PLoS ONE. 2013; 8 (9): e74645.
Opublikowano online 2013 Sep 10. doi: 10.1371 / journal.pone.0074645
PMCID: PMC3769238
Silvana Gaetani, redaktor
Abstrakcyjny
Światowa epidemia otyłości stanowi ogromne i rosnące zagrożenie dla zdrowia publicznego. Jednak neurobehawioralne mechanizmy przejadania się i otyłości nie są w pełni poznane. Zaproponowano, że procesy podobne do uzależnień mogą leżeć u podstaw niektórych form otyłości, w szczególności związanych z zaburzeniami odżywiania się. Aby zbadać rolę procesów podobnych do uzależnień w otyłości, zaadaptowaliśmy model zachowań podobnych do uzależnienia od kokainy u szczurów odpowiadających na pokarmy bardzo smaczne. Tutaj sprawdziliśmy, czy szczury reagujące na bardzo smaczną czekoladę Upewnij się, że wykażą trzy kryteria zachowania przypominającego uzależnienie, tj. Wysoką motywację, kontynuowanie poszukiwań pomimo sygnalizowanej braku dostępności i wytrwałości poszukiwania pomimo negatywnych konsekwencji. Zbadaliśmy również, czy narażenie na obżarty model (dieta składająca się z naprzemiennych okresów ograniczonego dostępu do żywności i dostępu do żywności o wysokiej smakowitości) sprzyja pojawianiu się zachowań podobnych do uzależnienia od żywności. Nasze dane pokazują znaczne indywidualne różnice w kontroli nad smacznym poszukiwaniem i przyjmowaniem pokarmu, ale nie można było zidentyfikować żadnej wyraźnej podgrupy zwierząt wykazujących zachowania podobne do uzależnień. Zamiast tego zaobserwowaliśmy szeroki zakres, od niskiej do bardzo wysokiej kontroli nad smacznym przyjmowaniem pokarmów. Jednak ekspozycja na obżarty model nie wpłynęła na kontrolę smacznego poszukiwania i przyjmowania pokarmów. Zwierzęta, które wykazywały niską kontrolę nad smakowitym przyjmowaniem pokarmu (tj. Uzyskały wysoką ocenę w trzech kryteriach zachowania przypominającego uzależnienie) były mniej wrażliwe na dewaluację nagrody za żywność i bardziej podatne na wywołane przez żywność przywrócenie wygaszonej odpowiedzi, co wskazuje, że kontrola nad smakowitością przyjmowanie pokarmu wiąże się ze zwykłym przyjmowaniem pokarmu i podatnością na nawrót. Podsumowując, przedstawiamy model zwierzęcy, aby ocenić kontrolę nad poszukiwaniem i przyjmowaniem żywności. Ponieważ zmniejszona kontrola nad spożywaniem pokarmu jest głównym czynnikiem rozwoju otyłości, zrozumienie jego behawioralnych i neuronalnych podstaw może ułatwić lepsze zarządzanie epidemią otyłości.
Wprowadzenie
Otyłość stanowi poważne zagrożenie dla zdrowia publicznego, ponieważ zwiększa ryzyko cukrzycy, chorób układu krążenia i raka [1,2]. Wskaźniki rozpowszechnienia otyłości stale rosną, przy spodziewanym wzroście o 2030 o X milionów 65 i milionów milionów otyłych dorosłych odpowiednio w USA i Wielkiej Brytanii [2]. Obecne rozpowszechnienie otyłości (definiowanej jako wskaźnik masy ciała> 30 kg / m2) wynosi około 33% w USA, a ponad połowa państw członkowskich UE ma poziom otyłości> 20% [3,4]. Pomimo wysokiego rozpowszechnienia neuronalne i behawioralne podstawy otyłości nie są w pełni zrozumiałe.
Sugerowano, że w niektórych formach nadmiernego przyjmowania pokarmu związanych z otyłością pośredniczy proces podobny do uzależnienia [1,2,5-11]. Chociaż stopień, w jakim uzależnienie od żywności może wyjaśnić epidemię otyłości, jest przedmiotem intensywnej debaty [2,12-14]. Na poparcie roli procesów podobnych do uzależnień w otyłości nakładają się kryteria DSM-IV dotyczące uzależnienia od substancji oraz proponowane kryteria zaburzeń odżywiania się [3,4,15,16] i otyłość [1,2,17]. Ponadto współwystępowanie między zaburzeniami odżywiania a zaburzeniami nadużywania substancji może być tak wysokie, jak 40% [18]. W związku z tym zasugerowano, że (nadmierne) jedzenie i zażywanie narkotyków opiera się na podobnym obwodzie nerwowym [19]. Jednym z możliwych wspólnych mechanizmów neuronowych jest zmniejszenie dostępności receptora dopaminowego D2 w prążkowiu, które występuje w obu zaburzeniach [20-24], odkrycie potwierdzone w zwierzęcym modelu kompulsywnego jedzenia [25]. Inne podobieństwa obejmują podobny wzorzec aktywności mózgu po głodzie i stłumieniu głodu [26-30] oraz współwystępowanie z osobowością impulsywną lub zespołem nadpobudliwości psychoruchowej [31-36].
Wcześniej argumentowaliśmy, że niedawno opracowane modele z dziedziny uzależnienia od narkotyków mogą być przydatne do zbadania koncepcji uzależnienia od żywności [15]. W 2004 Deroche-Gamonet i in. opracował model zachowań podobnych do uzależnień u szczurów, oparty na utracie kontroli nad przyjmowaniem kokainy [37]. W tym modelu szczury codziennie zażywały kokainę przez kilka miesięcy. Zwierzęta testowano pod kątem trzech parametrów behawioralnych w oparciu o kryteria DSM-IV dotyczące uzależnienia od substancji, tj. 1) Trudność w ograniczeniu poszukiwania podczas sygnalizowanej braku dostępności. 2) Niezwykle wysoka motywacja do poszukiwania i przyjmowania leku. 3) Kontynuowano poszukiwanie leku pomimo negatywnych konsekwencji. Stwierdzono, że podgrupa szczurów (17,2%) uzyskała punktację w obrębie górnego tercylu dla każdego kryterium, co stanowi znacznie więcej niż można by się spodziewać po przypadku (tj. 3,6%). Ponadto te podobne do uzależnienia zwierzęta wyrażające się zachowaniem wydają się być bardziej podatne na przywrócenie wygaszonego poszukiwania narkotyków, model nawrotu nadużywania narkotyków po detoksykacji [38].
W niniejszym badaniu sprawdziliśmy, czy zachowania uzależniające skierowane na jedzenie można wykazać, stosując podobne podejście jak Deroche-Gamonet i in. Aby ułatwić pojawienie się zachowań przypominających uzależnienie od żywności, wystawiliśmy zwierzęta na obżarstwo, polegające na naprzemiennych okresach ograniczania jedzenia i dostępu do smacznej żywności. Nadmierne modele jedzenia polegające na pośrednim dostępie do smacznego jedzenia [39,40] lub naprzemienny (12h / 12h) dostęp do sacharozy i pozbawienia żywności mają wpływ na obrzęki [41] i niektóre aspekty uzależnienia, takie jak objawy odstawienia [42,43], a także zmiany w sygnalizacji dopaminowej, które obserwuje się również po przedłużonej ekspozycji na lek [44,45].
Zaproponowano, że rozwój uzależnienia jest ułatwiony poprzez przejście z zachowania ukierunkowanego na wyniki, na celowe zachowanie w nawykowej strukturze zachowań reagujących na bodźce [46,47]. Aby przetestować rolę nawyków w naszym proponowanym modelu zachowań przypominających uzależnienie od żywności, przetestowaliśmy także reakcję na pokarm po dewaluacji smacznego wzmacniacza żywności [48]. Ponadto, ponieważ zachowania podobne do uzależnień są związane ze zwiększoną podatnością na przywrócenie poszukiwania narkotyków [37], postawiliśmy hipotezę, że zwierzęta o mniejszej kontroli nad spożywaniem pokarmu byłyby bardziej podatne na podpowiedzi i przywrócenie pokarmu w poszukiwaniu pożywienia po wyginięciu.
Materiały i Metody
Oświadczenie o etykiecie
Eksperymenty zostały zatwierdzone przez Komisję Etyki Zwierząt Uniwersytetu w Utrechcie i zostały przeprowadzone zgodnie z prawem holenderskim (Wet op de Dierproeven, 1996) i przepisami europejskimi (Wytyczne 86 / 609 / EWG).
Zwierzęta
Sześciotygodniowe samce szczurów Wistar (Charles River, Sulzfeld, Niemcy) o wadze 6-150 gramów na początku doświadczenia trzymano pojedynczo w klatkach Macrolon (L = 200 cm, W = 40 cm, H = 25 cm) w kontrolowanych warunkach ( temperatura 18–20 ° C, wilgotność względna 21 ± 55%) i w odwróconym 15-godzinnym cyklu światło-ciemność (włącza się o 12:19.00). Jedzenie i woda były swobodnie dostępne. Wszystkie eksperymenty przeprowadzono w ciemnej fazie cyklu dnia i nocy.
Przegląd eksperymentalny
Dostosowując model Deroche-Gamonet do utraty kontroli nad poszukiwaniem kokainy do smacznego pożywienia, w badaniu pilotażowym stwierdziliśmy, że nawet łagodny wstrząs elektryczny tłumił wszelkie poszukiwanie jedzenia. Dlatego postanowiliśmy zmierzyć „ciągłe poszukiwanie pomimo kary”, stosując zafałszowanie chininy smacznego jedzenia [49]. W tym pilotażowym eksperymencie porównano diety 4 (opisane poniżej) pod kątem ich zdolności do wywoływania zachowań podobnych do uzależnienia od żywności. W tym przypadku zwierzęta 24 (n = 6 na grupę) zostały przeszkolone i przetestowane pod kątem trzech zachowań opisanych przez [37]. Co ciekawe, kiedy zwierzęta badano pod kątem trzeciego kryterium (odporność na łagodny wstrząs elektryczny), stwierdzono całkowite zahamowanie poszukiwania czekolady, nawet gdy intensywność wstrząsu obniżono do 0.35 mA. Nie stwierdzono różnicy w reakcji w paradygmacie szoku między różnymi grupami dietetycznymi (ANOVA p = 0.1146 F = 2.243 df = 23). Dodatkowo, nie zaobserwowaliśmy znaczącej różnicy w odpowiedzi w ramach progresywnego harmonogramu wzmocnienia między czterema grupami diet (dane nieprzedstawione). Zauważyliśmy jednak tendencję do wzrostu zachowań podobnych do uzależnień u zwierząt narażonych na model objadania się, biorąc pod uwagę wszystkie trzy kryteria. Ponieważ wstrząs elektryczny tłumił wszelkie poszukiwania nagrody, postanowiliśmy zmierzyć kryterium odporności na przeciwności w inny sposób, tj. Wystawiając zwierzęta na smaczny pokarm zafałszowany chininą 2 mM. W głównym eksperymencie opisanym w niniejszym badaniu porównaliśmy grupę narażoną na model objadania się (n = 36) z grupą kontrolną karmioną karmą (n = 12). W tym eksperymencie zwierzęta wstępnie przeszkolono w zakresie trzech kryteriów 5 tygodni, a następnie tygodni 8 dostępu do diety. Nie zaobserwowaliśmy różnicy w odpowiedzi operanta między grupami diet przed dietą. Następnie kontynuowaliśmy przekwalifikowanie i testowanie trzech kryteriów, a następnie sesje ekstynkcji 10 i dwie sesje przywracania (wywołane wskazówką i czekoladą).
Diety
W tym badaniu zastosowano cztery różne diety, a zwierzęta były narażone na odpowiednią dietę przez tygodnie 8. Dieta kontrolna składała się z karmy ad libitum (SDS, 3.3 kcal / g, 77.0% węglowodanów, 2.8% tłuszczu, 17.3% białka). Dieta o ograniczonym dostępie składała się z karmy ad libitum z dodatkiem 3h dostępu do czekoladyTM (Abbott Laboratories, Abbott Park, IL, USA), przez 5 dni w tygodniu (od 12.00 – 15.00h). Dieta wysokotłuszczowa o wysokiej zawartości sacharozy składała się z chowu ad libitum w połączeniu z tłuszczem nasyconym ad libitum (łój wołowy (Ossewit / Blanc de Boeuf), Vandemoortele, Belgia, 9.1 kcal / g) i 30% roztwór sacharozy (klasa handlowa sacharoza w wodzie z kranu, 1.2 kcal / ml). Dieta typu binge składała się z 4 dni karmy 15.0-15.5g / dzień naprzemiennie z 3 dni karmy ad libitum z dodatkiem ciasteczek ad libitum Oreo (Nabisco, East Hanover, NJ, USA, 4.7 kcal / g, 74% węglowodanów, 21% tłuszczu , 3% białka). W tym przypadku pliki cookie Oreo były dostępne dla 24h / dzień przez trzy dni. Chow / dzień 15g został oparty na wcześniejszych pracach Hagana i in. gdzie zwierzęta były ograniczone do 66% karmy ad-lib. Ten model jest zmodyfikowaną wersją Hagana i in. bez komponentu naprężenia modelu przegięcia [39,50]. Woda z kranu była dostępna przez cały czas, z wyjątkiem testów. W badaniu pilotażowym porównano wszystkie cztery diety. Zwierzęta testowano przed i po tygodniach dostępu do diety 8. Główny eksperyment tego artykułu porównuje 8 tygodniową dietę Binge z 8 tygodniami karmy ad-lib. Kontynuowaliśmy dietę zjadliwą, ponieważ dane z literatury, a także nasze własne dane pilotażowe sugerują, że opisana powyżej dieta zjadliwa najprawdopodobniej wywołuje zachowania podobne do uzależnienia od żywności [39].
Aparatura
Szczury trenowano w komorach do kondycjonowania instrumentalnego (30.5 x 24.1 x 21.0 cm; Med Associates Inc, St. Albans, VT, USA). Każda komora była wyposażona w dwie wysuwane dźwignie (4.8 x 1.9 cm). Nad każdą dźwignią umieszczono lampkę sygnalizacyjną (światło stymulacyjne ENV-221M dla szczurów, 28 V, 100 mA; Med Associates Inc) i lampę domową (oświetlenie domowe ENV-215M do komór szczurów, 28 V, 100 mA; Med Associates Inc) na przeciwległej ścianie. Podłoga komory została pokryta metalową kratką z prętami oddzielonymi 1 cm. Komora została umieszczona w kabinie dźwiękochłonnej wyposażonej w wentylator w celu zminimalizowania hałasu zewnętrznego. Czekoladowy Upewnij się, że został dostarczony do pojemnika na żywność, znajdującego się pomiędzy dwiema dźwigniami, przez nylonowe rurki podłączone do pojedynczej prędkości pompy strzykawkowej (PHM-100-3.33; Med Associates Inc) umieszczonej na zewnątrz komory. Komora operanta była kontrolowana przez oprogramowanie MED-PC (wersja IV) Research Control & Data Acquisition System.
Nabycie czekolady Zapewnij sobie administrację
Zwierzęta szkolono w zakresie reagowania na żywność, jak opisano wcześniej [51,52]. Szczury po raz pierwszy odbyły sesje szkoleniowe dla operantów 10 trwające 1 godz. Podczas tych sesji obecne były dwie dźwignie, z których jedna została oznaczona jako aktywna. Pozycja aktywnych i nieaktywnych dźwigni była równoważona między zwierzętami. Sesja rozpoczęła się od włożenia obu dźwigni i podświetlenia oświetlenia domu. Podczas pierwszej sesji zastosowano harmonogram zbrojenia 1 o stałym stosunku (FR), co oznacza, że każde aktywne naciśnięcie dźwigni skutkowało dostarczeniem mlecznej czekolady 0.2. Upewnij się, wycofanie obu dźwigni na 20 s i podświetlenie lampki kontrolnej nad aktywnym dźwignia na 10 s, podczas której oświetlenie domu zostało wyłączone. Wymóg odpowiedzi został zwiększony do harmonogramu zbrojenia FR2 podczas drugiej i trzeciej sesji. Od czwartej sesji obowiązywał harmonogram zbrojenia FR5.
Odpowiadanie na przerwę
Procedura limitu czasu została oparta na [37], chociaż zastosowano krótszy czas trwania sesji, aby zapobiec wpływowi sytości na odpowiedź. Sesje składały się z bloków 5 min. Czekolady 10 Upewnij się, że zamieniono dostępność na bloki 4 min. 5, podczas których czekolada Upewnij się, że jest niedostępna. Podczas blokowania dostępności zwierzęta wskazywały na uwarunkowaną reakcję nagrodę przez oświetlenie światła w domu. Procedura samodzielnego podawania podczas bloków dostępności była taka sama jak opisano powyżej, tj. Zastosowano harmonogram zbrojenia FR5. Podczas blokady niedostępności światło w domu było wyłączone, a reakcje na obu dźwigniach nie były zaplanowane. Odpowiedzi stały się bardziej zmienne podczas ostatnich bloków sesji, prawdopodobnie w wyniku sytości. Dlatego jako parametr krytyczny wykorzystaliśmy liczbę odpowiedzi uzyskanych podczas pierwszego bloku niedostępności 5 min, ponieważ ten blok był otoczony dwoma blokami dostępności, w których zwierzęta zawsze otrzymywały maksymalną ilość nagród w dostępnym czasie. Zwierzęta otrzymywały sesje 10 przed dietą i sesje 15 po diecie. Średnia liczba odpowiedzi podczas pierwszego bloku niedostępności ostatnich sesji 4 została wykorzystana jako wynik limitu czasu zwierzęcia.
Harmonogram zbrojenia progresywnego
Zgodnie z harmonogramem wzmacniania progresywnych proporcji zwierzęta musiały spełniać wymóg reakcji na aktywnej dźwigni, który stopniowo wzrastał po każdej zdobytej czekoladzie Zapewnij nagrodę (1, 2, 4, 6, 9, 12, 15, 20, 25 itp. [53]). Sesja rozpoczęła się od oświetlenia lampki domowej (sygnalizująca dostępność nagrody) i włożenia dźwigni aktywnej i nieaktywnej. Spełnienie wymogu odpowiedzi na aktywnej dźwigni spowodowało wycofanie obu dźwigni, podświetlenie lampki kontrolnej nad aktywną dźwignią przez 10 s oraz dostarczenie mlecznej czekolady 0.2. Upewnij się. Po upływie limitu czasu 20 rozpoczął się nowy cykl. Sesja zakończyła się, gdy zwierzętom nie udało się zdobyć nagrody w ciągu 60 min. Zwierzęta otrzymywały sesje 4 PR przed i sesje 4 PR po diecie. W obu przypadkach jako wynik PR zwierzęcia zastosowano średnią z aktywnych odpowiedzi dźwigni podczas sesji 4.
Odpowiedzialny za karę
Procedurę zaadaptowano z Deroche-Gamonet i in. (2004). Podczas tej procedury zwierzęta badano w komorach klimatyzacyjnych operant, które różniły się od tych używanych podczas treningu, przerwy i sesji PR. Sesja rozpoczęła się od oświetlenia lampki domowej i prezentacji obu dźwigni. Podczas tych sesji zwierzęta odpowiedziały zgodnie z harmonogramem wzmocnienia FR5, w którym każde naciśnięcie dźwigni 1st powodowało prezentację tonu i każdego 4th i 5th Prasa dźwigniowa spowodowała prezentację porażenia prądem elektrycznym stopy (0.35mA, 2sec), podawanego przez podłogę rusztu. Każdy 5th Prasa dźwigniowa doprowadziła do dostawy czekolady mlecznej 0.2. Zapewnij. Dźwięk został wyłączony po 4th naciśnij dźwignię lub gdy zwierzęta nie wykonały odpowiedzi 4 w ciągu minuty 1, w którym to przypadku rozpoczął się nowy cykl FR5. Miarą wynikową była liczba nacisków dźwigni, które zwierzęta wykonały podczas sesji jako procent odpowiedzi wyjściowej (średnia z sesji 4 FR5 z dni wcześniejszych). Ocenialiśmy odpowiedź w ramach tego paradygmatu w badaniu pilotażowym (opisanym powyżej), w którym wstrząs elektryczny prawie całkowicie tłumił reagowanie na pokarm u wszystkich zwierząt.
Zafałszowanie chininy
Zwierzętom zapewniono swobodny dostęp do niezafałszowanej lub zafałszowanej (przy użyciu 2 mM chininy; Sigma, Holandia) czekolady Zapewnij w klatce domowej przez 30 minut w różne dni. Doświadczenie pilotażowe wykazało, że stężenie 2 mM chininy spowodowało znaczną indywidualną zmienność, podczas gdy wyższe stężenia hamowały spożycie u prawie wszystkich zwierząt, a niższe stężenia miały bardzo niewielki wpływ na czekoladę. Zapewnić spożycie. Współczynnik tłumienia obliczono w następujący sposób: ((konsumpcja bez zafałszowań - konsumpcja zafałszowana) / konsumpcja bez zafałszowań) * 100, tak że współczynnik tłumienia 100 obejmował całkowite zahamowanie spożycia, a stosunek 0 oznaczał brak tłumienia w ogóle .
Dewaluacja nagrody
Zwierzęta otrzymały 2 h swobodnego dostępu do czekolady Zapewnij w klatce domowej bezpośrednio przed sesją operacyjną 20 min, podczas której światło domowe było oświetlone i obie dźwignie były obecne przez całą sesję. Zarówno aktywne, jak i nieaktywne reakcje dźwigni nie miały zaplanowanych konsekwencji. Wynik dewaluacji obliczono jako liczbę aktywnych pras dźwigniowych wykonanych przez zwierzę po dewaluacji. Wyniki porównano z liczbą naciśnięć dźwigni podczas normalnej sesji 20 min bez dewaluacji FR5 dzień wcześniej.
Wygaśnięcie i przywrócenie
Zwierzęta otrzymywały codzienne sesje 12 godz. 1 h, podczas których naciskanie dźwigni nie miało zaplanowanych konsekwencji. Oświetlenie domu (które wcześniej sygnalizowało dostępność nagrody) było włączone przez całą sesję. W dniu 13 przywrócenie wywołane przez pamięć testowano w następujący sposób. Sesja rozpoczęła się od podświetlenia lampki sygnalizacyjnej nad aktywną dźwignią przez 10 sec. Podczas tej sesji spełnienie wymagania FR5 dla aktywnej dźwigni spowodowało wycofanie obu dźwigni i podświetlenie lampki kontrolnej przez 10 s, ale nagroda nie została dostarczona. Zwierzęta otrzymały normalne sesje wymierania w dniu 14 i 15. W dniu 16 przetestowano przywrócenie wywołane czekoladą Zapewnienie. Sesja rozpoczęła się od dostawy ml czekolady 0.6 Upewnij się. Prasy dźwigniowe podczas tej sesji nie miały zaplanowanych konsekwencji.
Analiza danych
Na podstawie trzech kryteriów obliczono „wynik uzależnienia” według Belina i in. [54]. Normalizacji dokonano odejmując średnią wszystkich zwierząt od każdego pojedynczego zwierzęcia i dzieląc przez odchylenie standardowe całej grupy. Spowodowało to wynik kryterium ze średnią 0 i odchylenie standardowe 1 dla każdego kryterium. Wynik uzależnienia obliczono następnie jako sumę trzech znormalizowanych wyników. Skategoryzowaliśmy również zwierzęta według Deroche – Gamonet i in., Co oznacza, że policzyliśmy liczbę kryteriów, za które zwierzę uzyskało punktację między 66th i 99th percentyl rozkładu [37]. Dwie grupy diet porównano ze sobą za pomocą testów t-Studenta. Grupy kryteriów porównano przy użyciu jednokierunkowych analiz ANOVA, a następnie, w stosownych przypadkach, wielokrotnych testów post hoc w Turcji. Surowe zestawy danych są dostępne na żądanie.
Efekt
Kohorta zwierząt (n = 48) została przetestowana pod kątem trzech kryteriów zachowania przypominającego uzależnienie. Aby sprowokować rozwój niekontrolowanego odżywiania, podgrupę (n = 36) poddano modelowi obgryzania. Nie zaobserwowano istotnych różnic w żadnym z trzech indywidualnych kryteriów między zwierzętami kontrolnymi i obżerającymi się (czas oczekiwania na odpowiedź (TO): p = 0.6 t = 0.53 df = 46; współczynnik progresywny (PR): p = 0.9 t = 0.1128 df = 46 ; chinina: p = 0.3 t = 1.048 df = 46) (Rysunek 1A-C). Model obżarstwa spowodował jednak znaczący wzrost przyrostu masy ciała (p <0.0001 t = 6.105 df = 46) (Rysunek 1D). Następnie podzieliliśmy wszystkie zwierzęta na podgrupy 4 na podstawie liczby kryteriów, dla których ocenili między 66th i 99th percentyl, według Deroche-Gamonet i in. (2004). W naszym przypadku podgrupa 3-critt nie była większa niż oczekiwana przez przypadek (tj. 3,6%) (Rysunek 2). Było to prawdą zarówno w przypadku grupy binge (Rysunek 2A) oraz całej kohorty (Rysunek 2B). Podgrupy kryteriów różniły się od siebie w każdym z kryteriów (ANOVA TO: p <0.0001 F = 11.42 df = 47; PR: p <0.0001 F = 9,850 df = 47; chinina: p = 0.0006 F = 6.932 df = 47) (Rysunek 3A-C). W grupie bezsennej ocenialiśmy, czy zmniejszona kontrola przewidywała przyrost masy ciała podczas diety, co nie miało miejsca (Rysunek 3D).
Co ważne, różnice między grupami kryteriów nie były spowodowane zmiennością sytości lub zapotrzebowania na energię, ponieważ wszystkie grupy spożywały taką samą ilość czekolady podczas sesji 70 min FR5 (ANOVA p = 0.3 F = 1.266 df = 47) (Rysunek 4A) lub po otrzymaniu 2h ad libitum dostępu do czekolady Upewnij się (ANOVA p = 0.4 F = 0.9651 df = 47) (Rysunek 4B). Obliczyliśmy również wynik uzależnienia na podstawie [54]. Zaowocowało to szerokim zakresem wyników (Rysunek 5).
Zasugerowano, że kształtowanie nieprawidłowych, ukierunkowanych na leki nawyków reakcji na bodziec jest kluczowym krokiem w rozwoju zachowań uzależniających [46,47]. Aby ocenić, czy zachowanie wyrażone przez zwierzęta było celowe czy nawykowe, zdewaluowaliśmy czekoladę. Zapewnij nagrodę, zapewniając zwierzętom 2 h swobodnego dostępu w ich klatce domowej przed sesją testową 20 min, podczas której dźwignia naciska, gdy nie jest wzmocniona . Zwierzęta uzyskały średnio 63% mniej odpowiedzi, gdy czekolada została zdewaluowana w porównaniu z sesją min. 20, w której naciśnięto dźwignię, gdzie wzmocniono, a czekolada nie uległa dewaluacji (średnia różnica to 104.0, 95% ci = 92.06 do 115.9) (Rysunek 6A). Prasy dźwigniowe wykonane po dewaluacji korelują z wynikiem uzależnienia (r2= 0.2, 0.001, p <XNUMX, XNUMX) (Rysunek 6B). Nie zaobserwowano różnicy między upijaniem się a grupą kontrolną (danych nie pokazano).
Następnie oceniliśmy, czy zwierzęta ze zmniejszoną kontrolą nad jedzeniem były bardziej skłonne do przywrócenia wygaszonej odpowiedzi. Zmierzyliśmy rodzaje przywracania 2. W porównaniu z odpowiedzią podczas wyginięcia (Rysunek 7A), prezentacja czekolady zależna od odpowiedzi Zapewnienie istotnych wskazówek spowodowało znaczące (p = 0.0035 t = 3.077 df = 47) przywrócenie odpowiedzi w całej grupie, ale nie było różnicy między grupami kryteriów (ANOVA p = 0.865 F = 0.2442 df = 47) (Rysunek 7B). Podczas przywracania wywołanego czekoladą, zaobserwowaliśmy znaczące przywrócenie (p <0.0001 t = 12.35 df = 47) i istotną różnicę w przywracaniu między grupami, przy czym grupa 2 kryteriów wykazała wyższy poziom odpowiedzi niż zwierzęta spełniające kryteria 0 i 1 (ANOVA p = 0.01 F = 4.225 df = 47) (Rysunek 7C).
Dyskusja
W niniejszym badaniu zaadaptowaliśmy zwierzęcy model zachowań przypominających uzależnienie od kokainy, aby ocenić występowanie zachowań uzależniających skierowanych przeciwko smacznym pokarmom. W celu ułatwienia rozwoju niekontrolowanego odżywiania, podgrupę zwierząt (n = 36) wystawiono na model typu binge składający się z dni 4 66% karmy ad libitum naprzemiennie z dostępem dni 3 do karmy ad libitum w połączeniu z ciasteczkami Oreo. Po przetestowaniu trzech kryteriów utraty kontroli zmierzyliśmy również reakcję po dewaluacji i skłonność do przywrócenia wygaszonej odpowiedzi wywołanej przez zależną od reakcji prezentację wskazówki związanej z nagrodą żywności lub czekolady Zapewnij sobie nagrodę.
Obżarty model nie wpływa na kontrolę nad poszukiwaniem jedzenia
Nie zaobserwowaliśmy wpływu modelu obżarstwa na żadne z trzech kryteriów zachowania przypominającego uzależnienie (Ryciny 1 i I 2) .2). Zaobserwowaliśmy jednak wzrost przyrostu masy ciała po ekspozycji na model binge. Obecna dieta oparta jest na badaniu przeprowadzonym przez Hagana i wsp., Którzy wykazali zwiększone objadanie się smacznym jedzeniem zwierząt, które były narażone na porównywalną dietę nawet po ich wycofaniu z diety 30 [50]. W przeciwieństwie do Hagana i wsp. Wykorzystaliśmy samce szczurów. Nie możemy zatem wykluczyć, że moglibyśmy uzyskać bardziej wyraźne efekty obżerającej się diety, gdybyśmy użyli samic szczurów. Rzeczywiście BED występuje częściej u kobiet niż u mężczyzn [55]. Z drugiej strony wielokrotnie wykazano, że w odpowiednich okolicznościach zarówno samce, jak i samice szczurów będą podjadały smaczny pokarm [56-58]. W innym powszechnie stosowanym modelu objadania się, który powoduje obrzęk u obu płci szczurów, stosuje się naprzemienne okresy pozbawienia pokarmu 12h / 12h w połączeniu z dostępem do roztworu 10% sacharozy [59,60]. Wcześniejsze badania wykazały również, że stały dostęp do diety o wysokiej zawartości tłuszczu i sacharozy zwiększa reakcję zgodnie z harmonogramem PR i reakcję zgodnie z harmonogramem PR, zanim dostęp do diety pozytywnie koreluje z magazynowaniem tłuszczu w jamie brzusznej po 4 tygodniach dostępu do wysokotłuszczowej diety o wysokiej zawartości tłuszczu dieta cukrowa u samców szczurów [51]. W związku z tym ekspozycja na niektóre rodzaje diet otyłych może prowadzić do upijania się i zwiększonej motywacji do jedzenia. Jednak nasze dane wskazują, że przedłużona ekspozycja na dietę typu binge nie jest sama w sobie wystarczająca, aby wywołać wyraźne zachowania podobne do uzależnień.
Brak dowodów na „uzależnienie od żywności”, ale duża indywidualna zmienność kontroli nad smacznym przyjmowaniem pokarmów
W przeciwieństwie do tego, co stwierdzono dla kokainy, podgrupa szczurów, która występowała w górnym tercylu dla wszystkich trzech kryteriów, nie była większa niż oczekiwana przez przypadek (3,6%). Dlatego uzasadnione jest stwierdzenie, że w naszym badaniu nie pojawiły się wyraźne oznaki uzależnienia od czekolady. Nawet przy braku takiej „podgrupy uzależnionych” zakres kontroli nad poszukiwaniem żywności obserwowany w niniejszym badaniu jest bardzo istotny. Oznacza to, że zmniejszona kontrola spożycia żywności u ludzi, nawet przy braku wyraźnego zachowania podobnego do uzależnienia, może powodować przejadanie się, a długotrwałe łagodne przejadanie się prowadzi do otyłości u niektórych osób. W niniejszym badaniu zmniejszona kontrola nad smacznym przyjmowaniem pokarmów nie przewidywała przyrostu masy ciała, co prawdopodobnie wynika z faktu, że szczury (w przeciwieństwie do ludzi) nie próbują zapobiegać przyrostowi masy ciała. Tak więc ważne jest zbadanie mechanizmów neuronalnych stojących za tym kontinuum kontroli nad poszukiwaniem i przyjmowaniem żywności, a nasz obecny model zapewnia narzędzia behawioralne do tego.
Zwierzęta wykazujące zmniejszoną kontrolę nad przyjmowaniem pokarmu są mniej wrażliwe na dewaluację nagrody
Zauważyliśmy znaczny spadek odpowiedzi po dewaluacji na poziomie grupy (Rysunek 6a). Co ciekawe, istniały duże różnice indywidualne dotyczące wpływu dewaluacji, które korelowały z wynikiem uzależnienia (Rysunek 6b). Zaproponowano, że rozwój uzależnienia jest ułatwiony poprzez przejście od ukierunkowanego na cel zachowania na zachowanie oparte na nawykowym bodźcu [46]. Uważa się, że w tym pierwszym pośredniczą części brzuszne i przyśrodkowe prążkowia, natomiast w drugim zależy od grzbietowo-bocznego prążkowia [61]. Rzeczywiście, wielokrotnie udowodniono, że przedłużone samopodawanie kokainy rekrutuje grzbietowo-boczne mechanizmy prążkowia leżące u podstaw poszukiwania narkotyków [62-65] oraz że zmiany lub inaktywacja grzbietowo-bocznego prążkowia zmniejszają nawykowe zachowanie [66-69]. Ponieważ zwierzęta, które wykazują mniejszą kontrolę nad spożywaniem pokarmu, wyrażają więcej nawykowych zachowań, odkrycia te sugerują, że zmniejszona kontrola nad spożywaniem pokarmu jest związana z większym zaangażowaniem grzbietowo-bocznym prążkowia w kontrolę jedzenia.
Zwierzęta o niskiej kontroli są bardziej skłonne do wznowienia poszukiwania pożywienia
Istotną cechą uzależnienia jest wysokie ryzyko nawrotu [70,71]. Można to zbadać za pomocą modeli zwierzęcych, które badają skłonność zwierzęcia do przywracania poszukiwania narkotyków po wygaszeniu odpowiedzi operanta. Poszukiwanie narkotyków można przywrócić za pomocą wskazówki związanej z narkotykami, niewielkiej „początkowej” ilości leku lub stresu [38]. Aby ocenić, czy zwierzęta, które mają mniejszą kontrolę nad poszukiwaniem pożywienia, były bardziej skłonne przywrócić poszukiwanie wygaszonego pożywienia, przetestowaliśmy je zarówno pod kątem przywrócenia pod wpływem wskazówek, jak i nagród. Jak widać w Rysunek 7C, jedynie gruntowanie zwierząt nagrodą o smaku czekoladowym wywołało znaczącą różnicę w przywróceniu między grupami kryteriów 4. W tym przypadku zwierzęta z kryteriami 2 zareagowały znacznie więcej podczas przywracania. Jest prawdopodobne, że zwierzęta z kryteriami 3 również są bardziej skłonne do przywrócenia, ale trudno było to wykazać statystycznie ze względu na małą liczbę zwierząt w tej grupie.
Podsumowując, przedstawiamy model, który można wykorzystać do pomiaru zmian w kontroli zachowań żywieniowych. Model zapewnia ciągłość zachowań, od bardzo wysokiej do niskiej kontroli, której skrajność można nazwać uzależnieniem od żywności, ale przynajmniej w obecnym eksperymencie nie można ustalić wyraźnej granicy między zwierzętami „uzależnionymi” i „nieuzależnionymi” , podgrupa zwierząt, które potencjalnie można zaklasyfikować jako wykazujące zachowania podobne do uzależnień, nie jest większa niż przypadkowo. Z drugiej strony stwierdziliśmy, że niska kontrola spożycia pokarmu była związana z wysoką skłonnością do smakowitego nawrotu wywołanego pokarmem i zwiększoną nawykową reakcją na czekoladę, co wskazuje, że zmiany behawioralne związane z zachowaniem uzależniającym można zaobserwować u zwierząt z niską kontrolą nad smakowitością spożycie żywności. Model ten stanowi zatem cenne narzędzie do badania kontroli nad jedzeniem i jego neuronowymi podstawami. Jest to bardzo istotne, gdy weźmiemy pod uwagę, że zmniejszona kontrola nad jedzeniem, nawet bez ścisłej klasyfikacji uzależnienia od żywności, może powodować poważne problemy zdrowotne.
Oświadczenie o finansowaniu
Wspierany przez Fundację NeuroFAST (zintegrowana neurobiologia przyjmowania pokarmu, uzależnienia i stresu). NeuroFAST jest finansowany z Siódmego programu ramowego Unii Europejskiej (FP7 / 2007-2013) w ramach umowy o dotację nr 245009. Fundatorzy nie odgrywali żadnej roli w projektowaniu badań, gromadzeniu i analizie danych, podejmowaniu decyzji o opublikowaniu lub przygotowaniu manuskryptu.
Referencje