CRF receptoriai branduolyje accumbens moduliuoja partnerių pirmenybę prerijų voluose (2007)

Horm Behav. Autoriaus rankraštis; pasiekiamas PMC 10 m. gruodžio 2007 d.

Paskelbta galutine redaguota forma:

PMCID: PMC2128037

NIHMSID: NIHMS22254

Galutinę leidėjo redaguotą šio straipsnio versiją galite rasti tinklalapyje Horm Behav

Žr. Kitus PMC straipsnius citata paskelbtas straipsnis.

Eiti į:

Abstraktus

Naujausi įrodymai rodo, kad kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus (CRF) vaidmuo reguliuojant porų ryšį prerijų pelėnams. Anksčiau mes parodėme, kad monogaminių ir nemonogaminių pelėnų rūšių 1 tipo CRF receptoriai (CRF) pasiskirsto labai skirtingai.1) ir 2 tipo CRF receptorius (CRF2) smegenyse ir tas CRF1 ir CRF2 receptorių tankis nucleus accumbens (NAcc) yra susijęs su socialine organizacija. Monogaminių prerijų ir pušinių pelėnų 1 tipo CRF receptorių (CRF1), ir žymiai didesnis 2 tipo (CRF2). Čia pranešame, kad CRF mikroinjekcijos tiesiai į NAcc pagreitina prerijų pelėnų patinų partnerio pirmenybės formavimąsi. Kontrolinės CSF injekcijos į NAcc ir CRF į uodegą-putameną nepalengvino partnerio pasirinkimo. Taip pat CRF injekcijos į nemonogaminių pievų pelėnų NAcc taip pat nepalengvino partnerio pasirinkimo. Prerijų pelėnams šis CRF palengvinimo efektas buvo užblokuotas kartu suleidus bet kurį CRF.1 arba CRF2 receptorių antagonistai į NAcc. Imunocitocheminis dažymas CRF ir Urocortin-1 (Ucn-1), du endogeniniai CRF ligandai1 arba CRF2 receptorių smegenyse, atskleidė, kad NAcc buvo CRF, bet ne Ucn-1, imunoreaktyvių skaidulų. Tai patvirtina hipotezę, kad vietinis CRF išsiskyrimas į NAcc gali suaktyvinti CRF1 arba CRF2 receptoriai regione. Apibendrinant, mūsų rezultatai atskleidžia naują sukauptų CRF sistemų vaidmenį socialiniame elgesyje.

Raktiniai žodžiai: nucleus accumbens, prisirišimas, CRF1, CRF2, kortikotropiną atpalaiduojantis faktorius, kortikotropiną atpalaiduojantis hormonas, pelėnas, neuropeptidų receptoriai, porinis ryšys, socialinis elgesys, monogamija, rūšių skirtumai

Kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus (CRF) sistema yra susijusi su neurobiologija, sukeliančia stresą ir nerimą, tačiau daug mažiau žinoma apie jos vaidmenį socialiniame elgesyje. Mikrotininiai graužikai pasižymi įvairiomis socialinėmis organizacijomis, todėl siūlo puikų lyginamąjį požiūrį tiriant socialinio elgesio neurobiologiją.Youngas ir Wangas, 2004 m). Prerija (Microtus ochrogaster) ir pušiniai pelėnai (Microtus pinetorum) yra monogamiški; Suaugę partneriai sukuria ilgalaikius selektyvius porų ryšius lauke ir laboratorijoje (Getzas, Carteris ir Gavishas, ​​1981 m; Salo, Shapiro ir Dewsbury, 1993 m). Priešingai, glaudžiai susijusi pieva (Microtus pennsylvanicus) ir kalnų pelėnai (Microtus montanus) yra palaidi ir vieniši (Gruder-Adams ir Getz, 1985; Shapiro ir Dewsbury, 1990). Ankstesni tyrimai atskleidė, kad oksitocino ir vazopresino neuropeptidų receptorių pasiskirstymas smegenyse yra atsakingas už rūšių skirtumus socialinėje organizacijoje.Insel ir Shapiro, 1992; Insel, Wang ir Ferris, 1994 m; Limas, Wangas, Olazabalas, Renas, Terwilligeris ir Youngas, 2004b). Tačiau naujesni įrodymai rodo, kad kita neuropeptidų sistema, CRF, taip pat moduliuoja porų ryšį tarp prerijų pelėnų.DeVries, Guptaa, Cardillo, Cho ir Carteris, 2002 m).

Yra palyginti nedaug tyrimų, nagrinėjančių streso hormonų vaidmenį socialiniame elgesyje. Viename tyrime nustatyta, kad egzogeninio kortikosterono skyrimas prerijų pelėnų patinams palengvino porų ryšių su nauja patele susidarymą.DeVriesas, DeVriesas, Taymansas ir Carteris, 1996 m). Vėliau atliktas tyrimas parodė, kad CRF, vartojamas intracerebroventrikuliniu būdu (icv), palengvino prerijų pelėnų patinų partnerio pasirinkimą, net ir vartojant labai mažas dozes, kurios, atrodo, neturėjo įtakos judėjimo aktyvumui ar nerimą primenančiam elgesiui.DeVries ir kt., 2002 m). Be to, partnerio pasirinkimas buvo užblokuotas icv vartojant alfa-spiralinį CRF, kuris neselektyviai blokuoja CRF receptorius smegenyse.DeVries ir kt., 2002 m). Šie duomenys rodo, kad CRF gali atlikti vaidmenį formuojant porų ryšį per nuo nerimo nepriklausomus mechanizmus, dalyvaujant centrinio veikimo smegenų receptoriams. Tačiau icv infuzuotas CRF gali paveikti bet kokį smegenų regionų skaičių, kad palengvintų partnerio pasirinkimą, ir šiuo metu nežinoma, kurie smegenų regionai yra konkrečiai susiję.

Kadangi CRF sistema buvo susijusi su porų ryšių formavimo reguliavimu, mes prognozavome, kad šios sistemos neuroninės grandinės skirsis tarp monogaminių ir nemonogaminių rūšių. Anksčiau mes parodėme, kad nors CRF mRNR ir peptido pasiskirstymas tarp pelėnų rūšių atrodo labai konservuotas, 1 ir 2 tipų CRF receptorių pasiskirstymas (CRF)1 ir CRF2) dramatiškai skiriasi visose keturiose pelėnų rūšyse, turinčiose skirtingas socialines organizacijas (Limas, Nairas ir Youngas, 2005 m; Limas, Tsivkovskaja, Bai, Youngas ir Ryabininas, 2006 m). Atrodė, kad jungimasis prie receptorių koreliuoja su monogamine socialine struktūra keliuose smegenų regionuose; tačiau tik nucleus accumbens (NAcc) nuosekliai atsiskyrė tiek su monogaminėmis pelėnų rūšimis, tiek su abiem nemonogaminėmis pelėnų rūšimis. Monogaminių prerijų ir pušinių pelėnų 1 tipo CRF receptorių (CRF 1), ir žymiai didesnis 2 tipo (CRF2) rišantis, NAcc nei nemonogaminiai pievų ir kalnų pelėnai (Lim ir kt., 2005).

Remiantis mūsų neuroanatominiais tyrimais, rodančiais CRF rūšių skirtumus1 ir CRF2 NAcc tankis, iškėlėme hipotezę, kad CRF veiksmas, ypač NAcc, buvo labai svarbus monogaminiam socialiniam elgesiui prerijų pelėnams. Pirma, mes nustatėme, ar CRF, švirkščiamas tiesiai į NAcc, gali palengvinti partnerio pasirinkimo formavimąsi po sutrumpinto bendro gyvenimo su partneriu laiko. Toliau identišką eksperimentą atlikome su nemonogaminiais pievų pelėnais. Tada mes manipuliavome CRF1 ir CRF2 NAcc naudojant farmakologinius antagonistus, siekiant nustatyti jų santykinį indėlį į CRF palengvintą partnerio pirmenybės formavimąsi. Galiausiai, parodome dviejų endogeninių CRF ligandų imunoreaktyvaus dažymo įrodymus1 ir CRF2 receptoriai smegenyse, CRF- ir Urocortin-1 (Ucn-1), prerijų pelėnų NAcc. Šių tyrimų rezultatai pirmą kartą parodo, kad CRF, veikdamas NAcc, gali skatinti socialinį prisirišimą ir, be to, tiek CRF.1 ir CRF2 Šiame procese dalyvauja receptoriai.

METODAI

Tematika

Gyvūnai buvo suaugę, seksualiai naivūs, prerijų patinai ir patelės (70–100 dienų amžiaus) iš Floridos valstijos universiteto laboratorinės veisimosi kolonijos, kurios iš pradžių buvo kilę iš lauke sugautų pelėnų Ilinojaus valstijoje, JAV. Suaugę lytiškai naivūs pievų pelėnai buvo iš Emory universiteto laboratorinės veisimosi kolonijos. Po nujunkymo 21 dienos amžiaus tiriamieji buvo apgyvendinti tos pačios lyties brolių ir seserų porose arba trijulėse ir ad libitum buvo tiekiamas vanduo ir Purina triušio maistas. Visi narveliai buvo laikomi 14:10 šviesos ir tamsos ciklu, kai temperatūra buvo 20 °C. Duomenys iš 87 prerijų pelėnų patinų buvo įtraukti į CRF farmakologinius eksperimentus, kartu su lygiu skaičiumi stimuliuojančių prerijų pelėnų patelių porų sujungimo tyrimui. Taip pat buvo naudojami 10 pievų pelėnų patinų duomenys, taip pat vienodas stimuliuojančių pievų pelėnų patelių skaičius. CRF imunocitochemijos tyrimuose buvo naudojami aštuoni prerijų pelėnai (n = 4 kiekvienai lyčiai).

CRF palengvinimas partnerio pasirinkimui

Suaugę prerijų pelėnų patinai (n = 31) buvo abipusiai kaniuliuoti į NAcc naudojant stereotaksinius metodus, kaip aprašyta anksčiau (Aragona, Liu, Curtis, Stephan ir Wang, 2003a; Liu ir Wang, 2003). Tiriamieji buvo anestezuoti natrio pentobarbitaliu (2.5 mg 40 g kūno svorio), o 26 dydžio dvišalės kreipiamosios kaniulės (Plastics One, Roanoke, VA), nukreiptos į NAcc, buvo implantuotos stereotaksiniu būdu (priekinis 1.7 mm, dvipusis ±1 mm, ventralinis -4.0). mm iki bregmos). Kontrolinės injekcijos (n = 6) buvo nukreiptos į uodegą-putameną (priekinis 1.7 mm, dvipusis ±1 mm, ventralinis -2.5 mm iki bregmos). Po 3–5 dienų pasveikimo tiriamieji gavo mikroinjekcijas (200 nl vienoje pusėje) arba dirbtinio likvoro, arba vaisto, ištirpinto likvore. Injekcijos buvo padarytos 33 dydžio adata, kuri buvo 1 mm žemiau kreipiančiosios kaniulės į tikslinę sritį. Adata buvo prijungta prie Hamilton švirkšto (Hamilton, Reno, NV) per polietileno-20 vamzdelį, per kurį tirpalas lėtai buvo infuzuojamas pompa (MasterFlex L/S standartinė pavara, modelis 7016-21) 200 nl greičiu. /min, vienai pusei. Žmogaus/žiurkės CRF buvo gautas iš Sigma (St. Louis, MO).

Gyvūnai buvo suskirstyti į vieną iš keturių grupių: CSF kontrolė (n = 7), 0.01 pg CRF į NAcc (n = 9), 0.1 pg CRF į NAcc (n = 15) ir 0.1 pg CRF į uodeginį putameną (n = 6). Caudate-putamen (CP) yra smegenų sritis, esanti tik nugaroje nuo NAcc, ir jame taip pat yra CRF.2 receptorius, taigi tarnauja kaip anatominė CRF poveikio kontrolės sritis. Kiekvienas gyvūnas gavo dvišales 200 nl tūrio injekcijas prieš sutrumpintą 6 valandų gyvenimą kartu su nauja patele. 0.01 pg CRF koncentracija 200 nL yra 10 nM, o 0.1 pg CRF koncentracija 200 nL yra 100 nM. Apskaičiuotas Ki už CRF1 yra 11 nM, o apskaičiuotas Ki CRF2 yra 25 nM, palyginti su 125aš sauvagine (Primusas, Jevičius, Baltazaras ir Galageris, 1997 m). Bendras gyvenimas 6 valandas be poravimosi nuosekliai nesukelia partnerio pirmenybės, kaip buvo įrodyta ankstesniuose tyrimuose (Aragona ir kt., 2003a; Aragona, Liu, Yu, Curtis, Detwiler, Insel ir Wang, 2006 m.). Iš karto po bendro gyvenimo tiriamieji buvo tikrinami dėl partnerio pasirinkimo.

Partnerio pasirinkimo testą sudarė patinas patalpinimas į 3 kamerų aparatą, kuriame partnerė buvo pririšta viename narve, o nauja tokio pat amžiaus ir socialinę seksualinę patirtį turinti patelė („nepažįstama“) buvo pririšta antrame narve, kaip anksčiau. aprašyta (Carteris, DeVriesas ir Getzas, 1995 m). Kiekviena stimuliuojanti moteris buvo naudojama dviejuose atskiruose partnerio pasirinkimo testuose, vieną kartą kaip partneris ir dar kartą kaip kito tiriamojo nepažįstamoji, todėl kiekviena moteris per 20 valandų bendro gyvenimo buvo lygiavertė socialiniu ir seksualiniu poveikiu. Tiriamiesiems buvo leista laisvai klaidžioti visame aparate, o laikas, praleistas bendraujant su partneriu ir nepažįstamuoju, buvo kiekybiškai įvertintas per 3 valandų testą.

Lokomotorinis aktyvumas buvo matuojamas partnerio pirmenybės testo metu, siekiant nustatyti, ar pasirinktos CRF gydymo dozės paveikė bendrą lokomotorinį aktyvumą ar į nerimą panašų elgesį, kaip aprašyta anksčiau (Hotta, Shibasaki, Arai ir Demura, 1999 m). Narvų kirtimų skaičius per abu partnerio pirmenybės aparato tunelius buvo įvertintas naudojant infraraudonųjų spindulių detektorius. Trijuose partnerio pirmenybės aparato narveliuose yra keturi infraraudonųjų spindulių pluoštai, o du pluoštai riboja kiekvieną tunelį, jungiantį du narvus. Bendras nuotraukų spindulių pertraukų skaičius buvo susumuotas kiekvienam gyvūnui per trijų valandų laikotarpį. Atlikus elgesio testus, tiriamieji buvo paaukoti, o injekcijos vietos buvo patikrintos histologiškai.

Suaugę pievų pelėnų patinai (n=10) taip pat buvo išbandyti dėl CRF palengvinimo partnerio pasirinkimo. Gyvūnai buvo kanuliuojami abipusiai į NAcc, kaip aprašyta aukščiau, ir atsitiktinai priskirti vienai iš dviejų grupių: CSF kontrolei (n = 4) arba CRF 0.1, 6 pg (n = XNUMX). Bendro gyvenimo ir partnerio pasirinkimo testai buvo atlikti tiksliai taip, kaip aprašyta aukščiau prerijų pelėnams. Suaugę pievų pelėnų patinai iš mūsų kolonijos paprastai nesudaro partnerio pirmenybės, kai gyvena kartu su patele (Lim ir kt., 2004b).

CRF1– ir CRF2- selektyvi farmakologija ir partnerio pirmenybė

Suaugę prerijų pelėnai buvo kanuliuojami abipusiai į NAcc, kaip aprašyta aukščiau ir suskirstyti į vieną iš trijų grupių: 0.1 pg CRF (n = 10), 0.1 pg CRF plius 10 pg CRF1 antagonistas (CP-154,526 25) (n = 0.1) ir 10 pg CRF plius XNUMX pg CRF2 antagonistas (anti-sauvagine-30) (n = 15). Anti-sauvagine-30 buvo gautas iš Sigma (St. Louis, MO), o CP-154,526 iš Michael Owens, Ph.D. (Emory universitetas, Atlanta, GA). 10 pg CRF koncentracija1 antagonisto (CP-154,526) 200 nL tirpale yra 100 nM, o 10 pg CRF koncentracija2 antagonisto (anti-sauvagine-30) 200 nL tirpale yra 10 nM. Kiekvienas gyvūnas gavo dvišales 200 nl tūrio injekcijas tiesiai į NAcc prieš sutrumpintą 6 valandų gyvenimą kartu su nauja patele. Iškart po bendro gyvenimo tiriamieji buvo išbandyti dėl partnerio pasirinkimo, kaip aprašyta aukščiau. Atlikus elgesio testus, tiriamieji buvo paaukoti, o injekcijos vietos buvo patikrintos histologiškai. Gyvūnai, kurių kaniuliavimo vietos buvo už NAcc ribų, nebuvo įtraukti į duomenų analizę ir neatsispindėjo bendrame naudotų gyvūnų skaičiuje.

Duomenų analizė

Kiekvieno eksperimento partnerio pirmenybės testo duomenys buvo analizuojami naudojant 2 krypčių ANOVA, kurioje veiksniai buvo stimulas (partneris ar nepažįstamasis) ir gydymas. Be to, Stjudento t testai buvo naudojami lyginant laiką, praleistą bendraujant su partneriu ir nepažįstamuoju kiekvienoje gydymo grupėje. Kiekvienam eksperimentui buvo atlikti Bonferroni reikšmingumo lygio pataisymai, siekiant sumažinti I tipo klaidų riziką dėl kelių palyginimų. Vyrai buvo priskirti prie partnerio pirmenybės atsiradusių vyrų, jei bendraudami su partneriu praleido daugiau nei dvigubai daugiau laiko nei su nepažįstamuoju.

Duomenys, surinkti apie lokomotorinį aktyvumą, buvo susumuoti kaip infraraudonųjų spindulių pertraukų skaičius kiekvienam gyvūnui ir apskaičiuotas kiekvienos gydymo grupės vidurkis. Rezultatai buvo analizuojami naudojant vienpusę ANOVA, kai gydymas buvo nepriklausomas veiksnys.

CRF ir Urocortin-1 imunohistochemija

Suaugę prerijų pelėnai nuo 10:00 iki 14:00 buvo giliai anestezuoti izofluranu ir perfuzuoti fiziologiniu tirpalu, po to 2% paraformaldehidu 10 mM (pH 7.4) fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS). Išpjaustytos smegenys buvo fiksuotos per naktį 2% paraformaldehido / PBS tirpale ir apsaugotos nuo krio 30% sacharozės / PBS. Trisdešimties μm storio laisvai plūduriuojančios vainikinės sekcijos buvo supjaustytos kriostate ir apdorotos imunohistochemijai pagal standartinius protokolus (Ryabinin, Criado, Henriksen, Bloom ir Wilson, 1997 m; Weitemier, Tsivkovskaja ir Ryabinin, 2005 m) su pelėnų audinių koregavimais, atliktais ankstesniuose eksperimentuose (Lim ir kt., 2006). Trumpai tariant, endogeninis peroksidazės aktyvumas buvo sustabdytas 15 minučių inkubuojant 0.3, 1% vandenilio peroksidu. Urocortin-2 specifinio antikūno blokavimas buvo atliktas penkias valandas inkubuojant su 0.1% galvijų serumo albuminu, 0.01% heparinu, 100% Triton X-4.5 PBS. CRF specifinių antikūnų blokavimas buvo atliktas penkias valandas inkubuojant su 0.3% ožkos serumu, 100% Triton X-1 PBS. Pirminiai triušio antikūnai, atpažįstantys Urocortin-1 (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), buvo naudojami praskiedus santykiu 5,000:1 15,000. Pirminiai antikūnai, atpažįstantys CRF (Peninsula Laboratories, San Carlos, CA), buvo naudojami praskiedus santykiu 1:XNUMX XNUMX. Pirminiams antikūnams aptikti buvo naudojami biotinilinti antriniai antikūnai prieš triušius (Vector Laboratory Inc., Burlingame, CA). Antriniai antikūnai buvo aptikti naudojant Vectastain ABC rinkinį (Vector), o fermentinis vystymas buvo atliktas naudojant Metal Enhanced DAB rinkinį (Pierce, Rockford, IL, JAV). Imuninio dažymo specifiškumas buvo įvertintas pagal visišką imunoreaktyvumo nebuvimą tose srityse, kuriose nėra žinoma, kad jos ekspresuoja CRF arba Urocortin-XNUMX. Be to, anksčiau buvo atlikti šių antikūnų kontroliniai preabsorbcijos eksperimentai (Bachtell, Weitemier, Galvan-Rosas, Tsivkovskaia, Risinger, Phillips, Grahame ir Ryabinin, 2003 m.).

Kokybinė vaizdo analizė buvo atlikta naudojant sistemą, kurią sudaro Olympus BX40 mikroskopas ir didelės raiškos skaitmeninė vaizdo kamera (Olympus Qcolor3), sujungta su Macintosh asmeniniu kompiuteriu, kuriame veikia OS-X. Vaizdai iš vienos sekcijos, geriausiai atitinkančios gyvūnus kiekviename smegenų regione, buvo renkami skaitmeniniu būdu, esant tuo pačiu apšvietimo intensyvumui. Kadangi NAcc ląstelių kūnuose imunopozityvaus dažymo nepastebėta, imunoreaktyvių neuronų skaičius nebuvo kiekybiškai skaičiuojamas.

REZULTATAI

Farmakologinis manipuliavimas CRF receptoriais NAcc

Anksčiau buvo įrodyta, kad CRF icv infuzija palengvina prerinių pelėnų partnerių pasirinkimą (DeVries ir kt., 2002 m). Remiantis mūsų neuroanatominiais duomenimis, rodančiais CRF rūšių skirtumus1 ir CRF2 NAcc iškėlėme hipotezę, kad NAcc buvo veiksmo vieta, skirta CRF palengvinti partnerio pirmenybę. Ankstesnis tyrimas parodė, kad nuo dozės priklausomas icv CRF vartojimas gali palengvinti prerinių pelėnų patinų partnerių pasirinkimą po sutrumpinto bendro gyvenimo su patele.DeVries ir kt., 2002 m). Remdamiesi šiuo tyrimu, sukūrėme CRF dozes konkrečioms injekcijoms į NAcc. Naudotos dozės, 0.1 pg ir 0.01 pg CRF, ištirpintos 200 nL izotoniniame tirpale (arba atitinkamai 100 nM ir 10 nM), buvo gerokai mažesnės už minimalias efektyvias icv dozes – 0.1 ng ir 1 ng CRF, ištirpintas 1 μL (arba 210 nM ir 2.1 μM atitinkamai) (DeVries ir kt., 2002 m). Nors buvo įrodyta, kad CRF pirmiausia jungiasi su CRF1, jis taip pat jungiasi su CRF2 su dideliu giminingumu (Ki lygus atitinkamai 11 ir 25) (Primus ir kt., 1997).

Bendro duomenų rinkinio analizė naudojant 2 krypčių ANOVA atskleidė reikšmingą pagrindinį stimuliuojančio gyvūno poveikį (F(1,66) = 6.77, p<0.05), tačiau kitų pagrindinių efektų ar sąveikų nenustatyta. Norint nustatyti, kurios grupės mieliau leido laiką bendraudamos su partneriais, o ne su nepažįstamaisiais, buvo atlikti Stjudento t testai su Bonferroni p vertės pataisymais. Kontroliniai prerijų pelėnai su abipuse dirbtinio CSF ​​injekcija į NAcc pertvaros polių arba 0.1 pg CRF į uodegą-putameną, kontaktuodami su partneriu nepraleido žymiai daugiau laiko nei svetimas dirgiklis (p>0.3, Stjudento t testas). , Bonferroni lygis nustatytas ties p<0.01) (Pav. 1A). Prerijų pelėnai, kuriems buvo sušvirkšta mažesne CRF doze, 0.01 pg, turėjo tendenciją praleisti daugiau laiko bendraujant su partneriu nei su nepažįstamuoju (p>0.08, Stjudento t testas, Bonferroni lygis nustatytas ties p<0.01). Priešingai, prerijų pelėnai, gavę dvišalę 10 kartų didesnę CRF dozę, 0.1 pg į NAcc pertvaros polių, kontaktuodami su partneriu praleido žymiai daugiau laiko nei nepažįstamasis (p<0.01, Stjudento t testas, Bonferroni lygio rinkinys esant p<0.01) (Pav. 1A). Be to, nors tik 6 iš 13 kontrolinių gyvūnų pirmenybę teikė partneriui, kuris apibrėžiamas kaip du kartus daugiau laiko bendraujant su partneriu nei nepažįstamasis, 12 iš 15 gyvūnų, gavusių 0.1 pg CRF, pirmenybę teikė partneriui (Pav. 1B). 3 gyvūnai, kurie nerodė partnerio pirmenybės, turėjo stiprių svetimų pageidavimų, o tai greičiausiai prisidėjo prie pagrindinio gydymo poveikio arba sąveikos efekto nebuvimo dvipusėje ANOVA. Taigi, nors CRF infuzijos į NAcc žymiai padidino kontakto su partneriu laiką, palyginti su nepažįstamuoju, bendras kontakto su partneriu laikas nepailgėjo.

1 pav 

Dvišalės CRF mikroinjekcijos į NAcc palengvina prerijų pelėnų patinų partnerio pasirinkimą. (A) Kontroliniai gyvūnai, kurie gavo dirbtinio CSF ​​į NAcc arba 0.1 pg CRF į uodegą-putameną (CP), neteikė reikšmingos pirmenybės partneriui. ...

Dėl dramatiškų rūšių skirtumų CRF1 ir CRF2 NAcc tankis, iškėlėme hipotezę, kad CRF veiksmas NAcc tik palengvins partnerio pirmenybės formavimąsi prerijų pelėnams, o ne nemonogaminiams pievų pelėnams. Iš tiesų, pievų pelėnai, kuriems buvo sušvirkšta CSF arba didelė 0.1 pg CRF dozė, kontaktuodami su partneriu nepraleido žymiai daugiau laiko nei nepažįstamasis (p>0.5, Stjudento t testas) (2 pav).

2 pav 

Dvišalės CRF mikroinjekcijos į NAcc nepalengvina partnerio pirmenybės ne monogaminiams pievų pelėnų patinams. Suaugę pievų pelėnai, kuriems į NAcc buvo sušvirkštas dirbtinis CSF arba 0.1 pg CRF, kontaktuodami su partneriu nepraleido daugiau laiko nei ...

Remiantis rūšių skirtumais CRF1 ir CRF2 pasiskirstymą NAcc, iškėlėme hipotezę, kad tiek CRF1 ir CRF2 moduliuotų partnerio pirmenybės elgesį, galbūt priešingomis kryptimis. Bendro duomenų rinkinio analizė naudojant 2 krypčių ANOVA atskleidė reikšmingą pagrindinį stimuliuojančio gyvūno poveikį (F(1,94) = 7.52, p<0.05), tačiau kitų pagrindinių efektų ar sąveikų nenustatyta. Prerijų pelėnams sušvirkštas 0.1 pg CRF kokteilis ir 10 pg selektyvaus CRF2 antagonistas anti-sauvagine-30, nepraleido reikšmingai daugiau laiko su partneriu ar nepažįstamuoju (p>0.3, Stjudento t testas, Bonferroni lygis nustatytas ties p<0.016) (Pav. 3A). Įdomu tai, kad prerijų pelėnams buvo suleista 0.1 pg CRF ir 10 pg selektyvaus CRF kokteilio.1 antagonistas CP-154,526-1, taip pat parodė partnerio pirmenybės blokadą (p>0.5, Stjudento t testas, Bonferroni lygis nustatytas ties p<0.016) (Pav. 3A). Kontroliniai prerijų pelėnai, kuriems į NAcc buvo sušvirkšta 0.1 pg CRF, buvo tiriami vienu metu ir buvo nustatyta, kad jie atkartojo pirminius partnerio pasirinkimo palengvinimo rezultatus (p<0.01, Stjudento t testas, Bonferroni lygis nustatytas ties p<0.016) (Pav. 3A). Be to, nors 8 iš 10 CRF gydytų prerijų pelėnų pirmenybę teikė partneriui, tik 11 iš 25 gyvūnų, kuriems buvo suteikta CRF.1 antagonistas ir 6 iš 15 gyvūnų, vartojusių CRF2 antagonistas, rodė partnerio pirmenybę (Pav. 3B). Mūsų rezultatai rodo, kad abiejų CRF aktyvinimas1 ir CRF2 NAcc receptoriai yra būtini norint palengvinti CRF sukeltą partnerio pasirinkimą prerijų pelėnams.

3 pav 

Abu CRF1 ir CRF2 NAcc receptoriai yra būtini CRF palengvintam partnerio pirmenybės formavimui prerijų pelėnams. (A) Gyvūnai, kuriems į NAcc buvo sušvirkšta 0.1 pg CRF, kontaktuodami su partneriu praleido daugiau laiko nei su nepažįstamuoju (p<0.01, Studento ...

Lokomotorinis aktyvumas skirtingose ​​gydymo grupėse reikšmingai nesiskyrė (F(1,80) = 1.37, p>0.05, vienpusis ANOVA), nors gyvūnų, vartojusių CRF į NAcc, lokomotorinis aktyvumas buvo mažesnis. Rezultatai rodomi Lentelė 1. Pateiktas reprezentatyvus histologijos skyrius, kuriame parodyta NAcc kaniuliavimo vieta 4 pav.

4 pav 

Histologinis kaniulės įdėjimo patikrinimas. a ) Receptoriaus autoradiograma kairėje pusėje vaizduoja CRF vietą2 prerijoje pelėnas NAcc. b) reprezentatyvi Nissl dažytos smegenų dalies mikrofotografija, vaizduojanti kaniulės įdėjimą, pasibaigiantį viduje ...
Lentelė 1 

Lokomotorinis aktyvumas, išreikštas bendru infraraudonųjų spindulių pertraukų arba narvelių kirtimų skaičiumi, vidutiniu kiekvienoje gydymo grupėje. Tarp gydymo grupių reikšmingų skirtumų nėra (F = 1.37, p>0.05, vienpusė ANOVA).

CRF- ir Ucn-1 imunoreaktyvumas NAcc

Norėdami parodyti mikrofotografijas, kurių endogeninių CRF receptorių ligandų yra NAcc, atlikome CRF ir Urocortin-1 (Ucn-1) imunoreaktyvumą suaugusiems prerijų pelėnams. Reprezentatyvios smegenų sekcijos, apdorotos CRF imunocitochemijai, parodytos 5 pav. CRF imunoreaktyvios skaidulos buvo pastebėtos abiejų lyčių NAcc, be akivaizdžių skaidulų pasiskirstymo ar tankio skirtumų (5b pav). Ucn-1 skaidulų NAcc neaptikta nei prerijų pelėnų patinų, nei patelių (5c pav). Taigi gali būti, kad CRF yra vienas iš endogeninių ligandų, galinčių fiziologiškai surišti CRF.1 ir CRF2 receptorius pelėno NAcc, kad būtų lengviau pasirinkti partnerius. Pažymėtina, kad buvo įrodyta, kad CRF prisijungia prie abiejų CRF1 ir CRF2, su maždaug 2–10 kartų didesniu afinitetu CRF1 (Primus ir kt., 1997). Tačiau negalime atmesti galimybės, kad kiti endogeniniai ligandai, tokie kaip Urocortin-2 arba Urocortin-3, taip pat gali prisidėti prie porų ryšių formavimo nervinės kontrolės.

5 pav 

CRF ir Ucn-1 imunoreaktyvumas prerijų pelėnams. a) Žiurkių atlaso schema, rodanti 10 kartų NAcc padidinimo plotą (žr. stačiakampį) (Paxinos ir Watson, 1998). b ) Prerijų pelėnų sekcija, kurioje pavaizduoti CRF imunoreaktyvūs pluoštai NAcc (žr. rodykles). c) Prerijos ...

DISKUSIJA

Ankstesniuose tyrimuose mes nustatėme sukaupto CRF rūšių skirtumus1– ir CRF2 išraiška, koreliuojanti su socialine organizacija keturiose pelėnų rūšyse. Monogaminių prerijų ir pušinių pelėnų CRF kiekis buvo didesnis2 NAcc, ir mažesnis CRF lygis1 NAcc, palyginti su nemonogaminėmis pievų ir kalnų pelėnų rūšimis (Lim ir kt., 2005). Remdamiesi šiais duomenimis, iškėlėme hipotezę, kad CRF veiksmas NAcc buvo labai svarbus monogaminiam socialiniam elgesiui prerijų pelėnams. Šiame tyrime pirmą kartą parodome, kad CRF mikroinjekcijos tiesiai į NAcc iš tikrųjų palengvina prerijų pelėnų patinų partnerio pasirinkimą. Dviejų krypčių ANOVA analizė aptiko pagrindinį stimuliuojančio gyvūno poveikį, ty bendrai su partneriu praleidžiama daugiau laiko nei su nepažįstamuoju, tačiau pagrindinis gydymo ar sąveikos poveikis nebuvo aptiktas. Stiprūs svetimšalių pageidavimai 3 gyvūnams iš 0.1 pg CRF NAcc grupės padidino dispersiją, neleidžiant aptikti sąveikos efekto. Tačiau atskiri laiko, praleisto su nepažįstamais partneriais, palyginimai atskleidė reikšmingus partnerio pageidavimus 0.1 pg CRF NAcc grupėje. Šis poveikis buvo pakartotas antagonistų tyrime, patvirtinant poveikio tvirtumą. Šis partnerio pageidavimų pokytis nebuvo susijęs su statistiškai reikšmingu laiko, praleisto su partneriu, pailgėjimu ar su nepažįstamu asmeniu praleisto laiko sumažėjimu, o greičiau dėl bendro padidėjusio partnerio pirmenybės nepažįstamojo atžvilgiu. Priešingai, CRF neturi įtakos nemonogaminių pievų pelėnų partnerių pasirinkimui. Be to, parodome, kad šį palengvinimo efektą moduliuoja CRF veikimas abiejuose CRF1 ir CRF2 receptoriai. Galiausiai parodome fotomikrografijos įrodymus, kad prerijų pelėnų NAcc yra CRF imunoreaktyvių skaidulų, o tai rodo, kad CRF gali būti vienas iš endogeninių ligandų, veikiančių CRF.1 ir CRF2 receptorius NAcc formuojant partnerio pirmenybę. Kartu šie duomenys rodo naują CRF sistemų, veikiančių NAcc socialiniame elgesyje, vaidmenį.

Mūsų duomenys, rodantys, kad CRF NAcc palengvina partnerių pasirinkimą, patvirtina mūsų pradinę hipotezę, kad kaupiamos CRF sistemos dalyvauja formuojant porų ryšius prerijų pelėnams. Mes taip pat iškėlėme hipotezę, kad CRF2 ypač receptoriai buvo labai svarbūs, atsižvelgiant į CRF gausą2 receptorius dviejose monogaminėse pelėnų rūšyse, bet ne dviejose nemonogaminėse pelėnų rūšyse (Lim ir kt., 2005). Pievinių pelėnų eksperimento rezultatai patvirtina šią hipotezę, nes CRF infuzija neturi įtakos partnerių pasirinkimui rūšiai, kuriai veiksmingai trūksta CRF2 receptoriai NAcc. Be to, mes nustatėme, kad kartu skiriant CRF2-selektyvus antagonistas blokuoja partnerio pirmenybę prerijų pelėnams. Šie duomenys atskleidžia potencialiai svarbų CRF vaidmenį2 receptoriai, susidarant poriniams ryšiams.

Tačiau mes taip pat nustatėme, kad kartu buvo skiriamas CRF1-selektyvus antagonistas blokavo partnerio pirmenybę prerijų pelėnams. Šis rezultatas buvo labiau stebinantis, atsižvelgiant į CRF1 receptoriai yra ekspresuojami NAcc tiek nemonogaminėse, tiek monogaminėse rūšyse. Kartu šie duomenys pabrėžia, kad svarbu abu receptorių potipius, skirtus partnerio pasirinkimui išreikšti, ir atkreipia dėmesį į galimybę, kad receptorių specifiškumas yra sudėtingas klausimas, kurį gali būti naudinga toliau tirti. Gali būti, kad porų sujungimo metu gali būti dinamiška dviejų NAcc receptorių potipių sąveika, todėl gali būti įdomu toliau tyrinėti CRF ląstelių fenotipus.1– ir CRF2-išreiškiančius neuronus arba pamatyti, ar CRF1 ir CRF2 receptoriai netgi gali kolokalizuotis į tuos pačius neuronus. Taip pat gali būti, kad gali būti įtrauktos ir kitos medžiagos, pvz., CRF surišantis baltymas, kuris gali veikti kaip endogeninio CRF rezervuaras (Jahn, Eckart, Brauns, Tezval ir Spiess, 2002 m).

Veiksmingos CRF dozės konkrečios vietos injekcijoms į NAcc, kurios palengvino partnerio pasirinkimą, nesukėlė reikšmingo gydymo vaistais poveikio judėjimo aktyvumui, o tai paprastai aiškinama kaip į nerimą panašus elgesys. DeVriesas ir Carteris (2002 m.) nustatė veiksmingas CRF icv dozes partnerio pirmenybėms 0.1 ir 1.0 ng (atitinkamai 210 nM ir 2.1 μM), ir nenustatė lokomotorinio aktyvumo skirtumų tarp gydymo grupių (DeVries ir kt., 2002 m). Jų dozės buvo nuo 1000 iki 10,000 10 kartų didesnės ir mažiausiai nuo dviejų iki dvidešimties kartų didesnės nei tų dozių, kurias mes panaudojome konkrečiai vietai į NAcc (100 nM ir XNUMX nM). Nors mūsų tyrime nenustatėme reikšmingų lokomotorinio aktyvumo skirtumų skirtingose ​​​​gydomose grupėse, buvo pastebėta nežymi tendencija, kad gyvūnai, vartoję vien CRF į NAcc, narvuose buvo kryžminami mažiau. Nors gali būti, kad CRF gali daryti subtilų poveikį į nerimą panašiam elgesiui, taigi ir judėjimui, o tai savo ruožtu gali turėti įtakos partnerio pasirinkimo formavimuisi, manome, kad labiau tikėtinas paaiškinimas yra tas, kad sumažėjęs narvų kirtimas vien tik CRF grupėje yra padidėjusio padidėjimo rezultatas. partnerio pirmenybė, ty laikas, praleistas tik partnerio narve. Tai patvirtina hipotezę, kad CRF gali turėti naują, atskirą vaidmenį reguliuojant socialinį elgesį, galbūt nepriklausomą nuo HPA ašies poveikio nerimui.

Taip pat parodome mikrofotografinius įrodymus apie CRF imunoreaktyvumą NAcc tame pačiame regione kaip CRF2 monogaminių prerijų pelėnų receptoriai. Tai rodo, kad CRF gali būti vienas iš endogeninių ligandų, veikiančių CRF1 ir CRF2 receptoriai NAcc. Nors buvo įrodyta, kad CRF pirmiausia jungiasi su CRF1, jis taip pat jungiasi su CRF2 su dideliu giminingumu (Primus ir kt., 1997). Ucn-1 imunoreaktyvių skaidulų nebuvo pastebėta NAcc, bet buvo pastebėta kituose smegenų regionuose, tokiuose kaip Edingerio-Vestfalo branduolys.Lim ir kt., 2006). Mes negalėjome nustatyti Urocortin-2 ar Urocortin-3 skaidulų pelėnų smegenyse dėl specifinio imuninio dažymo trūkumo; tačiau būtų įdomu nustatyti, ar šie galimi ligandai, kurie taip pat jungiasi su CRF2 receptoriai, turintys didelį afinitetą, taip pat yra NAcc kartu su CRF2 receptorius.

Pilvo priekinės smegenys, ypač NAcc, buvo ne kartą identifikuotos kaip svarbi smegenų sritis prerijų pelėnų porų ryšiams susidaryti. Atsižvelgiant į NAcc vaidmenį mezolimbiniame dopamino atlygio kelyje, buvo iškelta hipotezė, kad natūralūs atlygio ir sustiprinimo mechanizmai yra porų ryšių formavimo pagrindas, todėl partneris yra selektyviai susietas su atlygiu (Aragona ir kt., 2003a; Limas, Murphy ir Youngas, 2004a). Anksčiau farmakologinėmis ir genetinėmis manipuliacijomis parodėme, kad ventraliniai priekinių smegenų vazopresino V1a receptoriai yra būtini vyriškos lyties porų ryšiams formuoti, net jei jie per daug išreikšti nemonogaminėse pelėnų rūšyse (Lim ir kt., 2004b; Lim ir Young, 2004). Oksitocino receptoriai NAcc yra būtini, kad prerijų pelėnų patelėms būtų teikiama pirmenybė partneriams (Youngas, Limas, Gingrichas ir Inselis, 2001 m). Taip pat buvo įrodyta, kad susikaupę dopamino D1 ir D2 receptoriai moduliuoja partnerio pasirinkimo formavimąsi ir išlaikymą tiek vyrams, tiek moterims, o iš tikrųjų dopaminas sąveikauja su oksitocinu šio elgesio proceso metu.Aragona ir kt., 2003a; Aragona ir kt., 2006; Aragona, Liu, Yu, Damron, Perlman ir Wang, 2003b; Liu ir Wang, 2003). Taigi, CRF receptorių aktyvinimas greičiausiai prisideda prie didesnės grandinės, kuri susilieja NAcc, kad sukurtų šį sudėtingą socialinį elgesį. Remiantis šia hipoteze, yra įrodymų, kad NAcc CRF receptoriai gali moduliuoti dopamino išsiskyrimą į striatumą (Lu, Liu, Huang ir Zhang, 2003 m), ir naujausi preliminarūs įrodymai, rodantys, kad NAcc CRF receptorių aktyvinimas gali paskatinti strypo spaudimą natūraliam sutvirtinimui (Berridge, Pecine ir Schulkin, 2004 m). Kitas tyrimas parodė, kad CRF2 ventralinės tegmentinės srities receptoriai, kurie siunčia dopaminergines projekcijas į NAcc, gali sukelti ilgalaikį potenciją, fiziologinę elgesio mokymosi ir atlygio asociacijos koreliaciją.Ungless, Singh, Crowder, Yaka, Ron ir Bonci, 2003 m). Kadangi manoma, kad partnerio pirmenybė yra natūralaus atlygio mokymosi forma, NAcc CRF receptoriai gali atlikti panašų vaidmenį sinapsėje formuojant porų ryšį prerijų pelėnams.

Porų ryšių susidarymas gamtoje yra sudėtingas pažinimo procesas, reikalaujantis daugelio išorinių dirgiklių ir vidinių būsenų integracijos. Porų ryšių formavimasis atsiranda dėl kelių elgesio procesų, įskaitant socialinį pripažinimą, požiūrį ir socialinę motyvaciją, sintezės ir apima mokymąsi bei atmintį. Oksitocinas ir vazopresinas yra neatsiejami nuo socialinių dirgiklių nervinio apdorojimo ir socialinių prisiminimų formavimo.Bielsky, Hu, Szegda, Westphal ir Young, 2004 m; Ferguson, Young, Hearn, Matzuk, Insel ir Winslow, 2000 m). Dopaminas gali būti įtrauktas į padidintą motyvacinę būseną, skatinančią socialinę sąveiką su partneriu, ir sustiprinimą, reikalingą partnerio pasirinkimui nustatyti. CRF gali suteikti mechanizmą, kuriuo vidinė streso būsena moduliuoja partnerio pirmenybę. CRF signalizacija taip pat galėtų leisti ilgalaikius nervų plastiškumo pokyčius formuojant porą. Kiekviena neuromediatorių sistema atlieka skirtingą, bet lemiamą vaidmenį sudėtingame porų sujungimo elgesyje, o bet kurios vienos sistemos blokada sutrikdytų poros ryšio susidarymą.

CRF vaidmuo reguliuojant socialinį elgesį buvo ištirtas minimaliai, nepaisant daugybės tyrimų, susijusių su CRF su stresu ir nerimu. Yra tvirtų įrodymų, kad CRF2 receptorių aktyvinimo funkcijos sumažina nerimą ir į depresiją panašų pelių elgesį (Bale, Contarino, Smith, Chan, Gold, Sawchenko, Koob, Vale ir Lee, 2000 m.; Bale ir Vale, 2003). Socialinis elgesys, stresas ir nerimas yra labai tarpusavyje susiję, ypač kai elgesys yra susijęs su socialine parama arba socialine izoliacija. Prerijų pelėnams, kurie sudarė porinius ryšius, socialinio atsiskyrimo nuo partnerio metu yra padidėjęs kortikosterono kiekis plazmoje, o susijungimas su partneriu grąžina šį lygį į pradinį (Carteris, DeVriesas, Taymansas, Robertsas, Williamsas ir Getzas, 1997 m). Prerijų pelėnų patinai, patiriantys priverstinį plaukimą, psichologinį stresą, rodo, kad po sutrumpinto bendro gyvenimo su partneriu lengviau formuojasi porinis ryšys (DeVries ir kt., 1996 m). Galiausiai, poromis susieti patinai, kurie yra atskirti nuo savo partnerių, turi pasyvesnę įveikimo strategiją priverstinio plaukimo teste nei jų kolegos, atskirti nuo brolių ir seserų, ir tokius elgesio pokyčius lydi CRF mRNR padidėjimas NAcc (Bosch, Nair, Neumann ir Young, 2005 m).

Šie duomenys rodo, kad socialinis ir stresinis elgesys turi abipusį ryšį, be to, tos pačios molekulės, susijusios su stresu ir nerimu, taip pat vaidina svarbų vaidmenį socialiniame elgesyje. Tiesą sakant, yra įrodymų, kad „socialiniai“ neuropeptidai vazopresinas ir oksitocinas gali modifikuoti streso ir nerimo elgesį.Bielsky ir kt., 2004 m; Landgraf, Gerstberger, Montkowski, Probst, Wotjak, Holsboer ir Engelmann, 1995 m.; Liebschas, Wotjakas, Landgrafas ir Engelmannas, 1996 m; Mantella, Vollmer, Li ir Amico, 2003 m; Ring, Malberg, Potestio, Ping, Boikess, Luo, Schechter, Rizzo, Rahmanas ir Rosenzweig-Lipson, 2006 m.; Windle, Shanks, Lightman ir Ingram, 1997 m). Taigi, tos pačios molekulės, kurios moduliuoja vidinę streso būseną, gali prisidėti prie socialinio elgesio reguliavimo, pavyzdžiui, porų ryšių susidarymo, ir kad molekulės ir grandinės, sukurtos siekiant vieno elgesio, iš tikrųjų gali dinamiškai valdyti kitą.

Padėka

Emory universitete norėtume padėkoti daktarui Michaelui J. Owensui už maloniai suteiktą junginį CP-154,526 XNUMX. Taip pat norėtume padėkoti Lorrai Miller ir Meera Modi už pagalbą atliekant pievų pelėnų eksperimentą. Galiausiai, norėtume padėkoti dr. A. Courtney DeVries iš Ohajo valstijos universiteto ir C. Sue Carter iš Ilinojaus universiteto Čikagoje už jų novatorišką darbą su CRF prerijų pelėnams ir daktaro DeVries susirašinėjimą apie farmakologinius eksperimentus.

Dotacijų parama: Šis tyrimas buvo paremtas NIH dotacijomis MH65050 MML, AA13738 AER, MH58616 ZXW, MH64692 LJY ir NSF STC IBN-9876754 ir Yerkes centro dotacija RR00165.

Išnašos

Leidėjo atsisakymas: Tai PDF failas iš neregistruoto rankraščio, kuris buvo priimtas paskelbti. Kaip paslauga mūsų klientams teikiame šią ankstyvą rankraščio versiją. Rankraštis bus kopijuojamas, užrašomas ir peržiūrimas gautas įrodymas, kol jis bus paskelbtas galutinėje cituotojoje formoje. Atkreipkite dėmesį, kad gamybos proceso metu gali būti aptiktos klaidos, kurios gali turėti įtakos turiniui, ir visi su žurnalu susiję teisiniai atsakymai.

Nuorodos

  1. Aragona BJ, Liu Y, Curtis JT, Stephan FK, Wang Z. Nucleus accumbens dopamine kritinis vaidmuo formuojant partnerio pirmenybę prerijų pelėnų patinuose. J Neurosci. 2003a;23(8):3483–90. [PubMed]
  2. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Curtis JT, Detwiler JM, Insel TR, Wang Z. Nucleus accumbens dopaminas diferencijuoja monogaminių porų ryšių formavimąsi ir palaikymą. Nat Neurosci. 2006; 9 (1): 133 – 9. [PubMed]
  3. Aragona BJ, Liu Y, Yu YJ, Damron A, Perlman G, Wang ZX. Priešingas socialinio prisirišimo moduliavimas D1 ir D2 tipo dopamino receptorių aktyvavimu nucleus accumbens apvalkale. Horm Behav. 2003b;44:37.
  4. Bachtell RK, Weitemier AZ, Galvan-Rosas A, Tsivkovskaia NO, Risinger FO, Phillips TJ, Grahame NJ, Ryabinin AE. Edingerio-Vestfalijos šoninės pertvaros urokortino kelias ir jo ryšys su alkoholio vartojimu. J Neurosci. 2003;23(6):2477–87. [PubMed]
  5. Bale TL, Contarino A, Smith GW, Chan R, Gold LH, Sawchenko PE, Koob GF, Vale WW, Lee KF. Pelės, kurioms trūksta kortikotropiną atpalaiduojančio hormono receptoriaus-2, elgiasi kaip nerimas ir yra itin jautrios stresui. Natas Genetas. 2000;24(4):410–4. [PubMed]
  6. Bale TL, Vale WW. Padidėjęs į depresiją panašus elgesys pelėms, kurioms trūksta kortikotropino atpalaiduojančio faktoriaus receptorių-2: seksualiai dichotominiai atsakai. J Neurosci. 2003;23(12):5295–301. [PubMed]
  7. Berridge KK, Pecine S, Schulkin J. Apetitinis CRF poveikis accumbens apvalkale dėl sacharozės atlygio sąlyginio metodo. Neurologijos draugija abstrakčių peržiūros priemonė / maršruto planuotoja. 2004:437.12.
  8. Bielsky IF, Hu SB, Szegda KL, Westphal H, Young LJ. Didelis socialinio atpažinimo ir į nerimą panašaus elgesio sumažėjimas vazopresino V1a receptorių išjungtose pelėse. Neuropsichofarmakologija. 2004;29(3):483–93. [PubMed]
  9. Bosch OJ, Nair HP, Neumann ID, Young LJ. Į depresiją panašus elgesys po izoliacijos nuo patelės partnerio yra susijęs su pakitusiu smegenų CRF mRNR ir HPA ašies aktyvumu prerijų pelėnų patinuose. Neurologijos draugija abstrakčių peržiūros priemonė / maršruto planuotojas; 2005. (Programos Nr. 420.4)
  10. Carter CS, DeVries AC, Getz LL. Žinduolių monogamijos fiziologiniai substratai. Neurosci Biobehav Rev. 1995; 19 (2): 303 – 14. [PubMed]
  11. Carteris CS, DeVries AC, Taymans SE, Roberts RL, Williams JR, Getz LL. Peptidai, steroidai ir porų sujungimas. Ann NY Acad Sci. 1997;807:260–72. [PubMed]
  12. DeVries AC, DeVries MB, Taymans SE, Carter CS. Streso poveikis socialiniams poreikiams prerijų pelėnams yra seksualiai dimorfiškas. Proc Natl Acad Sci US A. 1996;93(21):11980–4. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  13. DeVries AC, Guptaa T, Cardillo S, Cho M, Carter CS. Kortikotropiną atpalaiduojantis faktorius skatina prerijų pelėnų patinų socialines nuostatas. Psichoneuroendokrinologija. 2002;27(6):705–14. [PubMed]
  14. Ferguson JN, Young LJ, Hearn EF, Matzuk MM, Insel TR, Winslow JT. Socialinė amnezija pelėms, kurioms trūksta oksitocino geno. Natas Genetas. 2000;25(3):284–8. [PubMed]
  15. Getz LL, Carter CS, Gavish L. Prerijų pelėnų poravimosi sistema Microtus ochragaster: Porų sujungimo lauko ir laboratoriniai įrodymai. Elgesio ekologija ir sociobiologija. 1981;8:189–194.
  16. Gruder-Adams S, Getz LL. Microtus ochragaster ir M. pennsylvanicus poravimosi sistemos ir tėvo elgesio palyginimas. Žurnalas „Mammalogy“. 1985;66(1):165–167.
  17. Hotta M, Shibasaki T, Arai K, Demura H. 1 tipo kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus receptorius tarpininkauja emocinio streso sukeltam maisto suvartojimo slopinimui ir žiurkių elgesio pokyčiams. Brain Res. 1999;823(1–2):221–5. [PubMed]
  18. Insel TR, Shapiro LE. Oksitocino receptorių pasiskirstymas atspindi monogaminių ir poligaminių pelėnų socialinę organizaciją. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89(13):5981–5. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  19. Insel TR, Wang ZX, Ferris CF. Smegenų vazopresino receptorių pasiskirstymo modeliai, susiję su mikrotinų graužikų socialine organizacija. J Neurosci. 1994;14(9):5381–92. [PubMed]
  20. Jahn O, Eckart K, Brauns O, Tezval H, Spiess J. Kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus rišantis baltymas: ligandų surišimo vieta ir subvieneto struktūra. Proc Natl Acad Sci US A. 2002;99(19):12055–60. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  21. Landgraf R, Gerstberger R, Montkowski A, Probst JC, Wotjak CT, Holsboer F, Engelmann M. V1 vazopresino receptorių antisensinis oligodeoksinukleotidas į pertvarą sumažina vazopresino surišimą, socialinės diskriminacijos gebėjimus ir su nerimu susijusį elgesį žiurkėms. J Neurosci. 1995;15(6):4250–8. [PubMed]
  22. Liebsch G, Wotjak CT, Landgraf R, Engelmann M. Pertvaros vazopresinas moduliuoja su nerimu susijusį elgesį žiurkėse. Neurosci Lett. 1996;217(2–3):101–4. [PubMed]
  23. Limas MM, Murphy AZ, Young LJ. Ventraliniai striatopallidaliniai oksitocino ir vazopresino V1a receptoriai monogaminiame prerijų pelėnyje (Microtus ochrogaster) J Comp Neurol. 2004a;468(4):555–70. [PubMed]
  24. Lim MM, Nair HP, Young LJ. Kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus receptorių 1 ir 2 potipių rūšių ir lyčių skirtumai smegenyse monogamiškose ir palaidinėse pelėnų rūšyse. J Comp Neurol. 2005;487(1):75–92. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  25. Lim MM, Tsivkovskaia NO, Bai Y, Young LJ, Ryabinin AE. Kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus ir urokortino 1 pasiskirstymas pelėnų smegenyse. Brain Behav Evol. 2006;68(4):229–240. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  26. Limas MM, Wang Z, Olazabal DE, Ren X, Terwilliger EF, Young LJ. Padidėjęs partnerio pasirinkimas nepatenkintoms rūšims, manipuliuojant vieno geno ekspresija. Gamta. 2004b;429(6993):754–7. [PubMed]
  27. Limas MM, jaunasis LJ. Nuo vazopresino priklausomos nervų grandinės, kurios sudaro porų ryšį monogaminiame prerijų pelėnyje. Neurologijos. 2004;125(1):35–45. [PubMed]
  28. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oksitocinas ir dopaminas sąveikauja, kad reguliuotų porų ryšių formavimąsi moterų prerijų voluose. Neurologija. 2003; 121 (3): 537 – 44. [PubMed]
  29. Lu L, Liu Z, Huang M, Zhang Z. Nuo dopamino priklausomi atsakai į kokainą priklauso nuo kortikotropiną atpalaiduojančio faktoriaus receptorių potipių. J Neurochem. 2003;84(6):1378–86. [PubMed]
  30. Mantella RC, Vollmer RR, Li X, Amico JA. Oksitocino stokojančių pelių patelės pasižymi sustiprėjusiu su nerimu susijusiu elgesiu. Endokrinologija. 2003;144(6):2291–6. [PubMed]
  31. Paxinos G, Watson C. Žiurkės smegenys stereotaksinėmis koordinatėmis. 4. Akademinė spauda; 1998 m.
  32. Primus RJ, Yevich E, Baltazar C, Gallager DW. CRF1 ir CRF2 surišimo vietų autoradiografinė lokalizacija suaugusių žiurkių smegenyse. Neuropsichofarmakologija. 1997;17(5):308–16. [PubMed]
  33. Ring RH, Malberg JE, Potestio L, Ping J, Boikess S, Luo B, Schechter LE, Rizzo S, Rahman Z, Rosenzweig-Lipson S. Anksiolitinis oksitocino aktyvumas pelių patinuose: elgesio ir autonominiai įrodymai, terapinės reikšmės. Psichofarmakologija (Berlis) 2006:1–8. [PubMed]
  34. Ryabinin AE, Criado JR, Henriksen SJ, Bloom FE, Wilson MC. Skirtingas c-Fos ekspresijos jautrumas hipokampe ir kituose smegenų regionuose vidutinėms ir mažoms alkoholio dozėms. Mol psichiatrija. 1997;2(1):32–43. [PubMed]
  35. Salo AL, Shapiro LE, Dewsbury DA. Įvairių rūšių pelėnų elgesys (Microtus) Psychol Rep. 1993;72(1):316–8. [PubMed]
  36. Shapiro LE, Dewsbury DA. Dviejų rūšių pelėnų (Microtus ochrogaster ir M. montanus) giminingo elgesio, porų susiejimo ir makšties citologijos skirtumai J Comp Psychol. 1990;104(3):268–74. [PubMed]
  37. Ungless MA, Singh V, Crowder TL, Yaka R, Ron D, Bonci A. Kortikotropiną atpalaiduojantis faktorius reikalauja CRF surišančio baltymo, kad sustiprintų NMDA receptorius per CRF receptorių 2 dopamino neuronuose. Neuronas. 2003;39(3):401–7. [PubMed]
  38. Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Urocortin 1 pasiskirstymas pelių smegenyse priklauso nuo padermės. Neurologijos. 2005;132(3):729–40. [PubMed]
  39. „Windle RJ“, „Shanks N“, „Lightman SL“, „Ingram“ kompaktinis diskas. Centrinis oksitocino vartojimas sumažina streso sukeltą kortikosterono išsiskyrimą ir žiurkių nerimą. Endokrinologija. 1997;138(7):2829–34. [PubMed]
  40. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Ląsteliniai socialinio prisirišimo mechanizmai. Horm Behav. 2001;40(2):133–8. [PubMed]
  41. Young LJ, Wang Z. Porų susiejimo neurobiologija. Nat Neurosci. 2004;7(10):1048–54. [PubMed]