Neirozinātnes žurnāls, 6 septembris 2006, 26 (36): 9196-9204; doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1124-06.2006
Peter Olausson1, J. David Jentsch2, Natalie Tronson1, Rachel L. Neve3, Eric J. Nestler4, un Jane R. Taylor1
1.Korespondence jāadresē Jane R. Taylor, Psihiatrijas departamentam, Molekulārās psihiatrijas nodaļai, Yale Universitātes Medicīnas skolai, Ribicoff pētniecības iekārtām, Konektikutas Garīgās veselības centram, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[e-pasts aizsargāts]
Anotācija
Motivācijas pārmaiņas ir saistītas ar vairāku psihisku traucējumu patofizioloģiju, ieskaitot vielu lietošanu un depresiju. Ir zināms, ka atkārtota iedarbība uz ļaunprātīgu vai stresu izraisošām zālēm pastāvīgi inducē transkripcijas faktoru ΔFosB kodolkrāsās (NAc) un dorsālajā striatumā, kas hipotēzi veicina neuroadaptāciju dopamīna regulētā signalizācijā.. Tomēr ir maz zināms par ΔFosB īpašo iesaistīšanos apetīti motivētu uzvedību regulēšanā. Šeit mēs parādām, ka AFosB inducējamā pārmērīga ekspresija NAc un brangēnu peles dorsālā striatālā, vai īpaši žurku NAc kodolā, izmantojot vīrusu mediētu gēnu pārnesi, pastiprināta pastiprināta instrumentālā veiktspēja un progresējoša attiecība. Ļoti līdzīgas uzvedības sekas tika konstatētas pēc iepriekšējas atkārtotas kokaīna, amfetamīna, MDMA [(+) - 3,4-metilēdioksimetamfetamīna] vai nikotīna iedarbības žurkām. Šie rezultāti atklāj, ka ΔFosB ir spēcīgs motivācijas procesu regulējums, un sniedz pierādījumus tam, ka narkotiku izraisītās izmaiņas gēnu ekspresijā caur ΔFosB indukciju NAc kodolā var būtiski ietekmēt motivējošu ietekmju ietekmi uz instrumentālo uzvedību.
Ievads
Atkārtota iedarbība uz narkotikām izraisa laikus dinamiskas gēnu transkripcijas izmaiņas, kas rada ilgstošas neuroadaptācijas kodola accumbens (NAc) ietvaros.Nestler, 2004). Šim smadzeņu reģionam ir izšķiroša nozīme gan narkotiku, gan dabiskās pastiprināšanas procesos (Kelley un Berridge, 2002), lai gan ir maz zināms par transkripcijas faktoriem, kas ietekmē uzvedību, ko motivē nežēlīgas, ēstgribas pastiprinātāji, piemēram, pārtika. ΔFosB ir transkripcijas faktors, kas aktivizēts NAc un dorsālā striatumā, lietojot hronisku zāļu iedarbību (Konradi et al., 1994; Nye et al., 1995; Chen et al., 1997; Pich et al., 1997; Shaw-Lutchman et al., 2003) un piespiedu riteņu vadīšana (Werme et al., 2002). Šajos reģionos to izraisa arī vairāki hroniska stresa veidi.Perrotti et al., 2004). Zāļu pastiprināšanas procesu pastiprināšana, kas saistīti ar striatāla ΔFosB indukciju, ir labi pierādīta (Kelz et al., 1999; Colby et al., 2003; Zachariou et al., 2006). Tomēr nav zināms, kā šajos reģionos paaugstināta ΔFosB līmeņa ietekme uz instrumentālo uzvedību, ko motivē dabīgie pastiprinātāji.
Instrumentālo atbilžu sniegšana ir nepieciešama narkotiku lietošanas uzvedības sastāvdaļa, kas var kļūt disregulēta vai neelastīga, jo pāreja uz atkarību progresē (Jentsch un Taylor, 1999; Berke un Hyman, 2000; Berridge un Robinson, 2003; Everitt un Robbins, 2005). NAc ir iesaistīta vairākos instrumentālās uzvedības aspektos, kas ir būtiski atkarībai (Balleine un Killcross, 1994; Corbit et al., 2001; de Borchgrave et al., 2002; Di Ciano un Everitt, 2004b; Everitt un Robbins, 2005). Tādēļ ir iespējams, ka narkotiku izraisītās neiroadaptācijas NAc ietvaros varētu ietekmēt instrumentālo darbību veikšanu. Patiešām, hroniska kokaīna iedarbība uzlabo instrumentālo sniegumu ar pastiprinātu saharozi (Miles et al., 2004) un manipulācijas, kas domātas, lai bloķētu neiroplastiskumu NAc kodolā, ieskaitot PKA (proteīna kināzes A) vai proteīna sintēzes inhibēšanu, traucē uztura atlīdzību par instrumentālo reakciju (Baldwin et al., 2002a; Hernandez et al., 2002). NAc kodols arī veicina kondicionēto ietekmi uz instrumentālo uzvedību (Parkinsona et al., 1999; Corbit et al., 2001; Hall et al., 2001; Di Ciano un Everitt, 2004a; Ito et al., 2004), nodrošinot neirobioloģisko substrātu, ar kuru ΔFosB indukcija var spēcīgi ietekmēt instrumentālo veiktspēju un motivāciju ēstgribas pastiprinātājiem, piemēram, pārtikai, ūdenim vai ļaunprātīgai lietošanai.
Šeit mēs pētījām ΔFosB ietekmi uz pārtikas motivētu instrumentālu uzvedību, izmantojot divas komplementāras ģenētiskās pieejas: (1) inducējamo ΔFosB pārprofesionālo ekspresiju NAc un borsransgēnu pelēm (NSE-tTA × TetOp-ΔFosB) un (2) pārmērīgu ekspresiju ΔFosB NAc kodolā, īpaši izmantojot vīrusu mediētu gēnu pārnesi žurkām. Mēs izvērtējām arī to, vai iepriekšēja atkārtota kokaīna, amfetamīna, (+) - 3,4-metilēdioksimetamfetamīna (MDMA) vai nikotīna iedarbība apstākļos, par kuriem ziņots, ka palielinās ΔFosB, uzlabos pārtikas pastiprinātu instrumentālo reakciju un / vai motivāciju, izmantojot progresīvo attiecību grafiku, kā pierādīts ar narkotikām pastiprinātai pašpārvaldei (Horgers et al., 1990, 1992; Piazza et al., 1990; Vezina et al., 2002; Miles et al., 2004). Mūsu rezultāti liecina par pastāvīgo ΔFosB ietekmi uz instrumentālo uzvedību un liek domāt, ka šis transkripcijas faktors var darboties NAc kodolā kā motivācijas funkcijas regulators.
Materiāli un metodes
Dzīvnieki un dzīvnieku kopšana
Eksperimentāli naivas Sprague Dawley žurkas ieguva no Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Vīriešu bitransgēnās 11A peles tika iegūtas no krustojuma starp homozigotiskām transgēnām pelēm, kas ekspresē neironu specifisku enolāzes (NSE) -tTA tetraciklīna transaktivatora proteīnu (A līnija) un pelēm, kas ekspresē TetOp (tetraciklīna reaģējošo promotoru) -AFosB (līnija 11); vecāku līnijas tika uzturētas ārpusbraucamā jauktajā fonā (50% ICR un 50% C57BL6 × SJL) (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Šīs bitransgēnās 11A peles ekspresē ΔFosB tikai tad, ja: (1) abi transgēni atrodas vienā šūnā, un (2) transkripcijas aktivācija ar tTA netiek kavēta tetraciklīna antibiotiku, piemēram, doksiciklīna, klātbūtnē. Doksiciklīna ievadīšana šīm pelēm tādējādi var izraisīt laika kontroli pār ΔFosB ekspresiju un izmantot, lai novērstu ekspresiju attīstības laikā; patiešām, doksiciklīna lietošana nav saistīta ar konstatējamu ΔFosB noplūdes izpausmi (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Turklāt šajos eksperimentos tika izvēlēta bitransgēnu peles 11A līnija, jo tām ir ekspresijas modelis, kas galvenokārt ir ierobežots ar dinamorfīnu saturošiem striatāla neironiem (gan NAc, gan dorsālo striatumu), kas ir ļoti līdzīgs ΔFosB indukcijas modelim ar hronisku narkotiku palīdzību ekspozīcija (Kelz et al., 1999). Turklāt iepriekš minētā ΔFosB izteiktās izteiksmes kvantitatīvā izteiksme ir kvantificēta (Chen et al., 1998; Kelz et al., 1999). Peles tika izveidotas Teksasas Dienvidrietumu universitātē un uzturētas un pārbaudītas Yale telpās. Grūsnības un attīstības laikā visas peles tika uzturētas doksiciklīnā līdz 8 – 9 nedēļas vecumam ar 100 μg / ml koncentrāciju dzeramajā ūdenī, kas bija zināms, ka saglabā TetOp vadītos transgēnus „izslēgtā” stāvoklī, un lietoja sākuma 6 nedēļu laikā no doksiciklīna, kad ΔFosB ekspresija kļūst maksimāla (Kelz et al., 1999). Visi eksperimenti ietvēra littermate bitransgenic peles salīdzinājumu ar doksiciklīnu, kas pats par sevi neietekmē motivētu uzvedību (Kelz et al., 1999; McClung un Nestler, 2003; Zachariou et al., 2006).
Visi eksperimentālie pacienti tika izmitināti pa pāriem (žurkām) vai grupās (pelēm; no četriem līdz pieciem būrī) kontrolētos temperatūras un mitruma apstākļos 12 h gaismas / tumšajā ciklā (iedegās pie 7: 00 AM un izslēgti pie 7: 00 PM). Viņiem tika atļauts vismaz 7 d pielāgoties mājokļa iekārtām pirms jebkura pētījuma. Dzīvniekiem vienmēr bija pieejams ūdens un ierobežota piekļuve pārtikai, kā aprakstīts turpmāk. Visu dzīvnieku izmantošanu veica saskaņā ar Nacionālajiem Veselības rokasgrāmatiem laboratorijas dzīvnieku aprūpei un lietošanai, un to apstiprināja Dzīvnieku aprūpes un lietošanas komitejas Teksasas Dienvidrietumu un Yale universitātē.
Narkotikas
Kokaīna hidrohlorīds [Valsts Narkotiku ļaunprātīgas izmantošanas institūts (NIDA)], d-amfetamīna sulfāts (Sigma, St Louis, MO), MDMA hidrohlorīds (laipni nodrošināts ar NIDA) un (-) - nikotīna ūdeņraža tartrāts (Sigma ) tika izšķīdināti sterilā fizioloģiskajā šķīdumā (0.9%) un injicēti intraperitonāli 5 ml / kg (pelēm) vai 2 ml / kg (žurkām) tilpumā. Pirms injekcijas nikotīna šķīduma pH tika koriģēts ar nātrija bikarbonātu.
Vīrusu vektori
Vīrusu mediēta gēna pārnešana tika veikta, kā aprakstīts iepriekš (Carlezon et al., 1998; Perrotti et al., 2004). Īsumā, cDNS, kas kodē specifiskos proteīnus, tika ievietotas herpes simplex vīrusa (HSV) amplikona HSV-PrPUC un iesaiņotas vīrusā, izmantojot palīgu 5dl1.2. Vektors, kas vada vai nu HSV-LacZ ekspresiju, kas kodē kontrolproteīnu β-galaktozidāzi, vai HSV-AFosB, kas kodē AFosB, pēc tam tika ievadīts NAc kodā saskaņā ar eksperimentālo protokolu.
eksperimentāla procedūra
Kontūra.
Eksperiments 1 pētīja iepriekšējās atkārtotās zāļu iedarbības ietekmi uz pārtikas pastiprinātu instrumentālo veiktspēju un progresējošo attiecību. Žurkas tika nejauši sadalītas piecās eksperimentālās grupās (n = 9 – 10 / grupa). Šīs grupas saņēma divas reizes dienā injekcijas (intraperitoneāli; 9: 00 AM un 5: 00 PM) ar sāls šķīdumu vai kādu no šādām zālēm: nikotīnu, 0.35 mg / kg; MDMA, 2.5 mg / kg; kokaīns, 15 mg / kg; vai amfetamīns, 2.5 mg / kg 15 dienas pēc kārtas. Devas tika izvēlētas, pamatojoties uz iepriekš publicētajiem datiem (Taylor un Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003) un zāļu izraisīto lokomotorisko stimulāciju novēroja ārstēšanas dienās 1 un 15. Pēc 5 atcelšanas dzīvnieki tika apmācīti, lai reaģētu uz 10 secīgām dienām, un pēc tam pārbaudīja progresējošu attiecību, reaģējot nākamajā dienā. Divi dzīvnieki tika izslēgti no statistiskās analīzes, jo tie nesaņēma instrumentālo reakciju, padarot ne vairāk kā vienu aktīvo sviru atbildi uz katru no trim galīgajām treniņu sesijām.
Eksperimenti 2 un 3 pētīja ΔFosB inducējamā striatāla pārmērīgas ekspresijas ietekmi uz bitransgēnām pelēm uz instrumentālo veiktspēju un reaģējot uz pastiprinājuma pakāpenisku attiecību. Ir pierādīts, ka αFosB inducējamā pārmērīga ekspresija šajās pelēs ir imitē atkārtotas zāļu iedarbības ietekmi uz lokomotorisko aktivitāti un kondicionēto vietu preferenču paradigmām (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Šīs peles var sniegt kritisku informāciju par striatāla ΔFosB ieguldījumu specifiskos uzvedības procesos. Genotipizētas tēviņu peles tika turētas pie doksiciklīna vai 8 nedēļu vecumā tika pārslēgtas uz krāna ūdeni. Eksperimenti tika uzsākti pēc 6 nedēļu doxiciklīna atcelšanas, kad transgēna ekspresija ir maksimāla (Kelz et al., 1999). Eksperimentā 2 dzīvnieki (n = 16) bija ierobežoti ar pārtiku un apmācīti zemāk aprakstītajā instrumentālajā procedūrā (skat. Zemāk, Instrumentālā reakcija un progresīvās attiecības testēšana) 10 secīgās dienās. Pēc instrumentālās pārbaudes pabeigšanas šajās pelēm tika novērtēta kokaīna izraisīta lokomotoriskā stimulācija. Eksperimentā 3 atsevišķa peles grupa (n = 18) tika apmācīta par instrumentālo reakciju 10 secīgās dienās apstākļos, kad tika piegādāti ne vairāk kā 50 pastiprinātāji. 11 dienā visas peles tika pārbaudītas ar progresējošu attiecību. 12 dienā mēs noteicām reinforcer devalvācijas ietekmi, veicot progresējošu attiecību reaģēšanu.
Eksperimenti 4 un 5 pētīja ΔFosB pārmērīgas ekspresijas vīrusa iedarbības ietekmi tieši uz NAc. Eksperiments 4 pārbaudīja ΔFosB pārmērīgas ekspresijas ietekmi uz instrumentālo veiktspēju. Šeit žurkas tika ievadītas ar HSV-ΔFosB (n = 8) vai HSV-LacZ (n = 8) NAc kodolā un apmācītas instrumentālajā procedūrā, kas sākās 40 h vēlāk. Pēc 10 ikdienas treniņiem sākotnējie aktivitātes līmeņi tika novērtēti visiem dzīvniekiem lokomotorās aktivitātes uzraudzības iekārtās, kā aprakstīts zemāk (skatīt zemāk, lokomotoriskā aktivitāte). Eksperiments 5 novērtēja NAc ΔFosB pārmērīgas ekspresijas ietekmi uz progresējošu attiecību. Šeit žurkas sākotnēji tika apmācītas 15 secīgām dienām, iedalītas eksperimentālām grupām, un pēc tam tika ievadītas ar HSV-ΔFosB (n = 8) vai HSV-LacZ (n = 7) NAc kodolā. Dzīvnieki tika atstāti neizmēģināti un neapstrādāti 4 d, lai ļautu ΔFosB ekspresijai maksimāli. 5 dienā pēc infūzijas visi dzīvnieki tika pārbaudīti, nospiežot progresējošo attiecību grafiku. Pēc pēdējās testēšanas dienas visas žurkas tika nogalinātas un infūzijas kanulu novietošana NAc serdē tika pārbaudīta histohēmiski. Pamatojoties uz infūzijas kanulu novietojumu, divi žurki tika izslēgti no eksperimenta 4 un viena žurka no eksperimenta 5.
Gēnu ekspresijas raksturojums tika veikts atsevišķā dzīvnieku grupā. Šeit HSV-LacZ tika ievadīts NAc kodolā, un dzīvnieki tika nogalināti 3 d vēlāk. Pēc tam β-galaktozidāzes ekspresija tika novērtēta imūnhistoķīmiski.
Locomotoriskā darbība.
Locomotorā aktivitāte tika mērīta, izmantojot aktivitātes mērītājus (Digiscan dzīvnieku darbības monitoru; Omnitech Electronics, Columbus, OH). Aktivitātes mērītāji bija aprīkoti ar divām infrasarkano staru fotorezistoru rindām, katrā rindā, kas sastāv no 16 sensoriem, novietoti atsevišķi 2.5 cm. Darbības skaitītājus kontrolēja un datus no darbības skaitītājiem, ko savāca datoru dators, izmantojot Micropro programmatūru (Omnitech Electronics).
Eksperimentālie dzīvnieki tika ievietoti caurspīdīgās plastmasas kastēs (25 × 45 × 20 cm), kas tika ievietotas aktivitātes skaitītājos. Sākotnēji dzīvniekiem tika atļauts pieradināt pie kustības aktivitātes reģistrācijas kontrolierīcēm 30 min. Dažos eksperimentos dzīvnieki pēc tam tika izņemti, injicēti ar kokaīnu, amfetamīnu, nikotīnu vai transportlīdzekli saskaņā ar eksperimentālo dizainu un ievietoti atpakaļ kastēs. Pēc tam lokomotoriskā aktivitāte tika reģistrēta 60 min, sākot 5 min pēc zāļu injekcijas, lai izvairītos no nespecifiskas injekcijas izraisītas hipermotilitātes. Visi eksperimenti tika veikti dzīvnieku gaismas fāzē (starp 9: 00 AM un 6: 00 PM).
Instrumentālās atbildes un progresīvās attiecības testēšana.
Instrumentālā reakcija tika novērtēta, izmantojot standarta operācijas kameras žurkām (30 × 20 × 25 cm) vai pelēm (16 × 14 × 13 cm), ko kontrolēja MedPC programmatūra (Med Associates, St. Albans, VT). Katra kamera tika novietota skaņas mazinošā ārējā kamerā, kas aprīkota ar baltu trokšņa ģeneratoru un ventilatoru, lai samazinātu ārējā trokšņa ietekmi. Kameru izgaismoja mājas aizmugurējās sienas apgaismojums. Granulu dozators piegādāja barības granulas (20 vai 45 mg; Bio-Serv, Frenchtown, NJ) kā stiprinātāju žurnālā. Galvas ierakstus konstatēja ar fotoceli, kas uzstādīts virs stiprinājuma tvertnes. Šajā žurnālā bija stimuls. Attiecībā uz žurkām, viena svira tika novietota katrā žurnāla pusē. Pelēm divas kameras atveres tika novietotas uz kameru aizmugurējās sienas (ti, pretēji reinforcer žurnālam).
5 d laikā tieši pirms treniņa sākšanas dzīvnieki tika ierobežoti ar 90 min piekļuvi pārtikai dienā un pakļauti graudu barības granulām (pelēm, 20 mg; žurkām, 45 mg) viņu būros. Testēšanas laikā pārtikas granulas bija pieejamas periodiski operantu kamerās saskaņā ar uzvedības protokolu (skatīt tālāk), kā arī neierobežotā daudzumā mājas būrī 90 min, sākot ar 30 min pēc dienas pārbaudes. Šis pārtikas piekļuves grafiks ļauj katram atsevišķam dzīvniekam sasniegt savu individuālo sāta punktu un mazina mainīgo, ko izraisa dominējošā un pakārtotā dzīvnieka konkurence. Mūsu rokās šis grafiks ļauj lēni palielināt svaru pēc sākotnējā svara zuduma ∼85 – 90% brīvās barošanas svaru. Eksperimenta laikā tika pārbaudīti dzīvnieku svari.
Visiem priekšmetiem sākotnēji tika pieradināts testēšanas aparāts 2 d; šajās sesijās pārtikas granulas tika nogādātas žurnālā “Reinforcer” uz fiksēta laika 15 s (FT-15) grafika. Sākot no nākamās dienas, dalībnieki saņēma ikdienas apmācības 10 secīgas dienas. Reaģēšana uz pārtiku tika pārbaudīta, pamatojoties uz iepriekš publicētām instrumentālās kondicionēšanas procedūrām (Baldwin et al., 2002b). Atbildot uz pareizo (ti, aktīvo) sviru / pacēlāju, tika pastiprināta, savukārt reaģējot uz otru (neaktīvu) sviru / pacēlāju, nebija ieprogrammētas sekas. Aktīvās pacēlāja vai sviras stāvoklis (pa kreisi / pa labi) bija līdzsvarots visām eksperimentālajām grupām. Reaģēšanas prasības pabeigšana (skatīt zemāk) izraisīja žurnāla stimulēšanas gaismas sākumu, pēc tam sekoja 1 s, piegādājot vienu pārtikas granulu. Divas sekundes vēlāk stimulēšanas gaisma tika izslēgta. Pirmie 10 pastiprinātāji tika iegūti pēc veiksmīgas reaģēšanas pabeigšanas saskaņā ar fiksētu attiecību (FR1) grafiku, pēc kura granulas bija pieejamas pēc reaģēšanas uz mainīga attiecība (VR2). Sesija ilga 15 min.
Eksperimenti 3 (pelēm) un 5 (žurkām) izmantoja alternatīvas apmācības grafikus, lai izvairītos no instrumentālās veiktspējas atšķirību iespējamās sekas treniņu laikā, reaģējot uz turpmāko progresējošo attiecību (detalizētāk). Eksperimentā 3 peles tika apmācītas ar FR1 grafiku 2 d un pēc tam uz FR2 grafiku 8 d. Pirmais 3 d testēšanas laikā izmantoja 60 min sesijas. Pēdējās 7 apmācības dienās sesija tika pārtraukta, kad tika iegūti 50 pastiprinātāji. Eksperimentā 5 žurkas tika apmācītas ar FR1 / VR2 grafiku 15 min sesijās, kā aprakstīts iepriekš visiem pārējiem eksperimentiem ar diviem izņēmumiem. Pirmkārt, tika piegādāts maksimālais 150 granulu skaits. Otrkārt, šie dzīvnieki saņēma 5 papildu mācību dienas (ti, kopā 15 d), lai pirms jebkādas eksperimentālas manipulācijas varētu izveidot stabilu darbību.
Dzīvnieki tika pārbaudīti, reaģējot uz pārtiku, izmantojot pakāpenisku pastiprinājuma grafiku. Šajā testā atbildes prasība, lai iegūtu pārtiku, tika uzsākta kā FR1 grafiks, bet pakāpeniski palielinājās par 2, lai iegūtu turpmāku atkārtotu pārbaudi (ti, 1, 3, 5, 7…, X + 2 atbildes). Zāļu ārstēšanas eksperimentā ar žurkām 5 tika pakāpeniski palielināts, iegūstot 1, 6, 11, 16…, X + 5 galīgo grafiku. Visi pārējie parametri bija vienādi ar iepriekš aprakstīto mācību procedūru. Tests tika izbeigts, kad 5 min.
Reinforcera devalvācija.
Reinforcera devalvācijas ietekme tika pārbaudīta, izmantojot specifisku iepriekšēju sagatavošanu. Šeit 3 h laikā ļāva pelēm ēst neierobežotu graudu barības granulu daudzumu savā mājas būrī pirms testēšanas ar progresīvo pastiprinājuma grafiku, kā aprakstīts iepriekš.
Ķirurģiskās metodes.
Dzīvnieki tika anestēzēti, izmantojot Equithesin [maisījums, kas satur pentobarbitālu (35 mg / kg) un hlora hidrātu (183.6 mg / kg) etanolā (10% v / v) un propilēnglikolu (39% v / v); ievadīts 4.32 ml / kg, ip]. Cannulas (Plastics One, Roanoke, VA) tika ķirurģiski implantētas virs NAc kodola, izmantojot Kopf stereotaktisko aprīkojumu. Stereotaktiskās koordinātas, kas izmantotas attiecībā pret bregmu, bija šādas: priekšējā / aizmugurējā, + 1.5 mm; sānu / vidēja, ± 1.5 mm; vēdera / muguras, -6.0 mm (Paxinos un Watson, 1986). Kanulas tika piestiprinātas pie galvaskausa, izmantojot skrūves un zobu cementu. Lai izvairītos no bloķēšanas, gliemežtransportieri tika ievietoti vadotnēs. Pēc operācijas dzīvnieki tika pakļauti standarta pēcoperācijas aprūpei un tiem tika atļauts atjaunoties 5 d pirms jebkura eksperimenta sākuma.
Infūzijas.
Vīrusu vektoru intracerebrālās infūzijas tika veiktas divpusēji 40 h pirms apmācības sākuma (skatīt zemāk). Injekcijas šļirces (31 gabarīts), kas stiepjas 1 mm zem virziena kanulu gala, lēnām vienlaicīgi tika nospiestas kreisajā un labajā NAc, un 1.0 μl / s pusē tika ievadīts 4 min. Periods ar infūzijas ātrumu 0.25 μl / min, izmantojot mikroinfūzijas sūkni (PHD-5000; Harvard Apparatus, Holliston, MA). Infūzijas adatas tika atstātas vietā 1 min pēc infūzijas pabeigšanas, un manekena kanulas tika nomainītas. Cannula izvietojumus histoloģiski pārbaudīja pēc uzvedības eksperimentu pabeigšanas (skatīt 6B. Attēlu), un eksperimentālo datu statistiskajā analīzē tika iekļauti tikai dzīvnieki ar pareizi novietotām kannēm.
Histoloģiskās analīzes un imunodevēšana.
Pēc eksperimentu pabeigšanas dzīvnieki, kas eksperimenta laikā saņēmuši operācijas, tika anestēzēti ar Equithesin un perfūzēti transkardiāli ar 0.1 m PBS (5 min) un 10% formalīnu (10 min) saskaņā ar standarta procedūrām. Smadzenes tika pēcfiksētas formalīnā un pēc tam ievietotas fosfātu buferētā saharozes šķīdumā (30%). Pēc tam visi smadzenes tika sagriezti 40 μm sekcijās uz mikrotomu un izmantoti kanulu novietojuma un proteīnu ekspresijas histoloģiskajai analīzei.
Cannula izvietojums tika veikts sekcijās, kas bija kontrastētas ar neitrālu sarkanu, un pēc etanola dehidratācijas montētas uz mikroskopa priekšmetstikliņiem distirēna plastifikatorā un ksilolā (DPX). Imūnhistoķīmija tika veikta, kā aprakstīts iepriekš (Hommel et al., 2003). Īsāk sakot, β-galaktozidāzes ekspresija pēc HSV-LacZ infūzijas tika noteikta ar imunofluorescentu krāsošanu, izmantojot kazu anti-β-galaktozidāzes primāro antivielu (1: 5000; Biogenesis, Kingston, NH). Pēc inkubācijas pa nakti, sekcijas tika izskalotas un pēc tam inkubētas ar fluorescējošu ēzeļu pretkazu sekundāro antivielu, kas bija konjugēta ar Cy2 (1: 200; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA). Sekcijas tika mazgātas vēlreiz, pēc tam etanola dehidratācija un montāža DPX. Blakus esošās kontroles sekcijas tika apstrādātas vienādi, neiekļaujot primārās antivielas. Imunofluorescence tika novērtēta pie 520 nm, izmantojot a Zeiss (Oberkochen, Vācija) mikroskops ar FITC filtru un attēli, kas uzņemti identiskos ekspozīcijas laikos ar Zeiss Axiovision digitālās attēlveidošanas sistēma.
Statistika
Visu eksperimentu dati tika novērtēti, izmantojot vienvirziena, divvirzienu vai trīsceļu ANOVA, kam sekoja Scheffe vai Dunnett post hoc tests, vajadzības gadījumā koriģējot vairākus salīdzinājumus, izmantojot Holma secīgo noraidīšanas testu. Vērtība p ≤ 0.05 tika uzskatīta par statistiski nozīmīgu.
rezultāti
Eksperiments 1: atkārtotas zāļu iedarbības ietekme uz instrumentālo veiktspēju un progresējošo attiecību
Lai apstiprinātu, ka mūsu atkārtotā zāļu iedarbības paradigma radīja funkcionāli nozīmīgas neuroadaptācijas, vispirms novērtējām lokomotorisko sensibilizāciju kā hronisku zāļu iedarbības prototipu. Žurkām tika ievadītas divas reizes dienā nikotīna injekcijas (0.35 mg / kg), MDMA (5 mg / kg), kokaīns (15 mg / kg) vai amfetamīns (2.5 mg / kg), un lokomotorā aktivitāte tika pārbaudīta pēc pirmās injekcijas. ārstēšanas dienas 1 un 15 (papildu 1A – E attēls, pieejams vietnē www.jneurosci.org kā papildu materiāls). Statistiskā analīze atklāja nozīmīgu ārstēšanu pēc dienas mijiedarbības (F(4,42) = 9.335; p ≤ 0.0001). Izņemot MDMA (p = 0.62), visas zāles izraisīja ievērojami lielāku lokomotorisko aktivitāti (ti, sensibilizāciju) 15 dienā, salīdzinot ar 1 dienu (nikotīns, p ≤ 0.001; kokaīns, p ≤ 0.001; amfetamīns, p ≤ 0.01). Atkārtotas sālsūdens injekcijām nebija nekādas ietekmes. Neviena no ārstēšanas procedūrām nemainīja sākotnējo lokomotorisko aktivitāti, ko mēra pieradināšanas periodā 15 dienā (papildu 2A. www.jneurosci.org kā papildu materiāls).
Piecas dienas pēc pēdējās zāļu injicēšanas mēs pārbaudījām iepriekšējo atkārtotu nikotīna, MDMA, kokaīna vai amfetamīna iedarbības ietekmi uz pastiprinātu instrumentālu uzvedību. Dati tiek sniegti par katru narkotiku atsevišķi Skaitlis 1A – H, izmantojot salīdzinošo sālsūdens kontroles grupu. Mēs atklājām, ka iepriekšējo iedarbību uz katru no šīm zālēm ievērojami un selektīvi palielināja pastiprināta instrumentālā reakcija uz uzturu (ārstēšana ar sviru pēc mācību dienas, F(36,378) = 1.683; p ≤ 0.01; post hoc analīze: nikotīns, p ≤ 0.01; MDMA, p ≤ 0.05; kokaīns, p ≤ 0.01; amfetamīns, p ≤ 0.001). Asimptotiskās darbības laikā novērotā pastāvīgā instrumentālā atbildes reakcija liecināja par iespējamu motivācijas pastiprināšanos, kas atbilst iepriekš ziņotajiem palielinājumiem pēc atkārtotas psihostimulanta iedarbības (skatīt diskusiju). Tāpēc mēs pārbaudījām, vai iepriekšēja atkārtota zāļu iedarbība palielināja motivāciju, izmantojot progresīvās attiecības grafiku. Iepriekšējās zāļu iedarbības statistiskā ietekme uz reaģēšanu uz aktīvo sviru (apstrāde ar sviras mijiedarbību, F(4,42) = 3.340; p ≤ 0.05) (Fig. 2A), kā arī pēdējais pārtraukuma punkts (F(4,42) = 5.560; p ≤ 0.001) (Fig. 2B). Papildu analīze parādīja, ka visas ārstēšanas procedūras palielināja gan aktīvo reakciju skaitu (nikotīns, p ≤ 0.001; MDMA, p ≤ 0.05; kokaīns, p ≤ 0.001; amfetamīns, p ≤ 0.001), gan pārtraukuma punktu (nikotīns, p ≤ 0.001; MDMA , p ≤ 0.01; kokaīns, p ≤ 0.0001; amfetamīns, p ≤ 0.0001), kas atbilst šo terapiju ietekmei uz motivāciju. Ņemot vērā to, ka narkotiku ietekme uz sākotnējo lokomotorisko aktivitāti nav bijusi, un nav iedarbības uz neaktīviem sviru spiedieniem, maz ticams, ka palielināta reakcija uz pārtiku šajos apstākļos atspoguļo nespecifisku motora aktivitātes pieaugumu.
Skaitlis 1.
Iepriekšējo atkārtotu nikotīna injekciju (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokaīna (15 mg / kg) vai amfetamīna (2.5 mg / kg) iedarbība divreiz dienā 15 d turpmākai instrumentālai uzvedībai. Dzīvnieki tika pārbaudīti kopā, bet skaidrības labad katras zāles iedarbojas atsevišķi, izmantojot to pašu sāls šķīdumu apstrādātu kontroles grupu. A (aktīvās atbildes) un B (neaktīvās atbildes) parāda iepriekšējās nikotīna iedarbības ietekmi; C, D, MDMA; E, F, kokaīns; G, H, amfetamīns. Dati tiek attēloti kā vidējie ± SEM.
Skaitlis 2.
Iepriekšējās atkārtotās ārstēšanas (divas reizes dienā, 15 dienas) ar fizioloģisko šķīdumu, nikotīnu (0.35 mg / kg), MDMA (2.5 mg / kg), kokaīnu (15 mg / kg) vai amfetamīnu (2.5 mg / kg) ietekme uz instrumentālo reakciju pēc pakāpeniskas armēšanas grafika. Dati tiek attēloti kā vidēji ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01; * p <0.05. Sal, fizioloģiskais šķīdums; Nik, nikotīns; Coc, kokaīns; Amf, amfetamīns; PR, progresīvā attiecība.
Iepriekšējā zāļu iedarbība neietekmēja arī ķermeņa masu, kas reģistrēta pirms pārtikas ierobežošanas, instrumentālās apmācības pirmajā vai pēdējā dienā vai tieši pirms progresīvās attiecības testa (papildu 2B. www.jneurosci.org kā papildu materiāls). Ierobežota 3 d pārtikas pieejamība sākotnēji samazināja ķermeņa masu vidēji 91 – 92% no brīvā barošanas svara. Pēc uzvedības testēšanas beigām svars bija atgriezies 97 – 99% no iepriekšējas ķermeņa masas, un starp zāļu iedarbību un sāls šķīdumu ārstētiem dzīvniekiem netika novērotas atšķirības. Tādēļ ķermeņa svara izmaiņas un bada vai ēstgribas atšķirības nedrīkst būtiski veicināt instrumentālās veiktspējas vai motivācijas novēršanu.
Eksperiments 2: AFosB inducējama pārmērīga ekspresija bitransgēnās pelēs; instrumentālā veiktspēja
Pēc tam mēs pārbaudījām, vai instrumentālā veiktspēja palielinājās arī bitransgēnās pelēs, kas inducēja pārmērīgu ΔFosB ekspresiju ar izteiktu selektivitāti NAc un dorsālā striatumā (Kelz et al., 1999). Šajā eksperimentā ΔFosB pārmērīgi ekspresējošas peles salīdzināja ar pakaišu kontrolieriem, kas nepārspiež ΔFosB, jo tie tiek uzturēti ar doksiciklīnu (skat. Materiāli un metodes). Mēs atklājām, ka ΔFosB pārmērīga ekspresija ievērojami palielināja pastiprinātu reakciju uz pārtiku (gēna ekspresija ar sviru, izmantojot mācību dienu, F(9,126) = 3.156; p ≤ 0.01) (Fig. 3A). Neaktīvās apertūras laikā veikto nosepoke reakciju skaits abās grupās neatšķīrās (Fig. 3B). Kopā šie dati liecina, ka ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc un dorsālā striatumā selektīvi palielināja instrumentālo veiktspēju
Skaitlis 3
ΔFosB inducējama striatāla pārmērīgas ekspresijas ietekme bitransgēnās pelēs uz instrumentālo veiktspēju. A, Aktīvās atbildes. B, neaktīvas atbildes. Dati tiek attēloti kā vidējie ± SEM.
Lai izslēgtu, ka instrumentālās veiktspējas uzlabošana ΔFosB pārmērīgi ekspresējošiem dzīvniekiem var izskaidrot ar ēstgribas vai bada izmaiņām, ķermeņa svars tika reģistrēts pirms pārtikas ierobežošanas un pirmajā un pēdējā apmācības dienā. ΔFosB pirms ēšanas ierobežojuma neietekmēja ķermeņa svaru, kā arī uzvedības testēšanas laikā nebija ietekmes uz ķermeņa svaru. Šajā gadījumā 3 d ierobežota piekļuve pārtikai samazināja ķermeņa svaru līdz vidējam 87 – 89% no brīvās barošanas svara. Uzvedības testēšanas beigās dzīvnieku svars bija 97 – 99% no ķermeņa svara priekšnosacījumiem ar ekvivalentām izmaiņām ΔFosB un kontroles pelēm (papildu 3A. www.jneurosci.org kā papildu materiāls). Tāpēc ir maz ticams, ka ΔFosB pārmērīgas ekspresijas iespējamā ietekme uz badu vai apetīti varētu izraisīt uzlabojumus instrumentālās atbildes reakcijā.
Kad testēšana ar instrumentālo veiktspēju tika pabeigta, ΔFosB pārmērīga ekspresija nemainīja sākotnējo lokomotorisko aktivitāti, kas tika mērīta 30 min perioda laikā (papildu 3B. www.jneurosci.org kā papildu materiāls). Šis novērojums apstiprina viedokli, ka nespecifiska aktivitātes izmaiņas neveicina šo dzīvnieku novēroto instrumentālo veiktspēju. Tomēr ziņots, ka ΔFosB pārmērīgi ekspresējošās bitransgēnās peles uzrāda pastiprinātu lokomotorisko reakciju uz akūtu un atkārtotu kokaīnu (Kelz et al., 1999). Tā kā mēs izmantojām nedaudz atšķirīgu doxiciklīna izņemšanas grafiku, lai izraisītu gēnu ekspresiju (6 nedēļas ar pārtikas ierobežojumu), mēs nolēmām apstiprināt šo fenotipu. FosB-pārmērīgi ekspresējošas peles uzrādīja ievērojami lielāku lokomotoriskās aktivitātes palielināšanos, injicējot ar kokaīnu, salīdzinot ar to pakaišu kontrolēm, kas tika uzturētas ar doksiciklīnu (ārstēšana ar gēnu ekspresiju, F(1,44) = 4.241; p ≤ 0.05) (papildu 3C attēls, pieejams vietnē www.jneurosci.org kā papildu materiāls).
Eksperiments 3: AFosB inducējama pārmērīga ekspresija bitransgēnās pelēs; progresīvā attiecība
Ņemot vērā to, ka iepriekšējā zāļu iedarbība izraisa striatālu ΔFosB (Nestler et al., 2001) un tika konstatēts, ka, lai palielinātu progresējošo attiecību, mēs pārbaudījām, vai transgeniskā striatāla pārmērīga ΔFosB ekspresija arī palielina veiktspēju ar pakāpenisku pastiprinājuma grafiku. Jauna peles grupa tika apmācīta, lai reaģētu instrumentālos apstākļos (skat. Materiāli un metodes), kas pirms testēšanas ar progresējošu attiecību reaģēja (F(1,16) <1). Tomēr progresīvās attiecības testā mēs novērojām ievērojamu gēnu ekspresiju ar sviras mijiedarbību (F(1,16) = 5.30; p ≤ 0.05) (Fig. 4A) un konstatēja, ka ΔFosB-pārmērīgi ekspresējošas peles, salīdzinot ar littermate kontroles pelēm, kuras tika turētas uz doksiciklīna, veica lielāku skaitu aktīvo reakciju (p ≤ 0.05), bet neaktīvo sviru reakciju skaits nebija atšķirīgs. AFosB pārmērīgi ekspresējošas peles arī sasniedza augstāku pārtraukuma punktu (F(1,16) = 5.73; p ≤ 0.05) (Fig. 4B). Šie dati liecina, ka, tāpat kā iepriekšējā psihostimulanta iedarbība, ΔFosB striatāla pārmērīga ekspresija palielina motivāciju. Tā kā neaktīvo reakciju skaits nav mainījies AFosB pārmērīgi ekspresējošajās pelēs, nespecifiskais aktivitātes pieaugums, visticamāk, neveicinās šo ietekmi. Šo viedokli apstiprināja arī sākotnējās lokomotoriskās aktivitātes novērtējumi, kuros nebija atšķirības starp pelēm, kas pārspiež ΔFosB un niedru kontrolierīces pelēm, kas tika turētas pie doksiciklīna. Testēšanas dienā netika konstatētas bruto ķermeņa masas atšķirības starp ΔFosB pārmērīgi ekspresējošiem un kontroles dzīvniekiem. Tādējādi, lai gan ΔFosB pārmērīgi ekspresējošie dzīvnieki izdala vairāk pārtikas motivētu instrumentālo reakciju, tie nešķiet vairāk patērē pārtiku, kad tas ir brīvi pieejams. Visticamākais skaidrojums šim novērojumam ir tāds, ka, lai gan motivācija nosaka, cik grūti dzīvnieks strādās, lai iegūtu pastiprinātāju, daudzi papildu faktori (apetīte, sāta sajūta, vielmaiņas stāvoklis utt.) Ietekmē barošanas uzvedību un pārtikas faktisko patēriņu.
Skaitlis 4.
FosB inducējamas pārekspresijas ietekme uz bitransgeniskām pelēm uz instrumentālo reakciju uz progresējošas pastiprināšanas grafiku pirms un pēc sāta izraisītas pastiprinātāja devalvācijas. A, B, bāzes stāvoklis: sviras reakcijas (A), pārtraukuma punkts (B). C, D, Pēc pastiprinātāja devalvācijas: sviras atbildes (C), lūzuma punkts (D). Dati tiek attēloti kā vidēji ± SEM. * p <0.05.
Šeit izmantotās ΔFosB bitransgēnās peles izsaka ΔFosB visā striatumā. Tā kā ventrālais striatums (ieskaitot NAc) ir iesaistīts motivācijas procesos, tiek apgalvots, ka muguras striatums ir iesaistīts instrumentu paradumu iegūšanā (Yin et al., 2004; Faure et al., 2005). Lai gan mācību fāzē mēs nenovērojām atšķirības instrumentālajā darbībā, izmantojot zemu attiecību grafiku ar maksimāliem stiprinājuma ierobežojumiem, apstākļi, kas bija relatīvi izturīgi pret instrumentālo paradumu attīstību (Dickinson, 1985), iespējams, ka ieradumu noteikšana var ietekmēt reaģēšanu saskaņā ar progresīvās proporcijas grafiku. Šī iespēja tika pārbaudīta tieši, novērtējot atkārtotas devalvācijas ietekmi, veicot progresējošu attiecību reaģēšanu. Šāda priekšapstrāde izdzēsa ΔFosB ietekmi uz progresējošo attiecību reaģēšanu, neradot atšķirības atbildes reakcijās vai pārtraukuma punktos, kas novēroti starp ΔFosB-pārmērīgas ekspresijas un kontroles pelēm (F(1,16) <1) (Fig. 4C, D). Kopā šie dati liecina, ka ΔFosB pārmērīga ekspresija neietekmēja jutīgumu pret atalgoto rezultātu vērtības izmaiņām, izmantojot šo testēšanas grafiku. Drīzāk progresīvās attiecības testā novērotā instrumentālā reakcija šķiet mērķtiecīga, un palielināta lūzuma punkts, kas novērots ΔFosB-pārmērīgi ekspresējošajās pelēs, iespējams, ir saistīts ar pastiprinātu motivāciju, nevis uz paaugstinātu ieradumu.
Eksperiments 4: vīrusa mediēta ΔFosB pārprodukcija NAc kodolā: instrumentālā veiktspēja
Lai novērtētu, vai ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc varētu būt saistīta ar uzvedību, kas novērota bitransgēnās pelēs, mēs ievadījām HSV-AFosB vai HSV-LacZ kā kontroli, selektīvi žurku NAc kodolā, un pētījām šīs manipulācijas ietekmi uz pārtiku - pastiprināta instrumentālā veiktspēja (Fig. 5A, B). Pēc žurnāla apmācības HSV-ΔFosB vai HSV-LacZ tika ievadīts NAc kodolā 40 h pirms uzvedības testēšanas uzsākšanas. Infūzijas atrašanās vieta un vīrusu mediētās gēnu ekspresijas apjoms ir parādīts Skaitlis 6A un B. NAV infūzijas ar HSV-ΔFosB izraisīja noturīgu aktīvo reakciju skaita pieaugumu (gēna ekspresija ar sviru, F(1,12) = 8.534; p ≤ 0.05) (Fig. 5A), kas saglabājās visā eksperimentā. Šie efekti bija selektīvi, jo nav nekādas būtiskas ΔFosB pārmērīgas ekspresijas ietekmes NAc kodolā uz neaktīvo atbilžu skaitu (Fig. 5B) vai sākotnējā lokomotoriskā aktivitāte, kas reģistrēta nākamajā dienā pēc eksperimenta pabeigšanas (dati nav parādīti). OsFosB pārmērīga izpausme NAc tādējādi imitēja iepriekšējo zāļu iedarbības vai ΔFosB striatālās pārmērīgas ekspresijas ietekmi.
Skaitlis 5.
HSV-ΔFosB infūziju ietekme uz NAc kodolu pirms apmācības par instrumentu reaģēšanu. A, Aktīvās atbildes. B, neaktīvas atbildes. Dati tiek attēloti kā vidējie ± SEM.
Skaitlis 6.
A, Infūzijas vietu izvietojums vīrusu vektoru eksperimentiem. Uz augšu, piepildītie melnie apļi atbilst paredzētajai infūzijas vietai. Tikai infūzijas, kas veiktas ∼0.5 mm šajā apgabalā (ti, NAc kodolā), kā norādīts aplis, tika uzskatīts par pieņemamu. Statistikas analīzē netika iekļauti dzīvnieki ar infūzijām ārpus šīs zonas. Apakšā, infūzijas vieta NAc reprezentatīvam dzīvniekam. B, Proteīna ekspresijas imunohistochemiskā pārbaude pēc HSV-LacZ infūzijas. Augšējie paneļi demonstrē β-galaktozidāzes ekspresiju NAc kodolā (2.5 un 10 × palielinājums). Grunts paneļi parāda imunofluorescences trūkumu blakus esošajās kontroles daļās, izmantojot to pašu imūnhistoķīmisko procedūru bez primārās antivielas iekļaušanas.
Eksperiments 5: vīrusa mediēta ΔFosB pārprodukcija NAc kodolā: progresīva attiecība
Galīgais eksperiments tieši noteica, vai ierobežotā ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc kodolā, izmantojot vīrusu mediēto gēnu pārneses metodi, bija pietiekama, lai palielinātu motivāciju žurkām. Šeit HSV-ΔFosB tika ievadīts tikai pēc tam, kad bija pabeigta instrumentālā apmācība, novēršot iespējamo ΔFosB pārmērīgas ekspresijas ietekmi uz turpmāko progresīvās attiecības testu. Jaunā žurku grupa tika apmācīta, kā iepriekš, un sadalīta līdzsvarotās eksperimentālās grupās, pamatojoties uz to sniegumu pēdējās apmācības dienās. Pēc tam dzīvnieki saņēma divkāršas HSV-AFosB vai HSV-LacZ infūzijas NAc kodolā un tika pārbaudītas ar progresējošu attiecību, reaģējot pēc 5 d pārmērīgas ekspresijas. Statistiskā analīze atklāja nozīmīgu gēnu ekspresiju ar sviras mijiedarbību (F(1,12) = 14.91; p ≤ 0.01) (Fig. 7A). Žurkas, kas inficētas ar HSV-ΔFosB, aktīvāk reaģēja (p ≤ 0.01), salīdzinot ar infūzijām ar HSV-LacZ, bet neietekmēja neaktīvo sviru. Atbilstoši šim pieaugumam, ar HSV-ΔFosB inficētām žurkām bija arī augstāks pārtraukuma punkts (F(1,12) = 18.849; p ≤ 0.001) (Fig. 7B) nekā dzīvnieki, kas inficēti ar HSV-LacZ. ΔFosB neietekmēja sākotnējo lokomotorisko aktivitāti, kas testēta 1 h pirms progresīvās attiecības testa (papildu 4A. www.jneurosci.org kā papildu materiāls). Progresīvās attiecības testēšanas dienā nebija arī ķermeņa masas atšķirību (papildu 4B www.jneurosci.org kā papildu materiāls). Šie konstatējumi apstiprina mūsu novērojumus ar transgeniskām ΔFosB pārmērīgi ekspresējošām pelēm un norāda, ka selektīva ΔFosB pārprodukcija NAc ir pietiekama, lai uzlabotu ar pārtiku saistītu motivāciju.
Skaitlis 7.
HSV-ΔFosB 5 d infūziju ietekme pirms testēšanas uz instrumentālo reakciju pēc pakāpeniskas pastiprināšanas grafika. A, Sviras atbildes. B, pārtraukuma punkts. Dati tiek attēloti kā vidēji ± SEM. *** p <0.001; ** p <0.01.
diskusija
Šis pētījums parāda, ka ΔFosB pārmērīga izpausme NAc uzlabo pārtikas pastiprinātu instrumentālo uzvedībur. Iepriekšēja kokaīna, amfetamīna, MDMA vai uzlabotā nikotīna iedarbība izraisīja ilgstošu turpmāko instrumentālo veiktspēju. Šīs iedarbības uz narkotikām palielināja arī pārtikas motivētu uzvedību ar pakāpenisku pastiprinājuma grafiku. Šīs iepriekšējās zāļu iedarbības sekas tika atdarinātas ar ierobežotu ΔFosB pārmērīgu ekspresiju striatumā, izmantojot inducējamas bitransgēnās (NSE-tTA × TetOP-AFosB) peles vai izmantojot jaunu vīrusu vektoru, lai selektīvi ekspresētu ΔFosB NAc.. Jāatzīmē, ka ΔFosB pārmērīga izpausme NAc kodolā pēc tam, kad jau bija iegūta instrumentāla atbilde, uzlaboja pārtikas produktu motivāciju saskaņā ar progresīvās proporcijas grafiku. Kopā mūsu secinājumi identificē ΔFosB NAc kodolā kā potenciālu medikamentu izraisītu neuroadaptāciju mediatoru, kas var veicināt instrumentālo uzvedību, paplašinot šī transkripcijas faktora lomu, iekļaujot procesus, kas ir saistīti ar motivējošu ietekmi uz pārtikas pastiprinātu uzvedību. Viņi arī palielina iespēju, ka apstākļi, kas izraisa ΔFosB ekspresiju NAc, var ietekmēt gan dabisko, gan zāļu pastiprinātāju motivācijas īpašības..
ΔFosB uzkrājas gan NAc, gan dorsālā striatuma dinorfīnu ekspresējošos vidējos smadzeņu nervos pēc hroniskas, bet ne akūtas iedarbības uz narkotikām. Šis reģionālais ekspresijas modelis tiek atveidots inducējamās bitransgēnās ΔFosB pārmērīgi ekspresējošās pelēs, ko izmanto šeit. Šajās pelēs, paaugstināts ΔFosB striatālais līmenis palielina dzīvnieku jutīgumu pret kokaīnu un morfīnu, ko mēra pēc nosacītas vietas (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006). Tas palielina arī progresējošu attiecību pret kokaīnu, kas liecina, ka motivācija lietot kokaīnu ir uzlabota ar striatālu ΔFosB pārmērīgu ekspresiju (Colby et al., 2003). Šeit mēs noskaidrojām, ka striatāla ΔFosB pārmērīga ekspresija šajās pelēs palielināja arī progresējošo attiecību, reaģējot uz pārtikas pastiprinātāju, un ka šīs blakusparādības tika konstatētas, ierobežojot vīrusu mediētu ΔFosB pārmērīgu ekspresiju NAc kodolā žurkām. Mūsu dati liecina, ka ΔFosB var darboties kā primāro pastiprinātāju motivācijas transkripcijas modulators, neatkarīgi no tā, vai tie ir pārtika, zāles vai varbūt vingrinājums, kas saskan ar sākotnējiem novērojumiem, ka ΔFosB striatāla izpausme palielinās pēc hroniskas riteņu braukšanas vai saharozes lietošanasMcClung et al., 2004). Šie dati liecina, ka ΔFosB pārmērīga izpausme NAc var uzlabot gan dabisko, gan zāļu pastiprinātāju motivējošo ietekmi.
NAc apakšreģioni ir argumentēti, lai diferencēti starpniecību ietekmētu pavlovu vai instrumentālo stimulējošo procesu ietekmi uz instrumentālo sniegumu (Corbit et al., 2001; de Borchgrave et al., 2002), bet vispārīgākus motīvus ietekmējošus instrumentus var kodēt citi reģioni, piemēram, amygdala centrālais kodols. (Corbit un Balleine, 2005). NAc kodols tomēr ir arī ierosināts būt kritiska vieta mērķtiecīgas instrumentālās mācīšanās iegūšanai (Smith-Roe un Kelley, 2000; Baldwin et al., 2002a,b; Kelley, 2004). Mēs parādām līdzvērtīgu iepriekšējo zāļu iedarbības un transgēnas striatālās ΔFosB pārmērīgas ekspresijas ietekmi uz instrumentālās uzvedības uzlabošanu. HSV-ΔFosB infūzijas, kas aprobežojās ar NAc kodolu, palielināja arī pārtikas pastiprinātu instrumentu reaģēšanu. Lai gan šie eksperimenti neizslēdz dorsāla striatuma ieguldījumu šajos uzvedības veidos, tie stingri norāda, ka ΔFosB izraisītās izmaiņas gēnu ekspresijā NAc ir pietiekamas, lai palielinātu pārtikas motivētu reakciju. Tā kā progresējoša attiecība reaģēja arī tad, kad ΔFosB tika izteikts pēc stabilas instrumentālās veiktspējas sasniegšanas, šķiet, ka iespējama motivējoša ietekme uz instrumentālo uzvedību. Tomēr nevar pilnībā izslēgt iespēju, ka mūsu manipulācijas ietekmē arī instrumentālos mācību procesus. Lai pamatotu mūsu secinājumus, palielinājās instrumentālā veiktspēja, kas novērota pēc iepriekšējas perorālas kokaīna iedarbības (\ tMiles et al., 2004) ir apgalvots, ka tā ietver motivācijas izmaiņas, kas atbilst hroniskas nikotīna terapijas spējai palielināt progresējošu attiecību, reaģējot pelēm (\ tBrunzell et al., 2006). Turklāt dopamīna transportera izsitošas peles, kurās palielinās ekstracelulārais dopamīna līmenis, parāda gan pastiprinātu ΔFosB imunoreaktivitāti, gan ar pārtiku pastiprinātu motivāciju, bet nemainītu mācīšanos (Cagniard et al., 2006). Turklāt, mēs atklājām, ka striatāla ΔFosB pārmērīga ekspresija pelēm neietekmēja veiktspēju, kad pārtika tika “devalvēta”, izmantojot priekšnosacījumus. Šie dati liecina, ka dzīvnieki bija jutīgi pret pastiprinātāja motivācijas vērtību un ka atbildes reakcija bija mērķis.
Iepriekšēja atkārtota zāļu iedarbība var arī uzlabot uzvedības kontroli, ko rada ar dabīgiem pastiprinātājiem saistīti kondicionēti stimuli, ko mēra ar pavlovu pieeju (Harmer un Phillips, 1998; Taylor un Jentsch, 2001; Olausson et al., 2003), kondicionēts pastiprinājums (Taylor un Horger, 1999; Olausson et al., 2004), un pavlovu-to-instrumentālu nodošanu (Wyvell un Berridge, 2001). Tagad ir pārliecinoši pierādījumi tam, ka NAc kodols, pretstatā čaumalam, ir iesaistīts ar narkotikām saistītu uzvedības kontrolē, izmantojot pavlovu nosacītus stimulus (Parkinsona et al., 1999, 2002; Hall et al., 2001; Dalley et al., 2002; Ito et al., 2004). Mūsu rezultāti var liecināt, ka zāļu izraisītā ΔFosB indukcija NAc var būt viens no mehānismiem, ar kuru palīdzību šajās procedūrās tiek uzlabota uzvedības kontrole. Iespējams, ka pavlovu kondicionēti stimulatori, kas darbojas kā kondicionēti pastiprinātāji, veicina pašreizējo uzvedības efektu. Pastiprināta kontrole pār šādiem uzvedības stimuliem, ko veicina striatāla ΔFosB palielināšanās, var arī veicināt proteīna ietekmi uz narkotiku izraisītu nosacītu vietu izvēli (Kelz et al., 1999; Zachariou et al., 2006) un pakāpeniska attiecība pret kokaīnu (\ tColby et al., 2003). Motivācijas procesu izmaiņas ir hipotētiskas, lai veicinātu atkarību izraisošo uzvedību (Robinsons un Berridge, 1993; Jentsch un Taylor, 1999; Robbins un Everitt, 1999; Nestler, 2004). Šie dati atbilst arī citām teorijām, kas uzsver vairākus instrumentālus un pavloviskus procesus atkarības uzvedībā (Everitt un Robbins, 2005). Tagad ir vajadzīgs papildu darbs, lai definētu narkotiku un ΔFosB izraisīto neiroadaptāciju lomu NAc un citos limbisko-striatru apakšreģionos attiecībā uz konkrētiem asociācijas vai motivācijas faktoriem, kas var veicināt instrumentālo veiktspēju un veicināt kompulsīvo uzvedību.
Lai gan precīzi molekulārie mehānismi, ar kuru palīdzību NAc ietekmē izmaiņas, ko motivē primārie vai kondicionētie pastiprinātāji, nav zināmi (Kelley un Berridge, 2002), NAAB GABAergiskie vidēji smailie neironi tiek uzskatīti par kritisku substrātu narkotiku un pieredzes atkarīgam plastiskumam. Šeit dopamīnerģiskie ievadi no ventrālā tegmentālā apgabala un glutamatergiskā ievadījuma no kortikoskopijas aferentiem saplūst uz parastajiem dendritiem un dendritiskajiem mugurkauliem. (Sesack un Pickel, 1990; Smith un Bolam, 1990). Hroniska psihostimulanta iedarbība palielina šādu muguriņu blīvumu uz neironiem NAc apvalkā un kodolā (Robinsons un Kolb, 1999; Robinson et al., 2001; Li et al., 2003, 2004). Nesen uzvedības sensibilizācijas izraisīšana bija saistīta ar dendritisko muguriņu palielināšanos NAc kodolā (Li et al., 2004). Jo īpaši kokaīna izraisītais mugurkaula blīvuma pieaugums saglabājas tikai D1- pozitīvi neironi, kas ekspressē ΔFosB (Robinsons un Kolb, 1999; Lee et al., 2006). ΔFosB NAc kodolā tādējādi var veicināt ilgstošu sinaptisku plastiskumu, kas varētu ietekmēt instrumentālo uzvedību. Patiešām, dopamīna-glutamāta neirotransmisijas kritiskā loma (Smith-Roe un Kelley, 2000), proteīnkināzes A aktivitāte (Baldwin et al., 2002a) un de novo proteīnu sintēze (Hernandez et al., 2002) NAc kodolā par instrumentālo sniegumu iepriekš ir ziņots. Tagad mēs identificējam ΔFosB kā transkripcijas faktoru, kas var nepārtraukti uzlabot pārtikas pastiprinātu reakciju, ja to pārmērīgi izsaka NAc kodolā. Specifiskie gēni vai proteīni, kas iesaistīti šajos efektos, vēl nav precīzi definēti. ΔFosB regulē vairāku proteīnu ekspresiju NAc, kas iesaistīts neiroplastikā (McClung un Nestler, 2003). Nesenā mikroarray analīze raksturoja gēnu ekspresijas modeļus šeit izmantotās ΔFosB ekspresējošās bitransgēnu peles NAc un identificēja gēnu apakškopu, ko regulēja relatīvi īslaicīga ΔFosB ekspresija (McClung un Nestler, 2003). BDNF bija viens no šādiem gēniem, un ir zināms, ka šajā neironu ķēdē BDNF uzlabo atbildes reakciju uz narkotiku un pārtikas produktiem.Horgers et al., 1999; Grims et al., 2003; Lu et al., 2004). Papildu interesējošais gēns ir no ciklīna atkarīga kināze 5 (Bibb et al., 2001), ko izraisa arī ΔFosB, un var regulēt gan kokaīna izraisīto strukturālo plastiskumu (\ tNorrholm et al., 2003) un motivāciju, ko mēra ar pakāpenisku attiecību, reaģējot uz dabiskiem vai narkotiku pastiprinātājiem (JR Taylor, nepublicēti novērojumi). Vēl papildu kandidāti ir AMPA glutamāta receptoru GluR2 apakšvienība (Kelz et al., 1999) un transkripcijas faktoru NFkB (kodolfaktoru κB) (\ tAng et al., 2001). Būtu svarīgi novērtēt šīs un citas regulētās olbaltumvielas NAc apakšreģionos kā kandidātus ΔFosB uzvedības efektu starpniecībai attiecībā uz instrumentālo veiktspēju un motivāciju.
Jūsu darbs IR Klientu apkalpošana pašreizējā eksperimentu sērija sniedz pierādījumus tam, ka ΔFosB pārprodukcija NAc ietvaros var uzlabot ar pārtiku saistītu uzvedību un tādējādi regulēt instrumentālo sniegumu, kā tas jau iepriekš tika pierādīts par zāļu atlīdzību. Šie dati sniedz jaunus pierādījumus tam, ka ΔFosB var darboties kā vispārējs molekulārs slēdzis, kas saistīts ar pastiprinātāju motivācijas aspektu uzlabojumiem uz mērķtiecīgu uzvedību. Mūsu secinājumi liek domāt, ka NAc ΔFosB indukcija, piemēram, atkarību izraisošām zālēm, stresu vai, iespējams, ļoti atalgojot pārtiku, var būt kritisks mehānisms, ar kuru disfunkcionālas motivācijas stāvokļi izraisa psihiskus traucējumus, kas saistīti ar kompulsīvu uzvedību.
Zemsvītras piezīmes
o Saņemts martā 15, 2006.
o Pārskatīšana saņemta jūnijā 23, 2006.
o Pieņemts augusts 2, 2006.
Šo darbu atbalstīja Zāļu ļaunprātīgas izmantošanas valsts institūts, Nacionālais garīgās veselības institūts un Nacionālais alkohola lietošanas un alkohola lietošanas institūts. Mēs pateicamies par Dilja Kruegera, Drew Kiraly, Dr. Ralph DiLeone, Robert Sears un Dr Jonathan Hommel vērtīgo palīdzību Yale universitātes Psihiatrijas katedrā. Mēs esam arī pateicīgi Dr. Jennifer Quinn un Dr. Paul Hitchcott par noderīgiem komentāriem par šo manuskriptu.
Korespondence jāadresē Jane R. Taylor, Psihiatrijas departamentam, Molekulārās psihiatrijas nodaļai, Yale Universitātes Medicīnas skolai, Ribicoff pētniecības iekārtām, Konektikutas Garīgās veselības centram, 34 Park Street, New Haven, CT 06508.[e-pasts aizsargāts]
Copyright © 2006 Neiroloģijas biedrība 0270-6474 / 06 / 269196-09 $ 15.00 / 0
Atsauces
1. ↵
1. Ang E,
2. Chen JS,
3. Zagouras P,
4. Magna H,
5. Holland J,
6. Schaeffer E,
7. Nestler EJ
(2001) NFkB indukcija kodolkrāsās ar hronisku kokaīna lietošanu. J Neurochem 79: 221 – 224.
2. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadegijas K,
3. Holahan MR
4. Kelley AE
(2002a) Appetitive instrumentālo mācīšanos traucē cAMP atkarīga proteīnkināzes inhibīcija kodolā. Neurobiols Learn Mem 77: 44 – 62.
3. ↵
1. Baldwin AE,
2. Sadegijas K,
3. Kelley AE
(2002b) Appetitive instrumentālajai mācīšanai ir nepieciešama nejauša NMDA un dopamīna D aktivizēšana1 receptoriem mediālā prefrontālā garozā. J Neurosci 22: 1063 – 1071.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
4. ↵
1. Balleine B,
2. Killcross S
(1994) Ibotēnskābes bojājumu ietekme uz kodolu iedarbojas uz instrumentālo iedarbību. Behav Brain Res 65: 181 – 193.
5. ↵
1. Berke JD,
2. Hyman SE
(2000) Atkarība, dopamīns un atmiņas molekulārie mehānismi. Neurons 25: 515 – 532.
6. ↵
1. Berridge KC,
2. Robinsons TE
(2003) Parsēšanas atlīdzība. Tendences Neurosci 26: 507 – 513.
7. ↵
1. Bibb JA,
2. Chen J,
3. Taylor JR,
4. Svenningsson P,
5. Nishi A,
6. Snyder GL,
7. Yan Z,
8. Sagawa ZK,
9. Ouimet CC,
10. Nairn AC,
11. Nestler EJ
12. Greengard P
(2001) Hroniskas iedarbības ietekmi uz kokaīnu regulē neironu proteīns Cdk5. Daba 410: 376 – 380.
8. ↵
1. Brunzell DH
2. Chang JR,
3. Schneider B,
4. Olausson P,
5. Taylor JR,
6. Picciotto MR
(2006) beta2-apakšvienības saturošie nikotīnskābes acetilholīna receptori ir iesaistīti nikotīna izraisītā kondicionētā pastiprinājuma palielināšanā, bet ne progresīvā attiecība, reaģējot uz pārtiku C57BL / 6 pelēm. Psihofarmakoloģija (Berl) 184: 328 – 338.
9. ↵
1. Cagniard B,
2. Balzams PD,
3. Brunner D,
4. Zhuang X
(2006) Pārtikas atlīdzības saņemšanai pelēm ar hroniski paaugstinātu dopamīnu piemīt pastiprināta motivācija, bet ne mācīšanās. Neiropsihofarmakoloģija 31: 1362 – 1370.
10. ↵
1. Carlezon WA Jr.
2. Thome J,
3. Olson VG,
4. Lane-Ladd SB,
5. Brodkin ES,
6. Hiroi N,
7. Duman RS
8. Neve RL,
9. Nestler EJ
(1998) Kokaīna atlīdzības regulēšana ar CREB. Zinātne 282: 2272 – 2275.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
11. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Ceru, ka BT
4. Nakabeppu Y
5. Nestler EJ
(1997) Hroniski Fos saistītie antigēni: stabili ΔFosB varianti, ko izraisa smadzenēs ar hronisku ārstēšanu. J Neurosci 17: 4933 – 4941.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
12. ↵
1. Chen J,
2. Kelz MB,
3. Zeng G,
4. Sakai N,
5. Steffen C,
6. Shockett PE,
7. Picciotto MR
8. Duman RS
9. Nestler EJ
Transgeniskie dzīvnieki ar inducējamu, mērķtiecīgu gēnu ekspresiju smadzenēs. Mol Pharmacol 54: 495 – 503.
13. ↵
1. Colby CR,
2. Whisler K,
3. Steffen C,
4. Nestler EJ
5. Self DW
(2003) ΔFosB pārmērīga ekspresija ar striatālu šūnu tipam specifiskā veidā palielina kokaīna stimulāciju. J Neurosci 23: 2488 – 2493.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
14. ↵
1. Corbit LH,
2. Balleine BW
(2005) Bazolaterālo un centrālo amygdala bojājumu dubultā disociācija uz vispārējiem un konkrētiem pavlovu-instrumentālās pārneses veidiem. J Neurosci 25: 962 – 970.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
15. ↵
1. Corbit LH,
2. Muir JL,
3. Balleine BW
(2001) Kodolmateriālu loma kodolmateriālu kondicionēšanā: pierādījums funkcionālai disociācijai starp akumbensu serdi un apvalku. J Neurosci 21: 3251 – 3260.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
16. ↵
1. Dalley JW,
2. Chudasama Y
3. Theobald DE,
4. Pettifer CL,
5. Fletcher CM,
6. Robbins TW
(2002) Nucleus accumbens dopamīns un diskriminēta pieeja mācībām: 6-hidroksidopamīna bojājumu un sistēmiskas apomorfīna ievadīšanas interaktīvā iedarbība. Psihofarmakoloģija (Berl) 161: 425 – 433.
17. ↵
1. de Borchgrave R
2. Rawlins JN
3. Dickinson A,
4. Balleine BW
(2002) Citotoksisku kodolu iedarbības ietekme uz instrumentālo kondicionēšanu žurkām. Exp Brain Res 144: 50 – 68.
18. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004a) Tieša mijiedarbība starp bazolaterālo amygdalu un kodolskābes kodolu pamato ar kokaīna meklēšanu uzvedību žurkām. J Neurosci 24: 7167 – 7173.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
19. ↵
1. Di Ciano P,
2. Everitt BJ
(2004b) Kondicionētas pastiprinošas īpašības stimuliem, kas savienoti ar pašapkalpošanās kokaīnu, heroīnu vai saharozi: ietekme uz atkarību izraisošu uzvedību. Neirofarmakoloģija 47 ([Suppl 1]) 202 – 213.
20. ↵
1. Dickinson A
(1985) Darbības un ieradumi: uzvedības autonomijas attīstība. Philos Trans R Lond B Biol Sci 308: 67 – 78.
21. ↵
1. Everitt BJ,
2. Robbins TW
(2005) Narkotiku stiprināšanas neirālās sistēmas: no darbībām līdz ieradumiem līdz piespiedu kārtai. Nat Neurosci 8: 1481 – 1489.
22. ↵
1. Faure A,
2. Haberland U,
3. Conde F
4. El Massioui N
(2005) Nigrostriatāla dopamīna sistēmas bojājums traucē stimulēšanas reakcijas veidošanās. J Neurosci 25: 2771 – 2780.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
23. ↵
1. Grimm JW,
2. Lu L,
3. Hayashi T,
4. Ceru, ka BT
5. Su TP,
6. Shaham Y
(2003) Laika atkarīgs smadzeņu radīto neirotrofisko faktoru proteīnu līmeņa pieaugums mesolimbiskā dopamīna sistēmā pēc izņemšanas no kokaīna: ietekme uz kokaīna alkas inkubāciju. J Neurosci 23: 742 – 747.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
24. ↵
1. J Hall,
2. Parkinson JA,
3. Connor TM,
4. Dickinson A,
5. Everitt BJ
(2001) Amigdala un kodola kodola centrālā kodola iesaistīšana Pāvlovu iespaidā par instrumentālo uzvedību. Eur J Neurosci 13: 1984 – 1992.
25. ↵
1. Harmer CJ,
2. Phillips GD
(1998) Uzlabota ēstgribīga kondicionēšana pēc atkārtotas pirmapstrādes ar d-amfetamīnu. Behav Pharmacol 9: 299 – 308.
26. ↵
1. Hernandez PJ,
2. Sadegijas K,
3. Kelley AE
(2002) Agrīnai instrumentālās mācīšanās konsolidācijai ir nepieciešama proteīnu sintēze kodolos. Nat Neurosci 5: 1327 – 1331.
27. ↵
1. Hommel JD,
2. Sears RM
3. Georgescu D,
4. Simmons DL,
5. DiLeone RJ
(2003) Vietējā gēna nokļūšana smadzenēs, izmantojot vīrusu mediētu RNS traucējumus. Nat Med 9: 1539 – 1544.
28. ↵
1. Horgers BA,
2. Shelton K,
3. Schenk S
(1990) Preexposure sensitivizē žurkas pret kokaīna ietekmi. Pharmacol Biochem Behav 37: 707 – 711.
29. ↵
1. Horgers BA,
2. Giles MK
3. Schenk S
(1992) Amfetamīna un nikotīna iedarbība uz žurkām dod iespēju pašiem ievadīt nelielu kokaīna devu. Psihofarmakoloģija (Berl) 107: 271 – 276.
30. ↵
1. Horgers BA,
2. Iyasere CA,
3. Berhow MT,
4. Messer CJ,
5. Nestler EJ
6. Taylor JR
(1999) Lokomotīvās aktivitātes uzlabošana un kokaīna atlīdzība ar smadzeņu radīto neirotrofisko faktoru. J Neurosci 19: 4110 – 4122.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
31. ↵
1. Ito R,
2. Robbins TW,
3. Everitt BJ
(2004) Atšķirīga kontrole no kokaīna meklējošās uzvedības kodola un čaumalas. Nat Neurosci 7: 389 – 397.
32. ↵
1. Jentsch JD,
2. Taylor JR
(1999) Impulsivitāte, ko izraisa frontostriatāla disfunkcija narkotiku lietošanā: ietekme uz uzvedību, kas saistīta ar atalgojuma stimuliem. Psihofarmakoloģija (Berl) 146: 373 – 390.
33. ↵
1. Kelley AE
(2004) Ventrālā striatāla kontrole ēstgribas motivācijai: loma inaktīvā uzvedībā un ar atalgojumu saistīta mācīšanās. Neurosci Biobehav Rev 27: 765 – 776.
34. ↵
1. Kelley AE,
2. Berridge KC
(2002) Dabisko atlīdzību neirozinātne: saistība ar atkarību izraisošām zālēm. J Neurosci 22: 3306 – 3311.
35. ↵
1. Kelz MB,
2. Chen J,
3. Carlezon WA Jr.
4. Whisler K,
5. Gilden L
6. Beckmann AM,
7. Steffen C,
8. Zhang YJ,
9. Marotti L,
10. Self DW,
11. Tkatch T,
12. Baranauskas G,
13. Surmeier DJ,
14. Neve RL,
15. Duman RS
16. Picciotto MR
17. Nestler EJ
(1999) Transkripcijas faktora ΔFosB ekspresija smadzenēs kontrolē jutību pret kokaīnu. Daba 401: 272 – 276.
36. ↵
1. Konradi C,
2. Cole RL,
3. Heckers S,
4. Hyman SE
(1994) Amfetamīns regulē gēnu ekspresiju žurku striatumā, izmantojot transkripcijas faktoru CREB. J Neurosci 14: 5623 – 5634.
37. ↵
1. Lee KW,
2. Kim Y,
3. Kim A,
4. Helmins K,
5. Nairn AC,
6. Greengard P
(2006) Kokaīna izraisīta dendrīta mugurkaula veidošanās D1 un D2 dopamīna receptoru saturošos vidējos smadzeņu neironus kodolkrāsās. Proc Natl Acad Sci ASV 103: 3399 – 3404.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
38. ↵
1. Li Y,
2. Kolb B,
3. Robinsons TE
(2003) Pastāvīgo amfetamīna izraisīto izmaiņu vieta dendritisko muguriņu blīvumā vidēji smailiem neironiem kodolā accumbens un caudate-putamen. Neiropsihofarmakoloģija 28: 1082 – 1085.
39. ↵
1. Li Y,
2. Acerbo MJ,
3. Robinsons TE
(2004) Uzvedības sensibilizācijas izraisīšana ir saistīta ar kokaīna izraisītu strukturālo plastiskumu kodola (bet ne čaumalas) kodolā. Eur J Neurosci 20: 1647 – 1654.
40. ↵
1. Lu L,
2. Dempsey J,
3. Liu SY,
4. Bossert JM,
5. Shaham Y
(2004) Viena smadzeņu radītā neirotrofiskā faktora infūzija vēdera apvalka zonā izraisa ilgstošu kokaīna pastiprināšanos pēc atcelšanas. J Neurosci 24: 1604 – 1611.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
41. ↵
1. McClung CA,
2. Nestler EJ
(2003) Gēnu ekspresijas un kokaīna atlīdzības regulēšana ar CREB un ΔFosB. Nat Neurosci 6: 1208 – 1215.
42. ↵
1. McClung CA,
2. Ulery PG,
3. Perrotti LI,
4. Zachariou V,
5. Bertons O
6. Nestler EJ
(2004) ΔFosB: molekulārs slēdzis ilgstošai adaptācijai smadzenēs. Brain Res Mol Brain Res 132: 146 – 154.
43. ↵
1. Miles FJ,
2. Everitt BJ,
3. Dalley JW,
4. Dickinson A
(2004) Kondicionēta aktivitāte un instrumentāla pastiprināšana pēc ilgstošas perorālas kokaīna lietošanas žurkām. Behav Neurosci 118: 1331 – 1339.
44. ↵
1. Nestler EJ
(2004) Narkotiku atkarības molekulārie mehānismi. Neirofarmakoloģija 47 ([Suppl 1]) 24 – 32.
45. ↵
1. Nestler EJ
2. Barrot M,
3. Self DW
(2001) ΔFosB: ilgstoša molekulārais slēdzis atkarībai. Proc Natl Acad Sci ASV 98: 11042 – 11046.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
46. ↵
1. Norrholm SD,
2. Bibb JA,
3. Nestler EJ
4. Ouimet CC,
5. Taylor JR,
6. Greengard P
(2003) Kokaīna izraisīta dendritisko muguriņu proliferācija kodolkrāsās ir atkarīga no ciklīna atkarīgas kināzes-5 aktivitātes. Neirozinātne 116: 19 – 22.
47. ↵
1. Nye HE
2. Ceru, ka BT
3. Kelz MB,
4. Iadarola M,
5. Nestler EJ
(1995) Farmakoloģiskie pētījumi par hroniska FOS saistītā antigēna indukcijas ar kokainu regulēšanu striatumā un kodolskaldnē. J Pharmacol Exp Ther 275: 1671 – 1680.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
48. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2003) Atkārtota nikotīna iedarbība uzlabo ar mācībām saistīto apmācību žurkām. Neiropsihofarmakoloģija 28: 1264 – 1271.
49. ↵
1. Olausson P,
2. Jentsch JD,
3. Taylor JR
(2004) Atkārtota nikotīna iedarbība uzlabo reakciju ar kondicionētu pastiprinājumu. Psihofarmakoloģija (Berl) 173: 98 – 104.
50. ↵
1. Parkinson JA,
2. Olmstead MC,
3. Burns LH,
4. Robbins TW,
5. Everitt BJ
(1999) Kodolskābes kodolu un čaumalu bojājumu ietekmes sadalījums uz apetitīvās pavlovijas pieejas uzvedību un d-amfetamīna pastiprināta kondensācijas pastiprināšana un lokomotoriskā aktivitāte. J Neurosci 19: 2401 – 2411.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
51. ↵
1. Parkinson JA,
2. Dalley JW,
3. Kardināls RN,
4. Bamford A,
5. Fehnert B,
6. Lachenal G,
7. Rudarakanchana N,
8. Halkerston KM,
9. Robbins TW,
10. Everitt BJ
(2002) Nucleus accumbens dopamīna izsīkums pasliktina gan apetitīvās Pavlovijas pieejas uzvedību, gan ietekmi uz to: ietekme uz mesoaccumbens dopamīna funkciju. Behav Brain Res 137: 149 – 163.
52. ↵
1. Paxinos G,
2. Watson C
(1986) Žurku smadzenes stereotaksiskās koordinātās (Academic, Sydney).
53. ↵
1. Perrotti LI,
2. Hadeishi Y
3. Ulery PG,
4. Barrot M,
5. Monteggia L,
6. Duman RS
7. Nestler EJ
(2004) ΔFosB indukcija ar smadzenēm saistītajās smadzeņu struktūrās pēc hroniska stresa. J Neurosci 24: 10594 – 10602.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
54. ↵
1. Piazza PV,
2. Deminiere JM,
3. le Moal M,
4. Simon H
(1990) Stresa un farmakoloģiski izraisīta uzvedības sensibilizācija palielina neaizsargātību pret amfetamīna pašpārvaldes iegūšanu. Brain Res 514: 22 – 26.
55. ↵
1. Pich EM,
2. Pagliusi SR,
3. Tessari M,
4. Talabot-Ayer D,
5. Hooft van Huijsduijnen R
6. Chiamulera C
(1997) Nikotīna un kokaīna atkarību izraisošajām īpašībām bieži sastopami neirālie substrāti. Zinātne 275: 83 – 86.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
56. ↵
1. Robbins TW,
2. Everitt BJ
(1999) Narkotiku atkarība: slikti ieradumi. Daba 398: 567 – 570.
57. ↵
1. Robinsons TE,
2. Berridge KC
(1993) Narkotiku iejaukšanās nervu pamats: atkarības teorijas stimulēšana. Brain Res Brain Res Rev 18: 247 – 291.
58. ↵
1. Robinsons TE,
2. Kolb B
(1999) Dendritu un dendritisko muguriņu morfoloģijas izmaiņas kodolā un prefronta garozā pēc atkārtotas ārstēšanas ar amfetamīnu vai kokaīnu. Eur J Neurosci 11: 1598 – 1604.
59. ↵
1. Robinsons TE,
2. Gorny G,
3. Mitton E,
4. Kolb B
(2001) Kokaīna pašpārvalde maina dendritu un dendritisko muguriņu morfoloģiju kodolos un neocortex. Synapse 39: 257 – 266.
60. ↵
1. Sesack SR,
2. Pickel VM
(1990) Žurku mediālajā kodolā accumbens hippokampāls un katecholamīnerģiskie termināļi saplūst ar spiniem neironiem un atrodas savā starpā. Brain Res 527: 266 – 279.
61. ↵
1. Shaw-Lutchman TZ,
2. Impey S,
3. Storm D
4. Nestler EJ
(2003) CRE-mediētas transkripcijas regulēšana peles smadzenēs ar amfetamīnu. Synapse 48: 10 – 17.
62. ↵
1. Smith AD,
2. Bolam JP
(1990) Bazālo gangliju neironu tīkls, ko atklāj identificēto neironu sinaptisko savienojumu izpēte. Tendences Neurosci 13: 259 – 265.
63. ↵
1. Smith-Roe SL,
2. Kelley AE
(2000) NMDA un dopamīna D sakritība1 receptoriem kodola accumbens kodolā ir nepieciešamas ēstgribas instrumentālas mācības. J Neurosci 20: 7737 – 7742.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
64. ↵
1. Taylor JR,
2. Horgers BA
(1999) Pēc kokaīna sensibilizācijas pastiprināta reakcija uz kondicionētu atalgojumu, ko rada amfetamīns. Psihofarmakoloģija (Berl) 142: 31 – 40.
65. ↵
1. Taylor JR,
2. Jentsch JD
(2001) Psihomotorās stimulējošo narkotiku atkārtotas lietošanas pārtraukšana maina pavlovijas pieejas uzvedību žurkām: kokaīna, d-amfetamīna un 3,4-metilēndioksimetamfetamīna (“ekstazī”) diferenciālā ietekme Biol psihiatrija 50: 137 – 143.
66. ↵
1. Vezina P,
2. Lorrain DS
3. Arnolds GM,
4. Austin JD,
5. Suto N
(2002) Vidējā smadzeņu dopamīna neironu reaktivitātes sensibilizācija veicina amfetamīna meklēšanu. J Neurosci 22: 4654 – 4662.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
67. ↵
1. Werme M,
2. Messer C,
3. Olson L,
4. Gilden L
5. Thoren P,
6. Nestler EJ
7. Brene S
(2002) ΔFosB regulē riteņu kustību. J Neurosci 22: 8133 – 8138.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
68. ↵
1. Wyvell CL,
2. Berridge KC
(2001) Stimulējoša sensibilizācija ar iepriekšējo amfetamīna iedarbību: palielināts cue-trigerēts “vēlas” saharozes atlīdzībai. J Neurosci 21: 7831 – 7840.
Kopsavilkums / bezmaksas teksts
69. ↵
1. Yin HH,
2. Knowlton BJ,
3. Balleine BW
(2004) Dorsolaterālā striatuma bojājumi saglabā paredzamo rezultātu, bet traucē ieradumu veidošanos instrumentālajā mācīšanā. Eur J Neurosci 19: 181 – 189.
70. ↵
1. Zachariou V,
2. Bolanosa CA,
3. Selley DE,
4. Theobald D,
5. Cassidy MP,
6. Kelz MB,
7. Shaw-Lutchman T,
8. Bertons O
9. Sim-Selley LJ,
10. Dileone RJ,
11. Kumar A,
12. Nestler EJ
(2006) ΔFosB būtiska loma morfīna darbībā. Nat Neurosci 9: 205 – 211.
;
