DeltaFosB pārmērīga ekspresija kodolkrāsās imitē aizsargājošo atkarību fenotipu, bet ne vides bagātināšanas aizsargājošo depresijas fenotipu (2014).

Front Behav Neurosci. 2014; 8: 297.

Publicēts tiešsaistē Aug 29, 2014. doi:  10.3389 / fnbeh.2014.00297

PMCID: PMC4148937

Anotācija

Vides bagātināšana rada aizsargājošu atkarību un depresijas fenotipus žurkām. ΔFosB ir transkripcijas faktors, kas regulē atalgojumu smadzenēs un ko izraisa psiholoģisks stress, kā arī ļaunprātīgas lietošanas narkotikas. Tomēr ΔFosB loma vides bagātināšanas aizsardzības fenotipos nav labi izpētīta. Šeit mēs parādām, ka ΔFosB ir atšķirīgi regulēts žurkām, kas audzētas izolētā stāvoklī (IC), salīdzinot ar tām, kas ir bagātinātā stāvoklī (EK), reaģējot uz ierobežojošu stresu vai kokaīnu.

Hroniska stresa vai hroniskas kokaīna terapijas rezultātā katrs paaugstina ΔFosB proteīna līmeni IC žurku kodolos (NAc), bet ne no EK žurkām, jo ​​EK stāvoklis jau ir palielinājies, ko novēro EK apstākļos..

Vīrusu mediēta ΔFosB pārmērīga ekspresija pāru novietoto žurku NAc apvalkā (ti, neatkarīgi no vides bagātināšanas / izolācijas) palielina operantu reakciju uz saharozi, ja to izraisa bads, bet samazinās atbildes reakcija uz satiesiem dzīvniekiem. Turklāt ΔFosB pārmērīga ekspresija samazina kokaīna pašpārvaldi, uzlabo kokaīna izzušanu un samazina kokaīna izraisītu intravenozas kokaīna pašregulācijas atjaunošanu; visi uzvedības konstatējumi atbilst bagātināšanas fenotipam.

Turpretī ΔFosB pārmērīga ekspresija nemainīja pāru novietoto žurku reakcijas vairākos ar trauksmi un depresiju saistītus uzvedības testos.

Tādējādi ΔFosB ir NAc apvalks atdarina aizsargājošo fenotipu, bet ne vides bagātināšanas aizsardzības depresijas fenotipu.

atslēgvārdi: [pieaugums]FosB, vides bagātināšana, depresija, kokaīna pašpārvalde, adeno saistīts vīruss (AAV), pārmērīga ekspresija

Ievads

Dzīves pieredze, īpaši dzīves sākumposmā, būtiski ietekmē dzīvnieku uzvedību visā dzīves laikā. Videi ir būtiska loma cilvēku neaizsargātībā un izturībā pret garīgiem traucējumiem (Elisei et al., 2013; Akdeniz et al. 2014; Kato un Iwamoto, 2014; van Winkel et al. 2014). Grauzēju modeļos tika ziņots, ka dzīvojot bagātinātā vidē no atšķiršanas līdz jauniem pieaugušajiem, kas rada aizsargājošu atkarību un depresijas fenotipus. (Green et al., 2002, 2003, 2010; Laviola et al., 2008; Solinas et al. 2008, 2009; El Rawas et al. 2009; Thiel et al. 2009, 2010). Šajā paradigmā dzīvniekiem tiek piešķirts vai nu bagātināts stāvoklis (EK), kurā dzīvnieki tiek grupēti grupā, un viņiem ir ikdienas piekļuve jauniem objektiem, vai izolēts stāvoklis (IC), kurā dzīvnieki tiek izmitināti bez novitātes vai sociāla kontakta. Dzīvnieki, kas audzēti bagātinātā stāvoklī, kas ietver sociālo kontaktu, vingrojumus un novitāti, intravenozas narkotiku pašpārvaldes paradigmā uzrāda mazāku nostiprināšanos un kokaīna vai amfetamīna meklēšanu (Green et al., 2002, 2010). Papildus atkarības fenotipam šāds bagātināšanas risks rada depresijas līdzīgu efektu depresijas dzīvnieku modeļos. (Green et al., 2010; Jha et al., 2011). Konkrētāk, bagātinātajiem dzīvniekiem saharozes preferenču testā ir samazinājusies anhedonijas veida uzvedība, sociālā mijiedarbības testā ir mazāk sociālo izņemšanu, un piespiedu peldēšanas testā (FST) ir mazāk kustību. Neskatoties uz bagātināšanas antivielām un antidepresantiem līdzīgiem efektiem, šie vides bagātināšanas aizsargfenotipu pamatā esošie mehānismi joprojām ir nepilnīgi saprotami, lai gan mūsu iepriekšējie pētījumi ir saistīti ar transkripcijas faktora, CREB, aktivitātes samazināšanos kodola accumbens (NAc ), veicot dažu vides bagātināšanas seku starpniecību (Green et al., 2010; Larson et al., 2011). Tādējādi šo diferenciālo audzēšanas pētījumu mērķis ir izmantot pamatzinātnes pieeju, lai identificētu elastības molekulāros mehānismus, kurus vēlāk var tulkot klīnikā. Šī pieeja ir līdzvērtīga vides aizsardzības sistēmai, piemēram, selektīvai selekcijai (McBride et al., 2014).

Šeit mēs koncentrējamies uz citu transkripcijas faktoru ΔFosB, ko NAc izraisa acīmredzami ar zināmām stresa formām vai gandrīz visām ļaunprātīgas izmantošanas zālēm, ieskaitot kokaīnu, morfīnu, alkoholu, nikotīnu un amfetamīnu (Hope et al., 1992; Kelz un Nestler, 2000; Perrotti et al. 2004, 2008). Kā transkripcijas faktors ΔFosB dimerizējas ar Jun ģimenes olbaltumvielām, galvenokārt JunD, lai izveidotu aktīvu AP-1 kompleksu, kas saistās ar AP-1 atbildes elementu, lai uzlabotu vai nomāktu tās mērķa gēnu transkripciju (Nestler, 2001), lai gan jaunie pētījumi liecina, ka ΔFosB var darboties arī kā homodimērs (Wang et al., 2012). ΔFosB olbaltumviela ir saīsināta splice dispersijas dispersija FosB gēns, kas izraisa ΔFosB proteīna trūkumu divos C-terminālos degronu domēnos, novēršot ΔFosB proteīnu no straujas degradācijas, kas novērota ar FosB un visiem pārējiem Fos ģimenes proteīniem. Tā kā ΔFosB ir ārkārtīgi stabils NAc, ΔFosB darbojas ļoti atšķirīgi, reaģējot uz akūtajiem un hroniskajiem stimuliem, salīdzinot ar citiem Fos proteīniem. Ar atkārtotu iedarbību uz ļaunprātīgu izmantošanu vai stresu ΔFosB proteīns pakāpeniski uzkrājas un saglabājas vairākas dienas līdz nedēļām, kamēr FosB un citi Fos proteīni tiek ierosināti tikai īsu laiku (stundas) un pēc turpmākās iedarbības attīstās novājināta indukcija (Nestler et al., 2001; Nestler, 2008).

ΔFosB nozīme ir ne tikai tā, ka to izraisa ļaunprātīgas izmantošanas un stresa izraisītas zāles, bet ir pierādīts, ka ΔFosB manipulācijas smadzenēs ietekmē dzīvnieku uzvedību. Selektīva ΔFosB inducēšana dinorfīna vidējā smadzeņu nervos pieaugušajiem pelēm palielina lokomotorisko jutību, reaģējot uz akūtu un atkārtotu kokaīnu, kā arī atalgojošu reakciju uz kokaīnu nosacītās vietas preferenču paradigmā un stiprināšanu pašpārvaldes paradigmā (Kelz et al., 1999; Kelz un Nestler, 2000; Colby et al. 2003).

Lai gan aizsargājošās atkarības un depresijas fenotipi ir detalizēti aprakstīti videi bagātinātām žurkām, nav iespējams pilnībā novērtēt ΔFosB lomu šo aizsardzības fenotipu mediācijā. Iepriekš veiktie vides bagātināšanas pētījumi parādīja, ka, salīdzinot ar standarta vidi (SE), bagātināta vide palielina bazālos ΔFosB līmeņus gan D1, gan D2 vidējā spiny neironos striatālajos reģionos pelēm. (Solinas et al., 2009; Lobo et al. 2013). Turklāt bagātinātajām Wistar žurkām NAc un prefrontālā garozā parādījās paaugstinātas ΔFosB pozitīvās šūnas, salīdzinot ar SE žurkām, kas liecina par ΔFosB iespējamo lomu aizsargājošā fenotipā pret nikotīnu. (Venebra-Muñoz et al., 2014). Turklāt ΔFosB pārmērīga ekspresija visā peles strijā palielina ikdienas riteņu kustību, kas var būt līdzīga palielinātajai žurku aktivitātei bagātinātā vidē. (Werme et al., 2002).

Šajā pētījumā mēs pieņēmām, ka: (1) vides bagātināšana palielinātu bazālo ΔFosB līmeņu uzkrāšanos NAc; un (2) šī ΔFosB uzkrāšanās veicinātu vides bagātināšanas aizsargājošo ietekmi.

materiāli un metodes

Dzīvnieki

Vides bagātināšanai vīrieši Sprague-Dawley žurkas (Harlan, Houston, TX, USA) pēc nejaušības dienas 21 līdz 51 tika nejauši izvēlēti EK vai IC korpusā. EK žurkas tika izmitinātas grupā (20 vienā būrī) lielā metāla būrī (70 × 70 × 70 cm) ar vairākiem cietiem plastmasas priekšmetiem (bērnu rotaļlietas, plastmasas konteineri, PVC caurules utt.). Šie objekti tika aizstāti ar jauniem objektiem un katru dienu tika pārkārtoti jaunā konfigurācijā. IC žurkas atsevišķi tika ievietotas standarta polikarbonāta būros. Katrā eksperimentā žurkas palika šajos apstākļos, un visi uzvedības testi un bioķīmiskie testi sākās pēc 51 dienas (ti, vismaz 30 dienas bagātināšanas / izolācijas dienas). AFosB pārmērīgai ekspresijai tēviņi Sprague-Dawley žurkas (Harlan, Houston, TX, USA) tika iegūti pēc izmēra 225-250 g un pārī novietoti standarta polikarbonāta būros, pirms tos stereotaktiski injicēja ar adeno saistītu vīrusu vektoru (AAV2) controlFosB pārmērīga ekspresija ar zaļo fluorescējošo proteīnu (GFP) vai tikai GFP kā kontrole (skatīt tālāk). Standarta žurku govs un ūdens bija brīvi pieejami visām žurkām, izņemot uzvedības testu un pārtikas regulēšanas laikā. Visas žurkas tika uzturētas kontrolētā vidē (temperatūra, 22 ° C, relatīvais mitrums, 50% un 12 h gaismas / tumšais cikls, gaismas 600 h) laboratorijas dzīvnieku aprūpes (AAALAC) apstiprinātās kolonijas novērtēšanas un akreditācijas asociācijā . Visi eksperimenti atbilst NIH rokasgrāmatai par laboratorijas dzīvnieku aprūpi un lietošanu un Teksasas Universitātes Medicīnas filiāles institucionālo dzīvnieku aprūpes un lietošanas komiteju.

Vides bagātināšana ir kombinēta manipulācija, kas sastāv no novitātes, sociālā kontakta un vingrinājumiem. Pārī mājokļi nodrošina sociālo kontaktu un tādējādi pārstāv EK (skat. NIH rokasgrāmatu). Tādējādi piemērota kontroles grupa stāvoklim ar novitāti, sociālo kontaktu un vingrojumu būtu grupa bez novitātes, sociāla kontakta vai vingrinājuma, IC nosacījums. IC žurkām ir mazākas hroniskas stresa pazīmes nekā EK žurkām. Konkrētāk, EK žurkām ir palielināts virsnieru skaits (Mlynarik et al., 2004), blāvi CORT atbildes (Stairs et al., \ t 2011), novājināta tūlītēja agrīna gēnu indukcija (Zhang et al., manuskripts sagatavošanā) un AFosB uzkrāšanās (Solinas et al., 2009; Lobo et al. 2013), visas hroniskas stresa pazīmes (Crofton et al., pārskatā).

Psiholoģiskais stress

Bagātināti un izolēti žurki tika ievietoti vienreizējās lietošanas mīkstos plastmasas grauzēju ierobežotājos (DecapiCone®, Braintree Scientific Inc., MA, ASV) 60 min vai nu 1 dienā (akūta), vai 9 dienās (atkārtoti). Īsa ekspozīcijas mRNS testiem 30 žurkām (5 žurkām vienā grupā) tika atdalīts 30 min pēc pēdējās ierobežošanas stresa sākuma, žurku smadzenes tika izdalītas un NAc tika sadalīts mRNS analīzei. Imūnhistoķīmijas gadījumā 12 žurkas tika perfūzētas ar sāls šķīdumu un 4% paraformaldehīdu, smadzenes ekstrahētas, pēc fiksētas 4% paraformaldehīdā un uzglabātas 20% glicerīnā 1xPBS pie 4 ° C. Žurku smadzenes tika sagrieztas pie 40 μm ar sasalšanas mikrotomu. Smadzenes tika iegūtas 24 h pēc galīgā stresa, lai ļautu pilna garuma FosB proteīnam noārdīties (Perrotti et al., 2008).

Kokaīna intravenoza pašapkalpošanās ar vides bagātināšanu

Intravenoza katetra implantācija

Žurkas tika anestezētas, izmantojot ketamīnu (100 mg / kg IP) un ksilazīnu (10 mg / kg IP), un silastiskais katetrs tika ievietots un nostiprināts jugulārā vēnā, izkāpjot no ādas uz dzīvnieka muguras. Katru dienu katetri tika infūzēti ar 0.1 ml sterila sāls šķīduma, kas satur heparīnu (30.0 U / ml), penicilīna G kālija (250,000 U / ml) un streptokināzi (8000 SV / ml), lai novērstu infekciju un saglabātu katetra caurlaidību visa ilguma laikā. eksperimentiem.

Kokaīna pašpārvalde ar vides bagātināšanu

Divdesmit bagātināti un 20 izolēti žurki tika ievietoti operācijas kamerās 30 × 24 × 21 cm (Med-Associates, St. Albans, VT) un ļāva nospiest sviru kokaīna infūzijām (0.5 mg / kg / infūzija, NIDA zāļu piegāde, Research Triangle Institute, NC, USA) vai fizioloģiskais šķīdums ar fiksētu attiecību 1 (FR1) 2 h dienā, kopā 14 dienas. Lai saglabātu līdzīgu kokaīna devu starp EK un IC grupām, bija maksimāli 30 infūzijas vienā sesijā. Audu apstrādes jauda bija ierobežota ar 30 paraugiem, tāpēc zemākās atbildes žurkas no katras grupas netika apstrādātas, atstājot NN no 8 kokaīnam un 7 sāls grupām. Tādējādi EK / IC atšķirības starp EK un IC žurkām nav bijušas atšķirīgas. Žurku smadzenes tika izdalītas 3 h pēc pēdējās pašregulācijas sesijas sākuma un NAc tika sadalīts mRNS un proteīnu analīzei. Viena NAc puse tika izmantota Western blot, otra puse tika izmantota qPCR.

Nejauša kokaīna lietošana ar vides bagātināšanu

Tiešai salīdzināšanai ar iepriekš publicēto literatūru (Hope et al., 1994; Chen et al. 1995), EK (N = 12) un IC žurkām (N 12) tika injicēts ar sāls šķīdumu vai 20 mg / kg kokaīna intraperitoneāli (IP) 1 dienā (akūta) vai 9 dienās (atkārtoti). Viens EK paraugs tika zaudēts apstrādes laikā. Akūta grupa saņēma sāls šķīdumu injekcijas 8 dienām un vienu kokaīna injekciju 9 dienā, lai visas žurkas saņēma tādu pašu injekciju skaitu. Pēc pēdējās injekcijas smadzenes tika izdalītas 30 min, un NAc tika atdalīta mRNS analīzei.

MRNS kvantitatīva noteikšana, izmantojot qPCR

RNS tika ekstrahēts, homogenizējot RNA STAT-60 (Teltest, Friendswood, TX), atdalot RNS no DNS un proteīna, izmantojot hloroformu, un nogulsnējot kopējo RNS ar izopropanolu. Piesārņojošā DNS tika noņemta (TURBO DNS-Free, Life Technologies, CA, USA) un attīrītas RNS 5 ug tika atgriezta cDNS (SuperScript III First Strand Synthesis: Invitrogen katalogs # 18080051). ΔFosB mRNS tika kvantitatīvi noteikts, izmantojot kvantitatīvu reālā laika PCR (SYBR Green: Applied Biosystems, Foster City, CA) uz Applied Biosystems 7500 ātrā termociklatora ar primeriem, kas paredzēti, lai noteiktu tikai ΔFosB (uz priekšu: AGGCAGAGCTGGAGTCGGAGAT; reverse: GCCGAGGACTTGAACTTCACTCG) un normalizēti uz primeriem, kas izstrādāti lai atklātu žurkas GAPDH (uz priekšu: AACGACCCCTTCATTGAC; reverse: TCCACGACATACTCAGCAC). Pirms eksperimentiem visi primeri tika apstiprināti un analizēti specifiskumam un linearitātei (Alibhai et al., 2007).

Western blot

NAc labā puse no kokaīna vai sālsūdens pašregulējošām EC un IC žurkām tika homogenizēta buferšķīdumā, kas satur saharozi, Hepes buferšķīdumu, nātrija fluorīdu, 10% SDS un proteāzes un fosfatāzes inhibitorus (Sigma-Aldrich: P-8340, P -2850, P-5726). Olbaltumvielu koncentrāciju novērtēja, izmantojot Pierce BCA Protein Assay Kit (Thermo Scientific, IL, ASV). Tā kā olbaltumvielas, kas iegūtas no viena žurka, nebija pietiekamas analīzei, 2 paraugi no vienas grupas tika apvienoti, veidojot 4 paraugus katrai grupai. Olbaltumvielu paraugi tika denaturēti 95 ° temperatūrā 5 min, un darbojās ar 10-20% poliakrilamīda gradientgelu (TGX kritērijs, Bio-Rad Laboratories, CA, ASV), pēc tam pārvietoti uz polivinilidēnfluorīda (PVDF) membrānu (Millipore, MA, ASV ). Membrāna tika bloķēta ar blotēšanas bloka blokatoru (beztauku sauso pienu), inkubējot ar ΔFosB primāro antivielu (trušu, 1: 1000, #2251, šūnu signālierīces tehnoloģiju, MA, ASV) un β-aktīna primāro antivielu (pele, 1: 1000 , Cell Signaling Technology, MA, ASV), mazgā ar TBST un pēc tam inkubē ar fluorescējošām sekundārajām antivielām (ēzeļu anti-trušiem (780 nm), ēzeļu anti-pele (680 nm), 1: 15000, Li-Cor Biosciences, NE, ASV). Pēc tam tika attēloti Western bloti (Odyssey, Li-Cor Biosciences, NE, USA) un proteīna līmeņi ar Odyssey programmatūru.

Imūnhistoķīmija

Attēls Attēls11 (N = 3), šūnas, kas satur ΔFosB, tika vizualizētas un saskaitītas ar ΔFosB imūnhistoķīmisko marķējumu NAc šķēlītēs, kas iekrāsotas ar DAB (DAB peroksidāzes substrāta komplekts, Vector Laboratories, CA, ASV). Smadzenes tika iegūtas, nostiprinātas, nokrāsotas un sadalītas 40 μm šķēlītēs, kas satur NAc uz slīdoša sasalšanas mikrotoma (Leica Biosystems, IL, USA). Šķēles palika peldošas un pirms skalošanas ar 1% normālu kazu serumu (Jackson ImmunoResearch, PA, ASV) ar 3% tritonu un avidīnu D (Vector Laboratories, CA, USA) pirms tam tika izskalotas ar 0.3xPBS. NAc šķēles inkubēja ar FosB primāro antivielu nakti (1: 1000, Santa Cruz Biotechnology, Dallas, TX, USA) ar 3% kazas serumu, 0.3% tritonu, 1xPBS un biotīna šķīdumu (Vector Laboratories, CA, USA). Lai gan šī antiviela atpazīst gan FosB, gan AFosB, iepriekšējie Western blot pētījumi parādīja, ka pēc 24 h pēc stimulācijas lielākā daļa imūnhistoķīmisko signālu sastāv no ΔFosB, jo FosB degradējas labi pirms 24 h (Perrotti et al., 2008). Pēc mazgāšanas šķēles inkubēja ar biotinilētu kazu anti-trušu sekundāro antivielu IgG (Vector Laboratories, CA, USA), kazu serumu un 1xPBS. Tad šķēles inkubēja ar avidīna-biotīna kompleksa (ABC) peroksidāzes traipu 15 min (Thermo Scientific, IL, ASV). Visbeidzot, šķēles tika piestiprinātas, dehidrētas, izmantojot etanolu un CitriSolv (Fischer Scientific, MA, ASV) un pārklātas ar DPX (Fisher Scientific). Šūnu skaitīšanai no Bregma + 1.80 paraugi tika ņemti no katriem dzīvniekiem. Kopējais ΔFosB imūnsistēmas šūnu skaits tika skaitīts no četrām NAc sekcijām no katras žurkas serdes un čaumalas.

Skaitlis 1  

stress un [pieaugums]FosB EK un IC žurkām. (A – D) Reprezentatīvs ΔFosB imūnhistoķīmijas krāsojums NAC apvalkā un IC kodols (A un B) un EK (C un D) žurkām ar (B un D) un bezA un C) atkārtots stress (N = 3). (E) Kvantitatīva noteikšana ...

Adeno saistītā vīrusa pārprodukcija [pieaugums]FosB

Uz AAV2 balstīta vektora, kas ekspresē AFosB un humanizētu renila GFP (hrGFP; Winstanley et al., 2007, 2009a,b) vai hrGFP kontroles vektors (N = 10 katrs) tika ievadīts divpusēji žurkas NAc. Tā kā nav IC cilvēku, IC žurku vietā tika izmantotas pāra novietotas žurkas, lai šajā pētījumā palielinātu atbilstību zinātnieku aprindām, demonstrējot ΔFosB ietekmi. neatkarīgs EK / IC paradigma. Kā kontrols tika izmantots AAV, kas ekspresē hrGFP, bet neizsaka ΔFosB. ΔFosB izpausme in vivo tika apstiprināta ar imunofluorescences krāsošanu ar FosB primāro antivielu (1: 200, Rabbit, Cell Signaling Technology, MA, ASV). AAV vektori tika ievadīti NAc apvalkā divpusēji (1 μl / sānu virs 10 min), izmantojot koordinātas (AP = 1.7, L = 2.0, D = −6.5). Uzvedības testi sākās 3 nedēļas pēc stereotaksiskās operācijas. Precīza izvietošana tika noteikta imūnhistoķīmiski pēc uzvedības testēšanas.

Saharozes neofobija

ΔFosB pārmērīgas ekspresijas žurkas (N = 10) un kontroles žurkām (N = 8) tika apstrādātas 1 nedēļā pirms uzvedības testu sākšanas. Lai pārbaudītu trauksmi līdzīgu uzvedību, žurkām tika novērtēta neofobija ar jaunu garšu (saharozi). Žurkas tika atdalītas atsevišķos sprostos, un ūdens tika noņemts pie 1600 h. Standarta žurku ūdens pudeles tika piepildītas ar 1% w / v saharozes šķīdumu žurku normālajā "krāna" ūdenī un nosvērta pirms ievietošanas uz katra būrī 1800 h. Pēc 30 min pudeles tika noņemtas un atkārtoti nosvērtas, un tika aprēķināta saharozes pudeļu svara atšķirība pirms un pēc testa. Pēc tam uz saudzēm aizvietoja saharozi papildu 2 dienām, lai žurkām iepazītos ar saharozes aromātu pirms saharozes preferences testa.

Paaugstināts plus labirints

Vēl viens trauksmes uzvedības tests, paaugstināts labirints (EPM), tika pārbaudīts 2 dienas pēc saharozes neofobijas. EPM mēra vektoru modificētu izpētes uzvedību jaunā un trauksmes rašanās vidē (Green et al., 2008). Divas aizvērtas rokas un divas atvērtas rokas (Med Associates Inc., VT, ASV), kas mērīja 12 × 50 cm, bija 75 cm virs grīdas un tām bija fotobērti pie katras rokas ieejas. Laiku, kas pavadīts atklātās rokās, 5 min tika novērots, izmantojot fotobāzes pārtraukumus, izmantojot Med-PC programmatūru.

Aukstā stresa izraisīta defekācija

Dienā pēc EPM tika izmantots trešais trauksmes tests: defekācija, reaģējot uz viegli saspringtu vidi (aukstumu). Polikarbonāta peles sprosti (33 × 17 × 13 cm) tika iepriekš atdzesēti uz ledus 10 min. Žurkām 30 min tika ievietotas sprostos uz ledus un katru 5 min.

Sociālais kontakts

Nākamajā dienā, izmantojot sociālo mijiedarbības testu, tika mērīta depresija līdzīga uzvedība. Pirms testēšanas žurkas tika atdalītas 24 h. Testa dienā žurkas tika ievietotas jaunā vidē (plastmasas konteiners, 45 × 40 × 45 cm) ar to būrīšiem un uzvedība tika ierakstīta video 30 min. Laika periodu, kurā žurku pāru veica viens otru, izmērīja pētnieks akli pret žurku stāvokli.

Saharozes izvēle

Pēc sociālā kontakta kā anhedonijas paraugu tika izmantots saharozes preferenču tests. Pāra novietotās žurkas tika atdalītas 1600 h laikā ar pārtiku, bet 2 h nav atļauts piekļūt ūdenim. Pēc 1800 h uz katras būros tika ievietotas divas iepriekš nosvērtas ūdens pudeles, no kurām viena bija ūdens, otrā - 1% saharozes šķīdums ūdenī. Ūdens pudeles tika novietotas normālā stāvoklī, kamēr saharoze tika novietota aptuveni 10 cm attālumā. Pudeles tika izņemtas un atkārtoti nosvērtas pēc 15 min.

Locomotoriskā darbība

Trīs dienas pēc saharozes preferences lokomotorās aktivitātes tika novērtētas normālos gaismas apstākļos, ievietojot žurkas skaidrā Plexiglas kamerā (40 × 40 × 40 cm) ar plānu pakaišu slāni, ko ieskauj divas 4 × 4 fotomateriālu matricas, viena 4 cm virs zemi un vienu 16 cm virs zemes, lai reģistrētu horizontālo iespaidu un vertikālo (audzēšanas) aktivitāti. Fotoattēlu pārtraukumus 2 h pārraudzīja ar modificētu atklātā lauka darbības sistēmu (San Diego Instruments, CA, ASV).

Piespiedu peldēšanas tests

Pēdējais spontānais uzvedības tests bija FST, modelis, kas bija jutīgs pret antidepresantiem. Žurkas ievietoja plexiglas cilindrā, kas piepildīts ar aptuveni 14 L istabas temperatūru (24 ± 0.5 °) ūdeni 15 min. Sesijā 1, un 5 min sesijā 2 nākamajā dienā. Žurkas žāvēja un ievietoja atpakaļ savos mājas būros. Peldēšanas aktivitāte tika ierakstīta video formātā, un latentiskais laiks pirmajam neuzturības periodam (1 s) un kopējais laiks, kas bija nekustīgs, tika noteikts 2 sesijai, ko pētnieks, kurš bija apžilbinājis apstākļus.

Saharozes operants reaģē

Kontroles AAV žurkas un ΔFosB pārmērīgi ekspresējošās žurkas tika regulētas ar 85% no brīvā barošanas svara 7 dienās. Visas žurkas tika apmācītas, lai uzspiestu saharozes granulas (Bio-Serv, NJ, ASV), izmantojot FR1 pastiprināšanas grafiku 15 min sesijām 5 secīgās dienās. Pēc tam žurku 3 dienām tika nodrošināta brīva piekļuve pārtikai un atkal ļāva nospiest saharozes granulas uz FR1 grafika 15 min, šoreiz pie 100% bez barības masas.

Kokaīna pašpārvalde

iegūšana

Vienu nedēļu pēc katetra operācijas (kā aprakstīts iepriekš) visas žurkas (7 kontroles žurkas un 10 ΔFosB pārmērīgas ekspresijas žurkas, viena kontroles žurka tika zaudēta no katetra operācijas) tika ievietotas operācijas kamerās 30 × 24 × 21 cm (Med-Associates, St. Albans, VT) un ļāva sev ievadīt 0.2 mg / kg / infūzijas vienības kokaīna devu 2 h sesijā 4 dienām; tad 0.5 mg / kg / infūzija 3 dienām, izmantojot FR1 grafiku. Katra infūzija tika ievadīta intravenozi 0.01 ml tilpumā 5.8 s. Infūziju signalizēja divu gaismas signālu apgaismojums 20 s, kas signalizēja par taimauta periodu, kura laikā nevarēja veikt turpmākas infūzijas.

Dzēšana

Tā kā hroniska kokaīna iedarbība, iespējams, izraisītu ΔFosB uzkrāšanos kontroles žurkām, kas radītu žurkām abos vektora apstākļos lielus AFosB līmeņus smadzenēs, žurkas tika ierobežotas viņu mājas būrī 4 dienām bez sevis ievadīšanas, lai ļautu AFosB proteīna līmenis samazinās kontroles vektora žurkām. Pēc 4 dienu abstinences žurkas tika ievietotas operantajā kamerā un ļāva pašam ievadīt sāls šķīdumu kokaīna vietā, izmantojot FR1 grafiku 1 h sesijām 3 secīgās dienās.

Fiksēta attiecība pret devu

Katram žurka (kontrolējamā un ΔFosB pārmērīga ekspresija) tika atļauts ievadīt 0.00325, 0.0075, 0.015, 0.03, 0.06, 0.125, 0.25, 0.5 mg / kg / infūzijas kokaīnu augošā secībā pēc FR1 grafika katru dienu 5 secīgās dienās. Žurkas ievada katru kokaīna devu 30 min.

Kokaīna izraisīta atjaunošana

Žurām tika veikta atkārtotas sesijas atjaunošanas procedūra. Žurkas saņēma 0.5 mg / kg / infūzijas ar FR1 grafiku 60 min, kam sekoja 3 h izzušana (ar iespējamiem kokaīna rādītājiem). Pēc tam viņi saņēma IP injekciju (Green et al., 2010) no kokaīna, kas satur vienu no piecām devām (0, 2.5, 5, 10 vai 20 mg / kg) katram žurka nejaušā secībā 5 atjaunošanas sesijās. Pēdējā sesijas 3 h fāze bija atjaunošana, reaģējot uz kokaīnu, bet vēl bez kokaīna infūzijām. Pēc katras kokaīna izraisītās atjaunošanas sesijas žurkas saņēma 2 dienas, kad bija liela devas (0.5 mg / kg / infūzija) kokaīna lietošana, lietojot FR1 grafiku 2 h, lai saglabātu augstu reakcijas ātrumu katrā sesijā. Kokaīna pašpārvaldes procesa laikā dažu žurku katetri pakāpeniski zaudēja atklātību; tāpēc šajā analīzē tika izmantoti 6 kontroles žurku un 7 ΔFosB pārmērīgi ekspresējošo žurku dati.

Statistiskā analīze

Lai salīdzinātu četras ārstēšanas grupas, tika veiktas divvirzienu dispersijas analīzes (ANOVA) un divvirzienu atkārtoti pasākumi ANOVA, un, lai salīdzinātu nosacījumu atšķirības, tika izmantoti plānotie salīdzinājumi. Tika analizēta nozīme tikai starp diviem apstākļiem, izmantojot studentu t-pārbaude. Visi t- testu dati nokārtoja Shapiro-Wilk testu par normalitāti. Visi dati ir izteikti kā vidējais ± SEM. Statistiskā nozīme tika noteikta p <0.05. Visas viena eksperimenta bagātinātās žurkas tika ievietotas vienā būrī, bet tika apstrādātas kā atsevišķi subjekti, sniedzot norādes par iespējamo pseidoreplikāciju.

rezultāti

EK žurkām ir augstāks bazālais līmenis [pieaugums]FosB NAc nekā IC žurkām

Salīdzinot ar IC žurkām, EK žurkām ir ievērojami lielāks AFosB pozitīvo šūnu skaits abos NAc kodolos (t(4) = −3.31, p <0.05) un apvalks (t(4) = −6.84, p <0.05) (att 1A, C, E, F), liecina, ka ΔFosB bazālais tonis ir lielāks EK žurkām, salīdzinot ar IC žurkām. Turklāt Western blot rezultāti liecināja par spēcīgu tendenci attiecībā uz EK sāļšām žurkām ar augstāku AFosB proteīna līmeni NAc, salīdzinot ar IC sāls žurkām (t(6) = −2.03, p = 0.089; Attēls Attēls2A) 2A), izmantojot divkāršu testu. Tomēr, ņemot vērā pieaugošo izteiksmi skaitļos 1A – F un citiem dokumentiem (Solinas et al., \ t 2009), mēs esam pārliecināti par to. Western blot konstatējumi arī apstiprina, ka praktiski visa imūnhistoķīmijā konstatētā FosB līdzīgā imūnoreaktivitāte bija ΔFosB, nevis FosB, kas nebija konstatējama 24 h laikā.

Skaitlis 2  

Kokaīns un [pieaugums]FosB EK un IC žurkām. (A – B) Vidējais ΔFosB proteīns (A) un mRNS (B) līmenis (± SEM) NAc pēc sālsūdens sāls vai kokainas pašregulācijas 14 dienas IC un EC žurkām (\ tN = 7 – 8). Sarkanās joslas panelī a apzīmē ...

[pieaugums]FosB ir atšķirīgi inducēts EK un IC žurkām ar stresu

Pastāv ievērojama ietekme uz atkārtotu ierobežošanas stresu abos apvalkos (F(1, 8) = 16.6, P <0.005) un kodols (F(1, 8) = 7.9, P <0.05) NAc un galvenā ietekme uz vides bagātināšanu čaumalās (F(1, 8) = 22.3, P <0.005; Skaitļi 1A – F). Vēl svarīgāk ir tas, ka stresa un vides bagātināšanas mijiedarbība bija nozīmīga arī abos apvalkos (F(1, 8) = 25.6, P <0.01) un kodols (F(1, 8) = 6.7, P <0.05). Mijiedarbība bija tāda, ka pēc atkārtota ierobežošanas stresa IC žurkām ΔFosB pozitīvo šūnu skaits ievērojami palielinājās, savukārt EC žurkām pēc atkārtota stresa šis skaitlis nemainījās.

Turpmāk izpētīt, kā ΔFosB dinamiski regulē akūta vai atkārtota stresa un ļauj salīdzināt ar iepriekšējiem pētījumiem (Alibhai et al., 2007), ΔFosB indukcija mRNS pētīta ar akūtu un atkārtotu ierobežošanas stresu (1. attēls) (Attēls1G) .1G). Būtiska stresa ietekme bija nozīmīga (F(2, 24) = 31.9, P <0.001) un vides bagātināšana (F(1, 24) = 5.1, P <0.05). IC žurkām ΔFosB mRNS tika stipri inducēta pēc akūta ierobežojoša stresa. Tomēr ar atkārtotu stresu ΔFosB mRNS indukcija tika ievērojami vājināta salīdzinājumā ar akūtu indukciju. Bija arī ievērojama mijiedarbība (F(2, 24) = 4.6, P <0.05), parādot, ka ΔFosB mRNS akūtā indukcija EK žurkām bija mazāka nekā IC žurkām. Tādējādi EK žurkām ir augstāks ΔFosB bazālais līmenis proteīns NAc, bet mazāk ΔFosB mRNS reakcija uz akūtu stresu.

[pieaugums]FosB ir atšķirīgi inducēts ar kokaīnu EK un IC žurkām

Lai noteiktu, vai EK un IC žurkas atšķirīgi reaģē uz kokaīnu, mēs pētījām ΔFosB proteīna un mRNS regulēšanu žurku NAc pēc kokaīna pašregulācijas. 2A, B attiecīgi). Western blot atklāja nozīmīgu kokaīna ietekmi (F(1, 12) = 24.9, P <0.001) un nozīmīga mijiedarbība (F(1,12) = 5.5, P <0.05). Mijiedarbība bija tāda, ka ΔFosB palielinājās vairāk IC žurkām nekā EK žurkām (XNUMX. Attēls) (Attēls2A) .2A). Faktiski pēc kokaīna pašpārvaldes ΔFosB proteīna līmenis bija ievērojami paaugstināts tikai IC žurkām. Attiecībā uz mRNS līmeni qPCR rezultāti atklāja arī nozīmīgu kokaīna ietekmi (F(1, 26) = 47.1, P <0.001) un vides bagātināšanas galvenā ietekme (F(1, 26) = 13.8, P <0.005). Lai gan kopējais līmenis EK žurkām bija mazāks, abas grupas palielināja ΔFosB mRNS (XNUMX. Attēls) (Attēls2B2B).

Lai gan olbaltumvielu dati apstiprināja sākotnējo hipotēzi, tas bija hipotēzi no 1. attēla Attēls1G1G EK žurkas parādītu mazāk mRNS iepriekš aprakstītā kokaīna eksperimenta indukcija nekā izolētām žurkām, kas nenotika, iespējams, tāpēc, ka Attēls1G1G izmantoja 30 min laika punktu un kokaīna eksperimentā tika izmantots 3 h laiks. Lai tālāk izmeklētu mRNS hipotēzi, tika izmantots 30 min laika punkts, lai izpētītu gan akūtu, gan atkārtotu kokaīna ārstēšanu kā labāku salīdzinājumu ar attēlu Attēls1G.1G. Tā kā akūtā kokaīna ievadīšana ir problemātiska pēc būtības (ti, ieguves mācīšanās), EK un IC žurkām tika dotas akūtas vai 9 dienas atkārtotas nejaušās kokaīna IP injekcijas (20 mg / kg). Kā hipotēze bija būtiska vides bagātināšanas galvenā ietekme (F(1, 17) = 14.3, P <0.005), bet kokaīna ārstēšanas galvenais efekts (F(2, 17) = 3.4, P = 0.057) un mijiedarbība (F(2, 17) = 3.4, P = 0.055) bija tikai spēcīgas tendences ar divpusēju testu. Tomēr, ņemot vērā, ka mums bija virziena hipotēzes no 1. attēla Attēls1G, 1G, mēs uzskatām, ka EK žurkas ir mazāk indukcijas nekā IC žurkām (Attēls2C2C).

Pārmērīga izpausme [pieaugums]FosB in NAc apvalks imitē aizsargājošo bagātināšanas izraisīto atkarības fenotipu

Lai izpētītu ΔFosB ietekmi uz žurku uzvedību neatkarīgi no vides bagātināšanas / izolācijas (ti, lai šos rezultātus padarītu atbilstošākus ārpus EK / IC pētījumiem), adeno saistītu vīrusu (AAV) izmantoja, lai pārmērīgi izpaustu ΔFosB divpusēji NAc bagātinātie pāris turēti žurkas. Saskaņā ar mūsu iepriekšējiem pētījumiem NAc apvalks ir jutīgākais pret depresiju un narkotiku lietošanu / meklēšanu, tāpēc AAV vektori tika ievadīti NAc apvalkā šajā pētījumā (Green et al., 2006, 2008, 2010). Skaitļi 3A, B uzrāda ΔFosB reprezentatīvo imūnhistofluorescenci ar kontroles vektoru (A panelis; ti, endogēno AFosB ekspresiju) un ΔFosB pārmērīgi ekspresējošo vektoru (panelis B) NAc apvalkā.

Skaitlis 3  

Pārmērīga izpausme [pieaugums]FosB in NAc apvalks atdarina vides bagātināšanas aizsargājošo fenotipu. (A – B) Reprezentatīva ΔFosB imūnhistoķīmija hrGFP kontrolei (A) un ΔFosB pārmērīga ekspresija (B) AAV vektori. ...

Apstiprinājis titru, in vivo vīrusa vektora ekspresija un vispārēja izvietošana, mēs vispirms pētījām ΔFosB pārmērīgas ekspresijas ietekmi trauksmes modeļos. ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc korpusā nebija pietiekama, lai reproducētu vides bagātināšanas anksiogēno ietekmi saharozes neofobijā un aukstās stresa izraisītajās defekācijas paradigmās (dati nav parādīti). Turklāt nebija ietekmes uz EPM (dati nav parādīti). Tā kā vides bagātināšana žurkām rada antidepresantu līdzīgu efektu, mēs pēc tam veicām ar depresiju saistītus testus ar ΔFosB pārmērīgi ekspresējošām žurkām. Līdzīgi kā trauksmes modeļiem, rezultāti parādīja, ka ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc apvalkā nebija pietiekama, lai samazinātu depresijas līdzīgu uzvedību saharozes preferenču testā, sociālās mijiedarbības testā vai FST (dati nav parādīti).

Vides bagātināšanas paradigmā EK žurkām ir mazāka bazālā lokomotoriskā aktivitāte nekā IC žurkām (Bowling et al., 1993; Boulings un Bardo, 1994; Smith et al., 1997; Green et al., 2003, 2010). Lai izpētītu ΔFosB pārmērīgas ekspresijas ietekmi NAc apvalkā, spontāna lokomotoriskā aktivitāte tika pārbaudīta 120 min. Izmantojot divkāršu testu, rezultāti parādīja, ka ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc apvalkā radīja spēcīgu tendenci samazināt bazālo lokomotorisko aktivitāti žurkām (Zīm. (Attēls3C; 3C; t(16) = 1.84, p = 0.084). Neskatoties uz to, ka tie nav diezgan statistiski nozīmīgi ar divpusēju testu, šie dati joprojām ir intriģējoši, ņemot vērā to, ka tie atbilst mūsu tiešajai virziena hipotēzei, kas balstīta uz Green et al. (2010), kas atbilst vides bagātināšanas ietekmei.

In pretstatā depresijas un trauksmes modeļiem ΔFosB pārmērīga izpausme NAc korpusā varēja radīt EK līdzīgu fenotipu vairākās atkarības / stiprināšanas paradigmās. Isaharozes granulu operanta pašpārvaldes testā bija ievērojama mijiedarbība starp ΔFosB pārmērīgu ekspresiju un žurku bada motivāciju (F(1, 16) = 7.4, P <0.01). Žurkām, kas pārmērīgi izteica ΔFosB NAc apvalkā, bija vajadzīgs ievērojami vairāk saharozes granulas zem bada motivētiem apstākļiem (ti, bez 85% barības ķermeņa masas), bet mazāk granulu ar zemu motivāciju (ti, 100% bez barības masas; Attēls3D), 3D), kas imitē EK fenotipu perfekti (Green et al., \ t 2010).

Vides bagātināšanas paradigmā EK žurkas ekstinkcijas un kokaīna izraisītas atjaunošanas dēļ parādīja samazinātu kokaīna meklēšanu. (Green et al., 2010). Tādējādi kokainu uzņemšanas un meklējuma uzvedība tika mērīta ar ΔFosB ekspresējošām žurkām, izmantojot intravenozo kokaīna pašapkalpošanās paradigmu. Kā alkas paraugs kokaīna izzušanas paradigma atklāja, ka ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc korpusā samazināja narkotiku meklēšanu.r (F(1, 15) = 6.7, P <0.05; Attēls Attēls3E) .3E). Bija arī nozīmīga sesijas galvenā ietekme (F(2, 30) = 74.0, P <0.001). Lai uzturētu atbildes reakciju saskaņā ar FR1 shēmu, devai bija būtiska galvenā ietekme (F(7, 105) = 222.6, P <0.001) un nozīmīga mijiedarbība (F(7, 105) = 2.3, P <0.05) kopējā kokaīna devā. Mijiedarbības raksturs bija tāds, ka atšķirības bija redzamas tikai pie lielākām kokaīna devām (XNUMX. Attēls) (Attēls3F) .3F). Visbeidzot, kokaīna izraisītas atjaunošanas gadījumā bija nozīmīga devas ietekme uz \ tF(4, 44) = 15.5, P <0.001) un ΔFosB pārekspresijas galvenā efekta tendence, izmantojot divu astes testu (F(1, 11) = 4.1, P = 0.067). Tomēr, ņemot vērā Green et al. (2010) un statistiski nozīmīgi un konsekventi rezultāti attēlos 3D, E, F, ir iespējams, ka ΔFosB samazina atjaunošanu (1. attēls) (Attēls3G) .3G). Atbildot uz 10 mg / kg devu, ΔFosB ekspresējošām žurkām bija ievērojami mazāka. Rezultāti kopumā liecina, ka ΔFosB pārmērīga ekspresija žurku NAc apvalkā samazina kokaīna lietošanu un meklē uzvedību, kas atbilst vides bagātināšanas uzvedības ietekmei.

diskusija

Cilvēku neaizsargātību pret atkarību un depresiju stipri ietekmē vides faktori. Vides bagātināšana ir paradigma, kas manipulē dzīvnieku dzīves vidi, radot aizsargājošu iedarbību pret daudziem psihiskiem apstākļiem. ΔFosB ir svarīga loma atalgojuma funkcijas regulēšanā vairākos smadzeņu reģionos, ieskaitot NAc un dorsālo striatumu (Koob et al., 1998; Gudrs, 1998; Wallace et al. 2008; Grueter et al., 2013; Pitchers et al., 2013). Šajā projektā mēs pētījām ΔFosB dinamisko regulēšanu ar ierobežojošu stresu un kokaīnu bagātinātos un izolētos žurkos. Galvenie šā projekta rezultāti ir:

(1) EK žurkām ir paaugstināts ΔFosB līmenis NAc sākumā, salīdzinot ar IC žurkām;

(2) tikai IC žurkas uzkrāj papildu ΔFosB proteīnu ar atkārtotu stresu;

(3) EK žurkām parādās vājināta ΔFosB mRNS indukcija pēc stresa vai kokaīna; un

(4) ΔFosB pārmērīga ekspresija pāru novietoto žurku NAc, imitē aizsargājošo fenotipu, bet ne aizsargājošo depresijas fenotipu.

No publicētās literatūras var sagaidīt, ka transgēnās ΔFosB pārmērīgas ekspresijas pelēm ir paaugstināta jutība pret kokaīna atalgojumu un pašpārvaldi ar zemām zāļu devām (Kelz et al. 1999; Colby et al. 2003; Vialou et al., 2010; Robison et al. 2013), ka FosB pārmērīgi ekspresējošās žurkas pašreizējā eksperimentā parādītu lielāku tendenci par kokaīna pašpārvaldi un meklēšanu. ITomēr pašreizējos eksperimentos ΔFosB pārmērīga izpausme NAc korpusā samazināja kokaīna patēriņu un kokaīna meklēšanu izmiršanas un atjaunošanas laikā, kas liecina par samazinātu kokaīna motivāciju. Atšķirība var būt saistīta ar to, ka transgēnās peles ekspresēja ΔFosB visā striatumā, bet tikai dinamorīna + šūnās (Colby et al., 2003). Pašreizējā eksperimentā ΔFosB tika pārekspressēts ar AAV vektoru, kas inficē dinorfīna + un enkefalīna + neironus. Otrkārt, pašreizējais pētījums bija vērsts uz NAc apvalku, nevis visu striatāla reģionu.

Papildus atkarības fenotipam, vides bagātināšana rada antidepresantus un anksiogēnus līdzīgus profilus žurkām. (Green et al., 2010; Vialou et al., 2010). Pašreizējā pētījumā ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc nespēja ietekmēt nevienu no trim depresijas vai trīs trauksmes testiem. Lai gan ir daudzi iespējamie faktori, kas var veicināt ΔFosB, kas imitē bagātināšanas atkarību, bet ne depresijas fenotipu, ir iespējams, ka NAc apvalks ir dominējošāks atkarības izraisītā uzvedībā, bet ar depresiju saistītu uzvedību var spēcīgāk ietekmēt citi reģioni. Šie konstatējumi ir pretrunā ar pētījumiem peles kur ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc (kur nevar droši atšķirt čaulu pret kodolu), radīja spēcīgus antidepresantus līdzīgus efektus vairākos uzvedības testos (Vialou et al., 2010). Viens no iespējamiem iemesliem ir tas, ka var būt vieglāk saskatīt ΔFosB ietekmi uz smagiem stresa uzvedības modeļiem, piemēram, sociālā uzbrukuma stresu. Pašreizējais pārmērīgas ekspresijas pētījums pētīja depresijas līdzīgu uzvedību bez smaga stresa.

Visā pētījumā konsekventi ΔFosB augstie bazālie līmeņi (piemēram, no bagātināšanas, atkārtota stresa vai kokaīna) korelēja ar vājāku turpmāko ΔFosB indukciju. Tas var būt griestu efekts, un papildus paaugstinātajam proteīna līmenim nav iespējama turpmāka indukcija. Iespējams, ka AFosB uzkrātie līmeņi var atgriezties, lai aizkavētu turpmāko ΔFosB mRNS indukciju pēc stresa vai kokaīna kā negatīvu atgriezeniskās saites cilpu. Piemēram, EC žurkām bija augsts ΔFosB līmenis, un pēc stresa vai kokaīna parādījās mazināta ΔFosB indukcija. Tas pasvītro negatīvo korelāciju starp ΔFosB proteīna līmeni un tā mRNS indukciju. Uzkrāto ΔFosB negatīvā atgriezeniskā saite atspoguļo arī ΔFosB vājināto indukciju ar atkārtotu stresu IC žurkām.

Lai būtu skaidrs, mēs nesniedzam nekādus apgalvojumus, ka vides bagātināšanas paradigmai ir tieša translacionālā nozīme, jo īstajā atņemšanā ir ļoti maz bērnu (jāatzīmē, ka sociālekonomiskā nenodrošinātība neatbilst vides trūkumam). Šīs paradigmas lietderība ir tā, ka tā ir neārstnieciska, neķirurģiska, ģenētiska manipulācija, kas rada aizsargājošus uzvedības fenotipus atkarībai un depresijai, kurus var izmantot laboratorijas kontrolētā vidē kā pamatzināšanas instrumentu molekulāro mehānismu identificēšanai. psihiatriskajiem apstākļiem. Iepriekšējie pētījumi detalizēti aprakstīja uzvedības fenotipus (Bowling et al., 1993; Boulings un Bardo, 1994; Bardo et al. 1995; Green et al., 2002, 2003; El Rawas et al. 2009) un jaunāki pētījumi (Solinas et al., \ t 2009; Green et al., 2010; Lobo et al. 2013) kopā ar pašreizējo pētījumu sniedz norādes par šo uzvedības fenotipu pamatā esošajiem transkripcijas mehānismiem. Pašlaik tiek pētīti transkripcijas mērķa gēni / proteīni, kas ražo aizsargājošos fenotipus (Fan et al., 2013a,b; Lichti et al., 2014).

Mūsu vides bagātināšanas konceptualizācija ir tāda, ka bagātināšana ir nepārtrauktība ar izolāciju zemā galā un pilnīgu bagātināšanu augstākajā līmenī. “Pilnīga bagātināšana šajā gadījumā tiek definēta kā vide, kurā priekšmeti ir pakļauti jaunumam, sociālai saskarsmei, kas nav apdraudēta, un ir atļauta vieta un objekti vingrošanai. Tvisi šie trīs faktori atspoguļo „bagātināšanas” savienojuma nosacījumu, jo tie katrs ir atalgojošs un katrs atbrīvo dopamīnu NAc, un tādējādi aktivizē kopēju neirobioloģisku shēmu (Louilot et al., 1986; Calcagnetti un Schechter, 1992; Crowder un Hutto, 1992; Rebec et al. 1997; Bevins et al., 2002). Šajā konceptualizācijā izolācija tiek uzskatīta par kontroles grupu, jo tā ir manipulācijas trūkums (ti, bagātināšana; Crofton et al., Pārskatā). Tomēr ir iespējamas arī citas konceptualizācijas. Vienā alternatīvā konceptualizācijā kontinuums ir tāds pats, bet izolācijas grupa ir eksperimentālā grupa un bagātinātā grupa ir kontrole. IŠajā modelī, liedzot personām normālu bagātināšanos is faktiskā manipulācija. IŠajā gadījumā tā vietā, lai apgalvotu, ka bagātināšana ir aizsargājoša, varētu teikt, ka izolācija piešķir uzņēmību. Vēl trešā konceptualizācija liek domāt, ka nepastāv nepārtrauktība un ka bagātināšana un izolācija ir divas fundamentāli atšķirīgas manipulācijas. Šajā sakarā bagātināšana un izolācija ir jānošķir, un abas tās jāsalīdzina ar pārī novietotu vadību. Universālas vienprātības trūkums par bagātināšanas būtību ir paradigmas ierobežojums, tomēr nodrošina virzību turpmākajām studijām. Neatkarīgi no šo eksperimentu rezultātiem, neatkarīgi no turpmākās interpretācijas.

Vides un dzīves pieredze būtiski ietekmē daudzu psihisko slimību attīstību un izpausmi. Aizsardzības atkarības mehānisma un vides bagātināšanas depresijas fenotipu izpratne ir saistīta ar fundamentālu jautājumu par psihisko traucējumu izpēti, proti, vides ieguldījumu jutīguma vai noturības pret psihiskiem apstākļiem. Šajā pētījumā uzsvērta ΔFosB nozīme atkarību izraisošo uzvedību regulēšanā. Turpmākajos pētījumos ir jāturpina pētīt ΔFosB darbību un tās aktivizējošo un inhibējošo ietekmi uz konkrētiem mērķa gēniem vides bagātināšanas modeļa ietvaros.

Finansējums un izpaušana

Yafang Zhang, neviens; Elizabeth J. Crofton, neviens; Dingge Li, neviens; Mary Kay Lobo, neviens; Xiuzhen Fan, neviens; Eric J. Nestler, R37DA007359; Thomas A. Green, DA029091.

Interešu konflikta paziņojums

Autori paziņo, ka pētījums tika veikts bez jebkādām komerciālām vai finansiālām attiecībām, kuras varētu uzskatīt par iespējamu interešu konfliktu.

Pateicības

Šie eksperimenti tika finansēti no Nacionālā narkotiku lietošanas institūta, DA029091 un R37DA007359. Kokaīns, ko nodrošina Nacionālais narkotiku lietošanas institūts.

Atsauces

  1. Akdeniz C., Tost H., Meyer-Lindenberg A. (2014). Šizofrēnijas sociālā vides riska neirobioloģija: attīstās pētniecības joma. Soc. Psihiatrija Psihiatrs. Epidemiols. 49, 507 – 517 10.1007 / s00127-014-0858-4 [PubMed] [Cross Ref]
  2. Alibhai IN, Green TA, Potashkin JA, Nestler EJ (2007). FosB un DeltafosB mRNS ekspresijas regulēšana: in vivo un in vitro pētījumi. Brain Res. 1143, 22 – 33 10.1016 / j.brainres.2007.01.069 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  3. Bardo MT, Bowling SL, Rowlett JK, Manderscheid P., Buxton ST, Dwoskin LP (1995). Vides bagātināšana mazina lokomotorisko sensibilizāciju, bet ne in vitro dopamīna izdalīšanos, ko izraisa amfetamīns. Pharmacol. Biochem. Behav. 51, 397 – 405 10.1016 / 0091-3057 (94) 00413-d [PubMed] [Cross Ref]
  4. Bevins RA, Besheer J., Palmatier MI, Jensen HC, Pickett KS, Eurek S. (2002). Jaunu objektu novietošana: uzvedības un dopamīnerģiskie procesi jauninājuma atlīdzības izteiksmē. Behav. Brain Res. 129, 41 – 50 10.1016 / s0166-4328 (01) 00326-6 [PubMed] [Cross Ref]
  5. Boulinga SL, Bardo MT (1994). Amfetamīna lokomotoriskais un atalgojošais efekts bagātinātos, sociālos un izolētos audzētos žurkos. Pharmacol. Biochem. Behav. 48, 459 – 464 10.1016 / 0091-3057 (94) 90553-3 [PubMed] [Cross Ref]
  6. Bowling SL, Rowlett JK, Bardo MT (1993). Vides bagātināšanas ietekme uz amfetamīna stimulēto lokomotorisko aktivitāti, dopamīna sintēzi un dopamīna izdalīšanos. Neirofarmakoloģija 32, 885 – 893 10.1016 / 0028-3908 (93) 90144-r [PubMed] [Cross Ref]
  7. Calcagnetti DJ, Schechter MD (1992). Vietu kondicionēšana atklāj labvēlīgu sociālās mijiedarbības aspektu jauniešu žurkām. Physiol. Behav. 51, 667 – 672 10.1016 / 0031-9384 (92) 90101-7 [PubMed] [Cross Ref]
  8. Chen J., Nye HE, Kelz MB, Hiroi N., Nakabeppu Y., Hope BT, et al. (1995). Delta FosB un FosB līdzīgo proteīnu regulēšana ar elektrokonvulsīvo krampju un kokaīna terapiju. Mol. Pharmacol. 48, 880 – 889 [PubMed]
  9. Colby CR, Whisler K., Steffen C., Nestler EJ, Self DW (2003). DeltaFosB pārmērīga ekspresija uz striatālu šūnu tipa specifiku palielina kokaīna stimulēšanu. J. Neurosci. 23, 2488 – 2493 [PubMed]
  10. Crowder WF, Hutto CW (1992). Operatora vietas kondicionēšanas pasākumi, kas pārbaudīti, izmantojot divus neadrug pastiprinātājus. Pharmacol. Biochem. Behav. 41, 817 – 824 10.1016 / 0091-3057 (92) 90233-6 [PubMed] [Cross Ref]
  11. Elisei S., Sciarma T., Verdolini N., Anastasi S. (2013). Elastīgums un depresijas traucējumi. Psihiatrs. Danubs. 25 (Suppl. 2), S263 – S267 [PubMed]
  12. El Rawas R., Thiriet N., Lardeux V., Jaber M., Solinas M. (2009). Vides bagātināšana samazina heroīna atalgojošo, bet ne aktivizējošo ietekmi. Psihofarmakoloģija (Berl) 203, 561 – 570 10.1007 / s00213-008-1402-6 [PubMed] [Cross Ref]
  13. Fan X., Li D., Lichti CF, Green TA (2013a). Dinamiska kodolskābes proteomika, reaģējot uz akūtu psiholoģisku stresu videi bagātinātos un izolētos žurkos. PLoS One 8: e73689 10.1371 / journal.pone.0073689 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  14. Fan X., Li D., Zhang Y., Green TA (2013b). Atšķirīga fosfoproteomu regulēšana kodolkrūšu organismā videi bagātinātos un izolētos žurkos, reaģējot uz akūtu stresu. PLoS One 8: e79893 10.1371 / journal.pone.0079893 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  15. Green TA, Alibhai IN, Hommel JD, Dileone RJ, Kumar A., ​​Theobald DE, et al. (2006). Inducēja cAMP agrīna repressora ekspresijas indukcija kodolkrāsās ar stresu vai amfetamīnu palielina uzvedības reakcijas uz emocionāliem stimuliem. J. Neurosci. 26, 8235 – 8242 10.1523 / jneurosci.0880-06.2006 [PubMed] [Cross Ref]
  16. Green TA, Alibhai IN, Roybal CN, Winstanley CA, Theobald DE, Birnbaum SG, et al. (2010). Vides bagātināšana rada uzvedības fenotipu, ko mediē ar zemu ciklisku adenozīna monofosfāta reakcijas elementu saistīšanās (CREB) aktivitāti kodolā. Biol. Psihiatrija 67, 28 – 35 10.1016 / j.biopsych.2009.06.022 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  17. Green TA, Alibhai IN, Unterberg S., Neve RL, Ghose S., Tamminga CA, et al. (2008). ATF2, ATF3 un ATF4 aktivējošo transkripcijas faktoru (ATF) aktivizēšana kodolkrāsās un to emocionālās uzvedības regulēšana. J. Neurosci. 28, 2025 – 2032 10.1523 / jneurosci.5273-07.2008 [PubMed] [Cross Ref]
  18. Green TA, Kains ME, Thompson M., Bardo MT (2003). Vides bagātināšana samazina nikotīna izraisīto hiperaktivitāti žurkām. Psihofarmakoloģija (Berl) 170, 235 – 241 10.1007 / s00213-003-1538-3 [PubMed] [Cross Ref]
  19. Zaļā TA, Gehrke BJ, Bardo MT (2002). Vides bagātināšana samazina intravenozo amfetamīna pašregulāciju žurkām: devas-atbildes funkcijas fiksēto un progresīvo attiecību grafikiem. Psihofarmakoloģija (Berl) 162, 373 – 378 10.1007 / s00213-002-1134-y [PubMed] [Cross Ref]
  20. Grueter BA, Robison AJ, Neve RL, Nestler EJ, Malenka RC (2013). ΔFosB diferencēti modulē tiešo un netiešo kodola funkciju. Proc. Natl. Acad. Sci. ASV 110, 1923 – 1928 10.1073 / pnas.1221742110 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  21. Hope B., Kosofsky B., Hyman SE, Nestler EJ (1992). Tūlītēja agrīna gēna ekspresijas regulēšana un AP-1 saistīšanās ar žurku kodolu accumbens ar hronisku kokaīnu. Proc. Natl. Acad. Sci. ASV 89, 5764 – 5768 10.1073 / pnas.89.13.5764 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  22. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y., et al. (1994). Ilgstoša AP-1 kompleksa, kas sastāv no mainītiem Fos līdzīgiem proteīniem smadzenēs, indukcija ar hronisku kokaīnu un citām hroniskām procedūrām. Neurons 13, 1235 – 1244 10.1016 / 0896-6273 (94) 90061-2 [PubMed] [Cross Ref]
  23. Jha S., Dong B., Sakata K. (2011). Bagātināta vides apstrāde novērš depresijas līdzīgu uzvedību un atjauno smadzeņu radītā neirotrofiskā faktora hippokampālā neirogēzes un proteīna līmeni pelēs, kurām nav izpausmes caur promotoru IV. Tulkojums. Psihiatrija 1: e40 10.1038 / tp.2011.33 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  24. Kato T., Iwamoto K. (2014). Visaptveroša DNS metilēšanas un hidroksimetilēšanas analīze cilvēka smadzenēs un tās ietekme uz garīgiem traucējumiem. Neirofarmakoloģija 80, 133 – 139 10.1016 / j.neuropharm.2013.12.019 [PubMed] [Cross Ref]
  25. Kelz MB, Chen J., Carlezon WA, Whisler K., Gilden L., Beckmann AM, et al. (1999). Transkripcijas faktora deltaFosB ekspresija smadzenēs kontrolē jutību pret kokaīnu. Daba 401, 272 – 276 10.1038 / 45790 [PubMed] [Cross Ref]
  26. Kelz MB, Nestler EJ (2000). deltaFosB: molekulārais slēdzis, kas pamatojas uz ilglaicīgu nervu plastiskumu. Curr. Vārds. Neurols. 13, 715 – 720 10.1097 / 00019052-200012000-00017 [PubMed] [Cross Ref]
  27. Koob GF, Sanna PP, Bloom FE (1998). Atkarības neirozinātne. Neurons 21, 467 – 476 [PubMed]
  28. Larson EB, Graham DL, Arzaga RR, Buzin N., Webb J., Green TA, et al. (2011). CREB pārmērīga ekspresija kodolkrāsas apvalkā palielina kokaīna pastiprināšanos pašregulējošām žurkām. J. Neurosci. 31, 16447 – 16457 10.1523 / JNEUROSCI.3070-11.2011 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  29. Laviola G., Hannan AJ, Macrì S., Solinas M., Jaber M. (2008). Bagātinātas vides ietekme uz neirodeģeneratīvo slimību un psihisko traucējumu dzīvnieku modeļiem. Neurobiol. Dis. 31, 159 – 168 10.1016 / j.nbd.2008.05.001 [PubMed] [Cross Ref]
  30. Lichti CF, Fan X., angļu RD, Zhang Y., Li D., Kong F., et al. (2014). Vides bagātināšana maina olbaltumvielu ekspresiju, kā arī proteomu atbildes reakciju uz kokaīnu žurkām. Priekšpuse. Behav. Neurosci. 8: 246 10.3389 / fnbeh.2014.00246 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  31. Lobo MK, Zaman S., Damez-Werno DM, Koo JW, Bagot RC, Dinieri JA, et al. (2013). ΔFosB indukcija striatāla vidēja smailes neironu apakštipos, reaģējot uz hroniskiem farmakoloģiskiem, emocionāliem un optogēniskiem stimuliem. J. Neurosci. 33, 18381 – 18395 10.1523 / JNEUROSCI.1875-13.2013 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  32. Louilot A., Le Moal M., Simon H. (1986). Dopamīnerģisko neironu diferenciālā reaktivitāte kodolā akumbensā, reaģējot uz dažādām uzvedības situācijām. In vivo voltametriskais pētījums ar brīvi pārvietojamām žurkām. Brain Res. 397, 395 – 400 10.1016 / 0006-8993 (86) 90646-3 [PubMed] [Cross Ref]
  33. McBride WJ, Kimpel MW, Mcclintick JN, Ding ZM, Edenberg HJ, Liang T., et al. (2014). Izmaiņas gēnu ekspresijā paplašinātā amigdalā pēc tam, kad pusaudžu alkohola preferenču (P) žurkas lieto līdzīgu alkohola lietošanu. Pharmacol. Biochem. Behav. 117, 52 – 60 10.1016 / j.pbb.2013.12.009 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  34. Mlynarik M., Johansson BB, Jezova D. (2004). Bagātināta vide ietekmē adrenokortikālo reakciju uz imūnsistēmas reakciju un glutamāta receptoru gēna ekspresiju žurku hipokampā. Ann. NY Acad. Sci. 1018, 273 – 280 10.1196 / annals.1296.032 [PubMed] [Cross Ref]
  35. Nestler EJ (2001). Atkarības molekulārā neirobioloģija. Am. J. Addict. 10, 201 – 217 10.1080 / 105504901750532094 [PubMed] [Cross Ref]
  36. Nestler EJ (2008). Pārskatīšana. Atkarības transkripcijas mehānismi: DeltaFosB loma. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B Biol. Sci. 363, 3245 – 3255 10.1098 / rstb.2008.0067 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  37. Nestler EJ, Barrot M., Self DW (2001). DeltaFosB: ilgstoša molekulārais slēdzis atkarībai. Proc. Natl. Acad. Sci. ASV 98, 11042 – 11046 10.1073 / pnas.191352698 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  38. Perrotti LI, Hadeishi Y., Ulery PG, Barrot M., Monteggia L., Duman RS un citi. (2004). DeltaFosB indukcija ar smadzenēm saistītajās smadzeņu struktūrās pēc hroniska stresa. J. Neurosci. 24, 10594 – 10602 10.1523 / jneurosci.2542-04.2004 [PubMed] [Cross Ref]
  39. Perrotti LI, Weaver RR, Robison B., Renthal W., Maze I., Yazdani S., et al. (2008). DeltaFosB indukcijas smadzenēs atšķiras no ļaunprātīgas narkotikas. Synapse 62, 358 – 369 10.1002 / syn.20500 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  40. Pitchers KK, Vialou V., Nestler EJ, Laviolette SR, Lehman MN, Coolen LM (2013). Dabas un narkotiku atlīdzība darbojas, izmantojot kopīgus neirozitātes plastitātes mehānismus ar ΔFosB kā galveno mediatoru. J. Neurosci. 33, 3434 – 3442 10.1523 / jneurosci.4881-12.2013 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  41. Rebec GV, Christensen JR, Guerra C., Bardo MT (1997). Reģionālās un laika atšķirības reālā laika dopamīna izplūdē kodolā akumbensā pēc brīvās izvēles. Brain Res. 776, 61 – 67 10.1016 / s0006-8993 (97) 01004-4 [PubMed] [Cross Ref]
  42. Robison AJ, Vialou V., Mazei-Robison M., Feng J., Kourrich S., Collins M., et al. (2013). Uzvedības un strukturālajai reakcijai uz hronisku kokaīnu ir nepieciešama avota cilpa, kas ietver ΔFosB un kalcija / kalmodulīna atkarīgo proteīnkināzi II kodolā. J. Neurosci. 33, 4295 – 4307 10.1523 / jneurosci.5192-12.2013 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  43. Smith JK, Neill JC, Costall B. (1997). Pēcapstrādes apstākļi ietekmē kokaīna un d-amfetamīna uzvedību. Psihofarmakoloģija (Berl) 131, 23 – 33 10.1007 / s002130050261 [PubMed] [Cross Ref]
  44. Solinas M., Chauvet C., Thiriet N., El Rawas R., Jaber M. (2008). Kokaīna atkarības maiņa ar vides bagātināšanu. Proc. Natl. Acad. Sci. ASV 105, 17145 – 17150 10.1073 / pnas.0806889105 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  45. Solinas M., Thiriet N., El Rawas R., Lardeux V., Jaber M. (2009). Vides bagātināšana agrīnos dzīves posmos samazina kokaīna uzvedības, neiroķīmiskās un molekulārās sekas. Neiropsihofarmakoloģija 34, 1102 – 1111 10.1038 / npp.2008.51 [PubMed] [Cross Ref]
  46. Kāpnes DJ, Prendergast MA, Bardo MT (2011). Vides izraisītas atšķirības kortikosterona un glikokortikoīdu receptoru blokā amfetamīna pašregulācijas laikā žurkām. Psihofarmakoloģija (Berl) 218, 293 – 301 10.1007 / s00213-011-2448-4 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  47. Thiel KJ, Pentkowski NS, Peartree NA, gleznotāja MR, Neisewander JL (2010). Vides dzīves apstākļi, kas ieviesti piespiedu atturēšanās laikā, maina kokaīna meklēšanu un Fos proteīna izpausmi. Neirozinātne 171, 1187 – 1196 10.1016 / j.neuroscience.2010.10.001 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  48. Thiel KJ, Sanabria F., Pentkowski NS, Neisewander JL (2009). Vides bagātināšanas antipirēšanās efekti. Int. J. Neuropsychopharmacol. 12, 1151 – 1156 10.1017 / s1461145709990472 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  49. van Winkel M., Peeters F., Van Winkel R., Kenis G., Collip D., Geschwind N., et al. (2014). BDNF gēna variācijas ietekme uz sociālās stresa jutīgumu un pozitīvu emociju buferizējošo ietekmi: gēnu un vides mijiedarbības replikācija un paplašināšana. Eiro. Neuropsychopharmacol. 24, 930 – 938 10.1016 / j.euroneuro.2014.02.005 [PubMed] [Cross Ref]
  50. Venebra-Muñoz A., Corona-Morales A., Santiago-García J., Melgarejo-Gutiérrez M., Caba M., García-García F. (2014). Bagātināta vide mazina nikotīna pašpārvaldi un izraisa izmaiņas ΔFosB ekspresijā žurka prefrontālā garozā un kodolkrūšu kodolā. Neuroreport 25, 694 – 698 10.1097 / wnr.0000000000000157 [PubMed] [Cross Ref]
  51. Vialou V., Robison AJ, Laplants QC, Covingtona HE, Dietz DM, Ohnishi YN et al. (2010). DeltaFosB smadzeņu atlīdzības shēmās nodrošina izturību pret stresu un antidepresantu reakcijām. Nat. Neurosci. 13, 745 – 752 10.1038 / nn.2551 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  52. Wallace DL, Vialou V., Rios L., Carle-Florence TL, Chakravarty S., Kumar A., ​​et al. (2008). DeltaFosB ietekme uz kodoliem ir saistīta ar dabisku atalgojumu. J. Neurosci. 28, 10272 – 10277 10.1523 / jneurosci.1531-08.2008 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  53. Wang Y., Cesena TI, Ohnishi Y., Burger-Caplan R., Lam V., Kirchhoff PD, et al. (2012). Mazās molekulas skrīnings identificē transkripcijas faktora ΔFosB regulatorus. ACS Chem. Neurosci. 3, 546 – 556 10.1021 / cn3000235 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  54. Werme M., Messer C., Olson L., Gilden L., Thorén P., Nestler EJ, et al. (2002). Delta FosB regulē riteņu kustību. J. Neurosci. 22, 8133 – 8138 [PubMed]
  55. Winstanley CA, Bachtell RK, Theobald DE, Laali S., Green TA, Kumar A., ​​et al. (2009a). Palielināta impulsivitāte, pārtraucot kokaīna pašpārvaldi: DeltaFosB loma orbitofrontālajā garozā. Cereb. Cortex 19, 435 – 444 10.1093 / cercor / bhn094 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  56. Winstanley CA, Green TA, Theobald DE, Renthal W., LaPlant Q., DiLeone RJ, et al. (2009b). DeltaFosB indukcija orbitofrontālajā garozā pastiprina lokomotorisko sensibilizāciju, neskatoties uz to, ka tiek samazināta kokaīna izraisītā kognitīvā disfunkcija. Pharmacol. Biochem. Behav. 93, 278 – 284 10.1016 / j.pbb.2008.12.007 [PMC bezmaksas raksts] [PubMed] [Cross Ref]
  57. Winstanley CA, LaPlant Q., Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, et al. (2007). DeltaFosB indukcija orbitofrontālajā garozā mediē toleranci pret kokaīna izraisītu kognitīvo disfunkciju. J. Neurosci. 27, 10497 – 10507 10.1523 / jneurosci.2566-07.2007 [PubMed] [Cross Ref]
  • Gudrs RA (1998). Smadzeņu atlīdzības ceļu narkotiku aktivizēšana. Narkotiku atkarība. 51, 13 – 22 10.1016 / s0376-8716 (98) 00063-5 [PubMed] [Cross Ref]