kilde
Wagoner Center for Alkoholisme og Avhengighet Forskning, Institutt for nevrovitenskap, Universitetet i Texas i Austin, Austin, TX, 78712, USA. [e-postbeskyttet].
Abstrakt
ABSTRAKT:
BAKGRUNN:
Manglende evne til å redusere eller regulere alkoholinntak er et kjennetegn for alkoholforstyrrelser. Forskning på nye betegnelses- og genetiske modeller av erfaringsinduiserte endringer i drikking vil gi oss videre kunnskap om alkoholforstyrrelser. Distinkt selvbetjeningsadferd i alkohol ble tidligere observert ved sammenligning av to F1 hybridstammer av mus: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BXN) Vis redusert alkoholpreferanse etter erfaring med høye konsentrasjoner av alkohol og perioder med avholdenhet mens C57BL / 6J x FVB / NJ (BxF) viser vedvarende alkoholpreferanse. Disse fenotypene er interessante fordi disse hybridene viser forekomsten av genetisk additivitet (BxN) og overdominans (BxF) i etanolinntak på en opplevelseavhengig måte.
Spesifikt viser BxF vedvarende alkoholpreferanse og BxN utviser redusert alkoholpreferanse etter erfaring med høye etanolkonsentrasjoner; Opplevelsen med lave etanolkonsentrasjoner gir imidlertid opprettholdt alkoholpreferanse for begge hybrider.
I den foreliggende studien testet vi hypotesen om at disse fenotypene er representert ved differensiell produksjon av den inducerbare transkripsjonsfaktoren, ΔFosB, i belønning, aversjon og stressrelaterte hjerneområder.
RESULTATER:
Endringer i neuronal plastisitet (målt ved ΔFosB nivåer) var erfaringsavhengige, samt hjernegruppe og genotype-spesifikk, og videreutvikling av nevronkredsløpet underbygger motiverende aspekter av etanolforbruk.
BxN-mus med redusert alkoholpreferanse hadde lavere FosB-nivåer i Edinger-Westphal-kjernen enn mus som utviser vedvarende alkoholpreferanse og økte FosB-nivåer i sentral medial amygdala sammenlignet med kontrollmus.
BxN-mus som viste vedvarende alkoholpreferanse viste høyere ΔFosB-nivåer i det ventrale tegmentale området, Edinger-Westphal-kjernen, og amygdala (sentral og lateral divisjon).
Videre, i BxN-mus ΔFosB-nivåer i Edinger-Westphal-kjerne- og ventrale tegmentale regioner er signifikant positivt korrelert med etanolpreferanse og inntak. I tillegg oppdaget hierarkisk klyngningsanalyse at mange etanol-naive mus med generelt lave FosB-nivåer er i en klynge, mens mange mus som viser vedvarende alkoholpreferanse med høye ΔFosB-nivåer, ligger i en klynge sammen.
KONKLUSJON:
Ved å sammenligne og kontrastere to alkoholfenotyper, viser denne studien at belønnings- og stressrelaterte kretser (inkludert Edinger-Westphal-kjernen, ventral tegmental-området, amygdala) gjennomgår betydelig plastisitet som manifesterer seg som redusert alkoholpreferanse.
Bakgrunn
Det er kjente følsomhetsfaktorer, miljø og genetikk, forbundet med alkoholmisbruk og alkoholisme. Evnen til å drikke store mengder alkohol med liten konsekvens for individet er et primært oppstødssymptom hos mange alkoholikere, noe som indikerer at et lavt nivå av respons på alkohol er en viktig sårbarhetsfaktor i utviklingen av alkoholisme [1,2]. Definere neurobiologiske faktorer som bidrar til alkohol moderering vil hjelpe vår forståelse av alkoholbruk og misbruk, og er en effektiv strategi for utvikling av forbedrede behandlinger for personer diagnostisert med alkoholforstyrrelser. Bruk av gnagermodeller for å etterligne menneskers sykdom har vært et kraftig verktøy for å forstå denne sykdommen og forbedre behandlinger. Det finnes flere gnagermodeller på plass for å studere aspekter av alkoholmisbruk og alkoholisme, men ingen modellalkoholisme helt. I hvilken utstrekning en mus muntlig selvforvalter etanolløsninger under lignende miljøforhold, er avhengig av dens genetiske bakgrunn [3].
Nylig fant vi at C57BL / 6JxFVB / NJ (BxF) og FVB / NJxC57BL / 6J (FVBxB6) F1 hybridmus selv administrerer uvanlig høyt alkoholnivå i to-flaske preferanse tester (kvinner bruker 20-35 g / kg / dag og menn 7-25 g / kg / dag, avhengig av konsentrasjon og paradigme) [4]. Denne nye genetiske modellen har en betydelig fordel i forhold til eksisterende innavlede stammer, inkludert bevis på overdreven fenotype og drikking til høyt blodalkoholnivå [4]. I tillegg er det høye etanolforbruket utstilt av BxF-mus, sett i to ekstra etanol-drikkeparamigmer (drikking i mørket og etanol-aksept under planlagt væsketilgang)4]. Vi så da observert selvstendig adferd hos alkohol ved å sammenligne to F1 hybridstammer av mus: C57BL / 6J x NZB / B1NJ (BxN) viser redusert alkoholpreferanse etter erfaring med høye konsentrasjoner av alkohol og perioder med avholdenhet, og BxF viser vedvarende alkoholpreferanse [5]. Ved hjelp av et batteri av atferdstest har vi vist at BxN er mer følsomme enn BxF-mus til aversive og beroligende, men ikke givende, effekter av etanol [6].
Grunnforskning på nye betegnelses- og genetiske modeller av høyt alkoholforbruk og erfaringsinnvandrede endringer i drikking vil øke vår kunnskap om alkoholmisbruk og alkoholisme. Den reduserte alkoholpreferansefenotypen er interessant fordi BxN-mus opprinnelig viser en høy preferanse for etanolløsninger. Selv om det motiverende aspektet ved å redusere alkoholinntaket etter erfaring med høye etanolkonsentrasjoner og avholdenhet er ukjent, kan BxN-mus sammenlignes med moderate alkoholdrikkere ved at de fortsatt bruker etanolløsninger, men på et redusert nivå, antagelig på grunn av en aversiv opplevelse.
Den vedvarende alkoholpreferansemodellen er også interessant, da BxF-mus sterkt forbruker ekstremt høye nivåer etanol uavhengig av tidligere erfaring. Vedvarende og redusert alkoholpreferanse kan være relatert til en alkoholavhengighetseffekt, et fenomen hvor dyr utviser betydelig økt alkoholforbruk etter en periode med tvungen abstinense [7]. Alkoholavhengighetseffekten er et nyttig fenomen for å studere økt alkoholdrikkeoppførsel. Selv om den eksperimentelle tidsplanen som er kjent for å indusere alkoholmangelvirkningen, er ganske annerledes enn tidsplanen som benyttes her, sammenligner vedvarende og redusert alkoholpreferanse til en alkoholavhengighetseffekt de forskjellige atferdsfenotyper som diskuteres her til et viktig fenomen i gnagermodeller av alkoholforskning. Redusert alkoholpreferanse ville være det motsatte av en alkoholavsvingseffekt, og vedvarende alkoholpreferanse kunne beskrives som fraværet av en alkoholavsvingseffekt. Bruken av ulike genetiske dyremodeller, som BxF og BxN, bidrar sterkt til fremdriften av feltet, siden alkoholbruksforstyrrelser antas å oppstå fra komplekse interaksjoner mellom genetikk og miljø. Identifikasjon av differensiell umiddelbar tidlig genuttrykk for disse hybrider gir innsikt i hjernekretsene viktige for de givende og aversive egenskapene til etanol.
Etanol og andre narkotikaproblemer har blitt studert i spesifikke gnagermodeller ved bruk av molekylære markører av nevron plastisitet og / eller aktivitet [8-15]. Selvadministrert og eksperimentert administrert etanol resulterer ikke i ekvivalente hjernemetabolske kart, noe som tyder på at spesifikke kretser underbygger armeringseffekter av etanol [8,9].
En nøkkelkomponent, som ennå ikke er grundig undersøkt i alkoholforskning, er undersøkelse av vedvarende og redusert alkoholpreferanseadferd og identifikasjon av nevronkretser som er involvert under disse oppføringene. Målet med dette forsøket var å identifisere hjernegrupper engasjert av vedvarende og redusert alkoholpreferanse. Fordi kronisk alkoholadministrasjon (sammen med andre rusmidler) har vist seg å forårsake hjernens regionale forskjeller i ΔFosB-nivåer, testet vi hypotesen om at disse atferdsfenotypene er representert ved differensiell produksjon av den inducerbare transkripsjonsfaktoren, ΔFosB, i hjerneområder kjent for være involvert i belønning, aversjon og stress [10].
Kroniske stimuli som forårsaker regionale forskjeller i ΔFosB-nivåer, inkluderer misbrukmisbruk (alkohol, kokain, amfetamin, nikotin, morfin og antipsykotika), kronisk stress (spenningsspenning, uforutsigbart fotstøt, elektrokonvulsive anfall) og kompulsiv hjulkjøring [11]. Som en potensiell mediator av langsiktige tilpasninger i hjernen, er det viktig å identifisere den dominerende varianten av FosB (FosB eller FosB) som svar på kronisk etanolbehandling.
Det er flere studier som målt FosB og ΔFosB etter kroniske stimuli, for hvilke det ikke er verifisert at ΔFosB var den dominerende isoformen (som beskrevet nedenfor). Imidlertid er det sterkt bevis på at ΔFosB, ikke FosB, er den dominerende isoformen etter kroniske stimuli [10-12]. En studie av Ryabinin og Wang (1998) viste at i fire alkohol-foretrukne DBA / 2J-mus resulterte fire dager med gjentatte etanolinjeksjoner i robuste økninger i FosB-ekspresjon i følgende hjernegrupper: anterior cortical amygdaloid-kjerne, lateral septum ventral, sentral amygdala , lateral amygdala, lateral hypothalamus, nucleus accumbens skall, bed kjernen av stria terminalis og paraventricular kjernen av thalamus [13]. Resultatene deres identifiserer et etanol-responsivt neurokrets. FosB-uttrykk har også blitt målt i den høye alkoholpreparerende C57BL / 6J-musen under oppkjøp og vedlikehold av etanol-selvadministrasjon under begrensede tilgangsbetingelser. Det var ingen endringer i FosB nivåer under oppkjøp av selvadministrasjon [14]. Imidlertid, etter to uker med begrenset tilgang av etanol selvbehandling, ble FosB-nivåene økt i den sentrale mediale kjernen i amygdala- og Edinger-Westphal-kjernen [15]. Samlet sett identifiserer rapporter nye regioner som engasjerer seg i etanol selvadministrasjon, samt impliserer en rolle for den mesokortikolimbiske banen og utvidet amygdala [16]. Imidlertid er det viktig å merke seg at endringer i ΔFosB-nivåer avhenger av administrasjon av etanol, dose og tidsperiode som er utsatt for behandling eller tidsplan [13-15].
Musestammene som brukes i denne studien gir interessante modeller for sammenligning av vedvarende og redusert alkoholpreferanse og de underliggende mekanismene som er ansvarlige for disse forskjellige alkoholresponsene. Denne studien demonstrerer at mus som viser redusert alkoholpreferanse også viser betydelig plastisitet i belønnings- og stressrelaterte kretser (inkludert Edinger-Westphal-kjerne, ventral tegmental-område, amygdala, nucleus accumbens og cingulate cortex).
Resultater
Effekten av alkoholkonsentrasjoner og abstinensperioder på selvadministrasjon i BxF og BxN-mus
For å demonstrere at varierende etanolkonsentrasjoner og / eller avholdningsperioder endret etterfølgende etanolforbruk, utformet vi fire tidsplaner (grupper) for å måle etanolforbruk (Figur (Figure1a, b).1a, b). Det var fire eksperimentelle grupper for hver hybrid: Høye konsentrasjoner, høye konsentrasjoner med abstinensperioder, lave konsentrasjoner og lave konsentrasjoner med abstinensperioder. Komplett data for etanolpreferanse (Figur (Figure2)2) og forbruk (Figur (Figure3)3) data (for alle grupper og begge genotyper) presenteres som referanse. For å etablere og illustrere de adferdsmessige fenotypene av vedvarende og redusert alkoholpreferanse presenteres 9% etanolpreferanse og forbruksdata i figurene Figures44 og and5.5. Disse oppførselsfenotypene er basert på sammenligning av 9% etanolpreferanse og forbruk fra den første, andre, tredje og fjerde presentasjonen i High Concentrations-gruppene og tilsvarende eksperimentelle dager for lavkoncentrasjonsgruppene. En toveis ANOVA (genotype x tid) av 9% etanolpreferanse og forbruk ble utført. For High Concentrations gruppen, etanol preferanse (Figur (Figure4a)4a) og forbruk (Figur (Figure5a)5a) var større for BxF enn BxN, og BxF utviste vedvarende alkoholpreferanse og forbruk mens BxN utviste redusert alkoholpreferanse og forbruk (ETHANOLPREFERANSE - interaksjon F (3,54) = 4.83, P <0, 01, genotype F (1,54, 24.10) = 0.001, P <3,54, tid F (9.92) = 0.0001, P <1,54; ETANOLKONSUM - interaksjon N / S, genotype F (50.73) = 0.0001, P <3,54, tid F (11.68, 0.0001) = XNUMX, P <XNUMX). For gruppen med høye konsentrasjoner med avholdenhet, preferanse for etanol (figur (Figure4b)4b) og forbruk (figur (Figure5b)5b) var større for BxF enn BxN, og BxF utviste vedvarende alkoholpreferanse og forbruk mens BxN utviste redusert alkoholpreferanse og forbruk (ETANOLPREFERANSE - interaksjon F (3,132) = 15.89, P <0.0001, genotype F (1,132) = 250.43, P <0.0001, tid F (3,132) = 27.48, P <0.0001; ETANOLFORBRUK - interaksjon F (3,132) = 11.35, P <0.0001, genotype F (1,132) = 510.88, P <0.0001, tid F (3,132) = 22.42, P <0.0001). For gruppen med lave konsentrasjoner, etanolpreferanse (figur (Figure4c)4c) og forbruk (Figur (Figure5c)5c) var større for BxF enn BxN, og begge hybrider utviste vedvarende alkoholpreferanse og forbruk (ETHANOLPREFERANSE - interaksjon N / S, genotype F (1,54) = 12.2, P <0.01, tid N / S; ETANOLKONSUM - interaksjon N / S, genotype F (1,54) = 74.83, P <0.0001, tid N / S). For gruppen med lave konsentrasjoner med avholdenhet, preferanse for etanol (figur (Figure4d)4d) og forbruk (Figur (Figure5d)5d) var større for BxF enn BxN, og begge hybridene viste moderat reduksjon i alkoholpreferanse og forbruk (ETHANOL PREFERENSE - interaksjon N / S, genotype F (1,132) = 166.58, P <0.0001, tid N / S; ETHANOL FORBRUK - interaksjon F (3,132) = 3.61, P <0.05, genotype F (1,132) = 480.64, P <0.0001, tid F (3,132) = 7.87, P <0.0001). Oppsummert, i grupper med høye konsentrasjoner (uten avholdenhet), viste BxF vedvarende alkoholpreferanse mens BxN utviste redusert alkoholpreferanse, og i gruppene med lave konsentrasjoner (uten avholdenhet) viste både BxF og B6xN vedvarende alkoholpreferanse. Siden fenotypene av interesse fanges best i grupper uten avholdenhet, er de fokus for resten av studien.
ΔFosB-nivåer
ΔFosB kvantifisering og analyse ble brukt til å identifisere nevrokredsløpet kronisk aktivert under vedvarende og redusert alkoholpreferanse. Det var tre eksperimentelle grupper for hver hybrid: Høye konsentrasjoner, lave konsentrasjoner og vann (kontroll). ΔFosB-data presenteres som prosent av ΔFosB-positive nevroner [(# avFosB positive nevroner) / (# avFosB positive nevroner + # av Nissl-positive nevroner)] (Tabell (Table1).1). Tidligere arbeid har vist at etanolopplevelse kan indusere neurodegenerasjon [17]. Derfor undersøkte vi nevrale tall i denne studien og rapporterte ingen signifikant forskjell basert på genotype eller gruppe for hjernegruppene kvantifisert i denne studien. Følgende tre analyser av ΔFosB-data ble utført: 1) treveis ANOVA (genotype x gruppe x hjernegruppe), 2) toveis ANOVA (hjernegruppe x-gruppe) for hver genotype og 3) korrelasjonsmatriser ble utviklet for å kartlegge korrelasjon nettverk.
Gjentatte tiltak treveis ANOVA (genotype x gruppe x hjerneområde) avslørte en genotype x hjerneområdeinteraksjon [F (15,375) = 2.01, P <.05], en gruppe x hjerneområdet interaksjon [F (15.375) = 1.99, P <0.01], og en hovedeffekt av hjerneområdet [F (15,375) = 43.36, P <.000]. Gjentatte tiltak toveis ANOVA (hjerneområde x gruppe) for hver genotype viste at det var en hovedeffekt av gruppe og hjerneområde for både BxF og BxN [BxF - F (2,374) = 11.79, P <.0001, hovedeffekt av gruppe; F (15,374) = 25.64, P <.0001, hovedeffekt av hjerneområdet; BxN - F (2,360) = 43.38, P <.0001, hovedeffekt av gruppe; F (15,360) = 23.73, P <.0001, hovedeffekt av genotype]. Post-hoc-analyse avslørte seks signifikante gruppeforskjeller for BxN (figur (Figure6a-c).6ac). Prosent ΔFosB nivåer var høyere i gruppen med lav konsentrasjon enn i Vanngruppen i La, CeC / CeL, EW og VTA. Prosent ΔFosB var høyere i High Concentrations-gruppen enn i Vanngruppen i CeMPV. Prosent ΔFosB var høyere i gruppen Low Concentrations enn i High Concentrations-gruppen i EW. ΔFosB-data for alle andre hjernegrupper som er kvantifisert, presenteres i tabell Table1.1. Pearsons r-korrelasjonsanalyse ble brukt til å bestemme om% av ΔFosB-positive nevroner i en gitt hjerneområde var korrelert med etanolforbruk eller preferanse. Etanolforbruk og preferanse viste en signifikant positiv korrelasjon med% ΔFosB i EW og VTA for BxN mus (ETHANOL FORBRUK - EW r = 0.85; VTA r = 0.85; ETHANOL FORETRUKN - EW r = 0.83, VTA r = 0.88; p for alle).
Det komplekse forholdet mellom ΔFosB ekspresjon, genotype, hjernegruppe og etanolforbruk ble ytterligere utforsket ved hjelp av prinsippkomponentanalyse og hierarkisk clustering. Hovedkomponentanalysen viste at størstedelen av variabiliteten (~ 80%) i dataene var representert av 5-komponenter. Unsupervised hierarkisk clustering (gruppert av individer og hjernegrupper) ble deretter utført og bestilt ved å bruke den første hovedkomponenten (Figur (Figure7).7). Den enkelte clustering viste sterk, men ikke perfekt, mønster av gruppering basert på etanolforbruk, uavhengig av genotype. Mange av de etanol-naive musene samlet seg sammen og viste mindre samlet ΔFosB enn gjennomsnittet og mange av musene som viste vedvarende alkoholpreferanse gruppert sammen og viste mer samlet ΔFosB enn gjennomsnittet. Disse to klyngene var de mest divergerende. De tre klyngene i mellom representerte en større enn, mindre enn og gjennomsnittlig blanding av ΔFosB-verdier og etanol-drikkfenotyper.
Diskusjon
Distinkt selvbetjeningsadferd i alkohol ble observert ved sammenligning av to F1 hybridstammer av mus: BxN viser redusert alkoholpreferanse etter erfaring med høye konsentrasjoner av alkohol og perioder med avholdenhet, mens BxF viser vedvarende alkoholpreferanse. BxF-modeller stabile, høyt forbruk (vedvarende alkoholpreferanse) og BxN-modeller moderat drikking (redusert alkoholpreferanse). Neuronal plastisitet (eller aktivitet, målt ved ΔFosB-nivåer) var forskjellig avhengig av etanolopplevelse, og understøttet ytterligere en underliggende rolle av spesifikke neuronalkretser i vedvarende og redusert alkoholpreferanse.
For den høye alkoholkonsumstammen, C57BL / 6, etanolpreferanse og -forbruk er svært avhengig av initial etanolkonsentrasjon, lengde av abstinens og understamme (C57BL / 6Cr eller C57BL / 6J) [7,18]. Vi fant at etanolpreferansen og forbruket sett i BxF-mus var konsekvent høyere (og mer stabile enn i BxN) i de fire forskjellige tidsplaner som ble testet. Den moderat høye etanolinnstillingen og forbruket i BxN ble bare opprettholdt med en tidsplan for kronisk drikking (lave konsentrasjoner uten abstinens), mens reduksjoner i preferanse og forbruk ble observert med alle andre testede kroniske drikkingstider. BxN redusert alkoholpreferanse tilbyr en ny dyremodell hvor erfaring (gjentatt presentasjon av etanol etter erfaring med flere høye etanolkonsentrasjoner og / eller flere korte perioder med avholdenhet) reduserer deres respons på en tidligere høyst foretrukket etanolkonsentrasjon.
Selvadministrert og eksperimentert administrert etanol produserer forskjellige metabolitter i hjernen, noe som tyder på at spesifikke kretser ligger under de forsterkende effektene av etanol [8,9]. Vi testet hypotesen om at de vedvarende og reduserte alkoholpreferansefaktorene er representert ved differensiell produksjon av den inducerbare transkripsjonsfaktoren, ΔFosB, i hjernegrupper som er kjent for å være involvert i belønning, aversjon og stress. ΔFosB er en transkripsjonsfaktor med en unik langsiktig stabilitet og desensibiliserer ikke til stimuli som c-Fos gjør, heller akkumuleres det under kroniske behandlinger. Økninger i ΔFosB skyldes økt nevronaktivitet og antas å reflektere langvarig neuronal plastisitet. Vi fant at prosenten av ΔFosB positive nevroner i hjernegruppene avhenger av genotype (BxF og BxN) og gruppe (Vannkontroll, lave konsentrasjoner og høye konsentrasjoner).
Feller BxN, post-hoc analyse viste at frivillig etanolforbruk resulterte i økt ΔFosB i EW-kjernen, VTA og amygdala. Dette indikerer økt nevonal plastisitet i hjernegrupper som er kjent for å være involvert i etanol, belønning og stressresponser. BxN-mus i gruppen High Concentrations (redusert alkoholpreferanse) har redusert nevonal plasticitet i EW, noe som tyder på at disse nevronene reagerer på alkoholinntaket med en opplevelseavhengig plastisitet. I gruppen med lave konsentrasjoner (utvist vedvarende alkoholpreferanse) er nevronplastisitet i EW større enn i konsentrasjons- og vannkontrollgruppene med høy konsentrasjon. Selv om det ble utført med ulike etanoldryperparadigmer og genetiske musemodeller, er våre funn i EW av BxN-musene enige med tidligere etanolforbrukerstudier [14,15]. Den ikke-preganglioniske EW har nylig vært karakterisert som inneholdende periokulomotoriske urokortin (Ucn) -holdige neuroner [19]. Ucn1 er et corticotropinfrigivelsesfaktor (CRF) -lignende peptid som binder CRF1- og CRF2-reseptorer. Tidligere studier ved bruk av genetiske, farmakologiske og lesjonsmetoder har vist at Ucn1 er involvert i regulering av alkoholforbruk [19-22]. Ther er en kjent genetisk predisposisjon for høyt alkoholinntak hos gnagere som er korrelert med høyere basale nivåer av Ucn1 i EW og LSi [23]. Dermed var mangelen på post-hoc-betydning som vi observerte i EW for høy-alkohol-foretrukket og konsumerende BxF-mus uventet. Kanskje dette skyldes den litt forhøyede prosent ΔFosB nivåer i BxF vanngruppen sammenlignet med BxN vann gruppe. Faktisk var prosentene ΔFosB-nivåer for alle mus som utviser vedvarende alkoholpreferanse (BxF High Concentrations Group, BxF Low Concentrations Group og BxN Low Concentrations-gruppen) ganske like.
For BxN økte etanolforbruket i gruppen Low Concentrations neuronal plasticitet i VTA (større enn i konsentrasjons- og vannkontrollgruppene). Ethanol preferanse og forbruk var også større for gruppen Low Concentrations. Mangelen på post-hoc-betydning som vi observert i VTA for høy alkohol som foretrekker og konsumerer BxF-mus, var uventet og kan skyldes noe høyere basale nivåer av ΔFosB i vannkontrollgruppen. Prosent ΔFosB nivåer var litt forhøyet i BxF vanngruppen sammenlignet med BxN vann gruppe, mens prosentandelen AVFosB nivåer var ganske lik for alle mus som utviser vedvarende alkoholpreferanse (BxF High Concentrations Group, BxF Low Concentrations Group og BxN Low Concentrations Group) . VTA dopaminsystemet spiller en viktig rolle i å formidle armeringseffekter av etanol og deltar i mange gjensidige forbindelser som er viktige for etanol og belønningsrelatert atferd [24-26]. I tillegg prosjekter VTA til amygdala- og EW-kjernen. Rotter har vist seg å selv administrere etanol direkte inn i VTA [27]. Også økningen av etanol øker brennhastigheten for dopaminerge neuroner i VTA [28,29]. Økt avfyringshastighet kan knyttes til ΔFosB-induksjonen i VTA som vi observerte etter kronisk frivillig etanoladministrasjon i BxN.
Alkoholavhengighet induserer langsiktige nevroadaptasjoner, noe som resulterer i negative følelsesmessige tilstander; En viktig mekanisme i negativ forsterkning er corticotropin-releasing factor (CRF) signalering innenfor amygdalaen [30]. Farmakologiske manipulasjoner av nevroner i CeA har målrettet GABA, CRF, opioid, serotonin, dynorfin og norepinefrin reseptorer [25,31-34]. GABA-antagonister, så vel som CRF-antagonister, reduserer etanolforbruk [32,33,35]. Lesjoner av CeA reduserer kontinuerlig tilgang frivillig etanol forbruk [36]. Våre funn støtter videre en rolle for CeA i reguleringen alkohol drikkeradferd. GABAergiske nevroner i den sentrale amygdala danner en heterogen populasjon hvis forbindelser ser ut som relatert til deres peptidinnhold. Disse GABAergic nevronene integrerer utgangsaktiviteten til CeA. Som omtalt i [Wee og Koob (2010]), sEveral studier har identifisert en rolle for dynorfin og kappa opioid reseptorer i vedlikehold og eskalering av etanolinntake [37]. Mer nylig har Walker et al vist at k-opioidreseptorantagonisten, nor-binaltorphimin, i den utvidede amygdala reduserer selektivt etanol-selvadministrasjon i avhengige dyr [38]. Kappa opioid reseptor signalering forblir en viktig interesse for forskning ved krysset mellom stress, belønning og aversjon. Det har også blitt påvist at stress-indusert etanol selvadministrasjon er mediert av kappa opioid-reseptor signalering [39]. Den sentrale CeA kan deles inn i latero-kapsulær (CeL / CeC) og medial posterior ventral. GABAergiske nevroner av CeL / CeC mottar dopaminerge innervasjoner fra VTA; Som tidligere nevnt, aktiveres disse nevronene etter akutt etanoladministrasjon og viser økte FosB-mus som viser vedvarende alkoholpreferanse. Se også Mc [Brud (2002]) for en utmerket vurdering på CeA og effekten av alkohol [40]. I vår studie viste BxN-mus med forsinket alkoholpreferanse (Low Concentrations group) økt nevronal plastisitet i CeC / CeL- og La- og BxN-musen med redusert alkoholpreferanse (High Concentrations group), økt nevonal plastisitet i CeMPV. Disse resultatene antyder at spesifikk etanolopplevelse involverer plastisitet i GABAergic nevroner i amygdala. Med disse dataene, sammen med tilsvarende endringer i nevonal plastisitet i VTA og EW, foreslår vi at denne kretsen gjennomgår betydelig plastisitet under vedvarende alkoholpreferansevilkår.
Tidligere undersøkelser har vist at C57BL / 6J-mus kan oppnå høyt blodalkoholnivå ved å drikke to flasker, men disse alkoholnivåene i blodet opprettholdes ikke, og ofte oppfyller drikket ikke kriterier for farmakologisk motivasjon fremsatt av Dole og Gentry (1984) [41,42]. BxN-mus som viser redusert alkoholpreferanse forbrukes mindre enn det ville forventes fra en typisk C57BL / 6J-mus [1]. Derfor, selv om vi ikke tok blodalkoholprøver, er det ikke sannsynlig at BxN-mus som viser redusert alkoholpreferanse oppnådde vedvarende farmakologisk relevante blodalkoholnivåer, noe som tyder på høyt blodalkoholkonsentrasjoner av, er ikke nødvendig for å indusere plastisitet i disse hjerneområdene. Det er viktig å merke seg at en svært signifikant effekt av gruppen også finnes i BxF, selv om post-hoc-resultater (korrigert for flere sammenligninger) for BxF hjernegrupper ikke indikerte signifikante endringer i prosent av ΔFosB positive nevroner for en hvilken som helst region etter kronisk etanolforbruk med disse forskjellige tidsplanene.
For å visualisere potensielle forhold mellom variabler ble hierarkisk clustering utført. Varmekartet i den resulterende analysen viser en generell trend mellom ΔFosB nivåer og etanolforbruk uavhengig av genotype. Høyere ΔFosB-nivåer var assosiert med høyt drikking og lavere FFosB-nivåer var assosiert med kontrolldyr; Forholdets styrke var imidlertid ikke tilstrekkelig til nøyaktig å forutsi drikkfenotyper basert utelukkende på FosB-nivåer.
Konklusjoner
Distinkt selvbetjeningsadferd i alkohol ble observert med to F1 hybridstammer av mus: BxN viser redusert alkoholpreferanse etter erfaring med høye konsentrasjoner av alkohol, mens BxF viser vedvarende alkoholpreferanse. BxF-modeller stabile, høyt forbruk (vedvarende alkoholpreferanse) og BxN-modeller moderat drikking (redusert alkoholpreferanse). Endringer i neuronal plastisitet (målt ved ΔFosB-nivåer) var erfaringsavhengige, samt hjernegruppe- og genotypespesifikke. Videre definerer nevronkretsene motiverende aspekter ved etanolforbruk. Disse resultatene viser at endringen av en foreldringslinje i hybridmus resulterer i endringer i mønstre av alkoholforbruk og markerte endringer i mønstre av ΔFosB-uttrykk, noe som tyder på at forskjellige hjernenettverk er engasjert i disse forskjellige hybridmusene.
Metoder
etikk
Denne studien ble utført i henhold til anbefalingene i veiledningen for pleie og bruk av laboratoriedyr i de nasjonale institusjonene for helse. Protokollen ble godkjent av Institutional Animal Care and Use Committee ved University of Texas i Austin (AUP 2010-00028). All operasjon ble utført under natriumpentobarbitalbedøvelse, og alle anstrengelser ble gjort for å minimere lidelse.
dyr
Studier ble utført ved bruk av intercross kvinnelige F1 hybridmus avledet fra C57BL / 6J og enten FVB / NJ eller NZB / B1NJ-mus (BxF F1 og BxN F1, maternell stamme x paternal stamme). C57BL / 6J, FVB / NJ og NZB / B1NJ oppdrettere ble kjøpt fra The Jackson Laboratory (Bar Harbor, ME) og parret i 7-8 uker. Avkom ble avvist til isoseksuelle grupper av hver av genotypene (BxF F1, BxN F1). Vi testet kun kvinnelige mus for å lette sammenligningen med tidligere innsamlede data [1,5,6]. Mus ble plassert i standardbur med mat og vann ad libitum. Kolonihallen og testrommet var på et 12 h lys: 12 h mørk syklus (lyser på 07: 00).
To-flaske valg etanol preferanse test
Den to flaskevalgsmetoden ble brukt til å bestemme frivillige etanol selvadministrasjonsmønstre i kvinnelige BxF- og BxN-mus [1,6]. F1 hybrid-kvinnelige mus (alder 63 dager) ble individuelt innkapslet i standardburar mens de ble vant i en uke til flasker med glidelåsrør som inneholdt vann før innføring av en etanolløsning. Etter tillatelse hadde mus tilgang til to identiske flasker: en som inneholder vann og den andre som inneholder en etanolløsning. Rørposisjoner ble endret daglig for å kontrollere posisjonspreferanser. For å ta hensyn til potensielt utslipp og fordampning ble gjennomsnittlig vekt uttømt fra rør i kontrollburer uten mus, trukket fra individuelle drikkeverdier hver dag. Mus ble veid hver 4-dag i hele forsøket. Alt væskekonsum ble målt daglig gjennom eksperimentet. Mengden etanolforbruket og etanolpreferanse ble beregnet for hver mus, og disse verdiene ble gjennomsnittet for hver konsentrasjon av etanol. Effekten av alkoholkonsentrasjoner og abstinensperioder på selvadministrasjon i BxF- og BxN-mus ble demonstrert ved å utpeke en eksperimentell gruppe med tilgang til høye konsentrasjoner (økende tilgang til 3-35% etanolløsninger, etterfulgt av 3 gjentatte sykluser av 9, 18, og 27% etanol, som avsluttes med en endelig presentasjon av 9% etanol) og en annen gruppe med lave konsentrasjoner (eskalerende tilgang til 3-9% etanol, med resten av forsøket utført med tilgang til 9% etanol). Hver av disse gruppene hadde en undergruppe som opplevde eller ikke opplevde tre ukes perioder med avholdenhet. Kontrollmus opplevde lignende forhold samtidig som eksperimentelle mus, men ble bare tilbudt en flaske vann.
Totalt var det fem grupper for hver hybrid: Vann (n = 14-16), høye konsentrasjoner (n = 10), høye konsentrasjoner med abstinensperioder (n = 20), lave konsentrasjoner (n = 10) og lave konsentrasjoner med abstinensperioder (n = 20). Se figur Figure11 for detaljerte to flaskevalg gruppeplaner.
ΔFosB immunhistokjemi og kvantifisering
ΔFosB immunhistokjemi (IHC) ble målt i 16 hjerneområder fra mus som opplevde 72 dagers kontinuerlig tilgang til enten vann (kontroll) eller vann og alkohol [høye konsentrasjoner og lave konsentrasjoner]. Effekten av høye konsentrasjoner på etanol preferanse og forbruk var mye større enn effekten av avholdenhet; derfor ble grupper som opplevde perioder med avholdenhet ikke inkludert i ΔFosB IHC-målinger. Videre ble eksperimentet utført utover det første utseendet av vedvarende eller redusert alkoholpreferanse for å vise atferdsmessige fenotyper er stabile med gjentatte sykluser av etanolkonsentrasjonsendringer for å undersøke effekten av kronisk etanolforbruk. Fire til åtte timer etter fjerning av alkohol på den 73. dag i eksperimentet ble mus dypt bedøvd (175 mg / kg natriumpentobarbital) og perfusert intrakardielt med 20 ml 0.01 M fosfatbufret saltvann (PBS), etterfulgt av 100 ml 4% paraformaldehyd i PBS. Hjerner ble fjernet, etterfiksert i 4% paraformaldehyd ved 4 ° C, innebygd i 3% agarose, snittet (50 um, koronal) på et vibratom, plassert i kryobeskyttende middel (30% sukrose, 30% etylenglykol og 0.1% polyvinyl pyrrolidon i PBS) over natten ved 4 ° C, og lagret ved -20 ° C til de ble behandlet for IHC. Tine seksjoner ble vasket med PBS, behandlet med 0.3% H2O2 og inkubert i en time i 3% normalt geiteserum for å minimere ikke-spesifikk merking. Vevssnitt ble deretter inkubert over natten ved 4 ° C i 3% normalt geiteserum og anti-FosB (SC-48, 1: 5000 fortynning, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA). Seksjoner ble vasket, inkubert i biotinylert geit anti-kanin Ig (1: 200 fortynning, Vector Laboratories, Burlingame, CA) i en time, vasket og inkubert i avidin-biotin kompleks (1: 200 fortynning, Elite kit-Vector Laboratories) . Peroksidaseaktivitet ble visualisert ved reaksjon med 0.05% diaminobenzidin (inneholdende 0.015% H2O2). Vevseksjoner ble Nissl motfargede (ved bruk av metylenblått / azurblå II). Lysbildene ble kodet for blindtelling. ΔFosB-IR-neuroner ble talt ved 50X (olje) forstørrelse ved hjelp av den optiske fraksjonsmetoden og StereoInvestigator-programvare. Samplingsparameterinformasjon: Tellerammen (50um x 50um x 10um) var den samme for alle regioner kvantifisert; Gridstørrelsen ble imidlertid bestemt for hver hjernegion for å sikre at totale bilaterale celleverdier ville være lik 100-300 for å oppnå en variasjonskoeffisient mindre enn 0.1. Data ble beregnet som prosent av ΔFosB positive kjerner (antall ΔFosB positive kjerner / antall neuroner) for hver region.
FosB-antistoffet som ble brukt i denne studien (SC-48, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA) ble reist mot en intern region av FosB og gjenkjenner både FosB og FosB. Selv om dette antistoffet gjenkjenner både FosB og FosB, vil de immunopositive nevene som er kvantifisert i denne studien bli referert til som FosB positive nevroner siden det har blitt vist at rusmidler, inkludert alkohol, spesielt induserer ΔFosB, ikke FosB, i nevroner. Perrotti et al. ([2008]) målt ΔFosB-induksjon (som svar på kronisk administrasjon av rusmidler, inkludert alkohol) ved bruk av to antistoffer: en som gjenkjenner FosB og FosB (SC-48) og en selektiv for FosB (ikke kommersielt tilgjengelig) og funnet at for alle medikamenter studert, er immunreaktiviteten observert ved bruk av FosB-antistoffet (SC-48) på grunn av AFosB, siden de ikke oppdaget noen immunoreaktive neuroner ved bruk av et antistoff selektivt for FosB i full lengde [10]. I tillegg er ΔFosB kjent for å bli indusert i hjernegruppe- og celletype-spesifikk måte, ved ulike kroniske behandlinger og gode vurderinger på dette emnet er tilgjengelige [11,43,44].
Forkortelser og plasseringer av nevroanatomiske strukturer
Il - infralimbisk cortex (+1.70 mm); Cg1 - cingulate cortex 1 (+1.1 mm); Cg2 - cingulate cortex 1 (+1.10 mm); NAcc-kjerne - nucleus accumbens core (+1.10 mm); NAcc shell - nucleus accumbens shell (+1.10 mm); LSi - mellomliggende septum (+1.10 mm); La - lateral amygdala (-1.22 mm); Bla - basolateral amygdala (-1.22 mm); CeC / CeL - sentral kapsel og sentral lateral amygdala (-1.22 mm); CeMPV - medial posterioventral del av den sentrale kjernen i amygdalaen (-1.22 mm); PAG - periaquaductal grey (-3.64 mm); EW - Edinger-Westphal kjerne (-3.64 mm); VTA - ventral tegmentalt område (-3.64 mm); DR - dorsal raphe (- 4.60 mm); PBN - parabrakial kjerne (-5.2 mm); NTS - nucleus tractus solitarius (−6.96 mm). Musens hjerne i stereotaksiske koordinater[45] ble brukt til å underordne en til tre seksjoner for kvantifisering av hver hjerneområde.
Statistiske prosedyrer
Data er rapportert som gjennomsnittlig ± SEM, bortsett fra hvor annet er angitt. Dataene ble normalt fordelt. Statistikken ble utført ved hjelp av Statistica versjon 6 (StatSoft, Tulsa, OK, USA) og GraphPad Prism versjon 4.00 (GraphPad Software, San Diego, CA, USA). Gjentatte tiltak for toveis ANOVA ble utført for etanolforbruk og preferanse data for å vurdere forskjeller mellom grupper. To og treveis ANOVA ble utført for ΔFosB-data for å evaluere interaksjoner og hovedvirkninger for gruppen (høye konsentrasjoner, lave konsentrasjoner og vann), hjernegruppe og genotype. Bonferronis korreksjon for flere sammenligninger og Bonferronis post-hoc ble utført når det var hensiktsmessig. Spesielt har vi antydet at stress- og belønningskretsene ville ha økt FosB hos mus som viste redusert alkoholpreferanse. For hvert hybridkors ble Pearson's r brukt til å identifisere tilstedeværelsen av signifikante korrelasjoner mellom FosB-nivåer og etanolpreferanse og forbruk i etanol-erfarne mus.
Hierarkisk clustering ble utført for å visualisere hvordan dataene varierer og vurdere hvordan datagruppen sammen. Imputerte medianverdier erstattet manglende prosent av ΔFosB-data, som ikke oversteg 15% av dataene. Selv om det er større grad av usikkerhet enn om de anslåtte verdiene faktisk hadde blitt observert, krever hierarkisk klynganalyse fullstendig medlemskap eller fullstendig sletting for case-wise sammenligninger. Hierarkisk clustering ble utført ved hjelp av Wards metode og de resulterende klyngene ble bestilt av den første prinsippkomponenten av en hovedkomponentanalyse (JMP®, Versjon 8, SAS Institute Inc., Cary, NC). For vann- og etanol-erfarne grupper ble ΔFosB-dataene for hver hjernegion omdannet z-score, og hovedkomponentanalyser ble utført for å bestemme antall klynger. Dataene ble deretter klynget av hjernegrupper og individer ved hjelp av overvåket hierarkisk clusteringsanalyse.
Forfatterens bidrag
ARO, YAB, RAH, TAJ bidro til utformingen av studien. ARO kjøpte dataene. ARO, IP, RDM analyserte dataene. ARO, RDM, IP, TAJ, YAB og RAH var involvert i utarbeidelse og revidering av manuskriptet. Alle forfattere leser og godkjente det endelige manuskriptet.
Takk til
Vi vil gjerne takke Drs. Jody Mayfield og Colleen McClung for nyttige diskusjoner og Marni Martinez, Jennifer Stokes, Michelle Foshat, Jose Cienfuegos, Jamie Seymour og Darshan Pandya for teknisk assistanse. Denne undersøkelsen ble støttet av Integrative Neuroscience Initiative på Alkoholism Consortium Grant AA13520, og National Institute on Alcohol Abuse and Alcoholism Grants AA06399-S og AA16424.
Referanser
- Garcia-Andrade C, Wall TL, Ehlers CL. Firewater myten og respons på alkohol i Mission indianere. Am J Psykiatri. 1997;154: 983-988. [PubMed]
- Schuckit MA, Smith TL, Kalmijn J. Forsøk på tvers av undergrupper om nivået på respons på alkohol som risikofaktor for alkoholforstyrrelser: en høyskolepopulasjon av kvinner og latinos. Alkohol Clin Exp Res. 2004;10: 1499-1508. [PubMed]
- Belknap JK, Crabbe JC, Young ER. Frivillig forbruk av etanol i 15 innavlede musestammer. Psykofarmakologi. 1993;112: 503-510. doi: 10.1007 / BF02244901. [PubMed] [Kors Ref]
- Blednov YA, Metten P, Finn DA, Rhodes JS, Bergeson SE, Harris RA, Crabbe JC. Hybrid C57BL / 6J x FVB / NJ mus drikker mer alkohol enn C57BL / 6J mus. Alkohol Clin Exp Res. 2005;29:1949–1958. doi: 10.1097/01.alc.0000187605.91468.17. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Blednov YA, Ozburn AR, Walker D, Ahmed S, Belknap JK. et al. Hybridmus som genetiske modeller av høyt alkoholforbruk. Behav Genet. 2010;40:93–110. doi: 10.1007/s10519-009-9298-4. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Ozburn AR, Harris RA, Blednov YA. Bevegelsesforskjeller mellom C57BL / 6JxFVB / NJ og C57BL / 6JxNZB / B1NJ F1 hybridmus: forhold til kontroll av etanolinntak. Behav Genet. 2010;40:551–563. doi: 10.1007/s10519-010-9357-x. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Melendez RI, Middaugh LD, Kalivas PW. Utvikling av alkoholavhengighet og eskaleringseffekt i C57BL / 6J. Alkohol Clin Exp Res. 2006;30:2017–2025. doi: 10.1111/j.1530-0277.2006.00248.x. [PubMed] [Kors Ref]
- Porrino LJ, Whitlow CT, Samson HH. Effekter av selvadministrasjon av etanol og etanol / sukrose på nivåer av lokal cerebral glukoseutnyttelse hos rotter. Brain Res. 1998;791(1-2): 18-26. [PubMed]
- Williams-Hemby L, Porrino LJ. Lav og moderat doser etanol produserer tydelige mønstre av cerebrale metabolske forandringer hos rotter. Alkohol Clin Exp Res. 1994;18(4):982–988. doi: 10.1111/j.1530-0277.1994.tb00070.x. [PubMed] [Kors Ref]
- Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Distinkte mønstre av DeltaFosB induksjon i hjernen av misbruk. Synapse. 2008;62(5):358–369. doi: 10.1002/syn.20500. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: en molekylær bryter for langsiktig tilpasning i hjernen. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
- Perrotti LI, Bolaños CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB akkumuleres i en GABAergic cellepopulasjon i den bakre halen av det ventrale tegmentale området etter psykostimulerende behandling. Eur J Neurosci. 2005;21:2817–2824. doi: 10.1111/j.1460-9568.2005.04110.x. [PubMed] [Kors Ref]
- Ryabinin AE, Wang YM. Gjentatt alkoholadministrasjon påvirker differensielt c-Fos og FosB protein immunoreaktivitet i DBA / 2J mus. Alkohol Clin Exp Res. 1998;22:1646–1654. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03962.x. [PubMed] [Kors Ref]
- Ryabinin AE, Bachtell RK, Freeman P, Risinger FO. ITF-uttrykk i musens hjerne under oppkjøpet av alkohol selvadministrasjon. Brain Res. 2001;890:192–195. doi: 10.1016/S0006-8993(00)03251-0. [PubMed] [Kors Ref]
- Bachtell RK, Wang YM, Freeman P, Risinger FO, Ryabinin AE. Alkoholdrikk produserer hjernegruppe-selektive endringer i ekspresjon av inducerbare transkripsjonsfaktorer. Brain Res. 1999;847(2):157–165. doi: 10.1016/S0006-8993(99)02019-3. [PubMed] [Kors Ref]
- Kalivas PW. Hvordan bestemmer vi hvilke narkotika-induserte nevroloplastiske endringer som er viktige? Nat Neurosci. 2005;8:1440–1441. doi: 10.1038/nn1105-1440. [PubMed] [Kors Ref]
- Crews FT, Nixon K. Mekanismer for neurodegenerasjon og regenerering i alkoholisme. Alkohol. 2009;44: 115-127. doi: 10.1093 / alcalc / agn079. [Kors Ref]
- Khisti RT, Wolstenholme J, Shelton KL, Miles MF. Karakterisering av etanol-depriveringseffekten i understrøk av C57BL / 6-mus. Alkohol. 2006;40: 119-126. doi: 10.1016 / j.alcohol.2006.12.003. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Weitemier AZ, Tsivkovskaia NO, Ryabinin AE. Urocortin 1-fordeling i musens hjerne er belastningsavhengig. Neuroscience. 2005;132: 729-740. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2004.12.047. [PubMed] [Kors Ref]
- Ryabinin AE. Lesjoner av Edinger-Westphal-kjernen i C57BL / 6J-mus forstyrrer etanol-indusert hypotermi og etanolforbruk. Eur J Neurosci. 2004;20:1613–1623. doi: 10.1111/j.1460-9568.2004.03594.x. [PubMed] [Kors Ref]
- Ryabinin AE, Yoneyama N, Tanchuck MA, Mark GP, Finn DA. Urocortin 1 mikroinjeksjon i musens laterale septum regulerer oppkjøpet og uttrykket av alkoholforbruk. Neuroscience. 2008;151: 780-790. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2007.11.014. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Turek VF, Tsivkovskaia NO, Hyytia P, Harding S, Lê AD, Ryabinin AE. Urocortin 1 uttrykk i fem par rotter linjer selektivt avlet for forskjeller i alkohol drikking. Psykofarmakologi. 2005;181:511–517. doi: 10.1007/s00213-005-0011-x. [PubMed] [Kors Ref]
- Ryabinin AE, Weitemier AZ. Urokortin 1-neurokretsen: etanol-følsomhet og potensial involvering i alkoholforbruk. Brain Res Rev. 2006;52: 368-380. doi: 10.1016 / j.brainresrev.2006.04.007. [PubMed] [Kors Ref]
- Samson HH, Tolliver GA, Haraguchi M, Hodge CW. Alkohol selvadministrasjon: rolle mesolimbisk dopamin. Ann NY Acad Sci. 1992;654:242–253. doi: 10.1111/j.1749-6632.1992.tb25971.x. [PubMed] [Kors Ref]
- McBride WJ, Li TK. Dyrmodeller av alkoholisme: neurobiologi av høy alkoholdrikkeoppførsel hos gnagere. Crit Rev Neurobiol. 1998;12:339–369. doi: 10.1615/CritRevNeurobiol.v12.i4.40. [PubMed] [Kors Ref]
- Koob GF, Roberts AJ, Schulteis G, Parsons LH, Heyser CJ, Hyytiä P, Merlo-Pich E, Weiss F. Neurokretsmål i etanolbelønning og avhengighet. Alkohol Clin Exp Res. 1998;22:3–9. doi: 10.1111/j.1530-0277.1998.tb03611.x. [PubMed] [Kors Ref]
- Rodd ZA, Melendez RI, Bell RL, Kuc KA, Zhang Y, Murphy JM, McBride WJ. Intrakranial selvadministrasjon av etanol i det ventrale tegmentale området av mannlige Wistar-rotter: bevis for involvering av dopaminneuroner. J Neurosci. 2004;24:1050–1057. doi: 10.1523/JNEUROSCI.1319-03.2004. [PubMed] [Kors Ref]
- Gessa GL, Muntoni F, Collu M, Vargiu L, Mereu G. Lette doser etanol aktiverer dopaminerge neuroner i det ventrale tegmentale området. Brain Res. 1985;348:201–203. doi: 10.1016/0006-8993(85)90381-6. [PubMed] [Kors Ref]
- Brodie MS, Shefner SA, Dunwiddie TV. Etanol øker brennhastigheten for dopaminneuroner i det rotte ventrale tegmentale området in vitro. Brain Res. 1990;508:65–69. doi: 10.1016/0006-8993(90)91118-Z. [PubMed] [Kors Ref]
- Heilig M, Koob GF. En nøkkelrolle for kortikotropinfrigivende faktor i alkoholavhengighet. Trender Neurosci. 2007;30(8):399–406. doi: 10.1016/j.tins.2007.06.006. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Dyr W, Kostowski W. Bevis for at amygdala er involvert i hemmerende virkninger av 5-HT3 reseptorantagonister på alkoholdrikking hos rotter. Alkohol. 1995;12:387–391. doi: 10.1016/0741-8329(95)00023-K. [PubMed] [Kors Ref]
- Gilpin NW, Richardson HN, Koob GF. Effekter av CRF1-reseptor og opioidreceptorantagonister på avhengighetsinducerte økninger i alkoholdrikk av alkoholforetrukne (P) rotter. Alkohol Clin Exp Res. 2008;32:1535–1542. doi: 10.1111/j.1530-0277.2008.00745.x. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Hyytiä P, Koob GF. GABAA-reseptorantagonisme i den utvidede amygdala reduserer etanol selvadministrasjon hos rotter. Eur J Pharmacol. 1995;283:151–159. doi: 10.1016/0014-2999(95)00314-B. [PubMed] [Kors Ref]
- Roberto M, Madamba SG, Moore SD, Tallent MK, Siggins GR. Etanol øker GABAergisk overføring på både pre- og postsynaptiske steder i rotte-sentrale amygdala-neuroner. Proc Natl Acad Sci. 2003;100: 2053-2058. doi: 10.1073 / pnas.0437926100. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Roberts AJ, Cole M, Koob GF. Intra-amygdala muscimol reduserer operant etanol selvtillit i avhengige rotter. Alkohol Clin Exp Res. 1996;20:1289–1298. doi: 10.1111/j.1530-0277.1996.tb01125.x. [PubMed] [Kors Ref]
- Möller C, Wiklund L, Sommer W, Thorsell A, Heilig M. Redusert eksperimentell angst og frivillig etanolforbruk hos rotter etter sentrale, men ikke basolaterale amygdala lesjoner. Brain Res. 1997;760:94–101. doi: 10.1016/S0006-8993(97)00308-9. [PubMed] [Kors Ref]
- Wee S, Koob GF. Rollen av dynorfin-kappa opioid-systemet i de forsterkende effektene av narkotika av misbruk. Psykofarmakologi (Berl) 2010;210:121–135. doi: 10.1007/s00213-010-1825-8. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Walker BM, Valdez GR, McLaughlin JP, Bakalkin G. Målrettet dynorfin / kappa opioidreseptorsystemer for å behandle alkoholmisbruk og avhengighet. Alkohol. 2012;46: 359-370. doi: 10.1016 / j.alcohol.2011.10.006. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Sperling RE, Gomes SM, Sypek EI, Carey AN, McLaughlin JP. Endogen kappa-opioid-formidling av stress-indusert potensiering av etanol-betinget stedpreferanse og selvadministrasjon. Psykofarmakologi (Berl) 2010;210:199–209. doi: 10.1007/s00213-010-1844-5. [PubMed] [Kors Ref]
- McBride WJ. Sentralkjerne av amygdala og effekten av alkohol og alkoholholdig atferd hos gnagere. Pharmacol Biochem Behav. 2002;71:509–515. doi: 10.1016/S0091-3057(01)00680-3. [PubMed] [Kors Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Mot en analog av alkoholisme hos mus: Skalfaktorer i modellen. Proc Natl Acad Sci. 1984;81: 3543-3546. doi: 10.1073 / pnas.81.11.3543. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Dole VP, Gentry RT. Mot en analog av alkoholisme hos mus: Kriterier for anerkjennelse av farmakologisk motivert drikking. Proc Natl Acad Sci. 1985;82: 3469-3471. doi: 10.1073 / pnas.82.10.3469. [PMC gratis artikkel] [PubMed] [Kors Ref]
- Nestler EJ. Molekylær nevobiologi av avhengighet. Er j addict 2001;10: 201-217. doi: 10.1080 / 105504901750532094. [PubMed] [Kors Ref]
- Nestler EJ, Kelz MB, Chen J. DeltaFosB: en molekylær mediator av langsiktig neurale og adferdsmessige plastisitet. Brain Res. 1999;835:10–17. doi: 10.1016/S0006-8993(98)01191-3. [PubMed] [Kors Ref]
- Franklin KJ, Paxinos G. Musens hjerne i stereotaksiske koordinater. 2. San Diego, CA: Akademisk; 2001.
;