Biol Psihiatrija. 2008 Dec 1; 64 (11): 941-50. Epub 2008 Jul 26.
Teegarden SL, Nestler EJ, Bale TL.
avots
Dzīvnieku bioloģijas katedra, Pensilvānijas Universitāte, Filadelfija, PA 19104-6046, ASV.
Anotācija
INFORMĀCIJAI:
Jutība pret atalgojumu ir saistīta ar predisponējošu faktoru uzvedībai, kas saistīta ar narkotiku lietošanu, kā arī pārēšanās. Tomēr pamatā esošie mehānismi, kas veicina atalgojuma jutīgumu, nav zināmi. Mēs pieņēmām, ka dopamīna signalizācijas traucējumu regulēšana varētu būt pamats paaugstinātas atlīdzības jutības cēloņam, kad atalgojuma stimuli varētu darboties, lai normalizētu sistēmu.
METODES:
Mēs izmantojām ģenētisko peles modeli ar paaugstinātu atalgojuma jutīgumu, Delta FosB pārmērīgi ekspresējošo peli, lai pārbaudītu atlīdzības ceļa izmaiņas, reaģējot uz garšīgu, augstu tauku saturu. Atalgojuma signālu marķieri šajās pelēs tika pārbaudīti gan pēc pamata, gan pēc 6 nedēļas garšīgas diētas iedarbības. Peles tika pārbaudītas uzvedības testā pēc augsta tauku satura diētas izņemšanas, lai novērtētu šī modeļa neaizsargātību pret atalgojuma stimuliem.
REZULTĀTI:
Mūsu rezultāti liecina par mainītu atalgojuma ceļa aktivāciju gar kodolskaldņu-hipotalāmu-ventrālo tegmentālo apgabalu shēmām, kas izriet no Delta FosB pārmērīgas izpausmes kodolkrūšu un striatāla reģionos.. Fosforilētā cikliskā adenozīna monofosfāta (cAMP) reakcijas elementa līmeņi (pCREB), no smadzenēm iegūts neirotrofisks faktors (BDNF), un dopamīns un cikliskā adenozīna monofosfāta regulētais fosfoproteīns ar molekulmasu 32 kDa (DARPP-32) kodolkrāsās tika samazināti Delta FosB pelēm, kas liecina par pazeminātu dopamīna signalizāciju. Sešas nedēļas ar augstu tauku diētu iedarbību šīs atšķirības pilnībā uzlaboja, atklājot garšīgas diētas spēcīgo atalgojumu. Delta FosB pelēm bija arī ievērojams lokomotoriskās aktivitātes un ar trauksmi saistītu reakciju pieaugums 24 stundas pēc augsta tauku satura izņemšanas.
Secinājumi:
Šie rezultāti nosaka pamata jutību pret atlīdzības izmaiņām saistībā ar Delta FosB un dopamīna signalizācijas traucējumiem, ko var normalizēt ar garšīgu uzturu, un tas var būt predisponējošs fenotips dažos aptaukošanās veidos..
Ievads
Neskatoties uz mūsu pieaugošajām zināšanām par nervu sistēmām, kas kontrolē apetīti un sāta sajūtu, Amerikas Savienotajās Valstīs turpina pieaugt aptaukošanās rādītāji. Pašreizējām zāļu terapijām ir ierobežota efektivitāte, un uzvedības modifikācijas cieš no minimālas ilgtermiņa atbilstības (1). Kaloriski blīvu, garšīgu pārtikas produktu patēriņš ir saistīts ar izmaiņām stresa un atalgojuma ceļos smadzenēs, kas liecina, ka šādu pārtikas produktu atalgojošās īpašības var ignorēt enerģijas bilances signālus (2-4). Pārtikas produkti ar augstu tauku saturu darbojas kā dabisks atlīdzība, aktivizējot smadzeņu atlīdzības centrus tādā pašā veidā kā ļaunprātīgas lietošanas zāles, un kā tādi tie ir izmantoti pašpārvaldes paradigmās (5-8). Tādējādi, visticamāk, uzvedība un motivācija pārēšanās un narkotiku lietošanai ir kopīgi pamatā esošie mehānismi, kas, iespējams, paver jaunas ārstēšanas iespējas abiem nosacījumiem.
Pētot attiecības starp garšīgiem pārtikas produktiem un ceļiem, kas regulē atlīdzību un stresu smadzenēs, mēs esam iepriekš identificējuši molekulāros un bioķīmiskos marķierus ar samazinātu atalgojumu un paaugstinātu stresu pēc izņemšanas no garšīgas, augstu tauku satura diētas (HF). Līdzīgi kā ļaunprātīgas lietošanas narkotiku iedarbība mūsu pētījumos izraisīja garšīgas diētas iedarbību, tāpēc palielinājās transkripcijas faktora ΔFosB līmenis kodolkrāsās (NAc), kas ir centrālā smadzeņu atlīdzības struktūra (9, 10).. Peles, kas inducējami pārspēja ΔFosB rādītāju, palielināja instrumentālo atbildi uz pārtikas atlīdzību (11), padarot tās par vērtīgu instrumentu, lai pārbaudītu atalgojuma jutīguma un ilglaicīgas atalgojuma sistēmas regulēšanas lomu molekulārajās un bioķīmiskās reakcijās uz garšīgu uzturu.
Šajā pētījumā mēs izmantojām ΔFosB pārmērīgi ekspresējošās peles, lai pārbaudītu ilgstošas atalgojuma marķieru izmaiņas NAc-hipotalāma – ventrālās tegmentālās zonas (VTA) neirocirkulācijā, reaģējot uz garšīgu HF diētu. Pamatojoties uz iepriekšējiem pētījumiem par šīm jutīgajām pelēm, mēs pieņēmām, ka ΔFosB izraisītās izmaiņas atalgojuma jutībā ietver dopamīna signalizācijas traucējumus, kas izriet no NAc atgriezeniskās saites uz VTA. Turklāt mēs pieņēmām, ka dabiskā atlīdzība par enerģiju blīvu HF diētu pēc tam normalizētu dopamīnerģisko sistēmu šajās pelēs, kā rezultātā pārspīlēta reakcija uz stresa izstāšanos no šīs HF diētas. Unikāls aspekts, kā izmantot garšīgu uzturu kā atalgojošu vielu, ļauj mums iekļaut hipotalāmu izejvielas, lai apbalvotu shēmas fenotipā, kas var paredzēt, ka populācija ir iecietīga pret ārstēšanai rezistentu aptaukošanos. Lai pārbaudītu šo hipotēzi, mēs pētījām dopamīna neirotransmisijas marķierus, ieskaitot pCREB, BDNF un DARPP-32 NAc un tirozīna hidroksilāzē un dopamīna transportētāju VTA pēc HF iedarbības. Mēs arī pārbaudījām specifiskus enerģijas bilances marķierus, kas, kā zināms, ietekmē dopamīna izlaidi, ieskaitot leptīna un oreksīna receptorus VTA un oreksīna ekspresiju sānu hipotalāmā.
Materiāli un metodes
Dzīvnieki
Vīriešu bitransgēnās peles, kas inducējami pārspēja ΔFosB dinorfīna pozitīvajos neironos NAc un dorsālā striatumā (Kelz et al., 1999), tika radītas jauktā fonā (ICR: C57Bl6 / SJL) Teksasas Dienvidrietumu medicīnas centra universitātē un uzturēja un pārbaudīts Pensilvānijas universitātē. Visas peles tika turētas uz doksiciklīna (100 μg / ml dzeramajā ūdenī) līdz ierašanās Pensilvānijas universitātē. Lai izraisītu pārmērīgu ekspresiju, doksiciklīns tika noņemts (n = 23) (12). Kontroles peles (n = 26) turpināja saņemt zāles. Astoņas nedēļas pēc doxicīna izņemšanas pelēm tika piešķirtas diētas grupas, un pēc tam izrādījās, ka ekspresija sasniedz maksimālo līmeni (13). Pelēm tika saglabāts 12: 12 gaiši-tumšs cikls (gaismas uz 0700) ar pārtiku un ūdeni, kas ir pieejami ad libitum. Visi pētījumi tika veikti saskaņā ar Pensilvānijas Universitātes Institucionālo dzīvnieku aprūpes un lietošanas komitejas apstiprinātiem eksperimentālajiem protokoliem, un visas procedūras tika veiktas saskaņā ar institucionālajām vadlīnijām.
Diēta
Peles tika turētas uz mājas čaumalas (n = 16) vai novietotas uz HF (n = 16-17) sešas nedēļas. House chow (Purina Lab Diet, St. Louis, MO) saturēja 4.00 kcal / g, kas sastāvēja no 28% proteīna, 12% tauku un 60% ogļhidrātu. HF uzturs (Research Diets, New Brunswick, NJ) satur 4.73 kcal / g, kas sastāvēja no 20% proteīna, 45% tauku un 35% ogļhidrātu.
Bioķīmija un gēnu ekspresija
Peles tika analizētas pēc sešu nedēļu ilgas diētas iedarbības. Smadzenes tika izņemtas no galvaskausa un vai nu sasaldētas veselas uz sausā ledus, vai arī izdalītas NAc (aptuveni 0.5 - 1.75 mm no bregmas, 3.5 - 5.5 mm dziļumā) un sasaldētas šķidrā slāpeklī. Audu uzglabā -80 ° C temperatūrā līdz pārbaudei.
Bioķīmiskās analīzes
Rietumu blotēšanas metodes ir aprakstītas papildu materiālos. Izmantotās antivielas bija: Cdk5, CREB un BDNF (1: 500, Santa Cruz biotehnoloģija, Santa Cruz, CA) un fosfo-CREB (pCREB) (Ser 133) (1: 500, šūnu signalizācijas tehnoloģija, Danvers, MA).
Receptora autoradiogrāfija
Detalizētas autoradiogrāfijas metodes ir aprakstītas papildu materiālos. Izmantotās ligandas bija 2 nM H3 - SCH 23390 un 5 nM H3 - spiperons (PerkinElmer, Boston, MA).
In situ hibridizācija
Audu apstrāde un hibridizācija tika veikta, kā aprakstīts iepriekš (14). DARPP-32 zondi laipni sniedza P. Greengard (Rockefeller University), un oreksīna zonde - J. Elmquist (Teksasas Universitātes Dienvidrietumu medicīnas centrs). DARPP-32 pārbaudītie slaidi tika pievienoti plēvēm 3 dienām, un oreksīna pētījumi tika veikti filmai 4 dienām. Filmu attēlu kvantitatīva noteikšana tika veikta, kā aprakstīts iepriekš (10).
QRT-PCR
RNS tika izolēta no VTA un atsevišķu gēnu ekspresija tika novērtēta, izmantojot TaqMan gēnu ekspresijas testus (Applied Biosystems, Foster City, CA). Detalizētas metodes un statistikas analīzes var atrast papildu materiālos.
Uzvedības analīze
Lai izpētītu atalgojuma jutīguma ietekmi uz uztura izraisītajām uzvedības izmaiņām, pēc četru nedēļu iedarbības tika izņemta peles apakšgrupa no HF un atgriezās mājās (n = 9 kontrole, n = 8 ΔFosB). Divdesmit četras stundas pēc izņemšanas pelēm tika pakļauti atklātā lauka tests saskaņā ar mūsu iepriekš publicēto uztura izņemšanas paradigmu (10). Īsumā, pele tika novietota atklātā lauka aparāta centrā un tika uzraudzīta piecas minūtes. Tika mērīti kopējie līniju krustojumi, fecal boli, laiks centrā un krustojumi centrā.
Statistika
Visi dati, izņemot Western blotus, tika analizēti, izmantojot divvirzienu ANOVA, kam sekoja Fišera PLSD tests ar doksiciklīna ārstēšanu (ΔFosB ekspresija) un diētas stāvokli kā neatkarīgos mainīgos. RT-PCR analīzēm tika izmantota samazināta P vērtība, lai labotu vairākus salīdzinājumus saistīto gēnu grupās (skatīt papildu materiālus). Western bloti tika analizēti, izmantojot studenta t-testu ar doksiciklīna ārstēšanu kā neatkarīgu mainīgo, salīdzinot optiskos blīvumus vienā blotā. Visi dati ir parādīti kā vidējie ± SEM.
rezultāti
Bāzes bioķīmiskās atšķirības
Lai noskaidrotu molekulāros ceļus, kas ir pastiprinātas jutīguma jutības pamatā ΔFosB pārekspresējošās pelēs, NAc tika pārbaudīti vairāku galveno signālu molekulu līmeņi. Bija tendence uz paaugstinātu Cdk5 līmeni ΔFosB peles NAc, salīdzinot ar pakārtotajiem kontroles dzīvniekiem, kurus uzturēja doksiciklīnā (F = 5.1, P = 0.08; 1A. Attēls). ΔFosB peles izteica ievērojami pazeminātu pCREB līmeni (F = 7.4, P <0.05; 1B. Att.), Kā arī kopējo CREB līmeni (F = 5.4, P = 0.05; 1 C. Attēls). Būtisks BDNF samazinājums tika novērots arī ΔFosB peles NAc (F = 10.6, P <0.05; 1D. Attēls).
Skaitlis 1
Ar pelēm, kas pārmērīgi izpaužas ΔFosB, parādījās bioķīmiski pazemināti dopamīna signalizācijas marķieri NAc.
Pārtikas uzņemšana un ķermeņa masa uz augstu tauku saturu
Pēc tam mēs pārbaudījām dabiski izdevīgas HF diētas ietekmi uz signālu molekulu izmaiņām ΔFosB pārekspresējošās pelēs. Mājā vai HF nebija atšķirību starp ΔFosB pelēm un kontroles devām. Tomēr, saskaroties ar HF, bija vispārējs kaloriju patēriņa samazinājums, normalizēts atbilstoši ķermeņa masai, kas bija specifisks ΔFosB pelēm (F = 11.2, P <0.01; 2.A attēls). Diētas iedarbības sešu nedēļu beigās pelēm, kuras saņēma HF, svars bija ievērojami lielāks nekā tām, kuras uzturēja ar chow diētu (F = 17.2, P <0.001), un ΔFosB peles kopumā svēra mazāk nekā kontroles grupas (F = 5.6, P <0.05; Zīm. 2B). Šis efekts bija raksturīgs atšķirībām starp grupām uz chow diētu (P <0.05).
Skaitlis 2
ΔFosB pārmērīgi ekspresējošās peles neuzrādīja atšķirības uztura uzņemšanā gan ar čau, gan ar augstu tauku saturu.
Bioķīmiskās atšķirības ar augstu tauku saturu
Lai noteiktu, kā HF uzturs var mainīt bazālās atšķirības NAc signalizācijā, tika pētīti tie paši signalizācijas proteīni, kas tika pētīti sākotnēji, dzīvniekiem, kas bija saņēmuši sešas nedēļas HF. Cdk5 līmeņos nebija būtisku atšķirību (3A attēls). PCREB un kopējā CREB līmeņi vairs nebija atšķirīgi pēc sešām HF nedēļām (3B, C attēls). Pēc sešu nedēļu ilgas HF ekspozīcijas (F = 6.5, P = 0.05; 3D) BDNF līmenis bija ievērojami paaugstināts AFosB pelēm.
Skaitlis 3
Augsta tauku satura (HF) diēta uzlaboja signalizācijas atšķirības, kas novērotas ΔFosB pārmērīgas ekspresijas pelēm NAc
Dopamīna receptoru autoradiogrāfija
Mēs izmantojām receptoru autoradiogrāfiju, lai novērtētu, vai ΔFosB izraisītās izmaiņas dopamīna signalizācijā NAc ir saistītas ar izmaiņām dopamīna receptoru ekspresijā (4. att.). Diēta ar augstu tauku saturu nedaudz palielināja D1 dopamīna receptoru saistīšanās blīvumu (P = 0.14), un šī atšķirība bija lielāka ΔFosB pelēm (4.B attēls). Pēc HF bija vērojama arī D1 saistīšanās laukuma palielināšanās tendence (P = 0.06), un post hoc testēšana parādīja, ka tas ir nozīmīgs ΔFosB pelēm (P <0.05; 4. att. C). Atšķirībā no D1 receptoriem izmaiņas D2 receptoru saistīšanās blīvumā (kontroles chow = 97.6 ± 6.9, kontroles HF = 101.1 ± 8.2, ΔFosB chow = 91.6 ± 1.0, ΔFosB HF = 94.8 ± 9.5) vai saistīšanās laukuma (kontroles chow = 47.3) izmaiņām Tika novērota ± 3.4, kontroles HF = 53.8 ± 6.0, ΔFosB chow = 51.9 ± 3.7, ΔFosB HF = 49.0 ± 3.3) NAc.
Skaitlis 4
Augsta tauku satura diēta (HF) izraisīja izmaiņas D1 dopamīna receptoru saistīšanā un DARPP-32 ekspresija ΔFosB pārmērīgas ekspresijas peles kodolā accumbens (NAc)
DARPP-32 izteiksme NAc
DARPP-32 ekspresijas līmeņu noteikšanai NAc tika izmantota in situ hibridizācija (4.D attēls). Diēta ar augstu tauku saturu ievērojami palielināja DARPP-32 ekspresiju šajā smadzeņu reģionā (F = 5.1, P <0.05), un bija ievērojama mijiedarbība starp uzturu un ΔFosB ekspresiju (F = 8.9, P <0.05), ar ΔFosB pelēm bija lielāka diētas izraisītas izmaiņas (4. att. E). BAR atšķirība DARPP-32 ekspresijā starp kontroles un ΔFosB pelēm tika atklāta ar post hoc testēšanu (P <0.01), kā arī ievērojamu DARPP-32 ekspresijas pieaugumu ΔFosB pelēm uz HF (P <0.01).
Gēnu izteiksme VTA
QRT-PCR tika izmantots, lai novērtētu izmaiņas gēnu ekspresijā VTA, mērķējot uz vairākiem galvenajiem gēniem, kas iepriekš bija saistīti ar atlīdzības regulēšanu. Visi paraugi tika normalizēti β-aktīnam. Lai nodrošinātu, ka β-aktīna ekspresija nemainījās ar ārstēšanu, tika veikts atsevišķs tests, lai salīdzinātu β-aktīnu ar otru iekšējo kontroli - GAPDH. Būtiskas atšķirības β-aktīna ekspresijā nebija (ΔCT vērtības, β-aktīns - GAPDH: kontroles čau = 2.29 ± 0.21, kontroles HF = 2.01 ± 0.04, ΔFosB čau = 2.32 ± 0.49, ΔFosB HF = 2.37 ± 0.10).
Tirozīna hidroksilāzes ekspresijai tika novērota mijiedarbības tendence starp ΔFosB ekspresiju un diētas ārstēšanu (F = 3.6, P <0.06; 5.A attēls). Šķita, ka sešas nedēļas HF iedarbība samazina tirozīna hidroksilāzes ekspresiju kontrolpelēs un palielina ekspresiju ΔFosB pelēs. Būtiska mijiedarbība starp ΔFosB ekspresiju un diētas iedarbību tika novērota dopamīna pārvadātāja ekspresijai (F = 6.7, P <0.03; 5B. Att.). Līdzīgi kā tirozīna hidroksilāzei, HF iedarbība samazināja dopamīna pārvadātāja ekspresiju kontrolpelēs un ievērojami palielināja ekspresiju ΔFosB pelēs (P <0.05). Bāzes atšķirība dopamīna pārvadātāja ekspresijā starp kontroles un ΔFosB pelēm nesasniedza nozīmīgumu (P = 0.16), bet pēc 6 nedēļām HF ΔFosB peles izteica ievērojami paaugstinātu dopamīna nesēja līmeni salīdzinājumā ar kontrolgrupām (P <0.05).
Skaitlis 5
Augsta tauku satura diētas (HF) ekspozīcija un ΔFosB ekspresija izraisīja izmaiņas vairāku galveno molekulu izpausmē VTA
Bija tendence, kas norāda uz palielinātas ΔFosB ekspresijas efektu, lai samazinātu TrkB līmeni VTA (F = 5.7, P <0.04; 5. C attēls). Lai gan galvenā ietekme uz κ-opioīdu receptoru ekspresiju nebija, bija tendence uz samazinātu ekspresiju ΔFosB pelēs (P = 0.08; 5. att. 6.1D). Leptīna receptora ekspresija tika noteikta arī VTA. Tika konstatēta ievērojama diētas iedarbības ietekme (F = 0.03, P <5), ar HF ievērojami samazinot leptīna receptora līmeni VTA gan ΔFosB, gan kontroles pelēm (1.E attēls). Tika pārbaudīta arī oreksīna 9.0. receptora ekspresija VTA. Diētai bija ievērojama ietekme uz oreksīna receptora ekspresiju (F = 0.02, P <5), pelēm, kas pakļautas HF, VTA izteica augstāku līmeni (1. att. F). Bija arī tendence, ka ΔFosB peles kopumā izteica augstāku oreksīna receptora 0.05 līmeni šajā smadzeņu reģionā (P <XNUMX).
Orexīna ekspresija sānu hipotalāmā
Mēs izmērījām oreksīna līmeni sānu hipotalāmā, VTA orexinergic inervācijas izcelsmi, veicot in situ hibridizāciju (6.A attēls). Bija nozīmīga mijiedarbība starp ΔFosB ekspresiju un uztura iedarbību uz oreksīna ekspresiju (F = 9.1, P <0.01), HF ievērojami palielinot oreksīna līmeni kontroles pelēm (P <0.05) un samazinot ekspresiju ΔFosB pelēm (6.B attēls). Lai gan oreksīna ekspresijā bazālā stāvoklī nebija būtisku atšķirību, pēc 6 nedēļas HF, ΔFosB peles izteica ievērojami zemāku oreksīna līmeni salīdzinājumā ar kontrolgrupām (P <0.05).
Skaitlis 6
Augsta tauku satura (HF) diētā bija atšķirīga ietekme uz oreksīna ekspresiju kontrolē (Ctrl) un ΔFosB pārmērīgi ekspresējošajās pelēs
Beuzvedības analīze
Lai novērtētu uzbudinājuma un emocionalitātes izmaiņas uztura izmaiņu dēļ, peles tika pakļautas atklātā lauka testam 24 stundas pēc HF diētas atcelšanas (10). Kopējos līnijas krustojumus, kas tika vērtēti kā uzbudinājuma rādītājs, būtiski ietekmēja ΔFosB ekspresija (F = 6.6, P <0.05) un diēta (F = 4.6, P <0.05; 7A. Att.). ΔFosB peles bija aktīvākas jaunajā vidē nekā spirāles, un post-hoc testēšana parādīja, ka peles, kas izņemtas no HF, bija ievērojami aktīvākas nekā tās, kas pakļautas chow (P <0.05). Fekāliju boli tika ieskaitīti kā trauksmei līdzīgas uzvedības mērs (10). Bija galvenais efekts no ΔFosB ekspresijas (F = 10.2, P <0.01), ar ΔFosB pārekspresējošām pelēm jaunā vidē radās vairāk fekāliju boli, it īpaši mājas chow un HF izņemšanas grupās (7.B attēls). ΔFosB pelēm, kuras uzturēja HF diētā, bija mazāk fekālo boli nekā tām, kuras uzturēja uz chow, un tām, kuras izņem 24 stundas pirms testa. Diēta, šķiet, neietekmēja kontroles peles. Netika novērota būtiska ne ΔFosB ekspresijas, ne diētas ietekme uz laiku, kas pavadīts atklātā lauka centrā (kontroles chow = 14.5 ± 3.1 sek, kontroles HF = 18.0 ± 3.2 sek, kontroles W / D = 15.4 ± 1.9 sek, ΔFosB chow = 16.9 ± 2.4 sek, ΔFosB HF = 13.1 ± 3.9 sek, ΔFosB W / D = 19.8 ± 2.6 sek).
Skaitlis 7
Peles, kas pārspēja ΔFosB, bija jutīgākas pret augsta tauku satura diētas (HF) izņemšanas ietekmi
diskusija
Aptaukošanās ārstēšanā ir kritiska vajadzība identificēt faktorus, kas ietekmē jutību pret pārēšanās un svara pieaugumu. Smadzeņu atlīdzības ceļiem ir svarīga loma garšīgu ēdienu un uztura izmaiņu motivācijā un reaģēšanā uz tiem (6, 10, 15, 16). Tā kā oreksigēni un anoreksijas signāli var tieši ietekmēt atlīdzības signalizāciju, izmantojot hipotalāmu-VTA-NAc ķēdi, gēnu atpazīstamība, kas reaģē uz enerģijas ziņā bagātām garšīgām diētām atlīdzības centros, var nodrošināt jaunus terapeitiskos mērķus aptaukošanās ārstēšanā (17, 18). Tāpēc mēs pārbaudījām atlīdzības un enerģijas bilances bioķīmiskos un molekulāros marķierus gar hipotalāmu-VTA-NAc ķēdi, reaģējot uz HF uzturu ΔFosB pārmērīgi ekspresējošās pelēs, kā uzlabotas jutības pret atlīdzības izmaiņām modeli (13, 19, 20) un uzvedības jutība pēc uztura izņemšanas. Mēs pieņēmām, ka dopamīna signalizācijas bazālā disregulācija ΔFosB pelēm būtu normalizēta ar HF uztura atalgojošo ietekmi, ietverot enerģijas bilances signālu un dopamīna sistēmas krustojumu.
Lai pārbaudītu marķierus, kas norāda uz dopamīna signalizācijas disregulāciju NAc, mēs pārbaudījām D1 receptoru līmeni un pakārtotos efektorus. Lai gan D1 receptoru saistīšanā nav būtisku atšķirību, \ t bija tendence HF ekspozīcijai palielināt saistošo laukumu ΔFosB pelēm. Tas ir interesanti, jo ΔFosB indukcija ar medikamentiem un dabiskiem ieguvumiem dominē dinorfīna pozitīvajā vidējā smailes neironu apakštipā, kas galvenokārt izpauž D1 receptorus. (9, 21). Dopamīna signālierīces mērķa pCREB līmeņi tika ievērojami samazināti AFosB pelēm, veicinot D1 receptoru aktivācijas samazināšanos šajā smadzeņu reģionā (22, 23). Interesanti, ka mēs konstatējām arī ievērojamu kopējo CREB līmeņu samazināšanos ΔFosB pelēm, kas liecina par turpmāku samazinātu dopamīna signālu pārneses spēju, kas var būt sekundāra atgriezeniskajai saitei, ko izraisa ilgstošs pCREB (24) samazinājums. BDNF ekspresiju regulē pCREB, paaugstināts ar D1 aktivāciju, un tas ir svarīgs atalgojuma neiroplastiskuma starpnieks NAc (25, 26). Attiecīgi mēs atklājām ievērojamu BDNF proteīna samazināšanos ΔFosB pelēm NAc.
Visi vidēji smailie neironi NAc ekspresē DARPP-32 (27). Tās daudzie pakārtotie efektori padara to par svarīgu spēlētāju atalgojuma veidos (28), un tas ir saistīts ar narkomāniju un citiem traucējumiem, kas saistīti ar dopamīna sistēmu, tostarp afektīviem traucējumiem un šizofrēniju. (27, 29). Mēs atklājām DARPP-32 ekspresijas dziļu bazālo samazinājumu ΔFosB pelēm NAc. DARPP-32 ekspresiju regulē BDNF, un tāpēc samazināta ekspresija var būt tieši saistīta ar ADNF pelēm (27, 29, 30) konstatēto BDNF līmeņu samazināšanos. Pat mērenas DARPP-32 fosforilācijas stāvokļa izmaiņas var izraisīt būtiskas izmaiņas intracelulārajā signalizācijā NAc (27). Iepriekšējie pētījumi nav ziņojuši par DARPP-32 proteīna izmaiņām ΔFosB pelēm pēc 12-wk izņemšanas no doksiciklīna, kad tika veikts plašāks striatāla novērtējums (31), liecina, ka ΔFosB ietekme uz DARPP-32 var būt specifiska laika un reģiona ziņā.
Mēs pieņēmām, ka dopamīna signalizācijas rādītāju dramatiskie samazinājumi ΔFosB pelēm NAc varēja ietekmēt VTA dopamīna projekcijas neironus, lai gan ΔFosB nav pārmērīgi izteikts šajos neironos. Tāpēc mēs pētījām ar dopamīnu saistīto gēnu ekspresiju VTA, ieskaitot tirozīna hidroksilāzi un dopamīna transporteru. Tirozīna hidroksilāzes un dopamīna transportera līmenis ir pozitīvi korelēts ar dopamīna izlaidi. Bija vērojama tendence, ka ΔFosB pelēm ir samazināts tirozīna hidroksilāzes daudzums un nozīmīgs dopamīna transportera samazinājums, ievērojot dopamīna signalizācijas traucējumus NAc.. Tā kā šie dopamīna saistīto gēnu bazālie samazinājumi ΔFosB pelēm VTA, iespējams, atspoguļo atgriezenisko saiti no NAc ilgstošas ΔFosB pārmērīgas ekspresijas laikā, mēs pārbaudījām BDNF receptoru TrkB ekspresiju kā iespējamu NAc atgriezeniskās saites mehānismu VTA (32). Līdzīgi kā tirozīna hidroksilāzes un dopamīna transportera gadījumā, arī TrkB ekspresija parādīja tendenci, ka αFosB pelēm, kas nesasniedza nozīmīgumu, koriģējot daudzkārtējiem salīdzinājumiem, bija tendence samazināties. BDNF-TrkB kompleksu var retrogradi transportēt un darboties VTA ietvaros, lai ietekmētu vietējo gēnu ekspresiju un veicinātu šūnu augšanu un uzturēšanu (33). Turklāt presinaptiskās TrkB aktivācija NADN ietvaros var tieši stimulēt dopamīna neirotransmisiju (32), atbalstot dopamīna signalizācijas mazināšanos šajās pelēs.
Κ-opioīdu receptoru Dynorphin aktivizēšana regulē dopamīna signalizāciju un ir vēl viens mehānisms, ar kura palīdzību NAc sniedz atgriezenisko saiti VTA (34). Mēs atklājām, ka κ-opioīdu receptoru ekspresija VTA parādīja tendenci samazināt ΔFosB pelēm. Tā kā ir pierādīts, ka ΔFosB pārmērīga ekspresija samazina dinorfīna ekspresiju NAc (20), ΔFosB pelēm, iespējams, ir būtiski samazināts neto VTA κ-opioīdu aktivācija. Lai gan dinorfīna signalizācija parasti rada inhibējošu iedarbību uz dopamīna neironiem (35), žurkām, kurām ir pastiprināta ļaunprātīgu zāļu pašpārvalde, NAc ir pazemināts dinamorfīna līmenis, norādot uz lomu, kas saistīta ar pazeminātu dinorfīna signalizāciju, paaugstinot atalgojuma jutīgumu (36). , 37). Dinorfīna - κ-opioīdu sistēmas regulēšana ir saistīta ar narkotiku lietošanas iegūšanu un pastāvību, atbalstot opioīdu signalizācijas kritisko līdzsvaru dopamīna ceļu normalizēšanā (38).
Pamatojoties uz enerģiski blīvā HF uztura atalgojošo spēju, mēs pieņēmām, ka dopamīna un opioīdu atalgojuma signālu regulēšana ΔFosB pelēm ļautu šīm pelēm pastiprināt atalgojuma atbildes reakciju uz šādu diētu, tādējādi normalizējot atalgojuma sistēmu, aktivizējot hipotalāmu. -VTA-NAc shēma. Sešas nedēļas ilgas diētas iedarbības laikā starp ΔFosB un kontroles pelēm netika novērotas nekādas atšķirības, kas liecina, ka izmaiņas, kas konstatētas biokemisko un molekulārajos atalgojuma signalizācijas marķieros ΔFosB pelēm, nebija saistītas ar patērēto kaloriju atšķirībām. Kā paredzēts, pCREB, kopējais CREB, BDNF, DARPP-32 un κ-opioīdu receptoru līmeņos konstatētās bazālās atšķirības starp ΔFosB un kontroles pelēm tika vājinātas, iespējams, sakarā ar palielinātu dopamīna izlaidi ΔFosB pelēm HF (29, 39-41) .
Gan tirozīna hidroksilāzes, gan dopamīna transportera pārbaude VTA atklāja pārsteidzošas pretfilmas ΔFosB un kontroles peles reakcijas pēc HF.. Kontroles pelēm tika konstatēta tirozīna hidroksilāzes un dopamīna transportera ekspresijas samazināšanās, bet AFosB pelēm parādījās abu šo dopamīnu saistīto gēnu pastiprināta ekspresija. Interesanti, ka tirozīna hidroksilāzes ekspresija VTA tiek mainīta ar hronisku kokaīna vai metamfetamīna lietošanu (42-44), kas liecina, ka ΔFosB pelēm var būt dabiska HF atlīdzība par kontroles pelēm.
Lai noskaidrotu, kā potenciālais hipotalāma ievade VTA var pārraidīt signālus, kas atspoguļo enerģijas līdzsvaru, tika pētīta arī leptīna receptora un oreksīna receptoru-1 ekspresija. Cirkulējošais leptīna līmenis palielinās ar HF, un leptīns savukārt var darboties VTA, lai mainītu dopamīna signalizāciju (18, 45). VTA leptīna receptoru ekspresiju līdzīgi samazināja HF gan FosB, gan kontroles pelēm, ievērojot HF svara pieaugumu un uztura uzņemšanu. Augsts tauku saturs palielināja arī oreksīna receptoru-1 ekspresiju gan FosB, gan kontroles peles VTA. Oxxin aktivizē dopamīna neironus VTA, veicina VTA plastiskumu un palielina dopamīna līmeni NAc (46-48). Ir pierādīts, ka augsta tauku satura diēta palielina oreksīna ekspresiju pelēm, saskaņā ar mūsu novērojumiem (49, 50). Tādējādi palielināta oreksīna receptora ekspresija, kā arī izmaiņas leptīna signalizācijā VTA var veicināt gan uztura atlīdzību gan FosB, gan kontroles pelēm, atbalstot disociāciju starp ceļiem, kas nodod enerģijas bilances signālus un tos, kas tieši saistīti ar atlīdzību.
Lai pārbaudītu atalgojuma izņemšanas stresa izraisošās sekas, peles tika pārbaudītas atklātā lauka testā 24 stundas pēc HF izņemšanas. OsFosB pelēm bija lielāka jutība pret vēlamo diētu izņemšanas akūtu iedarbību, parādot paaugstinātu arousal darbību un fecal boli ražošanu jaunajā atklātajā arēnā, salīdzinot ar visām pārējām kontroles un uztura grupām. OsFosB pelēm šajā testā parādījās arī interesants uzvedības modelis, kas liecināja par jutīgumu un jutību pret stresu, un HF diēta sākotnēji samazināja izkārnījumu boli ražošanu, salīdzinot ar čau, un atcelšana atkal palielināja šo trauksmes reakciju. Šis novērotais atklātā lauka aktivitātes pieaugums nesaskanēja ar oreksīna ekspresijas izmaiņām, kas liecināja par saistību ar stresa izraisītu uzbudinājumu, kas nav tikai oreksīna izraisītas signalizācijas izmaiņu efekts. Kopumā šie dati apstiprina mūsu hipotēzi, ka ΔFosB pelēm būtu paaugstināta jutīguma jutīguma dēļ jutīgāka pret vēlamo diētu izņemšanas akūtu ietekmi..
Kā ilgstoša ΔFosB pārmērīga izpausme NAc noved pie šādām izmaiņām uzvedībā un atlīdzības signalizācijā? Mēs esam ierosinājuši VTA sakritības noteikšanas modeli, kurā mainīta atgriezeniskā saite no NAc un hipotalāmu signāliem par atalgojuma stāvokli, lai noteiktu dopamīna sistēmas regulējumu, kas var atbalstīt saikni starp atalgojuma ceļa disregulāciju un nosliece uz aptaukošanos (8 attēls). HF iedarbības laikā VTA ietekmē vairākus ieguldījumus, kas atspoguļo gan enerģijas bilanci, gan atalgojuma stāvokli. Leptīna un oreksīna signalizācijas palielināšanās, kā arī atgriezeniskā reakcija no NAc uz sānu hipotalāmu var ietekmēt šo oreksigēnu signālu reakciju uz HF ΔFosB pelēm (17, 18, 45, 47, 51-53). Augsta tauku satura diētas izraisītie paaugstinājumi BDNF var sniegt atgriezenisko saiti ar VTA, veicinot izmaiņas ar dopamīnu saistītā gēnu ekspresijā.
Skaitlis 8
Augsta tauku satura (HF) uzturs normalizē regulēto atalgojuma signalizāciju ΔFosB pelēm
Šie rezultāti raksturo atalgojuma jutīguma molekulāros marķierus un norāda, ka dopamīna sistēmas ilgstoša regulēšana var veicināt indivīda atkarību un aptaukošanos. Turklāt šie dati ir svarīgs solis, lai noteiktu iespējamos jaunos terapeitiskos mērķus aptaukošanās un citu traucējumu ārstēšanā un profilaksē, kas var būt atkarīgi no atlīdzības sistēmas. Nākotnē būs svarīgi izpētīt, kā šī sistēma reaģē uz HF uztura izņemšanu, kā arī izpētīt jebkādas dzimumu atšķirības jutīgumā pret atalgojumu un augstu tauku satura diētu.
Papildmateriāls
Supp. Metodes
Noklikšķiniet šeit, lai skatītu (61K, doc)
Pateicības
Autori vēlas pateikties Cathy Steffen par palīdzību dzīvnieku audzēšanā un pārvietošanā. Šo darbu atbalstīja Pensilvānijas Universitātes Diabēta centra (DK019525) dotācija un stipendijas no Nacionālā garīgās veselības institūta (R01 MH51399 un P50 MH66172) un Nacionālā narkotiku lietošanas institūta (R01 DA07359).
Zemsvītras piezīmes
Finanšu informācijas atklāšana: visi autori paziņo, ka viņiem nav biomedicīnas finanšu interešu vai potenciālu interešu konfliktu.
Atsauces
1. Wadden TA, Berkowitz RI, Womble LG, Sarwer DB, Phelan S, Cato RK, Hesson LA, Osei SY, Kaplan R, Stunkard AJ. Dzīvesveida modifikācijas un farmakoterapijas randomizēts pētījums aptaukošanās gadījumā. N Engl J Med. 2005; 353 (20): 2111 – 20. [PubMed]
2. Blendy JA, Strasser A, Walters CL, Perkins KA, Patterson F, Berkowitz R, Lerman C. Samazināta nikotīna atlīdzība aptaukošanās gadījumā: cilvēku un peles salīdzinājums. Psihofarmakoloģija (Berl) 2005
3. Franken IH, Muris P. Individuālās atalgojuma jutības atšķirības ir saistītas ar pārtikas tieksmi un relatīvo ķermeņa masu veselām sievietēm. Apetīte. 2005; 45 (2): 198 – 201. [PubMed]
4. Kelley AE, Berridge KC. Dabisko atlīdzību neirozinātne: saistība ar atkarību izraisošām zālēm. J Neurosci. 2002; 22 (9): 3306 – 11. [PubMed]
5. Cagniard B, Balsam PD, Brunner D, Zhuang X. Pārtikas atlīdzības saņemšanai pelēm ar hroniski paaugstinātu dopamīnu piemīt pastiprināta motivācija, bet ne mācīšanās. Neiropsihofarmakoloģija. 2006; 31 (7): 1362 – 70. [PubMed]
6. Liang NC, Hajnal A, Norgren R. Sham, kas baro kukurūzas eļļu, palielina žurkas dopamīnu. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2006; 291 (5): R1236 – 9. [PubMed]
7. Mendoza J, Angeles-Castellanos M, Escobar C. Iedarbība ar garšīgu maltīti izraisa pārtikas prognozēšanu un c-Fos izpausmi ar smadzenēm saistītās jomās. Neirozinātne. 2005; 133 (1): 293 – 303. [PubMed]
8. Schroeder BE, Binzak JM, Kelley AE. Parastais prefrontālās kortikālās aktivācijas profils pēc saskarsmes ar nikotīna vai šokolādes konteksta norādēm. Neirozinātne. 2001; 105 (3): 535 – 45. [PubMed]
9. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: ilgstoša molekulārais slēdzis atkarībai. Proc Natl Acad Sci US A. 2001, 98 (20): 11042 – 6. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
10. Teegarden SL, Bale TL. Uzturvērtības samazināšana rada paaugstinātu emocionalitāti un risku uztura recidīvam. Biol Psihiatrija. 2007; 61 (9): 1021 – 9. [PubMed]
11. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Nestler EJ, Taylor JR. dFosB Nucleus Accumbens regulē pastiprinātu instrumentālo uzvedību un motivāciju. Neiroloģijas žurnāls. 2006; 26 (36): 9196 – 9204. [PubMed]
12. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Transgeniskie dzīvnieki ar inducējamu, mērķtiecīgu gēnu ekspresiju smadzenēs. Mol Pharmacol. 1998; 54 (3): 495 – 503. [PubMed]
13. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Transkripcijas faktora deltaFosB ekspresija smadzenēs kontrolē jutību pret kokaīnu. Daba. 1999; 401 (6750): 272 – 6. [PubMed]
14. Bale TL, Dorsa DM. Seksu atšķirības un estrogēna ietekme uz oksitocīna receptoru ziņotāja ribonukleīnskābes ekspresiju ventromediālajā hipotalāmā. Endokrinoloģija. 1995; 136 (1): 27 – 32. [PubMed]
15. Avena NM, Long KA, Hoebel BG. Žurkām, kas ir atkarīgas no cukura, pēc abstinences uzlabojas cukura atbildes reakcija: pierādījums par cukura atņemšanu. Physiol Behav. 2005; 84 (3): 359 – 62. [PubMed]
16. Vai MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Nucleus accumbens mu-opioīdi regulē augsta tauku satura diētas uzņemšanu, aktivizējot izplatītu smadzeņu tīklu. J Neurosci. 2003; 23 (7): 2882 – 8. [PubMed]
17. Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Orexīna signalizācija vēdera apvalka zonā ir nepieciešama, lai palielinātu tauku apetīti, ko izraisa kodolskābes opioīdu stimulācija. J Neurosci. 2007; 27 (41): 11075 – 82. [PubMed]
18. Hommel JD, Trinko R, Sears RM, Georgescu D, Liu ZW, Gao XB, Thurmon JJ, Marinelli M, DiLeone RJ. Leptīna receptoru signalizācija vidus smadzeņu dopamīna neironos regulē barošanu. Neirons. 2006; 51 (6): 801 – 10. [PubMed]
19. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. DeltaFosB pārmērīga ekspresija stimulē šūnu tipa šūnu tipa specifisku pārmērīgu izpausmi. J Neurosci. 2003; 23 (6): 2488 – 93. [PubMed]
20. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB būtiska loma morfīna iedarbībā. Nat Neurosci. 2006; 9 (2): 205 – 11. [PubMed]
21. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, Greengard P. Kokaīna izraisīta dendrīta mugurkaula veidošanās D1 un D2 dopamīna receptoru saturošos vidējos smadzeņu neironus kodola accumbens. Proc Natl Acad Sci US A. 2006, 103 (9): 3399 – 404. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
22. Blendy JA, Maldonado R. Zāļu atkarības ģenētiskā analīze: cAMP atbildes elementa saistošā proteīna loma. J Mol Med. 1998; 76 (2): 104 – 10. [PubMed]
23. Nestler EJ. Narkomānijas molekulārie mehānismi. Neirofarmakoloģija. 2004; 47 1: 24 – 32. [PubMed]
24. Tanis KQ, Duman RS, Newton SS. CREB iesiešana un aktivitāte smadzenēs: reģionālā specifika un indukcija elektrokonvulsīvā lēkme. Biol Psihiatrija. 2007
25. Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplants Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Chromatin remodeling ir galvenais mehānisms, kas pamato kokaīna izraisīto plastitāti striatumā. Neirons. 2005; 48 (2): 303 – 14. [PubMed]
26. Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, Dileone RJ, Rios M, Self DW. Dinamiskā BDNF aktivitāte kodolkrāsās ar kokaīna lietošanu palielina sevis ievadīšanu un recidīvu. Nat Neurosci. 2007; 10 (8): 1029 – 37. [PubMed]
27. Svenningsson P, Nairn AC, Greengard P. DARPP-32 mediē vairāku ļaunprātīgas lietošanas narkotikas. Aaps J. 2005; 7 (2): E353 – 60. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
28. Palmer AA, Verbitsky M, Suresh R, Kamens HM, Reed CL, Li N, Burkhart-Kasch S, McKinnon CS, Belknap JK, Gilliam TC, Phillips TJ. Gēnu ekspresijas atšķirības pelēm, kas ir atšķirīgi izvēlētas jutībai pret metamfetamīnu. Mamm genoms. 2005; 16 (5): 291 – 305. [PubMed]
29. Bogush A, Pedrini S, Pelta-Heller J, Chan T, Yang Q, Mao Z, Sluzas E, Gieringer T, Ehrlich ME. AKT un CDK5 / p35 mediē smadzeņu radīto neirotrofisko faktoru DARPP-32 indukciju vidēja izmēra smadzeņu neironos in vitro. J Biol Chem. 2007; 282 (10): 7352 – 9. [PubMed]
30. Benavides DR, Bibb JA. Cdk5 loma narkotiku lietošanā un plastiskumā. Ann NY Acad Sci. 2004; 1025: 335 – 44. [PubMed]
31. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Hroniskās iedarbības ietekmi uz kokaīnu regulē neironālais proteīns Cdk5. Daba. 2001; 410 (6826): 376 – 80. [PubMed]
32. Blochl A, Sirrenberg C. Neurotropīni stimulē dopamīna izdalīšanos no žurku mezenefalālajiem neironiem caur Trk un p75Lntr receptoriem. J Biol Chem. 1996; 271 (35): 21100 – 7. [PubMed]
33. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. BDNF būtiska loma mezolimbiskā dopamīna ceļā sociālā uzbrukuma stress. Zinātne. 2006; 311 (5762): 864 – 8. [PubMed]
34. Nestler EJ, Carlezon WA., Jr Mesolimbiskā dopamīna atlīdzības shēma depresijā. Biol Psihiatrija. 2006; 59 (12): 1151 – 9. [PubMed]
35. Ford CP, Beckstead MJ, Williams JT. Kappa opioīdu inhibēšana somatodendritisko dopamīna inhibējošo postinaptisko strāvu gadījumā. J Neurophysiol. 2007; 97 (1): 883 – 91. [PubMed]
36. Nylander I, Vlaskovska M, Terenius L. Smadzeņu dinamorfa un enkefalīna sistēmas Fischer un Lewis žurkām: morfīna tolerances un izņemšanas sekas. Brain Res. 1995; 683 (1): 25 – 35. [PubMed]
37. Nylander I, Hyytia P, Forsander O, Terenius L. Atšķirības starp žurkām, kas izvēlas alkoholu (AA) un alkoholu izvairošas (ANA), prodynorfīna un proenkefalīna sistēmās. Alkohola klīns Exp Res. 1994; 18 (5): 1272 – 9. [PubMed]
38. Kreek MJ. Kokaīns, dopamīns un endogēnā opioīdu sistēma. J Addict Dis. 1996; 15 (4): 73 – 96. [PubMed]
39. Carlezon WA, Jr, Duman RS, Nestler EJ. CREB daudzās sejas. Tendences Neurosci. 2005; 28 (8): 436 – 45. [PubMed]
40. Dudman JT, Eaton ME, Rajadhyaksha A, Macias W, Taher M, Barczak A, Kameyama K, Huganir R, Konradi C. Dopamīna D1 receptori veicina CREB fosforilāciju, izmantojot NMDA receptoru fosforilāciju Ser897-NR1. J Neurochem. 2003; 87 (4): 922 – 34. [PubMed]
41. Self DW. Narkotiku regulēšana attiecībā uz neiroadaptācijām mezolimbiskā dopamīna sistēmā. Neirofarmakoloģija. 2004; 47 1: 242 – 55. [PubMed]
42. Beitner-Johnson D, Nestler EJ. Morfīns un kokaīns dopamīnerģiskajos smadzeņu atlīdzības reģionos rada kopīgas hroniskas darbības ar tirozīna hidroksilāzi. J Neurochem. 1991; 57 (1): 344 – 7. [PubMed]
43. Lu L, Grimm JW, Shaham Y, Hope BT. Molekulārās neuroadaptācijas akumbenēs un ventrālajā tegmentālajā apgabalā pirmo 90 dienu laikā, kad piespiedu atturēšanās no kokaīna pašregulācijas žurkām. J Neurochem. 2003; 85 (6): 1604 – 13. [PubMed]
44. Shepard JD, Chuang DT, Shaham Y, Morales M. Metamfetamīna pašregulācijas ietekme uz tirozīna hidroksilāzes un dopamīna transportera līmeni žurkām ar mezolimbisku un nigrostriatālu dopamīna ceļiem. Psihofarmakoloģija (Berl) 2006, 185 (4): 505 – 13. [PubMed]
45. Fulton S, Pissios P, Manchon RP, Stiles L, Frank L, Pothos EN, Maratos-Flier E, Flier JS. Leptīna regulēšana mezoakumulu dopamīna ceļā. Neirons. 2006; 51 (6): 811 – 22. [PubMed]
46. Narita M, Nagumo Y, Miyatake M, Ikegami D, Kurahashi K, Suzuki T. Proteīna kināzes C ietekme uz oreksīna izraisītu ekstracelulāro dopamīna līmeņa paaugstināšanos un tās atalgojošo efektu. Eur J Neurosci. 2007; 25 (5): 1537 – 45. [PubMed]
47. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Tieša oreksinergisko sistēmu iesaistīšana mesolimbiskā dopamīna ceļa aktivizēšanā un saistītā uzvedība, ko izraisa morfīns. J Neurosci. 2006; 26 (2): 398 – 405. [PubMed]
48. Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Fields HL, Bonci A. Orexin A VTA ir būtisks, lai izraisītu sinaptu plastiskumu un uzvedību attiecībā uz kokaīnu. Neirons. 2006; 49 (4): 589 – 601. [PubMed]
49. Park ES, Yi SJ, Kim JS, Lee HS, Lee IS, Seong JK, Jin HK, Yoon YS. Oreksīna-A un neiropeptīda Y izpausmes izmaiņas tukšā dūšā un ar augstu tauku saturu barotām žurkām. J Vet Sci. 2004; 5 (4): 295 – 302. [PubMed]
50. Wortley KE, Chang GQ, Davydova Z, Leibowitz SF. Peptīdi, kas regulē uztura uzņemšanu: hipertrigliceridēmijas laikā oreksīna gēna ekspresija palielinās. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1454 – 65. [PubMed]
51. Zheng H, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, Berthoud HR. Peptīdi, kas regulē uztura uzņemšanu: ēstgribas izraisošas acumbens manipulācijas aktivizē hipotalāma oreksīna neironus un inhibē POMC neironus. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1436 – 44. [PubMed]
52. Baldo BA, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Daniel RA, Landry CF, Kelley AE. Oreksīna / hipokretīna saturošu hipotalāmu neironu apakšpopulācijas aktivizēšana, izmantojot GABAA receptoru izraisītu kodola accumbens čaulas inhibīciju, bet ne ar jaunu vidi. Eur J Neurosci. 2004; 19 (2): 376 – 86. [PubMed]
53. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Sānu hipotalāma oreksīna neironu loma atalgojuma meklējumos. Daba. 2005; 437 (7058): 556 – 9. [PubMed]
;