DeltaFosB i The Nucleus Accumbens er kritisk for å styrke virkningen av seksuell belønning. (2010)

KOMMENTARER: Delta FosB er en markør for all avhengighet, både atferdsmessig og kjemisk. Ettersom dette molekylet øker i belønningskretsen, gjør vanedannende atferd også. Det er en av molekylene som er involvert i nevroplastiske endringer. Dette eksperimentet viser at det øker med seksuell erfaring, på samme måte som det gjør med narkotikamisbruk. I eksperimentet brukte de genteknologi for å øke nivåene utover "normal". Dette resulterte i forbedret tilrettelegging av seksuell aktivitet. Vi tror dette skjer med pornoavhengighet.

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Genes Brain Behav. 2010 okt; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Institutt for anatomi og cellbiologi, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, Ontario, Canada.

ABSTRACT

Seksuell oppførsel hos hannrotter er givende og forsterkende. Imidlertid er lite kjent om de spesifikke cellulære og molekylære mekanismer som formidler seksuell belønning eller forsterkende effekter av belønning på påfølgende uttrykk for seksuell oppførsel. Denne studien tester hypotesen om at ΔFosB, den stabilt uttrykte avkortede formen av FosB, spiller en kritisk rolle i forsterkningen av seksuell oppførsel og erfaringsfremkalt tilrettelegging av seksuell motivasjon og ytelse.

Seksuell erfaring ble vist å forårsake ΔFosB-akkumulering i flere limbiske hjernegrupper, inkludert kjernen accumbens (NAc), medial prefrontal cortex, ventral tegmental område og caudate putamen, men ikke den mediale preoptiske kjernen.

Deretter ble induksjonen av c-Fos, et nedstrøms (undertrykt) mål for ΔFosB, målt hos seksuelt erfarne og naive dyr. Antall paringsinducerte c-Fos-immunoreaktive celler ble signifikant redusert hos seksuelt erfarne dyr sammenlignet med seksuelt naive kontroller.

Endelig ble ΔFosB nivåer og dets aktivitet i NAc manipulert ved å bruke viral-mediert genoverføring for å studere sin potensielle rolle i formidling av seksuell erfaring og erfaringsinducert tilrettelegging av seksuell ytelse. Dyr med ΔFosB overekspresjon viste forbedret tilrettelegging av seksuell ytelse med seksuell erfaring i forhold til kontroller. I motsetning til dette uttrykket av ΔJunD, en dominerende negativbindingspartner av FFosB, nedsatt seksuell opplevelsesinducert tilrettelegging av seksuell ytelse og stunted langsiktig vedlikehold av tilrettelegging sammenlignet med grønne fluorescensproteiner og ΔFosB-overuttrykkende grupper.

Sammen støtter disse funnene en kritisk rolle for ΔFosB-uttrykk i NAc for de forsterkende effektene av seksuell oppførsel og seksuell opplevelse-fremkalt tilrettelegging av seksuell ytelse.

INNLEDNING

Seksuell oppførsel er svært givende og forsterkende for mannlige gnavere (Coolen et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Videre endrer seksuell erfaring etterfølgende seksuell oppførsel og belønning (Tenk et al. 2009). Med gjentatt parring erfaring, forenkles eller forsterkes kjønnsadferd, vist ved reduserte latenser for å initiere parring og tilrettelegging av seksuell ytelse (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Imidlertid er de underliggende cellulære og molekylære mekanismene for seksuell belønning og forsterkning dårlig forstått. Seksuell oppførsel og betingede signaler som forutsier parring, har vist seg å forbigå ekspresjon av umiddelbar tidlig gen c-fos i mesolimbisk system av hannrotter (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Videre ble det nylig demonstrert at seksuell erfaring induserer langvarig neuroplasticitet i mannlig rotte mesolimbic systemet (Frohmader et al. 2009; mugger et al. 2010). I tillegg er det på mannlige rotter vist at seksuell erfaring induserer ΔFosB, a Fos familiemedlem, i nucleus accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). ΔFosB, en avkortet spleisvariant av FosB, er et unikt medlem av Fos-familien på grunn av sin større stabilitet (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) og spiller en rolle i økt motivasjon og belønning for narkotika av misbruk og den langsiktige nevrale plastisitetsformidlingsavhengigheten (nestler et al. 2001). ΔFosB danner et heteromert transkripsjonsfaktorkompleks (aktivatorprotein-1 (AP-1)) med Jun-proteiner, fortrinnsvis JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). Gjennom inducerbart overuttrykk av ΔFosB, primært begrenset til striatum ved bruk av bi-transgene mus, produseres en narkotikaavhengig-lignende atferdsfenotype til tross for mangel på tidligere legemiddeleksponering (McClung et al. 2004). Denne atferdsfenotypen inkluderer en sensitiv lokomotorisk respons på kokain (Kelz et al. 1999), økt preferanse for kokain (Kelz et al. 1999) og morfin (Zachariou et al. 2006), og økt kokain selvadministrasjon (Colby et al. 2003).

I likhet med narkotikabelønning er ΔFosB oppregulert av naturlig givende atferd og formidler uttrykk for disse atferdene. Overuttrykk av ΔFosB i NAc ved hjelp av gnagermodeller øker frivillig kjøring (Werme et al. 2002), instrumental reagerer på mat (Olausson et al. 2006), sukroseinntak (Wallace et al. 2008), og letter mannlige (Wallace et al. 2008) og kvinne (Bradley et al. 2005) seksuell oppførsel. Dermed kan ΔFosB være involvert i å formidle effektene av naturlig givende erfaringer. Thans nåværende studie utvider seg på tidligere studier ved å spesifikt undersøke rollen som ΔFosB i NAc i de langsiktige resultatene av seksuell erfaring med etterfølgende parringsadferd og nerveaktivering i mesolimbic systemet.

For det første ble det etablert hvilke hjerneområder som var involvert i belønningskretsene og seksuell oppførsel, uttrykk for sex-opplevelse-indusert ΔFosB.
Deretter ble effekten av sex-erfaringsinducert ΔFosB på parringsinducert ekspresjon av c-Fos, et nedstrømsmål undertrykt av ΔFosB (Renthal et al. 2008) ble undersøkt.
Endelig ble effekten av å manipulere ΔFosB-aktivitet i NAc (gen over-ekspresjon og ekspresjon av en dominant negativbindende partner) på seksuell oppførsel og erfaringsinducert tilrettelegging av seksuell motivasjon og ytelse bestemt ved bruk av virusvektortilførselsteknologi.

METODER

dyr

Voksne mannlige Sprague Dawley-rotter (200-225 gram) ble erholdt fra Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Dyr ble plassert i pleksiglassbur med et tunnelrør i samme kjønnspar gjennom eksperimenter. Kolonistuen var temperaturregulert og opprettholdt i en mørk mørk syklus med 12 / 12 hr med mat og vann tilgjengelig ad libitum unntatt under oppførselstesting. Stimulusfamilier (210-220 gram) til parringsøkter mottok et subkutant implantat som inneholdt 5% østradiolbenzoat og 95% kolesterol etter bilateral ovariektomi under dyp anestesi (0.35g ketamin / 0.052g Xylazin). Seksuell mottakelse ble indusert ved administrering av 500μg progesteron i 0.1 mL sesamolje ca. 4 timer før testing. Alle prosedyrer ble godkjent av dyrepleie- og brukskomiteene ved University of Western Ontario og i samsvar med CCACs retningslinjer som involverer vertebrate dyr i forskning.

Seksuell adferd

Parringstider oppstod i den tidlige mørke fasen (mellom 2-6 timer etter den mørke perioden) under mørk rød belysning. Før oppstart av forsøk ble dyrene tilfeldig delt inn i grupper. Under parringsøktene fikk mannlige rotter å kopiere til utløsning eller 1 time, og parametere for seksuell oppførsel ble registrert, inkludert: fjelllatens (ML, tid fra kvinnens innføring til første montering), intromissjonslatens (IL; tid fra introduksjon av kvinnen til det første fjellet med vaginal penetrasjon), ejakulasjonslatens (EL, tid fra første intromisjon til utløsning), etter utløp av intervallet (PEI, tid fra utløsning til første etterfølgende intromisjon), antall monteringer (M; bekkenbøyning uten vaginal penetrasjon), antall intromissjoner (IM, montering inkludert vaginal penetrasjon) og kopuleringseffektivitet (CE = IM / (M + IM)) (Agmo 1997). Antall mounts og intromissjoner ble ikke inkludert i analysen for dyr som ikke viste utløsning. Mount og intromission latencies er parametere som indikerer seksuell motivasjon, mens ejakulasjons latens, antall monteringer og koplingseffektivitet gjenspeiler seksuell ytelse (Hull 2002).

Eksperiment 1: Ekspresjon av ΔFosB

Seksuelt naive mannlige rotter fikk lov til å mate i rene testburer (60 × 45 × 50 cm) for 5 sammenhengende, daglige parringsøkter eller forble seksuelt naivt. Tilleggstabell 1 skisserer adferdsparadigmet for eksperimentelle grupper: naivt nei sex (NNS; n = 5), naivt sex (NS; n = 5), opplevd ingen sex (ENS; n = 5) og erfarne sex (ES; n = 4). NS og ES dyr ble ofret 1 time etter utløsning på den endelige dagen av parring for å undersøke parring-indusert c-Fos ekspression. NNS dyr ble ofret samtidig med ENS dyr 24 timer etter avsluttende paringsøkt for å undersøke Sex Experience-induced ΔFosB. Seksuelt erfarne grupper ble matchet for seksuell oppførsel før påfølgende testing. Ingen signifikante forskjeller ble oppdaget mellom grupper for noen atferdsrelaterte tiltak innenfor den aktuelle parringsøkten, og sexopplevelsesfremkalt tilrettelegging av seksuell oppførsel ble vist av begge erfarne grupper (Tilleggstabell 2). Kontroller inkluderte seksuelt naive menn som ble håndtert samtidig med parringsdyr som sikrer eksponering for kvinnelige lukt og vokaliseringer uten direkte kvinnelig kontakt.

For offer ble dyrene bedøvet sterkt under anvendelse av natriumpentobarbital (270mg / kg; ip) og perfusjonert intrakardielt med 50 ml 0.9% saltløsning, fulgt av 500 ml 4% paraformaldehyd i 0.1 M fosfatbuffer (PB). Hjernene ble fjernet og etterfiksert for 1 h ved romtemperatur i samme fikseringsmiddel, så nedsenket i 20% sukrose og 0.01% natriumazid i 0.1 M PB og lagret ved 4 ° C. Koronale seksjoner (35 μm) ble kuttet med et frysende mikrotom (H400R, Micron, Tyskland), samlet i fire parallelle serier i krybeskyttelsesløsning (30% sukrose og 30% etylenglykol i 0.1 M PB) og lagret ved -20 ° C. Frie flytende seksjoner ble vasket omfattende med 0.1 M fosfatbuffert saltvann (PBS; pH 7.3-7.4) mellom inkubasjoner. Seksjoner ble utsatt for 1% H₂O₂ for 10 min ved romtemperatur for å ødelegge endogene peroksidaser, deretter blokkert i PBS + inkubasjonsløsning, som er PBS som inneholder 0.1% bovint serumalbumin (katalogpost 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) og 0.4% Triton X -100 (katalogpost BP151-500; Sigma-Aldrich) for 1 h. Seksjoner ble deretter inkubert natten over ved 4 ° C i et polyclonalt antistoff med pan-FosB-kanin (1: 5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, USA). Pan-FosB-antistoffet ble hevet mot en intern region delt av FosB og FosB. ΔFosB-IR-cellene var spesielt FosB-positive fordi etter det stimulerende tidspunkt (24 timer) nedbrytes alle detekterbare stimulusinducerte FosB (Perrotti et al. 2004; Perrotti et al. 2008). I tillegg ble i dette forsøk dyrene som parret på den siste dagen (NS, ES) ofret 1 h etter parring, således før FosB-ekspresjon. Western blot-analyse bekreftet gjenkjenningen av ΔFosB ved omtrent 37 kD. Etter primær antistoff-inkubasjon ble seksjoner inkubert for 1h i biotin-konjugert geit-anti-kanin-IgG (1: 500 i PBS +, Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) og deretter 1 h i avidin-biotin-roserad peroxidase (ABC-elite ; 1: 1K i PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA). Etter disse inkubasjonene ble prosessene behandlet på en av følgende måter:

1. Enkel peroksidasemerking

Seksjoner av NNS- og ENS-dyr ble brukt til en hjerneanalyse av seksuell erfaring-indusert ΔFosB-akkumulering. Etter ABC-inkubasjon ble peroksidasekomplekset visualisert etter behandling i 10 minutter til en kromogenoppløsning inneholdende 0.02% 3,3'-diaminobenzidin-tetrahydroklorid (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) forbedret med 0.02% nikkelsulfat i 0.1 M PB med hydrogenperoksid (0.015%). Seksjoner ble vasket grundig i 0.1 M PB for å avslutte reaksjonen og montert på kodede Superfrost pluss glassrør (Fisher, Pittsburgh, PA, USA) med 0.3% gelatin i ddH₂0. Etter dehydrering ble alle lysbilder dekket av DPX (dibutylftalat xylen).

2. Dual immunofluorescens

Seksjoner fra alle fire eksperimentelle grupper som inneholdt NAc og mPFC ble brukt til analyse av ΔFosB og c-Fos. Etter ABC-inkubasjon ble seksjoner inkubert for 10 min med biotinylert tyramid (BT; 1: 250 i PBS + 0.003% H₂O₂ Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) og for 30 min med Alexa 488-konjugert strepavidin (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Seksjoner ble deretter inkubert over natten med et kaninpolyklonalt antistoff som spesifikt gjenkjente c-Fos (1: 150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), etterfulgt av en 30 min inkubering med geit-anti-kanin Cy3-konjugert sekundært antistoff (1: 200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, USA). Etter farging ble delene vasket grundig i 0.1 M PB, montert på kodede glassruter med 0.3% gelatin i ddH₂0 og deksel gled med et vandig monteringsmedium (Gelvatol) inneholdende anti-fading agent 1,4-diazabicyklo (2,2) oktan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Immunohistokemiske kontroller inneholdt utelatelse av begge eller begge primære antistoffer, hvilket resulterte i mangel på merking i passende bølgelengde.

Dataanalyse

Brainanalyse av ΔFosB

To eksperimenter blind for behandling utførte hjernens brede skanning på kodede lysbilder. ΔFosB-immunoreaktive (-IR) -celler gjennom hjernen ble halvkvantitativt analysert ved hjelp av en skala for å representere antall FosB-positive celler som angitt i Tabell 1. I tillegg, basert på semi-kvantitative funn, ble antall ΔFosB-IR-celler telt ved bruk av standardområder for analyse i hjerneområder som var involvert i belønning og seksuell oppførsel ved bruk av et kamera lucida-tegningsrør festet til et Leica DMRD-mikroskop (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar , Tyskland): NAc (kjerne (C) og skall (S); 400 × 600μm) analysert ved tre rostral-caudale nivåer (Balfour et al. 2004); ventral tegmental område (VTA; 1000 × 800μm) analysert ved tre rostral-caudale nivåer (Balfour et al. 2004) og VTA-halen (Perrotti et al. 2005); prefrontal cortex (anterior cinglulate area (ACA); prelimbic cortex (PL); infralimbic cortex (IL); 600 × 800μm hver); Caudate putamen (CP; 800 × 800μm); og medial preoptisk kjernen (MPN; 400 × 600 μm) (Supplerende tall 1-3). To seksjoner ble telt per subregion, og i gjennomsnitt pr. Dyr for beregning av gruppens gjennomsnitt. Seksuelt naive og erfarne gruppeverdier av ΔFosB-IR-celler ble sammenlignet for hver subregion ved å bruke uparbeide t-tester.

Sammendrag av ΔFosB-uttrykk hos seksuelt naive og erfarne dyr

Analyse av ΔFosB og c-Fos

Bilder ble tatt med et kjølt CCD-kamera (Microfire, Optronics) festet til et Leica-mikroskop (DM5000B, Leica Microsystems, Wetzlar, Tyskland) og Neurolucida-programvare (MicroBrightfield Inc) med faste kamerainnstillinger for alle emner (ved hjelp av 10x-mål). Antall celler som uttrykker c-Fos-IR eller FosB-IR i standardområder for analyse i NAc-kjernen og skallet (400 × 600μm hver; Supplerende figur 1) og ACA av mPFC (600 × 800μm; Supplerende figur 3) ble manuelt talt av en observatør blindet til forsøksgruppene, i 2-seksjoner per dyr ved bruk av Neurolucida-programvare (MBF Bioscience, Williston, VT) og i gjennomsnitt pr. dyr. Gruppe-gjennomsnitt av c-Fos eller ΔFosB-celler ble sammenlignet ved bruk av toveis ANOVA (Faktorer: seksuell opplevelse og sexaktivitet) og Fisher LSD for post-hoc-sammenligninger med et signifikansnivå på 0.05.

Eksperiment 2: ΔFosB ekspresjonsmanipulering

Viral vektor-mediert genoverføring

Seksuelt naive mannlige Sprague Dawley-rotter ble randomisert i grupper før stereotaksisk kirurgi. Alle dyr mottok bilaterale mikroinjeksjoner av rekombinante adenoassosierte virale (rAAV) vektorer som koder for GFP (kontroll; n = 12), vildtype ΔFosB (n = 11) eller en dominant-negativ bindingspartner av ΔFosB betegnet ΔJunD (n = 9) inn i NAc. ΔJunD reduserer ΔFosB-mediert transkripsjon ved konkurrerende heterodimerisering med FFosB før binding av AP-1-regionen i genpromotorer (Winstanley et al. 2007). Virus titer ble bestemt av qPCR og evaluert in vivo før studiestart. Titer var 1-2 × 10¹¹ smittsomme partikler per ml. rAAV vektorer ble injisert i et volum 1.5 μL / side over 7 minutter (koordinater: AP + 1.5, ML +/- 1.2 fra Bregma; DV-7.6 fra skallen overflate ifølge Paxinos og Watson, 1998) ved hjelp av en Hamilton sprøyte (5μL ; Harvard Apparatus, Holliston, MA, USA). Vektorene gir ingen toksisitet som er større enn kontrollinfusjoner alene (Winstanley et al., 2007; For detaljer om AAV-forberedelse, se Hommel et al., 2003). Bevegelseseksperimenter startet 3 uker etter vektorinjeksjoner som muliggjør optimal og stabil virusinfeksjon (Wallace et al. 2008). Transgenuttrykk i murine arter topper ved 10 dager og forblir forhøyet i minst 6 måneder (Winstanley et al. 2007). På slutten av forsøket ble dyrene perfusjonert transcartielt og NAc-seksjoner ble immunforedret for GFP (1: 20K; kanin anti-GFP antistoff; Molekylære Probes) ved anvendelse av en ABC-peroksidase-DAB-reaksjon (som beskrevet ovenfor) til histologisk verifiser injeksjonssteder ved hjelp av GFP som markør (Supplerende figur 4). ΔFosB og ΔJunD vektorer inneholder også et segmentpresenterende GFP separert av et internt ribosomalt oppføringssted, som muliggjør kontroll av injeksjonsstedet ved GFP-visualisering i alle dyr. Bare dyr med injeksjonssteder og spredning av virus begrenset til NAc ble inkludert i statistiske analyser. Spredning av virus var generelt begrenset til en del av NAc og spredte ikke rostral-caudalt gjennom hele kjernen. Videre virket spredning av virus stort sett begrenset til enten skall eller kjerne. Variasjonen av injeksjonssteder og spredning innenfor NAc påvirket imidlertid ikke effektene på atferd. Endelig påvirket GFP-injeksjoner ikke seksuell atferd eller erfaring-fremkalt tilrettelegging av seksuell oppførsel sammenlignet med ikke-kirurgiske dyr fra tidligere studier (Balfour et al. 2004).

Seksuell adferd

Tre uker etter virusvektiver ble dyrene parret til en utløsning (eller for 1 time) for 4 sammenhengende, daglige parringsøkter for å oppnå seksuell erfaring (erfaringsøkter) og ble senere testet for langsiktig uttrykk for erfaringsfremkalt tilrettelegging av seksuell oppførsel 1 og 2 uker (test sesjoner 1 og 2) etter den endelige opplevelsesøkten. Seksuelle oppførselsparametere ble registrert under alle parringsøkter som beskrevet ovenfor. Statistiske forskjeller for alle parametere under hver paringsøkt ble sammenlignet i og mellom grupper ved bruk av toveis gjentatte tiltak ANOVAs (Faktorer: behandling og parringssesjon) eller enveis ANOVAs (ejakulasjons latens, antall mounts og intromissjoner; Faktor: behandling eller parring økt) etterfulgt av Fisher LSD eller Newman-Keuls tester for post-hoc sammenligninger på et signifikansnivå av 0.05. Spesielt ble de tilretteleggende effektene av seksuell erfaring på parringsparametere sammenlignet mellom erfaringsøkt 1 (naiv) og erfaringsøkter 2, 3 eller 4 hver, samt mellom eksperimentelle grupper innenfor hver opplevelsesøkt. Videre, for å analysere effekter av behandling (vektor) på langsiktig tilrettelegging av seksuell oppførsel, ble parringsparametere sammenlignet mellom erfaringsøkt 4 og testøkt 1 og 2 innen hver behandlingsgruppe, og sammenlignet mellom eksperimentelle grupper i hver testsesjon.

RESULTATER

Seksuell erfaring forårsaker ΔFosB akkumulering

I utgangspunktet ble en halvkvantitativ undersøkelse av ΔFosB-akkumulering gjennom hjernen hos seksuelt erfarne menn sammenlignet med seksuelt naive kontroller utført. En oppsummering av de samlede funnene er gitt i Tabell 1. Analys av ΔFosB-IR ble fremmet ved å bestemme antall avFosB-IR-celler i flere limbisk-assosierte hjerneområder ved bruk av standardområder for analyse. Figur 1 demonstrerer representative bilder av DAB-Ni som farger NAc av seksuelt naive og erfarne dyr. Signifikant ΔFosB oppregulering ble funnet i mPFC-underregioner (Figur 2A), NAc kjerne og skall (2B), caudate putamen (2B) og VTA (2C). I NAc eksisterte betydelige forskjeller på alle rostral-caudale nivåer i NAc-kjernen og skallet, og dataene vist i Figur 2 er gjennomsnittet over alle rostro-caudale nivåer. Derimot var det ingen signifikant økning i ΔFosB-IR i den hypotalamiske mediale preoptiske kjernen (NNS: Avg 1.8 +/- 0.26; ENS: Avg 6.0 +/- 1.86).

Representative bilder som viser ΔFosB-IR-celler (svart) i NAc av naivt ingen kjønn (A) og opplever ingen sex (B) grupper. aco: anterior commissure Skalbjelke angir 100 μm.

Antall ΔFosB-IR celler i: A. infralimbic (IL), prelimbic (PL) og anterior cingulate cortex (ACA) delregioner av medial prefrontal cortex; B. Nucleus accumbens kjernen og skallet, og caudate putamen (CP); C. Rostral, midt, caudal og hale ...

Seksuell erfaring demper parring-indusert c-Fos

Effekten av seksuell erfaring på ΔFosB-nivåer i NAc ble bekreftet ved bruk av fluorescensfargingsteknikker. I tillegg ble effekter av seksuell erfaring på ekspresjon av c-Fos analysert. Figur 3 demonstrerer representative bilder av ΔFosB- (grønn) og c-Fos (rød) -IR-celler i alle eksperimentelle grupper (A, NNS; B, NS; C; ENS; D, ES). Seksuell erfaring økte betydelig ΔFosB-uttrykk i NAc-kjernen (Figur 4A: F_1,15 = 12.0; p = 0.003) og skallet (Figur 4C: F_1,15 = 9.3; p = 0.008). Derimot hadde parring 1 time før perfusjon ikke en effekt på FFosB-ekspresjon (Figur 4A, C) og ingen interaksjon mellom seksuell erfaring og parring umiddelbart før perfusjon ble påvist. Det var en generell effekt av parring før perfusjon på c-Fos-uttrykk i både NAc-kjernen (Figur 4B: F_1,15 = 27.4; p <0.001) og skall (Figur 4D: F_1,15 = 39.4; p <0.001). Videre ble en samlet effekt av seksuell opplevelse oppdaget i NAc-kjernen (Figur 4B: F_1,15 = 6.1; p = 0.026) og skallet (Figur 4D: F_1,15 = 1.7; p = 0.211) og en interaksjon mellom seksuell erfaring og parring før perfusjon ble detektert i NAc-kjernen (F_1,15 = 6.5; p = 0.022), med en trend i skallet (F_1,15 = 1.7; p = 0.211; F_1,15 = 3.4; p = 0.084). Post-hoc analyser demonstrerte parring-indusert c-Fos ekspresjon i kjerne og skall av seksuelt naive menn (Figur 4B, D). Men hos seksuelt erfarne menn var c-Fos ikke signifikant økt i NAc-kjernen (Figur 4B) og betydelig dempet i skallet (Figur 4D). Dermed forårsaket seksuell erfaring en reduksjon av parringsinducert c-Fos-ekspresjon. P-verdier for spesifikke parvise sammenligninger er i figurlegenden.

Representative bilder som viser ΔFosB (grønn) og c-Fos (rød) i NAc for hver eksperimentell gruppe. Skalestang angir 100 μm.

Sex erfaring-indusert ΔFosB og parringsinducerte c-Fos. Antall immunofreaktive celler for ΔFosB (Core, A, Shell, C, ACA, E) eller c-Fos (Core, B, Shell, D, ACA, F): NNS (n = 5), NS 5), ENS (n = 5) eller ES (n = 4). Data er uttrykt ...

Effekten av seksuell erfaring på parringsinducerte c-Fos-nivåer var ikke begrenset til NAc. En lignende demping av c-Fos-ekspresjon ble observert i ACA hos seksuelt erfarne dyr sammenlignet med seksuelt naive kontroller. Seksuell erfaring hadde en signifikant effekt på ΔFosB-ekspresjon i ACA (Figur 4E: F_1,15 = 154.2; p <0.001). Parring før perfusjon hadde ingen effekt på ΔFosB-ekspresjon (Figur 4C), men signifikant økt c-Fos (Figur 4F: F_1,15 = 203.4; p <0.001) i ACA. Videre ble parringsindusert c-Fos-uttrykk i ACA betydelig redusert av seksuell erfaring (Figur 4F: F_1,15 = 15.8; p = 0.001). En toveis interaksjon mellom seksuell erfaring og parring før perfusjon ble påvist for c-Fos ekspresjon (Figur 4F: F_1,15 = 15.1; p <0.001). P-verdier for spesifikke parvise sammenligninger er i figurlegendene. Til slutt var det ingen signifikant reduksjon i parringsindusert c-Fos-ekspresjon i den mediale preoptiske kjernen (NS: Gj.sn. 63.5 +/− 4.0; ES: Gj.sn. 41.4 +/− 10.09), et område der parringserfaring ikke forårsaket signifikant økning i ΔFosB-ekspresjon, noe som indikerer at parringsindusert c-Fos-ekspresjon ikke ble påvirket i alle hjerneområder.

ΔFosB i NAc formidler forsterkning av seksuell oppførsel

For å undersøke en potensiell molekylær mekanisme for forsterkning av seksuell atferd som demonstrert av erfaringsinduisert tilrettelegging av seksuell oppførsel, ble virkninger av lokal manipulering av ΔFosB-nivåer og dens transkripsjonsaktivitet bestemt. Seksuell erfaring i løpet av de fire påfølgende opplevelsesøktene hadde en signifikant effekt på fjellets latensitet (Figur 5A: F_1,23 = 13.8; p = 0.001), intromissjonslatens (Figur 5B: F_1,23 = 18.1; p <0.001) og utløsningslatens (Figur 5C: GFP, F_11,45 = 3.8; p = 0.006). GFP-kontrolldyr viste den forventede erfaring-induserte tilretteleggingen av seksuell oppførsel og viste signifikant lavere latenser til første montering, første intromisjon og utløsning under erfaringsøkt 4 sammenlignet med erfaringsøkt 1 (Figur 5A-C; se figurlegenden for p-verdier). Denne opplevelsesinducerte tilretteleggingen av seksuell oppførsel ble også observert i ΔFosB-gruppen for montering og intromissjonslatensier, men det var ikke signifikant forskjell oppdaget i ejakulasjonslatensiteten (Figur 5A-C). I kontrast viste ΔJunD dyr en stunted facilitation; Selv om latensene for mounts, intromissions og ejaculations ble redusert med gjentatte parringsøkter, oppnådde ingen av disse parameterne statistisk signifikans når de sammenlignet mellom erfaringsøkter 1 og 4 (Figur 5A-C). Mellom gruppesammensetninger for hver opplevelsessession viser at ΔJunD hadde betydelig lengre latens for å montere, intromitere og ejakulere i løpet av erfaringsøktene sammenlignet med ΔFosB og GFP (Figur 5A-C). I tillegg hadde både seksuell erfaring og behandling betydelige effekter på kopulasjonseffektivitet (Figur 5F: seksuell opplevelse, F_1,12 = 22.5; p <0.001; behandling, F_1,12 = 3.3; p = 0.049). ΔFosB hanner hadde økt koplingseffektivitet under opplevelsesøkt 4 sammenlignet med opplevelsesøkt 1 (Figur 5F). I tillegg hadde ΔFosB dyr signifikant færre fester som foregikk før utløsning i løpet av opplevelsesøksdagen 4, sammenlignet med erfaringsøkt 1 (Figur 5D: F_10,43 = 4.1; p = 0.004), og at ΔJunD hanner hadde betydelig flere fester som foregikk før utløsning, og dermed signifikant redusert koplingseffektivitet, enn noen av de andre to gruppene (Figur 5D og F). Dermed viste GFP og ΔFosB dyr erfaring-inducerte tilrettelegging av initiering av seksuell oppførsel og seksuell ytelse, mens ΔJunD-dyr ikke gjorde det.

Seksuell oppførsel av GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) og ΔJunD (n = 9) dyr: monteringslatens (A), intromissjonslatens (B), ejakulasjonslatens (C), antall monteringer (D), antall intromissjoner (E) og kopuleringseffektivitet (F). Data er uttrykt ...

For å teste hypotesen om at ΔFosB-uttrykk er kritisk for langtidsuttrykk av erfaringsinducert tilrettelegging av seksuell oppførsel, ble dyrene testet 1 uke (test sesjon 1) og 2 uker (test sesjon 2) etter den siste erfaringsøkten. Faktisk ble tilrettelagt seksuell oppførsel opprettholdt i både GFP- og ΔFosB-grupper, da ingen av adferdsparametrene var forskjellig mellom testmøtene 1 eller 2 og den endelige opplevelsesøkten 4, innenfor GFP- og ΔFosB-grupper (Figur 5A-C; bortsett fra ejakulasjons latens og koplingseffektivitet i test sesjon 1 for ΔFosB dyr). Signifikante forskjeller mellom ΔJunD dyr og GFP eller ΔFosB grupper ble påvist i begge test økter for alle seksuelle oppførselsparametere (Figur 5A-F). Det var ingen forskjeller oppdaget mellom eller i grupper når man sammenlignet antall intromissjoner, PEI eller prosentandeler av dyr som ejakulerte (100% av hannene i alle grupper som ikke var ekkolulert i løpet av de siste fire parringssesjonene).

DISKUSJON

Den nåværende studien viste at seksuell opplevelse fører til akkumulering av ΔFosB i flere limbic-assosierte hjerneområder, inkludert NAc-kjernen og skallet, mPFC, VTA og caudate putamen. I tillegg svekket seksuell erfaring parring-indusert ekspresjon av c-Fos i NAc og ACA. Endelig ble ΔFosB i NAc vist å være kritisk for å formidle tilrettelegging av parring under oppkjøpet av seksuell erfaring og det langsiktige uttrykket av erfaringsindubert tilrettelegging av seksuell oppførsel. Spesifikt redusere ΔFosB-mediert transkripsjonsdempet erfaring-inducert tilrettelegging av seksuell motivasjon og ytelse, mens overuttrykk av ΔFosB i NAc forårsaket en forbedret tilrettelegging av seksuell oppførsel, i form av økt seksuell ytelse med mindre erfaring. Sammen støtter dagens funn hypotesen om at ΔFosB er en kritisk molekylær mediator for den langsiktige nevrale og atferdsmessige plastisitet som fremkalles av seksuell erfaring.

De nåværende funnene utvider tidligere studier som viser sex-erfaring-indusert ΔFosB i NAc hos hannrotter (Wallace et al. 2008) og kvinnelige hamstere (Hedges et al. 2009). Wallace et al. (2008) viste at rAAV-ΔFosB overuttrykk i NAc økt seksuell oppførsel hos seksuelt naive dyr under den første parringsøkten, som vist ved færre intromisser til utløsning og kortere etter-ejaculatoriske intervaller, men hadde ingen effekt hos seksuelt erfarne menn (Wallace et al. 2008).

I motsetning til dette viste den nåværende studien ingen effekter av ΔFosB overuttrykk hos seksuelt naive menn under den første testen, men heller under og etter oppkjøpet av seksuell opplevelse. ΔFosB over-expressorer viste økt seksuell ytelse (økt koplingseffektivitet) sammenlignet med GFP-dyr.

I tillegg testet den nåværende studien rollen avFosB ved blokkering avFosB-mediert transkripsjon ved bruk av en AJunD-uttrykkende virusvektor. Forebygging av erfaringsinducert økning i ΔFosB-ekspresjon-inhibert erfaring-inducert tilrettelegging av seksuell motivasjon (økt montering og intromissjonslatensier) samt seksuell ytelse (økt ejakulasjonsforsinkelse og antall fester) og påfølgende langsiktig uttrykk for letter seksuell oppførsel.

Derfor er disse dataene de første til å indikere en obligatorisk rolle for ΔFosB i oppkjøpet av erfaringsinducert tilrettelegging av seksuell oppførsel. Videre viser disse dataene at ΔFosB også er kritisk involvert i det langsiktige uttrykket av erfaringsinducerte, enkle oppførsel. Vi foreslår at dette langsiktige uttrykket for tilrettelagt oppførsel representerer en form for minne for naturlig belønning, derfor er ΔFosB i NAc en formidler av belønningsminne. Seksuell erfaring økte også ΔFosB nivåer i VTA og mPFC, områder som er involvert i belønning og minne (Balfour et al. 2004; Phillips et al. 2008). Fremtidige studier er nødvendig for å belyse en potensiell betydning for ΔFosB oppregulering på disse områdene for belønningsminne.

ΔFosB-uttrykk er svært stabil, og har derfor stort potensial som en molekylær mediator av vedvarende tilpasninger av hjernen etter kroniske forstyrrelser (nestler et al. 2001). ΔFosB har vist seg å øke gradvis i NAc over flere kokaininjeksjoner og vedvarer i opptil flere uker (Håper et al. 1992; Håper et al. 1994). Disse endringene i NAc ΔFosB-uttrykk er forbundet med legemiddelbelønningssensibilisering og avhengighet (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; nestler et al. 2001; Zachariou et al. 2006). I motsetning til dette er rollen som ΔFosB i formidling av naturlig belønning blitt understudied. Nylige bevis har oppdaget at ΔFosB induksjon i NAc er involvert i naturlig belønning. ΔFosB nivåer økes tilsvarende i NAc etter sukroseinntak og hjulløp. Overuttrykket av ΔFosB i striatumet ved bruk av bitransgene mus eller virusvektorer i rotter forårsaker en økning i sukroseinntaket, økt motivasjon for mat og økt spontan hjulkjøring (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). De nåværende dataene legger vesentlig til disse rapportene og støtter videre ideen om at ΔFosB er en kritisk mediator for belønning forsterkning og naturlig belønning minne.

ΔFosB kan formidle erfaringsinducert forsterkning av seksuell oppførsel via induksjon av plastisitet i mesolimbic-systemet. Faktisk forårsaker seksuell opplevelse en rekke langvarige endringer i mesolimbic-systemet (Bradley & Meisel 2001; Frohmader et al. 2009; mugger et al. 2010). Dent atferdsnivået, en sensitiv lokomotorisk respons på amfetamin og en forbedret amfetaminbelønning har blitt vist hos seksuelt erfarne hannrotter (mugger et al. 2010); En endret lokomotorisk respons på amfetamin har også blitt observert med kvinnelige hamstere (Bradley & Meisel 2001). Videre har økt antall dendritiske spines og kompleksitet av dendritiske arbors blitt funnet etter en avholdenhet fra seksuell erfaring hos hannrotter (mugger et al. 2010). Den nåværende studien antyder ΔFosB kan være en spesifikk molekylær mediator av de langsiktige resultatene av seksuell opplevelse. Av avtale har ΔFosB nylig vist seg å være viktig for å indusere dendritisk ryggradsendring som respons på kronisk kokainadministrasjon (Dietz et al. 2009; Maze et al. 2010).

Det er ikke klart hvilken oppstrøms nevrotransmitter (e) er ansvarlig for å indusere ΔFosB i NAc, men DA har blitt foreslått som kandidat (Nye et al. 1995). Nesten alle misbrukemidler, inkludert kokain, amfetamin, opiater, cannabinoider og etanol, samt naturlige fordeler, øker ΔFosB i NAc (Perrotti et al. 2005; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Begge stoffene av misbruk og naturlige belønninger øker synaptisk DA-konsentrasjon i NAc (Damsma et al. 1992; Hernandez & Hoebel 1988a, b; Jenkins & Becker 2003). ΔFosB-induksjon med misbruk av legemidler har blitt vist i DA-reseptorholdige celler og kokaininducert ΔFosB er blokkert av en D1 DA-reseptorantagonist (Nye et al. 1995). Derfor frigjøres DA-frigivelse for å stimulere ΔFosB-uttrykk og derved mediere belønningsrelatert neuroplasticitet. Videre støtter ideen om at ΔFosB-nivåene er DA-avhengige, er funnet at hjerneområder hvor seksuell opplevelse endret ΔFosB-nivå, mottar sterk dopaminerg input fra VTA, inkludert medial prefrontal cortex og basolateral amygdala.

Imidlertid øker ΔFosB ikke i det mediale preoptiske området, selv om dette området mottar dopaminerg inngang, om enn fra hypotalamiske kilder (Miller & Lonstein 2009). Fremtidige studier er nødvendig for å teste om parringsinducert ΔFosB-uttrykk og effekten av seksuell opplevelse på seksuell motivasjon og ytelse er avhengig av DA-handling. Rollen til DA i seksuell belønning i hannrotter er for tiden ikke helt klar (Agmo & Berenfeld 1990; Pfaus 2009). Det er rikelig bevis på at DA slippes ut i NAc under eksponering for en kvinne eller parring (Damsma et al. 1992) og DA-neuroner aktiveres under seksuell oppførsel (Balfour et al. 2004). Imidlertid forhindrer systemiske injeksjoner av DA-reseptorantagonist ikke seksuell belønning-indusert betinget stedpreferanse (Agmo & Berenfeld 1990) og hypotesen om at DA er kritisk for erfaringsinducert forsterkning av parring er ikke testet.

Det er også uklart hva som er nedstrøms mediatorer av ΔFosB effekter på seksuell oppførsel. ΔFosB har vist seg å fungere som både en transkripsjonal aktivator og repressor gjennom en AP-1-avhengig mekanisme (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). Tallrike målgener har blitt identifisert, inkludert det umiddelbare tidlige gen c-fos (Håper et al. 1992; Håper et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dynorphin (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), NFκB-underenheter (Ang et al. 2001), Ennd AMPA glutamatreseptor GluR2-underenheten (Kelz et al. 1999). De nåværende resultatene viser at parringsinducerte c-Fos-nivåer ble redusert ved seksuell erfaring i hjerneområder med økt ΔFosB (NAc og ACA). Undertrykkelsen av c-Fos ser ut til å være avhengig av perioden siden siste parring og gjentatte parringsøkter, som i tidligere studier, ble en slik reduksjon i c-Fos ikke påvist i hanrotter som ble testet 1 uke etter den avsluttende parringsøkten (Balfour et al. 2004) eller etter seksuell opplevelse som består av bare en enkelt parringsøkt (Lopez & Ettenberg 2002). Videre er det nåværende funnet i samsvar med bevisene for at ΔFosB undertrykker c-fos-genet etter kronisk amfetamineksponering (Renthal et al. 2008). I tråd med disse funnene ble induksjonen av flere umiddelbare, tidlige gen-mRNAer (c-fos, fosB, c-jun, junB og zif268) redusert ved gjentatte kokaininjeksjoner sammenlignet med akutte legemiddelinjeksjoner (Håper et al. 1992; Håper et al. 1994), og amfetamin-indusert c-fos ble undertrykt etter uttak fra kronisk amfetaminadministrasjon (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). Den funksjonelle relevansen av nedreguleringen av c-Fos-uttrykk etter kronisk medisinbehandling eller seksuell erfaring forblir uklar og har blitt foreslått å være en viktig homøostatisk mekanisme for å regulere et dyrs følsomhet overfor gjentatt belønningsposisjon (Renthal et al. 2008).

Som konklusjon viser den nåværende studien at ΔFosB i NAc spiller en integrert rolle i seksuell belønning, og støtter muligheten for at ΔFosB er viktig for generell belønning forsterkning og minne. Funnene fra den nåværende studien belyser videre vår forståelse av cellulære og molekylære mekanismer som formidler seksuell belønning og motivasjon, og legger til en litteratur som viser at ΔFosB er en viktig aktør i utviklingen av avhengighet, ved å demonstrere en rolle for ΔFosB i naturlig belønning forsterkning.

Tilleggsmateriale

Supp Fig S1-S4 & Tabell S1-S2

Klikk her for å se.^{(167K, pdf)}

Takk til

Denne forskningen ble støttet av tilskudd fra de kanadiske instituttene for helseforskning til LMC, National Institute of Mental Health til EJN, og Canadas naturvitenskaps- og ingeniørvitenskapsråd til KKP og LMC.

REFERANSER

Agmo A. Mannlig rotte seksuell oppførsel. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
Agmo A, Berenfeld R. Forsterkende egenskaper av ejakulasjon i hannrotten: Opioids og dopaminers rolle. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Induksjon av kjernefaktor-kappaB i kjernen accumbens ved kronisk kokainadministrasjon. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Seksuell oppførsel og sexrelaterte miljøklipper aktiverer mesolimbic systemet hos hannrotter. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Effekter av kronisk eksponering for kokain reguleres av nevronproteinet Cdk5. Nature. 2001;410: 376-380. [PubMed]
Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. 6-Hydroxydopaminslesjoner hos kvinnelige hamstere (Mesocricetus auratus) avskaffer de sensibiliserte effektene av seksuell erfaring på kopulerende interaksjoner med menn. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
Bradley KC, Meisel RL. Seksuell atferd induksjon av c-Fos i kjernen accumbens og amfetaminstimulert lokomotorisk aktivitet er sensitized av tidligere seksuell erfaring i kvinnelige syriske hamstere. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Proteasomavhengige og uavhengige mekanismer for FosB destabilisering: identifisering av FosB degron domener og implikasjoner for DeltaFosB stabilitet. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
Chao J, Nestler EJ. Molekylær nevrobiologi av narkotikamisbruk. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Håper BT, Nestler EJ. Regulering av delta FosB og FosB-lignende proteiner ved elektrokonvulsiv anfall og kokainbehandling. Molekylær farmakologi. 1995;48: 880-889. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Striatal celletype-spesifikk overekspresjon av DeltaFosB øker incitamentet til kokain. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Sentral regulering av utløsning. Fysiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Seksuell oppførsel øker dopaminoverføringen i kjernen accumbens og striatum av hannrotter: sammenligning med nyhet og lokomotiv. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
Dietz DM, Maze I, Mekaniker M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Vesentlig rolle for ΔFosB i kokainregulering av dendritiske spines av nukleinsystemer. Samfunnet for Neurovidenskapens Sammendrag. 2009
Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Blanding fornøyelser: Gjennomgang av stoffets effekter på kjønnsadferd i mennesker og dyremodeller. Horm Behav. 2009 I trykk.
Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Delta FosB overekspresjon i kjernen accumbens forbedrer seksuell belønning i kvinnelige syriske hamstere. Genes Brain Behav. 2009;8: 442-449. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Feeding og hypothalamisk stimulering øker dopaminomsetningen i accumbens. Fysiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Matbelønning og kokain øker ekstracellulær dopamin i kjernen accumbens målt ved mikrodialyse. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Vesentlig rolle for fosB-genet i molekylære, cellulære og adferdshandlinger av kroniske elektrokonvulsive anfall. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Lokalt genknockdown i hjernen ved hjelp av viral-mediert RNA-forstyrrelse. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
Håper B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Regulering av umiddelbar tidlig genuttrykk og AP-1 binding i rottekjernen accumbens av kronisk kokain. Proc Natl Acad Sci US A. 1992;89: 5764-5768. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Håper BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Induksjon av et langvarig AP-1-kompleks bestående av endrede Fos-lignende proteiner i hjernen ved kronisk kokain og andre kroniske behandlinger. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Mannlig seksuell adferd. Horm Behav. 2002;1: 1-139.
Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Akutte og kroniske amfetaminbehandlinger regulerer differensielt neuropeptid messenger-RNA-nivåer og Fos immunoreaktivitet i råtta striatalneuroner. Neuroscience. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
Jenkins WJ, Becker JB. Dynamiske økninger i dopamin under stimulering i hunrotter. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Neve RL, Duman RS, Picciotto MR, Nestler EJ. Ekspresjon av transkripsjonsfaktoren deltaFosB i hjernen styrer følsomheten for kokain. Nature. 1999;401: 272-276. [PubMed]
Lopez HH, Ettenberg A. Eksponering for hunrotter produserer forskjeller i c-fos-induksjon mellom seksuelt naive og erfarne hannrotter. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Renthal W, Russo SJ, Mekaniker M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Viktig rolle av histon-metyltransferasen G9a i kokaininducert plastisitet. Science. 2010;327: 213-216. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Regulering av genuttrykk og kokainbelønning av CREB og DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: en molekylær bryter for langsiktig tilpasning i hjernen. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
Miller SM, Lonstein JS. Dopaminergiske fremspring til det medial preoptiske området av postpartum rotter. Neuroscience. 2009;159: 1384-1396. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Morgan JI, Curran T. Stimulus-transkripsjonskobling i nevroner: rolle av cellulære umiddelbare tidlig-gener. Trender Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
Nestler EJ. Molekylære mekanismer av narkotikamisbruk. Neuropharmacology. 2004;47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
Nestler EJ. Neurobiologi av kokainavhengighet. Sci Pract Perspect. 2005;3: 4-10. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Nestler EJ. Anmeldelse. Transkripsjonelle avhengighetsmekanismer: DeltaFosBs rolle. Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: en vedvarende molekylær bryter for avhengighet. Proc Natl Acad Sci US A. 2001;98: 11042-11046. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Nye HE, Håper BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Farmakologiske studier av regulering av kronisk FOS-relatert antigeninduksjon av kokain i striatum og nucleus accumbens. J Pharmacol Exp Ther. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB i kjernen accumbens regulerer matforsterket instrumentell oppførsel og motivasjon. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Inducible, hjernegionspesifikke uttrykk for en dominant negativ mutant av c-Jun i transgene mus reduserer følsomheten for kokain. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB akkumuleres i en GABAergic cellepopulasjon i den bakre halen av det ventrale tegmentale området etter psykostimulerende behandling. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Induksjon av deltaFosB i belønningsrelaterte hjernestrukturer etter kronisk stress. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Distinkte mønstre av DeltaFosB induksjon i hjernen av misbruk. Synapse. 2008;62: 358-369. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Pfaus JG. Veier av seksuell lyst. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Tilstand og seksuell oppførsel: en anmeldelse. Horm Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
Phillips AG, Vacca G, Ahn S. Et topp-ned perspektiv på dopamin, motivasjon og minne. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticitet i mesolimbic systemet fremkalt av naturlig belønning og etterfølgende belønning avholdenhet. Biolpsykiatri. 2010;67: 872-879. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Renthal W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB medierer epigenetisk desensibilisering av c-fos-genet etter kronisk amfetamineksponering. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Renthal W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Stack A, Kabbaj M, Nestler EJ. Gjennomsøkende analyse av kromatinregulering av kokain avslører en rolle for sirtuins. Neuron. 2009;62: 335-348. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Seksuell belønning i hannrotter: effekter av seksuell erfaring på betingede stedpreferanser assosiert med utløsning og intromissjoner. Horm Behav. 2009;55: 93-97. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforylering av DeltaFosB medierer dens stabilitet in vivo. Neuroscience. 2008
Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Regulering av DeltaFosB stabilitet ved fosforylering. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. DeltaFosBs innflytelse i kjernen accumbens på naturlig belønningsrelatert oppførsel. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB regulerer hjulkjøring. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. DeltaFosB-induksjon i orbitofrontal cortex medierer toleranse mot kokain-indusert kognitiv dysfunksjon. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. En viktig rolle for DeltaFosB i kjernen accumbens i morfin handling. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos letter oppkjøpet og utryddelsen av kokaininducerte vedvarende endringer. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]