Опиоидоор өдөөгддөг неополибраци нь хөндлөнгийн талбайд байрлах dopaminergic neurons нь байгалийн ба опиатын шагнал (2014)

COMMENTS: The DeltaFosB судалгаа Бид бүгд анхаарлаа хандуулдаг nucleus accumbens (шагналын төв), бэлгийн харьцаа нь мета ба кокаинтай ижил тархины механизмыг алдагдуулдаг болохыг тогтоожээ. Энэ судлаачийн хийсэн чухал судалгаанаас (Нийтлэг мэдрэлийн уян налархайн механизмын тухай Байгалийн болон Эмийн Шагналын тухай хууль ΔFosB гол хянагч (2013)):

Тиймээс байгалийн ба эмийн урамшуулал нь зөвхөн нэг мэдрэлийн зам дээр нийлж зогсохгүй, ижил молекулын медиаторууд дээр төвлөрч, цөмийн акумбенсын ижил мэдрэлийн эсүүдэд нэгдэж, урамшууллын ялгаа болон хоёр төрлийн шагналын "хүсэлд" нөлөөлөх болно.

Ачаалал: метал, кокаин, хүйс бүгд ижил төстэй зүйлийг адилхан эсийн урамшууллын төвд (цөмд нэрвэгдэгсэд) хийж, тархинд өөр өөрөөр хийдэг. Энэ нь механизм, үр нөлөөнд байгалийн ашиг тус, мансууруулах бодисын ялгаатай байдаг түгээмэл яриа юм.

Энэхүү шинэ судалгаагаар VTA-г бэлгийн харьцаа юу хийдэг болохыг судлав. VTA бол допамин үүсгэдэг мэдрэлийн эсүүд эхэлдэг бөгөөд тэдгээр нь accumbens цөм, урд талын бор гадаргын хэсэг, мөн амигдала хүртэл салаалдаг. VTA бол манай ихэнх допамины эх үүсвэр (худаг) юм. Шагналын тойргийн эдгээр 2 зургийг үзнэ үү. Pic1, Pic2

Судлаачид хүйс (climax) нь VTA-ийн эсийн биеийг түр хугацаагаар (эрэгтэйчүүдэд) бууруулдаг болохыг тогтоожээ. Биеийн бие ба тэдний цог жавхлан тархины саарал биеийг оруулдаг. Энэ нь героины донтолт нь VTA-д (героинийг нэг удаа хэрэглэхгүй харин артерийн героин хэрэглэх) юм. VTA эсийн энэ агшилтыг хараарай Хүний heroin-д тохиолддог.

Хүйсээр өдөөгдөж буй эсийн агшилтын хэмжээ дор хаяж 7 хоногийн турш үргэлжилдэг. Хүйсээр өдөөгдсөн өөрчлөлтүүд 30-ийн өдрүүдэд хэвийн байсан бол судлаачид зөвхөн 1, 7, болон 30 өдрүүдээр үнэлжээ.

Героинд донтох эсийн биений агшилт нь accumbens цөмд бага допамин үүсгэдэг - эсвэл бидний нэрлэдэг зүйл desensitization. Судлаачид тэдний хариу үйлдлийг үнэлэхийн тулд (сексийн дараа) харханд морфин тарьсан боловч юу ч болоогүй байна. Ихэнхдээ хархнууд морфиныг маш ихээр хайрладаг боловч энд тэд түр зуурын мэдрэмжгүй болсон байв. Товчхондоо, үрийн шингэний дараахь хархнуудын шагналын тойрог нь героины түвшин бага байсан тул хариу өгөхгүй байв. Судлаачид "хэвийн" хархны урвалыг өдөөхөд илүү өндөр тун шаардлагатай болно гэж таамаглаж байсан.

Дүгнэж хэлэхэд - Секс (түр хугацаагаар) героинд донтохтой ижил зүйлийг VTA-д хийдэг: мэдрэлийн эсийн бие үүсгэдэг допамины агшилт. Энэ нь шагналын төв дэх допаминыг бууруулж, хар тамхинд төдийлөн хариу үзүүлэхгүй болоход хүргэдэг бөгөөд хархны тархийг сэргээхэд дор хаяж 7 хоног шаардлагатай байдаг.

 

J Neurosci. 2014 Jun 25;34(26):8825-36. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.0133-14.2014.

Pitchers KK1, Хөөх CM2, Белоат LN3, Fuller J2, Ван С2, Frohmader KS2, Laviolette SR2, Lehman MN4, LM хөргөх5.

Товч

Байгалийн урамшуулал ба хүчирхийлэл нь мезолимпийн зам дээр тархаж, цөмийн хавдрын мэдрэлийн уян хатан тогтолцоог бий болгодог. Опиатын архаг хордлого нь морфины шагналын хүлцэлийг зохицуулдаг амны хөндийн нугаламын талбайн допаминарийн мэдрэлийн мэдрэлийн уян хатан байдлыг өдөөж өгдөг.

Энд тест нь VTA дахь эндоген опиоидуудыг сулруулдаг гэж таамаглаж буй таамаглалыг эрэгтэй хүний ​​харханд VTA допамины эсийн морфологийн өөрчлөлтийг бий болгож, улмаар бэлгийн зан үйлийн туршлагаас үүдэлтэй арматурын урт хугацааны илэрхийлэлийг зохицуулдаг.

Нэгдүгээрт, бэлгийн туршлага нь VTA dopamine soma 1 болон 7-ийн хэмжээ буурсан, гэхдээ 30-ийн сүүлийн өдрүүд өнгөрсний дараа. Энэ нөлөө нь нaloxone-аар хаагдсан холбоо барих бүрээс өмнө; Тиймээс VTA допамины эсийн уян чанар нь эндоген опиоидуудын үйл ажиллагаанаас хамааралтай байв.

Нөгөөтэйгүүр, бэлгийн туршлагатай эрчүүд 0.5 мг / кг морфиныг илүүд үздэг тул VTA уян хатан байдал өөрчлөгдсөн опиатын шагналтай холбоотой байв.

Дараа нь дотоодын опиоидын үйлдэл нь системтэй буюу дотогшоо-VTA-ийн аль алинаар нь зохицсон туршлагын нaloxone эмтэй эр ямагт бэлгийн харьцаа, санах ойг зуучилж өгдөг эсэхийг тогтоожээ. Налаксон нь бэлгийн зан үйлийн анхдагч туршлагаас үүдэлтэй саад тотгорыг даван туулах чадвартай, эсвэл нөхцөлд тохирсон байрлалыг даван туулахыг хориглодоггүй. Гэсэн хэдий ч naloxone эмчилгээ нь хавсарсан болзошгүй шинж тэмдгээр өдөөгдөж буй месолиметрийн хэсгүүдэд бэлгийн зан үйл, мэдрэлийн идэвхжүүлэлтийн мэдрэлийн идэвхжилтийг дэмжсэн урт хугацааны илэрхийлэлийг сулруулсан.

Эдгээр өгөгдлүүд нь эндотоген опиоидууд нь морфин урамшуулал, байгалийн шагнал урамшуулал, урт хугацааны санах ойд чухал үүрэг гүйцэтгэдэг VTA dopamine neurons-ийн мэдрэлийн уян хатан байдлыг өдөөдөг.

 

Оршил

Байгалийн шагналын зан үйлүүд нь мезокортиколимик системийнMeisel болон Mullins, 2006; Hoebel et al., 2009; Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a; Young et al., 2011; Блум нар, 2012). Хүчирхийлэлд өртөх эм нь энэ тогтолцоонд мэдрэлийн өөрчлөлт үүсгэдэг бөгөөд энэ нь эргээд мансууруулах бодисын хөгжил,Hyman et al., 2006; Нестлер, 2012). Бид өмнө нь байгалийн шагнал урамшуулал, тухайлбал, эрэгтэй харханд бэлгийн харьцаанд орж байсан туршлага, мөн түүнчлэн нуклейн олдвор (NAc) -д мэдрэлийн уян хатан байдлыг үүсгэдэг, түүний дотор dendritic spinesPitchers et al., 2010a) болон deltaFosB (Pitchers et al., 2013). Нөгөөтэйгүүр сексийн өдөөн хатгасан пластик нь бэлгийн зан үйлийг санаачлагч, гүйцэтгэлийг дэмжих байдлаар илэрхийлэгдэх дараалсан бэлгийн харилцааны үр нөлөөнд чухал ач холбогдолтой (Pitchers et al., 2010b, 2012, 2013). Үүнээс гадна сексийн туршлага нь сэтгэлзүйн эмгэгийн хариу урвалыг өөрчилдөг.Frohmader et al., 2010a; Pitchers et al., 2010a, 2013).

NAc нь ампулын талбайн (VTA) хэсгийн dopaminergic neurons-ий доод хэсэг юм. VTA dopamine neurons нь бэлгийн хавьтлаар идэвхжиж, бэлгийн шагналыг урьдчилан таамаглах боломжтой нөхцөлд өртдөг (Balfour et al., 2004; Frohmader et al., 2010a), опиоидын пептид (EOP) -аар дамжуулан μ-опиоид рецепторт (MORs; Мэттс ба Герман, 1984; Жонсон, Хойд, 1992; Klitenick et al., 1992; Ikemoto et al., 1997; Balfour et al., 2004). Иймээс бэлгийн зан үйлийг урьдчилан таамаглах нөхцлийг илрүүлэх нь EOP, VTA dopamine-эсийн идэвхжлийг сулруулдаг бөгөөд энэ нь бэлгийн сэдэл,Митчелл, Стюарт нар, 1990; ван Фурт нар, 1995; ван Фурт ба ван Рэй, 1996) болон NAc-ийн dopamine release (Fiorino нар, 1997).

Гадны опиатын давтагдалд өртөх нь VTA-ийн морфологийн өөрчлөлтийг үүсгэдэг (Mazei-Robison et al., 2011; Мазеи-Робисон ба Нестлер, 2012), VTA допамины мэдрэлийн хэмжээг багасгасанSklair-Tavron нар, 1996; Spiga et al., 2003; Чу нар, 2007; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011), мэдрэлийн судасны уургийг бууруулсан (Битнер-Жонсон нар, 1992), dopamine эсийн таашаал нэмэгдэж, axoplasmic тээврийн болон dopamine гаралтыг NAcБитнер-Жонсон нар, 1992; Mazei-Robison et al., 2011). Эдгээр VTA допамины мэдрэлийн өөрчлөлтүүд нь морфины шагналын хүлцэлийг үүсгэдэг бөгөөд эмийг тасралтгүй сарын дотор устгадаг тулRusso et al., 2007). VTA dopamine neurons-ийн уян налархай нь опиатуудын үйл ажиллагаанд өвөрмөц шинжтэй, эсвэл байгалийн шагнал урамшууллын үед EOP-ийг гаргах замаар үйлдвэрлэгддэг эсэх нь одоогоор тодорхойгүй байна.

Эндээс бид байгалийн шагнал урамшуулал нь опиатын нөлөөнөөс үүдэлтэй мэдрэлийн эсийн эмгэгийг үүсгэдэг таамаглалыг тестлэх, ингэснээр байгалийн оптикийн зан төлөв, ой санамжийг шагнах уян хатан механизм дээр суурилдаг. Эрэгтэйчүүдийн харханд бэлгийн харьцаанд орсон VTA dopamine neurons-ийн хэмжээ нь VTA-ийн EOP-ийн үйлчлэлээс хамаарах үйл явцаар багасдаг эсэхийг бид туршиж үздэг. Цаашилбал, VTA dopamine neurons дахь EOP-өдөөгдсөн өөрчлөлт нь байгалийн урамшууллын зан төлөвийг бэхжүүлж, байгалийн шагнал урамшууллын урамшууллын ач холбогдлыг тайлбарлаж, морфины урамшуулалыг хөнгөвчлөхөд хүргэдэг.

Материал, арга зүй

амьтад

Маршалийн хүлцэл туршилтаас бусад 200 h 225 h гэрлийн / харанхуй цикл дээр хиймэл гэрлийн өрөөнд насанд хүрэгчид эр Сэррагу-Дабли харх (12-10 g) , 00 дээр гэрэл асдаг: 5 PM). Хоол хүнс, ус бэлэн болсон зар сурталчилгаа зан үйлийн шинжилгээ хийхийн зэрэгцээ. Өрхийн эмч нар өндгөвчний эмчлэгдсэн бөгөөд 5% 17-β-эстрадиол бензойат SILASTIC капсулууд (1.98 мм дотоод диаметр, 0.5 см урт, Dow-Corning) бүхий ургамлаар тарьсан. Прогестероныг (арьсан доорх, 500 μg нь кунжутын тосны 0.1 мл) 3-6 цагт бэлдмэлийг бэлдмэлийг бэлдмэлээр бэлдмэлийг бэлдмэлийг бэлдмэлээр бэлдмэлийг бэлдмэл хэрэглэхийг өдөөж бэлдмэлийг бэлдмэлийг хэрэглэхэд хүргэдэг. Бүх журмыг Баруун Онтарио их сургууль, Мичиганы их сургуулийн Мал амьтны эрүүл мэндийн хороо нар баталж, мал эмнэлгийн талаархи Канадын зөвлөл болон Эрүүл мэндийн үндэсний зөвлөлийн удирдамжийг баталсан.

VTA dopamine soma хэмжээ нь өөрчлөгддөг

Өдөр бүрийн хачин сесс.

DNDX, 1, 7 d (31) үед бэлгийн чадвартай, гэнэн амьтдыг dopamine neuron-ийн хэмжээ өөрчлөлтийн хугацааны өөрчлөлтийг судлахын тулдn = Бүлэгт хамаарах 5-8) сүүлчийн өдөр (туршлагатай) эсвэл зөөвөрлөх (гэнэн). Бэлгийн туршлагатай бүлгүүд бэлгийн харьцааны сүүлчийн бэлгийн уулзалтын үеэр бэлгийн зан үйлтэй тохирсон байсан ба нийт 5 секундын туршид (нийт бүлгийн 5-ийн дундаж) бэлгийн хавьталтын нийт тоог тохируулсан бөгөөд бэлгийн зан үйлийн ямар нэгэн параметрийн хувьд ялгаатай байв.

Хийх сешууд.

Садар самууныг бэлгийн мөлжлөгт өртсөн эрчүүд нь хоёр нөхцлөөр бэлгийн харилцаанд ордог. Бэлгийн мөлжлөгт өртсөн малыг ЕНУХХ-ийн (60 h хүртэл) харуулах хүртэл тэгш өнцөгт тестийн координатууд (45 × 50 × 1 см) дээр дараалан хоногт 5 удаа эмчлүүлж болно. Усан үзмийн шүүсийг 70% этилийн спиртаар сайтар цэвэрлэж, шинэ ор дэрний хажууд хуруугаараа нэмсэн. Харанхуй үеэр бэлгийн зан үйлийг (2-6 h харанхуй болсон) гүйцэтгэсэн. Зөвхөн бэлгийн хавьтлын 4-ээс доошгүй бэлгийн хавьталд орсон амьтдыг зөвхөн бэлгийн туршлагатай гэж үзэж туршилтанд оруулжээ. Бүх бэлгийн хавьтлууд ажиглагдсан ба бэлгийн зан төлөв бүртгэгджээ. Холболт хийх (M) хурууны хээ (IMs), холболтын хоцрогдол (ML, эхийг холбоход анх удаа холболт хийх хугацаа), intromission latency (IL); Эсрэгээр өдөөсөн бамбайгаас эхлээд) бүртгэгдсэн байнаAgmo, 1997). Ховор ан амьтад нэг өрөөнд бэлгийн туршлагатай эрчүүдтэй хамтран 1 цагт цэвэр сорилын тор байрлуулсан бөгөөд тэдгээр нь алс холын эмэгтэй үнэртэй, түүнчлэн туршлагатай эрэгтэйн адил төстэй орчин, орчны шинэлэг байдал илэрсэн байв.

Дархлаажуулалтын шошгололт.

Амьтдыг натрийн пентобарбитал (270 mg / kg, ip) ашиглан 50 мл-ийн 0.9% давстай, 500 мл 4% paraformaldehyde 0.1 м н натрийн фосфатын буфер (PB) -аар шингээсэн. Уманыг арилгаж 1 h байранд (RT) температурт байрлуулсан бөгөөд 20% sucrose болон 0.01% натрийн азидаар 0.1 m PB-д 4 ° C-д хадгалахад дүрнэ. 35 m PB (400 m PB) 30 ° C (30 m PB) дээр криопротекант уусмал (0.1% sucrose, 20% ethylene glycol) колоротекторын дөрвөн калоритын цувралаар цуглуулсан. Бүх инкубаци RT-д зөөлөн явагддаг ба инкубацийн хооронд 0.1 m PBS, pH 7.35-тай харьцангуй зөөлөн шүршүүрт явдаг байв. Хэсэг нь 1% H-д өртсөн2O2 эндоген пероксидазыг устгах 10-ийн хувьд 1 h-д инкубацийн уусмал (PBS +: 0.4% Triton X-100, Sigma-Aldrich агуулсан) болон 0.1% үхрийн сийвэнгийн альбумин (Jackson Immuno Research Laboratories) -ийг хаасан. Дараа нь хэсгүүдийг хулганын тирозин гидроксилаза (TH) -тулдмаар RT дээр шөнийн турш өсгөвөл (1: 20 000; Миллипор). Анхдагч эсрэгбиемийг өсгөвөрлөсний дараа хэсэг хэсгүүдийг AlexaNluor 555 -тай ямааны эсрэг хулгана эсрэгбиемийн (1: 100; Invitrogen, Eugene, OR) 30 минанд инкубацлана. Эцэст нь хэсгүүдийг 0.1 m PB, Superfrost Plus шилэн слайд дээр суурилуулсан, хатаасан, глурватолоор бүрхэгдсэн 1,4-диазабицикл (2,2) октаны (DABCO, 50 mg / ml, Sigma-Aldrich; Lennette, 1978).

Өгөгдлийн шинжилгээ: мэдрэлийн хэмжээ.

VTA-ийн дархлааг идэвхижүүлэгч (IR) мэдрэлийн зургийг 40 хазайлтын үед 3 рострал дээр агууламжтайBalfour et al., 2004). Өөр өөр түвшинд байгаа эс хоорондын ялгаагүй ялгаагүй. TH-IR мэдрэлийн бүлгийн хэмжээ нь ImageJ (Эрүүл мэндийн Үндэсний хүрээлэн) ашиглан хийсэн. Үүнд: дундаж талбай, периметр, тойрог зэргийг хэмжинэ Sklair-Tavron et al. (1996). Амьтны нэг 25 эсийн дунджаар (3 VTA түвшний бүх түвшинг нэгтгэсэн) шинжилсэн бөгөөд зөвхөн харагдахуйц цөм бүхий эсүүд орсон болно. Амьтны хувьд дундаж талбай, периметр, тойрог зэргийг тооцоолсон болно. Статистикийн анализын хувьд ANOVA хоёр арга хэрэглэсэн (хүчин зүйл: бэлгийн туршлага (бэлгийн туршлагатай эсвэл хүйсийн бус) ба цаг (1, 7, эсвэл 31 d) шуудангийн хаяг Холм-Сунсан аргыг 0.05-ийн ач холбогдолын түвшингээр харьцуулах.

VTA бус dopamine өөрчлөлтүүд

Хоёр долоо хоногт хослуулах.

ДЭМБ-ын мэдрэлийн эсийн тоо хэмжээг багасгахын тулд өдөр тутмын бэлгийн хавьтлын үед бэлгийн туршлага шаардлагатай эсэхийг шалгахын тулд 5 долоо хоногт хоёр удаа уулзах үед өвчтөний допамины мэдрэлийг мэдрэлийн эсүүд шинжилдэг. Хийх сеансууд дээр тайлбарласанчлан, гэхдээ 2.5-ийн долоо хоногийн туршид. Тархи нь 7 d хамгийн сүүлд зөөвөрлөх эсвэл зөөвөрлөсний дараа цуглуулсан.

Immunoperoxidase хаяглалт.

Үүнээс гадна дархлааны фотосинтез ба хромоген илрүүлэх эмзэг будах аргуудыг хэрэглэх нь мөн TH-IR soma-ийн өөрчлөлтийг харах боломжийг олгодог. Дээр дурдсанчлан ферфуз болон эдийн боловсруулалт явагдана. 1% H-ийн эмчилгээний дараах2O2 болон PBS +, хулгана polyclonal tyrosine hydroxylase (TH) -antibody (RT) -тулдмид (RT) -тулдмалд (RT) шөнийн дотор өсгөвөрлөнө (1: 20 000; Миллипор). Антибиотик инкубаторт антибиотик өсгөвөрлөсний дараа биотин-ямааны ямааны эсрэг туулайн IgG (1 h, 1: 500 PBS +, Vector Laboratories), avidin-biotin-horseradish peroxidase (1 h, ABC элит, 1: 1 000) , 3,3'-динотобензорины тетрахрихлорид (10 мин, 0.02%, DAB, Sigma-Aldrich) нь натрийн сульфат (0.02 m PB) дэх устөрөгчийн хэт исэл (0.1%) -аар баяжуулсан. 0.015 m PB нь урвалыг зогсоож, Superfrost дээр нэмсэн шилэн слайд (Фишер) холбож, 0.1% -ийн желатинаар ddH2O. Шингэн алдалтын дараа бүх слайдууд нь DPX mountant (билигил фталат ксилен, сигма-альдрихтай) бүрхсэн.

Өгөгдлийн шинжилгээ: мэдрэлийн хэмжээ.

Дээр дурдсанчлан TH-IR эсийг талбай, периметр, эргэлтийн хувьд шинжилсэн. Үүнээс гадна, VTA TH-IR эсийг шинжлэхэд ашигладаг ижил хэсгүүдэд агуулагдсан nigra (SN) дахь TH-IR эсүүдийг шинжилж үзэв. Эцэст нь VTA ба SN TH-IR эсүүдийн шинжилгээг хийсний дараа хэсгүүдийг кресил ягаан өнгийн эсрэг байрлуулсан бөгөөд TH-IR бус эсүүдийг дээр дурдсантай ижил аргаар ашиглаж дүн шинжилгээ хийв. Гэнэн, туршлагатай бүлгүүдийн хоорондын ялгааг хоёр сүүлт Оюутны тусламжтайгаар харьцуулсан болно t 0.05-ийн ач холбогдол бүхий түвшинг шалгах.

Допамины артерийн хэмжээ багассанаар нaloxone-ийн үр нөлөө

MORs нь бэлгийн допингийн мэдрэлийн бүлгийн допамины мэдрэлийн өөрчлөлтийг өдөөж байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд бэлгийн зан үйлийн үед MOR-ыг хоригложээ. Бэлчээрийн тал хувь нь сексийн туршлагатай болсон байхад нөгөө хагас нь бэлгийн харьцаанд ордоггүй байсан. Биеэ үнэлэгч амьтад 5-д дараалан хоноглож болно. Бэлгийн мэдрэлийн болон нүцгэн бүлгүүдийн дотроос амьтдыг эмчилгээг хийхээс өмнө эсвэл эмчилгээг эхлэхээс өмнөх 10 mg / kg, sc Sigma-Aldrich, 0.9% давстай уусмал) (гэнэн); ингэснээр бэлгийн сулралтай давс (Naive Sal), бэлгийн дургүй болох нaloxone (Naive NLX), бэлгийн туршлагатай давс (Exp Sal), бэлгийн туршлагатай naloxone (Exp NLX; n = 5-8 бүлэг тус бүр). Нaloxone эмчилгээ нь 5 d-ийн аль нэг дээр бэлгийн зан үйлийн ямар нэгэн параметрт статистик ач холбогдолгүй нөлөө үзүүлдэггүй, нaloxone- болон давстай эмчилгээтэй бүлгийн хүмүүс бэлгийн харилцаанд ижил төстэй байна. Бүх амьтдыг сүүлчийн оролтын дараа 7 d доторх феромастриалаар устгана. Dopamine soma-ийн хэмжээгээр, дархлаажуулалт, өгөгдөлд дүн шинжилгээ хийх (хоёр талын ANOVA, хүчин зүйл: бэлгийн туршлага, эмчилгээний эмчилгээ) дээр дурьдсанчлан явуулав.

Морфины нөхцөл болзол

Туршилтын загвар.

Өмнө нь Russo et al. (2007) морфин архаг морфин нь морфины урамшуулалд хүлцэл үүсгэдэг. Бэлгийн туршлага, морфины архаг эмгэг нь VTA-ийн допамин мэдрэлийн хэмжээгээр буурахад бэлгийн морфологийн өөрчлөлтөд хамаарах дасгалууд морфины урамшуулалыг шалгадаг. Бэлгийн туршлагатай, гэнэн амьтдыг зургаан өөр бүлэгт хуваадагn Бэлгийн зан үйл (бэлгийн дургүйцсэн, туршлагатай), морфины тун (9, 13, эсвэл 0.5 mg / kg, ip) дээр үндэслэн Морфинээс үүдэлтэй болзолт нөхцлийн давуу эрх (CPP) -д шинжилгээ хийсэн.

Морфин-CPP.

Сүүлчийн завсарлагааны дараа 1 d-ийн нөхцөл байдал, бэлгийн гүйцэтгэлийн хувьд бүлгүүд хамгийн сүүлийн үеийн сексийн үзлэгийн үеэр таарч байсан. Ашигласан CPP-ийн парадигмен нь урьдчилсан туршилт, агааржуулалтын өдрүүд, туршилтын дараах, аппаратууд дээр суурилсан Tenk et al. (2009). Товчхондоо CPP аппарат (MED Associates) нь гурван өөр өрөөнөөс бүрдсэн байв. Сеанс бүрийн хооронд удаан хугацаагаар үнэрлэх шинж тэмдгийг багасгахын тулд аппаратыг 70% этилийн спиртийн уусмалаар сайтар цэвэрлэв. Хувь хүний ​​сонголтыг тодорхойлохын тулд урьдчилсан туршилтыг явуулж, амьтдыг бүхэлд нь аппарат хэрэгсэлд 15 минутын турш үнэгүй нэвтрүүлэх боломжийг олгов. Бүлгээрээ амьтад тодорхой нэг өрөөг илүүд үздэггүй байсан боловч амьтан тус бүрт бага зэргийн анхны сонголт байсан. Туршилтын үеэр камеруудын аль нэгэнд ихээхэн давуу эрх олгосон хархнууд (танхим тус бүрт зарцуулсан хугацааны хооронд> 200 с-ийн зөрүү; амьтдын 5%) судалгаанаас хасагдсан болно. Агааржуулагчийн үед эмийг анх сонгосон эсвэл давуу эрхгүй өрөөнд хослуулан парадигм (Tzschentke, 2007), амьтад нь 30 минутанд хориотой байсан. Амьтад өглөө (9: 00 AM to 12: 00 PM) давстай (ip) -аар тарьсан ба давстай хослуулсан камер (хяналтын) -д хязгаарлагддаг. 1 mg / kg, 00 mg / kg эсвэл 4 mg / kg, 00% 0.5-ийн давсны уусмал, Жонсон Маттию дээр ууссан морфин сульфат), хориотой (HNUMX: 5.0-10.0: 0.9 PM) морфин-хосолсон танхимд. Амьтад хоёр агааржуулалт хийв. Маргааш нь (сүүлчийн өдрөөс хойш 3 d) сүүлчийн туршилттай ижил төстэй дараах туршилт явуулсан. Статистикийн дүн шинжилгээгээр морфины хослуулсан өрөө тасалгаанд зарцуулсан хугацааг туршилтын тусгалын үеэр давстай хослуулсан өрөөтэй харьцуулсан харьцуулалтыг ашиглан бэлгийн хавьталд орсноос хойш бэлгийн сулрал эсвэл бэлгийн сулралтай эрчүүдэд шинжилгээ хийсний дараа t Туршилт. p <0.05 бол статистик ач холбогдолтой гэж үзсэн. Бэлгийн хувьд гэнэн, туршлагатай амьтдын нэмэлт хяналтын бүлгүүд хос, хосгүй камерт хоёуланд нь давсны уусмал авч сөрөг хяналт болдог. Хоёр бүлгийн хооронд танхимуудын хоорондох цаг хугацааны ялгааг илрүүлээгүй болно.

Бэлгийн зан үйлтэй холбоотой туршлагаас үүдэлтэй тогтолцооны нaloxone-ийн үр нөлөө

Туршилтын загвар.

Бэлгийн туршлага нь дор хаяж 1 сарын турш үйлчилдэг бэлгийн зан үйлийг хөнгөвчлөхөд хүргэдэг (Pitchers et al., 2012). Бэлгийн зан үйлтэй холбоотой туршлагаас шалтгаалан бэлгийн хавьталд өртөж болзошгүй бэлгийн зан үйлийг дэмжиж, бэлгийн туршлагатай малыг дараалсан таван дарааллын өмнө нaloxone эсвэл давсны уусмалаар хүлээн авсанn = 12 тус бүрийг) дээр тайлбарласан болно. Хамгийн сүүлчийн семинараас хойш нэг долоо хоногт бүх мал амьтдыг нэг удаа донтолт хүртэл буюу 1 h хүртэл үргэлжлүүлэн явуулсан. Сүүлийн шинжилгээнд орохоос өмнө налоксон эсвэл давсны уусмал эмчилгээ хийгээгүй. Нaloxone сексийн харилцан үйлчлэлд нөлөөлөх эсэх (өдөр 1 vs day 5) эсвэл засварлах үйлчилгээ (өдөр 5-ийн сорил) -ийг нөлөөлсөн эсэхийг харьцуулахын тулд харьцуулсан харьцуулалтыг харьцуулсан харьцуулалтыг харьцуулсан харьцуулалт (давтан ба нaloxone ) болон өдөр (1 өдөр, 5 өдөр, эсвэл тест)] болон Холм-Сэнсан аргаар шуудангийн хаяг харьцуулалт. Статистикийн бүх сорилтын хувьд, p <0.05 нь статистикийн ач холбогдолтой гэж үзсэн.

Нэмэлт хяналтын туршилтууд

Туршилтын өдөрт системийн налоксо.

Эцсийн завсарлагатай бэлгийн харьцаанд ороогүй бэлгийн зан төрхийн өөрчлөлт нь нaloxone байхгүй байсантай холбоотой болохыг харуулахын тулд бид эцсийн бэлтгэл туршилт дээр налоксон буюу давстай бэлдмэлийг бэлдмэлийн бэлгийн хавьтлаар өвчилсөн малчидтай хавсарч бэлдэж өгсөн. Ялангуяа бүх амьтад Naloxone тарилга (10 mg / kg, sc) 30-ийн дараалсан хоногийн туршид нэг удаа бэлгийн хавьталд орохоос өмнө 5 мин авсан. Туршилтын өдөр 7-ийн дараагаар амьтдын тал хувь нь нaloxone (10 mg / kg, n = 7) буюу давс (n = 6) Хүлээн авсан эмэгтэйг оруулахаас өмнө 30 мин. Бэлгийн зан үйлийг ажиглаж тэмдэглэв. Нaloxone сексийн харилцан үйлчлэлд нөлөөлөх эсэх (өдөр 1 vs day 5) эсвэл засварлах үйлчилгээ (өдөр 5-ийн сорил) -ийг нөлөөлсөн эсэхийг харьцуулахын тулд харьцуулсан харьцуулалтыг харьцуулсан харьцуулалтыг харьцуулсан харьцуулалт (давтан ба нaloxone ) болон өдөр (1 өдөр, 5 өдөр, эсвэл тест)] болон Холм-Сэнсан аргаар шуудангийн хаяг харьцуулалт. Статистикийн бүх сорилтын хувьд, p <5% -ийг статистикийн ач холбогдолтой гэж үзсэн.

Бэлгийн зан үйлийг богино хугацаанд илэрхийлэхэд нaloxone-ийн үр нөлөө.

Нансонссон (10 mg / kg, sc) эмчилгээний үр дүнг сүүлчийн завсарлагааны дараа дараагийн бэлгийн зан үйлийн шинжилгээнд туршиж үзсэний дараа 1 d сүүлийн завсарлагааны дараа (давсны уусмал, n = 5; нaloxone, n = 4).

Системийн нaloxone урьдчилан боловсруулалт.

Нaloxone-ийн эмчилгээг ганц удаа давтан хийсний дараагаар 7 d сексийн эмчилгээний үр нөлөөг дордуулж байгаа эсэхийг тодорхойлохын тулд бэлгийн идэвхгүй амьтад 5 өдөрт нaloxone (10 mg / kg, sc) буюу давсны уусмалыг дараалсан хоногт 7 d эцсийн naloxone эсвэл давстай тарих. Энэ туршилтын эцсийн өдөр амьтад ямар нэг тарилга аваагүй. Бэлгийн зан үйлийг ажиглаж, дээр дурьдсанчлан тэмдэглэв. Холимог параметрүүд нь хос хосоор нь ялгаатай бүлэгтэй харьцуулсан t Тестүүд. Статистикийн бүх сорилтын хувьд, p <5% -ийг статистикийн ач холбогдолтой гэж үзсэн.

Системийн нaloxone болон хүйсийн урамшуулал.

Бэлгийн харилцааны хөнгөвчлөх үйлчилгээ үзүүлэхэд налоксоны тайвшруулах нөлөө үзүүлэх нэг боломж бол налоксон нь бэлгийн харьцаанд үзүүлэх үр нөлөөг хааж өгдөг. Энэ боломжийг туршихын тулд урьд өмнө бэлгийн харьцаанд ороогүй туршлагатай эрэгтэйчүүдэд налоксон эсвэл давстай тарилга хийсний дараа БЗХ-ийн парадигмыг хийжээ. CPP процедур нь дээр дурдсан, агааржуулалтын өдөр, тестийн дараах туршилтыг багтаасан морфин-CPP-ийн хувьд дээр дурдсантай төстэй байв.

Биеэ үнэлэх өрөө нь бэлгийн зан үйлтэй хослуулсан. Таарах аргаар амьтан тус бүр нь нaloxone (тариа)n = 12) буюу давс (n = 11) Хүлээн авсан эмэгтэйд хандахаас өмнө 30 мин. Хооллолтын дундаж үргэлжлэх хугацаа ~13 мин байна. Элэгний дараах 1 минутын дараа амьтныг 30 минутанд хослуулсан. Нөхөрлөлийн бусад өдрүүдэд амьтад нь нaloxone буюу давсны аль алиных нь (аль алиныг нь хүлээн авснаас нь авсан) тарилга хийсний дараа 30-ийн минутанд тохиромжгүй тасалгаанд байрлуулсан байна. Дараа нь туршилтын өмнөх туршилтыг явуулсан. Хөндлөнгийн давуу талыг тодорхойлохын тулд өмнөх туршилт болон туршилтын дараах үетэй харьцуулсан цагийг харьцуулсан болно. Статистикийн дүн шинжилгээний хувьд хосолсон t Туршилтын өмнөх шалгалтын үеэр давуу болон ялгаатай онооны харьцуулалт, цаг хугацаа болон туршилтын өмнөх үеийн цаг хугацааг харьцуулах зорилгоор хэрэглэсэн. p <0.05 ач холбогдолтой гэж үзсэн.

Бэлгийн зан үйлтэй холбоотой туршлагаас шалтгаалан интернациональ VTA naloxone-ийн үр нөлөө

Туршилтын загвар.

VTA-д тусгайлан зориулсан EOP-ийн үйл ажиллагаа нь бэлгийн харилцааны бэлгийн чиг баримжааны нөлөөллөөс шалтгаалан бэлгийн зан үйлтэй холбоотой өөрчлөлтүүдийг хийдэг болохыг тогтоосны дараа мал амьтдыг таван өдрийн турш хуралдахаас өмнө NTAxone буюу давсны уусмалаар цацдаг. Behavioral paradigm нь системийн нaloxone туршилттай төстэй. Бэлгийн туршлагатай амьтад 5-ийн туршид нэг удаад хүртэл буюу 1 h хүртэлх хугацаанд эмчлүүлж болно. Хүлээн авагч нь эр бэлгийн мөлжлөгт эмэгтэйчүүдийг танилцуулахаас 15 минутын өмнө эрүүний хархыг хоѐуланг нь нaloxone (10 μg / мкл, 0.5 μl эзэлхүүн, 0.9% давстай ууссан) эсвэл давс (0.5 μl нь тархи). Хоѐрдогч бичил сгэжийг 0.5 мкл / мин-ийн урсгалын хурдаар 1 мин интервалаар удирдаж, дараа нь тарилга хийхэд зориулж нэмэлт 1 мин нэмэгдэх боломжтой. Тарилгын каннула нь дамми бэхэлсэн болон тоосны тагийг сольсон. Туршилтын сүүлчийн өдрөөс хойш нэг долоо хоногт бүх мал амьтдыг задлан шинжилж, налоксон эсвэл давсны уусмалгүйгээр задалдаг. Зураг 3A туршилтын загварыг тоймлов. Өгөгдлийн анализыг системчилсэн налоксон туршилтаар тодорхойлсон.

Кануляцийн мэс засал.

Эрэгтэй ямаа кетамин (0.1 мг / мл), ксилазин (0.87 мг / мл), мөөгөнцрийг тарих (0.13 мл / кг), стеротодикс аппаратаар (Kopf Instruments) хийдэг. 21-хэмжигч хөтөчтэй карнат (Plastics One) нь гавлын ясны жижиг цооногоор тархинд VTA рүү -4.8 мм AP, 0.75 мм ML, XGUMX мм-ээс гавлын ясны дээд хэсэгт байрлана. Paxinos and Watson (2013). Каннулла шүдний нийлэгийг хамгаалж, гавлын ясанд суулгасан гурван эрэг хавьд хамрагдсан. Амьтад нь 2-ийн долоо хоногийн сэргээх хугацааг өгч, зан үйлийн сорил хийхэд ашигладаг тарилгын аргыг өдөр тутам зохицуулдаг.

Каннула байршлын шалгалт.

Каннулагийн байршлыг TH-immunostaining ашиглан VTA-ийг зөв оношлохыг баталгаажуулахын тулд шалгаж үзсэн. Тохиромжтой байршилтай малыг шинжилгээнд оруулав (эцсийн бүлгийн хэмжээ: туршлагатай давслаг n = 8; туршлагатай нaloxone n = 6). VTA-ийн гадна чиглэсэн VTA-н Naloxone тарилга хийлгэсэн 3 нэмэлт амьтдыг "алдсан" тарилгын бүлэгт бүлэглэж бүлэглэв. Алдагдсан бүлгийг анатомийн хяналт болон Манн-Витнейн гэж тус тусад нь шинжилсэн U Туршилтын эцсийн өдрийн эмчилгээг харьцуулахын тулд naloxone болон давсалсан эмчилгээний туршлагатай эрэгтэйчүүдтэй харьцуулсан.

Холбогдох контакттай сигналь өдөөгдсөн мессежний илэрхийлэл

Туршилтын загвар.

Туршилт хийснээр эрэгтэйчүүдэд MOR идэвхжүүлэлт хийх, VTA болон NAc-ийн мэдрэлийн үйл ажиллагааг идэвхжүүлэхBalfour et al., 2004). Иймээс бэлгийн харьцаа нь бэлгийн шагналыг урьдчилан таамаглах нөхцөл болдог. Одоогийн судалгаагаар MOR идэвхжсэн үед сэжигтэй өдөөгдсөн мэдрэлийн идэвхжүүлэлтийг хийхэд бэлгийн туршлага шаардлагатай эсэхийг шалгасан. Naloxone эсвэл давсны уусмалыг систем дээр (ip) 30 мин байрлуулсан ба өмнө нь хажууд (туршлагатай) авах, эсвэл хяналтын эмийг сонгохоос өмнө эмэгтэйчүүдийг танилцуулахгүйгээр байрлуулсан тор (төвийг сахисан) орчин, гэнэн). Тиймээс туршилтын дөрвөн бүлгийг үүсгэсэн: Naive Sal, Naive NLX, Exp Sal, Exp NLX. Сүүлчийн уулзалтаас хойш нэг долоо хоногт бүлгийн амьтдын тал хувь нь загасны тор (экс эр хүйсээр: хүйсийн холбоотой болзошгүй нөхцлүүд), эсвэл тор (зангилаатай): нөгөө тал нь ямар ч дохио, оронд нь гэрийн торнууд дээр үлдсэн (суурь перкийн илэрхийлэлийг тодорхойлох). Энэхүү туршилтын загвар нь 8 бүлгүүдийг үүсгэсэн: Naive Sal-No Cue, Naive Sal + Cue, Naive NLX-No Cue, Naive NLX + Cue, Exp Sal-No Cue, Exp Sal ​​+ Cue, Exp NLX-No Cue, Exp NLX + Cue (n = 4 бүрээс Naive NLX-No Cue, n = 3). Амьтдыг 10-15-ийн минутанд шингээж авсан. Малаа хянахдаа гэрийн тороосоо салгаад, нэг зэрэг түрхэнэ.

Immunohistochemistry.

Дээр дурьдсаны дагуу хэсэгчилсэн болон дархлаажуулалтыг явуулсан. Энд бид p42 болон p44 MAP Kinases ERK1 болон ERK2 (pERK, 1: 4 000, Cell Signaling Technology) эсрэг туулайн поликлонгийн эсрэгбиемийг ашигласан. Антибиотик нь антибиотикт ихээхэн тодорхойлогдсон байдаг (Roux, Blenis, 2004; Murphy ба Blenis, 2006; Frohmader et al., 2010b). Үүнээс гадна антибиотик анхдагч дутагдал нь бүх дархлаа дархлаажуулалт, баруун талыг хамарсан булчингийн тархины шинжилгээгээр зохих молекул туухайнд хоёр хамтлаг илрүүлсэн.

Мэдээллийн дүн шинжилгээ хийх.

pERK-иммунокард идэвхтэй (-IR) эсүүд нь хэд хэдэн тархины бүсүүдэд тооллогын камераар холбогдсон Leica DMRD микроскоп: NAc [үндсэн (C) ба бүрхүүл (S); 400 × 600 μm; дунд зэргийн хагарал; mPFC; урд талын cingulate талбай (АТГ); prelimbic cortex (PL); infralimbic cortex (IL); 600 × 800 μm], caudate-putamen (CP, 800 × 800 μm), basolateral amygdala (BLA, 900 × 1200 μm; Balfour et al., 2004; Frohmader et al., 2010b; Pitchers et al., 2010b). Тархины бүсэд хоёр хэсэг нь тоологдож, стандартчилсан талбайн эсийн тоо нь мм тутамд нэг эсийн тоогоор тооцоолсон2. Энэ хоёр бүлэг амьтанд дунджаар тооцогддог байсан. Бэлгийн болон нүцгэн бүлгүүдийн бүлгийн дунджийг харьцуулсан харьцуулалтыг хоёр талын ANOVA (хүчин зүйлүүд): эмийн эмчилгээ (NLX эсвэл Sal), Сue (Сue эсвэл no cue)] дараа нь шуудангийн хаяг Холм-Сакан буюу Манн-Витни сумын тестийг ашиглана p <0.05. Бэлгийн туршлагатай амьтдын NAc бүрхүүлд хүчин зүйлсийн ач холбогдлын хүчтэй хандлага ажиглагдаж байсан тул зөвхөн давсны уусмал (Sal-No Cue) ба давсны дохио (Sal + Cue) бүлгүүдийг харьцуулах зорилгоор хос харьцуулалтыг хийсэн.

Зураг.

Дижитал зургууд нь CCD камер (Macrofire, Optronics) ашиглан a Leica микроскоп (DM5000B) тогтмол камертай тохиргоотой. Зургийг Adobe Photoshop 9.0 программд оруулсан. Зургууд нь тод байдал, тодосголтыг тохируулснаас бусад тохиолдолд ямар ч өөрчлөлт оруулаагүй болно.

үр дүн

VTA dopamine эсүүд дэх бэлгийн туршлагаас үүдэлтэй өөрчлөлтүүд

Бэлгийн туршлага нь VTA dopamine soma хэмжээгээр буурсанЗураг. 1А-С). Бэлгийн туршлага нь VTA TH-IR эсийн soma-ын хил хязгаарын хүрээг маш ихээр багасгасан (талбай: F(1,31) = 23.068, p <0.001; периметр, F(1,31) = 18.225, p <0.001). Цаг хугацааны гол нөлөө бас байсан (талбар: F(2,31) = 6.377, p = 0.005; периметр, F(2,31) = 4.389, p = 0.021) болон туршлага, цаг хугацааны хооронд чухал харилцан үйлчлэл (талбай: F(2,31) = 5.284, p = 0.011; периметр, F(2,31) = 4.347, p = 0.022). Хөхний оношилгоо нь бэлгийн чадвартай малаас бэлгийн мөлжлөгт өртсөн сүүлийн үеийнхээс хойш бэлгийн дааврын хяналттай харьцуулахад TH-IR эсийн талбай, периметр нь 1 болон 7 d нарыг мэдэгдэхүйц бууруулсан байна [Зураг. 1B, газар: p = 0.002 (1 d), p <0.001 (7 d); C, периметр: p = 0.009 (1 d), p <0.001 (7 d)]. Сүүлийн бэлгийн хавьтлын дараа TH-IR мэдрэлийн эсийн сома хэмжээ 31-д шилжсэн тул бэлгийн харьцааны үр нөлөөг сарниулах хугацааг хойшлуулав.Зураг. 1B, газар: p = 0.798; C, периметр: p = 0.785). Бэлгийн туршлагаас шалтгаалсан өөрчлөлт нь цаг хугацааны туршид эргэлтэнд ороогүй (Зураг. 1D). VTA dopamine soma хэмжээгээр багасгасан нь өдөр тутмын хачирхалтай үйлдлээс хамаардаггүй байсан бол хоёр удаа хоёр удаа хуруугаараа цуцалж байсан туршлага нь VTA dopamine soma хэмжээг багасгасан (Зураг. 2A,B, E-H, газар: p = 0.004; периметр: p <0.001). Үүний эсрэгээр бэлгийн харьцаанд орох нь substantia nigra дахь TH-IR soma хэмжээд нөлөөлөөгүй (Зураг. 2C, I-J, газар: p = 0.13; периметр: p = 0.16) ойролцоох VTA бус TH-IR мэдрэлийн (neurons) -д ойрхон хэмжээгээр өөрчлөөгүй (Зураг. 2D, E-H, газар: p = 0.46; периметр: p = 0.45).

Зураг 1. 

Дотоодын опиоидыг өдөөсөн артерийн хэмжээ нь VTA допамины мэдрэлийн өөрчлөлтүүд. A, Бэлгийн мөлжлөг, туршлагатай малын VTA dopamine neurons-ийн төлөөлөл дүрсийг эцсийн хооллолт хийсний дараа 7 d хэмээх хэмжээг багасгасан байгааг харуулж байна. Хэмжээст зураас, 5 μm. Бэлгийн туршлага (Exp, black bars) нь талбайд мэдэгдэхүйц буурсан байгааг харуулсан тоон үзүүлэлт (B; μm -д2) болон периметр (C; μm) VTA dopamine эсүүд, 1 d (Naive, Exp; n = 6) болон 7 d (Naive, n = 5; Exp, n = 6) гэхдээ 31 d (Naive, n = 6; Exp, n = 8) эцсийн завсарласны дараа бэлгийн гэнэдэгийн хяналттай (Гэнэн, цагаан баар) харьцуулсан. 84 эсвэл 1 d-д байгаа naive controls -тэй харьцуулахад газар нутгийг 7% туршлагатай эрэгтэйчүүдээр бууруулав. 91.6 болон 90 d resp. -Ийн хяналттай харьцуулахад периметрийг 1 болон 7% хүртэл бууруулсан. Circular нь ямар ч нөлөө үзүүлэхгүй (D). Энэ бүс дэх допамины эсийн уян хатан байдалE) болон периметр (F) нь нaloxone (NLX, n = 8), харин давстай биш (Sal, n = 7) Холих үеийн эмчилгээ, бэлгийн сэрэлийн хяналттай харьцуулахад 7 d сүүлчийн хяналтын дараа (Sal, n = 5; NLX, n = 6). Өгөгдлийн утга ± SEM; * тухайн өдөрт бэлгийн мэдрэмжгүй хяналттай харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгаа гардагB, C) эсвэл бэлдмэлтэй бэлгийн харилцаанд орохгүй бэлгийн харьцаанд орсон эм бэлдмэлтэй харьцуулахад бэлгийн харьцаанд орсон эрэгтэйE, F).

Зураг 2. 

Бэлгийн дадал зуршил нь амин дэмин допамины мэдрэлийн эсүүд эсвэл VTA нонпопамин мэдрэлийн эсийн хэмжээг багасгана. VTA TH-IR neuron soma area (A; μm -д2) болон периметр (B; (μm) -д бэлгийн бойжилт (хар), туршлагатай (хар) амьтдын хувьд долоо хоногт хоёр удаа дараалан хоноглодог туршлагатай болсон. TH-IR soma хэсэг (C) болон VTA бус TH-IR soma area (D) бэлгийн харилцааны (хар), туршлагатай (хар) амьтад. Өгөгдлийн утга ± SEM; * бэлгийн харилцааны хяналттай харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгаа байгааг харуулж байна. Бэлгийн өвчтэй НТХШ-ийн (хүрэн) мэдрэлийг харуулсан төлөөлөлийн зурагE), туршлагатай (F) эрэгтэй. G, H, Суманд заасан нейроны өндөр өсгөлтийн зураг E болон F тус тусдаа. Эдгээр зурган дээр Nissl-будсан нейронууд хөх өнгөтэй байна. Бэлгийн гэнэдэгийн TH-IR мэдрэлийн эсүүдийг харуулсан төлөөлөлийн зурагI) болон туршлагатай (J) эрэгтэй. Хуваарийн баар: E-J, 20 μm.

VTA dopamine neurons-ийн хэмжээг багасгах нь бэлгийн туршлагаас шалтгаалж опиоид рецепторын идэвхжүүлэлтээс хамаардаг

Бэлгийн туршлагаас үүдэлтэй VTA dopamine neuron-ийг багасгасан нь бие биедээ тохирсон нээлтийн өмнө удирддаг nonselix NORxone-ийн хориглогдсон. Налаxсон эмчилгээний өмнө эмчилгээнд хамрагдахад чухал нөлөө үзүүлсэн (F(1,22) = 4.738, p = 0.041) бөгөөд периметрт мэдэгдэхүйц нөлөө үзүүлсэн (F(1,22) = 2.892, p = 0.052). Туршлага ба налоксон эмчилгээний хоорондын харилцан үйлчлэл нь газар нутгийгF(1,22) = 5.578, p = 0.027) болон периметр (F(1,22) = 8.167, p = 0.009). Хоѐрт харьцуулалтаар давстай эмчилгээ хийлгэсэн малчид бэлгийн замаар дамждаг эм бэлдмэлтэй бэлгийн харьцаанд орсон эмгэгтэй харьцуулахад хамгийн сүүлчийн бэлгийн хавьтлаар XTA dopamine neurons-ийн талбай, периметрийг мэдэгдэхүйц бууруулсан байна.Зураг. 1E, газар: p = 0.018; F, периметр: p = 0.007). Үүний эсрэгээр, бэлгийн туршлагатай нaloxone-treated animals нь нaloxone-treated naive эрчүүдээс ялгаатай биш байв (Зураг. 1E, газар: p = 0.483; F, периметр: p = 0.330). Үүнээс гадна туршлагатай нaloxone амьтантай харьцуулахад туршлагатай давсалсан амьтдын тоо эрс багассан (Зураг. 1E, газар: p = 0.002; F, периметр: p = 0.002). Нaloxone-ийн нөлөө нь бэлгийн туршлагад зориулагдсан бөгөөд зөвхөн нaloxone эмчилгээ нь давстай боловсруулсан концентрацтай харьцуулахад бэлгийн гайгүй нaloxone-эмчилгээний эрчүүдэд TH-IR эсэд нөлөөлөхгүйЗураг. 1E,F). Үүнээс гадна, туршлагаас үүдэлтэй артерийн хэмжээг багасгах нь нaloxone-ийн нөлөөгөөр нaloxone-ийн нөлөөнөөс үүсэх үр дагавар биш юм. Учир нь нaloxone-болон давсны боловсруулсан эрчүүдийн хоорондын харилцан үйлчлэл нь хоорондоо харилцан адилгүй байдаг. (ejaculation-ийн завсарлага) (naluxone-treated males in first and fifth mating session)p = 0.03 ба p = 0.004, тус тусдаа). Таван төрлийн бэлгийн хавьтлын үед бэлгийн харьцаанд ордог эрэгтэй, нaloxone эмч нарыг бэлгийн хавьталд хүргэдэг.

Бэлгийн туршлагаас үүдэлтэй морфины шагнал урамшуулал

VTA dopamine soma хэмжээгээр бэлгийн хавьтлууд нь VTA-ийн EOP-ийн үйлдэл нь гадны нөлөөнд байдагSklair-Tavron нар, 1996; Russo et al., 2007). Тиймээс байгалийн шагналаар өдөөгдсөн VTA допамины эсийн уян хатан чанар нь опиатын морфины шагнал хүртдэг эсэхийг шалгасан. Үнэндээ бэлгийн туршлага нь морфины шагналын хүлцэл, архаг опиатын үр дагавартай төстэйRusso et al., 2007). Бэлгийн эр бэлгийн чиг баримжаатай эрчүүдэд 0.5 мг / кг морфин хэрэглэхэд CPP-ийг хөгжүүлээгүй; харин бэлгийн идэвхгүй эрэгтэйчүүд нь энэхүү тунгийн CPP-ийг үүсгэсэн бол шинжилгээний дараах үеэр давстай хослуулсан камертай харьцуулахад морфины хосолсон тасалгаанд илүү хугацаа зарцуулдагЗураг. 3; p = 0.039). Бэлгийн идэвхгүй, туршлагатай бүлгүүд морфин-хосолсон танхимд морфин ихтэй тунгаар давстай хосоороо харьцуулахад илүү их цаг зарцуулсан байна: 5.0 mg / kg (Зураг. 3; Naïve: p = 0.029; Exp: p = 0.012) ба 10.0 mg / kg (Зураг. 3; Naïve: p <0.001; Дуусах: p = 0.002).

Зураг 3. 

Морфины шагналд бэлгийн харьцааны үр нөлөө. Нас бэлгийн хавьталд (Sal, Morphine-paired) (Mor, 0.5, 5 эсвэл 10 mg / kg bodyweight) бэлгийн хавьталд орсон тахал (Nave, n = 10-13) эсвэл туршлагатай (Exp, n = 9-13) эрэгтэй. Өгөгдлийн утга ± SEM; * Ижил төрлийн амьтдын дотроос Sal-paired танхимтай харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгаа гардаг. NS, ач холбогдолгүй.

Бэлгийн туршлагаас шалтгаалан опиоид рецепторын идэвхжүүлэлтээс хамааралтай байдаг

Үр дүнд нь 5-ийн өдөр тутмын богино хугацааны уулзалтын үеэр явагдах EOP-ийн үйлдэл нь VTA dopamine neurons-ийн уян чанарыг үүсгэдэг бөгөөд энэ нь морфин эсвэл героины өөрөө удирдах үйлчилгээRusso et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). VTA dopamine-ийн хэмжээгээр багасгах нь урамшуулал болон гүйцэтгэлийн хувьд сексийн зан үйлийг өдөөн турхирахад чиглэсэн сургалт, ялангуяа бэлгийн туршлагад чухал ач холбогдолтой гэж таамаглаж байна. Энэхүү таамаглалыг MER-ийг naloxone ашиглан хааж, сэжиглэж буй таван өдрийн турш бэлгийн харилцааны улмаас өдөөгдсөн бэлгийн зан үйлийг хөнгөвчлөхөд үзүүлэх нөлөөллийг судлан шинжилсэн. Өгөгдлийг энд үзүүлэв Зураг 4 Зөвхөн эхний болон тав дахь үеийн уулзваруудын хувьд, энэ нь туршлагаас шалтгаалахаас шалтгаалан гаж нөлөө үзүүлдэг. Үүнээс гадна, хялгасан үеэр налоксоны эмчилгээний урт хугацааны үр нөлөө нь 1-ийн эцсийн шинжилгээгээр долоо хоногт хожимдож дууссаны дараа хачин зан үйлийн ажиллагааг дэмжсэн аргыг туршиж үздэг. Зураг 4A туршилтын загварыг үзүүлэв. Бэлгийн харьцааны бүх параметрүүд дээр хачин сесс суулгахад чухал нөлөө үзүүлсэн (холбох хоцрогдол: F(2,55) = 11.286, p <0.001; дотогшлох хоцрогдол: F(2,55) = 8.767, p <0.001; Дур тавих хоцролт: F(2,55) = 10.368, p <0.001) ба бэхэлгээний хоцрогдол дээр налоксон эмчилгээ (F(1,55) = 6.585, p = 0.013) болон intromission (F(1,55) = 7.863, p = 0.007). Уялдаатай харьцуулалтууд нь нaloxone эмчилгээ нь анхны холболтын үеэр бэлгийн зан үйлтэй холбоотой байсан болохыг харуулсан тул нaloxone амьтад эхний холболттой харьцангуй урт хугацаатай байдаг (p = 0.002) болон intromission (p = 0.002) хуягласан эхний өдрөөс давсны хяналттай харьцуулсан. Эхний сексийн зан авирын энэхүү нaloxone нөлөө нь бэлгийн туршлагаас ангид байсан бөгөөд дараагийн семинарын үеэр ажиглагдсангүй (Хүснэгт 1). Үүнээс гадна бэлгийн чиг баримжаатай таван эм бэлдмэлийн өмнө налоксон эмчилгээ хийснээр бэлгийн харилцааны анхдагч бэлгийн харилцааны үйл ажиллагааг бэлгийн харьцаанд оруулдаггүй байв. Бэлгийн харьцааны давуу тал, давсалсан эмзэг эр бэлгийн хавьтлыг багасгахын ач холбогдлын улмаасЗураг. 4B; p = 0.032) intromission (Зураг. 4C; p = 0.033) болон Ejaculation (Зураг. 4D; p <0.001) бэлгийн харьцааны хөнгөвчлөлтийг харуулсан эхний хослолтой харьцуулахад тав дахь хосын үеэр. Үүний нэгэн адил, налоксоноор эмчилсэн эрчүүд холболт хийхэд мэдэгдэхүйц богино хоцрогдол илэрсэн (Зураг. 4B; p <0.001), дотогшлох (Зураг. 4C; p <0.001), мөн ялгаралт (Зураг. 4D; p = 0.017) эхний өдөртэй харьцуулахад тавдугаарт. Үүнээс гадна, нaloxone-эмчилсэн эрэгтэй нь тав дахь үеийн завсарлагааны үеэр ямар нэгэн ховордлын үед давсны хяналтаас ялгаатай байв.

Зураг 4. 

Дотоодын опиоидууд нь бэлгийн зан үйлтэй холбоотой туршлагаас үүдэлтэй чухал үүрэг гүйцэтгэдэг. A, Туршилтын загвар. B-D, Давстай эмчилсэн эрэгтэйчүүдэд зориулсан бэлгийн зан байдлын үзүүлэлтүүд (Sal, цагаан баар, n = 11) эсвэл нaloxone (NLX, хар баар, n = 12) системийн удирдлагатай. Харуулах өгөгдөл нь холбоход хоцрогдол (B; секунд), intromission (C; секунд), болон Ejaculation (D; секундээр) 1 болон 5 өдрүүд дээр дараалсан таван өдрийн турш үргэлжилсэн. Үүнээс гадна өгөгдөлийг сүүлчийн хяналтын тестэнд тавигдсан бол 7 d нь тав дахь үеийн завсарлагааны дараа харуулав. Өгөгдөл нь SEM-ийн утгатай байна. + эмчилгээний хүрээнд 1 болон 5 хоногийн хооронд мэдэгдэхүйц ялгаа байгааг; * эмчилгээний хүрээнд 5 шинжилгээний өдөр ба өдрийн хооронд чухал ялгаа байгааг; # өдөр өдрийн дотор нaloxone ба давсны бүлэг хоорондын ялгаа их байгааг харуулж байна.

Энэ хүснэгтийг харах: 

Хүснэгт 1. 

Нaloxone-ийн удирдлагыг холбохын өмнө эмзэглэлийг нэмэгдүүлэхийн тулд зөвхөн эхний өдөр өдөрт холбох, буулгах үйлдэл хийдэг

Үүний эсрэгээр, бэлгийн харьцааны явцад нaloxone эмчилгээ нь эцсийн шинжилгээний эцсийн өдрийн бэлгийн зан үйлийн туршлагаас үүдэлтэй нөлөөллийг арилгаж чадсан. Туршилтын өдөр 7 d naloxone тарилга байхгүй үед сүүлний завсарлага хийсний дараа хийгдсэн. Сахины эмчилгээнд хамрагдсан эрэгтэйчүүд нь бэлгийн зан үйлийг өдөөсөн туршлагаас үүдэлтэй. Тухайлбал, тавцангийн тавцангийн суулт, турхиралт, болон бэлгийн хавьталд орох хоцрогдол нь тав дахь үеийн завсарлага ба туршилтын эцсийн өдөр хоёрын хооронд ялгаагүй байна (Зураг. 4Б-Д). Нaloxone-эмчилгээ хийдэг эрэгтэйчүүд холбоход нормальЗураг. 4B; p = 0.033), intromission (Зураг. 4C; p = 0.036) болон Ejaculation (Зураг. 4D; p = 0.049) туршилтанд 5 дахь оролттой харьцуулахад. Туршилтын өдрүүдэд нaloxone амьтад нь давсны эмчилгээтэй эрчүүдээс удаан хугацаагаар норослогдож илэрч байгааг илрүүлсэн (Зураг. 4B; p = 0.017) болон intromission (Зураг. 4C; p = 0.043). Тиймээс налоксо эмчилгээ нь засвар үйлчилгээ хийхээс зайлсхийх, гэхдээ эхнийх нь бэлгийн зан үйлийн туршлагаас үүдэлтэй дэмжлэгийг хөгжүүлэх явдал биш юм. Эдгээр үр дүнгүүд нь EOP-өдөөгдсөн VTA допамины мэдрэлийн уян хатан шинжийг урт хугацааны илэрхийлэл дээр байгалийн шагнал урамшуулал болгоход чухал үүрэг гүйцэтгэдэг болохыг харуулж байна.

Опиоид рецепторын саадыг саатуулах үед опиоид рецепторыг саатуулах үед хэд хэдэн нэмэлт туршилт хийсэн нь эцсийн бэлтгэл туршилтын өдрийн naloxone-ийн удирдлаган дор дутагдалтайгаасЗураг. 5A,B) нь урт хугацааны туршид алдагдсан, гэхдээ богино хугацааны зохицуулалт хийх боломжгүй (Зураг. 5E,F), дангаараа нaloxone-г дангаар нь хордуулах шалтгаан болдоггүйЗураг. 5C,D), нaloxone-эмчилгээнд хамрагдсан эрэгтэйчїїдийн бэлгийн шагналаа алддаггїй (Зураг. 5G,H). Нэгдүгээрт, эцсийн бэлгийн харьцаанд орооцолдсон бэлгийн зан авирын өөрчлөлт нь нaloxone байхгүй байсантай холбоотой болохыг харуулахын тулд, naloxone эсвэл давсны уусмалыг эцсийн завсарлагааны өдөрт бэлдэж байсан бол бэлгийн хавьталд орсон байхад нь бэлгийн хавьталд орсон амьтадЗураг. 5A). Ойрын үед холбоход хамгийн чухал нөлөө үзүүлсэнЗураг. 5B; F(2,27) = 30.031, p = 0.038) болон intromission (Хүснэгт 2; F(2,27) = 10.686, p = 0.048). Импульсээр хоцорч яваа эмгэгийн үед үр нөлөөтэй байсангүй (Хүснэгт 2; F(2,27) = 2.388, p = 0.109) Дээр дурьдсанчлан, бэлгийн үед эмчилгээ хийлгэх явцад нaloxone эмчилгээ эхний таван бэлгийн харьцааны үед бэлгийн зан үйлийг хөнгөвчлөхөд нөлөөлдөггүй. Хоѐр бүлгүүд (давсны ба нaloxone-эмчилгээ хийлгэсэн бүлгүүд сүүлчийн хяналтын үед хүлээн авсан эмчилгээний аргаар тодорхойлогдсон, хоёуланг нь нaloxone хүлээн авсан) нь 5 өдрийнхтэй харьцуулахад 1 өдрийн бэлгийн заналхийлэлийг хангаж, эхний холболтод нэлээн богино хугацааныЗураг. 5B; давс: p = 0.033; Нaloxone: p = 0.014) болон intromission (Хүснэгт 2; давс: p = 0.034; Нaloxone: p = 0.026). Налаxсон эсвэл давсны хүчилийг эцсийн амьсгалд турших өдөр хүлээн авсан амьтдыг холбоход удаан хугацаа шаардагдсанЗураг. 5B; давс: p = 0.018; Нaloxone: p = 0.029) болон intromission (Хүснэгт 2; давс: p = 0.019; Нaloxone: p = 0.020) харьцуулах тав дахь өдөртэй харьцуулахад. Тиймээс бэлгийн харьцааны үед налоксон буюу давстай бэлдмэлийг хэрэглэхээс өмнө налоксоны эмчилгээний үр нөлөөгүй байсан бэлгийн зан үйлийн үед бэлгийн зан үйл, бэлгийн зан үйлийг урт хугацаанд хөнгөвчлөхөд нөлөөлөхгүй байсан нь амьтнаас ямар нэгэн тариа хийлгээгүй эцсийн завсарлагатай өдөр (Зураг. 4).

Зураг 5. 

Дотоодын опиоидууд нь бэлгийн зан үйлтэй холбоотой туршлагаас шалтгаалан урт хугацааны туршид илэрхийлэгддэг. A, Туршилтын өдөр NLX эмчилгээний үр дүнтэй туршилт хийх туршилтын загвар. BХөх болон эцсийн завсарлага (Туршилт) 5 хоног үргэлжилсэн 1 ба 5 өдрийн давс (саарал) буюу нaloxone (хар) тарилгын дараа хоцрох. Өгөгдлийн утга нь ± SEM. * 1 болон өдрийн 5 өдрийн эмчилгээний хүрээнд мэдэгдэхүйц ялгаа гардаг. # эмчилгээний өдрийн шинжилгээний өдөр, 5 өдрийн хооронд мэдэгдэхүйц ялгаа байгааг илэрхийлнэ. C, Налаxсоны өмнөх эмчилгээний үр дүнг турших туршилтын туршлагын загвар. D, Эцсийн завсарлагаанд сүүлчийн завсарлага өгөх, 7-ийн хоноглолтоос хойш 5-ийн хоногт давтан эсвэл нaloxone тарилга хийхгүйгээр XNUMX-ийн өдрүүд орно. Өгөгдлийн утга нь ± SEM. E, Нaloxone эмчилгээ нь бэлгийн туршлагатай малын бэлгийн чиг баримжаатай бэлгийн зан үйлийн богино хугацааны дэлгэцэнд нөлөөлж буй эсэхийг турших туршилтанд туршилтын загвар. F1 өдөр, өдөрт 5 өдөрт 5 хоног үргэлжилсэн хазайлт, сүүлчийн завсарлагааны өдөр 1 өдрийн давсны (саарал) эсвэл нaloxone (хар) шахах 5-ийн өдрийн хоцролтыг хийнэ. Өгөгдлийн утга нь ± SEM. * 1 болон өдрийн 5 өдрийн эмчилгээний хүрээнд мэдэгдэхүйц ялгаа гардаг. G, Нaloxone эмчилгээ нь бэлгийн зан үйлийн урамшууллын үр нөлөөг хаасан эсэхийг турших зорилгоор туршилтын туршилтын загвар. H, Туршилт хийхээс өмнө нaloxone эсвэл давсны уусмалд хамрагдсан амьтдад туршилт явуулсан туршилт (цагаан) ба дараах шинжилгээнд (секундээр) завсарласан тасалгаа (секундээр) зарцуулсан. Өгөгдлийн утга ± SEM; * урьдчилан тааварласантай харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгааг харуулж байна.

Энэ хүснэгтийг харах: 

Хүснэгт 2. 

Үзүүлсэн өгөгдөл нь бэлгийн зан үйлийг урт хугацааны арматурын алдагдал дээр MOR-ийн саад тотгорын үр нөлөөг илрүүлэх зорилгоор хийлгэсэн хяналтын туршилтаас intromission болон ejaculation (секунд) хоцролттой байна. Эцэст нь хэмжих туршилтын өдөр naloxone

Бэлгийн харилцааны хосолсон бэлгийн хавьталд орооцолдсон эмчилгээг хийлгэж байсан ба сүүлийн удаа эмчилгээ хийсний дараа 7 d-ийн бэлгийн зан үйлийн өөрчлөлтийг саармагжуулж байгаагүй нaloxone эмчилгээ хийлгэсэн эсэхийг тодорхойлохын тулд бэлгийн идэвхгүй амьтад өдөрт 5 удаа тарилга хийлгэх буюу давсны уусмалыг 7 дараа нь (Зураг. 5C). Давсалсан болон нaloxone-ийн урьдчилан бэлтгэсэн бүлгүүдийн хооронд ямар нэгэн овоолгын параметрийг тодорхойлоход мэдэгдэхүйц ялгаагүйЗураг. 5D; холбох давтамж; intromission latency: давсны уусмал 139.7 ± 40.3 vs naloxone 121.83 ± 42.55; EJPULATION latency: давсны уусмал 887.9 ± 70.0 vs naloxone 1050.8 ± 327.31). Эдгээр үр дүнгүүд зөвхөн нaloxone дангаараа VTA допамины мэдрэлийн уян налархайн үед дангаараа нaloxone-ийн нөлөөгүйтэй адилхан бэлгийн зан үйлийг өөрчлөхөд хангалттай биш гэдгийг харуулж байна.

Бэлгийн харилцааны туршлагаас харахад нaloxone эмчилгээ нь бэлгийн зан үйлийг өдөөх сексийн харилцааны урт хугацааны илэрхийлэлд сөргөөр нөлөөлдөг. Үүнийг цааш нь туршихын тулд зангилааны үед нaloxone эмчилгээний үр нөлөөг дараачийн бэлгийн зан үйлээр туршиж үзсэн бөгөөд сүүлийн туршилтаар хийсэн 1 d (туршилтын загвар, Зураг. 5E). Mount дээр холболт хийхэд чухал нөлөө үзүүлсэн (Зураг. 5F; F(2,20) = 19.780, p <0.001) ба нэвтрэлтийн хоцрогдол (Хүснэгт 2; F(2,20) = 19.041, p <0.001). Дур тавих хоцрогдолд өдрийн онцлох нөлөө байхгүй (Хүснэгт 2; F(2,20) = 3.042, p = 0.070). Дээр дурьдсанчлан эрэгтэйчүүд (давстай эсвэл налоксон эмчилгээ хийлгэж байсан ч) бэлгийн харьцааны талаархи таван бэлгийн харилцан үйлчлэлийг дэмжихэд нэлээд богино хугацаа шаардагддагЗураг. 5F; давс: p = 0.002; Нaloxone: p = 0.018) болон intromission (Хүснэгт 2; давс: p = 0.006; Нaloxone: p = 0.009) өдрийн 5 өдрийн 1-тэй харьцуулсан өдөр. Үүнтэй төстэйгээр бэлгийн зан үйлийг хөнгөвчлөхийн тулд өдөрт 1-тай харьцуулахад богино хугацааны хоцрогдолтойгоор илрүүлсэн туршилтын өдөрЗураг. 5F; давс: p = 0.001; Нaloxone: p = 0.020) болон intromission (Хүснэгт 2; давс: p = 0.004; Нaloxone: p = 0.009). Илүүдэл эмчилгээний үед нaloxone эмчилгээ нь бэлгийн даслын дараа 1 d-ийн шинжилгээ хийсний дараа биеэ үнэлэхийг өдөөхөд нөлөөлдөггүй, энэ нь эцсийн шинжилгээний өдрөөс naloxone эмчилгээнээс хамаардаггүй.

Эцэст нь налоксоны хөнгөвчлөх бэлгийн харьцааны урт хугацааны илэрхийлэлд нөлөөлдөг нөлөөлөл нь налоксоны бэлгийн харьцааны урамшуулах шинж чанар дээр хориглох нөлөөтэй байдаг. Гэхдээ үрчлэхээс өмнө шууд удирдаж байсан налоксон нь суулгацанд CPP үүсэхийг өөрчилсөнгүй (Зураг. 5G), нaloxone эмчилгээ нь бэлгийн шагналыг өөрчилдөггүйг харуулж байна. Давстай ба налоксоны эмчилгээтэй бүлгүүд нь бэлгийн хавьталд орохдоо бэлгийн харьцаанд орохдоо ихээхэн хэмжээний цаг хугацаа зарцуулсанЗураг. 5H; давс: p = 0.038; Нaloxone: p = 0.002) туршилтын өмнөх үед туршилттай харьцуулахад давуу талтай. Тиймээс налоксон нь бэлгийн зан үйлтэй холбоотой шагналыг хааж, бэлгийн зан үйлийг сахихад сөрөг нөлөө үзүүлэхгүй.

Бэлгийн зан үйлийг хөнгөвчлөх нь VTA-ийн EOP үйл ажиллагаанаас хамаардаг

Бэлгийн зан үйлийг урт хугацааны факультеттай болгохын тулд ЕАТ-д тусгайлан зориулсан EOP-ыг үйл ажиллагаандаа хэрэгжүүлэхийг баталгаажуулахын тулд туршилтын загварыг Зураг 3A Системийн тарилга гэхээсээ илүү дотно VTA naloxone инсулинаар давтаж байв. Үр дүн нь дээр дурдсан системийн удирдлагад адилхан байсан. Бэлгийн харьцааны бүх параметрүүд дээр хялгасан өдрийн нөлөө их байсанЗураг. 6A, холболтын хоцрогдол: F(2,33) = 4.494, p = 0.019; B, intromission latency: F(2,33) = 4.042, p = 0.027; C, Индексжүүлэлтийн хоцрогдол: F(2,33) = 5.309, p = 0.010) ба хожмын үеийн дотогшлох VTA naloxone эмчилгээF(1,33) = 7.345, p = 0.011) болон intromission (F(1,33) = 6.126, p = 0.019). Интra-VTA naloxone нь 5 d холболтын үед анх удаа өдөөгдөж байсан бэлгийн зан үйлийг өдөөхөд нөлөөлөхгүй байсан тул нaloxone-эмчилгээ хийдэг эрчүүд холбохын тулд далд оролтыг багасгасан (Зураг. 6A; p = 0.001), intromission (Зураг. 6B; p <0.001), мөн ялгаралт (Зураг. 6C; p = 0.001) өдрийн 5 өдрийн 1-тэй харьцуулсан өдөр. Налоакон эмч нар эрлийз эмчилгээ хийлгэсэн эрэгтэйчүүдээс тав дахь өдрийн завсарлагаанаас ялгаатай байв. Интra-VTA налоксоны эмчилгээ, системийн удирдлага нь ихээхэн хэмжээгээр нэмэгдсэн холболтыг үүсгэсэн (Зураг. 6A; p <0.001) ба нэвтрэлтийн хоцрогдол (Зураг. 6B; p <0.001) эхний хослолын өдөр давсны уусмалаар эмчилсэн эрчүүдтэй харьцуулсан бөгөөд энэ нь дараачийн хослолын үеэр ажиглагдаагүй (энэ хугацаанд налоксон ба давсны уусмалаар эмчилсэн эрчүүд ялгаагүй). Гэнэтийн ажиглалт бол энэ туршилтаар давсны уусмалаар эмчилсэн эрчүүд суулгалтын болон дотогшлох хоцролтын статистик ач холбогдолтой хөнгөвчлөлтийг харуулаагүй (дээр дурдсан бүх туршилтаар харуулсан болно) бөгөөд зөвхөн үрийн шингэний хоцролтыг эхний өдөртэй харьцуулахад тав дахь өдөр богиносгосон байна. (давсны уусмал: p = 0.001).

Зураг 6. 

VTA-ийн зуучийн дасгалын доторхи доторхи опиоидууд нь бэлгийн зан үйлийг өдөөж, урт хугацааны засвар үйлчилгээ хийхэд хүргэдэг. Давстай эмчилсэн эрэгтэйчүүдэд бэлгийн зан үйлийн параметрүүд (Sal, цагаан баар, n = 8) эсвэл NLX (хар баар, n = 6) доторх VTA-ийн удирдлагатай. Харуулах өгөгдөл нь холбоход хоцрогдол (A), intromission (B), болон EJALULATION (C) өдөрт 5 хоног дараалан 1 болон 5-ээр явагдана. Үүнээс гадна өгөгдлийг эцсийн хагаст оношилгоо хийх өдөр, 7 нь давсны уусмал эсвэл нaloxone тарилга байхгүй тохиолдолд дараах өдөр 5-ыг үзүүлнэ. Өгөгдлийн утга ± SEM; + эмчилгээний хүрээнд 1 болон 5 хоногийн хооронд мэдэгдэхүйц ялгаа байгааг; * эмчилгээний хүрээнд 5 шинжилгээний өдөр ба өдрийн хооронд чухал ялгаа байгааг; # өдрийн дотор нaloxone болон Sal бүлүүдийн ялгааг харуулж байна. Туршилтын 4.60 (давс, цагаан, налоксон, хар, алдсан, саарал) дахь амьтдын доторх VTA тарилга хийх цэгийг заана (H, -5.00, I, -5.25, J, -5; Swanson Brain Maps-ийн загвар зураг ашигланSwanson, 2004). Каннулус нь хоёр талынх байсан бол тарилгын талбайнуудыг дангаар нь төлөөлж танилцуулсан. Фр, Фассикуляр чимэгфлекс; ML, Medial lemniscus; SN, substantia nigra.

Интra-VTA naxolone эмчилгээ нь бэлгийн харьцаанд ордог эрчүүдийн бэлгийн чиг баримжаатай бэлгийн зан үйлийг арилгаж, системчилсэн нaloxone-ийн үр нөлөөг үзүүлдэг. Тухайлбал, туршилтын эцсийн өдөр naloxone-эмчилгээтэй эрчүүд холбоход удаан хугацаа шаардагддаг байсан (Зураг. 6A; p = 0.011), intromission (Зураг. 6B; p = 0.010), болон Ejaculation (Зураг. 6C; p = 0.015) тав дахь удаагаа хуралдах бэлтгэлтэй харьцуулах ба эцсийн шинжилгээний өдөр давсны эмчилгээтэй эрэгтэйтэй харьцуулахадЗураг. 6A, p = 0.006; B, p = 0.008). Үүний эсрэгээр, давсархаг эмчилгээ хийдэг амьтан нь эцсийн шинжилгээний өдөр, өдрөөс 5 хоорондох холболт, хийсвэрлэлтийн хооронд ялгаагүй ялгаатай байна. Эдгээр нелеелел нь ойролцоох каннабреатрын цэгуудтэй эр бэлгийн хавьтагчтай НТХ-тэй харьцуулахад NTAxone-ийн нийлбэрийг тодорхойлдог боловч VTAЗураг. 6D; n = 3) давсны боловсруулалттай хяналттай ижил төстэй бэлгийн зан үйлийг урт хугацааны туршид үзүүлэх (ML, IL = 53 ± 6.245, EL = 389 ± 299.5) ба эцсийн шинжилгээний өдрөөр дотогшоо VTA naloxone амьтантай харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгаатай (ML, IL: p = 0.029; EL: p = 0.0395).

EOP-тэй холбоотой үйлдэл нь сексийн холбоотой саад өдөөн хатгасан мэдрэлийн идэвхжлийг шаарддаг

Үр дүнд суурилсан үр дүнд тулгуурлан бид үр дүнтэй холбоотой VTA-ийн EOP идэвхжүүлэлт болон дараагийн VTA dopamine soma хэмжээг бууруулах нь урамшуулал-урамшууллын үр дүнг өдөөх урамшууллын урамшууллын ач холбогдлыг чухалчлан таамаглаж, улмаар бэлгийн зан үйлийг хөнгөвчлөхөд тусалдаг. Энэ таамаглалыг шалгахын тулд опиоидын рецепторыг сексийн урамшуулал (сексийн холбоотой концепцийг) урьдчилан таамаглах нөхцлөөр өдөөгдсөн мэдрэлийн үйл ажиллагааны үед хагалгааны үр дүнд үүсэх нөлөөллийг судлах. Садар самуунгүй амьтад мөн хүрээлэн буй орчны дохиогоор илэрч байсан боловч эдгээр нь урьд өмнө тохиолдож байсан туршлагатай холбоотой байсан тул төвийг сахисан сангууд байсан. Эцэст нь, суурь түвшний перкийн түвшинг гэрийн торонд үлдээсэн бэлгийн туршлагатай, гэнэн хяналттай бүлгүүдээр тодорхойлсон бөгөөд ямар ч тэмдэглэлд (No-Cue) илэрдэггүй. Өмнөх үр дүнг баталгаажуулж, өргөжүүлэх (Balfour et al., 2004), өмнөх бэлгийн тэтгэмжтэй холбоотой контекстын илэрцийг NAc (бэлгийн чиг баримжаатай эрэгтэйчүүдэд)Зураг. 7) болон mPFC (Зураг. 8А-С), харин BLA-д neuronal идэвхжлийг үүсгэдэггүй (Зураг. 8Dэсвэл CPU (өгөгдөл харуулаагүй). NAc-ийн цөмд өртөх гол нөлөөллүүд байсан (F(1,12) = 12.1941, p = 0.004), АТГ (F(1,12) = 5.541, p = 0.038), PL (F(1,12) = 5.241, p = 0.041), NAc-ийн цөмд Naloxone эмчилгээ (F(1,12) = 6.511, p = 0.025), АТГ (F(1,12) = 15.242, p = 0.002), PL (F(1,12) = 7.336, p = 0.019). ҮСС-ийн цөмд харилцан үйлчлэлтэй байсан (F(1,12) = 10.107, p = 0.008), АТГ (F(1,12) = 16.060, p = 0.002), PL (F(1,12) = 8.235, p = 0.014), IL ((F(1,12) = 6.965, p = 0.022). Нэгдїгээрт, євчинтэй холбоотой Сueн хавдар нь бэлгийн туршлагатай малын бэлдмэл (Exp Sal ​​+ Cue) дахь перктэй ихээхэн нэмэгдсэн нь NAc-ийн голомт дахь гэрийн торонд (Exp Sal-No Cue)Зураг. 7A; p <0.001) ба mPFC дэд бүсүүд ACA (Зураг. 8A; p = 0.001), PL (Зураг. 8B; p = 0.003), IL (Зураг. 8C; p = 0.029). Үүний эсрэгээр, бэлгийн гайгүй амьтадтай бэлгийн харилцаанд орсон бэлгийн дур хүслийг харуулсан сексийн шагналтай холбоотойгоор тархины аль ч хэсэгт перкийг өдөөж чадаагүй (Naive Sal + Cue naive Sal-No Cue-тай харьцуулбал). Инжир. 7, 8), ПЕРК-ийн танилцуулга нь бэлгийн туршлагад хамаарах дохио юм. Тїїнчлэн бэлгийн туршлага ганцаараа тархины бїсїїдэд суурь їзїїлэлтийг єєрчлєхгїй байсан. Учир нь гэрийн тороос авсан бїлэг, бэлгийн гээмэл, туршлагатай, давстай эсвэл налоксоноор эмчилсэн бїлгїїд хоорондоо ялгаагїй байв.

Зураг 7. 

Сексийн холбоотой холбоотой нөхцлөөр өдөөх NAc-ийн мэдрэлийн идэвхжилд дотоодын опиоидын үйлдэл шаардлагатай. Мм-ийн pERK-IR эсийн тоо2 гол цөмдA) болон бүрхүүл (B(цагаан), туршлагатай (Exp, хар) NLX буюу давстай (Sal) системд урьдчилан бэлтгэсэн (Exp males) системтэй эсвэл зөөвөрлөх уулзалт (Naive male). Бүлгүүд нь оношлогдохуйц (Cue) -тэй холбоотой байсан бөгөөд тэдгээр нь экспромт эрэгтэй, Naive амьтдын дунд төвийг сахисан, эсвэл гэрийн торноос авсан (Cue-ийн шошгоны дутагдалаар тэмдэглэсэн). Өгөгдөл нь SEM-ийн утгатай байна. * нь давсархаг урьдчилан боловсруулсан ямар ч хяналтгүй (ялгаатай Сue-No Cue болон Exp Sal-No Cue) -тай харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгааг гаргадаг. # нь Sal-treated Cue-exposed Exp бүлэг (Exp Sal ​​+ Cue) -тай харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгааг харуулж байна. Перро-IR эсийн төлөөлөлийн зураг2 бэлгийн туршлагатай эрэгтэйчїїдийн ЇС-ийн їндсэн дээрC, D) эсвэл NLX (E, F) нь гэрийн тор (Cue, C, E) -ээс авсан, эсвэл хамаатай холбоотой контекстын заалтанд ил гарсан (Cue; D, F). N = 4 бүлгүүд Нь Naive NLX (No Cue) n = 3. ac, Anterior комисс. Хэмжээст зураас, 100 μm.

Зураг 8. 

Налонксонын нөлөөгөөр бусад VTA зорилтот бүсүүдэд бүрхүүлтэй өдөөгдсөн pERK илэрхийлэл дээр үр нөлөө үзүүлдэг. Мм-ийн pERK-IR эсийн тоо2 (цагаан), туршлагатай (Exp, хар) NLX буюу давстай (Sal) системд урьдчилан бэлдэж байхдаа ААБ-д контекст (Cue) эсвэл гэрийн тор (ямар ч дохио)A), PL (B), IL (C), болон BLA (D). Өгөгдөл нь ± SEM утгатай; * нь давсархаг урьдчилан боловсруулсан ямар ч хяналтгүй (ялгаатай Сue-No Cue болон Exp Sal-No Cue) -тай харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгааг гаргадаг. # Саль-эмчилгээний сэжигтэй сэжигтэй хяналтуудтай (Nave Sal + Cue) харьцуулахад мэдэгдэхүйц ялгааг харуулж байна.

Манай таамаглалыг дэмжсэнээр бэлгийн харьцааны туршид нaloxone эмчилгээ нь бэлгийн холбоотой холбоотой нөхцлүүдийн дагуу pERK индукцыг ихээхэн сулруулсан. Эдгээр Naloxone-эмчилгээтэй эр эмийн экспресс (Exp NLX + Cue) нь PERK илэрхийлэл нь гэрийн тороос авсан бэлгийн гайгүй буюу туршлагатай хяналтын бүлгүүдэд суурь перкийн илэрхийлэлд ялгагддаггүй (Naive Sal-No Cue or Naive NLX- No Cue). Үүнээс гадна Naloxone-эмчилгээтэй эр эмийн экспресс (Exp NLX + Cue) дахь PERK-ийн илэрхийлэл нь NAc core-ийн давсны арчилгатай туршлагатай амьтантай (Exp Sal ​​+ Cue) харьцуулахад бага байсан (Зураг. 7A; p = 0.002) болон mPFC дэд бүлгүүд (Зураг. 8A, АТГ: p <0.001; B, PL: p = 0.002; C, IL: p = 0.015).

NAc-ийн бүрхүүлд ANOVA анализ хийхэд нөлөөлөх хүчин зүйлүүд болон нaloxone эмчилгээний статистик мэдэгдэхүйц нөлөө үзүүлдэггүй. Гэсэн хэдий ч хос харьцуулсан харьцуулалт нь сэжигтэй бэлгийн туршлагатай бүлэг (Exp SAL + Cue) -д перкийг өдөөсөн нь Салин мэдрэлийн хяналтын бүлэггүйЗураг. 7B; Гайгүй SAL-No Сue нь: p = 0.0163).

хэлэлцүүлэг

Одоогийн судалгаагаар бэлгийн зан үйлтэй холбоотойгоор ЭМДС-ийн үйл ажиллагаа явуулж буй EOP нь байгалийн өвөрмөц зан төлөвтэй байсан нь VTA dopamine эсийн хэмжээгээр хүчтэй боловч түр зуурын бууралтад хүргэсэн болохыг харуулж байна. Хэмжээ багассан нь VTA бус допамины мэдрэлийн эсүүд болон ойролцоох организмын допамин мэдрэлийн эсэд ажиглагдаагүй бөгөөд энэ өөрчлөлт нь VTA-ийн допамины эсүүдэд онцгой ач холбогдолтой болохыг тогтоожээ. Энэхүү VTA-ийн допамины уян хатан чанар нь архаг опиатын өртөлттэйSklair-Tavron нар, 1996; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011) ба гадны нөлөөнд (морфин) шагналыг ижил төстэй тэсвэртэй болгодог. Бид VTA допамины уян хатан чанар нь урт хугацааны (засвар үйлчилгээ) урт хугацааны хувьд (засвар үйлчилгээ) чухал үүрэгтэй гэдгийг харуулж байна. Гэхдээ богино хугацааны (хөгжүүлэлт), бэлгийн зан үйлийг сайжруулах, VTA зорилтот бүсүүдэд шагнал урамшуулал бүхий холбогдох мэдрэлийн үйл ажиллагаа (pERK) бэхжүүлэх нь NAc ба mPFC. Эдгээр үр дүнгүүд нь байгалийн шагнал урамшууллын санамж, шагналын санамжийг урамшуулан дэмжих урт хугацааны илэрхийлэлд VTA-ийн допамины уян хатан байдлын үүргийг илэрхийлдэг.

Бэлгийн харилцааны туршлага нь дараагийн бэлгийн зан үйлийг хөнгөвчлөхөд хүргэдэг, үүнд үржлийн үйл ажиллагаа эхэлж, гүйцэтгэл сайжирсанаасBalfour et al., 2004; Pitchers et al., 2010a,b, 2012). Бэлгийн зан үйлийг энэ аргаар зохицуулах нь 28 d-ийн дараагаарPitchers et al., 2012). Түүнчлэн бэлгийн зан үйл, бэлгийн харьцааны талаар урьдчилан таамаглахад бэлгийн заналхийлэл нь MOR-ийн вирүсийн идэвхжлийг үүсгэж, МЭӨ-ийн вирусийн эсрэг мэдрэлийн идэвхжлийг өдөөх, үүнд VTA (dopamine, nondopamine neurons), NAc, PFC, болон BLABalfour et al., 2004, 2006). VTA dopamine neurons нь өвөрмөц урамшууллын урамшууллын урамшууллын мэдрэмжийг ойлгоход чухал үүрэг гүйцэтгэдэг.Berridge, Robinson, 1998; Berridge et al., 2009; Flagel et al., 2011) бөгөөд шагнал урамшууллын хувьд нэн чухал байдаг (Schultz, 2010). Одоогийн мэдэгдэж буй үр дүнгүүд нь одоогийн мэдлэг дээр тулгуурлан шагнал урамшуулал бүхий VTA мэдрэлийн системийн мэдрэлийн функцууд нь эдгээр үүрэгт нэн чухал болохыг харуулж, ETA-ийн EOP идэвхжүүлэлтээс хамаардаг. EOP нь эрэгтэй бэлгийн харьцааны үед VOR-д үйлчилдэг MOR Ligand. Хэдийгээр β endorphin болон enkephalin хоёулаа хооллогчдыг урамшуулах урам зоригийг агуулдаг боловчHayward нар, 2002) энэ нь эрэгтэй хүний ​​бэлгийн зан үйлийн хувьд тогтоогдсон хэвээр байна. Бид өмнө нь β-endorphin нейроныг идэвхжүүлсэн үед идэвхжээгүй, POMC мРНХ-ийн хэмжээ нэмэгдэхгүй байгааг өмнө нь харуулсан. Тиймээс β endorphin нь ослын үед VTA-ийн үүрэг гүйцэтгэдэг эгзэгтэй EOP биш байж болноDavis нар, 2007). Энэхүү VTA-ийн допамины уян хатан чанар нь бэлгийн урамшуулал-байгаль орчны санааг урьдчилан таамагласнаас хойш mPFC, NAc, VTA-ийн мэдрэлийн үйл ажиллагаанд чухал үүрэгтэй байв. Түүнчлэн, VTA-ийн допамины уян хатан чанар нь бэлгийн зан үйлийн өсөлт, гүйцэтгэлийг нэмэгдүүлэх урт хугацааны илэрхийлэл юм. Үүний эсрэгээр бэлгийн туршлагаас үүдэлтэй мэдрэлийн эсийн нөлөөнд өртсөн мэдрэлийн мэдрэхүйн өөрчлөлтийг эрт илрүүлэхэд шаардагддаггүй байсан ба бэлгийн дуршил (CPP-аар тодорхойлогддог), бэлгийн сэдэл, гүйцэтгэлийн (богино хугацааны туршид бэлгийн чиг баримжаа эсвэл 1-ийн үед)Мехрара ба Бумум, 1990). Үүний оронд өгөгдөл нь VTA dopamine neuroplasticity нь удаан хугацааны туршид зуучлах (7 d сүүлийн сексийн шинжилгээний дараа; Pitchers et al., 2012) Бэлгийн урамшууллын "хүссэн" илэрхийлэл, дохио өгөхөд нөлөөлсөн хариу үйлдэлМиллер ба Бумум, 1987; Berridge, Robinson, 1998).

Бэлгийн туршлагатай амьтад хулганы дугуйны үр дагавартай төстэй морфин урамшуулалд тэсвэртэй байхыг харуулсан. Өөр нэг байгалийн өвөрмөц зан байдал нь нaloxone эмчилгээг хориглодог (жишээ нь,Lett et al., 2001, 2002) ба VTA-ийн допамины эсийн уян чанараас хамаарах (одоогийн үр дүн). Байгалийн ашигт малтмалын нэгэн адил опиатын морфин, эсвэл героиныг давтан илрүүлэх нь VTA dopamine soma хэмжээг түр зуур багасгахад хүргэдэг (Sklair-Tavron нар, 1996; Spiga et al., 2003; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Үүнээс гадна богино хугацааны эмчилгээ хийлгэх нь өвдөлт намдаахад хүргэдэг бөгөөд шагнал урамшууллыг бий болгохын тулд мансууруулах бодисын хэмжээг ихэсгэдэгShippenberg et al., 1987; Russo et al., 2007), өөрийгөө зохицуулах амьтдыг мансууруулах бодисыг ихэсгэх шалтгаан болдог (Ахмед нар, 2000; Walker et al., 2003). Тиймээс EOP ба опиоидууд нь эрт гарах үед өвдөлт намдаах эмийг түгээхэд түгээмэл мэдрэлийн субстратууд дээр ажилладаг бөгөөд энэ нь давтан өртөхөөс сэргийлж,Koob and Le Moal, 2005). Үүний эсрэгээр удаан хугацааны туршид мансууруулах бодисын хордлогын эсрэг эмийг удаан хугацаагаар хэрэглэх үед эмчилгээнд урамшуулал өгөх шинж чанарыг мэдрэх чадвартай болгодог (Харрис болон Астон Жонс, 2003; Астон Жонс ба Харрис, 2004; Harris болон Gewirtz нар 2004). Сонирхолтой нь, 7-28-ийн бэлгийн хавьтлын үед бэлгийн хавьталд ордог бэлгийн туршлагаас сэтгэцийн эмчилгээнд хөндлөнгөөс мэдрэх мэдрэмжийг бий болгодогPitchers et al., 2010a) нь NAc (dc) -д хамаарах датаФосбын илэрхийлэл ба dopamine рецепторын 1 идэвхжүүлэлтээс хамаардагPitchers et al., 2013). Тиймээс бэлгийн шагналын туршлага нь нэгэн зэрэг опиатын шагналыг хүлээж авахад хүргэдэг бөгөөд сэтгэцийн эмгэгийн мэдрэмжийг өдөөж байдаг ч морфины урамшууллын хугацааг урт хугацаагаар тэвчихийг үргэлжлүүлэн шалгадаг. Мансууруулах эмчилгээний эдгээр эсрэг үр нөлөөг мезолимик системийн янз бүрийн хэсэгт мэдрэлийн уян хатан хэлбэрээр зуучилж болно. Үүнд: VTA EOP-ийн үйлдэл ба допамины уян хатан чанар нь опиатын шагналын хүлцэлийг (одоогийн судалгаа) хийдэг бол NAc deltaFosB илэрхийлэл нь сэтгэцийн эмгэг мэдрэмжийг хянадаг (Pitchers et al., 2013). Эдгээр үйл явдлууд нь эмийн бэлдмэлийн өсөлтөд хувь нэмрээ оруулдаг (Ахмед, Кобоб, 1998, 1999; Ахмед нар, 2000, 2002, 2003; Walker et al., 2003).

Байгалийн шагнал урамшууллын үед EOP-д нөлөөлж буй молекулын механизмууд нь тодорхойгүй хэвээр үлддэг. IRS2-Akt-mTORC2 нь давтан морфины улмаас үүссэн VTA-ийн хэмжээ багассан гол зууч юм.Jaworski et al., 2005; Russo et al., 2007; Mazei-Robison et al., 2011). Морфины давтан адсорбционар өөрчлөгдөх нь тархины шалтгаант нейротроф хүчин зүйлсийн доторхи VTA-ийн инсулинаар (VNNF; Sklair-Tavron болон Narangler, 1995). BDNF нь TrkB дохиогоор дамжуулан энэ замыг идэвхжүүлдэг (Russo et al., 2007), BDNF болон IRS2-Akt-ийн замын нэг хэсэг нь өндөр давтамжтай хүлээн авагч киназаSeroogy and Gall, 1993; Numan болон Seroogy, 1999) ба Допамин болон GABA мэдрэлийн бүлгийн эмгэгүүдээр илэрхийлэгддэг. Вирїсийн вектор ген шилжүүлэх технологийг ашиглан IRS2-Akt-ийн замын янз бүрийн бүрэлдэхүүн хэсгүүдийг бууруулж архаг опиатын өртөлтийн нөлөөг дуурайдаг. Цаашилбал, энэ дохиоллын замыг сэргээх замаар опиатын өртөлтийн үр нөлөөг аврах боломжтой (Russo et al., 2007) ба mTORC2-ийн бүрэлдэхүүн хэсэг нь хэтэрсэн морфинаас шалтгаалсан VTA допаминыг багасгахаас сэргийлдэг (Mazei-Robison et al., 2011). Тиймээс VTA dopamine soma-ийн архаг ходоодны хорт нөлөөг судалж үзсэн өмнөх ажил нь IRS2-Akt-mTOR-ийн морфин-өдөөгдсөн бууралтыг багасгахад нөлөөлж байгааг харуулж байна.Мазеи-Робисон ба Нестлер, 2012). Тиймээс, VTA dopamine neuroplasticity-ийн бэлгийн туршлагад үзүүлэх бэлтгэл нь BDNF болон IRS2-Akt-mTORC2 замаар дамждаг.

Эцэст нь хэлэхэд одоогийн судалгаагаар VTA нейропластик нь байгалиас урамшуулал, ялангуяа эрэгтэй хүний ​​бэлгийн харьцааны зан үйлээс үүдэлтэй. Тухайлбал, Допингийн хяналтын ажилтан дахь DOP-д үйл ажиллагаа явуулж буй dopamine soma хэмжээг багасгаж, мэдрэлийн мэдрэмж сайжирч, гиподопаминерикийн системд хүргэх допамины гаралтыг багасган, бэлгийн урамшууллын урьдчилан таамаглах дохионы хариу мессенжерийн үйл ажиллагааг өөрчилдөг. Цаашилбал, VTA нейропластик нь урамшууллын сэдэл, ой санамжийг шагнахад чухал үүрэгтэй. Эцэст нь, байгалийн шагнал урамшуулалтай холбоотой мэдрэлийн уян хатан чанар, урамшуулал өгөх богино хугацааны дараа VTA нь эмийн донтолтыг хөгжүүлэх эмзэг байдалд нөлөөлдөг.

Хөл тэмдэглэл

  • Нэгдүгээр сард 12, 2014 хүлээн авсан.
  • Хяналт тавдугаар сард 17, 2014 хүлээн авсан.
  • Тавдугаар 20, 2014 хүлээн зөвшөөрөгдсөн.

  • Энэхүү судалгаа нь Канадын Эрдэм шинжилгээний Хүрээлэнгийн Эрдэм Шинжилгээний Хүрээлэн, Байгалийн Шинжлэх Ухааны ба Шинжлэх Ухааны Судалгааны Зөвлөлөөс KKP-т дэмжлэг үзүүлсэн

  • Зохиогчид санхүүгийн өрсөлдөөн байхгүй гэж үздэг.

  • Миссисиппийн Их Сургуулийн Анагаах Ухааны Төв, Физиологи, Биофизикийн тэнхим, 2500 North State Street, Jackson, MS 39216-4505-ийн доктор Лик М. [имэйлээр хамгаалагдсан]

Ашигласан материал

  1. ↵
    1. А Agmo А

    (1997) Эрэгтэй хулганы бэлгийн зан үйл. Brain Res Brain Res Protoc 1: 203-209.

  2. ↵
    1. Ахмед Ш,
    2. Koob GF

    (1998) Дундаж ба хэт их хэрэглээтэй шилжилт: Хедоник цэгийн өөрчлөлт. Шинжлэх ухаан 282: 298-300.

  3. ↵
    1. Ахмед Ш,
    2. Koob GF

    (1999) Хулгайлагдсаны дараа кокаины бие даасан менежментийг тогтоодог урт хугацааны өсөлт. Psychopharmacology 146: 303-312.

  4. ↵
    1. Ахмед Ш,
    2. Walker JR,
    3. Koob GF

    (2000) Мансууруулах бодисын өсөлтийн түүхтэй хархад героиныг авах сэдэлийн байнгын өсөлт. Neuropsychopharmacology 22: 413-421.

  5. ↵
    1. Ахмед Ш,
    2. Kenny PJ,
    3. Koob GF,
    4. Маркоу А

    (2002) Коины хэрэглээг нэмэгдүүлэхтэй холбоотой гейоник этоцассын нейробиологийн нотолгоо. Nat Neurosci 5: 625-626.

  6. ↵
    1. Ахмед Ш,
    2. Лин Д,
    3. Koob GF,
    4. Парсонс LH

    (2003) Кокаины бие даасан удирдлагыг өргөжүүлэх нь кокайнаас өдөөгдсөн цөмийг капсулыг допамины түвшинд хүргэхээс хамаарахгүй юм. J Neurochem 86: 102-113.

  7. ↵
    1. Aston-Jones G,
    2. Харрис GC

    (2004) Цаг хугацаа тасралтгүй үргэлжлэх үед мансууруулах бодисыг нэмэгдүүлэх тархины эд эсүүд. Neuropharmacology 47: 167-179.

  8. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Yu L,
    3. LM хөргөх

    (2004) Бэлгийн зан үйл, хүйсийн холбоотой хүрээлэн буй орчны дохиолол нь хархнуудад зориулсан mesolimbic системийг идэвхжүүлдэг. Neuropsychopharmacology 29: 718-730.

  9. ↵
    1. Balfour ME,
    2. Brown JL,
    3. Yu L,
    4. LM хөргөх

    (2006) Дундаж пренрихээс үүсэх эфирийн хувь нэмэр эрэгтэй хулгана дахь бэлгийн зан үйлийн дараа мэдрэлийн идэвхжилтэнд нөлөөлдөг. Мэдрэлийн 137: 1259-1276.

  10. ↵
    1. Beitner-Johnson D,
    2. Guitart X,
    3. Nestler EJ

    (1992) Мэдрэлийн булчирхайн уургууд ба mesolimbic dopamine систем: Морфин болон архаг кокаин архаг морфиноор үүсгэгдсэн нийтлэг зохицуулалт. J Neurosci 12: 2165-2176.

  11. ↵
    1. Berridge KC,
    2. Робинсон TE

    (1998) Допамин урамшууллын үүрэг юу вэ: гононик нөлөө, сурах урамшуулал, урамшууллын ач холбогдол? Brain Res Brain Res Rev 28: 309-369.

  12. ↵
    1. Berridge KC,
    2. Робинсон TE,
    3. Aldridge JW

    (2009) Шагналын бүрэлдэхүүн хэсгүүд: "дуртай", "хүсмээр", суралцах. Curr Opin Pharmacol 9: 65-73.

  13. ↵
    1. Блам К,
    2. Вернер Т,
    3. Carnes S,
    4. Carnes P,
    5. Бавират А,
    6. Жордоо Ж,
    7. Оскар-Берман М,
    8. Алт М

    (2012) Хүйс, мансууруулах бодис, рок 'n' өнхрөх: нийтлэг mesolimbic идэвхжилтийг таамаглах урамшууллын ген полиморфизмийн үйл ажиллагаа гэж таамагладаг. J сэтгэцэд нөлөөлөх эм 44: 38-55.

  14. ↵
    1. Чу NN,
    2. Zuo YF,
    3. Мэн L,
    4. Lee DY,
    5. Хан JS,
    6. Cui CL

    (2007) Захын цахилгаан өдөөлт нь эсийн хэмжээг багасгаж, морфины архаг архаг архаг үрэвсэлт вирүсээр аман дахь BDNF түвшин нэмэгдсэн байна. Brain Res 1182: 90-98.

  15. ↵
    1. Дэвис BA,
    2. Fitzgerald ME,
    3. Brown JL,
    4. Amstalden KA,
    5. LM хөргөх

    (2007) POMC мэдрэлийн ерөнхий мэдрэлийн үед идэвхижүүлэх, харин эр харханд бэлгийн харьцаанд ордоггүй. Behav Neurosci 121: 1012-1022.

  16. ↵
    1. Fiorino DF,
    2. Coury A,
    3. Филлипс AG

    (1997) Судасны динамик өөрчлөлт нь эрэгтэй харханд нөлөөлж буй Coolidge-ийн нөлөөгөөр dopamine efflux-д хамаардаг. J Neurosci 17: 4849-4855.

  17. ↵
    1. Flagel SB,
    2. Кларк JJ,
    3. Робинсон TE,
    4. Mayo L,
    5. A казак,
    6. I Willuhn,
    7. Үзэгчид CA,
    8. Клинтон,
    9. Филлипсийн PE,
    10. Akil H

    (2011) Сэргээх шагнал урамшуулал дээр допаминий сонгон шалгаруулах үүрэг. Байгаль 469: 53-57.

  18. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Pitchers KK,
    3. Balfour ME,
    4. LM хөргөх

    (2010a) Таашаалын холимог: хүн ба амьтны загвар дээр бэлгийн зан үйлд үзүүлэх эмийн нөлөөг судлах. Horm Behav 58: 149-162.

  19. ↵
    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke J,
    3. Шуурхай шуурхай үнэлгээний судалгаа,
    4. Lehman MN,
    5. LM хөргөх

    (2010b) Метампетамин нь эрэгтэй харханд бэлгийн зан үйлийг зохицуулдаг мэдрэлийн бүлгийн эмүүд дээр ажилладаг. Мэдрэлийн 166: 771-784.

  20. ↵
    1. Харрисон АС,
    2. Gewirtz JC

    (2004) Морфины хурц үеэс эхлэн таталтын өндөр эрсдэл: дуран татах, түгшээх загвар. Psychopharmacology 171: 140-147.

  21. ↵
    1. Харрисийн GC,
    2. Астон Жонс Г

    (2003) Нилээд дургүй болохоос үүдэлтэй сэдэл, сонирхолыг өөрчилсөн: шагнал урамшууллын хугацааг уртасгах нотолгоо. Neuropsychopharmacology 28: 865-871.

  22. ↵
    1. Hayward MD,
    2. Pintar JE,
    3. Бага MJ

    (2002) Бета-теорорфин ба энкефалингүй хулгана дахь сонгомол шагнал урамшуулал. J Neurosci 22: 8251-8258.

  23. ↵
    1. Hoebel BG,
    2. Avena NM,
    3. Bocarsly ME,
    4. Рада П

    (2009) Байгалийн донтолт: харханд элэгний донтолт дээр суурилсан зан төлөв, харилцааны загвар. J Addict Med 3: 33-41.

  24. ↵
    1. Hyman SE,
    2. Malenka RC,
    3. Nestler EJ

    (2006) Донтолтын мэдрэлийн механизм: шагналд хамаарах сургалт ба санах ойн үүрэг. Annu Rev Neurosci 29: 565-598.

  25. ↵
    1. Ikemoto S,
    2. Kohl RR,
    3. McBride WJ

    (1997) Габах (А) рецепторт хоригдсон бамбай нь урд хүзүүнд байрлах нуклеотидын эсийн гаднах гадаргуугийн түвшинг нэмэгдүүлдэг. J Neurochem 69: 137-143.

  26. ↵
    1. Jaworski J,
    2. Spangler S,
    3. Seeburg АН,
    4. Хоогенраад CC,
    5. Доншен газрын тос М

    (2005) Фосфоиносцидид-3'-kinase-Akt-амьтдын рамамициний замыг dendritic arborization-ийн хяналт. J Neurosci 25: 11300-11312.

  27. ↵
    1. Johnson SW,
    2. Хойд RA

    (1992) Опиоидууд допамины мэдрэлийг өдөөх мэдрэлийн мэдрэлийг орон нутгийн дотоод гиперпаризацигаар өдөөж байна. J Neurosci 12: 483-488.

  28. ↵
    1. Клитеник MA,
    2. DeWitte P,
    3. Kalivas PW

    (1992) Опиоид ба GABA-ийн судасжилтын талбайн гадаргуу дахь somatodendritic dopamine-ийн эмчилгээ: vivo microdialysis-ийн судалгаа. J Neurosci 12: 2623-2632.

  29. ↵
    1. Koob GF,
    2. Le Moal М

    (2005) Шагнал мэдрэлийн сэхээн амьдруулах эмчилгээ болон хар тамхины донтолтын "бараан тал" -ын уян хатан чанар. Nat Neurosci 8: 1442-1444.

  30. ↵
    1. Lennette DA

    (1978) Дархлааны флюресцент микроскопид зориулсан сайжруулсан тэжээлийг боловсронгуй болгох орчин. Am J Clin Pathol 69: 647-648.

  31. ↵
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Ко MT

    (2001) Naloxone нь болзолт байрлалыг харханд дугуйгаар өдөөгддөг давуу талтай. Physiol Behav 72: 355-358.

  32. ↵
    1. Lett BT,
    2. Grant VL,
    3. Koh MT,
    4. Flynn G

    (2002) Дугуй ажиллаж эхлэхээс өмнө морфины урамшууллын үр дүнд хөндлөнгөөс тэсвэрлэх чадварыг бий болгодог. Pharmacol Biochem Behav 72: 101-105.

  33. ↵
    1. Matthews RT,
    2. Герман хэл

    (1984) Мөгөөрсний хөндийн хөндийн хөндийн хөндийн допамин мэдрэлийг өдөөх электрофизиологийн нотолгоо. Мэдрэлийн 11: 617-625.

  34. ↵
    1. Мазеи-Робисон MS,
    2. Koo JW,
    3. Friedman AK,
    4. Lansink CS,
    5. Robison AJ,
    6. Виниш М,
    7. Krishnan V,
    8. Kim S,
    9. Siuta MA,
    10. Галли А,
    11. Niswender KD,
    12. Appasani R,
    13. Хорват МК,
    14. Neve RL,
    15. Worley PF,
    16. Snyder SH,
    17. Хурц YL,
    18. Cheer JF,
    19. Han MH,
    20. Russo SJ,
    21. нар.

    (2011) МТГ-ын дохиолол болон мэдрэлийн үйл ажиллагаа нь амфинины өдөөгдсөн допаминий мэдрэлийн талбайн допамин мэдрэлийн эмгэгийн үед дасан зохицох үйлдэл. Neuron 72: 977-990.

  35. ↵
    1. Мазеи-Робисон MS,
    2. Nestler EJ

    (2012) Амны хөндийгөөс үүдэлтэй молекул болон эсийн уян хатан байдал, байршлын катехоламин мэдрэлийн эсүүд. Хүйтэн Хаврын Харб 2: a012070.

  36. ↵
    1. Mehrara BJ,
    2. Baum MJ

    (1990) Naloxone нь илэрхийлэлд саад болохоос биш, болзолт нөхцөлд байгаа эмэгтэй ямагт таатай нөхцөлд байгаа эрэгтэй мөлхөгчдийн худалдан авалт биш юм. Psychopharmacology 101: 118-125.

  37. ↵
    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Эмэгтэй мэрэгчдийн бэлгийн туршлага: үүрэн механизм ба үйл ажиллагааны үр дагавар. Brain Res 1126: 56-65.

  38. ↵
    1. Миллер RL,
    2. Baum MJ

    (1987) Naloxone төөрөлтийн дараа удалгүй эр хөгширч буй эмэгтэйд тээглүүр ба болзолт газрыг давахыг дарангуйлдаг. Pharmacol Biochem Behav 26: 781-789.

  39. ↵
    1. Митчелл ЖБ,
    2. Стюарт Ж.

    (1990) Опио-мансууруулах бодис судсаар тарьж хэрэглэдэг эрчүүдийн хулганад бэлгийн зан үйлийг хөнгөвчлөх. Pharmacol Biochem Behav 35: 643-650.

  40. ↵
    1. Murphy LO,
    2. Blenis J

    (2006) MAPK дохионы өвөрмөц байдал: зөв газарт зөв цагт. Биохимийн шинжлэх ухааны чиг хандлага 31: 268-275.

  41. ↵
    1. Nestler EJ

    (2012) Мансууруулах бодисын донтолтын хуулбарын механизм. Эмчилгээ Psychopharmacol Neurosci 10: 136-143.

  42. ↵
  • ↵
    1. Paxinos G,
    2. Ватсон С

    (2013) Хэвшмэл солбицлын (Academic, Boston), Ed 7 дахь хулганы тархи.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Ричтанд ЭМ,
    5. Yu L,
    6. LM хөргөх

    (2010a) Байгалийн урамшуулал, урамшуулалгүй тэвчих замаар өдөөгдсөн mesolimbic систем дэх мэдрэл-уян чанар. Biol Psychiatry 67: 872-879.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Frohmader KS,
    3. Vialou V,
    4. Mouzon E,
    5. Nestler EJ,
    6. Lehman MN,
    7. LM хөргөх

    (2010b) DeltaFosB нь капсулыг хүлээн зөвшөөрөхөд бэлгийн урамшууллын үр нөлөөг бэхжүүлэхэд чухал үүрэгтэй. Ген Brain Behav 9: 831-840.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Schmid S,
    3. Ди Sebastiano AR,
    4. Ван X,
    5. Laviolette SR,
    6. Lehman MN,
    7. LM хөргөх

    (2012) Байгалийн шагналын туршлага нь AMPA болон NMDA рецепторыг түгээх, үйл ажиллагааг өөрчилдөг. PLoS One 7: e34700.

  • ↵
    1. Pitchers KK,
    2. Vialou V,
    3. Nestler EJ,
    4. Laviolette SR,
    5. Lehman MN,
    6. LM хөргөх

    (2013) Байгалийн ба эмийн урамшуулал DeltaFosB нь мэдрэлийн мэдрэлийн уянгын механизмын механизм дээр гол үүрэг гүйцэтгэгчээр ажилладаг. J Neurosci 33: 3434-3442.

  • ↵
    1. Roux PP,
    2. Blenis J

    (2004) ERK ба p38 MAPK-идэвхжүүлсэн уургийн kinase: янз бүрийн биологийн функц бүхий уургийн гэр бүл. Microbiol Mol Mol Biol Rev 68: 320-344.

  • ↵
    1. Russo SJ,
    2. Боланос CA,
    3. Theobald DE,
    4. DeCarolis NA,
    5. Renthal W,
    6. Кумар А,
    7. Winstanley CA,
    8. NE Renthalhal,
    9. Wiley MD,
    10. Өөрөө DW,
    11. Russell DS,
    12. Neve RL,
    13. Eisch AJ,
    14. Nestler EJ

    (2007) IRS2-Akt замд дундын булчирхайн допамин мэдрэлийн эсүүд нь опиатын зан үйл, эсийн хариу үйлдлийг зохицуулдаг. Nat Neurosci 10: 93-99.

  • ↵
    1. Schultz W

    (2010) Допамины мэдрэлийн олон функц. F1000 Biol Rep 2: 2.

  • ↵
    1. Seroogy KB,
    2. Gall CM

    (1993) Нейротропинийг дунд зэргийн dopaminergic neurons гэх мэтээр илэрхийлэх. Exp Neurol 124: 119-128.

  • ↵
    1. Shippenberg TS,
    2. Bals-Kubik R,
    3. Herz A

    (1987) Опиоидын идэвхжүүлсэн шинж чанарууд: Delta-receptors-ийг идэвхжүүлэх нь арматурын үйл явцыг зуучилж өгдөг гэдгийг нотолсон. Brain Res 436: 234-239.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Nestler EJ

    (1995) Морфин ба нейротрофинүүд, NT-3, NT-4, ба BDNF-ийн нөлөөгөөр in vitro in locus coeruleus neurons. Brain Res 702: 117-125.

  • ↵
    1. Sklair-Tavron L,
    2. Ши WX,
    3. Lane SB,
    4. Харрис Хв,
    5. Bunney BS,
    6. Nestler EJ

    (1996) Архаг морфин нь mesolimbic dopamine neurons-ийн морфиментын өөрчлөлтийг харуулдаг. Proc Natl Acad Sci USA 93: 11202-11207.

  • ↵
    1. Spiga S,
    2. Серра GP,
    3. Puddu MC,
    4. Фодда М,
    5. Диана М

    (2003) VTA-ийн гаж хувирал-өдөөгдсөн гажиг: Лазерын сканнинг бичил харуурыг илрүүлэх. Eur J Neurosci 17: 605-612.

  • ↵
    1. Swanson LW

    (2004) Тархины зургууд: хулганы тархины бүтэц (Academic, San Diego), Ed 3.

  • ↵
    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Жан Q,
    4. Pitchers KK,
    5. LM хөргөх

    (2009) Эрэгтэй харханд бэлгийн харьцаа: Элэгжүүлэлт, интрометртэй холбоотой таатай нөхцөлтэй бэлгийн туршлагаас бэлгийн харьцааны үр нөлөө. Horm Behav 55: 93-97.

  • ↵
    1. Tzschentke TM

    (2007) Болзошгїй нєхцєл байдал (CPP) парадигментын шагналыг хэмжих: Сїїлийн арван жилийн шинэчлэлт. Addict Biol 12: 227-462.

  • ↵
    1. ван Фурт WR,
    2. van Ree JM

    (1996) Бэлгийн сэдэл: амны хөндийн доторхи дотоод опиоидуудын оролцоо. Brain Res 729: 20-28.

  • ↵
    1. ван Фурт WR,
    2. Wolterink G,
    3. van Ree JM

    (1995) Эрэгтэй хүний ​​бэлгийн зан үйлийн зохицуулалт: тархины опиоид, допаминий оролцоо. Brain Res Brain Res Rev 21: 162-184.

  • ↵
    1. Walker JR,
    2. Chen SA,
    3. Moffitt H,
    4. CE Inturrisi,
    5. Koob GF

    (2003) Архаг опиоидын өртөлт нь харханд героины бие махбодийн үйл ажиллагааг нэмэгдүүлсэн. Pharmacol Biochem Behav 75: 349-354.

  • ↵
    1. Залуучуудын холбоо,
    2. Gobrogge KL,
    3. Лю Y,
    4. Ван Z

    (2011) Хоѐр хавирган доторх нейробиологи: нийгмийн monogamous мэрэгчдийн үзэл бодол. Урд неокарендокринол 32: 53-69.

    •