KOMENTĀRI: Delta FosB ir marķieris visām atkarībām, gan uzvedības, gan ķīmiskām. Tā kā atalgojuma ķēdē šī molekula palielinās, palielinās arī atkarību izraisošā uzvedība. Tā ir viena no molekulām, kas iesaistīta neiroplastiskajās izmaiņās. Šis eksperiments parāda, ka tas palielinās līdz ar seksuālo pieredzi, līdzīgi kā tas notiek ar narkomāniju. Eksperimentā viņi izmantoja gēnu inženieriju, lai paaugstinātu tā līmeni virs “normālā” līmeņa. Tā rezultātā uzlabojās seksuālās aktivitātes. Mēs domājam, ka tas notiek ar atkarību no pornogrāfijas.
PILNĪGA PĒTĪJUMS
Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.
Gēni Brena prāts. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.
Anatomijas un šūnu bioloģijas katedra, Šulichas Medicīnas un zobārstniecības skola, Rietumu Ontario Universitāte, Londona, Ontārio, Kanāda.
ANOTĀCIJA
Vīriešu žurku seksuālā uzvedība ir atalgojoša un pastiprinoša. Tomēr maz ir zināms par specifiskiem šūnu un molekulārajiem mehānismiem, kas veicina seksuālu atlīdzību, vai par atalgojuma pastiprinošo ietekmi uz sekojošu seksuālās uzvedības izpausmi. Šis pētījums pārbauda hipotēzi, ka ΔFosB, stabili izteikta FosB forma, ir izšķiroša loma seksuālās uzvedības nostiprināšanā un pieredzes izraisītā seksuālās motivācijas un snieguma veicināšanā.
Tika pierādīts, ka seksuālā pieredze izraisa ΔFosB uzkrāšanos vairākos limbiskajos smadzeņu reģionos, ieskaitot kodolu accumbens (NAc), mediālo prefrontālo garozu, ventrālo tegmentālo zonu un caudātu putamen, bet ne mediālo priekšpopulāro kodolu.
Pēc tam c-Fos indukcija, kas ir lejupvērsts (represēts) ΔFosB mērķis, tika mērīts seksuāli pieredzējušos un iepriekš neārstētos dzīvniekos. Pārošanās izraisīto c-Fos-imunoreaktīvo šūnu skaits seksuāli pieredzējušiem dzīvniekiem ievērojami samazinājās, salīdzinot ar seksuāli naivām kontrolēm.
Visbeidzot, ΔFosB līmeņi un tā aktivitāte NAc tika manipulēti, izmantojot vīrusu mediētu gēnu pārnesi, lai izpētītu tās potenciālo lomu seksuālās pieredzes un pieredzes izraisītas seksa veicināšanas sekmēšanā. Dzīvnieki ar ΔFosB pārmērīgu ekspresiju parādīja pastiprinātu seksuālo sniegumu veicināšanu ar seksuālo pieredzi attiecībā pret kontrolēm. Turpretī ΔJunD, ΔFosB dominējošā negatīvā saistošā partnera, ekspresija mazināja seksuālās pieredzes izraisīto seksuālo sniegumu veicinošo darbību un trūka ilglaicīgu atvieglojumu uzturēšanu, salīdzinot ar zaļo fluorescences proteīnu un ΔFosB pārmērīgas ekspresijas grupām.
Kopā šie rezultāti apstiprina ΔFosB izpausmes kritisko lomu NAc, lai nostiprinātu seksuālās uzvedības un seksuālās pieredzes veicināšanas sekas.
IEVADS
Seksuāla uzvedība ir ļoti atalgojoša un pastiprina vīriešu grauzējiem (Coolen et al. 2004; Pfaus un citi. 2001). Turklāt seksuālā pieredze maina sekojošu seksuālo uzvedību un atalgojumu (Tenk un citi. 2009). Ar atkārtotu pārošanās pieredzi tiek veicināta vai pastiprināta seksuālā uzvedība, par ko liecina samazināšanās latentās, lai uzsāktu pārošanos un veicinātu seksuālo sniegumu (Balfour un citi. 2004; Pfaus un citi. 2001). Tomēr seksuālās atlīdzības un pastiprinājuma pamatā esošie šūnu un molekulārie mehānismi ir nepietiekami saprotami. Ir pierādīts, ka seksuālā uzvedība un konditorejas norādes, kas prognozē pārošanos, īslaicīgi izraisa tūlītēja agrīna gēna c-fos ekspresiju vīriešu žurku mesolimbiskajā sistēmā (Balfour un citi. 2004; Pfaus un citi. 2001). Turklāt nesen tika pierādīts, ka seksuālā pieredze izraisa ilgstošu neiroplastiku vīriešu žurku mesolimbiskajā sistēmā (Frohmader un citi. 2009; Krūzes un citi. 2010). Turklāt vīriešu kārtas žurkām ir pierādīts, ka seksuālā pieredze izraisa ΔFosB, a Fos ģimenes loceklis, kodolā accumbens (NAc) (Wallace un citi. 2008). FosB, FosB saīsināts splice variants, ir unikāls Fos ģimenes loceklis, pateicoties tās lielākai stabilitātei (laucinieks un citi. 2007; Ulery-Reynolds un citi. 2008; Ulery un citi. 2006) un veicina motivāciju un atalgojumu par ļaunprātīgu narkotiku lietošanu un ilgstošu neironisko plastiskumu, kas mediē atkarību (Nestler un citi. 2001). ΔFosB veido heteromēru transkripcijas faktora kompleksu (aktivatora proteīnu-1 (AP-1)) ar Jun proteīniem, vēlams JunD (Čens un citi. 1995; Hiroi un citi. 1998). Inducējama ΔFosB pārmērīga ekspresija, galvenokārt ierobežota ar striatumu, izmantojot bi-transgēnās peles, narkotiku atkarīgais uzvedības fenotips tiek radīts, neraugoties uz iepriekšējās zāļu iedarbības trūkumu (McClung un citi. 2004). Šis uzvedības fenotips ietver jutīgu lokomotorisku reakciju uz kokaīnu (\ tKelz un citi. 1999), lielāka kokaīna izvēle (Kelz un citi. 1999) un morfīns (Zachariou un citi. 2006) un paaugstinātu kokaīna pašpārvaldi (\ tColby un citi. 2003).
Līdzīgi kā atlīdzība par narkotiku lietošanu, ΔFosB tiek regulēta ar dabisku atalgojumu, un tā veicina šo uzvedību. ΔFosB pārmērīga izpausme NAc, izmantojot grauzēju modeļus, palielina brīvprātīgo riteņu kustību (Werme un citi. 2002), reaģējot uz pārtiku (Olausson un citi. 2006), saharozes (Wallace un citi. 2008), un atvieglo vīriešus (Wallace un citi. 2008) un sieviete (Bradley un citi. 2005) seksuālo uzvedību. Līdz ar to ΔFosB var būt iesaistīts dabiskas atalgojošas pieredzes iedarbībā. Tpašreizējais pētījums paplašina iepriekšējos pētījumus, konkrēti pētot ΔFosB lomu NAc ilgstošos seksuālās pieredzes iznākumos par turpmāko pārošanās uzvedību un nervu aktivizāciju mezolimbiskajā sistēmā..
- Pirmkārt, tika noskaidrots, kuri smadzeņu reģioni, kas saistīti ar atalgojuma shēmu un seksuālo uzvedību, izsaka seksuālās pieredzes izraisītu ΔFosB.
- Tālāk seksa pieredzes izraisītā ΔFosB ietekme uz c-Fos izpausmi, kas ir pakārtota mērķa repressēta ar ΔFosB (Renthal un citi. 2008), tika pētīta.
- Visbeidzot, manipulējot ar ΔFosB aktivitāti NAc (gēnu pārmērīga ekspresija un dominējošā negatīvā saistošā partnera ekspresija) uz seksuālo uzvedību un pieredzes izraisītu seksuālās motivācijas un veiktspējas veicināšanu, noteica, izmantojot vīrusu vektora piegādes tehnoloģiju.
METODES
Dzīvnieki
Pieaugušo tēviņu Sprague Dawley žurkas (200 – 225 grami) ieguva no Charles River Laboratories (Senneville, QC, Kanāda). Eksperimentos dzīvnieki tika izmitināti plexiglas būros ar tuneļa cauruli vienā un tajā pašā dzimuma pāriem. Kolonijas telpa tika regulēta ar temperatūru un saglabāta gaišā 12 / 12 hr cikla laikā ar ēdienu un ūdeni. ad libitum izņemot uzvedības testēšanas laikā. Stimulus sievietes (210 – 220 grami) pārošanās sesijām saņēma subkutānu implantu, kas satur 5% estradiola benzoātu un 95% holesterīnu pēc divpusējas ovariektomijas dziļā anestēzijā (0.35g ketamīns / 0.052g Xylazine). Seksuālo uztveramību izraisīja 500µg progesterona ievadīšana 0.1 mL sezama eļļā aptuveni 4 stundas pirms testēšanas. Visas procedūras apstiprināja Rietumu Ontario Universitātes Dzīvnieku aprūpes un lietošanas komitejas un atbilst CCAC vadlīnijām, kurās pētījumos izmantoti mugurkaulnieki.
Seksuālā uzvedība
Pārošanās sesijas notika agrīnā tumšās fāzes laikā (starp 2 – 6 stundām pēc tumšā perioda sākuma) zemu sarkanā apgaismojumā. Pirms eksperimenta sākuma dzīvnieki tika nejauši sadalīti grupās. Pārošanās laikā vīriešu kārtas žurkām tika atļauts kopulēties ar ejakulāciju vai 1 stundu, un tika reģistrēti seksuālās uzvedības parametri, tostarp: mount latency (ML; laiks no sievietes ievadīšanas līdz pirmajam stiprinājumam), intromission latency (IL; laiks no ievadīšanas brīža) sieviete līdz pirmajai montāžai ar vaginālo iekļūšanu), ejakulācijas latentums (EL; laiks no pirmās intromisijas līdz ejakulācijai), pēc ejakulācijas intervāls (PEI; laiks no ejakulācijas līdz pirmajai intromīzijai), stiprinājumu skaits (M; iegurņa trieciens bez maksts) iekļūšana), intromciju skaits (IM, montāža, ieskaitot vaginālo iekļūšanu) un kopulācijas efektivitāte (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Analīzē netika iekļauts stiprinājumu un intromciju skaits dzīvniekiem, kuriem nebija ejakulācijas. Uzstādīšanas un iekļūšanas latences ir parametri, kas norāda uz seksuālo motivāciju, bet ejakulācijas latentums, stiprinājumu skaits un kopulācijas efektivitāte atspoguļo seksuālo sniegumu (Hull 2002).
Eksperiments 1: ΔFosB ekspresija
Seksuāli naivām žurkām tika ļauts veidoties tīros testa būros (60 × 45 × 50 cm) 5 secīgām, ikdienas pārošanās sesijām vai seksuāli naivām. Papildu tabula 1 iezīmē eksperimentālo grupu uzvedības paradigmu: naivi nav dzimuma (NNS; n = 5), naivs dzimums (NS; n = 5), nav dzimuma (ENS; n = 5) un pieredzējis sekss (ES; n = 4). NS un ES dzīvnieki tika nogalināti 1 stundu pēc ejakulācijas pēdējā pārošanās dienā, lai izpētītu pārošanās izraisīto c-Fos ekspresiju. NNS dzīvnieki tika nogalināti vienlaikus ar ENS dzīvniekiem 24 stundas pēc pēdējās pārošanās sesijas, lai pārbaudītu seksuālās pieredzes izraisīto ΔFosB. Seksuāli pieredzējušām grupām tika veikta seksuāla uzvedība pirms turpmākās pārbaudes. Nav konstatētas būtiskas atšķirības starp grupām attiecībā uz jebkādiem uzvedības pasākumiem atbilstošajā pārošanās sesijā, un abu pieredzējušo grupu vidū bija seksuālās pieredzes izraisīta seksuālās uzvedības veicināšana.Papildu tabula 2). Kontroles iekļāva seksuāli naivus tēviņus, kuri tika ārstēti vienlaikus ar pārošanās dzīvniekiem, nodrošinot sievietes smaržu un vokalizāciju bez tieša kontakta ar sievietēm.
Zaudējot, dzīvnieki tika dziļi anestēti, izmantojot nātrija pentobarbitālu (270mg / kg; ip) un perfūzēti intracardiāli ar 50 ml sālsūdens sāls šķīdumu, kam sekoja 0.9 ml paraformaldehīda 500 M fosfāta buferšķīdumā (PB). Smadzenes tika noņemtas un pēc tam fiksētas 4 h istabas temperatūrā tajā pašā fiksatorā, tad iegremdēja 0.1% saharozi un 1% nātrija azīdu 20 M PB un uzglabājamas 0.01 ° C. Koronālās sekcijas (0.1 µm) tika sagrieztas ar sasalšanas mikrotomu (H4R, Micron, Vācija), kas savāktas četrās paralēlās sērijās krioprotektanta šķīdumā (35% saharoze un 400% etilēnglikols 30 M PB) un uzglabātas –30 ° C. Brīvās peldošās sekcijas plaši mazgāja ar 0.1 M fosfātu buferētu sāls šķīdumu (PBS; pH 20 – 0.1) starp inkubācijām. Sekcijas tika pakļautas 7.3% H2O2 10 min istabas temperatūrā, lai iznīcinātu endogēnās peroksidāzes, tad bloķēta PBS + inkubācijas šķīdumā, kas ir PBS, kas satur 0.1% liellopu seruma albumīnu (katalogs 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) un 0.4% Triton X -100 (katalogs BP151-500; Sigma-Aldrich) 1 h. Tad sekcijas tika inkubētas naktī pie 4 ° C pan-FosB trušu poliklonālajā antivielā (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Pan-FosB antiviela tika audzēta pret iekšējo reģionu, ko kopīgi lietoja FosB un ΔFosB. ΔFosB-IR šūnas bija īpaši pozitīvas ΔFosB-pozitīvas, jo pēc stimulēšanas laika (24 stundas) visi atklājami stimulējoši stimulētie FosB ir pasliktinājušies (Perrotti un citi. 2004; Perrotti un citi. 2008). Turklāt šajā eksperimentā dzīvnieki, kas pāroja pēdējo dienu (NS, ES), tika nogalināti 1 h pēc pārošanās, tātad pirms FosB ekspresijas. Western blot analīze apstiprināja ΔFosB noteikšanu aptuveni 37 kD. Pēc primārās antivielu inkubācijas sekcijas tika inkubētas 1 h biotīna konjugētā kazu anti-truša IgG (1: 500 PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, CA, ASV) un pēc tam 1 h avidīna-biotīna-saimniekorganisma peroksidāzē (ABC elite 1: 1K PBS, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Pēc šī inkubācijas sadaļas tika apstrādāti vienā no šiem veidiem:
1. Viena peroksidāzes marķēšana
NNS un ENS dzīvnieku sekcijas tika izmantotas seksuālās pieredzes izraisītās ΔFosB uzkrāšanās smadzeņu analīzei. Pēc ABC inkubācijas peroksidāzes komplekss tika vizualizēts pēc 10 minūšu apstrādes ar hromogēna šķīdumu, kas satur 0.02% 3,3'-diaminobenzidīna tetrahidrogēnhlorīdu (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) ar 0.02% niķeļa sulfātu 0.1 M PB kopā ar ūdeņraža peroksīds (0.015%). Sekcijas tika rūpīgi nomazgātas 0.1 M PB, lai izbeigtu reakciju, un uzmontētas uz kodētā Superfrost plus stikla priekšmetstikliņiem (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) ar 0.3% želatīnu ddH.20. Pēc dehidratācijas visi slaidi tika pārklāti ar DPX (dibutilftalāta ksilolu).
2. Divkārša imunofluorescence
ΔFosB un c-Fos analīzei tika izmantotas sekcijas no visām četrām eksperimentālajām grupām, kas satur NAc un mPFC. Pēc ABC inkubācijas sekcijas tika inkubētas 10 min ar biotinilētu tyramīdu (BT; 1: 250 PBS + 0.003% H2O2 Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) un 30 min ar Alexa 488 konjugētu strepavidīnu (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Pēc tam sekcijas tika inkubētas nakti ar trušu poliklonālo antivielu, kas īpaši atpazīst c-Fos (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), kam sekoja 30 min inkubācija ar kazu anti-trušu Cy3 konjugētu sekundāro antivielu (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, ASV). Pēc iekrāsošanas sekcijas tika rūpīgi nomazgātas 0.1 M PB, kas piestiprinātas pie kodēta stikla priekšmetstikliņiem ar 0.3% želatīnu ddH.20 un nosegts ar ūdens montāžas vidi (Gelvatol), kas satur anti-fading aģentu 1,4-diazabiciklo (2,2) oktānu (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Imūnhistoķīmiskās kontroles ietvēra neviena vai abu primāro antivielu izlaišanu, kā rezultātā nebija marķējuma atbilstošā viļņu garumā.
Datu analīze
ΔFosB smadzeņu analīze
Divi eksperimentētāji, kas bija akli ārstēšanai, veica smadzeņu plašu skenēšanu ar kodētiem slaidiem. FosB-imūnreaktīvās (-IR) šūnas visā smadzenē tika daļēji kvantitatīvi analizētas, izmantojot skalu, lai attēlotu ΔFosB-pozitīvo šūnu skaitu, kā norādīts Tabula 1. Turklāt, pamatojoties uz daļēji kvantitatīviem konstatējumiem, ΔFosB-IR šūnu skaits tika skaitīts, izmantojot standarta analīzes zonas smadzeņu zonās, kas saistītas ar atalgojumu un seksuālo uzvedību, izmantojot kameras lucida zīmēšanas cauruli, kas pievienota Leica DMRD mikroskopam (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Vācija): NAc (kodols (C) un apvalks (S); 400 × 600µm), analizēts trīs rostral-caudal līmeņos (Balfour un citi. 2004); Ventrālā tegmentālā zona (VTA; 1000 × 800µm), kas analizēta trīs rostral-caudal līmeņos (Balfour un citi. 2004) un VTA astes (Perrotti un citi. 2005); prefrontālā garoza (priekšējais cinglulācijas laukums (ACA); prelimbiska garoza (PL); infralimbiskā garoza (IL); 600 × 800 µm katra); caudāta putamen (CP; 800 × 800µm); un mediālā preoptiskā kodola (MPN; 400 × 600 µm) (Papildu skaitļi 1 – 3). Divi posmi tika skaitīti pa apakšreģioniem, un vidējais rādītājs katram dzīvniekam grupas vidējās vērtības aprēķināšanai. OsFosB-IR šūnu seksuāli naivus un pieredzējušus grupas vidējos rādītājus salīdzināja katram apakšreģionam, izmantojot nesalīdzināmus t-testus.
ΔFosB un c-Fos analīze
Attēli tika uzņemti, izmantojot atdzesētu CCD kameru (Microfire, Optronics), kas pievienots Leica mikroskopam (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Vācija) un Neurolucida programmatūrai (MicroBrightfield Inc) ar fiksētiem kameras iestatījumiem visiem objektiem (izmantojot 10x mērķus). To šūnu skaits, kas ekspresē c-Fos-IR vai ΔFosB-IR standarta analīzes jomās NAc kodolā un apvalkā (400 × 600µm katrs; Papildu attēls 1) un mPFC ACA (600 × 800µm; Papildu attēls 3) manuāli skaitīja, veicot novērotāju, kurš bija aklēts eksperimentālajām grupām, 2 sekcijās katram dzīvniekam, izmantojot Neurolucida programmatūru (MBF Bioscience, Williston, VT) un vidēji uz vienu dzīvnieku. C-Fos vai ΔFosB šūnu grupu vidējos rādītājus salīdzināja, izmantojot divvirzienu ANOVA (faktori: seksuālā pieredze un seksuālā aktivitāte) un Fisher LSD pēcnovērtējuma salīdzināšanai ar 0.05 nozīmīguma līmeni.
Eksperiments 2: ΔFosB ekspresijas manipulācija
Vīrusu vektora mediēta gēnu pārnešana
Seksuāli naivas Sprague Dawley žurkas pēc nejaušības principa tika sadalītas grupās pirms stereotaksiskās operācijas. Visi dzīvnieki saņēma divpusējas mikroinjekcijas no rekombinanto adeno saistītu vīrusu (rAAV) vektoru, kas kodē GFP (kontrole; n = 12), savvaļas tipa ΔFosB (n = 11) vai dominējošo negatīvo ΔFosB saistošo partneri ar nosaukumu ΔJunD (n = 9) valsts pārvaldē. ΔJunD samazina AFosB mediēto transkripciju, konkurētspējīgi heterodimerizējot ar AFosB, pirms saistās AP-1 reģiona gēnu promotoros (Winstanley un citi. 2007). Vīrusa titrs tika noteikts ar qPCR un novērtēts in vivo pirms pētījuma sākuma. Titrs bija 1 – 2 × 1011 infekcijas daļiņas uz ml. rAAV vektori tika ievadīti 1.5 µL / sānu tilpumā 7 minūtēs (koordinātas: AP + 1.5, ML +/− 1.2 no Bregma; DV −7.6 no galvaskausa virsmas saskaņā ar Paxinos un Watson, 1998), izmantojot Hamilton šļirci (5µL Harvard Apparatus, Holliston, MA, ASV). Vektori neuzrāda toksicitāti, kas ir lielāka nekā tikai kontrolinfūzijām (Winstanley et al., 2007; sīkāku informāciju par AAV sagatavošanu skat Hommel et al., 2003). Uzvedības eksperimenti sākās 3 nedēļas pēc vektora injekcijām, ļaujot optimālu un stabilu vīrusu infekciju (Wallace un citi. 2008). Transgēna ekspresija peļu sugās 10 dienās un saglabājas paaugstināta vismaz 6 mēnešu laikā (Winstanley un citi. 2007). Eksperimenta beigās dzīvnieki tika transcardiāli perfūzēti un NAc sekcijas tika imunoloģiski apstrādātas GFP (1: 20K; trušu anti-GFP antivielas; Molecular Probes), izmantojot ABC-peroksidāzes-DAB reakciju (kā aprakstīts iepriekš), lai histoloģiski pārbaudīt injekcijas vietas, izmantojot GFP kā marķieri (Papildu attēls 4). AFosB un AJunD vektori satur arī segmentu, kas ekspresē GFP, atdalītu ar iekšējo ribosomu ievadīšanas vietu, ļaujot injekcijas vietas pārbaudi ar GFP vizualizāciju visos dzīvniekos. Statistiskajās analīzēs tika iekļauti tikai dzīvnieki ar injekcijas vietām un vīrusa izplatību, kas attiecās tikai uz NAc. Vīrusa izplatīšanās parasti bija tikai daļa no NAc un netika izplatīta rostral-caudally visā kodolā. Turklāt vīrusa izplatīšanās pārsvarā aprobežojās ar čaumalu vai serdi. Tomēr injekcijas vietu atšķirības un izplatīšanās NAc neietekmēja uzvedību. Visbeidzot, GFP injekcijas neietekmēja seksuālo uzvedību vai pieredzes izraisītu seksuālās uzvedības atvieglošanu, salīdzinot ar neoperācijas dzīvniekiem no iepriekšējiem pētījumiem (Balfour un citi. 2004).
Seksuālā uzvedība
Trīs nedēļas pēc vīrusu vektora piegādes, dzīvnieki, kas bija savienoti ar vienu ejakulāciju (vai 1 stundu) 4 secīgu ikdienas pārošanās sesiju laikā, lai iegūtu seksuālu pieredzi (pieredzes sesijas), un pēc tam tika pārbaudīti ilglaicīgai pieredzes veicināšanai seksuālās uzvedības atvieglošanai 1 un 2 nedēļas (testa sesijas 1 un 2) pēc pēdējās pieredzes sesijas. Visu pārošanās sesiju laikā tika aprakstīti seksuālās uzvedības parametri, kā aprakstīts iepriekš. Statistikas atšķirības attiecībā uz visiem parametriem katrā pārošanās sesijā tika salīdzinātas grupās un starp tām, izmantojot divvirzienu atkārtotus pasākumus ANOVAs (faktori: ārstēšana un pārošanās sesija) vai vienvirziena ANOVAs (ejakulācijas latentums, stiprinājumu un intromciju skaits; faktors: ārstēšana vai pārošanās) sesiju), kam seko Fisher LSD vai Newman-Keuls testi pēcnovērtējuma salīdzināšanai ar 0.05 nozīmīguma līmeni. Konkrētāk, seksuālās pieredzes veicinošo ietekmi uz pārošanās parametriem salīdzināja pieredzes sesijā 1 (naivs) un pieredzes sesijās 2, 3 vai 4, kā arī starp eksperimentālajām grupām katrā pieredzes sesijā. Turklāt, lai analizētu ārstēšanas (vektora) ietekmi uz seksuālās uzvedības ilgtermiņa atvieglošanu, pārošanās parametri tika salīdzināti starp 4 un sesijas 1 un 2 pieredzes sesijām katrā ārstēšanas grupā, un salīdzināja eksperimentālās grupas katrā testa sesijā.
REZULTĀTI
Seksuālā pieredze izraisa ΔFosB uzkrāšanos
Sākotnēji tika veikta daļēji kvantitatīva ΔFosB uzkrāšanās visā smadzenēs seksuāli pieredzējušiem vīriešiem, salīdzinot ar seksuāli naivām kontrolēm. Kopsavilkums par kopējiem konstatējumiem ir sniegts Tabula 1. FosB-IR analīze tika veikta, nosakot ΔFosB-IR šūnu skaitu vairākos ar limbiem saistītos smadzeņu reģionos, izmantojot standarta analīzes jomas. Skaitlis 1 demonstrē DAB-Ni reprezentatīvus attēlus, kas iekrāso seksuāli naivu un pieredzējušu dzīvnieku NAc. Nozīmīgs ΔFosB augšupvērsts regulējums tika atrasts mPFC apakšreģionos (Attēls 2A), NAc kodols un apvalks (2B), caudāts putamen (2B) un VTA (2C). NAc ir konstatētas būtiskas atšķirības visos galvenajos līmeņos NAc kodolā un korpusā, un dati, kas parādīti Skaitlis 2 ir vidējais līmenis visos rostro-caudal līmeņos. Turpretī ΔFosB-IR nozīmīgs pieaugums hipotalāmajā mediālajā preoptiskajā kodolā (NNS: Avg 1.8 +/− 0.26; ENS: Avg 6.0 +/− 1.86).
Seksuālā pieredze mazina pārošanās izraisīto c-Fos
Seksuālās pieredzes ietekme uz ΔFosB līmeņiem NAc tika apstiprināta, izmantojot fluorescences krāsošanas metodes. Turklāt tika analizēta seksuālās pieredzes ietekme uz c-Fos izpausmi. Skaitlis 3 demonstrē reprezentatīvus attēlus no FosB- (zaļās) un c-Fos (sarkanās) -IR šūnas visās eksperimentālajās grupās (A, NNS; B, NS; C, ENS; D, ES). Seksuālā pieredze ievērojami palielināja ΔFosB izteiksmi NAc kodolā (Attēls 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) un apvalks (Attēls 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Turpretī 1 stundu pārošanās pirms perfūzijas neietekmēja ΔFosB ekspresiju (4A, C attēls) un netika konstatēta mijiedarbība starp seksuālo pieredzi un pārošanos tieši pirms perfūzijas. Kopēja pārošanās ietekme pirms perfūzijas uz c-Fos ekspresiju gan NAc kodolā (Attēls 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) un apvalks (4D attēls: F1,15 = 39.4; p <0.001). Turklāt NAc kodolā tika atklāts seksuālās pieredzes kopējais efekts (Attēls 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) un apvalks (4D attēls: F1,15 = 1.7; p = 0.211) un NAc kodolā tika konstatēta mijiedarbība starp seksuālo pieredzi un pārošanos pirms perfūzijas (F1,15 = 6.5; p = 0.022), ar tendenci apvalkā (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Post hoc analīzes parādīja pārošanās izraisītu c-Fos izteiksmi seksuāli naivu tēviņu kodolā un čaulā (4B, D attēls). Tomēr seksuāli pieredzējušiem tēviņiem c-Fos NAc serumā būtiski nepalielinājās (Attēls 4B) un ievērojami samazināts korpusā (\ t4D attēls). Tādējādi seksuālā pieredze izraisīja pārošanās izraisītu c-Fos izteiksmes samazināšanos. P-vērtības konkrētiem pāru salīdzinājumiem ir attēla leģendās.
Seksuālās pieredzes ietekme uz pārošanās izraisītajiem c-Fos līmeņiem nebija ierobežota ar NAc. Līdzīgs c-Fos ekspresijas samazinājums tika novērots ACA seksuāli pieredzējušiem dzīvniekiem, salīdzinot ar seksuāli naivām kontrolēm. Seksuālā pieredze būtiski ietekmēja ΔFosB izteiksmi ACA (4E attēls: F1,15 = 154.2; p <0.001). Pārošanās pirms perfūzijas neietekmēja ΔFosB ekspresiju (Attēls 4C), bet ievērojami palielināja c-Fos (Attēls 4F: F1,15 = 203.4; p <0.001) ACA. Turklāt pārošanās izraisīto c-Fos ekspresiju ACA ievērojami samazināja seksuālā pieredze (Attēls 4F: F1,15 = 15.8; p = 0.001). C-Fos izteiksmei tika atklāta divpusēja mijiedarbība starp seksuālo pieredzi un pārošanos pirms perfūzijas.Attēls 4F: F1,15 = 15.1; p <0.001). Konkrētu pāru salīdzinājumu P vērtības ir figūru leģendās. Visbeidzot, pārošanās izraisītās c-Fos ekspresijas mediālajā preoptiskajā kodolā (NS: Avg 63.5 +/− 4.0; ES: Avg 41.4 +/− 10.09), apgabalā, kurā pārošanās pieredze neradīja nozīmīgu ΔFosB ekspresijas palielināšanās, kas norāda, ka pārošanās izraisītā c-Fos ekspresija netika ietekmēta visās smadzeņu zonās.
ΔFosB NAc veicina seksuālās uzvedības stiprināšanu
Lai izpētītu iespējamo molekulāro mehānismu seksuālās uzvedības nostiprināšanai, ko apliecina seksuālās uzvedības veicināšana ar pieredzi, tika konstatētas AFosB līmeņu vietējās manipulācijas un tās transkripcijas aktivitātes sekas. Seksuālajai pieredzei četru secīgo pieredzes sesiju laikā bija ievērojama ietekme uz iestāšanās latenci (Attēls 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001);Attēls 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001) un ejakulācijas latentums (Attēls 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP kontroles dzīvnieki parādīja gaidāmo pieredzi, ko izraisīja seksuālās uzvedības veicināšana, un parādīja ievērojami zemākas latentes pirmajai stiprināšanai, pirmajai intromīzijai un ejakulācijai pieredzes sesijas laikā 4, salīdzinot ar pieredzi 1 (Attēls 5A – C; skatiet attēla leģendu par p-vērtībām). Šī pieredze, ko izraisīja seksuālās uzvedības atvieglošana, tika novērota arī ΔFosB grupā, lai konstatētu aizkaru un iekļūšanu latentā, bet ejakulācijas latentumā netika konstatēta būtiska atšķirība (Attēls 5A – C). Pretstatā tam, ΔJunD dzīvnieki parādīja stunted atvieglojumu; lai gan ar atkārtotiem pārošanās sesijām nokrišņu, intromciju un ejakulāciju latentuma dēļ samazinājās, neviens no šiem parametriem nesasniedza statistisko nozīmi, salīdzinot 1 un 4 pieredzes sesijas (Attēls 5A – C). Starp grupu salīdzinājumiem katrai pieredzes sesijai, redzams, ka ΔJunD bija ievērojami garāks latentums, lai varētu uzstādīt, ienirt un ejakulēt pieredzes sesijās, salīdzinot ar ΔFosB un GFP (Attēls 5A – C). Turklāt gan seksuālajai pieredzei, gan ārstēšanai bija būtiska ietekme uz kopulācijas efektivitāti (Attēls 5F: seksuālā pieredze, F1,12 = 22.5; p <0.001; ārstēšana, F1,12 = 3.3; p = 0.049). OsFosB tēviņi pieredzes sesijas laikā 4 palielināja kopulācijas efektivitāti salīdzinājumā ar 1 pieredzi.Attēls 5F). Turklāt ΔFosB dzīvniekiem, salīdzinot ar 4 pieredzi, pieredzes sesijas dienā 1 bija ievērojami mazāk stiprinājumu pirms ejakulācijas.5D attēls: F10,43 = 4.1; p = 0.004), un ka ΔJunD tēviņiem bija ievērojami vairāk stiprinājumu pirms ejakulācijas, tādējādi ievērojami samazinot kopulācijas efektivitāti, nekā jebkura no pārējām divām grupām (5D un F attēls). Tādējādi GFP un ΔFosB dzīvnieki parādīja, ka tas veicināja seksuālās uzvedības un seksuālās darbības sākšanu, savukārt ΔJunD dzīvnieki to nedarīja.
Lai pārbaudītu hipotēzi, ka ΔFosB ekspresija ir būtiska pieredzes izraisītas seksuālās uzvedības veicināšanas ilgtermiņa izpausmei, dzīvnieki tika pārbaudīti 1 nedēļā (testa sesija 1) un 2 nedēļas (testa sesija 2) pēc pēdējās pieredzes sesijas. Patiešām, GFP un ΔFosB grupās tika saglabāta atvieglota seksuālā uzvedība, jo neviens no uzvedības parametriem neatšķīrās starp testēšanas sesijām 1 vai 2 un galīgo pieredzes sesiju 4, GFP un ΔFosB grupās (Attēls 5A – C; izņemot ejakulācijas latentumu un kopulācijas efektivitāti testa sesijā 1 ΔFosB dzīvniekiem). Abās testa sesijās tika konstatētas būtiskas atšķirības starp ΔJunD dzīvniekiem un GFP vai ΔFosB grupām attiecībā uz visiem seksuālās uzvedības parametriem (Attēls 5A – F). Starp grupām vai starp tām netika konstatētas atšķirības, salīdzinot to intrakciju skaitu, PEI vai to dzīvnieku procentuālo daļu, kuri ejakulēja (100% vīriešu visās grupās, kas ejakulētas pēdējo četru pārošanās sesiju laikā).
DISKUSIJA
Pašreizējais pētījums parādīja, ka seksuālā pieredze izraisa ΔFosB uzkrāšanos vairākos ar limbiem saistītos smadzeņu reģionos, ieskaitot NAc serdi un čaumalu, mPFC, VTA un caudate putamen. Turklāt seksuālā pieredze mazināja pārošanās izraisīto c-Fos ekspresiju NAc un ACA. Visbeidzot, tika pierādīts, ka ΔFosB NAc ir izšķirošs, veicinot pārošanās veicināšanu seksuālās pieredzes iegūšanas laikā un pieredzes izraisītas seksuālās uzvedības veicināšanas ilgtermiņa izpausmi.. Konkrētāk, samazinot ΔFosB-mediēto transkripciju, mazinājās pieredzes izraisīta seksuālās motivācijas un snieguma veicināšana, bet ΔFosB pārmērīga izpausme NAc radīja pastiprinātu seksuālās uzvedības veicināšanu, palielinot seksuālo sniegumu ar mazāku pieredzi. Kopumā pašreizējie konstatējumi apstiprina hipotēzi, ka ΔFosB ir kritisks molekulārais starpnieks ilglaicīgai neirālai un uzvedības plastikai, ko izraisa seksuālā pieredze.
Pašreizējie atklājumi paplašina iepriekšējos pētījumus, kas liecina par seksuālās pieredzes izraisītu ΔFosB radīšanu NAc žurkām (Wallace un citi. 2008) un sievietes kāmji (Riska ierobežošana un citi. 2009). Wallace et al. (2008) parādīja, ka rAAV-ΔFosB pārmērīga ekspresija NAc pastiprināja seksuāli naidīgu dzīvnieku seksuālo uzvedību pirmajā pārošanās sesijā, par ko liecina mazāk intradiju ejakulācijai un īsāki pēcdzemdību intervāli, bet tiem nebija ietekmes seksuāli pieredzējušiem vīriešiem (Wallace un citi. 2008).
Turpretī pašreizējā pētījumā netika konstatēta ΔFosB pārmērīgas izpausmes ietekme uz seksuāli naiviem vīriešiem pirmā testa laikā, bet gan seksuālās pieredzes iegūšanas laikā un pēc tam. ΔFosB pārproduktori parādīja paaugstinātu seksuālo sniegumu (palielinātu kopulācijas efektivitāti), salīdzinot ar GFP dzīvniekiem.
Turklāt pašreizējā pētījumā tika pārbaudīta ΔFosB loma, bloķējot ΔFosB-mediēto transkripciju, izmantojot AJunD ekspresējošu vīrusu vektoru. Pieredzes izraisītā ΔFosB ekspresijas pieauguma novēršana kavēja pieredzes izraisītu seksuālās motivācijas atvieglošanu (palielinātu mount un intromission latences), kā arī seksuālo sniegumu (palielinātu ejakulācijas latentumu un stiprinājumu skaitu) un sekojošu ilgstošu izteiktas seksuālās uzvedības izpausmi.
Tādējādi šie dati ir pirmie, kas norāda uz obligātu ΔFosB lomu pieredzes izraisītas seksuālās uzvedības veicināšanā. Turklāt šie dati rāda, ka ΔFosB ir arī kritiski iesaistīts pieredzes izraisītās atvieglotās uzvedības ilgtermiņa izpausmē. Mēs iesakām, ka šī ilgstošā atvieglotās uzvedības izpausme ir atmiņas forma dabiskai atlīdzībai, tāpēc ΔFosB NAc ir atalgojuma atmiņas starpnieks. Seksuālā pieredze arī palielināja ΔFosB līmeņus VTA un mPFC, jomās, kas saistītas ar atalgojumu un atmiņu (Balfour un citi. 2004; Filipss un citi. 2008). Turpmākie pētījumi ir nepieciešami, lai noskaidrotu ΔFosB regulēšanas potenciālo nozīmi šajās jomās atalgojuma atmiņā.
ΔFosB ekspresija ir ļoti stabila, tādējādi tai ir liels potenciāls kā molekulārais starpnieks pastāvīgām smadzeņu adaptācijām pēc hroniskām perturbācijām (Nestler un citi. 2001). Ir pierādīts, ka ΔFosB NAc pakāpeniski palielinās vairākās kokaīna injekcijās un saglabājas līdz pat vairākām nedēļām (Cerēt un citi. 1992; Cerēt un citi. 1994). Šīs izmaiņas NAc ΔFosB ekspresijā ir saistītas ar jutīguma paaugstināšanu un atkarību no narkotikām (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung un citi. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler un citi. 2001; Zachariou un citi. 2006). Turpretī ΔFosB loma dabiskās atlīdzības starpniecībā ir nepietiekama. Pēdējie pierādījumi liecina, ka ΔFosB indukcija NAc ir saistīta ar dabisku atlīdzību. ΔFosB līmeņi līdzīgi saharozes patēriņam un riteņiem darbojas līdzīgi kā NAc. ΔFosB pārmērīga ekspresija striatumā, izmantojot žurkām, kas satur transgēnus, vai vīrusu vektori, palielina saharozes patēriņu, pastiprināta pārtikas motivācija un palielināts spontānais ritenis (Olausson un citi. 2006; Wallace un citi. 2008; Werme un citi. 2002). Pašreizējie dati būtiski papildina šos ziņojumus un vēl vairāk atbalsta domu, ka ΔFosB ir kritisks starpnieks atlīdzības pastiprināšanai un dabiskai atalgojuma atmiņai.
ΔFosB var mediēt pieredzes izraisītu seksuālās uzvedības pastiprināšanos ar plastiskuma indukciju mezolimbiskajā sistēmā. Patiešām, seksuālā pieredze izraisa vairākas ilgstošas izmaiņas mezolimbiskajā sistēmā (Bredlijs un Meisels 2001; Frohmader un citi. 2009; Krūzes un citi. 2010). seksuāli pieredzējušiem vīriešu kārtas žurkām ir pierādīts uzvedības līmenis, jutīga lokomotoriska reakcija uz amfetamīnu un paaugstināts amfetamīna līmenis.Krūzes un citi. 2010); sievietes kāmji ir novērojuši arī mainītu lokomotorisko reakciju uz amfetamīnu (\ tBredlijs un Meisels 2001). Turklāt, pēc abstinences perioda, sākot no seksuālās pieredzes vīriešu kārtas žurku tēviņiem, tika konstatēts dendritisko muguriņu skaita pieaugums un dendritisko rokturu sarežģītība.Krūzes un citi. 2010). Pašreizējais pētījums liecina, ka ΔFosB var būt specifisks seksuālās pieredzes ilgtermiņa rezultātu mediators. Piekrītot, ΔFosB nesen ir pierādīts, ka tas ir būtisks, lai izraisītu dendritisku mugurkaula izmaiņas, reaģējot uz hronisku kokaīna lietošanu. (Dietz un citi. 2009; Labirints un citi. 2010).
Nav skaidrs, kurš augšupējais neirotransmiters (-i) ir atbildīgs (-i) par ΔFosB izraisīšanu NAc, bet DA ir ierosināts kā kandidāts (Nye un citi. 1995). Faktiski visas ļaunprātīgas lietošanas narkotikas, tostarp kokaīns, amfetamīns, opiāti, kannabinoīdi un etanols, kā arī dabiskie ieguvumi, palielina ΔFosB NAc. (Perrotti un citi. 2005; Wallace un citi. 2008; Werme un citi. 2002). Abas ļaunprātīgas izmantošanas un dabas atlīdzības narkotikas palielina sinaptisko DA koncentrāciju NAc (Damsma un citi. 1992; Ernandess un Hēbels 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). DA receptoru saturošu šūnu βFosB inducēšana ar narkotikām ir pierādīta, un kokaīna izraisītais ΔFosB tiek bloķēts ar D1 DA receptoru antagonistu.t (Nye un citi. 1995). Līdz ar to DA izpausme ir hipotētiska, lai stimulētu ΔFosB ekspresiju un līdz ar to mediētu ar atalgojumu saistītu neiroplastiku. Turpinot atbalstīt domu, ka ΔFosB līmeņi ir atkarīgi no DA, ir secinājums, ka smadzeņu apgabali, kuros seksuālā pieredze mainīja ΔFosB līmeņus, saņem spēcīgu dopamīnerģisku ievadi no VTA, ieskaitot mediālo prefrontālo garozu un basolaterālo amygdalu.
Tomēr, pretēji, ΔFosB nav palielināts mediālajā preoptiskajā zonā, pat ja šī zona saņem dopamīnerģisku ievadi, lai gan no hipotalāmajiem avotiem (Millers un Lonšteins 2009). Turpmākie pētījumi ir nepieciešami, lai pārbaudītu, vai pārošanās izraisītā ΔFosB izpausme un seksuālās pieredzes ietekme uz seksuālo motivāciju un sniegumu ir atkarīga no DA darbības. DA loma seksuālā atlīdzībā vīriešu kārtas žurkām pašlaik nav pilnīgi skaidra (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Ir pietiekami daudz pierādījumu tam, ka DA tiek izlaists NAc sievietes vai pārošanās laikā (Damsma un citi. 1992) un DA neironi tiek aktivizēti seksuālās uzvedības laikā (Balfour un citi. 2004). Tomēr DA receptoru antagonistu sistēmiskas injekcijas neizslēdz seksuālas atlīdzības izraisītu nosacītu vietu izvēli (Agmo & Berenfeld 1990) un hipotēze, ka DA ir būtiska pieredzes izraisītā pārošanās pastiprināšana, nav pārbaudīta.
Nav arī skaidrs, kādi ir pakārtotie ΔFosB mediatori attiecībā uz seksuālo uzvedību. Ir pierādīts, ka ΔFosB darbojas kā transkripcijas aktivators un repressors, izmantojot AP-1 atkarīgu mehānismu (McClung & Nestler 2003; Peakman un citi. 2003). Ir identificēti vairāki mērķa gēni, ieskaitot tūlītēju agrīnu gēnu c-fos (Cerēt un citi. 1992; Cerēt un citi. 1994; Morgans un Kurans 1989; Renthal un citi. 2008; Džan un citi. 2006), cdk5 (Bibb un citi. 2001), dinorfīns (Zachariou un citi. 2006), sirtuin-1 (Renthal un citi. 2009), NFKB apakšvienības (Ang un citi. 2001) Noun AMPA glutamāta receptoru GluR2 apakšvienība (Kelz un citi. 1999). Pašreizējie rezultāti rāda, ka pārošanās izraisītie c-Fos līmeņi tika samazināti ar seksuālo pieredzi smadzeņu apgabalos ar palielinātu ΔFosB (NAc un ACA). C-Fos nomākšana ir atkarīga no perioda kopš pēdējās pārošanās un atkārtotās pārošanās sesijas, kā iepriekšējos pētījumos, šāds c-Fos samazinājums netika konstatēts žurku tēviņiem, kuri tika pārbaudīti 1 nedēļā pēc pēdējās pārošanās sesijas (Balfour un citi. 2004) vai pēc seksuālas pieredzes, kas sastāv tikai no viena pārošanās \ tLopesa un Ettenberga 2002. gads). Turklāt pašreizējais konstatējums atbilst pierādījumiem, ka ΔFosB pēc hroniskas amfetamīna iedarbības apspiež c-fos gēnu.Renthal un citi. 2008). Saskaņā ar šiem konstatējumiem vairāku tūlītēju agrīnu gēnu mRNS (c-fos, fosB, c-jun, junB un zif268) indukcija tika samazināta pēc atkārtotām kokaīna injekcijām, salīdzinot ar akūtām zāļu injekcijām (Cerēt un citi. 1992; Cerēt un citi. 1994) un amfetamīna izraisītais c-fos tika nomākts pēc hroniskas amfetamīna lietošanas pārtraukšanas (\ tJaber un citi. 1995; Renthal un citi. 2008). C-Fos izpausmes regulēšanas funkcionālā nozīme pēc hroniskas narkotiku ārstēšanas vai seksuālās pieredzes joprojām ir neskaidra, un ir ierosināts, ka tas ir svarīgs homeostatisks mehānisms, kas regulē dzīvnieka jutīgumu pret atkārtotu atalgojuma iedarbību (Renthal un citi. 2008).
Nobeigumā, pašreizējais pētījums parāda, ka ΔFosB NAc spēlē neatņemamu lomu seksuālās atalgojuma atmiņā, atbalstot iespēju, ka ΔFosB ir svarīga vispārējai atalgojuma pastiprināšanai un atmiņai.. Pašreizējā pētījuma rezultāti vēl vairāk izskaidro mūsu izpratni par šūnu un molekulārajiem mehānismiem, kas veicina seksuālu atalgojumu un motivāciju, un pievienot literatūras kopai, kas parāda, ka ΔFosB ir svarīgs atkarības attīstības dalībnieks, demonstrējot ΔFosB lomu dabīgā atlīdzībā pastiprināšana.
Pateicības
Šo pētījumu atbalstīja Kanādas Veselības pētniecības institūtu dotācijas LMC, Nacionālajam garīgās veselības institūtam, kā arī Kanādas Dabas zinātņu un inženierzinātņu padomei KKP un LMC.
ATSAUCES
- Agmo A. Vīriešu žurkas seksuālā uzvedība. Brain Res Brain Res Protoc. 1997: 1: 203 – 209. [PubMed]
- Agmo A, Berenfeld R. Ejakulācijas stiprināšana vīriešu kārtas žurkām: opioīdu un dopamīna loma. Behav Neurosci. 1990: 104: 177 – 182. [PubMed]
- Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Kodola faktoru-kappaB indukcija kodolkrāsās ar hronisku kokaīna lietošanu. J Neurochem. 2001: 79: 221 – 224. [PubMed]
- Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksuāla uzvedība un ar dzimumu saistīti vides norādījumi aktivizē mesolimbisko sistēmu žurku tēviņiem. Neiropsihofarmakoloģija. 2004: 29: 718 – 730. [PubMed]
- Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Kroniskās iedarbības ietekmi uz kokaīnu regulē neironu proteīns Cdk5. Daba. 2001: 410: 376 – 380. [PubMed]
- Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hidroksidopamīna bojājumi sievietes kāmjiem (Mesocricetus auratus) atceļ seksuālās pieredzes jutīgo ietekmi uz kopulējošām mijiedarbībām ar vīriešiem. Behav Neurosci. 2005: 119: 224 – 232. [PubMed]
- Bradley KC, Meisel RL. C-Fos seksuālās uzvedības inducēšana kodolā un amfetamīna stimulētā lokomotoriskā aktivitāte ir jūtama pret iepriekšējo seksuālo pieredzi sieviešu sīriešu kāmjiem. J Neurosci. 2001: 21: 2123 – 2130. [PubMed]
- Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. FosB destabilizācijas proteasomu atkarīgie un neatkarīgie mehānismi: FosB degronu domēnu identifikācija un ietekme uz DeltaFosB stabilitāti. Eur J Neurosci. 2007: 25: 3009 – 3019. [PubMed]
- Chao J, Nestler EJ. Narkotiku atkarības molekulārā neirobioloģija. Annu Rev Med. 2004: 55: 113 – 132. [PubMed]
- Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Delta FosB un FosB līdzīgo proteīnu regulēšana ar elektrokonvulsīvo krampju un kokaīna terapiju. Molekulārā farmakoloģija. 1995: 48: 880 – 889. [PubMed]
- Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. DeltaFosB pārmērīga ekspresija uz striatālu šūnu tipa specifiku palielina kokaīna stimulēšanu. J Neurosci. 2003: 23: 2488 – 2493. [PubMed]
- Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Ejakulācijas centrālais regulējums. Physiol Behav. 2004: 83: 203 – 215. [PubMed]
- Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Seksuālā uzvedība palielina dopamīna transmisiju tēviņiem un vīriešu kārtas žurkām: salīdzinājums ar jaunumu un lokomotīvi. Behav Neurosci. 1992: 106: 181 – 191. [PubMed]
- Dietz DM, Maze I, Mechanic M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. ΔFosB būtiska loma kokaīna dendrītu muguriņu kokaīna regulēšanā. Neiroloģijas biedrība. 2009
- Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Jaukšanas sajūtas: pārskats par narkotiku ietekmi uz seksuālo uzvedību cilvēkiem un dzīvnieku modeļiem. Horm Behav. 2009 Presē.
- Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB pārmērīga ekspresija kodolā accumbens uzlabo seksuālo atalgojumu sieviešu sīriešu kāmjiem. Gēni Brena prāts. 2009: 8: 442 – 449. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Hernandez L, Hoebel BG. Barošana un hipotalāma stimulācija palielina dopamīna apgrozījumu aknās. Physiol Behav. 1988a: 44: 599 – 606. [PubMed]
- Hernandez L, Hoebel BG. Pārtikas atlīdzība un kokaīns palielina ekstracelulāro dopamīnu kodolkrāsās, mērot ar mikrodialīzi. Dzīve Sci. 1988b; 42: 1705 – 1712. [PubMed]
- Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. FosB gēna būtiskā loma hronisku elektrokonvulsīvu krampju molekulārajās, šūnu un uzvedības aktivitātēs. J Neurosci. 1998: 18: 6952 – 6962. [PubMed]
- Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Vietējais gēnu nokļūšana smadzenēs, izmantojot vīrusu mediētu RNS traucējumus. Nat Med. 2003: 9: 1539 – 1544. [PubMed]
- Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Tūlītēja agrīna gēnu ekspresijas regulēšana un AP-1 saistīšanās ar žurku kodolu accumbens ar hronisku kokaīnu. Proc Natl Acad Sci US A. 1992, 89: 5764 – 5768. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Ilgstoša AP-1 kompleksa, kas sastāv no mainītiem Fos līdzīgiem proteīniem smadzenēs, indukcija ar hronisku kokaīnu un citām hroniskām procedūrām. Neirons. 1994: 13: 1235 – 1244. [PubMed]
- Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Vīriešu seksuālā uzvedība. Horm Behav. 2002: 1: 1 – 139.
- Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Akūtas un hroniskas amfetamīna terapijas atšķirīgi regulē neiropeptīdu ziņotāja RNS līmeni un Fos imūnreaktivitāti žurku striatāla neironos. Neirozinātne. 1995: 65: 1041 – 1050. [PubMed]
- Jenkins WJ, Becker JB. Dopamīna dinamiskais pieaugums paced kopulācijas laikā žurku mātītēm. Eur J Neurosci. 2003: 18: 1997 – 2001. [PubMed]
- Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Transkripcijas faktora deltaFosB ekspresija smadzenēs kontrolē jutību pret kokaīnu. Daba. 1999: 401: 272 – 276. [PubMed]
- Lopez HH, Ettenberg A. Ekspozīcija ar žurku mātītēm rada atšķirības c-fos indukcijā starp seksuāli nezināmiem un pieredzējušiem žurku tēviņiem. Brain Res. 2002: 947: 57 – 66. [PubMed]
- Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Histona metiltransferāzes G9a būtiska loma kokaīna izraisītā plastiskumā. Zinātne. 2010: 327: 213 – 216. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- McClung CA, Nestler EJ. Gēnu ekspresijas un kokaīna atlīdzības regulēšana ar CREB un DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003: 6: 1208 – 1215. [PubMed]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: molekulārs slēdzis ilgstošai adaptācijai smadzenēs. Brain Res Mol Brain Res. 2004: 132: 146 – 154. [PubMed]
- Miller SM, Lonstein JS. Dopamīnerģiskās projekcijas pēcdzemdību žurku mediālajā priekšplānā. Neirozinātne. 2009: 159: 1384 – 1396. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkripcijas savienojums neironos: šūnu tūlītēju agrīnu gēnu loma. Tendences Neurosci. 1989: 12: 459 – 462. [PubMed]
- Nestler EJ. Narkomānijas molekulārie mehānismi. Neirofarmakoloģija. 2004; 47 Suppl 1: 24 – 32. [PubMed]
- Nestler EJ. Kokaīna atkarības neirobioloģija. Sci Practic Perspect. 2005: 3: 4 – 10. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Nestler EJ. Pārskatīšana. Atkarības transkripcijas mehānismi: DeltaFosB loma. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008: 363: 3245 – 3255. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: ilgstoša molekulārais slēdzis atkarībai. Proc Natl Acad Sci US A. 2001, 98: 11042 – 11046. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakoloģiskie pētījumi par hroniska FOS saistītā antigēna indukcijas ar kokainu regulēšanu striatumā un kodolskaldnē. J Pharmacol Exp Ther. 1995: 275: 1671 – 1680. [PubMed]
- Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB kodolā accumbens regulē pastiprinātu instrumentālo uzvedību un motivāciju. J Neurosci. 2006: 26: 9196 – 9204. [PubMed]
- Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, krājumi JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducible, smadzeņu specifiskā c-Jun dominējošā negatīvā mutanta ekspresija transgēnās pelēs samazina jutību pret kokaīnu. Brain Res. 2003: 970: 73 – 86. [PubMed]
- Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB uzkrājas GABAerg šūnu populācijā vēdera tegmentālās zonas aizmugurējā asti pēc psihostimulanta ārstēšanas. Eur J Neurosci. 2005: 21: 2817 – 2824. [PubMed]
- Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. DeltaFosB indukcija ar smadzenēm saistītajās smadzeņu struktūrās pēc hroniska stresa. J Neurosci. 2004: 24: 10594 – 10602. [PubMed]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB indukcijas smadzenēs atšķiras no ļaunprātīgas narkotikas. Sinapse. 2008: 62: 358 – 369. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Pfaus JG. Seksuālās vēlmes ceļi. J Sex Med. 2009: 6: 1506 – 1533. [PubMed]
- Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Kondicionēšana un seksuālā uzvedība: pārskats. Horm Behav. 2001: 40: 291 – 321. [PubMed]
- Phillips AG, Vacca G, Ahn S. No augšas uz leju skats uz dopamīnu, motivāciju un atmiņu. Pharmacol Biochem Behav. 2008: 90: 236 – 249. [PubMed]
- Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neiroplastiskums mesolimbiskajā sistēmā, ko izraisa dabiska atlīdzība un turpmāka atalgojuma atturēšanās. Biol Psihiatrija. 2010: 67: 872 – 879. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB mediē c-fos gēna epigenetisko desensibilizāciju pēc hroniskas amfetamīna iedarbības. J Neurosci. 2008: 28: 7344 – 7349. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Ar kokaīnu saistītā hromatīna regulējuma genoma mēroga analīze atklāj sirtuīnu lomu. Neirons. 2009: 62: 335 – 348. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksuāla atlīdzība žurku tēviņiem: seksuālās pieredzes ietekme uz sasaistīto vietu izvēli, kas saistīta ar ejakulāciju un intromations. Horm Behav. 2009: 55: 93 – 97. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. DeltaFosB fosforilācija nodrošina tā stabilitāti in vivo. Neirozinātne. 2008
- Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. DeltaFosB stabilitātes regulēšana ar fosforilēšanu. J Neurosci. 2006: 26: 5131 – 5142. [PubMed]
- Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. DeltaFosB ietekme uz kodoliem ir saistīta ar dabisku atalgojumu. J Neurosci. 2008: 28: 10272 – 10277. [PMC bezmaksas raksts] [PubMed]
- Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB regulē riteņu darbību. J Neurosci. 2002: 22: 8133 – 8138. [PubMed]
- Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB indukcija orbitofrontālajā garozā mediē toleranci pret kokaīna izraisītu kognitīvo disfunkciju. J Neurosci. 2007: 27: 10497 – 10507. [PubMed]
- Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. DeltaFosB būtiska loma morfīna iedarbības kodolā. Nat Neurosci. 2006: 9: 205 – 211. [PubMed]
- Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos veicina kokaīna izraisītu pastāvīgu izmaiņu iegūšanu un izzušanu. J Neurosci. 2006: 26: 13287 – 13296. [PubMed]