Psikjatrija Biol. 2008 Diċembru 1; 64 (11): 941-50 Epub 2008 Lulju 26.
Teegarden SL, Nestler EJ, Bale TL.
sors
Dipartiment tal-Bijoloġija tal-Annimali, l-Università ta 'Pennsylvania, Philadelphia, PA 19104-6046, USA.
Astratt
SFOND:
Is-sensittività għall-premju ġiet implikata bħala fattur predispost għal imġieba marbuta ma ’l-abbuż tad-droga kif ukoll ma’ l-ikel żejjed. Madankollu, il-mekkaniżmi sottostanti li jikkontribwixxu għas-sensittività tal-premju mhumiex magħrufa. Aħna hypothesized li regolazzjoni ħażina fis-sinjalar ta 'dopamine tista' tkun kawża sottostanti ta 'sensittività ogħla ta' premju li biha stimoli ppremjati jistgħu jaġixxu biex tiġi normalizzata s-sistema.
METODI:
Aħna użajna mudell ġenetiku tal-ġrieden ta 'sensittività akbar ta' premju, il-ġurdien li jesprimi żżejjed minn Delta FosB, biex jeżamina bidliet fil-passaġġ ta 'premju bi tweġiba għal dieta togħma ta' xaħam. Markaturi ta 'sinjali ta' premju f'dawn il-ġrieden ġew eżaminati kemm fil-biċċa l-kbira kif ukoll wara ġimgħat ta '6 ta' espożizzjoni tad-dieta togħma. Il-ġrieden ġew eżaminati f'test ta ’mġieba wara l-irtirar ta’ dieta b'ħafna xaħam biex tiġi evalwata l-vulnerabbiltà ta ’dan il-mudell għat-tneħħija ta’ stimoli ta ’sodisfazzjon.
RIŻULTATI:
Ir-riżultati tagħna juru bidla mibdula fl-attivazzjoni tal-mogħdija tul in-nukleu accumbens-hypothalamic-ventral tegmental circuit ċirkwit li jirriżulta minn espressjoni żejda ta ’Delta FosB fl-nukleu accumbens u reġjuni striatali. Livelli ta 'fosforilat ċikliku adenosine monophosphate (cAMP) ta' rispons ta 'element li jeħel mal-proteina (pCREB), fattur newtrofiku derivat mill-moħħ (BDNF), u d-dopamine u ċ-ċikliku adenosine monophosphate regolati fosfoproteina b'massa molekulari ta '32 kDa (DARPP-32) fin-nukleu accumbens tnaqqsu fil-ġrieden Delta FosB, li jissuġġerixxu sinjali mnaqqsa ta' dopamine. Sitt ġimgħat ta ’espożizzjoni għal dieta b’ħafna xaħam tejbet kompletament dawn id-differenzi, u żvelat il-kapaċità ta’ sodisfazzjon qawwija ta ’dieta togħma. Ġrieden Delta FosB urew ukoll żieda sinifikanti fl-attività tal-lokomotur u r-risponsi relatati ma 'l-ansjetà 24 sigħat wara l-irtirar ta' xaħam għoli.
KONKLUŻJONIJIET:
Dawn ir-riżultati jistabbilixxu sensittività sottostanti għal bidliet fil-premju relatati ma 'regolazzjoni ħażina ta' Delta FosB u sinjalazzjoni ta 'dopamine li jistgħu jiġu normalizzati b'dieti ta' togħma u jistgħu jkunu fenotip predispost f'xi forom ta 'obeżità.
introduzzjoni
Minkejja l-għarfien dejjem jiżdied tagħna tas-sistemi newrali li jikkontrollaw l-aptit u x-xaba ', ir-rati ta' l-obeżità jkomplu jiżdiedu fl-Istati Uniti. It-trattamenti kurrenti tal-mediċina għandhom effikaċja limitata, u modifiki fl-imġiba jbatu minn konformità minima fit-tul (1). Il-konsum ta 'ikel li jagħti togħma b'kaloriku kien marbut ma' bidliet fl-istress u fil-mogħdijiet ta 'premju fil-moħħ, u jissuġġerixxi li l-proprjetajiet ta' sodisfazzjon ta 'ikel bħal dan jistgħu jissuperaw sinjali ta' bilanċ ta 'enerġija (2-4). Ikel b'ħafna xaħam jaġixxi bħala premjijiet naturali, jattiva ċentri ta 'premju għall-moħħ b'mod simili għal drogi ta' abbuż, u bħala tali ntużaw fil-paradigmi ta 'amministrazzjoni personali (5-8). Għalhekk, huwa probabbli li l-imgieba u l-motivazzjoni għas-sovrapożizzjoni u l-abbuż tad-droga għandhom mekkaniżmi sottostanti komuni, li potenzjalment jiftħu toroq ġodda ta 'trattament għaż-żewġ kundizzjonijiet.
Fl-istudju tar-relazzjoni bejn ikel togħma u mogħdijiet li jirregolaw il-premju u l-istress fil-moħħ, aħna diġà identifikajna indikaturi molekulari u bijokimiċi ta 'premju mnaqqas u stress miżjud wara l-irtirar minn dieta ta' xaħam għoli li togħma (HF). Simili għal drogi ta ’abbuż, l-espożizzjoni għal dieta togħma fl-istudji tagħna rriżultat f’livelli miżjuda tal-fattur ta’ traskrizzjoni ΔFosB fl-nukleu accumbens (NAc), struttura ċentrali ta ’premju għall-moħħ (9, 10). Ġrieden li jesprimu żżejjed inFosB induttibilment juru reazzjoni strumentali miżjuda għal premju ta 'l-ikel (11), li jagħmluhom għodda siewja biex jeżaminaw ir-rwol tas-sensittività tal-premju u r-regolazzjoni ħażina fit-tul tas-sistema ta' premjazzjoni fir-risponsi molekulari u bijokimiċi għal dieta togħma.
Fl-istudju preżenti, użajna l-mFosB-ġrieden li jesprimu żżejjed biex jeżaminaw alterazzjonijiet fit-tul f'markers ta 'premju fin-newroċirkuwitu tan-NAc-hypothalamus-ventral tegmental (VTA) bi tweġiba għal dieta HF togħma. Abbażi ta 'studji preċedenti f'dawn il-ġrieden sensittivi għall-premju, aħna nibnunajajna li bidliet fis-sensittività tal-premju induFosB ikkaġunati jinvolvu disregolazzjoni fis-sinjalar ta' dopamine li tirriżulta minn rispons NAc għall-VTA. Barra minn hekk, aħna nisjotipikaw li l-esponiment għal premju naturali ta 'dieta HF densa għall-enerġija mbagħad in-normalizzazzjoni tas-sistema dopaminerġika f'dawn il-ġrieden, li tirriżulta f'reazzjoni esaġerata għall-istress ta' rtirar minn din id-dieta HF. L-aspett uniku ta ’l-użu ta’ dieta togħma bħala sustanza ta ’sodisfazzjon jippermettilna ninkludu d-dħul ipotalamiku biex nippremjaw iċ-ċirkwiti f’fenotip li jista’ jkun tbassir ta ’popolazzjoni predisposta għall-obeżità reżistenti għat-trattament. Biex teżamina din l-ipoteżi, studajna markaturi ta 'dopamine newrotrażmissjoni, inklużi pCREB, BDNF, u DARPP-32 fin-NAc u t-tyrosine hydroxylase u t-trasportatur tad-dopamine fil-VTA, wara l-esponiment għall-HF. Aħna eżaminajna wkoll markaturi speċifiċi ta 'bilanċ ta' enerġija magħruf li jinfluwenzaw l-output ta 'dopamine, inklużi riċetturi ta' leptin u orexin fil-VTA u espressjoni ta 'orexin fi ħdan l-ipotalamus laterali.
Materjali u Metodi
annimali
Ġrieden bitransġeniċi maskili li jesprimu iż-żejjed ΔFosB induttiv f’newroni pożittivi għad-dinamorfina fin-NAc u fl-istrijatum dorsali (Kelz et al., 1999) kienu ġġenerati fuq sfond imħallat (ICR: C57Bl6 / SJL) fiċ-Ċentru Mediku tal-Lbiċ ta ’l-Università ta’ Texas u miżmuma u miżmuma u ttestjati fl-Università ta ’Pennsylvania. Il-ġrieden kollha nżammu fuq doxycycline (100 μg / ml fl-ilma tax-xorb) sal-wasla fl-Università ta 'Pennsylvania. Biex tinduċi espressjoni eċċessiva, doxycycline tneħħa (n = 23) (12). Ġrieden tal-kontroll (n = 26) komplew jirċievu l-mediċina. Ġrieden ġew assenjati lil gruppi ta 'dieta tmien ġimgħat wara t-tneħħija ta' doxycyline li fiha l-espressjoni ta 'żmien intweriet li tilħaq il-livelli massimi (13). Il-ġrieden inżammu fuq ċiklu 12: 12 skur ċar (dwal fuq 0700) bl-ikel u l-ilma disponibbli ad libitum. L-istudji kollha saru skond protokolli sperimentali approvati mill-Kumitat għall-Kura u l-Użu ta ’l-Annimali Istituzzjonali ta’ l-Università ta ’Pennsylvania, u l-proċeduri kollha twettqu skond il-linji gwida istituzzjonali.
Espożizzjoni tad-dieta
Il-ġrieden inżammu fuq chow house (n = 16) jew tqiegħdu fuq HF (n = 16-17) għal sitt ġimgħat. House chow (Purina Lab Diet, St. Louis, MO) kien fih 4.00 kcal / g, li jikkonsisti minn 28% proteina, 12% xaħam, u 60% karboidrat. Id-dieta HF (Diets ta ’Riċerka, New Brunswick, NJ) kien fiha 4.73 kcal / g, li tikkonsisti minn 20% proteina, 45% xaħam, u 35% karboidrat.
Bijokimika u espressjoni tal-ġene
Ġrieden ġew analizzati wara sitt ġimgħat ta ’espożizzjoni għad-dieta. L-imħuħ tneħħew mill-kranju jew ġew iffriżati sħaħ fuq silġ niexef jew in-NAc mifrud (madwar 0.5-1.75 mm minn bregma, f'fond ta '3.5-5.5 mm) u ffriżat f'nitroġenu likwidu. It-tessut inħażen f ’-80 ° C sakemm ġie analizzat.
Analiżi bijokimiċi
Il-metodi għall-blots tal-Punent huma deskritti f'materjali supplimentari. L-antikorpi użati kienu: Cdk5, CREB, u BDNF (1: 500, Santa Cruz Bijoteknoloġija, Santa Cruz, CA) u phospho-CREB (pCREB) (Ser 133) (1: 500, Cell Signaling Technology, Danvers, MA).
Awtoradiografija tar-riċettur
Metodi dettaljati għall-awtoradjografija huma deskritti f'materjali supplimentari. Ligandi użati kienu 2 nM H3 - SCH 23390 u 5 nM H3 - spiperone (PerkinElmer, Boston, MA).
Ibridizzazzjoni in situ
L-ipproċessar tat-tessuti u l-ibridizzazzjoni saru kif deskritt qabel (14). Is-sonda DARPP-32 ġiet ipprovduta ġentilment minn P. Greengard (l-Università ta 'Rockefeller), u s-sonda ta' l-orexin minn J. Elmquist (L-Università ta 'Texas Ċentru Mediku tal-Lbiċ). Slajds imwassla għal DARPP-32 kienu mwaħħlin mal-film għal ġranet 3, u slajds assaminati għal orexin kienu mwaħħla mal-film għal ġranet 4. Il-kwantifikazzjoni ta ’l-immaġini tal-film saret kif deskritt qabel (10).
QRT-PCR
RNA kienet iżolata mill-VTA u l-espressjoni ta 'ġeni individwali vvalutati bl-użu ta' analiżi tal-espressjoni tal-ġene TaqMan (Applied Biosystems, Foster City, CA). Metodi dettaljati u analiżi statistiċi jistgħu jinstabu f'materjali supplimentari.
Analiżi tal-imġiba
Sabiex jiġu eżaminati l-effetti tas-sensittività tal-premju fuq bidliet fl-imġieba kkaġunati mid-dieta, sottogrupp ta 'ġrieden ġie rtirat mill-HF wara erba' ġimgħat ta 'espożizzjoni u rritornat lill-chow house (n = 9 kontroll, n = 8 ΔFosB). Erbgħa u għoxrin siegħa wara l-irtirar, il-ġrieden kienu esposti għat-test fil-miftuħ skond il-paradigma ta ’l-irtirar tad-dieta ppubblikata qabel (10). Fil-qosor, il-maws ġie mqiegħed fiċ-ċentru ta 'l-apparat fil-miftuħ u mmonitorjat għal ħames minuti. Kejl totali tal-linja, boli tal-ippurgar, ħin fiċ-ċentru, u slaleb fiċ-ċentru ġew imkejla.
istatistika
Id-dejta kollha minbarra Western blots ġiet analizzata bl-użu ta 'ANOVA b'żewġ direzzjonijiet segwit minn test PLSD ta' Fisher bi trattament ta 'doxycycline (espressjoni ΔFosB) u kundizzjoni tad-dieta bħala l-varjabbli indipendenti. Għal analiżi RT-PCR, valur P imnaqqas ġie utilizzat biex jikkoreġi għal paraguni multipli fi gruppi ta 'ġeni relatati (ara materjali supplimentari). Western blots ġew analizzati bl-użu tat-test t ta 'student bi trattament ta' doxycycline bħala l-varjabbli indipendenti, billi qabblu d-densitajiet ottiċi fl-istess blot. Id-dejta kollha hija ppreżentata bħala medja ± SEM.
Riżultati
Differenzi bijokimiċi bażiċi
Biex jiġu ċċarati l-mogħdijiet molekulari li huma l-bażi tas-sensittività mtejba tal-premju fil-ġrieden li jesprimu ż-żejjed ta 'OsFosB, ġew eżaminati livelli ta' bosta molekuli ta 'sinjalazzjoni ewlenin fin-NAc. Kien hemm tendenza għal livelli miżjuda ta 'Cdk5 fin-NAc ta' ġrieden ΔFosB meta mqabbla ma 'annimali ta' kontroll littermate miżmuma fuq doxycycline (F = 5.1, P = 0.08; Fig. 1A). Ġrieden osFosB esprimew livelli mnaqqsa b'mod sinifikanti ta 'pCREB (F = 7.4, P <0.05; Fig. 1B) kif ukoll livelli totali ta' CREB (F = 5.4, P = 0.05; Fig. 1C). Tnaqqis sinifikanti f'BDNF ġie osservat ukoll fin-NAc ta 'ġrieden osFosB (F = 10.6, P <0.05; Fig. 1D).
Figura 1
Ġrieden li jesprimu żżejjed osFosB urew markaturi bijokimiċi ta ’sinjalazzjoni mnaqqsa ta’ dopamine fin-NAc
Teħid ta 'ikel u piż tal-ġisem fuq dieta b'ħafna xaħam
Aħna mbagħad eżaminajna l-effetti ta 'dieta HF li tippremja b'mod naturali fuq alterazzjonijiet f'molekuli ta' sinjalazzjoni fil-ġrieden li jesprimu żżejjed osFosB. Ma kien hemm l-ebda differenza bejn il-ġrieden osFosB u l-kontrolli fit-teħid tal-ikel fuq id-dar jew fuq l-HF. Madankollu, kien hemm tnaqqis ġenerali fit-teħid ta 'kaloriji normalizzat għall-piż tal-ġisem meta espost għal HF li kien speċifiku għall-ġrieden ΔFosB (F = 11.2, P <0.01; Fig. 2A). Fl-aħħar ta 'sitt ġimgħat ta' espożizzjoni għad-dieta, ġrieden li jirċievu HF jiżnu b'mod sinifikanti aktar minn dawk fuq dieta chow (F = 17.2, P <0.001), u ġrieden osFosB iżnu inqas b'mod ġenerali mill-kontrolli (F = 5.6, P <0.05; Fig. 2B). Dan l-effett kien speċifiku għal differenzi bejn gruppi fuq id-dieta ta 'chow (P <0.05).
Figura 2
Ġrieden li jesprimu żżejjed fosB ma wrew l-ebda differenza fit-teħid ta ’l-ikel fuq id-dieta ta’ chow jew ta ’xaħam għoli (HF)
Differenzi bijokimiċi fuq dieta b'ħafna xaħam
Biex jiġi ddeterminat kif id-differenzi bażiċi fis-sinjalar NAc jistgħu jinbidlu bid-dieta HF, l-istess proteini ta 'sinjalazzjoni studjati fil-linja bażi ġew eżaminati f'annimali li rċivew sitt ġimgħat ta' HF. Ma kienx hemm differenzi sinifikanti fil-livelli ta 'Cdk5 (Fig. 3A). Il-livelli ta 'pCREB u CREB totali ma kinux iktar differenti wara sitt ġimgħat ta' HF (Fig. 3B, C). Il-livelli ta ’BDNF kienu għoljin b’mod sinifikanti fil-ġrieden osFosB wara sitt ġimgħat ta’ espożizzjoni għall-HF (F = 6.5, P = 0.05; Fig. 3D).
Figura 3
Differenzi ta 'sinjalizzazzjoni mtejba ta' dieta ta 'xaħam għoli (HF) osservati fin-NAc tal-ġrieden li jesprimu żżejjed osFosB
Awtoradiografija tar-riċettur tad-dopamine
Aħna użajna l-awtoradjografija tar-riċetturi biex nivvalutaw jekk l-alterazzjonijiet ikkawżati minn ΔFosB fis-sinjalar ta 'dopamine fin-NAc humiex relatati ma' bidliet fl-espressjoni tar-riċettur ta 'dopamine (Fig. 4A). Dieta b'ħafna xaħam dehret li żżid kemmxejn id-densità tal-irbit tar-riċettur ta 'dopamine D1 (P = 0.14), u din id-differenza kienet akbar fil-ġrieden osFosB (Fig. 4B). Kien hemm ukoll tendenza lejn żieda fl-erja li torbot D1 wara HF (P = 0.06), u l-ittestjar post hoc wera li dan kien sinifikanti fil-ġrieden ΔFosB (P <0.05; Fig. 4C). B'kuntrast mar-riċetturi D1, l-ebda tibdil fid-densità tal-irbit tar-riċettur D2 (kontroll chow = 97.6 ± 6.9, kontroll HF = 101.1 ± 8.2, ΔFosB chow = 91.6 ± 1.0, ΔFosB HF = 94.8 ± 9.5) jew żona ta 'rbit (kontroll chow = 47.3 ± 3.4, kontroll HF = 53.8 ± 6.0, ΔFosB chow = 51.9 ± 3.7, ΔFosB HF = 49.0 ± 3.3) ġew osservati fin-NAc.
Figura 4
Dieta b'ħafna xaħam (HF) wasslet għal bidliet fl-irbit ta 'riċettur ta' dopamine D1 u espressjoni ta 'DARPP-32 fil-nukleu accumbens (NAc) ta' ΔFosB ġrieden li jesprimu żżejjed
Espressjoni DARPP-32 fin-NAc
Ibridizzazzjoni in situ intużat biex tiddetermina livelli ta 'espressjoni ta' DARPP-32 fin-NAc (Fig. 4D). Dieta b'ħafna xaħam żiedet b'mod sinifikanti l-espressjoni ta 'DARPP-32 f'dan ir-reġjun tal-moħħ (F = 5.1, P <0.05), u kien hemm interazzjoni sinifikanti bejn id-dieta u l-espressjoni ta' osFosB (F = 8.9, P <0.05), bil-ġrieden ΔFosB juru bidla kkaġunata mid-dieta (Fig. 4E). Differenza bażika fl-espressjoni ta ’DARPP-32 bejn ġrieden ta’ kontroll u osFosB ġiet żvelata permezz ta ’ttestjar post hoc (P <0.01), kif ukoll żieda sinifikanti fl-espressjoni ta’ DARPP-32 fil-ġrieden ΔFosB fuq HF (P <0.01).
Espressjoni tal-ġene fil-VTA
QRT-PCR ġie użat biex jivvaluta bidliet fl-espressjoni tal-ġene fil-VTA, immirat għal bosta ġeni ewlenin preċedentement implikati fir-regolazzjoni tal-premju. Il-kampjuni kollha ġew normalizzati għal β-actin. Biex jiġi żgurat li l-espressjoni ta 'β-actin ma nbidlitx bit-trattament, saret analiżi separata biex tqabbel β-actin mat-tieni kontroll intern, GAPDH. Ma kien hemm l-ebda differenza sinifikanti fl-espressjoni ta 'β-actin (valuri ΔCT, β-actin - GAPDH: kontroll chow = 2.29 ± 0.21, kontroll HF = 2.01 ± 0.04, ΔFosB chow = 2.32 ± 0.49, osFosB HF = 2.37 ± 0.10).
Xejra għal interazzjoni bejn l-espressjoni ta 'osFosB u t-trattament tad-dieta ġiet osservata għall-espressjoni ta' tyrosine hydroxylase (F = 3.6, P <0.06; Fig. 5A). Sitt ġimgħat ta ’espożizzjoni għal HF dehru li jnaqqsu l-espressjoni ta’ tyrosine hydroxylase fil-ġrieden ta ’kontroll u jżidu l-espressjoni fil-ġrieden osFosB. Interazzjoni sinifikanti bejn l-espressjoni ta 'osFosB u l-espożizzjoni għad-dieta kienet osservata għall-espressjoni tat-trasportatur tad-dopamine (F = 6.7, P <0.03; Fig. 5B). Simili għal tyrosine hydroxylase, espożizzjoni għal HF naqqset l-espressjoni tat-trasportatur tad-dopamine fil-ġrieden tal-kontroll u żiedet b'mod sinifikanti l-espressjoni fil-ġrieden osFosB (P <0.05). Id-differenza bażika fl-espressjoni tat-trasportatur tad-dopamine bejn il-kontroll u l-ġrieden ΔFosB ma laħqitx sinifikat (P = 0.16), iżda wara 6 wks ta ’HF, ġrieden ΔFosB esprimew livelli elevati b’mod sinifikanti ta’ trasportatur ta ’dopamine meta mqabbla mal-kontrolli (P <0.05).
Figura 5
Espożizzjoni għal dieta għolja (HF) u espressjoni expressionFosB wasslu għal bidliet fl-espressjoni ta 'numru ta' molekuli ewlenin fil-VTA
Kien hemm tendenza li tindika effett ta 'espressjoni miżjuda ta' osFosB biex tnaqqas il-livelli ta 'TrkB fil-VTA (F = 5.7, P <0.04; Fig. 5C). Għalkemm ma kienx hemm effetti ewlenin fuq l-espressjoni tar-riċettur κ-opioid, kien hemm tendenza lejn espressjoni mnaqqsa fil-ġrieden ΔFosB (P = 0.08; Fig. 5D). L-espressjoni tar-riċettur tal-leptin ġiet determinata wkoll fil-VTA. Instab effett sinifikanti ta 'espożizzjoni għad-dieta (F = 6.1, P <0.03), b'HF inaqqas b'mod sinifikanti l-livelli tar-riċettur tal-leptin fil-VTA kemm fil-ġrieden osFosB kif ukoll fil-ġrieden ta' kontroll (Fig. 5E). Espressjoni tar-riċettur orexin 1 fil-VTA ġiet eżaminata wkoll. Kien hemm effett sinifikanti tad-dieta fuq l-espressjoni tar-riċettur orexin (F = 9.0, P <0.02), bil-ġrieden esposti għal HF li jesprimu livelli ogħla fil-VTA (Fig. 5F). Kien hemm ukoll tendenza għall-ġrieden osFosB biex jesprimu livelli ġenerali ogħla ta 'riċettur orexin 1 f'dan ir-reġjun tal-moħħ (P <0.05).
Espressjoni ta 'orexin fil-hypothalamus laterali
Aħna mkejla livelli ta 'orexin fl-ipotalamu laterali, l-oriġini tal-inervazzjoni orexinergic tal-VTA, permezz ta' ibridizzazzjoni in situ (Fig. 6A). Kien hemm interazzjoni sinifikanti bejn l-espressjoni ta 'osFosB u l-espożizzjoni għad-dieta fuq espressjoni ta' orexin (F = 9.1, P <0.01), b'HF iżidu b'mod sinifikanti l-livelli ta 'orexin fil-ġrieden ta' kontroll (P <0.05) u jonqsu l-espressjoni fil-ġrieden osFosB (Fig. 6B). Għalkemm ma kien hemm l-ebda differenza sinifikanti fl-espressjoni ta 'orexin fl-istat bażiku, wara 6 wks ta' HF, ġrieden ΔFosB esprimew livelli mnaqqsa b'mod sinifikanti ta 'orexin meta mqabbla mal-kontrolli (P <0.05).
Figura 6
Dieta ta 'xaħam għoli (HF) kellha effetti differenzjali fuq l-espressjoni ta' orexin fil-kontroll (Ctrl) u ΔFosB ġrieden li jesprimu żżejjed
BeAnaliżi havioral
Biex jiġu evalwati l-alterazzjonijiet fit-tqanqil u l-emozzjonalità minħabba bidla fid-dieta, il-ġrieden kienu esposti għat-test open-field 24 siegħa wara l-irtirar tad-dieta HF (10). Salib tal-linja totali, li ġew skorjati bħala miżura ta 'tqanqil, kienu affettwati b'mod sinifikanti mill-espressjoni ta' osFosB (F = 6.6, P <0.05) u dieta (F = 4.6, P <0.05; Fig. 7A). Ġrieden ΔFosB kienu aktar attivi fl-ambjent ġdid minn kontrolli, u ttestjar post hoc wera li ġrieden irtirati minn HF kienu ferm aktar attivi minn dawk esposti għal chow (P <0.05). Il-boli tal-ippurgar kienu magħduda bħala miżura ta 'mġieba li tixbah l-ansjetà (10). Kien hemm effett ewlieni ta 'espressjoni ta' osFosB (F = 10.2, P <0.01), b'ġrieden li jesprimu ż-żejjed ta 'OsFosB jipproduċu aktar boli tal-ippurgar fl-ambjent ġdid, partikolarment fil-gruppi tad-dar chow u tal-irtirar tal-HF (Fig. 7B). Ġrieden ΔFosB miżmuma fuq dieta HF ipproduċew inqas boli tal-ippurgar minn dawk miżmuma fuq chow u dawk irtirati 24 siegħa qabel it-test. Il-ġrieden tal-kontroll ma dehrux affettwati mid-dieta. Ma kien hemm l-ebda effetti sinifikanti ta 'l-espressjoni ta' osFosB jew dieta fuq il-ħin mgħoddi fiċ-ċentru tal-kamp miftuħ (kontroll chow = 14.5 ± 3.1 sek, kontroll HF = 18.0 ± 3.2 sek, kontroll W / D = 15.4 ± 1.9 sek, secFosB chow = 16.9 ± 2.4 sek, ΔFosB HF = 13.1 ± 3.9 sek, ΔFosB W / D = 19.8 ± 2.6 sek).
Figura 7
Ġrieden li jesprimu ΔFosB kienu aktar sensittivi għall-effetti ta ’l-irtirar ta’ dieta b'ħafna xaħam (HF)
Diskussjoni
Fit-trattament ta ’l-obeżità, hemm ħtieġa kritika għall-identifikazzjoni ta’ fatturi li jinfluwenzaw is-suxxettibilita ’għall-eċċessiv u ż-żieda fil-piż. Il-mogħdijiet tal-premjijiet tal-imħuħ għandhom rwol importanti fil-motivazzjoni għal u r-rispons għal ikel li jittiekel u bidliet fid-dieta (6, 10, 15, 16). Minħabba li sinjali oreksiġeniċi u anoreksiġeniċi jistgħu jinfluwenzaw direttament sinjali ta 'premju permezz ta' ċirkwit hypothalamus-VTA-NAc, l-eluċidazzjoni ta 'ġeni li jirrispondu għal dieti ta' togħma rikki fl-enerġija ġewwa ċentri ta 'premju jistgħu jipprovdu miri terapewtiċi ġodda fit-trattament ta' l-obeżità (17, 18). Għalhekk, eżaminajna indikaturi bijokimiċi u molekulari ta 'sinjali ta' premju u bilanċ ta 'enerġija tul iċ-ċirkwit hypothalamus-VTA-NAc bi tweġiba għal dieta HF f' mFosB-ġrieden li jesprimu żżejjed bħala mudell ta 'sensittività mtejba għal bidliet fil-premju (13, 19, 20) , u s-sensittività għall-imġiba wara l-irtirar tad-dieta. Aħna hypothesized li r-regolazzjoni ħażina bażika ta 'sinjalar ta' dopamine fil-ġrieden osFosB tkun normalizzata bl-effetti ta 'sodisfazzjon ta' dieta HF, li tinkludi l-intersezzjoni ta 'sinjali ta' bilanċ ta 'enerġija u s-sistema ta' dopamine.
Biex teżamina markaturi indikattivi ta 'regolazzjoni ħażina fis-sinjalar ta' dopamine fin-NAc, aħna eżaminajna l-livelli ta 'riċettur D1 u effectors downstream. Għalkemm ma kien hemm l-ebda differenza sinifikanti fl-irbit mar-riċettur D1, kien hemm xejra għall-espożizzjoni għall-HF li żżid l-erja ta ’rbit fil-ġrieden osFosB. Dan huwa interessanti peress li l-induzzjoni ta 'osFosB bi premjijiet tad-droga u naturali tidher li tippredomina fis-sottotip pożittiv għad-dynorphin ta' newroni mdawra medji li primarjament jesprimu riċetturi D1 (9, 21). Il-livelli tal-mira pCREB ta ’sinjalar ta’ dopamine downstream tnaqqsu b’mod sinifikanti fil-ġrieden osFosB, li jappoġġjaw l-attivazzjoni mnaqqsa tar-riċettur D1 f’dan ir-reġjun tal-moħħ (22, 23). Interessanti, sibna wkoll tnaqqis sinifikanti fil-livelli totali ta 'CREB fil-ġrieden osFosB, li jissuġġerixxu aktar kapaċità mnaqqsa għat-trasduzzjoni tas-sinjal dopamine li tista' tkun sekondarja għal rispons li jirriżulta minn tnaqqis fit-tul fil-pCREB (24). L-espressjoni BDNF hija rregolata minn pCREB, hija miżjuda bl-attivazzjoni ta ’D1, u hija medjatur importanti tan-newroplastiċità relatata mal-premju fin-NAc (25, 26). Għaldaqstant, sibna tnaqqis sinifikanti fil-proteina BDNF fin-NAc tal-ġrieden osFosB.
In-newroni kollha żgħar fin-NAc jesprimu DARPP-32 (27). Il-bosta effectors downstream tiegħu jagħmluh attur vitali fil-mogħdijiet ta 'premju (28), u ġie implikat fid-dipendenza fuq id-droga u f'disturbi oħra li jinvolvu s-sistema ta' dopamine inklużi disturbi affettivi u skizofrenija (27, 29). Aħna sibna tnaqqis bażiku profond fl-espressjoni DARPP-32 fin-NAc tal-ġrieden osFosB. L-espressjoni DARPP-32 hija rregolata minn BDNF, u għalhekk l-espressjoni mnaqqsa tista 'tkun direttament relatata mat-tnaqqis fil-livelli ta' BDNF misjuba fil-ġrieden osFosB (27, 29, 30). Anke bidliet moderati fl-istat ta 'fosforilazzjoni ta' DARPP-32 jistgħu jwasslu għal tibdiliet sostanzjali fis-sinjalar intraċellulari fl-NAc (27). Studji preċedenti ma rrapportaw l-ebda bidla fil-proteina DARPP-32 fil-ġrieden osFosB wara t-tneħħija ta ’12-wk minn doxycycline meta twettqet valutazzjoni striatali aktar wiesgħa (31), jissuġġerixxi li l-effetti ta ’ΔFosB fuq DARPP-32 jistgħu jkunu speċifiċi għall-ħin u għar-reġjun.
Aħna hypothesized li t-tnaqqis drammatiku fl-indiċijiet ta 'sinjalar ta' dopamine fin-NAc tal-ġrieden osFosB x'aktarx kien jinvolvi bidliet fin-newroni tal-projezzjoni tad-dopamine VTA, għalkemm ΔFosB mhux espressat żżejjed f'dawn in-newroni. Għalhekk, eżaminajna l-espressjoni tal-ġeni relatati mad-dopamine fil-VTA, inklużi t-tyrosine hydroxylase u t-trasportatur tad-dopamine. Livelli ta 'tyrosine hydroxylase u dopamine transportporter huma korrelatati b'mod pożittiv ma' dopamine output. Kien hemm tendenza għall-ġrieden osFosB li juru tnaqqis fit-tyrosine hydroxylase u tnaqqis sinifikanti fit-trasportatur tad-dopamine, skond ir-regolazzjoni ħażina tas-sinjalar ta ’dopamine fin-NAc. Peress li dan it-tnaqqis bażiku fil-ġeni relatati mad-dopamine fil-VTA tal-ġrieden osFosB preżumibbilment jirrifletti r-rispons mibdul min-NAc matul longFosB fit-tul ta ’espressjoni żejda, eżaminajna l-espressjoni tar-riċettur BDNF, TrkB, bħala mekkaniżmu possibbli ta ’rispons NAc għall-VTA (32). Simili għat-trasportatur ta 'tyrosine hydroxylase u dopamine, l-espressjoni ta' TrkB uriet ukoll tendenza li tkun imnaqqsa bażikament fil-ġrieden osFosB li ma laħqux sinifikat meta kkoreġuti għal tqabbil multiplu. Il-kumpless BDNF-TrkB jista 'jiġi ttrasportat retrograda u jaġixxi fi ħdan il-VTA biex jaffettwa l-espressjoni tal-ġene lokali u jippromwovi t-tkabbir u l-manutenzjoni taċ-ċelluli (33). Barra minn hekk, l-attivazzjoni BDNF ta 'TrkB presinaptiku fin-NAc tista' tistimula direttament in-newrotrażmissjoni ta 'dopamine (32), billi tappoġġja tnaqqis sottostanti ta' sinjalar ta 'dopamine f'dawn il-ġrieden.
L-attivazzjoni ta 'Dynorphin tar-riċetturi op-opioid tirregola sinjalar ta' dopamine u hija mekkaniżmu ieħor li bih l-NAc jipprovdi rispons lill-VTA (34). Sibna li l-espressjoni tar-riċettur κ-opioid fil-VTA wriet tendenza li għandha titnaqqas fil-ġrieden osFosB. Billi ntwera li xFosB espressjoni eċċessiva li tnaqqas l-espressjoni ta 'dynorphin fin-NAc (20), il-ġrieden osFosB x'aktarx ikollhom tnaqqis profond fil-VTA nett κ-attivazzjoni ta ’opjojdi. Għalkemm is-sinjalar tad-dynorphin normalment jeżerċita effett inibitorju fuq in-newroni dopamine [35], il-firien li juru amministrazzjoni mtejba lilhom infushom ta 'drogi ta' abbuż juru livelli mnaqqsa ta 'dynorphin fin-NAc, li jindikaw rwol għal sinjalizzazzjoni bażikament mnaqqsa ta' dynorphin fit-tisħiħ tas-sensittività għall-premju [36] , 37). Disregolazzjoni tas-sistema dynorphin - io-opioid kienet marbuta mal-akkwist u l-persistenza tal-abbuż tad-droga, li tappoġġja bilanċ kritiku ta 'sinjalazzjoni opioid fin-normalizzazzjoni tal-mogħdijiet ta' dopamine (38).
Abbażi tal-kapaċità ta 'sodisfazzjon ta' dieta HF densa għall-enerġija, aħna nibnunajajna li disregolazzjoni fid-dopamine u s-sinjalar ta 'premjijiet opjojdi fil-ġrieden osFosB kienet tippredisponi dawn il-ġrieden għal risponsi mtejba ta' premju għal dieta bħal din, u b'hekk in-normalizzazzjoni tas-sistema ta 'premju permezz tal-attivazzjoni tal-ipotalamus Ċirkwit -VTA-NAc. Matul l-espożizzjoni tad-dieta ta 'sitt ġimgħat, ma ġew osservati l-ebda differenzi fit-teħid tal-ikel bejn osFosB u ġrieden ta' kontroll, li jissuġġerixxi li l-bidliet misjuba fil-markaturi bijokimiċi u molekulari ta 'sinjali ta' premju fil-ġrieden osFosB ma kinux minħabba differenzi fil-kaloriji kkonsmati. Kif antiċipat, differenzi bażiċi misjuba f 'pCREB, CREB totali, BDNF, DARPP-32, u levels-opioid riċetturi livelli bejn ΔFosB u ġrieden ta' kontroll kienu attenwati, probabbli minħabba żieda fl-output ta 'dopamine fil-ġrieden osFosB fuq HF (29, 39-41) .
L-eżami kemm tat-tyrosine hydroxylase kif ukoll tat-trasportatur tad-dopamine fil-VTA wera risponsi sorprendenti opposti ta 'osFosB u ġrieden ta' kontroll wara HF. Ġrieden ta 'kontroll urew tnaqqis fl-espressjoni ta' tyrosine hydroxylase u dopamine transportporter, filwaqt li ΔFosB ġrieden wera żieda fl-espressjoni taż-żewġ ġeni relatati ma 'dopamine. Interessanti, l-espressjoni ta 'tyrosine hydroxylase tinbidel fil-VTA permezz ta' kokaina kronika jew amministrazzjoni ta 'methamphetamine (42-44), li tissuġġerixxi li l-ġrieden iceFosB jistgħu jsibu l-premju naturali tal-HF iktar saljenti mill-ġrieden ta' kontroll.
Sabiex jiġi eżaminat kif l-input ipotalamiku potenzjali għall-VTA jista 'jkun sinjali ta' trażmissjoni li jirriflettu l-bilanċ ta 'l-enerġija, l-espressjoni tar-riċettur tal-leptin u tar-riċettur ta' orexin-1 ġew eżaminati wkoll. Il-livelli taċ-ċirkolazzjoni tal-leptin jiżdiedu bl-HF, u l-leptin jista 'jaġixxi fil-VTA biex ibiddel is-sinjalar tad-dopamine (18, 45). L-espressjoni tar-riċettur tal-leptin VTA tnaqqset bl-istess mod bl-HF kemm f ΔFosB kif ukoll fil-ġrieden ta ’kontroll, skond żjieda fil-piż simili u teħid tad-dieta waqt li kienet fuq l-HF. Xaħam għoli żied ukoll l-espressjoni tar-riċettur ta 'l-orexin-1 fil-VTA kemm ta' osFosB kif ukoll ta 'ġrieden ta' kontroll. Orexin jattiva newroni ta ’dopamine fil-VTA, jippromwovi l-plastiċità tal-VTA, u jżid il-livelli ta’ dopamine fin-NAc (46-48). Dieta b'ħafna xaħam ġiet murija li żżid l-espressjoni ta 'orexin fil-ġrieden, skond l-osservazzjonijiet tagħna (49, 50). Għalhekk, żieda fl-espressjoni tar-riċettur ta 'orexin kif ukoll bidliet fis-sinjalar tal-leptin fil-VTA jistgħu jippromwovu premju tad-dieta kemm bothFosB kif ukoll ġrieden ta' kontroll, li jappoġġjaw dissoċjazzjoni bejn il-mogħdijiet li jibgħatu sinjali ta 'bilanċ ta' l-enerġija u dawk marbuta direttament biex jippremjaw.
Biex jiġu eżaminati l-effetti li pprovokaw l-istress tal-irtirar tal-premju, il-ġrieden ġew eżaminati f'test fil-beraħ 24 siegħa wara t-tneħħija tal-HF. Il-ġrieden FosB kienu iktar sensittivi għall-effetti akuti ta 'l-irtirar preferut tad-dieta, urew attività ta' tqanqil akbar u l-produzzjoni ta 'boli fecal fl-arena miftuħa ġdida mqabbla mal-gruppi l-oħra kollha ta' kontroll u dieta. Ġrieden iceFosB urew ukoll xejra ta ’mġiba interessanti f’dan it-test li tissuġġerixxi sensittività għall-premju u l-istress, bid-dieta HF inizjalment tnaqqas il-produzzjoni tal-boli fekali meta mqabbla ma’ chow, u l-irtirar mill-ġdid iżid din ir-rispons relatat ma ’l-ansjetà. Din iż-żieda osservata fl-attività fil-beraħ ma kkorrelatatx ma 'bidliet fl-espressjoni ta' orexin, u tissuġġerixxi relazzjoni ma 'tqanqal ikkawżat minn stress li mhux sempliċement effett ta' bidliet fis-sinjalazzjoni medjata bl-orexin. Kollox ma ’kollox, din id-data tappoġġja l-ipoteżi tagħna li l-ġrieden osFosB ikunu aktar sensittivi għall-effetti akuti ta’ l-irtirar tad-dieta ppreferut minħabba s-sensittività tagħhom għall-premju miżjuda.
Kif l-espressjoni żejda fuq żmien twil ta 'osFosB fin-NAc twassal għal tali bidliet fl-imġiba u tippremja s-sinjalar? Aħna pproponejna mudell ta 'skoperta ta' koinċidenti ta 'VTA fejn reazzjonijiet mibdula mill-NAc u sinjali ta' relays hypothalamus rigward stat ta 'premju biex jiddeterminaw ir-regolazzjoni tas-sistema ta' dopamine li tista 'tappoġġja rabta bejn disregolazzjoni tal-mogħdija tal-premju u predispożizzjoni għall-obeżità (Fig. 8). Matul l-esponiment għall-HF, inputs multipli li jirriflettu kemm il-bilanċ ta 'l-enerġija kif ukoll l-istat ta' premju jikkonverġu fuq il-VTA. Żidiet fis-sinjali ta 'leptin u orexin kif ukoll rispons mibdul min-NAc għall-ipotalamus laterali jistgħu jaffettwaw kif dawn is-sinjali orexigenic jirrispondu għal HF fil-ġrieden osFosB (17, 18, 45, 47, 51-53). Żidiet ikkawżati mid-dieta b'ħafna xaħam fil-BDNF jistgħu jipprovdu rispons ta 'premju lill-VTA, u jippromwovu aktar il-bidliet fl-espressjoni tal-ġene relatata mad-dopamine.
Figura 8
Dieta b'ħafna xaħam (HF) tinnormalizza sinjali ta 'premjijiet disregolati fil-ġrieden osFosB
Dawn ir-riżultati jiddelinjaw markaturi molekulari ta 'sensittività għall-premju u jindikaw li r-regolazzjoni ħażina fit-tul tas-sistema ta' dopamine tista 'tippredisponi individwu għall-vizzju u l-obeżità. Barra minn hekk, din id-dejta tipprovdi pass importanti lejn l-identifikazzjoni ta 'miri terapewtiċi potenzjali ġodda fit-trattament u l-prevenzjoni tal-obeżità u disturbi oħra li jistgħu jiffukaw fuq is-sistema ta' premjazzjoni. Fil-futur, se jkun importanti li jiġi investigat kif din is-sistema tirrispondi għat-tneħħija tad-dieta HF, kif ukoll biex tinvestiga kwalunkwe differenza sesswali fis-sensittività biex tippremja u esponiment għad-dieta b'ħafna xaħam.
Materjal Supplimentari
Supp. Metodi
Ikklikkja hawn biex tara. (61K, dok)
Ringrazzjamenti
L-awturi jixtiequ jirringrazzjaw lil Cathy Steffen għall-għajnuna fit-trobbija u t-trasferiment tal-annimali. Dan ix-xogħol ġie appoġġat minn għotja miċ-Ċentru tad-Dijabete ta ’l-Università ta’ Pennsylvania (DK019525) u minn għotjiet mill-Istitut Nazzjonali tas-Saħħa Mentali (R01 MH51399 u P50 MH66172) u l-Istitut Nazzjonali dwar l-Abbuż tad-Droga (R01 DA07359).
Noti f'qiegħ il-paġna
Żvelar Finanzjarju: L-awturi kollha jiddikjaraw li m'għandhom l-ebda interessi finanzjarji bijomediċi jew kunflitti ta ’interess potenzjali.
Referenzi
1. Wadden TA, Berkowitz RI, Womble LG, Sarwer DB, Phelan S, Cato RK, Hesson LA, Osei SY, Kaplan R, Stunkard AJ. Prova randomised tal-modifika tal-istil tal-ħajja u l-farmakoterapija għall-obeżità. N Engl J Med. 2005; 353 (20): 2111-20. [PubMed]
2. Blendy JA, Strasser A, Walters CL, Perkins KA, Patterson F, Berkowitz R, Lerman C. Premju mnaqqas tan-nikotina fl-obeżità: paragun bejn il-bnedmin u l-ġrieden. Psikofarmakoloġija (Berl) 2005
3. Franken IH, Muris P. Differenzi individwali fis-sensittività tal-premju huma relatati mal-effetti tax-xenqa tal-ikel u l-piż relattiv tal-ġisem f'nisa b'saħħithom. Tnaqqis fl-aptit. 2005; 45 (2): 198-201. [PubMed]
4. Kelley AE, Berridge KC. In-newroxjenza ta 'premjijiet naturali: relevanza għal drogi dipendenti. J Neurosci. 2002; 22 (9): 3306-11. [PubMed]
5. Cagniard B, Balsam PD, Brunner D, Zhuang X. Ġrieden b 'dopamine elevati kronikament juru motivazzjoni mtejba, iżda mhux ta' tagħlim, għal premju ta 'l-ikel. Neuropsychopharmacology. 2006; 31 (7): 1362-70. [PubMed]
6. Liang NC, Hajnal A, Norgren R. Sham li tmigħ iż-żejt tal-qamħ iżid accumbens dopamine fil-far. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2006; 291 (5): R1236 – 9. [PubMed]
7. Mendoza J, Angeles-Castellanos M, Escobar C. It-tisħiħ minn ikla togħma jinduċi attività antiċipattiva fl-ikel u espressjoni c-Fos f'żoni relatati mal-premju tal-moħħ. Newroxjenza. 2005; 133 (1): 293-303. [PubMed]
8. Schroeder BE, Binzak JM, Kelley AE. Profil komuni ta ’attivazzjoni kortikali ta’ qabel l-għajn wara espożizzjoni għal trufijiet kuntestwali assoċjati man-nikotina jew biċ-ċikkulata. Newroxjenza. 2001; 105 (3): 535-45. [PubMed]
9. Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: swiċċ molekulari sostnut għall-vizzju. Proc Natl Acad Sci US A. 2001; 98 (20): 11042 – 6. [Oġġett mingħajr PMC] [PubMed]
10. Teegarden SL, Bale TL. Tnaqqis fil-preferenza tad-dieta jipproduċi iktar emozzjonalità u riskju għal rikaduta tad-dieta. Psikjatrija Biol. 2007; 61 (9): 1021-9. [PubMed]
11. Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Nestler EJ, Taylor JR. dFosB fin-Nukleu Accumbens Jirregola Mġiba u Motivazzjoni Strumentali Rinfurzata mill-Ikel. Il-Ġurnal Uffiċjali tan-Newroxjenza. 2006; 26 (36): 9196-9204. [PubMed]
12. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, Picciotto MR, Duman RS, Nestler EJ. Annimali transġeniċi b’espressjoni tal-ġene immirata li tinduċi fil-moħħ. Mol Pharmacol. 1998; 54 (3): 495-503. [PubMed]
13. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen Ċ, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. L-espressjoni tal-fattur ta ’traskrizzjoni deltaFosB fil-moħħ tikkontrolla s-sensittività għall-kokaina. Natura. 1999; 401 (6750): 272-6. [PubMed]
14. Bale TL, Dorsa DM. Differenzi sesswali fi u effetti ta 'estroġen fuq l-espressjoni ta' riċettur ta 'oxytocin messenger ribonucleic acid fil-hypothalamus ventromedjali. Endokrinoloġija. 1995; 136 (1): 27-32. [PubMed]
15. Avena NM, Long KA, Hoebel BG. Firien li jiddependu fuq iz-zokkor juru reazzjoni mtejba għaz-zokkor wara l-astinenza: evidenza ta ’effett ta’ privazzjoni taz-zokkor. Physiol Behav. 2005; 84 (3): 359-62. [PubMed]
16. Se MJ, Franzblau EB, Kelley AE. Nucleus accumbens mu-opioids jirregolaw il-konsum ta 'dieta b'ħafna xaħam permezz ta' l-attivazzjoni ta 'netwerk distribwit tal-moħħ. J Neurosci. 2003; 23 (7): 2882-8. [PubMed]
17. Zheng H, Patterson LM, Berthoud HR. Is-sinjalar bl-orexin fiż-żona tegmentali ventrali huwa meħtieġ għal aptit ta 'xaħam għoli kkaġunat minn stimulazzjoni ta' opjojdi tan-nukleu accumbens. J Neurosci. 2007; 27 (41): 11075-82. [PubMed]
18. Hommel JD, Trinko R, Sears RM, Georgescu D, Liu ZW, Gao XB, Thurmon JJ, Marinelli M, DiLeone RJ. Is-sinjalar tar-riċettur tal-leptin fin-newroni tad-dopamine midbrain jirregola l-għalf. Neuron. 2006; 51 (6): 801-10. [PubMed]
19. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Espressjoni eċċessiva ta ’DeltaFosB speċifika għal tip ta’ ċellula striatali ttejjeb l-inċentiv għall-kokaina. J Neurosci. 2003; 23 (6): 2488-93. [PubMed]
20. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, MP Cassidy, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Rwol essenzjali għal DeltaFosB fin-nukleu jakkumula fl-azzjoni tal-morfina. Nat Neurosci. 2006; 9 (2): 205-11. [PubMed]
21. Lee KW, Kim Y, Kim AM, Helmin K, Nairn AC, formazzjoni tas-sinsla dendritika kkaġunata mill-kokaina fid-D1 u d-D2 li fihom ir-riċettur tad-dopamine newroni fin-nukleu accumbens. Proc Natl Acad Sci US A. 2006; 103 (9): 3399 – 404. [Oġġett mingħajr PMC] [PubMed]
22. Blendy JA, Maldonado R. Analiżi ġenetika tal-vizzju tad-droga: ir-rwol tal-proteina li tgħaqqad l-element ta ’rispons ta’ cAMP. J Mol Med. 1998; 76 (2): 104-10. [PubMed]
23. Nestler EJ. Mekkaniżmi molekulari tad-dipendenza fuq id-droga. Neurofarmoloġija. 2004; 47 1: 24 – 32. [PubMed]
24. Tanis KQ, Duman RS, Newton SS. Irbit CREB u Attività fil-Moħħ: Speċifiċità Reġjonali u Induzzjoni permezz ta 'Qbid Elettrokonvulżiv. Psikjatrija Biol. 2007
25. Kumar A, Choi KH, Renthal W, Tsankova NM, Theobald DE, Truong HT, Russo SJ, Laplant Q, Sasaki TS, Whistler KN, Neve RL, Self DW, Nestler EJ. Ir-rimudellar mill-ġdid tal-kromatina huwa mekkaniżmu ewlieni li fuqu hija bbażata l-plastiċità kkaġunata mill-kokaina fl-istriatum. Neuron. 2005; 48 (2): 303-14. [PubMed]
26. Graham DL, Edwards S, Bachtell RK, Dileone RJ, Rios M, Self DW. L-attività dinamika ta 'BDNF fin-nukleu takkumula ma' l-użu tal-kokaina żżid l-amministrazzjoni u r-rikaduta. Nat Neurosci. 2007; 10 (8): 1029-37. [PubMed]
27. Svenningsson P, Nairn AC, Greengard P. DARPP-32 jimmedja l-azzjonijiet ta ’drogi multipli ta’ abbuż. Aaps J. 2005; 7 (2): E353 – 60. [Oġġett mingħajr PMC] [PubMed]
28. Palmer AA, Verbitsky M, Suresh R, Kamens HM, Reed CL, Li N, Burkhart-Kasch S, McKinnon CS, Belknap JK, Gilliam TC, Phillips TJ. Differenzi fl-espressjoni tal-ġene fil-ġrieden magħżula b'mod diverġenti għas-sensittività tal-metamfetamia. Mamm Ġenoma. 2005; 16 (5): 291-305. [PubMed]
29. Bogush A, Pedrini S, Pelta-Heller J, Chan T, Yang Q, Mao Z, Sluzas E, Gieringer T, Ehrlich ME. AKT u CDK5 / p35 jimmedjaw l-induzzjoni ta 'fattur newrotrofiku derivat mill-moħħ ta' DARPP-32 f'newroni insiġin ta 'daqs medju in vitro. J Biol Chem. 2007; 282 (10): 7352-9. [PubMed]
30. Benavides DR, Bibb JA. Ir-rwol ta 'Cdk5 fl-abbuż tad-droga u l-plastik. Ann NY Acad Sci. 2004; 1025: 335 – 44. [PubMed]
31. Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. L-effetti ta 'espożizzjoni kronika għall-kokaina huma regolati mill-proteina newronali Cdk5. Natura. 2001; 410 (6826): 376-80. [PubMed]
32. Blochl A, Sirrenberg C. Neurotrophins jistimulaw ir-rilaxx ta ’dopamine minn newroni mesencephalic far minn riċetturi Trk u p75Lntr. J Biol Chem. 1996; 271 (35): 21100-7. [PubMed]
33. Berton O, McClung CA, Dileone RJ, Krishnan V, Renthal W, Russo SJ, Graham D, Tsankova NM, Bolanos CA, Rios M, Monteggia LM, Self DW, Nestler EJ. Ir-rwol essenzjali tal-BDNF fil-passaġġ mesolimbiku tad-dopamina fl-istress ta 'telfa soċjali. Xjenza. 2006; 311 (5762): 864-8. [PubMed]
34. Nestler EJ, Carlezon WA., Jr Iċ-ċirkwit tal-premju mesolimbiku tad-dopamina fid-depressjoni. Psikjatrija Biol. 2006; 59 (12): 1151 – 9. [PubMed]
35. Ford CP, Beckstead MJ, Williams JT. Kappa inibizzjoni opioid ta ’somatodendritic dopamine inhibitorory postsynaptic currents. Neurophysiol J. 2007; 97 (1): 883-91. [PubMed]
36. Nylander I, Vlaskovska M, Terenius L. Sistemi ta 'dynorphin tal-moħħ u enkephalin fil-firien Fischer u Lewis: effetti tat-tolleranza tal-morfina u l-irtirar tagħhom. Moħħ Riż. 1995; 683 (1): 25-35. [PubMed]
37. Nylander I, Hyytia P, Forsander O, Terenius L. Differenzi bejn firien li jippreferu l-alkoħol (AA) u dawk li jevitaw l-alkoħol (ANA) fis-sistemi ta 'prodynorphin u proenkephalin. Clin Alkoħol Exp Res. 1994; 18 (5): 1272-9. [PubMed]
38. Kreek MJ. Kokaina, dopamina u s-sistema endoġenika ta ’l-opjojdi. J Addict Dis. 1996; 15 (4): 73-96. [PubMed]
39. Carlezon WA, Jr, Duman RS, Nestler EJ. Il-ħafna uċuħ ta 'CREB. Xejriet Neurosci. 2005; 28 (8): 436-45. [PubMed]
40. Dudman JT, Eaton ME, Rajadhyaksha A, Macias W, Taher M, Barczak A, Kameyama K, Huganir R, Konradi C. Dopamine D1 riċetturi jimmedjaw il-fosforilazzjoni ta 'CREB permezz ta' fosforilazzjoni tar-riċettur NMDA f'Serxnumx-NRxnumx. J Neurochem. 897; 1 (2003): 87-4. [PubMed]
41. Self DW. Ir-regolazzjoni tal-imġieba tat-teħid tad-drogi u dawk li qed ifittxu permezz ta 'neuroadaptations fis-sistema mesolimbic dopamine. Neurofarmoloġija. 2004; 47 1: 242 – 55. [PubMed]
42. Beitner-Johnson D, Nestler EJ. Il-morfina u l-kokaina jeżerċitaw azzjonijiet kroniċi komuni fuq it-tyrosine hydroxylase f'reġjuni dopaminerġiċi li jippremjaw il-moħħ. J Neurochem. 1991; 57 (1): 344-7. [PubMed]
43. Lu L, Grimm JW, Shaham Y, Tama BT. Newrattattamenti molekulari fl-erbgħa akkumbensi u fiż-żona tegmentali ventrali matul l-ewwel ġranet 90 ta 'astinenza sfurzata mill-għoti ta' awto-kokaina fil-firien. J Neurochem. 2003; 85 (6): 1604-13. [PubMed]
44. Shepard JD, Chuang DT, Shaham Y, Morales M. L-effett ta 'l-għoti ta' awto-metamfetamia fuq il-livelli ta 'trasportatur ta' tyrosine hydroxylase u dopamine fil-mogħdijiet ta 'dopamine mesolimbiċi u nigrostriatali tal-far. Psikofarmakoloġija (Berl) 2006; 185 (4): 505 – 13. [PubMed]
45. Fulton S, Pissios P, Manchon RP, Stiles L, Frank L, Pothos EN, Maratos-Flier E, Flier JS. Regolazzjoni tal-leptin tal-passaġġ mesoaccumbens dopamine. Neuron. 2006; 51 (6): 811-22. [PubMed]
46. Narita M, Nagumo Y, Miyatake M, Ikegami D, Kurahashi K, Suzuki T. Implikazzjoni tal-proteina kinase C fl-elevazzjoni kkawżata mill-orexin tal-livelli ta 'dopamine ekstraċellulari u l-effett ta' sodisfazzjon tagħha. Eur J Neurosci. 2007; 25 (5): 1537-45. [PubMed]
47. Narita M, Nagumo Y, Hashimoto S, Khotib J, Miyatake M, Sakurai T, Yanagisawa M, Nakamachi T, Shioda S, Suzuki T. Involviment dirett ta 'sistemi orexinergic fl-attivazzjoni tal-passaġġ mesolimbiku tad-dopamina u mġiba relatata indotta mill-morfina. J Neurosci. 2006; 26 (2): 398-405. [PubMed]
48. Borgland SL, Taha SA, Sarti F, Fields HL, Bonci A. Orexin A fil-VTA huwa kritiku għall-induzzjoni tal-plastiċità sinaptika u s-sensitizzazzjoni fl-imġiba għall-kokaina. Neuron. 2006; 49 (4): 589-601. [PubMed]
49. Park ES, Yi SJ, Kim JS, Lee HS, Lee IS, Seong JK, Jin HK, Yoon YS. Bidliet fl-espressjoni ta 'orexin-A u neuropeptide Y fl-ipotalamus tal-firien mitmugħa b'dieta ta' sawm u b'ħafna xaħam. J Vet Sci. 2004; 5 (4): 295-302. [PubMed]
50. Wortley KE, Chang GQ, Davydova Z, Leibowitz SF. Peptidi li jirregolaw il-konsum tal-ikel: l-espressjoni tal-ġene ta 'orexin tiżdied waqt stati ta' ipertrigliċeridemija. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1454 – 65. [PubMed]
51. Zheng H, Corkern M, Stoyanova I, Patterson LM, Tian R, Berthoud HR. Peptidi li jirregolaw il-konsum tal-ikel: manipulazzjoni ta 'accumbens li tinduċi l-aptit jattiva n-newroni ta' orexin ipotalamiċi u jinibixxi n-newroni ta 'POMC. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2003; 284 (6): R1436 – 44. [PubMed]
52. Baldo BA, Gual-Bonilla L, Sijapati K, Daniel RA, Landry CF, Kelley AE. Attivazzjoni ta 'subpopolazzjoni ta' newroni ipotalamiċi li fihom orexin / hypocretin permezz ta 'inibizzjoni medjata minn riċettur ta' GABAA tan-nukleu accumbens qoxra, iżda mhux bl-espożizzjoni għal ambjent ġdid. Eur J Neurosci. 2004; 19 (2): 376-86. [PubMed]
53. Harris GC, Wimmer M, Aston-Jones G. Rwol għan-newroni ta ’l-orexin ipotalamiċi laterali fit-tfittxija ta’ kumpens. Natura. 2005; 437 (7058): 556-9. [PubMed]
;