresuojančiose: žiurkės rOX₁R (rOX₁R) (a) esant 0.1 (□), 0.3 (Δ), ...

2 eksperimentas: Patinų ir patelių PK nustatymas

PK nustatymas žiurkių patinams buvo tiriamas tomis pačiomis eksperimentinėmis sąlygomis kaip ir eksperimentas 3. Jie yra parodyti Lentelė 2.

SB-649868, JNJ-10397049 ir GSK1059865 farmakokinetiniai parametrai patinams, auginantiems Sprague – Dawley

C_daugiausia SB-649868 kiekis 3 mg / kg buvo 333 ± 52 ng / ml, o AUC 1260 ± 262 ng^*h / ml.

C_daugiausia JNJ-10397049 kiekis 5 mg / kg buvo 14.2 ± 1.0 ng / ml, o AUC 64 ± 4.3 ng^*h / ml.

C_daugiausia iš GSK1059865, kai 10 mg / kg buvo 366 ± 70 ng / ml, o AUC 1290 ± 320 ng^*h / ml.

PK nustatymas žiurkių patelėse buvo tiriamas tomis pačiomis eksperimentinėmis sąlygomis kaip ir eksperimentas 4, ir jie parodyti Lentelė 3.

SB-649868, JNJ-10397049 ir GSK1059865 farmakokinetiniai parametrai patelių Sprague – Dawley žiurkėms

C_daugiausia SB-649868 kiekis 3 mg / kg buvo 572 ± 115 ng / ml, o AUC 1708 ± 331 ng^*h / ml.

C_daugiausia JNJ-10397049 kiekis 10 mg / kg buvo 369 ± 97 ng / ml, o AUC 457 ± 224 ng^*h / ml.

C_daugiausia iš GSK1059865, kai 10 mg / kg buvo 268 ± 29 ng / ml, o AUC 768 ± 46 ng^*h / ml.

3 eksperimentas: SB-649868, JNJ-10397049 ir GSK1059865 poveikis žiurkių miego modeliui

Hipnozinis OXR antagonistų profilis buvo įvertintas per 3-h laikotarpį aktyviojoje žiurkės fazėje, pradedant įrašymo fazę žiurkės šviesos ir tamsos cikle CT 18 (užsidega CT 12). CT 18 buvo specialiai pasirinktas tam, kad būtų galima maksimaliai įvertinti hipnotinį junginių poveikį.

Šiomis eksperimentinėmis sąlygomis dvigubas OX₁/JAUTIS₂R antagonistas SB-649868 (3 ir 10 mg / kg, tirpalu) sukėlė stiprų pabudimo sumažėjimą (F (2, 21) = 22.9; P<0.01) ir miego delsos sumažėjimas (F (2, 21) = 9.11; P<0.01), palyginti su kontroline grupe. Dunnetto testas po ANOVA parodė statistiškai reikšmingą poveikį vartojant 3 ir 10 mg / kg (P<0.01) abiem miego parametrais. Miego modelių analizė rodo, kad tiek NREM, tiek REM miegas padidėja vartojant abi dozes (Lentelė 4a).

SB-649868 („Gavage“) poveikis miego parametrams žiurkėms

Atrankinis OX₂R antagonistas JNJ-10397049 (5 ir 25 mg / kg, pilvaplėvės ertmėje) parodė hipnotizuojantį poveikį, kurį parodo sumažėjęs prabudimas (F (2, 14) = 18.8; P<0.01) ir miego vėlavimas (F (2, 14) = 4.8; P<0.05). Dunnetto tyrimas atlikus ANOVA parodė, kad sumažėjimas buvo statistiškai reikšmingas vartojant 5 ir 25 mg / kg (P<0.01 už budrumą ir P<0.05 už miego vėlavimą). NREM miego padidėjimas pastebėtas vartojant abi dozes (P<0.01), tačiau jokio poveikio REM miegui nepastebėta (Lentelė 4b).

JNJ-10397049 (ip) poveikis miego parametrams žiurkėms

Atrankinis OX₁R antagonistas GSK1059865 (5 ir 25 mg / kg, pilvaplėvės ertmėje) sukėlė budrumo mažėjimo tendenciją (F (2, 14) = 3.27; P<0.05) ir miego vėlavimas (F (2, 20) = 1.73; P> 0.05). Miego modelių analizė parodė, kad padidėjo tik NREM miegas, statistiškai reikšmingas vartojant didžiausią išbandytą dozę (P<0.05 Dunnetto testas po ANOVA); jokio poveikio REM miegui nepastebėta (4c lentelė).

GSK1059865 (ip) poveikis miego parametrams žiurkėms

Eksperimentuokite 4A. BE: SB-649868 ir topiramato poveikis

ANOVA atskleidė labai reikšmingą 2-h HPF suvartojimo skirtumą keturioms žiurkių grupėms po nešiklio skyrimo (F (3, 32) = 13.81; P<0.01). Kaip parodyta 4 pav, po vaisto vartojimo HPF suvartojimas R + S grupėje buvo žymiai didesnis nei kontrolinės (NR + NS) grupės. ŽR žiurkių HPF vartojimas buvo labai ryškus per pirmąsias 15 minutes, kai jos buvo prieinamos; NR + S grupės HPF vartojimas reikšmingai nesiskyrė nuo kontrolinės grupės (NR + NS), tai rodo, kad stresas nebuvo pakankamas BE sukelti. Be to, R + NS grupės HPF vartojimas reikšmingai nesiskyrė nuo kontrolinės grupės (NR + NS), tai rodo, kad maisto suvaržymo ciklų nepakanka BE sukelti. Todėl BE priežastis gali būti unikali dietos ir streso sąveika.

4 pav

SB-649868 (1 ir 3 mg / kg, vartojant prošvaistę) arba jo nešiklio poveikis labai geram maistui (HPF). Reikšmės išreikštos devynių žiurkių vidurkiu ± SEM. ^**P<0.01, skirtumas nuo žiurkių, paveiktų nešikliu; kur nenurodyta, ...

Standartinių maisto granulių buvo suvartojama labai nedaug (apie 3 – 4% visų kalorijų, suvartotų 2 h teste), ir tam neturėjo įtakos maisto ribojimas, stresas ar jų abiejų derinys.

Kaip parodyta 4 pav, SB-649868 reikšmingai sumažino HPF suvartojimą R + S grupėje (F (2, 24) = 18.63; P<0.01), bet ne kitose grupėse: NR + NS (F (2, 24) = 0.91; P> 0.05); R + NS (F (2, 24) = 0.16; P> 0.05); NR + S (F (2, 24) = 1.1; P> 0.05). Post-hoc palyginimai atskleidė, kad SB-649868 poveikis R + S grupėje buvo statistiškai reikšmingas visais laiko momentais, reaguojant į didžiausią 3 mg / kg dozę. 1 mg / kg dozė R + S grupėje parodė sumažėjimo tendenciją, kuri nebuvo statistiškai reikšminga.

Topiramato testas atskleidė labai reikšmingą 2-h HPF suvartojimo skirtumą (F (3, 32) = 3.93; P<0.01) skirtingų grupių po nešiklio. Topiramatas, vartojamas 60 mg / kg selektyvumo, sumažino HPF vartojimą (F (1, 16) = 6.57; P<0.01) R + S grupėje (5 pav), bet ne NR + NS, NR + S ir R + NS grupėse. NR + S ir R + NS grupių duomenys nerodomi.

5 pav

Topiramato (60 mg / kg, vartojant prošvaistę) arba jo nešiklio poveikis labai skanaus maisto (HPF) vartojimui. Reikšmės išreikštos devynių žiurkių vidurkiu ± SEM. ^*P<0.05, skirtumas nuo žiurkių, paveiktų nešikliu; kur nenurodyta, skirtumas ...

Eksperimentuokite 4B. BE: JNJ-10397049 ir GSK1059865 poveikis

Kaip ir ankstesniame eksperimente, ANOVA patvirtino, kad R + S grupėje žymiai padidėjo HPF suvartojimas (F (1, 16) = 16.17; P<0.01). JNJ-10397049 neturėjo įtakos šėrimui ir NR + NS grupėje (F (2, 26) = 0.23; P> 0.05) arba R + S grupėje (F (2, 24) = 0.49; P> 0.05) (6a pav).

6 pav

JNJ-10397049 (1 ir 3 mg / kg, pilvaplėvės ertmėje) (a) arba GSK1059865 (10 ir 30 mg / kg, dozuojant), b) poveikis labai geram maistui (HPF). Reikšmės išreikštos devynių žiurkių vidurkiu ± SEM. ^*P<0.05, skirtumas ...

Gauti rezultatai rodo, kad OX₂R antagonizmas maitinimo elgsenai įtakos neturėjo. Taigi poveikis, anksčiau pastebėtas naudojant SB-649868, buvo tariamas per OX₁R mechanizmai. Norėdami patvirtinti šią išvadą, pasirenkamasis OX₁Buvo tiriamas R antagonistas GSK1059865 (10 ir 30 mg / kg). ANOVA parodė reikšmingą skirtumą tarp grupių, reaguojant į nešiklio gydymą (F (1, 16) = 17.1; P<0.01), patvirtinantį BE efektą R + S grupėje. GSK1059865 (vartojant 10 ir 30 mg / kg dozes) neveikė maitinimo NR + NS grupėje (F (2, 24) = 0.10; P> 0.05). R + S grupėje ANOVA parodė reikšmingą poveikį (F (2, 23) = 4.20, P<0.05) (6b pav). Post-hoc palyginimai atskleidė, kad GSK1059865 poveikis R + S grupėje, vartojant 10 ir 30 mg / kg dozes, buvo statistiškai reikšmingas 15, 30 ir 60 min. po laisvos prieigos prie HPF.

DISKUSIJA

Daugybė įrodymų rodo, kad dietos, stresas ir neigiamos emocinės būsenos yra galimi BE sukėlėjai pacientams, kenčiantiems nuo BED ar nervinės bulimijos (Wardle et al, 2000; Freeman ir Gil, 2004). Iš tikrųjų dietų laikymosi laikotarpiai yra įprasti per didelę valgytojų istoriją, nors pats badas neatrodo pakankamas BE sukelti, jei nėra streso ir neigiamos afektinės būsenos (Polivy et al, 1994; Vandenys et al, 2001). Nemažai įrodymų rodo, kad BE priežastis gali būti unikali dietos ir streso sąveika; todėl aplinkos kritinis poveikis ir ciklinių maisto apribojimų istorija gali būti atsakingi už jo kritulius ir palaikymą (Stice et al, 2001; Crowther et al, 2001; wolff et al, 2000). Atitinkamai, pasikartojantys maisto apribojimai yra pastoviausiu persivalgymo prognozuojant atsaką į stresą (Wardle et al, 2000).

Dietos laikymasis ir stresas taip pat vaidina svarbų vaidmenį plėtojant BE ikiklinikiniame modelyje. Pagal modelį, kurį sukūrė Cifani et al (2009), BE atsiranda dėl dietų laikymosi ir streso, veikiant HPF. Šiame modelyje žiurkių patelės yra veikiamos pakartotinių restrikcijos ciklų ir stresinės procedūros, kuriai būdingas gyvūnų veikimas HPF, neturint galimybės prie jo prieiti.

Kaip teigiama įžangoje, OX mechanizmai buvo naudojami kontroliuojant tiek homeostatinį, tiek atlygį grįstą maitinimą, taip pat motyvuojant narkotikus piktnaudžiauti („Bonci and Borgland“, 2009). Laikantis minties, kad nervų sistemos, kurios motyvuoja ir sustiprina piktnaudžiavimą narkotikais, taip pat gali būti elgesio, susijusio su maisto ieškojimu ir vartojimu, pagrindas (Gearhardtas et al, 2011b), šiame tyrime buvo tiriamas OXR antagonisto gebėjimas blokuoti BE epizodus ir įvertinti OX dalyvavimą₁ ir OX₂ BE epizodų valdymo mechanizmai.

Dėl šios priežasties trys literatūroje nurodyti junginiai turi skirtingą selektyvumą vs OX₁ ir OX₂ buvo tiriami žmogaus receptoriai: dvigubas OX₁/JAUTIS₂R antagonistas (SB-649868), selektyvusis OX₂R antagonistas (JNJ-10397049) ir selektyvusis OX₁R antagonistas (GSK1059865). Norint vartoti tinkamas farmakologines dozes, pirmiausia buvo įvertinti trys OXR antagonistai in vitro žiurkių rekombinantiniame OX₁R ir OX₂R, norint nustatyti potenciją ir patvirtinti jų selektyvumą šiai gyvūnų rūšiai. Skirtingas OX₁/JAUTIS₂R selektyvumas buvo patvirtintas žiurkėms naudojant [³H] inozitolio tyrimas.

Norint įvertinti PK ekspoziciją kraujyje palaikant miego ir BE tyrimus, buvo tiriami junginių PK profiliai žiurkių patinams ir patelėms, nes tai buvo lytis, naudojama atitinkamai miego ir BE eksperimentuose.

Po to dozės, galinčios sukelti hipnotizuojantį poveikį, buvo nustatytos naudojant miego žiurkės modelį. Galiausiai junginiai buvo tiriami nustatytomis dozėmis pagal BE modelį.

OX₁R ir OX₂Literatūroje rašoma, kad R antagonistai yra susiję su miego kontrole, ypač norėdami sukelti hipnotizuojantį poveikį (Di Fabio et al, 2011; Gozzi et al, 2011; Dugovičius et al, 2009). Ikiklinikinio hipnozinio miego modelio su žiurkėmis patinai rezultatai parodė, kad dvigubas OX₁/JAUTIS₂R antagonistas SB-649868 sukėlė tvirtą hipnotizuojantį poveikį tiek gebėjimui sukelti, tiek palaikyti miegą, pasiekdamas statistiškai reikšmingą poveikį vartojant 3 mg / kg. Panašus į SB-649868, OX₂R antagonistas JNJ-10397049 parodė gerą hipnotizuojantį poveikį, žymiai sutrumpindamas laiką, praleistą prabudus vartojant 5 mg / kg. OX, priešingai₁R antagonistas GSK1059865 pasižymėjo labai blogu hipnotizuojančiu gebėjimu sukelti ir palaikyti miegą. Šios išvados atitinka kitas ataskaitas, teigiančias, kad OX₂R gali būti svarbesnis nei OX₁R tarpininkaujant OX poveikiui miegui (Sakurai, 2007; Brisbare-Roch et al, 2007; Malherbe et al, 2009; Dugovičius et al, 2009; Di Fabio et al, 2011).

SB-649868, išbandytas keturiomis skirtingomis streso ir maisto ribojimo sąlygomis (NR + NS, R + NS, NR + S, R + S), galėjo sumažinti HPF vartojimą tik R + S grupėje. Vartojant 3 mg / kg, SB-649868 poveikis buvo panašus į stebėtą vartojant topiramatą. Kaip ir topiramatas, SB-649868 nepakeitė HPF suvartojimo kitomis maisto ribojimo ir streso sąlygomis.

OX₂Tomis pačiomis sąlygomis ištirtas R antagonistas JNJ-10397049 neparodė jokio poveikio HPF suvartojimui visomis keturiomis patikrintomis sąlygomis.

Šie rezultatai aiškiai rodo, kad OX₁R yra susijęs su BE epizodų valdymu ir pasiūlė galimą OX vaidmenį₁R antagonistai panaikina streso ir ribotos dietos sukeltus BE epizodus. Norėdami patikrinti šią hipotezę, atrankinis OX₁R antagonistas GSK1059865 buvo vertinamas gyvūnams, kuriems nustatytas apribojimas ir stresas. Gauti rezultatai patvirtino, kad OX₁R antagonistai slopino padidėjusį HPF suvartojimą R + S žiurkėms, nepaveikdami kontrolinio maisto vartojimo (NR + NS).

JNJ-10397049 poveikio nebuvimas negali būti siejamas su nepakankamu junginių poveikiu gyvūnams, kuriems pateiktas BE modelis. JNJ-10397049 PK įvertinimas parodė lyčių skirtumą, kai patelės, veikdamos tą pačią JNJ-10397049 dozę (10 mg / kg), buvo labiau paveiktos nei patinai. Įvertintos AUC reikšmės buvo 64 ng^*h / ml žiurkių patinams vs 457 ng^*h / ml žiurkių patelėms (maždaug septynis kartus didesnis). Todėl daroma išvada, kad BE modelio ekspozicija gyvūnams, vartojant 1 ir 3 mg / kg JNJ-10397049, buvo daug didesnė už tą, kuri buvo pasiekta atliekant miego tyrimą naudojant 5 ir 25 mg / kg. Kita vertus, nei SB-649868, nei GSK1059865 PK lyčių skirtumų nepastebėta, o žiurkių patinų ir patelių abiejų junginių ekspozicija sutapo.

Kaip teigiama įžangoje, stresas yra pagrindinis BE lemiantis veiksnys. Per pastarąjį dešimtmetį buvo sukurta keletas duomenų rinkinių, pagrindžiančių OX peptidų vaidmenį didelio susijaudinimo būsenose, įskaitant stresą, o pastarieji susiję su žymiai didesniu OXerginio neurotransmisijos greičiu. Siūlomi OX neuronai periferinėje – dorsomedialinėje pogumburyje, kad būtų tarpininkaujant streso aktyvinimui (Harris ir Aston-Jones, 2006, apžvalgai žr Koob, 2008). Gali būti, kad OXA iš šios pagumburio srities suaktyvina CRF ekspresuojančius neuronus paraventrikuliniame pagumburio branduolyje ir centriniame amigdalos branduolyje (Sakamoto et al, 2004). Atitinkamai, OX₁R antagonistai slopina farmakologinio stresoriaus yohimbino sukeltą etanolio ir sacharozės ieškojimą.Richardsas et al, 2008) ir OXA atkuria kokaino ieškomą elgesį (Boutrel et al, 2005). Neseniai Kuveki (2011) nustatė, kad OX sistema yra vienas iš pagrindinių neuronų grandinių, kontroliuojančių autonomines funkcijas ir emocinį elgesį, moduliatorių. Ankstesnės išvados Johnson et al (2010) parodė, kad selektyvusis OX₁R antagonistas SB334867 susilpnino į nerimą panašų elgesį ir blokavo lokalizacijos, širdies ritmo ir kraujospūdžio reakcijų padidėjimą, kurį sukėlė žiurkės natrio laktatas.

Keletas tyrimų rodo, kad pacientams, sergantiems nervine bulimija ir BED, gali būti pakitęs striatos dopamino (DA) reguliavimas (Bello ir Hajnal, 2010; Broftas et al, 2011; Wang et al, 2011). Hoebelio ir jo bendradarbių tyrimai (apžvalgą žr Avena ir Bocarsly, 2011) atskleidė striatos DA išsiskyrimo ir receptorių jungimosi pokyčius, panašius į tuos, kurie pastebimi reaguojant į piktnaudžiavimo vaistus. LH gaminami neuropeptidai gali modifikuoti VTA – DA ir striatos neuronų aktyvumą. OX turintys neuronai eina iš LH į VTA, kur OX₁R vaidina svarbų vaidmenį reguliuojant mezolimbinio DA plitimą ir įvairių narkotinių medžiagų piktnaudžiavimo ir maisto naudingąsias savybes (Casonas et al, 2010; Uramura et al, 2001; Zheng et al, 2007). Be to, BE epizodai gali būti kontroliuojami darant konkrečią įtaką HPF apdovanojimo ir stiprinimo procesams. Šiuo atžvilgiu įdomu pastebėti, kad OX neuronai LH buvo pasiūlyti tarpininkauti atlygio aktyvavimui (apžvalgą žr. Koob, 2008). Taigi, siūloma, kad OX neuronai LH būtų suaktyvinti su užuominomis, susijusiomis su atlygiu, pavyzdžiui, maistu ar vaistais, o stimuliuojant OX neuronus LH, vėl pradedami vartoti vaistai žiurkėms (Harris et al, 2005).

Mūsų grupė, naudodama ikiklinikinį MRT metodą, neseniai įrodė, kad OX₁R, o ne OX₂R selektyviai moduliuoja smegenų smegenų smegenų sritį ir žievės dalį.Gozzi et al, 2011). Šie duomenys patvirtina ir pratęsia ankstesnes išvadas, kad OX₁R vaidina vaidmenį apdorojant atlygį ir skatinant narkotikų elgesį (Boutrel et al, 2005; Lawrence'as et al, 2006; olandas et al, 2008; Kalvis et al, 2010). Taigi, norint įvertinti, ar OX sukelia slopinamąjį poveikį BE, reikės atlikti papildomą darbą₁R antagonistai yra susiję su jų įtaka streso ar atlygio mechanizmams arba abiem.

Apibendrinant galima pasakyti, kad šio tyrimo rezultatai, gauti naudojant tris OXR antagonistus, turinčius skirtingą selektyvumą OX₁R vs OX₂R aiškiai parodė skirtingą OXR vaidmenį kontroliuojant BE epizodus ir keičiant miegą. Mūsų duomenys patvirtino pagrindinį OX vaidmenį₂R mechanizmai miego valdyme. Be to, jie pirmą kartą parodo, kad OX₁R mechanizmai vaidina svarbų vaidmenį kontroliuojant BE epizodus. Šios išvados rodo, kad tikslinga OX₁R galėtų parodyti įdomų naują farmakologinį požiūrį į su BE susijusių sutrikimų gydymą.

Padėka

Dėkojame dr. Charlesui Pickensui už rankraščio stilistinę pataisą.

pastabos

EM-P yra nuolatinis GSK darbuotojas.

Nuorodos

Amerikos psichiatrų asociacija. Psichikos sutrikimų diagnostinis ir statistinis vadovas, IV-TR. Amerikos psichiatrų asociacija: Vašingtone; 2000.
„Appolinario JC“, „Godoy-Matos A“, „Fontenelle LF“, „Carraro L“, „Cabral M“, „Vieira A“ ir kt. Atviras sibutramino tyrimas nutukusiems pacientams, turintiems besaikio valgymo sutrikimą. J Clin psichiatrija. 2000; 63: 8 – 30. [PubMed]
Arunlakshana O, Schild HO. Kai kurie kiekybiniai narkotikų antagonistų naudojimo būdai. Br J Pharmacol Chemother. 1959; 14: 48 – 58. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Avena NM, Bocarsly ME. 2011Dėl smegenų atlygio sistemų, susijusių su valgymo sutrikimais, reguliavimas: neurocheminė informacija iš gyvūninės mitybos sutrikimų modelių, nervinės bulimijos ir anorexia nervosa neuropharmacologye-pub modelių prieš spausdinant 27. Lapkritis 2011. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Avena NM, Rada P, Hoebel BG. Cukraus priklausomybės įrodymai: pertrūkių pernelyg didelio cukraus vartojimo elgesio ir neurocheminis poveikis. Neurosci Biobehav Rev. 2008; 32: 20 – 39. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Bello NT“, Hajnal A. Dopamino ir besaikis valgymo elgesys. „Pharmacol Bioichem Behav“. 2010; 97: 25 – 33. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Bonci A, Borgland S. Oreksino / hipokretino ir CRF vaidmuo formuojant nuo narkotikų priklausomą sinapsinį plastiškumą mezolimbinėje sistemoje. Neurofarmakologija. 2009; 56: 107 – 111. [PubMed]
„Borgland SL“, „Taha SA“, „Sarti F“, laukai HL, „Bonci A.“ VTA oreksinas A yra labai svarbus norint sukelti sinapsinį plastiškumą ir elgsenos jautrinimą kokainui. Neuronas. 2006; 49: 589 – 601. [PubMed]
„Boutrel B“, „Kenny PJ“, „Specio SE“, „Martin-Fardon R“, „Markou A“, „Koob GF“ ir kt. Hipokretino vaidmuo tarpininkaujant streso sukeltam kokaino elgesio atstatymui. Proc Natl Acad Sci JAV. 2005; 102: 19168 – 19173. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Brandi PE, „Hill LA“, „Zheng W“, „Scolnick EM“. Inozitolio fosfatų scintiliacijos artumo tyrimas ląstelių ekstraktuose: didelio baltymo receptorių aktyvacijos pralaidumo matavimas. Analinis biochem. 2003; 313: 311 – 318. [PubMed]
Brisbare-Roch C, Dingemanse J, Koberstein R, Hoever P, Aissaoui H, Flores S ir kt. Miego skatinimas nukreipiant žiurkių, šunų ir žmonių oreksino sistemą. Nat Med. 2007; 13: 50 – 155. [PubMed]
„Broft AI“, „Berner LA“, „Martinez D“, „Walsh BT“. Nervinė bulimija ir striatomos dopamino disreguliacijos įrodymai: koncepcijos apžvalga. Physiol Behav. 2011; 104: 122 – 127. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Carter WP, Hudson JI, Lalonde JK, Pindyck L, Mcelroy SL, Popiežius HG., Jr Farmakologinis gydymas apsinuodijimo valgymo sutrikimais. Int J Valgymo sutrikimas. „2003“; „34“ (tiekiama: „S74 – S88“. [PubMed]
Casonas AM, Smith R. J., Tahsili-Fahadanas P, „Moorman DE“, „Sartor GC“, „Aston-Jones G.“ Oreksino / hipokretino vaidmuo ieškant atlygio ir priklausomybei: pasekmės nutukimui. Physiol Behav. 2010; 100: 419 – 428. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Chemelli RM, Willie JT, Sinton CM, Elmquist JK, Scammell T, Lee C ir kt. Narkolepsija pelėms, gaunamoms iš oreksino išstūmimo: miego reguliavimo molekulinė genetika. Ląstelė. 1999; 98: 437 – 451. [PubMed]
Cifani C, Polidori C, Melotto S, Ciccocioppo R, Massi MA. Ikiklinikinis besaikio valgymo modelis, atsirandantis laikantis dietų ir laikantis streso maisto srityje: sibutramino, fluoksetino, topiramato ir midazolamo poveikis. Psichofarmakologija. 2009; 204: 113 – 125. [PubMed]
„Corwin R“, „Avena NM“, Boggiano MM. Jausmas ir atlygis: trijų žiurkių perdėto valgymo modelių perspektyva. Physiol Behav. 2011; 104: 87 – 97. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Crowther JH, Sanftner J, Bonifazi DZ, aviganis KL. Kasdieninio vargo vaidmuo besaikio valgymo metu. Int J Valgymo sutrikimas. 2001; 29: 449 – 454. [PubMed]
de Lecea L, Kilduff TS, Peyron C, Gao X, Foye PE, Danielson PE ir kt. Hipokretinai: hipotalamui specifiniai peptidai, turintys neuroekscitacinį aktyvumą. Proc Natl Acad Sci JAV. 1998; 95: 322 – 327. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Devlin MJ“, „Yanovski SZ“, „Wilson GT“. Nutukimas: ką turi žinoti psichinės sveikatos specialistai. Am J psichiatrija. 2000; 157: 854 – 866. [PubMed]
Di Fabio R, Pellacani A, Faedo S, Roth A, Piccoli L, Gerrard P ir kt. Naujo dvigubo oreksino 1 ir oreksino 2 receptorių antagonisto, naudingo miego sutrikimams gydyti, atradimo procesas ir farmakologinis apibūdinimas. „Biorg Med Chem Lett“. 2011; 21: 5562 – 5567. [PubMed]
Dugovic C, Shelton JE, Aluisio LE, Fraser IC, Jiang X, Sutton SW ir kt. Oreksino-1 receptorių blokada silpnina oreksino-2 receptorių antagonizmo sukeltą miego skatinimą žiurkėms. J Pharmacol Exp Ther. 2009; 330: 142 – 151. [PubMed]
„Fassino S“, „Leombruni P“, „Pierò A“, „Abbate-Daga G“, „Giacomo Rovera G.“ nuotaika, nusiteikimas valgyti ir pykčio nutukusioms moterims, turinčioms ir be apsivalymo. J Psychosom Res. 2003; 54: 559 – 566. [PubMed]
Foulds Mathes W, Brownley KA, „Mo X“, „Bulik CM“. Nevalgymo biologija. Apetitas. 2009; 52: 545 – 553. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Freemanas LM, Gil KM. Kasdienis stresas, susidorojimas ir dietinis suvaržymas per daug valgant. Int J Valgymo sutrikimas. 2004; 36: 204 – 212. [PubMed]
„Gearhardt AN“, „Corbin WR“, „Brownell KD“. Priklausomybė nuo maisto: priklausomybės diagnostinių kriterijų tyrimas. J nark. Med. 2011a; 3: 1 – 7. [PubMed]
„Gearhardt AN“, „Yokum S“, „Orr PT“, „Stice E“, „Corbin WR“, „Brownell KD“. Neuroniniai priklausomybės nuo maisto santykiai. Arch Gen psichiatrija. 2011b; 68: 808 – 816. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Auksinė MS, „Frost-Pineda K“, „Jacobs WS“. Persivalgymas, per didelis valgymas ir valgymo sutrikimai kaip priklausomybės. Psichiatras Ann. 2003; 33: 112 – 116.
Gozzi A, Turrini G, Piccoli L, Massagrande M, Amantini D, Antolini M ir kt. Funkcinis magnetinio rezonanso tomografija atskleidžia skirtingus nervinius substratus, susijusius su oreksino-1 ir oreksino-2 receptorių antagonistų poveikiu. „PLoS One“. 2011; 6: e16406. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Grucza RA, Przybeck TR, Cloninger CR. Nepilnaverčio valgymo sutrikimo paplitimas ir koreliacijos bendruomenės imtyje. Compr psichiatrija. 2007; 48: 124 – 131. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Harris GC, Aston-Jones G. Arouzija ir atlygis: oreksino funkcijos dichotomija. Tendencijos Neurosci. 2006: 29: 571 – 577. [PubMed]
Harrisas GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Šoninių hipotalaminių oreksinų neuronų vaidmuo. Gamta. 2005: 437: 556 – 559. [PubMed]
Haynes AC, Jackson B, Chapman H, Tadayyon M, Johns A, Porter RA ir kt. Selektyvus oreksino-1 receptorių antagonistas sumažina žiurkių patinų ir patelių maisto vartojimą. Regul Pept. 2000; 96: 45 – 51. [PubMed]
Širdis AC. Nevalgymas ir bulimija: galimos etiologijos ir patofiziologijos įžvalgos per genetinius epidemiologinius tyrimus. Biolo psichiatrija. 1998; 44: 1208 – 1209. [PubMed]
„Hoebel BG“. Smegenų neurotransmiteriai atsilygina maistui ir vaistams. Am J Clin mityba. „1985“; „42“ (atsargos: 1133 – 1150. [PubMed]
Hollander JA, Lu Q, Cameron MD, Kamenecka TM, Kenny PJ. Insulinis hipokretino perdavimas reguliuoja atlygį už nikotiną. Proc Natl Acad Sci JAV. 2008; 105: 19480 – 19485. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Hudson JI, Hiripi E, popiežius HG, Jr, Kessler RC. Valgymo sutrikimų paplitimas ir koreliacijos nacionaliniame gretutinių ligų tyrime. Biolo psichiatrija. 2007; 61: 348 – 358. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Ifland JR, Preuss HG, Marcus MT, Rourke KM, Taylor WC, Burau K ir kt. Rafinuotas maisto priklausomumas: klasikinis medžiagų vartojimo sutrikimas. Med hipotezės. 2009: 72: 518 – 526. [PubMed]
Kenakinas T, Jenkinson S, Watson C. Neapsakomų antagonistų stiprumo ir molekulinio veikimo mechanizmo nustatymas. J Pharmacol Exp Ther. 2006; 319: 710 – 723. [PubMed]
Kenny PJ. Įprasti nutukimo ir narkomanijos ląstelių ir molekuliniai mechanizmai. Nat Rev Neurosci. 2011; 12: 638 – 651. [PubMed]
„Koob GF“. Smegenų streso sistemos vaidmuo priklausomybėje. Neuronas. 2008; 59: 11 – 34. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Kuwaki T. Orexin emocinį stresą susieja su autonominėmis funkcijomis. „Auton Neurosci“. 2011; 161: 20 – 27. [PubMed]
Javaras KN, popiežius HG, Lalonde JK, Roberts JL, Nillni YI, Laird NM ir kt. Didelis valgymo sutrikimas kartu su psichiniais ir medicininiais sutrikimais. J Clin psichiatrija. 2008; 269: 266 – 273. [PubMed]
Johnson PL, Truitt W, Fitz SD, Minick PE, Dietrich A, Sanghani S ir kt. Pagrindinis oreksino vaidmuo panikos srityje. Nat Med. 2010; 16: 111 – 115. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Johnson PM, Kenny PJ. Dopamino D2 receptoriai, priklausantys priklausomybei nuo atlygio disfunkcijos ir priverstinio valgymo nutukusioms žiurkėms. Nat Neurosci. 2010: 13: 635 – 641. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Jupp B, Krivdic B, Krstew E, Lawrence AJ. Orexin1 receptorių antagonistas SB-334867 žiurkėms išskiria alkoholio ir sacharozės motyvacines savybes. „Brain Res. 2011; 1391: 54 – 59. [PubMed]
Lawrence AJ, Cowen MS, Yang HJ, Chen F, Oldfield B. Oreksinų sistema reguliuoja alkoholio paieškas žiurkėms. Br J Pharmacol. 2006; 148: 752 – 759. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Lu XY, Bagnol D, Burke S, Akil H, Watson SJ. Skirtingas OX1 ir OX2 oreksino / hipokretino receptorių pasiuntinių RNR pasiskirstymas ir reguliavimas smegenyse nevalgius. Hormas Behavas. 2000; 37: 335 – 344. [PubMed]
Malherbe P, Borroni E, Pinard E, Wettstein JG, Knoflach F. Almoreksanto, dvigubo oreksino 1 receptoriaus (OX1) / oreksino 2 receptoriaus (OX2) antagonisto biocheminis ir elektrofiziologinis apibūdinimas: palyginimas su selektyviais OX1 ir antagonistais. Mol Pharmacol. 2; 2009: 76 – 618. [PubMed]
Marcus JN, Aschkenasi CJ, Lee CE, Chemelli RM, Saper CB, Yanagisawa M ir kt. Oreksino receptorių 1 ir 2 diferencinė raiška žiurkių smegenyse. J Comp Neurol. 2001; 435: 6 – 25. [PubMed]
Martin-Fardon R, Zorrilla EP, Ciccocioppo R, Weiss F. Įgimto ir narkotikų sukelto smegenų streso ir susijaudinimo sistemų reguliavimo sutrikimų priklausomybė vaidmuo: susitelkimas į kortikotropiną atpalaiduojantį faktorių, nociceptino / orfanino FQ ir oreksiną / hipokretiną. „Brain Res. 2010; 1314: 145 – 161. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
McAtee LC, Sutton SW, Rudolph DA, Li X, Aluisio LE, Phuong VK ir kt. Nauji pakeisti 4-fenil- [1,3] dioksanai: stiprūs ir selektyvūs oreksino receptorių 2 (OX2R) antagonistai. Bioorg Med Chem Lett. 2004; 14: 4225 – 4229. [PubMed]
„McElroy SL“, „Guerdjikova AI“, „Martens B“, „Keck PE“, Jr, popiežius HG, „Hudson JI“. Antiepilepsinių vaistų vaidmuo valgant valgymo sutrikimus. CNS narkotikai. 2009; 23: 139 – 156. [PubMed]
„McElroy SL“, „Hudson JI“, „Capece JA“, „Beyers K“, „Fisher AC“, „Rosenthal NR“. Topiramatas, skirtas gydyti su nutukimu susijusius besaikio valgymo sutrikimus: placebu kontroliuojamas tyrimas. Biolo psichiatrija. 2007; 61: 1039 – 1048. [PubMed]
Nair SG, Golden SA, Shaham Y. Hipokretino 1 receptorių antagonisto SB 334867 diferencinis poveikis labai riebaus maisto savaiminiam vartojimui ir maisto, kurio siekiama žiurkėms, atstatymui. Br J Pharmacol. 2008; 154: 406 – 416. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Pelchat ML“, „Johnson A“, „Chan R“, „Valdez J“, „Ragland JD“. Troškimo vaizdai: maisto troškimo aktyvinimas fMRI metu. „NeuroImage“. 2004; 23: 1486 – 1493. [PubMed]
Perello M, Sakata I, Birnbaum S, Chuang JC, Osborne-Lawrence S, Rovinsky SA ir kt. Ghrelin padidina naudingų dietų, kurių metu gaunama daug riebalų, vertę nuo oreksino. „Biol Psych“. 2010; 67: 880 – 886. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Polivy J, Zeitlin SB, Herman CP, Beal AL. Maisto ribojimas ir besaikis valgymas: buvusio karo belaisvio tyrimas. J nenormalus psicholas. 1994; 103: 409 – 411. [PubMed]
Skaitykite KD, Braggio S. Įvertinus smegenų frakciją ankstyvame narkotikų atradime. Ekspertų nuomonė Vaistas Metab Toxicol. 2010; 6: 337 – 344. [PubMed]
Richards JK, Simms JA, Steensland P, Taha SA, Borgland SL, Bonci A ir kt. Oreksino-1 / hipokretino-1 receptorių slopinimas slopina yohimbino sukeltą etanolio ir sacharozės atkūrimą Long-Evans žiurkėms. Psichofarmakologija. 2008; 199: 109 – 117. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Rodgers RJ, Halford JC, Nunes de Souza RL, Canto de Souza AL, Piper DC, Arch JR ir kt. SB-334867, selektyvusis oreksino-1 receptorių antagonistas, padidina elgesio sotumą ir blokuoja hiperfaginį oreksino-A poveikį žiurkėms. Eur J Neurosci. 2001; 13: 1444 – 1452. [PubMed]
„Sakamoto F“, „Yamada S“, „Ueta Y“. Centralizuotai vartojamas oreksinas A aktyvina kortikotropiną atpalaiduojantį faktorių, kuriame yra neuronai hipotalaminiame paraventrikuliniame branduolyje ir žiurkių centriniame amygdaloidiniame branduolyje: galimas centrinių oreksinų dalyvavimas streso suaktyvintuose centriniuose CRF neuronuose. Reg Pept. 2004; 118: 183 – 191. [PubMed]
Sakurai T. Oreksino (hipokretino) nervinė grandinė: miego ir budrumo palaikymas. Nat Rev Neurosci. 2007; 8: 171 – 181. [PubMed]
„Sakurai T“, „Amemiya A“, „Ishii M“, „Matsuzaki I“, „Chemelli RM“, „Tanaka H“ ir kt. Oreksinai ir oreksinų receptoriai: hipotalaminių neuropeptidų ir su G baltymais sujungtų receptorių šeima, reguliuojanti šėrimo elgesį. Ląstelė. 1998; 92: 573 – 585. [PubMed]
„Sharf R“, „Sarhan M“, „Brayton CE“, didžėjus „Guarnieri“, Taylor JR, „DiLeone RJ“. Oreksino signalizacija per OX1R tarpininkauja veikiančiajam, reaguojant į maisto sustiprinimą. Biolo psichiatrija. 2010; 67: 753 – 760. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Shoblock JR“, „Welty N“, „Aluisio L“, „Fraser I“, „Motley ST“, „Morton K“ ir kt. Dėl selektyvaus oreksino-2 receptorių blokavimo susilpnėja savarankiškas etanolio vartojimas, teikiama pirmenybė ir vėl pradedamas vartoti. Psichofarmakologija. 2011; 215: 191 – 203. [PubMed]
Smith RJ, Tahsili-Fahadan P, Aston-Jones G. Orexinas / hipokretinas yra būtini ieškant konteksto priklausomo kokaino. Neurofarmakologija. 2010; 58: 179 – 184. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
„Stice E“, „Agras WS“, „Telch FC“, „Halmi“ KA, „Mitchell JE“, „Wilson T.“ Subtyping moterys, turinčios mitybos sutrikimų, kartu laikydamosi dietų, daro neigiamą įtaką matmenims. Int J Valgymo sutrikimas. 2001; 30: 11 – 27. [PubMed]
„Trivedi P“, „Yu H“, „MacNeil DJ“, „Van der Ploeg LH“, „Guan XM“. Oreksino receptorių mRNR pasiskirstymas žiurkės smegenyse. FEBS Lett. 1998; 438: 71 – 75. [PubMed]
Uramura K, Funahashi H, Muroya S, Shioda S, Takigawa M, Yada T. Orexin-a aktyvina fosfolipazės C ir baltymų kinazės C tarpininkaujamą Ca²⁺ signalizavimas dopamino ventralinės pagrindinės srities neuronuose. „NeuroReport“. 2001; 12: 1885 – 1889. [PubMed]
„Volkow ND“, „Wise RA“. Kaip narkomanija gali padėti mums suprasti nutukimą. Nat Neurosci. 2005; 8: 555 – 560. [PubMed]
Yagerio J. Binge'o valgymo sutrikimas: geresnių gydymo būdų paieška. Am J psichiatrija. 2008; 165: 4 – 6. [PubMed]
„Yanovski SZ“. „2003“ per didelis valgymo sutrikimas ir nutukimas: ar valgymo sutrikimo gydymas galėtų teigiamai paveikti nutukimo epidemiją. Int J Valgymo sutrikimas. „2003“; „34“ (tiekiama: „S117 – S120“. [PubMed]
„Walsh BT“, Devlin MJ. Valgymo sutrikimai: progresas ir problemos. Mokslas. 1998; 280: 1387 – 1390. [PubMed]
Wang GJ, Geliebter A, Volkow ND, Telang FW, Logan J, Jayne MC ir kt. Padidėjęs striatos dopamino išsiskyrimas stimuliuojant maistą, esant per dideliam valgymo sutrikimui. Nutukimas. 2011; 19: 1601 – 1608. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
Wardle J, Steptoe A, Oliver G, Lipsey Z. Stresas, dietos ribojimas ir maisto vartojimas. J Psychosom Res. 2000; 48: 195 – 202. [PubMed]
Vandenys A, A kalnas, Waller G. Vidinis ir išorinis per daug nervinio valgymo epizodų anekdotai grupėje moterų, sergančių nervine bulimija. Int J Valgymo sutrikimas. 2001; 29: 17 – 22. [PubMed]
Wilfley DE, Crow SJ, Hudson JI, Mitchell JE, Berkowitz RI, Blakesley V ir kt. Sibutramino valgymo sutrikimų tyrimo grupė. Sibutramino veiksmingumas gydant per didelę mitybos sutrikimą: atsitiktinių imčių daugiacentris placebu kontroliuojamas dvigubai aklas tyrimas. Am J psichiatrija. 2008; 165: 51 – 58. [PubMed]
Willie JT, Chemelli RM, Sinton CM, Yanagisawa M. Valgyti ar miegoti? Oreksinas reguliuojant maitinimą ir budrumą. Annu Rev Neurosci. 2001; 24: 429 – 458. [PubMed]
„Wolff GE“, „Crosby RD“, „Roberts JA“, „Wittrock DA“. Didelio streso, nuotaikos, susitvarkymo ir valgymo elgesio skirtumai, pasireiškiantys besaikio valgymo ir nevalgymo koledžo moterims. Narkomanas elgesys. 2000; 25: 205 – 216. [PubMed]
Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Oreksinas, signalizuojantis ventralinėje pagrindinėje srityje, reikalingas esant dideliam riebalų apetitui, kurį sukelia opioidų stimuliuojama branduolio perteklius. J Neurosci. 2007; 27: 11075 – 11082. [PubMed]