DeltaFosB in The Nucleus Accumbens is van cruciaal belang voor het versterken van de effecten van seksuele beloning. (2010)

OPMERKINGEN: Delta FosB is een marker voor alle verslavingen, zowel gedragsmatige als chemische. Naarmate dit molecuul toeneemt in het beloningscircuit, neemt ook verslavend gedrag toe. Het is een van de moleculen die betrokken zijn bij neuroplastische veranderingen. Dit experiment laat zien dat het toeneemt met seksuele ervaring, net als bij drugsverslavingen. In het experiment gebruikten ze genetische manipulatie om de niveaus boven 'normaal' te verhogen. Dit resulteerde in een verbeterde facilitering van seksuele activiteit. We denken dat dit gebeurt met pornoverslaving.


VOLLEDIGE STUDIE

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Genen Brain Behav. 2010 okt; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Afdeling Anatomie en Celbiologie, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, Ontario, Canada.

SAMENVATTING

Seksueel gedrag bij mannelijke ratten is lonend en versterkend. Er is echter weinig bekend over de specifieke cellulaire en moleculaire mechanismen die seksuele beloning medieren of de versterkende effecten van beloning op de daaropvolgende uitdrukking van seksueel gedrag. Deze studie test de hypothese dat ΔFosB, de stabiel tot expressie gebrachte verkorte vorm van FosB, een cruciale rol speelt in de versterking van seksueel gedrag en ervaringsgericht faciliteren van seksuele motivatie en prestaties.

Er werd aangetoond dat seksuele ervaring ΔFosB-accumulatie veroorzaakt in verschillende limbische hersenregio's, waaronder de nucleus accumbens (NAc), mediale prefrontale cortex, ventraal tegmentaal gebied en caudate putamen, maar niet de mediale preoptische kern.

Vervolgens werd de inductie van c-Fos, een stroomafwaarts (onderdrukt) doelwit van ΔFosB, gemeten bij seksueel ervaren en naïeve dieren. Het aantal door paring geïnduceerde c-Fos-immunoreactieve cellen was significant verminderd bij seksueel ervaren dieren in vergelijking met seksueel naïeve controles.

Ten slotte werden ΔFosB-niveaus en de activiteit ervan in het NAc gemanipuleerd met behulp van virale gemedieerde genoverdracht om de mogelijke rol ervan in het bemiddelen van seksuele ervaring en door ervaring geïnduceerde facilitering van seksuele prestaties te bestuderen. Dieren met ΔFosB-overexpressie vertoonden verbeterde facilitering van seksuele prestaties met seksuele ervaring ten opzichte van controles. In tegenstelling daarmee verzwakte de expressie van ΔJunD, een dominante negatieve bindingspartner van ΔFosB, door seksuele ervaring geïnduceerde facilitering van seksuele prestaties en vertraagde langetermijnonderhoud van facilitatie in vergelijking met groene fluorescentie-eiwitten en ΔFosB tot overexpressie brengende groepen.

Samen ondersteunen deze bevindingen een kritische rol voor ΔFosB-expressie in het NAc voor de versterkende effecten van seksueel gedrag en seksuele ervaring-geïnduceerde facilitering van seksuele prestaties.

INLEIDING

Seksueel gedrag is zeer lonend en versterkt voor mannelijke knaagdieren (Coolen et al. 2004; Pfaus c.s.. 2001). Bovendien verandert seksuele ervaring achteraf seksueel gedrag en beloning (Tenk c.s.. 2009). Met herhaalde paar-ervaring, wordt seksueel gedrag gefaciliteerd of "versterkt", wat blijkt uit verminderde latencies om het paren en faciliteren van seksuele prestaties te starten (Balfour c.s.. 2004; Pfaus c.s.. 2001). De onderliggende cellulaire en moleculaire mechanismen van seksuele beloning en versterking worden echter slecht begrepen. Seksueel gedrag en geconditioneerde aanwijzingen die paring voorspellen, hebben aangetoond dat ze tijdelijk expressie van onmiddellijk-vroege genen c-fos in het mesolimbische systeem van mannelijke ratten induceren (Balfour c.s.. 2004; Pfaus c.s.. 2001). Bovendien werd onlangs aangetoond dat seksuele ervaring langdurige neuroplasticiteit veroorzaakt in het mesolimbische systeem van de man (Frohmader c.s.. 2009; Pitchers c.s.. 2010). Bovendien is bij mannelijke ratten aangetoond dat seksuele ervaring ΔFosB induceert, a Fos-gezinslid, in de nucleus accumbens (NAc) (Wallace c.s.. 2008). ΔFosB, een ingekorte splitsingsvariant van FosB, is een uniek lid van de Fos-familie vanwege zijn grotere stabiliteit (Carle c.s.. 2007; Ulery-Reynolds c.s.. 2008; Ulery c.s.. 2006) en speelt een rol bij verhoogde motivatie en beloning voor drugsmisbruik en de verslaving aan verslaving op lange termijn aan neurale plasticiteit (Nestler c.s.. 2001). ΔFosB vormt een heteromerisch transcriptiefactorcomplex (activatorproteïne-1 (AP-1)) met Jun-eiwitten, bij voorkeur JunD (Chen c.s.. 1995; Hiroi c.s.. 1998). Door induceerbare overexpressie van ΔFosB, primair beperkt tot het striatum met behulp van bi-transgene muizen, wordt een drugsverslaafd achtig gedragsfenotype geproduceerd ondanks de afwezigheid van eerdere blootstelling aan geneesmiddelen (McClung c.s.. 2004). Dit gedragsfenotype omvat een gesensibiliseerde locomotorische respons op cocaïne (Kelz c.s.. 1999), verhoogde voorkeur voor cocaïne (Kelz c.s.. 1999) en morfine (Zachariou c.s.. 2006) en verhoogde zelftoediening door cocaïne (Colby c.s.. 2003).

Net als drugsbeloning wordt ΔFosB opgereguleerd door natuurlijk belonend gedrag en bemiddelt het de expressie van dit gedrag. Overexpressie van ΔFosB in de NAc met knaagdiermodellen verhoogt het vrijwillige wielrennen (Werme c.s.. 2002), instrumenteel reageren op eten (Olausson c.s.. 2006), inname van sucrose (Wallace c.s.. 2008), en vergemakkelijkt man (Wallace c.s.. 2008) en vrouw (Bradley c.s.. 2005) seksueel gedrag. Dus, ΔFosB kan betrokken zijn bij het bemiddelen van de effecten van natuurlijke belonende ervaringen. TDe huidige studie breidt eerdere studies uit door specifiek de rol van ΔFosB in het NAc te onderzoeken in de langetermijnresultaten van seksuele ervaring met het daaropvolgende paargedrag en neurale activering in het mesolimbische systeem.

  • Eerst werd vastgesteld welke hersengebieden die betrokken zijn bij de beloningscircuits en seksueel gedrag uitdrukking geven aan door sekservaring geïnduceerde ΔFosB.
  • Vervolgens, het effect van door sekservaring geïnduceerde ΔFosB op paring-geïnduceerde expressie van c-Fos, een stroomafwaarts doel dat wordt onderdrukt door ΔFosB (Renthal c.s.. 2008), was onderzocht.
  • Ten slotte werd het effect van manipulatie van ΔFosB-activiteit in het NAc (genoverexpressie en expressie van een dominante negatief-bindende partner) op seksueel gedrag en ervaringsgeïnduceerde facilitering van seksuele motivatie en prestaties bepaald met behulp van virale vectorafleveringstechnologie.

METHODEN

Dieren

Volwassen mannelijke Sprague Dawley-ratten (200-225 gram) werden verkregen van Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Dieren werden gehuisvest in plexiglas kooien met een tunnelbuis in paren van hetzelfde geslacht gedurende experimenten. De kolonie kamer was temperatuur gereguleerd en werd onderhouden op een 12 / 12 uur lichte donkere cyclus met voedsel en water beschikbaar ad libitum behalve tijdens gedragstesten. Stimulusvrouwtjes (210-220 gram) voor paringsessies kregen een subcutaan implantaat met 5% estradiolbenzoaat en 95% cholesterol na bilaterale ovariëctomie onder diepe anesthesie (0.35g ketamine / 0.052g Xylazine). Seksuele ontvankelijkheid werd geïnduceerd door toediening van 500μg progesteron in 0.1 mL sesamolie, ongeveer 4 uren vóór het testen. Alle procedures werden goedgekeurd door de Animal Care and Use Committees van de University of Western Ontario en conform de CCAC-richtlijnen met betrekking tot gewervelde dieren in onderzoek.

Seksueel gedrag

Paringsessies deden zich voor tijdens de vroege donkere fase (tussen 2-6 uur na het begin van de donkere periode) bij zwak rode verlichting. Voorafgaand aan het begin van het experiment werden de dieren willekeurig verdeeld in groepen. Tijdens koppelsessies mochten mannelijke ratten copuleren tot ejaculatie of 1 uur, en parameters voor seksueel gedrag werden opgenomen, waaronder: mount latentie (ML; tijd vanaf introductie van de vrouw tot de eerste mount), intromissie latentie (IL; tijd vanaf introductie van het vrouwtje tot de eerste vatting met vaginale penetratie), ejaculatie latentie (EL, tijd van de eerste intromissie tot ejaculatie), post ejaculatie-interval (PEI; tijd van ejaculatie tot eerste volgende intromissie), aantal monitoren (M; bekken stoten zonder vaginale penetratie), aantal intromissies (IM; mount inclusief vaginale penetratie) en copulatie-efficiëntie (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Aantallen bergen en intromissies werden niet opgenomen in de analyse voor dieren die geen ejaculatie vertoonden. Mount en intromission latencies zijn parameters die indicatief zijn voor seksuele motivatie, terwijl ejaculatie latency, aantal mounts en copulatie-efficiëntie seksuele prestaties weerspiegelen (Hull 2002).

Experiment 1: uitdrukking van ΔFosB

Seksueel naïeve mannelijke ratten mochten paren in schone testkooien (60 × 45 × 50 cm) voor opeenvolgende, dagelijkse koppelsessies van 5 of bleef seksueel naïef. Aanvullende tabel 1 schetst het gedragsparadigma voor experimentele groepen: naïef geen geslacht (NNS; n = 5), naïef geslacht (NS; n = 5); ondervonden geen seks (ENS; n = 5) en ervaren seks (ES; n = 4). NS- en ES-dieren werden 1 uur na ejaculatie op de laatste dag van de paring opgeofferd om paring-geïnduceerde c-Fos-expressie te onderzoeken. NNS-dieren werden gelijktijdig met ENS-dieren 24 uur na de laatste paarzitting opgeofferd om door sekservaring geïnduceerd AFosB te onderzoeken. Seksueel ervaren groepen werden op elkaar afgestemd voor seksueel gedrag voordat ze later werden getest. Er werden geen significante verschillen gevonden tussen groepen voor gedragsmetingen binnen de juiste paringssessie en seksuele ervaring-geïnduceerde facilitering van seksueel gedrag werd getoond door beide ervaren groepen (Aanvullende tabel 2). De controles omvatten seksueel niet-naïeve mannen die gelijktijdig werden behandeld met parende dieren en die blootstelling aan vrouwelijke geuren en vocalisaties zonder rechtstreeks vrouwelijk contact garandeerden.

Voor opoffering werden de dieren diep verdoofd met natriumpentobarbital (270mg / kg; ip) en intracardiaal geperfuseerd met 50 mL 0.9% zoutoplossing, gevolgd door 500 mL 4% paraformaldehyde in 0.1 M-fosfaatbuffer (PB). Hersenen werden verwijderd en post-gefixeerd voor 1 h bij kamertemperatuur in hetzelfde fixeermiddel, vervolgens ondergedompeld in 20% sucrose en 0.01% natriumazide in 0.1 M PB en bewaard bij 4 ° C. Coronale secties (35 μm) werden geknipt met een invriezen microtoom (H400R, Micron, Duitsland), verzameld in vier parallelle reeksen in cryoprotectant oplossing (30% sucrose en 30% ethyleenglycol in 0.1 M PB) en opgeslagen bij -20 ° C. Vrij zwevende coupes werden uitgebreid gewassen met 0.1 M fosfaat-gebufferde zoutoplossing (PBS; pH 7.3-7.4) tussen incubaties. Secties werden blootgesteld aan 1% H2O2 voor 10 min bij kamertemperatuur om endogene peroxidasen te vernietigen, vervolgens geblokkeerd in PBS + incubatieoplossing, die PBS is met 0.1% bovien serumalbumine (catalogusitem 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) en 0.4% Triton X -100 (catalogusitem BP151-500; Sigma-Aldrich) voor 1 h. Secties werden vervolgens overnacht geïncubeerd bij 4 ° C in een pan-FosB konijn polyklonaal antilichaam (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, VS). Het pan-FosB-antilichaam werd opgewekt tegen een intern gebied gedeeld door FosB en AFosB. De ΔFosB-IR-cellen waren specifiek ΔFosB-positief omdat bij de post-stimulustijd (24 uur) alle detecteerbare door stimulus geïnduceerde FosB is afgebroken (Perrotti c.s.. 2004; Perrotti c.s.. 2008). Bovendien werden in dit experiment dieren die op de laatste dag paren (NS, ES) 1 uur na paring opgeofferd, dus voorafgaand aan de FosB-expressie. Western blot-analyse bevestigde de detectie van ΔFosB bij ongeveer 37 kD. Na primaire antilichaamincubatie werden coupes geïncubeerd voor 1 h in aan biotine geconjugeerd anti-konijn-IgG van geit (1: 500 in PBS +; Vector Laboratories, Burlingame, CA, VS) en vervolgens 1 h in avidine-biotine-hoseradish peroxidase (ABC-elite) ; 1: 1K in PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, VS). Na deze incubatiesecties werden op een van de volgende manieren verwerkt:

1. Enkele peroxidase labeling

Secties van NNS- en ENS-dieren werden gebruikt voor een hersenanalyse van door seksuele ervaringen geïnduceerde ΔFosB-accumulatie. Na ABC-incubatie werd het peroxidasecomplex gevisualiseerd na behandeling van 10 minuten tot een chromogeenoplossing die 0.02% 3,3'-diaminobenzidine tetrahydrochloride (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) bevat, versterkt met 0.02% nikkelsulfaat in 0.1 M PB met waterstofperoxide (0.015%). Secties werden grondig gewassen in 0.1 M PB om de reactie te beëindigen en gemonteerd op gecodeerde Superfrost plus glasplaatjes (Fisher, Pittsburgh, PA, VS) met 0.3% gelatine in ddH20. Na uitdroging werden alle objectglaasjes afgedekt met DPX (dibutylftalaat xyleen).

2. Dubbele immunofluorescentie

Secties van alle vier experimentele groepen die NAc en mPFC bevatten, werden gebruikt voor analyse van AFosB en c-Fos. Volgend op ABC-incubatie werden coupes geïncubeerd voor 10 min met gebiotinyleerd tyramide (BT; 1: 250 in PBS + 0.003% H2O2 Tyramid amplificatieset, NEN Life Sciences, Boston, MA) en voor 30 min met Alexa 488-geconjugeerd strepavidine (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Secties werden vervolgens overnacht geïncubeerd met een polyklonaal konijnantilichaam dat specifiek c-Fos herkent (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), gevolgd door een 30 minincubatie met geit-anti-konijn Cy3-geconjugeerd secundair antilichaam (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, VS). Na kleuring werden de secties grondig gewassen in 0.1 M PB, gemonteerd op gecodeerde glasplaatjes met 0.3% gelatine in ddH20 en bedekt met een waterig montagemedium (Gelvatol) met het anti-fadingmiddel 1,4-diazabicyclo (2,2) octaan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistochemische controles omvatten weglating van één of beide primaire antilichamen, resulterende in de afwezigheid van labeling in de geschikte golflengte.

Data-analyse

Hersenanalyse van ΔFosB

Twee experimenteerders die blind waren voor de behandeling voerden de hersenscan uit op gecodeerde dia's. ΔFosB-immunoreactieve (-IR) cellen in de hersenen werden semi-kwantitatief geanalyseerd met een schaal om het aantal ΔFosB-positieve cellen weer te geven, zoals uiteengezet in Tabel 1. Daarnaast werden op basis van semi-kwantitatieve bevindingen de aantallen ΔFosB-IR-cellen geteld met behulp van standaardgebieden voor analyse in hersengebieden die betrokken zijn bij beloning en seksueel gedrag met behulp van een camera lucida-tekenbuis die is bevestigd aan een Leica DMRD-microscoop (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Duitsland): NAc (kern (C) en schaal (S); 400 × 600μm) geanalyseerd op drie rostraal-caudale niveaus (Balfour c.s.. 2004); ventrale tegmentale gebied (VTA; 1000 × 800μm) geanalyseerd op drie rostraal-caudale niveaus (Balfour c.s.. 2004) en VTA-staart (Perrotti c.s.. 2005); prefrontale cortex (voorste cinglatie-gebied (ACA); prelimbische cortex (PL); infralimbische cortex (IL); 600 x XUMUMμm elk); caudate putamen (CP; 800 × 800μm); en mediale preoptische nucleus (MPN; 800 × 400 μm) (Aanvullende figuren 1-3). Twee secties werden geteld per subregio en gemiddeld per dier voor berekening van het groepsgemiddelde. Seksueel naïeve en ervaren groepsgemiddelden van ΔFosB-IR-cellen werden vergeleken voor elke subregio met behulp van ongepaarde t-tests.

Tabel 1    

Samenvatting van ΔFosB-expressie in seksueel naïeve en ervaren dieren
Analyse van ΔFosB en c-Fos

Beelden werden vastgelegd met behulp van een gekoelde CCD-camera (Microfire, Optronics) bevestigd aan een Leica-microscoop (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Duitsland) en Neurolucida-software (MicroBrightfield Inc) met vaste camera-instellingen voor alle onderwerpen (met 10x-doelstellingen). Aantal cellen dat c-Fos-IR of AFosB-IR tot expressie brengt in standaard analysegebieden in NAc-kern en schaal (400 × 600μm elk; Aanvullend figuur 1) en ACA van de mPFC (600 × 800μm; Aanvullend figuur 3) werden handmatig geteld door een waarnemer blind voor de experimentele groepen, in 2-coupes per dier met behulp van Neurolucida-software (MBF Bioscience, Williston, VT) en gemiddeld per dier. Groepgemiddelden van c-Fos of ΔFosB-cellen werden vergeleken met behulp van tweeweg ANOVA (factoren: seksuele ervaring en seksactiviteit) en Fisher LSD voor post hoc-vergelijkingen op een significantieniveau van 0.05.

Experiment 2: ΔFosB-expressiemanipulatie

Virale vector-gemedieerde genoverdracht

Seksueel naïeve mannelijke Sprague Dawley-ratten werden willekeurig verdeeld in groepen voorafgaand aan stereotaxische chirurgie. Alle dieren kregen bilaterale micro-injecties van recombinante adeno-geassocieerde virale (rAAV) vectoren die coderen voor GFP (controle; n = 12), wildtype ΔFosB (n = 11) of een dominant-negatieve bindingspartner van ΔFosB genaamd ΔJunD (n = 9) in het NAc. ΔJunD vermindert ΔFosB-gemedieerde transcriptie door competitief heterodimeriseren met ΔFosB voordat het het AP-1-gebied bindt in genpromotors (Winstanley c.s.. 2007). De virustiter werd bepaald door qPCR en geëvalueerd in vivo voor aanvang van de studie. Titer was 1-2 × 1011 infectieuze deeltjes per ml. rAAV-vectoren werden geïnjecteerd in een volume van 1.5 μL / kant gedurende 7 minuten (coördinaten: AP + 1.5, ML +/- 1.2 van Bregma; DV -7.6 van schedeloppervlak volgens Paxinos en Watson, 1998) met behulp van een Hamilton-injectiespuit (5μL ; Harvard Apparatus, Holliston, MA, VS). De vectoren produceren geen toxiciteit groter dan alleen controle-infusies (Winstanley et al, 2007; voor details over de bereiding van AAV Hommel et al., 2003). Gedragsexperimenten startten 3 weken na vectorinjecties waardoor een optimale en stabiele virale infectie mogelijk was (Wallace c.s.. 2008). Transgene expressie in muriene soorten piekt op 10-dagen en blijft gedurende ten minste 6 maanden verhoogd (Winstanley c.s.. 2007). Aan het einde van het experiment werden de dieren transcardiaal geperfundeerd en werden NAc-coupes immuno-bewerkt voor GFP (1: 20K; anti-GFP-antilichaam van konijn; Molecular Probes) met behulp van een ABC-peroxidase-DAB-reactie (zoals hierboven beschreven) om histologisch te worden controleer injectieplaatsen met GFP als een marker (Aanvullend figuur 4). ΔFosB- en ΔJunD-vectoren bevatten ook een segment dat GFP tot expressie brengt, gescheiden door een interne ribosomale ingangsplaats, wat injectie op de injectieplaats mogelijk maakt door GFP-visualisatie bij alle dieren. Alleen dieren met injectieplaatsen en verspreiding van virus beperkt tot het NAc werden opgenomen in statistische analyses. De verspreiding van het virus was over het algemeen beperkt tot een deel van het NAc en verspreidde zich niet rostraal-caudaal door de kern. Bovendien bleek de verspreiding van het virus meestal beperkt te zijn tot shell of kern. De variatie van injectieplaatsen en verspreiding binnen het NAc had echter geen invloed op de effecten op het gedrag. Ten slotte hadden GFP-injecties geen invloed op seksueel gedrag of op ervaring geïnduceerde facilitering van seksueel gedrag in vergelijking met niet-chirurgische dieren uit eerdere onderzoeken (Balfour c.s.. 2004).

Seksueel gedrag

Drie weken na de toediening van virale vectoren, koppelden dieren aan één ejaculatie (of voor 1 uur) voor 4 opeenvolgende, dagelijkse paringsessies om seksuele ervaring te krijgen (ervaringssessies) en werden vervolgens getest op langdurige expressie van door ervaring geïnduceerde facilitering van seksueel gedrag. 1 en 2 weken (testsessies 1 en 2) na de laatste ervaringssessie. Seksuele gedragsparameters werden geregistreerd tijdens alle paringssessies zoals hierboven beschreven. Statistische verschillen voor alle parameters tijdens elke paring sessie werden vergeleken binnen en tussen groepen met behulp van twee-weg herhaalde metingen ANOVA's (factoren: behandeling en paring sessie) of one-way ANOVA's (ejaculatie latentie, aantal mounts en intromissies; Factor: behandeling of paring sessie) gevolgd door Fisher LSD- of Newman-Keuls-tests voor post hoc-vergelijkingen op een significantieniveau van 0.05. Concreet werden de faciliterende effecten van seksuele ervaring op paringsparameters vergeleken tussen ervaringssessie 1 (naïef) en ervaringssessies 2, 3 of 4 elk, evenals tussen experimentele groepen binnen elke ervaringssessie. Om de effecten van behandeling (vector) op langdurige facilitering van seksueel gedrag te analyseren, werden paringsparameters vergeleken tussen ervaringssessie 4 en testsessie 1 en 2 binnen elke behandelgroep en vergeleken tussen experimentele groepen binnen elke testsessie.

RESULTATEN

Seksuele ervaring veroorzaakt ΔFosB-accumulatie

Aanvankelijk werd een semi-kwantitatief onderzoek uitgevoerd naar de accumulatie van ΔFosB in de hersenen bij seksueel ervaren mannen in vergelijking met seksueel naïeve controles. Een samenvatting van de algemene bevindingen wordt gegeven in Tabel 1. ΔFosB-IR-analyse werd bevorderd door het bepalen van het aantal ΔFosB-IR-cellen in verschillende limbisch geassocieerde hersenregio's met behulp van standaard analysegebieden. Figuur 1 toont representatieve beelden van DAB-Ni kleuring van het NAc van seksueel naïef en ervaren dieren. Significante ΔFosB opwaartse regulatie werd gevonden in mPFC subregio's (Figuur 2A), NAc core en shell (2B), caudate putamen (2B) en VTA (2C). In NAc bestonden er significante verschillen op alle rostraal-caudale niveaus in de NAc-kern en de schaal, en de gegevens getoond in Figuur 2 is het gemiddelde van alle rostro-caudale niveaus. Daarentegen was er geen significante toename in ΔFosB-IR in de hypothalamische mediale preoptische nucleus (NNS: Avg 1.8 + / - 0.26; ENS: Avg 6.0 + / - 1.86).

Figuur 1    

 

Representatieve beelden die ΔFosB-IR-cellen (zwart) in het NAc van naïeve geen geslacht (A) tonen en geen geslacht (B) -groepen ervaren. aco: anterieure commissuur Schaalbalk geeft 100 μm aan.
Figuur 2     

Aantal ΔFosB-IR-cellen in: A. infralimbic (IL), prelimbische (PL) en anterior cingulate cortex (ACA) subregio's van de mediale prefrontale cortex; B. kern en schil van Nucleus accumbens en caudate putamen (CP); C. rostraal, midden, staart en staart ...

Seksuele ervaring verzwakt paring-geïnduceerde c-Fos

Het effect van seksuele ervaring op ΔFosB-niveaus in het NAc werd bevestigd met behulp van fluorescentiekleuringstechnieken. Daarnaast werden effecten van seksuele ervaring op expressie van c-Fos geanalyseerd. Figuur 3 toont representatieve beelden van ΔFosB- (groen) en c-Fos (rood) -IR-cellen in alle experimentele groepen (A, NNS; B, NS; C; ENS; D; ES). Seksuele ervaring verhoogde ΔFosB-expressie significant in NAc-core (Figuur 4A: F1,15 = 12.0; p = 0.003) en shell (Figuur 4C: F1,15 = 9.3; p = 0.008). Daarentegen had het paren van 1 uur voorafgaand aan perfusie geen effect op ΔFosB-expressie (Figuur 4A, C) en er werd geen interactie gedetecteerd tussen seksuele ervaring en paring onmiddellijk voorafgaand aan perfusie. Er was een algemeen effect van paring voorafgaand aan perfusie op de expressie van c-Fos in zowel de NAc-kern (Figuur 4B: F1,15 = 27.4; p <0.001) en shell (Figuur 4D: F1,15 = 39.4; p <0.001). Bovendien werd een algemeen effect van seksuele ervaring gedetecteerd in de NAc-kern (Figuur 4B: F1,15 = 6.1; p = 0.026) en shell (Figuur 4D: F1,15 = 1.7; p = 0.211) en een interactie tussen seksuele ervaring en paring voorafgaand aan perfusie werd gedetecteerd in de NAc-kern (F1,15 = 6.5; p = 0.022), met een trend in de schaal (F1,15 = 1.7; p = 0.211; F1,15 = 3.4; p = 0.084). Post-hocanalyses toonden door paring geïnduceerde c-Fos-expressie in de kern en de schaal van seksueel naïeve mannen (Figuur 4B, D). Bij seksueel ervaren mannen was c-Fos echter niet significant verhoogd in NAc-core (Figuur 4B) en aanzienlijk verzwakt in de schaal (Figuur 4D). Dus, seksuele ervaring veroorzaakte een vermindering van paring-geïnduceerde c-Fos-expressie. P-waarden voor specifieke paarsgewijze vergelijkingen staan ​​in de figuurlegenda.

Figuur 3     

Representatieve beelden die ΔFosB (groen) en c-Fos (rood) in NAc voor elke experimentele groep tonen. Schaalbalk geeft 100 μm aan.
Figuur 4     

Door sekservaring geïnduceerde ΔFosB en paring-geïnduceerde c-Fos. Getallen van ΔFosB (Core, A; Shell, C; ACA, E) of c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) immunoreactieve cellen voor elke groep: NNS (n = 5), NS (n = 5), ENS (n = 5) of ES (n = 4). Gegevens worden uitgedrukt ...

Het effect van seksuele ervaring op door paring geïnduceerde c-Fos-niveaus was niet beperkt tot het NAc. Een vergelijkbare verzwakking van c-Fos-expressie werd waargenomen in de ACA bij seksueel ervaren dieren in vergelijking met seksueel naïeve controles. Seksuele ervaring had een significant effect op ΔFosB-expressie in de ACA (Figuur 4E: F1,15 = 154.2; p <0.001). Paring voorafgaand aan perfusie had geen effect op ΔFosB-expressie (Figuur 4C) maar aanzienlijk toegenomen c-Fos (Figuur 4F: F1,15 = 203.4; p <0.001) in de ACA. Bovendien was door paring geïnduceerde c-Fos-expressie in de ACA significant verminderd door seksuele ervaring (Figuur 4F: F1,15 = 15.8; p = 0.001). Een tweewegsinteractie tussen seksuele ervaring en paring voorafgaand aan perfusie werd gedetecteerd voor c-Fos-expressie (Figuur 4F: F1,15 = 15.1; p <0.001). P-waarden voor specifieke paarsgewijze vergelijkingen staan ​​in de figuurlegendes. Ten slotte was er geen significante vermindering van door paring geïnduceerde c-Fos-expressie in de mediale preoptische kern (NS: Avg 63.5 +/- 4.0; ES: Avg 41.4 +/- 10.09), een gebied waar paringservaring geen significante toename van ΔFosB-expressie, wat aangeeft dat door paring geïnduceerde c-Fos-expressie niet in alle hersengebieden werd beïnvloed.

ΔFosB in het NAc zorgt voor versterking van seksueel gedrag

Om een ​​mogelijk moleculair mechanisme voor versterking van seksueel gedrag te onderzoeken, zoals aangetoond door ervaringsgeïnduceerde facilitering van seksueel gedrag, werden effecten van lokale manipulatie van ΔFosB-niveaus en de transcriptionele activiteit ervan bepaald. Seksuele ervaring tijdens de vier opeenvolgende ervaringssessies had een significant effect op de mount latency (Figuur 5A: F1,23 = 13.8; p = 0.001), introissie latentie (Figuur 5B: F1,23 = 18.1; p <0.001), en ejaculatie latentie (Figuur 5C: GFP, F11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP-controledieren vertoonden de verwachte ervaringsgeïnduceerde facilitering van seksueel gedrag en vertoonden significant lagere latencies voor first mount, first intromission en ejaculation tijdens ervaringssessie 4 in vergelijking met ervaringssessie 1 (Figuur 5A-C; zie figuurlegenda voor p-waarden). Deze door ervaring geïnduceerde facilitering van seksueel gedrag werd ook waargenomen in de ΔFosB-groep voor mount- en intromission-latenties, maar er werd geen significant verschil gedetecteerd in de latentie van ejaculatie (Figuur 5A-C). Daarentegen vertoonden ΔJunD-dieren een onvolgroeide facilitatie; hoewel de latencies voor mounts, intromissies en ejaculaties afnamen met herhaalde paringsessies, bereikte geen van deze parameters statistische significantie in vergelijking tussen ervaringssessies 1 en 4 (Figuur 5A-C). Tussen groepvergelijkingen voor elke ervaringssessie blijkt dat ΔJunD significant langere latenties had om te koppelen, intromit en ejaculeren tijdens ervaringssessies in vergelijking met ΔFosB en GFP (Figuur 5A-C). Bovendien hadden zowel de seksuele ervaring als de behandeling aanzienlijke gevolgen voor de copulatie-efficiëntie (Figuur 5F: seksuele ervaring, F1,12 = 22.5; p <0.001; behandeling, F1,12 = 3.3; p = 0.049). ΔFosB-mannetjes hadden verhoogde copulatie-efficiëntie tijdens ervaringssessie 4 vergeleken met ervaringssessie 1 (Figuur 5F). Bovendien hadden ΔFosB-dieren aanzienlijk minder koppelingen voorafgaand aan ejaculatie tijdens ervaringssessiedag 4, vergeleken met ervaringssessie 1 (Figuur 5D: F10,43 = 4.1; p = 0.004), en dat ΔJunD-mannetjes significant meer bergen hadden voorafgaand aan ejaculatie, waardoor de copulatie-efficiëntie aanzienlijk afnam, dan bij de andere twee groepen (Figuur 5D en F). Aldus vertoonden GFP en AmaosB-dieren ervaringsgeïnduceerde facilitering van initiatie van seksueel gedrag en seksuele prestatie, terwijl AJunD-dieren dat niet deden.

Figuur 5     

Seksueel gedrag van GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) en ΔJunD (n = 9) dieren: mount latency (A), intromission latentie (B), ejaculation latency (C), aantal mounts (D), aantal intromissies (E) en copulatie-efficiëntie (F). Gegevens worden uitgedrukt ...

Om de hypothese te testen dat ΔFosB-expressie cruciaal is voor langdurige expressie van ervaringsgeïnduceerde facilitering van seksueel gedrag, werden dieren 1-week (testsessie 1) en 2-weken (testsessie 2) getest na de laatste ervaringssessie. Inderdaad, gefaciliteerd seksueel gedrag werd gehandhaafd in zowel GFP- als ΔFosB-groepen omdat geen van de gedragsparameters verschilde tussen testsessies 1 of 2 en de laatste ervaringssessie 4, binnen GFP en ΔFosB-groepen (Figuur 5A-C; behalve voor ejaculatie-latentie en copulatie-efficiëntie in testsessie 1 voor ΔFosB-dieren). Significante verschillen tussen ΔJunD-dieren en GFP- of ΔFosB-groepen werden in beide testsessies gedetecteerd voor alle parameters voor seksueel gedrag (Figuur 5A-F). Er werden geen verschillen gevonden tussen of binnen groepen bij het vergelijken van aantallen intromissies, PEI of percentages van dieren die ejaculeerden (100% van mannetjes in alle groepen ejaculeerden tijdens de laatste vier paar sessies).

DISCUSSIE

De huidige studie toonde aan dat seksuele ervaring een accumulatie van ΔFosB veroorzaakt in verschillende limbisch-geassocieerde hersenregio's, waaronder de NAc-kern en shell, mPFC, VTA en caudate putamen. Bovendien verminderde seksuele ervaring door paring geïnduceerde expressie van c-Fos in het NAc en ACA. Tot slot werd ΔFosB in het NAc kritisch getoond bij het faciliteren van paring tijdens het verwerven van seksuele ervaring en de langdurige expressie van door ervaring geïnduceerde facilitering van seksueel gedrag. Specifiek verminderde AΔosB-gemedieerde transcriptie verzwakte ervaring-geïnduceerde facilitering van seksuele motivatie en prestaties, terwijl overexpressie van ΔFosB in het NAc veroorzaakte een verbeterde facilitering van seksueel gedrag, in termen van verhoogde seksuele prestaties met minder ervaring. Samen ondersteunen de huidige bevindingen de hypothese dat ΔFosB een cruciale moleculaire bemiddelaar is voor de langdurige neurale en gedragsplasticiteit veroorzaakt door seksuele ervaring.

De huidige bevindingen verlengen eerdere studies die seksbeleving-geïnduceerde ΔFosB in het NAc laten zien bij mannelijke ratten (Wallace c.s.. 2008) en vrouwelijke hamsters (Hedges c.s.. 2009). Wallace et al. (2008) toonde aan dat rAAV-ΔFosB overexpressie in het NAc verbeterde seksueel gedrag bij seksueel naïeve dieren tijdens de eerste paarssessie, zoals blijkt uit minder intromissies voor ejaculatie en kortere post-ejaculatie-intervallen, maar had geen effect bij seksueel ervaren mannetjes (Wallace c.s.. 2008).

In tegenstelling hiermee toonde de huidige studie geen effecten van ΔFosB-overexpressie bij seksueel naïeve mannen tijdens de eerste test, maar eerder tijdens en na de verwerving van seksuele ervaring. ΔFosB-overexpressoren vertoonden verhoogde seksuele prestaties (verhoogde copulatie-efficiëntie) vergeleken met GFP-dieren.

Bovendien testte de huidige studie de rol van ΔFosB door ΔFosB-gemedieerde transcriptie te blokkeren met behulp van een ΔJunD tot expressie brengende virale vector. Preventie van door ervaring geïnduceerde toename van ΔFosB-expressie remde door ervaring geïnduceerde facilitering van seksuele motivatie (verhoogde mount- en intromissie-latenties) evenals seksuele prestaties (verhoogde ejaculatie-latentie en aantal mounts) en daaropvolgende langdurige expressie van gefaciliteerd seksueel gedrag.

Daarom zijn deze gegevens de eersten die een verplichte rol aangeven voor ΔFosB bij het verwerven van door ervaring geïnduceerde facilitering van seksueel gedrag. Bovendien laten deze gegevens zien dat ΔFosB ook kritisch betrokken is bij de langetermijnexpressie van ervaringsgericht gefaciliteerd gedrag. We stellen voor dat deze langetermijnuitdrukking van gefaciliteerd gedrag een vorm van geheugen voor natuurlijke beloning vertegenwoordigt, en daarom is ΔFosB in NAc een bemiddelaar van beloningsgeheugen. Seksuele ervaring verhoogde ook ΔFosB-niveaus in de VTA en mPFC, gebieden die betrokken zijn bij beloning en geheugen (Balfour c.s.. 2004; Phillips c.s.. 2008). Toekomstige studies zijn nodig om een ​​mogelijk belang van ΔFosB up-regulatie in deze gebieden voor beloningsgeheugen op te helderen.

ΔFosB-expressie is zeer stabiel, en heeft daardoor een groot potentieel als moleculaire bemiddelaar van aanhoudende aanpassingen van de hersenen na chronische verstoringen (Nestler c.s.. 2001). Van ΔFosB is aangetoond dat het in de NAc geleidelijk toeneemt via meerdere cocaïnespuiten en tot enkele weken aanhoudt (Hoop c.s.. 1992; Hoop c.s.. 1994). Deze veranderingen in NAc ΔFosB-expressie zijn geassocieerd met sensibilisatie en verslaving van geneesmiddelbeloningen (Chao en Nestler 2004; McClung en Nestler 2003; McClung c.s.. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler c.s.. 2001; Zachariou c.s.. 2006). Daarentegen is de rol van ΔFosB bij het bemiddelen van natuurlijke beloningen niet genoeg onderzocht. Recent bewijs is naar voren gekomen, wat suggereert dat ΔFosB-inductie in het NAc een rol speelt bij natuurlijke beloning. ΔFosB-niveaus zijn op dezelfde manier verhoogd in de NAc na inname van sucrose en draaiende wielen. De overexpressie van ΔFosB in het striatum met behulp van bitransgene muizen of virale vectoren bij ratten veroorzaakt een toename van de inname van sucrose, verbeterde motivatie voor voedsel en verhoogde spontane wielrennen (Olausson c.s.. 2006; Wallace c.s.. 2008; Werme c.s.. 2002). De huidige gegevens dragen substantieel bij aan deze rapporten en ondersteunen verder het idee dat ΔFosB een cruciale bemiddelaar is voor beloningsversterking en natuurlijk beloningsgeheugen.

ΔFosB kan ervaren-geïnduceerde versterking van seksueel gedrag bemiddelen door inductie van plasticiteit in het mesolimbische systeem. Inderdaad, seksuele ervaring veroorzaakt een aantal langdurige veranderingen aan het mesolimbische systeem (Bradley & Meisel 2001; Frohmader c.s.. 2009; Pitchers c.s.. 2010). De• het gedragsniveau, een gesensibiliseerde reactie van het bewegingsapparaat op amfetamine en een verhoogde amfetaminebeloning zijn aangetoond bij seksueel ervaren mannelijke ratten (Pitchers c.s.. 2010); een gewijzigde motorische reactie op amfetamine is ook waargenomen bij vrouwelijke hamsters (Bradley & Meisel 2001). Verder zijn verhogingen van het aantal dendritische stekels en de complexiteit van dendritische prothesen gevonden na een periode van onthouding van seksuele ervaring bij mannelijke ratten (Pitchers c.s.. 2010). De huidige studie suggereert dat ΔFosB een specifieke moleculaire bemiddelaar kan zijn van de langetermijnresultaten van seksuele ervaring. In overeenstemming is recent aangetoond dat AFFB belangrijk is voor het induceren van dendritische wervelkolomveranderingen als reactie op chronisch cocaïnebeheer (Dietz c.s.. 2009; Doolhof c.s.. 2010).

Het is niet duidelijk welke stroomopwaartse neurotransmitter (s) verantwoordelijk is voor het induceren van ΔFosB in het NAc, maar DA is voorgesteld als kandidaat (Nye c.s.. 1995). Vrijwel alle drugs van misbruik, waaronder cocaïne, amfetamine, opiaten, cannabinoïden en ethanol, evenals natuurlijke beloningen, verhogen ΔFosB in het NAc (Perrotti c.s.. 2005; Wallace c.s.. 2008; Werme c.s.. 2002). Zowel drugsgebruik als natuurlijke beloningen verhogen de synaptische DA-concentratie in het NAc (Damsma c.s.. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). ΔFosB-inductie door drugs van misbruik is aangetoond in DA-receptor bevattende cellen en cocaïne-geïnduceerde ΔFosB wordt geblokkeerd door een D1 DA-receptorantagonist (Nye c.s.. 1995). Vandaar dat de hypothese is dat DA-afgifte de ΔFosB-expressie stimuleert en daardoor beloningsgerelateerde neuroplasticiteit veroorzaakt. Verder ondersteunen van het idee dat ΔFosB-niveaus DA-afhankelijk zijn, is de bevinding dat hersengebieden waar seksuele ervaring veranderde ΔFosB-niveaus een sterke dopaminerge input van de VTA ontvangen, inclusief de mediale prefrontale cortex en basolaterale amygdala.

In tegenstelling daarmee is ΔFosB niet verhoogd in het mediale preoptische gebied, hoewel dit gebied dopaminerge input ontvangt, hoewel uit hypothalamische bronnen (Miller & Lonstein 2009). Toekomstige studies zijn nodig om te testen of paring-geïnduceerde ΔFosB-expressie en de effecten van seksuele ervaring op seksuele motivatie en prestaties afhankelijk zijn van DA-actie. De rol van DA bij seksuele beloning bij mannelijke ratten is momenteel niet volledig duidelijk (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Er is voldoende bewijs dat DA wordt vrijgegeven in het NAc tijdens blootstelling aan een vrouw of paring (Damsma c.s.. 1992) en DA-neuronen worden geactiveerd tijdens seksueel gedrag (Balfour c.s.. 2004). Systemische injecties met een DA-receptorantagonist verhinderen echter niet de door seksuele beloning geïnduceerde geconditioneerde plaatsvoorkeur (Agmo & Berenfeld 1990) en de hypothese dat DA kritisch is voor ervaringsgeïnduceerde versterking van de paring is niet getest.

Het is ook onduidelijk wat de stroomafwaartse bemiddelaars zijn van ΔFosB-effecten op seksueel gedrag. Van ΔFosB is aangetoond dat het werkt als een transcriptionele activator en repressor via een AP-1 afhankelijk mechanisme (McClung en Nestler 2003; Peakman c.s.. 2003). Talrijke doelwitgenen zijn geïdentificeerd, waaronder het directe vroege gen c-fos (Hoop c.s.. 1992; Hoop c.s.. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal c.s.. 2008; Zhang c.s.. 2006), cdk5 (Bibb c.s.. 2001), dynorphine (Zachariou c.s.. 2006), sirtuin-1 (Renthal c.s.. 2009), NFκB-subeenheden (Ang c.s.. 2001), Theen de AMPA-glutamaatreceptor GluR2-subeenheid (Kelz c.s.. 1999). De huidige resultaten tonen aan dat door paring geïnduceerde c-Fos-spiegels verminderd waren door seksuele ervaring in hersengebieden met toegenomen ΔFosB (NAc en ACA). De onderdrukking van c-Fos lijkt afhankelijk van de periode sinds de laatste paring en herhaalde paringsessies, zoals in eerdere studies, werd een dergelijke afname in c-Fos niet gedetecteerd in mannelijke ratten die de 1-week na de laatste paarzitting (Balfour c.s.. 2004) of na seksuele ervaring bestaande uit slechts één enkele paringssessie (Lopez en Ettenberg 2002). Bovendien is de huidige bevinding consistent met het bewijs dat ΔFosB het c-fos-gen onderdrukt na chronische blootstelling aan amfetamine (Renthal c.s.. 2008). In overeenstemming met deze bevindingen, was de inductie van verschillende onmiddellijke vroege gen-mRNA's (c-fos, fosB, c-jun, junB en zif268) verminderd na herhaalde cocaïnespuiten in vergelijking met acute geneesmiddelinjecties (Hoop c.s.. 1992; Hoop c.s.. 1994), en door amfetamine geïnduceerde c-fos werd onderdrukt na het staken van de toediening van chronische amfetamine (Jaber c.s.. 1995; Renthal c.s.. 2008). De functionele relevantie van de neerwaartse regulatie van c-Fos-expressie na chronische medicamenteuze behandeling of seksuele ervaring blijft onduidelijk en er is gesuggereerd een belangrijk homeostatisch mechanisme te zijn om de gevoeligheid van een dier voor herhaalde beloningsblootstelling te reguleren (Renthal c.s.. 2008).

Concluderend laat de huidige studie zien dat ΔFosB in het NAc een integrale rol speelt in het seksuele beloningsgeheugen, wat de mogelijkheid ondersteunt dat ΔFosB belangrijk is voor algemene beloningsversterking en geheugen. De bevindingen van de huidige studie verduidelijken ons begrip van cellulaire en moleculaire mechanismen die seksuele beloning en motivatie mediëren, en voegen toe aan een verzameling literatuur waaruit blijkt dat ΔFosB een belangrijke speler is in de ontwikkeling van verslaving, door een rol te laten zien voor ΔFosB in natuurlijke beloning versterking.

Aanvullend materiaal

Supp Fig S1-S4 & Tabel S1-S2

Danksagung

Dit onderzoek werd ondersteund door subsidies van de Canadese instituten voor gezondheidsonderzoek aan LMC, het National Institute of Mental Health aan het EJN en de Natural Sciences and Engineering Research Council van Canada aan KKP en LMC.

REFERENTIES

  • Agmo A. Mannelijk seksueel gedrag van ratten. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
  • Agmo A, Berenfeld R. Versterkende eigenschappen van ejaculatie bij de mannelijke rat: rol van opioïden en dopamine. Gedrag Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
  • Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Inductie van nucleaire factor-kappaB in nucleus accumbens door chronisch cocaïnebeleid. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
  • Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksueel gedrag en seksgerelateerde omgevingsfactoren activeren het mesolimbische systeem bij mannelijke ratten. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
  • Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Effecten van chronische blootstelling aan cocaïne worden gereguleerd door het neuronale eiwit Cdk5. Natuur. 2001;410: 376-380. [PubMed]
  • Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopamine-laesies bij vrouwelijke hamsters (Mesocricetus auratus) heffen de overgevoelige effecten van seksuele ervaring op copulatory interacties met mannen op. Gedrag Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
  • Bradley KC, Meisel RL. Seksueel gedrag inductie van c-Fos in de nucleus accumbens en door amfetamine gestimuleerde locomotorische activiteit worden gesensibiliseerd door eerdere seksuele ervaring bij vrouwelijke Syrische hamsters. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
  • Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasoom-afhankelijke en -onafhankelijke mechanismen voor destabilisatie van FosB: identificatie van FosB-degron-domeinen en implicaties voor DeltaFosB-stabiliteit. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
  • Chao J, Nestler EJ. Moleculaire neurobiologie van drugsverslaving. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
  • Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Regulatie van delta FosB en FosB-achtige eiwitten door elektroconvulsieve aanvallen en cocaïnebehandelingen. Moleculaire farmacologie. 1995;48: 880-889. [PubMed]
  • Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatale celtypespecifieke overexpressie van DeltaFosB verhoogt de stimulans voor cocaïne. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
  • Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Centrale regulatie van ejaculatie. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
  • Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Seksueel gedrag verhoogt de dopamine-overdracht in de nucleus accumbens en het striatum van mannelijke ratten: vergelijking met nieuwheid en voortbeweging. Gedrag Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
  • Dietz DM, Maze I, Mechanic M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Essentiële rol voor ΔFosB bij de regulatie van cocaïne van dendritische stekels van nucleus accumbens neuronen. Society for Neuroscience Abstract. 2009
  • Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Plezier mengen: beoordeling van de effecten van medicijnen op seksueel gedrag in mensen en diermodellen. Horm Behav. 2009 In de pers.
  • Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB-overexpressie in de nucleus accumbens verhoogt de seksuele beloning bij vrouwelijke Syrische hamsters. Genen Brain Behav. 2009;8: 442-449. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Voedende en hypothalamische stimulatie verhogen de dopamine-omzet in de accumbens. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
  • Hernandez L, Hoebel BG. Voedselbeloning en cocaïne verhogen extracellulair dopamine in de nucleus accumbens zoals gemeten door microdialyse. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
  • Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Essentiële rol van het fosB-gen in moleculaire, cellulaire en gedragsmatige acties van chronische elektroconvulsieve aanvallen. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
  • Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Lokale gen knockdown in de hersenen met behulp van virale gemedieerde RNA-interferentie. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
  • Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulatie van directe vroege genexpressie en AP-1-binding in de rattenucleus accumbens door chronische cocaïne. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Inductie van een langdurig AP-1-complex dat bestaat uit veranderde Fos-achtige eiwitten in de hersenen door chronische cocaïne en andere chronische behandelingen. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
  • Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mannelijk seksueel gedrag. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
  • Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Acute en chronische amfetaminebehandelingen reguleren op verschillende manieren neuropeptide boodschapper RNA-niveaus en Fos immunoreactiviteit in rattenstriatale neuronen. Neuroscience. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
  • Jenkins WJ, Becker JB. Dynamische toename van dopamine tijdens gestimuleerde copulatie bij de vrouwelijke rat. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
  • Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Expressie van de transcriptiefactor deltaFosB in de hersenen regelt de gevoeligheid voor cocaïne. Natuur. 1999;401: 272-276. [PubMed]
  • Lopez HH, Ettenberg A. Blootstelling aan vrouwelijke ratten veroorzaakt verschillen in c-fos-inductie tussen seksueel naïeve en ervaren mannelijke ratten. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
  • Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mechanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Essentiële rol van het histon-methyltransferase G9a in door cocaïne geïnduceerde plasticiteit. Science. 2010;327: 213-216. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • McClung CA, Nestler EJ. Regulatie van genexpressie en cocaïnebeloning door CREB en DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
  • McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: een moleculaire switch voor langdurige aanpassing in de hersenen. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
  • Miller SM, Lonstein JS. Dopaminerge projecties op het mediale preoptische gebied van postpartum ratten. Neuroscience. 2009;159: 1384-1396. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Morgan JI, Curran T. Stimulus-transcriptiekoppeling in neuronen: rol van cellulaire direct-vroege genen. Trends Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
  • Nestler EJ. Moleculaire mechanismen van drugsverslaving. Neurofarmacologie. 2004;47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
  • Nestler EJ. De neurobiologie van cocaïneverslaving. Sci Pract Perspectief. 2005;3: 4-10. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Nestler EJ. Beoordeling. Transcriptionele verslavingsmechanismen: rol van DeltaFosB. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: een aanhoudende moleculaire switch voor verslaving. Proc Natl Acad Sci US A. 2001;98: 11042-11046. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmacologische studies van de regulatie van chronische FOS-gerelateerde antigeeninductie door cocaïne in het striatum en nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
  • Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB in de nucleus accumbens reguleert voedselversterkt instrumentaal gedrag en motivatie. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
  • Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Induceerbare, hersenregio-specifieke expressie van een dominante negatieve mutant van c-Jun in transgene muizen verlaagt de gevoeligheid voor cocaïne. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
  • Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB accumuleert in een GABAergic celpopulatie in de achterste staart van het ventrale tegmentale gebied na behandeling met psychostimulantia. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
  • Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Inductie van deltaFosB in beloningsgerelateerde hersenstructuren na chronische stress. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
  • Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Verschillende patronen van DeltaFosB-inductie in de hersenen door misbruik van drugs. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Pfaus JG. Paden van seksueel verlangen. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
  • Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Conditionering en seksueel gedrag: een beoordeling. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
  • Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Een top-down perspectief op dopamine, motivatie en geheugen. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
  • Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticiteit in het mesolimbische systeem veroorzaakt door natuurlijke beloning en daaropvolgende beloningsonthouding. Biol Psychiatry. 2010;67: 872-879. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB bemiddelt epigenetische desensitisatie van het c-fos-gen na chronische blootstelling aan amfetamine. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Genoom-brede analyse van chromatine regulatie door cocaïne onthult een rol voor sirtuins. Neuron. 2009;62: 335-348. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksuele beloning bij mannelijke ratten: effecten van seksuele ervaring op geconditioneerde plaatsvoorkeuren geassocieerd met ejaculatie en intromissies. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylering van DeltaFosB bemiddelt de stabiliteit in vivo. Neuroscience. 2008
  • Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulering van DeltaFosB-stabiliteit door fosforylering. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
  • Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. De invloed van DeltaFosB in de nucleus accumbens op natuurlijk beloningsgerelateerd gedrag. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB regelt wielrennen. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
  • Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB-inductie in orbitofrontale cortex medieert tolerantie voor door cocaïne geïnduceerde cognitieve dysfunctie. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
  • Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Een essentiële rol voor DeltaFosB in de nucleus accumbens in morfineactie. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
  • Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos faciliteren de verwerving en het uitsterven van door cocaïne geïnduceerde persistente veranderingen. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]