„DeltaFosB“ „The Nucleus Accumbens“ yra svarbi seksualinio atlygio įtaka. (2010)

PASTABOS: Delta FosB yra visų priklausomybių, tiek elgesio, tiek cheminių medžiagų, žymeklis. Kai atlygio grandinėje ši molekulė didėja, didėja ir priklausomybę sukeliantis elgesys. Tai viena iš molekulių, dalyvaujančių neuroplastiniuose pokyčiuose. Šis eksperimentas rodo, kad jis didėja seksualinės patirties būdu, panašiai kaip ir priklausomybės nuo narkotikų atveju. Eksperimento metu jie panaudojo genų inžineriją, kad padidintų jos lygį virš „normalaus“ lygio. Tai padėjo labiau palengvinti seksualinę veiklą. Manome, kad taip nutinka priklausomybei nuo pornografijos.

Visiškas tyrimas

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Genesas Behav. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Vakarų Ontarijo universiteto, Londono, Ontarijo, Kanados medicinos ir odontologijos universiteto Anatomijos ir ląstelių biologijos katedra.

SANTRAUKA

Vyrų žiurkių seksualinis elgesys yra naudingas ir stiprinamas. Tačiau mažai žinoma apie specifinius ląstelių ir molekulinius mechanizmus, tarpininkaujančius seksualinį atlygį, arba sustiprinančius atlygio poveikį vėlesniam seksualinio elgesio išraiška. Šiame tyrime išnagrinėta hipotezė, kad ΔFosB, stabiliai išreikšta FosB forma, vaidina svarbų vaidmenį stiprinant seksualinį elgesį ir patirties sukeltą seksualinės motyvacijos ir veikimo palengvinimą.

Nustatyta, kad seksualinė patirtis sukelia ΔFosB kaupimąsi keliuose limbiniuose smegenų regionuose, įskaitant branduolį accumbens (NAc), medialinį prefrontalinį žievę, ventralinį tegmentalą ir caudatinį putameną, bet ne medialinį preopticinį branduolį.

Be to, lytiniu būdu patyrę ir anksčiau negydyti gyvūnai buvo matuojami c-Fos indukcija, žemyn (nuslopinta) ΔFosB taikiniu. Paauglių sukeltų c-Fos-imunoreaktyvių ląstelių skaičius buvo gerokai sumažintas lytiškai patyrusiems gyvūnams, lyginant su lytiniu požiūriu naiviais kontroliniais tyrimais.

Galiausiai ΔFosB lygiai ir jo aktyvumas NAc buvo manipuliuojami naudojant virusą perduodantį genų perdavimą, kad būtų ištirtas jo galimas vaidmuo tarpininkaujant seksualinės patirties ir patirties sukeltos lytinės veiklos palengvinimo. Gyvūnai su ΔFosB pernelyg didele ekspresija parodė geresnį seksualinės veiklos palengvinimą su seksualine patirtimi, palyginti su kontrolėmis. Priešingai, ΔJunD, dominuojančio neigiamo ΔFosB partnerio, ekspresija susilpnino seksualinės patirties sukeltą lytinės veiklos palengvinimą ir trukdė ilgalaikį palengvinimo palaikymą, lyginant su žaliosios fluorescencijos baltymu ir ΔFosB viršekspressuojančiomis grupėmis.

Kartu šie rezultatai patvirtina svarbų ΔFosB išraiškos vaidmenį NAc, siekiant sustiprinti seksualinio elgesio ir seksualinės patirties sukeltos lytinės veiklos palengvinimo poveikį.

ĮVADAS

Seksualinis elgesys yra labai naudingas ir sustiprina vyriškus graužikus (Coolen ir kt. 2004; Pfaus et al. 2001). Be to, seksualinė patirtis keičia vėlesnį seksualinį elgesį ir atlygį (Tenk et al. 2009). Pasikartojanti poravimosi patirtis palengvina ar sustiprina lytinį elgesį, o tai rodo sumažėję latentiniai santykiai inicijuojant poravimą ir seksualinės veiklos palengvinimą (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Tačiau lytinio atlygio ir sutvirtinimo pagrindiniai ląstelių ir molekuliniai mechanizmai yra menkai suprantami. Buvo įrodyta, kad seksualinis elgesys ir sąlyginiai užuominos, kurios prognozuoja poravimosi procesą, pereinamuoju laikotarpiu sukelia tiesioginio ankstyvojo geno c-fos ekspresiją vyriškų žiurkių mesolimbinėje sistemoje (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Be to, pastaruoju metu buvo įrodyta, kad seksualinė patirtis sukelia ilgalaikį neuroplastumą patinų žiurkės mesolimbinėje sistemoje (Frohmaderis et al. 2009; Krapai et al. 2010). Be to, žiurkių patinams nustatyta, kad seksualinė patirtis sukelia ΔFosB, a Fos šeimos narys, branduolių accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). „FosB“, sutrumpintas „FosB“ šliuzo variantas, yra unikalus „Fos“ šeimos narys dėl didesnio stabilumo (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) ir atlieka svarbų vaidmenį skatinant motyvaciją ir atlygį už piktnaudžiavimo narkotikais ir ilgalaikio neuroninio plastiškumo tarpininkavimą („Nestler“ et al. 2001). ΔFosB formuoja heteromerinį transkripcijos faktoriaus kompleksą (aktyvatoriaus baltymas-1 (AP-1)) su Jun proteinais, geriau JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). Indukuojantis per didelę ΔFosB ekspresiją, pirmiausia apsiribojant striatumu, naudojant bi-transgenines peles, atsiranda narkotikų priklausomas elgesio fenotipas, nepaisant to, kad nėra ankstesnio vaisto poveikio (McClung et al. 2004). Šis elgesio fenotipas apima jautrintą lokomotorinį atsaką į kokainą (Kelz et al. 1999), didesnis kokaino pirmenybė (Kelz et al. 1999) ir morfinas (Zachariou et al. 2006) ir padidėjęs kokaino savęs administravimas (\ tColby et al. 2003).

Panašiai kaip ir narkotikų atlygis, ΔFosB reguliuoja natūralus atlygio elgesys ir tarpininkauja šių elgesio išraiška. Per didelė ΔFosB ekspresija NAc, naudojant graužikų modelius, padidina savanorišką ratų judėjimą (Werme et al. 2002), instrumentinis atsakas į maistą (Olausson et al. 2006), sacharozės suvartojimas (Wallace et al. 2008), ir palengvina vyrus (Wallace et al. 2008) ir moterys (Bradley et al. 2005) seksualinis elgesys. Taigi ΔFosB gali būti įtrauktas į tarpininkavimą natūralios naudingos patirties poveikiu. Tdabartinis tyrimas išplečia ankstesnius tyrimus, konkrečiai tirdamas ΔFosB vaidmenį NAc ilgalaikiame seksualinės patirties rezultate, susijusiame su vėlesniu poravimosi elgesiu ir nervine aktyvacija mezolimbinėje sistemoje.

  • Pirma, buvo nustatyta, kurie smegenų regionai, susiję su atlygio schema ir seksualiniu elgesiu, išreiškia seksualinės patirties sukeltą ΔFosB.
  • Po to seksualinės patirties sukeltas ΔFosB poveikis poravimosi sukeltai c-Fos ekspresijai, žemyn srovės tikslui, represuojamam ΔFosB (Renthal et al. 2008), buvo ištirta.
  • Galiausiai, manipuliuojant ΔFosB aktyvumu NAc (genų pernelyg išraiška ir dominuojančio neigiamo prisijungimo partnerio ekspresija) seksualinės elgsenos ir patirties sukeltos seksualinės motyvacijos ir veikimo palengvinimo būdai buvo nustatyti naudojant virusų vektoriaus pristatymo technologiją.

METODAI

Gyvūnai

Suaugusieji vyrų Sprague Dawley žiurkės (200 – 225 gramai) buvo gauti iš Charles River Laboratories (Senneville, QC, Kanada). Eksperimentų metu gyvūnai buvo laikomi Plexiglas narveliuose su tunelių vamzdeliu tose pačiose lyties porose. Kolonijos patalpos buvo reguliuojamos temperatūroje ir palaikomos šviesiai tamsiame 12 / 12 ciklo cikle su maistu ir vandeniu. ad libitum išskyrus elgesio bandymus. Stimulus patelės (210 – 220 gramai) poravimosi metu gavo po oda dvišales ovarektomijas po 5% estradiolio benzoato ir 95% cholesterolio po 0.35g ketaminu / 0.052g Xylazine. Seksualinis imlumas buvo pradėtas vartoti 500µg progesteroną 0.1 mL sezamo aliejuje maždaug prieš 4 valandas prieš bandymą. Visos procedūros buvo patvirtintos Vakarų Ontarijo universiteto Gyvūnų priežiūros ir naudojimo komitetuose ir atitiko CCAC gaires, susijusias su stuburiniais gyvūnais.

Seksualinis elgesys

Poravimosi sesijos įvyko ankstyvosios tamsos fazės metu (tarp 2 – 6 valandų po tamsiojo laikotarpio pradžios), kai apšviestas raudonas. Prieš pradedant eksperimentą, gyvūnai atsitiktinai buvo suskirstyti į grupes. Poravimosi metu vyrų žiurkėms buvo leista susitelkti į ejakuliaciją arba 1 valandą, ir buvo užregistruoti seksualinio elgesio parametrai, įskaitant: prijungimo latentinį laiką (ML; laikas nuo patelės įvedimo iki pirmojo kalno), intromizacijos latentinį laiką (IL; patelė iki pirmojo kalno su makšties įsiskverbimu), ejakuliacijos latentinis laikas (EL; laikas nuo pirmojo įsiskverbimo iki ejakuliacijos), po ejakuliacijos intervalas (PEI; laikas nuo ejakuliacijos iki pirmojo vėlesnio intromissiono), stiebų skaičius (M; skvarba), įsibrovimų skaičius (IM, montavimas įskaitant makšties įsiskverbimą) ir kopuliacijos efektyvumas (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Analizuojant gyvūnus, kuriems nebuvo nustatyta ejakuliacija, nebuvo įtrauktos staktos ir introms. Lankstumo ir įsibrovimo latencijos yra seksualinės motyvacijos rodikliai, o ejakuliacijos latentinis laikas, laikiklių skaičius ir kopuliacijos efektyvumas atspindi seksualinę veiklą (Korpusas 2002).

Eksperimentas 1: ΔFosB išraiška

Seksualiai negydytoms žiurkėms buvo leista poruotis švariuose bandymų narvuose (60 × 45 × 50 cm) 5 iš eilės, kasdieniai poravimosi sesijoms arba lytiniu požiūriu naivūs. Papildoma lentelė 1 apibūdina eksperimentinių grupių elgsenos paradigmą: naivus ne seksas (NNS; n = 5), anksčiau negydyta lytis (NS; n = 5), nepatyrė lyties (ENS; n = 5) ir patyręs lytis (ES; n = 4). NS ir ES gyvūnai buvo nužudyti 1 valandą po ejakuliacijos paskutinėje poravimosi dieną tiriant poravimosi sukeltą c-Fos ekspresiją. NNS gyvūnai buvo nužudyti kartu su ENS gyvūnais 24 valandomis po paskutinės poravimosi sesijos, kad ištirtų lyties patirties sukeltą ΔFosB. Seksualiai patyrusios grupės buvo seksualiai elgiamasi prieš vėlesnius tyrimus. Nerasta jokių reikšmingų skirtumų tarp grupių dėl bet kokių elgesio priemonių atitinkamoje poravimosi sesijoje ir seksualinės patirties sukeltas seksualinio elgesio palengvinimas buvo rodomas abiejose patyrusiose grupėse (Papildoma lentelė 2). Kontrolės priemonės apėmė lytiškai naivus vyrus, kurie buvo gydomi kartu su poravimu, užtikrinantis moterų kvapų ir vokalizacijos poveikį be tiesioginio kontakto su moterimis.

Nugaišinimui gyvūnai buvo nuodžioti anestezuoti natrio pentobarbitaliu (270mg / kg; ip) ir perfuzuoti intrakardialiai 50 ml 0.9% fiziologinio tirpalo, po to 500 ml 4% paraformaldehido 0.1 M fosfato buferyje (PB). Smegenys buvo pašalintos ir užfiksuotos 1 h kambario temperatūroje tame pačiame fiksatoriuje, tada panardintos į 20% sacharozę ir 0.01% natrio azidą 0.1 M PB ir laikomos 4 ° C temperatūroje. Koroniniai pjūviai (35 µm) buvo nupjauti su užšalimo mikrotomu (H400R, Micron, Vokietija), surinkti į keturias lygiagrečias serijas krioprotekto tirpale (30% sacharozė ir 30% etileno glikolis 0.1 M PB) ir laikomi -20 ° C temperatūroje. Laisvos plūduriuojančios sekcijos buvo plaunamos plačiai su 0.1 M fosfatiniu buferiniu tirpalu (PBS; pH 7.3 – 7.4) tarp inkubacijų. Skyriai buvo veikiami 1% H2O2 10 min kambario temperatūroje, kad būtų sunaikintos endogeninės peroksidazės, tada blokuojamos PBS + inkubavimo tirpale, kuris yra PBS, turintis 0.1% galvijų serumo albuminą (katalogas 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) ir 0.4% Triton X -100 (katalogo elementas BP151-500; Sigma-Aldrich) 1 h. Po to sekcijos buvo inkubuojamos per naktį 4 ° C temperatūroje pan-FosB triušio polikloniniame antikūne (1: 5K; sc-48 Santa Cruz biotechnologija, Santa Cruz, CA, JAV). Pan-FosB antikūnas buvo iškeltas prieš vidinį FosB ir ΔFosB bendrą regioną. ΔFosB-IR ląstelės buvo specialiai ΔFosB-teigiamos, nes po stimuliavimo trukmės (24 valandos) visi aptikti stimulo sukeltos FosB yra susilpnėję (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). Be to, šiame eksperimente paskutinę dieną poravę gyvūnai (NS, ES) buvo užmušti 1 h po poravimosi, taigi prieš FosB ekspresiją. Western blot analizė patvirtino ΔFosB aptikimą maždaug 37 kD. Po pirminio antikūnų inkubavimo, sekcijos buvo inkubuojamos 1 h biotino konjuguotame ožkų anti-triušio IgG (1: 500 PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) ir 1 h avidin-biotino-šeimininko peroksidazėje (ABC elitas 1: 1K PBS, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Po šio inkubavimo skyriai buvo apdoroti vienu iš šių būdų:

1. Vienkartinis peroksidazės ženklinimas

NNS ir ENS gyvūnų sekcijos buvo panaudotos seksualinės patirties sukeltos ΔFosB kaupimosi smegenų analizei. Po ABC inkubavimo peroksidazės kompleksas buvo vizualizuotas po 10 minučių apdorojimo chromogeniniu tirpalu, turinčiu 0.02% 3,3'-diaminobenzidino tetrahidrochlorido (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), sustiprintą 0.02% nikelio sulfatu 0.1 M PB vandenilio peroksidas (0.015%). Sekcijos buvo kruopščiai plaunamos 0.1 M PB, kad būtų nutraukta reakcija ir sumontuotos ant koduotos Superfrost plius stiklo plokštelės (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) su 0.3% želatina ddH20. Po dehidratacijos visos skaidrės buvo padengtos DPX (dibutilftalato ksilenu).

2. Dviguba imunofluorescencija

ΔFosB ir c-Fos analizei buvo naudojami sekcijos iš visų keturių eksperimentinių grupių, kuriose yra NAc ir mPFC. Po ABC inkubavimo, sekcijos buvo inkubuojamos 10 min su biotiniluotu tiramidu (BT; 1: 250 PBS + 0.003% H2O2 Tramidinio signalo stiprinimo rinkinys, NEN Life Sciences, Bostonas, MA) ir 30 min su Alexa 488 konjuguotu strepavidinu (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Po to sekcijos buvo inkubuojamos per naktį su triušių polikloniniu antikūnu, specifiškai atpažįstančiu c-Fos (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), po to inkubuojant 30 miną su ožkų anti-triušio Cy3 konjuguotu antriniu antikūnu (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, JAV). Po dažymo, sekcijos buvo kruopščiai plaunamos 0.1 M PB, sumontuotos ant koduotų stiklelių su 0.3% želatina ddH20 ir padengtas vandeniu montavimo terpe (Gelvatol), turinčiu anti-fading agentą 1,4-diazabiciklo (2,2) oktaną (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Imunohistocheminiai kontroliniai tyrimai apima vieno arba abiejų pirminių antikūnų praleidimą, dėl to nepavyko žymėti atitinkamu bangos ilgiu.

Duomenų analizė

ΔFosB smegenų analizė

Dvi eksperimentuotojai, aklai gydyti, smegenų plataus skenavimo atliko koduotus skaidres. ΔFosB-imunoreaktyvios (-IR) ląstelės visose smegenyse buvo pusiau kiekybiškai išanalizuotos naudojant skalę, kad būtų parodytas ΔFosB-teigiamų ląstelių skaičius, kaip nurodyta Lentelė 1. Be to, remiantis pusiau kiekybiniais duomenimis, ΔFosB-IR ląstelių skaičius buvo skaičiuojamas naudojant standartines analizės sritis smegenų srityse, susijusiose su atlygiu ir seksualiniu elgesiu, naudojant kameros lucida piešimo vamzdelį, prijungtą prie Leica DMRD mikroskopo (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Vokietija): NAc (branduolys (C) ir apvalkalas (S); 400 × 600µm), analizuojamas trijuose rostral-caudal lygiuose (Balfour et al. 2004); ventralinis tegmentalinis plotas (VTA; 1000 × 800µm), analizuojamas trijuose rostral-caudal lygiuose (Balfour et al. 2004) ir VTA uodega (Perrotti et al. 2005); prefrontalinė žievė (priekinė cingluliacija (ACA); prelimbinė žievė (PL); infralimbinė žievė (IL); 600 × 800 µm kiekvienas); caudate putamen (CP; 800 × 800µm); ir medialinis preopticinis branduolys (MPN; 400 × 600 µm) (Papildomi skaičiai 1 – 3). Apskaičiuoti du poskyriai buvo suskaičiuoti, o vidurkis vienam gyvūnui skaičiuojant vidurkį. Seksualiai naivūs ir patyrę ΔFosB-IR ląstelių grupės vidurkiai buvo lyginami kiekviename subregione naudojant nesusijusius t-testus.

Lentelė 1     

Apibendrinimas ΔFosB ekspresija lytiškai naiviuose ir patyrusiuose gyvūnuose
ΔFosB ir c-Fos analizė

Vaizdai buvo užfiksuoti naudojant aušinamą CCD kamerą (Microfire, Optronics), pritvirtintą prie Leica mikroskopo (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Vokietija) ir Neurolucida programinę įrangą („MicroBrightfield Inc“) su fiksuotais fotoaparato nustatymais visiems objektams (naudojant 10x tikslus). Ląstelių, ekspresuojančių c-Fos-IR arba ΔFosB-IR standartinėse analizės srityse NAc šerdyje ir lukštuose, skaičius (400 × 600 µm kiekvienas; Papildomas paveikslas 1) ir mPFC ACA (600 × 800µm; Papildomas paveikslas 3) rankiniu būdu skaičiuoja stebėtojas, kuris buvo užsikimšęs eksperimentinėms grupėms, 2 sekcijose vienam gyvūnui, naudojant Neurolucida programinę įrangą (MBF Bioscience, Williston, VT) ir vidurkį vienam gyvūnui. C-Fos arba ΔFosB ląstelių grupės vidurkiai buvo lyginami naudojant dvipusį ANOVA (faktoriai: seksualinė patirtis ir lytinis aktyvumas) ir Fisher LSD, kad būtų galima atlikti post hoc palyginimus 0.05 reikšmingumo lygiu.

Eksperimentas 2: ΔFosB ekspresijos manipuliavimas

Virusinis vektorinis tarpinis genų perdavimas

Lytiniu požiūriu naivūs Sprague Dawley žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į grupes prieš stereotaksinę chirurgiją. Visi gyvūnai gavo dvišales mikroinjekcijas iš rekombinantinių adeno-susijusių virusinių (rAAV) vektorių, koduojančių GFP (kontrolė; n = 12), laukinio tipo AFosB (n = 11) arba dominuojančio neigiamo ΔFosB jungiamojo partnerio, vadinamo ΔJunD (n = 9) į NAc. AJunD mažina AFosB tarpininkaujantį transkripciją, konkurencingai heterodimerizuodamas su AFosB, prieš prijungdamas AP-1 regioną genų promotoriuose (Winstanley et al. 2007). Viruso titras buvo nustatytas qPCR ir įvertintas in vivo prieš pradedant tyrimą. Titras buvo 1 – 2 × 1011 infekcinių dalelių per ml. rAAV vektoriai buvo švirkščiami 1.5 µL / pusėje tūrio per 7 minutes (koordinatės: AP + 1.5, ML +/− 1.2 iš Bregma; DV −7.6 iš kaukolės paviršiaus pagal Paxinos ir Watson, 1998) naudojant Hamilton švirkštą (5µL Harvard Apparatus, Holliston, MA, JAV). Vektoriai nesukelia didesnio toksiškumo, nei tik kontrolinės infuzijos (Winstanley ir kt., 2007; išsamesnės informacijos apie AAV paruošimą žr Hommel ir kt., 2003). Elgsenos eksperimentai prasidėjo 3 savaites po vektoriaus injekcijų, leidžiančių optimaliai ir stabiliai užkrėsti virusą (Wallace et al. 2008). Transgeno ekspresija pelių rūšių smailėse 10 paros metu ir išlieka padidėjusi mažiausiai 6 mėnesių (Winstanley et al. 2007). Eksperimento pabaigoje gyvūnai buvo transcardiškai perfuzuoti ir NAc sekcijos buvo imuniškai apdorotos GFP (1: 20K; triušio anti-GFP antikūnas; Molecular Probes), naudojant ABC-peroksidazės-DAB reakciją (kaip aprašyta aukščiau), histologiškai tikrinti injekcijos vietas, naudojant GFP kaip žymeklį (Papildomas paveikslas 4). AFosB ir AJunD vektoriai taip pat turi segmentą, išreiškiantį GFP, atskirtą vidinės ribosomos įvedimo vietos, leidžiančią atlikti injekcijos vietos tikrinimą pagal GFP vizualizaciją visuose gyvūnuose. Į statistinius tyrimus buvo įtraukti tik tie gyvūnai, kuriems yra injekcijos vietos, ir virusas, išplitęs tik NAc. Viruso plitimas paprastai apsiribojo NAc dalimi ir neperplūdo rostrali-caudally per visą branduolį. Be to, viruso plitimas dažniausiai apsiribojo korpusu arba šerdimi. Tačiau injekcijos vietų kitimas ir plitimas NAc neturėjo įtakos elgesiui. Galiausiai, GFP injekcijos nepaveikė lytinio elgesio ar patirties sukeltos lytinio elgesio palengvinimo, palyginti su ankstesnių tyrimų metu atliktais neoperaciniais gyvūnais (Balfour et al. 2004).

Seksualinis elgesys

Praėjus trims savaitėms po virusinio vektoriaus pristatymo, 1 kasdieniam poravimosi užsiėmimui gyvūnai sujungė vieną ejakuliaciją (arba 4 valandą), kad įgytų seksualinę patirtį (patirties seansai) ir vėliau buvo išbandyti ilgalaikio patiriamo seksualinio elgesio palengvinimo išraiška 1 ir 2 savaitės (bandymų sesijos 1 ir 2) po paskutinės patirties sesijos. Seksualinės elgsenos parametrai buvo užregistruoti visų poravimosi sesijų metu, kaip aprašyta aukščiau. Statistiniai visų parametrų skirtumai kiekvienoje poravimosi sesijoje buvo lyginami grupėse ir tarp grupių, naudojant dvipusius pakartotinius matavimus ANOVAs (veiksniai: gydymas ir poravimosi sesija) arba vienpusis ANOVA (ejakuliacijos latentinis laikotarpis, tvirtinimų ir intromizijų skaičius; faktorius: gydymas arba poravimas) sesijos metu), po to seka Fisher LSD arba Newman-Keuls testai, skirti atlikti post hoc palyginimus 0.05 reikšmingumo lygiu. Tiksliau sakant, seksualinės patirties palengvinantis poveikis poravimosi parametrams buvo lyginamas 1 patirties seanso (naivus) ir 2, 3 arba 4 patirties sesijų, taip pat tarp eksperimentinių grupių kiekvienoje patirties sesijoje. Be to, norint išanalizuoti gydymo (vektoriaus) poveikį ilgalaikiam seksualinio elgesio palengvinimui, kiekvienos gydymo grupės lyginamieji parametrai buvo lyginami 4 ir testo sesijos 1 ir 2 patirties seansuose, ir kiekvienoje bandymo sesijoje palygintos eksperimentinės grupės.

REZULTATAI

Seksualinė patirtis sukelia ΔFosB kaupimąsi

Iš pradžių buvo atliktas pusiau kiekybinis ΔFosB kaupimasis smegenyse lytiniu būdu patyrusiems vyrams, lyginant su lytiškai naiviais kontroliniais tyrimais. Bendrų išvadų santrauka pateikta Lentelė 1. AFosB-IR analizė buvo daroma nustatant ΔFosB-IR ląstelių skaičių keliose limbinių susijusių smegenų zonose, naudojant standartines analizės sritis. 1 pav demonstruoja reprezentatyvų vaizdą apie DAB-Ni, dažančio seksualiai negydytų ir patyrusių gyvūnų NAc. Reikšmingas ΔFosB reguliavimas buvo rastas mPFC subregionuose (Pav. 2A), NAc šerdis ir apvalkalas (2B), caudate putamen (2B) ir VTA (2C). NAc reikšmingi skirtumai visuose „NAc“ branduolio ir korpuso rostrali-caudal lygiuose ir duomenys, pateikti 2 pav yra visų rostro-caudal lygių vidurkis. Priešingai, αFosB-IR reikšmingai nepadidėjo hipotalaminėje medialinėje preopticinėje branduolyje (NNS: Vid. 1.8 +/− 0.26; ENS: Avg 6.0 +/− 1.86).

1 pav    

 

Reprezentatyvūs vaizdai, rodantys ΔFosB-IR ląsteles (juodąsias) naivoje, neturinčioje nė vieno lyties (A), ir neturi sekso (B) grupių. aco: anterior commissure Skalės juosta rodo 100 µm.
2 pav      

ΔFosB-IR ląstelių skaičius: A. infralimbic (IL), prelimbinis (PL) ir priekinis cingulinis žievės (ACA) subregionas prefialinio žievės medialoje; B. Nucleus accumbens šerdis ir apvalkalas ir caudate putamen (CP); C. Rostralinis, vidurinis, uodegos ir uodegos ...

Seksualinė patirtis mažina poravimosi sukeltą c-Fos

Seksualinės patirties poveikis ΔFosB lygiams NAc buvo patvirtintas naudojant fluorescencijos dažymo metodus. Be to, buvo išanalizuotas seksualinės patirties poveikis c-Fos ekspresijai. 3 pav demonstruoja reprezentatyvius ΔFosB- (žalios) ir c-Fos (raudonos) -IR ląstelių vaizdus visose eksperimentinėse grupėse (A, NNS; B, NS; C, ENS; D, ES). Seksualinė patirtis žymiai padidino ΔFosB ekspresiją NAc šerdyje (Pav. 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) ir apvalkalas (Pav. 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Priešingai, 1 valandos pora prieš perfuziją neturėjo įtakos ΔFosB ekspresijai (4A, C pav) ir nebuvo nustatyta sąveika tarp lytinės patirties ir poravimosi prieš pat perfuziją. Bendras poravimosi efektas prieš perfuziją pasireiškė c-Fos ekspresijai tiek NAc šerdyje (Pav. 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) ir apvalkalas (4D pav: F1,15 = 39.4; p <0.001). Be to, bendras seksualinės patirties poveikis buvo nustatytas NAc šerdyje (Pav. 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) ir apvalkalas (4D pav: F1,15 = 1.7; p = 0.211) ir NAc šerdyje buvo nustatyta sąveika tarp lytinės patirties ir poravimosi prieš perfuziją (F1,15 = 6.5; p = 0.022), su korpuso tendencija (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Post hoc analizė parodė, kad lytiniu požiūriu naivių vyrų šerdyje ir lukštuose pasireiškė poravimosi sukeltas c-fosas.4B, D pav). Tačiau lytiškai patyrusiems vyrams C-Fos NAc šerdyje reikšmingai nepadidėjo.Pav. 4B) ir žymiai susilpnėjo korpuse (4D pav). Taigi seksualinė patirtis sumažino poravimosi sukeltą c-Fos išraišką. P-reikšmės specifiniams porų palyginimams yra paveikslo legendose.

3 pav      

Reprezentatyvūs vaizdai, rodantys ΔFosB (žalia) ir c-Fos (raudona) kiekvienoje eksperimentinėje grupėje. Skalės juosta rodo 100 µm.
4 pav      

Sekso patirtis sukėlė ΔFosB ir poravimosi sukeltas c-Fos. AFosB (Core, A; Shell, C; ACA, E) arba c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) imunoreaktyvių ląstelių skaičius kiekvienai grupei: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) arba ES (n = 4). Duomenys išreiškiami ...

Lytinės patirties poveikis poravimosi sukeltam c-Fos lygiui buvo ne tik NAc. Panašus c-Fos ekspresijos sumažėjimas buvo pastebėtas lytiniu būdu patyrusiems gyvūnams, lyginant su lytiniu požiūriu naivių kontrolinių preparatų. Seksualinė patirtis turėjo didelę įtaką ΔFosB išraiškai ACA (4E pav: F1,15 = 154.2; p <0.001). Poravimas prieš perfuziją neturėjo įtakos ΔFosB ekspresijai (Pav. 4C), tačiau žymiai padidėjo c-Fos (4F pav: F1,15 = 203.4; p <0.001) ACA. Be to, poravimosi sukeltą c-Fos raišką ACA žymiai sumažino seksualinė patirtis (4F pav: F1,15 = 15.8; p = 0.001). C-Fos ekspresijai buvo nustatyta dvipusė seksualinės patirties ir poravimosi sąveika prieš perfuziją.4F pav: F1,15 = 15.1; p <0.001). Konkrečių porų palyginimų P reikšmės pateiktos paveikslų legendose. Galiausiai reikšmingai nesumažėjo poravimosi sukeltos c-Fos ekspresijos medialiniame preoptiniame branduolyje (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09) - srityje, kurioje poravimosi patirtis nesukėlė reikšmingo ΔFosB ekspresijos padidėjimas, rodantis, kad poravimosi sukelta c-Fos raiška nebuvo paveikta visose smegenų srityse.

ΔFosB NAc tarpininkauja seksualinio elgesio stiprinimui

Siekiant ištirti galimą lytinio elgesio stiprinimo molekulinį mechanizmą, kaip parodė patirtis, skatinanti seksualinio elgesio palengvinimą, buvo nustatytas vietinio manipuliavimo su AFosB lygiais poveikis ir jo transkripcinis aktyvumas. Seksualinė patirtis per keturias iš eilės patirtas sesijas turėjo didelę įtaką kalno latentui (Pav. 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001);Pav. 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001) ir ejakuliacijos vėlavimas (Pav. 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP kontroliniai gyvūnai parodė tikėtiną patirties sukeltą seksualinio elgesio palengvinimą ir parodė žymiai mažesnes latentines charakteristikas pirmajam įsitvirtinimui, pirmąją intromiziją ir ejakuliaciją 4 patirties sesijos metu, palyginti su 1 patirtimi.5A – C pav; žr. p reikšmių legendą). Šis patirties sukeltas lytinio elgesio palengvinimas taip pat buvo pastebėtas „FosB“ grupėje, skirtoje kalno ir intromizacijos latencijoms, tačiau ejakuliacijos latentijoje nebuvo pastebėtas didelis skirtumas (5A – C pav). Atvirkščiai, ΔJunD gyvūnai parodė triukšmingą palengvinimą; nors kartotinių poravimosi sesijų metu laikikliai, įsibrovimų ir ejakuliacijų latencijos sumažėjo, nė vienas iš šių parametrų nepasiekė statistinio reikšmingumo, palyginti su 1 ir 4 patirtimi.5A – C pav). Tarp kiekvienos patirties sesijos grupių palyginimų matyti, kad ΔJunD turėjo žymiai ilgesnių latentų, skirtų patirti, įsisavinti ir ejakuliacija patirties sesijų metu, palyginti su ΔFosB ir GFP (5A – C pav). Be to, tiek seksualinė patirtis, tiek gydymas turėjo didelį poveikį kopuliacijos efektyvumui (5F pav: seksualinė patirtis, F1,12 = 22.5; p <0.001; gydymas, F1,12 = 3.3; p = 0.049). ΔFosB vyrai patyrė 4 patirties seanso metu padidino kopuliacijos efektyvumą, lyginant su 1 patirtimi.5F pav). Be to, „AFosB“ gyvūnai, palyginti su 4 patirties sesija, patyrė gerokai mažiau priešais ejakuliaciją.5D pav: F10,43 = 4.1; p = 0.004) ir kad ΔJunD vyrai turėjo daug daugiau stovai prieš ejakuliaciją, taigi žymiai sumažino kopuliacijos efektyvumą, nei bet kuri kita iš dviejų grupių (5D ir F pav). Taigi, GFP ir ΔFosB gyvūnai parodė patirties sukeltą lytinio elgesio ir seksualinės veiklos pradžios palengvinimą, o ΔJunD gyvūnai to nepadarė.

5 pav      

GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) ir ΔJunD (n = 9) gyvūnų seksualinis elgesys: prijungimo latencija (A), intratizacijos latencija (B), ejakuliacijos latencija (C), laikiklių skaičius (D), vidinių (E) ir kopuliacijos efektyvumo (F) skaičius. Duomenys išreiškiami ...

Norint išbandyti hipotezę, kad ΔFosB ekspresija yra labai svarbi ilgalaikio patirties sukeltos lytinės elgsenos išraiška, gyvūnai buvo išbandyti 1 savaitę (testo sesija 1) ir 2 savaites (bandymų sesija 2) po paskutinės patirties sesijos. Iš tiesų, GFP ir ΔFosB grupėse išlaikytas palengvintas seksualinis elgesys, nes nė vienas iš elgesio parametrų nesiskyrė tarp bandymų sesijų 1 arba 2 ir galutinės patirties sesijos 4, GFP ir ΔFosB grupėse (5A – C pav; išskyrus ejakuliacijos latentinį ir kopuliacijos efektyvumą bandymų sesijoje 1 ΔFosB gyvūnams). Abiejų bandymų sesijų metu buvo nustatyti reikšmingi skirtumai tarp ΔJunD gyvūnų ir GFP arba ΔFosB grupių visuose seksualinės elgsenos parametruose (5A – F pav). Nebuvo jokių skirtumų tarp grupių ar tarp jų, lyginant intratizacijų, PEI ar ejakuliuojamų gyvūnų procentinių dalių skaičių (100% vyrų visose grupėse, ejakuluotose per paskutines keturias poravimosi sesijas).

DISKUSIJA

Dabartinis tyrimas parodė, kad seksualinė patirtis sukelia ΔFosB kaupimąsi keliose su limbais susijusiuose smegenų regionuose, įskaitant NAc branduolį ir lukštą, mPFC, VTA ir caudate putamen. Be to, seksualinė patirtis susilpnino poravimosi sukeltą c-Fos ekspresiją NAc ir ACA. Galiausiai, buvo įrodyta, kad ΔFosB NAc yra labai svarbus tarpininkavimo palengvinant seksualinės patirties įgijimą ir ilgalaikės patirties sukeltos lytinio elgesio palengvinimo išraiška.. Konkrečiai, mažinant ΔFosB tarpininkaujantį transkripciją, sumažėjo patirties sukeltas seksualinės motyvacijos ir veikimo palengvinimas, o ΔFosB pernelyg išraiška NAc padidino seksualinio elgesio palengvinimą, nes padidėjo seksualinė veikla ir mažiau patirties. Kartu dabartinės išvados patvirtina hipotezę, kad ΔFosB yra kritinis molekulinis tarpininkas ilgalaikiam nervų ir elgesio plastiškumui, kurį sukelia seksualinė patirtis.

Dabartiniai rezultatai išplečia ankstesnius tyrimus, rodančius lyties patirties sukeltą ΔFosB NAc žiurkių patinams (Wallace et al. 2008) žiurkėnai (Gyvatvorės et al. 2009). Wallace ir kt. (2008) parodė, kad rAAV-ΔFosB per didelė ekspresija NAc sustiprino lytinį elgesį lytiškai naiviems gyvūnams per pirmąją poravimosi sesiją, kaip liudija mažiau introdukcijų į ejakuliaciją ir trumpesnius po ejakuliacijos periodus, tačiau jie neturėjo įtakos seksualiai patyrusiems vyrams (Wallace et al. 2008).

Atvirkščiai, šiuo metu atliktas tyrimas parodė, kad per pirmąjį bandymą, bet ne seksualinės patirties įgijimo metu ir po jo, ΔFosB pernelyg išraiška nebuvo paveikta lytiškai naiviems vyrams. ΔFosB pernelyg išreiškėjai parodė padidėjusį seksualinį efektyvumą (padidėjusį kopuliacijos efektyvumą), palyginti su GFP gyvūnais.

Be to, dabartiniame tyrime buvo ištirtas ΔFosB vaidmuo blokuojant ΔFosB-medijuojamą transkripciją, naudojant AJunD ekspresuojančią virusinę vektorių. Patirtį sukeliančio ΔFosB ekspresijos padidėjimo prevencija slopino patirties sukeltą seksualinės motyvacijos palengvinimą (padidėjusią kalno ir vidinės latencijos), taip pat seksualinę veiklą (padidėjusį ejakuliacijos latentą ir stiebų skaičių) ir paskesnę palengvinto seksualinio elgesio išraišką.

Taigi šie duomenys yra pirmieji, kurie nurodo privalomą ΔFosB vaidmenį įgyjant patirties sukeltą lytinio elgesio palengvinimą. Be to, šie duomenys rodo, kad ΔFosB taip pat kritiškai dalyvauja ilgalaikėje patirties sukeltos palengvinto elgesio išraiška. Siūlome, kad ši ilgalaikė palengvinto elgesio išraiška būtų atminties forma natūraliam atlygiui, taigi ΔFosB NAc yra atlygio atminties tarpininkas. Seksualinė patirtis taip pat padidino ΔFosB lygį VTA ir mPFC, srityse, susijusiose su atlygiu ir atmintimi (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Būsimieji tyrimai reikalingi norint išsiaiškinti galimą ΔFosB aukštesnio reguliavimo reikšmę šiose srityse už atminimo atmintį.

ΔFosB ekspresija yra labai stabili, todėl ji turi didelį potencialą kaip molekulinis mediatorius, palaikantis nuolatinius smegenų prisitaikymus po lėtinių perturbacijų („Nestler“ et al. 2001). Nustatyta, kad ΔFosB palaipsniui didina NAc kiekį, palyginti su daugeliu kokaino injekcijų, ir išlieka iki kelių savaičių (Viltis et al. 1992; Viltis et al. 1994). Šie NAc ΔFosB ekspresijos pokyčiai siejami su narkotikų atlygio jautrinimu ir priklausomybe („Chao & Nestler 2004“; „McClung & Nestler 2003“; McClung et al. 2004; „Nestler 2004“, 2005, 2008; „Nestler“ et al. 2001; Zachariou et al. 2006). Priešingai, osFosB vaidmuo tarpininkaujant natūraliam atlygiui buvo per mažas. Naujausi įrodymai rodo, kad ΔFosB indukcija NAc yra susijusi su natūraliu atlygiu. ΔFosB lygiai taip pat padidėja NAc po sacharozės suvartojimo ir rato veikimo. Per didelė ΔFosB ekspresija striatume naudojant bitransgenines peles arba virusinius vektorius žiurkėse padidina sacharozės suvartojimą, sustiprinta maisto produktų motyvacija ir spontaniškas ratas (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Dabartiniai duomenys iš esmės papildo šias ataskaitas ir toliau patvirtina, kad ΔFosB yra svarbiausias atlygio stiprinimo ir natūralaus atlygio atminties tarpininkas.

ΔFosB gali tarpininkauti patirties sukeltą seksualinio elgesio stiprinimą, indukuodamas plastiškumą mezolimbinėje sistemoje. Iš tiesų, seksualinė patirtis sukelia daugybę ilgalaikių mezolimbinės sistemos pakeitimų (Bradley & Meisel 2001 m; Frohmaderis et al. 2009; Krapai et al. 2010). seksualiai patyrusių patinų žiurkių patyrė elgsenos lygį, jautrintą lokomotorinį atsaką į amfetaminą ir padidintą amfetamino atlygį.Krapai et al. 2010); kūdikių žiurkėnai taip pat pastebėjo pakitusį lokomotorinį atsaką į amfetamino \ tBradley & Meisel 2001 m). Be to, po abstinencijos laikotarpio nuo patinų žiurkių patyrimo dendritinių spyglių skaičiaus ir dendritinių dantų sudėtingumo padidėjimas buvo nustatytas (Krapai et al. 2010). Dabartinis tyrimas rodo, kad ΔFosB gali būti specifinis ilgalaikis seksualinės patirties rezultatas. Pagal susitarimą ΔFosB neseniai buvo įrodyta, kad jis yra svarbus, siekiant sukelti dendritinius stuburo pokyčius atsakant į lėtinį kokaino vartojimą. (Dietz et al. 2009; Labirintas et al. 2010).

Neaišku, kokie priešviršutiniai neurotransmiteriai (-iai) yra atsakingi už ΔFosB indukciją NAc, bet DA buvo pasiūlyta kaip kandidatas (Nye et al. 1995). Beveik visi piktnaudžiavimo vaistai, įskaitant kokainą, amfetaminą, opiatus, kannabinoidus ir etanolį, taip pat natūralus atlygis, padidina ΔFosB NAc. (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Abu piktnaudžiavimo vaistai ir natūralūs atlygiai didina sinaptinę DA koncentraciją NAc (Damsma et al. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003 m). ReceptorFosB piktnaudžiavimo narkotikais indukcija nustatyta DA receptorių turinčiose ląstelėse, o kokaino sukeltas ΔFosB blokuojamas D1 DA receptorių antagonistut (Nye et al. 1995). Taigi, DA išsiskyrimas yra hipotezė, kad stimuliuoja ΔFosB ekspresiją ir taip tarpininkauja su atlyginimu susijusiam neuroplastikai. Toliau remiant idėją, kad ΔFosB lygiai priklauso nuo DA, matyti, kad smegenų sritys, kuriose seksualinė patirtis pakeitė ΔFosB lygį, gauna stiprią dopaminerginę iš VTA, įskaitant medialinę prefrontalinę žievę ir bazolaterinę amygdalą.

Tačiau, priešingai, ΔFosB nėra padidėjęs medialiniame preopticiniame plote, nors ši sritis gauna dopaminerginį įėjimą, nors ir iš hipotalaminių šaltinių (Milleris ir Lonšteinas 2009 m). Būsimi tyrimai reikalingi norint išbandyti, ar poravimosi sukeltas ΔFosB išraiška ir seksualinės patirties poveikis seksualinei motyvacijai ir veikimui priklauso nuo DA veiksmų. DA vaidmuo lytiniame atlyginime patinų žiurkėms šiuo metu nėra visiškai aiškus (Agmo ir Berenfeldas 1990 m; Pfaus 2009). Yra daug įrodymų, kad DA yra išleista NAc, kai patiria moterį ar porą (Damsma et al. 1992) ir DA neuronai aktyvuojami seksualinio elgesio metu (Balfour et al. 2004). Tačiau sisteminės DA receptorių antagonistų injekcijos netrukdo seksualinio atlygio sukeliamoms sąlyginėms vietovės nuostatoms (Agmo ir Berenfeldas 1990 m) ir hipotezė, kad DA yra labai svarbi patirties sukeltam poravimosi stiprinimui, yra neišbandyta.

Taip pat neaišku, kokie yra tolesni ΔFosB poveikio tarpininkai seksualiniam elgesiui. Nustatyta, kad ΔFosB veikia kaip transkripcijos aktyvatorius ir repressorius per AP-1 priklausomą mechanizmą („McClung & Nestler 2003“; Peakman et al. 2003). Nustatyti daug tikslinių genų, įskaitant tiesioginį ankstyvąjį geno c-fos (Viltis et al. 1992; Viltis et al. 1994; Morgan & Curran 1989 m; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dinamorfinas (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), NFKB subvienetai (Ang et al. 2001) Išir AMPA glutamato receptorių GluR2 subvienetas (Kelz et al. 1999). Dabartiniai rezultatai rodo, kad poravimosi sukeltos c-Fos koncentracijos sumažėjo seksualinės patirties smegenų srityse su padidėjusiu ΔFosB (NAc ir ACA). C-Fos slopinimas pasireiškia priklausomai nuo laikotarpio nuo paskutinių poravimosi ir pakartotinių poravimosi sesijų, kaip ir ankstesniuose tyrimuose, toks c-Fos sumažėjimas nebuvo aptiktas žiurkėms, ištirtoms 1 savaitę po paskutinės poravimosi sesijos (Balfour et al. 2004) arba po seksualinės patirties, kurią sudaro tik viena poravimosi sesija (Lopez & Ettenberg 2002 m). Be to, dabartinė išvada atitinka įrodymus, kad ΔFosB slopina c-fos geną po lėtinio amfetamino poveikio (Renthal et al. 2008). Remiantis šiais duomenimis, pakartotinių ankstyvųjų geno mRNR (c-fos, fosB, c-jun, junB ir zif268) indukcija buvo sumažinta po pakartotinių kokaino injekcijų, lyginant su ūminėmis vaistų injekcijomis (Viltis et al. 1992; Viltis et al. 1994) ir amfetamino sukeltas c-fos slopinamas po pašalinimo iš lėtinio amfetamino vartojimo.Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). C-Fos ekspresijos reguliavimo po veikimo po lėtinio narkotikų ar seksualinės patirties funkcinė svarba lieka neaiški, ir buvo pasiūlyta, kad jis yra svarbus homeostatinis mechanizmas, skirtas reguliuoti gyvūno jautrumą pakartotiniam atlygio poveikiui (Renthal et al. 2008).

Apibendrinant, dabartinis tyrimas rodo, kad ΔFosB NAc atlieka svarbų vaidmenį seksualinio atlygio atmintyje, palaikydamas galimybę, kad ΔFosB yra svarbus bendram atlyginimų stiprinimui ir atmintyje. Dabartinio tyrimo išvados dar labiau paaiškina mūsų supratimą apie ląstelinius ir molekulinius mechanizmus, tarpininkaujančius seksualinį atlygį ir motyvaciją, ir pridedame prie literatūros, rodančios, kad ΔFosB yra svarbus veikėjas priklausomybės vystyme, parodydamas ΔFosB vaidmenį natūraliu atlygiu stiprinimas.

Papildoma medžiaga

Pateikite S1-S4 pav. Ir S1-S2 lentelę

Padėka

Šis tyrimas buvo paremtas Kanados sveikatos tyrimų institutų dotacijomis LMC, Nacionaliniam psichikos sveikatos institutui į ETT ir Kanados gamtos mokslų ir inžinerijos mokslinių tyrimų tarybai KKP ir LMC.

NUORODOS

  1. Agmo A. Vyrų žiurkių lytinis elgesys. Brain Res Brain Res Protoc. 1997: 1: 203 – 209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Vyrų žiurkių ejakuliacijos savybių stiprinimas: opioidų ir dopamino vaidmuo. Behav Neurosci. 1990: 104: 177 – 182. [PubMed]
  3. Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Branduolinio faktoriaus-kappaB indukcija branduoliuose accumbens lėtinio kokaino vartojimo metu. J Neurochem. 2001: 79: 221 – 224. [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksualinis elgesys ir su lytimi susiję aplinkos ženklai aktyvuoja mesolimbinę sistemą žiurkių patinams. Neuropsichofarmakologija. 2004: 29: 718 – 730. [PubMed]
  5. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Lėtinio kokaino poveikio reguliuoja neuroninis baltymas Cdk5. Gamta. 2001: 410: 376 – 380. [PubMed]
  6. Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hidroksidopamino pažeidimai žiurkėnų moterims (Mesocricetus auratus) panaikina jautrią seksualinės patirties poveikį kopuliacinei sąveikai su vyrais. Behav Neurosci. 2005: 119: 224 – 232. [PubMed]
  7. Bradley KC, Meisel RL. Seksualinio elgesio c-Fos indukcija branduolyje accumbens ir amfetamino stimuliuojamas lokomotorinis aktyvumas jautrinamas ankstesniam seksualiniam patyrimui Sirijos žiurkėnų moterims. J Neurosci. 2001: 21: 2123 – 2130. [PubMed]
  8. Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomų priklausomi ir nepriklausomi FosB destabilizavimo mechanizmai: FosB degronų domenų identifikavimas ir poveikis DeltaFosB stabilumui. Eur J Neurosci. 2007: 25: 3009 – 3019. [PubMed]
  9. Chao J, Nestler EJ. Narkomanijos molekulinė neurobiologija. Annu Rev Med. 2004: 55: 113 – 132. [PubMed]
  10. Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Delta FosB ir FosB panašių baltymų reguliavimas elektrokonvulsinių priepuolių ir kokaino gydymu. Molekulinė farmakologija. 1995: 48: 880 – 889. [PubMed]
  11. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatyvinė ląstelių tipo specifinė „DeltaFosB“ ekspresija padidina kokaino skatinimą. J Neurosci. 2003: 23: 2488 – 2493. [PubMed]
  12. Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Centrinis ejakuliacijos reguliavimas. Physiol Behav. 2004: 83: 203 – 215. [PubMed]
  13. Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Seksualinis elgesys padidina dopamino transmisiją patinų žiurkių branduolyje ir striatume: palyginimas su naujumu ir judėjimu. Behav Neurosci. 1992: 106: 181 – 191. [PubMed]
  14. Dietz DM, Maze I, Mechanic M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Esminis ΔFosB vaidmuo branduolio accumbens neuronų dendritinių spyglių kokaino reguliavime. Neurologijos draugija Santrauka. 2009
  15. „Frohmader KS“, „Pitchers KK“, „Balfour ME“, „Coolen LM“. Malonumų maišymas: narkotikų poveikio lytiniam elgesiui žmonėms ir gyvūnų modeliams apžvalga. Horm Behav. 2009 Spaudoje.
  16. Gyvatvorės VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB overexpression į branduolį accumbens padidina seksualinį atlygį moteriškų Sirijos žiurkėnų. Genesas Behav. 2009: 8: 442 – 449. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  17. Hernandez L, Hoebel BG. Maitinimas ir hipotalaminis stimuliavimas padidina dopamino apyvartą. Physiol Behav. 1988a: 44: 599 – 606. [PubMed]
  18. Hernandez L, Hoebel BG. Užmokestis už maistą ir kokainas padidina ekstraląstelinį dopaminą branduoliuose, matuojant mikrodializės būdu. Life Sci. 1988b: 42: 1705 – 1712. [PubMed]
  19. Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Esminis fosB geno vaidmuo lėtinių elektrokonvulsinių priepuolių molekuliniuose, ląsteliniuose ir elgesio veiksmuose. J Neurosci. 1998: 18: 6952 – 6962. [PubMed]
  20. Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Vietinis genų nusileidimas smegenyse naudojant virusinę tarpinę RNR trukmę. Nat Med. 2003: 9: 1539 – 1544. [PubMed]
  21. Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Greitos ankstyvosios geno ekspresijos reguliavimas ir AP-1 surišimas žiurkių branduolyje akrobatinio lėtinio kokaino. Proc Natl Acad Sci US A. 1992, 89: 5764 – 5768. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  22. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Ilgalaikio AP-1 komplekso, kurį sudaro kintantys Fos tipo baltymai smegenyse, sukėlimas lėtiniu kokainu ir kitais lėtiniais gydymais. Neuronas. 1994: 13: 1235 – 1244. [PubMed]
  23. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Vyrų lytinis elgesys. Horm Behav. 2002: 1: 1 – 139.
  24. Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Ūminis ir lėtinis amfetamino gydymas skirtingai reguliuoja neuropeptido pasiuntinių RNR ir Fos imunoreaktyvumą žiurkių strialių neuronuose. Neurologija. 1995: 65: 1041 – 1050. [PubMed]
  25. Jenkins WJ, Becker JB. Dopamino dinaminis padidėjimas žiurkių patelėliuose. Eur J Neurosci. 2003: 18: 1997 – 2001. [PubMed]
  26. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Duman RS Nestler EJ. Transkripcijos faktoriaus deltaFosB ekspresija smegenyse kontroliuoja jautrumą kokainui. Gamta. 1999: 401: 272 – 276. [PubMed]
  27. Lopez HH, Ettenberg A. Poveikis patelių žiurkėms sukelia c-fos indukcijos skirtumus tarp lytiškai naivių ir patyrusių patinų. Brain Res. 2002: 947: 57 – 66. [PubMed]
  28. Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Esminis histono metiltransferazės G9a vaidmuo kokaino sukeliamame plastikume. Mokslas. 2010: 327: 213 – 216. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  29. McClung CA, Nestler EJ. CREB ir DeltaFosB reguliuoja geno ekspresiją ir kokaino atlygį. Nat Neurosci. 2003: 6: 1208 – 1215. [PubMed]
  30. McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekulinis jungiklis ilgalaikiam prisitaikymui smegenyse. Brain Res Mol Brain Res. 2004: 132: 146 – 154. [PubMed]
  31. Miller SM, Lonstein JS. Dopaminerginės projekcijos į pogimdyvių žiurkių medialinį preopticinį plotą. Neurologija. 2009: 159: 1384 – 1396. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  32. Morgan JI, Curran T. Stimulio-transkripcijos jungimas neuronuose: ląstelių tiesioginių ankstyvųjų genų vaidmuo. Tendencijos Neurosci. 1989: 12: 459 – 462. [PubMed]
  33. Nestler EJ. Narkomanijos molekuliniai mechanizmai. Neurofarmakologija. 2004; 47 Suppl 1: 24 – 32. [PubMed]
  34. Nestler EJ. Kokaino priklausomybės neurobiologija. Sci praktikos perspektyva. 2005: 3: 4 – 10. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  35. Nestler EJ. Peržiūra. Transkripcijos priklausomybės mechanizmai: DeltaFosB vaidmuo. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008: 363: 3245 – 3255. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  36. „Nestler EJ“, „Barrot M“, „Self DW“. DeltaFosB: ilgalaikis molekulinis jungiklis priklausomybei. Proc Natl Acad Sci US A. 2001, 98: 11042 – 11046. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  37. Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologiniai tyrimai, susiję su lėtinio FOS susijusio antigeno indukcijos, kurią sukelia kokainas, reguliavimu striatum ir nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995: 275: 1671 – 1680. [PubMed]
  38. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB branduolyje accumbens reguliuoja sustiprintą instrumentinį elgesį ir motyvaciją. J Neurosci. 2006: 26: 9196 – 9204. [PubMed]
  39. Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducible, smegenų srities specifinė dominuojančio neigiamo c-Jun mutanto ekspresija transgeninėse pelėse mažina jautrumą kokainui. Brain Res. 2003: 970: 73 – 86. [PubMed]
  40. Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB kaupiasi GABAerginių ląstelių populiacijoje ventralinės tegmentalinės srities užpakalinėje uodegoje po gydymo psichostimuliantais. Eur J Neurosci. 2005: 21: 2817 – 2824. [PubMed]
  41. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. DeltaFosB indukcija su lydinčiomis smegenų struktūromis po lėtinio streso. J Neurosci. 2004: 24: 10594 – 10602. [PubMed]
  42. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Skirtingi DeltaFosB indukcijos modeliai smegenyse, naudojant narkotikus. Sinapsija. 2008: 62: 358 – 369. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  43. Pfaus JG. Lytinio potraukio keliai. J Sex Med. 2009: 6: 1506 – 1533. [PubMed]
  44. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Kondicionavimas ir seksualinis elgesys: peržiūra. Horm Behav. 2001: 40: 291 – 321. [PubMed]
  45. Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Dopamino, motyvacijos ir atminties iš viršaus į apačią perspektyva. Pharmacol Biochem Behav. 2008: 90: 236 – 249. [PubMed]
  46. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplastika mesolimbinėje sistemoje, kurią sukelia natūralus atlygis ir paskesnis atlygio susilaikymas. Biol psichiatrija. 2010: 67: 872 – 879. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  47. Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB tarpininkauja c-fos geno epigenetiniam desensibilizavimui po lėtinio amfetamino poveikio. J Neurosci. 2008: 28: 7344 – 7349. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  48. Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Visame pasaulyje atlikta kromatino reguliavimo kokainu analizė atskleidžia sirtuinų vaidmenį. Neuronas. 2009: 62: 335 – 348. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  49. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Kitchers KK, Coolen LM. Seksualinis atlygis žiurkių patinams: seksualinės patirties poveikis sąlyginėms vietovės nuostatoms, susijusioms su ejakuliacija ir intromis. Horm Behav. 2009: 55: 93 – 97. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  50. Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. DeltaFosB fosforilinimas tarpininkauja jo stabilumui in vivo. Neurologija. 2008
  51. Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. DeltaFosB stabilumo reguliavimas fosforilinimo būdu. J Neurosci. 2006: 26: 5131 – 5142. [PubMed]
  52. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. „DeltaFosB“ įtaka branduoliui siejama su natūraliu atlygiu. J Neurosci. 2008: 28: 10272 – 10277. [PMC nemokamas straipsnis] [PubMed]
  53. Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reguliuoja ratų važiavimą. J Neurosci. 2002: 22: 8133 – 8138. [PubMed]
  54. Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB indukcija orbitofrontalinėje žievėje skleidžia toleranciją kokaino sukeltai kognityvinei disfunkcijai. J Neurosci. 2007: 27: 10497 – 10507. [PubMed]
  55. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Esminis DeltaFosB vaidmuo branduolio akumbensuose morfino veikloje. Nat Neurosci. 2006: 9: 205 – 211. [PubMed]
  56. Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos palengvina kokaino sukeltų nuolatinių pokyčių įgijimą ir išnykimą. J Neurosci. 2006: 26: 13287 – 13296. [PubMed]