Równoczesna ekspozycja na metamfetaminę i zachowania seksualne zwiększają późniejszą nagrodę za narkotyki i powodują kompulsywne zachowania seksualne u samców szczurów (2011)

J Neurosci. 2011 Nov 9;31(45):16473-82. doi: 10.1523/JNEUROSCI.4013-11.2011.

Frohmader KS, Lehman MN, Laviolette SR, Coolen LM.

Źródło

Katedra Anatomii i Biologii Komórki, Schulich School of Medicine and Dentistry, University of Western Ontario, London, Ontario N6A5C1, Kanada.

Abstrakcyjny

Użytkownicy metamfetaminy (met) zgłaszają zwiększoną przyjemność seksualną, wielu partnerów seksualnych i uprawiają seks bez zabezpieczenia z powodu utraty kontroli hamowania. To kompulsywne zachowanie seksualne przyczynia się do wzrostu rozpowszechnienia zakażeń przenoszonych drogą płciową, ale podstawa neuronalna tego nie jest znana. Wcześniej ustaliliśmy paradygmat kompulsywnych zachowań seksualnych u samców szczurów, u których choroba trzewna wywołana chlorkiem litu była połączona z zachowaniami seksualnymi (Davis i in., 2010; Frohmader i in., 2010a). W bieżącym badaniu zbadano wpływ powtarzanego podawania Meta na sprawność seksualną, kompulsywne zachowania seksualne i płeć lub nagrodę Meth. Po pierwsze, wyniki wykazały, że siedem dziennych dawek 2 mg / kg, ale nie 1 mg / kg, Meth zwiększyło opóźnienia w celu zainicjowania krycia. To upośledzenie było widoczne 30 min po ostatnim podaniu Met, ale zanikło po 1 lub 7 d późniejszej abstynencji lekowej. Powtarzane 1 mg / kg Metabolizm spowodował kompulsywne zachowanie poszukiwania płci 2 tygodnie po ostatnim podaniu Meth. Efekt ten był zależny od podawania mety równoczesnego z doświadczeniem seksualnym i nie był obserwowany u zwierząt doświadczonych seksualnie, które otrzymywały tylko Metę. Co więcej, równoczesne Met i doświadczenia seksualne wzmocniły warunkową preferencję miejsca (CPP) dla Meth i dla jednoczesnego Meta i krycia w porównaniu z Meth lub kojarzeniem w pojedynkę. W przeciwieństwie do tego, CPP do kojarzenia samego zostało zmniejszone. Łącznie dane te wskazują, że związek między zażywaniem narkotyków i kryciem może być wymagany do wyrażania kompulsywnych zachowań seksualnych i jest skorelowany ze zwiększonym poszukiwaniem nagrody za jednoczesne narażenie na Met i krycie.

Poprzednia sekcjaNastępny rozdział

Wprowadzenie

Choroby związane ze zdrowiem seksualnym w uzależnionych populacjach podniosły świadomość skutków nadużywania narkotyków na zachowania seksualne, ponieważ przewlekłe zażywanie narkotyków wiąże się z niebezpiecznymi praktykami seksualnymi skutkującymi częstszym występowaniem zakażeń przenoszonych drogą płciową, w tym ludzkiego wirusa niedoboru odporności (HIV) (Crowe i George, 1989; Peugh i Belenko, 2001; Sánchez i in., 2002; Raj i in., 2007; Fisher i in., 2011). Te działania leków na zachowania seksualne są dobrze udokumentowane dla psychostymulującej metamfetaminy (Meth). Użytkownicy metody często zgłaszają zwiększone pożądanie seksualne, pobudzenie i przyjemność oraz identyfikują te czynniki jako główną motywację do zażywania narkotyków (Semple i in., 2002; Schilder i in., 2005; Green and Halkitis, 2006). Co więcej, nadużywanie Metów jest często związane z utratą hamującej kontroli zachowań seksualnych lub zachowań kompulsywnych seksualnie (Halkitis i in., 2001; McKirnan i in., 2001; Rawson i in., 2002; Green and Halkitis, 2006) i częstsze występowanie HIV (Frosch i in., 1996; Halkitis i in., 2001; Parsons i Halkitis, 2002).

Raporty na ludziach wykazujące użycie Met jako predyktora zachowań związanych z ryzykiem seksualnym opierają się na raportach własnych chronicznych użytkowników Met, którym brakuje wiarygodnego pomiaru związku między używaniem Met a zachowaniami seksualnymi (Frohmader i wsp., 2010b). W związku z tym, w celu zrozumienia złożonego związku między Meth a zachowaniami seksualnymi, konieczne jest zbadanie zmian zachowań seksualnych wywołanych przez Meth w kontrolowanych warunkach eksperymentalnych z wykorzystaniem modelu zwierzęcego.

Niedawno nasze laboratorium zbadało wpływ ostrej mety na kompulsywne poszukiwania płci u samców szczurów (Frohmader i wsp., 2010a). W badaniach tych wykorzystano paradygmat warunkowanej awersji płciowej, w którym samce szczurów nauczyły się kojarzyć kojarzenie z późniejszą chorobą trzewną (Peters, 1983; Agmo, 2002). Po ustaleniu związku między kryciem a bodźcem awersyjnym zwierzęta nie zainicjowałyby zachowań godowych (Davis i wsp., 2010; Frohmader i wsp., 2010a). Metaboliczne leczenie pojedynczego wstrzyknięcia tygodni przed kondycjonowaniem zakłóciło nabywanie zahamowanych reakcji seksualnych (Frohmader i wsp., 2010a). Tak więc samce szczurów poddane wstępnej metodzie poszukiwały zachowań seksualnych, chociaż kojarzenie wiązało się z bodźcem awersyjnym; było to nazywane nieprzystosowalnym lub kompulsywnym kryciem.

Ponieważ wcześniejsze badania oceniające skutki ostrego wstrzyknięcia leku i badania nad wpływem powtarzanych Metów na zachowania seksualne samców szczura są ograniczone, głównym celem obecnych badań było zbadanie wpływu powtarzanego podawania Meta na różne aspekty zachowań seksualnych, w tym wydajność, kompulsywne poszukiwanie seksu i nagroda. Po pierwsze, efekty powtarzanych Metów na kojarzenie były testowane po podaniu leku i po okresach abstynencji narkotykowej, aby odróżnić krótko- i długoterminowe skutki Meta na funkcje seksualne. Następnie zbadano wpływ powtarzanego podawania Met na nieprzystosowane zachowania seksualne, wprowadzając paradygmat warunkowanej awersji seksualnej. Ponadto ustalono, czy wyuczone powiązania między powtarzaną ekspozycją na Metę a zachowaniami seksualnymi były niezbędne dla wpływu Meta na nieprzystosowawcze zachowania seksualne. Na koniec sprawdzono, czy powtarzane narażenie na Met skutkuje zwiększoną nagrodą za Met i / lub krycie, jak określono paradygmatami warunkowej preferencji miejsca (CPP).

Materiały i Metody

Tematy

Dorosłe samce szczurów Sprague Dawley (210-225 g) otrzymano z Charles River Laboratories i trzymano w parach tej samej płci w standardowych klatkach z pleksiglasu (klatki domowe) zawierających kawałki rury PVC do wzbogacania środowiska. Zwierzęta trzymano w pomieszczeniu utrzymywanym w 12 / 12 h odwrócony cykl światło / ciemność (światła wyłączone w 11: 00 AM) z dostępną żywnością i wodą ad libitum. Wszystkie testy przeprowadzono podczas ciemnego cyklu pod czerwonym oświetleniem. Samice bodźców (200 – 225 g; Charles River Laboratories) stosowane do zachowań seksualnych zostały obustronnie wycięte z jajników i otrzymały podskórny implant zawierający 5% benzoesanu estradiolu i 95% cholesterolu. Aby wywołać podatność seksualną, samicom podawano 0.5 mg progesteronu w 0.1 ml oleju sezamowego (sc) 4 h przed zachowaniem seksualnym. Procedury eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami na Uniwersytecie Zachodniego Ontario oraz Komitetem ds. Opieki nad Zwierzętami i Uniwersytetu w Michigan i były zgodne z wytycznymi przedstawionymi przez Kanadyjską Radę ds. Opieki nad Zwierzętami i Narodowymi Instytutami Zdrowia.

Projekty eksperymentalne

Zachowania seksualne

W bieżącym eksperymencie badano wpływ powtarzanych met na wydajność seksualną i motywację bezpośrednio po wstrzyknięciu leku i po okresie abstynencji od narkotyków. Trzydzieści trzy samce szczurów przeżyły doświadczenia seksualne w oddzielnych klatkach testowych (areny krycia; 60 × 45 × 50 cm) zawierające czystą pościel podczas pięciu sesji krycia dwa razy w tygodniu. Podczas każdej sesji krycia mężczyźni mogli kojarzyć się z otwartą samicą aż do pojawienia się jednego wytrysku lub 1 h, w zależności od tego, co nastąpiło wcześniej. Tydzień po ostatniej sesji krycia samce przyzwyczaiły się do procedur eksperymentalnych i otrzymały podskórne wstrzyknięcie 1 ml / kg soli fizjologicznej przez trzy kolejne dni. Po każdym wstrzyknięciu zwierzęta umieszczono w komorach aktywności lokomotorycznej Plexiglas (40.5 × 40.5 cm; Med Associates) wyposażonych w matryce fotobeamowe 16 × 16; aktywność lokomotoryczną rejestrowano dla 30 min. Oprócz rejestrowania zachowań ambulatoryjnych po wstrzyknięciu leku, umieszczenie samców w komorach lokomotorycznych zapewniło środowisko związane z lekiem, odmienne od zachowania godowego. Następnie samce otrzymywały codzienne wstrzyknięcie 1 lub 2 mg / ml / kg Meth lub nośnika (sól fizjologiczna, 1 ml / kg; n = 11 każdy) dla 7 kolejnych dni. Po każdym wstrzyknięciu samce umieszczano w komorach aktywności lokomotorycznej i rejestrowano aktywność lokomotoryczną dla 30 min, po czym wracały do ​​klatek trzymających. Ostatniego dnia podawania mety samce usunięto z komory aktywności ruchowej po min. 30 i umieszczono na arenie krycia w celu zbadania wpływu Meta na zachowania seksualne. Zwierzęta testowano ponownie pod kątem zachowań seksualnych na arenach godowych po 1 d lub 1 tygodniu abstynencji lekowej.

Podczas sesji krycia obserwowano i rejestrowano standardowe parametry zachowań seksualnych, w tym opóźnienia w montażu (czas od wprowadzenia samicy do pierwszego montażu) i intromisję (czas od wprowadzenia kobiety do pierwszego wstrzyknięcia), które wskazują na motywację seksualną (Hull i wsp., 2002), jak również opóźnienie wytrysku (czas od pierwszej intromisji do wytrysku), liczba wierzchowców i intromisji przed wytryskiem oraz interwał postejakulacyjny, które są miarami sprawności seksualnej (Hull i wsp., 2002; Pfaus, 2009). Różnice między grupami określono dla każdego parametru zachowań seksualnych za pomocą nieparametrycznej analizy Kruskala-Wallisa i Dunna post hoc porównania, na poziomach istotności 0.05.

Aktywność lokomotoryczna

Aktywność lokomotoryczną po każdym wstrzyknięciu Meth analizowano za pomocą oprogramowania do analizy Med Associates jako odległość przebytą w odstępach 5-minutowych. Różnice między grupami zbadano za pomocą nieparametrycznej analizy Kruskala – Wallisa i Dunna post hoc porównania. W celu zbadania indukowanego metyką uczulenia na lokomotywę, aktywność indukowaną metą podczas ostatniej 10 min testu porównano między pierwszym a siódmym dniem wstrzyknięcia w każdej grupie leczenia dawką leku, stosując parowanie t testy. Do wszystkich porównań zastosowano poziom istotności 0.05.

Uwarunkowana niechęć do seksu

Eksperymentuj 1.

Po pierwsze, samce szczurów 50 przyzwyczajano do zastrzyków z solą fizjologiczną przez trzy kolejne dni, a samce uzyskiwały doświadczenia seksualne podczas trzech sesji krycia. Przed każdą sesją krycia zwierzętom wstrzykiwano 1 mg / kg Met lub 1 ml / kg soli fizjologicznej (sc), umieszczane na arenach krycia i, 30 min później, pozwalano na kojarzenie z samicą przyjmującą do wytrysku lub 1 h. Parametry zachowań seksualnych były rejestrowane i analizowane (patrz zachowania seksualne powyżej). Dwa tygodnie później zwierzęta poddano paradygmatowi uwarunkowanej awersji seksualnej. Samce podzielono na cztery grupy eksperymentalne zgodnie z obróbką wstępną (Meth lub solą fizjologiczną) i kondycjonowaniem [chlorek litu (LiCl) -parowany lub nieparowany]; grupy były niesparowane solą (n = 12), Meth-unpairs (n = 12), sparowany solą fizjologiczną (n = 13) i Meth-paired (n = 13). Uwarunkowany paradygmat awersji składał się z ośmiu kolejnych prób kondycjonowania 2 d. W pierwszym dniu wszystkie samce zostały umieszczone na arenie krycia w okresie przyzwyczajenia 10 min, po którym wprowadzono chłonną samicę. Samice pachniały wymazując olej migdałowy na szyję i podstawę ogona przed kryciem, ponieważ wykazano, że wskazówki węchowe ułatwiają zachowanie mężczyzn i wzmacniają kondycjonowanie (Lawrence i Kiefer, 1987; Agmo, 2002). Samcom pozwolono na kojarzenie przez 30 min lub do jednego wytrysku. Jeśli w ciągu pierwszych 15 min nie wystąpiły intromisje, wiązanie zostało zakończone. Jedną minutę po wytrysku lub zakończeniu badania mężczyźni otrzymali 127.2 mg / kg dootrzewnowe wstrzyknięcie 10 ml / kg LiCl (sparowane samce) lub sól fizjologiczną (niesparowane samce). LiCl lub sól fizjologiczną podawano niezależnie od tego, czy doszło do krycia. Następnego dnia niesparowani mężczyźni otrzymywali zastrzyk 10 ml / kg LiCl, podczas gdy mężczyźni otrzymywali sól fizjologiczną. Zwierzęta wracano do klatki domowej po zastrzykach.

Eksperymentuj 2.

Aby sprawdzić, czy efekty leczenia wstępnego Meth na uwarunkowaną awersję seksualną były zależne od jednoczesnego narażenia na Met i krycia lub z powodu samego Meta, przeprowadzono dodatkowy eksperyment. Samce szczurów (n = 20) otrzymał doświadczenia seksualne podczas pięciu sesji krycia, ale bez zabiegów Meth lub solankowych (n = 10 każdy). Zamiast tego, 1 tydzień po doświadczeniu seksualnym, otrzymali siedem zastrzyków raz dziennie Meth (1 mg / kg, sc) lub soli fizjologicznej i 2 tygodnie później poddano paradygmatowi warunkowej awersji seksualnej (patrz Eksperyment 1, powyżej).

W obu eksperymentach i podczas każdej próby kondycjonowania analizowano parametry zachowań seksualnych i określano różnice grupowe dla każdej próby kondycjonowania, stosując dwukierunkową analizę wariancji (czynniki: wstępne traktowanie / zasolenie, kondycjonowanie). Pearson χ2 analiza została wykorzystana do porównania różnic między grupami w odsetkach mężczyzn, którzy wykazywali wierzchowce, intromisje lub wytrysk w obrębie każdego szlaku warunkowego.

Uwarunkowana preferencja miejsca

Aby sprawdzić, czy wstępne leczenie metą wpłynęło na nagrodę za Met lub zachowania seksualne, przeprowadzono eksperymenty CPP. We wszystkich eksperymentach CPP zastosowano trójkomorowy aparat (Med Associates) zawierający dwie większe zewnętrzne komory (28 × 22 × 21 cm) z wyróżniającymi się wizualnymi i dotykowymi wskazówkami i oddzielonymi małym centralnym przedziałem (13 × 12 × 21 cm). . Drzwiczki po obu stronach przedziału centralnego oddzielały komory i można je było podnosić, aby umożliwić zwierzętom swobodny ruch w całym urządzeniu, lub opuszczać, aby ograniczyć je do określonego obszaru. Aparat był wyposażony w fotopromieniowanie do pomiaru czasu spędzonego w każdej komorze. Pierwszego dnia przeprowadzono 15-minutowy test wstępny w celu określenia początkowych preferencji każdego zwierzęcia w komorze, przy czym każdemu zwierzęciu pozwolono swobodnie wędrować między komorami aparatu CPP. Między grupami eksperymentalnymi nie wykryto żadnych znaczących preferencji dla żadnej z komór. Zwierzęta wykluczano z badania, jeśli wykazywały rozszerzoną preferencję co do określonej komory (różnica w ciągu 120 s; wykazana przez <10% badanych). Kondycjonowanie prowadzono w dniach 2 i 3. Podczas kondycjonowania początkowo niekorzystną komorę (komorę sparowaną) połączono z manipulacją nagrodą przez 30 minut. Początkowo preferowana komora (komora niesparowana) została połączona z manipulacją kontrolną. Kolejność, w jakiej zwierzęta były narażone na sparowane i niesparowane komory, była równoważona w każdej grupie eksperymentalnej. Posttest, który był proceduralnie identyczny jak test wstępny, został przeprowadzony czwartego i ostatniego dnia.

Eksperymentuj 1.

Po pierwsze, samce szczurów 50 przyzwyczajano do zastrzyków z solą fizjologiczną przez trzy kolejne dni, a samce uzyskiwały doświadczenia seksualne podczas trzech sesji krycia. Podczas każdej sesji krycia zwierzętom wstrzykiwano 1 mg / kg Met lub 1 ml / kg soli fizjologicznej (sc), umieszczane w klatkach testowych i, 30 min później, pozwalano na kojarzenie z samicą receptywną do wytrysku lub 1 h. Parametry zachowania seksualnego były rejestrowane i analizowane (opis, patrz zachowania seksualne powyżej). Tydzień później zwierzęta podzielono na cztery grupy eksperymentalne dobrane pod kątem leczenia farmakologicznego i sprawności seksualnej do testów CPP. Podczas kondycjonowania samcom wstrzyknięto albo Meth albo sól fizjologiczną (pasującą do wcześniejszego leczenia lekiem), a 30 min później pozostawiono do skojarzenia aż do wytrysku. Po minucie od wytrysku zwierzę umieszczono w sparowanej komorze. Komora niesparowana była związana z zastrzykiem (Meth lub saline) lub kryciem bez wstrzyknięcia. Po teście posttest, wynik preferencji (procent czasu spędzonego w sparowanej komorze podczas testu wstępnego i posttestu; obliczony jako czas spędzony na sparowanej komorze podzielony przez czas w komorze sparowanej + niesparowanej × 100) i wynik CPP (Eksperyment 1; różnica w czas spędzony w sparowanej komorze podczas posttestu minus test wstępny) obliczono dla każdego przedmiotu. Wyniki preferencji porównano w grupach eksperymentalnych przy użyciu par t testy i wyniki CPP porównano między grupami eksperymentalnymi przy użyciu jednokierunkowej ANOVA i testu najmniejszej istotnej różnicy Fishera dla post hoc porównania, wszystkie z poziomami ufności 95%.

Eksperymentuj 2.

Aby sprawdzić, czy efekty wstępnego leczenia Met na CPP dla Meta lub krycia zależały od jednoczesnej ekspozycji na Met i krycia lub z powodu samego Meta, przeprowadzono dodatkowy eksperyment. Samce szczurów otrzymywały Meth (1 mg / kg) i kojarzyły się jednocześnie przez 4 kolejne dni (n = 10). Dwie grupy kontrolne pozostały naiwne seksualnie i otrzymywały albo Meth albo sól fizjologiczną (n = 10 każdy). Tydzień później przeprowadzono CPP dla Meth. Wszystkie samce otrzymały zastrzyk Meth w sparowanej komorze i wstrzyknięcie soli było związane z niesparowaną komorą. Wyniki preferencji obliczono i porównano w grupach doświadczalnych za pomocą par t testy z poziomem istotności 0.05.

Eksperymentuj 3.

Aby sprawdzić, czy jednoczesna ekspozycja na Meth i krycie jest krytyczna dla zmienionej nagrody seksualnej, przeprowadzono badanie kojarzenia CPP. Samce szczurów otrzymywały jednocześnie Meth (1 mg / kg) lub sól fizjologiczną jednocześnie z kryciem przez cztery kolejne dni (n = 10 każdy). Tydzień później przetestowano CPP dla zachowań seksualnych. Wszystkie samce zostały umieszczone w sparowanej komorze po kojarzeniu i żadne skojarzenie nie było związane z niesparowaną komorą. Wyniki preferencji obliczono i porównano w grupach doświadczalnych za pomocą par t testy z poziomem istotności 0.05.

Uwarunkowana awersja do miejsca

Aby sprawdzić, czy ekspozycja Metod zmienia wrażliwość na chorobę wywoływaną przez LiCl, przeprowadzono eksperyment warunkowej awersji do miejsca (CPA). Testy CPA przeprowadzono w pierwszej połowie ciemnego okresu przy użyciu tego samego aparatu, który był używany do eksperymentów CPP (patrz Preferencje warunkowego miejsca powyżej). Przez trzy kolejne dni samce szczurów zdobywały doświadczenia seksualne równocześnie z Meth (1 mg / kg) lub solą fizjologiczną (n = 10 każdy). Tydzień później wszyscy mężczyźni otrzymali zastrzyk LiCl (10 ml / kg, ip) w połączeniu z początkowo preferowaną komorą, podczas gdy równoważna dawka soli fizjologicznej była związana z początkowo niewykorzystaną komorą. Po posttest, średnia ocena preferencji (procent czasu spędzonego w sparowanej komorze podczas testu wstępnego i posttestu; obliczony jako czas spędzony na sparowanej komorze podzielony przez czas w komorze sparowanej + niesparowanej × 100) i wynik CPA (różnica w czasie spędzonym w sparowana komora podczas posttestu minus test wstępny) została obliczona dla każdego przedmiotu. Wyniki preferencji porównano w grupach eksperymentalnych przy użyciu par t testy, podczas gdy wyniki CPA zostały porównane między grupami eksperymentalnymi za pomocą niesparowanych t testy, wszystkie z poziomem istotności 0.05.

wyniki

Zachowania seksualne

Metodę znacząco wpłynęło na rozpoczęcie zachowań seksualnych podczas krycia testowano 30 min po ostatnim wstrzyknięciu leku. Ten efekt był zależny od dawki przy 2 mg / kg, ale nie 1 mg / kg, Meth. Met znacząco zwiększył opóźnienia montowania i intromisji (p = Odpowiednio 0.001 i 0.002) w porównaniu z kontrolami soli fizjologicznej (Rys. 1A). Met nie wpływał na odsetek samców, którzy zapoczątkowali zachowanie, a 100% mężczyzn skojarzyło się we wszystkich trzech grupach leczenia. Met nie wywierał długoterminowego wpływu na inicjację zachowań seksualnych, ponieważ samce poddane wstępnej metodzie nie wykazywały zmienionego zachowania krycia w porównaniu z kontrolnymi solami fizjologicznymi, gdy krzyżowanie było testowane podczas dni abstynencji lekowej 1 i 7 (Rys. 1B,C). Wreszcie Meth nie wpływał na sprawność seksualną w żadnym momencie, ponieważ nie miało to wpływu na latencję do wytrysku (Rys. 1) lub liczby wierzchowców i włamań (dane nie pokazane). Tak więc powtarzane Met upośledzało inicjację kojarzenia podczas testowania krótko po podaniu, ale nie miało długoterminowego wpływu na motywację seksualną lub wydajność.

Rysunek 1. 

Wpływ powtarzających się Met na sprawność seksualną. A-C, Latency to mount (ML), intromission (IL) i ejakulacja (EL) po podaniu 0, 1 lub 2 mg / kg Meth 30 min po siódmym i ostatnim wstrzyknięciu leku (A) i dni abstynencji od narkotyków 1 (B) i 7 (C). Dane przedstawiono jako średnią ± SEM. * Znaczące różnice w porównaniu z samcami, którym wstrzyknięto sól fizjologiczną (p < 0.05).

Aktywność lokomotoryczna

Metodą 1 lub 2 mg / kg dawki zwiększono aktywność lokomotoryczną w porównaniu z grupą kontrolną (p <0.001, 1 i 2 mg / kg; Rys. 2A,B). Powtarzane podawanie mety spowodowało uczuloną odpowiedź lokomotoryczną - mężczyźni, którym podano 1 mg / kg mc, wykazywali znacznie większą aktywność lokomotoryczną po ostatnim wstrzyknięciu leku w porównaniu z pierwszym wstrzyknięciem (p = 0.042; Rys. 2C). W przeciwieństwie do tego, 2 mg / kg Meth powodował znacząco zmniejszoną aktywność lokomotoryczną w ostatnim dniu w porównaniu z pierwszym dniem (p = 0.009; Rys. 2C), co może wskazywać na wzrost zachowań stereotypowych.

Rysunek 2. 

Wpływ powtarzanych met na aktywność ruchową. A, B, Odległość pokonana przez samców, którym podawano 0, 1 lub 2 mg / kg Meth po pierwszym (A) i ostatni (B) Wtrysk met. Dane przedstawiono jako średnią ± SEM. * Znaczące różnice od kontroli dla wszystkich grup leczenia (p <0.05); #istotne różnice między 1 mg / kg Met i tylko kontrolne (p < 0.05). C, Indukowana przez metę uczulona odpowiedź ruchowa. Odległość pokonana przez samce, którym podawano 0, 1 lub 2 mg / kg Met po pierwszym i ostatnim wstrzyknięciu mety podczas ostatniej 10 min zapisów aktywności lokomotorycznej. Dane przedstawiono jako średnią ± SEM. * Znacząca różnica w stosunku do mężczyzn naiwnych seksualnie z tej samej grupy terapeutycznej (p < 0.05).

Uwarunkowana niechęć do seksu

Zachowania seksualne

Podczas fazy leczenia wstępnego Meth eksperymentu 1, zachowanie seksualne nie uległo zmianie w wyniku leczenia 1 mg / kg mety podczas każdej z trzech kolejnych sesji w porównaniu z mężczyznami poddanymi wstępnej obróbce solą fizjologiczną (Tabela 1). Wyniki te potwierdzają brak wpływu tej dawki Meth na zachowania seksualne, nawet gdy są podawane w tym samym środowisku. Co więcej, leczenie wstępne Meth nie zmieniło zachowania seksualnego w pierwszym dniu paradygmatu warunkowania (przed parowaniem LiCl; Tabela 1) lub podczas dowolnych prób kondycjonowania w grupach niesparowanych LiCl. Wyniki te potwierdzają, że Meth nie miał długoterminowego wpływu na zachowania seksualne.

Wyświetl tę tabelę: 

Tabela 1. 

Przegląd zachowań seksualnych

Kompulsywne zachowania seksualne

Eksperymentuj 1.

W przeciwieństwie do tego, powtarzane leczenie metą zwiększyło kompulsywne poszukiwanie płci. U zwierząt kontrolnych poddanych działaniu soli fizjologicznej uwarunkowana awersja seksualna znacząco hamowała zachowania seksualne. W szczególności zmniejszone odsetki samców z parami LiCl, które zamontowały się i wtrąciły w porównaniu z niesparowanymi samcami poddanymi wstępnej obróbce solą, były po raz pierwszy widoczne na szóstym (p = 0.039) próba kondycjonowania i trwała przez warunkową próbę 7 (p = 0.005; dane nie pokazane) i 8 (p <0.001; Rys. 3B). Znacząca różnica w odsetku mężczyzn, którzy wytrysnęli, była widoczna po raz pierwszy na czwartym (p = 0.041) warunkowa próba i trwała przez cały czas (p <0.001; Rys. 3C). Jednak leczenie wstępne Met miało wpływ na uwarunkowaną awersję seksualną, ponieważ mężczyźni poddani wstępnej metodzie leczenia w połączeniu z LiCl nie osiągnęli znaczącego zahamowania zachowań seksualnych do ostatniej próby kondycjonującej w porównaniu z niesparowanymi mężczyznami poddanymi wstępnej metodzie leczenia. Konkretnie, procent wstępnie leczonych metami samców LiCl wykazujących intromisję i ejakulację był znacznie obniżony tylko podczas warunkowego testu 8 (p = 0.03 i p = 0.011, odpowiednio). Tak więc leczenie wstępne 2 w Met przed tygodniem warunkowania spowodowało nieprzystosowawcze lub kompulsywne zachowanie poszukiwania płci.

Rysunek 3. 

Wpływ jednoczesnego krycia (płeć) i leczenia wstępnego Meth na uwarunkowaną awersję seksualną (Experiment 1). A, Grupy eksperymentalne obejmowały samce solne (Sal) lub wstępnie traktowane metą, które otrzymywały LiCl po kojarzeniu (parzyste samce) i wstępnie traktowanymi solą fizjologiczną lub samcami, które otrzymywały sól fizjologiczną po kojarzeniu (samce niesparowane). Podczas drugiego dnia każdego badania kondycjonującego pary sparowanych otrzymywały solankę, a niesparowane samce otrzymywały LiCl. B, C, Procent montowania samców (B) i wytrysk (C) podczas uwarunkowanej niechęci seksualnej po leczeniu wstępnym Meth podawanym jednocześnie z doświadczeniem seksualnym. * Znacząca różnica w stosunku do nieparzystych samców leczonych solą fizjologiczną (p <0.05); #znacząca różnica w stosunku do niepreparowanych samców metapreparowanych (p < 0.05).

Eksperymentuj 2.

Wpływ leczenia wstępnego Meth na uwarunkowaną awersję płciową zależał od jednoczesnego doświadczenia Met i kojarzenia się. W szczególności, uwarunkowana seksualna niechęć nie była dotknięta przez doświadczonych seksualnie mężczyzn, którzy otrzymywali Met przed doświadczeniem leczenia i kojarzenia się w różnym czasie (brak prądu). Odsetki mężczyzn poddanych wcześniejszej metodzie leczenia LiCl, u których występowały wierzchowce i ejakulacje, nie różniły się od sparowanych wcześniej samców z solą fizjologiczną (Rys. 4). Dane te sugerują, że początkowy związek między Meth a doświadczeniem seksualnym był czynnikiem wpływającym na wpływ Meth na kompulsywne zachowania seksualne.

Rysunek 4. 

Skutki niebieżnego krycia (płeć) i leczenia wstępnego Meth na uwarunkowaną awersję seksualną (Experiment 2). Procent montażu samców (A) i wytrysk (B) podczas LiCl uwarunkowanej awersji seksualnej po leczeniu wstępnym Meth nie związanym z doświadczeniem seksualnym. Włączono dwie grupy: LiCl-sparowany wstępnie solą fizjologiczną i LiCl-sparowany wstępnie z Meth.

Uwarunkowana awersja do miejsca

Dodatkowe eksperymenty kontrolne ujawniły, że niezdolność do hamowania kojarzenia po wstępnym leczeniu metą nie wynika z osłabionej wrażliwości na trzewną chorobę indukowaną LiCl, ponieważ wszystkie samce tworzyły niechęć do komory związanej z pojedynczą dawką LiCl. W szczególności, samce poddane wstępnej obróbce solą fizjologiczną i metanem spędzały znacznie mniej czasu w komorze sparowanej LiCl podczas posttestu w porównaniu z testem wstępnym (p = Odpowiednio 0.037 i 0.045; Rys. 5A). Co więcej, różnica czasu spędzonego w komorze sparowanej LiCl po teście posttest versus pretest była identyczna w grupach poddanych wstępnej metodzie i soli (Rys. 5B).

Rysunek 5. 

Wpływ jednoczesnego krycia (płeć) i leczenia wstępnego na CPA wywołane LiCl. A, B, Wynik preferencji (czas spędzony na sparowanej komorze podzielony przez czas w sparowanej + niesparowanej komorze × 100; A) i wynik CPA (różnica czasu spędzonego w sparowanej komorze podczas testu wstępnego po teście minus; B) w skojarzonych samcach wstępnie potraktowanych solą fizjologiczną (Sal; płeć + sól fizjologiczna) lub Meth (płeć + Meth). Dane przedstawiono jako średnią ± SEM. * Znaczące różnice w stosunku do testu wstępnego w tej samej grupie eksperymentalnej (p < 0.05).

Uwarunkowana preferencja miejsca

eksperyment 1

Badania nad własnym raportem pokazują, że użycie Meth zwiększa przyjemność seksualną i jest główną motywacją do używania narkotyków (Semple i in., 2002; Schilder i in., 2005; Green and Halkitis, 2006). To indukowane przez metę wzmocnienie przyjemności seksualnej nie zostało przetestowane w modelu gryzoni. Dlatego też paradygmat CPP został użyty do sprawdzenia, czy zachowanie seksualne z Meth jest bardziej satysfakcjonujące niż samo krycie lub podawanie Meth. Zgodnie z wcześniejszymi badaniami (Agmo i Berenfeld, 1990; Pfaus i Phillips, 1991; Tenk i wsp., 2009), kojarzenie w kontrolnych solach samców poddanych wstępnej obróbce solą fizjologiczną skutkowało CPP - mężczyźni spędzili więcej czasu w komorze płciowej + sparowanej solanki niż komora z solą fizjologiczną podczas posttestu (p = 0.001; Rys. 6C,D). Ponadto kontrolne samce nie stanowiły preferencji dla komory z płcią + solą fizjologiczną nad komorą parami płci, co dowodzi, że zastrzyk soli przed kryciem nie wpłynął na nagrodę seksualną (Rys. 6C,D). Wyniki pokazały, że met zwiększał CPP w odniesieniu do płci w porównaniu z samym kryciem lub samą metą. Samce spędzały więcej czasu podczas posttestu w komorze z płcią + Metodą niż komora z seksem (p <0.001; Rys. 6C) lub komora sparowana Meth (p = 0.02; Rys. 6C) lub w porównaniu z grupą kontrolną (p = Odpowiednio 0.002 i 0.05; Rys. 6D). Dlatego zachowania seksualne zbieżne z Meth wydają się być bardziej satysfakcjonujące niż zachowania seksualne lub Met sam u zwierząt, które były wcześniej traktowane zachowaniem seksualnym i jednocześnie.

Rysunek 6. 

Wpływ jednoczesnego kojarzenia (płeć) i wstępnego traktowania Meth na CPP wywołane kryciem i Met (eksperyment 1). Włączono cztery grupy. A, Dwie grupy otrzymały leczenie seksualne + sól fizjologiczną (Sal) i następujące leczenie w komorze sparowanej / niesparowanej: płeć + sól fizjologiczna / seks, seks + sól fizjologiczna / sól fizjologiczna. Pierwsza grupa służyła jako kontrola negatywna, ponieważ nie oczekuje się, że sól fizjologiczna zmieni CPP dla seksu. Druga grupa służyła jako kontrola pozytywna, ponieważ spodziewano się, że płeć wywoła CPP. B, Pozostałe dwie grupy otrzymały seks + leczenie wstępne Meth i następujące w parach sparowanych / niesparowanych: płeć + met / płeć lub płeć + met / met. Kolejność, w jakiej zwierzęta były wystawione na działanie sparowanych i niesparowanych komór, została zrównoważona w każdej grupie eksperymentalnej. C, Wynik preferencji (czas spędzony na sparowanej komorze podzielony przez czas w sparowanej + niesparowanej komorze × 100). Dane przedstawiono jako średnią ± SEM. * Znaczące różnice w stosunku do testu wstępnego w tej samej grupie eksperymentalnej (p < 0.05). D, Wynik CPP (różnica czasu spędzonego w sparowanej komorze podczas posttestu minus test wstępny). Dane przedstawiono jako średnią ± SEM. * Znaczące różnice w stosunku do płci + soli fizjologicznej / grupy seksu (p < 0.05).

eksperyment 2

Następnie ustalono, czy równoczesna obróbka wstępna Meth i płci wpłynęła na CPP tylko dla Met w porównaniu z leczeniem solą fizjologiczną w niesparowanej komorze. Rzeczywiście, samce wstępnie traktowane metą, które parzyły się równocześnie z każdym wstrzyknięciem leku, preferowały komorę sparowaną metanem (p = 0.01; Rys. 7). Natomiast samce, które otrzymywały powtarzane zastrzyki soli fizjologicznej lub zastrzyki Meth bez kontekstu krycia, nie wykazały zwiększonej preferencji dla komory sparowanej Meth podczas posttestu.

Rysunek 7. 

Wpływ jednoczesnego kojarzenia (płeć) i leczenia wstępnego na CPP indukowane meta- dem (eksperyment 2). Wynik preferencji (czas spędzony na sparowanej komorze podzielony przez czas w sparowanej + niesparowanej komorze × 100) u samców wstępnie potraktowanych solą fizjologiczną (Sal), Meth lub sex + Meth. Dane przedstawiono jako średnią ± SEM. * Znacząca różnica w stosunku do testu wstępnego w tej samej grupie eksperymentalnej (p < 0.05).

eksperyment 3

W końcu zbadano, czy jednoczesne Met i wstępne traktowanie parowania wpłynęły na CPP tylko w celu kojarzenia. Samce wstępnie traktowane Meth i kojarzące się nie stanowiły preferencji dla zachowań seksualnych, o czym świadczy brak zwiększonego czasu spędzonego w komorze z parami płci. Natomiast samce, które były leczone solą fizjologiczną i łączone w krycia, preferowały komorę z parami płciowymi (p = 0.003; Rys. 8). Łącznie dane te sugerują, że związek między Meth a kojarzeniem skutkuje zwiększeniem bodźca motywacyjnego dla Met w przypadku braku kojarzenia i jednoczesnego krycia z Meth, ale zmniejszonego bodźca zachęcającego do krycia pod nieobecność leku.

Rysunek 8. 

Wpływ jednoczesnego krycia (płeć) i leczenia wstępnego Meth na CPP wywołane kryciem (Eksperyment 3). Wynik preferencji (czas spędzony na sparowanej komorze podzielony przez czas w sparowanej + niesparowanej komorze × 100) u samców wstępnie potraktowanych seksem + solą fizjologiczną (Sal) lub seksem + Meth. Dane przedstawiono jako średnią ± SEM.

Dyskusja

Obecne badanie przetestowało wpływ powtarzających się Metów na zachowania seksualne, ze szczególnym naciskiem na sprawność seksualną, nieprzystosowanie lub kompulsywne poszukiwanie seksu, oraz kojarzenie i / lub nagrodę Meth. Głównym odkryciem tego badania było to, że leczenie wstępne Meth nie wpłynęło na ekspresję zachowań seksualnych, ale spowodowało kompulsywne zachowania seksualne w tygodniach po wstępnym leczeniu. Ten wpływ na kompulsywne zachowania seksualne zależał od jednoczesnego doświadczenia z Meth i krycia. Co więcej, równoczesne leczenie wstępne Metem i krycia poprawiło nagrodę Meth, ale zmniejszyło nagrodę seksualną. Razem badania te pokazują, że związek między Meth a kryciem ma kluczowe znaczenie dla rozwoju lub wyrażania kompulsywnych zachowań seksualnych i zmian w wynagrodzeniu seksualnym i narkotykowym.

Metaboliczne leczenie poprzedzające kojarzenie miało długoterminowy wpływ na zdolność paradygmatu uwarunkowanej awersji seksualnej do hamowania zachowań seksualnych. Efekt ten nie może być łatwo wyjaśniony przez deficyt uczenia się lub pamięci, ponieważ mężczyźni poddani wstępnej metodzie leczenia nie wykazali żadnych dowodów na zaburzenia uczenia się podczas paradygmatów niechęci seksualnej wywołanych CPP lub LiCl. Ponadto jest mało prawdopodobne, aby wielokrotne podawanie małej dawki Meth powodowało upośledzenie funkcji poznawczych i neurotoksyczność obserwowane zwykle po długotrwałym narażeniu na wysokie dawki Meth u szczurów (Walsh i Wagner, 1992; Friedman i in., 1998; Chapman i in., 2001; Schröder i in., 2003) i ludzi (Ornstein i in., 2000; Simon i in., 2002; Kalechstein i in., 2003), jako jednodniowe paradygmaty objadania się przy użyciu tej samej dawki co obecne badanie nie osłabiły uczenia się rozpoznawania obiektów i nie spowodowały neurotoksyczności (Marshall i in., 2007). Innym alternatywnym wyjaśnieniem upośledzonego nabywania lub wyrażania uwarunkowanej awersji seksualnej jest utrata wrażliwości na LiCl. Jednak zwierzęta były w równym stopniu zdolne do uzyskania uwarunkowanej awersji do komory uprzednio połączonej z LiCl. Stąd mężczyźni poddani wstępnej metodzie leczenia nie mieli zaburzonej pamięci asocjacyjnej ani zmniejszonej wrażliwości na chorobę wywoływaną przez LiCl lub LiCl. Wydaje się, że wstępne leczenie Meth spowodowało nieprzystosowanie lub kompulsywne poszukiwanie seksu, pomimo wyuczonych negatywnych konsekwencji, co jest zgodne z ludzkimi doniesieniami (Frosch i in., 1996; Halkitis i in., 2001; McKirnan i in., 2001; Rawson i in., 2002; Somlai i in., 2003; Green and Halkitis, 2006; Springer i in., 2007).

Ponadto, wpływ Met i wstępnego leczenia skojarzonego na zmniejszone hamowanie nieprzystosowalnych zachowań seksualnych nie jest łatwo wyjaśniony przez zwiększoną nagrodę związaną z kryciem. Przeciwnie, u zwierząt, które otrzymały jednoczesne doświadczenia Met i kojarzenia, szukanie nagrody związane z kryciem zostało ograniczone. Dlatego też należy zaproponować inne wyjaśnienie skutków jednoczesnego leczenia metą i kojarzeniem się pary na ekspresję niewłaściwego zachowania seksualnego. Niedawne badanie neuroanatomiczne z naszego laboratorium zidentyfikowało obszary mózgu, w których Meth może pośredniczyć w oddziaływaniu na zachowania seksualne (Frohmader i in., 2010c). W tym przypadku aktywację nerwową indukowaną przez kojarzenie lub metę badano stosując odpowiednio markery aktywności neuronowej, takie jak Fos lub fosforylacja MAPK. Met i kojarzenie koaktywowanych neuronów w jądrze półleżącym, podstawno-bocznym ciele migdałowatym i przednim obszarze obręczy przyśrodkowej kory przedczołowej (Frohmader i in., 2010c) oraz w korze oczodołowo-czołowej (Frohmader i Coolen, 2010). Kory przedczołowe i oczodołowo-czołowe są szczególnie interesujące, ponieważ przyczyniają się do zachowań uzależniających (Kalivas i Volkow, 2005; Kalivas i wsp., 2005; Lasseter i in., 2010; Winstanley i wsp., 2010). Co więcej, hipoaktywność tych obszarów mózgu została skorelowana z kilkoma chorobami psychicznymi związanymi z utratą kontroli hamowania (Graybiel i Rauch, 2000; Taylor i wsp., 2002; London i in., 2005). Te dowody sugerują, że Meth może działać w tych czołowych korach, aby powodować długoterminowe zmiany, które z kolei pośredniczą w kompulsywnych zachowaniach seksualnych. Zgodnie z tym wykazano, że częste występowanie kompulsywnych zachowań seksualnych pokrywa się z innymi zaburzeniami psychicznymi, w tym z uzależnieniem od narkotyków, lękiem i zaburzeniami nastroju (Bancroft, 2008). Przypuszcza się również, że za zmniejszoną kontrolę impulsów odpowiedzialna jest indukowana lekami dysfunkcja przyśrodkowej kory przedczołowej i kory oczodołowo-czołowej (Brewer i Potenza, 2008; Fineberg i in., 2010) i zwiększone zachowania ukierunkowane na płeć obserwowane u wielu osób uzależnionych (Jentsch i Taylor, 1999; Bancroft, 2008). W zgodzie z tym, uszkodzenia środkowej kory przedczołowej u samców szczurów spowodowały kompulsywne zachowanie poszukiwania płci w warunkowym paradygmacie awersji seksualnej stosowanym w obecnych badaniach (Davis i wsp., 2010).

Wcześniejsze badania wykazały, że powtarzane podawanie psychostymulantom lub opiatom zwiększa nagrodę wywołaną lekami mierzoną przez CPP (Lett, 1989; Shippenberg i Heidbreder, 1995; Shippenberg i wsp., 1996). Ponadto doświadczenia seksualne spowodowały późniejsze uwrażliwienie nagrody d-amfetaminy (Pitchers i wsp., 2010). W obecnym badaniu wpływ Met i / lub doświadczeń seksualnych na Meth CPP był testowany w warunkach, w których nie oczekiwano, aby skutkowało CPP leku: niska dawka Meth, pojedyncza próba kondycjonująca i testowanie w ciemnej fazie dnia czasami najniższy CPP (Webb i in., 2009a,b). Reżim uczulający powtarzanych Meth lub doświadczeń seksualnych wykorzystanych w obecnym badaniu nie spowodował zwiększenia Meth CPP. Jednak wstępne leczenie metą równoczesne z kryciem poprawiło nagrodę Met, co wskazuje, że to powiązanie między Meth a kryciem spowodowało zwiększenie poszukiwania nagrody za Meth. Wyniki te wydają się zgodne z ludzkimi doniesieniami o zwiększonej ilości Meta, szukającego identyfikującej przyjemności seksualnej w trakcie przyjmowania Meta jako głównego celu używania narkotyków (Semple i in., 2002; Schilder i in., 2005; Green and Halkitis, 2006). Obecnie nie jest jasne, które składniki zachowań seksualnych są krytyczne dla związku między Meth a kryciem. W obecnym badaniu wszyscy mężczyźni pokryli się do wytrysku. Jednak nasze wcześniejsze odkrycia sugerują, że interakcje społeczne mogą być wystarczające do wywołania nieprzystosowawczego zachowania poszukującego seksu (Frohmader i wsp., 2010a).

Substraty neuronalne, które mogą pośredniczyć w nasilaniu efektów jednoczesnego Meta i kojarzenia wstępnego w metach, obejmują jądro półleżące i jądro podstawno-boczne. Długotrwałe zmiany gęstości i morfologii kręgosłupa dendrytycznego w półleżących wynikach powtarzanego podawania leku (Brown i Kolb, 2001; Robinson i wsp., 2002; Li i wsp., 2003; Robinson i Kolb, 2004) lub doświadczenia seksualne (Meisel i Mullins, 2006; Pitchers i wsp., 2010) i przypuszcza się, że pośredniczą w indukowanym przez leki uczuleniu na narządy ruchu i nagrody (Pierce i Kalivas, 1997; Vanderschuren i Kalivas, 2000; Li i wsp., 2004). Ciało migdałowate podstawno-boczne ma kluczowe znaczenie dla pamięci bodźców warunkowych związanych z bodźcami narkotykowymi (Grace i Rosenkranz, 2002; Laviolette i Grace, 2006) i zaangażowany w uczulenie i wzmocnienie nagrody (Everitt i wsp., 1999; Cardinal i wsp., 2002; Zobacz, 2002). Zmiany lub inaktywacje ciała podstawno-bocznego ciała migdałowatego blokują nabycie (Whitelaw i in., 1996) i wyrażenie (Grimm and See, 2000) warunkowego przywrócenia kokainy. Ponadto, zmiany podstawno-boczne ciała migdałowatego skutkują zmniejszoną odpowiedzią na bodźce warunkowe połączone z pożywieniem (Everitt i wsp., 1989) lub wzmocnienie seksualne (Everitt i wsp., 1989; Everitt, 1990) u szczurów. Dlatego możliwe jest, że psychostymulujące i kojarzące się ze sobą zmiany w półleżących ciałach migdałowatych i podstawno-bocznych ciałach migdałowatych powodują nasilenie wrażliwości na Met.

Wykazano, że pułapki leków na uczulenie ułatwiają zachowania seksualne. Uczulające potraktowanie d-amfetaminą (codzienne zastrzyki 10 1.5 mg / kg) ułatwiają zachowania seksualne (Fiorino i Phillips, 1999a,b), a także podejście do bodźców seksualnych (Nocjar i Panksepp, 2002). Badania na samicach szczurów wstępnie traktowanych Meth (trzy codzienne wstrzyknięcia 5 mg / kg) spowodowały nasilone zachowania receptywne (Holder i in., 2010). W przeciwieństwie do tego, obecne badanie nie wykazało wpływu uwrażliwiającego schematu leczenia Metą na zachowania seksualne. Możliwe wyjaśnienia tej rozbieżności obejmują niższe dawki leku stosowane w bieżącym badaniu, różne oceny motywacji seksualnej i różnice płci (Becker i Hu, 2008).

Badania nad modelami uzależnienia od gryzoni skupiły się ostatnio na paradygmatach objadania się narkotyków w celu zbadania zaburzeń behawioralnych wywołanych przez metale (Belcher i in., 2008; Izquierdo i in., 2010; O'Dell i in., 2011), zmiany neuroplastyczne (Brennan i in., 2010) i neurotoksyczność (Moszczynska i in., 1998; Kuczenski i in., 2007; Graham i wsp., 2008). Głównym celem tych badań było uzyskanie poziomów leku w osoczu u szczurów zbliżonych do tych występujących u osób uzależnionych od Mety. W przeciwieństwie do tego, obecne badanie wykazało, że pasywne podawanie jednorazowo mety w dawce dobowej było wystarczające do wywołania długotrwałego kompulsywnego zachowania seksualnego. Paradygmat objadania się Meth nie został wykorzystany ze względów praktycznych: wysokie dawki Meth zaburzają zachowania seksualne (Frohmader i wsp., 2010a) a ludzie często używają leków poprawiających sprawność seksualną w celu utrzymania funkcji seksualnych (Semple i in., 2009). Celem obecnych zestawów badań było zbadanie nagród seksualnych i kompulsywnego krycia u zwierząt z nienaruszonym zachowaniem godowym. Wyniki pokazują, że kompulsywne zachowania seksualne i zmieniona nagroda narkotykowa i seksualna mogą być spowodowane bardzo niską ekspozycją na lek, która towarzyszy doświadczeniom seksualnym i nie są zależne od wywoływania nadmiernych poziomów Meth w mózgu.

Łącznie obecny zestaw badań stanowi ważny krok w kierunku lepszego zrozumienia wpływu Meta na kompulsywne zachowania seksualne i powiązania między nagrodą za narkotyki i seksualną. Ponadto dane te są zbieżne z danymi opisanymi u ludzi uzależnionych; w ten sposób model szczura płci męskiej można dalej wykorzystywać do badania molekularnych i strukturalnych mechanizmów wpływu mety na zachowania seksualne i potencjalnie przyczyniać się do przyszłych terapii uzależnienia od narkotyków.

Przypisy

  • Otrzymano sierpień 4, 2011.
  • Wersja otrzymała wrzesień 8, 2011.
  • Zaakceptowano wrzesień 23, 2011.
  • Praca ta była wspierana przez kanadyjski instytut badań zdrowotnych Grant RN 014705 na rzecz LMC

  • Autorzy deklarują brak konkurencyjnych interesów finansowych.

  • Korespondencję należy kierować do Lique M. Coolen, University of Michigan, Wydział Fizjologii Molekularnej i Integracyjnej, Nauki Medycznej II, Room 7732B, 1137 E. Catherine Street, Ann Arbor, MI 48109-5663. [email chroniony]

Referencje

    1. Agmo A

    (2002) Uwarunkowanie awersyjne warunkujące kopulację i motywacja seksualna u samców szczurów: dowody na dwuetapowy proces zachowań seksualnych. Physiol Behav 77: 425-435.

    1. Agmo A,
    2. Berenfeld R

    (1990) Wzmacnianie właściwości wytrysku u samców szczurów: rola opioidów i dopaminy. Behav Neurosci 104: 177-182.

    1. Bancroft J

    (2008) Zachowania seksualne, które „wymykają się spod kontroli”: teoretyczne podejście koncepcyjne. Psychiatr Clin North Am 31: 593-601.

    1. Becker JB,
    2. Hu M

    (2008) Różnice płci w narkomanii. Przód Neuroendocrinol 29: 36-47.

    1. Belcher AM,
    2. Feinstein EM,
    3. O'Dell SJ,
    4. Marshall JF

    (2008) Metamfetamina wpływa na pamięć rozpoznawczą: porównanie schematów dawkowania rosnącego i jednodniowego. Neuropsychopharmacology 33: 1453-1463.

    1. Brennan KA,
    2. Colussi-Mas J,
    3. Carati C,
    4. Lea RA,
    5. Fitzmaurice PS,
    6. Schenk S.

    (2010) Samopodawanie metamfetaminy i wpływ przygodności na poziomy tkanek monoaminy i metabolitu u szczura. brain Res 1317: 137-146.

    1. Brewer JA,
    2. Potenza MN

    (2008) Neurobiologia i genetyka zaburzeń kontroli impulsów: związki z uzależnieniami od narkotyków. Biochem Farmakol 75: 63-75.

    1. Brown RW,
    2. tłok B

    (2001) Uczulenie na nikotynę zwiększa długość dendrytyczną i gęstość kręgosłupa w jądrze półleżącym i korze zakrętu obręczy. brain Res 899: 94-100.

    1. Kardynał RN,
    2. Parkinson JA,
    3. Hall J,
    4. Everitt BJ

    (2002) Emocja i motywacja: rola ciała migdałowatego, prążkowia brzusznego i kory przedczołowej. Neurosci Biobehav Rev 26: 321-352.

    1. Chapman DE,
    2. Hanson GR,
    3. Kesner RP,
    4. Keefe KA

    (2001) Długotrwałe zmiany funkcji zwojów podstawy mózgu po reżimie neurotoksycznym metamfetaminy. J Pharmacol Exp Ther 296: 520-527.

    1. Crowe LC,
    2. George WH

    (1989) Alkohol a ludzka seksualność: przegląd i integracja. Psychol Bull 105: 374-386.

    1. Davis JF,
    2. Loos M,
    3. Di Sebastiano AR,
    4. Brown JL,
    5. Lehman MN,
    6. Coolen LM

    (2010) Uszkodzenia przyśrodkowej kory przedczołowej powodują nieprzystosowalne zachowania seksualne u samców szczurów. Biol Psychiatry 67: 1199-1204.

    1. Everitt BJ

    (1990) Motywacja seksualna: analiza neuronalna i behawioralna mechanizmów leżących u podstaw odpowiedzi apetycznych i kopulacyjnych samców szczurów. Neurosci Biobehav Rev 14: 217-232.

    1. Everitt BJ,
    2. Cador M,
    3. Robbins TW

    (1989) Interakcje między ciałem migdałowatym a prążkowiem brzusznym w powiązaniach bodziec-nagroda: badania z zastosowaniem harmonogramu wzmacniania seksualnego drugiego rzędu. Neuroscience 30: 63-75.

    1. Everitt BJ,
    2. Parkinson JA,
    3. Olmstead MC,
    4. Arroyo M,
    5. Robledo P,
    6. Robbins TW

    (1999) Procesy asocjacyjne uzależniające i nagradzają rolę podsystemów prążkowia brzuszno-brzusznego. Ann NY Acad Sci 877: 412-438.

    1. Fineberg NA,
    2. Potenza MN,
    3. Chamberlain SR,
    4. Berlin HA,
    5. Menzies L,
    6. Bechara A,
    7. Sahakian BJ,
    8. Robbins TW,
    9. Bullmore ET,
    10. Hollander E

    (2010) Badanie kompulsywnych i impulsywnych zachowań, od modeli zwierzęcych po endofenotypy: przegląd narracyjny. Neuropsychopharmacology 35: 591-604.

    1. Fiorino DF,
    2. Phillips AG

    (1999a) Ułatwianie zachowań seksualnych u samców szczurów po indukowanym d-amfetaminą uczuleniu behawioralnym. Psychopharmacology 142: 200-208.

    1. Fiorino DF,
    2. Phillips AG

    (1999b) Ułatwienie zachowań seksualnych i zwiększenie wypływu dopaminy w jądrze półleżącym samców szczurów po indukowanym d-amfetaminą uczuleniu behawioralnym. J Neurosci 19: 456-463.

    1. Fisher DG,
    2. Reynolds GL,
    3. Ware MR,
    4. Napper LE

    (2011) Stosowanie metamfetaminy i viagry: związek z zachowaniami seksualnymi. Arch Sex Behav 40: 273-279.

    1. Friedman SD,
    2. Castañeda E,
    3. Hodge GK

    (1998) Długotrwałe wyczerpanie monoamin, zróżnicowane wyzdrowienie i subtelne upośledzenie zachowania po neurotoksyczności indukowanej metamfetaminą. Pharmacol Biochem Behav 61: 35-44.

    1. Frohmader KS,
    2. Coolen LM

    (2010) Wpływ metamfetaminy na nieprzystosowawcze zachowania seksualne i leżące u ich podstaw substraty nerwowe. Soc Neurosci Abstr 36: 595-18.

    1. Frohmader KS,
    2. Bateman KL,
    3. Lehman MN,
    4. Coolen LM

    (2010a) Wpływ metamfetaminy na sprawność seksualną i kompulsywne zachowania seksualne u samców szczurów. Psychofarmakologia (Berl) 212: 93-104.

    1. Frohmader KS,
    2. Dzbany KK,
    3. Balfour ME,
    4. Coolen LM

    (2010b) Mieszanie przyjemności: przegląd wpływu leków na zachowania seksualne u ludzi i modeli zwierzęcych. Horm Behav 58: 149-162.

    1. Frohmader KS,
    2. Wiskerke J,
    3. Mądry RA,
    4. Lehman MN,
    5. Coolen LM

    (2010c) Metamfetamina działa na subpopulacje neuronów regulujących zachowania seksualne u samców szczurów. Neuroscience 166: 771-784.

    1. Frosch D,
    2. Shoptaw S,
    3. Huber A,
    4. Rawson RA,
    5. Ling W

    (1996) Seksualne ryzyko HIV wśród homoseksualnych i biseksualnych mężczyzn nadużywających metamfetaminy. J Subst Abuse Treat 13: 483-486.

    1. Grace AA,
    2. Rosenkranz JA

    (2002) Regulacja uwarunkowanych odpowiedzi podstawno-bocznych neuronów ciała migdałowatego. Physiol Behav 77: 489-493.

    1. Graham DL,
    2. Noailles PA,
    3. Kadet JL

    (2008) Różnicowe konsekwencje neurochemiczne eskalującego schematu dawkowania z obkurczeniem, po którym następują jednodniowe wyzwania związane z podawaniem metamfetaminy w wielu dawkach. J. Neurochem 105: 1873-1885.

    1. Graybiel AM,
    2. Rauch SL

    (2000) W stronę neurobiologii zaburzeń obsesyjno-kompulsyjnych. Neuron 28: 343-347.

    1. Zielona AI,
    2. Zapalenie Halkitis PN

    (2006) Krystaliczna metamfetamina i seksualność w miejskiej subkulturze gejowskiej: powinowactwo elektywne. Kult Kultowego seksu 8: 317-333.

    1. Grimm JW,
    2. Zobacz RE

    (2000) Dysocjacja pierwotnych i wtórnych, zależnych od nagrody jąder limbicznych w zwierzęcym modelu nawrotu. Neuropsychopharmacology 22: 473-479.

    1. Halkitis PN,
    2. Parsons JT,
    3. Stirratt MJ

    (2001) Podwójna epidemia: zażywanie kryształów metamfetaminy w związku z przenoszeniem HIV wśród homoseksualistów. J Homosex 41: 17-35.

    1. Holder MK,
    2. Hadjimarkou MM,
    3. Zup SL,
    4. Blutstein T,
    5. Benham RS,
    6. McCarthy MM,
    7. Mong JA

    (2010) Metamfetamina ułatwia zachowanie seksualne kobiet i zwiększa aktywację neuronów w przyśrodkowym ciele migdałowatym i brzuszno-przyśrodkowym jądrze podwzgórza. Psychoneuroendocrinology 35: 197-208.

    1. Hull EM,
    2. Meisel RL,
    3. Sachs BD

    (2002) w mózgu i zachowaniu hormonów, męskie zachowania seksualne, red. Pfaff DW, Arnold AP, Etgen AM, Fahrbach SE, Rubin RT (Elsevier Science, San Diego), pp 1 – 138.

    1. Izquierdo A,
    2. Belcher AM,
    3. Scott L,
    4. Cazares VA,
    5. Chen J,
    6. O'Dell SJ,
    7. Malvaez M,
    8. Wu T,
    9. Marshall JF

    (2010) Zaburzenia uczenia się specyficzne dla odwracania po reżimie stosowania metamfetaminy u szczurów: możliwy udział dopaminy w prążkowiu. Neuropsychopharmacology 35: 505-514.

    1. Jentsch JD,
    2. Taylor JR

    (1999) Impulsywność wynikająca z dysfunkcji czołowo-czołowej w nadużywaniu narkotyków: implikacje dla kontroli zachowania przez bodźce związane z nagrodami. Psychofarmakologia (Berl) 146: 373-390.

    1. Kalechstein AD,
    2. Newton TF,
    3. Green M

    (2003) Zależność od metamfetaminy wiąże się z zaburzeniami neurokognitywnymi w początkowych fazach abstynencji. J Neuropsychiatry Clin Neurosci 15: 215-220.

    1. Kalivas PW,
    2. Volkow ND

    (2005) Neuralna podstawa uzależnienia: patologia motywacji i wyboru. Am J Psychiatry 162: 1403-1413.

    1. Kalivas PW,
    2. Volkow N,
    3. Seamans J

    (2005) Niewykonalna motywacja w uzależnieniu: patologia w transmisji glutaminianu przedczołowo-półleżącego. Neuron 45: 647-650.

    1. Kuczenski R,
    2. Everall IP,
    3. Załogi L,
    4. Adame A,
    5. Grant I,
    6. Masliah E

    (2007) Zwiększająca się dawka-wielokrotna ekspozycja na metamfetaminę z binge powoduje degenerację kory nowej i układu limbicznego u szczura. Exp Neurol 207: 42-51.

    1. Lasseter HC,
    2. Xie X,
    3. Ramirez DR,
    4. Fuchs RA

    (2010) w neurobiologii behawioralnej uzależnienia od narkotyków, przedczołowa regulacja korowa poszukiwania leków w zwierzęcych modelach nawrotu narkotyków, red. Self DW, Staley Gottschalk JK (Springer, Berlin), pp 101 – 117.

    1. Laviolette SR,
    2. Grace AA

    (2006) Kanabinoidy wzmacniają plastyczność uczenia się emocjonalnego w neuronach przyśrodkowej kory przedczołowej za pośrednictwem podstawno-bocznych ciał migdałowatych. J Neurosci 26: 6458-6468.

    1. Lawrence GJ,
    2. Kiefer SW

    (1987) Zaprzestanie zachowań kopulacyjnych szczura płci męskiej z zastosowaniem choroby jako kary: ułatwienie z nowym zapachem. Behav Neurosci 101: 289-291.

    1. Lett BT

    (1989) Powtarzające się narażenia nasilają się, a nie zmniejszają korzystne efekty amfetaminy, morfiny i kokainy. Psychofarmakologia (Berl) 98: 357-362.

    1. Li Y,
    2. Kolb B,
    3. Robinson TE

    (2003) Lokalizacja utrzymujących się indukowanych amfetaminą zmian w gęstości kolców dendrytycznych na średnich neuronach kolczastych w jądrze półleżącym i ogoniastym. Neuropsychopharmacology 28: 1082-1085.

    1. Li Y,
    2. Acerbo MJ,
    3. Robinson TE

    (2004) Indukcja uczulenia behawioralnego jest związana z indukowaną kokainą plastycznością strukturalną w jądrze (ale nie w powłoce) jądra półleżącego. Eur J Neurosci 20: 1647-1654.

    1. Londyn ED,
    2. Berman SM,
    3. Voytek B,
    4. Simon SL,
    5. Mandelkern MA,
    6. Monterosso J,
    7. Thompson PM,
    8. Brody AL,
    9. Geaga JA,
    10. Hong MS,
    11. Hayashi KM,
    12. Rawson RA,
    13. Ling W

    (2005) Mózgowa dysfunkcja metaboliczna i upośledzenie czujności u ostatnio abstynentnych osób nadużywających metamfetaminy. Biol Psychiatry 58: 770-778.

    1. Marshall JF,
    2. Belcher AM,
    3. Feinstein EM,
    4. O'Dell SJ

    (2007) Metamfetaminowe zmiany nerwowe i poznawcze u gryzoni. Nałóg 102: 61-69.

    1. McKirnan DJ,
    2. Vanable PA,
    3. DG Ostrów,
    4. Nadzieja B

    (2001) Oczekiwania związane z „ucieczką” seksualną i ryzykiem seksualnym wśród homoseksualnych i biseksualnych mężczyzn zajmujących się narkotykami i alkoholem. J Subst Abuse 13: 137-154.

    1. Meisel RL,
    2. Mullins AJ

    (2006) Doświadczenia seksualne u samic gryzoni: mechanizmy komórkowe i konsekwencje funkcjonalne. brain Res 1126: 56-65.

    1. Moszczyńska A,
    2. Turenne S,
    3. Kish SJ

    (1998) Poziomy przeciwutleniacza glutationu w prążkowiu szczura są zmniejszone po obfitym podaniu metamfetaminy. Neurosci Lett 255: 49-52.

    1. Nocjar C,
    2. Panksepp J

    (2002) Przewlekłe przerywane leczenie amfetaminą zwiększa przyszłe zachowanie apetyczne dla leków i nagrody naturalnej: interakcja ze zmiennymi środowiskowymi. Behav Brain Res 128: 189-203.

    1. O'Dell SJ,
    2. Feinberg LM,
    3. Marshall JF

    (2011) Neurotoksyczny schemat metamfetaminy upośledza rozpoznawalność nowości mierzoną przez zadanie oparte na zapachu społecznym. Behav Brain Res 216: 396-401.

    1. Ornstein TJ,
    2. Iddon JL,
    3. Baldacchino AM,
    4. Sahakian BJ,
    5. London M,
    6. Everitt BJ,
    7. Robbins TW

    (2000) Profile zaburzeń poznawczych u przewlekłych osób nadużywających amfetaminy i heroiny. Neuropsychopharmacology 23: 113-126.

    1. Parsons JT,
    2. Zapalenie Halkitis PN

    (2002) Praktyki seksualne i zażywanie narkotyków przez mężczyzn zakażonych wirusem HIV, którzy często odwiedzają środowiska publiczne i komercyjne. Opieka nad AIDS 14: 815-826.

    1. Peters RH

    (1983) Nauczyłem się niechęci do zachowań kopulujących u samców szczurów. Behav Neurosci 97: 140-145.

    1. Peugh J,
    2. Belenko S

    (2001) Alkohol, narkotyki i funkcje seksualne: przegląd. J Leki psychoaktywne 33: 223-232.

    1. Pfaus JG

    (2009) Drogi pożądania seksualnego. J Sex Med 6: 1506-1533.

    1. Pfaus JG,
    2. Phillips AG

    (1991) Rola dopaminy w przewidujących i uzupełniających aspektach zachowań seksualnych u samca szczura. Behav Neurosci 105: 727-743.

    1. Pierce RC,
    2. Kalivas PW

    (1997) Model obwodowy ekspresji uczulenia behawioralnego na psychostymulanty podobne do amfetaminy. Brain Res Rev 25: 192-216.

    1. Dzbany KK,
    2. Balfour ME,
    3. Lehman MN,
    4. Richtand NM,
    5. Yu L,
    6. Coolen LM

    (2010) Neuroplastyczność w układzie mezolimbicznym wywołana naturalną nagrodą i późniejszą abstynencją nagrody. Biol Psychiatry 67: 872-879.

    1. Raj A,
    2. Saitz R,
    3. Cheng DM,
    4. Zima M,
    5. Samet JH

    (2007) Związki między używaniem alkoholu, heroiny i kokainy a zachowaniami seksualnymi wysokiego ryzyka wśród pacjentów detoksykacyjnych. Am J Drug Alcohol Abuse 33: 169-178.

    1. Rawson RA,
    2. Washton A,
    3. Domier CP,
    4. Reiber C

    (2002) Narkotyki i skutki seksualne: rola typu narkotyku i płci. J Subst Abuse Treat 22: 103-108.

    1. Robinson TE,
    2. tłok B

    (2004) Plastyczność strukturalna związana z ekspozycją na narkotyki. Neuropharmacology 47 (Suppl 1): 33-46.

    1. Robinson TE,
    2. Gorny G,
    3. Savage VR,
    4. tłok B

    (2002) Powszechne, ale specyficzne regionalnie działanie eksperymentalnej morfiny na samopoczucie morfiny na kolce dendrytyczne jądra półleżącego, hipokampa i kory nowej dorosłych szczurów. Synapse 46: 271-279.

    1. Sánchez J,
    2. Comerford M,
    3. Chitwood DD,
    4. Fernandez MI,
    5. McCoy CB

    (2002) Wysokie ryzyko zachowań seksualnych wśród osób zażywających heroinę, które nie mają historii stosowania narkotyków w zastrzykach: implikacje dla zmniejszenia ryzyka HIV. Opieka nad AIDS 14: 391-398.

    1. Schilder AJ,
    2. Lampinen TM,
    3. Miller ML,
    4. Hogg RS

    (2005) Krystaliczna metamfetamina i ecstasy różnią się pod względem niebezpiecznego seksu wśród młodych gejów. Can J Public Health 96: 340-343.

    1. Schröder N,
    2. O'Dell SJ,
    3. Marshall JF

    (2003) Neurotoksyczny schemat metamfetaminy poważnie upośledza pamięć rozpoznawczą u szczurów. Synapse 49: 89-96.

    1. Zobacz RE

    (2002) Neuronowe substraty uwarunkowanego nawrotu do zachowania poszukującego leków. Pharmacol Biochem Behav 71: 517-529.

    1. Semple SJ,
    2. Patterson TL,
    3. Grant I

    (2002) Motywacje związane z używaniem metamfetaminy wśród mężczyzn HIV, którzy uprawiają seks z mężczyznami. J Subst Abuse Treat 22: 149-156.

    1. Semple SJ,
    2. Strathdee SA,
    3. Zians J,
    4. Patterson TL

    (2009) Zachowania związane z ryzykiem seksualnym związane z jednoczesnym podawaniem metamfetaminy i innych leków w próbie mężczyzn zakażonych HIV, którzy uprawiają seks z mężczyznami. Am J Addict 18: 65-72.

    1. Shippenberg TS,
    2. Heidbreder C

    (1995) Uczulenie na uwarunkowane nagradzające działanie kokainy: właściwości farmakologiczne i czasowe. J Pharmacol Exp Ther 273: 808-815.

    1. Shippenberg TS,
    2. Heidbreder C,
    3. Lefevour A

    (1996) Uczulenie na uwarunkowane nagradzające działanie morfiny: farmakologia i charakterystyka czasowa. Eur J Pharmacol 299: 33-39.

    1. Simon SL,
    2. Domier CP,
    3. Sim T,
    4. Richardson K,
    5. Rawson RA,
    6. Ling W

    (2002) Wydajność poznawcza obecnych osób nadużywających metamfetaminy i kokainy. J Addict Dis 21: 61-74.

    1. Somlai AM,
    2. Kelly JA,
    3. McAuliffe TL,
    4. Ksobiech K,
    5. Hackl KL

    (2003) Predyktory zachowań związanych z ryzykiem zakażenia HIV w próbie społecznościowej mężczyzn i kobiet używających narkotyków do iniekcji. AIDS Behav 7: 383-393.

    1. Springer AE,
    2. Peters RJ,
    3. Shegog R,
    4. Biały DL,
    5. Kelder SH

    (2007) Stosowanie metamfetaminy i zachowania związane z ryzykiem seksualnym u amerykańskich uczniów szkół średnich: wyniki z krajowej ankiety dotyczącej zachowań ryzyka. Poprzednia Sci 8: 103-113.

    1. Taylor SF,
    2. Liberzon I,
    3. Decker LR,
    4. Koeppe RA

    (2002) Funkcjonalne badanie anatomiczne emocji w schizofrenii. Schizophr Res 58: 159-172.

    1. Tenk CM,
    2. Wilson H,
    3. Zhang Q,
    4. Dzbany KK,
    5. Coolen LM

    (2009) Nagroda seksualna u samców szczurów: wpływ doświadczenia seksualnego na uwarunkowane preferencje miejsca związane z ejakulacją i intrygami. Horm Behav 55: 93-97.

    1. Vanderschuren LJ,
    2. Kalivas PW

    (2000) Zmiany w transmisji dopaminergicznej i glutaminergicznej w indukcji i ekspresji uczulenia behawioralnego: krytyczny przegląd badań przedklinicznych. Psychofarmakologia (Berl) 151: 99-120.

    1. Walsh SL,
    2. Wagner GC

    (1992) Upośledzenia ruchowe po neurotoksyczności indukowanej metamfetaminą u szczura. J Pharmacol Exp Ther 263: 617-626.

    1. Webb IC,
    2. Baltazar RM,
    3. Lehman MN,
    4. Coolen LM

    (2009a) Dwukierunkowe interakcje między systemami okołodobowymi i nagradzającymi: czy ograniczony dostęp do żywności jest unikalny zeitgeber? Eur J Neurosci 30: 1739-1748.

    1. Webb IC,
    2. Baltazar RM,
    3. Wang X,
    4. Dzbany KK,
    5. Coolen LM,
    6. Lehman MN

    (2009b) Dobowe zmiany w nagrodzie naturalnej i lekowej, mezolimbicznej hydroksylazy tyrozynowej i ekspresji genu zegarowego u samca szczura. J Biol Rhythms 24: 465-476.

    1. Whitelaw RB,
    2. Markou A,
    3. Robbins TW,
    4. Everitt BJ

    (1996) Ekscytotoksyczne zmiany w podstawno-bocznym ciele migdałowatym upośledzają nabywanie zachowania poszukującego kokainy w schemacie wzmocnienia drugiego rzędu. Psychopharmacology 127: 213-224.

    1. Winstanley CA,
    2. Olausson P,
    3. Taylor JR,
    4. Jentsch JD

    (2010) Wgląd w związek między impulsywnością a nadużywaniem substancji od badań z wykorzystaniem modeli zwierzęcych. Alcohol Clin Exp Res 34: 1306-1318.

Powiązany artykuł

artykuły cytujące ten artykuł