OPMERKINGEN: verklaart het verschil tussen door stress veroorzaakte deltafosb-inductie en deltafosb-inductie die de nucleus accumbens gevoelig maakt
Biol Psychiatry. 2012 Jan 1; 71 (1): 44-50. doi: 10.1016 / j.biopsych.2011.08.011. Epub 2011 Sep 29.
Muschamp JW, Nemeth CL, Robison AJ, Nestler EJ, Carlezon WA Jr.
bron
Afdeling Psychiatrie, Harvard Medical School, McLean Hospital, 115 Mill Street, Belmont, MA 02478, VS.
Abstract
Achtergrond
Verhoogde expressie van de transcriptiefactor ΔFosB vergezelt herhaalde blootstelling aan drugs van misbruik, met name in hersengebieden die geassocieerd zijn met beloning en motivatie (bijvoorbeeld nucleus accumbens [NAc]). De aanhoudende effecten van ΔFosB op doelwitgenen kunnen een belangrijke rol spelen bij de ontwikkeling en expressie van gedragsaanpassingen die verslaving kenmerken. Deze studie onderzoekt hoe ΔFosB de responsiviteit van het hersenbeloningsysteem op belonende en aversieve geneesmiddelen beïnvloedt.
Methoden
We gebruikten het intracraniële zelfstimulatie (ICSS) -paradigma om de effecten van cocaïne in transgene muizen met induceerbare overexpressie van ΔFosB in striatale regio's (waaronder NAc en dorsale striatum) te beoordelen. Muizen geïmplanteerd met laterale hypothalamus stimulerende elektroden werden getraind met behulp van de 'rate-frequency'-procedure voor ICSS om de frequentie te bepalen waarbij stimulatie lonend wordt (drempelwaarde).
Resultaten
Een dosis-effect-analyse van cocaïne-effecten onthulde dat muizen die ΔFosB overmatig tot expressie brengen, een verhoogde gevoeligheid tonen voor de belonende (drempelverlagende) effecten van het medicijn, in vergelijking met nestgenootcontroles. Interessant genoeg waren muizen die ΔFosB overmatig tot expressie brachten ook minder gevoelig voor de depressieve (drempelverhogende) effecten van U50488, een kappa-opioïde agonist waarvan bekend is dat deze dysforie en stressachtige effecten bij knaagdieren veroorzaakt.
Conclusies
Deze gegevens suggereren dat inductie van ΔFosB in striatale regio's twee belangrijke gedragsconsequenties heeft - verhoogde gevoeligheid voor geneesmiddelbeloning en verminderde gevoeligheid voor afkeer - het produceren van een complex fenotype dat tekenen van kwetsbaarheid voor verslaving en veerkracht tegen stress vertoont.
sleutelwoorden: transcriptiefactor, nucleus accumbens, hersenstimulatiebeloning, verslaving, veerkracht, stress, model, muis
INLEIDING
Blootstelling aan drugs van misbruik leidt tot de uitdrukking van fos familietranscriptiefactoren in neuronen van de nucleus accumbens (NAc; 1), een structuur die verband houdt met drugsgebruik en ander gemotiveerd gedrag (2-5). Hoewel de meeste eiwitten uit de Fos-familie tijdelijk worden weergegeven na blootstelling aan geneesmiddelen en dit effect wordt verzwakt door chronische dosering, ΔFosB, een splitsingsvariant van de FosB gen, is resistent tegen afbraak en hoopt zich op bij herhaalde blootstelling aan geneesmiddelen (6, 7). Er is nu aanzienlijk bewijs dat aanhoudende verhogingen van expressie van ΔFosB binnen dynorphin / substantie P-positieve medium stekelige neuronen van het NAc een neuroadaptatie is die leidt tot verhoogde gevoeligheid voor drugs van misbruik en kwetsbaarheid voor het ontwikkelen van gedragskenmerken die kenmerkend zijn voor verslaving (8, 9). Inderdaad, cocaïne vestigt geconditioneerde plaatsvoorkeuren bij lagere doses in transgene muizen met induceerbare, celspecifieke overexpressie van ΔFosB in deze neuronen dan in controlemuizen (10). Bovendien krijgen ΔFosB-tot overexpressie brengende muizen intraveneuze cocaïne zelftoediening bij lagere doses en besteden grotere inspanningen (dwz hogere 'breekpunten') voor cocaïne-infusies in progressieve verhoudingschema's van versterking (11). Samen geven deze gegevens aan dat verhoogde ΔFosB in het NAc de gevoeligheid voor de belonende effecten van cocaïne verhoogt.
Verschillende vormen van chronische stress, waaronder herhaalde fysieke beperkende stress of sociale nederlaagstress, induceren ΔFosB in het NAc en verschillende andere hersenregio's (12-14). Een dergelijke inductie wordt ruwweg gelijk gezien in dynorphin / substantie P- en enkefaline-uiting middelgrote stekelige neuronen. Omdat hogere niveaus van ΔFosB in NAc ook de gevoeligheid voor natuurlijke beloningen verhogen (15-17), kunnen deze gegevens een compenserende reactie weerspiegelen die mogelijk een deel van de aversieve (dysfore) effecten van chronische stress kan compenseren. Deze mogelijkheid wordt ondersteund door experimenten waarbij wildtype muizen onderworpen aan chronische sociale nederlaag stress een sterke negatieve correlatie vertonen tussen ΔFosB niveaus in NAc en de mate waarin de muizen schadelijke gedragsreacties vertonen op de stress. Deze gegevens worden aangevuld door experimenten waarbij dezelfde lijn van ΔFosB-tot overexpressie brengende muizen die een verhoogde gevoeligheid voor cocaïne vertonen, ook minder vatbaar is voor chronische sociale nederlaagstress (14). Als zodanig lijkt verhoogde expressie van ΔFosB in het NAc resistentie tegen stress te veroorzaken ('resilience').
Er is groeiend bewijs dat kappa-opioïde receptor (KOR) -systemen van hersenen een belangrijke rol spelen in de motivationele aspecten van stress. Toediening van KOR-agonisten produceert dysforie bij mensen (18, 19) en een breed scala aan depressiveachtige effecten bij knaagdieren (20-24). Belangrijk is dat KOR-agonisten bepaalde aspecten van stress kunnen nabootsen (25-28). Een mechanisme waardoor dit zou kunnen gebeuren, is via interacties tussen de stress peptide corticotropin releasing factor (CRF) en dynorfine, het endogene ligand voor KORs (29): de aversieve effecten van stress verschijnen als gevolg van CRF-receptor-gemedieerde stimulatie van de afgifte van dynorfine en daaropvolgende stimulatie van KOR's (30, 31). Ter ondersteuning van dit mechanisme blokkeren KOR-antagonisten de effecten van stress (20, 25, 32-35). Gezamenlijk suggereren deze bevindingen dat studies met KOR-agonisten een aanzienlijk inzicht kunnen verschaffen in de hersenmechanismen van stressrespons bij knaagdieren.
De huidige onderzoeken waren bedoeld om grondiger te evalueren hoe verhoogde expressie van ΔFosB de gevoeligheid voor belonende en aversieve stimuli beïnvloedt door een enkele gedragstest te gebruiken die zeer gevoelig is voor beide: het intracraniële zelfstimulatie (ICSS) -paradigma. In deze test voeren muizen zelf belonende elektrische stimulatie uit via elektroden geïmplanteerd in de laterale hypothalamus. Geneesmiddelen van misbruik verminderen de hoeveelheid stimulatie die reageert ("drempels"), terwijl behandelingen die anhedonie of dysforie bij mensen veroorzaken (bijv. Ontwenning van geneesmiddelen, antipsychotica, anti-manische middelen, kappa-opioïde receptor [KOR] -agonisten, stress) ICSS-drempels verhogen, wat aangeeft dat stimuleringsbedragen die eerder aanhielden, niet langer effectief zijn als gevolg van de behandeling (voor beoordeling, zie 36). Als zodanig is ICSS gevoelig voor manipulaties die de beloning verhogen, de beloning verminderen of de aversie verhogen. Het gebruik van een enkele gedragstest om de gevoeligheid voor beloning en aversieve stimuli te evalueren, is in het bijzonder voordelig bij transgene muizen omdat het een gestandaardiseerde reeks testomstandigheden en parameters mogelijk maakt, waardoor de variabiliteit tussen de testen in responsvereisten en behandelingsgeschiedenis die de interpretatie van de gegevens kan compliceren, wordt verminderd. We ontdekten dat muizen met verhoogde expressie van ΔFosB in dynorfine / substantie P tot expressie brengende middelgrote stekelige neuronen van NAc en dorsale striatum een verhoogde gevoeligheid hebben voor de belonende effecten van cocaïne, gepaard gaand met verminderde gevoeligheid voor de stressachtige (aversieve) effecten van de KOR-agonist U50488, het produceren van een fenotype dat kenmerken vertoont van verhoogde kwetsbaarheid voor verslaving maar toegenomen veerkracht tegen stress.
MATERIALEN EN METHODES
Dieren
Een totaal van 23-induceerbare, bitransgene mannelijke muizen die AFFB (11A-lijn) tot expressie brachten, werden gegenereerd met behulp van een door tetracycline gereguleerd genexpressiesysteem (37). Mannelijke muizen die de NSE-tTA en TetOP-ΔFosB transgenen dragen, werden opgewekt op water dat doxycycline bevatte (DOX, 100 μg / ml; Sigma, St. Louis MO). Experimenten begonnen acht weken na het verwijderen van 13-muizen uit DOX om een stabiele 7-voudige toename van door TetOp gemedieerde ΔFosB-transgene expressie mogelijk te maken binnen dynorfine-positieve neuronen van het striatum (ΔFosB-ON; zie 10, 37, 38). Elf muizen bleven op DOX voor de duur van de experimenten en vormden een controlegroep (controle). De muizen waren nestgenoten die voor minstens 57-generaties teruggekruist waren tot een C6BL / 12-achtergrond en werden individueel gehuisvest met ad libitum toegang tot voedsel en water op een 12 h light-cyclus (7: 00 AM tot 7: 00 PM). Bovendien werden 9-muizen die het NSE-tTA-transgen alleen droegen, gebruikt als een tweede controlegroep; ze werden opgewekt op DOX en vervolgens gedurende ~ 8 weken verwijderd uit DOX voorafgaand aan verder experimenteren (OFF-DOX). Procedures werden uitgevoerd in overeenstemming met de 1996 National Institutes of Health (NIH) Gids voor de verzorging en het gebruik van laboratoriumdieren en met de goedkeuring van het Institutional Animal Care and Use Committee in McLean Hospital.
immunohistochemie
Transgene overexpressie werd bevestigd door immunohistochemie voor FosB (Fig 1). Bitransgene muizen werden opgeofferd en trascadiaal geperfuseerd met 0.1 M fosfaat-gebufferde zoutoplossing en 4% paraformaldehyde. Hersenen werden vervolgens verwijderd, achteraf gefixeerd en cryobeschermd zoals eerder beschreven (14, 38). Weefsel werd in het coronale vlak in 30 mm-coupes gesneden en coupes immunologisch gekleurd met behulp van een FosB-antilichaam (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA). Diaminobenzidinekleuring werd gebruikt om FosB-positieve cellen zichtbaar te maken. Beelden werden verkregen met behulp van een Zeiss Imager 1 beeldcontrastmicroscoop en digitaal vastgelegd met Axiovison-software (Carl Zeiss USA, Peabody, MA).
Representatieve microfoto's van bitransgene muizen met overexpressie van ΔFosB. Nucleaire labeling voor FosB is lager bij controlemuizen die op doxycycline (linkerpaneel) worden gehouden dan die waaraan doxycycline niet is gegeven (rechts). ac = anterior commisure; NAc ...
ICSS
Muizen (25-28 g) werden geanesthetiseerd met een intraperitoneale (IP) injectie van een ketamine-xylazine mengsel (80-10 mg / kg; Sigma) en geïmplanteerd met monopolaire stimulerende elektroden die stereotactisch gericht waren naar de mediale voorhersenenbundel (MFB; in mm) van bregma, AP: -1.9, ML: -0.8, DV: -4.8 onder dura, volgens de atlas van Paxinos en Franklin, 2nd ed., 2001). Na een herstelperiode van één week werden muizen getraind om te reageren op hersenstimulatie tijdens dagelijkse sessies van één uur (39). Stimulatiestroom werd aangepast naar de laagste waarde die stabiel reageren (60 ± 6 responsen / min.) Gedurende 3 opeenvolgende dagen zou ondersteunen. Deze waarde werd beschouwd als de 'minimale stroom' en deze benadering is eerder gebruikt om door mutatie geïnduceerde verschillen in basale gevoeligheid voor de lonende effecten van stimulatie te identificeren (40). Nadat voor elke muis een minimale stroom was gemeten, werd deze constant gehouden. Muizen mochten vervolgens reageren op een van de 15-stimulatiefrequenties, gepresenteerd in aflopende volgorde (0.05-logboek10 eenheidsstappen) gedurende vijftien 50 sec-proeven. Proeven werden voorafgegaan door een tweede 5-prime waarbij niet-contingente stimulatie werd gegeven, gevolgd door een 5 sec-time-out waarin de respons niet werd versterkt. Elke set van 15-trials (of "pass") werd gepresenteerd en reageerde tijdens elke 50 sec-studie. Tijdens de 3-4 weektraining van de training, werd het bereik van de gebruikte frequenties aangepast, zodat muizen stabiel reageerden via de hoogste 6-7-frequenties via 6-passes (90 min van training). De laagste frequentie die ondersteunde antwoorden (ICSS-drempelwaarde of 'theta-zero') werd berekend met behulp van de kleinste kwadraten-lijn van de best passende analyse (36, 41). Wanneer werd waargenomen dat dieren stabiele gemiddelde ICSS-drempels hebben (± 10% over 5 opeenvolgende dagen), werd het effect van geneesmiddelbehandelingen op de ICSS-drempel gemeten.
Drugstest
Cocaïne HCl en (±) -trans-U50488 methaansulfanoaat (Sigma) werden opgelost in 0.9% zoutoplossing en IP geïnjecteerd in een volume van 10 ml / kg. Muizen reageerden door 3-passen onmiddellijk voorafgaand aan medicamenteuze behandeling en drempels van de tweede en derde doorgang gemiddeld om de basislijn (drempelwaarde en maximale responsratio) parameters te verkrijgen. Elke muis ontving vervolgens een injectie van een geneesmiddel of vehikel en werd getest op 15 min onmiddellijk na injecties. Bitransgene muizen kregen doses cocaïne (0.625-10 mg / kg) of U50488 (0.03-5.5 mg / kg) in stijgende volgorde. De OFF-DOX-muizen ontvingen alleen cocaïne. Elke medicamenteuze behandeling volgde een test met drager op de voorgaande dag om te verzekeren dat de muis was hersteld van eerdere behandelingen en geconditioneerde medicijneffecten te minimaliseren. Een interval van twee weken werd gegeven tussen cocaïne en U50488 experimenten. Zoals hierboven werden dieren die geen stabiele baseline-respons vertoonden uitgesloten. Groepsverschillen werden geanalyseerd met behulp van t-test (minimale stroomsterkte), ANOVA's (effecten van medicamenteuze behandelingen op drempelwaarde en maximale snelheid); significante effecten werden verder geanalyseerd met behulp van post hoc tests (Dunnett's test). In elk geval werden vergelijkingen gemaakt op basis van de nulhypothese dat betekent dat bij met medicijnen behandelde aandoeningen niet zouden verschillen van het gemiddelde in de met een voertuig behandelde aandoening. Omdat het bekend is dat cocaïne de drempels voor beloning in ICSS verlaagt (42), werden vergelijkingen met vehiculum gemaakt op basis van de hypothese dat cocaïne de drempels voor beloning zou verlagen. Omgekeerd, omdat is aangetoond dat kappa-agonisten de beloningsdrempels in ICSS verhogen (23), werden vergelijkingen gemaakt met het voertuig op basis van de hypothese dat U50488 zou op dezelfde manier beloningsdrempels verhogen. Elektrode-plaatsingen werden bevestigd door histologie (Fig 2).
Representatieve microfoto toont plaatsing van stimulerende elektroden voor ICSS (pijl). LHA = lateraal hypothalamisch gebied; fx = fornix. Schaalbalk = 250 μm.
RESULTATEN
ΔFosB overexpressie en minimale stroommetingen
Alle muizen namen snel ICSS-gedrag over en reageerden met hoge snelheden op MFB-stimulatie. Er waren geen groepsverschillen in de minimumdrempel tussen muizen met overexpressie van ΔFosB in striatum en NAc (ΔFosB-ON) en die op DOX (controle; t(22)= 0.26, niet significant [ns]) (Fig 3) Dit geeft aan dat de genetische manipulatie zelf geen effect heeft op de gevoeligheid voor de lonende impact van laterale hypothalamische stimulatie bij baseline-omstandigheden.
Induceerbare ΔFosB-overexpressie heeft geen effect op de minimale stroom die nodig is om ICSS te ondersteunen. Scatterplot toont de gemiddelde minimumstroom (balken) die vereist is om robuust ICSS-gedrag (60 ± 6 responsen / min) in afzonderlijke muizen (gevulde cirkels) te ondersteunen ...
ΔFosB overexpressie en cocaïne-effecten
Cocaïne verlaagde de gemiddelde ICSS-drempels in alle groepen muizen, waardoor verschuivingen naar links in ICSS-frequentie-frequentiefuncties plaatsvonden (Fig. 4A, B). ΔFosB-ON-muizen waren gevoeliger voor de lonende effecten van cocaïne: een 2-manier herhaalde ANOVA metingen op gemiddelde ICSS-drempels onthulde de belangrijkste effecten van cocaïnedosis (F(5,65)= 11.20, P<0.01), en DOX-behandeling (F(1,13)= 6.23, P<0.05), maar geen dosis × DOX-interactie (F(5,65)= 0.87, ns). Vooraf geplande contrasten (de tests van Dunnett) met behandeling met zoutoplossing binnen elke groep onthulden dat ΔFosB-ON-muizen (n= 8) toonde significante verlagingen van de ICSS-grenswaarde bij doses ≥1.25 mg / kg, terwijl een dosis 10 mg / kg nodig was om significante effecten te produceren bij Control-muizen (ON-DOX) (Fig. 4C). Een 2-manier herhaalde metingen ANOVA op maximale responspercentages onthulde een significant hoofdeffect van cocaïnedosis (F(5,65)= 3.89, P<0.05). Vooraf geplande contrasten met behandeling met een zoutoplossing in elke groep toonden aan dat cocaïne snelheidverhogende effecten produceerde bij doses ≥ 5 mg / kg in ΔFosB-ON-muizen, zonder effect bij welke dosis dan ook bij controlemuizen (Fig. 4D). Er was geen hoofdeffect van DOX-behandeling (F(1,13)= 1.56, ns), en er was ook geen dosis x DOX-interactie (F(5,65)= 0.43, ns). DOX-behandeling alleen had geen effect op het reageren op de geteste dosis van cocaïne (10 mg / kg) omdat controle en OFF-DOX-groepen geen verschil in beloningsdrempels vertoonden (Fig. 4C, inzet; t(14)= 0.27, ns), of maximale reactiesnelheid (Fig. 4D, inzet; t(14)= 0.34, ns).
Induceerbare ΔFosB-overexpressie verhoogt de gevoeligheid voor de belonende effecten van cocaïne. (A, B) Frequentiefrequentiefuncties voor individuele representatieve muizen in elke groep demonstreren verschuivingen naar links in beide groepen die groter zijn in ΔFosB-ON ...
ΔFosB overexpressie en U50488 duurt
De KOR-agonist U50488 verhoogde gemiddelde ICSS-drempels in controlemuizen, waardoor naar rechts verschuivingen in de frequentiefrequentiefunctie van deze groep plaatsvonden, terwijl ΔFosB-ON-muizen ongevoelig voor het geneesmiddel waren (Fig. 5A, B). Een herhaalde 2-metingen ANOVA op gemiddelde ICSS-drempels toonden de belangrijkste effecten van de dosis van het geneesmiddel aan (F(6,60)= 3.45, P<0.01), DOX-behandeling (F(1,10)= 18.73, P<0.01), en een significante dosis × DOX-interactie (F(6,60)= 2.95, P<0.05). Post hoc testen (Dunnett's test) toonden aan dat, in vergelijking met zoutoplossing, U50488 (5.5 mg / kg) veroorzaakte significante verhogingen van ICSS-drempels in controlemuizen (n= 4) maar had geen effect in ΔFosB-ON-muizen (Fig. 5C). Bovendien was er een significant verschil tussen groepen bij deze dosis. Een 2-manier herhaalde ANOVA metingen op maximale responspercentages toonden geen hoofdeffecten van de dosis (F(6,60)= 1.95, ns) of DOX-behandeling (F(1,10)= 4.66, ns [P= 0.06]), noch was er een dosis × DOX-interactie (F(6,60)= 1.31, ns) (Fig. 5D). Deze gegevens geven dat aan U50488 had geen significante invloed op de respons onder de geteste omstandigheden.
Induceerbare ΔFosB-overexpressie blokkeert anhedonische effecten van U50488. (A, B) Snelheidsfrequentiefuncties voor individuele representatieve muizen in elke groep tonen rechts ...
DISCUSSIE
We laten zien dat muizen met induceerbare overdruk van ΔFosB in NAc en andere striatale regio's gevoeliger zijn voor de belonende effecten van cocaïne en minder gevoelig zijn voor de prodepressieve effecten van de KOR-agonist U50488 vergeleken met normale muizen.
Deze gegevens komen overeen met de bestaande literatuur over de rol van ΔFosB bij de beloning en stress van geneesmiddelen en breiden deze op verschillende belangrijke manieren uit. Eerder werk met de effecten van ΔFosB-overexpressie op geneesmiddelbeloning gebruikte plaatsconditionering of paradigma's voor zelfmedicatie met geneesmiddelen (10, 11). Gegevens uit ICSS-experimenten vullen dit werk aan door een 'real-time' index te bieden van de invloed van geneesmiddelen op de gevoeligheid van hersenkeloncircuits. Studies in wildtype muizen hebben aangetoond dat farmacologische manipulaties kunnen toenemen (bijv. Cocaïne) of afnemen (bijv. U50488) de lonende impact van MFB-stimulatie (24); ICSS biedt dus een methode voor het kwantificeren van de hedonische toestand, terwijl een dier onder de invloed is van een medicamenteuze behandeling. Omdat geneesmiddelen waarvan bekend is dat ze mensen belonen of afwenden, tegenovergestelde (dwz lagere en hogere drempels, respectievelijk) output produceren in ICSS van knaagdieren, kan het paradigma deze toestanden betrouwbaarder dissociëren dan zelftoediening door geneesmiddelen, waarbij lagere zelftoedieningssnelheden kunnen duiden op verzadiging of op het ontstaan van aversieve effecten (36). Bovendien vermijdt ICSS de mogelijke verwarring die medicamenteuze behandelingen kunnen aanwenden voor de ontwikkeling en expressie van geleerde responsen in klassieke conditioneringsparadigma's die vaak worden gebruikt om de beloning van geneesmiddelen te bestuderen (dat wil zeggen plaatsconditionering).
Onze ICSS-drempelwaarden geven duidelijk aan dat inductie van ΔFosB de belonende effecten van cocaïne verbetert, omdat het medicijn significante verlagingen van ICSS-drempels bij lagere doses produceert dan bij nestgenootcontroles waarin overexpressie niet was geïnduceerd. Het feit dat de ΔFosB-ON-muizen ook verhoogde maximale reactiesnelheid lieten zien bij hoge doses cocaïne, verhoogt de mogelijkheid dat ΔFosB-overexpressie op ICSS-drempels een artefact is van verhoogde locomotorische activiteit of responsmogelijkheden (43). Dit is om verschillende redenen onwaarschijnlijk. Ten eerste maakt onze analysemethode voor het meten van theta-0 gebruik van een best passende kleinstekwadraten om de frequentie te schatten waarop stimulatie lonend wordt. Omdat het regressiealgoritme extreme waarden toekent, is het minimaal gevoelig voor door behandeling geïnduceerde wijzigingen in responsmogelijkheden; daarentegen kunnen wijzigingen in responsmogelijkheden alleen artefactuele verschuivingen in drempels veroorzaken bij gebruik van M-50, een meting die analoog is aan een ED-50 in farmacologie (zie 36, 41, 44, 45). Ten tweede zijn de toenames in maximale responspercentages boven de basiswaarden alleen duidelijk bij de hoogste doses cocaïne, twee keer hoger dan die waarbij de ICSS-drempels van ΔFosB-ON-dieren significant lager zijn dan bij de controles. Tenslotte, als de effecten van ΔFosB op ICSS-drempels te wijten waren aan niet-specifieke activerende effecten van de mutatie, kan van de muizen ook worden verwacht dat ze een grotere gevoeligheid voor de effecten van MFB-stimulatie zelf vertonen, wat zich manifesteert als een lagere gemiddelde minimumstroom om snelheden te ondersteunen van 60 ± 6-responsen / min, of door verhogingen van de maximale responspercentages na de behandeling met het voertuig. We vonden geen bewijs van een van deze effecten. Samen suggereren deze bevindingen dat ΔFosB-overexpressie een verhoogde gevoeligheid veroorzaakt voor zowel de belonende (bij lage tot hoge doses) en stimulerende (alleen bij hoge doses) effecten van cocaïne. Een vergelijkbaar patroon van effecten is eerder gemeld bij muizen met een mutatie die manieachtige tekens produceert (40).
Interessant is dat ΔFosB overexpressie de drempelverhogende, pro-depressieve effecten van elimineerde U50488. Deomdat KOR-agonistbehandelingen bepaalde effecten van stress kunnen nabootsen (25-28), deze bevinding is een vermoedelijk teken van veerkracht; inderdaad, ΔFosB-overexpressie is in verband gebracht met veerkracht tegen de depressief-achtige effecten van chronische sociale nederlaagstress op de voorkeur van sacharose en sociale interactie (14, 46).
Stress verhoogt de expressie van dynorfine (47, 48), en KOR-antagonisten produceren antidepressivum-achtige en anti-stress-achtige effecten (20, 32, 47, 49). Bovendien wordt de aversieve component van de activering van de hypothalamus-hypofyse-bijnieras die gepaard gaat met stress, gemedieerd door dynorfine, omdat geconditioneerde aversie tegen signalen die verband houden met zwemstress of corticotrofine-afgevende factor worden geblokkeerd door KOR-antagonisten of dynorphin-gen knock-out. (30). De muizen die in deze experimenten werden gebruikt, vertonen selectieve ABosB-overexpressie in dynorfine-neuronen van het striatum. Dit vermindert op zijn beurt de dynorfine-expressie in deze neuronen (38), een effect waarvan kan worden verwacht dat het de basisfunctie van hersenen-KOR-systemen vermindert. Bovendien, omdat KOR-activering de afgifte van dopamine (DA; 22, 50), een zender waarvan bekend is dat deze een integrale rol speelt bij de ondersteuning van ICSS (51-53), kan dit effect ook gedeeltelijk verklaren waarom ΔFosB muizen die overexpressie vertonen, een verhoogde gevoeligheid voor cocaïnebeloning vertonen. Het feit dat deze muizen een verzwakte dynorphin-tint hebben in combinatie met een ongevoeligheid voor de prodepressieve effecten van exogene KOR-agonisten, verhoogt de mogelijkheid dat de mutatie een bredere reeks neuroadaptatons produceert die in staat zijn om 'anti-beloningssystemen' in de hersenen te compenseren. (54).
Ongeacht of deze wordt geïnduceerd door chronische blootstelling aan drugs van misbruik of door stress, de inductie van AFosB en van dynorfine kan worden beschouwd als tegengestelde neuroadaptaties. ΔFosB lijkt de gevoeligheid voor een verscheidenheid aan farmacologische en natuurlijke voordelen positief te beïnvloeden (10, 11, 15). Het dynorphin-KOR-systeem lijkt echter prodepressieve toestanden te induceren die elementen van anhedonie, dysforie en afkeer bij mensen en proefdieren omvatten (19, 21, 35, 55).
Onder niet-pathologische omstandigheden kunnen deze aanpassingen elkaar compenseren, wat resulteert in een homeostatisch-achtige respons die externe invloeden op een hedonische toon compenseert. In het licht van het bewijs dat de prikkelbaarheid van NAc middelgrote stekelige neuronen omgekeerd evenredig is met de gemoedstoestand (14, 56, 57), Kan AFosB beschermende effecten uitoefenen tegen dysforie-inducerende stressoren door de exciteerbaarheid van deze cellen te verminderen via een verhoogde expressie van GluR2 (10), die de vorming van GluR2-bevattende, calcium-ondoordringbare AMPA-receptoren bevordert (herzien in 58).
Daarentegen kunnen dynorfine- of KOR-agonisten de verhoogde niveaus van DA die gepaard gaan met blootstelling aan drugs of misbruik, verzwakken (59). Verslaving en depressie bij mensen zijn vaak comorbide en worden versneld door levensstress (60-62). Daarentegen is het fenotype van AFosB tot overexpressie brengende muizen er een van toegenomen medicijnzoekend maar veerkrachtig tegen de depressieve effecten van stress. De mechanismen die ten grondslag liggen aan deze dissociatie zijn onduidelijk, maar het kan te wijten zijn aan het beperkte patroon van ΔFosB-overexpressie dat door deze muizen wordt weergegeven. Verhoogde striatale ΔFosB en daaropvolgende verlagingen van dynorfine zijn slechts twee van de vele neuroadaptaties die optreden bij blootstelling aan drugs en stress (63, 64). Als zodanig is het onwaarschijnlijk dat ze de reeks veranderingen die leiden tot comorbide symptomen van verslaving en depressie volledig reproduceren. Het is ook belangrijk om te benadrukken dat deze studies alleen de effecten van ΔFosB behandelen, en dat onder normale omstandigheden blootstelling aan drugs van misbruik en stress meer tijdelijke verhogingen van de expressie van andere Fos-familie-eiwitten die hier niet worden onderzocht, met inbegrip van FosB van volledige lengte (9).
Samengevat hebben we ICSS gebruikt in transgene muizen die ΔFosB tot overexpressie brengen om aan te tonen dat deze genetische manipulatie de belonende effecten van cocaïne verbetert. We hebben ook geconstateerd dat dit weerstand biedt tegen de prodepressieve effecten van KOR-activering door U50588. Omdat het dynorphin-KOR-systeem een sleutelbemiddelaar is van de affectieve gevolgen van stress, stemmen deze gegevens overeen met de hypothese dat ΔFosB de beloningsgevoeligheid verbetert en tegelijkertijd de respons op stressoren vermindert. Als zodanig kan het verbeteren van de ΔFosB-expressie onder sommige omstandigheden de veerkracht bevorderen.
DANKBETUIGINGEN
Deze studie werd ondersteund door het National Institute on Drug Abuse en National Institute of Mental Health (DA026250 naar JWM, MH51399 en DA008227 naar EJN, en MH063266 naar WAC).
voetnoten
Disclaimer uitgever: Dit is een PDF-bestand van een onbewerkt manuscript dat is geaccepteerd voor publicatie. Als service aan onze klanten bieden wij deze vroege versie van het manuscript. Het manuscript zal een copy-editing ondergaan, een typografie en een review van het resulterende bewijs voordat het in zijn definitieve citeervorm wordt gepubliceerd. Houd er rekening mee dat tijdens het productieproces fouten kunnen worden ontdekt die van invloed kunnen zijn op de inhoud en alle wettelijke disclaimers die van toepassing zijn op het tijdschrift.
INFORMATIEVERSCHAFFING / BELANGENCONFLICTEN
In de afgelopen 3-jaren ontving Dr. Carlezon een vergoeding van HUYA Biosciences en Myneurolab.com. Hij heeft verschillende patenten en patentaanvragen die geen verband houden met het werk dat in dit rapport wordt beschreven. Er zijn geen persoonlijke financiële holdings die kunnen worden gezien als een belangenconflict. Dr. Nestler is een consultant voor PsychoGenics en Merck Research Laboratories. Dr. Muschamp, Dr. Robison en mevrouw Nemeth rapporteren geen biomedisch financieel belang of potentiële belangenconflicten.
REFERENTIES
1. Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulatie van directe vroege genexpressie en AP-1-binding in de rattenucleus accumbens door chronische cocaïne. Proc Natl Acad Sci US A. 1992; 89: 5764-5768. [PMC gratis artikel] [PubMed]
2. Mogenson GJ, Jones DL, Yim CY. Van motivatie naar actie: functionele interface tussen het limbisch systeem en het motorsysteem. Prog Neurobiol. 1980, 14: 69-97. [PubMed]
3. Carlezon WA, Jr, Thomas MJ. Biologische substraten van beloning en afkeer: een nucleus accumbens-activiteitshypothese. Neurofarmacologie. 2009; 56 Suppl 1: 122-132. [PMC gratis artikel] [PubMed]
4. Pennartz CM, Groenewegen HJ, Lopes da Silva FH. De kern accumbens als een complex van functioneel verschillende neuronale ensembles: een integratie van gedrags-, elektrofysiologische en anatomische gegevens. ProgNeurobiol. 1994, 42: 719-761. [PubMed]
5. Pierce RC, Vanderschuren LJ. De gewoonte de baas: de neurale basis van ingebakken gedrag bij cocaïneverslaving. Neurosci Biobehav Rev. 2010; 35: 212-219. [PMC gratis artikel] [PubMed]
6. Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, et al. Inductie van een langdurig AP-1-complex dat bestaat uit veranderde Fos-achtige eiwitten in de hersenen door chronische cocaïne en andere chronische behandelingen. Neuron. 1994, 13: 1235-1244. [PubMed]
7. Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, et al. Regulatie van delta FosB en FosB-achtige eiwitten door elektroconvulsieve aanvallen en cocaïnebehandelingen. Mol Pharmacol. 1995, 48: 880-889. [PubMed]
8. McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. ΔFosB: een moleculaire schakelaar voor langdurige aanpassing in de hersenen. Moleculair hersenonderzoek. 2004, 132: 146-154. [PubMed]
9. Nestler EJ. Transcriptionele verslavingsmechanismen: rol van ΔFosB. Filosofische transacties van de Royal Society B: Biological Sciences. 2008, 363: 3245-3255. [PMC gratis artikel] [PubMed]
10. Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, et al. Expressie van de transcriptiefactor deltaFosB in de hersenen regelt de gevoeligheid voor cocaïne. Natuur. 1999, 401: 272-276. [PubMed]
11. Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatale celtypespecifieke overexpressie van DeltaFosB verhoogt de stimulans voor cocaïne. J Neurosci. 2003, 23: 2488-2493. [PubMed]
12. Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, et al. Inductie van deltaFosB in beloningsgerelateerde hersenstructuren na chronische stress. J Neurosci. 2004, 24: 10594-10602. [PubMed]
13. Nikulina EM, Arrillaga-Roma I, Miczek KA, Hammer RP., Jr Langdurige wijziging in mesocorticolimbische structuren na herhaalde sociale nederlaagstress bij ratten: tijdsverloop van mu-opioïde receptor-mRNA en immunoseactiviteit van FosB / DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2008, 27: 2272-2284. [PMC gratis artikel] [PubMed]
14. Vialou V, Robison AJ, LaPlant QC, Covington HE, Dietz DM, Ohnishi YN, et al. ΔFosB in hersen-beloningscircuits bemiddelt veerkracht tegen stress en antidepressieve responsen. Nature Neuroscience. 2010, 13: 745-752. [PMC gratis artikel] [PubMed]
15. Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, et al. De invloed van FosB in de Nucleus Accumbens op natuurlijk beloningsgerelateerd gedrag. Journal of Neuroscience. 2008, 28: 10272-10277. [PMC gratis artikel] [PubMed]
16. Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB-overexpressie in de nucleus accumbens verhoogt de seksuele beloning bij vrouwelijke Syrische hamsters. Genen Brain Behav. 2009, 8: 442-449. [PMC gratis artikel] [PubMed]
17. Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, et al. DeltaFosB in de nucleus accumbens is van cruciaal belang voor het versterken van de effecten van seksuele beloning. Genen Brain Behav. 2010, 9: 831-840. [PMC gratis artikel] [PubMed]
18. Pfeiffer A, Brantl V, Herz A, Emrich HM. Psychotomie wordt gemedieerd door kappa-opiaatreceptoren. Wetenschap. 1986, 233: 774-776. [PubMed]
19. Wadenberg ML. Een overzicht van de eigenschappen van spiradoline: een krachtige en selectieve kappa-opioïde receptoragonist. CNS Drug Rev. 2003; 9: 187-198. [PubMed]
20. Mague SD. Antidepressivum-achtige effecten van kappa -Opioïde receptorantagonisten in de gedwongen zwemproef bij ratten. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2003, 305: 323-330. [PubMed]
21. Todtenkopf MS, Marcus JF, Portoghese PS, Carlezon WA., Jr Effecten van kappa-opioïde receptorliganden op intracraniële zelfstimulatie bij ratten. Psychopharmacology (Berl) 2004; 172: 463-470. [PubMed]
22. Carlezon WA, Jr, Beguin C, DiNieri JA, Baumann MH, Richards MR, Todtenkopf MS, et al. Depressief-achtige effecten van de kappa-opioïde receptoragonist salvinorin A op gedrag en neurochemie bij ratten. J Pharmacol Exp Ther. 2006, 316: 440-447. [PubMed]
23. Tomasiewicz H, Todtenkopf M, Chartoff E, Cohen B, Carlezonjr W. De Kappa-opioïde agonist U69,593 blokkeert door cocaïne geïnduceerde verbetering van hersenstimulatiebeloning. Biologische psychiatrie. 2008, 64: 982-988. [PMC gratis artikel] [PubMed]
24. Dinieri JA, Nemeth CL, Parsegian A, Carle T, Gurevich VV, Gurevich E, et al. Veranderde gevoeligheid voor belonende en aversieve geneesmiddelen bij muizen met induceerbare verstoring van cAMP-responselement-bindende eiwitfunctie in de nucleus accumbens. J Neurosci. 2009, 29: 1855-1859. [PMC gratis artikel] [PubMed]
25. McLaughlin JP, Marton-Popovici M, Chavkin C. Kappa opioïde receptorantagonisme en prodynorfine-genverstoring blokkeren stress-geïnduceerde gedragsreacties. J Neurosci. 2003, 23: 5674-5683. [PMC gratis artikel] [PubMed]
26. McLaughlin JP, Land BB, Li S, Pintar JE, Chavkin C. Eerdere activering van kappa-opioïde-receptoren door U50,488 bootst herhaaldelijk geforceerde zwemstress na om de preferentieconditionering van cocaïnepotentiëen te versterken. Neuropsychopharmacology. 2006, 31: 787-794. [PMC gratis artikel] [PubMed]
27. McLaughlin JP, Li S, Valdez J, Chavkin TA, Chavkin C. Sociale nederlaag stress-geïnduceerde gedragsreacties worden gemedieerd door het endogene kappa opioïde systeem. Neuropsychopharmacology. 2006, 31: 1241-1248. [PMC gratis artikel] [PubMed]
28. Carey AN, Lyons AM, Shay CF, Dunton O, McLaughlin JP. Endogene kappa-opioïde-activatie medieert stress-geïnduceerde tekorten in leren en geheugen. J Neurosci. 2009, 29: 4293-4300. [PubMed]
29. Chavkin C, James IF, Goldstein A. Dynorphin is een specifiek endogeen ligand van de kappa-opioïde receptor. Wetenschap. 1982, 215: 413-415. [PubMed]
30. Land BB, Bruchas MR, Lemos JC, Xu M, Melief EJ, Chavkin C. De dysfore component van stress wordt gecodeerd door activering van het dynorfine kappa-opioïde systeem. J Neurosci. 2008, 28: 407-414. [PMC gratis artikel] [PubMed]
31. Bruchas MR, Schindler AG, Shankar H, Messinger DI, Miyatake M, Land BB, et al. Selectieve p38α MAPK-deletie in serotonerge neuronen produceert stressbestendigheid in modellen van depressie en verslaving. Neuron. (In de pers) [PMC gratis artikel] [PubMed]
32. Pliakas AM, Carlson RR, Neve RL, Konradi C, Nestler EJ, Carlezon WA., Jr veranderde de gevoeligheid voor cocaïne en verhoogde immobiliteit bij de geforceerde zwemtest in verband met verhoogde cAMP-responselementbindingseiwitexpressie in nucleus accumbens. J Neurosci. 2001, 21: 7397-7403. [PubMed]
33. Beardsley PM, Howard JL, Shelton KL, Carroll FI. Differentiële effecten van de nieuwe Kappa opioïde receptorantagonist, JDTic, op herstel van cocaïne-zoeken geïnduceerd door footshock-stressoren versus cocaïneprimes en de antidepressivum-achtige effecten ervan bij ratten. Psychopharmacology (Berl) 2005; 183: 118-126. [PubMed]
34. Knoll AT, Meloni EG, Thomas JB, Carroll FI, Carlezon WA. Anxiolytisch-achtige effecten van K-Opioïde receptorantagonisten in modellen van ongeleerde en geleerde angst bij ratten. Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2007, 323: 838-845. [PubMed]
35. Knoll AT, Carlezon WA., Jr Dynorphin, stress en depressie. Brain Res. 2010, 1314: 56-73. [PMC gratis artikel] [PubMed]
36. Carlezon WA, Chartoff EH. Intracraniële zelfstimulatie (ICSS) bij knaagdieren om de neurobiologie van motivatie te bestuderen. Natuurprotocollen. 2007, 2: 2987-2995. [PubMed]
37. Chen J, Kelz MB, Zeng G, Sakai N, Steffen C, Shockett PE, et al. Transgene dieren met induceerbare, gerichte genexpressie in de hersenen. Mol Pharmacol. 1998, 54: 495-503. [PubMed]
38. Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, et al. Een essentiële rol voor ΔFosB in de nucleus accumbens bij morfineactie. Nature Neuroscience. 2006, 9: 205-211. [PubMed]
39. Gilliss BCM, Pieper J, Carlezon W. Cocaine en SKF-82958 versterken de beloning voor hersenstimulatie bij Swiss-Webster-muizen. Psychopharmacology. 2002, 163: 238-248. [PubMed]
40. Roybal K, Theobold D, Graham A, DiNieri JA, Russo SJ, Krishnan V, et al. Mania-achtig gedrag veroorzaakt door een onderbreking van CLOCK. Proc Natl Acad Sci US A. 2007; 104: 6406-6411. [PMC gratis artikel] [PubMed]
41. Miliaressis E, Rompre PP, Durivage A. Psychofysische methode voor het in kaart brengen van gedragssubstraten met behulp van een beweegbare elektrode. Brain Res Bull. 1982, 8: 693-701. [PubMed]
42. Verstandige RA. Verslavende medicijnen en beloning voor hersenstimulatie. Annu Rev Neurosci. 1996, 19: 319-340. [PubMed]
43. Liebman JM. Discriminatie tussen beloning en prestaties: een kritische evaluatie van de intracraniële zelfstimulatiemethodologie. Neurosci Biobehav Rev. 1983; 7: 45-72. [PubMed]
44. Miliaressis E, Rompre PP, Laviolette P, Philippe L, Coulombe D. Het curve-shift-paradigma bij zelfstimulering. Physiol Behav. 1986, 37: 85-91. [PubMed]
45. Rompre PP, Wise RA. Opioïde-neuroleptische interactie bij hersenstam zelfstimulatie. Brain Res. 1989, 477: 144-151. [PubMed]
46. Vialou V, Maze I, Renthal W, LaPlant QC, Watts EL, Mouzon E, et al. Serumresponsfactor bevordert de veerkracht tegen chronische sociale stress door de inductie van DeltaFosB. J Neurosci. 2010, 30: 14585-14592. [PMC gratis artikel] [PubMed]
47. Shirayama Y, Ishida H, Iwata M, Hazama GI, Kawahara R, Duman RS. Stress verhoogt de immunoreactiviteit van dynorfine in limbische hersengebieden en dynorfine-antagonisme produceert antidepressivum-achtige effecten. J Neurochem. 2004, 90: 1258-1268. [PubMed]
48. Chartoff EH, Papadopoulou M, MacDonald ML, Parsegian A, Potter D, Konradi C, et al. Desipramine vermindert stress-geactiveerde dynorfine-expressie en CREB-fosforylering in NAc-weefsel. Mol Pharmacol. 2009, 75: 704-712. [PMC gratis artikel] [PubMed]
49. Newton SS, Thome J, Wallace TL, Shirayama Y, Schlesinger L, Sakai N, et al. Remming van cAMP-reactie-element-bindend eiwit of dynorfine in de nucleus accumbens produceert een antidepressivum-achtig effect. J Neurosci. 2002, 22: 10883-10890. [PubMed]
50. Spanagel R, Herz A, Shippenberg TS. Tegengestelde tonisch actieve endogene opioïde systemen moduleren de mesolimbische dopaminerge route. Proc Natl Acad Sci US A. 1992; 89: 2046-2050. [PMC gratis artikel] [PubMed]
51. Hernandez G, Shizgal P. Dynamische veranderingen in dopaminetoon tijdens zelfstimulering van het ventrale tegmentale gebied bij ratten. Gedragsonderzoek naar de hersenen. 2009, 198: 91-97. [PubMed]
52. Jij ZB, Chen YQ, Wise RA. Het vrijkomen van dopamine en glutamaat in de nucleus accumbens en het ventraal tegmentale gebied van de rat na laterale zelfstimulatie van de hypothalamus. Neuroscience. 2001, 107: 629-639. [PubMed]
53. Hernandez G, Haines E, Rajabi H, Stewart J, Arvanitogiannis A, Shizgal P. Voorspelbare en onvoorspelbare beloningen produceren vergelijkbare veranderingen in de dopaminetoon. Gedrags-neurowetenschap. 2007, 121: 887-895. [PubMed]
54. Koob GF, Le Moal M. Addiction and the Brain Antireward System. Annu Rev Psychol. 2008, 59: 29-53. [PubMed]
55. Walsh SL, Strain EC, Abreu ME, Bigelow GE. Enadoline, een selectieve kappa-opioïde-agonist: vergelijking met butorfanol en hydromorfon bij de mens. Psychopharmacology (Berl) 2001; 157: 151-162. [PubMed]
56. Dong Y, Green T, Saal D, Marie H, Neve R, Nestler EJ, et al. CREB moduleert de prikkelbaarheid van nucleus accumbens neuronen. Nat Neurosci. 2006, 9: 475-477. [PubMed]
57. Roitman MF, Wheeler RA, Tiesinga PH, Roitman JD, Carelli RM. Hedone en nucleus accumbens neurale reacties op een natuurlijke beloning worden gereguleerd door aversieve conditionering. Leer Mem. 2010, 17: 539-546. [PMC gratis artikel] [PubMed]
58. Derkach VA, Oh MC, Guire ES, Soderling TR. Regulerende mechanismen van AMPA-receptoren in synaptische plasticiteit. Nat Rev Neurosci. 2007, 8: 101-113. [PubMed]
59. Shippenberg TS, Zapata A, Chefer VI. Dynorphin en de pathofysiologie van drugsverslaving. Pharmacol Ther. 2007, 116: 306-321. [PMC gratis artikel] [PubMed]
60. Jacobsen LK, Southwick SM, Kosten TR. Stoornissen bij het gebruik van stoffen bij patiënten met een posttraumatische stressstoornis: een overzicht van de literatuur. Am J Psychiatry. 2001, 158: 1184-1190. [PubMed]
61. Swendsen J, Conway KP, Degenhardt L, Glantz M, Jin R, Merikangas KR, et al. Psychische stoornissen als risicofactoren voor middelengebruik, misbruik en afhankelijkheid: resultaten van de 10-jaren follow-up van de Nationale Comorbiditeitenquête. Verslaving. 2010, 105: 1117-1128. [PMC gratis artikel] [PubMed]
62. Liu RT, Alloy LB. Stressgeneratie bij depressie: een systematische review van de empirische literatuur en aanbevelingen voor toekomstig onderzoek. Clin Psychol Rev. 2010; 30: 582-593. [PMC gratis artikel] [PubMed]
63. Hyman SE, Malenka RC, Nestler EJ. Neurale verslavingsmechanismen: de rol van beloningsgerelateerd leren en geheugen. Annu Rev Neurosci. 2006, 29: 565-598. [PubMed]
64. McEwen BS, Gianaros PJ. Stress- en allostasis-geïnduceerde hersenplasticiteit. Annu Rev Med. 2011, 62: 431-445. [PubMed]
;
