Składki motywacji motywacyjnej Pavlovia do karmienia z użyciem cue-potencji (2018)

. 2018; 8: 2766.

Opublikowano online 2018 Feb 9. doi:  10.1038/s41598-018-21046-0

PMCID: PMC5807356

Abstrakcyjny

Sygnały sygnalizujące dostępność smacznej żywności nabierają zdolności do wzmagania poszukiwania i konsumpcji żywności. W bieżącym badaniu wykorzystano kombinację technik behawioralnych, farmakologicznych i analitycznych w celu zbadania roli motywacyjnej Pawłowskiej motywacji w karmieniu wzmocnionym sygnalizacją. Pokazujemy, że wskazówka sparowana z roztworem sacharozy (CS +) może przenieść kontrolę nad karmieniem w celu stymulowania konsumpcji sacharozy w nowym pojemniku i że efekt ten zależy od aktywacji receptorów dopaminowych D1, o których wiadomo, że moduluje inne formy motywacji cue zachowanie, ale nie smak. Analizy mikrostrukturalne zachowania polegającego na lizaniu sacharozy wykazały, że CS + miał tendencję do zwiększania częstotliwości, z jaką szczury angażowały się w aktywne ataki lizania, nie mając wiarygodnego wpływu na czas trwania lizania ataków, co było miarą związaną ze smakowitością sacharozy. Co więcej, odkryliśmy, że indywidualne różnice w wywoływanym przez CS + wzroście częstotliwości ataku były związane z całkowitym spożyciem sacharozy w teście, co potwierdza pogląd, że proces ten był związany ze znaczącym rozregulowaniem zachowań żywieniowych. W związku z tym obecne badanie (1) pokazuje, że zależny od dopaminy pawilowski motywacyjny proces motywacyjny może pośredniczyć w karmieniu wzmocnionym sygnalizacją i (2) przedstawia eksperymentalne i analityczne podejście do analizowania tego aspektu zachowania.

Wprowadzenie

Sygnały środowiskowe, które sygnalizują dostępność smacznych potraw, mogą wywołać silne pragnienie jedzenia- i promować jedzenie bez głodu, efekt obserwowany u gryzoni, i ludzie-. Ten behawioralny wpływ, który, jak się uważa, odgrywa ważną rolę w przejadaniu się i otyłości-, może być badany za pomocą zadania żywienia wzmocnionego cue (CPF). W typowym badaniu CPF głodne zwierzęta poddawane są warunkowaniu Pawłowskiemu polegającemu na powtarzających się parach między bodźcem warunkowym (CS +; np. Ton słuchowy) a niewielką ilością smacznego pokarmu lub płynu, takiego jak roztwór sacharozy, który spożywają z kubka znajduje się w ustalonej pozycji w komorze doświadczalnej. Następnie mają nieograniczony dostęp do swojej karmy konserwacyjnej, aby upewnić się, że są w pełni nasycone przed testowaniem. Zwierzęta są następnie wracane do komory i mogą swobodnie spożywać sacharozę z kubka, podczas gdy CS + jest sporadycznie prezentowany w sposób niekonsekwentny. W takich warunkach zwierzęta wykazują wyraźne zwiększenie spożycia pokarmu podczas sesji testowych z CS + w stosunku do sesji z niesparowanym bodźcem (CS−).

Podczas gdy takie odkrycia wskazują, że zewnętrzne sygnały mogą działać niezależnie od fizjologicznego głodu, aby promować karmienie, procesy psychologiczne leżące u podstaw tego efektu nie są mocno ustalone. Jedną z możliwości jest to, że sygnały związane ze spożywaniem smacznych pokarmów uzyskują odruchową lub nawykową kontrolę nad karmieniem (tj. W oparciu o reakcję na bodziec). Jeśli jest to podstawowy mechanizm pośredniczący w CPF, wówczas CS + powinien stymulować konsumpcję poprzez wywoływanie specyficznych zachowań żywieniowych, które zostały ustalone podczas warunkowania Pawłowa. To uczenie się odpowiedzi widok jest wiarygodny, gdy źródło pożywienia jest ustalane podczas szkolenia i testowania, jak w przykładzie opisanym powyżej. Chociaż ten scenariusz dotyczy większości demonstracji CPF, pojawiły się również doniesienia, że ​​sygnały związane z żywnością mogą powodować karmienie w nowych lokalizacjach-, wskazując, że mogą kontrolować karmienie pośrednio. Jednym z możliwych wyjaśnień jest to, że takie sygnały wzmagają karmienie dzięki temu samemu Pawłowskiemu motywacyjnemu procesowi motywacyjnemu, który pozwala im wywoływać i ożywiać instrumentalne zachowania poszukujące pożywienia,, To motywacyjny widok przewiduje, że CS + wywołuje chęć poszukiwania pożywienia, co również prowadzi do karmienia, gdy żywność jest łatwo dostępna. Alternatywnie, podając dowody, że sygnały dla smacznego jedzenia mogą wzmocnić hedoniczną ocenę bodźców smakowych-możliwe jest, że sygnały wzmagają karmienie, sprawiając, że jedzenie staje się bardziej smaczne. Chociaż ten pogląd hedoniczny jest mechanistycznie odmienny od poglądu motywacyjnego, konta te nie wykluczają się wzajemnie i mogą wyjaśniać różne aspekty CPF,.

Jednym ze sposobów rozróżnienia motywacyjnych i hedonicznych rachunków CPF jest określenie, w jaki sposób sygnały sparowane z pokarmem wpływają na mikrostrukturę karmienia. Gdy gryzonie mogą swobodnie spożywać roztwór sacharozy lub innych smacznych płynów, angażują się w lizanie ataków o różnym czasie trwania, które są oddzielone okresami bezczynności. Zważywszy, że średni czas trwania tych liznięć zapewnia wiarygodną i selektywną miarę smakowitości płynów,, uważa się, że częstotliwość tych ataków jest kontrolowana przez procesy motywacyjne-. Zatem, jeśli CS + stymuluje karmienie przez zwiększenie smakowitości sacharozy, to ten sygnał powinien zwiększyć czas, ale niekoniecznie częstotliwość lizania ataków. W przeciwieństwie do tego, motywacyjny pogląd przewiduje, że CS + powinien wywoływać poszukiwanie i konsumpcję sacharozy, nawet gdy zwierzęta są zaabsorbowane innymi czynnościami, co prowadzi do częstszych, ale niekoniecznie dłuższych, okresów lizania.

W bieżącym badaniu zbadano wpływ dostarczania CS + na mikrostrukturę lizania sacharozy przy użyciu dwóch protokołów CPF, jednego, w którym sacharoza była zawsze dostępna w tej samej lokalizacji (Experiment 1), i jednego, w którym źródło zostało zmienione podczas treningu i testowania (Experiments 2 i 3), pozwalając nam ocenić pośredni wpływ CS +. Nasze podejście do oceny tego niezależnego od odpowiedzi (uogólnionego) wpływu sprzężonych z żywnością sygnałów na żywienie modelowano po zadaniu Pavloviana-to-instrumental transfer (PIT), które jest szeroko stosowane do badania motywacyjnego wpływu bodźców w nagrodę na zachowanie szukające nagrody,,. Przyjęliśmy również parametry warunkujące i testujące Pavlovian powszechnie stosowane w badaniach PIT w celu ułatwienia porównania z tą literaturą. Biorąc pod uwagę, że aktywność receptora dopaminergicznego D1 jest kluczowa dla ekspresji PIT i innych miar zachowań motywacyjnych- ale jest stosunkowo nieistotny dla hedonicznych aspektów zachowania żywieniowego,,, oceniliśmy również wpływ blokady receptora D1 na lizanie sacharozy nasilonej przez cue (Experiment 3) jako dalszą próbę roli motywacji w tym zakresie. Na koniec przeanalizowaliśmy mikrostrukturę danych lizania sacharozy z tych eksperymentów, aby sprawdzić, czy CPF było selektywnie związane ze wzrostami częstości lub czasu trwania lizania sacharozy, jak można by przewidzieć, odpowiednio, w motywacyjnych i hedonicznych poglądach CPF.

wyniki

Karmienie wzmocnione cue z sygnałem, który sygnalizuje źródło pożywienia

W naszym pierwszym eksperymencie zastosowaliśmy konwencjonalny, zgodny z reakcją projekt CPF, w którym specyficzne odpowiedzi wymagane do spożycia sacharozy były takie same we wszystkich fazach szkolenia i testowania. Głodne szczury otrzymywały 10 d od Pawłowa, aby ustalić CS + jako wskazówkę dostępności sacharozy w kubku z jedzeniem po jednej stronie komory. Do ostatniego dnia kondycjonowania, wejścia do kubka (± SEM między pacjentami) były znacząco wyższe podczas CS + (23.72 ± 2.79 na minutę) w porównaniu z odstępem między próbami [18.27 ± 3.25 na minutę; sparowane próbki t-test, t(15) = 3.13, p = 0.007]. Wejścia do pucharów podczas CS− (8.60 ± 1.91 na minutę) nie różniły się istotnie od okresu międzypróbowego [10.69 ± 2.00 na minutę; sparowane próbki t-test, t(15) = −1.60, p = 0.130].

Szczury następnie poddano dwóm testom CPF w stanie sycącym, aby scharakteryzować wpływ CS + na lizanie sacharozy. W każdym teście szczury miały swobodny dostęp do roztworu 2% lub 20% sacharozy, co pozwoliło nam ocenić wpływ smakowitości sacharozy na CPF. Postać 1a pokazuje całkowitą liczbę lizawek obserwowanych podczas prób CS jako funkcję okresu CS, typu CS i stężenia sacharozy. Dane analizowano za pomocą uogólnionych modeli liniowych efektów mieszanych (tabela uzupełniająca S1). Co ważne, istniała znacząca interakcja Okresu CS × Typ CS, t(116) = 12.70, p <0.001. Dalsza analiza (zapadanie się w zależności od stężenia) ujawniła znaczny wzrost w badaniach CS +, p <0.001, ale nie próby CS−, p = 0.118, co wskazuje, że CS + był bardziej skuteczny niż CS− w zwiększaniu lizania sacharozy, w porównaniu z poziomami sprzed CS. Nasza analiza wykazała również, że na selektywność sygnalizacyjną istotny wpływ miało stężenie sacharozy (interakcja trójdrożna, p <0.001). W szczególności, chociaż CS + był wysoce skuteczny w zwiększaniu lizania sacharozy zarówno w 2%, jak i 20% warunkach, ps <0.001, CS− nie wpłynął istotnie na współczynnik lizania w teście 2%, p = 0.309, ale spowodowało niewielki, ale znaczący wzrost testu 20%, p = 0.039. Tak więc, chociaż wskazówka sparowana z pożywieniem była ogólnie bardziej skuteczna w kontrolowaniu karmienia, niesparowana wskazówka wydawała się wywierać podobny wpływ, gdy szczurom pozwolono spożyć bardzo smaczny roztwór sacharozy w teście.

Rysunek 1 

Całkowite zachowanie lizania. Wyniki eksperymentów 1 – 3 (a – c, odpowiednio) oceniając wpływ cue sacharozy (CS +) i niesparowanego cue (CS−) na lizanie sacharozy (a) tego samego kubka z jedzeniem używanego podczas warunkowania Pawłowa i ...

Przeniesienie karmienia wzmocnionego sygnalizacją do nowego źródła żywności

Ponieważ sacharoza była dostępna w tym samym źródle podczas treningu i testów w Experiment 1, nie jest jasne, czy zaobserwowany efekt CPF był zależny od zdolności CS + do (1) motywować szczury poszukują i spożywają sacharozę lub (2) bezpośrednio wywołują określone odruch warunkowylub nawyk. Eksperyment 2 skupił się bardziej na poprzedniej hipotezie, sprawdzając, czy CS + związany z dostarczaniem sacharozy do kubka z żywnością może motywować lizanie sacharozy z dziobka po przeciwnej stronie komory podczas testu, porównywalny ze zjawiskami behawioralnymi obserwowanymi w PIT.

Szczury były trenowane przy użyciu tej samej procedury warunkowania Pawłowa, co w Eksperymencie 1, co skutkowało zachowaniem antycypacyjnym zbliżonym do cue w ostatnim dniu uwarunkowań Pawłowskich. Podejścia do kubków pokarmowych (± SEM między pacjentami) były większe podczas CS + (18.71 ± 1.73 na minutę) w stosunku do odstępu między próbami [12.49 ± 0.98 na minutę; sparowane próbki t-test, t(15) = 3.02, p = 0.009]. Nie było istotnych różnic między CS− (9.41 ± 0.98 na minutę) a odstępem między próbami [8.44 ± 0.88 na minutę; sparowane próbki t-test, t(15) = 0.98, p = 0.341].

Biorąc pod uwagę, że wpływ CS + na lizanie sacharozy w eksperymencie 1 był nieco bardziej widoczny, gdy szczury były testowane z 2% sacharozą, nasze początkowe badanie z sacharozą dostępną w nowym źródle (dziobek, z kubkiem na żywność przykrytym nieprzezroczystym panelem - patrz Metody) koncentruje się na tym stanie. Jednak w tym teście lizanie sacharozy nie różniło się istotnie między CS + (lizanie 328.1 ± 84.8) a okresami przed CS + [lizanie 245.6 ± 45.9; sparowane próbki t-test, t(15) = 1.07, p = 0.300]. Aby jeszcze bardziej zniechęcić konkurencję do reakcji i wzmocnić picie sacharozy z dziobka, szczurom dano 5 dodatkowych sesji treningu polizania z dziobka 20% sacharozy w warunkach braku pożywienia przy braku CS. Następnie szczury całkowicie nasycono karmą domową i podano im dwa testy CPF z sacharozą dostępną przy metalowym dziobku. Podczas testów szczury miały stały dostęp do 2% lub 20% roztworu sacharozy w oddzielnych testach (u osobników, kolejność z przeciwwagą).

Postać 1b pokazuje, że podczas tej rundy testów CS + skutecznie promował picie sacharozy w nowej lokalizacji, nawet jeśli ta wskazówka nigdy nie była bezpośrednio związana z tym zachowaniem. Analiza modelu z efektami mieszanymi (tabela uzupełniająca S2) znaleziono istotną interakcję Typu CS × Okres CS, t(120) = 15.16, p <0.001, co wskazuje, że CS + był bardziej skuteczny w zwiększaniu lizania sacharozy w stosunku do poziomów wyjściowych (CS vs. okres przed CS, p <0.001) niż CS− (CS vs. okres przed CS, p = 0.097), jak w eksperymencie 1. Stężenie sacharozy nie wpłynęło istotnie na selektywność sygnalizacyjną tego efektu (interakcja trójdrożna, p = 0.319). Co ważne, chociaż wskaźniki lizania wydawały się być podwyższone w okresie przed CS- w porównaniu z okresami przed CS +, sparowane próbki t-testy wykazały, że różnica ta nie była istotna statystycznie w warunku 2%, t(15) = 1.66, p = 0.118 lub w stanie 20%, t(15) = 1.56, p = 0.139. Należy się tego spodziewać, biorąc pod uwagę pseudolosową strukturę badania stosowaną podczas szkolenia i testowania, która zapobiega systematycznym (międzypróbowym) efektom przeniesienia i wyklucza przewidywanie przyszłego typu badania (lub czasu). Warto również zauważyć, że te same zwierzęta wykazywały podobne podwyższenie swoistości dla CS + podczas lizania w Eksperymencie 3, gdy ich wskaźniki lizania przed CS- i przed CS + były bardziej porównywalne (patrz ryc. 1c, pojazd).

Uzależnienie od receptorów dopaminy typu D1

Wyniki Eksperymentu 2 wskazują, że CS + nabył zdolność do zwiększania konsumpcji sacharozy przez wyzwalanie zachowania żywieniowego, które nigdy nie było bezpośrednio związane z tym sygnałem, zgodnie z wpływem motywacyjnym podobnym do PIT. Biorąc pod uwagę znaczenie receptorów dopaminy typu D1 w motywacji motywacyjnej Pawłowa-, Experiment 3 zbadał, czy blokowanie aktywności tych receptorów zakłóciłoby ekspresję CPF. Tym samym szczurom użytym w eksperymencie 2 podano ostatnią parę testów CPF (20% sacharoza) po wstępnym traktowaniu SCH-23390 (0.04 mg / kg), selektywnym antagonistą D1 lub podłożem. Wyniki testu pokazano na ryc. 1c (także tabela dodatkowa S3).

Analiza ujawniła główny efekt leczenia farmakologicznego, t(120) = −2.15, p = 0.034, przy czym lizanie sacharozy było ogólnie obniżone przez SCH-23390. Co ważne, odkryliśmy istotną interakcję Lek × okres CS × typ CS, t(120) = −20.91, p <0.001, co wskazuje, że SCH-23390 specyficznie zakłócał ekspresję CPF. Rzeczywiście, dalsza analiza wykazała, że ​​podczas gdy CS + znacznie zwiększył lizanie sacharozy w porównaniu z poziomami sprzed CS + w teście na nośniku, p <0.001, nie było wpływu CS + w teście SCH-23390, p = 0.982. Podobnie jak w przypadku uogólnienia sygnału obserwowanego w eksperymencie 1, CS− wywołało nieznacznie znaczący wzrost lizania sacharozy w obu stanach leku, ps ≤ 0.049. Zatem antagonizm receptora dopaminowego typu D1 poprzez podawanie SCH-23390 istotnie upośledzał karmienie wywołane CS +, zgodnie z motywującym kontem motywacyjnym CPF.

Analiza mikrostrukturalna wpływu sygnałów sacharozy i stężenia sacharozy na karmienie

Wyniki eksperymentów 2 i 3 sugerują, że zastosowany tutaj nowy protokół podobny do PIT wspiera motywacyjną formę CPF, ponieważ wskazówki były w stanie motywować zachowania żywieniowe w miejscu oddzielonym od źródła pokarmu sygnalizowanego przez sygnał. Aby dalej przetestować to konto, zbadaliśmy, czy pobudzający wpływ CS + na picie sacharozy był związany ze specyficzną zmianą w mikrostrukturalnej organizacji zachowania lizania. Jak opisano powyżej, podczas gdy czas trwania lizania różni się w zależności od smaku płynu,, częstotliwość, z jaką szczury angażują się w nowe ataki lizania, ma odzwierciedlać oddzielny proces motywacyjny-. Zmieniliśmy stężenie sacharozy, aby manipulować jej smakowitością, jak w poprzednich raportach,. Chociaż wysokie i niskie stężenia sacharozy różnią się również zawartością kaloryczną, obszerne badania wykazały, że miara czasu trwania bout jest czułym i selektywnym miernikiem wpływu nagrody orosensorycznej i jest dysocjowalna od przetwarzania kalorycznego po spożyciu-. Tak więc CS +, który wywołuje motywację motywacyjną, powinien zwiększyć częstotliwość ataku, podczas gdy CS +, który zwiększa spożycie poprzez zwiększenie smakowitości sacharozy, powinien promować dłuższe okresy walki.

Aby zapewnić wystarczającą moc statystyczną, załamaliśmy dane we wszystkich opisanych powyżej warunkach testu nielekowego (testy 2% i 20% dla Eksperymentu 1 i Eksperyment 2 oraz stan pojazdu dla Eksperymentu 3). Połączone dane pokazano na rys. 2, wykreślone oddzielnie jako całkowite zagrywki (a), częstotliwość ataku (b) i czas trwania ataku (c). Postać 2d pokazuje wykresy rastrowe dwóch reprezentatywnych właściwości lizania szczurów podczas okresów przed CS + i CS +, gdy 2% i 20% sacharozy były dostępne w teście. Zgodnie z motywacyjną interpretacją CPF, te szczury miały tendencję do angażowania się w więcej ataków lizania sacharozy podczas CS + niż podczas okresu przed CS +. W przeciwieństwie do tego, czasy trwania ataku były zazwyczaj dłuższe, gdy szczury spożywały bardziej smaczny roztwór sacharozy 20% niż podczas spożywania 2% sacharozy, co było widoczne podczas okresów przed CS + i CS +. Tak więc, czas trwania ataku nie był silnie zależny od sygnału z sacharozy. Rzeczywiście, wzory widoczne na ryc. 2d zostały potwierdzone przez uogólnione modele liniowych efektów mieszanych połączonego zestawu danych (patrz rys. 2a – c i dodatkowa tabela S4). Wtórne analizy efektów mieszanych wykazały, że kategoryczny czynnik „Eksperyment” (1, 2, 3) nie wpłynął znacząco na interakcje CS Period × Typ CS na częstotliwości lub czasie trwania, ps ≥ 0.293, pozwalający nam łączyć te dane do kolejnych analiz. Co ciekawe, zdolność CS + do motywowania do lizania była również odzwierciedlona w znacznie szybszym opóźnieniu inicjowania lizania- po CS + vs. CS-onset [uogólniony liniowy model mieszanych efektów (rozkład odpowiedzi = gamma, funkcja łącza = log); t(306) = −2.71, p = 0.007], chociaż surowa różnica w latencjach była stosunkowo niewielka (CS +: 1.16 sekundy ± 0.47; CS−: 2.79 sekundy ± 0.79).

Rysunek 2 

Mikrostrukturalne składniki zachowania lizania. Zebrano dane ze wszystkich stanów nielekowych z Experiments 1 – 3 oceniając wpływ cue sacharozy (CS +) i niesparowanej cue (CS−) na zużycie sacharozy. Te dane reprezentują ...

Mediacyjna analiza efektu okresu CS

Biorąc pod uwagę takie wyniki, przeprowadziliśmy analizę mediacji statystycznej na połączonych danych (ryc. 2) w celu określenia, czy wywołane przez CS + picie sacharozy było preferencyjnie związane ze zmianami w częstotliwości lub czasie trwania. Postać 3a pokazuje strukturę modelu wielu mediacji dla tej analizy (okres CS). Wystąpił znaczący efekt ogólny (Total; c) okresu CS na zachowanie lizania, t(156) = 4.11, p <0.001, c = 5.22 [2.71; 7.73], ponieważ było więcej zagrywek w okresie CS + niż w okresie przed CS +. Następnie przetestowaliśmy, czy CS + w podobny sposób wpłynęło na mikrostrukturę lizania i stwierdziliśmy znaczące, wywołane przez wskazówkę, podwyższenie częstotliwości nawrotów (M2), t(156) = 3.27, p = 0.001, a2 = 0.70 [0.28; 1.12], ale nie czas trwania walki (M1), t(141) = 1.89, p = 0.061, a1 = 0.34 [-0.02, 0.69]. Tak więc, na poziomie grupy, wpływ CS + na częstotliwość walki, ale nie na czas trwania walki, bardziej ogólnie przypominał jego wpływ na lizanie.

Rysunek 3 

Mediacja CPF przez cechy mikrostrukturalne zachowania lizania. (a) Model okresu CS opisujący wpływ okresu CS na całkowite zagrywki z mediatorami czasu trwania ataku i częstotliwości ataku. (b) Model koncentracji opisujący działanie sacharozy ...

Jeśli efekt CS + na lizanie był zależny od jego wpływu na częstotliwość ataku, to (1) te środki powinny być skorelowane, a (2) wpływ CS + na częstotliwość ataku powinien uwzględniać efekt CS + na całkowitą miarę lizania. Ocena pierwszej prognozy wykazała, że ​​ignorując okres CS, zarówno częstotliwość ataku, jak i czas trwania ataku były istotnie skorelowane z całkowitymi zagrywkami, ps <0.001, co nie jest zaskakujące, biorąc pod uwagę, że te miary mikrostrukturalne mają wewnętrzny związek z całkowitymi zagrywkami. Nasza ocena drugiej prognozy była jednak bardziej odkrywcza. Skonstruowaliśmy model wielokrotnej mediacji, aby zbadać, czy te miary mikrostrukturalne wyjaśniały wariancję związaną z CS + w miary całkowitego lizania, włączając częstotliwość i czas trwania walki jako efekty stałe, wraz z okresem CS. Innymi słowy, zapytaliśmy, czy kontrolowanie wariancji w tych miarach lizawki osłabiło efekt CS + w porównaniu z jego siłą w prostszym (zredukowanym) modelu opisanym powyżej. Zgodnie z mediacją stwierdziliśmy, że to kierować efekt okresu CS na zagrywki (c„) nie było znaczące, t(139) = 0.90, p = 0.370, c'= 0.41 [−0.49, 1.30], podczas sterowania częstotliwością i czasem trwania ataku. Następnie oszacowaliśmy wpływ CS + na lizanie każdego z tych potencjalnych mediatorów i stwierdziliśmy, że istniał znaczący pośredni wpływ częstotliwości ataku na liże, a2b2 = 2.90 [1.18; 4.76], ale nie dotyczy czasu trwania walki, a1b1 = 1.71 [-0.09, 3.35]. Zatem dane te wskazują, że wzrost lizania wywołany przez CS + jest głównie spowodowany wzrostem częstotliwości ataków, w przeciwieństwie do wydłużenia czasu trwania walki, co jest zgodne z raczej motywacyjnym niż hedonicznym opisem CPF.

Mediacyjna analiza efektu stężenia sacharozy

Przeprowadziliśmy drugą analizę mediacyjną na połączonych danych (ryc. 2), aby potwierdzić, że smakowitość sacharozy (stężenie) była związana z selektywnym wzrostem czasu trwania (rys. 3b, Koncentracja). Uproszczony model (brak stałych efektów dla częstotliwości lub czasu trwania ataku) wykazał, że całkowity wpływ koncentracji na całkowite zagrywki nie był znaczący, t(156) = 0.42, p = 0.678, c = 0.57 [-2.13, 3.27], co wskazuje, że ogólny poziom lizania sacharozy w teście nie zależał silnie od stężenia sacharozy. Należy się tego spodziewać, ponieważ wpływ smakowitości sacharozy na lizanie jest najbardziej widoczny w ciągu pierwszych 2-3 minut spożycia, na długo przed pierwszym okresem przed CS w naszych sesjach testowych. Niemniej jednak stężenie sacharozy miało znaczący wpływ na czas trwania walki (M1), t(141) = 5.20, p <0.001, a1 = 0.88 [0.54; 1.21], przy czym 20% sacharoza wspiera dłuższe okresy picia niż 2% sacharoza. Co ciekawe, stężenie sacharozy miało znaczący wpływ hamujący na częstotliwość nawrotów (M2), t(156) = −3.84, p <0.001, a2 = −0.83 [−1.26, −0.40], przy czym szczury miały skłonność do mniejszej liczby ataków, gdy piły bardziej smaczny roztwór. Zatem wzrost czasu trwania nawrotu związany ze stężeniem został zrównoważony spadkiem częstotliwości nawrotów. Zgodnie z tym, nasz pełny model mediacji, który obejmował stałe efekty dla czasu trwania i częstotliwości walki, nie wskazywał bezpośredniego wpływu koncentracji na zagrywkach, t(139) = 0.45, p = 0.650, c'= 0.23 [−0.76, 1.22]. Istniały jednak znaczące pośrednie, ale przeciwne efekty częstotliwości ataku, a2b2 = −3.49 [−5.50, −1.58] i czas trwania walki, a1b1 = 4.46 [2.96, 5.95], przy całkowitym lizaniu.

Indywidualne różnice w działaniu okresu CS i koncentracji na mikrostrukturze lizania

Modele mediacji ujawniły, że częstość występowania i czas trwania odgrywają odrębne role w pośredniczeniu w skutkach koncentracji CS + i sacharozy na lizaniu na poziomie grupy, ale nie odnoszą się do tego, w jaki sposób takie efekty są wyrażane u poszczególnych szczurów, co może być ważne dla zrozumienia indywidualnego podatności na przejadanie się. Biorąc pod uwagę wyniki analizy mediacji, przewidywaliśmy, że poszczególne szczury wykazywałyby wzrost netto częstości ataków w okresie CS +, w stosunku do wartości wyjściowej, ale nie wykazywałyby żadnej stałej lub wiarygodnej zmiany w czasie trwania. Ponadto przewidywano, że poszczególne szczury wykazują dłuższe, ale rzadsze ataki lizania podczas spożywania 20% sacharozy, w stosunku do testu 2%. Figa. 3c id pokazują indywidualne różnice w wpływie odpowiednio okresu CS (CS + - pre-CS +) i stężenia sacharozy (20% –2%) na częstość i czas trwania nawrotów (analiza połączonych danych na ryc. 2). CS + zwiększona częstotliwość ataku u 67% szczurów (ryc. 3c), z mniej więcej równymi liczbami tych szczurów, również wykazującymi wzrost czasu trwania ataku (34%) lub nie (33%). Test dobroci dopasowania do kwadratu chi przy założeniu równomiernie rozłożonych punktów danych w czterech ćwiartkach ujawnił znaczną asymetrię dystrybucji,2(3) = 10.91, p = 0.012. Rzeczywiście, średnia z ΔCzęstotliwość dystrybucja była znacznie większa niż 0, t(66) = 4.80, p <0.001, podczas gdy średnia ΔCzas dystrybucja nie różniła się znacząco od 0, t(66) = 1.80, p = 0.076. W odniesieniu do efektu koncentracji (ryc. 3d), większość szczurów (58%) wykazywała dłużej i rzadziej napady 20% w porównaniu z 2% sacharozy, a test chi-kwadrat dobroci dopasowania potwierdził, że dane nie były równomiernie rozmieszczone w ćwiartkach, χ2(3) = 31.85, p <0.001. Rzeczywiście stwierdziliśmy, że średnia ΔCzęstotliwość dystrybucja była znacznie mniejsza niż 0, t(51) = −4.22, p <0.001, podczas gdy średnia z ΔCzas dystrybucja była znacznie większa niż 0, t(51) = 4.18, p <0.001.

Mikrostrukturalne predyktory konsumpcji sacharozy

Dane na rys. 3c sugerują, że istniała znaczna zmienność wpływu CS + na częstotliwość ataku i że niektóre szczury były szczególnie wrażliwe na ten wpływ motywacyjny. Chociaż możliwe jest, że te szczury były w stanie kontrolować swoje całkowite spożycie sacharozy przez picie mniej przy braku CS +, dalsza analiza połączonego zestawu danych (ryc. 2) potwierdziło, że te zwiększone częstości ataków CS + były związane z przejadaniem się. W szczególności stwierdziliśmy, że szczury, które wykazywały dodatnie ΔCzęstotliwość wyniki podczas prób CS + (podgrupy Freq ↑, Dur ↓ i Freq ↑, Dur ↑ na ryc. 3C) spożywał znacznie więcej sacharozy niż szczury, które tego nie robiły (podgrupy Freq ↓, Dur ↓ i Freq ↓, Dur ↑), t(63) = 2.27, p = 0.026 (ryc. 4a). Zależność ta utrzymywała się, gdy ΔCzęstotliwość był traktowany jako zmienna ciągła, t(63) = 2.19, p = 0.032 (ryc. 4b) i nie zależy od stężenia sacharozy, Stężenie × ΔCzęstotliwość, t(63) = 0.64, p = 0.528.

Rysunek 4 

Objętość roztworu sacharozy (ml) zużytego jako funkcja wywołanych zmian CS + w częstotliwości i czasie trwania. (a) Dane te reprezentują zużycie sacharozy jako funkcję grupy jakościowej, określone przez CS + wywołane wzrosty (↑) lub zmniejszenia (↓) ...

Dyskusja

Odkryliśmy, że wskazówka sygnalizująca dostępność sacharozy była w stanie zwiększyć spożycie sacharozy u szczurów, niezależnie od tego, czy wskazówka ta również zasygnalizowała konkretne działania potrzebne do uzyskania sacharozy (Experiment 1) lub nie (eksperymenty 2 i 3). To ostatnie odkrycie jest szczególnie interesujące, ponieważ jest mało prawdopodobne, aby zależało od wykonania wcześniej istniejących warunkowanych odpowiedzi żywieniowych (lub nawyków reakcji na bodziec), i zamiast tego sugeruje, że takie wskazówki nabywają właściwości afektywne i / lub motywacyjne, które pozwalają im elastycznie przenosić ich kontrola nad działaniami żywieniowymi. Ta tendencja do bodźców środowiskowych w celu promowania konsumpcji żywności, nawet gdy ustalone procedury żywieniowe nie są łatwo dostępne, wydaje się zatem stanowić użyteczny i selektywny model zwierzęcy procesu Pawłowa, który wspiera wywołane przez cue łaknienie żywności i przejadanie się u ludzi-. Chociaż istnieją wcześniejsze doniesienia, że ​​bodźce sparowane z żywnością mogą promować żywienie w sposób niezależny od odpowiedzi-, większość eksperymentów CPF utrzymuje źródło pokarmu w fazie treningowej i testowej, a zatem dostarcza jedynie ograniczonych informacji o naturze procesów psychologicznych leżących u podstaw tego efektu. Obecne badanie dostarcza dowodu na uogólniony pobudzający wpływ sprzężonych z pokarmem sygnałów na zachowanie żywieniowe przy użyciu procedury wzorowanej na zadaniu PIT, która jest szeroko stosowana do badania uogólnionego motywacyjnego wpływu sygnałów sparowanych pożywieniem na zachowanie poszukiwania pożywienia. Na przykład, tak jak w PIT, bieżące zadanie może być wykorzystane do oceny tendencji do uzyskania przez cue właściwości motywacyjnych, które generalizują do nowej lokalizacji. Zapożyczyliśmy również parametry treningowe i testowe (np. Czas trwania cue, interwały między próbami i harmonogram wzmacniania), które są powszechnie używane w PIT, ułatwiając porównania między badaniami. Podejście to może zatem zapewnić większą kontrolę eksperymentalną dla przyszłych badań potencjalnych różnic w procesach psychologicznych i / lub biologicznych leżących u podstaw kontroli Pawłowa nad zachowaniem instrumentalnym a konsumpcyjnym.

Obecne badanie wykazało, że aktywacja receptorów dopaminowych D1 ma kluczowe znaczenie dla ekspresji tej niezależnej od odpowiedzi formy CPF, co pomaga w motywującej interpretacji motywacyjnej, biorąc pod uwagę znaczenie sygnalizacji dopaminy ogólnie, i aktywację receptora D1 konkretnie w ekspresji Pawłowian transfer instrumentalny,-,,. Biorąc pod uwagę dowody, że dopamina jest stosunkowo nieistotna dla przetwarzania hedonicznych właściwości bodźców pokarmowych,,, wydaje się mało prawdopodobne, aby antagonista D1 wywierał swój wpływ, przerywając zdolność CS + do zmiany smakowitości sacharozy podczas testu. Ta motywacyjna interpretacja jest również wspierana przez naszą mikrostrukturalną analizę lizania, która wykazała, że ​​sygnały zwiększały karmienie głównie przez wywoływanie większej liczby ataków lizania, niż przez wydłużanie czasu trwania tych ataków. Zamiast tego czasy trwania różnią się w zależności od smaku sacharozy, co zostało dobrze ustalone,,,. Co ciekawe, nasza analiza statystyczna mediacji wykazała, że ​​chociaż szczury zaangażowane w dłuższe ataki podczas lizania 20% w porównaniu z 2% sacharozy, wykazały również kompensacyjny spadek częstotliwości ataku. Dlatego manipulacja smakowitością zdawała się wpływać na sposób, w jaki szczury wzorowały swoje spożycie sacharozy bez wpływu na ogólny poziom karmienia. W przeciwieństwie do tego, żaden efekt kompensacyjny nie był widoczny podczas prób z CS +, co wydaje się tłumaczyć wzrost netto zachowania lizania obserwowany w próbach z tym sygnałem. Co więcej, szczury wykazujące wzrost częstości ataków podczas badań CS + wykazały również podwyższony poziom całkowitego spożycia sacharozy. Takie wyniki sugerują, że sprzężone z jedzeniem sygnały (1) mogą rozregulować zachowanie żywieniowe, a (2) są bardziej skuteczne w prowadzeniu przejadania się niż manipulacje smakowitością sacharozy, przynajmniej w warunkach testowanych tutaj.

Obecne wyniki rzucają również światło na rolę dopaminy w regulacji zachowania żywieniowego przy braku wyraźnych sygnałów sparowanych pożywieniem. Poprzednie badania wykazały, że ogólnoustrojowe podawanie antagonisty dopaminy D1 SCH23390 tłumi nieusprawiedliwiony zużycie sacharozy przez zmniejszenie częstotliwości ataku bez zmiany czasu trwania,, który jest podobny do wzoru lizania wykazywanego przez myszy z niedoborem dopaminy. Chociaż mechanizmy psychologiczne kontrolujące częstotliwość ataków w takich sytuacjach nie są jasne, zasugerowano, że kontekstowe i / lub interoceptywne sygnały związane z karmieniem nabierają zdolności ukradkowego motywowania nowych ataków poszukiwania i konsumpcji żywności,. Nasze wyniki dają pewne poparcie dla wiarygodności tej interpretacji, wykazując, że nowe ataki lizania mogą być wywołane przez wyraźne sygnały sparowane z żywnością i że ten efekt zależy również od aktywacji receptora dopaminowego D1.

Jak wspomniano w innym miejscu,, stosunkowo mało było wcześniejszych badań na temat roli dopaminy w CPF. Jednak w jednym z wczesnych badań stwierdzono, że podawanie niespecyficznego antagonisty receptora dopaminy α-flupentiksolu atenuowanego CS + wywołało poszukiwanie pożywienia, ale pozostało nienaruszone, ponieważ jego zdolność do zwiększania spożycia żywności, co wydaje się być sprzeczne z naszym odkryciem, że antagonizm D1 zakłóca lizanie sacharozy indukowane przez cue. Istnieje wiele różnic proceduralnych w obu badaniach, które mogą wyjaśnić tę pozorną rozbieżność. Na przykład może być tak, że nasza selektywna manipulacja przenoszeniem dopaminy D1 jest bardziej skuteczna w zakłócaniu wpływu CS + na przyjmowanie pokarmu. Ponadto w tym poprzednim badaniuszczury pozbawione żywności były szkolone i testowane w swoich klatkach domowych przy użyciu unikalnej procedury kondycjonowania Pavlovian, w której sygnał był używany do sygnalizowania sesji karmienia, które były rozłożone w ciągu dnia. Później wykazano, że wskazówka jest skuteczna w promowaniu żywienia nawet wtedy, gdy szczury były testowane w stanie nienaruszonym. Charakter i zakres tego szkolenia oraz fakt, że wymagane odpowiedzi żywieniowe pozostały niezmienione na wszystkich etapach szkolenia i testowania, sugerują, że ten protokół CPF mógł zachęcać do stosowania nawykowej reakcji karmienia podczas badania. Biorąc pod uwagę, że przetrenowanie może sprawić, że wywoływane przez cue jedzenie będzie niewrażliwe na manipulacje sygnalizacją dopaminowąmoże być tak, że ta potencjalnie oparta na nawyku forma CPF jest mniej zależna od dopaminy niż opisana tutaj forma motywacyjna.

Chociaż wiele pozostaje do ustalenia na temat roli dopaminy w CPF, wiadomo, że to zjawisko behawioralne zależy od greliny- i hormon koncentrujący melaninę układy neuropeptydowe, które są zasadniczo zaangażowane w regulację obu zachowań żywieniowych i sygnalizacja dopaminy-. Co ciekawe, działanie pobudzające apetyt na grelinę zależy od zdolności tego hormonu do modulowania mezolimbicznej sygnalizacji dopaminy-. Na przykład skłonność greliny do zwiększania poszukiwania pożywienia i konsumpcji bez wpływu na smakowitość pokarmu (czas trwania lizania) można zahamować przez jednoczesne podawanie antagonisty receptora dopaminy D1 SCH-23390. Opierając się na takich wynikach, można by się spodziewać, że podobna interakcja między greliną i dopaminą może stanowić podstawę motywacyjnego wpływu parowania pokarmu na karmienie.

Podczas gdy obecne odkrycia pokazują, że sparowane sygnały żywnościowe mogą stymulować przejadanie się poprzez motywowanie nowych ataków żywieniowych, takie sygnały mogą również wpływać na żywienie przez inne procesy. W naszym podejściu do transferu kontroli ukryte jest uznanie, że sygnały żywieniowe mogą wyzwalać spożycie poprzez bezpośrednie wywoływanie określonych zachowań żywieniowych. Co więcej, chociaż CS + nie zmieniło rzetelnie czasów trwania w bieżącym badaniu, ostatnie badanie, w którym zastosowano bardziej konwencjonalny protokół CPF ze stałym źródłem pożywienia, wykazało, że wskazówki żywieniowe mogą wydłużać lizanie ataków. Zgodnie z tym istnieją wcześniejsze doniesienia, że ​​sygnały związane z smacznym jedzeniem mogą zwiększać ekspresję apetycznych reakcji twarzoczaszki na bodźce smakowe-, kolejna miara smaku hedoniki lub „lubienia”. Tak więc jest prawdopodobne, że sygnały żywnościowe mogą szybko nakarmić wiele dróg, wywołując pożądanie, wywołując specyficzne reakcje żywieniowe i / lub poprawiając smak żywności. Te procesy mogą leżeć u podstaw odmiennych luk w przejadaniu się przez cue, być może wyjaśniając indywidualne różnice w podatności na ten efekt,,. Obecne odkrycia pokazują skuteczne podejście do selektywnego analizowania motywacyjnego składnika CPF u szczurów.

Metody

Przedmioty i aparatura

Dorosłe samce szczurów Long Evans (N = 32 szczury ogółem; n = 16 dla eksperymentu 1 in = 16 dla eksperymentów 2 i 3), ważące 370-400 g po przybyciu, trzymano w parach w przezroczystych plastikowych klatkach w temperaturze i wilgotności -kontrolowane wiwarium. Szczury miały ad libitum dostęp do wody w ich klatkach domowych podczas eksperymentu. Szczury umieszczano w harmonogramie restrykcji żywności podczas pewnych faz eksperymentu, jak określono poniżej. Hodowla i procedury eksperymentalne zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Opieki nad Zwierzętami i Wykorzystaniem Zwierząt UC Irvine (IACUC) i były zgodne z Przewodnikiem Narodowej Rady ds. Badań nad Opieką i Wykorzystaniem Zwierząt Laboratoryjnych.

Procedury behawioralne przeprowadzono w identycznych komorach (ENV-007, Med Associates, St Albans, VT, USA), umieszczonych w kabinach z tłumieniem dźwięku i światła. Roztwór sacharozy można dostarczać za pomocą pompy strzykawkowej do zagłębionego plastikowego kubka, który znajdował się centralnie w jednej ścianie końcowej każdej komory, 2.5 cm powyżej podłogi ze stali nierdzewnej. Detektor fotobeamowy umieszczony przy wejściu do pojemnika na żywność wykorzystano do monitorowania wejść głowy związanych ze spożyciem sacharozy, jak również do reakcji warunkowego podejścia podczas sesji kondycjonowania Pawłowa. W niektórych sesjach testowych (Eksperymenty 2 i 3), roztwór sacharozy można uzyskać przez zlizanie grawitacyjnego metalowego dozownika do picia, który został umieszczony ~ 0.5 cm w otworze 1.3 cm znajdującym się na ścianie końcowej naprzeciwko kubka na żywność. Poszczególne lizawki z kubka na żywność i metalowego dziobka rejestrowano w sposób ciągły podczas sesji testowych za pomocą urządzenia do lizowania kontaktowego (ENV-250B, Med Associates, St Albans, VT, USA). Biały nieprzezroczysty panel z pleksiglasu był umieszczony przed końcową ścianą mieszczącą miseczkę na żywność podczas wszystkich sesji, gdy można było uzyskać sacharozę z metalowego dziobka. Oświetlenie domowe (3 W, 24 V) zapewniało oświetlenie, a wentylator zapewniał wentylację i hałas w tle.

Pawłowa kondycja

Szczury umieszczano w harmonogramie restrykcji pokarmowych, aby utrzymać ich masę ciała na poziomie około 85% ich masy ciała przy swobodnym karmieniu przed poddaniem 2 d szkoleniu w czasopismach, w którym otrzymały dostawy 60% roztworu sacharozy 20 (0.1 ml) w każdym codzienna sesja (1 h). Szczury otrzymały następnie 10 d warunkowania Pawłowa. Każda codzienna sesja kondycjonowania składała się z serii prezentacji 6 o sygnale dźwiękowym 2-min (CS +; albo 80-dB białego szumu lub klikacza 10-Hz), z próbami oddzielonymi zmiennym interwałem 3-min (zakres 2 – 4) . Podczas każdej próby CS +, porcje 0.1 ml (dostarczone przez 2 sec) roztworu sacharozy 20% (w / v) dostarczano do kubka z jedzeniem zgodnie z harmonogramem losowym 30-sec, co dawało średnią z czterech dostaw sacharozy na próbę . Ostatniego dnia kondycjonowania szczury otrzymały drugą sesję, w której alternatywny sygnał (CS-; alternatywny bodziec słuchowy) był prezentowany w taki sam sposób jak CS +, ale nie był sparowany z roztworem sacharozy. Zachowanie antycypacyjne mierzono przez porównanie szybkości podejść do kielichów (przerw fotobeamicznych) w okresie pomiędzy początkiem CS a pierwszym dostarczeniem sacharozy (aby uniknąć wykrycia bezwarunkowego zachowania żywieniowego), co kontrastowało z szybkością podejść do kubków podczas interwał próbny. Wszystkie szczury otrzymały pięć dni ad libitum dostęp do diety podtrzymującej po ostatniej sesji kondycji Pawłowa przed poddaniem się dodatkowym badaniom.

Test karmienia wzmocniony sygnalizacją

eksperyment 1

W tym eksperymencie oceniano wpływ CS + na zużycie roztworu sacharozy z tego samego kubka spożywczego używanego podczas treningu, tak że uwarunkowana odpowiedź na ten sygnał (tj. Podejście kubkowe) była zgodna z zachowaniem potrzebnym do uzyskania sacharozy w teście. Po odzyskaniu masy ciała utraconej podczas warunkowania Pawłowa, szczury otrzymały parę testów CPF, które rozdzielono 48 h, podczas których szczury pozostawały niezakłócone w swoich klatkach. Podczas każdej sesji CPF (min. 86 w całkowitym czasie trwania), roztwór sacharozy 2% lub 20% był stale dostępny w kubku na żywność przez napełnianie kubka mleczkiem 0.1 sacharozy, gdy szczur przechodził przez fotobeam (zbliża się kubek). Jednakże, aby zapobiec przepełnieniu kubka, dostarczanie sacharozy podawano tylko wtedy, gdy upłynęło co najmniej 4 od ostatniej dostawy sacharozy i jeśli szczur wykonał co najmniej pięć liźnięć w tym okresie. W trakcie tej sesji każdy z bodźców słuchowych 2-min był niekonsekwentnie prezentowany czasy 4 w kolejności pseudolosowej (ABBABAAB), oddzielone stałym interwałem 8-min. Pierwsza próba rozpoczęła 8 min po rozpoczęciu sesji, aby umożliwić indukcję sytości przed oceną behawioralnego wpływu sygnałów. Zlecenie próbne zostało zrównoważone przez warunki treningowe Pawłowa, tak że pierwszym przedstawionym CS był CS + dla połowy przedmiotów, a CS− dla pozostałej połowy podmiotów. Kolejność testowania stężenia sacharozy była również równoważona, przy czym połowa każdego warunku otrzymywała najpierw test 2%, a test 20% drugi, a połowa otrzymywała przeciwny układ (tj. Wszystkie zwierzęta otrzymywały oba stężenia w oddzielnych testach).

eksperyment 2

W tym eksperymencie zbadaliśmy wpływ CS + na zużycie roztworu sacharozy z innego źródła niż kubek używany podczas warunkowania Pawłowia, tak że uwarunkowana odpowiedź na ten sygnał była niezgodna z zachowaniem potrzebnym do spożycia sacharozy podczas testu. Pierwszy test, który przeprowadziliśmy, obejmował tylko warunek sacharozy 2%. Po umożliwieniu szczurom odzyskania masy utraconej podczas warunkowania Pawłowskiego, podano im dwie dzienne sesje (czas trwania 86 min), w których mieli nieograniczony dostęp do roztworu sacharozy 2% z metalowej wylewki (zasilanej grawitacyjnie przez butelkę) umieszczonej w małym otworze w ściana końcowa naprzeciwko kubka z jedzeniem. Biały panel z pleksiglasu umieszczono przed ścianą, w której znajdował się pojemnik na żywność podczas sesji z dostępem do dziobka (w tym kolejne testy CPF), aby zniechęcić zwierzęta do poszukiwania sacharozy w tym miejscu. Sesje te miały na celu zapewnienie szczurom doświadczenia picia sacharozy z nowego źródła przy braku sygnałów dźwiękowych. Następnego dnia szczury otrzymały pojedynczą sesję testu CPF, jak opisano w Eksperymencie 1, z tym wyjątkiem, że 2% sacharoza była stale dostępna na metalowym dziobku, a nie na kubku.

Ponieważ w tym pierwszym teście było niewiele dowodów CPF, przypuszczalnie z powodu współzawodnictwa między wywołanym przez CS + pucharem i podejściem do dziobka, daliśmy szczurom dodatkowy trening dziobków (w przypadku braku CS +), aby wzmocnić sacharozę szukającą dziobka i zniechęcić podejście do kubka po jedzeniu, gdy wylewka była dostępna (ponieważ była przykryta panelem). Szczury umieszczono zatem z powrotem w harmonogramie restrykcji pokarmowych (tak samo jak podczas fazy kondycjonowania Pawłowa) przed podaniem 5 d dodatkowych sesji treningowych wylewki, przy czym każda z tych sesji składała się z 10 min dostępu do roztworu 20% sacharozy. Szczurom podano 4 d ad libitum dostęp do domowej karmy, aby pozwolić im odzyskać utraconą wagę podczas tej fazy. Następnie szczury miały ostry brak pożywienia (20 h) przed odbyciem sesji przekwalifikowania Pawłowa z CS + i CS−, jak w ostatnim dniu szkolenia początkowego (tj. Z 20% sacharozy dostarczonej do kubka z jedzeniem podczas prób CS +). Zauważ, że dziobek został usunięty z komory podczas tych i wszystkich kolejnych sesji przekwalifikowania Pawłowa. Szczurom podano następnie ~ 20 h ad libitum dostęp do domowego chow przed poddaniem się dwóm testom CPF z użyciem metalowego dziobka, które były identyczne z pierwszym testem, z tym wyjątkiem, że szczury miały dostęp do 2% lub 20% w dwóch oddzielnych testach (jak w Experiment 1).

eksperyment 3

Po znalezieniu bardziej znaczących dowodów CPF podczas ostatniej rundy testów z dziobkiem, szczury z Experiment 2 otrzymały dodatkowe badania w celu oceny zależności tego wpływu od sygnalizacji dopaminy w D1 receptorów dopaminy. Szczury otrzymały najpierw sesję 10-min przekwalifikowania dziobka, w której miały dostęp do roztworu 20% sacharozy. Ponieważ szczury wróciły do ​​normalnej masy ciała ad libitum home chow po ostrej deprywacji pokarmowej 20-h, zastosowaliśmy tę procedurę, aby upewnić się, że szczury były głodne podczas tej sesji przekwalifikowania i podczas późniejszego przekwalifikowania Pawłowa (CS + i CS - sesje, jak poprzednio), które zostały przeprowadzone na dzień przed każdym z nich dwa końcowe testy CPF. Szczury otrzymały co najmniej 20 h ad libitum dostęp do domowego chow przed każdą sesją testową. Podczas tej ostatniej rundy testów CPF, szczury miały ciągły dostęp do 20% sacharozy z dziobka podczas obu sesji testowych. Piętnaście minut przed każdym testem szczurom podano zastrzyk dootrzewnowy (1 ml / kg) jałowej soli fizjologicznej lub SCH-23390 (selektywny antagonista receptora dopaminy D1) stosując dawkę (0.04 mg / kg), o której wiadomo, że jest wystarczająca do tłumienia konsumpcji sacharozy,,. Szczury testowano w obu warunkach lekowych, równoważąc je dla kolejności testu.

Analiza danych

Podstawową miarą zależną były pojedyncze lizawki, które rejestrowano z rozdzielczością 10 ms za pomocą lickometru kontaktowego podczas wszystkich sesji CPF. Bardzo rzadko wykryliśmy artefakty w naszych pomiarach lickometrem, które były spowodowane długotrwałym kontaktem szczura (łapa lub usta) z sacharozą (lub metalowym ustnikiem). Artefakty te przybrały postać odpowiedzi lickometru o wysokiej częstotliwości (> 20 Hz). Zakładając, że szczury wykazują maksymalne tempo lizania <10 Hz, wykluczyliśmy wszystkie potencjalne lizawki odpowiedzi występujące w 0.05 sek ostatniego (nie-artefaktowego) lizania, odpowiadające częstotliwości odcięcia 20-Hz. Sesje, w których wykluczono co najmniej 20% odpowiedzi lizających, biorąc pod uwagę to kryterium, zostały całkowicie usunięte z analizy (sesja 1 od szczura 1 w Experiment 1).

Licking zachowanie

Dla każdej sesji określiliśmy całkowitą liczbę zagrywek między typami okresów (Pre-CS +, CS +, Pre-CS−, CS−). Ponieważ nasza podstawowa miara zależna (całkowite lizanie) jest zmienną licznika, dane te analizowano za pomocą uogólnionych modeli liniowych efektów mieszanych z rozkładem odpowiedzi Poissona i funkcją połączenia logarytmicznego -. To podejście statystyczne pozwala na estymację parametrów jako funkcję warunku (efekty stałe) i jednostki (efekty losowe). W Eksperymentach 1 i 2 struktura efektów stałych zawierała ogólny punkt przecięcia, trójstronną interakcję między okresem CS (Pre, CS) × Typ CS (CS−, CS +) × Koncentracja (2%, 20%) i wszystko niższe efekty główne i interakcje. Dla Eksperymentu 3, Drug (Vehicle, SCH) został zastąpiony przez Koncentrację, aby uwzględnić zmiany w projekcie eksperymentalnym. Wszystkie te zmienne były zmiennymi wewnątrzobiektowymi, traktowanymi jako predyktory jakościowe i kodowane efektami. Wybór modelu efektów losowych obejmował określenie modelu, który zminimalizował kryterium informacyjne Akaike , zapewniając jednocześnie, że liczba punktów danych na parametr nie spadnie poniżej 10 ,. Korzystając z tych kryteriów, najlepsza struktura efektów losowych w eksperymentach obejmowała nieskorelowane przechwycone obiekty tematyczne dostosowane do okresu CS, typu CS i stężenia (lub leku). Wszystkie analizy statystyczne przeprowadzono w MATLAB (The Math Works; Natick, MA). Poziom alfa dla wszystkich testów wynosił 0.05. Ponieważ wszystkie predyktory były kategoryczne, wielkość efektu była reprezentowana przez niestandaryzowany współczynnik regresji , zgłoszone jako b w tekście iw tabelach wyników modelu. Analizy post hoc interakcji przeprowadzono za pomocą post hoc F-testy prostych efektów w analizie omnibus za pomocą coefTest funkcja w MATLAB.

Analiza mikrostrukturalna zachowania lizania

Poszczególne liże zostały sklasyfikowane jako rozpoczynające lub kontynuujące lizanie. Walkę wyznaczono jako wiele kolejnych zagrywek, w których odstępy między przeplotami (ILI) nie przekraczały 1 s. Gdy co najmniej 1 minęło od ostatniego liźnięcia, następne liże zostały wyznaczone jako początek nowego ataku. Częstotliwość ataku i czas trwania obliczono najpierw dzieląc sesje na okresy przed CS i CS, tak jak w przypadku całkowitych lizawek w powyższych analizach. W tych okresach każde lizanie poprzedzone okresem co najmniej 1 s oznaczono jako walkę. Czas trwania każdego ataku obliczono jako odstęp czasu między pierwszym i ostatnim lizaniem w tym ataku. Poszczególne liże występujące w odosobnieniu nie były liczone jako część ataku. Aby zmaksymalizować wielkość próby do kolejnych analiz mediacyjnych, częstotliwość ataku i dane o czasie trwania zostały podzielone pomiędzy eksperymentami, aby ocenić ogólne efekty okresu CS, typu CS i koncentrację na tych pomiarach mikrostrukturalnych. Dane z warunku SCH-23390 w Eksperymencie 3 nie zostały uwzględnione w tych analizach.

Dane te analizowano za pomocą uogólnionych modeli liniowych efektów mieszanych obejmujących strukturę efektów stałych okresu CS × typ CS × stężenie (i wszystkie interakcje i efekty główne niższego rzędu) oraz strukturę efektów losowych nieskorelowanych przechwyconych obiektów ubocznych skorygowanych o okres CS , Typ CS i stężenie. Podobnie jak w analizie zachowania całkowitego lizania, z analizy usunięto jedną sesję dla jednego szczura z Experiment 1. Analiza częstotliwości bout wykorzystywała rozkład odpowiedzi Poissona z funkcją połączenia logarytmicznego ze względu na rodzaj danych częstotliwościowych. Analiza czasu trwania bout wykorzystywała rozkład odpowiedzi gamma z funkcją łączenia logów, ponieważ czas trwania bout jest ciągłą miarą ograniczoną między 0 i + ∞. Dla porównania, ta sama analiza została przeprowadzona na całkowitych lizawkach zapadniętych między eksperymentami, w których analiza przyjęła rozkład odpowiedzi Poissona z funkcją połączenia logarytmicznego, jak w analizie całkowitej lizania eksperymentu indywidualnego. Aby upewnić się, że krytyczny okres CS × oddziaływanie typu CS nie zależał od tego, w którym eksperymencie znajdował się każdy szczur, przeprowadzono drugą serię modeli o częstotliwości ataku i czasie trwania, identycznej z opisaną właśnie analizą, ale z dodatkowym predyktorem stałego efektu Eksperymentu × Okres CS × Typ CS. Eksperyment był czynnikiem kategorycznym. Wreszcie, jako środek potwierdzający lizanie umotywowane-, przeanalizowaliśmy opóźnienie pierwszego lizania po wystąpieniu CS przy użyciu uogólnionego liniowego modelu efektów mieszanych z rozkładem odpowiedzi gamma i funkcją połączenia log (n = 310). Model ten obejmował strukturę efektów stałych typu CS × stężenie (oraz wszystkie interakcje niższego rzędu i efekty główne) oraz strukturę efektów losowych przechwyceń przez osobników dostosowaną do typu CS, stężenia i typu CS × stężenia.

Mediacyjna analiza częstotliwości ataku i czasu trwania ataku

Dwa wielokrotne modele mediacji,, przeprowadzono w celu określenia, czy efekty (lub ich brak) okresu CS (Pre, CS) i stężenia (2%, 20%) na CPF były znacząco zależne od częstotliwości ataku i / lub czasu trwania ataku. W modelu okresu CS: zmienna X był okres CS (Pre, CS), zmienna wynikowa Y była łączna liczba zagrywek w tym okresie, a mediatorzy mieli częstotliwość ataku (M1) i czas trwania (M2). W modelu koncentracji zmienna X było stężenie sacharozy. Ponieważ wywołane cue lizanie było widoczne przede wszystkim w próbach CS + (patrz wyniki), analizowano tylko próby CS +. Dla każdego szczura i dla każdej sesji testowej, średnią liczbę liźnięć i ataków oraz średni czas trwania każdego ataku określono dla okresów przed CS + i CS +. Analizy te obejmowały wszystkie szczury z eksperymentów 1 i 2 (szczury 16 na eksperyment x eksperymenty 2 x stężenia 2 x okresy 2 CS = punkty danych 128) i dane o stanie pojazdu z eksperymentu 3 (szczury 16 x okresy 2 CS = punkty danych 32) . Podobnie jak w analizie zachowania całkowitego lizania, jedna sesja dla jednego szczura z Experiment 1 została usunięta z analizy, pozostawiając w sumie punkty danych 158. Rzadko szczury nie lizały podczas okresów przed CS + lub CS + podczas sesji (9 / 158; 9.5%). W takich przypadkach średnia liczba zagrywek i ataków została zakodowana jako „0”, a wartość średniego czasu trwania walki została pozostawiona jako pusta komórka. Gdy te same modele były uruchamiane, zakładając usunięcie listwise (tj. Usuwanie wierszy, w których czas trwania ataku był pustą komórką), utrzymywano podobne wzorce. Ponieważ analizy te obejmują ogólne modele liniowe (tj. Prostą lub wielokrotną regresję liniową), częstotliwość ataku i całkowite dane lizania były przekształcone w pierwiastek kwadratowy, a dane dotyczące czasu trwania były przekształcane logarytmicznie w celu skorygowania dodatniej skośności. Istotność efektu pośredniego została określona przez 95% percentyla ładowania początkowego z iteracjami 10,000. Współczynniki regresji są zgłaszane zgodnie z tradycyjnymi raportami analizy mediacyjnej (np. c'= bezpośredni efekt X on Y),.

Indywidualne różnice w zmianach wywołanych cue w częstotliwości i czasie trwania

Powyższe analizy pozwoliły ocenić wpływ CS + na lizanie mikrostruktury na poziomie grupowym. Scharakteryzowaliśmy także indywidualne różnice w wyrażaniu tego efektu. Dla każdego szczura obliczono dwie różnice punktowe dla miar częstotliwości i czasu trwania nawrotów. Równolegle z modelem okresowym CS, częstotliwość nawrotu w okresie przed CS + została odjęta od wartości częstotliwości nawrotu podczas okresu CS + (tj. CS + - przed CS +); w przypadku modelu stężenia częstotliwość nawrotów podczas testu z 2% sacharozą odjęto od odpowiedniej wartości podczas testu 20% (tj. 20% –2%). Obliczenia te dały miary opisujące zmianę częstotliwości nawrotu (ΔCzęstotliwość). Te same obliczenia przeprowadzono dla czasu trwania ataku (tj. ΔCzas). W związku z tym dla każdej pary punktów danych Pre-CS + / CS + i 2% / 20% określono zmiany częstotliwości i czasu trwania ataku. Średnie tych rozkładów porównano z 0 za pomocą jednej próbki t-test (α = 0.05) do oceny przesunięć dystrybucyjnych z dala od żadnej ogólnej zmiany. Każdy z tych punktów danych został skategoryzowany przez wzrost i / lub spadek częstotliwości i czasu trwania ataku i reprezentowany przez wykres rozproszenia dwuwymiarowego (np. Zwiększenie częstotliwości ataku / zgonu w czasie trwania po rozpoczęciu CS +), pozwalając na określenie proporcji danych punkty w każdym kwadrancie 2 × 2 (częstotliwość / czas trwania × wzrost / spadek). Punkty danych, w których wynik różnicy był równy zero, zostały sklasyfikowane jako spadek (tj. Nie wzrost). Chi-kwadrat (χ2) testy dopasowania dla obu okresów CS i danych dotyczących koncentracji określiły, czy rozkłady tych punktów danych były różne od danych o równomiernym rozkładzie w tych czterech kategoriach (α = 0.05). Aby określić, czy w każdym eksperymencie był w przybliżeniu równy rozkład tych punktów danych w czterech ćwiartkach, przeprowadzono proste analizy korelacyjne dla okresu CS i danych stężenia, aby ocenić zależność między liczbą punktów danych w każdym kwadrancie w każdym eksperymencie i odpowiadająca oczekiwana liczba punktów danych, oszacowana na podstawie ogólnych proporcji w każdym kwadrancie.

Mikrostrukturalne predyktory konsumpcji sacharozy

Ostatnią serię uogólnionych analiz liniowych efektów mieszanych przeprowadzono w celu określenia, czy całkowita objętość roztworu sacharozy zużytego w całej sesji testowej była przewidywana przez zmianę szczura w częstotliwości ataku i czasie trwania od okresów przed CS + do CS +. Analizy obejmowały dane ze wszystkich stanów nielekowych (tj. Testy 2% i 20% sacharozy do eksperymentów 1 i 2 oraz stan pojazdu z Eksperymentu 3). Analizy przyjęły rozkład odpowiedzi gamma z funkcją łączenia logów. Pierwsza analiza zmniejszyła całkowity zużyty roztwór sacharozy (ml) na główne efekty i interakcje między kategorycznymi grupami 2 × 2 wzrostu / zmniejszenia częstotliwości / czasu trwania ataku, jak opisano powyżej. W drugiej analizie regresowano całkowite zużycie sacharozy na główne efekty i interakcję między ciągłą wartością ΔCzęstotliwość i stężenie sacharozy.

Dostępność danych

Zestawy danych analizowane podczas bieżących eksperymentów są dostępne u odpowiedniego autora na uzasadnione żądanie.

Elektroniczny materiał uzupełniający

Podziękowania

Badania te były wspierane przez granty NIH AG045380, DK098709, DA029035 i MH106972 dla SBO. Darczyńcy nie mieli żadnej roli w projektowaniu badań, zbieraniu i analizowaniu danych, podejmowaniu decyzji o publikacji lub przygotowaniu manuskryptu.

Autorskie Wkłady

SBO opracowało i zaprojektowało eksperymenty; BH i ATL przeprowadzili eksperymenty; ATM i SBO przeanalizowały dane. Wszyscy autorzy napisali artykuł i przejrzeli rękopis.

Uwagi

Konkurujące interesy

Autorzy nie deklarują konkurencyjnych interesów.

Przypisy

Elektroniczny materiał uzupełniający

Dodatkowa informacja towarzyszy temu artykuł w 10.1038 / s41598-018-21046-0.

Uwaga wydawcy: Springer Nature pozostaje neutralny w odniesieniu do roszczeń jurysdykcyjnych w opublikowanych mapach i powiązaniach instytucjonalnych.

Informacje o dostawcy

Andrew T. Marshall, e-mail: [email chroniony].

Sean B. Ostlund, e-mail: [email chroniony].

Referencje

1. Fedoroff I, Polivy J, Herman CP. Specyfika powściągliwych w porównaniu z niepohamowanymi zjadaczami odpowiedzi na sygnały żywnościowe: ogólne pragnienie jedzenia lub pragnienie jedzenia z daniami? Apetyt. 2003; 41: 7 – 13. doi: 10.1016 / S0195-6663 (03) 00026-6. [PubMed] [Cross Ref]
2. Pelchat ML, Schaefer S. Dietetyczna monotonia i głód pokarmowy u młodych i starszych osób dorosłych. Physiol Behav. 2000; 68: 353 – 359. doi: 10.1016 / S0031-9384 (99) 00190-0. [PubMed] [Cross Ref]
3. Jansen A. Model uczenia się objadania się: reaktywność wskazówek i ekspozycja na sygnał. Behav Res Ther. 1998; 36: 257 – 272. doi: 10.1016 / S0005-7967 (98) 00055-2. [PubMed] [Cross Ref]
4. Weingarten HP. Inicjacja posiłków kontrolowana przez wyuczone wskazówki: podstawowe właściwości behawioralne. Apetyt. 1984; 5: 147 – 158. doi: 10.1016 / S0195-6663 (84) 80035-5. [PubMed] [Cross Ref]
5. Petrovich GD, Ross CA, Gallagher M, Holland PC. Uczony kontekstowy sygnał wzmacnia jedzenie u szczurów. Physiol Behav. 2007; 90: 362 – 367. doi: 10.1016 / j.physbeh.2006.09.031. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
6. Brzoza LL, McPhee L, Sullivan S, Johnson S. Inicjacja posiłków warunkowych u małych dzieci. Apetyt. 1989; 13: 105 – 113. doi: 10.1016 / 0195-6663 (89) 90108-6. [PubMed] [Cross Ref]
7. Fedoroff IC, Polivy J, Herman CP. Wpływ wstępnej ekspozycji na sygnały żywnościowe na zachowania żywieniowe powściągliwych i niepohamowanych zjadaczy. Apetyt. 1997; 28: 33 – 47. doi: 10.1006 / appe.1996.0057. [PubMed] [Cross Ref]
8. Halford JC, Gillespie J, Brown V, Pontin EE, Dovey TM. Wpływ reklam telewizyjnych na żywność na spożycie żywności u dzieci. Apetyt. 2004; 42: 221 – 225. doi: 10.1016 / j.appet.2003.11.006. [PubMed] [Cross Ref]
9. Cornell CE, Rodin J, Weingarten H. Jedzenie indukowane bodźcem po nasyceniu. Physiol Behav. 1989; 45: 695 – 704. doi: 10.1016 / 0031-9384 (89) 90281-3. [PubMed] [Cross Ref]
10. Johnson AW. Jedzenie poza potrzebami metabolicznymi: jak sygnały środowiskowe wpływają na zachowania żywieniowe. Trendy Neurosci. 2013; 36: 101 – 109. doi: 10.1016 / j.tins.2013.01.002. [PubMed] [Cross Ref]
11. Kenny PJ. Mechanizmy nagród w otyłości: nowe spostrzeżenia i przyszłe kierunki. Neuron. 2011; 69: 664 – 679. doi: 10.1016 / j.neuron.2011.02.016. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
12. Pietrowicz GD. Sieci przodomózgowia i kontrola żywienia przez wyuczone wskazówki środowiskowe. Physiol Behav. 2013; 121: 10 – 18. doi: 10.1016 / j.physbeh.2013.03.024. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
13. Boswell RG, Kober H. Reaktywność sygnalizatora żywnościowego i pragnienie przewidywania jedzenia i przyrostu masy ciała: przegląd metaanalityczny. Obes Rev. 2016; 17: 159 – 177. doi: 10.1111 / obr.12354. [PubMed] [Cross Ref]
14. Holland PC, Gallagher M. Podwójna dysocjacja efektów zmian chorobowych ciała podstawno-bocznego i centralnego ciała migdałowatego na warunkowane karmienie wzmocnione bodźcami i transfer Pawłowowsko-instrumentalny. Eur J Neurosci. 2003; 17: 1680 – 1694. doi: 10.1046 / j.1460-9568.2003.02585.x. [PubMed] [Cross Ref]
15. Holland PC, Pietrowicz GD, Gallagher M. Wpływ zmian w ciele migdałowatym na warunkowane przez bodźce jedzenie wzmocnione u szczurów. Physiol Behav. 2002; 76: 117 – 129. doi: 10.1016 / S0031-9384 (02) 00688-1. [PubMed] [Cross Ref]
16. Reppucci CJ, Pietrowicz GD. Uczony pokarm stymuluje uporczywe karmienie szczurów. Apetyt. 2012; 59: 437 – 447. doi: 10.1016 / j.appet.2012.06.007. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
17. Rescorla RA, Solomon RL. Dwuprocesowa teoria uczenia się: relacje między uwarunkowaniem Pawłowa a uczeniem się instrumentalnym. Psychol Rev. 1967; 74: 151 – 182. doi: 10.1037 / h0024475. [PubMed] [Cross Ref]
18. Dickinson A, Smith J, Mirenowicz J. Dysocjacja Pawłowskiego i instrumentalnego uczenia się motywacyjnego pod antagonistami dopaminy. Behav Neurosci. 2000; 114: 468 – 483. doi: 10.1037 / 0735-7044.114.3.468. [PubMed] [Cross Ref]
19. Delamater AR, LoLordo VM, Berridge KC. Kontrola smakowitości płynów przez eksteroceptywne sygnały Pavlovian. J Exp Psychol Anim Behav Process. 1986; 12: 143 – 152. doi: 10.1037 / 0097-7403.12.2.143. [PubMed] [Cross Ref]
20. Holland PC, Lasseter H, Agarwal I. Ilość treningu i reaktywność smakowa wywołana sygnalizacją w odpowiedzi na wzmocnienie dewaluacji. J Exp Psychol Anim Behav Process. 2008; 34: 119 – 132. doi: 10.1037 / 0097-7403.34.1.119. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
21. Kerfoot EC, Agarwal I, Lee HJ, Holland PC. Kontrola apetycznych i awersyjnych reakcji na reaktywność smakową poprzez słuchowy bodziec warunkowy w zadaniu dewaluacji: FOS i analiza behawioralna. Learn Mem. 2007; 14: 581 – 589. doi: 10.1101 / lm.627007. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
22. Holland PC, Pietrowicz GD. Analiza systemów neuronowych wzmocnienia zasilania przez bodźce warunkowe. Physiol Behav. 2005; 86: 747 – 761. doi: 10.1016 / j.physbeh.2005.08.062. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
23. Davis JD, Smith GP. Analiza mikrostruktury rytmicznych ruchów języka u szczurów przyjmujących roztwory maltozy i sacharozy. Behav Neurosci. 1992; 106: 217 – 228. doi: 10.1037 / 0735-7044.106.1.217. [PubMed] [Cross Ref]
24. Higgs S, Cooper SJ. Dowody wczesnej modulacji opioidowej odpowiedzi lizania na sacharozę i intralipid: analiza mikrostrukturalna u szczura. Psychopharmacology (Berl) 1998; 139: 342 – 355. doi: 10.1007 / s002130050725. [PubMed] [Cross Ref]
25. D'Aquila PS. Dopamina na receptorach podobnych do D2 „wznawia” aktywację behawioralną zależną od receptora dopaminy D1 u lizujących szczurów dla sacharozy. Neuropharmakologia. 2010; 58: 1085 – 1096. doi: 10.1016 / j.neuropharm.2010.01.017. [PubMed] [Cross Ref]
26. Ostlund SB, Kosheleff A, Maidment NT, Murphy NP. Zmniejszone spożycie słodkich płynów u myszy pozbawionych receptora opioidowego mu: analiza mikrostrukturalna zachowania lizania. Psychopharmacology (Berl) 2013; 229: 105 – 113. doi: 10.1007 / s00213-013-3077-x. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
27. Mendez IA, Ostlund SB, Maidment NT, Murphy NP. Udział endogennych enkefalin i beta-endorfiny w żywieniu i otyłości wywołanej dietą. Neuropsychofarmakologia. 2015; 40: 2103 – 2112. doi: 10.1038 / npp.2015.67. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
28. Galistu A, D'Aquila PS. Wpływ antagonisty receptora dopaminowego D1 SCH 23390 na mikrostrukturę zachowania pokarmowego u pozbawionych wody szczurów lizujących wodę i roztwory NaCl. Physiol Behav. 2012; 105: 230 – 233. doi: 10.1016 / j.physbeh.2011.08.006. [PubMed] [Cross Ref]
29. Ostlund SB, Maidment NT. Blokada receptora dopaminy osłabia ogólne motywacyjne efekty motywacyjne niezwiązanych z wolą nagranych i nagradzanych sygnałów bez wpływu na ich zdolność do nastawiania wyboru działania. Neuropsychofarmakologia. 2012; 37: 508 – 519. doi: 10.1038 / npp.2011.217. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
30. Wassum KM, Ostlund SB, Balleine BW, Maidment NT. Różnicowa zależność motywacji Pawłowskiej od motywacyjnych procesów uczenia się zachęt do sygnalizacji dopaminy. Learn Mem. 2011; 18: 475 – 483. doi: 10.1101 / lm.2229311. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
31. Laurent V, Bertran-Gonzalez J, Chieng BC, Balleine BW delta-opioidy i procesy dopaminergiczne w powłoce półleżącej modulują cholinergiczną kontrolę uczenia się predykcyjnego i wyboru. J Neurosci. 2014; 34: 1358 – 1369. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4592-13.2014. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
32. Receptory Lex A, Hauber W. Dopamine D1 i D2 w jądrze półleżącym w rdzeniu i powłoce półleżącej pośredniczą w przekazie Pawłowskim. Learn Mem. 2008; 15: 483 – 491. doi: 10.1101 / lm.978708. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
33. Yun IA, Nicola SM, Fields HL. Kontrastujące działanie zastrzyku dopaminy i antagonisty receptora glutaminianowego w jądrze półleżącym sugeruje mechanizm neuronalny leżący u podstaw zachowań ukierunkowanych na cel, wywoływanych przez cue. Eur J Neurosci. 2004; 20: 249 – 263. doi: 10.1111 / j.1460-9568.2004.03476.x. [PubMed] [Cross Ref]
34. Liao RM, Ko MC. Przewlekłe działanie haloperidolu i SCH23390-a na zachowania operacyjne i lizanie u szczura. Chin J Physiol. 1995; 38: 65 – 73. [PubMed]
35. Davis JD. Mikrostruktura zachowań pokarmowych. ANYAS. 1989; 575: 106 – 121. doi: 10.1111 / j.1749-6632.1989.tb53236.x. [PubMed] [Cross Ref]
36. Breslin PAS, Davis JD, Rosenak R. Sacharyna zwiększa skuteczność glukozy w stymulowaniu spożycia u szczurów, ale ma niewielki wpływ na negatywne sprzężenie zwrotne. Fizjologia i zachowanie. 1996; 60: 411–416. doi: 10.1016 / S0031-9384 (96) 80012-6. [PubMed] [Cross Ref]
37. Davis JD, Smith GP, Singh B, McCann DL. Wpływ nieuwarunkowanego i warunkowego negatywnego sprzężenia zwrotnego pochodzącego z sacharozy na mikrostrukturę zachowania pokarmowego. Fizjologia i zachowanie. 2001; 72: 392–402. doi: 10.1016 / S0031-9384 (00) 00442-X. [PubMed] [Cross Ref]
38. Asin KE, Davis JD, Bednarz L. Różnicujące działanie leków serotoninergicznych i katecholaminergicznych na zachowania pokarmowe. Psychofarmakologia. 1992; 109: 415 – 421. doi: 10.1007 / BF02247717. [PubMed] [Cross Ref]
39. Fritz MS, Mackinnon DP. Wymagana wielkość próbki w celu wykrycia efektu pośredniczącego. Psychol Sci. 2007; 18: 233 – 239. doi: 10.1111 / j.1467-9280.2007.01882.x. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
40. Allison J, kasztelan NJ. Charakterystyka czasowa picia składników odżywczych u szczurów i ludzi. Journal of Comparative and Physiological Psychology. 1970; 70: 116 – 125. doi: 10.1037 / h0028402. [Cross Ref]
41. Bolles RC. Gotowość do jedzenia i picia: efekt warunków deprywacji. Journal of Comparative and Physiological Psychology. 1962; 55: 230 – 234. doi: 10.1037 / h0048338. [PubMed] [Cross Ref]
42. Davis JD, Perez MC. Mikrostrukturalne zmiany w zachowaniu pokarmowym wywołane brakiem pożywienia i smakowitości. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 1993; 264: R97 – R103. doi: 10.1152 / ajpregu.1993.264.1.R97. [PubMed] [Cross Ref]
43. Hayes, AF Mediation, Moderation i Conditional Process Analysis: Podejście oparte na regresji. (The Guilford Press, 2013).
44. Smith GP. John Davis i znaczenie lizania. Apetyt. 2001; 36: 84 – 92. doi: 10.1006 / appe.2000.0371. [PubMed] [Cross Ref]
45. Aitken TJ, Greenfield VY, Wassum KM. Nucleus accumbens core sygnalizacja dopaminowa śledzi opartą na potrzebach wartość motywacyjną sygnałów sparowanych z jedzeniem. J Neurochem. 2016; 136: 1026 – 1036. doi: 10.1111 / jnc.13494. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
46. Wassum KM, Ostlund SB, Loewinger GC, Maidment NT. Fazowe mezolimbiczne ścieżki uwalniania dopaminy poszukują nagrody podczas ekspresji Pavlovian-to-instrumental. Biol Psychiatry. 2013; 73: 747 – 755. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.12.005. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
47. Cannon CM, Palmiter RD. Nagroda bez dopaminy. J Neurosci. 2003; 23: 10827 – 10831. [PubMed]
48. Weingarten HP, Martin GM. Mechanizmy inicjacji posiłku kondycjonowanego. Physiol Behav. 1989; 45: 735 – 740. doi: 10.1016 / 0031-9384 (89) 90287-4. [PubMed] [Cross Ref]
49. Choi WY, Balsam PD, Horvitz JC. Rozszerzony trening nawyków zmniejsza pośrednictwo dopaminy w ekspresji odpowiedzi apetycznej. J Neurosci. 2005; 25: 6729 – 6733. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.1498-05.2005. [PubMed] [Cross Ref]
50. Dailey MJ, Moran TH, Holland PC, Johnson AW. Antagonizm greliny zmienia odpowiedź apetyczną na uczone sygnały związane z jedzeniem. Behav Brain Res. 2016; 303: 191 – 200. doi: 10.1016 / j.bbr.2016.01.040. [PubMed] [Cross Ref]
51. Walker AK, Ibia IE, Zigman JM. Zakłócenie karmienia wzmocnionego sygnalizacją u myszy z zablokowaną sygnalizacją ghreliny. Physiol Behav. 2012; 108: 34 – 43. doi: 10.1016 / j.physbeh.2012.10.003. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
52. Kanoski SE, Fortin SM, Ricks KM, Grill HJ. Sygnalizacja greliny w hipokampie brzusznym stymuluje wyuczone i motywacyjne aspekty karmienia poprzez sygnalizację PI3K-Akt. Biol Psychiatry. 2013; 73: 915 – 923. doi: 10.1016 / j.biopsych.2012.07.002. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
53. Sherwood A, Holland PC, Adamantidis A, Johnson AW. Usuwanie receptora hormonalnego zawierającego melaninę-1 zakłóca przejadanie się w obecności sygnałów pokarmowych. Physiol Behav. 2015; 152: 402 – 407. doi: 10.1016 / j.physbeh.2015.05.037. [PubMed] [Cross Ref]
54. Domingos AI, et al. Hormony hormonalne podsiąkające melaninę komunikują wartość odżywczą cukru. eLife. 2013; 2: e01462. doi: 10.7554 / eLife.01462. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
55. Smith DG, et al. Mezolimbiczna superczułość dopaminy u myszy z niedoborem receptora hormonu 1 z koncentracją melaniny. The Journal of Neuroscience. 2005; 25: 914 – 922. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4079-04.2005. [PubMed] [Cross Ref]
56. Liu S, Borgland SL. Regulacja mezolimbicznego obwodu dopaminy przez podawanie peptydów. Neuroscience. 2015; 289: 19 – 42. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2014.12.046. [PubMed] [Cross Ref]
57. Stożek JJ, Roitman JD, Roitman MF. Grelina reguluje fazową sygnalizację dopaminy i jądra półleżącego, wywoływaną przez bodźce predykcyjne żywności. J Neurochem. 2015; 133: 844 – 856. doi: 10.1111 / jnc.13080. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
58. Cone JJ, McCutcheon JE, Roitman MF. Ghrelina działa jako interfejs między stanem fizjologicznym a fazową sygnalizacją dopaminy. J Neurosci. 2014; 34: 4905 – 4913. doi: 10.1523 / JNEUROSCI.4404-13.2014. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
59. Abizaid A i in. Grelina moduluje aktywność i synaptyczną organizację wprowadzania neuronów dopaminowych śródmózgowia, jednocześnie promując apetyt. J Clin Invest. 2006; 116: 3229 – 3239. doi: 10.1172 / JCI29867. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
60. Overduin J, Figlewicz DP, Bennett-Jay J, Kittleson S, Cummings DE. Grelina zwiększa motywację do jedzenia, ale nie zmienia smaku żywności. Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 2012; 303: R259 – 269. doi: 10.1152 / ajpregu.00488.2011. [Artykuł bezpłatny PMC] [PubMed] [Cross Ref]
61. Ferriday D, Brunstrom JM. „Nie mogę się powstrzymać”: wpływ ekspozycji na sygnały pokarmowe u osób z nadwagą i szczupłych. Int J Obes (Lond) 2011; 35: 142 – 149. doi: 10.1038 / ijo.2010.117. [PubMed] [Cross Ref]
62. Tetley A, Brunstrom J, Griffiths P. Indywidualne różnice w reaktywności sygnałów żywnościowych. Rola BMI i dobór wielkości porcji codziennej. Apetyt. 2009; 52: 614 – 620. doi: 10.1016 / j.appet.2009.02.005. [PubMed] [Cross Ref]
63. Schneider LH, Greenberg D, Smith GP. Porównanie wpływu selektywnych antagonistów receptora D1 i D2 na karmienie pozorowanej sacharozy i picie wody. Ann Ny Acad Sci. 1988; 537: 534 – 537. doi: 10.1111 / j.1749-6632.1988.tb42151.x. [Cross Ref]
64. Weijnen JAWM, Wouters J, van Hest JMHH. Interakcja między lizaniem a przełykaniem u pijącego szczura. Mózg, zachowanie i ewolucja. 1984; 25: 117 – 127. doi: 10.1159 / 000118857. [PubMed] [Cross Ref]
65. Boisgontier MP, Cheval B. Przejście modelu anova do mieszanego. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 2016; 68: 1004–1005. doi: 10.1016 / j.neubiorev.2016.05.034. [PubMed] [Cross Ref]
66. Bolker BM, i in. Uogólnione liniowe modele mieszane: praktyczny przewodnik po ekologii i ewolucji. Trendy w ekologii i ewolucji. 2008; 24: 127–135. doi: 10.1016 / j.tree.2008.10.008. [PubMed] [Cross Ref]
67. Coxe S, West SG, Aiken LS. Analiza danych zliczania: łagodne wprowadzenie do regresji Poissona i jej alternatyw. Journal of Personality Assessment. 2009; 91: 121 – 136. doi: 10.1080 / 00223890802634175. [PubMed] [Cross Ref]
68. Pinheiro, J. & Bates, D. Modele z efektami mieszanymi w S i S-Plus. (Springer, 2000).
69. Burnham, KP & Anderson, DR Wybór modelu i wnioskowanie: praktyczne podejście do informacji i teorii. (Springer, 1998).
70. MAAK Babyak. To, co widzisz, może nie być tym, co otrzymujesz: Krótkie, nietechniczne wprowadzenie do przeuczania w modelach typu regresyjnego. Medycyna psychosomatyczna. 2004; 66: 411 – 421. [PubMed]
71. Peduzzi P, Concato J, Kemper E, Holford TR, Feinstein AR. Badanie symulacyjne liczby zdarzeń na zmienną w analizie regresji logistycznej. Journal of Clinical Epidemiology. 1996; 49: 1373 – 1379. doi: 10.1016 / S0895-4356 (96) 00236-3. [PubMed] [Cross Ref]
72. Bates D, Kliegl R, Vasishth S, Baayen H. Parsimonious modele mieszane. ar Xiv preprint arXiv. 2015; 1506: 04967.
73. Baguley T. Standardowy lub prosty rozmiar efektu: co należy zgłosić? British Journal of Psychology. 2009; 100: 603 – 617. doi: 10.1348 / 000712608X377117. [PubMed] [Cross Ref]
74. Spector AC, Klumpp PA, Kaplan JM. Zagadnienia analityczne w ocenie niedoboru pokarmu i wpływu stężenia sacharozy na mikrostrukturę zachowania lizania u szczura. Neurobiologia behawioralna. 1998; 112: 678 – 694. doi: 10.1037 / 0735-7044.112.3.678. [PubMed] [Cross Ref]
75. Hayes AF. Beyond Baron and Kenny: Analiza mediacji statystycznej w nowym tysiącleciu. Monografie komunikacyjne. 2009; 76: 408 – 420. doi: 10.1080 / 03637750903310360. [Cross Ref]
76. Kaznodzieja KJ, Hayes AF. Procedury SPSS i SAS do szacowania skutków pośrednich w prostych modelach mediacji. Metody, instrumenty i komputery badania zachowań. 2004; 36: 717–731. doi: 10.3758 / BF03206553. [PubMed] [Cross Ref]