CRF-CRF1 Receptor-systeem in de centrale en basolaterale kernen van de Amygdala zorgt voor differentieel overmatig eten van smakelijke voeding (2013)

. 2013 november; 38 (12): 2456-2466.

Gepubliceerd online 2013 Jul 10. Prepublished online 2013 Jun 10. doi:  10.1038 / npp.2013.147

PMCID: PMC3799065

Abstract

Zeer smakelijk voedsel en een dieet zijn belangrijke factoren die bijdragen aan de ontwikkeling van compulsief eten bij obesitas en eetstoornissen. We hebben eerder aangetoond dat intermitterende toegang tot smakelijk voedsel resulteert in corticotropine-afgevende factor-1 (CRF)1) receptorantagonist-reversibel gedrag, waaronder een overmatige eetbare voedselinname, hypophagia van gewone chow en angstachtig gedrag. De hersengebieden die deze effecten mediëren, zijn echter nog onbekend. Mannelijke Wistar-ratten kregen continu voer toegediend voor 7 dagen / week (Chow / Chow groep), of met tussenpozen voedzame chow 5 dagen / week, gevolgd door een sucrose, smakelijk dieet 2 dagen / week (Chow / Palatable groep). Na afwisseling van chronisch dieet, de effecten van micro-infusie van de CRF1 receptorantagonist R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / zijde) in de centrale kern van de amygdala (CeA), de basolaterale kern van de amygdala (BlA), of de bedkern van de stria-terminale (BNST) werden geëvalueerd op overmatige inname van het eetbare dieet, chow-hypofagie en angstgevoelig gedrag. Verder werd CRF immunokleuring geëvalueerd in de hersenen van ratten met dieetcycli. Intra-CeA R121919 blokkeerde zowel buitensporige eetbare voedselinname als angstgevoelig gedrag Chow / Palatable ratten, zonder chow-hypofagie te beïnvloeden. Omgekeerd verminderde intra-BlA R121919 de chow-hypofagie in Chow / Palatable ratten, zonder dat dit van invloed is op een overmatige smakelijke voedselinname of angstgevoelig gedrag. Intra-BNST-behandeling had geen effect. De behandelingen hebben het gedrag van Chow / Chow ratten. Immunohistochemie onthulde een verhoogd aantal CRF-positieve cellen in CeA, maar niet in BlA of BNST-van Chow / Palatable ratten, zowel bij het stoppen als bij hernieuwde toegang tot het eetbare dieet, vergeleken met de controles. Deze resultaten leveren functioneel bewijs dat de CRF-CRF1 receptorsysteem in CeA en BlA heeft een verschillende rol bij het bemiddelen van onaangepast gedrag als gevolg van smakelijke dieetcycli.

sleutelwoorden: corticotropine-afgevende factor, BNST, verslaving, angst, hypofagie, rat

INLEIDING

Zeer smakelijke voedingsmiddelen (bijvoorbeeld voedingsmiddelen die rijk zijn aan suikers en / of vetten) worden verondersteld een belangrijke oorzaak te zijn voor het ontstaan ​​van dwangmatig eten bij bepaalde vormen van obesitas en eetstoornissen (; ). Er bestaan ​​veel overeenkomsten tussen drugsverslaving en overmatige inname van zeer smakelijk voedsel, waaronder verlies van controle over drugs / voedsel, onvermogen om gebruik / overeten te beëindigen, ondanks negatieve gevolgen, angst en dysforie bij pogingen om zich te onthouden van drugs / voedsel (; ). Deze algemene symptomen worden verondersteld voort te komen uit disfuncties van hersencircuits, die elkaar overlappen in drugsverslaving en dwangmatig eten.

Corticotropin-releasing factor type 1 (CRF1) receptorantagonisten zijn voorgesteld als nieuwe therapeutische doelen voor verslavende aandoeningen vanwege hun vermogen om de motivationele effecten van ontwenning te verminderen (). CRF is een kritische bemiddelaar van endocriene, sympathische en gedragsmatige reacties op stress (; ). CRF in de paraventriculaire kern van de hypothalamus controleert de hypothalamus-hypofyse-bijnier (HPA) -respons op stress, terwijl de gedragseffecten van CRF HPA-onafhankelijk zijn en gemedieerd door extrahypothalamische hersenregio's (). De extrahypothalamic CRF-CRF1 het receptorsysteem wordt gerekruteerd in afhankelijkheid van alle bekende drugs van misbruik via cycli van intoxicatie / terugtrekking, en deze hyperactivatie wordt als een gemeenschappelijk element beschouwd, het bevorderen van overmatige medicijninname door een negatief versterkt mechanisme (dat wil zeggen, dwangmatige medicatie-inname geproduceerd door het verwijderen van terugtrekking- geïnduceerde negatieve emotionele toestand; ; ; ).

Hoewel overeenkomsten tussen drugs en voedselmisbruik uitgebreid bestudeerd zijn met betrekking tot hun positieve versterkende eigenschappen (dat wil zeggen, overmatige voedselinname geproduceerd door het verkrijgen van een aangenaam effect; ; ; ; ; ), is de hypothese dat overmatige voedselinname kan resulteren als een vorm van 'zelfmedicatie' om de negatieve emotionele toestand die gepaard gaat met terugtrekking uit zeer smakelijk voedsel te verlichten, relatief weinig bestudeerd (; ; ).

We hebben eerder aangetoond dat intrekking van chronische, intermitterende toegang tot zeer smakelijke voedingsmiddelen de rekrutering van het extrahypothalamische CRF-systeem en de opkomst van CRF veroorzaakt1 receptorafhankelijk onaangepast gedrag, waaronder een overmatige voedselinname bij hernieuwde toegang tot het zeer smakelijke dieet, hypofagie van het anders aanvaardbare voer voor het voer en angstgevoelig gedrag tijdens onthouding ().

Direct functioneel bewijs met betrekking tot welk hersengebied verantwoordelijk is voor de CRF1 receptor-afhankelijke gedragsaanpassingen geïnduceerd door smakelijk dieet fietsen ontbreekt. Deze studie richtte zich daarom op het bepalen of plaatsspecifiek antagonisme van CRF1 receptoren in de centrale kern van de amygdala (CeA), de basolaterale kern van de amygdala (BlA) of de bedkern van de stria-terminale (BNST) was in staat om overmatige inname van zeer smakelijk voedsel, door intrekking veroorzaakte hypofagie van de reguliere voer en angstgevoelig gedrag. Bovendien was deze studie gericht op het bepalen of de expressie van CRF in CeA, BlA en BNST was verhoogd in raten met dieetcycli in vergelijking met controles, met behulp van immunohistochemie. Hoewel we eerder hebben aangetoond dat onthouding van smakelijke voeding geassocieerd is met een verhoogde CRF-expressie in CeA, is BlA en BNST momenteel niet gekend door dieetcycli.

MATERIALEN EN METHODES

vakken

Mannelijke Wistar-ratten (n= 140, waarvan 33-ratten voor CeA-experimenten, 46-ratten voor BlA-experimenten, 39-ratten voor BNST-experimenten en 22-ratten voor het immunohistochemische experiment; Aanvullende tabel 1), met een gewicht van 180-230 g en 41-47 dagen oud bij aankomst (Charles River, Wilmington, MA, VS), waren enkel ondergebracht in met draad bedekte plastic kooien (27 × 48 × 20 cm) op een 12-h achteruitrijlicht cyclus (licht uit bij 1100 uur), in een AAALAC goedgekeurde vochtigheids- (60%) en temperatuurgecontroleerde (22 ° C) vivarium. Ratten hadden ad libitum toegang tot op maïs gebaseerde chow (Harlan Teklad LM-485 Dieet 7012; 65% kcal koolhydraat, 13% vet, 21% eiwit, metaboliseerbare energie 310 cal / 100 g; Harlan, Indianapolis, IN, VS) en water, tenzij anders gespecificeerd . De procedures die in dit onderzoek werden gebruikt, behoorden tot de National Institutes of Health Guide voor de verzorging en het gebruik van laboratoriumdieren (NIH-publicatienummer 85-23, herzien 1996) en de Principles of Laboratory Animal Care en werden goedgekeurd door de Boston University Medical Campus Institutional. Comité voor dierenverzorging en -gebruik.

Drugs

R121919 (3-[6-(dimethylamino)-4-methyl-pyrid-3-yl]-2,5-dimethyl-N,N-dipropyl-pyrazolo [2,3-a] pyrimidine-7-amine, NBI 30775) werd gesynthetiseerd zoals beschreven in ). R121919 is een krachtige, niet-peptide CRF met hoge affiniteit1 receptorantagonist (Ki= 2-5 nM), die meer dan 1000-voudige zwakkere activiteit weergeeft op de CRF2 receptor, CRF-bindend eiwit of 70 andere receptortypen (). R121919 werd gesolubiliseerd met een 18: 1: 1-mengsel van zoutoplossing: ethanol: cremophor.

Gedragstesten

Ad libitum smakelijke voeding afwisseling toegang

De toegang tot de ad libitum smakelijke dieetwisseling werd uitgevoerd zoals eerder beschreven (, , ; ). In het kort werden ratten na acclimatisatie verdeeld in twee groepen die overeenkwamen voor voedselopname, lichaamsgewicht en voerefficiëntie van de voorgaande 3-4 dagen. Eén groep werd vervolgens voorzien ad libitum toegang tot een chow-dieet (Chow) voor 7-dagen per week (Chow / Chow, de controlegroep van deze studie), terwijl een tweede groep dagen 5 gratis toegang kreeg tot chow, gevolgd door 2-dagen van ad libitum tot een zeer smakelijk, met chocolade gearomatiseerd, hoog-sucrosedieet (smakelijk; Chow / Palatable groep). Alle gedragstesten zijn uitgevoerd bij ratten die minimaal 7 weken op dieet waren gefietst. Het 'chow'-dieet was het hierboven beschreven voer op basis van maïs van Harlan, terwijl het smakelijke dieet een qua voedingswaarde compleet, met chocoladesmaak, hoog sucrose (50% kcal), op AIN-76A gebaseerd dieet was dat vergelijkbaar is in macronutriënten verhoudingen en energiedichtheid voor het voer (formule met chocoladesmaak 5TUL: 66.7% kcal koolhydraten, 12.7% vet, 20.6% eiwit, metaboliseerbare energie 344 kcal / 100 g (testdieet, Richmond, IN, VS) geformuleerd als een precisie van 45 mg voedselpellets om de voorkeur te verhogen). Om het kort te houden, worden de eerste 5 dagen (alleen chow) en de laatste 2 dagen (chow of smakelijk volgens de experimentele groep) van elke week in alle experimenten aangeduid als C en P fasen. Smakelijk dieet werd verstrekt in GPF20 'J'-feeders (Ancare, Bellmore, NY, VS). Diëten waren nooit gelijktijdig beschikbaar.

Experimenten met voedselinname

Ratten werden voorzien van vooraf gewogen voedsel in hun thuiskooien bij het begin van de donkere cyclus. Behandelingen werden gegeven bij ratten die gedurende ten minste 7 weken een dieet hadden gefietst na hernieuwde toegang tot het eetbare dieet (C→P fase) of het dieet van het voer (P→C fase). R121919 werd bilateraal micro-geïnfundeerd in de CeA, de BlA of de BNST (0, 0.5 en 1.5 μg / kant, 0.5 μl / kant, 30-min voorbehandelingstijd) met behulp van gerandomiseerde binnen het onderwerp Latijnse vierkante ontwerpen.

Lichtdonker-kistentest

Ratten werden getest op 10 min in een licht-donker rechthoekige doos (50 100 x 35 cm) waarin het aversieve lichte compartiment (50 × 70 x 35 cm) werd verlicht door een 60 lux-licht. De donkere zijde (50 × 30 × 35 cm) had een ondoorzichtige dekking en ~0 lux van het licht. De twee compartimenten waren verbonden door een open deuropening, waardoor de onderwerpen vrij tussen de twee konden bewegen. Testen vond plaats na ten minste 7 weken dieetwissel, 5-9 h na de omschakeling van het eetbare dieet naar het voer van het voer (P→C fase); dit tijdstip verzekert het optreden van angstachtig gedrag veroorzaakt door terugtrekking uit eetbaar voedsel in Chow / Palatable ratten (, ). Ratten werden ten minste 2 h bewaard in de stille, donkere hal vóór het testen. Witte ruis was aanwezig tijdens gewenning en testen. Op de dag van testen werden de ratten bilateraal micro-geïntegreerd met R121919 in de CeA, de BlA of de BNST (0, 0.5 en 1.5 μg / zijde, 0.5 μl / zijkant) 30 min voordat ze in het donkere compartiment werden geplaatst, tegenover de deuropening en gedrag werd video opgenomen om later te scoren. Behandelingen werden gegeven met behulp van een tussenliggend ontwerp. De tijd doorgebracht in het open compartiment werd gemeten als een index van angstachtig gedrag. Het apparaat werd schoongeveegd met water en gedroogd na elk onderwerp.

Intracraniële operaties, micro-infusieprocedure en plaatsing van de canule

Intracraniële operaties

Ratten werden stereotaxisch geïmplanteerd met bilaterale, intracraniale canules zoals eerder beschreven (; ; ). In het kort, roestvrijstalen geleidingscanules (24 gauge, Plastics One, Roanoke, VA, VS) werden bilateraal 2.0 mm boven de CeA, de BlA of de BNST neergelaten. Vier roestvrijstalen juweliersschroeven werden rond de canule aan de schedel van de rat vastgemaakt. Er werden met tandheelkundige herstellende gevulde hars (Henry Schein, Melville, NY, VS) en acrylcement aangebracht, waardoor een voetstuk werd gevormd dat de canule stevig verankerde. De canule-coördinaten van bregma gebruikt voor de CeA waren: AP +0.2, ML ± 4.2, DV -7 (van de schedel) met de snijtandstang 5.0 mm boven de interaurale lijn, volgens de atlas van ). De cannula-coördinaten gebruikt voor de BlA waren: AP -2.64, ML ± 4.8, DV -6.5 (van de schedel) met platte schedel, volgens ). De cannula-coördinaten die voor de BNST werden gebruikt waren: AP -0.6, ML ± 3.5, DV -4.8 (van de schedel) met platte schedel en kantelhoek van 14 °. Een roestvrijstalen dummy-stilet (Plastics One) zorgde ervoor dat de canule open bleef. Na de operatie kregen de ratten een 7-dag herstelperiode, waarin ze dagelijks werden behandeld.

Micro-infusie procedure

Geneesmiddel werd micro-geïnfuseerd in de hersenen van ratten zoals eerder beschreven (; ). Voor intracraniale micro-infusie werd de dummy-stylet uit de geleidecanule verwijderd en vervangen door een 31-gauge roestvrijstalen injector die 2 mm voorbij de punt van de geleidecanule uitsteekt; de injector was via een PE 20-buis verbonden met een Hamilton-microsyringe (Hamilton, Reno, Nevada) aangedreven door een multi-spuit micro-infusiepomp (KD Scientific / Biological Instruments, Holliston, MA, VS). Micro-infusies werden uitgevoerd in 0.5 pl volume geleverd over 2 min; Injectoren werden op hun plaats gehouden voor 1 extra minuten om de terugstroming te minimaliseren.

Plaatsing van de canule

De plaatsing van de canule werd gecontroleerd aan het einde van alle testen (zie Figuur 1). Proefpersonen werden geanesthetiseerd (isofluraan, 2-3% in zuurstof) en transcardiaal geperfuseerd met ijskoud 4% paraformaldehyde (PFA) in water (pH 7.4) en micro-geïnfuseerd met Cresyl violet (0.5 ui / zijde). Hersenen werden vervolgens overnacht gefixeerd in 4% PFA en geëquilibreerd in 30% sucrose in PFA. Coronale coupes van 40 μm werden verzameld met behulp van een cryostaat (Thermo Scientific HM-525) en plaatsingen werden geverifieerd onder een microscoop. Veertig onderwerpen (14 voor CeA, 16 voor BlA en 10 voor BNST) werden uitgesloten van analyse vanwege onjuiste plaatsing van de canule. Gegevens van onjuiste plaatsingen werden geanalyseerd om de site-specificiteit van effecten te helpen interpreteren.

Figuur 1 

Tekening van hersenschijfjes van coronale ratten. Punten vertegenwoordigen de injectieplaatsen in de centrale kern van de amygdala (CeA) (a), basolaterale kern van de amygdala (BlA) (b) en bedkern van de stria terminalis (BNST) (c) die zijn opgenomen in de gegevensanalyse. ...

CRF Immunohistochemie

Gedragsprocedure, perfusies en immunohistochemie

Ratten (n= 22) werden dieetcycli gedurende 7 weken, onder narcose gebracht en geperfuseerd 2-4 h na omgeschakeld te zijn van het smakelijke dieet naar het voer van het voer (P→C fase) of van het voer van het voer naar het eetbare dieet (C→P fase). Ratten werden geanesthetiseerd en vervolgens transcardiaal geperfuseerd met eerst zoutoplossing + 2% (w / v) natriumnitriet (pH = 7.4) en vervolgens met 4% paraformaldehyde gebufferd in Borax (pH = 9.5). De ratten werden vervolgens onthoofd en de hersenen werden onmiddellijk verzameld, geplaatst in ~20 ml 4% PFA en bewaard in een 30% sucrose in 4% PFA-oplossing bij 4 ° C tot verzadiging.

Voor CRF-visualisatie werden hersenen met een cryostaat in coronale secties van 40 μm gesneden en vervolgens bij -20 ° C in een cryoprotectant bewaard. Elke zesde sectie (240 μm uit elkaar) van de volledige CeA, BlA en BNST werd op een systematische willekeurige manier gekozen en verwerkt voor immunocytochemie. Vrij zwevende secties werden gewassen in kaliumfosfaatbufferzoutoplossing (KPBS). Na de eerste wasbeurt werden de secties gedurende 0.3 minuten geïncubeerd in 30% waterstofperoxide KPBS-oplossing om endogene peroxidasen te blokkeren. Secties werden vervolgens opnieuw gewassen en gedurende 3 uur in een blokkeeroplossing (0.25% normaal geitenserum, 100% Triton X0.1 en 2% runderserumalbumine) geplaatst. Secties werden vervolgens overgebracht naar primair antilichaam (1: 100 verdunning, anti-CRF (sc-10718), Santa Cruz Biotechnology) in blokkerende oplossing en 72 uur bij 4 ° C geïncubeerd. Na een extra wasbeurt werden de coupes 1 uur bij kamertemperatuur in een secundair antilichaam (1000: 1000 verdunning, gebiotinyleerd anti-konijn (BA-2) Vector Laboratories, Burlingame, Californië) in een blokkeeroplossing geïncubeerd. Secties werden gewassen en vervolgens gedurende 1 uur geïncubeerd in een avidine-biotine mierikswortelperoxidase ABC-oplossing (Vector Laboratories) in een blokkeeroplossing. Secties werden vervolgens geïncubeerd met behulp van een diaminobenzidinesubstraatkit (Vector Laboratories) volgens de instructies van de fabrikant en zodra de reactie voltooid was, werden de secties gespoeld in KPBS, op objectglaasjes gemonteerd en gedurende de nacht gedroogd. De volgende dag werden de objectglaasjes gedehydrateerd met behulp van gegradeerde alcoholconcentraties en afgedekt met behulp van DPX-montagemiddel (Electron Microscopy Sciences, Hatfield, PA, VS).

Kwantificering van CRF + cellichamen

Kwantificering van CRF + cellichamen werd uitgevoerd in overeenstemming met de onbevooroordeelde stereologiebenadering. De reeks secties werd geanalyseerd voor elke kleuringsbatch. Secties werden geanalyseerd met een Olympus (Center Valley, PA, VS) BX-51 microscoop uitgerust met een Rotiga 2000R live videocamera (QImaging, Surrey, BC, Canada), een drie-assig MAC6000 XYZ gemotoriseerd podium (Ludl Electronics, Hawthorne, NY, VS), en een personal computer-werkstation. Alle celaantallen werden gemaakt op gecodeerde dia's door een onderzoeker die blind was voor de behandelingsomstandigheden. Elke regio werd virtueel geschetst op het gedigitaliseerde beeld van elke willekeurig gekozen sectie met behulp van de optische fractionator-workflowmodule van Stereo Investigator-software (MicroBrightField, Williston, VT, VS). Alle contouren werden getekend met een lage vergroting met behulp van een Olympus PlanApo N 2X-objectief met numerieke lensopening 0.08 en geteld met een Olympus UPLANFL N 40X-objectief met numerieke lensopening 0.75. Het rasterframe en het telframe werden ingesteld op 275 × 160 μm. Een bewakingszone van 2 μm en een dissectorhoogte van 20 μm werden gebruikt. De bevroren secties werden oorspronkelijk gesneden met een nominale dikte van 40 μm. Immunokleuren en monteren resulteren in een veranderde sectiedikte, die werd gemeten op elke telplaats. Een gemiddelde sectiedikte werd door de software berekend en gebruikt om het totale volume van het monstergebied en het totale aantal CRF + -cellen te schatten.

Statistische analyse

Student's t-tests werden gebruikt om factoren met twee niveaus te analyseren. ANOVA's werden uitgevoerd om factoren met meer dan twee niveaus te analyseren. Na significant omnibuseffect van ANOVA's (p<0.05), Fisher's LSD post hoc vergelijkingstests werden gebruikt. De test van Dunnett werd gebruikt om te bepalen of R121919 de inname van Chow / Palatable ratten om met een drager behandeld te worden Chow / Chow-gevoede niveaus. De gebruikte software / grafische pakketten waren Systat 11.0, SigmaPlot 11.0 (Systat Software, Chicago, IL, VS), InStat 3.0 (GraphPad, San Diego, CA, VS), Statistica 7.0 (Statsoft, Tulsa, OK, VS) en PASW. Statistieken 18.0 (SPSS, Chicago, IL, VS).

RESULTATEN

Effecten van micro-infusie van R121919 in de CeA

Overmatige inname van smakelijk voedsel

Om te bepalen of CRF1 receptoren in de CeA bemiddelen bij overmatige inname van smakelijk voedsel in ratten met dieetcycli, we hebben een micro-geïnfundeerde site, specifiek de selectieve CRF1 receptorantagonist R121919 in dit hersengebied en gemeten voedselinname aan het begin van de P fase. Zoals getoond in Figuur 2a, de inname van met vehikel behandeld smakelijk eetpatroon Chow / Palatable ratten was twee keer zo hoog als die van chow-fed controle Chow / Chow ratten. Antagonisme van CeA CRF1 receptoren volledig geblokkeerd dit overmatig eten van smakelijk voedsel in Chow / Palatable ratten, zonder de voedselinname in controleratten te beïnvloeden (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.72, NS; Chow / Palatable, F (2, 14) = 5.02, p<0.05). Post hoc vergelijking toonde aan dat de hoogste dosis R121919 (1.5 μg / kant) de eetbare voedselinname aanzienlijk verminderde in vergelijking met Chow / Palatable ratten. Inname van Chow / Palatable ratten na de micro-infusie van de 1.5 μg / neven-dosis verschilden niet significant van de inname van met vehikel behandeld Chow / Chow ratten. Bevestiging van de specificiteit van de effecten voor CRF1 receptoren in de CeA werd geen effect waargenomen bij de voedselinname van personen met misplaatste canules (Chow / Palatable, F (2, 2) = 4.32, NS).

Figuur 2 

Effecten van micro-infusie van de selectieve corticotropine-afgevende factor-1 (CRF1) receptorantagonist R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / zijde) in de centrale kern van de amygdala (CeA) over overmatig eten van smakelijk voedsel, hypofagie van regulier ...

Hypophagia van het reguliere voer voor de voeding

Om te bepalen of CRF1 receptoren in de CeA mediëren de hypofagie van het voer van het voer in ratten met dieetcycli, we hebben R121919 met micro-infusie ingebracht in dit hersengebied en de voedselinname gemeten aan het begin van de C fase. Zoals getoond in Figuur 2b, de inname van met hulpstoffen behandeld Chow / Palatable ratten was ~1 / 3 van de inname van met hulpstof behandeld Chow / Chow ratten (hypofagie). R121919-behandeling had geen invloed op de hypofagie van de reguliere voeding Chow / Palatable ratten (Chow / Palatable, F (2, 12) = 0.14, NS). Bevestiging van de resultaten verkregen in P fase, R121919 micro-infusie in de CeA had geen invloed op de inname van voer in de controle Chow / Chow ratten (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.01, NS).

Acuut intrekking-geïnduceerd angstachtig gedrag

Bepalen of CeA CRF1 receptoren mediëren de negatieve emotionele toestand veroorzaakt door het terugtrekken van het smakelijke voedsel in cyclische ratten, we micro-geïnfecteerd site specifiek R121919 in dit gebied van de hersenen en gemeten angst-achtig gedrag met behulp van de licht-donker vak test 5 h in de C fase. Zoals getoond in Figuur 2cratten die zich acuut terugtrokken uit chronische, intermitterende toegang tot het zeer smakelijke dieet toonden een significante afname van de tijd doorgebracht in het lichte compartiment van de licht-donker-doos. Micro-infusie van 1.5 μg / zijde van R121919 in de CeA, de dosis die effectief het overmatig eten van smakelijk voedsel reduceerde, volledig geblokkeerd angstachtig gedrag door de tijd die werd doorgebracht in het lichte gebied van de doos in Chow / Palatable ratten, zonder invloed op het gedrag in Chow / Chow ratten (DOSE: F (1, 24) = 4.40, p<0.05). Bevestiging van de specificiteit van de effecten voor CRF1 receptoren in de CeA, werd geen effect waargenomen bij voedselinname van personen met misplaatste canules (DOSE: F (2, 2) = 4.32, NS).

Effecten van micro-infusie van R121919 in de BlA

Overmatige inname van smakelijk voedsel

Bepalen of BlA CRF1 receptoren bemiddelen bij overmatig eten van eetbaar voedsel bij ratten met dieetcycli, we hebben een micro-geïnfundeerde plaats specifiek R121919 in dit hersengebied en gemeten voedselinname aan het begin van de P fase. In tegenstelling tot wat werd waargenomen na toediening van R1219191 in de CeA, zoals weergegeven in Figuur 3a bilaterale micro-infusie van de selectieve CRF1 receptor antagonist in de BlA had geen significante invloed op de eet smakelijk voedselinname Chow / Palatable ratten (Chow / Palatable, F (2, 26) = 1.56, NS). Evenzo, regelmatige chow-consumptie in Chow / Chow ratten werd niet beïnvloed door R121919 microinfusion (Chow / Chow, F (2, 18) = 0.52, NS).

Figuur 3 

Effecten van micro-infusie van de selectieve corticotropine-afgevende factor-1 (CRF1) receptorantagonist R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / zijde) in de basolaterale kern van de amygdala (BlA) over overmatig eten van smakelijk voedsel, hypofagie van regulier ...

Hypophagia van het reguliere voer voor de voeding

Om te bepalen of CRF1 receptoren in de BlA mediëren de hypofagie van chow in cyclische ratten, we microinfused R121919 in dit gebied van de hersenen en gemeten voedselinname aan het begin van de C fase. Zoals getoond in Figuur 3b, een significante toename van de normale inname van voer werd waargenomen na micro-infusie van de CRF1 receptorantagonist in de BlA van Chow / Palatable ratten (Chow / Palatable, F (2, 26) = 4.46, p<0.05). Inderdaad, de hoogste dosis (1.5 μg) van R121919 micro-infusie in de BlA tijdens C fase verhoogde het verbruik van het reguliere voer door 221.1 ± 33.1 (M ± SEM) significant in vergelijking met het behandelde vehikel Chow / Chow ratten. R121919 verzwakte, maar blokkeerde de blokkade geïnduceerde hypofagie bij de hoogste geïnjecteerde dosis niet volledig. Bevestiging van de verkregen gegevens in P fase, R121919 microinfusion had geen invloed op de reguliere voerinname in Chow / Chow ratten (Chow / Chow, F (2, 20) = 0.25, NS). Bevestiging van de specificiteit van de effecten voor CRF1 receptoren in de BlA, werd geen effect waargenomen bij de voedselinname van personen met misplaatste canules (Chow / Palatable, F (2, 8) = 0.50, NS).

Acuut intrekking-geïnduceerd angstachtig gedrag

Bepalen of BlA CRF1 receptoren mediëren de negatieve emotionele toestand veroorzaakt door het acuut intrekken van het smakelijke voedsel in cyclische ratten, we micro-geïnfecteerd site specifiek R121919 in dit gebied van de hersenen en gemeten angst-achtig gedrag 5 h in de C fase. Zoals getoond in Figuur 3c, smakelijk voedsel teruggetrokken Chow / Palatable ratten brachten minder tijd door in het lichte compartiment vergeleken met Chow / Chow ratten (DIEET: F (1, 23) = 84.03, p<0.001). R121919, micro-infusie in de BlA, had geen significante invloed op de tijd doorgebracht in het lichte gebied (DOSIS: F (1, 39) = 0.01, NS).

Effecten van Microinfusion van R121919 in de BNST

Overmatige inname van smakelijk voedsel

Bepalen of BNST CRF1 receptoren bemiddelen bij overmatig eten van eetbaar voedsel bij ratten met dieetcycli, R121919 werd op locatie specifiek micro-geïnfuseerd in dit hersengebied en de voedselinname werd gemeten aan het begin van de P fase. Zoals getoond in Figuur 4b, bilaterale micro-infusie van de selectieve CRF1 receptorantagonist in de BNST had geen significante invloed op de eet smakelijk voedselinname Chow / Palatable ratten (Chow / Palatable, F (2, 18) = 0.33, NS). Evenzo, regelmatige chow-consumptie in Chow / Chow ratten werd niet beïnvloed door R121919 microinfusion (Chow / Chow, F (2, 20) = 1.03, NS).

Figuur 4 

Effecten van micro-infusie van de selectieve corticotropine-afgevende factor-1 (CRF1) receptorantagonist R121919 (0, 0.5, 1.5 μg / zijde) in de bedkern van de stria-terminale (BNST) bij overmatig eten van smakelijk voedsel, hypofagie van ...

Hypophagia van het reguliere voer voor de voeding

Bepalen of BNST CRF1 receptoren mediëren de hypofagie van het voer van het voer in cyclische ratten, we hebben R121919 in dit hersengebied met micro-infusie toegediend en de voedselinname gemeten aan het begin van de C fase. Zoals getoond in Figuur 4a, R121919-microinfusie had geen invloed op de reguliere voerinname in Chow / Chow ratten (Chow / Chow, F (2, 14) = 0.03, NS). Evenzo had de R121919-behandeling geen invloed op de hypofagie van de reguliere voeding Chow / Palatable ratten (Chow / Palatable, F (2, 20) = 0.27, NS).

Acuut intrekking-geïnduceerd angstachtig gedrag

Bepalen of BNST CRF1 receptoren mediëren de negatieve emotionele toestand veroorzaakt door het acuut intrekken van het smakelijke voedsel in cyclische ratten, we micro-geïnfecteerde site specifiek R121919 in dit hersengebied en gemeten angst-achtig gedrag 5 h na de overstap van P→C fase. Zoals getoond in Figuur 4c, smakelijk voedsel teruggetrokken Chow / Palatable ratten brachten minder tijd door in het lichte compartiment in vergelijking met controle Chow / Chow ratten (DIEET: F (1, 17) = 17.11, p<0.01). R121919, bilateraal micro-infusie in een dosis van 1.5 μg / zijde in de BNST had geen significante invloed op de tijd doorgebracht in het lichte gebied (DOSIS: F (1, 33) = 0.47, NS).

CRF Immunohistochemie

Figuur 5 illustreert representatieve microfoto's van CRF + -cellen in de CeA, BlA en BNST in Chow / Chow en Chow / Palatable ratten, de ad libitum smakelijke dieet afwisseling procedure. Analyse van CRF immunoreactiviteit van de CeA onthulde dat een significant verschil tussen Chow / Palatable en Chow / Chow ratten tijdens beide C en P fase (F (2, 19) = 4.19, p<0.05). Er werden geen statistisch significante verschillen tussen de groepen waargenomen in BlA (F (2, 17) = 1.13, NS) of BNST (F (2, 19) = 1.16, NS).

Figuur 5 

Representatieve microfoto's van corticotropine-releasing factor (CRF) immunoreactiviteit in de centrale kern van de amygdala (CeA) (a-d), basolaterale kern van de amygdala (BlA) (e-h) en bedkern van de stria-terminus (BNST) ) (i-l) ...

DISCUSSIE

Deze studie was bedoeld om functioneel de hersenplaats te identificeren die verantwoordelijk is voor de door CRF gemedieerde overmatige inname van voedsel dat zeer smakelijk is bij ratten in het kader van wisseling van het dieet. Onze bevindingen bewijzen een belangrijke rol voor de CeA bij het bemiddelen bij overmatig eten van zeer smakelijk voedsel. Bovendien laten we zien dat het CRF-systeem in de BlA, anders dan de CeA, een rol speelt in het devaluatieproces dat optreedt bij het terugschakelen in voedselbeloningsgrootheden.

We hebben eerder aangetoond dat herhaalde cycli van toegang tot en acuut ontwennen van een suikerachtig, zeer smakelijk dieet leiden tot overmatig eten van smakelijk voedsel, evenals tot acute ontwenningsafhankelijke hypofagie van het normale voer en angstgevoelig gedrag (; , ). Overmatig eten hier wordt verondersteld te worden veroorzaakt door de negatieve emotionele toestand veroorzaakt door herhaalde episodes van acute terugtrekking uit zeer smakelijk voedsel via een extrahypothalamische CRF-CRF1 receptorsysteem-gemedieerd mechanisme, dat lijkt op het 'kindling'-achtige proces dat ten grondslag ligt aan verslavende aandoeningen (; ; ; ).

De resultaten van deze studie tonen aan dat CRF1 receptoren van de CeA en BlA onderscheiden differentieel voedingsaanpassingen en angst-achtig gedrag van chronisch dieet gefietste ratten. Toediening van de selectieve CRF1 receptorantagonist in de CeA blokkeerde zowel overmatig eten als angst-achtig gedrag Chow / Palatable ratten, zonder de hypofagie van het ondergeaccepteerde, regelmatige dieet aan te tasten. Interessant is dat de toediening van R121919 in de BlA de hypofagie van het minder appetijtelijke voer voor het voer (dat wil zeggen een toegenomen regelmatige inname van voer) verzwakt. Chow / Palatable ratten, zonder overmatig eten of angstgevoelig gedrag aan te tasten. Wanneer micro-geïnfundeerd in de BNST, heeft R121919 geen invloed op een van de variabelen gemeten in Chow / Palatable ratten (overmatig eten van het zeer eetbare dieet, inname van het reguliere voer van de voeding en het acute terugtrekking-geïnduceerde angst-achtige gedrag). De waargenomen farmacologische effecten waren selectief voor Chow / Palatable ratten omdat R121919, micro-geïnfundeerd in de CeA, BlA of BNST van Chow / Chow controle ratten, uitgeoefend geen effect. Daarom is de CRF-CRF1 het receptorsysteem van de CeA en BlA lijken op verschillende wijze de gedragsresultaten te mediëren die resulteren uit een eetpatroon dat chronisch smakelijk is. Aan de andere kant, de CRF-CRF1 het receptorsysteem van de BNST lijkt niet te zijn betrokken bij de gedragsaanpassingen die worden veroorzaakt door een smakelijke wisseling van het dieet.

Onze gedrags- en farmacologische bevindingen werden ondersteund door de waarneming dat CRF immunoreactiviteit binnen de CeA van Chow / Palatable ratten was significant toegenomen in vergelijking met Chow / Chow controle op ratten, tijdens terugtrekking uit en na hernieuwde toegang tot het zeer smakelijke dieet (). Interessant genoeg werd geen significant verschil in CRF-immunoreactiviteit tussen groepen waargenomen in de BlA of de BNST. De verhoogde CRF-immunoreactiviteit waargenomen in de CeA van Chow / Palatable ratten is consistent met onze eerdere bevinding dat acute terugtrekking uit het smakelijke dieet geassocieerd is met een verhoogde afgifte van CRF in de CeA (). Echter, in tegenstelling tot wat eerder werd getoond, veroorzaakte vernieuwing van de toegang tot het smakelijke dieet geen terugkeer van CRF-expressie in de CeA naar controleniveaus. De discrepantie tussen de hier verkregen resultaten en de vorige waarneming kan te maken hebben met het verschillende tijdstip van de hersencollectie en de verschillende anatomische resolutie van de technieken die zijn gebruikt om de CRF-expressie te meten. Desalniettemin is de waargenomen toename in CRF-expressie in de CeA tijdens intrekking en na hernieuwde toegang tot het eetbare dieet consistent met de selectieve effecten van blokkade van angstachtig gedrag (tijdens ontwenning) en overmatig eten (hernieuwde toegang) in Chow / Palatable ratten. De schijnbare inconsistentie tussen de twee studies kan daarom collectief als volgt worden geïnterpreteerd: tijdens acute smakelijke voedselonttrekking neemt de CRF-expressie in de CeA van met dieetcycli behandelde ratten toe in vergelijking met controles en is deze verantwoordelijk voor het optreden van een negatief effect. De CEA-CRF-expressie blijft gewijzigd tot de eerste uren van zeer smakelijke toegang, waardoor overmatig eten wordt veroorzaakt. Na overmatig smakelijke voedselconsumptie keert CRF echter terug naar controleniveaus ().

De getoonde gedrags-, farmacologische en moleculaire resultaten ondersteunen de hypothese dat de CRF-CRF1 het receptorsysteem in de CeA speelt een belangrijke rol bij het bemiddelen in de negatieve affectieve toestand en de overmatige inname van eetbaar voedsel bij ratten met dieetcycli, vergelijkbaar met wat uitgebreid is aangetoond voor alcohol- en drugsverslaving (). Inderdaad vertonen ethanolafhankelijke ratten verhoogde extracellulaire afgifte van CRF in het CeA tijdens onttrekking en de toediening van een CRF-receptorantagonist in de CeA is in staat om geëscaleerde zelftoediening van ethanol gedurende ontwenning te blokkeren (; ). Op analoge wijze vertonen opiaat-afhankelijke dieren verhoogde CRF-expressie in de CeA gedurende ontwenning () en blokkade van CRF-receptoren in de CeA, maar niet de BNST, vermindert de gedragstekenen van terugtrekking (; ). Een sleutelrol voor CRF-CRF1 systeem in de CeA is ook aangetoond in nicotineafhankelijkheid. Inderdaad, mecamylamine-geprecipiteerde nicotineontwenning is geassocieerd met een hyperactivering van de CRF-CRF1 receptorsysteem in CeA () en intra-CeA, maar niet intra-BlA, micro-infusie van een CRF1 receptorantagonist vermindert de nicotineonttrekkingsafhankelijke verhogingen in de drempelwaarde voor de beloning van de hersenen (). Bij cannabinoïde-afhankelijke ratten is geprecipiteerd stoppen geassocieerd met een uitgesproken verhoging van de extracellulaire CRF-concentratie in de CeA (). Al met al ondersteunt dit bewijs de hypothese dat de CRF-CRF1 het receptorsysteem in de CeA is een belangrijke bemiddelaar van acute door ontwenning geïnduceerde negatieve affecten, samen met overmatige drugs- en alcoholinname tijdens afhankelijkheid. Onze resultaten breiden deze kennis uit naar overmatig eten van zeer smakelijk voedsel, wat suggereert dat analoge neuroadaptaties optreden.

De resultaten van dit onderzoek tonen aan dat de smakelijke voedselaftrekkende afhankelijke hypofagie van het minder appetijtelijke voer voor het voer wordt verzacht door micro-infusie in de BlA van de selectieve CRF1 receptorantagonist, terwijl overmatig eten en angst-achtig gedrag niet werden beïnvloed door de intra-BlA-medicamenteuze behandeling. De differentiële betrokkenheid van de BlA CRF-CRF1 receptorsysteem in de uitkomsten van dieetcycli suggereert dat hypofagie van chow een gedragsproces kan zijn dat onafhankelijk is van angstachtig gedrag. Integendeel, deze bevindingen komen overeen met de hypothese dat het BlA sensibele en stimulerende aspecten van motiverend opvallende gebeurtenissen bemiddelt. Er zijn inderdaad aanzienlijke aanwijzingen dat de BlA van cruciaal belang is bij het bemiddelen van devaluatieprocessen en aversieve reacties op beloningsreductie (dwz Crespi-effect, opeenvolgend negatief contrast, beloningsdaling, enzovoort; ; ; ), en daarom kan de hypofagie die het gevolg is van de overstap van het zeer smakelijke dieet naar het minder appetijtelijke voer van het voer mogelijk een hedonisch devaluatieproces zijn, in plaats van een energiehomeostasis-afhankelijk mechanisme (dwz onafhankelijk van eerdere energie-inname of toename van het lichaamsgewicht ; , ). Blokkade van CRF1 receptoren in de BlA hebben daarom de hypothese dat ze chow-hypofagie verminderen (dat wil zeggen, om de inname van het voer te verhogen) door het devaluatieproces te verzwakken dat optreedt bij het overschakelen van het zeer smakelijke voedsel naar het minder appetijtelijke voer. Relevant voor deze context is ook de schijnbare inconsistentie tussen de moleculaire en de gedrags- / farmacologische resultaten die worden verkregen in de BlA. Hoewel de CRF1 receptorantagonist was in staat om de grootte van de chow-hypofagie te verminderen wanneer deze werd geïnjecteerd in de BlA, geen significante verschillen in CRF-immunoreactiviteit werden waargenomen in dit gebied bij het vergelijken van controle en met dieet cycli uitgevoerde ratten. Deze schijnbare discrepantie kan worden verklaard met het oog op het feit dat BlA-afhankelijke devaluatieprocessen van alternatieve beloningen fysiologisch plaatsvinden en een belangrijke evolutionaire betekenis hebben bij de selectie van voedingsmiddelen die de hoogste beloning / energiewaarde opleveren (). Als zodanig is het aannemelijk dat de bemiddeling van deze processen in het BlA geen neuroadaptaties in het CRF-systeem vereist (vergelijkbaar met die waargenomen in de CeA). Ter ondersteuning van deze hypothese, terwijl overmatig eten chronisch dieetcycli vereist om zich te ontwikkelen, treedt hypofagie van de minder geprefereerde alternatieve voeding op na de allereerste overgang van het zeer smakelijke dieet terug naar het reguliere voer (). Daarnaast is het belangrijk om te benadrukken dat, op basis van de resultaten verkregen door het injecteren van de CRF1-receptorantagonist in de BlA en CeA, de CRF1 receptor-afhankelijke hypofagie die hier wordt waargenomen lijkt een ander gedragsproces te zijn dan de anhedonie die wordt waargenomen bij het terugtrekken van geneesmiddelen. Desalniettemin is aangetoond dat acute terugtrekking van intermitterende toegang tot eetbaar voedsel andere hypohedonische reacties induceert, zoals verhoogde immobiliteit in de gedwongen-zwemtest en verminderde respons in een progressieve verhoudingsschema van wapening (; ).

Het is opmerkelijk om te vermelden dat, hoewel Chow / Palatable ratten zijn chronisch gefietst, de gedrags- en neurochemische veranderingen die hier worden getoond, treden op tijdens een acute, in plaats van een chronische, ontwenning van een smakelijk dieet. Het benadrukken van dit aspect is met name relevant, omdat in verslavingonderzoek grote verschillen in de gedrags-, farmacologische en neurochemische gevolgen van acute vs langdurige onthouding werd waargenomen (; ). Toekomstige studies zullen waardevol zijn om te bepalen hoe langdurig ontwennen de uitkomsten van dieetcycli kan beïnvloeden.

Een relevant discussiepunt is of het overmatig smakelijke voedselinname-gedrag dat we waarnemen in de context van dit diermodel als 'dwangmatig' kan worden beschouwd. In preklinisch verslavingsonderzoek is de term 'compulsief' uitgebreid gebruikt om overmatige inname van medicijnen tijdens ontwenning te beschrijven, die wordt aangedreven door een negatieve affectieve toestand en wordt verlicht bij hernieuwde toegang tot het medicijn (; ). Deze acceptatie van de term 'compulsief' is gebaseerd op het conceptuele raamwerk dat dwangstoornissen worden gekenmerkt door angst en stress voordat dwangmatig gedrag wordt begaan, en verlichting van de stress door het uitvoeren van dwangmatig gedrag (; ). In de context van het diermodel dat hier wordt gebruikt, zou het overmatige eetgedrag kunnen worden geïnterpreteerd als een vorm van 'dwangmatig' gedrag, gezien het eerder gepubliceerde bewijs dat ratten met intermitterende toegang tot het smakelijke dieet een negatieve emotionele toestand vertonen tijdens het terugtrekken van eetbaar voedsel. door angstig en depressief gedrag, dat wordt verlicht bij hernieuwde toegang (, ; ).

Samengevat, de resultaten van deze studie leveren kritisch functioneel bewijs dat de CRF-CRF1 receptorsysteem van de CeA en de BlA heeft een verschillende rol bij het bemiddelen van onaangepast gedrag als gevolg van intermitterende toegang tot eetbaar voedsel. In de CeA, de CRF-CRF1 receptorsysteem is een belangrijke bemiddelaar van het overmatig eten van smakelijk voedsel en het ontwenningsafhankelijke negatieve affect, terwijl het in de BlA de aversieve reacties van de proefpersonen veroorzaakt door beloningsreductie bemiddelt.

FINANCIERING EN OPENBAARMAKING

De auteurs verklaren geen belangenconflict.

Dankwoord

We danken Duncan Momaney, Aditi R Narayan, Jina Kwak voor technische assistentie en Tamara Zeric voor technische en redactionele assistentie. We danken ook Elena F. Crawford voor nuttige suggesties met betrekking tot CRF-immunohistochemie. Deze publicatie is mogelijk gemaakt door toekenningsnummers DA023680, DA030425, MH091945, MH093650 en AA016731, van het National Institute on Drug Abuse (NIDA), het National Institute of Mental Health (NIMH) en het National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism ( NIAAA), door het Peter Paul Career Development Professorship (PC) en door het Undergraduate Research Opportunities Program (UROP) van Boston University. Dit onderzoek werd ook ondersteund door de NIH Intramural Research Programmes van het National Institute on Drug Abuse en het National Institute of Alcohol Abuse and Alcoholism, NIH, DHHS. De inhoud ervan is uitsluitend de verantwoordelijkheid van de auteurs en vertegenwoordigt niet noodzakelijk de officiële standpunten van de National Institutes of Health.

voetnoten

 

Aanvullende informatie begeleidt het artikel op de website Neuropsychopharmacology (http://www.nature.com/npp)

 

 

Aanvullend materiaal

Aanvullende informatie

Referenties

  • Ahmed SH, Koob GF. Overgang naar drugsverslaving: een negatief versterkingsmodel op basis van een allostatische afname van de beloningsfunctie. Psychopharmacology (Berl) 2005; 180: 473-490. [PubMed]
  • Avena NM, Bocarsly ME, Hoebel BG. Diermodellen van suiker en vette eetbuien: relatie tot voedselverslaving en verhoogd lichaamsgewicht. Methoden Mol Biol. 2012, 829: 351-365. [PubMed]
  • Bakshi VP, Kalin NH. Corticotropine-releasing hormone and animal models of anxiety: gen-environment interacties. Biol Psychiatry. 2000, 48: 1175-1198. [PubMed]
  • Bale TL. Gevoeligheid voor stress: ontregeling van CRF-routes en ontwikkeling van ziekten. Horm Behav. 2005, 48: 1-10. [PubMed]
  • Blasio A, Iemolo A, Sabino V, Petrosino S, Steardo L, Rice KC. 2013aRimonabant slaat angstig bij ratten teruggetrokken uit eetbaar voedsel: rol van de centrale amygdala Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.153 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruis Ref]
  • Blasio A, Steardo L, Sabino V, Cottone P. 2013bOpioid-systeem in de mediale prefrontale cortex medieert binge-achtig eten Addict Bioldoi: 10.1111 / adb.12033 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruis Ref]
  • Breese GR, Overstreet DH, Knapp DJ. Conceptueel kader voor de etiologie van alcoholisme: een 'aanmaak' / stresshypothese. Psychopharmacology (Berl) 2005; 178: 367-380. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Bruijnzeel AW, Ford J, Rogers JA, Scheick S, Ji Y, Bishnoi M, et al. Blokkade van CRF1-receptoren in de centrale kern van de amygdala verzwakt de dysforie die geassocieerd is met het staken van nicotine bij ratten. Pharmacol Biochem Behav. 2012, 101: 62-68. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Chen C, Wilcoxen KM, Huang CQ, Xie YF, McCarthy JR, Webb TR, et al. Ontwerp van 2,5-dimethyl-3- (6-dimethyl-4-methylpyridine-3-yl) -7-dipropylaminopyrazolo [1,5-a] py rimidine (NBI 30775 / R121919) en structuur-activiteitsrelaties van een reeks krachtige en oraal actieve corticotropine-afgevende factorreceptorantagonisten. J Med Chem. 2004, 47: 4787-4798. [PubMed]
  • Corwin RL. Binge-ratten: een model van intermitterend overmatig gedrag. Eetlust. 2006, 46: 11-15. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Corwin RL, Grigson PS. Symposiumoverzicht - voedselverslaving: feit of fictie. J Nutr. 2009, 139: 617-619. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Nagy TR, Coscina DV, Zorrilla EP. Voedingsmicrostructuur bij door voeding geïnduceerde zwaarlijvigheidgevoelige versus resistente ratten: centrale effecten van urocortine 2. J Physiol. 2007; 583 (Pt 2: 487-504. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Roberto M, Bajo M, Pockros L, Frihauf JB, et al. Werving van CRF-systemen bemiddelt de schaduwzijde van dwangmatig eten. Proc Natl Acad Sci USA. 2009a; 106: 20016-20020. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Intermitterende toegang tot geprefereerd voedsel vermindert de versterkende werkzaamheid van chow bij ratten. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2008, 295: R1066-R1076. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Cottone P, Sabino V, Steardo L, Zorrilla EP. Consummatoire, angstgerelateerde en metabole aanpassingen bij vrouwelijke ratten met afwisselende toegang tot voedsel dat de voorkeur geniet. Psychoneuroendocrinology. 2009b; 34: 38-49. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Cottone P, Wang X, Park JW, Valenza M, Blasio A, Kwak J, et al. Antagonisme van sigma-1-receptoren blokkeert dwangmatig eten. Neuropsychopharmacology. 2012, 37: 2593-2604. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Dore R, Iemolo A, Smith KL, Wang X, Cottone P, Sabino V. 2013CRF bemiddelt de anxiogene en anti-belonen, maar niet de anorectische effecten van PACAP Neuropsychopharmacologydoi: 10.1038 / npp.2013.113 [PMC gratis artikel] [PubMed] [Kruis Ref]
  • Funk CK, O'Dell LE, Crawford EF, Koob GF. Corticotropine-afgevende factor in de centrale kern van de amygdala zorgt voor verhoogde ethanol zelf-toediening in teruggetrokken, ethanol-afhankelijke ratten. J Neurosci. 2006, 26: 11324-11332. [PubMed]
  • George O, Ghozland S, Azar MR, Cottone P, Zorrilla EP, Parsons LH, et al. CRF-CRF1-systeemactivering veroorzaakt door onthouding geïnduceerde toenames van nicotine zelftoediening bij nicotine-afhankelijke ratten. Proc Natl Acad Sci USA. 2007, 104: 17198-17203. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Grigoriadis DE, Chen C, Wilcoxen K, Chen T, Lorang MT, Bozigion H, et al. In vitro karakterisering van R121919: een nieuwe niet-peptide corticotropine-releasing factor1 (CRF1) receptorantagonist voor de mogelijke behandeling van depressie en angstgerelateerde aandoeningen. Society for Neuroscience. 2000; Abstract 807: 4-9.
  • Hagan MM, Chandler PC, Wauford PK, Rybak RJ, Oswald KD. De rol van smakelijk voedsel en honger als trigger-factoren in een diermodel van stress-geïnduceerd eetaanvallen. Int J Eat Disord. 2003, 34: 183-197. [PubMed]
  • Hatfield T, Han JS, Conley M, Gallagher M, Holland P. Neurotoxische laesies van basolaterale, maar niet centrale, amygdala interfereren met Pavlovische tweede orde conditionering en versterken devaluatie-effecten. J Neurosci. 1996, 16: 5256-5265. [PubMed]
  • Heilig M, Egli M, Crabbe JC, Becker HC. Acute intrekking, langdurige onthouding en negatief effect bij alcoholisme: zijn ze verbonden. Addict Biol. 2010, 15: 169-184. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Heilig M, Koob GF. Een sleutelrol voor de corticotropine-afgevende factor bij alcoholafhankelijkheid. Trends Neurosci. 2007, 30: 399-406. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Heinrichs SC, Menzaghi F, Schulteis G, Koob GF, Stinus L. Onderdrukking van corticotropine-afgevende factor in de amygdala verzwakt de aversieve gevolgen van morfineontwenning. Gedrag Pharmacol. 1995, 6: 74-80. [PubMed]
  • Iemolo A, Valenza M, Tozier L, Knapp CM, Kornetsky C, Steardo L, et al. Ontwenning van chronische, intermitterende toegang tot een zeer smakelijk voedsel veroorzaakt depressief gedrag bij ratten met compulsief eten. Gedrag Pharmacol. 2012, 23: 593-602. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Koob GF. Een rol voor hersenstresssystemen bij verslaving. Neuron. 2008, 59: 11-34. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Koob GF. Neurobiologische substraten voor de duistere kant van compulsiviteit bij verslaving. Neurofarmacologie. 2009; 56 (Suppl 1: 18-31. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Koob GF. De rol van CRF en CRF-gerelateerde peptiden in de donkere kant van verslaving. Brain Res. 2010, 1314: 3-14. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Koob GF, Heinrichs SC. Een rol voor corticotropine-afgevende factor en urocortine in gedragsreacties op stressoren. Brain Res. 1999, 848: 141-152. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Plasticiteit van neurocircuitbeloning en de 'donkere kant' van drugsverslaving. Nat Neurosci. 2005, 8: 1442-1444. [PubMed]
  • Koob GF, Le Moal M. Review. Neurobiologische mechanismen voor motivatieprocessen van de tegenstander bij verslaving. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008, 363: 3113-3123. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Koob GF, Volkow ND. Neurocircuit van verslaving. Neuropsychopharmacology. 2010, 35: 217-238. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Logrip ML, Koob GF, Zorrilla EP. De rol van corticotropine-afgevende factor in drugsverslaving: potentieel voor farmacologische interventie. CNS Drugs. 2011, 25: 271-287. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Maj M, Turchan J, Smialowska M, Przewlocka B. Morphine en cocaïne beïnvloeden de biosynthese van CRF in de centrale kern van de rat van amygdala. Neuropeptiden. 2003, 37: 105-110. [PubMed]
  • McNally GP, Akil H. De rol van corticotropine-releasing hormoon in de amygdala en bedkern van de stria-terminus in de gedrags-, pijnmodulatoire en endocriene gevolgen van opiaatontwenning. Neuroscience. 2002, 112: 605-617. [PubMed]
  • Merlo Pich E, Lorang M, Yeganeh M, Rodriguez de Fonseca F, Raber J, Koob GF, et al. Verhoging van extracellulaire corticotropine-afgevende factor-achtige immunoreactiviteitsniveaus in de amygdala van wakkere ratten tijdens beperking van de beperking en onttrekking van ethanol zoals gemeten door microdialyse. J Neurosci. 1995, 15: 5439-5447. [PubMed]
  • Murray E, Wise S, Rhodes S. 2011Wat kunnen verschillende hersens met beloning doen In Gottfried JA (eds) .Neurobiologie van Sensation and Reward, hoofdstuk 4 CRC Press: Boca Raton, FL, VS [PubMed]
  • Parylak SL, Koob GF, Zorrilla EP. De donkere kant van voedselverslaving. Physiol Behav. 2011, 104: 149-156. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Paxinos G, Watson C. 2007The Rat Brain in Stereotaxic Coordinates6th edn.Academic Press
  • Pellegrino A. A Stereotaxic Atlas of the Rat Brain. Plenum: New York; 1979.
  • Rodriguez de Fonseca F, Carrera MR, Navarro M, Koob GF, Weiss F. Activering van corticotropine-afgevende factor in het limbisch systeem tijdens intrekking van cannabinoïden. Wetenschap. 1997, 276: 2050-2054. [PubMed]
  • Sabino V, Cottone P, Steardo L, Schmidhammer H, Zorrilla EP. 14-Methoxymetopon, een zeer krachtige mu-opioïde-agonist, beïnvloedt bifasisch de inname van ethanol in Sardijnse alcohol-prefererende ratten. Psychopharmacology (Berl) 2007; 192: 537-546. [PubMed]
  • Salinas JA, Parent MB, McGaugh JL. Ibotenische zure laesies van het basolaterale amygdala-complex of de centrale nucleus beïnvloeden op differentiële wijze de respons op verminderingen van de beloning. Brain Res. 1996, 742: 283-293. [PubMed]
  • Shalev U, Erb S, Shaham Y. De rol van CRF en andere neuropeptiden bij door stress geïnduceerd herstel van het zoeken naar geneesmiddelen. Brain Res. 2010, 1314: 15-28. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  • Vale W, Spiess J, Rivier C, Rivier J. Karakterisering van een 41-residu schapenhypothalamic peptide dat secretie van corticotropine en beta-endorfine stimuleert. Wetenschap. 1981, 213: 1394-1397. [PubMed]
  • Volkow ND, O'Brien CP. Problemen voor DSM-V: moet obesitas worden opgenomen als een hersenaandoening. Ben J Psychiatry. 2007; 164: 708-710. [PubMed]
  • Wellman LL, Gale K, Malkova L. GABAA-gemedieerde remming van basolaterale amygdala-blokken beloont devaluatie bij makaken. J Neurosci. 2005, 25: 4577-4586. [PubMed]
  • Yach D, Stuckler D, Brownell KD. Epidemiologische en economische gevolgen van de wereldwijde epidemieën van obesitas en diabetes. Nat Med. 2006, 12: 62-66. [PubMed]