ന്യൂക്ലിയസ് അംബുംബനുകളിൽ ഓപോയോയ്ഡിലും കന്നബിനൈഡ് റിസപ്റ്ററിലും മധ്യേയുള്ള സിഗ്നലിങ്ങിനുള്ള ΔFOSB അമിതഭീതിയുടെ ഫലനം (2011)

ന്യൂറോഫാർമാളോളജി. 2011 Dec;61(8):1470-6. doi: 10.1016/j.neuropharm.2011.08.046.

സിം-ശെൽലി എൽജെ, കാസിഡി എം.പി., സ്പാർട്ട എ, സക്കറിയാവു വി, നെസ്റ്റ്ലർ ഇജെ, സെല്ലി ഡീ.

ഉറവിടം

ഡിപ്പാർട്ട്മെന്റ് ഓഫ് ഫാർമക്കോളജി ആൻഡ് ടോക്സിക്കോളജി ആൻഡ് ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഫോർ ഡ്രഗ് ആൻഡ് ആൽക്കഹോൾ സ്റ്റഡീസ്, വിർജീനിയ കോമൺ‌വെൽത്ത് യൂണിവേഴ്സിറ്റി സ്കൂൾ ഓഫ് മെഡിസിൻ, റിച്ച്മണ്ട്, വി‌എ എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്, യുഎസ്എ.

വേര്പെട്ടുനില്ക്കുന്ന

സ്ഥിരമായ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം osFosB ന്യൂക്ലിയസ് അക്കുമ്പെൻസിൽ (എൻ‌എസി) പ്രചോദിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു, ഇത് നിരവധി ദുരുപയോഗ മരുന്നുകളിലേക്ക് വിട്ടുമാറാത്ത എക്സ്പോഷർ ചെയ്യുന്നു, കൂടാതെ സ്ട്രൈറ്റത്തിലെ os ഫോസ്ബിയുടെ ട്രാൻസ്ജെനിക് എക്സ്പ്രഷൻ മോർഫിൻ, കൊക്കെയ്ൻ എന്നിവയുടെ പ്രതിഫലദായകമായ ഗുണങ്ങളെ വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നുe. എന്നിരുന്നാലും, ഈ നിരീക്ഷണങ്ങളുടെ യാന്ത്രിക അടിസ്ഥാനം അപൂർണ്ണമായി മനസ്സിലാക്കുന്നു. ΔFosB in ന്റെ ഇൻ‌ഡ്യൂസിബിൾ എക്‌സ്‌പ്രഷനോടുകൂടിയ ഒരു ബിട്രാൻസ്ജെനിക് മ mouse സ് മോഡൽ ഞങ്ങൾ ഉപയോഗിച്ചു ഡോപ്പാമൻ എൻ‌എസിയിലെ ഒപിയോയിഡ്, കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ സിഗ്നലിംഗിൽ os ഫോസ് എക്സ്പ്രഷന്റെ പ്രഭാവം നിർണ്ണയിക്കാൻ ഡി (എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്) റിസപ്റ്റർ / ഡൈനോർഫിൻ അടങ്ങിയ സ്ട്രൈറ്റൽ ന്യൂറോണുകൾ. O ഫോസ്ബി പ്രകടിപ്പിച്ച എലികളുടെ എൻ‌എസിയിൽ മ്യു ഒപിയോയിഡ്-മെഡിയേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ പ്രവർത്തനവും അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ തടസ്സവും വർദ്ധിപ്പിച്ചതായി ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു. അതുപോലെ, adFosB എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് എലികളിൽ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ കപ്പ ഒപിയോയിഡ് തടയൽ വർദ്ധിപ്പിച്ചു. ഇതിനു വിപരീതമായി, കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ-മെഡിറ്റേറ്റഡ് സിഗ്നലിംഗ് എലികളെ അമിതമായി എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് os ഫോസ്ബിയും നിയന്ത്രണ എലികളും തമ്മിൽ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നില്ല. Tഒപിയോയിഡും കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ സിഗ്നലിംഗും osFosB ന്റെ ആവിഷ്കാരത്താൽ വ്യത്യസ്തമായി മോഡുലേറ്റ് ചെയ്യപ്പെടുന്നുവെന്നും ഈ കണ്ടെത്തലുകൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത്, എൻ‌എസിയിലെ മെച്ചപ്പെടുത്തിയ mu, kappa opioid receptor സിഗ്നലിംഗ് വഴി osFosB എക്സ്പ്രഷൻ അതിന്റെ ചില ഫലങ്ങൾ ഉളവാക്കിയേക്കാമെന്നും സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

അടയാളവാക്കുകൾ: ജി-പ്രോട്ടീൻ, അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ്, സ്ട്രിയാറ്റം
പോവുക:

1. അവതാരിക

ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകളും കന്നാബിനോയിഡ് സിബിയും1 റിസപ്റ്ററുകൾ (സിബി1R) വ്യാപകമായി ഉപയോഗിക്കുന്ന രണ്ട് മയക്കുമരുന്ന് ക്ലാസുകളുടെ ന്യൂറോബയോളജിക്കൽ ടാർഗെറ്റുകളാണ്, അതിൽ മോർഫിൻ, ഹെറോയിൻ, കുറിപ്പടി ഒപിയോയിഡുകൾ, മരിജുവാന (9-ടെട്രാഹൈഡ്രോകന്നാബിനോൾ (ടിഎച്ച്സി)). ഒപിയോയിഡുകളുടെയും കന്നാബിനോയിഡുകളുടെയും രൂക്ഷമായ ഫലങ്ങൾ പ്രാഥമികമായി ജി സജീവമാക്കുന്ന ജി-പ്രോട്ടീൻ-കൂപ്പിൾഡ് റിസപ്റ്ററുകളാണ്.i / o പ്രോട്ടീനുകളും അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ തടസ്സം പോലുള്ള ഡ st ൺസ്ട്രീം എഫെക്റ്റർ പ്രതികരണങ്ങളും ഉണ്ടാക്കുന്നു (ചിൽ‌ഡേഴ്സ്, 1991, ചിൽ‌ഡേഴ്സ്, മറ്റുള്ളവ, 1992, ഹൗലെറ്റ്, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്). മോട്ടോർ, മെമ്മറി വൈകല്യവും സൈക്കോ ആക്റ്റീവ് ഇഫക്റ്റുകളും9-ടിഎച്ച്സി നിർമ്മിക്കുന്നത് സി.ബി.1R (ഹ്യൂസ്റ്റിസ്, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്, സിമ്മർ, മറ്റുള്ളവർ, 1999), തലച്ചോറിൽ വ്യാപകമായി വിതരണം ചെയ്യപ്പെടുന്നു, ബാസൽ ഗാംഗ്ലിയ, ഹിപ്പോകാമ്പസ്, സെറിബെല്ലം എന്നിവയിൽ ഉയർന്ന തോതിൽ (ഹെർക്കൻഹാം, മറ്റുള്ളവർ, 1991). ക്ലിനിക്കലി പ്രസക്തവും ദുരുപയോഗം ചെയ്യപ്പെടുന്നതുമായ ഒപിയോയിഡ് മരുന്നുകളുടെ വേദനസംഹാരിയും പ്രതിഫലദായകവുമായ ഫലങ്ങൾ പ്രധാനമായും മ്യു ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകൾ (MOR) ആണ്.മാത്യൂസ്, മറ്റുള്ളവ, 1996), അവ ലിംബിക് സിസ്റ്റത്തിലും മസ്തിഷ്കവ്യവസ്ഥയിലും സമ്പുഷ്ടമാണ് (മൻസൂർ, മറ്റുള്ളവർ, 1994). വെൻട്രൽ ടെഗ്‌മെന്റൽ ഏരിയ (വിടിഎ) മുതൽ ന്യൂക്ലിയസ് അക്കുമ്പെൻസ് (എൻ‌എസി) വരെയുള്ള ഡോപാമിനേർജിക് പ്രൊജക്ഷനുകൾ ഉൾക്കൊള്ളുന്ന മെസോലിംബിക് സിസ്റ്റം, ഒപിയോയിഡുകളുടെയും കന്നാബിനോയിഡുകളുടെയും പ്രതിഫലദായക ഫലങ്ങളിൽ ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നു (ബോസാർത്തും വൈസും, 1984, Vaccarino, et al., 1985, സാങ്കെൻ, മറ്റുള്ളവർ, 2006), അതുപോലെ മറ്റ് ദുരുപയോഗ മരുന്നുകളും (കോബ് ആൻഡ് വോൾക്കോ, 2010). മാത്രമല്ല, ഒന്നിലധികം ക്ലാസ് സൈക്കോ ആക്റ്റീവ് മരുന്നുകളുടെ പ്രതിഫലദായകമായ ഫലങ്ങളിൽ എൻ‌ഡോജെനസ് ഒപിയോയിഡ്, കന്നാബിനോയിഡ് സംവിധാനങ്ങൾ ഉൾപ്പെടുന്നു (മാൽഡൊണാഡോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006, ട്രിഗോ, മറ്റുള്ളവ, 2010). അതിനാൽ, ഒപിയോയിഡും സിബിയും ഉപയോഗിച്ച് മെക്കാനിസങ്ങൾ വ്യക്തമാക്കുന്നത് പ്രധാനമാണ്1ആർ‌ സിഗ്നലിംഗ് എൻ‌എ‌സിയിൽ‌ നിയന്ത്രിച്ചിരിക്കുന്നു.

സൈക്കോ ആക്റ്റീവ് മരുന്നുകളുടെ നിശിതത്തിൽ നിന്ന് ദീർഘകാലത്തേയ്ക്കുള്ള പരിവർത്തനത്തിന് മധ്യസ്ഥത വഹിക്കുന്ന പ്രോട്ടീനുകളെ തിരിച്ചറിയുക എന്നതാണ് മയക്കുമരുന്ന് ദുരുപയോഗ മേഖലയിലെ ഒരു പ്രധാന ചോദ്യം. AP-1 ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഘടകം osFosB പ്രത്യേകിച്ചും രസകരമാണ്, കാരണം ഇത് സ്ഥിരമായ വെട്ടിച്ചുരുക്കിയ സ്പ്ലൈസ് വേരിയൻറ് ഉൽപ്പന്നമാണ് fosb ദുരുപയോഗം അല്ലെങ്കിൽ പ്രകൃതിദത്ത പ്രതിഫലങ്ങൾ എന്നിവ ആവർത്തിച്ച് തുറന്നുകാണിക്കുന്ന ജീൻ (മക്ക്ലംഗ്, മറ്റുള്ളവർ, 2004, നെസ്റ്റ്ലർ, 2008, നെസ്‌ലർ, മറ്റുള്ളവർ, 1999). മോർഫിൻ ആവർത്തിച്ച് എക്സ്പോഷർ ചെയ്തതിനെത്തുടർന്ന് Δ ഫോസ്ബി തലച്ചോറിൽ പ്രചോദിപ്പിക്കപ്പെടുന്നുവെന്ന് ഞങ്ങൾ കണ്ടെത്തി9-ടിഎച്ച്സി, കൊക്കെയ്ൻ അല്ലെങ്കിൽ എത്തനോൾ, ഓരോ മരുന്നും ΔFosB എക്സ്പ്രഷന്റെ സവിശേഷമായ പ്രാദേശിക പാറ്റേൺ ഉൽ‌പാദിപ്പിക്കുന്നു (പെറോട്ടി, മറ്റുള്ളവർ, 2008). മയക്കുമരുന്നുകളിലുടനീളം സ്ഥിരമായ ഒരു കണ്ടെത്തൽ, സ്ട്രിയാറ്റത്തിൽ os ഫോസ്ബി വളരെയധികം പ്രചോദിപ്പിക്കപ്പെട്ടു, അവിടെ നാല് മരുന്നുകളും എൻ‌എസി കോറിൽ os ഫോസ്ബിയെ പ്രേരിപ്പിച്ചു, ഒഴികെ എല്ലാം9-എൻ‌എസി ഷെല്ലിലും കോഡേറ്റ്-പുട്ടമെനിലും എ‌ച്ച്‌ടി‌സി ഗണ്യമായി പ്രചോദനം പ്രകടിപ്പിച്ചു.

ഫാർമക്കോളജിക്കൽ പഠനങ്ങൾ കാണിക്കുന്നത് ഡോപാമൈൻ ഡിയുടെ കോ-അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ1 റിസപ്റ്റർ (ഡി1R) എതിരാളിയായ SCH 23390, NAc, caudate-putamen എന്നിവയിലെ osFosB ഇൻഡക്ഷൻ ഇടയ്ക്കിടെയുള്ള കൊക്കെയ്ൻ അല്ലെങ്കിൽ മോർഫിൻ അഡ്മിനിസ്ട്രേഷനെ തുടർന്ന് തടഞ്ഞു, ഇത് D യുടെ സാധ്യതയുള്ള പ്രാധാന്യം സൂചിപ്പിക്കുന്നു1ആർ പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ന്യൂറോണുകൾ (മുല്ലർ ആൻഡ് അൺറ്റർവാൾഡ്, 2005, Nye, et al., 1995). മയക്കുമരുന്ന്-മെഡിറ്റേറ്റഡ് ബിഹേവിയറുകളിൽ osFosB ഇൻഡക്ഷന്റെ സ്വാധീനം എൻ‌എസി, ഡോർസൽ സ്ട്രിയാറ്റം എന്നിവയുടെ പ്രത്യേക ന്യൂറോണൽ പോപ്പുലേഷനിൽ osFosB പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികൾ ഉപയോഗിച്ച് അന്വേഷിച്ചു.ചെൻ, മറ്റുള്ളവർ, 1998). ഡൈനോർഫിൻ / ഡിയിൽ osFosB പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന എലികൾ1NAc, Dorsal striatum (ലൈൻ 11A) എന്നിവയിലെ R പോസിറ്റീവ് ന്യൂറോണുകൾ ദുരുപയോഗ മരുന്നുകളോട് മാറ്റം വരുത്തിയ പ്രതികരണങ്ങൾ കാണിക്കുന്നു, പ്രത്യേകിച്ച് കൊക്കെയ്ൻ അല്ലെങ്കിൽ മോർഫിൻ എന്നിവയുടെ പ്രതിഫലദായകമായ ഫലങ്ങളോടുള്ള വർദ്ധിച്ച സംവേദനക്ഷമത (കോൾ‌ബി, മറ്റുള്ളവ, 2003, കെൽസ്, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്, സക്കറിയോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006). MOR അല്ലെങ്കിൽ വിവിധ ജി-പ്രോട്ടീൻ സബ്‌യൂണിറ്റുകളുടെ അളവിലുള്ള മാറ്റങ്ങളുടെ അഭാവത്തിലാണ് ഈ മാറ്റങ്ങൾ സംഭവിച്ചത്. എന്നിരുന്നാലും, osFosB എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് എലികളുടെ എൻ‌എസിയിൽ ഡൈനോർഫിൻ എം‌ആർ‌എൻ‌എ അളവ് കുറച്ചിട്ടുണ്ട് (സക്കറിയോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006), os ഫോസ്ബിയുടെ ഒരു ടാർഗെറ്റ് ഒരു എൻ‌ഡോജെനസ് ഒപിയോയിഡ് പെപ്റ്റൈഡ് എൻ‌കോഡുചെയ്യുന്ന ഒരു ജീൻ ആണെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. Oc ഫോസ്ബി ഇൻഡക്ഷൻ എൻ‌എസിയിലെ റിസപ്റ്റർ സിഗ്നലിംഗ് നിയന്ത്രിക്കുന്നതിലൂടെ പെരുമാറ്റ വ്യതിയാനങ്ങൾ സൃഷ്ടിച്ചേക്കാം, പക്ഷേ ഈ സാധ്യത അന്വേഷിച്ചിട്ടില്ല. അതിനാൽ, ഡൈനോർഫിൻ / ഡിയിലെ os ഫോസ്ബിയുടെ അമിതപ്രയോഗം നിർണ്ണയിക്കാൻ നിലവിലെ പഠനങ്ങൾ ബിട്രാൻസ്ജെനിക് മ mouse സ് മോഡൽ ഉപയോഗിച്ചു.1സ്ട്രിയറ്റൽ ന്യൂറോണുകൾ അടങ്ങിയ R, MOR- മെഡിറ്റേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ പ്രവർത്തനത്തെയും NAc- ലെ MOR-, KOR- മെഡിയേറ്റഡ് അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് ഇൻഹിബിഷനെയും മാറ്റുന്നു. CB- ൽ osFosB- യുടെ പ്രഭാവം1ആർ-മെഡിയേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ പ്രവർത്തനവും വിലയിരുത്തി കാരണം because9-THC അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ NAc- ൽ osFosB- നെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നു (പെറോട്ടി, മറ്റുള്ളവർ, 2008) മസ്തിഷ്ക റിവാർഡ് സർക്യൂട്ടുകളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിനായി എൻ‌ഡോകണ്ണാബിനോയിഡ് സിസ്റ്റം അറിയപ്പെടുന്നു (ഗാർഡ്നർ, 2005, മാൽഡൊണാഡോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006), പക്ഷേ എൻ‌ഡോകണ്ണാബിനോയിഡ് സിസ്റ്റത്തിൽ osFosB- ന്റെ സ്വാധീനം അന്വേഷിച്ചിട്ടില്ല.

പോവുക:

2. വസ്തുക്കളും രീതികളും

2.1. റിയാക്ടറുകൾ

[35S] GTPγS (1250 Ci / mmol), [α-32P] ATP (800 Ci / mmol) കൂടാതെ [3H] cAMP (26.4 Ci / mmol) പെർകിൻ‌മെറിൽ (ഷെൽട്ടൺ, CT) നിന്ന് വാങ്ങി. എടിപി, ജിടിപി, ജിഡിപി, സി‌എ‌എം‌പി, ബോവിൻ സെറം ആൽബുമിൻ, ക്രിയേറ്റൈൻ ഫോസ്ഫോകിനേസ്, പാപ്പാവെറിൻ, ഇമിഡാസോൾ, വിൻ-എക്സ്നൂംക്സ്-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് എന്നിവ സിഗ്മ ആൽ‌ഡ്രിക്കിൽ നിന്ന് (സെന്റ് ലൂയിസ്, എം‌ഒ) വാങ്ങി. റോച്ചെ ഡയഗ്നോസ്റ്റിക് കോർപ്പറേഷനിൽ (ചിക്കാഗോ, IL) നിന്ന് GTPγS വാങ്ങി. നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓൺ മയക്കുമരുന്ന് ദുരുപയോഗത്തിന്റെ (റോക്ക്‌വില്ലെ, എംഡി) മയക്കുമരുന്ന് വിതരണ പദ്ധതിയാണ് ഡാം‌ഗോ നൽകിയത്. ഫിഷർ സയന്റിഫിക് (നോർക്രോസ്, ജി‌എ) യിൽ നിന്ന് ഇക്കോനോ-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് സിന്റിലേഷൻ ദ്രാവകം ലഭിച്ചു. ഐ‌സി‌എൻ‌ (കോസ്റ്റ മെസ, സി‌എ) യിൽ നിന്ന് ഇക്കോലൈറ്റ് സിന്റിലേഷൻ ദ്രാവകം ലഭിച്ചു. മറ്റെല്ലാ രാസവസ്തുക്കളും സിഗ്മ ആൽ‌ഡ്രിക്ക് അല്ലെങ്കിൽ ഫിഷർ സയന്റിഫിക് എന്നിവയിൽ നിന്ന് ലഭിച്ചു.

2.2. എലികൾ

എൻ‌എസ്‌ഇ-ടി‌ടി‌എ (ലൈൻ എ) × ടെറ്റോപ്പ്- os ഫോസ്ബി (ലൈൻ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്) ൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ പുരുഷ ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികൾ കെൽ‌സ് മറ്റുള്ളവയിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ സൃഷ്ടിക്കപ്പെട്ടു. (കെൽസ്, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്). ട്രാൻസ്ജെൻ എക്സ്പ്രഷനെ അടിച്ചമർത്തുന്നതിനായി ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികളെ ഡോക്സിസൈക്ലിൻ (കുടിവെള്ളത്തിൽ 100) g) ആവിഷ്കരിച്ചു. 8 ആഴ്ച പ്രായത്തിൽ, ട്രാൻസ്ജെൻ എക്സ്പ്രഷൻ അനുവദിക്കുന്നതിനായി എലികളിൽ പകുതിയും ഡോക്സിസൈക്ലിൻ വെള്ളത്തിൽ നിന്ന് ഒഴിവാക്കി, അതേസമയം ട്രാൻസ്‌ജെനെ അടിച്ചമർത്താൻ ശേഷിക്കുന്ന എലികളെ ഡോക്സിസൈക്ലിനിൽ നിലനിർത്തുന്നു. 8 ആഴ്ചകൾക്കുശേഷം തലച്ചോറുകൾ ശേഖരിച്ചു, osFosB- യുടെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഇഫക്റ്റുകൾ പരമാവധി സമയം (മക്ലംഗ്ഗും നെസ്റ്റ്ലറും, 2003). രണ്ടാമത്തെ ട്രാൻസ്ജെനിക് മ mouse സ് ലൈൻ ഉപയോഗിച്ചു, അതിൽ സി-ജുണിന്റെ പ്രബലമായ നെഗറ്റീവ് എതിരാളിയായ Δc-Jun D ൽ പ്രകടിപ്പിക്കുന്നു1ആർ / ഡൈനോർഫിൻ, ഡി2സ്ട്രിയാറ്റം, ഹിപ്പോകാമ്പസ്, പരിയേറ്റൽ കോർട്ടെക്സ് എന്നിവയുടെ ആർ / എൻ‌കെഫാലിൻ സെല്ലുകൾ (പീക്ക്മാൻ, മറ്റുള്ളവർ, 2003). സി-ജുനും അനുബന്ധ ജുൻ ഫാമിലി പ്രോട്ടീനുകളും ഫോസ് ഫാമിലി പ്രോട്ടീനുകളുമായി വ്യത്യാസപ്പെടുകയും ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിന് ടാർഗെറ്റ് ജീനുകളുടെ AP-1 സൈറ്റുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുകയും ചെയ്യുന്നു. എന്നിരുന്നാലും, സി-ജുന്റെ (-c-Jun) എൻ-ടെർമിനസ് വെട്ടിച്ചുരുക്കുന്നത് സങ്കീർണ്ണമായ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണലായി നിർജ്ജീവമാക്കുകയും സജീവമായ AP-1 കോംപ്ലക്സുകളുടെ ഡി‌എൻ‌എ ബന്ധപ്പെടുത്തലിനെ തടസ്സപ്പെടുത്തുകയും ചെയ്യുന്നു. എൻ‌എസ്‌ഇ-ടി‌ടി‌എ (ലൈൻ എ) × ടെറ്റോപ്പ്-ഫ്ലാഗ്-എക്-ജുൻ (ലൈൻ ഇ) ൽ നിന്ന് ഉരുത്തിരിഞ്ഞ പുരുഷ ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികൾ പീക്ക്മാൻ മറ്റുള്ളവയിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ സൃഷ്ടിക്കപ്പെട്ടു. (പീക്ക്മാൻ, മറ്റുള്ളവർ, 2003). ട്രാൻസ്ജെൻ എക്സ്പ്രഷനെ അടിച്ചമർത്തുന്നതിനായി ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികളെ ഡോക്സിസൈക്ലിൻ (കുടിവെള്ളത്തിൽ 100) g) ആവിഷ്കരിച്ചു. 3 ആഴ്ചകളിൽ മുലയൂട്ടുന്ന കുട്ടികളെ ജനിതകമാറ്റം വരുത്തി ഗ്രൂപ്പുകളായി വേർതിരിച്ചു, പകുതി ഡോക്സിസൈക്ലിൻ അടങ്ങിയ വെള്ളത്തിലും പകുതി സാധാരണ കുടിവെള്ളത്തിലും FLAG-Δc-Jun എക്സ്പ്രഷനെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്നു. 6 ആഴ്‌ചകൾ‌ക്കുശേഷം തലച്ചോറുകൾ‌ ശേഖരിച്ചു, FLAG-Δc-Jun ന്റെ പരമാവധി അളവ് അളക്കുന്ന സമയം (പീക്ക്മാൻ, മറ്റുള്ളവർ, 2003). ലബോറട്ടറി മൃഗങ്ങളുടെ പരിപാലനത്തിനും ഉപയോഗത്തിനുമുള്ള നാഷണൽ ഇൻസ്റ്റിറ്റ്യൂട്ട് ഓഫ് ഹെൽത്ത് ഗൈഡ് അനുസരിച്ചാണ് എല്ലാ മൃഗ നടപടിക്രമങ്ങളും നടത്തിയത്.

2.3. മെംബ്രൺ തയ്യാറാക്കൽ

പരിശോധനയുടെ ദിവസം വരെ തലച്ചോറുകൾ −80 at C ൽ സൂക്ഷിച്ചു. പരിശോധനയ്‌ക്ക് മുമ്പ്, ഓരോ തലച്ചോറും ഉരുകുകയും എൻ‌എസി ഹിമത്തിൽ വിച്ഛേദിക്കപ്പെടുകയും ചെയ്തു. ഓരോ സാമ്പിളും 50 mM Tris-HCl, 3 mM MgCl എന്നിവയിൽ ഏകീകൃതമാക്കി2, 1 m C ലെ ഒരു ഗ്ലാസ് ഹോമോജെനൈസറിൽ നിന്നുള്ള 7.4 സ്ട്രോക്കുകളുള്ള 20 mM EGTA, pH 4 (മെംബ്രൻ ബഫർ). ഏകതാനത്തെ 48,000 at ൽ കേന്ദ്രീകരിച്ചു g 4 മിനുട്ടിനുള്ള 10 at C ൽ, മെംബ്രൻ ബഫറിൽ‌ വീണ്ടും ചേർ‌ത്തു, 48,000 at ൽ വീണ്ടും കേന്ദ്രീകൃതമാക്കി g 4 മിനുട്ടിനായി 10 at C യിൽ 50 mM Tris-HCl, 3 mM MgCl2, 0.2 mM EGTA, 100 mM NaCl, pH 7.4 (അസ്സേ ബഫർ). പ്രോട്ടീന്റെ അളവ് നിർണ്ണയിക്കുന്നത് ബ്രാഡ്‌ഫോർഡിന്റെ രീതിയാണ് (ബ്രാഡ്‌ഫോർഡ്, 1976) ബോവിൻ സെറം ആൽബുമിൻ (ബി‌എസ്‌എ) സ്റ്റാൻഡേർഡായി ഉപയോഗിക്കുന്നു.

2.4. അഗോണിസ്റ്റ്-ഉത്തേജിത [35S] GTPγS ബൈൻഡിംഗ്

അസ്സേ ബഫറിൽ അഡെനോസിൻ ഡീമിനേസ് (10 mU / ml) ഉപയോഗിച്ച് 30 at C ന് 3 മിനിറ്റ് നേരത്തേക്ക് മെംബ്രൺ പ്രീ-ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. മെംബ്രെൻ‌സ് (5-10 proteing പ്രോട്ടീൻ) 2 hr ന് 30 ° C ന് ഇൻ‌ക്യുബേറ്റ് ചെയ്തു, 0.1% (w / v) BSA, 0.1 nM [35S] GTPγS, 30 µM ​​GDP, അഡെനോസിൻ ഡീമിനേസ് (3 mU / ml) എന്നിവ ഡാം‌ഗോ അല്ലെങ്കിൽ‌ വിൻ‌ക്സ്നൂംക്സ്-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഉചിതമായ സാന്ദ്രതയോടുകൂടിയോ അല്ലാതെയോ ആണ്. 55,212 µM ​​GTPγS ഉപയോഗിച്ചാണ് നിർദ്ദിഷ്ട ബൈൻഡിംഗ് അളക്കുന്നത്. ജി.എഫ് / ബി ഗ്ലാസ് ഫൈബർ ഫിൽട്ടറുകളിലൂടെയുള്ള ഫിൽ‌ട്രേഷൻ വഴിയാണ് ഇൻകുബേഷൻ അവസാനിപ്പിച്ചത്, തുടർന്ന് എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എക്സ് ഐ‌എൻ‌എം‌എക്സ് മില്ലി ഐസ്-കോൾഡ് എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് എം‌എം ട്രിസ്-എച്ച്സി‌എൽ, പി‌എച്ച് എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്. ഇക്കോണോ-എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് സിന്റിലേഷൻ ദ്രാവകത്തിലെ ഫിൽ‌റ്ററുകൾ‌ ഒറ്റരാത്രികൊണ്ട് വേർതിരിച്ചെടുത്ത ശേഷം ലിക്വിഡ് സിന്റിലേഷൻ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി ഉപയോഗിച്ചാണ് ബ ound ണ്ട് റേഡിയോ ആക്റ്റിവിറ്റി നിർണ്ണയിച്ചത്.

2.5. അഡെനെയിൽ സൈക്ലേസ് അസ്സെ

മെംബ്രെൻ‌സ് (5-25 proteing പ്രോട്ടീൻ) മുകളിൽ വിവരിച്ചതുപോലെ അഡിനോസിൻ ഡീമിനേസ് ഉപയോഗിച്ച് മുൻ‌കൂട്ടി നിശ്ചയിച്ചിരുന്നു, തുടർന്ന് 15 for C ന് 30 മിനുട്ട് ഇൻ‌ക്യുബേറ്റ് ചെയ്തു, 1µM ഫോർ‌സ്‌കോളിന്റെ സാന്നിധ്യത്തിലോ അഭാവത്തിലോ, DAMGO, U50,488H അല്ലെങ്കിൽ WIN55,212- 2 ATM ATP, [α-32P] ATP (1.5 µCi), 0.2 mM DTT, 0.1% (w / v) BSA, 50 µM ​​ചാക്രിക AMP, 50 µM ​​GTP, 0.2 mM papaverine, 5 mM phosphocreatine, 20 യൂണിറ്റുകൾ / mm / ml) 3 ofl ന്റെ അവസാന വോള്യത്തിൽ. ഈ സാഹചര്യങ്ങളിൽ, ആകെ [α-32P] വീണ്ടെടുത്ത cAMP സാധാരണയായി ചേർത്ത മൊത്തം തുകയുടെ 1% നേക്കാൾ കുറവാണ് [α-32പി] ഓരോ സാമ്പിളിലും എടിപി. 3 മിനുട്ട് തിളപ്പിച്ചുകൊണ്ട് പ്രതികരണം അവസാനിപ്പിച്ചു [32പി] സലോമോന്റെ ഇരട്ട നിര (ഡോവെക്സ്, അലുമിന) രീതിയിലൂടെ ചാക്രിക എ‌എം‌പി വേർതിരിച്ചു.സലോമോൻ, 1979). [3എച്ച്] കോളം ക്രോമാറ്റോഗ്രാഫിക്ക് മുമ്പ് ഓരോ ട്യൂബിലും ആന്തരിക നിലവാരമായി cAMP (10,000 dpm) ചേർത്തു. റേഡിയോ ആക്റ്റിവിറ്റി നിർണ്ണയിച്ചത് ലിക്വിഡ് സിന്റിലേഷൻ സ്പെക്ട്രോഫോട്ടോമെട്രി (ഇതിനായുള്ള എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്% കാര്യക്ഷമതയാണ് 3H) എലോയേറ്റിന്റെ 4.5 മില്ലി എക്കോലൈറ്റ് സിന്റിലേഷൻ ദ്രാവകത്തിന്റെ 14.5 മില്ലിയിൽ ലയിച്ചതിനുശേഷം.

2.6. ഡാറ്റ വിശകലനം

മറ്റൊരുവിധത്തിൽ സൂചിപ്പിച്ചിട്ടില്ലെങ്കിൽ, ഡാറ്റയെ ശരാശരി മൂല്യങ്ങളായി റിപ്പോർട്ടുചെയ്യുന്നു X SE 4-8 പ്രത്യേക പരീക്ഷണങ്ങളുടെ SE, ഇവയെല്ലാം ത്രിരൂപത്തിൽ നടപ്പാക്കി. നെറ്റ്-ഉത്തേജിത [35എസ്] ജിടിപി‌എസ് ബൈൻഡിംഗ് അഗോണിസ്റ്റ്-ഉത്തേജിത ബൈൻഡിംഗ് മൈനസ് ബേസൽ ബൈൻഡിംഗ് ആയി കണക്കാക്കുന്നു. നെറ്റ് ഫോർസ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം ഫോർസ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത പ്രവർത്തനം - ബേസൽ പ്രവർത്തനം (pmol / mg / min) എന്ന് നിർവചിച്ചിരിക്കുന്നു. ഫോർസ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനത്തിന്റെ ശതമാനം തടയൽ നിർവചിക്കപ്പെടുന്നു (അഗോണിസ്റ്റിന്റെ അഭാവത്തിൽ നെറ്റ് ഫോർസ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത പ്രവർത്തനം - അഗോണിസ്റ്റ് / നെറ്റ് ഫോർസ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത പ്രവർത്തനം അഗോണിസ്റ്റിന്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ) × 100. എല്ലാ കർവ് ഫിറ്റിംഗും സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ വിശകലനങ്ങളും പ്രിസം എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്സി (ഗ്രാഫ്പാഡ് സോഫ്റ്റ്വെയർ, Inc., സാൻ ഡീഗോ, CA) ഉപയോഗിച്ചാണ് നടത്തിയത്. ഇസി ലഭിക്കുന്നതിന് ആവർത്തന നോൺ-ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ ഉപയോഗിച്ച് ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് കർവുകൾ വിശകലനം ചെയ്തു50 ഇപരമാവധി മൂല്യങ്ങൾ. ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് ഡാറ്റയുടെ സ്ഥിതിവിവരക്കണക്കുകളുടെ പ്രാധാന്യം നിർണ്ണയിക്കുന്നത് വേരിയൻസിന്റെ (ANOVA) ദ്വി-വഴി വിശകലനത്തിലൂടെയാണ്, അഗോണിസ്റ്റ് ഡോസും ജീൻ ഇൻഡക്ഷനും (ഓൺ അല്ലെങ്കിൽ ഓഫ്) പ്രധാന ഘടകങ്ങളായി ഉപയോഗിക്കുന്നു. കർവ്-ഫിറ്റ് മൂല്യങ്ങളുടെ സ്ഥിതിവിവരക്കണക്ക് പ്രാധാന്യം (ഇപരമാവധി അല്ലെങ്കിൽ ഇസി50) നിർണ്ണയിക്കുന്നത് ജോഡിയല്ലാത്ത രണ്ട്-വാലുള്ള വിദ്യാർത്ഥിയുടെ ടി-ടെസ്റ്റ്, വെൽക്കിന്റെ തിരുത്തൽ അല്ലെങ്കിൽ ഡാറ്റയുടെ സ്‌ക്വയർ റൂട്ട് പരിവർത്തനം ഉപയോഗിച്ച് ഇസിയിലെ അസമമായ വ്യതിയാനങ്ങൾ (എഫ്-ടെസ്റ്റ് കണ്ടെത്തിയത്) ശരിയാക്കാൻ ആവശ്യമായ സ്ഥലങ്ങളിൽ50 മൂല്യങ്ങൾ.

പോവുക:

3. ഫലം

3.1. ഒപിയോയിഡ്, കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ-മെഡിയേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ ആക്റ്റിവേഷൻ എന്നിവയിൽ osFosB എക്സ്പ്രഷന്റെ പ്രഭാവം

MOR- അല്ലെങ്കിൽ CB എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ1ആർ‌എൻ‌-മെഡിയേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ‌ ആക്റ്റിവേഷൻ‌ എൻ‌എ‌സിയിലെ os ഫോസ്ബിയുടെ ഇൻ‌ഡ്യൂസിബിൾ ട്രാൻ‌ജെജെനിക് എക്‌സ്‌പ്രഷൻ‌ വഴി മാറ്റി, അഗോണിസ്റ്റ്-ഉത്തേജിത [35എസ്] ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികളുടെ ഈ പ്രദേശത്ത് നിന്ന് സോപാധികമായി പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന (osFosB ഓണാണ്) അല്ലെങ്കിൽ osFosB ട്രാൻസ്ജെൻ പ്രകടിപ്പിക്കാത്ത (osFosB ഓഫ്) പ്രകടിപ്പിക്കാത്ത ഒറ്റപ്പെട്ട ചർമ്മത്തിൽ ജിടിപി‌എസ് ബൈൻഡിംഗ് പരിശോധിച്ചു. MOR സജീവമാക്കുന്നതിന് MOR- സെലക്ടീവ് എൻ‌കെഫാലിൻ അനലോഗ് DAMGO ഉപയോഗിക്കുകയും CB സജീവമാക്കുന്നതിന് കന്നാബിനോയിഡ് അമിനോഅകിലിൻഡോൾ WIN55,212-2 ഉപയോഗിക്കുകയും ചെയ്തു.1R. ഈ ലിഗാണ്ടുകൾ മുമ്പ് MOR, CB എന്നിവയിൽ പൂർണ്ണ അഗോണിസ്റ്റുകളാണെന്ന് കാണിച്ചിരുന്നു1R, യഥാക്രമം (ബ്രിവോജൽ, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്, സെല്ലി, മറ്റുള്ളവർ, 1997). എലി തലച്ചോറിൽ സിഗ്നൽ വളരെ കുറവായതിനാൽ KOR- മെഡിറ്റേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ പ്രവർത്തനം പരിശോധിക്കുന്നത് പ്രായോഗികമല്ല (ചിൽ‌ഡേഴ്സ്, മറ്റുള്ളവ, 1998). NAc ലെ DAMGO, WIN55,122-2 എന്നിവ GFosB ഓഫ്, എലികളിൽ osFosB എന്നിവയിൽ നിന്ന് ജി-പ്രോട്ടീൻ പ്രവർത്തനത്തിന്റെ ഏകാഗ്രതയെ ആശ്രയിച്ചുള്ള ഫലങ്ങൾ ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു (ചിത്രം 1). ഡാം‌ഗോ-ഉത്തേജിത പ്രവർത്തനത്തിനായി (ചിത്രം 1A), ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് ഡാറ്റയുടെ രണ്ട്-വഴി ANOVA ΔFosB നില (p <0.0001, F = 22.12, df = 1), ഡാം‌ഗോ ഏകാഗ്രത (p <0.0001, F = 29.65, df = 5) സുപ്രധാന ഇടപെടൽ (p = 0.857, F = 0.387, df = 5). ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് കർവുകളുടെ നോൺ‌ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ വിശകലനം വളരെയധികം ഡാം‌ഗോ ഇ വെളിപ്പെടുത്തിപരമാവധി എലികളിലെ osFosB- യിലെ മൂല്യം (E.പരമാവധി = 73 ± 5.2% ഉത്തേജനം) osFosB ഓഫ് എലികളുമായി (Eപരമാവധി = 56 ± 4.1% ഉത്തേജനം; p <0.05 വിദ്യാർത്ഥികളുടെ ടി-ടെസ്റ്റ് എലികളിലെ osFosB- ൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമാണ്). ഡാംഗോ ഇസി50 മൂല്യങ്ങൾ osFosB ഓണും osFosB ഓഫ് എലികളും തമ്മിൽ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരുന്നില്ല (302 ± 72 nM ഉം 212 ± 56 nM ഉം യഥാക്രമം p = 0.346).

ചിത്രം 1 

അഗോണിസ്റ്റ്-ഉത്തേജിതത്തിൽ osFosB എക്സ്പ്രഷന്റെ പ്രഭാവം [35S] NAc- ൽ GTPγS ബൈൻഡിംഗ്. വ്യത്യസ്ത ഫോക്കസ് ഉപയോഗിച്ച് രീതികളിൽ വിവരിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ osFosB- എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് (osFosB ഓൺ) അല്ലെങ്കിൽ കൺട്രോൾ (osFosB ഓഫ്) എലികളിൽ നിന്നുള്ള മെംബ്രൺ പരിശോധിച്ചു. പങ്ക് € |

MOR അഗോണിസ്റ്റ് ഡാം‌ഗോയ്‌ക്കൊപ്പം ലഭിച്ച ഫലങ്ങളിൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമായി, ജി-പ്രോട്ടീൻ ആക്റ്റിവേഷനിൽ osFosB സ്റ്റാറ്റസ്-ആശ്രിത വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നും കന്നാബിനോയിഡ് അഗോണിസ്റ്റ് WIN55,212-2 (ചിത്രം 1B). WIN55,212-2 ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് ഡാറ്റയുടെ ടു-വേ ANOVA, WIN55,212-2 ഏകാഗ്രതയുടെ (p <0.0001, F = 112.4, df = 7) ഒരു പ്രധാന സ്വാധീനം വെളിപ്പെടുത്തി, പക്ഷേ osFosB നിലയല്ല (p = 0.172) , F = 1.90, df = 1) കൂടാതെ ഇടപെടലുകളൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല (p = 0.930, F = 0.346, df = 7). അതുപോലെ, WIN55,212-2 E- ൽ osFosB നിലയുടെ ഫലമുണ്ടായില്ലപരമാവധി മൂല്യങ്ങൾ (103 ± 6%, 108 ± 8% എലികളുടെ ഓണും ഓഫും യഥാക്രമം osFosB- ൽ ഉത്തേജനം, വിദ്യാർത്ഥികളുടെ ടി-ടെസ്റ്റ് പ്രകാരം p = 0.813) അല്ലെങ്കിൽ EC50 മൂല്യങ്ങൾ (103 ± 20 nM ഉം 170 ± 23 nM ഉം ΔFosB- യിലും എലികളിലും യഥാക്രമം p = 0.123).

വളവുകളുടെ ആകൃതിയെ അടിസ്ഥാനമാക്കി, ഞങ്ങളുടെ മുമ്പത്തെ പഠനങ്ങൾ തലച്ചോറിലെ ബൈപാസിക് WIN55,212-2 ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് വളവുകൾ കാണിച്ചിരിക്കുന്നു എന്ന വസ്തുതയെ അടിസ്ഥാനമാക്കി (ബ്രിവോജൽ, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്, ബ്രിവോജൽ, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ്), രണ്ട്-സൈറ്റ് മോഡൽ ഉപയോഗിച്ച് WIN55,212-2 കർവുകളും വിശകലനം ചെയ്തു. ശരാശരി ഡാറ്റയുടെ വിശകലനം രണ്ട്-സൈറ്റ് മോഡൽ (R) ഉപയോഗിച്ച് ഫിറ്റിന്റെ ഗുണത്തിൽ നേരിയ പുരോഗതി കാണിച്ചു2 സിംഗിൾ-സൈറ്റ് മോഡലുമായി (R) താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ = 0.933, 0.914, സ്ക്വയറുകളുടെ ആകെത്തുക = യഥാക്രമം osFosB- യിലും എലികളിലും 3644, 5463 എന്നിവ.2 = 0.891, 0.879, സ്ക്വയറുകളുടെ ആകെത്തുക = യഥാക്രമം എലികളിലും അല്ലാതെയും osFosB- യിൽ 6561, 6628). എന്നിരുന്നാലും, ΔFosB ഓൺ, ഓഫ് എലികൾ തമ്മിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നും കണ്ടെത്തിയില്ലപരമാവധി അല്ലെങ്കിൽ ഇസി50 ഉയർന്നതോ കുറഞ്ഞതോ ആയ സൈറ്റുകളുടെ മൂല്യങ്ങൾ (അനുബന്ധ പട്ടിക 1), താഴ്ന്ന ഇസിയോടുള്ള പ്രവണതയുണ്ടെങ്കിലും50 ΔFosB ഓണുള്ള (EC) എലികളിലെ ഉയർന്ന പോറ്റൻസി സൈറ്റിലെ മൂല്യം50ഉയര്ന്ന XFosB ഓഫ് (EC) ഉള്ളവരുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ = 28.0 ± 10.6 nM)50ഉയര്ന്ന = 71.5 ± 20.2 nM; p = 0.094). മാത്രമല്ല, ബേസലിൽ osFosB നിലയുടെ ഒരു ഫലവും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല [35S] NAc മെംബ്രണുകളിൽ GTPγS ബൈൻഡിംഗ് (253 ± 14, 226 ± 14 fmol / mg എന്നിവ യഥാക്രമം osFosB- ലും അല്ലാതെയും എലികളിൽ, p = 0.188). എലികളുടെ എൻ‌എസിയിലെ os ഫോസ്ബിന്റെ ഇൻ‌ഡ്യൂസിബിൾ ട്രാൻസ്ജെനിക് എക്‌സ്‌പ്രഷൻ സി‌ബിയെ കാര്യമായി ബാധിക്കാതെ എം‌ആർ‌-മെഡിറ്റേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ ആക്റ്റിവേഷൻ വർദ്ധിപ്പിച്ചുവെന്ന് ഈ ഡാറ്റ സൂചിപ്പിക്കുന്നു1ആർ-മെഡിറ്റേറ്റഡ് അല്ലെങ്കിൽ ബേസൽ ജി-പ്രോട്ടീൻ പ്രവർത്തനം.

3.2. ഓപിയോയിഡ്, കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ-മെഡിറ്റേറ്റഡ് ഇൻഹിബിഷൻ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിൽ ΔFosB- യുടെ പ്രഭാവം

MOR, CB എന്നിവയുടെ ഡ st ൺസ്ട്രീം എഫെക്റ്റർ ആക്റ്റിവിറ്റിയുടെ മോഡുലേഷനിൽ ΔFosB- ന്റെ ഇൻഡ്യൂസിബിൾ ട്രാൻസ്ജെനിക് എക്സ്പ്രഷന്റെ സ്വാധീനം വിലയിരുത്തുന്നതിന്1R, എൻ‌എൻ‌സി മെംബ്രണുകളിൽ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് forM ഫോർ‌സ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം തടഞ്ഞു. MOR-, CB എന്നിവയ്‌ക്ക് പുറമേ1കെ-സെലക്ടീവ് ഫുൾ അഗോണിസ്റ്റ് യുഎക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് (അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് ആക്റ്റിവിറ്റിയുടെ ആർ-മെഡിയേറ്റഡ് ഇൻ‌ഹിബിഷൻ, കെ‌ഒ‌ആർ ആക്റ്റിവിറ്റിയുടെ ഫലങ്ങൾ എന്നിവ പരിശോധിച്ചു., ു, മറ്റുള്ളവർ, 1997), കാരണം ബിട്രാൻസ്ജെനിക് മോഡലിലെ ഡൈനോർഫിൻ എംആർ‌എൻ‌എ os ഫോസ്ബിയുടെ ലക്ഷ്യമാണെന്ന് മുമ്പത്തെ ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു (സക്കറിയോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006). DAMGO, U50,488, WIN55,212-2 എന്നിവ എലികളിലെ osFosB ഓഫ്, osFosB എന്നിവയിൽ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനത്തെ ഏകാഗ്രതയെ ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നുവെന്ന് ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചു.ചിത്രം 2). ഡാം‌ഗോ ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് ഡാറ്റയുടെ ടു-വേ ANOVA (ചിത്രം 2A) osFosB നില (p = 0.0012, F = 11.34, df = 1), DAMGO ഏകാഗ്രത (p <0.0001, F = 29.61, df = 6) എന്നിവയുടെ പ്രധാന പ്രധാന ഫലങ്ങൾ വെളിപ്പെടുത്തി, പക്ഷേ കാര്യമായ ഇടപെടലുകളൊന്നുമില്ല (p = 0.441, F = 0.986 , df = 6). ഡാം‌ഗോ കോൺ‌സെൻ‌ട്രേഷൻ-ഇഫക്റ്റ് കർവുകളുടെ നോൺ‌ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ വിശകലനം ഡാം‌ഗോ ഇസിയെ ഗണ്യമായി താഴ്ത്തി50 osFosB ഓഫ് എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ (101 ± 11 nM, p <510 വിദ്യാർത്ഥികളുടെ ടി-ടെസ്റ്റ്) എലികളുമായി osFosB- യിലെ മൂല്യം (182 ± 0.05 nM). എന്നിരുന്നാലും, ഡാംഗോ ഇയിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമില്ലപരമാവധി മൂല്യങ്ങൾ (20.9 ± 1.26%, 19.8 ± 1.27% itionFosB- യിലും എലികളിലും യഥാക്രമം p = 0.534).

ചിത്രം 2 

എൻ‌എസിയിലെ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം തടയുന്നതിനെ os ഫോസ്ബി എക്സ്പ്രഷന്റെ പ്രഭാവം. 1 µM ​​ന്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ രീതികളിൽ വിവരിച്ചിരിക്കുന്നതുപോലെ osFosB- എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് (osFosB ഓൺ) അല്ലെങ്കിൽ നിയന്ത്രണ (osFosB ഓഫ്) എലികളിൽ നിന്നുള്ള മെംബ്രെൻ പരിശോധിച്ചു. പങ്ക് € |

KOR-mediated adenylyl cyclase inhibition ΔFosB (ന്റെ ട്രാൻസ്ജെനിക് എക്സ്പ്രഷന്റെ പ്രവർത്തനമായും വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു.ചിത്രം 2B). U50,488 ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് ഡാറ്റയുടെ ടു-വേ ANOVA osFosB നില (p = 0.0006, F = 14.53, df = 1), U50,488 ഏകാഗ്രത (p <0.0001, F = 26.48, df = 3) , കാര്യമായ ഇടപെടലുകളൊന്നുമില്ലാതെ (p = 0.833, F = 0.289, df = 3). ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് കർവുകളുടെ നോൺ‌ലീനിയർ റിഗ്രഷൻ വിശകലനം ഒരു വലിയ U50,488 E വെളിപ്പെടുത്തിപരമാവധി ΔFosB ഓഫ് എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ (18.3 ± 1.14% ഗർഭനിരോധനം) 12.5.FosB ഓഫ് എലികളുമായി (2.03 ± 0.05% ഗർഭനിരോധനം; p <50,488 സ്റ്റുഡന്റ്‌സ് ടി-ടെസ്റ്റ് byFosB- ൽ നിന്ന് വ്യത്യസ്തമാണ്), UXNUMX EC- ൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമില്ല.50 മൂല്യങ്ങൾ (310 ± 172 nM ഉം 225 ± 48 nM ഉം ΔFosB- യിലും എലികളിലും യഥാക്രമം p = 0.324).

MOR, KOR എന്നിവയ്ക്കൊപ്പം നിരീക്ഷിച്ച ഇഫക്റ്റുകൾക്ക് വിപരീതമായി, കന്നാബിനോയിഡ് അഗോണിസ്റ്റ് WIN55212-2 (അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് തടയുന്നതിനെ പ്രേരിപ്പിക്കുന്ന ട്രാൻസ്ജെനിക് osFosB എക്സ്പ്രഷന്റെ കാര്യമായ ഫലമൊന്നുമില്ല.ചിത്രം 2C). WIN55,212-2 ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് ഡാറ്റയുടെ ടു-വേ ANOVA മയക്കുമരുന്ന് സാന്ദ്രതയുടെ (p <0.0001, F = 23.6, df = 2) ഒരു പ്രധാന സ്വാധീനം കാണിച്ചു, പക്ഷേ osFosB നിലയല്ല (p = 0.735, F = 0.118, df = 1) കാര്യമായ ഇടപെടലും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല (p = 0.714, F = 0.343, df = 2). കൂടാതെ, ഏതെങ്കിലും അഗോണിസ്റ്റിന്റെ അഭാവത്തിൽ ബേസൽ അല്ലെങ്കിൽ ഫോർസ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനങ്ങളിൽ osFosB നിലയുടെ ഫലമുണ്ടായില്ല. എലികളിൽ os ഫോസ്ബിയിൽ 491 ± 35 pmol / mg / min ആയിരുന്നു ബാസൽ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം ΔFosB ഓഫ് എലികളിലെ 546 ± 44 നെ അപേക്ഷിച്ച് (p = 0.346 വിദ്യാർത്ഥികളുടെ ടി-ടെസ്റ്റ്). അതുപോലെ, 1 µM ഫോർസ്‌കോളിന്റെ സാന്നിധ്യത്തിൽ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം miceFosB- യിൽ 2244 ± 163 pmol / mg / min ആയിരുന്നു, എലികളിൽ 2372 ± 138 pmol / mg / min, osFosB ഓഫ് എലികളിൽ (p = 0.555).

3.3. ഒപിയോയിഡ്, കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ-മെഡിയേറ്റഡ് ഇൻഹിബിഷൻ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിൽ ΔcJun- ന്റെ പ്രഭാവം

MAC, KOR എന്നിവയിൽ നിന്ന് NAc ലെ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിലേക്കുള്ള osFosB ന്റെ ഇൻ‌ഹിബിറ്ററി ട്രാൻസ്ജെനിക് എക്‌സ്‌പ്രഷൻ കാരണം, osFosB- മെഡിറ്റേറ്റഡ് ട്രാൻ‌സ്‌ക്രിപ്ഷന്റെ ഒരു പ്രബലമായ നെഗറ്റീവ് ഇൻ‌ഹിബിറ്റർ ഓപിയോയിഡ് റിസപ്റ്റർ സിഗ്നലിംഗിനെ വിപരീത രീതിയിൽ മോഡുലേറ്റ് ചെയ്യുമോ എന്ന് നിർണ്ണയിക്കാൻ താൽ‌പ്പര്യമുണ്ട്. ഈ ചോദ്യത്തിന്, DAMGO, U50,488 എന്നിവരുടെ ഫോർ‌സ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം തടഞ്ഞുവെന്ന് വ്യവസ്ഥാപിതമായി JcJun പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികളുടെ എൻ‌എസിയിൽ നിന്ന് തയ്യാറാക്കിയ മെംബ്രണുകളിൽ പരിശോധിച്ചു. MOR അല്ലെങ്കിൽ KOR അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം തടയുന്നതിൽ ΔcJun എക്സ്പ്രഷന്റെ ഫലങ്ങളൊന്നും ഫലങ്ങൾ കാണിച്ചില്ല (ചിത്രം 3). ഡാം‌ഗോ ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് കർവുകളുടെ ടു-വേ ANOVA, ഡാം‌ഗോ ഏകാഗ്രതയുടെ (p <0.0001, F = 20.26, df = 6) ഒരു പ്രധാന പ്രധാന ഫലം കാണിച്ചു, പക്ഷേ JcJun നിലയല്ല (p = 0.840, F = 0.041, df = 1) കാര്യമായ ഇടപെടലുകളൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല (p = 0.982, F = 0.176, df = 6). അതുപോലെ, ഇയിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസമില്ലപരമാവധി അല്ലെങ്കിൽ ഇസി50 betweencJun ഓണുള്ള എലികൾ തമ്മിലുള്ള മൂല്യങ്ങൾ (Eപരമാവധി = 23.6 ± 2.6%; ഇസി50 = 304 ± 43 nM) അല്ലെങ്കിൽ JcJun ഓഫ് (E.പരമാവധി = 26.1 ± 2.5%, p = 0.508; ഇസി50 = 611 ± 176 nM, പി = 0.129). U50,488 ലും സമാനമായ ഫലങ്ങൾ കണ്ടു, അതായത് ഏകാഗ്രത-ഇഫക്റ്റ് കർവുകളുടെ രണ്ട്-വഴി ANOVA ഏകാഗ്രതയുടെ (p <0.0001, F = 11.94, df = 6) കാര്യമായ സ്വാധീനം കാണിക്കുന്നു, പക്ഷേ JcJun സ്റ്റാറ്റസ് (p = 0.127) , F = 2.391, df = 1) കൂടാതെ കാര്യമായ ഇടപെടലുകളൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല (p = 0.978, F = 0.190, df = 6). അതുപോലെ, ഇയിൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നുമില്ലപരമാവധി അല്ലെങ്കിൽ ഇസി50 betweencJun ഓണുള്ള എലികൾ തമ്മിലുള്ള മൂല്യങ്ങൾ (Eപരമാവധി = 14.8 ± 2.9%; ഇസി50 = 211 ± 81 nM) അല്ലെങ്കിൽ ഓഫ് (E.പരമാവധി = 16.7 ± 1.8%, p = 0.597; ഇസി50 = 360 ± 151 nM, p = 0.411).

ചിത്രം 3 

NAc ലെ അഡെനൈലിൻ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം തടയുന്നതിനെക്കുറിച്ചുള്ള ΔcJun എക്സ്പ്രഷന്റെ പ്രഭാവം. JCJun- എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് (JcJun ഓൺ) അല്ലെങ്കിൽ കൺട്രോൾ (JcJun ഓഫ്) എലികളിൽ നിന്നുള്ള മെംബ്രെൻ‌സ് ഡാം‌ഗോ (എ), U50,488H (B) അല്ലെങ്കിൽ WIN55,212-2 എന്നിവയുടെ സാന്നിധ്യത്തിൽ ഇൻകുബേറ്റ് ചെയ്തു. പങ്ക് € |

കന്നാബിനോയിഡ് അഗോണിസ്റ്റ് എൻ‌എസിയിലെ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ ഗർഭനിരോധനത്തെയും ജുൻ എക്സ്പ്രഷൻ കാര്യമായി ബാധിച്ചില്ല. WIN55,212-2 ഏകാഗ്രത വളവുകളുടെ ടു-വേ ANOVA, WIN55,212-2 ഏകാഗ്രതയുടെ (p <0.0001, F = 15.53, df = 6) ഒരു പ്രധാന പ്രധാന ഫലം കാണിച്ചു, പക്ഷേ ജനിതകമാതൃകയല്ല (p = 0.066, F = 3.472, df = 1) കൂടാതെ കാര്യമായ ഇടപെടലുകളൊന്നും ഉണ്ടായിരുന്നില്ല (p = 0.973, F = 0.208, df = 6). അതുപോലെ, WIN55,212-2 E- ൽ കാര്യമായ വ്യത്യാസങ്ങളൊന്നുമില്ലപരമാവധി മൂല്യങ്ങൾ (13.0 ± 2.3%, 13.6 ± 0.9% itioncJun- ൽ വേഴ്സസ് ഓഫ് എലികൾ, യഥാക്രമം p = 0.821) അല്ലെങ്കിൽ EC50 മൂല്യങ്ങൾ (യഥാക്രമം p = 208, വേഴ്സസ് ഓഫ് എലികളിൽ oncJun- ലെ 120 ± 417 nM, 130 ± 0.270 nM). അങ്ങനെ, Δച്ജുന് പ്രകടിപ്പിച്ചും എലികളുടെ ൽ വിന്ക്സനുമ്ക്സ-ക്സനുമ്ക്സ ആകാറുണ്ട് ശേഷി തെളിയിക്കുന്ന നേരെ ഒരു ചെറിയ പ്രവണത ഉണ്ടായിട്ടും ത്രംസ്ഗെനെ ഗണ്യമായി അദെംയ്ല്യ്ല് ച്യ്ച്ലസെ എന്ന ചന്നബിനൊഇദ് ഇംഹിബിതിഒന് യാതൊരു വിധ. മാത്രമല്ല, ബേസൽ അല്ലെങ്കിൽ ഫോർസ്‌കോളിൻ-ഉത്തേജിത അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനങ്ങളിൽ ΔcJun സ്റ്റാറ്റസിന്റെ ഫലമുണ്ടായില്ല. ബാസൽ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം യഥാക്രമം ΔcJun ഓൺ അല്ലെങ്കിൽ ഓഫ് എലികളിലെ 55,212 ± 2 pmol / mg / min, 1095 ± 71 pmol / mg / min (p = 1007) എന്നിവയായിരുന്നു. 77 forM ഫോർസ്‌കോളിൻ ഉത്തേജിപ്പിച്ച അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം യഥാക്രമം ΔcJun ഓൺ അല്ലെങ്കിൽ ഓഫ് എലികളിലെ 0.403 ± 1 pmol / mg / min, 4185 ± 293 pmol / mg / min (p = 4032) എന്നിവയായിരുന്നു.

3.4. ചർച്ച

ഈ പഠനത്തിന്റെ ഫലങ്ങൾ, മെച്ചപ്പെട്ട MOR- മെഡിറ്റേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ ആക്റ്റിവേഷനും ഡൈനോർഫിൻ / ഡിയിലെ osFosB ന്റെ ഇൻ‌ഡ്യൂസിബിൾ ട്രാൻസ്ജെനിക് എക്‌സ്‌പ്രഷനോടുകൂടിയ എലികളുടെ എൻ‌എസിയിൽ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ തടസ്സവും വെളിപ്പെടുത്തി.1ന്യൂറോണുകൾ അടങ്ങിയിരിക്കുന്ന ആർ. ΔFosB എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് എലികളുടെ NAc- ലും KOR- മെഡിറ്റേറ്റഡ് അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനം വർദ്ധിപ്പിച്ചു, ഇത് NAc ലെ എൻ‌ഡോജെനസ് ഒപിയോയിഡ് സിസ്റ്റത്തെ osFosB നിയന്ത്രിക്കുന്നുവെന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ദാംഗോ ഇപരമാവധി MOR- ഉത്തേജിത മൂല്യത്തിന് വലുതാണ് [35എസ്] ജിടിപി‌എസ് ബൈൻഡിംഗും അതിന്റെ ഇസിയും50 നിയന്ത്രണ എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ osFosB ഓവർ എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് എലികളിൽ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് ഗർഭനിരോധനത്തിന് മൂല്യം കുറവായിരുന്നു. ഈ കണ്ടെത്തലുകൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് ഫലപ്രാപ്തി മോഡുലേഷനായി റിസപ്റ്റർ റിസർവ് ചെയ്യാനുള്ള സാധ്യതയാണ്, പക്ഷേ പരിശോധിച്ച പരിശോധനാ സാഹചര്യങ്ങളിൽ ജി-പ്രോട്ടീൻ സജീവമാക്കലല്ല. കെ‌ഒ‌ആർ അഗോണിസ്റ്റ് അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ പരമാവധി തടസ്സം ബാധിച്ചുവെന്ന് കണ്ടെത്തൽ os ഫോസ് എക്സ്പ്രഷൻ സൂചിപ്പിക്കുന്നത് കെ‌ആർ‌-മെഡിറ്റേറ്റഡ് പ്രതികരണത്തിനായി കുറഞ്ഞ റിസപ്റ്റർ റിസർവ്, മ mouse സ് തലച്ചോറിലെ കെ‌ആർ‌ ബൈൻഡിംഗ് സൈറ്റുകളുടെ താഴ്ന്ന നിലയുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു (അണ്ടർ‌വാൾഡ്, മറ്റുള്ളവർ, 1991). നേരെമറിച്ച്, സി.ബി.1ആർ-മെഡിയേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ പ്രവർത്തനവും അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ ഗർഭനിരോധനവും osFosB എക്സ്പ്രഷനെ ബാധിച്ചിട്ടില്ല, ഈ എൻ‌എസി ന്യൂറോണുകളിലെ Δ ഫോസ്ബിയോടുള്ള പ്രതികരണത്തിൽ ഒപിയോയിഡ്, കന്നാബിനോയിഡ് സിസ്റ്റങ്ങൾ വ്യത്യാസപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു എന്ന് സൂചിപ്പിക്കുന്നു.

ഓപിയോയിഡ് റിസപ്റ്റർ-മെഡിയേറ്റഡ് സിഗ്നലിംഗിൽ osFosB- ന്റെ സ്വാധീനം ഞങ്ങളുടെ മുമ്പത്തെ റിപ്പോർട്ടുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു, സ്ട്രൈറ്റത്തിലെ osFosB എക്സ്പ്രഷൻ മോർഫിന്റെ നിശിതവും വിട്ടുമാറാത്തതുമായ ഫലങ്ങൾ മാറ്റിമറിച്ചു (സക്കറിയോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006). ആ പഠനത്തിന്റെ ഒരു കണ്ടെത്തൽ, ഡൈനോർഫിൻ / ഡിയിലെ ΔFosB യുടെ ട്രാൻസ്ജെനിക് എക്സ്പ്രഷൻ ഉള്ള എലികൾ1ആർ സ്ട്രൈറ്റൽ ന്യൂറോണുകൾ നിയന്ത്രണങ്ങളേക്കാൾ പ്ലേസ് കണ്ടീഷനിംഗിൽ മോർഫിനേക്കാൾ കൂടുതൽ സെൻസിറ്റീവ് ആയിരുന്നു. കൂടാതെ, എൻ‌എസിയിലേക്ക് സൈറ്റ്-നിർദ്ദിഷ്ട കുത്തിവയ്പ്പിലൂടെ osFosB യുടെ വൈറലായി മധ്യസ്ഥതയിലുള്ള പ്രകടനത്തിലൂടെ ഈ പ്രഭാവം അനുകരിക്കപ്പെട്ടു. ഈ നിരീക്ഷണങ്ങൾ എൻ‌എ‌സിയിൽ മെച്ചപ്പെടുത്തിയ എം‌ഒ‌ആർ സിഗ്നലിംഗ് കാണിക്കുന്ന നിലവിലെ ഫലങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു.

ജീൻ എൻകോഡിംഗ് ഞങ്ങൾ മുമ്പ് തിരിച്ചറിഞ്ഞു os ഫോസ്ബിയുടെ ടാർഗെറ്റായി ഡൈനോർഫിൻ, കൂടാതെ കുറച്ച ഡൈനോർഫിൻ ΔFosB ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികളിലെ മോർഫിന്റെ വർദ്ധിച്ച പ്രതിഫലദായക ഗുണങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുമെന്ന് നിർദ്ദേശിച്ചു. (സക്കറിയോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006). നിലവിലെ ഫലങ്ങൾ‌ കാണിക്കുന്നത് എൻ‌എ‌സിയിലെ കെ‌ആർ‌-മെഡിറ്റേറ്റഡ് അഡെനൈൽ‌ സൈക്ലേസിന്റെ തടസ്സം os ഫോസ്ബി എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് എലികളിൽ‌ മെച്ചപ്പെടുത്തിയിരിക്കുന്നു, ഇത് ഡൈനോർ‌ഫിൻ‌ കുറച്ചതിനെത്തുടർന്ന് കെ‌ആർ‌ സെൻ‌സിറ്റിവിറ്റിയുടെ നഷ്ടപരിഹാര വർദ്ധനവിനെ പ്രതിഫലിപ്പിച്ചേക്കാം. NAc () ഉൾപ്പെടെയുള്ള പ്രൊഡിനോർഫിൻ നോക്കൗട്ട് എലികളുടെ ചില മസ്തിഷ്ക പ്രദേശങ്ങളിൽ KOR നിയന്ത്രിച്ചിട്ടുണ്ടെന്ന് മുമ്പത്തെ പഠനങ്ങൾ തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട്.ക്ലാർക്ക്, മറ്റുള്ളവർ, 2003).

Δഫൊസ്ബ്, Δച്ജുന്, Δഫൊസ്ബ് ബാധ്യതയായി പങ്കാളി ച്ജുന് പ്രധാന നെഗറ്റീവ് ഫയലിന് മുതംത് എന്ന ഇംദുചിബ്ലെ ത്രംസ്ഗെനിച് പദപ്രയോഗം വിപരീതമായി, മോർ അല്ലെങ്കിൽ ഭാരവും അഗൊനിസ്ത്സ് പ്രകാരം അദെംയ്ല്യ്ല് ച്യ്ച്ലസെ ഇംഹിബിതിഒന് യാതൊരു വിധ. എൻ‌എ‌സിയിലെ സിഗ്നൽ ട്രാൻസ്‌ഡക്ഷന്റെ ഈ തലത്തിൽ ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്റർ സിഗ്നലിംഗ് നിലനിർത്തുന്നതിൽ താരതമ്യേന കുറവുള്ള os ഫോസ്ബി എക്സ്പ്രഷന്റെ അടിസ്ഥാന അളവ് ഒരു പ്രധാന പങ്ക് വഹിക്കുന്നില്ലെന്ന് ഈ ഫലങ്ങൾ സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ഞങ്ങളുടെ മുമ്പത്തെ പഠനത്തിലെ ΔcJun എക്സ്പ്രഷൻ മോർഫിന്റെ കണ്ടീഷൻഡ് റിവാർഡിംഗ് ഇഫക്റ്റ് കുറച്ചിട്ടുണ്ട് എന്ന വസ്തുത (സക്കറിയോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006) ഒന്നുകിൽ കണ്ടീഷനിംഗ് പ്രക്രിയയ്ക്കിടെ osFosB യുടെ മോർഫിൻ ഇൻഡക്ഷൻ മരുന്നിനോടുള്ള പെരുമാറ്റ പ്രതികരണങ്ങളെ നിയന്ത്രിക്കുന്നതിൽ പ്രധാനമാണെന്നും അല്ലെങ്കിൽ ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകൾ പ്രോക്സിമൽ സിഗ്നലിംഗിനെ ബാധിക്കുന്നവ ഒഴികെയുള്ള ΔFosB യുടെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഇഫക്റ്റുകൾ ഒപിയോയിഡ് റിവാർഡിനെ സ്വാധീനിച്ചേക്കാമെന്നും സൂചിപ്പിക്കുന്നു. ഏത് സാഹചര്യത്തിലും, ഇപ്പോഴത്തെ പഠന ഫലങ്ങൾ ഇത് വ്യക്തമാക്കുന്നു, സ്‌ട്രൈറ്റൽ ഡൈനോർഫിൻ / ഡിയിലെ os ഫോസ് എക്‌സ്‌പ്രഷൻ ബേസൽ ലെവലിനേക്കാൾ ഉയർത്തുമ്പോൾ1ആർ-എക്സ്പ്രസ്സിംഗ് ന്യൂറോണുകൾ, എൻ‌എ‌സിയിലെ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് തടയുന്നതിന് എം‌ഒ‌ആറും കെ‌ഒ‌ആറും ചേരുന്നതിൽ ശക്തമായ വർദ്ധനവ് ഉണ്ട്.

MOS- ഉം KOR- മെഡിയേറ്റഡ് സിഗ്നലിംഗും osFosB അമിതപ്രയോഗം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള സംവിധാനങ്ങൾ അവ്യക്തമാണ്, പക്ഷേ MOR ലെവലുകൾ വിലയിരുത്തിയതായി ഞങ്ങൾ മുമ്പ് തെളിയിച്ചിട്ടുണ്ട് [3എച്ച്] നലോക്സോൺ ബൈൻഡിംഗ്, vs ഫോസ്ബിയുടെ എൻ‌എസിയിൽ വേഴ്സസ് ഓഫ് എലികളിൽ വ്യത്യാസമില്ല (സക്കറിയോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006). അതേ പഠനം Gα ആണെന്ന് കണ്ടെത്തിiNFosB എക്സ്പ്രഷൻ ഈ പ്രദേശത്ത് 1, 2 പ്രോട്ടീൻ അളവുകളെ ബാധിച്ചിട്ടില്ല. എന്നിരുന്നാലും, മുമ്പത്തെ ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ അറേ വിശകലനങ്ങൾ Gα ആണെന്ന് കാണിച്ചുo എലികളിലെ osFosB യുടെ NAc ൽ mRNA നിയന്ത്രിച്ചു (മക്ലംഗ്ഗും നെസ്റ്റ്ലറും, 2003). ജി-പ്രോട്ടീൻ സബ്യൂണിറ്റ് എക്‌സ്‌പ്രഷനിൽ പ്രോട്ടീൻ തലത്തിലും അതുപോലെ തന്നെ ജി-പ്രോട്ടീൻ മോഡുലേറ്ററി പ്രോട്ടീനുകളുടെ ആവിഷ്കാരത്തിലും ട്രാൻസ്ജെനിക് os ഫോസ്ബി എക്സ്പ്രഷന്റെ സ്വാധീനം സമഗ്രമായി പരിശോധിക്കുന്നത് ഭാവിയിലെ പഠനങ്ങളിൽ താൽപ്പര്യമുള്ളതാണ്.

OsFosB എക്സ്പ്രഷൻ സിബിയെ വർദ്ധിപ്പിച്ചില്ല എന്നത് രസകരമാണ്1NAc- ൽ R- മെഡിറ്റേറ്റഡ് സിഗ്നലിംഗ്. സി.ബിയിൽ മാറ്റങ്ങൾ വരുത്താൻ സാധ്യതയുണ്ട്1മുഴുവൻ എൻ‌എസി തയ്യാറെടുപ്പിലും അവ്യക്തമായ ന്യൂറോണുകളുടെ ഒരു പ്രത്യേക ജനസംഖ്യയിൽ ആർ സിഗ്നലിംഗ് സംഭവിക്കുന്നു. ഉദാഹരണത്തിന്, administration ന്റെ അഡ്മിനിസ്ട്രേഷൻ9- ടിഎച്ച്‌സി എൻ‌എസിയുടെ കാമ്പിൽ os ഫോസ്ബിയെ ഗണ്യമായി പ്രേരിപ്പിച്ചു, പക്ഷേ ഷെല്ലല്ല (പെറോട്ടി, മറ്റുള്ളവർ, 2008). ഞാൻnd എന്നതുമായി ആ വെല്ലുവിളി കാണിച്ചിരിക്കുന്നു9TH ന്റെ ആവർത്തിച്ചുള്ള അഡ്മിനിസ്ട്രേഷനെ തുടർന്ന്9-എച്ച്‌സി എൻ‌എസി കോറിൽ ഡോപാമൈൻ റിലീസ് വർദ്ധിപ്പിച്ചു, പക്ഷേ ഷെല്ലിൽ റിലീസ് കുറഞ്ഞു (കാഡോണി, മറ്റുള്ളവർ, 2008). ബിട്രാൻസ്ജെനിക് എലികളുടെ 11A ലൈൻ എക്സ്പ്രസ് ΔFosB ഡൈനോർഫിൻ / ഡിയിൽ മാത്രം1സ്ട്രിറ്റത്തിന്റെ R പോസിറ്റീവ് മീഡിയം സ്പൈനി ന്യൂറോണുകൾ, പക്ഷേ സി.ബി.1R ഡൈനോർഫിൻ / ഡി എന്നിവയിൽ പ്രകടമാണ്1R, എൻ‌കെഫാലിൻ / ഡി2R പോസിറ്റീവ് സ്ട്രാറ്ററ്റൽ ന്യൂറോണുകൾ (ഹോഹ്മാൻ ആൻഡ് ഹെർക്കൻഹാം, 2000), അതുപോലെ കോർട്ടിക്കൽ അഫെറന്റുകളുടെ ടെർമിനലുകളിലും (റോബ്, മറ്റുള്ളവർ, 2001). OssFosB- മെഡിറ്റേറ്റഡ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷന്റെ പ്രബലമായ നെഗറ്റീവ് റെഗുലേറ്ററായ ΔcJun, കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ സിഗ്നലിംഗിൽ കാര്യമായ സ്വാധീനം ചെലുത്തിയില്ല, എന്നിരുന്നാലും JcJun രണ്ട് ഡിയിലും പ്രകടമായി പ്രകടിപ്പിക്കപ്പെടുന്നു1 കൂടാതെ ഡി2ഈ എലികളിലെ ഇടത്തരം സ്പൈനി ന്യൂറോണുകളുടെ ജനസംഖ്യ ഉൾക്കൊള്ളുന്നു (പീക്ക്മാൻ, മറ്റുള്ളവർ, 2003). എന്നിരുന്നാലും, MOR, KOR എന്നിവയുമായുള്ള ഫലങ്ങൾ നിർദ്ദേശിച്ചതുപോലെ റിസൾട്ട് സിഗ്നലിംഗിനെ JcJun ബാധിക്കില്ലെന്ന് ബേസൽ osFosB എക്സ്പ്രഷൻ മതിയായ കുറവാണ്. സി.ബി.1ആർ സിഗ്നലിംഗ് ബാസൽ os ഫോസ്ബി എക്സ്പ്രഷൻ ഉപയോഗിച്ച് മിതമായ രീതിയിൽ മെച്ചപ്പെടുത്തുന്നു, അതായത് os ഫോസ്ബി എക്സ്പ്രഷൻ കൂടുതൽ വർദ്ധിപ്പിക്കുകയോ Δ സി ജൂണിനൊപ്പം അതിന്റെ പ്രവർത്തനങ്ങൾ തടയുകയോ ചെയ്യുന്നത് സ്റ്റാറ്റിസ്റ്റിക്കൽ പ്രാധാന്യത്തിന്റെ തലത്തിലെത്താത്ത നേരിയ ഫലങ്ങൾ മാത്രമാണ്. WIN55,212-2 EC താരതമ്യപ്പെടുത്തിക്കൊണ്ട് ഈ വ്യാഖ്യാനത്തിനുള്ള പരോക്ഷ പിന്തുണ കാണാൻ കഴിയും50 ΔcJun വേഴ്സസ് osFosB എന്നിവ പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന എലികൾ തമ്മിലുള്ള മൂല്യങ്ങൾ. WIN55,212-2 EC യുടെ അനുപാതം50 എലികളിലെ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് ഗർഭനിരോധനത്തിനുള്ള മൂല്യം അതിന്റെ EC- യിലേക്ക് JCJun ന്റെ പ്രേരണയോടെ50 ΔFosB ന്റെ പ്രേരണയുള്ള എലികളിലെ ജി-പ്രോട്ടീൻ ആക്റ്റിവേഷന്റെ മൂല്യം എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് ആയിരുന്നു, അതേസമയം ട്രാൻസ്‌ജെൻ ഇൻഡക്ഷൻ ഇല്ലാതെ എലികളിലെ അതേ അനുപാതം എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് ആയിരുന്നു.

മറ്റൊരുവിധത്തിൽ, സിബിയിൽ നേരിട്ട് സ്വാധീനം ചെലുത്താതെ കന്നാബിനോയിഡുകൾ osFosB എക്സ്പ്രഷനെ പ്രേരിപ്പിച്ചേക്കാം1R സിഗ്നലിംഗ്. ഈ സാഹചര്യത്തിൽ, canFosB- മെഡിറ്റേറ്റഡ് ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ റെഗുലേഷൻ വഴി മറ്റ് മരുന്നുകളുടെ സൈക്കോ ആക്റ്റീവ് ഇഫക്റ്റുകളോട് പ്രതികരിക്കാൻ കന്നാബിനോയിഡുകൾക്ക് കഴിയും. ഞാൻn വസ്തുത, administration ന്റെ ഭരണം9-THC ഒപിയോയിഡുകൾക്കും ആംഫെറ്റാമൈനുകൾക്കും ക്രോസ്-സെൻസിറ്റൈസേഷൻ ഉൽ‌പാദിപ്പിക്കുന്നു (കാഡോണി, മറ്റുള്ളവർ, 2001, ലമാർക്ക്, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്), ഈ സിദ്ധാന്തവുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു. മാത്രമല്ല, കന്നാബിനോയിഡ് അഗോണിസ്റ്റ് സി‌പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്‌സിന്റെ ആവർത്തിച്ചുള്ള ഭരണം എൻ‌എ‌സിയിൽ എം‌ആർ‌-മെഡിറ്റേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീൻ ആക്റ്റിവേഷൻ വർദ്ധിപ്പിക്കുമെന്ന് റിപ്പോർട്ടുചെയ്‌തു, എലികൾ‌ ഇന്നത്തെ പഠനത്തിൽ‌ os ഫോസ്ബി പ്രകടിപ്പിക്കുന്നതുപോലെവിഗാനോ, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്). OnFosB എക്സ്പ്രഷന്റെ പ്രഭാവം on9-THC- മെഡിറ്റേറ്റഡ് ബിഹേവിയേഴ്സ് വിലയിരുത്തിയിട്ടില്ല, എന്നാൽ നിലവിലെ ഫലങ്ങൾ ഒരു ഇടപെടലിനെ തടയില്ല. ഇതിന്റെയും ഞങ്ങളുടെ മുമ്പത്തെ പഠനത്തിന്റെയും ഫലങ്ങൾ (സക്കറിയോ, മറ്റുള്ളവർ, 2006) സ്ട്രിയാറ്റത്തിൽ MOR, KOR / dynorphin എന്നിവയിൽ osFosB- ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് മാറ്റങ്ങൾ കാണിക്കുക. Of ന്റെ പ്രതിഫലദായകമായ ഫലങ്ങൾ9-THC, സ്ഥല മുൻ‌ഗണന അനുസരിച്ച് അളക്കുന്നത് MOR ശൂന്യമായ എലികളിൽ നിർത്തലാക്കുന്നു, അതേസമയം KOR ഇല്ലാതാക്കുന്നത് att9-ടിഎച്ച്സി വെറുപ്പ് വെളിപ്പെടുത്തി വെളിപ്പെടുത്തി9-ടിഎച്ച്സി സ്ഥല മുൻഗണന (ഘോസ്ലാൻഡ്, മറ്റുള്ളവർ, എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്). അതുപോലെ, കണ്ടീഷൻ ചെയ്ത സ്ഥല വിരോധം to9കാട്ടുതീ-ടൈപ്പ് എലികളുമായി താരതമ്യപ്പെടുത്തുമ്പോൾ പ്രോ-ഡൈനോർഫിൻ നോക്കൗട്ടിൽ -THC ഇല്ല.സിമ്മർ, മറ്റുള്ളവർ, 2001). ഈ ഡാറ്റ നിർദ്ദേശിക്കുന്നത് that9Δ ഫോസ്ബി ഇൻഡക്ഷനും അനന്തരഫലമായി ഡൈനോർഫിൻ എക്സ്പ്രഷനിൽ കുറവുണ്ടായ എം‌ഒ‌ആർ സിഗ്നലിംഗിനും ശേഷം ടി‌എച്ച്‌സി കൂടുതൽ പ്രതിഫലദായകമായിരിക്കും.

സംഗ്രഹത്തിൽy, ഈ പഠന ഫലങ്ങൾ D ലെ osFosB ന്റെ ആവിഷ്കാരം കാണിച്ചു1ആർ / ഡൈനോർഫിൻ പോസിറ്റീവ് സ്ട്രാറ്ററ്റൽ ന്യൂറോണുകൾ എൻ‌എസിയിലെ ജി-പ്രോട്ടീൻ മധ്യസ്ഥതയിലുള്ള അഡെനൈൽ സൈക്ലേസ് പ്രവർത്തനത്തെ തടയുന്ന തലത്തിൽ MOR- ഉം KOR- മെഡിയേറ്റഡ് സിഗ്നലിംഗും വർദ്ധിപ്പിച്ചു. ഈ കണ്ടെത്തൽ പ്രതിഫലമായി എൻ‌ഡോജെനസ് ഒപിയോയിഡ് സിസ്റ്റത്തിന് ഒരു പങ്ക് തെളിയിച്ച പഠനങ്ങളുമായി പൊരുത്തപ്പെടുന്നു (ട്രിഗോ, മറ്റുള്ളവ, 2010), കൂടാതെ പ്രതിഫലത്തിൽ osFosB- മെഡിറ്റേറ്റഡ് ഇഫക്റ്റുകൾക്ക് സാധ്യതയുള്ള ഒരു സംവിധാനം നൽകുക. നേരെമറിച്ച്, സി.ബി.1പരിശോധിച്ച സാഹചര്യങ്ങളിൽ എൻ‌എസിയിലെ ആർ-മെഡിയേറ്റഡ് സിഗ്നലിംഗിനെ സ്ട്രൈറ്റൽ Δ ഫോസ്ബി എക്സ്പ്രഷൻ കാര്യമായി ബാധിച്ചിട്ടില്ല, എന്നിരുന്നാലും എൻ‌ഡോകണ്ണാബിനോയിഡ് സിസ്റ്റത്തിൽ os ഫോസ്ബി ഇൻഡക്ഷന്റെ സ്വാധീനം നിർണ്ണയിക്കാൻ കൂടുതൽ പഠനങ്ങൾ ആവശ്യപ്പെടുന്നു.

ഗവേഷണ ഹൈലൈറ്റുകൾ

  • ΔFosB പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന എലികളുടെ ന്യൂക്ലിയസ് അക്യുമ്പൻസിൽ MOR സിഗ്നലിംഗ് മെച്ചപ്പെടുത്തി
  • ΔFosB പ്രകടിപ്പിക്കുന്ന എലികളിലും അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ KOR തടസ്സം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു
  • OsFosB ന്റെ എക്സ്പ്രഷൻ സിബിയെ മാറ്റില്ല1ന്യൂക്ലിയസ് അക്യുമ്പൻസിലെ ആർ സിഗ്നലിംഗ്
പോവുക:

സപ്ലിമെന്ററി മെറ്റീരിയൽ

പോവുക:

കടപ്പാടുകൾ

സാങ്കേതിക സഹായത്തിന് രചയിതാക്കൾ ഹെങ്‌ജുൻ ഹീ, ജോർദാൻ കോക്സ്, ആരോൺ ടോമാർചിയോ എന്നിവരോട് നന്ദി പറയുന്നു.35S] GTPγS ബൈൻഡിംഗ് പരിശോധനകൾ. ഈ പഠനത്തെ യു‌എസ്‌പി‌എച്ച്എസ് ഗ്രാന്റ്സ് ഡാക്സ്നൂംക്സ് (എൽ‌ജെ‌എസ്), ഡാക്സ്നൂംക്സ് (ഡിഇഎസ്), പി‌എക്സ്എൻ‌എം‌എക്സ് ഡാക്സ്നൂംക്സ് (ഇജെ‌എൻ) പിന്തുണച്ചിട്ടുണ്ട്.

പോവുക:

അടിക്കുറിപ്പുകൾ

പ്രസാധകന്റെ നിരാകരണം: പ്രസിദ്ധീകരണത്തിനായി അംഗീകരിക്കപ്പെട്ട രേഖപ്പേരമില്ലാത്ത കൈയ്യെഴുത്തുപ്രതിയുടെ ഒരു PDF ഫയൽ ആണ് ഇത്. ഞങ്ങളുടെ കസ്റ്റമറുകൾക്കുള്ള ഒരു സേവനമെന്ന നിലയിൽ, കയ്യെഴുത്തുപ്രതിയുടെ ഈ ആദ്യകാല പതിപ്പാണ് ഞങ്ങൾ നൽകുന്നത്. ഇതിന്റെ ശരിയായ രൂപത്തിൽ പ്രസിദ്ധീകരിക്കപ്പെടുന്നതിനു മുൻപായി ഈ തെളിവുനൽകുന്നതിനുള്ള തെളിവ് കോപ്പിഡിറ്റിംഗ്, ടൈപ്പ്സെറ്റിങ്, അവലോകനത്തിനുണ്ടാകും. ഉൽപ്പാദന പ്രക്രിയയുടെ പിശകുകൾ കണ്ടേക്കാം, അത് ഉള്ളടക്കത്തെ ബാധിക്കും, ഒപ്പം ജേണലിസം ബാധകമാകുന്ന എല്ലാ നിയമപരമായ നിരാകരണങ്ങളും.

പോവുക:

അവലംബം

  • ബോസാർത്ത് എം‌എ, വൈസ് ആർ‌എ. ശരീരഘടനാപരമായി വ്യത്യസ്തമായ ഓപിയറ്റ് റിസപ്റ്റർ ഫീൽഡുകൾ പ്രതിഫലവും ശാരീരിക ആശ്രയത്വവും മധ്യസ്ഥമാക്കുന്നു. ശാസ്ത്രം. 1984;224: 516-517. [PubMed]
  • ബ്രാഡ്‌ഫോർഡ് എം.എം. പ്രോട്ടീൻ-ഡൈ ബൈൻഡിംഗിന്റെ തത്വം ഉപയോഗിച്ച് പ്രോട്ടീന്റെ മൈക്രോഗ്രാം അളവ് കണക്കാക്കുന്നതിനുള്ള ദ്രുതവും സെൻസിറ്റീവുമായ രീതി. അനൽ. ബയോകെം. 1976;72: 248-254. [PubMed]
  • ബ്രീവൊജെൽ സി‌എസ്, ചിൽ‌ഡേഴ്സ് എസ്‌ആർ, ഡെഡ്‌വിലർ എസ്‌എ, ഹാംപ്‌സൺ ആർ‌, വോഗ്റ്റ് എൽ‌ജെ, സിം-സെല്ലി എൽ‌ജെ. ക്രോണിക് ഡെൽറ്റ9-ടെട്രാഹൈഡ്രോകന്നാബിനോൾ ചികിത്സ തലച്ചോറിലെ കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ-ആക്റ്റിവേറ്റഡ് ജി-പ്രോട്ടീനുകളുടെ സമയത്തെ ആശ്രയിച്ചുള്ള നഷ്ടം ഉണ്ടാക്കുന്നു. ജെ. ന്യൂറോചെം. 1999;73: 2447-2459. [PubMed]
  • ബ്രിവോജൽ സി‌എസ്, സെല്ലി ഡി‌ഇ, ചിൽ‌ഡേഴ്സ് എസ്‌ആർ. ഉത്തേജിപ്പിക്കുന്നതിനുള്ള കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ അഗോണിസ്റ്റ് ഫലപ്രാപ്തി [35എസ്] എലി സെറിബെല്ലർ മെംബ്രണുകളുമായി ജിടിപിഎസ് ബന്ധിപ്പിക്കുന്നത് ജിഡിപി ബന്ധത്തിൽ അഗോണിസ്റ്റ്-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് കുറവുകളുമായി ബന്ധപ്പെട്ടിരിക്കുന്നു. J. Biol. ചെം. 1998;273: 16865-16873. [PubMed]
  • കാഡോണി സി, പിസാനു എ, സോളിനാസ് എം, അക്വാസ് ഇ, ഡി ചിയാര ജി. ഡെൽറ്റ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്-ടെട്രാഹൈഡ്രോകന്നാബിനോളിനെ ആവർത്തിച്ച് തുറന്നുകാട്ടിയതിനുശേഷം ബിഹേവിയറൽ സെൻ‌സിറ്റൈസേഷനും മോർഫിൻ ഉപയോഗിച്ച് ക്രോസ് സെൻ‌സിറ്റൈസേഷനും. സൈക്കോഫോർമാക്കോളജി (ബെർൽ) 2001;158: 259-266. [PubMed]
  • കാഡോണി സി, വാലന്റിനി വി, ഡി ചിയാര ജി. ബിഹേവിയറൽ സെൻസിറ്റൈസേഷൻ ടു ഡെൽറ്റ എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്-ടെട്രാഹൈഡ്രോകന്നാബിനോൾ, ക്രോസ്-സെൻ‌സിറ്റൈസേഷൻ വിത്ത് മോർഫിൻ: അക്കുമ്പൽ ഷെല്ലിലും കോർ ഡോപാമൈൻ ട്രാൻസ്മിഷനിലും ഡിഫറൻഷ്യൽ മാറ്റങ്ങൾ. ജെ. ന്യൂറോചെം. 2008;106: 1586-1593. [PubMed]
  • ചെൻ ജെ, കെൽ‌സ് എം‌ബി, സെങ് ജി, സകായ് എൻ, സ്റ്റെഫെൻ സി, ഷോക്കറ്റ് പി‌ഇ, പിക്കിയോട്ടോ എം‌ആർ, ഡുമാൻ ആർ‌എസ്, നെസ്‌ലർ ഇജെ. തലച്ചോറിലെ ഇൻഡ്യൂസിബിൾ, ടാർഗെറ്റുചെയ്‌ത ജീൻ എക്സ്പ്രഷൻ ഉള്ള ട്രാൻസ്ജെനിക് മൃഗങ്ങൾ. മോൽ. ഫാർമകോൾ. 1998;54: 495-503. [PubMed]
  • ചൈൽഡേഴ്സ് SR. ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്റർ-കപ്പിൾഡ് രണ്ടാമത്തെ മെസഞ്ചർമാർ. ലൈഫ് സയൻസ്. 1991;48: 1991-2003. [PubMed]
  • ചൈൽഡേഴ്സ് എസ്ആർ, ഫ്ലെമിംഗ് എൽ, കൊങ്കോയ് സി, മാർക്കൽ ഡി, പാച്ചെകോ എം, സെക്സ്റ്റൺ ടി, വാർഡ് എസ്. ഒപിയോയിഡ്, മസ്തിഷ്കത്തിലെ അഡെനൈൽ സൈക്ലേസിന്റെ കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ തടയൽ. ആൻ. NY അക്കാഡ്. സയൻസ്. 1992;654: 33-51. [PubMed]
  • ചിൽ‌ഡേഴ്സ് SR, സിയാവോ ആർ, വോഗ്റ്റ് എൽ‌ജെ, സിം-സെല്ലി എൽ‌ജെ. കപ്പ ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്റർ ഉത്തേജനം [35എസ്] ഗിനിയ പിഗ് മസ്തിഷ്കത്തിൽ ജിടിപി‌എസ് ബൈൻഡിംഗ്: കപ്പയ്ക്കുള്ള തെളിവുകളുടെ അഭാവം2ജി-പ്രോട്ടീനുകളുടെ സെലക്ടീവ് ആക്റ്റിവേഷൻ. ബയോകെം. ഫാർമകോൾ. 1998;56: 113-120. [PubMed]
  • ക്ലാർക്ക് എസ്, സിമ്മർ എ, സിമ്മർ എ എം, ഹിൽ ആർ‌ജി, കിച്ചൻ I. റീജിയൻ സെലക്ടീവ് അപ്-റെഗുലേഷൻ മൈക്രോ, ഡെൽറ്റ, കപ്പ-ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകൾ ന്യൂറോ സയന്സ്. 2003;122: 479-489. [PubMed]
  • കോൾബി സിആർ, വിസ്ലർ കെ, സ്റ്റെഫെൻ സി, നെസ്ലർ ഇജെ, സെൽ ഡി ഡബ്ല്യു. സ്ട്രെറ്റൽ സെൽ ടൈപ് അധിഷ്ഠിത ഡെവെറ്റോഫോസ് ബിയർ കൊക്കെയ്ൻ പ്രോത്സാഹനവും വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. ജെ. ന്യൂറോസി. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • ഗാർഡ്നർ EL. എൻ‌ഡോകണ്ണാബിനോയിഡ് സിഗ്നലിംഗ് സിസ്റ്റവും മസ്തിഷ്ക പ്രതിഫലവും: ഡോപാമൈന് പ്രാധാന്യം. ഫാർമകോൾ. ബയോകെം. ബീവി. 2005;81: 263-284. [PubMed]
  • ഘോസ്ലാൻഡ് എസ്, മാത്യൂസ് എച്ച്ഡബ്ല്യു, സിമോണിൻ എഫ്, ഫില്ലിയോൾ ഡി, കീഫെർ ബി‌എൽ, മാൽഡൊണാഡോ ആർ. കന്നാബിനോയിഡുകളുടെ പ്രചോദനാത്മക ഫലങ്ങൾ മ്യൂ-ഒപിയോയിഡ്, കപ്പ-ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകൾ ഉപയോഗിച്ച് മധ്യസ്ഥമാക്കുന്നു. ജെ. ന്യൂറോസി. 2002;22: 1146-1154. [PubMed]
  • ഹെർക്കൻഹാം എം, ലിൻ എ ബി, ജോൺസൺ എംആർ, മെൽ‌വിൻ എൽ‌എസ്, ഡി കോസ്റ്റ ബി‌ആർ, റൈസ് കെ‌സി. എലി തലച്ചോറിലെ കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകളുടെ സ്വഭാവവും പ്രാദേശികവൽക്കരണവും: ഒരു ക്വാണ്ടിറ്റേറ്റീവ് ഇൻ വിട്രോ ഓട്ടോറാഡിയോഗ്രാഫിക് സ്റ്റഡി. ജെ. ന്യൂറോസി. 1991;11: 563-583. [PubMed]
  • ഹോഹ്മാൻ എജി, ഹെർക്കൻഹാം എം. എലി സ്ട്രിയാറ്റത്തിന്റെ ന്യൂറോണൽ സബ്പോപ്പുലേഷനുകളിൽ കന്നാബിനോയിഡ് സിബി (എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്) റിസപ്റ്റർ എം‌ആർ‌എൻ‌എയുടെ പ്രാദേശികവൽക്കരണം: സിറ്റു ഹൈബ്രിഡൈസേഷൻ പഠനത്തിലെ ഇരട്ട ലേബൽ. സമന്വയിപ്പിക്കുക. 2000;37: 71-80. [PubMed]
  • ഹൗലെറ്റ് എസി, ബാർട്ട് എഫ്, ബോന്നർ ടിഐ, കാബ്രൽ ജി, കാസെല്ലസ് പി, ദേവാന ഡബ്ല്യുഎ, ഫെൽഡർ സിസി, ഹെർക്കൻഹാം എം, മാക്കി കെ, മാർട്ടിൻ ബിആർ, മെക്ക ou ലം ആർ, പെർട്ട്‌വീ ആർ‌ജി. ഇന്റർനാഷണൽ യൂണിയൻ ഓഫ് ഫാർമക്കോളജി. XXVII. കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകളുടെ വർഗ്ഗീകരണം. ഫാർമക്കോളജിക്കൽ അവലോകനം. 2002;54: 161-202.
  • ഹ്യൂസ്റ്റിസ് എം‌എ, ഗോറെലിക് ഡി‌എ, ഹൈഷ്മാൻ എസ്‌ജെ, പ്രെസ്റ്റൺ കെ‌എൽ, നെൽ‌സൺ ആർ‌എ, മൂൽ‌ചൻ ഇടി, ഫ്രാങ്ക് ആർ‌എ. CB1- സെലക്ടീവ് കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്റർ എതിരാളി SR141716 പുകവലിച്ച മരിജുവാനയുടെ ഉപരോധം. ആർച്ച്. ജനറൽ സൈക്യാട്രി. 2001;58: 322-328. [PubMed]
  • സ്റ്റീഫൻ സി, ഷാങ് വൈ ജെ, മാറോട്ടി എൽ, സെൽ ഡി ഡബ്ല്യു, ടാക്കാച്ച് ടി, ബാരനൗസ്കാസ് ജി, സുർമിയർ ഡി ജെ, നെവ് ആർ ആർ, ഡുമാൻ ആർഎസ്, പിസിപ്പോട്ടോ എം.ആർ, കെൻസി, നെസ്റ്റ്ലർ ഇജെ. തലച്ചോറിലെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷൻ ഫാക്റ്റർ ഡെൽറ്റ ഫോസ്ബിനെ വ്യാഖ്യാനിക്കുന്നത് കൊക്കെയ്നുമായി സംവേദനക്ഷമതയെ നിയന്ത്രിക്കുന്നു. പ്രകൃതി. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • കൂബ് ജിഎഫ്, വോൾക്കോ ​​എൻ‌ഡി. ആസക്തിയുടെ ന്യൂറോ സർക്കിട്രി. ന്യൂറോ സൈസോഫോർമാളോളജി. 2010;35: 217-238. [PMC സ്വതന്ത്ര ലേഖനം] [PubMed]
  • ലമാർക്ക് എസ്, തഗ്‌സൂട്ടി കെ, സൈമൺ എച്ച്. ഡെൽറ്റയുമായുള്ള വിട്ടുമാറാത്ത ചികിത്സ (എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ്) -ടെട്രാഹൈഡ്രോകന്നാബിനോൾ ആംഫെറ്റാമൈൻ, ഹെറോയിൻ എന്നിവയ്ക്കുള്ള ലോക്കോമോട്ടോർ പ്രതികരണം വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു. മയക്കുമരുന്നിന് അടിമപ്പെടാനുള്ള സാധ്യത. ന്യൂറോഫാർമാളോളജി. 2001;41: 118-129. [PubMed]
  • മാൽഡൊണാഡോ ആർ, വാൽ‌വർ‌ഡെ ഓ, ബെറെൻ‌ഡെറോ എഫ്. മയക്കുമരുന്നിന് അടിമകളായ എൻ‌ഡോകണ്ണാബിനോയിഡ് സിസ്റ്റത്തിന്റെ പങ്കാളിത്തം. ട്രെൻഡുകൾ ന്യൂറോസി. 2006;29: 225-232. [PubMed]
  • മൻസൂർ എ, ഫോക്സ് സി‌എ, തോംസൺ ആർ‌സി, അകിൽ എച്ച്, വാട്സൺ എസ്‌ജെ. mu-Opioid receptor mRNA ശൈലിയിലെ mRNA എക്സ്പ്രഷൻ: mu- റിസപ്റ്റർ ബൈൻഡിംഗുമായി താരതമ്യം. ബ്രെയിൻ റിസ. 1994;643: 245-265. [PubMed]
  • മാത്യൂസ് എച്ച്ഡബ്ല്യുഡി, മാൽഡൊണാഡോ ആർ, സിമോണിൻ എഫ്, വാൽവർഡെ ഓ, സ്ലോ എസ്, കിച്ചൻ ഐ, ബെഫോർട്ട് കെ, ഡിയറിച്ച് എ, ലെമീർ എം, ഡോൾ പി, സാവാര ഇ, ഹന oun ൻ ജെ, റോക്ക്സ് ബിപി, കീഫർ ബി‌എൽ. Μ- ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്റർ ജീൻ ഇല്ലാത്ത എലികളിൽ മോർഫിൻ-ഇൻഡ്യൂസ്ഡ് അനൽ‌ജെസിയ, റിവാർഡ് ഇഫക്റ്റ്, പിൻവലിക്കൽ ലക്ഷണങ്ങൾ എന്നിവ നഷ്ടപ്പെടുന്നു. പ്രകൃതി. 1996;383: 819-823. [PubMed]
  • മക്ലംഗ്ഗ് CA, നെസ്റ്റ്ലർ ഇജെ. ജീൻ ആവിഷ്കാരവും കോകൈൻ റിവാർഡും ക്രെബും ഡെൽറ്റാ ഫോസ്ബും നിയന്ത്രിക്കുന്നു. നാറ്റ്. ന്യൂറോസി. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • മക്ലംഗ് സി.എ, യുലറി പി.ജി, പെറൊട്ടി എൽഐ, സക്കറിയാവു വി, ബെർറ്റൻ ഓ, നെസ്ലർ ഇജെ. DeltaFosB: തലച്ചോറിലെ ദീർഘകാല ആധാരത്തിനുള്ള ഒരു തന്മാത്രാ സ്വാരം. ബ്രെയിൻ റെസ്. മോഡൽ. ബ്രെയിൻ റെസ്. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • മുള്ളർ ഡി‌എൽ, അണ്ടർ‌വാൾഡ് ഇ.എം. ഇടയ്ക്കിടെയുള്ള മോർഫിൻ അഡ്മിനിസ്ട്രേഷന് ശേഷം D1 ഡോപാമൈൻ റിസപ്റ്ററുകൾ എലി സ്ട്രിയാറ്റത്തിൽ ഡെൽറ്റ ഫോസ്ബി ഇൻഡക്ഷൻ മോഡുലേറ്റ് ചെയ്യുന്നു. ജെ. ഫാർമാക്കോൾ. കാലഹരണപ്പെടൽ നബി 2005;314: 148-154. [PubMed]
  • നെസ്റ്റ്ലർ ഇജെ. അവലോകനം ചെയ്യുക. ആസക്തിയുടെ ട്രാൻസ്ക്രിപ്ഷണൽ സംവിധാനങ്ങൾ: ഡെൽറ്റാ ഫോസ്ബിന്റെ പങ്ക്. ഫിലോസ്. ട്രാൻസ്. ആർ. സോക്ക്. ലോണ്ട്. ബി. ബയോൾ. സയൻസ്. 2008;363: 3245-3255. [PMC സ്വതന്ത്ര ലേഖനം] [PubMed]
  • നെസ്‌ലർ ഇജെ, കെൽ‌സ് എം‌ബി, ചെൻ ജെ. ഡെൽ‌റ്റ ഫോസ്ബി: ദീർഘകാല ന്യൂറൽ, ബിഹേവിയറൽ പ്ലാസ്റ്റിറ്റിയുടെ തന്മാത്രാ മധ്യസ്ഥൻ. ബ്രെയിൻ റിസ. 1999;835: 10-17. [PubMed]
  • നൈ ഹെ, ഹോപ്പ് ബിടി, കെൽസ് എം., ഇദറോള എം, നെസ്ലർ ഇജെ. ക്രോണിക് FOS ആൻറിജൻസ് ഇൻഡക്സിൽ കോക്കെയ്ൻ നിയന്ത്രണം സ്ട്രൈറ്റത്തിന്റെയും അണുകേന്ദ്രത്തിലെ അക്യൂമെൻസിന്റെയും നിയന്ത്രണം ജെ. ഫാർമാക്കോൾ. കാലഹരണപ്പെടൽ നബി 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • ഡാർമാൻ സി, സ്റ്റീഫൻ സി, മോണ്ടിഗേഗിയ എൽ, അലെൻ എം ആർ, സ്റ്റോക്ക് ജെഎൽ, ഡൂമാൻ ആർഎസ്, മക്നീഷ് ജെ ഡി, ബരോട്ട് എം, സെൽ ഡി ഡബ്ല്യു, നെസ്റ്റ്ലർ ഇ.ജെ, പി.റ്റി.എം. എം, കോൾബി സി, പെറെറ്റോ എൽഐ, തെക്കുമല്ല പി, കാർലെ ടി, അലിറി പി, ചാവോ ജെ, , ഷെയ്ഫർ ഇ. ഇൻസുലുബിൾ, മസ്തിഷ്ക മേഖലയിലെ സ്പെഷ്യജിക്കൽ എലികളുടെ സി-ജുനിന്റെ മസ്തിഷ്ക മേഖലയുടെ വികാസം, കൊക്കെയ്നുമായി സംവേദനക്ഷമത കുറയ്ക്കുന്നു. ബ്രെയിൻ റിസ. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • പിറോട്ടി എൽഐ, വീവർ ആർ ആർ, റോബിസൺ ബി, റെൻഘൽ ഡബ്ല്യു, എൽ ഗ്രേറ്റർ, യസ്ദാനി എസ്, എൽമോർ ആർ.ജി., നാൻ ഡി ഡി, സെലി ഡീ, മാർട്ടിൻ ബി, സിം-ശെൽലി എൽ, ബച്ചെൽ ആർ.കെ, സെൽ ഡി ഡബ്ല്യു, നെസ്റ്റ്ലർ ഇജെ. മയക്കുമരുന്ന് ദുരുപയോഗം ചെയ്തുകൊണ്ട് തലച്ചോറിലെ DeltaFosB ഉദ്ധരണിയിലെ പ്രത്യേക രീതികൾ. സമന്വയിപ്പിക്കുക. 2008;62: 358-369. [PMC സ്വതന്ത്ര ലേഖനം] [PubMed]
  • റോബ് ഡി, അലോൻസോ ജി, ഡച്ചാംപ് എഫ്, ബോകേർട്ട് ജെ, മൻസോണി ഒജെ. മ mouse സ് ന്യൂക്ലിയസ് അക്കുമ്പെൻസുകളുടെ ഗ്ലൂട്ടാമീറ്റർജിക് സിനാപ്‌സുകളിൽ കന്നാബിനോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകളുടെ പ്രാദേശികവൽക്കരണവും പ്രവർത്തനരീതിയും. ജെ. ന്യൂറോസി. 2001;21: 109-116. [PubMed]
  • സലോമോൻ വൈ. അഡെനിലേറ്റ് സൈക്ലേസ് അസ്സേ. അഡ്വ. സൈക്ലിക് ന്യൂക്ലിയോടൈഡ് റെസ്. 1979;10: 35-55. [PubMed]
  • സെല്ലി ഡിഇ, സിം എൽജെ, സിയാവോ ആർ, ലിയു ക്യു, ചിൽ‌ഡേഴ്സ് എസ്ആർ. മു ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്റർ-ഉത്തേജിത [35എസ്] എലി തലാമസിലും സംസ്ക്കരിച്ച സെൽ ലൈനുകളിലും ജിടിപി‌എസ് ബൈൻഡിംഗ്: അഗോണിസ്റ്റ് ഫലപ്രാപ്തിക്ക് അടിവരയിടുന്ന സിഗ്നൽ ട്രാൻസ്‌ഡക്ഷൻ മെക്കാനിസങ്ങൾ. മോൽ. ഫാർമകോൾ. 1997;51: 87-96. [PubMed]
  • ട്രിഗോ ജെഎം, മാർട്ടിൻ-ഗാർസിയ ഇ, ബെറെൻഡെറോ എഫ്, റോബ്ലെഡോ പി, മാൽഡൊണാഡോ ആർ. എൻ‌ഡോജെനസ് ഒപിയോയിഡ് സിസ്റ്റം: മയക്കുമരുന്നിന് അടിമപ്പെടുന്ന ഒരു സാധാരണ കെ.ഇ. മയക്കുമരുന്ന് മാലിന്യം ആശ്രയിച്ചിരിക്കുന്നു. 2010;108: 183-194. [PubMed]
  • അണ്ടർ‌വാൾഡ് ഇ.എം, ക്നാപ്പ് സി, സുക്കിൻ ആർ‌എസ്. എലി, ഗിനിയ പിഗ് തലച്ചോറിലെ κ1, κ2 ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്ററുകളുടെ ന്യൂറോ അനാട്ടമിക്കൽ ലോക്കലൈസേഷൻ. ബ്രെയിൻ റിസ. 1991;562: 57-65. [PubMed]
  • വാക്കറിനോ എഫ്ജെ, ബ്ലൂം എഫ്ഇ, കൂബ് ജിഎഫ്. ന്യൂക്ലിയസ് അക്കുമ്പെൻസിന്റെ ഉപരോധം ഒപിയേറ്റ് റിസപ്റ്ററുകൾ എലിയിലെ ഇൻട്രാവൈനസ് ഹെറോയിൻ പ്രതിഫലത്തെ ആകർഷിക്കുന്നു. സൈക്കോഫോർമാക്കോളജി (ബെർൽ) 1985;86: 37-42. [PubMed]
  • വിഗാനോ ഡി, റുബിനോ ടി, വാക്കാനി എ, ബിയാൻ‌ചെസി എസ്, മാർ‌മോറാറ്റോ പി, കാസ്റ്റിഗ്ലിയോണി സി, പരോളാരോ ഡി. സൈക്കോഫോർമാക്കോളജി (ബെർൽ) 2005;182: 527-536. [PubMed]
  • സക്കറിയാവു വി, ബൊളനോസ് സി, സെലിലി ഡി, തിയോബാൾഡ് ഡി, കാസിഡി എംപി, കെൽസ് എം ബി, ഷാ-ലച്ച്മാൻ ടി, ബർട്ടൻ ഒ, സിം-ശെൽലി എൽജെ, ദിലോൺ ആർജെ, കുമാർ എ, നെസ്ലർ ഇജെ. ന്യൂക്ലിയസിലെ DeltaFosB- യുടെ പ്രധാന പങ്ക് മോർഫിൻ പ്രവർത്തനത്തിൽ accumbens. നാറ്റ്. ന്യൂറോസി. 2006;9: 205-211. [PubMed]
  • സാങ്കെൻ എ, സോളിനാസ് എം, ഇകെമോട്ടോ എസ്, ഗോൾഡ്ബെർഗ് എസ്ആർ, വൈസ് ആർ‌എ. കന്നാബിനോയിഡ് റിവാർഡിനായി രണ്ട് ബ്രെയിൻ സൈറ്റുകൾ. ജെ. ന്യൂറോസി. 2006;26: 4901-4907. [PubMed]
  • J ു ജെ, ലുവോ എൽ വൈ, ലി ജെ ജി, ചെൻ സി, ലിയു-ചെൻ എൽ വൈ. അഗോണിസ്റ്റുകൾ ക്ലോൺ ചെയ്ത ഹ്യൂമൻ കപ്പ ഒപിയോയിഡ് റിസപ്റ്ററിന്റെ സജീവമാക്കൽ [35S] ജിടിപിഎസ് മെംബ്രണുകളുമായി ബന്ധിപ്പിക്കുന്നത് വർദ്ധിപ്പിക്കുന്നു: ലിഗാൻഡുകളുടെ സാധ്യതകളും ഫലപ്രാപ്തിയും നിർണ്ണയിക്കുന്നു. ജെ. ഫാർമാക്കോൾ. കാലഹരണപ്പെടൽ നബി 1997;282: 676-684. [PubMed]
  • സിമ്മർ എ, വാൽ‌ജെൻറ് ഇ, കോനിഗ് എം, സിമ്മർ എ‌എം, റോബ്ലെഡോ പി, ഹാൻ എച്ച്, വാൽ‌വർ‌ഡെ ഓ, മാൽ‌ഡൊണാഡോ ആർ. ഡെൽ‌റ്റയുടെ അഭാവം -എക്സ്എൻ‌യു‌എം‌എക്സ് ജെ. ന്യൂറോസി. 2001;21: 9499-9505. [PubMed]
  • സിമ്മർ എ, സിമ്മർ എ എം, ഹോഹ്മാൻ എജി, ഹെർക്കൻഹാം എം, ബോന്നർ ടിഐ. കന്നാബിനോയിഡ് CB1 റിസപ്റ്റർ നോക്ക out ട്ട് എലികളിലെ മരണനിരക്ക്, ഹൈപ്പോആക്ടിവിറ്റി, ഹൈപ്പോഅൽജിയ എന്നിവ വർദ്ധിച്ചു. പ്രോ. നാറ്റ്. അക്കാഡ്. സയൻസ്. യുഎസ്എ 1999;96: 5780-5785. [PMC സ്വതന്ത്ര ലേഖനം] [PubMed]