Variatie in Oxytocin Receptordichtheid in de Nucleus Accumbens heeft verschillende effecten op Affiliatief gedrag in Monogamous en Polygamous Voles (2009)

J Neurosci. Auteur manuscript; beschikbaar in PMC Oct 27, 2009.

Gepubliceerd in definitief bewerkte vorm als:

PMCID: PMC2768419

NIHMSID: NIHMS93410

De laatste bewerkte versie van dit artikel van de uitgever is gratis beschikbaar op J Neurosci

Zie andere artikelen in PMC dat citeren het gepubliceerde artikel.

Ga naar:

Abstract

Oxytocine-receptoren in de nucleus accumbens zijn betrokken bij de regulatie van alloparental gedrag en de vorming van paarobligaties in de sociaal monogame prairiewolf. De dichtheid van de oxytocine-receptor in de nucleus accumbens is positief gecorreleerd met alloparenting in juveniele en volwassen vrouwelijke prairie-woelmuizen en de oxytocinereceptor-antagonist ingebracht in de nucleus accumbens blokkeert dit gedrag. Verder hebben prairiewolmende wespen hogere dichtheden van oxytocinereceptoren in de accumbens dan niet-monogame knaagdiersoorten, en het blokkeren van accumulaire oxytocinereceptoren voorkomt paring-geïnduceerde partnervoorkeuren. Hier hebben we adeno-geassocieerde virale vector genoverdracht gebruikt om de functionele relatie tussen de oxytocine-receptor-dichtheid in de weide en sociaal gedrag in weide- en weidevliegen te onderzoeken. Volwassen vrouwelijke weidewormen die over-expressie oxytocine-receptor in de nucleus accumbens vertoonden versnelde partnervoorkeurvorming na samenwonen met een man, maar vertoonden geen verbeterd alloparental gedrag. Partnerpreferenties werden echter niet gefaciliteerd in niet-monogame weidevogels door de oxytocine-receptor in de nucleus accumbens te introduceren. Deze gegevens bevestigen een rol voor de oxytocinereceptor in de accumbens in de regulatie van partnervoorkeuren in vrouwelijke weidewolf, en suggereren dat oxytocinereceptor-expressie in de accumbens niet voldoende is om partnervoorkeuren in niet-monogame soorten te bevorderen. Deze gegevens laten als eerste een directe relatie zien tussen de oxytocine receptor dichtheid in de nucleus accumbens en de variatie in sociaal gehechtheidsgedrag. Aldus kan individuele variatie in oxytocinereceptor-expressie in het striatum bijdragen aan natuurlijke diversiteit in sociaal gedrag.

sleutelwoorden: maternale, virus, voorkeur, neuropeptide, cognitie, autoradiografie

INLEIDING

Microtine knaagdieren vertonen een opmerkelijke diversiteit in sociaal gedrag, variërend van sterk affiliatieve en sociaal monogaam, tot relatief asociale en promiscue paringstrategieën (Gruderadams en Getz, 1985). De sociaal monogame prairie veldmuis (Microtus ochrogaster) vormt duurzame sociale bindingen, of paarobligaties, aan een partner van het andere geslacht na samenwonen en paren, terwijl niet-monogame weide woelmuizen (Microtus pennsylvanicus) meestal niet. Volwassen seksueel naïeve vrouwelijke weidewolfbollen vertonen een aanzienlijke diversiteit in hun spontane verzorgingsgedrag, of alloparental gedrag, waarbij ongeveer de helft het gedrag van de moeder ten opzichte van pups vertoont, terwijl de rest pups negeert of aanvalt (Lonstein en De Vries, 1999; Balen en Carter, 2003; Olazabal en Young, 2005). Volken zijn dus een uitstekende gelegenheid om de neurobiologische mechanismen te onderzoeken die ten grondslag liggen aan sociale hechting en zorg door allen, evenals de mechanismen die leiden tot diversiteit in dit gedrag, zowel tussen soorten onderling als tussen individuen.

Het nonapeptide oxytocine (OT) is betrokken bij de regulatie van zowel partnervoorkeurvorming als alloparental gedrag bij prairiewolken. Infusie van een oxytocine receptor (OTR) antagonist in de nucleus accumbens (NAcc), maar niet in de aangrenzende caudate putamen blokkeert paring-geïnduceerde partnervoorkeur vorming, een laboratorium proxy van parenbindingsformatie (Young et al., 2001). Vergelijkbare infusies van OTR-antagonisten in de NAcc blokkeren ook het gedrag van pasgeborenen bij maagdelijke vrouwtjes (Olazabal en Young, 2006b). Dus activering van OTR's in de NAcc vergemakkelijkt zowel partnervoorkeurvorming als alloparental gedrag in vrouwelijke weidevliegen.

Van variatie in OTR-dichtheid in het NAcc is verondersteld dat het bijdraagt ​​tot soortverschillen in sociale organisatie en gedrag bij alledag. Prairiewolmotten hebben hoge dichtheden van OTR in het NAcc, terwijl niet-monogame weidevliegen, muizen en ratten dat niet doen (Insel en Shapiro, 1992; Olazabal en Young, 2006a). Prairie-woelmuizen vertonen ook hogere niveaus van alledaags gedrag dan weidevliegen, muizen of ratten (Olazabal en Young, 2006a). Parallel aan deze interspeciale relatie tussen OTR-dichtheid in het NAcc en ouderlijk gedrag, is OTR-dichtheid in het NAcc positief gecorreleerd met alloparental gedrag in zowel juveniele als volwassen vrouwelijke prairiewolken (Olazabal en Young, 2006b, a). In deze studie gebruikten we adeno-geassocieerde virale vector (AAV) genoverdracht om direct de hypothese te testen dat variatie in NAcc OTR dichtheid kan bijdragen aan variatie in sociaal gehechtheid en alloparental gedrag. Volwassen vrouwelijke prairiewolven werden bilateraal geïnfuseerd in de NAcc met een AAV die codeert voor het OTR-gen van de prairiebuffer, resulterend in een significante verhoging van de OTR-binding. Dieren werden vervolgens getest op alloparental gedrag en vorming van partnervoorkeur. Vervolgens testten we de hypothese dat OTR-expressie in de NAcc voldoende was om de vorming van partnervoorkeuren te vergemakkelijken door vrouwelijke weidewolven met dezelfde vector te infunderen. We voorspelden dat in vergelijking met controles, OTR overexpressie van vrouwelijke prairiewolmelen een groter alloparental gedrag en versnelde vorming van partnervoorkeuren zou vertonen. Verder voorspelden we dat weidewolde-vrouwtjes die OTR uitdrukken in de NAcc, partnervoorkeuren zouden ontwikkelen ten opzichte van mannelijke partners.

MATERIALEN EN METHODES

Dieren

Prairie en weidewalsen werden gehuisvest in groepen van hetzelfde geslacht met 2-3-woelmuizen / -kooi vanaf het moment van spenen op 21-23-dagen. De behuizing bestond uit een geventileerde 36 × 18 × 19cm kooi in plexiglas gevuld met Bed-ocobbs laboratoriumdierbedding onder een 14: 10 uur lichte / donkere cyclus bij 22 ° C met toegang tot voedsel (konijn LabDiet, Richmond, IN) en water ad libitum . De prairie-woelmuizen werden verkregen uit onze kweekkolonie in het laboratorium die oorspronkelijk afkomstig was van in het veld gevangen wieken in Illinois. Weidewolven werden afgeleid van de stam verkregen van een broedkolonie aan de Florida State University. Onderwerpen waren 2-5 maanden oude intacte seksueel naïeve vrouwelijke woelmuizen. Stimulus-dieren waren seksueel ervaren volwassen mannelijke woelmuizen. Elk mannetje diende als een "partner" en een "vreemdeling" tijdens de partnervoorkeurstest (zie hieronder). Nestgenoten werden toegewezen aan verschillende behandelingsgroepen om te controleren op variabiliteit binnen nesten en in kooien. Alle procedures werden goedgekeurd door het Institutional Animal Care and Use Committee van Emory University.

Adeno-geassocieerde virale vectoren

De OTR-coderende sequentie werd gecreëerd door het splitsen van de eerste exon van een prairie vole OTR genomische kloon die codeert voor de eerste vijf transmembraandomeinen (Genbank-inschrijvingsnummer AF079980) en het 3'-uiteinde van de OTR geamplificeerd van cDNA van de prairie en de baarmoeder. De coderende sequentie werd opnieuw gekaderd met behulp van PCR om de UTR's te elimineren en nieuwe flankerende restrictieplaatsen te verschaffen om klonering in het AAV-vectorplasmide te vergemakkelijken. Het gemodificeerde gen werd vervolgens gekloneerd in een AAV2-vectorplasmide tussen een 0.6 kb-cytomegalovirus (CMV) -promoter en een SV40-DNA-fragment bevattende het SVNNUMX kleine t-intron- en polyA-signaal. De AAV40-OTR was kruiselings verpakt in AAV2 door een drievoudige plasmidetransfectie in AAV-9-cellen (Stratagene, La Jolla, CA) met behulp van een standaard calciumfosfaatprecipitatiewerkwijze. Er werd geen helpervirus gebruikt. Een AAV293-eGFP-plasmide was parallel verpakt in AAV2 als een negatieve controlevector. Kort samengevat, elk AAV-vectorplasmide, een AAV9 / 2 rep / cap-plasmide dat AAV9-replicase en AAV2-capsidefuncties en een 9 verschaftrd plasmide coderend voor Adenovirus-helperfuncties, pHelper (Stratagene), werden gecotransfecteerd in 293-cellen in een molaire verhouding van 1: 1: 1. Cellen werden 48 uur na transfectie geoogst. De celpellets werden vervolgens opnieuw gesuspendeerd in DMEM en de intracellulaire virusdeeltjes werden vrijgegeven door drie opeenvolgende ronden van bevriezen-ontdooien, gevolgd door centrifugatie bij 13,000 rpm voor 10 min op een tafelbladcentrifuge om deeltjes te verwijderen. De vectorvoorraden werden opgeslagen bij -80 C en getitreerd door real-time PCR met behulp van een ABI Prism 7700 Sequence Detection System van Perkin-Elmer Applied Biosystems (Foster City, CA). Titels waren in de volgorde van 1012 DRP / ml. (DRP = Dnase Resistant Particles).

Virale vectorinfusie

Stereotaxische infusies werden uitgevoerd onder isofluraananesthesie in een Kopf-stereotax voorzien van een Ultra Micro Pump II (World Precision Instruments, Sarasota, FL) en een 26-gauge Hamilton-injectiespuit. Vrouwtjes werden bilateraal geïnjecteerd in de schaal van de NAcc (stammetjes: AP + 1.7mm, ML .9mm, DV -4.5mm, weidewoldes: AP + 1.6mm, ML .9mm, DV -4.3mm) met 750nl van een AAV met de woelmuis oxytocinereceptor (CMV-OTR, N = 12), of een controle-eGFP-expressievector (CMV-GFP, N = 16). Virus werd geïnfundeerd met een snelheid van 93.8nl / min. De spuit werd op zijn plaats gelaten voor 5 min na infusie om diffusie van vector op de naaldbaan te minimaliseren. Sham-geopereerde dieren (N = 9) werden geanesthetiseerd en hun hoofdhuid werd ingesneden en gehecht. Na de operatie werden de dieren in groep gehuisvest tot het tijdstip van het testen van partnervoorkeurgedrag. Voorlopige onderzoeken wezen erop dat de OTR-expressie op de injectieplaats na 10-dagen stabiel was.

Allround gedragstesten

Een maand na injectie werden de veldmuizen getest op alloparentaal gedrag. Het testen vond plaats tussen 0800 uur en 1800 uur. Proefdieren werden in een grote schone kooi (45.5 x 24 x 20 cm) geplaatst en men liet ze 15 minuten acclimatiseren. Twee pups (2-5 dagen oud) werden aan het ene uiteinde van de kooi geplaatst. De latentie om de pups te benaderen, het aantal dieren dat de pups aanviel en de hoeveelheid tijd die werd besteed aan het verzorgen, zweven en ophalen van de pups werd geregistreerd. Met het oog op statistische analyse werd een latentie van 900 seconden toegekend aan dieren die de pups niet benaderden tijdens de test van 15 minuten. Het testen werd onmiddellijk stopgezet als het vrouwtje de pups aanviel. Dieren werden gecategoriseerd als alloparentaal als ze> 30 seconden besteedden aan het likken van de pups zonder aan te vallen. Op basis van de resultaten van het experiment met veldmuizen werden veldmuizen niet getest op alloparentaal gedrag.

Partner Preference Testing (Prairie Vole)

Een maand na de alloparental gedragstest en twee maanden na AAV-infusie kregen de vrouwen 4 μg oestradiolbenzoaat (EB; Fisher, Pittsburgh, PA), opgelost in 0.1ml van sesamolie IP dagelijks gedurende 3 dagen voorafgaand aan paring om seksuele ontvankelijkheid te induceren. . 16 uren na de laatste EB-injectie dieren werden in 28 uren in een schone kooi (17 × 12 × 6cm) met een seksueel ervaren volwassen man geplaatst voor 6 uur en vervolgens teruggebracht naar groepshuisvesting. Paringsgedrag werd vastgelegd tijdens de eerste samenwoning met 3600 uur. De latentie tot eerste intromissie en het aantal paringsperioden in het eerste uur werden gescoord. Een latentie van 1 seconden werd toegewezen aan dieren die niet paren tijdens de 14-uurperiode ten behoeve van statistische analyse. De volgende ochtend (XNUMX uur na samenwonen) werden de dieren getest op partnervoorkeur. In een partnervoorkeurtest wordt het experimentele vrouwtje geplaatst in een neutrale middenkamer van een apparaat met drie kamers, waarbij het partnermannetje wordt vastgebonden in een zijkamer en een nieuw "vreemdeling" mannetje wordt vastgebonden in het andere (Williams et al., 1992). Het proefdier is vrij om door de kamers te bewegen en de tijd doorgebracht in de nabijheid van elk mannetje wordt geregistreerd met behulp van een geautomatiseerd bundelonderbrekingssysteem (Curtis en Wang, 2005b, a; Lim et al., 2007).

Een dag later werden de vrouwtjes opnieuw gekoppeld met dezelfde partner voor nog eens 12 uren samenwonen. De vrouwtjes werden vervolgens opnieuw getest op een partnervoorkeur (18 uur totale contacttijd). Dit paradigma met twee fasen werd gebruikt om onze detectie van een partner-voorkeurstest te optimaliseren, omdat er variabiliteit is in de drempeltijd die nodig is om een ​​partnervoorkeur te vormen. Dieren werden geacht een partnervoorkeur te hebben als ze twee keer zoveel tijd in de nabijheid van de partner doorbrachten in vergelijking met de vreemdeling.

Partner Preference Testing (weidewolfsvlees)

Gewoonlijk vormen weidevluchten uit onze kolonie geen paarbinding na 24hrs van mateblootstelling. Daarom zijn voor dit experiment partnervoorkeurtests uitgevoerd na een samenwoning van 24 en een extra 48 uur (72 uur totaal). Alle andere behandelings- en testmethoden zijn hetzelfde als hierboven.

Weefselverzameling en -verwerking

Na de gedragsexperimenten werden dieren onthoofd na een diepe verdoving met isofluoraan. Hersenen werden vervolgens verzameld en ingevroren op droogijs in poedervorm. De hersenen werden gesegmenteerd door de NAcc in de 6-serie op 20μm, op een cryostaat, op Fisher Frost-plus dia's. Dia's werden opgeslagen bij -80C tot ze werden gebruikt in autoradiografie.

OTR Autoradiografie

OTR-receptor autoradiografie werd gebruikt voor het bepalen van OTR-binding in met AAV geïnjecteerde dieren. Autoradiografie werd uitgevoerd zoals eerder beschreven met kleine aanpassingen (Insel et al., 1991; Wang en Young, 1997). Secties werden verwijderd uit -80C opslag, toegestaan ​​aan de lucht, ondergedompeld in 0.1% paraformaldehyde in fosfaat-gebufferde zoutoplossing (pH 7.4), en tweemaal gespoeld in 50 mM Tris-buffer (pH 7.4) om endogene OT te verwijderen. Vervolgens werd het weefsel geïncubeerd in 50 pM 125I-OVTA (NEX 254050UC PerkinElmer, Waltham, MA) gedurende één uur. Niet-gebonden radioligand werd verwijderd door vier wassingen in 50mM Tris plus 2% MgCl2 (pH 7.4) en vervolgens gedoopt in dH20 en aan de lucht gedroogd onder een stroom koele lucht. Na droging werden de objectglaasjes gedurende 72-uren blootgesteld aan BioMax MR-film (Kodak, Rochester, NY). Twee CMV-OTR- en één CMV-GFP-dieren werden uitgesloten van de gedragsanalyse vanwege injectiemisissen.

GFP-immunohistochemie

Een subset van de dieren (N = 5) geïnjecteerd met CMV-GFP, werd transcardiaal geperfundeerd met 50 ml PBS, gevolgd door 50 ml 4% paraformaldehyde in 0.1 M fosfaatbuffer met 2.5% acroleïne (Polysciences, Warrington, PA). Onmiddellijk na perfusie werden de hersenen verwijderd en bewaard bij 4 ° C in 30% sucroseoplossing tot coupes. De hersenen werden in 25μm-coronale secties gesneden met een bevriezend microtoom en vrij-zwevend in een cryobeschermende oplossing bij -20 ° C bewaard tot immunohistochemische verwerking.

Een 1: 6-serie via de rostrocaudale as van elk brein werd verwerkt voor GFP. In het kort werden secties verwijderd uit de cryoprotectieve oplossing, grondig gespoeld in met kaliumfosfaat gebufferde zoutoplossing (pH 7.4) en vervolgens gedurende 15 minuten in 1% natriumboorhydride gereageerd om overmaat aldehyden te verwijderen. Secties werden vervolgens geïncubeerd in primaire antilichaamoplossing gericht tegen GFP in kaliumfosfaat-gebufferde zoutoplossing (KPBS) bevattende 0.1% Triton-X voor 1 uur bij kamertemperatuur gevolgd door 48 uren bij 4 ° C. Cellen die GFP bevatten, werden geïdentificeerd door gebruik te maken van een polyklonaal konijnen-anti-GFP-antilichaam (catalogusnummer A6455, Invitrogen, Carlsbad, CA) in een concentratie van 1: 100,000. Na primaire antilichaamincubatie werd het weefsel gespoeld in KPBS, geïncubeerd gedurende 1 uur in gebiotinyleerd geiten-anti-konijnen-IgG (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA) in een concentratie van 1: 600, en gespoeld in KPBS, gevolgd door een 1- uur incubatie in avidine-biotine peroxidase complex (ABC Elite Kit PK-6100 Vector, Burlingame, CA) in een concentratie van 1: 200. Na spoelen in KPBS en Tris-buffer (pH 7.2) werd GFP gevisualiseerd als een bruin reactieproduct door 3,3'-diaminobenzidine te gebruiken dat 0.08% waterstofperoxide in Tris-buffer bevatte. Het reactieproduct werd na ongeveer 20 minuten beëindigd door spoelen in Tris-buffer. Secties werden uit zoutoplossing op glijbanen met gelatine aangebracht, aan de lucht gedroogd, gedehydrateerd in een reeks gegradeerde alcoholen, geklaard in Histoclear (National Diagnostics, Atlanta, GA) en afgedekt met behulp van Krystalon (EMD Chemicals, Gibbstown, NJ).

Statistische analyse

Gegevens worden weergegeven als gemiddelde ± standaardfout van het gemiddelde (SEM). Een tweerichtings-RM ANOVA werd uitgevoerd met de tijd die met elk stimulusdier werd doorgebracht als de afhankelijke variabele, waarbij de factor binnen de proefpersonen partner of vreemdeling was, en de behandelingsgroep als tussenpersoon. De Holm-Sidak-test werd gebruikt voor paarsgewijze post-hocvergelijkingen wanneer een significant interactie-effect werd gedetecteerd. Eenrichtings-ANOVA's werden uitgevoerd op alloparentaal en paargedrag voor veldmuizen. Die gedragingen die niet voldeden aan de criteria voor normaliteit werden geanalyseerd met behulp van de Kruskal-Wallis One Way Analysis of Variance on Ranks. Een Fisher's Exact Test werd gebruikt om groepsverschillen te bepalen in het aandeel dieren dat alloparentaal gedrag vertoonde. Het paargedrag van de veldmuis werd geanalyseerd met behulp van een t-Test en Mann-Whitney Rank Sum Test wanneer de normaliteitstest faalde.

RESULTATEN

Alloparental Behavior in Prairie Voles

Het aandeel van CMV-OTR-geïnjecteerde vrouwelijke veldwoelmuizen die alloparentaal gedrag vertoonden (3/9) verschilde niet van de controle (4/15) of nepwoelmuizen (3/10) (p> 0.5; Figuur 1A). Twee CMV-OTR, vier CMV-GFP-controle en twee schijn-wijfjes, die werden gecategoriseerd als niet-alloparental, vielen de pups aan. De latentie om pups te benaderen (Figuur 1B) en de tijd besteed aan likken / trimmen was ook niet significant verschillend tussen de groepen (H = 0.31, P> 0.8 voor latentie, H = 0.40, P> 0.8 voor trimmen). Toen alleen de dieren die aan de criteria van alloparentaal zijn voldeden werden vergeleken, was de latentie om pups te benaderen voor CMV-OTR-vrouwtjes (140.2 ± 65.2 seconden) niet anders dan bij CMV-GFP (62.5 ± 39.3 seconden) of schijnvertoning (169.4 ± 51.7 seconden). ) vrouwtjes (F (2,7) = 1.27, p> 0.3). Er was ook geen verschil in de hoeveelheid tijd die de alloparentale CMV-OTR-vrouwtjes besteedden aan het likken van pups in vergelijking met de alloparentale CMV-GFP of schijnvrouwtjes (F (2,7) = 1.94, p> 0.2; Figuur 1C). De totale hoeveelheid tijd die elke groep besteedde aan het likken / verzorgen, zweven en dragen van de pups was ook niet verschillend tussen de alloparentale CMV-OTR (695.2 ± 77.1 seconden) CMV-GFP (387.5 ± 132.7 seconden) of schijnvertoning (503.8 ± 82.8 seconden) ) dieren (F (2,7) = 1.98, p> 0.2).

Figuur 1  

Alloparental gedrag in sham, CMV-GFP en CMV-OTR vrouwelijke prairie woelmuizen. A) Er was geen effect van de behandeling op het aandeel vrouwen in elke behandelingsgroep dat gedrag bij het alledaagse vertoonde. De donkere balken vertegenwoordigen het percentage dieren dat ...

Paringsgedrag in Prairie Voles

Het paargedrag werd niet significant beïnvloed door de eerdere chirurgische behandeling van de vrouwtjes. De latentie tot de eerste intromissie was niet significant verschillend bij mannen die gepaard waren met CMV-OTR-vrouwtjes in vergelijking met mannetjes die gepaard waren met CMV-GFP of nepvrouwen (H = 5.043, p = .08; Figuur 2A). Hoewel de CMV-OTR-groep de neiging had om eerder te paren dan de andere groepen, paren ze niet vaker. Het aantal paringspartijen in het eerste uur verschilde niet in paren met CMV-OTR-vrouwtjes en paren met CMV-GFP of schijnvrouwtjes (F (2,31) = 0.46, p> 0.6; Figuur 2B).

Figuur 2  

Koppelings- en partnervoorkeurgedrag in sham, CMV-GFP en CMV-OTR vrouwelijke prairiewolken. De latentie tot eerste intromissie (A) en het aantal paringsperioden (B) waren niet significant verschillend tussen de groepen. C) Na een samenlevingsperiode van 6 uur, ...

Partnervoorkeurgedrag in Prairie Voles

Na de samenwoning met 6 hr vertoonde geen van de groepen een significante partnervoorkeur (Figuur 2C). Er was geen hoofdeffect van de behandeling (F (2,31) = 0.56, p> 0.5) of tijd doorgebracht met de partner versus de vreemdeling (F (1,31) = 0.46, p> 0.5). Na nog eens 12 uur samenwonen was er geen hoofdeffect van de behandeling (F (2,29) = 78, p = 0.5) of de hoeveelheid tijd die met de partner werd doorgebracht versus de vreemdeling (F (1,29) = 3.71 , p = 0.06). Er was echter een significant interactie-effect (F (2,29) = 5.56, p = 0.009). De post-hoc-test onthulde dat CMV-OTR-vrouwtjes significant meer tijd in de nabijheid van de partner doorbrachten dan met de vreemdeling (p <0.001; Figuur 2D). De CMV-GFP- en schijnvrouwtjes lieten na deze periode echter geen partnervoorkeur zien (p> 0.05; Figuur 2D). Bovendien bereikte 80% van de met CMV-OTR geïnjecteerde volken de criteria om een ​​partnervoorkeur te hebben, dwz twee keer zoveel tijd met de partner doorbrengen dan de vreemdeling, in vergelijking met slechts 31% ingespoten CMV-GFP en 44% schijnbeesten (Figuur 2E, F).

OTR- en GFP-expressie in de NAcc van Prairie Voles

Autoradiografie werd uitgevoerd om de plaatsing van AAV-injectie te bepalen en om te verifiëren dat de CMV-OTR-vector resulteerde in verhoogde OTR-binding in vergelijking met controles. Zoals eerder gemeld, was er significante individuele variatie in OTR-binding in de NAcc van controle CMV-GFP prairie woelmuizen (Figuur 3A, B). Duidelijke verhogingen in OTR-binding werden gedetecteerd in de NAcc van met CMV-OTR geïnjecteerde prairiewolms (Figuur 3C). Bovendien werd GFP-immunohistochemie uitgevoerd op hersensecties van CMV-GFP-dieren om de mate van expressie in neuronen van het NAcc te bepalen. Duidelijke labeling van cellen met neuronale kenmerken werd gedetecteerd, wat bevestigt dat de CMV-AAV-vectoren expressie in neuronen aandreven (Figuur 3E, F).

Figuur 3  

Analyse van OTR- en GFP-expressie in CMV-OTR en CMV-GFP vrouwelijke prairiewolven. OTR-dichtheid werd bepaald met behulp van receptor-autoradiografie. A, B) Er was significante variatie in de dichtheid van OTR-binding in de NAcc van CMV-GFP-vrouwtjes. Dit staat in contrast ...

Paringsgedrag in veldmuizen

Er werden geen significante verschillen in paargedrag waargenomen tussen de behandelingsgroepen in weidemuizen. De latentie tot de eerste intromissie was niet verschillend bij mannen gepaard met CMV-OTR (1245.1 ± 1465.9 seconden) vrouwtjes vergeleken met mannetjes die waren gepaard om CMV-GFP (566.6 ± 989.8 seconden) vrouwtjes te controleren (T = 128.0, p> 0.2). Het aantal paringspartijen in het eerste uur verschilde ook niet in paren met CMV-OTR (6.8 ± 5.1) vrouwtjes en paren met CMV-GFP (9.5 ± 4.4) vrouwtjes (t = 1.42, p> 0.1).

Partnervoorkeur in weidevluchten

Na een samenlevingsperiode van 24hr vertoonde geen van de groepen een significante partnervoorkeur (Figuur 4A). Er was geen hoofdeffect van de behandeling (F (1,20) = 0.19, p> 0.6) of tijd doorgebracht met partner versus vreemdeling (F (1,20) = 0.09, p> 0.7). Na nog eens 48 uur samenwonen was er opnieuw geen significant hoofdeffect van de behandeling (F (1,19) =. 65, p> 0.4) of tijd doorgebracht met een vrouw (F (1,19) = 0.62, p> .4; Figuur 4B).

Figuur 4  

Partnervoorkeurgedrag van vrouwelijke weidewormen na een 24 hr-samenwoning (A) en na een culmulatieve 72-samenwoning (B). CMV-OTR en CMV-GFP geïnjecteerde vrouwtjes vertoonden geen partnervoorkeur. Ze brachten evenveel tijd door met de partner ...

OTR-expressie in de NAcc of Meadow Voles

Met CMV-GFP geïnjecteerde weidevliegen hadden weinig of geen OTR-binding in de NAcc (Figure5A). Daarentegen hadden met CMV-OTR geïnjecteerde weidewalsen aanzienlijke OTR-binding in de NAcc, vergelijkbaar met die van de prairie-woelmuizen (Figuur 5B).

Figuur 5  

Receptor-autoradiografie die de OTR-bindingsdichtheid in de NAcc van CMV-OTR (A) en CMV-GFP (B) weidewormen illustreert. Merk op dat vrouwelijke weidevluchten met CMV-GFP weinig of geen OTR-binding in de NAcc hadden. OTR-binding in de NAcc was echter dramatisch verhoogd ...

DISCUSSIE

Verschillen in OTR-dichtheid in het NAcc zijn in verband gebracht met soortverschillen in paringsstrategie (sociale monogamie versus polygamie) en alloparental gedrag, wat suggereert dat variatie in OTR-receptorexpressie ten grondslag kan liggen aan soortverschillen in sociale organisatie en gedrag (Insel et al., 1991; Young en Wang, 2004; Olazabal en Young, 2006b). Sociaal monogamous prairie woelmuizen hebben hogere dichtheden van OTR in de NAcc dan niet-monogame weide en bergweiden, en farmacologische blokkade van die receptoren voorkomt paring-geïnduceerde partnervoorkeur vorming (Young et al., 2001; Olazabal en Young, 2006b). Er is ook significante individuele variatie in OTR-dichtheid in de NAcc in prairie-woelmuizen (Figuur 3A, B). OTR-dichtheid in dit gebied is positief gecorreleerd met individuele variatie in het alloparental gedrag van volwassen seksueel naïeve vrouwelijke prairiewolms (Young, 1999; Olazabal 2006) en OTR-antagonist toediening in de NAcc elimineert dit gedrag (Olazabal en Young, 2006a). Daarom hebben we in deze studie geprobeerd de relatie tussen de receptordichtheid in het NAcc en het verwante gedrag in volen rechtstreeks te testen door AAV-genoverdracht te gebruiken.

Onze resultaten laten zien dat, zoals voorspeld, vrouwelijke weidewiermuizen met verhoogde niveaus van OTR in de NAcc-weergave de partnervoorkeuren hebben versneld in vergelijking met vrouwen met een lagere OTR-dichtheid (CMV-GFP of shams). Cin tegenstelling tot onze voorspelling was er geen verschil in alloparental gedrag tussen groepen, wat wijst op verschillende mechanismen waarmee accumulatieve OTR de vorming van partnervoorkeuren en alloparental gedrag reguleert. Onze resultaten ondersteunen de hypothese dat individuele verschillen in OTR-expressie bijdragen tot intraspeciale variatie in sommige aspecten van affiliatief gedrag. Toenemende OTR-expressie in de NAcc was echter niet voldoende om partnerpreferentievorming in weidevliegen te induceren, zelfs na 72-uren samenleven, wat suggereert dat de soortverschillen in accumale OTR alleen niet voldoende zijn om de soortverschillen in het vermogen om partner te vormen te verklaren voorkeuren. Het is belangrijk op te merken dat er geen groepsverschillen waren in het paargedrag in een van de onderzochte parameters. Daarom kan de versterkte partnervoorkeur in de experimentele prairiewolfmuizen niet worden toegeschreven aan verhoogde seksuele activiteit tijdens de initiële samenlevingsperiode.

Volwassen vrouwelijke weidewolfbui vertonen opmerkelijke individuele variatie in hun weergave van zorg door alledag. Over 50% van seksueel naïeve wijfjes zal spontaan appels ophalen, likken / verzorgen en zweven over de pups die aan hen worden gepresenteerd (Lonstein en De Vries, 1999; Balen en Carter, 2003; Olazabal en Young, 2005). Er is ook een significante individuele variatie in OTR-dichtheid in de NAcc tussen prairiewolken (Young, 1999). Vrouwtjes met hogere dichtheden van OTR in het NAcc hebben meer kans om alloparentale respons te vertonen dan dieren met lagere OTR in dit gebied. Aldus was het verrassend dat het verhogen van de OTR-dichtheid in de NAcc van prairiewolven het allopale gedrag niet versterkte. Het feit dat deze dieren een versnelde vorming van partnervoorkeuren vertoonden, suggereert dat de OTR afgeleid van het virale vector-transgen functioneel was gekoppeld aan signaaltransductieroutes in de NAcc.

We veronderstellen dat individuele variatie in OTR-activatie in het NAcc tijdens de ontwikkeling een belangrijkere rol kan spelen bij het produceren van intraspeciale variatie in het gedrag van alledag. De positieve correlatie in OTR-dichtheid in het NAcc en het alloparental gedrag is aangetoond bij juveniele prairieeters en bij volwassenen (Olazabal en Young, 2006b, a). Alloparental gedrag in prairie woelmuizen lijkt bijzonder gevoelig te zijn voor verstoringen tijdens de ontwikkeling. Perinatale blootstelling aan OT verandert bijvoorbeeld het gedrag van alledeur in vrouwelijke volken (Bales et al., 2007). Daarom kunnen personen met hogere OTR-dichtheden tijdens de ontwikkeling verhoogde OTR-signalering ervaren in de NAcc, wat resulteert in langdurige neurochemische veranderingen die de kans vergroten om alledaags gedrag weer te geven wanneer ze volwassenen worden. Als deze hypothese correct is, zouden we voorspellen dat toenemende OTR-expressie in het NAcc neonataal de frequentie van alzijdig gedrag zou verhogen.

Een andere verklaring voor het falen van het verbeteren van OTR-expressie in het NAcc om het gedrag van alloparen te vergroten, is dat variatie in OTR-expressie in meerdere hersenregio's noodzakelijk kan zijn om de verwachte diversiteit in gedrag te produceren. OTR-expressie in het laterale septum is bijvoorbeeld negatief gecorreleerd met alloparental gedrag (Olazabal en Young, 2006a). Ten slotte is het ook mogelijk dat variatie in hormoonblootstelling of sociale ervaring de OTR-dichtheid in de NAcc beïnvloedt, naast het veranderen van alloparental gedrag. Bijvoorbeeld, de aanwezigheid of afwezigheid van de vader tijdens de ontwikkeling of perinatale manipulatie van steroïde hormonen kan de weergave van alloparentale responsiviteit in vrouwelijke weidewormen beïnvloeden (Roberts et al., 1996; Roberts et al., 1998; Lonstein en De Vries, 2000).

In mannelijke prairiewolven speelt vasopressine een cruciale rol bij de weergave van vaderlijk gedrag en partnervoorkeurvorming, parallel aan de rol van oxytocine bij vrouwen (Winslow et al., 1993; Wang et al., 1994). Locatiespecifieke farmacologische onderzoeken tonen aan dat V1aR in het ventrale pallidum, een belangrijke output van de NAcc, van cruciaal belang is voor de vorming van paarbindingen (Lim en Young, 2004). Toename van V1aR in het ventrale pallidum met behulp van virale vector-gemedieerde genoverdracht versnelt de partnervoorkeurvorming van mannelijke prairiewolven (Pitkow et al., 2001), een bevinding die parallel loopt met de huidige studie. Hoewel overexpressie van V1aR in het ventrale pallidum van mannelijke weidevluchten niet voldoende was om vaderlijk gedrag te induceren, bevorderde het de voorkeur van de partner (Lim et al., 2004); daarentegen, in de huidige studie stimuleerde overexpressie van OTR in de NaCC de vorming van partnervoorkeuren in vrouwelijke weidevliegen niet.

Er zijn verschillende mogelijke verklaringen voor het falen van weidewolfmuizen met verhoogde OTR in het NAcc om partnervoorkeuren te vormen. Ten eerste kunnen soortverschillen in OT-afgifte binnen de NAcc tijdens de paring verschillen tussen vrouwelijke weidevluchtmuizen en weidevliegen. Hoewel de OTR-lokalisatie verschilt tussen de soorten, hebben zowel veldmuizen en weidevliegen OT-immuunreactieve vezels in de NAcc (Ross and Young, niet-gepubliceerde gegevens). In vivo microdialyse-experimenten hebben aangetoond dat paring OT-afgifte in de NAcc van vrouwelijke weidewolfmuizen stimuleert, maar parallelle onderzoeken zijn niet uitgevoerd in weidevliegen (CD Cole en Young, niet-gepubliceerde gegevens). Het is mogelijk dat infusie van OT in met CMV-OTR behandelde dieren de vorming van partnervoorkeuren in weidevliegen zou bevorderen. Er dient echter te worden opgemerkt dat bij vaginocervicale stimulatie bij ratten en schapen de centrale OT-afgifte toeneemt (Kendrick et al., 1986; Sansone et al., 2002). Daarom is het aannemelijk dat weidevliegen al een toename van OT-accumulatoren bij paring ervaren. Een andere verklaring voor het falen van NAcc OTR-expressie om partnervoorkeurvorming in vrouwelijke weidewolven te stimuleren, is dat soortverschillen in OTR-expressie in andere hersengebieden ook noodzakelijk zijn voor paarbinding. De OTR-dichtheid is bijvoorbeeld ook hoger in de prefrontale cortex en de laterale amygdala in prairiewolven in vergelijking met niet-monoglobee mierenrassen (Insel et al., 1991; Young et al., 1996; Smeltzer et al., 2006). Daarom kan het verhogen van OTR-expressie op meerdere locaties noodzakelijk zijn om paring-geïnduceerde partnervoorkeuren in weidevliegen te stimuleren. Ten slotte is het mogelijk dat meerdere neurochemische verschillen tussen de soorten verantwoordelijk zijn voor soortverschillen in gedrag (bijv. Dopamine, corticotropine releasing factor) (Gingrich et al., 2000; Liu en Wang, 2003; Smeltzer et al., 2006; Lim et al., 2007).

Er zijn verschillende belangrijke kanttekeningen bij onze experimentele aanpak die aanleiding geven tot discussie. Ten eerste verhoogde de CMV-OTR waarschijnlijk de OTR-expressie in alle celtypen in het geïnjecteerde gebied, inclusief neuronale populaties die normaal niet reageren op OT. Het is echter mogelijk dat de transgene OTR resulteerde in een grotere signalering in neuronen die gewoonlijk endogene OTR tot expressie brengen vanwege verhoogde gevoeligheid voor OT afgegeven op die neuronen, of de aanwezigheid van de geschikte stroomafwaartse signaalmoleculen. Ten tweede werd het gebied van transgene expressie geproduceerd door virale vectorinfusie niet uniform tot expressie gebracht over de gehele rostraal-caudale of medio-laterale omvang van de NAcc. In de CMV-OTR-vrouwen was OTR-expressie consistent verhoogd in de schaal en aangrenzende kerngebieden van de NAcc. Er moet echter worden opgemerkt dat shell van de NAcc het meest betrokken is bij de regulatie van partnervoorkeurvorming en OTR-dichtheid in dit zelfde gebied sterker gecorreleerd is met alloparental gedrag dan het kerngebied.

Dit is de eerste studie die overtuigend aantoont dat variatie in OTR-expressie in de hersenen kan bijdragen aan variatie in sociaal gedrag. OT is op grote schaal betrokken geweest bij de regulering van verschillende gedragingen, waaronder sociale informatieverwerking en geheugen, partnerkeuze, bevruchting door moeder en gehechtheid (Dantzer et al., 1987; Kendrick, 2000; Ferguson et al., 2001; Kavaliers et al., 2003). Er is nu duidelijk bewijs dat OT menselijke sociale cognitie ook moduleert, inclusief interpersoonlijk vertrouwen, oogopslag, gezichtsgeheugen en emotieperceptie (Kosfeld et al., 2005; Domes et al., 2007; Guastella et al., 2008; Savaskan et al., 2008). OT-toediening verhoogt de retentie van sociale cognitie in een stem-intonatietaak bij autistische onderwerpen (Hollander et al., 2007), en verschillende genetische studies hebben bescheiden associaties gerapporteerd tussen niet-coderende polymorfismen van het OTR-gen en autismespectrumstoornis (Wu et al., 2005; Jacob et al., 2007; Lerer et al., 2007; Yrigollen et al., 2008). Er is beperkte informatie over de distributie van OTR en er is niets bekend over individuele variatie in OTR-dichtheid in het menselijk brein. Onze resultaten suggereren dat variatie in OTR-dichtheid in specifieke hersenregio's kan bijdragen aan individuele verschillen in sociaal-cognitieve functies bij mensen.

Danksagung

De auteurs willen Lorra Mathews bedanken voor haar uitstekende werk in het beheer van onze veldmuizenkolonie. Deze studie werd ondersteund door NIH verleent MH064692 aan LJY, RR00165 aan Yerkes National Primates Research Centre en NSF STC IBN-9876754.

REFERENTIES

  1. Bales KL, Carter CS. Geslachtsverschillen en ontwikkelingseffecten van oxytocine op agressie en sociaal gedrag bij prairiewolms (Microtus ochrogaster) Horm Behav. 2003, 44: 178-184. [PubMed]
  2. Bales KL, van Westerhuyzen JA, Lewis-Reese AD, Grotte ND, Lanter JA, Carter CS. Oxytocine heeft dosis-afhankelijke ontwikkelingseffecten op pair-bonding en allopezental care in vrouwelijke weidevliegen. Horm Behav. 2007, 52: 274-279. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  3. Curtis JT, Wang Z. Ventral tegmental gebiedsbetrokkenheid bij pair bonding in mannelijke weidevliegen. Physiol Behav. 2005a; 86: 338-346. [PubMed]
  4. Curtis JT, Wang Z. Glucocorticoïdreceptorbetrokkenheid bij paarbinding in vrouwelijke weideweelde: de effecten van acute blokkade en interacties met centrale dopamine-beloningssystemen. Neuroscience. 2005b; 134: 369-376. [PubMed]
  5. Dantzer R, Bluthe RM, Koob GF, Le Moal M. Modulatie van sociaal geheugen bij mannelijke ratten door neurohypophyseale peptiden. Psychopharmacology (Berl) 1987; 91: 363-368. [PubMed]
  6. Domes G, Heinrichs M, Michel A, Berger C, Herpertz SC. Oxytocine verbetert "mind-reading" bij mensen. Biol Psychiatry. 2007, 61: 731-733. [PubMed]
  7. Ferguson JN, Aldag JM, Insel TR, Young LJ. Oxytocine in de mediale amygdala is essentieel voor sociale herkenning bij de muis. J Neurosci. 2001, 21: 8278-8285. [PubMed]
  8. Gingrich B, Liu Y, Cascio C, Wang Z, Insel TR. Dopamine D2-receptoren in de nucleus accumbens zijn belangrijk voor sociale hechting bij vrouwelijke weidewormen (Microtus ochrogaster) Gedrag Neurosci. 2000, 114: 173-183. [PubMed]
  9. Gruderadams S, Getz LL. Vergelijking van het koppelsysteem en het gedrag van de vader in Microtus ochrogaster en Microtus pennsylvanicus. Journal of Mammalogy. 1985, 66: 165-167.
  10. Guastella AJ, Mitchell PB, Dadds MR. Oxytocine verhoogt de blik naar het ooggebied van menselijke gezichten. Biol Psychiatry. 2008, 63: 3-5. [PubMed]
  11. Hollander E, Bartz J, Chaplin W, Phillips A, Sumner J, Soorya L, Anagnostou E, Wasserman S. Oxytocin verhoogt de retentie van sociale cognitie bij autisme. Biol Psychiatry. 2007, 61: 498-503. [PubMed]
  12. Insel TR, Shapiro LE. Oxytocinereceptorverdeling weerspiegelt sociale organisatie in monogame en polygame woelmuizen. Proc Natl Acad Sci US A. 1992; 89: 5981-5985. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  13. Insel TR, Gelhard R, Shapiro LE. De vergelijkende verdeling van voorhersenseceptoren voor neurohypophyseale peptiden in monogame en polygame muizen. Neuroscience. 1991, 43: 623-630. [PubMed]
  14. Jacob S, Brune CW, Carter CS, Leventhal BL, Lord C, Cook EH., Jr Associatie van het oxytocinereceptorgen (OXTR) bij blanke kinderen en adolescenten met autisme. Neurosci Lett. 2007, 417: 6-9. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  15. Kavaliers M, Colwell DD, Choleris E, Agmo A, Muglia LJ, Ogawa S, Pfaff DW. Verminderde discriminatie en afkeer van geparasiteerde mannelijke geuren door vrouwelijke oxytocine knock-out muizen. Genen Brain Behav. 2003, 2: 220-230. [PubMed]
  16. Kendrick KM. Oxytocine, moederschap en binding. Exp Physiol. 2000; 85 (spec.nr.): 111S-124S. [PubMed]
  17. Kendrick KM, Keverne EB, Baldwin BA, Sharman DF. Cerebrospinale vloeistofniveaus van acetylcholinesterase, monoamines en oxytocine tijdens de bevalling, bevalling, vaginocervicale stimulatie, lamsscheiding en zogen in schapen. Neuro-endocrinologie. 1986, 44: 149-156. [PubMed]
  18. Kosfeld M, Heinrichs M, Zak PJ, Fischbacher U, Fehr E. Oxytocin verhoogt het vertrouwen in mensen. Natuur. 2005, 435: 673-676. [PubMed]
  19. Lerer E, Levi S, Salomon S, Darvasi A, Yirmiya N, Ebstein RP. Associatie tussen het oxytocine receptor (OXTR) gen en autisme: relatie tot Vineland Adaptief gedrag Schalen en cognitie. Mol Psychiatry. 2007 [PubMed]
  20. Lim MM, Young LJ. Vasopressine-afhankelijke neurale circuits die ten grondslag liggen aan de vorming van paarbindingen in de monogame prairiewolf. Neuroscience. 2004, 125: 35-45. [PubMed]
  21. Lim MM, Wang Z, Olazabal DE, Ren X, Terwilliger EF, Young LJ. Verbeterde partnervoorkeur in een promiscue soort door de expressie van een enkel gen te manipuleren. Natuur. 2004, 429: 754-757. [PubMed]
  22. Lim MM, Liu Y, Ryabinin AE, Bai Y, Wang Z, Young LJ. CRF-receptoren in de nucleus accumbens moduleren de voorkeur van de partner in veldmuizen. Horm Behav. 2007, 51: 508-515. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  23. Liu Y, Wang ZX. Nucleus accumbens oxytocine en dopamine werken samen om de vorming van paarlobbigen in vrouwelijke volken te reguleren. Neuroscience. 2003, 121: 537-544. [PubMed]
  24. Lonstein JS, De Vries GJ. Geslachtsverschillen in het ouderlijk gedrag van volwassen maagdelijke prairieheersmieren: onafhankelijkheid van gonadale hormonen en vasopressine. J Neuroendocrinol. 1999, 11: 441-449. [PubMed]
  25. Lonstein JS, De Vries GJ. Invloed van gonadale hormonen op de ontwikkeling van ouderlijk gedrag bij volwassen maagdelijke prairiewolmelen (Microtus ochrogaster) Gedrag Brain Res. 2000, 114: 79-87. [PubMed]
  26. Olazabal DE, Young LJ. Variabiliteit in "spontaan" gedrag van de moeder wordt in verband gebracht met angstachtig gedrag en verwantschap in naïeve juveniele en volwassen vrouwelijke weidewormen (Microtus ochrogaster) Dev Psychobiol. 2005, 47: 166-178. [PubMed]
  27. Olazabal DE, Young LJ. Soorten en individuele verschillen in juveniele vrouwelijke zorg voor allen zijn geassocieerd met oxytocine receptor dichtheid in het striatum en het laterale septum. Horm Behav. 2006a; 49: 681-687. [PubMed]
  28. Olazabal DE, Young LJ. Oxytocine-receptoren in de nucleus accumbens bevorderen "spontaan" gedrag van de moeder in adulte adulte volken. Neuroscience. 2006b; 141: 559-568. [PubMed]
  29. Paxinos G, Watson C. De hersenen van de rat in stereotaxische coördinaten. vierde editie Academic Press; San Diego, CA: 1998.
  30. Pitkow LJ, Sharer CA, Ren X, Insel TR, Terwilliger EF, Young LJ. Facilitatie van affiliatie en vorming van parenbindingen door overdracht van vasopressine-receptorgen in de ventrale voorhersenen van een monogame veldmuis. J Neurosci. 2001, 21: 7392-7396. [PubMed]
  31. Roberts RL, Zullo A, Gustafson EA, Carter CS. Behandelingen met perinatale steroïden veranderen het gedrag van alledaags en affiliatief gedrag bij wilde weiden. Horm Behav. 1996, 30: 576-582. [PubMed]
  32. Roberts RL, Williams JR, Wang AK, Carter CS. Coöperatieve veredeling en monogamie in veldmuizen: invloeden van de vader en geografische variatie. Anim Behav. 1998, 55: 1131-1140. [PubMed]
  33. Sansone GR, Gerdes CA, Steinman JL, Winslow JT, Ottenweller JE, Komisaruk BR, Insel TR. Vaginocervicale stimulatie maakt oxytocine vrij in het ruggenmerg bij ratten. Neuro-endocrinologie. 2002, 75: 306-315. [PubMed]
  34. Savaskan E, Ehrhardt R, Schulz A, Walter M, Schachinger H. Post-learning intranasale oxytocine moduleert het menselijk geheugen voor gezichtsidentiteit. Psychoneuroendocrinology. 2008, 33: 368-374. [PubMed]
  35. Smeltzer MD, Curtis JT, Aragona BJ, Wang Z. Dopamine, oxytocine en vasopressine-receptorbinding in de mediale prefrontale cortex van monogame en promiscueuze woelmuizen. Neurosci Lett. 2006, 394: 146-151. [PubMed]
  36. Wang Z, Young LJ. Ontogeny van oxytocine en vasopressine receptor binding in het laterale septum in prairie en bergweiden. Brain Res Dev Brain Res. 1997, 104: 191-195. [PubMed]
  37. Wang Z, Ferris CF, De Vries GJ. De rol van septische vasopressine-innervatie bij het gedrag van de vader bij prairiewolken (Microtus ochrogaster) Proc Natl Acad Sci US A. 1994; 91: 400-404. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  38. Williams JR, Catania KC, Carter CS. Ontwikkeling van partnervoorkeuren in vrouwelijke weidewormen (Microtus ochrogaster): de rol van sociale en seksuele ervaring. Horm Behav. 1992, 26: 339-349. [PubMed]
  39. Winslow JT, Hastings N, Carter CS, Harbaugh CR, Insel TR. Een rol voor centrale vasopressine bij pair bonding in monogame prairiewolmelen. Natuur. 1993, 365: 545-548. [PubMed]
  40. Wu S, Jia M, Ruan Y, Liu J, Guo Y, Shuang M, Gong X, Zhang Y, Yang X, Zhang D. Positieve associatie van het oxytocinereceptorgen (OXTR) met autisme in de Chinese Han-populatie. Biol Psychiatry. 2005, 58: 74-77. [PubMed]
  41. Young LJ. Frank A. Beach Award. Oxytocine en vasopressine receptoren en soort-typisch sociaal gedrag. Horm Behav. 1999, 36: 212-221. [PubMed]
  42. Young LJ, Wang Z. De neurobiologie van pair bonding. Nat Neurosci. 2004, 7: 1048-1054. [PubMed]
  43. Young LJ, Lim MM, Gingrich B, Insel TR. Cellulaire mechanismen van sociale hechting. Horm Behav. 2001, 40: 133-138. [PubMed]
  44. Young LJ, Huot B, Nilsen R, Wang Z, Insel TR. Soortverschillen in centrale oxytocinereceptorgenxpressie: vergelijkende analyse van promotersequenties. J Neuroendocrinol. 1996, 8: 777-783. [PubMed]
  45. Yrigollen CM, Han SS, Kochetkova A, Babitz T, Chang JT, Volkmar FR, Leckman JF, Grigorenko EL. Genen die het affiliatief gedrag controleren als kandidaat-genen voor autisme. Biol Psychiatry. 2008, 63: 911-916. [PMC gratis artikel] [PubMed]