အင်ဆူလင်အစာစားပြီးနောက်မွတ်မပြေနိုင်သောအချက်ပြဖို့ hypothalamus အတွက်အင်ဆူလင် receptors (InsRs) မြှင့်လုပ်ဆောင်။ သို့သော်နာတာရှည်ခြီးမွှောကျအင်ဆူလင်အဆင့်ကိုရရှိထားတဲ့အဝလွန်ခြင်း၏မြင့်တက်ဖြစ်ပွားမှု, အင်ဆူလင်ကိုလည်းလှုံ့ဆျောမှုနှင့်ဆုလာဘ်ထိန်းညှိကြောင်းဦးနှောက်စင်တာများအတွက်ပြုမူစေခြင်းငှါဆိုလို။ ကျနော်တို့အင်ဆူလင်အရေးယူအလားအလာ-မှီခို dopamine နျူကလီးယပ် accumbens အတွက် (DA) ဖြန့်ချိ (NAc) များကိုချဲ့ထွင်ခြင်းနှင့် InsRs ဖော်ပြကြောင်း striatal cholinergic interneurons ပါဝငျကွောငျးတခုသွယ်ဝိုက်ယန္တရားမှတဆင့်-putamen caudate နိုငျသောကဒီမှာသတင်းပို့ပါ။ ထို့အပြင်ကြွက်နှစ်ခုကွဲပြားခြားနားသောနာတာရှည်အစားအသောက်များတွင်ထိန်းသိမ်းရေး, အစားအစာကန့်သတ် (FR) နှင့်တစ်ဦး obesogenic (OB) အစားအစာ, အတိုက်အခံတိုးမြှင် FR အတွက်တုန့်ပြန်ပေမယ့် OB အတွက်တုန့်ပြန်၏ဆုံးရှုံးမှုနှင့်အတူ, အင်ဆူလင်မှ striatal DA လွှတ်ရာ sensitivity ကိုပြောင်းလဲပစ်။ အမူအကျင့်လေ့လာမှုများ NAc shell ကိုအတွက်နဂိုအတိုင်းအင်ဆူလင်အဆင့်ကိုတစ်တွဲဂလူးကို့စဖြေရှင်းချက်၏အရသာများအတွက် preference ကို၏ဝယ်ယူဘို့လိုအပ်သောဖြစ်ကြောင်းပြသပါ။ အတူတူအဲဒီဒေတာ striatal အင်ဆူလင်အချက်ပြအစားအစာရွေးချယ်မှုသြဇာလွှမ်းမိုးဖို့ DA လွှတ်ပေးရန်ပိုကောင်းစေပါတယ်ကြောင်းဆိုလို။

ဒါဟာကောင်းစွာအစာစားစဉ်နှင့်အပြီးပလာစမာအင်ဆူလင်တစ်ဦးစဉ်ဆက်မပြတ်တိုးနောက်ထပ်စားလျော့ကျကြောင်းဆားကစ် appetitive မှအနုတ်လက္ခဏာတုံ့ပြန်ချက်ကိုထောက်ပံ့ပေးသော hypothalamus အတွက်အင်ဆူလင် receptors (InsRs) မြှင့်လုပ်ဆောင်မြဲမြံစွာတည်နေသည်^{1, 2, 3}။ ဦးနှောက်အင်ဆူလင်ကိုအသွေး-ဦးနှောက်အတားအဆီးမှာပလာစမာကနေဦးနှောက်မှတက်ကြွစွာသယ်ယူပို့ဆောင်ရေးနှင့်အတူ, ပန်ကရိယβဆဲလ်ကနေအဓိကအားဆင်းသက်လာတာဖြစ်ပါတယ်^{4, 5, 6, 7, 8}အပြင်, အာရုံခံအင်ဆူလင်ပေါင်းစပ်ခြင်းနှင့်ဖြန့်ချိမှုအတွက်သက်သေအထောက်အထားရှိပါတယ်တိုးပွားလာနေသည်ပေမယ့်^{1, 9}။ အပို-hypothalamic InsRs ၏ function ကိုမဖြေရှင်းနိုင်ဖြစ်နေဆဲပေမယ့်အထူးသ, InsRs ၏စကားရပ်သည် hypothalamus မှချုပ်ထားမဟုတ်ပါ^{1, 2, 3}။ အင်ဆူလင်၏ပျံ့နှံ့နေတဲ့အဆင့်ဆင့်အစဉ်စွဲခြီးမွှောကျနေကြသည်နှင့်ဦးနှောက်အင်ဆူလင်သယ်ယူပို့ဆောင်ရေးနှင့်အဲဒီ receptor sensitivity ကိုယုတ်လျော့နေကြသည်ရသောအဝလွန်ခြင်းနှင့်အမျိုးအစား II ကိုဆီးချို၏မြင့်တက်ဖြစ်ပွားမှုပေးထား^{3, 8, 10, 11}ဒါကြောင့်လှုံ့ဆော်မှုနှင့်ဆုလာဘ်ထိန်းညှိကြောင်းဦးနှောက်ဒေသများတွင်အင်ဆူလင်၏ function ကိုနားလည်ရန်အရေးကြီးသည်။ အထူးသဖြင့်အကျိုးစီးပွားဦးနှောက်ဒေသများတွင်စားနပ်ရိက္ခာနှင့်မူးယစ်ဆေးဝါးများနှစ်ဦးစလုံး၏အကြိုးသက်ရောက်မှု mediates သောနျူကလီးယပ် accumbens (NAc) တို့ပါဝင်သည်^{12, 13}, ထိုအလေ့အထ-based အပြုအမူတွေအတွက်အခန်းကဏ္ဍရာ caudate-putamen (CPU) နှင့်တဏှာ¹³။ InsRs အမြင့်ဆုံးသိပ်သည်းဆဟာ NAc အတွက်ဖြစ်ပေါ်အတူဤဒေသများတလျှောက်လုံးထုတ်ဖော်ပြောဆိုနေကြပါတယ်^{3, 14}; InsRs ကိုလည်း ventral tegmental ဧရိယာ (VTA) တွင်သူများနှင့် substantia nigra ပိုဒျ compacta အ (SNc) အပါအဝင် midbrain အတွက် dopamine (DA) အာရုံခံဖော်ပြကြသည်¹⁵။ ဦးနှောက်အင်ဆူလင်အဆင့်ကိုပလာစမာအင်ဆူလင်ပြင်းအားနှင့်ခန္ဓာကိုယ် adiposity မှအချိုးကျများမှာ^{6, 7, 8}ယင်းယူဆချက်မှဦးဆောင်အင်ဆူလင်အစားအစာဆုလာဘ်ကိုသြဇာလွှမ်းမိုးရန်ဤဦးနှောက်ဒေသများတွင် InsRs မှာပြုမူအံ့သောငှါ^{3, 16, 17}.

striatal synaptosomes အတွက်ယခင်လေ့လာမှုများ, ဆိုတဲ့ Heterologous ဆဲလ်, ဦးနှောက်အချပ်များနှင့် Vivo အတွက် InsRs ၏အင်ဆူလင်တက်ကြွစွာ DA Transporter (DAT) က DA လွှာမှတစ်ခုတိုးစေပါတယ်ကြောင်းပြသကြ^{18, 19, 20, 21, 22, 23}။ ဤလုပ်ငန်းစဉ် PI3 kinase အချက်ပြလမ်းကြောင်းကပါဝင်ပတ်သက်^{19, 20}အဆိုပါပလာစမာအမြှေးပါးအတွင်း DAT သွင်း၌၎င်း, ရလဒ်များကို¹⁹။ DA လွှာမှနှင့် DAT မျက်နှာပြင်ဆီးချိုရောဂါ၏တိရိစ္ဆာန်မော်ဒယ်များတွင်တွေ့မြင်စကားရပ်နှင့်အစားအစာကန့်သတ်ပြီးနောက် (FR) လျော့နည်းသွားအတူအင်ဆူလင်အဆင့်ကိုပျံ့နှံ့နေတဲ့သည် dynamically striatal DAT လှုပျရှားမှု modulate^{20, 21}။ DAT လှုပျရှားမှုအတွက်အင်ဆူလင်-မှီခိုတိုး evoked extracellular DA အာရုံစူးစိုက်မှု ([DA] လျော့ချဖို့ပြသပြီ_o) ကို VTA အတွက်²³, DA လွှတ်ပေးရန်နှင့်လွှာမှအကြားချိန်ခွင်လျှာအတွက်ပြောင်းကုန်ပြီထင်ဟပ်။ မွတ်မပြေနိုင်သောအတွက်အင်ဆူလင်၏ထူထောင်အခန်းကဏ္ဍနှင့်ကိုက်ညီသည် VTA အတွက်အင်ဆူလင်၏စူးရှသော microinjection အစားအစာဆုလာဘ်လျော့နည်းကျဆင်းနိုင်ပါတယ်^{23, 24}, VTA နှင့် SNc DA အာရုံခံအတွက် InsRs ချို့တဲ့ကြွက်တိုးမြှင့်အစားအစာစားသုံးမှုကိုပြသခြင်းနှင့်အဝလွန်ဖြစ်လာသော်လည်း²⁵။ အင်ဆူလင် VTA DA အာရုံခံမှ excitatory input ကိုရေရှည်စိတ်ကျရောဂါသွေးဆောင်နိုငျသျောလညျး²⁴, မွတ်မပြေနိုင်သောအတွက်အခန်းကဏ္ဍနှင့်အတူနောက်တဖန်တသမတ်တည်း, အင်ဆူလင်ထိတွေ့မှုလည်းဖြစ်နိုင်သည် DA လွှတ်ပေးရန်နှင့် autoreceptor-mediated တားစီးလျော့ကျလာအသုံးပြုပုံ DA အာရုံခံဆဲလျပစ်ခတ်မှုနှုန်းကိုတိုးမြှင့်နိုင်ပါတယ်²⁵။ striatal DA လွှတ်ပေးရေးအပေါ်အင်ဆူလင်၏အသားတင်အကျိုးသက်ရောက်ထို့ကြောင့်ကြိုတင်ခန့်မှန်းရန်ခက်ခဲသည်။ အတွက် striatal DA လွှတ်ပေးရေးအပေါ်အင်ဆူလင်၏သြဇာလွှမ်းမိုးမှု၏လေ့လာမှုများအနေဖြင့်အမှန်စင်စစ်ရလဒ်များ ဟောင်း Vivo အချပ်¹⁹ နှင့်အစားအစာဆုလာဘ်အပေါ် NAc အတွက်အင်ဆူလင်၏ဒေသခံ microinjection ၏အကျိုးသက်ရောက်မှု²⁶ ဆနျ့ကငျြဖြစ်ပေါ်လာပါသည်။ ဒီဖြေရှင်းရန်ကျနော်တို့ NAc ၏နဂိုအတိုင်း microenvironment အတွက် axon DA လွှတ်ပေးရန်နှင့်လွှာမှအကဲဖြတ်နှင့် CPU ဟောင်း Vivo အစာရှောင်ခြင်း-scan ကသိသိ voltammetry (FCV) ကို အသုံးပြု. striatal ချပ်နှင့်ဆုလာဘ်အပြုအမူအပေါ် NAc အတွက်အင်ဆူလင်အချက်ပြ၏သက်ရောက်မှုစိတ်ပိုင်းဖြတ် Vivo အတွက်.

ကျွန်ုပ်တို့၏လေ့လာမှုများ NAc နှင့် CPU ထဲမှာအင်ဆူလင်၏အဓိကအကျိုးသက်ရောက် DA လွှာမှတစ်ဦးတွင်တစ်ပြိုင်တည်းတိုးနေသော်လည်း, DA လွှတ်ပေးရန်မြှင့်တင်ရန်ကြောင်းပြသပါ။ DA လွှတ်ပေးရန်၏ဤပြောင်းလဲနေသောစည်းမျဉ်းနီကိုတင်း acetylcholine (ACH) receptors (nAChRs) ၏ activation ကနေတဆင့်မြှင့်တင်ရန် DA လွှတ်ပေးရေးဦးတည်ရာ striatal cholinergic interneurons (ChIs) ၏စိတ်လှုပ်ရှားဖွယ်ရှိအင်ဆူလင်-မှီခိုတိုး, ပါဝငျသညျ။ ChIs ပေါ်နှင့် DA လွှတ်ပေးရေးအပေါ်အင်ဆူလင်၏သြဇာလွှမ်းမိုးမှု InsRs ကကမကထပြုခဲ့ခြင်းဖြစ်သည်။ အထူးသ, DA လွှတ်ပေးရေးအပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု FR ကြွက်များကနေအချပ်အတွက် amplified, ဒါပေမယ့်တစ်ခု obesogenic (OB) အစားအစာပေါ်ကြွက်များတွင်ကျိုးသကဲ့သို့ဖြစ်ကြပါစေဖြစ်ပါတယ်။ ဤရွေ့ကားဒေတာအတွက် DA လွှတ်ပေးရေး amplification ဖေါ်ပြခြင်း ဟောင်း Vivo အင်ဆူလင်အကျိုးကို signal ကိုအဖြစ်ပြုမူအံ့သောငှါ၎င်းခန့်မှန်းဖို့အင်ဆူလင်ခဲခွငျးအားဖွငျ့အချပ် Vivo အတွက်။ အမှန်စင်စစ်အပြိုင်အမူအကျင့်လေ့လာမှုများအရသာ-preference ကိုအေးစက်အတွက် NAc shell ကိုအတွက်အင်ဆူလင်အဘို့အခန်းကဏ္ဍဆန္ဒပြခဲ့ကြသည်။ အတူတကွဤတွေ့ရှိချက်အစားအစာရွေးချယ်မှုသြဇာလွှမ်းမိုးနိုင်မယ့်ဆုလာဘ် signal ကိုအဖြစ်အင်ဆူလင်အဘို့အသစ်တစ်ခုအခန်းကဏ္ဍညွှန်ပြ

InsRs တိုးမှာသရုပ်ဆောင်အင်ဆူလင် striatal DA လွှတ်ပေးရန် evoked

ဒေသအလိုက် evoked [DA] ၏ကနဦးစာမေးပွဲ_o အတွက် FCV နှင့်အတူစောင့်ကြည့် ဟောင်း Vivo အတူကြွက်ထံမှ striatal ချပ် ကြော်ငြာ libitum အစားအစာနှင့်ရေမှ (AL) access ကိုဇီဝကမ္မသက်ဆိုင်ရာပြင်းအား၏အကွာအဝေးကိုဖြတ်ပြီးအင်ဆူလင်၏စူးရှသောလျှောက်လွှာသောမျှော်လင့်မထားတဲ့တွေ့ရှိချက်ထင်ရှား^{1, 4} တိုးမြှင့် Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked [DA]_o (သင်္ဘောသဖန်း။ 1a-c ကို), အင်ဆူလင် EC နှင့်အတူ₅₀ 2-12 nm ၏တန်ဖိုးများ (အကျိုးသက်ရောက်မှုတစ်ဝက်လုပျသငျခဲ့ရာမှာအာရုံစူးစိုက်မှု) (သင်္ဘောသဖန်း။ 1b) ။ တိုးမြှင့် [DA] evoked_o ဒီအလုပျသမှုနှုန်း (တစ်သိသိသာသာတိုးခြင်းဖြင့်လိုက်ပါသွားခဲ့ပေးထား, အထူးသဖြင့်အံ့သြစရာဖြစ်ခဲ့သည်V_{max ကို}) တစ်ဦးချင်းစီမဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းအတွက် DAT-mediated လွှာမှများအတွက် (စားပွဲတင် 1), အရာ evoked [DA] တစ်ဦးယှဉ်ပြိုင်ကျဆင်းခြင်းဖို့ဦးဆောင်လမ်းပြလိမ့်မယ်_oယခင်ကအစီရင်ခံအဖြစ်^{22, 23}။ အဲဒီအစားကျွန်တော်တို့ဟာ [DA] evoked တွေ့ရှိခဲ့_o အကျယ်ချဲ့ 20 nm အင်ဆူလင်အားဖြင့် 55-30% amplified ခဲ့သည်; အကြီးမြတ်ဆုံးအချိုးကျသက်ရောက်မှုနှင့်အတူဒေသတွင်းအမြင့်ဆုံး InsR စကားရပ်နှင့်အတူ striatal မဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းသော NAc shell ကိုခဲ့သည်^{1, 14}။ တူညီသောအခြေအနေများအောက်တွင် 30 nm အင်ဆူလင်နှင့်ထိတွေ့ချပ် (striatal DA အကြောင်းအရာမပြောင်းလဲမှုကိုပြသနောက်ဆက်တွဲပုံ။ 1a), ကြောင်းအင်ဆူလင်ခဲ့ရသည်မဟုတ်ဘဲရိုးရိုး DA ပေါင်းစပ် upregulating ထက်ပြောင်းလဲနေသောလွှတ်ပေးရန်စည်းမျဉ်း, ပွောငျးလဲ။ အထူးသ, evoked [DA] အပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု_o supraphysiological ပြင်းအား≥100 nm (အနည်းဆုံးဆုံးရှုံးခဲ့ရခဲ့သည်သင်္ဘောသဖန်း။ 1b) ။ ဒီအပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုအဖြစ်ဖြန့်ချိကျော်တက်တိုးလာ DAT လှုပျရှားမှု၏ရလဒ်မဟုတ်ခဲ့ V_{max ကို} လည်း (ဤပြင်းအားမှာရှုံးနိမ့်ခဲ့သည်စားပွဲတင် 1) ။ ယေဘုယျအားဤဒေတာသောနဂိုအတိုင်း striatal microenvironment, evoked [DA] အပေါ်အင်ဆူလင်၏မြင်သာထင်သာအကျိုးသက်ရောက်မှုအတွက်ပြသ_o DA လွှာမှတစ်ဦးတွင်တစ်ပြိုင်တည်းတိုးနေသော်လည်း, လွှတ်ပေးရန်တိုးမြှင့်ဖို့ဖြစ်ပါတယ်။

  

  

(a) ပျမ်းမျှ Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked [DA]_o ; NAc shell ကို, 30 nm များအတွက်ရုပ်ပြ NAc core နဲ့ CPU မီနှင့်အပြီးအင်ဆူလင် (Ins) တွင် အမှားဘား (ချန်လှပ်, ဒါပေမယ့်ကြည့်ရှုb); မြှားလှုံ့ဆော်မှုများ၏အချိန်ဖော်ပြသည်။ အင်ဆူလင်တိုးမွှငျ့ [DA] evoked_o *** (အခွံထဲမှာ (55 ± 10% အားဖြင့်), core ကို (37 ± 5% အားဖြင့်) နှင့် CPU (20 ± 4% ဖြင့်ဖြစ်စေ)P<0.001) ။ (bအင်ဆူလင်၏) Effect (shell ကိုတစ်ဦးဇီဝကမ္မအကွာအဝေး (1-30 nm) ကိုဖြတ်ပြီးအာရုံစူးစိုက်မှုမှီခိုခဲ့n= 22-24, F_5,133= 14.471, P<0.001), core ကို (n= 36-76, F_5,308= 16.318, P<0.001) နှင့် CPu ကို (n= 30-62, F_5,253= 13.763, P<0.001), ဒါပေမယ့်≥100 nm မှာဆုံးရှုံးခဲ့ရသည်။ (cအထွတ်အထိပ်-evoked ၏) ကိုယ်စားလှယ်အသံသွင်း [DA]_o မူးယစ်ဆေးလျှောက်လွှာ (Con) ၏မရှိခြင်းအတွက် NAc core ကိုအတွက်တစ်ခုတည်း site ကိုမှာအချိန်နှိုင်းယှဉ်, အင်ဆူလင်၏လျှောက်လွှာစဉ်အတွင်း (30 nm) သို့မဟုတ်အင်ဆူလင်တစ် InsR inhibitor HNMPA (5 μM) ၏ရှေ့တော်၌လျှောက်ထားသောအခါ။ (d) ပျမ်းမျှအမြင့်ဆုံး-evoked [DA]_o HNMPA, InsR ရန် S30 (961 μM) နှင့် PI1K inhibitor LY3 (294002 μM) က, ဒါပေမယ့်မရ IGF-1R inhibitor ကို PPP (1 μM) ကအင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု (1 nm) ၏ကာကွယ်တားဆီးရေးဖေါ်ပြခြင်းဒေတာ (n= 29-76; P> 0.9 တစ် ဦး တည်းအင်ဆူလင်နှိုင်းယှဉ်) ။ အဘို့ သင်္ဘောသဖန်း။ 1a-ဃ, n= အသီးအသီးမူးယစ်ဆေးသို့မဟုတ်အင်ဆူလင်အာရုံစူးစိုက်မှုအဘို့အ 3-6 ကြွက်ထံမှမဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းနှုန်းက်ဘ်ဆိုက်များအရေအတွက်; တလမ်း ANOVA, Tukey ရိုးသားအရေးပါမှုကိုစမ်းသပ်မှု (HSD) ။ မြင် နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 1b, c ကို NAc shell ကိုနှင့် CPU ဒေတာအတွက်။

• အပြည့်အဝအရွယ်အစားပုံရိပ် (98 KB)

 

 

အင်ဆူလင်ကိုလည်း 1 nm (ref ကျော်လွန်ပြင်းအားမှာဆိုသော်ငြားအင်ဆူလင်ကဲ့သို့သောစီးပွားရေးတိုးတက်မှုအချက် 1 receptors (IGF-100Rs) မှာလုပျဆောငျနိုငျသောကွောငျ့ဖွစျသညျ။ 1), ကျွန်တော် evoked [DA] အပေါ်အင်ဆူလင်၏တိုးမြှင့်အကျိုးသက်ရောက်မှုအတည်ပြုပေးဖို့ကြိုးစားခဲ့_o InsR မှီခိုခဲ့သည်။ အကျိုးသက်ရောက်မှု IGF-2Rs, picropodophyllin ၏ inhibitor တစ်ခု intracellular InsR inhibitor, hydroxy-961-naphthalenylmethylphosphonic အက်ဆစ် (HNMPA) က, နှင့်တစ်ဦး InsR ရန်အသုံးပြုပုံ S1, ဒါပေမယ့်မရွေးချယ်သဖြင့်တားဆီးခဲ့သည်အဖြစ်ဤကိစ္စတွင်ဖြစ်သက်သေပြ²⁴ (PPP; သင်္ဘောသဖန်း။ 1c, ဃ နှင့် နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 1b, c ကို) ။ ကျနော်တို့ထို့နောက် DAT ၏အင်ဆူလင်-မှီခိုစည်းမျဉ်းများအတွက်တာဝန်ရှိအချက်ပြလမ်းကြောင်းစတင်ရာ PI3 kinase များ၏ပါဝင်ပတ်သက်မှု, လေ့လာ¹⁹။ 1 μMတစ်အာရုံစူးစိုက်မှုမှာတစ်ယောက်တည်း P13K inhibitor LY249002 အထွတ်အထိပ်-evoked [DA] မသက်ရောက်ခဲ့_o or V_{max ကို} (nမူးယစ်ဆေးနှုန်း = 29-76 က်ဘ်ဆိုက်များ (NAc core ကို), P> 0.05, ကှဲလှဲ၏တလမ်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာ (ANOVA); အချက်အလက်များပြထားခြင်းမရှိသေးသော်လည်းအင်ဆူလင်၏သက်ရောက်မှုကိုတားဆီးနိုင်ခဲ့သည် [DA]_o အားလုံး striatal ငျဒသေ (ထဲမှာသင်္ဘောသဖန်း။ 1d နှင့် နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 1b, c ကို).

DA axon နှင့် ChIs အပေါ် InsRs ၏ Localization

အတွင်းကြည့်ရှုလေ့လာကြသည်တိုး V_{max ကို} အမျိုးမျိုးသော striatal ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှုအတွက်ယခင်ရလဒ်များကလုပ်ပေးအဖြစ်အင်ဆူလင်၏ဇီဝကမ္မအဆင့်ဆင့်နှင့်အတူ DA လွှာမှ, DA axon အပေါ် InsRs ၏ရှေ့မှောက်တွင်ဆိုလိုများအတွက်^{18, 19, 20, 21, 22}။ midbrain DA အာရုံခံအပေါ် InsRs ၏အလုပ်လုပ်တဲ့စကားရပ်သရုပ်ပြခဲ့ပြီးဖြစ်သော်လည်း^{15, 23, 24, 25}, striatal DA axon အပေါ် InsR စကားရပ်အစီရင်ခံထားမထားပါဘူး။ ကျနော်တို့ကဒီကို အသုံးပြု. immunohistochemistry အမှာစကားပြောကြားသည်။ တစ်ဦး DA-synthesizing အင်ဇိုင်းများအတွက် immunoreactivity ခြင်းဖြင့်ဖော်ထုတ်ခဲ့ကြရာ DA axon အပေါ် InsR မူပြောင်းခြင်း၏ striatum ကန့်သတ်အရေအတွက်အကဲဖြတ်, tyrosine hydroxylase (TH) လျှောက်လုံးသိပ်သည်း InsR immunoreactivity ။ ထိုကြောင့်ငါတို့သည်ယခင်ကအစီရင်ခံ protocol ကိုမွေးစား²⁷ပုံမှန်ပုံရိပ်ကိုအမြင်နှင့်သာ 90 °အားဖြင့်လှည့်ခဲ့ InsR image ကိုအပြီးနောက်တဖန်ရေတွက် TH + profile များကိုအတူခေကြောင်း InsR puncta ရေတွက်ပါဝင်ပတ်သက်ရသော။ InsR နှင့် TH + profile များကိုများ၏သရုပ်ထပ်တူ nonspecific ဖြစ်လျှင်, ဒီလုပ်ထုံးလုပ်နည်းပုံမှန်သို့မဟုတ် 90 အဆင့်ထဲက°ရှိမရှိကစာရင်းအင်းအလားတူရေတွက်ပေးသင့်ပါတယ်။ သို့သော်ဤခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာ 14 ၏ TH + profile များကိုအတူ InsR puncta ၏ထပ်တစ်ဦးကျဆင်းခြင်းပြသ (9% ±n= 42 လယ်ကွင်း, P<0.01, Two- အမြီးတွဲ t-test; DA axon အပေါ် InsR ရှိနေခြင်းအတည်ပြုမှမပြဒေတာ) ။ ပိုများသော intriguingly သို့သော် striatum ၏ InsR immunolabelling choline acetyltransferase (Chat) အတွက် Co-immunolabelling အားဖြင့် striatal ChIs အဖြစ်ဖော်ထုတ်ခဲ့ကြီးမားသောဆဲလ်အသေကောင်အပေါ်ကွဲပြား InsR စကားရပ်, ACH ပေါင်းစပ်မှုအတွက်လိုအပ်သောအဓိကအင်ဇိုင်းဖော်ပြခဲ့တယ်။ electrophysiological စံအသုံးပြုခြင်း²⁸ ပဏာမလုံးဆဲလ်-မှတ်တမ်းတင်လေ့လာမှုများအတွက် ChIs ကိုသိရှိနိုင်ဖို့, အများအပြားတွင် neuron biocytin နှင့်ပြည့်စုံ, ပြီးတော့ immunohistochemistry များအတွက်လုပ်ငန်းများ၌ကြသည် ဟူ. ၎င်း, ဤအရာအားလုံး (4 / 4) (InsR နှင့် Chat နှစ်ဦးစလုံးအတှကျအ immunopositive ခဲ့ကြသည်သင်္ဘောသဖန်း။ 2a) ။ ၏ NAc အတွက် InsR နှင့် Chat Co-မူပြောင်းခြင်း၏နောက်ဆက်တွဲအကဲဖြတ်နီးပါးအားလုံး Chat + အာရုံခံ InsR (96% ထုတ်ဖော်ပြောဆိုကြောင်းအတည်ပြုခဲ့သည် nနှစ်ခုကြွက်များကနေလေးကဏ္ဍများအတွက် = 27 / 28 အာရုံခံ) ။

  

  

(a) Chi Chat နှင့် InsR 4 / 4 biocytin-ဖြည့် ChIs ၏ (ကိုယ်စားလှယ်) အတွက် immunolabelled ထို့နောက် biocytin နှင့်ပြည့်စုံ; ပေါင်းစပ် image ကို Co-မူပြောင်းခြင်းပြသ; စကေးဘား, 10 μm။ (b-e3, 200 နှင့် 300 PA;; လက်ရှိပဲမျိုးစုံ (400-s ကိုကြာချိန် depolarizing တစ်စီးရီးမှ striatal ChIs ၏) တုံ့ပြန်မှု 120-s ကိုကြားကာလ) အင်ဆူလင်မီနှင့်အပြီး (30 nm) ။ (b)) (အထက် a chi အတွက်အကြိမ်ရေလိုက်လျောညီထွေ (AP) ကိုအင်ဆူလင် (အောက်ပိုင်း) တွင်လက်ရှိသွေးခုန်နှုန်းတစ်လျှောက်လုံး အကယ်. spiking သော်လည်းလက်ရှိဆေးထိုးစဉ်ကဘယ်တုန်းကမှစွန်အရေးယူအလားအလာဆုံးရှုံးမှုတွင်တွေ့မြင်ဖြစ်ပါတယ် Spike; မှာပြသပြီးပြည့်စုံသောဒေတာအစု d။ (cအဆိုပါ Chi အတွက်တစ်ဦးချင်းစီကလက်ရှိခြေလှမ်းနှင့်အတူအေပီနံပါတျထဲမှာအင်ဆူလင်ကုထုံးတွေတိုး၏) ကိုယ်စားလှယ်အချိန်သင်တန်း b။ (dအင်ဆူလင်ထိတွေ့မှု၏အထွတ်အထိပ်အကျိုးသက်ရောက်မှုမတိုင်မီမှာကယ်နှုတ်တော်မူ၏လက်ရှိပဲမျိုးစုံစဉ်အတွင်းအေပီသတင်းဌာနအရေအတွက်) အနှစ်ချုပ် (n= 21 (စိတ်ကြွဆေး, 7 အာရုံခံ, 5 ကြွက်များ) တွဲeထိန်းချုပ်မှုအခြေအနေများ (ကွန်းအောက်မှာအင်ဆူလင် (+ Ins) ၏အကျိုးသက်ရောက်မှုဖေါ်ပြခြင်း) ပေမဲ့တုံ့ပြန်မှု; n= 21 စိတ်ကြွဆေး, 7 အာရုံခံ, *** တွဲP<0.001, Two- အမြီးတွဲ t-test), HNMPA (5 μM၏ရှေ့တော်၌) (n= 12 စိတ်ကြွဆေး, 4 အာရုံခံ, 4 ကြွက်တွဲ, P>Two-Tails တွဲ 0.05, t-test), နှင့်ကို PPP (1 μM၏ရှေ့တော်၌) (n= 18 တွဲစိတ်ကြွဆေး, 6 အာရုံခံ, 6 ကြွက်, **P<0.01, Wilcoxon) လက်မှတ်ရေးထိုးခဲ့ရာထူးစမ်းသပ်တွဲလိုက်ဖက်။ (f) ပျမ်းမျှ Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked [DA]_o (30% အထွတ်အထိပ်ထိန်းချုပ်ဖို့ဒါမှမဟုတ်DHβE ​​(5 μM) ပုံမှန်; NAc core ကိုအတွက် mecamylamine အတွက်မီနှင့်အပြီးအင်ဆူလင် (1 nm) (100 μM MEC)n= 20-40 ကြွက်ထံမှအခွအေနေနှုန်းမဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းနှုန်း 3-4 က်ဘ်ဆိုက်များ, P> 0.05, နှိုင်းယှဉ်ထိန်းချုပ်မှုနှိုင်းယှဉ်, အတူညီ t-test) ။ (g) ပျမ်းမျှ Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked [DA]_o heterozygous ထိန်းချုပ်မှုကနေ forebrain ချပ် (Het) နှင့် chat KO ကြွက် 30% အထွတ်အထိပ်ထိန်းချုပ်နိုင်ဖို့ပုံမှန်အင်ဆူလင် (100 nm), မီနှင့်အပြီး။ အင်ဆူလင်တိုးမွှငျ့ [DA] evoked_o NAc shell ကို, 190 ± 23 NAc core ကိုအတွက်% နှင့် 140 ± 8 CPU ထဲမှာ% (ထဲမှာ 137 ± 12% အားဖြင့် heterozygous ကြွက်တွေမှာngenotype နှုန်း 15-25 ကြွက်တွေကနေမဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းနှုန်း = 3-4 က်ဘ်ဆိုက်များ, **P<0.01, ***P<0.001 နှိုင်းယှဉ်မရတဲ့ထိန်းချုပ်မှုနှိုင်းယှဉ် t-test), ဒါပေမယ့် evoked [DA] မသက်ရောက်ခဲ့_o မဆို striatal မဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းအတွက် chat KO ကြွက် (P> 0.1) ။

• အပြည့်အဝအရွယ်အစားပုံရိပ် (167 KB)

 

 

အင်ဆူလင် Chi စိတ်လှုပ်ရှားတိုးပွါး

striatal ChIs အပေါ် InsRs ၏လုပ်ဆောင်နိုင်စွမ်းကိုစမ်းသပ်ဖို့ကျနော်တို့တပြင်လုံးကို-ဆဲလ်လက်ရှိ-ညှပ်မှတ်တမ်းတင်သုံးပြီး Chi စိတ်လှုပ်ရှားအပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုဆန်းစစ်ခဲ့သည်။ Chi စိတ်လှုပ်ရှားယုံကြည်စိတ်ချရသောဆူးကြိမ်နှုန်းလိုက်လျောညီထွေပြကြောင်းအရေးယူအလားအလာ (တစ်ဦးရထားထုတ်ယူနိုင်ရန် 3-s ကို depolarizing လက်ရှိပဲမျိုးစုံ၏စီးရီးသုံးပြီးအကဲဖြတ်ခဲ့သည်သင်္ဘောသဖန်း။ 2b), မကြာခဏလက်ရှိသွေးခုန်နှုန်း၏အဆုံးအားဖြင့် Spike ဆုံးရှုံးမှုနှင့်အတူ။ သိသိသာသာ, အင်ဆူလင် (30 nm) (အချိန်နှင့်အမျှအရေးယူအလားအလာအရေအတွက်တစ်တိုးတက်သောတိုးမှုမြင့်တက်အကြိမ်ရေလိုက်လျောညီထွေ attenuatedသင်္ဘောသဖန်း။ 2c), (အများဆုံးတိုးနှင့်အတူသင်္ဘောသဖန်း။ 2d, အီး) ပုံမှန်အား 20 နှင့်အင်ဆူလင်၏ထိတွေ့ခြင်း 50 မိတို့အကြားမြင်ကြ။ အင်ဆူလင်၏မရှိခြင်းများတွင်ထိန်းချုပ်မှု ChIs (evoked အရေးယူအလားအလာများ၏အရေအတွက်မျှပြောင်းလဲမှုပြသP> 0.05, Two- အမြီးတွဲ t-test; ဒေတာမှမပြ); တစ်ချိန်တည်းကြားကာလကျော်စောင့်ကြည့်ထိန်းချုပ်အာရုံခံတွေနဲ့နှိုင်းယှဉ်တဲ့အခါမှာ, အင်ဆူလင်နှင့်ထိတွေ့အာရုံခံ evoked အရေးယူအလားအလာများ၏အရေအတွက်အတွက်သိသိသာသာ သာ. ကြီးမြတ်ပြောင်းလဲမှု (ထိန်းချုပ်မှုပြသ nလေးအာရုံခံ, အင်ဆူလင်များထံမှ = 12 လှုံ့ဆော်မှုအားလုံး n= 21 ခုနစ်ခုတွင် neuron ကနေအားလုံးအတွက် stimulus, F_1,25= 5.63, P<0.05, ရောထွေး - အစီအမံနှစ်လမ်း ANOVA; ဒေတာကိုမပြပါ။ အင်ဆူလင်၏လုပ်ဆောင်မှုအလားအလာအရေအတွက်ကိုတိုးမြှင့်ခြင်းအပေါ်အကျိုးသက်ရောက်မှုကို HNMPA မှတားဆီးနိုင်သော်လည်း IGF-1R ရွေးချယ်တားစီးနိုင်သည့် PPP ကတားဆီးခဲ့သည်။သင်္ဘောသဖန်း။ 2e), အင်ဆူလင်အားဖြင့် Chi စိတ်လှုပ်ရှားတိုးပွားလာကြောင်းဆန္ဒပြပွဲ InsR ကမကထပြုခဲ့ခဲ့သည်။

evoked [DA] ၏အင်ဆူလင်တိုးမြှင့်_o nAChRs နှင့် ACH လိုအပ်ပါတယ်

ယခင်လေ့လာမှုများ ChIs နှင့် ACH အစွမ်းထက် DA axon အပေါ် nAChRs မှတဆင့် striatal DA လွှတ်ပေးရန်ထိန်းညှိကြောင်းပြသကြ^{29, 30, 31, 32, 33, 34}။ အပေါများ InsR ChIs အပေါ်စကားရပ်နှင့်စူးရှသောအင်ဆူလင်ထိတွေ့မှုနှင့်အတူမြင်ကြ Chi စိတ်လှုပ်ရှားအတွက်တိုးမြှင့်သည်ဤအာရုံခံတိုးမြှင် DA လွှတ်ပေးရန်ဖို့ဦးဆောင်လမ်းပြနိုင်အင်ဆူလင်အဘို့ဝတ္ထုပစ်မှတ်ဖြစ်အံ့သောငှါအကြံပြုသည်။ ဒီစမ်းသပ်ဖို့ကျနော်တို့ mecamylamine ၏ရှေ့တော်၌ non-ရွေးချယ် nAChR ရန်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုဆန်းစစ်, ဒါမှမဟုတ် dihydro-β-erythroidine (DHβE), ပေါ်ကြွယ်ဝပြည့်စုံသည်ဟုβ2 subunit ပါဝင်သော (β2 *) nAChRs များအတွက်ရွေးချယ်ရန် DA axon³⁵။ Evoked [DA]_o အလွယ်တကူနှစ်ဦးစလုံးမူးယစ်ဆေးဝါးများ Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked [DA] ၏လွှဲခွင်လျော့နည်းသွားသော်လည်း, ထိုရန်၏ရှေ့တော်၌ရှာဖွေတွေ့ရှိခဲ့သည်_o (ဥပမာ, NAc core ကိုအတွက် 13-26% အားဖြင့်), ယခင်ကအစီရင်ခံအဖြစ်^{29, 30, 31, 32}။ ACH နှင့် nAChRs, evoked [DA] အပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုများအတွက်အခန်းကဏ္ဍ၏ထောက်ခံမှုအတွက်_o (mecamylamine သို့မဟုတ်DHβEဖြစ်စေခြင်းဖြင့်တားဆီးခဲ့သည်သင်္ဘောသဖန်း။ 2f) ။ အင်ဆူလင်-တိုးမြှင် DA လွှတ်ပေးရန်အတွက် striatal ACH အချက်ပြ၏ပါဝင်ပတ်သက်မှုကိုအတည်ပြုပေးရန်, ကျနော်တို့အတွက်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုဆန်းစစ် ဟောင်း Vivo စကားရပ် Chat သောကြွက်ထံမှ striatal ချပ်ဗီဇ forebrain အဆောက်အဦများ (forebrain အတွက် ablated ခဲ့သည် chat striatum အပါအဝင် KO ကြွက်),³²။ ChIs သည်ဤကြွက်များတွင်နဂိုအတိုင်းဖြစ်သော်လည်း ACH ပေါင်းစပ်လျော့နည်းသွားစေပါတယ်သောဖျက်သိမ်းဖြစ်ပါတယ်, ဒါပေမယ့်နေဆဲအလွယ်တကူရှာဖွေ ထောက်လှမ်း. Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked [DA]_oယခင်ကဖော်ပြထားသကဲ့သို့³²။ ထိန်းချုပ်မှု heterozygous littermates များတွင်အင်ဆူလင် (30 nm) evoked [DA] တိုးမြှင့်_o NAc shell ကိုနှင့်အဓိကနှင့် CPU အတွက် 37-90% အားဖြင့် (သင်္ဘောသဖန်း။ 2g), (ဥပမာကြွက် striatum များ၌တွေ့မြင် amplification ကျော်လွန်, သဖန်းသီး။ 1) ။ သို့သော် evoked [DA] အပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု_o forebrain အတွက် striatal ရှုပ်ထွေးသောတစ်လျှောက်လုံးပျက်ကွက်ခဲ့ chat KO ကြွက်, DA လွှတ်ပေးရန်၏အင်ဆူလင်-mediated တိုးမြှင့် striatal ACH လိုအပ်သော်လည်းထိုကဲ့သို့သောအချိုမှုအဖြစ် ChIs မှမဟုတ်ပူးတွဲဖြန့်ချိက transmitter, ထိုသရုပ်ပြ³⁶.

evoked [DA] အပေါ်အင်ဆူလင်၏သြဇာလွှမ်းမိုးမှု_o မှီခိုစားသောက်သောအစားအစာဖြစ်ပါသည်

plasma နှင့်ဦးနှောက်အင်ဆူလင်ပြင်းအားခန္ဓာကိုယ် adiposity မှအချိုးကျများမှာ^{6, 7, 8}နှင့်အင်ဆူလင်မှဦးနှောက် sensitivity ကိုအတွက်အစားထိုးအပြောင်းအလဲများကိုဖို့ဦးဆောင်လမ်းပြနိုင်။ ထိုကြောင့်ငါတို့သည် AL ကိုထိန်းချုပ်ထားနှိုင်းယှဉ်နာတာရှည် FR သို့မဟုတ် OB အစားအစာတစ်ခုခုကိုအပေါ်ထိန်းသိမ်းထားကြွက်များကနေ striatal ချပ်သုံးပြီးအစားအသောက်များတွင် DA လွှတ်ပေးရန်မြှင့်တင်ရန်အင်ဆူလင်၏စွမ်းရည်ကိုသြဇာလွှမ်းမိုးသောအယူအဆစမ်းသပ်စစ်ဆေးပါတယ်။ မျှော်လင့်ထားသည့်အတိုင်းပလာစမာအင်ဆူလင်အဆင့်ကို (AL သို့မဟုတ် OB ကြွက်များထက် FR အတွက်အနိမ့်အင်ဆူလင်နှင့်အတူခန္ဓာကိုယ်အလေးချိန်ဆက်နွယ်နေကြောင်းခဲ့ကြသည်သင်္ဘောသဖန်း။ 3a နှင့် စားပွဲတင် 2) ။ အင်ဆူလင်ပျံ့နှံ့နေတဲ့တွင်ဤကွဲပြားခြားနားမှုနေသော်လည်းအထွတ်အထိပ်-evoked [DA]_o NAc shell ကိုနှင့်အမာခံ၌၎င်း, CPU အတွက်သိသိသာသာနိမ့်ခဲ့ ဟောင်း Vivo AL နှင့်နှိုင်းယှဉ်ပါနှစ်ဦးစလုံးအစားအသောက်အုပ်စုများထံမှ striatal ချပ် (သင်္ဘောသဖန်း။ 3b နှင့် နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 2 တစ်ဦး, ခ), အချက်များအင်ဆူလင်အပြင်အကြွင်းမဲ့အာဏာ [DA] evoked အစိုးရကြောင်းတွေ့ရှိခဲ့ရသည်_o။ Striatal DA အကြောင်းအရာ (အစား DA ပေါင်းစပ်ထက်လွှတ်ပေးရန်စည်းမျဉ်းအတွက်အပြောင်းအလဲတစ်ခုကိုညွှန်း, အစားအသောက်များတွင်အုပ်စုများအကြားကွဲပြားဘူးနောက်ဆက်တွဲပုံ။ 2c) ။ ပြောင်းလဲနေသောစည်းမျဉ်းထဲမှာပြောင်းလဲမှုနှင့်အတူတသမတ်တည်း, အင်ဆူလင်မှ striatal DA လွှတ်ရာ sensitivity ကိုသိသိသာသာအစားအသောက်များတွင်မှီခိုခဲ့သည်။ FR ကြွက်, အင်ဆူလင်ပြင်းအား AL မသက်ရောက်ခဲ့သော≤1 nm, (ခုနှစ်တွင်သင်္ဘောသဖန်း။ 1b), evoked [DA] တိုးမြှင့်_o (သင်္ဘောသဖန်း။ 3c), EC နှင့်အတူတိုးပွားလာအင်ဆူလင် Sensitivity ကို, ထင်ဟပ်₅₀ ခန့်မှန်းခြေအားဖြင့် AL အတွက် (နှိုင်းယှဉ်ကြောင်းပြင်းအား၏အမိန့်အနိမ့်ခဲ့ FR striatum (0.4-0.6 nm) တွင်တန်ဖိုးများ သင်္ဘောသဖန်းသီး 1b နှင့် 3c) ။ ဒီကဗျာမတူဘဲ, အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု OB striatum အတွက်ဆုံးရှုံးခဲ့ရလေ၏ AL striatum အတွက်အကျယ်ချဲ့အကျိုးသက်ရောက်မှုရှိခဲ့သည့်ပင် 30 nm အင်ဆူလင်, (သင်္ဘောသဖန်း။ 1b), (OB မသက်ရောက်ခဲ့သင်္ဘောသဖန်း။ 3c).

  

  

(a) Plasma အင်ဆူလင်အာရုံစူးစိုက်မှုအပြုသဘော (နို့တိုက်ကျွေးရေးအုပ်စုများကိုဖြတ်ပြီးခန္ဓာကိုယ်အလေးချိန်ဆက်နွယ်နေကြောင်းဖြစ်ပါတယ်R= 0.76) ။ (b) ပျမ်းမျှ Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked [DA]_o NAc core ကိုအတွက် (ကြည့်ရှု နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 2a, ခ ) NAc shell ကိုနှင့် CPU များအတွက် FR (38 ± 4%) နှင့် OB AL နှိုင်းယှဉ် (25 ± 4%) (ထဲမှာနိမ့်ခဲ့nအစားအသောက်များတွင်အုပ်စုတစ်စုနှုန်း 50-60 ကြွက်ထံမှ = 5-6 က်ဘ်ဆိုက်များ, F_2,156= 23.337, တလမ်း ANOVA, Tukey HSD, ***P<0.001); OB နှင့် FR (P<0.08) ။ (cevoked [DA] ၏) အာရုံ_o (အင်ဆူလင်မှ FR အတွက်တိုးမြှင့်ခဲ့ပါတယ်, ဒါပေမယ့် OB အတွက်ဆုံးရှုံးခဲ့ရnအားလုံးငျဒသေအတွက် AL ကြွက်နှိုင်းယှဉ် FR အတွက် သာ. ကြီးမြတ် sensitivity ကိုအတူအစားအစာအုပ်စုတစ်စုနှုန်း 21-49 ကြွက်, တလမ်း ANOVA, Tukey HSD) မှအာရုံစူးစိုက်မှုနှုန်းမဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းနှုန်း = 2-4 က်ဘ်ဆိုက်များ, (Pတစ်ခုချင်းစီကိုဒေသများအတွက် <0.001; two- လမ်း ANOVA; စီပီယူ: F_{(အစားအသောက်× conc; 3,286)}= 10.253; အမာခံ: F_{(အစားအသောက်× conc; 3,353)}= 6.166; အခွံ: F_{(အစားအသောက်× conc; 3,195)}= 10.735) ။

• အပြည့်အဝအရွယ်အစားပုံရိပ် (124 KB)

 

 

ဤရွေ့ကားဒေတာ striatal InsR sensitivity ကိုနှင့်ခန္ဓာကိုယ် adiposity အကြားတစ်ဦးပြောင်းပြန်ကြားဆက်ဆံရေးဆိုလို။ တနည်းသို့သော်ဤအစားအစာ-မှီခိုကွဲပြားခြားနားမှုပြောင်းလဲ nAChR sensitivity ကိုရောင်ပြန်ဟပ်ပါလိမ့်မယ်။ ထိုကြောင့်ငါတို့သည်အသီးအသီးသောအစားအစာအုပ်စုတစ်စုကနေ NAc core ကိုအတွက်နီကိုတင်းဖို့အာရုံစူးစိုက်မှုတုံ့ပြန်မှုဆုံးဖြတ်သည်။ နီကိုတင်း [DA] များ၏အချိုးနှိုင်းယှဉ်ခြင်းဖြင့် quantified နိုင်သည့် nAChR desensitization, ကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်_o Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked မှ 100 Hz မှာငါးပဲမျိုးစုံအကျဉ်းရထား evoked [DA]_o (5 p: 1 p အချိုး) nAChR activation / desensitization တစ်ဦးအညွှန်းကိန်းအဖြစ်^{30, 31}။ ဒီချဉ်းကပ်နည်းကိုသုံးပြီးကျနော်တို့ကို (NAc core ကိုအတွက် nAChR sensitivity ကိုအတွက်အစားအစာအုပ်စုများအကြားအဘယ်သူမျှမကွဲပြားမှုကိုတွေ့နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 3a-c ကို) ။ ထို့အပွငျ 5 p ထိန်းချုပ်: 1 p အချိုး (NAc core ကိုအတွက်အစားအစာအုပ်စုများအကြားကွဲပြားဘူးနောက်ဆက်တွဲပုံ။ 3d) သို့မဟုတ် CPU (ရုပ်ပြမဟုတ်), အစားအသောက်များတွင် nAChR-မှီခို DA လွှတ်ပေးရန်စည်းမျဉ်းပြောင်းလဲပစ်တော်မမူကြောင်းတွေ့ရှိခဲ့ရသည်။ ထို့ကြောင့် striatal InsR sensitivity ကိုအင်ဆူလင်၏ဇီဝကမ္မပြင်းအားမှာ striatal DA လွှတ်ပေးရန်၏စည်းမျဉ်းများဆုံးရှုံးခြင်းနှင့်အတူ AL ကြွက်နှိုင်းယှဉ် FR အတွက်တိုးမြှင့်ခံရဖို့ပုံပေါ်ပေမယ့် OB ကြွက်များတွင်ပျက်ကွက်။

NAc shell ကိုအင်ဆူလင် conditional အရသာ preference ကို modulates

အစားအသောက်ဦးစားပေးအကျူးနဲ့ post-စားသုံးမိပါအချက်များနှစ်ဦးစလုံးကနေထုတ်လုပ်လိုက်တဲ့နေကြသည်; အသီးအသီးအဘို့ယန္တရားများလုံးဝပြေလည်ပေမယ့်လက်ရှိသက်သေအထောက်အထားနှစ်ဦးစလုံးအတွက် NAc DA အချက်ပြ implicates ကြသည်မဟုတ်^{37, 38}။ ပလာစမာများနှင့် cerebrospinal fluid (CSF) အင်ဆူလင်အဆင့်ကိုအရံဂလူးကို့စမြင့်ပြီးနောက်လျှင်မြန်စွာမြင့်တက်လာကြောင်းပေးထား⁶, ထို striatum အတွက်အင်ဆူလင်တစ်ခုတိုးပလာစမာအင်ဆူလင်မြင့်၏ 5 မိအတွင်းရှာဖွေတွေ့ရှိနိုင်⁷ဒါကြောင့်အစာစားနေစဉ်အတွင်းရံအင်ဆူလင်လွှတ်ပေးရန် NAc DA လွှတ်ပေးရန်မြှင့်တင်ရန်နှင့် Post-စားသုံးမိပါဆုလာဘ်ယန္တရားများကိုအထောက်အကူပြုနိုင်မယ် hypothesize မှယုတ္တိဖြစ်ပါတယ်။ ကျနော်တို့အရင်ကဖော်ပြထားအရသာ-preference ကို protocol ကိုအဆင်ပြေအောင်³⁷ အဆိုပါ NAc အတွက်အင်ဆူလင် antibody ကို (InsAb) ၏ဒေသဆိုင်ရာလျှောက်လွှာမှတစ်ဆင့် endogenous အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုပိတ်ဆို့ခြင်းဟာတွဲအရသာများအတွက် preference ကိုလျော့နည်းကျဆင်းလိမ့်မည်ဟုသောအယူအဆစမ်းသပ်ဖို့ကြွက်များတွင် saccharin-ဒူဂလူးကို့စဖြေရှင်းနည်းများနှင့်အတူ။ အင်ဆူလင်၏သက်ရောက်မှုပိတ်ဆို့ခြင်းအတွက် InsAb များ၏ထိရောက်မှုတစ်ဦးအတွက်စမ်းသပ်ပြီးခဲ့သည် စသည်တို့အတွက် striatal synaptosomes သို့ DA လွှာမှ၏ assay ။ အင်ဆူလင် (30 nm) တွင်သိသိသာသာတိုးစေသော V_{max ကို} NAc သို့မဟုတ် CPU (ထံမှ synaptosomes အတွက်နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 4ကျွန်တော်တို့ရဲ့နှင့်အတူ), တသမတ်တည်း V_{max ကို} striatal ချပ်ကနေဒေတာတွေကို (စားပွဲတင် 1) နှင့်ယခင်လေ့လာမှုများနှင့်အတူ^{18, 19, 20, 21, 22, 23}။ အင်ဆူလင်၏မရှိခြင်းအတွက်, InsAb မထိန်းချုပ် antibody ကို immunoglobulin, G (IgG) ကိုမပြောင်းလဲ V_{max ကို} ထိန်းချုပ်မှုနှိုင်းယှဉ် DA လွှာမှသည်။ IgG ၏ရှေ့မှောက်တွင်များတွင်အင်ဆူလင်နေဆဲအတွက်သိသိသာသာတိုးစေသော V_{max ကို}; သို့သော်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုအပေါ် V_{max ကို} (InsAb ၏ရှေ့တော်၌ရှုံးနိမ့်ခဲ့သည်နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 4).

တစ်သျှူးပျက်စီးမှုကို minimize နှင့်တစ်ရှူးပစ်မှတ်၏ sensitivity ကိုထိန်းသိမ်းနိုင်စေရန်, ဘာသာရပ်များ၏အုပ်စုနှစ်စုကျွန်တော်တို့ဟာမဟုတ်ဘဲဘာသာရပ်၏တစ်ခုတည်းသောအုပ်စုတစ်စုကို အသုံးပြု. နှင့် InsAb နှင့်အတူအချင်းချင်းအရသာဖြေရှင်းချက်ချိတ်တွဲခြင်းထက်, တစ်ဦးပြောင်လှောင် microinjection လုပ်ထုံးလုပ်နည်းနှင့်အတူအချင်းချင်းအပြန်အလှန် NAc microinjection alternated ရသောစမ်းသပ်စစ်ဆေးခဲ့ကြ မော်တော်ယာဉ်။ အကျိုးဆက် (တပုလင်း-အေးစက်အစည်းအဝေးများကာလအတွင်းစမ်းသပ်အုပ်စုတစ်စုနှစ်ဦးကိုအရသာတဦးနှင့်အတူတွဲ InsAb microinjections လက်ခံရရှိနှင့်အစည်းအဝေးများပြောင်းပေါ်လှောင်ပြောင် microinjections အခြားအရသာနှင့်အတူတွဲသင်္ဘောသဖန်း။ 4a,) ထားခဲ့တယ်။ ထိန်းချုပ်မှုအုပ်စုသည်ဖော့စဖိတ်-buffered ဆား (PBS) သို့မဟုတ် IgG ဖြစ်စေ၏ microinjections နှင့်အတူ alternated လှောင်ပြောင် microinjections ကိုလက်ခံရရှိခဲ့သည်။ နှစ်ဦးစလုံးအနံ့ဖြေရှင်းချက်အေးစက်နေစဉ်အတွင်းဂလူးကို့စပါရှိသည်။ preference ကိုပု InsAb-microinjected အုပ်စုတစ်စုအတွက်လှောင်ပြောင် microinjection-တွဲအရသာဆီသို့ပြောင်းရွှေ့လိမ့်မည်ဟုမျှော်လင့်ခဲ့သည်သော်လည်းအရသာအကြားအဘယ်သူမျှမ differential ကိုဦးစားပေး, ထိန်းချုပ်မှု-microinjected အုပ်စုတွင်မျှော်လင့်ထားခဲ့ပါတယ်။

  

  

(aတပုလင်းအေးစက် (လက်ဝဲ) နဲ့ Two-ပုလင်းစမ်းသပ်မှု (ညာ) သရုပ်ဖော်) ပုံကြမ်း။ (b) Volume ကိုတပုလင်း-အေးစက်အစည်းအဝေးများကာလအတွင်း (ml) ကိုလောင်လေ၏။ ပြုတ်ရည်-အေးစက် session တစ်ခုနှင့် microinjection ကုသမှုအကြားသိသိသာသာအပြန်အလှန် (ရှိခဲ့သည်nအုပ်စုတစ်စုနှုန်း = 19-20 ကြွက်, F_(3,111)= 3.088, P<0.05, 2 × 4 ကပြုတ်ရည် - အေးဆေးတည်ငြိမ်သော session ကိုအပေါ်ထပ်ခါတလဲလဲအစီအမံနှင့်အတူ ANOVA ရောနှော) ။ InsAb microinjection သည်သုံးစွဲမှုကိုတတိယအကြိမ်ထိန်းချုပ်မှုနှင့်နှိုင်းယှဉ်လျှင်သိသိသာသာလျော့နည်းသွားသည်။t(40) = 3.026, **P<0.01) နှင့်စတုတ္ထ (t(40) = 3.052, **P<0.01, တ ဦး တည်းအမြီးကာကွယ်ထားခဲ့သည် t-tests) တာဟာ။ လှောင်ပြောင်ထိုး (အုပ်စုသည်ဖြစ်စေများတွင်သုံးစွဲမှုအပေါ်အဘယ်သူမျှမသက်ရောက်ခဲ့F_3,111= 1.110, 2 × 4 လှောင်ပြောင်အေးစက် session တစ်ခုအပေါ်အထပ်ထပ်အစီအမံ) နဲ့ ANOVA ရောနှော။ (c) Two-ပုလင်းအရသာ-preference ကိုစမ်းသပ်နေစဉ်အတွင်းကိုလောင် Volume ကို။ အေးစက်နေစဉ်အတွင်းအရသာနှင့် microinjection ကုသမှုအကြားသိသိသာသာအပြန်အလှန် (ရှိခဲ့သည်F_1,37= 5.36, P<0.05, အရသာအပေါ်ထပ်ခါတလဲလဲအစီအမံနှင့်အတူ Two- လမ်းရောနှော ANOVA) ။ InsAb အုပ်စုသည်လှောင်ပြောင်သောအရသာနှင့်နှိုင်းယှဉ်ပါက InsAb တွဲဖက်သောအရသာကိုသိသိသာသာလျော့နည်းစေသည်။t(18) = 2.82, ** P ကို<0.01, တ ဦး တည်းအမြီးကာကွယ်ထားခဲ့သည် t-test); ထိန်းချုပ်မှုအုပ်စုသည် (အဘယ်သူမျှမအရသာ preference ကိုပြသt(19) = 0.803, P> 0.05, ကာကွယ်ထားသည် t-test) ။ အုပျစုမြားနှိုငျးယှဉျ InsAb ကြွက် (သိသိသာသာပြုတ်ရည်-တွဲအရသာ၏လျော့နည်းသောက်t(40) = 1.96, *P<0.05) နှင့်လှောင်ပြောင် - တွဲအရသာ၏သိသိသာသာပိုပြီး (t(40) = 1.77, *P<0.05, တ ဦး တည်းအမြီးကာကွယ်ထားခဲ့သည် t-test) ထိန်းချုပ်မှုထက်။

• အပြည့်အဝအရွယ်အစားပုံရိပ် (161 KB)

 

 

တ-ပုလင်းအေးစက်အစည်းအဝေးများကာလအတွင်း InsAb microinjection သိသိသာသာတတိယနှင့်စတုတ္ထတာဟာ (ကာလအတွင်းမော်တော်ယာဉ်နှင့်နှိုင်းယှဉ်ပါစားသုံးမှုလျော့နည်းသွားသင်္ဘောသဖန်း။ 4b) ။ ဆန့်ကျင်ဘက်အားဖြင့်, နှစ်ဦးစလုံးအုပ်စုများအားလုံးလေးယောက်လှောင်ပြောင်ဆေးထိုးအစည်းအဝေးများ (စဉ်အတွင်းဖြေရှင်းချက်၏တူညီသောအသံအတိုးအကျယ်ကိုလောင်F_3,111= 0.127, P>0.05, ရောထွေး Two-လမ်း ANOVA) (သင်္ဘောသဖန်း။ 4b) ။ ရှစ်အေးစက်အစည်းအဝေးများတစ်ဦးစုစုပေါင်းပြီးနောက်အရသာ preference ကိုကြွက်များကိုတပြိုင်နက်နှစ်ဦးစလုံးအနံ့ဖြေရှင်းချက်မှဝင်ရောက်ခွင့်ရှိခဲ့သည့်အတွက်နှစ်ပုလင်းစမ်းသပ်မှု (အတွင်းအကဲဖြတ်ခဲ့သည်သင်္ဘောသဖန်း။ 4a) ။ စာရင်းအင်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာ (အရသာနှင့်အေးစက်နေစဉ်အတွင်းလက်ခံရရှိသော microinjection ကုသမှုအကြားသိသိသာသာအပြန်အလှန်ထင်ရှားသင်္ဘောသဖန်း။ 4c) ။ အဆိုပါ InsAb အုပ်စုကိုသိသိသာသာပြောင်လှောင်-တွဲအရသာ (နှင့်နှိုင်းယှဉ်ပါပု InsAb-တွဲအရသာ၏လျော့နည်းစားသုံးသင်္ဘောသဖန်း။ 4c), ယာဉ်အုပ်စုတွင်မပါအရသာ preference ကိုပြသသော်လည်း (သင်္ဘောသဖန်း။ 4c), နဂိုအတိုင်းအင်ဆူလင်အချက်ပြမွှေးကယ်လိုရီဖြေရှင်းချက်၏ရွေးချယ်ရေးမှလှူဒါန်းခဲ့ကြောင်းတွေ့ရှိခဲ့ရသည်။ မော်တော်ယာဉ်နှင့်နှိုင်းယှဉ် InsAb-microinjected ကြွက်အဆိုပါပြုတ်ရည်-တွဲအရသာ၏သိသိသာသာလျော့နည်းနှင့်လှောင်ပြောင်-ဆေးထိုး-တွဲအရသာ (များ၏သိသိသာသာပိုပြီးသောက်သင်္ဘောသဖန်း။ 4c) ။ IgG ၏ Microinjection (t(9) 0.792 = ။ P>0.05, protected t-tests) သို့မဟုတ် PBS (t(9) 0.442 = ။ P>0.05, protected t-tests) InsAb microinjection တစ် nonspecific အကျိုးသက်ရောက်မှုစားသုံးမှုသို့မဟုတ်အရသာ preference ကိုလျော့နည်းသွားကြောင်းဖြစ်နိုင်ခြေဆန့်ကျင်ငြင်းခုံ, (data တွေကိုပြမပါ) အရသာ preference ကိုမသက်ရောက်ခဲ့ရသည်။ အဆိုပါ InsAb အုပ်စု session တစ်ခုနှင့် session ကိုအမျိုးအစား (လှောင်ပြောင်ပြုတ်ရည်နှိုင်းယှဉ်အမှန်တကယ်ပြုတ်ရည်) အကြားမျှအပြန်အလှန်ရှိခဲ့သည်ကြောင့် (စမ်းသပ်မှုမှာ InsAb အုပ်စုတစ်စု၏ preference ကိုနည်းဝတ္ထုအရသာများအတွက်ဦးစားပေးမပေးကြောင်းကိုလည်းမှတ်သားရပါမည်F_3,54= 1.584, P> 0.05, Two- လမ်း ANOVA) ။ ဆိုလိုသည်မှာ InsAb အုပ်စုသည် InsAb ပြုတ်ရည် - တွဲထားသောအရသာနှင့်နှိုင်းစာလျှင်ပြောင်လှောင်ခြင်း - ပြုတ်ရည် - အရသာရှိသောအရသာကို ပို၍ မစားသုံးပါ။ အစား, ကုသမှုအုပ်စုများအကြားကွဲပြားမှုပြုတ်ရည် - အေးစက်အစည်းအဝေးများအတွင်းပေါ်ထွက်လာခဲ့သည်။ ယေဘုယျအားဖြင့်ဤအချက်အလက်များက NAc ရှိအင်ဆူလင်သည်သဘာ ၀ အားဖြင့်အချက်ပြသည့်အရသာအတွက် ဦး စားပေးအားဖြည့်ခြင်းတွင်အခန်းကဏ္ plays မှပါဝင်ကြောင်းဖော်ပြသည်။

ကျနော်တို့အင်ဆူလင် InsRs မှတဆင့် Chi စိတ်လှုပ်ရှားပြောင်းလဲပစ်က nAChR-မှီခိုထုံးစံ၌ striatal DA လွှတ်ပေးရန်ချဲ့ထွင်ကြောင်းဤနေရာတွင်သတင်းပို့ပါ။ ကျွန်ုပ်တို့၏ရလဒ်များကိုအင်ဆူလင်မွတ်မပြေနိုင်သောအချက်ပြ၎င်း၏ထူထောင်အခန်းကဏ္ဍအပြင်, တစ်ဦးဆုလာဘ် signal ကိုအဖြစ်ဆောင်ရွက်နိုင်သည်ကိုဆိုလို။ အထူးသ, DA လွှတ်ပေးရေးအပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု FR ပြီးနောက်အင်ဆူလင်မှသိသိသာသာတိုးလာ sensitivity ကိုအတူအစားအစာများက modulated, ဒါပေမယ့်တစ်ခု OB အစားအစာအပေါ်အင်ဆူလင်-တိုးမြှင့်စည်းမျဉ်းတစ်ခုပြီးပြည့်စုံသောဆုံးရှုံးမှုဖြစ်ပါတယ်။ ဤပြောင်းလဲမှုများပလာစမာအင်ဆူလင်အဆင့်ကိုအစားအသောက်များတွင်မှီခိုဖြစ်တွေ့သော်လည်း, nAChR sensitivity ကိုမဟုတ်ခဲ့ကြသည်ဟုပေးထားပြောင်းပြန်အင်ဆူလင်အဆင့်ကိုပျံ့နှံ့နေတဲ့နှင့်ဆက်စပ်သောဖြစ်ကြောင်း InsR sensitivity ကိုအတွက်အပြောင်းအလဲရောင်ပြန်ဟပ်ဖို့ပေါ်လာပါသည်။ နောက်ဆုံးအနေနဲ့ပြုမူတိရိစ္ဆာန်များအတွက်ကျွန်တော်တို့ရဲ့အရသာ-preference ကိုလေ့လာမှုများအင်ဆူလင်အစားအစာ-related သင်ယူမှုအတွက်အင်ဆူလင် implicates ဒါပေမယ့်လည်းအကျိုးကို signal ကိုအဖြစ်က၎င်း၏အခန်းကဏ္ဍကိုအတည်ပြုမသာသော NAc shell ကိုလွှမ်းမိုးမှုအစားအစာ preference ကိုအတွက်အချက်ပြကြောင်းဆိုလို။

Net က [DA]_o ယင်း DAT မှတဆင့် DA လွှတ်ပေးရန်နှင့် DA လွှာမှအကြားချိန်ခွင်လျှာကိုရောင်ပြန်ဟပ်။ ကြောင်းအင်ဆူလင်ဖေါ်ပြခြင်းယခင်သက်သေအထောက်အထား DAT လှုပျရှားမှုထိန်းညှိနိုင်ပါတယ်^{18, 19, 20, 21, 22, 23} အင်ဆူလင်တစ်ခုတိုး evoked [DA] တွင်ပိုက်ကွန်ကျဆင်းခြင်းစေသင့်ကြောင်းအဆိုပါခန့်မှန်းဖို့ဦးဆောင်_o တိုးမြှင့် DA လွှာမှမှတဆင့်။ သို့သော်ကျနော်တို့ striatum အတွက်, အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုကဤထက်ပိုမိုရှုပ်ထွေးကြောင်းတွေ့ရှိခဲ့ပါတယ်။ အင်ဆူလင်ထိတွေ့မှုတိုးလုပ်ခဲ့တယ်ပေမယ့် V_{max ကို} ယင်း DAT အဘို့, အင်ဆူလင်၏အဓိကအကျိုးသက်ရောက် evoked [DA] အတွက်တသမတ်တည်းတိုးနှင့်အတူ, DA လွှတ်ပေးရေးအပေါ်မဟုတ်, DA လွှာမှပေါ်ခဲ့သည်_o NAc shell ကိုနှင့်အဓိကနှင့် CPU ထဲမှာအင်ဆူလင်ပြင်းအားတစ်ဦးဇီဝကမ္မအကွာအဝေးကိုဖြတ်ပြီး။ evoked [DA] အတွက်တိုးလာပေမယ့်လည်း_o 100 nm တစ် supraphysiological အာရုံစူးစိုက်မှုမှာအဆင့်ဆင့်ကိုထိန်းချုပ်ရန်ပြန်ပြောင်းခဲ့ပါ, V_{max ကို} တစ်ဦးရှင်းပြချက်အဖြစ် DAT အပေါ်တစ်ဦးကြီးစိုးအကျိုးသက်ရောက်မှုဖျက်သိမ်းရေးကိုလည်းထိန်းချုပ်မှုကနေမပြောင်းလဲဖြစ်ခဲ့သည်။ အဲဒီအစား, လွှာမှအပေါ်အကျိုးသက်ရောက်မှုဆုံးရှုံးမှုအဖြစ်ဖြန့်ချိ InsRs သို့မဟုတ်မြင့်မားသောအင်ဆူလင်ပြင်းအားမှာမြစ်အောက်ပိုင်းအချက်ပြလမ်းကြောင်း၏ downregulation ၏ desensitization implicates ။ အမှန်စင်စစ် InsRs ရံတစ်ရှူးအတွက် binding အင်ဆူလင်အပြီးအလျင်အမြန် endocytosis နှင့်ပျက်စီးခြင်းကိုခံယူ¹မြင့်မားအင်ဆူလင်၏အဆင့်ဆင့်သို့မဟုတ်မြင့်မားသောကယ်လိုရီအစားအစာမှရေတိုရေရှည်ထိတွေ့မှုပြီးနောက်တွင် neuron InsR sensitivity ကို၏ဆုံးရှုံးမှုများအတွက်အထောက်အထားထွန်းသစ်စတွေနဲ့^{10, 11, 39}.

DA လွှတ်ပေးရန်ဒီနေရာမှာအစီရင်ခံ striatal မြှင့်တင်ရန်အင်ဆူလင်၏လွှမ်းမိုးသက်ရောက်မှုနှစ်ခုသည်အခြားမကြာသေးမီ၏ရလဒ်များကိုနှင့်အတူခြားနား ဟောင်း Vivo အချပ်လေ့လာမှုများ။ ပထမဦးဆုံး၌, အင်ဆူလင် [၏လျှပ်စစ် evoked လျတ်အတွက်လျော့နည်းစေသော³striatal ချပ်ကနေ H ကို] DA, တိုးမြှင့်သော်လည်း [³H ကို] က DAT inhibited အခါ DA လျတ်ရှာဖွေတွေ့ရှိခဲ့သည်²²။ ဖြန့်ချိကြောင်းပေးထား [³H ကို] DA အဆိုပါ superfusing ဖြေရှင်းချက်ထဲမှာရှာဖွေတွေ့ရှိဖို့တစ်ရှူးတစ်လျှောက်လုံး DAT-mediated လွှာမှလွတ်မြောက်ရန်ရမယ်, ဒီ protocol ကို DAT စည်းမျဉ်းမှအထူးသဖြင့်အထိခိုက်မခံဖြစ်ပါတယ်။ အင်ဆူလင် ChIs နှင့် nAChR activation မှတဆင့် DA လွှတ်ပေးရန်ပိုကောင်းစေပါတယ်ကြောင်းဖေါ်ပြခြင်းကျွန်တော်တို့ရဲ့ရလဒ်တွေကို, DAT-mediated လွှာမှတိုးမြှင့်ဖို့အပြင်, [အင်ဆူလင်-တိုးမြှင့်အတွက်ထင်ရသောဝိရောဓိတိုးရှင်းပြမယ်လို့³ယင်း DAT အပေါ်ယှဉ်ပြိုင်သက်ရောက်မှုပိတ်ဆို့ခံခဲ့ရသည့်အခါမြင်ကြ H ကို] DA လျတ်²²။ ဒုတိယလေ့လာမှု VTA အတွက် somatodendritic DA လွှတ်ပေးရန်တိုက်ရိုက်ထောက်လှမ်းဘို့ FCV အသုံးပြုသော, ဒါပေမယ့်လည်း DA လွှာမှပေါ်အင်ဆူလင်၏အမြင်သာထင်သာအကျိုးသက်ရောက်မှုကိုတွေ့ evoked [DA] လျော့နည်းသွားတွင်ထင်ဟပ်_o (ref ။ 23) ။ axon DA လွှတ်ပေးရန်ယန္တရားများနှိုင်းယှဉ်ဒေသခံ microcircuitry ထံမှ somatodendritic ဖို့အကြောင်းအချက်များတစ်အရေအတွက်ကွာခြားချက်များ,⁴⁰, ဒီဒေသဆိုင်ရာခြားနားချက်အထောက်အကူပြုနိုင်ပါတယ်။ နောက်ထပ်အောက်တွင်ဖော်ပြထားသောဆွေးနွေးထားတဲ့အတိုင်း, သို့သော်အင်ဆူလင်၏ဒေသတွင်းမှီခိုအခန်းကဏ္ဍမဟုတ်ဘဲဆနျ့ကငျြထကျ, ဖြည့်စွတ်ဖြစ်ဖွယ်ရှိပါသည်။

ယခင်က DA အချက်ပြ၏အင်ဆူလင်-မှီခိုစည်းမျဉ်းမဆိုအခန်းကဏ္ဍ DA အာရုံခံအပေါ် InsRs တိုက်ရိုက် activation ကကမကထပြုခဲ့ခံရဖို့ယူဆခဲ့သညျ။ ကျနော်တို့ InsRs လည်း striatal ChIs အပေါ်ထုတ်ဖော်ပြောဆိုကြသည်ကဒီမှာပြသနှင့်အင်ဆူလင်ဓာတ်စာအပေါ်အင်ဆူလင်၏သြဇာလွှမ်းမိုးမှုအတွက်အရေးပါသောအခန်းကဏ္ဍမှရသော striatal DA လွှတ်ပေးရန်, များကိုချဲ့ထွင်ရန် Chi စိတ်လှုပ်ရှား modulates ။ Striatal ChIs အာရုံခံလှုံ့ဆော်မှုအဓိကနှင့်ကွဲ-ခေတ္တနား spiking အာရုံကို directing အတွက်အရေးကြီးသောဖြစ်ကြောင်း ChIs အတွက်ပုံစံများ, အားဖြည့်နှင့်ဖွဲ့စည်းသင်ယူမှုကိုမောင်းကိုကူညီတုံ့ပြန်ပစ်ခတ်ကွဲပြပွဲသော thalamus ၏ intralaminar အရေးပါ၏အာရုံခံမှပရိုဂျက်လက်ခံရရှိ⁴¹။ ထို့ကြောင့်, striatal ChIs အပေါ် InsRs မှာအင်ဆူလင်၏လုပ်ဆောင်ချက်တစ်ရပ်မျိုချမိပါမုန့်ညက်အကျိုးကိုတန်ဖိုးတိုးမြှင့်အမြင်မှအထောက်အကူပြု thalamic ပစ်ခတ်ရန်မှ striatal တုန့်ပြန်ပေါ်အာရုံခံအစားအသောက်တွေကိုအကျိုးသက်ရောက်မှုကိုတိုးမြှင့်နိုင်ဘူး။ Chi activation အားဖြင့် striatal DA လွှတ်ပေးရန်၏တိုက်ရိုက်မြှင့်တင်ရေး ChIs လှုံ့ဆော်ကြောင်းအချက်များ DA လွှတ်ပေးရန်၏အစပျိုးခြင်းကဲ့သို့သောအခွင့်ထူးခံအခန်းကဏ္ဍရှိလိမ့်မည်ဟုအကြံပြုချက်မှဦးဆောင်ထားပါတယ်³³။ ကျွန်ုပ်တို့၏ဒေတာအင်ဆူလင်-တိုးမြှင် Chi စိတ်လှုပ်ရှားခြင်းနှင့် ACH အချက်ပြ DA လွှတ်ပေးရန်အတွက်ပြောင်းလဲနေသောတိုးမောင်းနှင်နှင့်အတူ, ဒီများအတွက်ပထမဦးဆုံးထောက်ပံ့သက်သေအထောက်အထားသည်။

အင်ဆူလင်၏ရှေ့တော်၌ elevated DA လွှတ်ပေးရေးကိုလည်း Single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked ဖိနှိပ်လို့ရပါတယ်ဖြစ်စေရာ၏ nAChR desensitization သို့မဟုတ် muscarinic ACH အဲဒီ receptor (mAChR) activation [DA] ကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်တစ်ခုအတိုင်းအတာအထိ ACH အချက်ပြအတွက်တိုးမြှင့်ဆန့်ကျင်စောဒကတက်သည်_o (refs 29, 30, 31, 42) ။ ထို့ကြောင့်ဤနေရာတွင်အစီရင်ခံတင်ပြသည့်ယန္တရားများခြင်းကိုမနှစ်သက်ခြင်းနှင့်မွတ်မပြေနိုင်သောနှင့်ဆက်စပ်လျက်ရှိသည်သော mAChRs ၏ ACH activation ထံမှကွဲပြားကြသည်⁴³.

single-သွေးခုန်နှုန်း-evoked [DA]_o AL ကြွက်များထက် FR နှင့် OB ကြွက်နှစ်ဦးစလုံးအတွက်အနိမ့်ခဲ့; ဤအရလဒ်များကိုယခင်အစီရင်ခံစာများနှင့်အတူဗျည်း၌ရှိကြ၏ပေမယ့်^{44, 45, 46}ကျွန်တော်တို့ရဲ့လေ့လာမှုတွေတစ်ဦးစဉ်ဆက်မပြတ်အချိန်ဘောင်ကျော်နှစ်ခုအစားအသောက်များတွင်အုပ်စုများအတွက်သုံး striatal ငျဒသေ၏ပထမဦးဆုံးစနစ်တကျနှိုင်းယှဉ်သည်။ DA လွှတ်ပေးရန်အတွက်အစားအစာ-မှီခိုပြောင်းလဲမှုများကိုအခြေခံအဆိုပါယန္တရားများ elucidated နှင့်ပစ္စုပ္ပန်လေ့လာမှုများ၏အတိုင်းအတာထက်ကျော်လွန်ဖြစ်ကြသည်ကြပြီမဟုတ်။ သို့သျောလညျးပလာစမာအင်ဆူလင်အဆင့်ကိုဆန့်ကျင် FR နှင့် OB အစားအစာများကပြောင်းလဲဖြစ်ကြောင်းပေးထားသောကြောင့် evoked [DA] လျော့နည်းသွားကြောင်းမဖြစ်နိုင်ဖြစ်ပါသည်_o နှစ်ဦးစလုံးအုပ်စုများအတွက်အစားအစာ-မှီခိုအင်ဆူလင်အဆင့်ကို၏အကျိုးဆက်ဖြစ်ပါတယ်။

အခြားတစ်ဖက်တွင်, အစားအစာနှင့်နောက်ဆက်တွဲအစားအသောက်များတွင်-မှီခိုပလာစမာအင်ဆူလင်အဆင့်ကိုအတူ InsR sensitivity ကိုပြောင်းလဲမှုများ OB အတွက်အင်ဆူလင်မှ FR နှင့်တုန့်ပြန်၏ဆုံးရှုံးမှုအတွက်အင်ဆူလင်တိုး sensitivity ကိုများအတွက်အများဆုံးဖွယ်ရှိရှင်းပြချက်သည်။ AL နှိုင်းယှဉ် FR သို့မဟုတ် OB ကြွက်ဖြစ်စေများတွင်ပြောင်းလဲ nAChR sensitivity ကို၏အခြားရွေးချယ်စရာရှင်းပြချက်အဘို့အဘယ်သူမျှမသက်သေအထောက်အထားရှိခဲ့သည်။ ကျွန်တော်တို့ရဲ့တွေ့ရှိချက် FR နှင့်အတူတိုးပွားလာ striatal InsR sensitivity ကိုညွှန်ပြရန်ပထမဦးဆုံးအကြားဖြစ်ကြပေမယ့်¹⁸, ကိုယ်အလေးချိန် CSF အတွက်လျော့နည်းသွားအင်ဆူလင်အဆင့်ကိုလိုက်ပါနိုင်ပါတယ်⁷, FR အတွက်အင်ဆူလင်မှ DA လွှတ်ပေးရေးတိုးမြှင် sensitivity ကိုအထောက်အကူပြုလိမ့်မည်ဟုအရာ။ ပြောင်းပြန် OB ကြွက်များတွင်အင်ဆူလင်တုန့်ပြန်ဆုံးရှုံးကိုယ်အလေးချိန်သို့မဟုတ် OB အစားအစာများကသွေးဆောင်လျော့နည်းသွားဦးနှောက် InsR sensitivity ကိုများအတွက်ယခင်သက်သေအထောက်အထားများနှင့်အတူတသမတ်တည်းဖြစ်တယ်^{3, 10, 11}.

ကျွန်တော်တို့၏ ဟောင်း Vivo အချပ်ဒေတာအင်ဆူလင်ဆုလာဘ်အဖြစ်မွတ်မပြေနိုင်သောအချက်ပြစေခြင်းငှါ၎င်းယူဆချက်ကိုထောကျပံ့။ ကျနော်တို့အရသာ-preference ကိုအေးစက်နေစဉ်အတွင်း NAc shell ကိုအတွက်နှစ်နိုင်ငံ InsAb microinjection နှင့်အတူ endogenous အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုပိတ်ဆို့ခြင်းအားဖြင့်ဒီအယူအဆစမ်းသပ်စစ်ဆေးပါတယ်။ ဆုလာဘ်တစ်ခုအခန်းကဏ္ဍနှင့်အတူတသမတ်တည်း, အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုပိတ်ဆို့ခြင်းနဂိုအတိုင်းအင်ဆူလင်အချက်ပြနှင့်ဆက်စပ်နေသည့်အရသာနှိုင်းယှဉ်တစ်တွဲဂလူးကို့စပါဝင်သောဖြေရှင်းချက်၏အရသာများအတွက် preference ကိုလျော့နည်းသွားသည်။ လှောင်ပြောင်သို့မဟုတ်ထိန်းချုပ်မှု microinjections စားသုံးမှုအပေါ်အဘယ်သူမျှမသက်ရောက်ခဲ့သော်လည်းယင်း NAc shell ကိုအတွက်အင်ဆူလင်ပိတ်ဆို့ခြင်းကိုလည်းတပုလင်းအေးစက်နေစဉ်အတွင်းတစ်တွဲဖြေရှင်းချက်၏စားသုံးမှုလျော့နည်းသွားသည်။ ဤရွေ့ကားအချက်အလက်များကို NAc shell ကိုအတွက်အင်ဆူလင်အစားအစာ preference ကိုတစ်အခန်းကဏ္ဍကြောင်းအကြံပြုအပ်ပါသည်။ ယခင်လေ့လာမှုများ NAc အတွက်နဂိုအတိုင်း DA အချက်ပြအရသာအေးစက်၏ဝယ်ယူဘို့လိုအပ်သောကြောင်းပြသကြ^{37, 38}, အာဟာရဖြေရှင်းချက်များအားဖြည့်အကျိုးသက်ရောက်မှုများဖြန်ဖြေအတွက် NAc DA များအတွက်အခန်းကဏ္ဍအတည်ပြု။ ဒီ [DA] လျော့ချဖို့မျှော်လင့်ထားလိမ့်မည်ဟုအဖြစ်ဤအလင်းမှာတော့နဂိုအတိုင်းအင်ဆူလင်ရရှိနိုင်မှုနှင့်အတူတွဲသည့်ဂလူးကို့စဖြေရှင်းချက်များအတွက် preference ကို, အ NAc shell ကိုအတွက် DAT-mediated DA လွှာမှပေါ်အင်ဆူလင်၏အဓိကအကျိုးသက်ရောက်ဆန့်ကျင်စောဒကတက်သည်_o ထို့ကြောင့်ထိန်းချုပ်မှု-တွဲအရသာ၏စားသုံးမှုလျော့ကျသွားသည်။ ကျွန်ုပ်တို့၏ရလဒ်များကိုကိုလည်းတိရိစ္ဆာန်များ sucrose စားသုံးမှုအတွက်နယ်စပ်ဒေသတိုးနှင့်အတူပါးစပ် sucrose Self-အုပ်ချုပ်ရေးအတွက်စေ့စပ်ခဲ့ကြသည်အချိန်ကိုတိုးမြှင့်ပေးသော NAc shell ကိုအတွက်အင်ဆူလင်၏ microinjection အတွက်ယခင်လေ့လာမှုကနေသူတို့နှင့်အတူတသမတ်တည်းများမှာ²⁶, တိုးမြှင့ DA လွှာမှ၏မျှော်မှန်းအကျိုးဆက်အနေဖြင့်ဆန့်ကျင်ဘက်ပြလေ၏။ ယေဘုယျအားဤအမူအကျင့်ဒေတာ striatal ChIs နှင့်မြှင့်တင်ရန် DA လွှတ်ပေးရေးအပေါ်အင်ဆူလင်၏ဟောကိန်းထုတ်သြဇာလွှမ်းမိုးမှုနှင့်ကိုက်ညီဖြစ်ကြသည်။ သို့သော်ဤရလဒ်များကို striatum တစ်လျှောက်လုံးကျယ်ပြန့် InsR စကားရပ်ပေးထားခြင်း, စောင့်ကြည့်အပြုအမူတွေအတွက် striatal microcircuitry ၏အခြားဒြပ်စင်များ၏ပါဝင်ပတ်သက်မှုဖယ်ထုတ်ပါဘူး^{1, 14}.

ဒီနေရာမှာအစီရင်ခံအဆိုပါလေ့လာမှုများအင်ဆူလင်ဟာကယ်လိုရီတန်ဖိုးကိုဆက်သွယ်အတွက်အခန်းကဏ္ဍနှင့်သိရပါနှင့်အဝလွန်နှစ်ဦးစလုံးဘာသာရပ်များအတွက်အင်ဆူလင်၏သြဇာလွှမ်းမိုးမှုအဘို့အအရေးကြီးသောသက်ရောက်မှုရှိပါတယ်ရသောဘောဇဉ်၏ထို့ကြောင့်အကြိုးသက်ရောက်မှုကြောင့်ပထမဦးဆုံးသက်သေအထောက်အထားသည်။ အများအပြားကလေ့လာမှုများအစားအစာ၏ Post-စားသုံးမိပါသက်ရောက်မှု, မသက်ဆိုင်ရှိမရှိအရသာ transduction လမ်းကြောင်း၏နဂိုအတိုင်းဖြစ်ကြောင်းညွှန်ပြ⁴⁷, NAc DA လွှတ်ပေးရန်နှင့်အပြုအမူ၏အပြုသဘောအားကောင်းတိုးမြှင့်^{37, 47}။ ထို့ကြောင့် Post-စုပ်ယူအင်ဆူလင်တုံ့ပြန်သည့်အစာစား၏များသောအထွက်နှုန်းဝှက်နှင့်စားသုံးမှုကို enable ပြုလုပ်အစားအစာဦးစားပေးနှင့်အပြုအမူများအားဖြည့်ဖို့အထောက်အကူဖြစ်စေလိမ့်မည်။ သို့သော်ပျံ့နှံ့နေတဲ့အင်ဆူလင်အဆင့်ကိုနှင့်ဗဟို InsR sensitivity ကိုအတွက်အစွန်းရောက်ပြောင်းလဲမှုများကိုမူမမှန်အဖြစ်သပ္ပါယ်အပြုအမူအတွက်အခန်းကဏ္ဍရှိနိုငျတယျ။ ဥပမာအားဖြင့်, FR ဘာသာရပ်များအတွက် hypoinsulinaemia နှင့် InsR sensitivity ကို၏အစားထိုး upregulation မူးရူး၎င်းတို့၏သဘောထားအတွက်အချက်တစ်ခုဖြစ်နိုင်ပါတယ်⁴⁸။ ပြောင်းပြန် OB ကြွက်များတွင်ဤနေရာတွင်ထင်ဟပ်အမျိုးအစား II ကိုဆီးချိုရောဂါဒါမှမဟုတ်အဝလွန်အတွက်ဗဟိုအင်ဆူလင်အာရုံမခံစားနိုင်သော, လျော်ကြေးအဖြစ်မြင့်မားများသောအညွှန်းကိန်းနှင့်အတူအစားအစာစားသုံးမှုကားမောင်း, စားသုံးမိပါကအောက်ပါဆုလာဘ်တစ်ခုလျော့နည်းသွားအသိအထောက်အကူပြုနိုင်^{49, 50}။ ထို့ကြောင့်, striatal အင်ဆူလင် Sensitivity ကိုတစ်ခုတိုးတစ်ခုသို့မဟုတ်ကျဆင်းခြင်းဖြစ်စေမူးရူးစားနှင့် / သို့မဟုတ်အဝလွန်မှု, ရောဂါဗေဒစားအထောက်အကူပြုနိုင်ပါတယ်။

ယေဘုယျအားကျွန်ုပ်တို့၏တွေ့ရှိချက်အကျိုးကို signal ကိုအဖြစ်အင်ဆူလင်အဘို့အသစ်တစ်ခုအခန်းကဏ္ဍထုတ်ဖေါ်။ ထိုသို့သောအခန်းကဏ္ဍမှာ VTA သို့ microinjected အင်ဆူလင်အစားအစာဆုလာဘ်နဲ့ဆက်စပ်တွေကိုအဘို့အ hedonic နို့တိုက်ကျွေးခြင်းနှင့် preference ကိုလျော့ချနိုင်သည်ကိုမကြာသေးမီတွေ့ရှိချက်များအပါအဝင်တစ်မွတ်မပြေနိုင်သောအချက်ပြအဖြစ်က၎င်း၏လူသိများ function ကိုအတူခြားနား^{23, 24}။ ဤ DA-မှီခိုလုပ်ဆောင်ချက်များကိုအတွက်အင်ဆူလင်အဘို့ဆန့်ကျင်အခန်းကဏ္ဍ ပြန်. နိုင်ပါတယ်ဘယ်လိုထင်ရသော၏မေးစရာများရှိနေပါသည်။ အဖြေကဤသက်ရောက်မှုဖြည့်စွတ်ထက်ဆနျ့ကငျြဖြစ်ကြောင်းဖြစ်နိုင်သည်။ ပစ္စုပ္ပန်ရလဒ်များ striatum အတွက်အင်ဆူလင်တစ်မျိုချမိပါမုန့်ညက်အကျိုးကိုတန်ဖိုးကိုဆက်သွယ်ကြောင်းဖော်ပြသည်။ တစ်ပြိုင်နက်ယင်း၏အာဟာရနှင့်အရှင်အကြိုးအရည်အသွေးတွေကိုတစ်ဦးမှတ်ဉာဏ်ထူထောင်နေချိန်မှာမွတ်မပြေနိုင်သောအချက်ပြတစ်ဦးကို dual အခန်းကဏ္ဍရိုးရှင်းစွာဖြင့်ထည့်သွင်းသည့်အပြုအမူများအထပ်ထပ်အားဖြည့်, အင်ဆူလင်တစ်မုန့်ညက်ကိုအဆုံးသတ်၏အရေးကြီးသောရည်ရွယ်ချက်အစေခံရန်ခွင့်ပြုလိမ့်မည်။

တိရိစ္ဆာန်ကိုင်တွယ်

တိရိစ္ဆာန်လုပ်ထုံးလုပ်နည်းများ NIH လမ်းညွှန်ချက်များနှင့်အညီရှိကြ၏နှင့်ဆေးပညာတိရိစ္ဆာန်စောင့်ရှောက်မှုနှင့်အသုံးပြုမှုကော်မတီများ၏ NYU ကျောင်းကအတည်ပြု။ အားလုံးတိရိစ္ဆာန်များ 12 ဇအလင်းအပေါ်ခဲ့ကြသည်: မှောင်မိုက်တဲ့သံသရာ, 06 ကနေအပေါ်အလင်းအိမ်နှင့်အတူ: 00 မှ 18: 00; ဟောင်း Vivo 08 နှင့် 00: 12 ချပ် 00 အကြားကိုပြင်ဆင်ခဲ့ကြသည်။ AL ကြွက်နှင့်ကြွက်များတွင် Mechanistic လေ့လာမှုများလုပ်ဆောင်ခဲ့သည် ဟောင်း Vivo အားလုံး၌ကျိန်းဝပ်တိရိစ္ဆာန်များကနေအချပ်, ကြွက် singly အားလုံးအစားအစာအုပ်စုတွင်နှိုင်းယှဉ်နှင့်အပြုအမူဆိုင်ရာလေ့လာမှုများအဘို့သျောခဲ့ကြသည်သော်လည်း။

ကြွက်အစားအသောက်များတွင် regimen

အရွယ်ရောက်ပြီးသူအထီး Sprague-Dawley ကြွက် (Taconic) 8-10 ရက်ပေါင်းရေရှည်တည်တံ့တဲ့အစားအစာ regimen ၏စတင်မှာအဟောင်း 21-30 ရက်သတ္တပတ်ခဲ့ကြသည်။ ကြွက် Semi-ကျပန်းအစားအသောက်များတွင်အုပ်စုများမှတာဝန်ကျ: ဘာသာရပ်များကနဦးအလေးချိန်အားဖြင့်အဆင့်ခဲ့ကြသည်, ကြွက်များ၏ပြီးတော့တစ်ဦးချင်းစီအဆက်ဆက်သုံးအစားအသောက်များတွင်အုပ်စုများအကြားကျပန်းဖြန့်ဝေခဲ့သည်။ AL ကြွက် FR သို့မဟုတ် OB အစားအစာပေါ်တွဲကြွက်များကဲ့သို့တူညီသောကာလအတွက်ကြွက် Chow အခမဲ့သုံးစွဲနိုင်ရှိခဲ့ပါတယ်။ အားလုံးကြွက်ရေအခမဲ့သုံးစွဲနိုင်ရှိခဲ့ပါတယ်။ အစားအသောက်ကန့်သတ်ယခင်ကအဖြစ်အကောင်အထည်ဖော်ခဲ့သည်⁵¹; ခန္ဓာကိုယ်အလေးချိန်အစားအစာဒီအလေးချိန်ကိုဆက်လက်ထိန်းသိမ်းထားဖို့ titrated ခဲ့သောပြီးနောက် 40% လျှော့ချခဲ့သည်သည်အထိခေတ္တမျှ, ကြွက်နေ့စဉ်စံကြွက် Chow ၏ AL စားသုံးမှု၏ 50-20% ရရှိခဲ့သည်။ OB ကြွက်, အတန်အသင့်မြင့်မားတဲ့အဆီနဲ့သကြားနဲ့အလွန်အမင်းအရေးပါတယ်လို့အရည်ကိုသေချာကြွက် Chow နဲ့ချောကလက်အခမဲ့သုံးစွဲနိုင်ခဲ့⁵².

Forebrain chat နောက်ကောက်ကြွက်

တစ်ခြွင်းချက် floxed allele နှင့်အတူကြွက်တွေ chat (chat^flox) တစ်ဦးနှင့်အတူဖြတ်ကျော်ခဲ့ကြ Nkx2.1^Cre ACH ပေါင်းစပ်၏ ablation forebrain ဖို့ကန့်သတ်ထားတဲ့အတွက်ကြွက်ထုတ်လုပ်ရန် Transgene လိုင်း³²။ non-Mutant Transgene littermates ထိန်းချုပ်မှုရှိသည် ဖြစ်. , သူတို့ရဲ့ genotype Cre⁺;chat^{flox / +} နှင့် Cre^-;chat^{flox / flox} '' heterozygotes '' အဖြစ်ရည်ညွှန်းကြသည်။ အချပ်လေ့လာမှုများအတွက်အသုံးပြုအရွယ်ရောက်ပြီးသူအထီးကြွက်ခဲ့ ကြော်ငြာ libitum Chow နှင့်ရေမှဝင်ရောက်ခွင့်။

ထွ Vivo အချပ်ပြင်ဆင်မှုနှင့်ဇီဝကမ္မဖြေရှင်းနည်းများ

ကြွက်သို့မဟုတ်ကြွက်နက်နက်ရှိုင်းရှိုင်း 50 မီလီဂရမ်ကီလိုဂရမ်နှင့်အတူ anaesthetized ခဲ့ကြသည်^-1 pentobarbital (intraperitoneal (ip)) နှင့်ခေါင်းဖြတ်အသတ်ခံ။ voltammetry အဘို့, Coronal forebrain ချပ် (300-400-μmအထူ) ဓါး microtome တုန်ခါနေတဲ့ Leica VT1200S အပေါ်ဖြတ်ခဲ့ကြ (Leica Microsystems ကို; Bannockburn, IL) (MM အတွက်) ပါဝင်တဲ့ရေခဲ-အအေး HEPES-buffered အတု CSF (aCSF) တွင်: NaCl (120); NaHCO₃ (20); ဂလူးကို့စ (10); HEPES အက်ဆစ် (6.7); KCl (5); HEPES ဆိုဒီယမ်ဆား (3.3); CaCl₂ (2); နှင့် MgSO₄ (2), 95% အိုနှင့်အတူ equilibrated₂/ 5% CO₂။ ချပ်ပြီးတော့လက်တွေ့စမ်းသပ်ချက်မတိုင်မီ 1 ဇများအတွက်အခန်းအပူချိန်မှာဒီဖြေရှင်းချက်ထဲမှာထိန်းသိမ်းထားခဲ့သည်^{30, 32, 53}။ electrophysiology အဘို့, anaesthetization ပြီးနောက်ကြွက် (mm အတွက်) ပါဝင်တဲ့ရေခဲ-အအေးဖြေရှင်းချက်တွေနဲ့ transcardially perfused ခဲ့ကြသည်: sucrose (225); KCl (2.5); CaCl₂ (0.5); MgCl₂ (7); NaHCO₃ (28); nah₂PO₄ (1.25); ဂလူးကို့စ (7); အက်စ်ကောဘစ် (1); နှင့် pyruvate (3), နှင့် 95 နှင့်အတူ equilibrated% အို₂/ 5% CO₂။ ချပ်ထို့နောက် (mm အတွက်) ပါဝင်တဲ့ပြုပြင်ထားသော aCSF အတွက်ပြန်လည်နာလန်ထူအခန်းထဲသို့ပြောင်းရွှေ့, ဒီဖြေရှင်းချက်ထဲမှာဖြတ်ခဲ့ကြသည်: NaCl (125); KCl (2.5); nah₂PO₄ (1.25); NaHCO₃ (25); MgCl₂(1); CaCl₂ (2); ဂလူးကို့စ (25); အက်စ်ကောဘစ် (1); pyruvate (3); နှင့် myo4% အိုနှင့်အတူ equilibrated -inositol (95),₂/ 5% CO₂; ဒီဖြေရှင်းချက်ထို့နောက်အခန်းအပူချိန်မှတဖြည်းဖြည်းအအေးခွင့်ပြုခဲ့ 34 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်မှာကနဦးဖြစ်ခဲ့သည်⁵⁴။ အားလုံး voltammetry နှင့်ဇီဝြဖစ်စဉ်စမ်းသပ်ချက် 32 ml ကိုမိမှာပါ superfused ခဲ့ကွောငျးကို C ° 1.5 မှာ submersion မှတ်တမ်းတင်အခန်းကောက်ယူခဲ့သည်^-1 aCSF (mm အတွက်) ပါဝင်တဲ့နှင့်အတူ: NaCl (124); KCl (3.7); NaHCO₃ (26); CaCl₂ (2.4); MgSO₄ (1.3); KH₂PO₄ (1.3); နှင့်ဂလူးကို့စ (10), နှင့် bovine သွေးရည်ကြည် albumin (BSA, 0.05-0.1 ml ကို mg^-1) 95 နှင့်အတူ equilibrated% အို₂/ 5% CO₂; ချပ်လက်တွေ့စမ်းသပ်ချက်မတိုင်မီ 30 မိအဘို့ဤပတ်ဝန်းကျင်တွင် equilibrate ခွင့်ပြုပေးခဲ့သည်။

အစာရှောင်ခြင်း-scan ကသိသိ voltammetry

Evoked DA လွှတ်ပေးရန်လေ့လာမှုများဦးနှောက်အချပ်အတွက် FCV သုံးပြီးကောက်ယူခဲ့သည်^{32, 53} အထီးကြွက်များကနေကိုပြင်ဆင်သို့မဟုတ် chat forebrain နောက်ကောက်ကြွက်နှင့် heterozygote ထိန်းချုပ်မှု (5-8 ရက်သတ္တပတ်) ။ လေ့လာစရာများ chat နောက်ကောက်ကြွက်မကျြစိကှ, ဒါပေမယ့်ကြွက်အစားအသောက်များတွင်အုပ်စုများမျက်စိကန်း precluded ကြောင်းသိသာ phenotypes ခဲ့ခဲ့ကြသည်။ Voltammetric တိုင်းတာတဲ့ Millar Voltammeter (စိန့်ဗာသောလမဲ၏အများနှင့်ဆေးပညာနှင့်သွားဘက်ဆိုင်ရာ, လန်ဒန်တက္ကသိုလ်ရဲ့တော်ဝင်လန်ဒန် School မှာဒေါက်တာဂျူလီယန် Miller ကအထူးတောင်းဆိုချက်အရအားဖြင့်ရရှိနိုင်) နဲ့လုပ်ခဲ့ကြသည်။ တစ်ဦးကသမားရိုးကျတြိဂံ waveform (Ag / AgCl နှိုင်းယှဉ်) + 0.7 V ကို, 1.3 V ကို s ကို၏စကင်နှုန်း -800 တစ်စကင်ကိုအကွာအဝေးနှင့်အတူ, FCV အတွက်အသုံးပြုခဲ့သည်^-1100 ms ၏, နှင့်နမူနာကြားကာလ^{30, 32, 53}။ ဒေတာကို Clampex 1200 software ကို (Molecular ဖုန်းများအတွက်) ကထိန်းချုပ်ထားတဲ့ DigiData 7.0B A / D ကိုဘုတ်အဖွဲ့ကို အသုံးပြု. ဝယ်ယူခဲ့ကြသည်။ DA လွှတ်ပေးရန်တစ်အာရုံစူးစိုက်မှုလှုံ့ဆော်လျှပ်ကူးပစ္စည်းသုံးပြီး evoked ခဲ့သည်; လှုံ့ဆော်မှုသွေးခုန်နှုန်းလွှဲခွင် 0.4-0.6 Ma ကြီးနှင့်ကြာချိန် 100 μsခဲ့သည်^{30, 32, 53}။ ဒေသခံ Single-သွေးခုန်နှုန်းဆွ NAc core နဲ့ CPU အတွက်အသုံးပြုခဲ့သည်; သို့သော်တစ်ဦးအကျဉ်းကြိမ်နှုန်းမြင့်သွေးခုန်နှုန်းရထား (100 Hz မှာငါးပဲမျိုးစုံ) evoked [DA] များကိုချဲ့ထွင်ရန်အသုံးပြုခဲ့သည်_o NAc shell ကိုပါ။ နှစ်ဦးစလုံးလှုံ့ဆော်မှု Paradigm DA အရေးယူအလားအလာကြောင်းထုတ်ပြန်ကြေညာခြင်းနှင့် Ca ကျလာသော²⁺ , မှီခိုတစ်ပြိုင်နက်တည်းဖြန့်ချိအချိုမှုအားဖြင့်ထိခိုက်ခြင်းနှင့်ဂါဘမြို့သား^{42, 55}နှင့် facilitated တစ်ပြိုင်နက်တည်းဖြန့်ချိ ACH အားဖြင့်^{29, 30, 31, 32, 33, 34}။ evoked [DA] တွက်ချက်ရန်_o, လျှပ် aCSF နှင့်ပေးထားသောစမ်းသပ်မှုစဉ်အတွင်းအသုံးပြုတစ်ခုချင်းစီကိုမူးယစ်၏ရှေ့တော်၌အသီးအသီးစမ်းသပ်မှုပြီးနောက် 32 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်မှာ DA ၏လူသိပြင်းအားနှင့်အတူချိန်ညှိခဲ့ကြ⁵³.

evoked [DA] အပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုကိုအကဲဖြတ်နိုင်ရန် Voltammetry စမ်းသပ်ချက်_o နှစ်ခု protocol များ၏ဖြစ်စေသုံးပြီးရယူခဲ့ကြသည်။ အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု (Sigma, I5523) အတွက်အချိန်သင်တန်းကိုဆုံးဖြတ်ရန်ကနဦးစမ်းသပ်ချက်စောင့်ကြပ်ကြည့်ရှုခြင်းဖြင့်ဖျော်ဖြေခဲ့ကြသည် [DA] evoked_o တစ်ခုတည်း site ကိုသည် 5 မိ။ တသမတ်တည်း [DA] evoked ပြီးနောက်အင်ဆူလင်လျှောက်ထားခဲ့သည်_o (ပုံမှန်အားဖြင့် 4-5 တိုင်းတာ) ရရှိသောခဲ့သည်; အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု 50-60 မိပြီးနောက်အကျယ်ချဲ့ခဲ့တယ်, ပြီးတော့ [DA] evoked_o အဆိုပါစမ်းသပ်မှုများ၏ကြာချိန်အဘို့ဤအဆင့်မှာရှိနေဆဲ (ပုံမှန်အား 90 မိစုစုပေါင်းအင်ဆူလင်ထိတွေ့; သင်္ဘောသဖန်း။ 1c) ။ နောက်ပိုင်းတွင်, အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှု [DA] evoked မှတ်တမ်းတင်ခြင်းဖြင့်အကဲဖြတ်ခဲ့သည်_o သုံး striatal ငျဒသေတစျခုစီအတွက်အချပ်အတွက် 4-5 discrete က်ဘ်ဆိုက်များ (bregma ထံမှ + 1.5 မီလီမီတာ) မှာအကျယ်ချဲ့အင်ဆူလင်အကျိုးသက်ရောက်မှု (60-80 မိကျော်နမူနာ) ၏ထိုအချိန်ကနောက်တဖန်ထိန်းချုပ်မှုအခြေအနေများ (aCSF သို့မဟုတ် aCSF ပေါင်းမူးယစ်) နှင့်အောက်တွင်, ထို့နောက် ဤအနမူနာတစ်ခုချင်းစီကိုမဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းများအတွက်ပျမ်းမျှခဲ့ကြသည်။ အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုအချပ်ပြင်ဆင်မှုအပြီးအချိန်နှင့်အတူလျော့; အချိန် minimize လုပ်ဖို့ ဟောင်း Vivo နှင့်တိရိစ္ဆာန်အသုံးပြုမှုကိုပိုကောင်းအောင်, ပုံမှန်အားဖြင့်တစ်ဦးပေးသောတိရိစ္ဆာန်ကနေနှစ်ခုချပ်တစ်ချိန်တည်းမှာမှတ်တမ်းတင်အခန်းကိုစမ်းသပ်ခဲ့သည်။ အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုကိုစိန်ခေါ်ဖို့အသုံးပြုမူးယစ်ဆေးဝါး HNMPA trisacetoxymethyl Ester (HNMPA-လေးအပါအဝင် aCSF superfusing မှတဆင့်အင်ဆူလင်မတိုင်မီ 15 မိလျှောက်ထားခဲ့သည်_3; Enzo ဘဝကသိပ္ပံ), S961 (Novo Nordisk), LY294002 (Sigma), picropodophyllotoxin (PPP; Tocris), mecamylamine (Tocris) နှင့်DHβE (Tocris) ။ ရလဒ်များထဲမှာဖော်ပြထားတဲ့အတိုင်း, အစားအသောက်များတွင်အုပ်စုများကြားတွင်နီကိုတင်း ACH receptors ၏ဖြစ်နိုင်သောပြောင်းလဲ sensitivity ကိုအထွတ်အထိပ်များ၏အချိုးနှိုင်းယှဉ်ခြင်းဖြင့်စမျးသပျခံခဲ့ရ [DA]_o 5 p အားဖြင့် evoked ကြောင်းနှင့်အတူ 100 p (1 Hz) က evoked (5 p အချိုး 1 p) evoked^{30, 31} 0-500 nm နီကိုတင်း (Sigma) ၏ရှေ့တော်၌ NAc core ကိုပါ။

၏ဆုံးဖွတျခ V _{max ကို} evoked [DA] ကနေ_o striatal ချပ်များတွင်ယာယီ

DAT-mediated DA လွှာမှ, evoked [DA] ၏ကျသွားအဆင့်၏ကနဦးအဘို့ကိုအတွက်အင်ဆူလင်ကုထုံးတွေပြောင်းလဲမှုများကိုအကဲဖြတ်ဖို့_o ခါးဆစ် extract ဖို့ Michaelis-Menten ညီမျှခြင်းမှတပ်ဆင်ခဲ့သည် V_{max ကို} (အကျယ်ချဲ့လွှာမှနှုန်းကိုစဉ်ဆက်မပြတ်)⁵⁶. K_m (inverse DA များအတွက် DAT ၏ဆှဖှေဲ့နှင့်ဆက်စပ်သောသော) 0.2 μMမှာ fixed ခဲ့ striatal ငျဒသေအနှံ့အလားတူဖြစ်လူသိများသည်⁵⁷ နှင့်အင်ဆူလင်အားဖြင့်ထိခိုက် (ကြည့်ရှု နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 4 စာတန်း) ။

မြေတပြင်လုံး-ဆဲလ်အသံဖမ်း

ဦးနှောက်အချပ် 29 နှစ်အရွယ်အထီးကြွက်မှ 35- ကနေကိုပြင်ဆင်ကြသည် ဟူ. ၎င်း, မှတ်တမ်းတင်ခြင်းအခြေအနေများ DA လွှတ်ပေးရန်လေ့လာမှုများအတွက်အသုံးပြုသူတို့အားတူညီခဲ့ကြသည်။ သမားရိုးကျနည်းလမ်းများအသုံးပြုခဲ့တပြင်လုံးကို-ဆဲလ်လက်ရှိ-ညှပ်အသံသွင်း⁵⁴။ Striatal ChIs အနီအောက်ရောင်ခြည် differential ကို-်ရောက်စွက်ဖက်ဆနျ့ကငျြဘမှန်ဘီလူးနှင့်တစ်ဦး× 51 ရေနှစ်မြှုပ်ခြင်းရည်ရွယ်ချက်နဲ့ Olympus တို့ BX40WI ဏု (Olympus တို့အမေရိက, Center ကချိုင့်, PA) ကို အသုံးပြု. မြင်ခဲ့ကြသည်။ (mm အတွက်) ပါရှိသော pipette ဖြေရှင်းချက်: K-gluconate (129); KCl (11); HEPES (10); MgCl₂ (2); EGTA (1); na₂-ATP (2); na₃-GTP (0.3); နှင့် Koh နှင့်အတူသော pH 7.2-7.3 မှချိန်ညှိ။ Chat immunoreactivity များအတွက်အကဲဖြတ်ခံရဖို့မှတ်တမ်းတင်ထားသောအာရုံခံအဘို့, 0.3% biocytin အဆိုပါ pipette ဖြေရှင်းချက်တွင်ထည့်သွင်းခဲ့ပါတယ်နှင့်အာရုံခံ intracellular အကြောင်းအရာများကို၏ dilution minimize လုပ်ဖို့ခေတ္တ (~ 5 မိ) မှတ်တမ်းတင်ခဲ့တယ်။ Pipette ခုခံ ~ 3-5 MΩဖြစ်ခဲ့သည်။ အသံသွင်းထားတဲ့ Axopatch 200B အသံချဲ့စက် (Molecular ဖုန်းများအတွက်, Sunnyvale, CA) ကို အသုံးပြု. ရယူခဲ့ကြသည်နှင့်အနိမ့် pass 2 kHz မှာ filtered ။ ChIs တည်ထောင်ရန် electrophysiological စံတို့ကဖော်ထုတ်ခဲ့ကြသည်²⁸; အများဆုံးကနဦးလုပ်သူများတက်ကြွခဲ့ကြပေမယ့်လှုပ်ရှားမှုပြင်ဆင်ရန်မှာအပြီး variable လျော့။ (ရလဒ်များကိုကြည့်ပါ) သို့သော်လက်ရှိဆေးထိုးဖို့တုန့်ပြန်အချိန်ကျော်ယေဘုယျအားဖြင့်ကြံ့ခိုင်ခြင်းနှင့်ကိုက်ညီခဲ့သောကြောင့် Chi စိတ်လှုပ်ရှားအပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုစုံစမ်းစစ်ဆေးရန်အသုံးပြုခဲ့သည်။ a chi ပြင်ဆင်မီဒီတုန့်ပြန် InsRs နှင့် IGF-1Rs ၏အခန်းကဏ္ဍကိုဆနျးစစျဖို့စမ်းသပ်ချက်များတွင် HNMPA သို့မဟုတ် PPP ပါတီတစ်ခုခုမှာအနည်းဆုံး 20 မိလျှောက်ထားခဲ့သည်။ အချို့သောဆဲလ်တွေထဲမှာ, တိုး 16 မိသို့မဟုတ်ရှည်သည်အထိအကျယ်ချဲ့မဟုတ်ခဲ့ပေမယ့်တစ်ဦးတည်းအင်ဆူလင်၏အကျယ်ချဲ့သက်ရောက်မှုပုံမှန်အားဖြင့်, ထိတွေ့မှု၏ ~ 50 မိပြီးနောက်လေ့လာတွေ့ရှိခဲ့ကြသည်။ ထိုမှတပါး, PPP ပါတီတှငျမှတျတမျးတငျထားသလေးခြောက်ယောက်တွင် neuron အတွက်, အင်ဆူလင်မှပြန်လည်ထူထောင်ခြင်းနှင့်ဆူးအရေအတွက်ကစတင်ကျော်လွန်မတိုင်မီဆူးအရေအတွက်ကနဦးကျဆင်းခြင်းစေ၏။ အကျိုးဆက်အားလုံးစမ်းသပ်ချက်အတွက်, အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုအင်ဆူလင်လျှောက်လွှာမတိုင်မီချက်ချင်း evoked spikes ၏နံပါတ်နှင့်အတူဆူးအရေအတွက်ကိုအပေါ်အများဆုံးအကျိုးသက်ရောက်နှိုင်းယှဉ်ခြင်းဖြင့် quantified ခဲ့သည်။ အထွတ်အထိပ်အကျိုးသက်ရောက်မှုကိုရောက်ရှိရမည့်အချိန်အတွက်သိသာကွာခြားချက်အချပ်များတွင်မှတ်တမ်းတင်ထားသောဆဲလ်၏အတိမ်အနက်ကိုအပါအဝင်အချက်များစွာတစ်အရေအတွက်, ရောင်ပြန်ဟပ်နိုင်ဘူး။ Evoked အရေးယူအလားအလာကိုလည်းနှိုင်းယှဉ်အချိန်အချက်များမှာအင်ဆူလင်၏မရှိခြင်းအတွက် ChIs တှငျမှတျတမျးတငျထားသခဲ့ကြသည်။

high-performance ကိုအရည် Chromatography

ကြွက် striatal ချပ် (400-μmအထူ) ၏ DA အကြောင်းအရာလြှပျစစျထောက်လှမ်းနှင့်အတူ high-performance ကိုအရည် Chromatography သုံးပြီးဆုံးဖြတ်ထားခဲ့ပါတယ်⁵⁸။ အချပ်အားလုံးအတွက် aCSF အတွက် 30 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်မှာ 32 မိဘို့ equilibrated ခဲ့ကြသည်, နှင့်အခြားသော 60 သို့မဟုတ် 32 nm အင်ဆူလင်နှင့်အတူ aCSF နွေးထွေးစွာရှိနေပြီးနေစဉ်တစ်စုံနှုန်းပြီးတော့တဦးတည်းအချပ် aCSF အတွက် 10 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်မှာနောက်ထပ် 30 မိဘို့နွေးထွေးစွာရှိနေပြီးခဲ့သည်။ အစားအသောက်များတွင်အုပ်စုကိုနှိုင်းယှဉ်ဘို့, striatal တစ်ရှူး 30-60 မိ Post-ပြန်လည်နာလန်ထူအကြားစုဆောင်းခဲ့သည်။ -7 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်မှာသိမ်းဆည်းထားပိုလျှံ aCSF ဂရုတစိုက်ချပ်ကနေဖယ်ရှားခဲ့ပါတယ်ပေါက်ဖွားအောက်ပါ, striatal တစ်ရှူး (10-80 မီလီဂရမ်) ၏နမူနာ, အလေးချိန်ခဲ့သည်ခြောက်သွေ့တဲ့ရေခဲပေါ်အေးခဲပြီးတော့ထို့နောက်မှာသိမ်းဆည်းထား။ ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာ၏နေ့တွင်, နမူနာအာဂွန်နှင့်အတူ deoxygenated, ရေခဲ-အအေး, eluent အတွက် sonicated ခဲ့ကြသည်⁵⁸, 2 မိများအတွက် microcentrifuge, နှင့် HPLC ကော်လံ (BAS အနောက် Lafayette, IN) ပေါ်သို့တိုက်ရိုက်ထိုးသွင်းသည့် supernatant အတွက်ပတ်ချာလည်; အဆိုပါ detector Ag / AgCl နှိုင်းယှဉ် 0.7 V ကိုမှာသတ်မှတ်ထားတဲ့ glassy ကာဗွန်လျှပ်ကူးပစ္စည်းဖြစ်ခဲ့သည်။

Immunohistochemistry

immunohistochemical တံဆိပ်ကပ်ခြင်းအဘို့, ကြွက်ဆိုဒီယမ် pentobarbital (50 မီလီဂရမ်ကီလိုဂရမ်နှင့်အတူ anaesthetized ခဲ့ကြသည်^-1, ip), ထို့နောက် (154 MM ဖော့စဖိတ်ကြားခံ, သော pH 10) တွင် 7.2 MM NaCl ဒီ PBS အတွက် 4% paraformaldehyde အားဖြင့်နောက်တော်သို့လိုက် PBS နှင့်အတူ transcardially perfused; ဦးနှောက်ကိုဖယ်ရှားခဲ့ကြသည်နှင့်အ Coronal အပိုင်း (20 μm) ဖြတ်သမားရိုးကျလုပ်ငန်းများ၌ခဲ့ကြသည်^{27, 59}။ နဲ့ Immunofluorescence ပုံရိပ်တွေတစ်ဦး× 800 သုံးပြီးပြောက် software ကို (Diagnostic တူရိယာ Inc က) ကထိန်းချုပ်ထားတဲ့ဒစ်ဂျစ်တယ်ကင်မရာတပ်ဆင်ထားကာ Nikon ကင်မရာလေး 100 confocal ဏုနှင့်အတူရရှိခဲ့ကာ× 1.4 ရည်ရွယ်ချက် (ဂဏန်းကို aperture = 510) ကို အသုံးပြု. သို့မဟုတ်တစ် Zeiss LSM 63 confocal ဏုနှင့်အတူခဲ့ကြသည် ရည်ရွယ်ချက် (ဂဏန်းကို aperture = 1.2) ။ အဆိုပါလေဆာအာဂွန် (488 nm), သူ / ဗိုလ်ချုပ်ကြီးနေဝင်း (543 nm) နှင့်သူ / ဗိုလ်ချုပ်ကြီးနေဝင်း (633 nm) တို့ဖြစ်သည်။ တစ်ခုချင်းစီကိုလေဆာများအတွက်သင့်လျော်သော filter များဟာ confocal ဏု software ကိုရွေးချယ်ခဲ့ကြသည်။ အတွက်ရွေးချယ်ထားသောရည်မှန်းချက်အသုံးနှင့်ပုဒ်မအထူတွေနဲ့မတူညီပေါက်ကိုဖောက်ပေးထားတယ်အရွယ်အစား z-stack မျိုးဆက်; ကျနော်တို့ software (ပုံမှန်အား 30 μm) ကညွှန်ပြသည့်အကောင်းဆုံးပေါက်ကိုဖောက်ပေးထားတယ်တန်ဖိုးကိုရွေးချယ်ခဲ့သည်။ နောက်ဆုံးပုံရိပ်တွေကို Adobe Photoshop ကို 7.0 သုံးပြီးလုပ်ငန်းများ၌နှင့်အတူဒစ်ဂျစ်တယ်ဖိုင်များ, deconvolution software ကို (AutoQuant Imaging) နဲ့ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခဲ့ကြသည်။ အားလုံးပုံရိပ်တွေအရောင်အဝါများနှင့်ဆနျ့ကငျြဘအဘို့အချိန်ညှိကြသည် ဟူ. ၎င်း, ထိုကဲ့သို့သောချိန်ညှိပုံသဏ်ဌာနျအပေါငျးတို့သအစိတ်အပိုင်းများမှတစ်ပုံစံတည်းကိုဖန်ဆင်းခဲ့သည်။ polyclonal AB152 ယုန် Anti-TH (1: 800) နှင့် monoclonal MAB318 mouse ကိုဆန့်ကျင် TH (1: 500) (Chemicon ကနေနှစ်ဦးစလုံး) Striatal DA axon နှစ်ခု TH ပဋိသုံးပြီးဖော်ထုတ်ခဲ့ကြသည်။ သုံး InsR ပဋိအသုံးပြုခဲ့ကြသည်: SC-57342 နှင့် SC-09 (1: 100; Santa Cruz), နှင့် PP5 (Pfizer ထံမှလက်ဆောင်တစ်ခု) ။ တစ်ဦးချင်းစီ၏သီးခြားယခင်ကသရုပ်ပြခဲ့ပြီး^{60, 61}နှင့်သက်ဆိုင်ရာပိတ်ဆို့ခြင်း peptide ၏ရှေ့တော်၌ပဋိ SC-57342 သို့မဟုတ် PP5 နှင့်အတူ immunolabelling ၏မရှိခြင်းအားဖြင့်ပစ္စုပ္ပန်လေ့လာမှုများအတွက်အတည်ပြုခဲ့သည်ခဲ့သည်။ Chat antibody ကို AB144 (1: 200; Millipore) ကြီးနှင့်ဓါတ် Vector (1: 200) မှဖြစ်ခဲ့သည်။ အသုံးပြုသောက Secondary ပဋိမြည်း Anti-ယုန် Alexa 488 (Invitrogen), သို့မဟုတ်မြည်း Anti-ယုန် Cy2 (Jackson ကဓါတ်ခွဲခန်း, ဘားဆိပ်ကမ်း, ME), မြည်း Anti-ဆိတ်သငယ်ကို Cy3 (ဂျက်ဆင်) နှင့်မြည်း Anti-mouse ကို Cy5 (ဂျက်ဆင်) တို့ဖြစ်သည်။

TH + axon အတွက် InsRs ပူးတွဲ-local အကဲဖြတ်ဖို့ကျနော်တို့ Kir6.2, ATP-အထိခိုက်မခံ K သည်၏အပေါက်-ဖွဲ့စည်း subunit ၏ရှေ့မှောက်တွင်ကိုသိရှိနိုင်ဖို့ယခင်ကဖော်ပြထားနည်းလမ်းများအသုံးပြုခဲ့⁺ DA axon အတွက်လိုင်းများ²⁷။ Puncta ကိုယ်စားပြု InsRs TH immunoreactivity နှင့်အတူ superimposition အခွင့်အလမ်းအားဖြင့်အချို့သောဒီဂရီမှဖြစ်ပေါ်စေခြင်းငှါညွှန်း, ပြုပြင်ပုံရိပ်တွေတလျှောက်လုံးဖြန့်ဝေခဲ့ကြသည်။ ဒီယူဆချက်ကိုစမ်းသပ်ဖို့ကျနော်တို့နှစ်ဦးကိုကြွက်များကနေကဏ္ဍများ immunolabelled သုံး NAc အတွက် 42 လွတ်လပ်သောနယ်ပယ်များတွင် InsR / TH superimpositions ရေတွက်။ အဆိုပါ InsR ဒီဂျစ်တယ်ဖိုင်တွေပြီးတော့လက်ယာရစ်° 90 လှည်နှင့်ရေတွက်ထပ်ခါတလဲလဲကြသည် ဟူ. ၎င်း, လည်ပတ်အများဆုံးနယ်ပယ်များတွင် TH နှင့်အတူပူးတွဲဒေသခံစံနှုန်းကိုက်ညီကြောင်း InsR puncta ၏နံပါတ် (ရလဒ်များကိုကြည့်ပါ) ယုတ်လျော့။ လည်ပတ်အတူ superimpositions ၏နံပါတ်အတွက်လျော့နည်း²⁷ DA axon နှင့်ဆက်စပ်တစ်ဦးချင်းစီ striatal လယ်ပြင်၌ InsR puncta ၏အချိုးအစားညွှန်ပြ။

အသွေးသည်ဂလူးကို့စများနှင့်အင်ဆူလင် Elisa

ပင်စည်သည်အသွေးအချပ်လေ့လာမှုများအဘို့အယင်းသို့ခေါင်းဖြတ်စီရင်၏အချိန်ကစုဆောင်းခဲ့သည်။ အသွေးသည်ဂလူးကို့စတဲ့စံသောအသွေးကိုဂလူးကို့စမော်နီတာနှင့်အတူချက်ချင်းဆုံးဖြတ်ထားခဲ့ပါတယ်။ အင်ဆူလင်အဘို့, အပိုဆောင်းသောအသွေး EDTA ပါဝင်သောပြွန်ထဲမှာစုဆောင်းခံခဲ့ရခြင်းနှင့် 1,500 မှာ centrifugedg 15 မိသည် ဖြစ်. , supernatant (ပလာစမာ) တစ်ခု ALPCO Rat အင်ဆူလင် Elisa ကိရိယာအစုံနှင့်အတူအပြောင်းအလဲနဲ့သည်အထိစုဆောင်း -80 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်မှာသိမ်းဆည်းထားခဲ့ပါတယ်။

Cannula နေရာချထားခြင်းနှင့် histological စိစစ်အတည်ပြု

အစပိုင်းတွင် 350-425 ဂရမ်အလေးချိန်လေးဆယ်တဦးတည်းအရွယ်ရောက်ပြီးသူအထီး Sprague-Dawley ကြွက် (Taconic နှင့်ချားလ်စ်မြစ်) ketamine (100 မီလီဂရမ်ကီလိုဂရမ်နှင့်အတူ anaesthetized ခဲ့ကြသည်^-1, ip) နှင့် xylazine (10 မီလီဂရမ်ကီလိုဂရမ်^-1, stereotaxically နှစ်ခုနာတာရှည် indwelling လမ်းညွှန် cannulae (26 gauge) နဲ့ကိုထညျ့သှငျး ip) နှင့် NAc medial shell ကိုအတွက်ပြုတ်ရည်က်ဘ်ဆိုက်များမှမြန်မာနိုင်ငံသ 2.0 မီလီမီတာ dorsal ထားရှိ⁶² (1.6 မီလီမီတာ anterior bregma ရန်, 2.1 မီလီမီတာအဆိုပါ sagittal suture မှ lateral, အကြံပေးချက်များ 8 ဦးခေါင်းခွံမျက်နှာပြင်ဖို့ midline, 5.8 မီလီမီတာ ventral ဆီသို့ဦးတည်° angled) ။ ကြွက် banamine (2.0 မီလီဂရမ်ကီလိုဂရမ်ပေးခဲ့^-1, မေ့ဆေးနဲ့ပြီးနောက်နံနက် မှစ. ပြန်လည်နာလန်ထူအောက်ပါ post-ခွဲစိတ် analgesic အဖြစ်အရေပြားအောက်ဆုံး) ။ တစုံတယောက်ကိုရက်သတ္တပတ်ခွဲစိတ်ကုသပြီးနောက်ကြွက် FR အပေါ်ထားရှိခဲ့ကြသည် (အထကျဖျောပွထားသ) နှင့်လေ့လာမှု၏ကျန်ရှိသောအဘို့မိမိတို့ Post-ခွဲစိတ်ပြန်လည်နာလန်ထူအလေးချိန်၏ 80% မှာထိန်းသိမ်းထားနိုင်ခဲ့ပါတယ်။ Cannula နေရာချထားအပြုအမူစမ်းသပ်ပြီးစီးပြီးနောက် histologically ဆုံးဖြတ်ခဲ့တယ်။ တစ်ခုချင်းစီကိုကြွက် CO နှင့်အတူသေဆုံးခဲ့ရသည်₂, decapitated နှင့် ဦး နှောက်> 10 နာရီများအတွက် 48% buffered formalin အတွက်ဖယ်ရှားခြင်းနှင့် fixed ။ Reichert-Jung Cryostat တွင်အအေးခံ coronal အပိုင်းများ (အနံ ၄၀ μmအထူ) ကိုဖြတ်ပစ်လိုက်သည်။ gelatin coated glass slides များပေါ်တွင်တပ်ဆင်ထားပြီး cresyl violet ဖြင့်စွန်းထင်းသည်။ ကြွက်တစ်ကောင်မှအချက်အလက်များကို cannulae နှစ်မျိုးလုံးသည် medial NAc shell အတွင်း၌သာသုံးသည်⁶² (အခွံ / Core ဒါမှမဟုတ်အခွံ / olfactory tubercle နယ်စပ်အပါအဝင်) (နောက်ဆက်တွဲပုံ။ 5); ဤအသတ်မှတ်ချက်ပေါ်အခြေခံပြီးနှစ်ဦးကြွက်နောက်ဆုံးခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှဖယ်ထုတ်လိုက်ခဲ့ကြသည်။

အရသာ-preference ကိုအေးစက် Pre-ထိတွေ့မှု

ကြွက်အစည်းအဝေးများအကြားတစ်ဦး 30-ဇကြားကာလနှင့်အတူရေထဲမှာ% ဆိုဒီယမ် saccharin (Sigma) 0.2 မှ (အိမ်မှာလှောင်အိမ်၌) နေ့ချင်းညချင်းတဦးတည်းကိုလက်ခံရရှိနှင့် (စမ်းသပ်ခြင်းအခန်း) Pre-ထိတွေ့ခြောက် 48-မိ-နှုန်းနေ့အစည်းအဝေးများ။ ကြွက်ပြီးတော့ရေထဲမှာ 5% unsweetened စပျစ်သီးဒါမှမဟုတ်ချယ်ရီ Kool-Aid ကို (Kraft Foods) တွင် 0.2% ဆိုဒီယမ် saccharin မှထိတွေ့မှုနှစ်ခု 0.05-မိ-နှုန်းနေ့အစည်းအဝေးများလက်ခံရရှိခဲ့သည်။ ပထမဦးဆုံး Kool-Aid ကို Pre-ထိတွေ့ session များအတွက်, ထိုကြွက်၏ထက်ဝက်ချယ်ရီ-အနံ့ဖြေရှင်းချက်ကိုလက်ခံရရှိနှင့်အခြားတစ်ဝက်စပျစ်သီးအနံ့ဖြေရှင်းချက်ကိုလက်ခံရရှိခဲ့သည်။ အဆိုပါအရသာအားလုံးကြွက်တစ်ဦးချင်းစီအရသာနမူနာကြောင်းသေချာစေရန်ဒုတိယ Kool-Aid ကို Pre-ထိတွေ့ session တစ်ခုအပေါ်ပြောင်းပြန်ခဲ့ကြသည်။ စားသုံးမှုအားလုံး Pre-ထိတွေ့အစည်းအဝေးများများအတွက်တိုင်းတာခဲ့သည်။ စမ်းသပ်ခြင်းအခန်းများလတ်ဆတ်တဲ့အိပ်ယာနှင့်အတူရှင်းရှင်းလင်းလင်းပလပ်စတစ်အိတ်များဖြစ်ကြသည်။ အားလုံး Pre-ထိတွေ့အစည်းအဝေးများအဘို့, ကြွက်အခနျးနှစ်ဖက်စလုံးတွင်တူညီသောဖြေရှင်းချက်မှဝင်ရောက်ခွင့်ရှိခဲ့ပါတယ်။ အဆိုပါနေ့ချင်းညချင်းကို pre-ထိတွေ့ session များအတွက် မှလွဲ. အားလုံးအစည်းအဝေးများမဆိုလေ့ကျင့်ရေးသို့မဟုတ်စမ်းသပ်ခြင်းမပြုမီ 30-မိလေ့ကာလနှင့်အတူတစ်ဦးအမူအကျင့်လုပ်ထုံးလုပ်နည်းခန်းထဲမှာကောက်ယူခဲ့ကြသည်။

one-ပုလင်းအေးစက်

ယခင်လေ့လာမှုများ ventromedial hypothalamus သို့ InsAb ၏ microinjection အပြုအမူနှင့် glucagon လျှို့ဝှက်ချက်များကိုအစာကျွေးအပေါ်အင်ဆူလင်၏အကျိုးသက်ရောက်မှုပိတ်ဆို့နိုင်သည်ကိုပြသကြ^{63, 64}။ ဤတွင်ကျနော်တို့အစားအစာရွေးချယ်မှု၏အားဖြည့်အတွက်အင်ဆူလင်တစ်ဖြစ်နိုင်တဲ့အခန်းကဏ္ဍအကဲဖြတ်ရန်ဒီချဉ်းကပ်နည်းကိုအသုံးပြုခဲ့သည်။ ကြွက် Semi-ကျပန်းပျမ်းမျှအား Pre-ထိတွေ့စားသုံးမှုအုပ်စုနှစ်စုသို့အသံအတိုးအကျယ်, ထိန်းချုပ်မှုသို့မဟုတ်စမ်းသပ်ဆဲ (InsAb) အပေါ်အခြေခံပြီးတာဝန်ကျတယ်။ သို့မဟုတ် IgG (Abcam ab137; 2.7 μgμl; ထိန်းချုပ်မှုအုပ်စု, ကြွက် (10 MM ဖော့စဖိတ်ကြားခံအတွက် 81032 MM NaCl နှင့် 0.5 MM KCl microinjection PBS) မော်တော်ယာဉ်ကိုလက်ခံရရှိ^-1 အခြားအရသာဖြေရှင်းချက်စားသုံးရှေ့တော်၌ထိုနှစ်ခုအရသာဖြေရှင်းချက်တစ်ဦးနှင့်တစ်ဦးပြောင်လှောင် microinjection စားသုံးမတိုင်မီ NAc shell ကိုအတွက် microinjection) ကိုလက်ခံရရှိသည်အတိုင်း, PBS ၌တည်၏။ စမ်းသပ်အုပ်စု, ကြွက် InsAb (Abcam ab46707 ၏ NAc shell ကို microinjection လက်ခံရရှိ; 0.5 μgμl၏ 1 μl^-1 PBS အတွက်တဦးတည်းအရသာဖြေရှင်းချက်မှထိတွေ့မှုနှငျ့အခွားမှလှောင်ပြောင် microinjection ကြိုတင်ထိတွေ့မှုမပြုမီ) ကိုလက်ခံရရှိပါတယ်။ microinjections ၏စုစုပေါင်းအရေအတွက်ကလေးယောက်ကန့်သတ်ထားခဲ့ပါတယ်ဒါကြောင့်အရည် microinjection နှင့်လှောင်ပြောင် microinjection အကြား Alternative နှင့်အတူဘာသာရပ်များနှစ်စုံဖြင့် microinjection site ကိုမှာ sensitivity ကို၏ဖြစ်နိုင်သောတစ်ရှူးပျက်စီးမှုနှင့်အရှုံးအသေးအဖွဲ, အသုံးပြုခဲ့ကြသည်⁶⁵။ အရည် microinjection များအတွက်ထိန်းချုပ်မှုဖြေရှင်းချက်သို့မဟုတ် InsAb 30 မီလီမီတာတိုးချဲ့ထားတဲ့ဖြည်းညှင်းစွာသက်ရောက်ရေနှင့် 50-gauge injector cannulae မှအခြားအဆုံးမှာဖြည့် 5 μl Hamilton ကဆေးထိုးပိုက်မှတဦးတည်းအဆုံးမှာပူးတွဲ PE-31 ပြွန်နှစ်ခု 2.0-စင်တီမီတာအရှည်သို့တင်ဆောင်ခဲ့သည် ယင်းကိုထညျ့သှငျးလမ်းညွှန်များထက်ကျော်လွန်။ အဆိုပါ 0.5 μlပြုတ်ရည် volumes ကို 90 μl s ကိုတစ်မှုနှုန်းမှာ 0.005 s ကိုအပ်ခဲ့သည်^-1; အဆိုပါ injector ထို့နောက် injector အဆိုပါ stylet ဖြင့်အစားထိုးခဲ့သည်ပျံ့နှံ့များအတွက်အချိန်ခွင့်ပြု ~ 60 s အတွက်နေရာအရပ်၌ကျန်ကြွင်းခဲ့သည်။

ကြွက်ဟာ microinjection သို့မဟုတ်လှောင်ပြောင် microinjection ပြီးစီး၏ 2 မိအတွင်းမှာအပြုအမူအခန်းများကိုတိုက်ရိုက်လွှဲပြောင်းပေးခဲ့သည်။ အေးစက်ဖြေရှင်းချက် 0.2% ဆိုဒီယမ် saccharin, 0.05% unsweetened စပျစ်သီးဒါမှမဟုတ်ချယ်ရီ Kool-Aid ကိုနှင့် 0.8% ဂလူးကို့စပါရှိသည်။ ဖြေရှင်းချက် access ကို session တစ်ခုနှုန်း 30 မိဖို့ကန့်သတ်ခဲ့သည်။ သောက်သုံးရေရရှိမှုနှင့်အတူအခနျးတွဲအရသာနှင့်ဘေးထွက် Semi-ကျပန်းအုပ်စုတစ်ခုချင်းစီအတွက်တာဝန်ပေးအပ်ခြင်းနှင့် counterbalanced ခဲ့ကြသည်။ microinjections အကြားကြားကာလရှစ်အေးစက်အစည်းအဝေးများတစ်ဦးစုစုပေါင်းအဘို့အပြုတ်ရည်များနှင့်ပြောင်လှောင်အစည်းအဝေးများအကြားပြောင်းအနည်းဆုံး 72 ဇဖြစ်ခဲ့သည်။

Two-ပုလင်း preference ကိုစမ်းသပ်

လေးဆယ်ရှစ်နာရီနောက်ဆုံးအေးစက် session တစ်ခုပြီးနောက်ကြွက်နှစ်ဦးစလုံးအေးစက်အရသာမှတစ်ပြိုင်နက်သုံးစွဲနိုင်နှင့်အတူစမ်းသပ်အခန်းနေရာချကြသည် ဟူ. ၎င်း, ဖြေရှင်းချက်ဂလူးကို့စခြင်းမရှိဘဲ, 0.2% စပျစ်သီးဒါမှမဟုတ်ချယ်ရီ Kool-Aid ကိုအတွက် 0.05% ဆိုဒီယမ် saccharin ခဲ့ကြသည်။ စမ်းသပ်ခြင်း 2 ရက်ပေါင်း (တစ်နေ့လျှင် 60 မိ) ကျော်ဖြစ်ပွားခဲ့သည်။ အရက်သောက်ပြွန်လှောင်ပြောင်-တွဲများသို့မဟုတ်ပြုတ်ရည်-တွဲဖြေရှင်းချက်များ၏အနေအထားတစ်ခုချင်းစီကိုကြွက်လှောင်အိမ်၏နှစ်ဖက်စလုံးတွင်အသီးအသီးဖြေရှင်းချက်၏စားသုံးမှုများအတွက်စမျးသပျခံခဲ့ရကြောင်းသေချာစေရန် alternated ခဲ့သည်။ အသီးအသီးအနံ့ဖြေရှင်းချက်၏စားသုံးမှု preference ကိုဆုံးဖြတ်ရန်နှစ်ခုစမ်းသပ်နေ့ရက်ကာလအဘို့ပျမ်းမျှခဲ့သည်။

[³H ကို] InsAb ထိရောက်မှုအကဲဖြတ်ရန် striatal synaptosomes အတွက် DA လွှာမှ

Striatal synaptosomes^{21, 66} NAc (shell ကိုနှင့်အဓိက) နှင့် CPU ခွဲဖြာနှင့်သီးခြားစီကိုပြင်ဆင်အတူ AL ကြွက် (အထီး, 350-400 ဆ) ကနေကိုပြင်ဆင်ခဲ့ကြသည်။ တစ်ခုချင်းစီကိုဒေသကနေတစ်ရှူးမော်တာ-မောင်းနှင် Teflon pestle နှင့်အတူတစ်ဖန်တစ်သားတည်းဖြစ်တည်ခြင်းအတွက်ရေခဲ-အအေး 15 M က sucrose ဖြေရှင်းချက်၏ 0.32 volumes ကိုအတွက် homogenized ခဲ့သည်; လက်မဆေးနှင့် centrifugal ပြီးနောက်နောက်ဆုံးတောင့်ရေခဲ-အအေး 0.32 M က sucrose အတွက် re-ဆိုင်းငံ့ခဲ့သည်^{21, 66}။ အဆိုပါ [စတင်ခင်မှာ³H ကို] DA လွှာမှ assay⁶⁶, လွှာမှကြားခံ၏ 180 μlစုစုပေါင်း volume ထဲမှာ synaptosomal aliquots 15 nm အင်ဆူလင်၏ရှေ့မှောက်တွင်သို့မဟုတ်မရှိခြင်းအတွက်မော်တော်ယာဉ် (PBS) တွင်သို့မဟုတ် InsAb (30 နောက်ဆုံး dilution 30) တွင် 1 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်မှာ 500 မိများအတွက် shaker နွေးထွေးစွာရှိနေပြီးခဲ့ကြသည် , IgG (နောက်ဆုံး dilution 1: 500) တွင်သို့မဟုတ်မော်တော်ယာဉ်၌တည်၏။ (mm အတွက်) တွင်ပါရှိသောလွှာမှကြားခံ: NaCl (122); na₂HPO₄ (3); nah₂PO₄ (15); KCl (5); MgSO₄ (1.2); ဂလူးကို့စ (10), CaCl₂ (1); nialamide (0.01); tropolone (0.1); နှင့်အက်စ်ကောဘစ်အက်ဆစ် (0.001), သော pH 7.4 ။ ၏လွှာမှ [³H ကို] DA လျှင်မြန်စွာ DA (20-96 μM) နှင့် [၏ကွဲပြားပြင်းအားနှင့်အတူ 0.003-ကောင်းစွာအပြားသို့တစ်ခုချင်းစီ synaptosomal ရပ်ဆိုင်းမှု၏μl 1.0 dispensing ခြင်းဖြင့်အစပျိုးခဲ့သည်³H ကို] DA (5 nm); 5 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်မှာပန်းကန်-shaker အတွက် 25 မိပြီးနောက်, လွှာမှအအေး, လျင်မြန်သောလေဟာနယ် filtration အားဖြင့်ရပ်စဲခဲ့သည်⁶⁶။ ကောင်းစွာနှုန်းအရေအတွက် pmoles ကူးပြောင်းခဲ့ကြသည်, ထို့နောက်တစ်မိနစ်လျှင်စုစုပေါင်းပရိုတိန်း၏ MG မှတညျ့။ အားလုံး assay triplicate အတွက်ဖျော်ဖြေခြင်းနှင့်အနည်းဆုံးလေးကြိမ်ထပ်ခါတလဲလဲကြသည် ဟူ. ၎င်း, V_{max ကို} နှင့် K_m Biosoft Kell Radlig software ကို (ကိန်းဘရစ်, ဗြိတိန်) ကို အသုံးပြု. တွက်ချက်ခဲ့ကြသည်။

စာရင်းအင်းခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာ

± sem ဆိုလိုတယ်အဖြစ်ဒေတာများပေးထားကြသည်; အရေးပါမှုအတူတွဲထားသောသို့မဟုတ် unpaired ကျောင်းသားရဲ့သုံးပြီးအကဲဖြတ်ခဲ့သည် t-tests သို့မဟုတ် ANOVA, မဟုတ်ရင်ညွှန်ပြမဟုတ်လျှင်။ voltammetry ဒေတာအဘို့, n အသံဖမ်းက်ဘ်ဆိုက်များအရေအတွက်တစ်ဦး striatal မဟာမဲခေါင်ဒေသတွင်းအတွင်း site ကို-to-site ကိုအမျိုးမျိုးပြောင်းလဲအချင်းချင်းတိရိစ္ဆာန်သို့မဟုတ်အချင်းချင်းအချပ်အမျိုးမျိုးပြောင်းလဲထက် သာ. ကြီးမြတ်ကြောင်းကိုပေးထားဖြစ်ပါသည်^{30, 32, 55, 56}; တိရိစ္ဆာန်အရေအတွက်ကိုတစ်ခုချင်းစီကိုဒေတာအစုများအတွက်မှတ်ချက်ပြုသည်။ အဆိုပါ EC₅₀ အထွတ်အထိပ်-evoked အပေါ်အင်ဆူလင်နှင့်နီကိုတင်း၏အကျိုးသက်ရောက်မှု [DA] များအတွက်_o Prism ကို 6.0 (GraphPad ဆော့ဝဲ Inc ကို,, La Jolla, CA) ကို အသုံးပြု. တွက်ချက်ခဲ့သည်။ electrophysiological ဒေတာအဘို့, စာရင်းအင်းအရေးပါမှုကိုအတူတွဲထားသောသုံးပြီးအကဲဖြတ်ခဲ့သည် tPrism ကို 6.0, ဒါမှမဟုတ် SAS 9.3 အတွက်ရောထွေး Two-လမ်း ANOVA (SAS Institute မှ Inc ကို, cari, မြောက်ကယ်ရိုလိုင်းနား) တွင် -tests တစ်ခုသို့မဟုတ် Wilcoxon စမ်းသပ်။ အရသာ-preference ကိုအေးစက်အတွက်အင်ဆူလင်ပါဝင်ပတ်သက်မှု၏အကဲဖြတ်ဘို့နှစ်ခုအပြည့်အဝလေ့လာမှုများအသုံးပြုသောယာဉ်ကုသမှု၏ချွင်းချက်နှင့်အတူတူညီခဲ့ protocol များကို အသုံးပြု. ပြီးစီးခဲ့ကြသည်။ ပထမဦးဆုံးလေ့လာမှုမှာတော့ 10 ကြွက် PBS နှင့် 9 ၏မော်တော်ယာဉ်တာဟာ InsAB ၏တာဟာလက်ခံရရှိကိုလက်ခံရရှိခဲ့သည်။ ဒုတိယလေ့လာမှုမှာတော့ 10 ကြွက် IgG နှင့် 10 ၏မော်တော်ယာဉ်တာဟာ InsAb ၏တာဟာလက်ခံရရှိကိုလက်ခံရရှိခဲ့သည်။ ပြုတ်ရည်-အေးစက်အစည်းအဝေးများကာလအတွင်းနှစ်ခုမော်တော်ယာဉ်အုပ်စုများ (PBS သို့မဟုတ် IgG) အကြားမျှသိသာထင်ရှားသောခြားနားချက် (ရှိခဲ့သည်F₁₉ပြုတ်ရည်-အေးစက် session တစ်ခုအပေါ်အထပ်ထပ်အစီအမံ) နဲ့သို့မဟုတ်စမ်းသပ်မှုမှာ = 0.619, ရောထွေး Two-လမ်း ANOVA) (F₁₉အရသာပေါ်အထပ်ထပ်အစီအမံတွေနဲ့ = 0.012, Two-လမ်းရောထွေး ANOVA) ။ အကျိုးဆက်နှစ်ခုစမ်းသပ်ချက်ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာများအတွက်ပေါင်းစပ်ခဲ့သည်။ ဒီခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာများအတွက်တစ်ဦး 2 × 4 (ပြုတ်ရည်-အေးစက်နေ့၌အထပ်ထပ်အတိုင်းအတာနှင့်အတူ) ANOVA ရောနှောကာကွယ်ထားသဖြင့်နောက်တော်သို့လိုက်, အေးစက်နေစဉ်အတွင်း microinjection ကုသမှု၏သက်ရောက်မှုကိုဆုံးဖြတ်ရန်အသုံးပြုခဲ့သည် t-tests (အေးစက်အစည်းအဝေးများ microinjection ကုသမှုစားသုံးမှုအသံအတိုးအကျယ်လျော့နည်းသွားသောဆုံးဖြတ်ရန် tailed တဦးတည်း) ။ အလားတူစိတ်ဖြာလှောင်ပြောင်အေးစက်အစည်းအဝေးများများအတွက်ပြီးစီးခဲ့သည်။ နှစ်ပုလင်းအရသာ-preference ကိုစမ်းသပ်နေစဉ်အတွင်းအေးစက်ကုသမှု၏အကျိုးသက်ရောက်မှုကိုဆုံးဖြတ်ရန်, ဒေတာဖြင့်ကာကွယ်ထားသဖြင့်နောက်တော်သို့လိုက်, (အရသာပေါ်အထပ်ထပ်အတိုင်းအတာနှင့်အတူ) တစ်ဦးရောနှော Two-လမ်း ANOVA သုံးပြီးဆန်းစစ်ခဲ့ကြသည် t-tests (InsAb preference ကိုလျော့နည်းကျဆင်းလိမ့်မည်ဟုသောအယူအဆစမ်းသပ်ဖို့ tailed တဦးတည်း) ။

ဘယ်လိုဤဆောင်းပါးတွင်ကိုးကားရန်: Stouffer, MA et al။ အင်ဆူလင် cholinergic interneurons ကိုသက်ဝင်ခြင်းဖြင့် striatal dopamine လွှတ်ပေးရန်ပိုကောင်းစေပါတယ်နှင့်ဖြင့်ဆုလာဘ်အချက်ပြလိုက်ခြင်း။ နတ်။ ဆက်သွယ်ရေး။ 6: 8543 Doi: 10.1038 / ncomms9543 (2015) ။

1. ဦး နှောက်တွင်းရှိ Schulingkamp, ​​RJ, Pagano, TC, Hung, D. & Raffa, RB အင်ဆူလင် receptors နှင့်အင်ဆူလင်လုပ်ဆောင်ချက် - ပြန်လည်သုံးသပ်ခြင်းနှင့်လက်တွေ့သက်ရောက်မှုများ။ အာရုံကြော။ ဇီဝဗေဒ။ ဗျာ 24, 855-872 (2000) ။
   • CAS
   • ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
   • PubMed
   • ဆောင်းပါး
   • Show ကိုအခြေအနေတွင်
2. Gerozissis, K. ဦးနှောက်အင်ဆူလင်, စွမ်းအင်နဲ့ဂလူးကို့စ homeostasis; မျိုးဗီဇ, ပတ်ဝန်းကျင်နှင့်ဇီဝဖြစ်စဉ်ရောဂါဗေဒ။ အီးယူအာရ်။ ဂျေ Pharmacol ။ 585, 38-49 (2008) ။
3. CAS
4. PubMed
5. ဆောင်းပါး
6. Show ကိုအခြေအနေတွင်
7. CAS
8. PubMed
9. ဆောင်းပါး
10. Show ကိုအခြေအနေတွင်
11. CAS
12. PubMed
13. ဆောင်းပါး
14. Show ကိုအခြေအနေတွင်
15. CAS
16. PubMed
17. ဆောင်းပါး
18. Show ကိုအခြေအနေတွင်
19. CAS
20. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
21. PubMed
22. ဆောင်းပါး
23. Show ကိုအခြေအနေတွင်
24. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
25. PubMed
26. ဆောင်းပါး
27. Show ကိုအခြေအနေတွင်
28. CAS
29. PubMed
30. ဆောင်းပါး
31. Show ကိုအခြေအနေတွင်
32. Show ကိုအခြေအနေတွင်
33. CAS
34. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
35. PubMed
36. ဆောင်းပါး
37. Show ကိုအခြေအနေတွင်
38. CAS
39. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
40. PubMed
41. ဆောင်းပါး
42. Show ကိုအခြေအနေတွင်
43. CAS
44. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
45. PubMed
46. Show ကိုအခြေအနေတွင်
47. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
48. PubMed
49. ဆောင်းပါး
50. Show ကိုအခြေအနေတွင်
51. CAS
52. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
53. PubMed
54. ဆောင်းပါး
55. Show ကိုအခြေအနေတွင်
56. CAS
57. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
58. PubMed
59. ဆောင်းပါး
60. Show ကိုအခြေအနေတွင်
61. Show ကိုအခြေအနေတွင်
62. CAS
63. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
64. PubMed
65. ဆောင်းပါး
66. Show ကိုအခြေအနေတွင်
67. CAS
68. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
69. PubMed
70. ဆောင်းပါး
71. Show ကိုအခြေအနေတွင်
72. CAS
73. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
74. PubMed
75. ဆောင်းပါး
76. Show ကိုအခြေအနေတွင်
77. PubMed
78. ဆောင်းပါး
79. Show ကိုအခြေအနေတွင်
80. Show ကိုအခြေအနေတွင်
81. CAS
82. PubMed
83. ဆောင်းပါး
84. Show ကိုအခြေအနေတွင်
85. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
86. PubMed
87. ဆောင်းပါး
88. Show ကိုအခြေအနေတွင်
89. CAS
90. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
91. PubMed
92. ဆောင်းပါး
93. Show ကိုအခြေအနေတွင်
94. CAS
95. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
96. PubMed
97. ဆောင်းပါး
98. Show ကိုအခြေအနေတွင်
99. CAS
100. PubMed
101. ဆောင်းပါး
102. Show ကိုအခြေအနေတွင်
103. Show ကိုအခြေအနေတွင်
104. CAS
105. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
106. PubMed
107. ဆောင်းပါး
108. Show ကိုအခြေအနေတွင်
109. CAS
110. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
111. PubMed
112. ဆောင်းပါး
113. Show ကိုအခြေအနေတွင်
114. CAS
115. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
116. PubMed
117. ဆောင်းပါး
118. Show ကိုအခြေအနေတွင်
119. CAS
120. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
121. PubMed
122. ဆောင်းပါး
123. Show ကိုအခြေအနေတွင်
124. PubMed
125. ဆောင်းပါး
126. Show ကိုအခြေအနေတွင်
127. CAS
128. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
129. PubMed
130. ဆောင်းပါး
131. Show ကိုအခြေအနေတွင်
132. CAS
133. PubMed
134. ဆောင်းပါး
135. Show ကိုအခြေအနေတွင်
136. CAS
137. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
138. PubMed
139. ဆောင်းပါး
140. Show ကိုအခြေအနေတွင်
141. CAS
142. PubMed
143. ဆောင်းပါး
144. Show ကိုအခြေအနေတွင်
145. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
146. PubMed
147. ဆောင်းပါး
148. Show ကိုအခြေအနေတွင်
149. Show ကိုအခြေအနေတွင်
150. Show ကိုအခြေအနေတွင်
151. CAS
152. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
153. PubMed
154. ဆောင်းပါး
155. Show ကိုအခြေအနေတွင်
156. CAS
157. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
158. PubMed
159. ဆောင်းပါး
160. Show ကိုအခြေအနေတွင်
161. CAS
162. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
163. PubMed
164. ဆောင်းပါး
165. Show ကိုအခြေအနေတွင်
166. CAS
167. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
168. PubMed
169. ဆောင်းပါး
170. Show ကိုအခြေအနေတွင်
171. CAS
172. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
173. PubMed
174. Show ကိုအခြေအနေတွင်
175. CAS
176. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
177. PubMed
178. ဆောင်းပါး
179. Show ကိုအခြေအနေတွင်
180. PubMed
181. ဆောင်းပါး
182. Show ကိုအခြေအနေတွင်
183. CAS
184. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
185. PubMed
186. ဆောင်းပါး
187. Show ကိုအခြေအနေတွင်
188. CAS
189. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
190. PubMed
191. ဆောင်းပါး
192. Show ကိုအခြေအနေတွင်
193. CAS
194. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
195. PubMed
196. ဆောင်းပါး
197. Show ကိုအခြေအနေတွင်
198. CAS
199. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
200. PubMed
201. ဆောင်းပါး
202. Show ကိုအခြေအနေတွင်
203. Show ကိုအခြေအနေတွင်
204. CAS
205. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
206. PubMed
207. Show ကိုအခြေအနေတွင်
208. Show ကိုအခြေအနေတွင်
209. Show ကိုအခြေအနေတွင်
210. Show ကိုအခြေအနေတွင်
211. CAS
212. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
213. PubMed
214. ဆောင်းပါး
215. Show ကိုအခြေအနေတွင်
216. CAS
217. PubMed
218. ဆောင်းပါး
219. Show ကိုအခြေအနေတွင်
220. CAS
221. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
222. PubMed
223. Show ကိုအခြေအနေတွင်
224. Show ကိုအခြေအနေတွင်
225. CAS
226. PubMed
227. ဆောင်းပါး
228. Show ကိုအခြေအနေတွင်
229. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
230. PubMed
231. ဆောင်းပါး
232. Show ကိုအခြေအနေတွင်
233. Show ကိုအခြေအနေတွင်
234. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
235. PubMed
236. ဆောင်းပါး
237. Show ကိုအခြေအနေတွင်
238. Show ကိုအခြေအနေတွင်
239. CAS
240. ပါကစ္စတန်စစ်ထောက်လှမ်းရေး ISI
241. PubMed
242. ဆောင်းပါး
243. Show ကိုအခြေအနေတွင်
244. Show ကိုအခြေအနေတွင်
245. Vogt, MC & Bruning, JC CNS အင်ဆူလင်အချက်ပြစွမ်းအင်သည် homeostasis နှင့်ဂလူးကို့စ်ဇီဝြဖစ်စဉ်ကိုထိန်းချုပ်သည်။ သန္ဓေသားမှအသက်ကြီးသည်အထိ။ ခေတ်ရေစီးကြောင်း Endocrinol ။ Metab ။ 24, 76-84 (2013) ။
246. ကြွက် ဦး နှောက်ထဲမှာအင်ဆူလင်၏ Havrankova, ဂျေ, Schmechel,,, Roth, ဂျေ & Brownstein, အမ်သတ်မှတ်ခြင်း။ proc ။ Natl Acad ။ သိပ္ပံ ယူအက်စ်အေ 75, 5737-5741 (1978) ။
247. endothelial cells ဖြတ်ပြီးအင်ဆူလင်ကို King, GL & Johnson, အက်စ် Receptor-mediated သယ်ယူပို့ဆောင်ရေး။ သိပ္ပံ 227, 1583-1586 (1985) ။
248. ကြွက်များတွင်အစာရှောင်ခြင်းနှင့် refeeding စဉ် Strubbe, JH, Port, Jr Jr & ဝုဒ်, SC အင်ဆူလင်တုံ့ပြန်မှုများနှင့်ပလာစမာနှင့် ဦး နှောက်အရည်အတွက်ဂလူးကို့စအဆင့်။ ဇီဝကမ္မ။ Behav ။ 44, 205-208 (1988) ။
249. Banks, WA & Kastin, AJ ပန်ကရိယ peptides နှစ်ခု - အင်ဆူလင်နှင့် amylin မှသွေး - ဦး နှောက်အတားအဆီး၏ကွဲပြားခြားနား permeability ။ peptides 19, 883-889 (1998) ။
250. ဘဏ်များ, WA နှောက်အင်ဆူလင်၏ရင်းမြစ်။ အီးယူအာရ်။ ဂျေ Pharmacol ။ 490, 5-12 (2004) ။
251. Nemoto, တီ et al။ ကြွက် hippocampus နှင့်ဦးနှောက် cortex အတွက်အင်ဆူလင်ပေါင်းစပ်နှင့်၎င်း၏လျှို့ဝှက်ချက်များကိုရည်မှတ်နယူးထိုးထွင်းသိမြင်မှုကို: glycogen synthase kinase-1βမှတဆင့် proinsulin အဆင့် amyloid-β42-3-သွေးဆောင်လျော့ချရေး။ cell Signal ။ 26, 253-259 (2014) ။
252. de Souza, မှန် CT et al။ တစ်ဦးအဆီကြွယ်ဝသောအစားအစာစားသုံးမှုဟာ proinflammatory တုံ့ပြန်မှုမြှင့်လုပ်ဆောင်ခြင်းနှင့် hypothalamus အတွက်အင်ဆူလင်ကိုခုခံဖြစ်ပေါ်သည်။ ဟိုမုန်းစနစ်ဘာသာရပ် 146, 4192-4199 (2005) ။
253. အန်သိုနီ, K. et al။ ဇီဝဖြစ်စဉ် syndrome ရောဂါအတွက်အစားအသောက်စားသုံးမှု၏ချို့ယွင်းထိန်းချုပ်မှုများအတွက်နှောက်အခြေခံ: အင်ဆူလင်ကိုခုခံအတွက်အစာစားချင်စိတ်များနှင့်ဆုလာဘ်ထိန်းချုပ်ရန်ဦးနှောက်ကွန်ရက်မှာအင်ဆူလင်-evoked တုံ့ပြန်မှု၏ attenuation? ဆီးချိုရောဂါ 55, 2986-2992 (2006) ။
254. Kelley, AE & Berridge, KC သဘာဝဆုကျေးဇူးများ၏အာရုံကြောသိပ္ပံ - စွဲစွဲစေသောဆေးများနှင့်ဆက်စပ်မှု။ ဂျေ Neurosci ။ 22, 3306-3311 (2002) ။
255. Koob, GF & Volkow, စွဲ၏ ND Neurocircuitry ။ Neuropsychopharmacology 35, 217-238 (2010) ။
256. Werther, ဂျော်ဂျီယာ et al။ ကြွက်ဦးနှောက်နှင့် pituitary gland ကို အသုံးပြု. အတွက်အင်ဆူလင် receptors ၏ပြည်တွင်းနှင့်စရိုက်လက္ခဏာတွေ စသည်တို့အတွက် autoradiography နှင့်ကွန်ပျူတာ densitometry ။ ဟိုမုန်းစနစ်ဘာသာရပ် 121, 1562-1570 (1987) ။
257. ကြွက်များ၏ ventral tegmental areaရိယာ / substantia nigra (VTA / SN) တွင် Figlewicz, DP, အီဗန်, SB, Murphy က, ဂျေ, Hoen, အမ် & Baskin, DG Expression ကိုအင်ဆူလင်နှင့် leptin များအတွက် receptors ။ Brain Res ။ 964, 107-115 (2003) ။
258. Daws, LC et al။ အင်ဆူလင်အချက်ပြခြင်းနှင့်စွဲလမ်း။ Neuropharmacology 61, 1123-1128 (2011) ။
259. Figlewicz, DP & Sipols, AJ စွမ်းအင်စည်းမျဉ်းစည်းကမ်းချက်များနှင့်အစားအစာဆုများ။ Pharmacol ။ ထဲကဓာတုပစ်စညျး။ Behav ။ 97, 15-24 (2010) ။
260. ပက်တာ, TA et al။ အစားအသောက်ဆင်းရဲချို့တဲ့ကြွက် dopamine ပို့ဆောင်ရေး mRNA နှင့်လှုပ်ရှားမှုလျော့နည်းစေပါသည်။ Neuroendocrinology 68, 11-20 (1998) ။
261. Carvelli, L. et al။ dopamine လွှာမှ၏ PI 3-kinase စည်းမျဉ်း။ ဂျေ Neurochem ။ 81, 859-869 (2002) ။
262. ဝီလျံ, JM et al။ Hypoinsulinemia dopamine ၏စိတ်ကြွဆေး-သွေးဆောင်ပြောင်းပြန်သယ်ယူပို့ဆောင်ရေးထိန်းညှိ။ PLoS Biol ။ 5, e274 (2007) ။
263. ကြွက် striatum အတွက် Zhen, ဂျေ, Reith, MEA & Carr, KD နာတာရှည်အစားအစာကန့်သတ်ခြင်းနှင့် dopamine Transporter ။ Brain Res ။ 1082, 98-101 (2006) ။
264. Schoffelmeer, AN et al။ အင်ဆူလင်ကိုကင်း-အထိခိုက်မခံ monoamine Transporter function ကိုနှင့်ထကြွလွယ်သောအပြုအမူ modulates ။ ဂျေ neuroscience ။ 31, 1284-1291 (2011) ။
265. ventral tegmental inရိယာ၌ Mebel, DM, Wong, JC, Dong, YJ & Borgland, SL Insulin များသည် hedonic နို့တိုက်ကျွေးမှုကိုလျော့နည်းစေပြီးပြန်လည်စားသုံးမှုမှတဆင့် dopamine အာရုံစူးစိုက်မှုကိုဖိနှိပ်သည်။ အီးယူအာရ်။ ဂျေ Neurosci ။ 36, 2336-2346 (2012) ။
266. Labouebe, G. အ et al။ အင်ဆူလင် endocannabinoids မှတဆင့် ventral tegmental ဧရိယာ dopamine အာရုံခံ၏ရေရှည်စိတ်ကျရောဂါဖြစ်ပေါ်သည်။ နတ်။ neuroscience ။ 16, 300-308 (2013) ။
267. Konner, AC အ et al။ စွမ်းအင် homeostasis များ၏ထိန်းချုပ်မှုအတွက် catecholaminergic အာရုံခံအတွက်အင်ဆူလင်အချက်ပြဘို့အခန်းက္ပ။ cell Metab ။ 13, 720-728 (2011) ။
268. Figlewicz, DP, Bennett, JL, Aliakbari, S. , Zavosh, A. & Sipols, AJ Insulin သည်ကွဲပြားခြားနားသော CNS ၀ က်ဘ်ဆိုက်များတွင်ပြင်းထန်သော sucrose စားသုံးမှုကိုလျှော့ချရန်နှင့်ကြွက်များတွင်မိမိကိုယ်ကိုအုပ်ချုပ်ရန် sucrose ကိုလုပ်ဆောင်သည်။ နံနက်။ ဂျေ Physiol ။ Regul ။ Integr ။ Comp ။ ဇီဝကမ္မ။ 295, R388-R394 (2008) ။
269. Patel, JC, Witkovsky, P. , Coetzee, WA & Rice, ME သည်ခွဲစိတ်ကုသမှုမတိုင်မီက K သည်အားဖြင့်ကိုယ်ဝန်ဆောင် dopamine ထုတ်လွှတ်မှု၏ဒုတိယအလိုက်စည်းမျဉ်းဥပဒေ_ATP channel များကို။ ဂျေ Neurochem ။ 118, 721-736 (2011) ။
270. Tepper, JM & Bolam, JP လည်ပတ်မှုမတူကွဲပြားမှုနှင့် neostriatal interneurons များ၏တိကျမှု။ ကြက်သွန်ဖြူ။ ထင်မြင်ချက်။ Neurobiol ။ 14, 685-692 (2004) ။
271. Zhou၊ FM၊ Liang၊ Y. & Dani၊ JA Endogenous နီကိုတင်းအဆိပ်အတောက်ဖြစ်မှုကိုလက်စတီနီယံလုပ်ငန်းသည် striatum တွင် dopamine ထုတ်လွှတ်မှုကိုစည်းမျဉ်းသတ်မှတ်သည်။ နတ် အာရုံကြော။ 4, 1224-1229 (2001) ။
272. Rice, ME & Cragg, SJ နီကိုတင်း striatum အတွက်ဆုလာဘ် -related dopamine အချက်ပြမှုများကိုချဲ့ထွင်။ နတ် အာရုံကြော။ 7, 583-584 (2004) ။
273. Zhang, အိပ်ချ် & Sulzer, နီကိုတင်းအားဖြင့် dopamine လွှတ်ပေးရန် D. ၏ကြိမ်နှုန်း - မှီခိုမော်ဂျူ။ နတ် အာရုံကြော။ 7, 581-582 (2004) ။
274. Patel, JC, Rossignol, E. , Rice, ME & Machold, RP striatal dopamine ထုတ်လွှတ်မှုနှင့် forebrain နှင့် brainstem cholinergic သွင်းအားစုများမှရှာဖွေရေးမော်တာအပြုအမူအားဆန့်ကျင်ခြင်း။ နတ် Commun ။ 3, 1172 (2012) ။
275. Threlfell, S. et al။ Striatal dopamine လွှတ်ပေးရန် cholinergic interneurons အတွက် synchronous လှုပ်ရှားမှုအားဖြင့်အစပျိုးသည်။ အာရုံခံဆဲလျ 75, 58-64 (2012) ။
276. Cachope, R. et al။ ဆုလာဘ်အပြောင်းအလဲနဲ့များအတွက်သေံ setting: cholinergic interneurons ၏ရွေးချယ် activation accumbal phasic dopamine လွှတ်ပေးရန်ပိုကောင်းစေပါတယ်။ cell ကိုယ်စားလှယ်။ 2, 1-9 (2012) ။
277. ကြွက် nigrostriatal dopaminergic အာရုံခံဆဲလ်ထဲမှာနီကိုတင်း acetylcholine အဲဒီ receptor beta2 subunit immunoreactivity ၏ဂျုံးစ်, IW, Bolam, JP & Wonnacott, အက်စ် Presynaptic မူပြောင်းခြင်း။ ဂျေ Comp ။ Neurol ။ 439, 235-247 (2001) ။
278. Higley, MJ et al။ Cholinergic interneurons အဆိုပါ striatum အတွက်အစာရှောင်ခြင်း VGluT3-မှီခို glutamatergic ဂီယာဖျန်ဖြေ။ PLoS ONE 6, e19155 (2011) ။
279. Touzani, K. , Bodnar, R. & Sclafani, နျူကလိယ accubens အတွင်း dopamine D1 ကဲ့သို့သော receptors ၏အေကိုပြန်လည်အသက်သွင်းခြင်းသည်ကြွက်များတွင်အာဟာရ - အရသာရှိသောအရသာ ဦး စားပေးမှုကိုဖော်ပြရန်အတွက်အရေးပါသည်။ အီးယူအာရ်။ ဂျေ Neurosci ။ 27, 1525-1533 (2008) ။
280. Sclafani, A. , Touzani, K. & Bodnar, RJ Dopamine နှင့်အစားအစာကြိုက်နှစ်သက်မှုများကိုလေ့လာခဲ့သည်။ ဇီဝကမ္မ။ Behav ။ 104, 64-68 (2011) ။
281. Mayer, CM & Belsham, DD Central အင်ဆူလင်အချက်ပြမှုကိုအင်ဆူလင် receptor အလွှာ-1 serine phosphorylation, proteasomal degradation နှင့် lysosomal အင်ဆူလင် receptor ပျက်စီးခြင်းမှတဆင့်ရေရှည်အင်ဆူလင်ထိတွေ့မှုအားဖြင့်လျော့သွားသည်။ Endocrinology 151, 75-84 (2010) ။
282. Basal ganglia တွင်ဆန်၊ ME၊ Patel၊ JC & Cragg, SJ Dopamine ထုတ်လွှတ်သည်။ အာရုံကြောသိပ္ပံ 198, 112-137 (2011) ။
283. Basal ganglia-related အမူအကျင့်ပြောင်းလဲခြင်းနှင့်အားဖြည့်ဖို့ Smith, Y. , Surmeier, DJ သမား, Redgrave, P. & Kimura, အမ် Thalamic ပံ့ပိုးမှုများ။ ဂျေ Neurosci ။ 31, 16102-16106 (2011) ။
284. Threlfell, S. et al။ Striatal muscarinic receptors dorsal striatum နှိုင်းယှဉ် ventral အတွက် cholinergic interneurons အပေါ်ကွဲပြားအဲဒီ receptor Subtype မှတဆင့် dopamine ဂီယာ၏လှုပ်ရှားမှုမှီခိုမြှင့်တင်ရန်။ ဂျေ neuroscience ။ 30, 3398-3408 (2010) ။
285. Hoebel, BG, Avena, NM & Rada, P. Accumbens dopamine-acetylcholine ချိန်ခွင်လျှာနှင့်ချဉ်းကပ်မှု။ ကြက်သွန်ဖြူ။ ထင်မြင်ချက်။ Pharmacol ။ 7, 617-627 (2007) ။
286. Pothos, EN, Creese, I. & Hoebel, BG သည်ကိုယ်အလေးချိန်ကျဆင်းမှုကိုကန့်သတ်ထားသည်ကန့်သတ်ထားသောအစာသည်နျူကလိယအတွင်းရှိ extracellular dopamine ကိုလျော့နည်းစေပြီး amphetamine, morphine နှင့်အစားအစာစားသုံးမှုအတွက် dopamine တုန့်ပြန်မှုကိုပြောင်းလဲစေသည်။ ဂျေ Neurosci ။ 15, 6640-6650 (1995) ။
287. Geiger, BM et al။ ကြွက်အစားအသောက်အဝလွန်ခြင်းအတွက် mesolimbic dopamine neurotransmission ၏လိုငွေပြမှု။ neuroscience 159, 1193-1199 (2009) ။
288. မောရစ်, JK et al။ အင်ဆူလင်ကိုခုခံ nigrostriatal dopamine function ကိုချို့ယွင်း။ Exp ။ Neurol ။ 231, 171-180 (2011) ။
289. de Araujo, IE ကို et al။ အရသာရှိတဲ့ Receptor အချက်ပြ၏မရှိခြင်းအတွက်စားနပ်ရိက္ခာဆုလာဘ်။ အာရုံခံဆဲလျ 57, 930-941 (2008) ။
290. Stice, E. , Spoor, S. , Bohon, C & Small, DM အဝလွန်ခြင်းနှင့်အစားအစာကိုမတည့်သော striatal တုန့်ပြန်မှုအကြားဆက်စပ်မှုကို TaqIA A1 allele ကတည်းဖြတ်သည်။ သိပ္ပံ 322, 449-452 (2008) ။
291. ဝမ်, GJ et al။ ဦးနှောက် dopamine နှင့်အဝလွန်ခြင်း။ ကမ္ဘာကျော်ဆေးပညာဂျာနယ် Lancet 357, 354-357 (2001) ။
292. Johnson, PM & Kenny, PJ Dopamine D2 receptors စွဲကဲ့သို့သောဆုလာဘ်ကမောက်ကမဖြစ်မှုနှင့်အဝလွန်ကြွက်များတွင် compulsive စားသုံးမှုအတွက်။ နတ် အာရုံကြော။ 13, 635-641 (2010) ။
293. Carr က, KD ကင်မ်, G.-Y. & Cabeza de Vaca, S.Pewarding နှင့်တိုက်ရိုက် dopamine receptor agonists များ၏ locomotor-activating သက်ရောက်မှုများကိုကြွက်များတွင်နာတာရှည်အကန့်အသတ်ဖြင့်တိုးပွားစေသည်။ Psychopharmacology (Berl ။ ) 154, 420-428 (2001) ။
294. Levin, BE & Keesey, RE အစားအစာကြောင့်ဖြစ်သောအဝလွန်ခြင်းနှင့်ခံနိုင်ရည်ရှိသောကြွက်များတွင်ခန္ဓာကိုယ်အလေးချိန်အမျိုးမျိုးကွဲပြားခြင်းကိုကာကွယ်ခြင်း။ နံနက်။ ဂျေ Physiol ။ 274, R412-R419 (1998) ။
295. Patel, JC & Rice, ME ဦး နှောက်ချပ်များတွင်မြန်ဆန်စွာစကင်စက်ဘီး voltammetry ကို အသုံးပြု၍ axonal နှင့် somatodendritic dopamine ထုတ်လွှတ်မှုကိုစောင့်ကြည့်သည်။ နည်းလမ်းများ Mol ။ ဇီဝကမ္မ။ 96, 243-273 (2013) ။
296. Lee က, CR, Witkovsky, P. & Rice, H ကိုအားဖြင့် sustia nigra pars reticulata GABAergic အာရုံခံဆဲလ်၏ ME ၏စည်းမျဉ်းဥပဒေ₂O₂ flufenamic အက်ဆစ်-အထိခိုက်မခံလိုင်းများမှတဆင့်နှင့် K_ATP channel များကို။ တပ်ဦး။ Syst ။ neuroscience ။ 5, 14 (2011) ။
297. Chen, BT, Moran, KA, Avshalumov, MV & Rice, ME သည်ဗို့အားအထိခိုက်ခံနိုင်သော Ca အားဖြင့် somatodendritic dopamine ထုတ်လွှတ်မှု၏ကန့်သတ်ချက်စည်းမျဉ်း။²⁺ channel များကို axon dopamine လွှတ်ပေးရေးခိုင်မာတဲ့စည်းမျဉ်းတွေနဲ့နှိုင်းယှဉ်။ ဂျေ Neurochem ။ 96, 645-655 (2006) ။
298. လီ, X တို့မှာ et al။ ကြွက်တွေမှာ LRRK2 overexpression နှင့်အတူ Enhanced striatal dopamine ဂီယာနှင့်မော်တာစွမ်းဆောင်ရည်မိသားစုပါကင်ဆန်ရောဂါ mutation G2019S အားဖြင့်ဖယ်ထုတ်ပစ်သည်။ ဂျေ neuroscience ။ 30, 1788-1797 (2010) ။
299. Wu, Q. , Reith, MEA, Wightman, RM, Kawagoe, KT & Garris, PA သည် Real-time voltammetry ဖြင့်တိုင်းတာသောလျှပ်စစ်ဓာတ်အားပေးသော dopamine ဒိုင်းနမစ်မှထုတ်လွှတ်မှုနှင့်ထုတ်ယူမှု parameters များကိုဆုံးဖြတ်ခြင်း။ ဂျေ Neurosci ။ နည်းလမ်းများ 112, 119-133 (2001) ။
300. Chen, BT, Avshalumov, MV & Rice, ME H₂O₂ တစ်ဝတ္ထု, Synaptic dopamine လွှတ်ပေးရေး endogenous modulator တွေကိုဖြစ်ပါတယ်။ ဂျေ Neurophysiol ။ 85, 2468-2476 (2001) ။
301. Witkovsky, P. , Patel, JC, Lee, CR & Rice, nigral dopaminergic neuron ၏ somatodendritic အခန်းမှ dopamine လွှတ်ပေးမှုတွင်ပါဝင်သောပရိုတိန်းများ၏ immunocytochemical identification ။ အာရုံကြောသိပ္ပံ 164, 488-496 (2009) ။
302. Sugimoto, K. et al။ ကြွက်အရံအာရုံကြောထဲမှာအင်ဆူလင်အဲဒီ receptor: ယင်း၏တည်နေရာနဲ့ Alternate spliced ​​isoforms ။ ဆီးချိုရောဂါ Metab ။ res ။ ဗျာ 16, 354-363 (2000) ။
303. Sanchez-Alavez, အမ် et al။ အင်ဆူလင်နွေး-အထိခိုက်မခံအာရုံခံတိုက်ရိုက်တားစီးနေဖြင့် hyperthermia ကိုဖြစ်ပေါ်စေသည်။ ဆီးချိုရောဂါ 59, 43-50 (2010) ။
304. Stereotaxic Coordinates မှ Paxinos, G. & Watson, C. The Rat Brain 6 edn Academic (2007) ။
305. Strubbe, JH & Mein, CG သည် VMH တွင်အင်ဆူလင်ပantibိပစ္စည်းများကိုနှစ်ကြိမ်ထိုးသွင်းမှုကြောင့်အစာတိုးပွားလာသည်။ Physiol Behav ။ 19, 309-313 (1977) ။
306. Paranjape, SA et al။ ပန်ကရိယ glucagon လျှို့ဝှက်ချက်ပေါ် ventromedial hypothalamus အတွက်အင်ဆူလင်၏သြဇာလွှမ်းမိုးမှု Vivo အတွက်။ ဆီးချိုရောဂါ 59, 1521-1527 (2010) ။
307. Wise, RA & Hoffman, DC မူးယစ်ဆေးဝါးဆုလာဘ်ယန္တရားများကိုဒေသတွင်းဆေးထိုးခြင်းဖြင့်ပြုလုပ်သည်။ Synapse 10, 247-263 (1992) ။
308. Zhen, ဂျေ, Maiti, အက်စ်, Chen က N. , Dutta, AK & Reith, 4- (2-benzhydryloxy-ethyl) -1- (4-fluorobenzyl) piperidine နှင့် aspartate ၏ hydroxypiperidine analogue အကြား MEA အပြန်အလှန်ဆက်သွယ်မှု လူ့ dopamine Transporter ။ အီးယူအာရ်။ ဂျေ Pharmacol ။ 68, 506-17 (26) ။

ဒေါင်းလုပ်ညွှန်းဆို

ဒီလေ့လာမှုတွေ NIH ထောက်ပံ့ငွေ DA033811 (မဲ, KDC နှင့် MEAR), NS036362 (မဲ), DA03956 (KDC) နှင့်တစ်ဦး NARSAD လွတ်လပ်သောစုံစမ်းစစ်ဆေးမှုများပြုလုပ်ရန် Award ဆုကို (KDC) ကထောက်ခံခဲ့သည်။ S961 ဒေါက်တာ Lauge Schaffer, Novo Nordisk နေရက်ရက်ရောရောလက်ဆောင်တစ်ခုဖြစ်ခဲ့သည်။ PP5 antibody ကို Pfizer ကနေရက်ရက်ရောရောလက်ဆောင်တစ်ခုဖြစ်ခဲ့သည်။ ကျနော်တို့ထုတ်ယူဖို့ software ကိုဒေါက်တာချားလ်စ် Nicholson, ဆေးပညာ NYU ကျောင်းကျေးဇူးတင်ပါတယ် V_{max ကို} FCV ဒေတာကနေတန်ဖိုးများ။