Methamphetamine werkt op subpopulaties van neuronen die seksueel gedrag reguleren bij mannelijke ratten (2009)

Neuroscience. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Verstandige RA, Lehman MN, Coolen LM.

bron

Afdeling Anatomie en Celbiologie, Schulich School voor Geneeskunde en Tandheelkunde, Universiteit van Western Ontario, Londen, ON, Canada, N6A 5C1.

Abstract

Methamphetamine (Meth) is een zeer verslavende stimulans. Meth misbruik wordt vaak geassocieerd met de praktijk van seksueel risicogedrag en de verhoogde prevalentie van Human Immunodeficiency Virus en Meth gebruikers melden verhoogd seksueel verlangen, opwinding en seksueel genot. De biologische basis voor deze nexus van drugs en geslacht is onbekend. De huidige studie toont aan dat toediening van meth bij mannelijke ratten neuronen activeert in hersengebieden van het mesolimbische systeem die betrokken zijn bij de regulatie van seksueel gedrag. Specifiek, Meth en paring co-activeren cellen in de nucleus accumbens kern en schil, basolaterale amygdala en anterior cingulate cortex. Deze bevindingen illustreren dat drugsmisbruik, in tegenstelling tot het huidige geloof, dezelfde cellen kan activeren als een natuurlijke versterker, dat wil zeggen seksueel gedrag, en op zijn beurt het dwangmatig zoeken naar deze natuurlijke beloning kan beïnvloeden.

sleutelwoorden: nucleus accumbens, basolaterale amygdala, prefrontale cortex, middelenmisbruik, voortplanting, verslaving

Motivatie en beloning worden gereguleerd door het mesolimbische systeem, een onderling verbonden netwerk van de hersengebieden bestaande uit het ventrale tegmentale gebied (VTA) nucleus accumbens (NAc), basolaterale amygdala en mediale prefrontale cortex (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas en Volkow, 2005). Er is voldoende bewijs dat het mesolimbische systeem wordt geactiveerd als reactie op beide middelen van misbruik (Di Chiara en Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi et al., 1999) en natuurlijk belonen gedrag zoals seksueel gedrag (Fiorino et al., 1997, Balfour et al., 2004). Mannelijk seksueel gedrag, en in het bijzonder ejaculatie, is zeer lonend en versterkt in dierenmodellen (Pfaus et al., 2001). Mannelijke knaagdieren ontwikkelen een geconditioneerde plaatsvoorkeur (CPP) voor copulatie (Agmo en Berenfeld, 1990, Martinez en Paredes, 2001, Tenk, 2008) en voert operante taken uit om toegang te krijgen tot een seksueel ontvankelijke vrouw (Everitt et al., 1987, Everitt en Stacey, 1987). Drugsmisbruik levert ook lonende en versterkende resultaten op en dieren zullen leren zelfmiddelen toe te dienen van misbruik, waaronder opiaten, nicotine, alcohol en psychostimulanten (Wise, 1996, Pierce en Kumaresan, 2006, Feltenstein en Zie, 2008). Hoewel bekend is dat beide drugs van misbruik en seksueel gedrag mesolimbische hersengebieden activeren, is het momenteel onduidelijk of drugs van misbruik dezelfde neuronen beïnvloeden die seksueel gedrag bemiddelen.

Elektrofysiologische studies hebben aangetoond dat voedsel en cocaïne beide neuronen activeren in het NAc. De twee versterkers activeren echter niet dezelfde cellen binnen de NAc (Carelli et al., 2000, Carelli en Wondolowski, 2003). Bovendien veroorzaken de zelftoediening van voedsel en sucrose op lange termijn geen veranderingen in de elektrofysiologische eigenschappen die door cocaïne worden opgewekt (Chen et al., 2008). In tegenstelling hiermee suggereert een verzameling bewijsmateriaal dat mannelijk seksueel gedrag en drugsmisbruik inderdaad kunnen werken op dezelfde mesolimbische neuronen. Psychostimulantia en opioïden veranderen de expressie van seksueel gedrag bij mannelijke ratten (Mitchell en Stewart, 1990, Fiorino en Phillips, 1999a, Fiorino en Phillips, 1999b). Recente gegevens van ons laboratorium toonden aan dat seksuele ervaring de respons op psychostimulantia verandert, zoals blijkt uit een gesensibiliseerde locomotorische respons en gesensibiliseerde beloningsperceptie op d-amfetamine bij seksueel ervaren dieren (Pitchers et al., 2009). Een vergelijkbare respons werd eerder waargenomen bij herhaalde blootstelling aan amfetamine of andere drugsmisbruik (Lett, 1989, Shippenberg en Heidbreder, 1995, Shippenberg et al., 1996, Vanderschuren en Kalivas, 2000). Samen suggereren deze bevindingen dat seksueel gedrag en reacties op drugs van misbruik worden gemedieerd door dezelfde neuronen in het mesolimbische systeem. Daarom is het eerste doel van de huidige studie om neurale activering van het mesolimbische systeem te onderzoeken door seksueel gedrag en toediening van geneesmiddelen in hetzelfde dier. In het bijzonder testten we de hypothese dat het psychostimulant, methamphetamine (Meth), direct inwerkt op neuronen die normaal seksueel gedrag mediëren.

Meth is een van de meest misbruikte illegale drugs ter wereld (NIDA, 2006, Ellkashef et al., 2008) omHet is vaak in verband gebracht met veranderd seksueel gedrag. Interessant is dat meth-gebruikers een verhoogd seksueel verlangen en opwinding melden, evenals verhoogd seksueel genot (Semple et al., 2002, Schilder et al., 2005). Bovendien, Meth-misbruik wordt vaak geassocieerd met seksueel compulsief gedrag (Rawson et al., 2002). Gebruikers melden vaak dat ze tal van seksuele partners hebben en maken minder snel gebruik van bescherming dan andere drugsgebruikers (Somlai et al., 2003, Springer et al., 2007). Helaas zijn onderzoeken die wijzen op het gebruik van Meth als voorspeller van seksueel risicogedrag beperkt omdat ze steunen op onbevestigde zelfrapportages (Elifson et al., 2006). Daarom is een onderzoek naar de cellulaire basis van door Meth geïnduceerde veranderingen in seksueel gedrag in een diermodel vereist om deze complexe drugssekse-nexus te begrijpen.

Met het oog op het hierboven geschetste bewijs dat suggereert dat drugsmisbruik, en met name Meth, kunnen werken op neuronen die normaal betrokken zijn bij het bemiddelen van seksueel gedrag, was het doel van deze studie om neurale activering door seksueel gedrag en toediening van het psychostimulant Meth te onderzoeken. Deze studie implementeerde een neuroanatomische techniek, gebruikmakend van immunohistochemische visualisatie van de directe vroege genen Fos en gefosforyleerd Map Kinase (pERK) om gelijktijdige neurale activering door seksueel gedrag en Meth respectievelijk te detecteren. Fos wordt alleen tot expressie gebracht in de kern van cellen, met een maximaal expressieniveau 30-90 minuten na activering van het neuron. Er is voldoende bewijs dat seksuele activiteit Fos-expressie in de hersenen induceert (Pfaus en Heeb, 1997, Veening en Coolen, 1998), inclusief het mesocorticolimbische systeem (Robertson et al., 1991, Balfour et al., 2004). Er zijn ook aanwijzingen dat drugsmisbruik pERK-expressie induceren binnen het mesocorticolimbische systeem (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005). In tegenstelling tot de expressie van FOS is fosforylatie van ERK een zeer dynamisch proces en treedt het slechts enkele minuten na neuronale activering 5-20 op. De verschillende tijdelijke profielen van FOS en pERK maken hen tot een ideale reeks markers voor daaropvolgende neuronale activering door twee verschillende stimuli.

EXPERIMENTELE PROCEDURES

vakken

Volwassen mannelijke Sprague Dawley-ratten (210-225 g) verkregen van Charles River Laboratories (Montreal, QC, Canada) werden twee per kooi gehuisvest in standaard plexiglaskooien (thuiskooien). De dierenkamer werd gehandhaafd op een 12 / 12 h omgekeerde lichtcyclus (licht uit bij 10.00 h). Voedsel en water waren beschikbaar ad libitum. Alle testen werden uitgevoerd tijdens de eerste helft van de donkere fase onder zwak rode verlichting. Stimulusvrouwtjes die werden gebruikt voor seksueel gedrag werden bilateraal geovariectomiseerd onder diepe anesthesie (13 mg / kg ketamine en 87 mg / kg xylazine) en kregen een subcutaan implantaat met 5% estradiolbenzoaat (EB) en 95% cholesterol. Seksuele ontvankelijkheid werd geïnduceerd door subcutane (sc) toediening van 500 μg progesteron in 0.1 ml sesamolie 4 h voorafgaand aan testen. Alle procedures werden goedgekeurd door de Animal Care Committee van de University of Western Ontario en voldoen aan de richtlijnen die zijn opgesteld door de Canadian Council on Animal Care.

Experimentele ontwerpen

Experimenten 1 en 2: mannelijke ratten (n = 37) mochten paren met een receptieve vrouw tot één ejaculatie (E) of voor 30 min, die ooit het eerst voorkwam in schone testkooien (60 × 45 × 50 cm) gedurende vijf keer -weekly pre-test paring sessies, om seksuele ervaring op te doen. Tijdens de laatste twee sessies werden alle standaardparameters voor seksuele prestaties geregistreerd, waaronder: mount latentie (ML; tijd vanaf introductie van de vrouw tot de eerste mount), intromission latentie (IL; tijd vanaf introductie van de vrouw tot de eerste mount met vaginale penetratie), ejaculatie latentie (EL; tijd van de eerste intromissie tot ejaculatie), post ejaculatie-interval (PEI; tijd van ejaculatie tot eerste volgende intromissie), aantal mops (M) en aantal intromissies (IM) (Agmo, 1997). Alle mannen ontvingen 1 ml / kg dagelijkse injectie van 0.9% NaCl (zoutoplossing; sc) 3 opeenvolgende dagen voorafgaand aan de testdag, voor gewenning aan het hanteren en injecties. Een dag voor de testdag waren alle mannen alleenstaand. Bij ervaren mannen kan Fos worden geïnduceerd door geconditioneerde contextuele aanwijzingen die verband houden met eerdere seksuele ervaring (Balfour et al, 2004). Daarom werden alle paringen en controlemanipulaties tijdens de laatste testen uitgevoerd in de thuissalon (vermijding van voorspellende geconditioneerde aanwijzingen) om geconditioneerde cue-geïnduceerde activatie te voorkomen bij de niet-gemarageerde controlemannen. Mannetjes werden verdeeld in acht experimentele groepen die in geen enkele mate van seksuele prestatie verschilden tijdens de laatste twee paringssessies (gegevens niet getoond). Tijdens de laatste test mochten mannetjes in hun thuiskooi paren tot ze een ejaculatie (sekse) vertoonden of geen vrouwelijke partner ontvingen (geen seks). Alle gekoppelde mannetjes kregen 60 minuten na het begin van de paring geperfundeerd om analyse van paring-geïnduceerde Fos-expressie mogelijk te maken. Mannen ontvingen een injectie van 4 mg / kg Meth of 1 ml / kg zoutoplossing (sc) (n = 4 elk), hetzij 10 (experiment 1) of 15 (experiment 2) min voorafgaand aan perfusie, voor analyse van door geneesmiddelen geïnduceerde fosforylering van MAP-kinase. Dosering en tijd vóór perfusie waren gebaseerd op eerdere rapporten (Choe et al., 2002, Choe en Wang, 2002, Chen en Chen, 2004, Mizoguchi et al., 2004, Ishikawa et al., 2006). Tot de controlegroepen behoorden mannen die niet paren, maar die Meth 10 (n = 7) of 15 (n = 5) min voorafgaand aan het offer ontvingen, of zoutoplossinginjecties 10 (n = 5) of 15 (n = 4) min vóór de slachting. . Na het offer werden de hersenen verwerkt voor immunohistochemie.

Experiment 3: Omdat een hoge dosis Meth werd gebruikt in experiment 1 en 2, werd een aanvullend neuroanatomisch experiment uitgevoerd om te onderzoeken of seksueel gedrag en een lagere dosis Methindosis afhankelijke patronen van overlappende neurale activering induceren. Deze studie werd op dezelfde manier uitgevoerd als experimenten 1 en 2. Bij de laatste test ontvingen gepaarde en niet-gematchte groepen (n = 6 elk) 1 mg / kg Meth (sc) 15 min. Voorafgaand aan het offer.

Experiment 4: om te testen of neurale activatie veroorzaakt door seks en Meth specifiek is voor Meth, onderzocht dit experiment of vergelijkbare patronen van overlappende neurale activering konden worden gezien met het psychostimulerende d-amfetamine (Amph). Dit experiment werd op dezelfde manier uitgevoerd als experimenten 1 en 2. Bij de laatste test kregen mannen echter ofwel Amph (5 mg / kg) of zoutoplossing (1 mg / kg) (sc) 15 min voorafgaand aan opoffering toegediend (n = 5 elk). Behandel niet-gemate mannetjes die een zoutoplossing of Amph 15 minuten voorafgaand aan het offer kregen. Een overzicht van de experimentele groepen gebruikt in experimenten 1-4 is beschikbaar in Tabel 1.

Tabel 1       

Overzicht van experimentele groepen opgenomen in 1-4-experimenten.

Weefselvoorbereiding

Dieren werden geanesthetiseerd met pentobarbital (270 mg / kg; ip) en transcardiaal geperfundeerd met 5 ml zoutoplossing gevolgd door 500 ml 4% paraformaldehyde in 0.1 M fosfaatbuffer (PB). Hersenen werden verwijderd en post-gefixeerd voor 1 h bij kamertemperatuur in hetzelfde fixeermiddel, vervolgens ondergedompeld in 20% sucrose en 0.01% natriumazide in 0.1 M PB en bewaard bij 4 ° C. Coronale secties (35 μm) werden gesneden op een bevriezende microtoom (H400R, Micron, Duitsland), verzameld in vier parallelle reeksen in cryoprotectantoplossing (30% sucrose en 30% ethyleenglycol in 0.1 M PB) en bewaard bij 20 ° C tot verder verwerken.

immunohistochemie

Alle incubaties werden uitgevoerd bij kamertemperatuur onder voorzichtig schudden. Vrij zwevende coupes werden uitgebreid gewassen met 0.1 M fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) tussen incubaties. Secties werden geïncubeerd in 1% H2O2 voor 10 min., dan geblokkeerd in incubatieoplossing (PBS met 0.1% bovine serumalbumine en 0.4% Triton X-100) voor 1 h.

pERK / Fos

Weefsel werd overnacht geïncubeerd met een konijnen polyklonaal antilichaam tegen p42 en p44 kaartkinasen ERK1 en ERK2 (pERK; 1: 400 experiment 1 partij 19; 1: 4.000 experiment 2 en 3 partij 21; celsignalering Cat # 9101;), gevolgd door een 1 h incubaties met gebiotinyleerd ezel anti-konijn IgG (1: 500; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) en avidine-mierikswortelperoxidase-complex (ABC Elite; 1: 1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Vervolgens werd het weefsel gedurende 10 min geïncubeerd met gebiotinyleerd tyramide (BT; 1: 250 in PBS + 0.003% H2O2; Tyramid amplificatieset, NEN Life Sciences, Boston, MA) en voor 30 min met Alexa 488 geconjugeerd strepavidine (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Vervolgens werd het weefsel overnacht geïncubeerd met een polyklonaal konijnantilichaam tegen c-Fos (1: 500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), gevolgd door een 30 minincubatie met geiten-anti-konijn Alexa 555 (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Na kleuring werden de secties grondig gewassen in 0.1 M PB, gemonteerd op glasplaatjes met 0.3% gelatine in ddH20 en bedekt met een waterig montagemedium (Gelvatol) met anti-fadingmiddel 1,4-diazabicyclo (2,2) octaan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistochemische controles omvatten weglating van één of beide primaire antilichamen, resulterende in de afwezigheid van labeling in de geschikte golflengte.

Data-analyse

Seksueel gedrag

Voor alle vier experimenten werden standaardparameters voor seksuele prestaties geregistreerd zoals hierboven beschreven en geanalyseerd met behulp van variantieanalyse (ANOVA). Gegevensanalyse van seksueel gedrag tijdens de laatste testdag onthulde geen significante verschillen tussen groepen in een van de parameters van seksuele prestaties.

pERK / Fos Celtellingen

Enkele en dubbele gelabelde cellen voor Fos en pERK werden geteld in de caudale niveaus van NAc core en shell subregions, basolaterale amygdala (BLA), posterodorsale mediale amygdala (MEApd), centrale amygdala (CeA), mediale preoptische nucleus (MPN), posteromediale en posterolaterale bedkern van de stria-terminale (BNSTPM en BNSTpl) en de voorste afgeleide zone (ACA), prelimbische (PL) en infralimbische (IL) subregio's van de mPFC. Beelden werden vastgelegd met behulp van een gekoelde CCD-camera (Microfire, Optronics) bevestigd aan een Leica-microscoop (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Duitsland) en Neurolucida-software (MicroBrightfield Inc) met vaste camera-instellingen voor alle onderwerpen (met 10x-doelstellingen). Met behulp van neurolucida-software werden analysegebieden gedefinieerd op basis van oriëntatiepunten (Swanson, 1998) uniek voor elke hersenregio (zie Figuur 1). Standaard analysegebieden werden gebruikt in alle gebieden behalve NAc core en shell. In de laatste gebieden was de expressie van pERK en Fos niet homogeen en verscheen het in patch-achtige patronen. Daarom werden de hele kern en schaal geschetst op basis van oriëntatiepunten (lateraal ventrikel, anterieure commisure en eilanden van Calleja). De analysegebieden verschilden niet tussen experimentele groepen en waren 1.3 mm2 in de kern en shell van de NAc. Standaard analysegebieden voor de overige gebieden waren: 1.6 mm2 in de BLA, 2.5 en 2.25 mm2 in respectievelijk de MEApd en de CeA, 1.0 mm2 in de MPN, 1.25 mm2 in de BNST- en mPFC-subregio's en 3.15 mm2 in de VTA. Twee secties werden bilateraal geteld voor elk hersengebied per dier, en het aantal enkele en duaal gemerkte cellen voor pERK en Fos alsook de percentages van pERK-cellen die de Fos-marker tot expressie brachten, werden berekend. Voor experimenten 1, 2 en 4 werden groepsgemiddelden vergeleken met behulp van tweezijdige ANOVA (factoren: paring en geneesmiddel) en Fisher's LSD voor post hoc vergelijkingen op een significantieniveau van 0.05. Voor experiment 3 werden groepsgemiddelden vergeleken met behulp van ongepaarde t-testen op een significantieniveau van 0.05.

Figuur 1       

Schematische tekeningen en afbeeldingen die hersengebieden van analyse illustreren. De aangegeven analysegebieden waren gebaseerd op oriëntatiepunten die uniek waren voor elk hersengebied, verschilden niet tussen experimentele groepen en waren 1.25 mm2 in mPFC subregio's (a), 1.3 mm2 in de ...

Afbeeldingen

Digitale afbeeldingen voor Figuur 3 werden vastgelegd met behulp van CCD-camera (DFC 340FX, Leica) bevestigd aan een Leica-microscoop (DM500B) en geïmporteerd in Adobe Photoshop 9.0-software (Adobe Systems, San Jose, CA). Afbeeldingen werden op geen enkele manier gewijzigd, behalve voor het aanpassen van de helderheid.

Figuur 3       

Representatieve beelden van NAc-coupes die immunologisch gekleurd zijn voor Fos (rood; a, d, g, j) en pERK (groen; b, e, h, k) van dieren van elke experimentele groep: Nee Sex + Sal (a, b, c) , Sex + Sal (d, e, f), No Sex + Meth (g, h, i) en Sex + Meth (j, k, l). Rechter panelen zijn ...

RESULTATEN

Neurale activering van het limbische systeem door seksueel gedrag en meth-toediening

Experiment 1: Analyse van enkele en tweevoudige gelabelde cellen voor door paring geïnduceerde door Fos en Meth geïnduceerde pERK bij mannetjes die Meth 10 minuten voorafgaand aan de opoffering ontvingen onthulden door paring geïnduceerde Fos in de MPN, BNSTpm, NAc-kern en shell, BLA, VTA, en alle subregio's van mPFC, in overeenstemming met eerdere studies die door paring geïnduceerde expressie van Fos in deze gebieden aantonen (Baum en Everitt, 1992, Pfaus en Heeb, 1997, Veening en Coolen, 1998, Hull et al., 1999). Meth toediening 10 minuten voorafgaand aan door opoffering geïnduceerd pERK in NAc core en shell, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl en regio's van mPFC, consistent met activeringspatronen geïnduceerd door andere psychostimulantia (Valjent et al., 2000, Valjent et al., 2004, Valjent et al., 2005).

Bovendien werden drie patronen van co-expressie van neurale activering door seksueel gedrag en Meth waargenomen: ten eerste werden hersengebieden geïdentificeerd waar seks en medicijnen niet-overlappende neurale populaties activeerden (Tabel 2). Specifiek, in de CeA, MEApd, BNSTpl en mPFC, significante verhogingen van zowel door geneesmiddelen geïnduceerde pERK (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001) als seksgeïnduceerde Fos (F (1,16, 16.53) = 158.83-0.001; p <1,16) waargenomen. In deze regio's waren er echter geen significante toenames in dubbel gelabelde neuronen bij gepaarde met Meth behandelde mannetjes. De enige uitzondering was de MEApd, waar een effect van het paren op het aantal dubbel gelabelde cellen werd gevonden (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Er was echter geen algemeen effect van medicamenteuze behandeling en dubbele labeling in met Meth behandelde groepen was niet significant hoger dan in met zoutoplossing behandelde groepen, en werd dus niet veroorzaakt door het medicijn (Tabel 2). Ten tweede werden hersengebieden geïdentificeerd waar neurale activering alleen werd veroorzaakt door paring (Tabel 3). Specifiek werden de MPN, BNSTpm en VTA alleen geactiveerd door paring en bevatten significante toenamen in door paring geïnduceerde Fos (F (1,16) = 14.99-248.99; p ≤ 0.001), maar geen door meth geïnduceerde pERK.

Tabel 2       

Overzicht van paring-geïnduceerde door FOS en meth geïnduceerde pERK-expressie in hersengebieden waar seks en medicijnen niet-overlappende neurale populaties activeren.
Tabel 3       

Overzicht van paring-geïnduceerde FOS en Meth-geïnduceerde pERK-expressie in hersengebieden waar neurale activering alleen werd geïnduceerd door paring.

Ten slotte werden hersengebieden gevonden waar seks en medicijnen overlappende populaties van neuronen activeerden (Figuur 2 en and3) .3). In de NAc-kern en schaal, BLA en ACA waren er algemene effecten van paring (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) en medicamenteuze behandeling (F (1,16) = 6.39- 52.68; p = 0.022- <0.001), evenals een interactie tussen deze twee factoren (F (1,16) = 5.082-47.27; p = 0.04- <0.001; geen significante interactie in ACA) op het aantal cellen dat beide tot expressie brengt door paring geïnduceerde Fos en Meth-geïnduceerde pERK. Post-hoc analyse onthulde dat het aantal dubbelgelabelde neuronen significant hoger was bij gepaarde Meth-geïnjecteerde mannen vergeleken met niet-gedekte Meth-behandelde (p = 0.027- <0.001), of gepaarde zoutoplossing-behandelde (p = 0.001- <0.001) mannen (Figuur 2 en and3) .3). Wanneer gegevens werden uitgedrukt als de percentages van door geneesmiddelen geactiveerde neuronen, 39.2 ± 5.3% in de NAc-kern, 39.2 ± 5.8% in de NAc-schaal, 40.9 ± 6.3% in de BLA en 50.0 ± 5.3% van ACA-neuronen werden geactiveerd door zowel paring als Meth.

Figuur 2       

Seksegeïnduceerde FOS en Meth-geïnduceerde pERK-expressie in NAc-, BLA- en ACA-neuronen 10 min na toediening van 4 mg / kg Meth. Gemiddelde getallen ± sem van Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) en dubbele (c, f, i, l) gelabelde cellen in de NAc-kern (a, ...

Een onverwachte observatie was dat seksueel gedrag door meth geïnduceerd pERK trof. Hoewel Meth significant pERK-niveaus induceerde in zowel gekoppelde als niet-gemedieerde Meth-geïnjecteerde groepen, was in de NAc, BLA en ACA de pERK-labeling significant lager in gekoppelde Meth-geïnjecteerde mannen in vergelijking met niet-gemedieerde Meth-geïnjecteerde mannen (Figuur 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Deze vinding kan de hypothese ondersteunen dat seks en medicijnen op dezelfde neuronen werken, maar het kan ook een aanwijzing zijn voor paring-geïnduceerde veranderingen in geneesmiddelopname of metabolisme die op hun beurt veranderde neurale reacties op Meth veroorzaken. Om te onderzoeken of seksueel gedrag een ander temporeel patroon van door geneesmiddelen geïnduceerde activering veroorzaakt, werden coupes van het NAc, BLA en ACA gekleurd voor mannen die op een later tijdstip (15 min.) Na toediening van het geneesmiddel werden geofferd (experiment 2).

Experiment 2: Analyse van enkele en tweevoudige gelabelde cellen bevestigden de hierboven beschreven bevindingen dat seksueel gedrag en daaropvolgende blootstelling aan Meth 15 minuten voorafgaand aan het opofferen resulteerden in significante verhogingen van Fos- en pERK-immunolabeling in de NAc-kern en shell, BLA en ACA. Bovendien werd in deze gebieden opnieuw significante co-expressie van door paring geïnduceerde door FOS en meth geïnduceerde pERK gevonden (Figuur 4; paringseffect: F (1,12) = 15.93–76.62; p = 0.002- <0.001; medicijneffect: F (1,12) = 14.11-54.41; p = 0.003- <0.001). Het aantal dubbelgelabelde neuronen bij gepaarde met Meth geïnjecteerde mannen was significant hoger in vergelijking met niet-gedekte met Meth behandelde (p <0.001) of gepaarde met zoutoplossing behandelde (p <0.001) mannen. Wanneer gegevens werden uitgedrukt als de percentages door geneesmiddel geactiveerde neuronen, 47.2 ± 5.4% (NAc-kern), 42.7 ± 7.6% (NAc-schaal), 36.7 ± 3.7% (BLA) en 59.5 ± 5.1% (ACA) geactiveerde neuronen door paring werden ook geactiveerd door Meth. Bovendien verschilde door geneesmiddel geïnduceerde pERK niet tussen gedekte en niet-gedekte dieren (Figuur 4b, e, h, k), in alle gebieden behalve de ACA (p <0.001). Deze gegevens geven aan dat seksueel gedrag inderdaad een verandering van het temporele patroon van pERK-inductie door Meth veroorzaakt.

Figuur 4       

Seksegeïnduceerde FOS en Meth-geïnduceerde pERK-expressie in NAc-, BLA- en ACA-neuronen 15 min na toediening van 4 mg / kg Meth. Gemiddelde getallen ± sem van Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) en dubbele (c, f, i, l) gelabelde cellen in de NAc-kern (a, ...

Neurale activering na seksueel gedrag en 1 mg / kg Meth

Tot dusverre hebben resultaten aangetoond dat seksueel gedrag en 4 mg / kg met meth geactiveerde overlappende populaties van neuronen in de NAc-kern en -schaal, BLA en ACA. To onderzoek naar de invloed van geneesmiddelendosering op deze overlap in activering, patronen van neurale activering werden ook bestudeerd met behulp van een lagere dosis Meth. De NAc-kern en -schaal, BLA en ACA werden geanalyseerd op activatie geïnduceerd door sex en Meth. Inderdaad, seksueel gedrag en daaropvolgende blootstelling aan Meth resulteerde in significante verhogingen van Fos en pERK immunolabeling in de NAc core en shell subregio's, de BLA, evenals neuronen in het ACA-gebied van de mPFC (Figuur 5). Interessant is dat de lagere dosis Meth resulteerde in vergelijkbare aantallen pERK-gelabelde neuronen zoals geïnduceerd door 4 mg / kg Meth in de vier geanalyseerde hersengebieden. Belangrijker is dat de NAc-kern en shell, BLA en ACA significante toenamen in het aantal tweevoudig gelabelde cellen vertoonden (Figuur 5c, f, i, l) vergeleken met ongedekte mannen met meth-injectie (p = 0.003- <0.001). Wanneer gegevens werden uitgedrukt als de percentages geneesmiddel-geactiveerde neuronen, 21.1 ± 0.9% en 20.4 ± 1.8% in respectievelijk de NAc-kern en schaal, 41.9 ± 3.9% in de BLA en 49.8 ± 0.8% van ACA-neuronen werden geactiveerd door seks en Meth.

Figuur 5       

Seksegeïnduceerde FOS en Meth-geïnduceerde pERK-expressie in NAc-, BLA- en ACA-neuronen 15 min na toediening van 1 mg / kg Meth. Gemiddelde getallen ± sem van Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) en dubbele (c, f, i, l) gelabelde cellen in de NAc-kern (a, ...

Neurale activering na seksueel gedrag en toediening van d-amfetamine

Om te testen of de bovenstaande resultaten specifiek waren voor Meth, werd een aanvullend experiment uitgevoerd om paring- en amf-geïnduceerde neurale activering te onderzoeken. Analyse van enkele en tweevoudige gelabelde cellen voor pERK en Fos toonde aan dat seksueel gedrag en daaropvolgende blootstelling aan Amph resulteerde in significante verhogingen van FOS en pERK immunolabeling in de NAc core en shell en BLA (Figuur 6; paringseffect: F (1,15) = 7.38-69.71; p = 0.016- <0.001; medicijneffect: F (1,15) = 4.70–46.01; p = 0.047- <0.001). Bovendien was het aantal dubbelgelabelde neuronen significant hoger bij gepaarde Amph-behandelde in vergelijking met ongedekte Amph-behandelde (p = 0.009- <0.001), of gepaarde zoutoplossing-behandelde (p = 0.015- <0.001) mannen (Figuur 6c, f, i). Wanneer gegevens werden uitgedrukt als de percentages van door geneesmiddelen geactiveerde neuronen, respectievelijk 25.7 ± 2.8% en 18.0 ± 3.2% in de NAc-kern en shell, en 31.4 ± 2.0% van BLA-neuronen werden geactiveerd door zowel paring als Amph. Het ACA-gebied van de mPFC vertoonde significante niveaus van paring-geïnduceerde FOS (Figuur 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). In tegenstelling tot Meth resulteerde Amph echter niet in significante verhogingen van door geneesmiddelen geïnduceerde pERK-niveaus in de ACA (Figuur 6k) of aantallen dubbel gelabelde neuronen in de ACA (Figuur 6l) vergeleken met zowel gematchte als niet-opgegekeerde met zoutoplossing geïnjecteerde mannen.

Figuur 6       

Seksegeïnduceerde FOS en Amph-geïnduceerde pERK-expressie in NAc-, BLA- en ACA-neuronen 15 min na toediening van 5 mg / kg Amph. Gemiddelde getallen ± sem van Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) en dubbele (c, f, i, l) gelabelde cellen in de NAc-kern (a, ...

DISCUSSIE

De huidige studie toont op cellulair niveau een overlapping aan tussen neurale activatie door het natuurlijke versterkende seksuele gedrag en het psychostimulerende Meth. Daarom laten deze gegevens zien dat geneesmiddelen niet alleen op dezelfde hersenregio's werken die natuurlijke beloningen reguleren, maar in feite activeren geneesmiddelen dezelfde cellen die betrokken zijn bij de regulatie van natuurlijke beloning. Specifiek werd hier aangetoond dat seksueel gedrag en Meth een populatie van neuronen medeactiveerden in de NAc-kern en shell-, BLA- en ACA-regio van de mPFC, waarbij potentiële plaatsen werden geïdentificeerd waar Meth seksueel gedrag zou kunnen beïnvloeden.

De huidige bevinding dat seksueel gedrag en toediening van Meth overlappende populaties van neuronen activeren in de NAc, BLA en ACA is in tegenstelling tot bevindingen uit andere onderzoeken die aantonen dat verschillende populaties van NAc-neuronen coderen voor medicatie en natuurlijke beloning.

Specifiek, elektrofysiologische studies die neurale activering vergelijken tijdens zelftoediening van natuurlijke beloningen (voedsel en water) en intraveneuze cocaïne hebben aangetoond dat cocaïne zelftoediening een differentiële, niet-overlappende populatie van neuronen activeerde die in het algemeen niet reageerde tijdens operant die reageerde op water en voedselversterking (92%). Alleen 8% van accumale neuronen vertoonde activering door zowel cocaïne als natuurlijke beloning (Carelli et al., 2000).

Daarentegen vertoonde een meerderheid (65%) van de cel in het NAc activering door verschillende natuurlijke beloningen (voedsel en water), zelfs als één versterker beter verteerbaar was (sucrose) (Roop et al., 2002).

Verschillende factoren hebben mogelijk bijgedragen aan de discrepantie met de huidige resultaten. Eerst werden verschillende technische benaderingen gebruikt om neurale activiteit te onderzoeken. De huidige studie maakte gebruik van een neuroanatomische methode voor de detectie van gelijktijdige neurale activering door twee verschillende stimuli met behulp van duale fluorescencerende immunocytochemistie voor Fos en pERK, waardoor onderzoek van enkelvoudige celactivatie over grote overspanningen van hersengebieden mogelijk was. In tegenstelling hiermee gebruikten de studies van Carelli en collega's elektrofysiologische opnames beperkt tot het NAc van gedragende dieren om te onderzoeken of zelftoediening van drugs van misbruik hetzelfde neurale circuit activeert dat door natuurlijke beloningen wordt gebruikt.

Ten tweede, de huidige studie onderzocht een andere natuurlijke beloning dat wil zeggen seksueel gedrag in vergelijking met eerdere studies, die voedsel en water gebruikten in beperkte ratten (Carelli, 2000). Voedsel en water hebben misschien een lagere waarde dan paring. Seksueel gedrag is zeer de moeite waard en ratten vormen gemakkelijk CPP voor copulatie (Agmo en Berenfeld, 1990, Martinez en Paredes, 2001, Tenk, 2008). Hoewel dieet-beperkte ratten CPP vormen voor water (Agmo et al., 1993, Perks en Clifton, 1997) en eten (Perks en Clifton, 1997), dde onbeperkte ratten consumeren bij voorkeur en vormen CPP voor meer smakelijk voedsel (Jarosz et al., 2006, Jarosz et al., 2007).

Ten derde omvatten onze studies verschillende drugsmisbruiken in vergelijking met eerdere onderzoeken, waarbij methamfetamine en amfetamine werden gebruikt in plaats van cocaïne. De huidige resultaten tonen aan dat specifiek Meth, en in mindere mate amfetamine, resulteerde in activering van neuronen die ook door seksueel gedrag werden geactiveerd. Drugservaring heeft mogelijk ook een rol gespeeld in onze bevindingen. In de huidige onderzoeken werden dieren gebruikt die seksueel werden ervaren, maar die medicijn naïef waren. Daarentegen gebruikten de elektrofysiologische studies van Carelli en medewerkers "goed getrainde" dieren die herhaaldelijk werden blootgesteld aan cocaïne.

Daarom is het mogelijk dat de meth-geïnduceerde activering van neuronen geactiveerd door seksueel gedrag is veranderd in drugs ervaren ratten. Voorlopige onderzoeken uit ons laboratorium suggereren echter dat het onwaarschijnlijk is dat de ervaring met drugs een belangrijke factor is, zoals seksueel gedrag en Meth-behandeling bij mannen die chronisch zijn behandeld met met Meth gecoopte vergelijkbare percentages van door geneesmiddelen geactiveerde neuronen, zoals gerapporteerd in het huidige onderzoek (20.3 ± 2.5% in NAc-kern en 27.8 ± 1.3% in NAc-schaal; Frohmader en Coolen, niet-gepubliceerde waarnemingen).

Ten slotte onderzocht de huidige studie de "directe" werking van geneesmiddelen met behulp van passieve toediening. Daarom onthult de huidige analyse geen informatie over neurale circuits die betrokken zijn bij het zoeken naar medicijnen of aanwijzingen die verband houden met geneesmiddelbeloning, maar onthult eerder neurale activiteit veroorzaakt door de farmacologische werking van het medicijn. In de vorige elektrofysiologische studies is NAc neurale activiteit die optreedt binnen seconden na versterkte reacties niet het gevolg van de farmacologische werking van cocaïne, maar is sterk afhankelijk van associatieve factoren binnen het paradigma van zelftoediening (Carelli, 2000, Carelli, 2002). In het bijzonder wordt de neurale activiteit van NAc beïnvloed door responsonafhankelijke presentaties van stimuli die zijn geassocieerd met intraveneuze cocaïnedistributie evenals door instrumentele contingenties (dat wil zeggen, hendelpersen) die inherent zijn aan dit gedragsparadigma (Carelli, 2000, Carelli en Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli en Wightman, 2004). Samenvattend kunnen onze bevindingen van co-activering door natuurlijke en medicinale beloning specifiek zijn voor activering door seksueel gedrag en passief toegediende Meth en Amph.

Meth en geslacht-geactiveerde overlappende populaties van neuronen in de NAc-kern en de schaal op een dosisafhankelijke manier. De co-geactiveerde neuronen in het NAc kunnen mogelijke effecten van Meth op de motivatie en belonende eigenschappen van seksueel gedrag bemiddelen omdat letsels van het NAc seksueel gedrag verstoren (Liu et al., 1998, Kippin et al., 2004). Bovendien zijn deze neuronen mogelijk een locus voor dosisafhankelijke effecten op de paring, omdat de lagere dosis Meth (1 mg / kg) het aantal dubbel gelabelde cellen met 50% verminderde in vergelijking met de hogere dosis Meth (4 mg / kg). Hoewel deze studie het chemische fenotype van co-geactiveerde neuronen niet identificeert, hebben eerdere studies aangetoond dat geneesmiddel-geïnduceerde pERK- en FOS-expressie in het NAc afhankelijk is van zowel dopamine- (DA) als glutamaatreceptoren (Valjent et al., 2000, Ferguson et al., 2003, Valjent et al., 2005, Sun et al., 2008). Hoewel het niet duidelijk is of paring-geïnduceerde neurale activering in het NAc afhankelijk is van deze receptoren, is dit aangetoond in andere hersenregio's, vooral in het mediale preoptische gebied (Lumley and Hull, 1999, Dominguez et al., 2007). Thus, Meth kan werken op neuronen die ook geactiveerd zijn tijdens seksueel gedrag via activering van dopamine- en glutamaatreceptoren. De rol van NAc glutamaat in seksueel gedrag is momenteel onduidelijk, maar het is algemeen bekend dat DA een cruciale rol speelt in de motivatie voor seksueel gedrag (Hull et al., 2002, Hull et al., 2004, Pfaus, 2009). Microdialyse-onderzoeken meldden verhogingen van de NAc DA-efflux tijdens de appetijt- en consumptiefasen van mannelijk seksueel gedrag (Fiorino en Phillips, 1999a, Lorrain et al., 1999) en mesolimbische DA-efflux is gecorreleerd aan het vergemakkelijken van de initiatie en handhaving van seksueel gedrag van ratten (Pfaus en Everitt, 1995). Verder tonen DA-manipulatiestudies DA-antagonisten in het NAc seksueel gedrag, terwijl agonisten de initiatie van seksueel gedrag vergemakkelijkenr (Everitt et al., 1989, Pfaus en Phillips, 1989). Zo kan Meth de motivatie voor seksueel gedrag beïnvloeden via activering van DA-receptoren.

In tegenstelling tot de NAc bleef het aantal tweevoudig gelabelde cellen in de BLA en ACA, ongeacht de dosis Meth, relatief onveranderd. De BLA is van cruciaal belang voor discreet associatief leren en is sterk betrokken bij geconditioneerde versterking en beloningsevaluatie tijdens instrumentele respons (Everitt et al., 1999, Cardinal et al., 2002, Zie 2002). BLA-gelaedeerde ratten vertonen een verminderde hendellager voor geconditioneerde stimuli gecombineerd met voedsel (Everitt et al., 1989) of seksuele versterking (Everitt et al., 1989, Everitt, 1990). Daarentegen heeft deze manipulatie geen invloed op de consumptieve fase van voeding en seksueel gedrag (Cardinal et al., 2002). De BLA speelt ook een belangrijke rol in het geheugen van geconditioneerde stimuli die samenhangen met medicijnstimuli (Grace en Rosenkranz, 2002, Laviolette en Grace, 2006). Laesies of farmacologische inactivaties van de BLA blokkeren de acquisitie (Whitelaw et al., 1996) en expressie (Grimm en Zie, 2000) geconditioneerd caged herstel van cocaïne, zonder het proces van drugstoediening te beïnvloeden. Voorts Amph rechtstreeks geïnfundeerd in de BLA resulteert in een versterkte medicatieherstel in aanwezigheid van de geconditioneerde aanwijzingen (Zie et al., 2003). Daarom is het mogelijk dat DA-transmissie met psychostimulant versterkt in de BLA resulteert in versterkte emotionele opvallendheid en zoeken (Ledford et al., 2003) van seksuele beloning, aldus bijdragend aan de verbeterde seksuele drift en verlangen gemeld door Meth misbruikers (Semple et al., 2002, Groen en Halkitis, 2006).

In de ACA was neurale activering van geslachtsgeactiveerde neuronen dosisonafhankelijk en specifiek voor Meth, omdat het niet werd waargenomen met Amph. Hoewel Meth en Amph vergelijkbare structurele en farmacologische eigenschappen hebben, is Meth een krachtiger psychostimulant dan Amph met langer durende effecten (NIDA, 2006). Studies door Goodwin et al. toonden aan dat Meth een grotere DA-efflux genereert en remt de klaring van lokaal toegepast DA effectiever in de NAc van de rat dan Amph. Deze eigenschappen zouden kunnen bijdragen aan de verslavende eigenschappen van Meth in vergelijking met Amph (Goodwin et al., 2009) en misschien de verschillen in neurale activering die werden waargenomen tussen de twee geneesmiddelen. Het is echter niet duidelijk of de verschillende resultatenpatronen te wijten zijn aan verschillen in werkzaamheid tussen de geneesmiddelen of potentieproblemen die verband houden met de gebruikte doses en nader onderzoek is vereist.

Co-activering door Meth en geslacht werd niet waargenomen in andere subregio's van de mPFC (IL en PL). Bij de rat is de ACA uitgebreid bestudeerd met behulp van appetijtelijke taken, ter ondersteuning van een rol in stimulusversterkende associaties (Everitt et al., 1999, Zie 2002, Cardinal et al., 2003). Er is voldoende bewijs dat de mPFC betrokken is bij het hunkeren naar drugs en hervallen drugsgebruik en drugsgebruik bij zowel mensen als ratten (Grant et al., 1996, Childress et al., 1999, Capriles et al., 2003, McLaughlin en Zie, 2003, Shaham et al., 2003, Kalivas en Volkow, 2005). IkIn lijn hiermee is voorgesteld dat mPFC disfunctioneren veroorzaakt door herhaalde blootstelling aan misbruikt drugs verantwoordelijk kan zijn voor verminderde impulscontrole en verhoogd medicijngericht gedrag zoals waargenomen bij veel verslaafden (Jentsch en Taylor, 1999). Recente gegevens van ons laboratorium hebben aangetoond dat mPFC-laesies resulteren in voortgezet zoeken naar seksueel gedrag wanneer dit werd geassocieerd met een aversieve stimulus (Davis et al., 2003). Hoewel deze studie de ACA niet heeft onderzocht, ondersteunt het de hypothese dat de mPFC (en de ACA specifiek) de effecten van Meth op een verlies van remmende controle over seksueel gedrag medieert, zoals gemeld door Meth misbruikers (Salo et al., 2007).

Samenvattend vormen deze studies samen een kritische eerste stap naar een beter begrip van de manier waarop misbruikende middelen werken op neurale paden die normaal gesproken natuurlijke beloningen bemiddelen. Bovendien illustreren deze bevindingen dat in tegenstelling tot de huidige overtuiging dat drugs van misbruik niet dezelfde cellen in het mesolimbische systeem als natuurlijke beloning activeren, Meth, en in mindere mate Amph, dezelfde cellen activeren als seksueel gedrag. Deze co-geactiveerde neurale populaties kunnen op hun beurt het zoeken naar natuurlijke beloningen na blootstelling aan drugs beïnvloeden. Ten slotte kunnen de resultaten van deze studie aanzienlijk bijdragen aan ons begrip van de basis van verslaving in het algemeen. Vergelijkingen van de overeenkomsten en verschillen, evenals veranderingen in neurale activatie van het mesolimbische systeem opgewekt door seksueel gedrag ten opzichte van drugs van misbruik kunnen leiden tot een beter begrip van verslavingsmisbruik en daarmee samenhangende veranderingen in natuurlijke beloning.

Dankwoord

Dit onderzoek werd ondersteund door subsidies van de National Institutes of Health R01 DA014591 en de Canadese instituten voor gezondheidsonderzoek RN 014705 aan LMC.

AFKORTINGEN

  • ABC
  • avidine-biotine-mierikswortelperoxidase-complex
  • ACA
  • anterieure cingulate gebied
  • Amph
  • d-amfetamine
  • BLA
  • basolaterale amygdala
  • BNSTpl
  • posterolaterale bedkern van de stria-terminal
  • BNSTpm
  • posteromediale bedkern van de stria-terminal
  • BT
  • gebiotinyleerd tyramide
  • Cea
  • centale amygdala
  • CPP
  • geconditioneerde plaats voorkeur
  • E
  • ejaculatie
  • EL
  • ejaculatie latency
  • IF
  • infralimbic gebied
  • IL
  • introissie latentie
  • IM
  • intromissie
  • M
  • monteren
  • MAP Kinase
  • door mitogeen geactiveerd proteïnekinase
  • MEApd
  • posterodorsale mediale amygdala
  • Meth
  • methamfetamine
  • ML
  • mount latency
  • mPFC
  • mediale prefrontale cortex
  • MPN
  • mediale preoptische kern
  • NAc
  • kern Accumbens
  • PB
  • fosfaatbuffer
  • PBS
  • fosfaat-gebufferde zoutoplossing
  • PEI
  • na ejaculatie interval
  • pERK
  • gefosforyleerde MAP-kinase
  • PL
  • prelimbic gebied
  • VTA
  • ventrale tegmental gebied

voetnoten

Disclaimer uitgever: Dit is een PDF-bestand van een onbewerkt manuscript dat is geaccepteerd voor publicatie. Als service aan onze klanten bieden wij deze vroege versie van het manuscript. Het manuscript zal een copy-editing ondergaan, een typografie en een review van het resulterende bewijs voordat het in zijn definitieve citeervorm wordt gepubliceerd. Houd er rekening mee dat tijdens het productieproces fouten kunnen worden ontdekt die van invloed kunnen zijn op de inhoud en alle wettelijke disclaimers die van toepassing zijn op het tijdschrift.

Referenties

  1. Agmo A. Mannelijk seksueel gedrag van ratten. Brain Res Brain Res Protoc. 1997, 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Versterkende eigenschappen van ejaculatie bij de mannelijke rat: rol van opioïden en dopamine. Gedrag Neurosci. 1990, 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Beloning en versterking door drinkwater: rol van opioïden en dopaminereceptorsubtypen. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksueel gedrag en seksgerelateerde omgevingsfactoren activeren het mesolimbische systeem bij mannelijke ratten. Neuropsychopharmacology. 2004, 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Verhoogde expressie van c-fos in het mediaal-preoptische gebied na paring in mannelijke ratten: rol van afferente inputs van het mediale amygdala en centrale centrale tegmentale veld. Neuroscience. 1992, 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Een rol voor de prefrontale cortex bij door stress en cocaïne geïnduceerd herstel van het zoeken naar cocaïne bij ratten. Psychopharmacology (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Kardinaal RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Emotie en motivatie: de rol van de amygdala, het ventrale striatum en de prefrontale cortex. Neuroscience & Biobehavioral beoordelingen. 2002; 26: 321-352. [PubMed]
  8. Kardinaal RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. De rol van de cortex anterieure cingulate in de controle over gedrag door Pavlovian geconditioneerde stimuli bij ratten. Gedrags-neurowetenschap. 2003, 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Activering van accumbenscelafbranden door stimuli geassocieerd met cocaïneafgifte tijdens zelftoediening. Synapse. 2000, 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleus accumbens celvuren tijdens doelgericht gedrag voor cocaïne versus 'natuurlijke' versterking. Fysiologie en gedrag. 2002; 76: 379-387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Selectieve activering van accumbens neuronen door cocaïne-geassocieerde stimuli tijdens een water / cocaïne meervoudig schema. Hersenenonderzoek. 2001, 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Bewijs dat afzonderlijke neurale circuits in de nucleus accumbens coderen voor cocaïne versus een "natuurlijke" (water en voedsel) beloning. J Neurosci. 2000, 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Functionele microcircuits in de accumbens onderliggende drugsverslaving: inzichten van real-time signalering tijdens gedrag. Huidige mening in de neurobiologie. 2004, 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Selectieve codering van cocaïne versus natuurlijke beloningen door nucleus accumbens neuronen is niet gerelateerd aan blootstelling aan chronische drugs. J Neurosci. 2003, 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Neuronale reacties in de prefrontale cortex en nucleus accumbens tijdens de zelftoediening door heroïne bij vrij bewegende ratten. Brain Res. 1997, 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Cocaïne maar geen natuurlijke beloning Zelfregistratie noch passieve cocaïne-infusie produceert persistente LTP in de VTA. Neuron. 2008, 59: 288-297. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Verbeterde Cdk5-activiteit en p35-translocatie in de ventraal-striatum van acute en chronische methamfetamine-behandelde ratten. Neuropsychopharmacology. 2004, 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Limbische activering tijdens cue-geïnduceerde cocaïnewens. Am J Psychiatry. 1999, 156: 11-18. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamine verhoogt fosforylering van extracellulair signaalgereguleerd kinase en transcriptiefactoren in het striatum van de rat via groep I-metabotrope glutamaatreceptoren. Neuropsychopharmacology. 2002, 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII reguleert door amfetamine geïnduceerde ERK1 / 2-fosforylatie in striatale neuronen. NeuroReport. 2002, 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Society for Behavioral Neuroendocrinology. Vol. 44. Cincinnati, Ohio: Hormonen en gedrag; 2003. Laesies van de mediale prefrontale cortex verstoren het seksuele gedrag bij mannelijke ratten niet; p. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Geneesmiddelen die door mensen zijn misbruikt, verhogen bij voorkeur de synaptische dopamineconcentraties in het mesolimbische systeem van vrij bewegende ratten. Proc Natl Acad Sci US A. 1988; 85: 5274-5278. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Paring activeert NMDA-receptoren in het mediale preoptische gebied van mannelijke ratten. Gedrags-neurowetenschap. 2007, 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Voorspellers van het nemen van seksueel risico bij nieuwe drugsgebruikers. Journal of sex research. 2006, 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmacotherapie van methamfetamine Verslaving: een update. Drugmisbruik. 2008, 29: 31-49. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Seksuele motivatie: een neurale en gedragsmatige analyse van de mechanismen die ten grondslag liggen aan de appetitieve en copulatoire reacties van mannelijke ratten. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interacties tussen de amygdala en het ventrale striatum bij stimulus-beloningsverenigingen: studies met een tweede-orde schema van seksuele versterking. Neuroscience. 1989, 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Studies van instrumenteel gedrag met seksuele versterking bij mannelijke ratten (Rattus norvegicus): I. Beheersing door korte visuele stimuli in combinatie met een receptieve vrouw. J Comp Psychol. 1987, 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Associatieve processen in verslaving en beloning De rol van Amygdala-Ventral Striatal Subsystems. Annalen van de New York Academy of Sciences. 1999, 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Onderzoek naar instrumenteel gedrag met seksuele versterking bij mannelijke ratten (Rattus norvegicus): II. Effecten van preoptische gebiedslaesies, castratie en testosteron. J Comp Psychol. 1987, 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, zie RE. Het neurocircuit van verslaving: een overzicht. Br J Pharmacol. 2008, 154: 261-274. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Door amfetamine opgewekte c-fos mRNA-expressie in het caudate-putamen: de effecten van DA- en NMDA-receptorantagonisten variëren als een functie van neuronaal fenotype en omgevingscontext. Journal of Neurochemistry. 2003, 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Dynamische veranderingen in nucleus accumbens dopamine-efflux tijdens het Coolidge-effect bij mannelijke ratten. J Neurosci. 1997, 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Vergemakkelijking van seksueel gedrag en verhoogde dopamine-efflux in de nucleusopname van mannelijke ratten na door D-amfetamine geïnduceerde gedragssensibilisatie. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Vergemakkelijking van seksueel gedrag bij mannelijke ratten na door d-amfetamine geïnduceerde gedragssensibilisatie. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amphetamine en Methamphetamine beïnvloeden Dopamine Transporters differentieel in vitro en in vivo. J Biol Chem. 2009, 284: 2978-2989. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Regulatie van geconditioneerde reacties van basolaterale amygdala-neuronen. Fysiologie en gedrag. 2002; 77: 489-493. [PubMed]
  38. Grant S, London ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Activering van geheugencircuits tijdens cue-uitgelokt cocaïnecraving. Proc Natl Acad Sci US A. 1996; 93: 12040-12045. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  39. Groene AI, Halkitis PN. Kristalmethamfetamine en seksuele socialiteit in een stedelijke homosubcultuur: een electieve affiniteit. Cultuur, gezondheid en seksualiteit. 2006; 8: 317-333. [PubMed]
  40. Grimm JW, zie RE. Dissociatie van primaire en secundaire beloningsrelevante limbische kernen in een diermodel van terugval. Neuropsychopharmacology. 2000, 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Hormone-neurotransmitter interacties in de controle van seksueel gedrag. Behavioral Brain Research. 1999, 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mannelijk seksueel gedrag. In: Pfaff DW, et al., Editors. Hormonen Hersenen en gedrag. San Diego, CA: Elsevier Science (VS); 2002. pp. 1-138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamine en serotonine: invloeden op mannelijk seksueel gedrag. Fysiologie en gedrag. 2004; 83: 291-307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitta A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Effecten van enkelvoudige en herhaalde toediening van methamfetamine of morfine op neuroglycan C-genexpressie in de hersenen van de rat. The International Journal of Neuropsychopharmacology. 2006, 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Geconditioneerde plaatsvoorkeuren (CPP's) voor hoogcalorische "snackvoeding" bij rattenstammen die genetisch gevoelig zijn versus resistent tegen door voeding geïnduceerde obesitas: resistentie tegen blokkering van naltrexon. Farmacologie Biochemie en gedrag. 2007, 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Effect van opioïde antagonisme op geconditioneerde plaatsvoorkeuren op snacks. Farmacologie Biochemie en gedrag. 2006, 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsiviteit als gevolg van frontostriatale disfunctie bij drugsmisbruik: implicaties voor de controle van gedrag door beloningsgerelateerde stimuli. Psychopharmacology (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. De neurale basis van verslaving: een pathologie van motivatie en keuze. Am J Psychiatry. 2005, 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Geheugen en verslaving: gedeelde neurale circuits en moleculaire mechanismen. Neuron. 2004, 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Tegengestelde rollen van de nucleus accumbens en het anterieure laterale hypothalamische gebied bij de controle van seksueel gedrag bij de mannelijke rat. European Journal of Neuroscience. 2004, 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Cannabinoïden Potentiëel Emotioneel leren Plasticiteit in neuronen van de mediale pre-frontale cortex via basolaterale Amygdala-ingangen. J Neurosci. 2006, 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, zie RE. Potentiated Reinstatement of Cocaine-seeking-gedrag na D-amfetamine Infusie in de basolaterale Amygdala. Neuropsychopharmacology. 2003, 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Herhaalde belichtingen intensiveren in plaats van de belonende effecten van amfetamine, morfine en cocaïne. Psychopharmacology (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Seksueel gedrag bij mannelijke ratten na radiofrequentie of dopamine-afnemende laesies in nucleus accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998, 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Laterale hypothalamische serotonine remt Nucleus Accumbens dopamine: implicaties voor seksuele verzadiging. J Neurosci. 1999, 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Effecten van een D1-antagonist en van seksuele ervaring op copulatie-geïnduceerde Fos-achtige immunoreactiviteit in de mediale preoptische kern. Hersenenonderzoek. 1999, 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Alleen zelf-paring paring is de moeite waard in ratten van beide geslachten. Horm Behav. 2001, 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, zie RE. Selectieve inactivatie van de dorsomediale prefrontale cortex en de basolaterale amygdala verzwakt geconditioneerd-gecued herstel van het gedoofde cocaïne-zoekgedrag bij ratten. Psychopharmacology (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Facilitering van seksueel gedrag bij de mannelijke rat in de aanwezigheid van stimuli die eerder gepaard zijn gegaan met systemische morfine-injecties. Farmacologie Biochemie en gedrag. 1990, 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Voorschriften van Methamphetamine Beloning door extracellulair signaalgestuurde Kinase 1 / 2 / ets-like Gene-1 signaalroute via de activering van Dopamine NIDA ( Onderzoeksrapporten: misbruik en add-ons methamfetamine 2006 NIH Publicatienummer 06-4210.PubMed]
  61. Voordelen SM, Clifton PG. Herwaardering van versterkers en geconditioneerde plaatsvoorkeur. Fysiologie en gedrag. 1997; 61: 1-5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Pathways of Sexual Desire. Journal of Sexual Medicine. 2009, 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. De psychofarmacologie van seksueel gedrag. In: Bloom FE, Kupfer DJ, editors. Psychopharmacology: de vierde generatie van vooruitgang. New York: Raven; 1995. pp. 743-758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Implicaties van onmiddellijke vroege geninductie in de hersenen na seksuele stimulatie van mannelijke en vrouwelijke knaagdieren. Brain Research Bulletin. 1997, 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Conditionering en seksueel gedrag: een beoordeling. Horm Behav. 2001, 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Differentiële effecten van dopamine-receptorantagonisten op het seksuele gedrag van mannelijke ratten. Psychopharmacology. 1989, 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Het mesolimbische dopaminesysteem: de laatste gemeenschappelijke route voor het versterkende effect van misbruikende drugs? Neuroscience & Biobehavioral beoordelingen. 2006; 30: 215-238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Seksuele ervaring induceert functionele en structurele plasticiteit in het mesolimbische systeem. Biologische psychiatrie. 2009 Druk op.
  69. Ranaldi R, Pocock D, Zereik R, Wise RA. Dopamine-fluctuaties in de nucleus accumbens tijdens onderhoud, extinctie en herstel van intraveneuze D-amfetamine zelftoediening. J Neurosci. 1999, 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Drugs en seksuele effecten: rol van het drugstype en geslacht. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002, 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Seksueel gedrag verhoogt de c-fos-expressie in de voorhersenen van de mannelijke rat. Brain Res. 1991, 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Accumbens-activiteit tijdens een meervoudig schema voor versterking van water en sucrose bij ratten. Synapse. 2002, 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Aandachtscontrole en hersenmetabolietniveaus bij misbruik van methamfetamine. Biologische psychiatrie. 2007, 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Crystal methamphetamine en ecstasy verschillen in relatie tot onveilige seks tussen jonge homomannen. Canadian Journal of Public Health. 2005, 96: 340-343. [PubMed]
  75. Zie RE. Neurale substraten van geconditioneerde-cued terugval tot drug-zoekgedrag. Farmacologie Biochemie en gedrag. 2002, 71: 517-529. [PubMed]
  76. Zie RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Drugsverslaving, terugval en de Amygdala. Annalen van de New York Academy of Sciences. 2003, 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivaties geassocieerd met methamfetamine bij hiv-mannen die seks hebben met mannen. Journal of Substance Abuse Treatment. 2002, 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Het herstelmodel van terugval van drugs: geschiedenis, methodologie en belangrijke bevindingen. Psychopharmacology (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilisatie voor de geconditioneerde lonende effecten van cocaïne: farmacologische en temporele kenmerken. J Pharmacol Exp Ther. 1995, 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilisatie voor de geconditioneerde lonende effecten van morfine: farmacologie en temporele kenmerken. Eur J Pharmacol. 1996, 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Voorspellers van HIV-seksueel risicogedrag in een gemeenschapsvoorbeeld van mannen en vrouwen die drugs gebruiken. AIDS en gedrag. 2003, 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Methamphetamine gebruik en seksueel risicogedrag bij Amerikaanse middelbare scholieren: bevindingen van een nationale risicogedragsstudie. Preventie Wetenschap. 2007, 8: 103-113. [PubMed]
  83. Sun WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Effecten van dopamine en NMDA-receptoren op door cocaïne geïnduceerde Fos-expressie in het striatum van Fischer-ratten. Hersenenonderzoek. 2008, 1243: 1-9. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  84. Swanson LW, redacteur. Brain Maps: Structure of the Rat Brain. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksuele beloning bij mannelijke ratten: effecten van seksuele ervaring op geconditioneerde plaatsvoorkeur in verband met ejaculaties en intromissies. Horm Behav. 2008 [PMC gratis artikel] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Pages C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Betrokkenheid van de extracellulaire signaalgecontroleerde kinase-cascade voor cocaïne-belonende eigenschappen. J Neurosci. 2000, 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Pages C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Verslavende en niet-verslavende geneesmiddelen induceren duidelijke en specifieke patronen van ERK-activering in het brein van muizen. Eur J Neurosci. 2004, 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Regulatie van een eiwitfosfatasecascade maakt convergente dopamine- en glutamaatsignalen mogelijk om ERK in het striatum te activeren. Proc Natl Acad Sci US A. 2005; 102: 491-496. [PMC gratis artikel] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Veranderingen in dopaminerge en glutamaterge transmissie bij de inductie en expressie van gedragssensibilisatie: een kritische beoordeling van preklinische studies. Psychopharmacology (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Neurale activering na seksueel gedrag in de hersenen van de mannelijke en vrouwelijke rat. Behavioral Brain Research. 1998, 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Excitotoxische laesies van de basolaterale amygdala verminderen de verwerving van cocaïne-zoekgedrag onder een tweede-orde schema van wapening. Psychopharmacology. 1996, 127: 213-224. [PubMed]
  92. Verstandige RA. Neurobiologie van verslaving. Huidige mening in de neurobiologie. 1996, 6: 243-251. [PubMed]