Kilde
Institutt for celle- og nevrobiologi, Keck School of Medicine, University of Southern California, Los Angeles, CA 90033, USA.
Abstrakt
Anabole-androgen steroid (AAS) misbruk er utbredt. Dessuten forsterker AAS, som vist ved selvadministrering av gnagere. Reseptorene som transduserer forsterkningseffekten av AAS er imidlertid uklare. AAS kan binde seg til klassiske kjernefysiske androgenreseptorer (AR) eller membranreseptorer. Vi brukte to tilnærminger for å undersøke rollen til kjernefysiske AR-er i AAS-selvadministrasjon. Først testet vi androgen selvadministrering hos rotter med testikkel feminiseringsmutasjonen (Tfm), som forstyrrer androgenbinding. Hvis kjernefysiske armer er essensielle for AAS-selvadministrasjon, bør ikke Tfm-menn selvadministrere androgener. Tfm-menn og villtype (WT) kullkamerater administrerte selv ikke-aromatiserbar androgen dihydrotestosteron (DHT) eller kjøretøy intracerebroventrikulært (ICV) i faste forhold (FR) tidsplaner opp til FR5. Både Tfm- og WT-rotter fikk en preferanse for den aktive nesepoke under DHT-selvadministrering (66.4 +/- 9.6-responser / 4 h for Tfm og 79.2 +/- 11.5 for WT-responser / 4 h), og nesepokene økte etterhvert som FR-kravet økt. Preferansescore var signifikant lavere i rotter som selv administrerte kjøretøy (42.3 +/- 5.3 svar / 4 h for Tfm og 19.1 +/- 4.0 svar / 4 h for WT). Vi testet også selvadministrering av DHT konjugert til bovint serumalbumin (BSA) ved C3 og C17, som er begrenset til handlinger på celleoverflaten. Hamstere fikk selvadministrere DHT-, BSA- og DHT-BSA-konjugater i 15 dager ved FR1. Hamstrene viste en betydelig preferanse for DHT (18.0 +/- 4.1 responser / 4 h) eller DHT-BSA konjugater (10.0 +/- 3.7 responser / 4 h og 21.0 +/- 7.2 responser / 4 h), men ikke for BSA (2.5 + / -2.4 svar / 4 h). Samlet viser disse dataene at nukleære armer ikke er nødvendig for androgen selvadministrering. Videre kan androgen selvadministrering bli mediert av plasmamembranreseptorer.
Copyright 2010 Elsevier Ltd. Alle rettigheter forbeholdt.
Anabole-androgene steroider (AAS) er misbruksmidler. Disse testosteron (T)-derivatene brukes til atletiske og estetiske formål ( Yesalis et al., 1993 ). Bivirkningene spenner fra hypogonadisme og gynekomasti til hjerte- og leverdysfunksjon ( Leshner, 2000 ). I tillegg hoper det seg opp bevis for at AAS-misbruk forårsaker humørsvingninger ( Pope og Katz, 1994 ), aggresjon ( Choi og Pope, 1994 , Kouri et al., 1995 ), og kan føre til avhengighet ( Brower et al., 1991 , Brower, 2002 ). Til tross for økende bekymring, har de underliggende mekanismene bak AAS-misbruk ikke blitt godt forstått.
Hos mennesker hevdes det at oppstart av AAS-bruk i stor grad er motivert av anabole effekter, men noen misbrukere utvikler etter hvert avhengighet ( Brower, 2002 ). Bevis fra dyreforsøk støtter denne hypotesen. AAS induserer betinget stedspreferanse (CPP) hos mus ( Arnedo et al., 2000 ) og rotter ( Packard et al., 1997 , Packard et al., 1998 , Frye et al., 2002 ). Videre konsumerer hamstere frivillig AAS gjennom oral ( Wood, 2002 ), intravenøs ( Wood et al., 2004 ) og intracerebroventrikulær (ICV) selvadministrering ( DiMeo og Wood, 2004 , Triemstra og Wood, 2004 , Wood et al., 2004 , DiMeo og Wood, 2006b ).
Selv om ICV-selvadministrering antyder sentrale virkningssteder, er de spesifikke hormonene og reseptorene som medierer AAS-forsterkning uklare. Nåværende bevis tyder på at de forsterkende effektene av T3 medieres av androgener, snarere enn gjennom østrogener etter aromatisering. Hannhamstere vil selvadministrere dihydrotestosteron (DHT; DiMeo og Wood, 2006b ) og andre ikke-aromatiserbare androgener ( Ballard og Wood, 2005 ). I tillegg blokkeres T3-selvadministrering av antiandrogenet flutamid ( Peters og Wood, 2004 ). Spørsmålet blir nå: hvordan transduseres det androgene signalet i hjernen?
Androgenreseptoren (AR) er en klassisk nukleær steroidreseptor som fungerer som en transkripsjonsfaktor. AR-er er sparsomme i strukturer assosiert med rusmisbruk, som nucleus accumbens (Acb) og det ventrale tegmentale området (VTA; Simerly et al., 1990 , Wood og Newman, 1999 ). Det finnes også bevis for at gonadale steroider virker via celleoverflatereseptorer ( Mermelstein et al., 1996 , Zhu et al., 2003 , Thomas et al., 2006 , Vasudevan og Pfaff, 2007 ).
I den nåværende studien brukte vi to tilnærminger for å bestemme rollen til klassisk nukleær AR i androgenforsterkning. For å minimere mulig aktivering av østrogenreseptorer (ER) testet vi DHT-selvadministrasjon. I det første eksperimentet ble rotter med testikulær feminiseringsmutasjon (Tfm) testet for ICV-selvadministrasjon av DHT. Tfm er en enkeltbasesubstitusjon som resulterer i defekte AR-er med begrenset ligandbinding ( Yarbrough et al., 1990 ). Hannlige Tfm-rotter viser en ekstern hunnfenotype på grunn av utilstrekkelig androgen stimulering under utvikling ( Zuloaga et al., 2008b ). Hvis funksjonelle nukleære AR-er er nødvendige for AAS-forsterkning, bør ikke Tfm-rotter selvadministrere DHT. I stedet var Tfm-rotter i stand til å tilegne seg DHT-selvadministrasjon. I det andre eksperimentet testet vi ICV-selvadministrasjon av membran-ugjennomtrengelige former av DHT hos hamstere. Når DHT er konjugert til bovint serumalbumin (BSA), er virkningen begrenset til celleoverflatereseptorer. Hvis nukleære AR-er er nødvendige for androgenforsterkning, bør ikke hamstere selvadministrere DHT konjugert til BSA. Tvert imot viste hamsterne en klar preferanse for DHT konjugert til BSA. Samlet sett viser disse studiene at nukleære AR-er ikke er nødvendige for selvadministrering av androgener. I stedet kan androgenforsterkning medieres av membran-AR-er.
Metoder og materialer
Fag
rotter
Voksne hann-Tfm-rotter og villtype (WT) kullsøsken ble hentet fra en koloni ved Michigan State University. Genotypen deres ble verifisert ved PCR, i likhet med metodene beskrevet tidligere ( Fernandez et al., 2003 ). Kort fortalt ble øreklipsene fordøyd over natten ved 55 °C i lysebuffer som inneholdt proteinase K, og deretter varmeinaktivert ved 95 °C i 30 minutter. AR ble amplifisert ved bruk av forward primer 5′-GCAACTTGCATGTGGATGA-3′ og revers primer 5′-TGAAAACCAGGTCAGGTGC-3′, noe som ga et 135 bp produkt. Amplifiserte prøver ble deretter fordøyd med Sau96I restriksjonsenzym (R0165L, New England BioLabs, Ipswich, MA) over natten ved 37 °C og kjørt på en 3 % agarosegel. Bare WT AR kuttes med dette restriksjonsenzymet, og etterlater to bånd under 100 bp, mens Tfm AR forblir ukuttet. Tfm-dyr ble også verifisert ved fenotype, ved tilstedeværelse av brystvorter, feminin ano-genital avstand og abdominale testikler. Tfm-rotter har tidligere blitt brukt til å demonstrere ikke-genomiske androgeneffekter i hippocampus ( MacLusky et al., 2006 ). Ved starten av eksperimentet var WT-rotter mellom 75 og 140 dager gamle, og Tfm-rotter var mellom 75 og 138 dager gamle.
hamstere
Voksne hann-syriske hamstere (130–150 g) ble anskaffet fra Charles River Laboratories (Wilmington, MA). Dyrene ble holdt enkeltvis i en reversert lyssyklus (14L:10D) med fôr og vann tilgjengelig ad libitum . Alle forsøksprosedyrer ble godkjent av institusjonelle dyrepleie- og brukskomiteer ved de respektive institusjonene og utført i samsvar med veiledningen for pleie og bruk av forsøksdyr ( NationalResearchCouncil, 1996 ).
Kirurgi
Alle dyrene ble implantert med en 22 g føringskanyle i rustfritt stål (Plastic One, Roanoke, VA) i den laterale ventrikkelen [rotte: AP: 0.7, ML: -1.8, DV: -4.0 ∼ -5.0 ( Paxinos og Watson, 1998 ); hamster: AP: +1.0, ML, +1.0, DV: -3.0 ∼ -5.0 ( Morin og Wood, 2001 ), mm fra bregma], under Na + pentobarbital-anestesi (rotte: 50 mg/kg, hamster: 100 mg/kg) som tidligere beskrevet ( Wood et al., 2004 ). Alle kirurgiske prosedyrer ble utført under aseptiske forhold i henhold til Principles of Laboratory Animal Care ( NIH, 1985 ). Dyrene fikk komme seg i minst en uke etter operasjonen før testing.
Narkotika
DHT, DHT-karboksymetyloksim (CMO), DHT-CMO-BSA, DHT-hemisuccinat (Hemis) og DHT-Hemis-BSA ble oppnådd fra Steraloids (Newport, RI). I DHT-CMO-BSA er DHT konjugert til BSA i C3-posisjonen med CMO som linker. På samme måte er DHT koblet til BSA i C17-posisjonen via Hemis for å danne DHT-Hemis-BSA. Både DHT-CMO-BSA ( Gatson et al., 2006 ) og DHT-Hemis-BSA ( Braun og Thomas, 2003 ) har tidligere blitt brukt til å undersøke mulige effekter av androgener på plasmamembranen. DHT ble løst opp i en vandig løsning av 13 % β-cyklodekstrin (βCD, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) ved 1 μg/μl. Som bestemt fra vår tidligere studie på hamstere, produserer denne dosen robust operant respons under ICV-selvaginasjon ( DiMeo og Wood, 2006b ). DHT-derivater ble løst opp i samme vehikel ved molekvivalent konsentrasjon av DHT (DHT-CMO: 1.25 μg/μl, DHT-CMO-BSA: 8.7 μg/μl, DHT-Hemis: 1.34 μg/μl, DHT-Hemis-BSA: 8.83 μg/μl). BSA (Sigma-Aldrich) ble løst opp i samme vehikel ved 7.45 μg/μl for å oppnå molekvivalent konsentrasjon av BSA som i DHT-CMO-BSA og DHT-Hemis-BSA. BSA-holdige legemidler ble fremstilt daglig rett før bruk for å unngå nedbrytning, og alle løsninger ble filtrert gjennom et 0.22 μm filter. Tidligere studier har vist at bare en liten andel steroider dissosierer fra BSA ( Stevis et al., 1999 ), og denne mengden er utilstrekkelig til å indusere signifikante androgene effekter ( Lieberherr og Grosse, 1994 , Gatson et al., 2006 ). På samme måte har vår tidligere studie vist at DHT administreres selv ved 1.0 μg/μl, men ikke ved 0.1 μg/μl ( DiMeo og Wood, 2006b ). Derfor er det usannsynlig at fritt DHT (>10 %) dissosierer fra BSA i tilstrekkelig mengde til å støtte selvadministrasjon.
Apparat
Dyr fikk selvadministrere medikament- eller kjøretøysløsning 4 timer / dag, 5 dager / uke i et operantkammer (Med Associates, St. Albans, VT) innelukket i et lyddempende kammer med tvungen ventilasjon. Hvert kammer var utstyrt med et huslys, 2 nesehull og en datastyrt sprøytepumpe koblet til en væskesvivel på en balansearm. Løsninger fra en 100 μl glasssprøyte ble levert til dyret gjennom Tygon-rør koblet til svivelen. Røret som forbinder svivelen og ICV-kanylen ble beskyttet av en metallfjær. Legemiddeloppløsning eller kjøretøy ble levert via en 28-ga intern kanyle satt inn i føringskanylen rett før testing. Hver infusjon leverte 1 μl løsning med 0.2 μl / s. Nesehule var plassert 6 cm fra gulvet under huslyset. Et av nesehullene ble betegnet som det aktive nesehullet. En respons på dette hullet ble registrert som en aktiv nesepoke (R: aktivforsterket) og tellet mot responskravet (FR1 til 5) for å utløse en infusjon. Når en infusjon ble utløst, ble huslyset slukket og det aktive hullet opplyst under 5-infusjonen for å hjelpe til med diskriminering av det aktive nese-rotehullet. Nesepoking i det aktive hullet i løpet av denne 5-tidsavbruddstiden ble registrert, men telte ikke for ytterligere forsterkning (NR: aktiv-ikke-forsterket). En respons på det andre nesepokehullet ble registrert som en inaktiv nesepoke (I), men resulterte ikke i noen infusjon. Plasseringen av det aktive nese-pokehullet foran eller bak på kammeret var balansert for å kontrollere for sidepreferanser. Dataene ble registrert av WMPC-programvare (Med Associate) på en Windows-PC.
ICV selvadministrasjon
rotter
Selvadministrering av DHT hos Tfm- og WT-rotter fulgte en stigende fast-ratio (FR) tidsplan fra FR1 til FR5. Rottene ble initialt trent på FR1, hvor hver respons på det aktive nesehullet ble forsterket. Deretter ble antallet responser som kreves for å oppnå en infusjon økt med én hver 5. dag. Ved FR5 var fem responser på det aktive nesehullet nødvendig for en infusjon. Totalt sett ble rottene testet på FR1 i 10 dager og FR2 til FR5 (5 dager hver), i totalt 30 dager. Rotter fra hver genotype ble tilfeldig tildelt enten DHT- eller vehikkel (Veh)-grupper, og fikk lov til å selvadministrere DHT eller βCD-vehikkelen. Trettiseks rotter (n WT = 19, n Tfm = 17) ble brukt i dette eksperimentet.
hamstere
Hamstere ble testet under en FR1-plan i 15 dager. I tidligere studier er 15 dager med egenadministrasjon av ICV T tilstrekkelig til å oppnå en preferanse for den aktive nesepoke. Hamstere ble tilfeldig tildelt DHT (n = 8), DHT-CMO (n = 9), DHT-CMO-BSA (n = 10), DHT-Hemis (n = 11), DHT-Hemis-BSA (n = 8) ), eller BSA (n = 9) grupper.
Dataanalyse
rotter
Daglige preferansescore for den aktive nesepoke ble bestemt ved å trekke fra inaktive nesepokker fra summen av aktivt forsterket og aktivt ikke-forsterket nesepoke (R + NR-I). Gjennomsnittlig preferansescore ble beregnet for hvert dyr fra de siste 5 dagene av FR1 og i løpet av FR2 til FR5. I tillegg ble det gjennomsnittlige antall forsterkninger per økt for hvert dyr ved hvert FR sammenlignet.
Dataene ble analysert ved hjelp av 3-veis ANOVA, med genotype (WT eller Tfm), medikament (DHT eller vehikkel) og FR-skjema (1 ∼ 5) som faktorer mellom forsøkspersonene. FR-skjemaet ble behandlet som en mellomfaktor, siden noen dyr ikke klarte å fullføre hele 30-dagene med testing på grunn av tilstopping av ICV-guidekanylen. I disse tilfellene ble bare dataene fra de fullførte skjemaene inkludert i analysene. Antall dyr inkludert i hver tilstand er vist i tabell 1. En treveis ANOVA ble fulgt opp av passende lavere ordens ANOVA-er for enkle effekter. Newman-Keuls-testen for post-hoc parvise sammenligninger ble brukt når det var nødvendig.
Tabell 1
hamstere
De individuelle gjennomsnittene av R, NR og I ble brukt til dataanalyse. Preferanseskåren for hvert dyr ble bestemt ved å subtrahere gjennomsnittlig inaktiv nesepoke (I) fra gjennomsnittlig aktiv nesepoke (R+NR-I). Gjennomsnittlig preferanseskåre ble analysert med en ett-utvalgs t- test mot 0 (dvs. ingen preferanse) for hver gruppe. I tillegg ble antallet mottatt forsterkninger gjennomsnittliggjort for hvert dyr. Gjennomsnittlig forsterkning mottatt for hver medikamentgruppe ble sammenlignet med BSA-kontrollgruppen med en 2 uavhengige utvalgs t -test. Dyr som ikke fullførte minst 5 økter ble ekskludert fra analysen (1 fra hver av DHT-Hemis- og DHT-Hemis-BSA-gruppene).
Alle statistiske analyser ble utført ved hjelp av SPSS 12 (SPSS Inc., Chicago, IL). For alle analyser ble p < 0.05 ansett som statistisk signifikant. Dataene presenteres som gjennomsnitt ± SEM per 4-timers økt.
Resultater
WT- og Tfm-rotter administrerer selv DHT
Operant som svarer
Fig. 1 illustrerer gjennomsnittlig preferanse for aktivt nesepoke (R + RN – I) ved hver FR for DHT- og Veh-gruppene. Rotter som selvadministrerte DHT viste en større preferanse for aktivt nesepoke (73.1 ± 7.6 resp/4t), sammenlignet med vehikkelkontrollene (29.8 ± 3.5 resp/4t; F 1,145 = 31.77, p < 0.001). Det var også en hovedeffekt av FR-skjema (F 4,145 = 4.25, p < 0.01), genotype-legemiddelinteraksjon (F 1,145 = 5.27, p = 0.02), og en legemiddel-FR-skjemainteraksjon (F 4,145 = 2.60, p = 0.02). Det var ingen hovedeffekt av genotype, og andre interaksjoner var ikke signifikante.
Post-hoc-tester viste at rottene som selvadministrerte DHT viste en signifikant større preferanse fremfor FR-skjemaet (F 4,73 = 4.18, p < 0.01), noe som økte preferansen fra FR1 (33.4 ± 4.4 resp/4t) til FR4 (110.8 ± 26.7 resp/4t) og FR5 (106.4 ± 18.9 resp/4t). Ingen effekt av genotype ble observert i denne gruppen (genotype-FR-skjema: F 4,73 = 0.13, ns; genotype: F 1,73 = 0.86, ns).
I motsetning til dette viste rottene som selvadministrerte Veh ingen endring i preferanse fremfor FR-skjemaet (F 4,72 = 0.31, ns), og ingen interaksjon mellom genotype og FR-skjema (F 4,72 = 0.12, ns). I motsetning til DHT viste Tfm-rotter større preferanse enn WT i denne gruppen (henholdsvis 42.3 ± 5.3 og 19.1 ± 4.0 resp/4t; F 4,72 = 11.81, p < 0.01).
infusjoner
Gjennomsnittlig antall DHT- og Veh-infusjoner mottatt ved hver FR er vist i figur 2. Totalt sett fikk rotter flere infusjoner når de fikk selvadministrere DHT (26.9 ± 2.2 μg/4t) vs. vehikkel (15.4 ± 1.9 μl/4t, F 1,145 = 14.70, p < 0.001). Det var også en hovedeffekt av FR-skjema (F 1,145 = 3.32, p = 0.01) og genotype-legemiddel-interaksjon (F 1,145 = 6.41, p = 0.01). Alle andre interaksjoner og hovedeffekter var ikke signifikante.
Gjennomsnittlig daglig inntak av DHT på tvers av alle FR-regimer var likt hos Tfm-rotter (24.3 ± 2.9 μg/4t) og WT-rotter (29.4 ± 3.4 μg/4t). I begge gruppene forble medikamentinntaket konstant etter hvert som FR-regimet økte (F 4,73 = 0.54, ns). Under FR1 selvadministrerte Tfm- og WT-hanner DHT med henholdsvis 24.5 ± 2.3 μg/4t og 37.3 ± 6.7 μg/4t. Under et FR5-regime var gjennomsnittlig DHT-selvadministrering 18.3 ± 4.5 μg/4t for Tfm og 23.9 ± 5.9 μg/4t for WT-rotter. Denne gruppen viste ingen genotype- eller genotype-FR-regimebaserte forskjeller (F 1,73 = 1.17, ns; F 4,73 = 0.34, ns, henholdsvis).
I motsetning til dette, hos både Tfm- og WT-rotter, sank antallet vehikkelinfusjoner betydelig etter hvert som FR-behovet økte (F 4,72 = 4.73, p < 0.01). Noe overraskende administrerte Tfm-rotter omtrent dobbelt så mye vehikkel (20.7 ± 2.4 μl/4t) som WT-rotter (10.7 ± 1.4 μl/4t, F 1,72 = 7.77, p < 0.01). Hos Tfm-rotter ved FR1 oversteg antallet vehikkelinfusjoner (39.9 ± 13.2 μl/4t) antallet DHT-infusjoner (24.5 ± 2.3 μl/4t). Ved slutten av eksperimentet hadde imidlertid vehikkeladministrering sunket til 10.3 ± 2.4 μl/4t. På samme måte administrerte WT-rotter 18.6 ± 4.1 μl/4t selv. Dette gikk ned til 6.6 ± 1.8 μl/4t ved FR5.
Gjennomsnittlig kroppsvekt ved starten av hver FR-plan og antall dyr i hver tilstand er vist i tabell 1. WT-rottene var betydelig tyngre enn Tfm-rottene (F 1,174 = 144.62, p < 0.001), og alle gruppene økte i vekt over tid (F 5,174 = 5.59, p < 0.001). Det var ingen effekt av medikamenttilstand (DHT vs Veh) på kroppsvekt (F 1, 174 = 0.31, ns), eller noen interaksjon. DHT-inntaket justert for kroppsvekt var likt i begge genotypene ved både FR1 (WT: 77.9 μg/kg, Tfm: 65.4 μg/kg) og FR5 (WT: 46.5 μg/kg, Tfm: 42.6 μg/kg).
Syriske hamstere administrerer selv DHT konjugert til BSA
Operant som svarer
Hamstere selvadministrert DHT og DHT konjugert til BSA, men ikke BSA alene. Fig. 3a viser gjennomsnittlig preferanse (aktiv - inaktiv nese-pokes) for DHT, BSA, DHT-CMO-BSA, og DHT-Hemis-BSA, DHT-CMO, DHT-Hemis. I samsvar med våre tidligere studier utviklet hamstere en preferanse for aktiv nesepoke under DHT-selvadministrasjon (t7 = 4.34, p <0.01), men viste ingen preferanser ved selvadministrering av BSA (t8 = 1.03, ns). På samme måte viste hamstere en preferanse for den aktive nesepokeren med både DHT-CMO-BSA (t9 = 2.71, p = 0.02) og DHT-Hemis-BSA (t7 = 2.92, p = 0.02). Med DHT festet til linkere alene, hamstere selvadministrert DHT-CMO (t8 = 3.91, p <0.01), men viste ingen signifikant preferanse ved selvadministrering av DHT-Hemis (t10 = 1.87, p = 0.09). Med DHT-Hemis var svarene på den aktive nesepoke (40.5 ± 10.3 resp / 4h) lik de for DHT-Hemis-BSA (41.2 ± 11.4 resp / 4h), men disse mennene viste også økt respons for den inaktive nesen -poke (28.7 ± 6.6 resp / 4h) sammenlignet med dem for DHT-Hemis-BSA (20.3 ± 4.4 resp / 4h).
infusjoner
Antall infusjoner mottatt for hver gruppe vises i Fig. 3b. Hamstere fikk betydelig mer DHT- enn BSA-infusjoner (t15 = 3.04, p = 0.01). Tilsvarende fikk hamstere flere infusjoner når de fikk lov til å selv administrere DHT-Hemis-BSA (t15 = 2.72, p = 0.02) eller DHT-CMO (t16 = 2.70, p = 0.02) sammenlignet med BSA. Antall infusjoner mottatt for DHT-CMO-BSA (17.2 ± 3.2 μl / 4hr) og DHT-Hemis (22.7 ± 5.9 μl / 4hr) grupper var lik de som selv administrerte DHT, DHT-Hemis-BSA og DHT- CMO. Ikke desto mindre fikk hamstrene ikke betydelig mer DHT-CMO-BSA (t17 = 1.96, p = 0.07) eller DHT-Hemis (t18 = 1.91, p = 0.07) sammenlignet med BSA.
Overdose
Elleve av 55 hamstere døde før de fullførte alle 15 testøktene. Dødsfall på grunn av androgen-overdose under testosteron-selvaginasjon har tidligere blitt beskrevet ( Peters og Wood, 2005 ). I denne studien døde 2 av 8 hanner (25 %) under DHT-selvaginasjon, tilsvarende de 24 % som ble rapportert for testosteron-overdose ( Peters og Wood, 2005 ). Selvvaginasjon av DHT-CMO og DHT-Hemis var assosiert med de høyeste tapene (hver 3 av 8 per gruppe, 38 %), mens det var få dødsfall blant hamstere som selvadministrerte BSA (1 av 9, 11 %) eller DHT-Hemis-BSA (0 av 8). Som med testosteron-overdose døde ingen av hamsterne i denne studien under selvvaginasjon. I stedet døde hamsterne flere timer senere i sine hjemmebur, med alvorlig lokomotorisk og respiratorisk depresjon.
Testosteron-overdose er nært korrelert med testosteroninntak, spesielt maksimalt inntak per økt ( Peters og Wood, 2005 ). Figur 4 sammenligner preferansepoeng, antall mottatte forsterkninger og maksimalt inntak for hamstere som fullførte alle 15 testøkter, og de som ikke gjorde det. Begge gruppene viste en signifikant preferanse for aktiv nesestikk ( p < 0.05). Preferansen var imidlertid signifikant større hos hamstere som døde under selvadministrering (25.7 ± 5.2 resp/4t) sammenlignet med de som overlevde (9.5 ± 2.0 resp/4t, t 53 = 3.42, p < 0.01). Hamstere som ikke fullførte 15 økter fikk mer enn dobbelt så mange infusjoner per økt (31.2 ± 5.0 inf/4t) som de som fullførte alle øktene (14.8 ± 1.1 inf/4t, t 53 = 5.05, p < 0.001). Videre var det maksimale inntaket per økt betydelig høyere (77.0 ± 9.8 inf/4t) for hamstere som døde i løpet av studien enn for hanner som overlevde (36.1 ± 2.9 inf/4t, t 53 = 5.41, p < 0.001).
Diskusjon
Androgen selvadministrering kan være mediert av membranassosiert, men ikke av nukleære androgenreseptorer
Den nåværende studien viser at klassiske nukleære armer ikke er essensielle for androgen selvadministrering. Både Tfm- og WT-rotter utviklet en preferanse for den aktive nesepoke under DHT-selvadministrering. Videre var de i stand til å svare på den stigende FR-timeplanen ved å øke aktive nesepokker, og derved opprettholde et jevnt nivå av medisininntak uavhengig av FR-timeplanen. I kontrast, rotter som mottok kjøretøy, svarte ikke på endringene i FR-timeplanen. De aktive nesepokene deres økte ikke betydelig som svar på endringer i FR-timeplanen, og de fikk færre infusjoner etter hvert som responskravet økte. Fordi ligandbinding til den "klassiske" kjernefysiske androgenreseptoren er kompromittert i Tfm-mutanter, støtter dette hypotesen vår om at androgenforsterkning blir formidlet via alternative veier.
Den uventet høye responsen på vehikkel hos Tfm-rotter skyldes sannsynligvis ikke selve vehiklet. Vi observerte lignende fenomener i en separat gruppe Tfm-rotter som ikke fikk noen infusjoner (data ikke vist). I stedet kan det være relatert til feminiserte atferdstrekk hos Tfm-hannene. De økte nesestikkene hos Tfm-rotter kan være analoge med høyere utforskende hodedyp observert hos hunnrotter ( Brown og Nemes, 2008 ). Alternativt er Tfm-rotter og -mus kjent for å vise økt angstlignende atferd ( Zuloaga et al., 2006 , Zuloaga et al., 2008a ). Kanskje de beroligende/angstdempende effektene av DHT ( Agren et al., 1999 , Arnedo et al., 2000 , Frye og Seliga, 2001 , Berbos et al., 2002 , Peters og Wood, 2005 ) dempet den angstlignende atferden da Tfm-rotter selvadministrerte DHT.
I tillegg gir selvadministrering av DHT-BSA-konjugater hos hannhamstere bevis for at androgener kan virke på den nevrale plasmamembranen og ha en forsterkende effekt. Hamstere viste en betydelig preferanse for begge DHT-BSA-konjugater. Dosene som ble selvadministrert er i tråd med våre tidligere studier av T3, DHT og ofte misbrukte steroider ( Ballard og Wood, 2005 , DiMeo og Wood, 2006b ). I motsetning til dette viste hamstere ingen preferanse for BSA alene. Dataene om dødelighet og medikamentinntak viser at DHT og dets derivater kan være dødelige, noe som utvider våre tidligere data om T3-overdose ( Peters og Wood, 2005 ).
Den nåværende studien avslører et artsspesifikt mønster av operant respons. Hamstere foretrakk ikke aktiv nesestimulering mens de selvadministrerte legemidlet, som tidligere vist ( Johnson og Wood, 2001 , Wood, 2002 , DiMeo og Wood, 2004 , Triemstra og Wood, 2004 , Wood et al., 2004 , Ballard og Wood, 2005 , DiMeo og Wood, 2006b ). Hos rotter var det imidlertid en klar preferanse for aktiv nesestimulering uavhengig av hvilket legemiddel som ble mottatt. Vi observerte en lignende trend i vår tidligere studie om intravenøs selvadministrering av T hos rotter, selv om den ikke var statistisk signifikant ( Wood et al., 2004 ). Basert på slike artsspesifikke atferdsforskjeller i selvadministrering, må man være forsiktig når man sammenligner atferdsdata fra rotter og hamstere.
Det er flere forbehold som må vurderes ved tolkning av den nåværende studien. For det første er nukleære AR-er med betydelig svekket ligandbinding fortsatt tilstede hos Tfm-rotter ( Yarbrough et al., 1990 ), i motsetning til hos Tfm-mus ( He et al., 1991 ). Det er mulig at disse muterte nukleære AR-ene er tilstrekkelige for å mediere effekten av androgener ved suprafysiologiske doser. For det andre kan DHT-BSA-konjugatene brytes ned in vivo , noe som resulterer i fritt DHT. Selv om dette ikke ser ut til å være et betydelig problem in vitro ( Lieberherr og Grosse, 1994 , Gatson et al., 2006 ), er graden og tidsforløpet for DHT-BSA-nedbrytning in vivo i hjernen foreløpig ukjent. Til slutt trenger kanskje ikke DHT-BSA-konjugater signifikant inn i hjernevevet. DHT-BSA er betydelig større enn DHT, og dermed er effektene av DHT-BSA observert i den nåværende studien sannsynligvis mediert på steder nær ventriklene.
Til tross for disse forbeholdene ga disse to forskjellige tilnærmingene konsistente resultater som argumenterer sterkt mot nødvendigheten av nukleær AR i androgenforsterkning. I tillegg antyder selvadministrering av BSA-konjugater at androgener kan virke på plasmamembranen i androgenforsterkning. Så vidt vi vet, gir den nåværende studien det første in vivo- beviset for atferdsrelevante effekter av androgener på plasmamembranen.
Androgener utøver raske kjernefysiske AR-uavhengige effekter på belønning
Flere andre studier på androgenbelønning har vist resultater som er konsistente med ikke-genomiske effekter eller plasmamembraneffekter. CPP utvikles innen 30 minutter etter systemisk T3-injeksjon ( Alexander et al., 1994 ), et tidsforløp som er konsistent med akutte ikke-genomiske effekter av T3. CPP kan også induseres med intra-Acb-infusjoner av T3 eller dens metabolitt ( Packard et al., 1997 , Frye et al., 2002 ), selv om Acb har få genomiske AR. Videre uttrykker VTA Fos som respons på ICV T3-infusjon ( Dimeo og Wood, 2006a ), til tross for mangelen på signifikant klassisk AR-ekspresjon der. Den nåværende studien gir ikke informasjon om virkningsstedet i hjernen. Likevel indikerer den at den relative mangelen på nukleær AR alene ikke er en tilstrekkelig grunn til å ekskludere strukturer som Acb og VTA fra de potensielle stedene som kan mediere androgene effekter.
Raske plasmamembraneffekter av steroider i dorsal og ventral striatum er ikke begrenset til androgener. Progestiner er kjent for å indusere CPP, muligens via gamma-aminosmørsyre (GABA)-reseptorer i Acb ( Frye, 2007 ). Østrogener utøver også raske, membranreseptormedierte effekter i dorsal striatum ( Mermelstein et al., 1996 , Becker og Rudick, 1999 ). En membranassosiert reseptor er allerede isolert for progestiner ( Zhu et al., 2003 ), og bevisene for celleoverflatereseptorer for østrogener (gjennomgått i Vasudevan og Pfaff, 2007 ) og androgener (gjennomgått i Thomas et al., 2006 ) akkumuleres. Selv om østrogener også er forsterkende ( DiMeo og Wood, 2006b ), ser de forsterkende effektene av T ut til å være overveiende androgene. Hamstere administrerer selv ikke-aromatiserbare androgener, som drostanolon og DHT ( Ballard og Wood, 2005 , DiMeo og Wood, 2006b ). I tillegg kan antiandrogenet flutamid blokkere T-selvadministrering ( Peters og Wood, 2004 ). Selv om dette kan virke som å motsi rollen til membran-AR som rapporteres i denne studien, er det rapportert at flutamid også blokkerer membran-AR-aktivering ( Braun og Thomas, 2003 , Braun og Thomas, 2004 ).
Egenskapene til membran-androgenreseptorer
Historisk sett ble effektene av steroider, inkludert androgener, ansett å være transdusert av kjernereseptormedierte prosesser. Imidlertid har rapporter om raske androgeneffekter, antagelig mediert av membranassosierte reseptorer, vært tilgjengelige i flere tiår. For eksempel, i det mediale preoptiske området, kan androgener endre neuronal avfyring i løpet av sekunder ( Yamada, 1979 ) til minutter ( Pfaff og Pfaffmann, 1969 ). Videre har Orsini og kolleger ( Orsini, 1985 , Orsini et al., 1985 ) vist en rask modifisering av neuronal avfyringsfrekvens av androgener i den laterale hypothalamus (LHA). Denne effekten av androgener i LHA kan være spesielt relevant for denne studien, ettersom LHA er kjent for å være involvert i belønningskretsene ( Olds og Milner, 1954 ) og LHA oreksin/hypokretin reguleres av gonadale steroider ( Muschamp et al., 2007 ).
Celletypene med mulige membran-AR-er inkluderer gliale ( Gatson et al., 2006 ), gonadale ( Braun og Thomas, 2003 , Braun og Thomas, 2004 ) og immunceller ( Benten et al., 1999 , Guo et al., 2002 ), myocytter ( Estrada et al., 2003 ) og osteoblaster ( Lieberherr og Grosse, 1994 ). Selv om den molekylære identiteten ennå ikke er bestemt, inkluderer kandidater for membran-AR membranreseptorer med kjente steroidbindingssteder, som GABA-A (gjennomgått i Lambert et al., 2003 ) og NR2-subenheter av N-metyl-D-asparaginsyrereseptorer ( Malayev et al., 2002 ). Alternativt har Thomas og kolleger (2004) rapportert bevis for en ny G-proteinkoblet reseptor som en membran-AR. I tillegg kan ikke effektene av androgener som ikke er relatert til en spesifikk reseptor utelukkes i den aktuelle studien.
Nylig vitro studier antyder at det er flere membran-AR-er, eller mer enn ett bindingssted på en enkelt reseptor, som foreslått for membran-progesteron-reseptoren (Ramirez et al., 1996). I mange celletyper ser det ut som om membranen AR er en membranreseptor koblet til Gq / o (Lieberherr og Grosse, 1994, Benten et al., 1999, Zhu et al., 1999, Guo et al., 2002, Estrada et al., 2003). Steroidbindingskarakteristikkene og følsomheten for anti-androgener av den antatte membranen AR varierer imidlertid sterkt avhengig av celletypen. For eksempel kan anti-androgener blokkere effekten av DHT på ovarieceller i croaker (Braun og Thomas, 2003, Braun og Thomas, 2004), mens de ikke er effektive i andre celletyper (Lieberherr og Grosse, 1994, Benten et al., 2004, Gatson et al., 2006), eller kan til og med utøve agonistlignende effekter i hippocampalceller (Gjedde, 2001, Nguyen et al., 2007) og flere kreftcellelinjer (Peterziel et al., 1999, Zhu et al., 1999, Evangelou et al., 2000, Papakonstanti et al., 2003). Videre er det rapportert om forskjellige T-bindende egenskaper for forskjellige organer hos fisk (Braun og Thomas, 2004).
Vår erfaring med ofte misbrukte AAS indikerer at større modifikasjoner ved A-ringen (ved C2 og/eller C3) og ved C17 har en tendens til å forstyrre selvadministrering ( Ballard og Wood, 2005 ). For eksempel er stanozolol, som har en større modifikasjon ved C2 og C3 samt en metylgruppe festet til C17, ikke selvadministrert. I den nåværende studien selvadministrerte hamstere både BSA konjugert ved C3 (DHT-CMO-BSA) og C17 (DHT-Hemis-BSA). Ytterligere forskning er nødvendig for å belyse egenskapene til androgener som selvadministreres.
Klinisk signifikans
AAS, spesielt T, er de desidert vanligste prestasjonsfremmende midlene som brukes av idrettsutøvere, og står for nesten halvparten av de positive dopingtestene ( World Anti-Doping Agency, 2006 ). Gitt en så utbredt bruk har AAS-misbruk omfattende helsekonsekvenser. Hjerte- og leverbivirkninger av AAS-misbruk er veletablerte ( Leshner, 2000 ). Disse og de anabole effektene av AAS har blitt antatt å være mediert gjennom nukleær AR. Imidlertid antyder de mulige nukleære AR-uavhengige effektene av androgener at påvirkningen av AAS kan strekke seg langt utover strukturer med nukleær AR-ekspresjon.
Når det gjelder likhet med andre rusmidler, har AAS forskjellige effekter og har forskjellige virkningsmekanismer enn sentralstimulerende midler. I motsetning til sentralstimulerende midler ( Graybiel et al., 1990 ), induserer AAS c-Fos-aktivering kun i VTA og ikke i Acb ( Dimeo og Wood, 2006a ). Videre demper AAS stimulantindusert Acb DA-frigjøring ( Birgner et al., 2006 ), og hemmer DA-frigjøring akutt ( Triemstra et al., 2008 ). Atferdsmessig induserer ikke AAS den lokomotoriske aktiveringen som er karakteristisk for stimulanter ( Peters og Wood, 2005 ).
I stedet ligner atferdsresponsene på akutt AAS på de man ser hos opioider eller benzodiazepiner, og kan muligens ha additive effekter når de tas sammen. Akutt eksponering for AAS reduserer autonome funksjoner, inkludert respirasjon og kroppstemperatur ( Peters og Wood, 2005 ). AAS-indusert autonom depresjon minner om symptomene på opioid-overdose, og blokkeres av opioid-antagonisten naltrekson ( Peters og Wood, 2005 ). Videre forsterker nandrolon, et vanlig brukt AAS, de hypotermiske effektene av morfin og forverrer nalokson-utløste morfinabstinenssymptomer ( Celerier et al., 2003 ). I tillegg er det veletablert at akutte AAS er beroligende/angstdempende ( Agren et al., 1999 , Arnedo et al., 2000 , Frye og Seliga, 2001 , Berbos et al., 2002 , Peters og Wood, 2005 ), muligens mediert av deres direkte effekter på GABA-A-reseptorer ( Masonis og McCarthy, 1995 , Masonis og McCarthy, 1996 ). Økt etanolforbruk hos rotter kronisk behandlet med AAS kan også være en refleksjon av endret GABAerg funksjon ( Johansson et al., 2000 ).
Våre funn om overdose reiser en ytterligere helsebekymring. Foreløpig er klassifiseringen av AAS som kontrollstoffer basert på deres anabole egenskaper ( Controlled Substances Act, 1991 ). Den nåværende studien viser imidlertid at den anabole effekten av AAS ikke nødvendigvis samsvarer med deres forsterkende egenskaper og overdoserisiko. I tillegg til DHT-BSA-konjugater er DHT-CMO som ble brukt i denne studien ikke et kontrollert stoff, selv om dets forsterkende egenskaper og dødeligheten fra overdose ser ut til å være ganske lik DHT og T ( Peters og Wood, 2005 ). Overdosemønsteret lignet også det som tidligere ble rapportert for T ( Peters og Wood, 2005 ), hvor høyt inntak resulterte i dødelighet 24 til 48 timer senere. I lys av disse funnene kan kriteriene som brukes for å klassifisere et steroid som et kontrollert stoff kreve revisjoner for å ta hensyn til dets misbruksrisiko og toksisitet, i tillegg til dets anabole potens.
Resultatene fra den nåværende studien antyder at kjernefysisk AR, den eneste AR som er isolert så langt, ikke er vesentlig for androgenforsterkningen. I stedet antyder resultatene at androgenforsterkning blir transdusert ved plasmamembranen. Dermed er ytterligere undersøkelser om identiteten til antatt membran AR, deres funksjonelle egenskaper og anatomisk distribusjon nødvendig for å belyse den underliggende mekanismen for AAS-misbruk og dens kliniske implikasjoner.
Fotnoter
Utgiverens ansvarsfraskrivelse: Dette er en PDF-fil av et uredigert manuskript som er akseptert for publisering. Som en tjeneste for våre kunder tilbyr vi denne tidlige versjonen av manuskriptet. Manuskriptet vil gjennomgå korrekturlesing, satsing og korrekturlesing før det publiseres i sin endelige siterbare form. Vær oppmerksom på at det kan oppdages feil under produksjonsprosessen som kan påvirke innholdet, og alle juridiske ansvarsfraskrivelser som gjelder for tidsskriftet gjelder.
Referanser
- Agren G, Thiblin I, Tirassa P, Lundeberg T, Stenfors C. Atferdsangstmessige effekter av lavdosert anabole androgen steroidbehandling hos rotter. Fysiol Behav. 1999;66: 503-509. [PubMed]
- Alexander GM, Packard MG, Hines M. Testosteron har givende affektive egenskaper hos hannrotter: implikasjoner for det biologiske grunnlaget for seksuell motivasjon. Behav Neurosci. 1994;108: 424-428. [PubMed]
- Arnedo MT, Salvador A, Martinez-Sanchis S, Gonzalez-Bono E. Belønningsegenskaper av testosteron i intakte hannmus: en pilotstudie. Pharmacol Biochem Behav. 2000;65: 327-332. [PubMed]
- Ballard CL, Wood RI. Intracerebroventrikulær selvadministrering av ofte misbrukte anabole-androgene steroider hos mannlige hamstere (Mesocricetus auratus): nandrolon, drostanolon, oxymetholone og stanozolol. Behav Neurosci. 2005;119: 752-758. [PubMed]
- Becker JB, Rudick CN. Raske effekter av østrogen eller progesteron på den amfetamininduserte økningen i striatal dopamin forbedres ved østrogenprimering: en mikrodialysestudie. Pharmacol Biochem Behav. 1999;64: 53-57. [PubMed]
- Benten WP, Guo Z, Krucken J, Wunderlich F. Raske effekter av androgener i makrofager. Steroider. 2004;69: 585-590. [PubMed]
- Benten WP, Lieberherr M, Stamm O, Wrehlke C, Guo Z, Wunderlich F. Testosteron signalering gjennom internaliserbare overflatreseptorer i androgenreseptorfrie makrofager. Mol Biol Cell. 1999;10: 3113-3123. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
- Berbos ZJ, Chu L, Wood RI. Akutte atferdseffekter av anabole steroider: angst, stereotypi og lokomotorisk aktivitet. Horm Behav. 2002;41: 457.
- Birgner C, Kindlundh-Hogberg AM, Nyberg F, Bergstrom L. Endrede ekstracellulære nivåer av DOPAC og HVA i rotten nucleus accumbens skall som svar på sub-kronisk nandrolon administrering og en påfølgende amfetaminutfordring. Neurosci Lett 2006
- Braun AM, Thomas P. Androgens hemmer østradiol-17beta-syntese i atlantisk croaker (Micropogonias undulatus) eggstokkene ved en nongenomisk mekanisme initiert ved celleoverflaten. Biol Reprod. 2003;69: 1642-1650. [PubMed]
- Braun AM, Thomas P. Biokjemisk karakterisering av en membran-androgenreseptor i eggstokken til den atlantiske krokeren (Micropogonias undulatus) Biol Reprod. 2004;71: 146-155. [PubMed]
- Megler KJ. Anabole steroidmisbruk og avhengighet. Curr Psychiatr Rep. 2002;4: 377-387.
- Brower KJ, Blow FC, Young JP, Hill EM. Symptomer og korrelasjoner av anabole-androgen steroidavhengighet. Br J Addict. 1991;86: 759-768. [PubMed]
- Brun GR, Nemes C. Den undersøkende oppførselen til rotter i hullpanelapparatet: er hodedopp et gyldig mål på neofili? Behav Prosesser. 2008;78: 442-448. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
- Celerier E, Yazdi MT, Castane A, Ghozland S, Nyberg F, Maldonado R. Effekter av nandrolon på akutte morfinresponser, toleranse og avhengighet hos mus. Eur J Pharmacol. 2003;465: 69-81. [PubMed]
- Choi PY, Pope HG., Jr Vold mot kvinner og ulovlig androgen-anabole steroidbruk. Ann Clin Psychiatry. 1994;6: 21-25. [PubMed]
- Tittel 21, kapittel 13 - Forebygging og kontroll av narkotikamisbruk Lov om kontrollerte stoffer. 1991
- DiMeo AN, Wood RI. Sirkulerende androgener øker følsomheten for selvadministrering av testosteron hos mannlige hamstere. Pharmacol Biochem Behav. 2004;79: 383-389. [PubMed]
- Dimeo AN, Wood RI. ICV testosteron induserer Fos i mannlig syrisk hamsterhjerne. Psychoneuroendocrinology. 2006a;31: 237-249. [PubMed]
- DiMeo AN, Wood RI. Selvadministrering av østrogen og dihydrotestosteron hos hannlige hamstere. Horm Behav. 2006b;49: 519-526. [PubMed]
- Estrada M, Espinosa A, Muller M, Jaimovich E. Testosteron stimulerer intracellulær kalsiumfrigjøring og mitogen-aktiverte proteinkinaser via en G-proteinkoblet reseptor i skjelettmuskelceller. Endokrinologi. 2003;144: 3586-3597. [PubMed]
- Evangelou A, Jindal SK, Brown TJ, Letarte M. Nedregulering av transformerende vekstfaktor beta-reseptorer av androgen i eggstokkreftceller. Kreft Res. 2000;60: 929-935. [PubMed]
- Fernandez R, Collado P, Garcia Doval S, Garcia-Falgueras A, Guillamon A, Pasaro E. En molekylær metode for klassifisering av genotyper oppnådd i en avlskoloni fra testikkel-feminiserte (Tfm) rotter. Horm Metab Res. 2003;35: 197-200. [PubMed]
- Frye CA. Progestins påvirker motivasjon, belønning, kondisjonering, stress og / eller respons på misbruk av medikamenter. Pharmacol Biochem Behav. 2007;86: 209-219. [PubMed]
- Frye CA, Rhodes ME, Rosellini R, Svare B. Kjernen akkumuleres som et virkningssted for belønning av testosteronegenskaper og dets 5alpha-reduserte metabolitter. Pharmacol Biochem Behav. 2002;74: 119-127. [PubMed]
- Frye CA, Seliga AM. Testosteron øker analgesi, angstforstyrrelse og kognitiv ytelse hos hannrotter. Kognitiv, affektiv og atferdsmessig nevrovitenskap. 2001;1: 371-381.
- Gatson JW, Kaur P, Singh M. Dihydrotestosteron modulerer differensiert den mitogenaktiverte proteinkinasen og fosfoinositid 3-kinase / Akt-traséene gjennom den nukleære og nye membran-androgenreseptoren i C6-celler. Endokrinologi. 2006;147: 2028-2034. [PubMed]
- Graybiel AM, Moratalla R, Robertson HA. Amfetamin og kokain induserer medikamentspesifikk aktivering av c-fos-genet i striosom-matriksrom og limbiske underavdelinger i striatum. Proc Natl Acad Sci US A. 1990;87: 6912-6916. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
- Guo Z, Benten WP, Krucken J, Wunderlich F. Nongenomic testosteron kalsiumsignalering. Genotropiske handlinger i androgenreseptorfrie makrofager. J Biol Chem. 2002;277: 29600-29607. [PubMed]
- Han WW, Kumar MV, Tindall DJ. En rammeskiftmutasjon i androgenreseptorgenet forårsaker fullstendig androgenensensitivitet hos testikkel-feminiserte mus. Nucleic Acids Res. 1991;19: 2373-2378. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
- Johansson P, Lindqvist A, Nyberg F, Fahlke C. Anabole androgene steroider påvirker alkoholinntak, defensiv atferd og opioide peptider i hjernen hos rotta. Pharmacol Biochem Behav. 2000;67: 271-279. [PubMed]
- Johnson LR, Wood RI. Oral testosteron egenadministrasjon hos mannlige hamstere. Neuroendocrinology. 2001;73: 285-292. [PubMed]
- Kouri EM, Lukas SE, pave HG, Jr, Oliva PS. Økt aggressiv respons hos mannlige frivillige etter administrering av gradvis økende doser testosteronnypionat. Drug Alcohol Depend. 1995;40: 73-79. [PubMed]
- Lambert JJ, Belelli D, Peden DR, Vardy AW, Peters JA. Neurosteroidmodulering av GABAA-reseptorer. Prog Neurobiol. 2003;71: 67-80. [PubMed]
- Leshner AI. (NIDA Research Report Series).Anabole steroidemishandling. 2000: 1-8.
- Lieberherr M, Grosse B. Androgener øker intracellulær kalsiumkonsentrasjon og inositol 1,4,5-trisfosfat og diacylglyceroldannelse via et kikhoste-toksin-sensitivt G-protein. J Biol Chem. 1994;269: 7217-7223. [PubMed]
- MacLusky NJ, Hajszan T, Johansen JA, Jordan CL, Leranth C. Androgeneffekter på hippocampal CA1 ryggrads synapse antall beholdes i Tfm hannrotter med mangelfulle androgenreseptorer. Endokrinologi. 2006;147: 2392-2398. [PubMed]
- Malayev A, Gibbs TT, Farb DH. Inhibering av NMDA-responsen ved gravidolonsulfat avslører selektiv modulering av subtypen av NMDA-reseptorer med sulfaterte steroider. Br J Pharmacol. 2002;135: 901-909. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy-MP. Direkte effekter av anabole / androgene steroider, stanozolol og 17 alfa-metyltestosteron, på benzodiazepinbinding til. gamma-aminobutyric (a) reseptor. Neurosci Lett. 1995;189: 35-38. [PubMed]
- Masonis AE, McCarthy-MP. Effekter av den androgene / anabole steroidstanozololen på GABAA-reseptorfunksjon: GABA-stimulert 36Cl-tilstrømning og [35S] TBPS-binding. J Pharmacol Exp Ther. 1996;279: 186-193. [PubMed]
- Mermelstein PG, Becker JB, Surmeier DJ. Estradiol reduserer kalsiumstrømmer i rotte neostriatale nevroner via en membranreseptor. J Neurosci. 1996;16: 595-604. [PubMed]
- Morin LP, Wood RI. En stereotaksisk atlas av The Golden Hamster Brain. Academic Press; San Diego: 2001.
- Muschamp JW, Dominguez JM, Sato SM, Shen RY, Hull EM. En rolle for hypocretin (orexin) i seksuell mannlig atferd. J Neurosci. 2007;27: 2837-2845. [PubMed]
- Council NR, redaktør. NationalResearchCouncil. Veileder for stell og bruk av forsøksdyr. Nasjonalt forskningsråd; Washington, DC: 1996.
- Nguyen TV, Yao M, Pike CJ. Flutamid og cyproteronacetat gir agonisteffekter: induksjon av androgenreseptoravhengig nevrotisk beskyttelse. Endokrinologi. 2007;148: 2936-2943. [PubMed]
- NIH. Prinsipp for forsøksdyrpleie. National Institute of Health; Bethesda, Maryland: 1985.
- Olds J, Milner PM. Positiv forsterkning produsert ved elektrisk stimulering av septal-området og andre områder av rottehjerne. J Comp Physiol Psychol. 1954;47: 419-427. [PubMed]
- Orsini JC. Direkte effekter av androgener på lateral hypotalamisk nevronal aktivitet hos hannrotter: II. En trykkutkastingsstudie. Brain Res Bull. 1985;15: 547-552. [PubMed]
- Orsini JC, Barone FC, Armstrong DL, Wayner MJ. Direkte effekter av androgener på lateral hypothalamus neuronal aktivitet hos hannrotter: I. En mikroiontoforetisk studie. Brain Res Bull. 1985;15: 293-297. [PubMed]
- Packard MG, Cornell AH, Alexander GM. Belønner affektive egenskaper ved intra-nucleus accumbens injeksjoner av testosteron. Behav Neurosci. 1997;111: 219-224. [PubMed]
- Packard MG, Schroeder JP, Alexander GM. Uttrykk for testosteron-betinget stedpreferanse blokkeres ved perifer eller intra-akkumulert injeksjon av alfa-flupenthixol. Horm Behav. 1998;34: 39-47. [PubMed]
- Papakonstanti EA, Kampa M, Castanas E, Stournaras C. En rask, ikke-genom signaliseringsvei regulerer aktinomorganiseringen indusert ved aktivering av membran-testosteronreseptorer. Mol Endocrinol. 2003;17: 870-881. [PubMed]
- Paxinos G, Watson C. Rottehjernen: i sterotaksiske koordinater. 4th. Academic Press; New York: 1998.
- Peters KD, Wood RI. Anabole-androgen steroidavhengighet involverer androgen- og opioidreseptorer. Fortsettelser av det 34th årlige møtet i Society for Neuroscience; San Diego, CA. 2004.
- Peters KD, Wood RI. Androgenavhengighet hos hamstere: overdose, toleranse og potensielle opioidergiske mekanismer. Neuroscience. 2005;130: 971-981. [PubMed]
- Peterziel H, Mink S, Schonert A, Becker M, Klocker H, Cato AC. Rask signalering med androgenreseptor i prostatakreftceller. Onkogen. 1999;18: 6322-6329. [PubMed]
- Pfaff DW, Pfaffmann C. Luktstoff og hormonelle påvirkninger på den basale forhjernen til hannrotter. Brain Res. 1969;15: 137-156. [PubMed]
- Pike CJ. Testosteron demper beta-amyloid toksisitet i dyrkede hippocampale nevroner. Brain Research. 2001;919: 160-165. [PubMed]
- Pave HG, Jr, Katz DL. Psykiatriske og medisinske effekter av anabole-androgen steroidbruk. En kontrollert studie av 160-idrettsutøvere. Arch Gen Psykiatri. 1994;51: 375-382. [PubMed]
- Ramirez VD, Zheng J, Siddique KM. Membranreseptorer for østrogen, progesteron og testosteron i rottehjernen: fantasi eller virkelighet. Cell Mol Neurobiol. 1996;16: 175-198. [PubMed]
- Simply RB, Chang C, Muramatsu M, Swanson LW. Distribusjon av androgen og østrogen mRNA-holdige celler i rottehjernen: En hybridisasjonsstudie in situ. J Comp Neurol. 1990;294: 76-95. [PubMed]
- Stevis PE, Deecher DC, Suhadolnik L, Mallis LM, Frail DE. Differensielle effekter av østradiol og østradiol-BSA-konjugater. Endokrinologi. 1999;140: 5455-5458. [PubMed]
- Thomas P, Dressing G, Pang Y, Berg H, Tubbs C, Benninghoff A, Doughty K. Progestin, østrogen og androgen G-protein-koblede reseptorer i fiskegonader. Steroider. 2006;71: 310-316. [PubMed]
- Triemstra JL, Sato SM, Wood RI. Testosteron og nucleus accumbens dopamine i den mannlige syriske hamsteren. Psychoneuroendocrinology. 2008;33: 386-394. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
- Triemstra JL, Wood RI. Testosteron selvadministrering i kvinnelige hamstere. Behav Brain Res. 2004;154: 221-229. [PubMed]
- Vasudevan N, Pfaff DW. Membraninitierte handlinger av østrogener i nevroendokrinologi: nye prinsipper. Endocr Rev. 2007;28: 1-19. [PubMed]
- Tre RI. Oral testosteron egenadministrasjon hos mannlige hamstere: doserespons, frivillig trening og individuelle forskjeller. Horm Behav. 2002;41: 247-258. [PubMed]
- Wood RI, Johnson LR, Chu L, Schad C, Self DW. Testosteronforsterkning: intravenøs og intracerebroventrikulær selvadministrasjon hos hannrotter og hamstere. Psykofarmakologi (Berl) 2004;171: 298-305. [PubMed]
- Wood RI, Newman SW. Androgenreseptorimmunreaktivitet i den mannlige og kvinnelige syriske hamsterhjernen. J Neurobiol. 1999;39: 359-370. [PubMed]
- WorldAnti-DopingAgency. Negative analytiske funn rapportert av akkrediterte laboratorier. Verdens antidopingbyrå; Montreal, Canada: 2006.
- Yamada Y. Effekten av testosteron på enhetsaktivitet i rottehypothalamus og septum. Brain Res. 1979;172: 165-169. [PubMed]
- Yarbrough WG, Quarmby VE, Simental JA, Joseph DR, Sar M, Lubahn DB, Olsen KL, French FS, Wilson EM. En enkelt basemutasjon i androgenreseptorgenet forårsaker androgenensensitivitet hos den testikulære feminiserte rotten. J Biol Chem. 1990;265: 8893-8900. [PubMed]
- Yesalis CE, Kennedy NJ, Kopstein AN, Bahrke MS. Anabole-androgen steroidbruk i USA. JAMA. 1993;270: 1217-1221. [PubMed]
- Zhu X, Li H, Liu JP, Funder JW. Androgen stimulerer mitogen-aktivert proteinkinase i menneskelige brystkreftceller. Mol Cell Endocrinol. 1999;152: 199-206. [PubMed]
- Zhu Y, Rice CD, Pang Y, Pace M, Thomas P. Kloning, uttrykk og karakterisering av en membranprogestinreseptor og bevis på at den er en mellommann i meiotisk modning av fiskeococytter. Proc Natl Acad Sci US A. 2003;100: 2231-2236. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
- Zuloaga DG, Morris JA, Jordan CL, Breedlove SM. Mus med testikkelfeminiseringsmutasjonen demonstrerer en rolle for androgenreseptorer i reguleringen av angstrelatert atferd og den hypotalamiske hypofyse-binyre-aksen. Horm Behav. 2008a;54: 758-766. [PubMed]
- Zuloaga DG, setter DA, Jordan CL, Breedlove SM. Androgenreseptorers rolle i maskuliniseringen av hjernen og atferden: det vi har lært av mutasjonen av testikulær feminisering. Horm Behav. 2008b;53: 613-626. [PMC gratis artikkel] [PubMed]
- Zuloaga DZ, Jordan CL, Breedlove SM. Rotter med testikkelfeminiseringsmutasjonen (TFM) viser økte indekser for angst. Fortsettelser av det 36th årlige møtet i Society for Neuroscience; Atlanta, GA. 2006. Program nr. 152.118.