Exprimarea și distribuția receptorului dopaminic se modifică dinamic în nucleul accumbens de șobolan după retragerea de la administrarea cocainei. (2010)

Comentarii: utilizatorii porno grei raportează multe tipuri de simptome de sevraj după ce încetează să mai utilizeze. Toți experimentează pofte. Recuperarea nu este liniară, deoarece unii pot recidiva sau pot avea pofte săptămâni după recuperare. Acest studiu poate dezvălui de ce. După încetarea consumului de cocaină, receptorii dopaminei (D2) nu au revenit la normal la 45 de zile, iar receptorii D3 au crescut - ceea ce poate duce la pofte puternice.


Kelly L. Conrad, Ph.D.,a,c Kerstin Ford, BS,a,b Michela Marinelli, Ph.D.,b și Marina E. Wolf, Ph.D.a

Abstract

Receptorii dopaminei (DAR) din nucleul accumbens (NAc) sunt critici pentru acțiunile cocainei, dar natura adaptărilor funcției DAR după expunerea repetată la cocaină rămâne controversată. Acest lucru se poate datora, în parte, faptului că diferite metode utilizate în studiile anterioare au măsurat diferite grupuri DAR. În studiul de față, am folosit un test de reticulare a proteinelor pentru a face primele măsurători ale expresiei suprafeței DAR în NAc de șobolani experimentați cu cocaină. Nivelurile de receptor intracelular și total au fost, de asemenea, cuantificate. Șobolanii s-au auto-administrat ser fiziologic sau cocaină timp de zece zile. Întreaga NAc, sau subregiunile de bază și miez, au fost colectate una sau 45 de zile mai târziu, când șobolanii prezintă niveluri scăzute și ridicate de căutare a medicamentului indusă de tac, respectiv. Am găsit DAR D1 de suprafață celulară crescută în coaja NAc în prima zi după întreruperea autoadministrării de cocaină (desemnată ziua de retragere 1 sau WD1), dar acest lucru s-a normalizat prin WD45. Scăderea nivelurilor de DAR intracelulare și de suprafață D2 au fost observate în grupul cu cocaină. În shell, ambele măsuri au scăzut pe WD1 și WD45. În miez, expresia scăzută a suprafeței DAR D2 a fost observată numai pe WD45. În mod similar, WD45 dar nu WD1 a fost asociat cu o expresie crescută a suprafeței DAR D3 în miez. Luând în considerare multe alte studii, sugerăm că scăderea D2 DAR și creșterea expresiei D3 DAR a suprafeței pe WD45 poate contribui la căutarea sporită a cocainei după retragere prelungită, deși acest lucru este probabil un efect modulator, în lumina efectului de mediere demonstrat anterior pentru receptorii de glutamat de tip AMPA.

Cuvinte cheie: cocaină, receptori de dopamină, nucleu accumbens, trafic de receptori

Se consideră că modificările în semnalizarea receptorului de dopamină (DA) (DAR) contribuie la dependență (Volkow și colab., 2009). Prin urmare, numeroase studii au examinat efectele auto-administrării și retragerii cocainei asupra expresiei DAR-urilor D1 (D1 și D5) și D2 (D2, D3 și D4) a DAR-urilor din nucleul accumbens (NAc). Studiile la om și primatele neumane au utilizat topografia cu emisie de pozitron (PET) pentru a oferi o măsură indirectă a receptorilor de suprafață celulari DAR disponibili. În studiile la șobolan, teste de legare sau in vitro au fost utilizate autoradiografia receptorilor; aceste tehnici măsoară DAR-urile într-un număr de compartimente, inclusiv, dar fără a se limita la piscina de suprafață a celulei. În special în studiile privind rozătoarele, rezultatele par să depindă de regimul medicamentos și de calendarul experimentului (Anderson și Pierce, 2005). Cu toate acestea, o altă variabilă importantă este utilizarea diferitelor metode care măsoară diferite grupuri DAR, combinate cu complexități recent descoperite cu privire la agregarea DAR, trafic și semnalizare. Toți acești factori complică măsurarea speciilor funcționale DAR.

Este bine stabilit că DAR-urile D1 și DAR-like D2 sunt cuplate pozitiv și negativ, respectiv, cu adenilil ciclaza și că fiecare familie poate influența și alte cascade de transducție a semnalului (Lachowicz și Sibley, 1997; Neve și colab., 2004). Mai recent, s-a apreciat că D1, D2 și D3 DAR formează dimere și complexe de ordine superioară (Lee și colab., 2000a; George și colab., 2002; Javitch, 2004). Oligomerizarea, care apare devreme pe calea biosintetică la nivelul reticulului endoplasmic, poate fi necesară pentru direcționarea DAR-urilor și a altor receptori cuplați de proteina G (GPCR) la suprafața celulei (Lee și colab., 2000b; Bulenger și colab., 2005). Oligomerii DAR sunt formați de legături disulfură, dar și de interacțiuni de domeniu transmembran hidrofob, ceea ce le face parțial rezistente la reducerea condițiilor și duc la observarea benzilor de monomeri, dimer și oligomeri în studiile de blotare occidentală (de ex. Lee și colab., 2003). DAR-urile conțin, de asemenea, un număr variabil de situsuri de glicozilare legate de N (Missale și colab., 1998) care poate fi necesară pentru D2 DAR pentru traficul de suprafață celulară (Free și colab., 2007). Glicozilarea D2 DAR contribuie la o bandă suplimentară ~ 70-75kDa observată frecvent în Western blots (David și colab., 1993; Fishburn și colab., 1995; Lee și colab., 2000b). În mod intrigant, sa arătat că DAR formează hetero-oligomeri între diferite subtipuri DAR și cu alte GPCR și non-GPCR; prin activarea DAR-urilor în aceste complexe multimerice, agoniștii DA pot activa căile de semnalizare distincte sau modificate în mărime față de cele legate de DAR-urile individuale (de ex. Rocheville și colab., 2000; Ginés și colab., 2000; Scarselli și colab., 2001; Lee și colab., 2004; Fiorentini și colab., 2003; 2008; Marcellino și colab., 2008; Deci și colab., 2009).

La utilizatorii abocați de cocaină umană, vulnerabilitatea la recidivă crește adesea după etapa de retragere a drogurilor acute (Gawin și Kleber, 1986; Kosten și colab., 2005). Un fenomen analog a fost observat după retragerea din autoadministrarea cu cocaină cu acces extins la șobolani (Neisewander și colab., 2000; Grimm și colab., 2001; Lu și colab., 2004a, b; Conrad și colab., 2008). Aceste studii au arătat că căutarea de droguri indusă de cec crește între prima zi și 90 de retragere de droguri, iar apoi se întoarce către valoarea inițială până la 6 luni. Faza de ascensiune este denumită „incubare”. Scopul prezentului studiu a fost de a determina dacă incubația poftei de cocaină indusă de cete este însoțită de modificări ale nivelurilor D1, D2 sau D3 DAR în NAc. Pentru a măsura selectiv modificările în grupul DAR funcțional exprimat pe suprafața celulelor, am adaptat un test de reticulare proteic utilizat anterior de laboratoarele noastre pentru a măsura expresia suprafeței celulelor receptorului de glutamat după tratamente in vivo (Boudreau și Wolf, 2005; Boudreau și colab., 2007; 2009; Conrad și colab., 2008; Nelson și colab., 2009; Ferrario și colab., 2010). Folosind acest test, nivelurile DAR de suprafață, intracelulare și totale de DAR au fost determinate în alicoturi de țesut NAc obținute de la șobolani fie 1 day, fie 45 zile după întreruperea administrării extinse a cocainei sau a soluției saline.

PROCEDURI EXPERIMENTALE

Animale și proceduri comportamentale

Experimentele s-au desfășurat în conformitate cu Ghidul Național al Institutelor de Sănătate pentru Îngrijirea și Utilizarea Animalelor de Laborator (Publicațiile NIH nr. 80-23; 1996 revizuit) și au fost aprobate de Comitetul nostru instituțional de îngrijire și utilizare a animalelor. Au fost depuse toate eforturile pentru a reduce la minimum numărul animalelor folosite și suferința lor. Studiul de față a analizat distribuția DAR în părțile alicotice ale țesutului NAc obținut de la aceiași șobolani utilizați anterior pentru a demonstra incubarea poftei de cocaină și modificările asociate în expresia subunităților receptorilor α-amino-3-hidroxi-5-metilisoxazol-4-AMN (AMPA). după 45 zile de retragere de la autoadministrarea cocainei (Conrad și colab., 2008). Țesutul nu a fost disponibil pentru toți șobolanii folosiți în studiul nostru anterior, reprezentând unele diferențe în valorile N. S-au folosit două cohorte de șobolani. Întregul NAc (nucleu + coajă) a fost disecat în primul, în timp ce miezul și coaja au fost disecate separat în a doua. Aceste studii au folosit șobolani Sprague Dawley de sex masculin (Harlan, Indianapolis, IN) cu o greutate de 250-275g la sosire și adăpostiți individual pe un ciclu invers 12h / 12h invers (se aprind la orele 0900). Procedurile de pregătire chirurgicală și de autoadministrare au fost descrise anterior (Conrad și colab., 2008). Pe scurt, șobolanii au fost lăsați să tragă din nas să auto-administreze cocaină sau soluție salină timp de 10 zile (6h / zi) în camerele de auto-administrare (MED Associates, St. Albans, VT) în dulapurile care atenuează sunetul. Poterea nasului în gaura activă a furnizat o infuzie de soluție salină sau cocaină (0.5 mg / kg / 100μL peste 3s), însoțită de o lumină discretă 30-s în interiorul orificiului nasului. Tezarea nasului în gaura inactivă nu a avut consecințe. S-a utilizat o perioadă de timp de expunere de 10s în prima oră sau pentru primele perfuzii 10 (oricare s-a produs prima dată) și s-a extins la 30s pentru timpul rămas pentru a preveni supradozajul de cocaină. Șobolanii care au administrat administrarea de cocaină medie au făcut perfuzii 120 în fiecare zi (~ 60mg / kg / zi), în timp ce șobolanii care au soluție salină auto-administrată au infuzat 20 în fiecare zi (datele nu sunt prezentate). Mâncarea și apa au fost prezente în permanență. După întreruperea administrării saline sau a cocainei, șobolanii au fost returnați în cuștile de acasă pentru 1 sau 45 zile înainte de obținerea țesutului NAc pentru studii de reticulare proteică (vezi secțiunea următoare). Astfel, s-au format patru grupuri experimentale: șobolani salini uciși în ziua retragerii 1 (WD1-Sal), șobolani de cocaină uciși pe WD1 (WD1-Coc), șobolani salini uciși pe WD45 (WD45-Sal) și șobolani cu cocaină uciși pe WD45 (WD45 -Coc). Termenul „WD” se referă pur și simplu la numărul de zile în care medicamentul nu a fost disponibil și nu implică un set de simptome fiziologice rezultate din încetarea consumului de medicamente cronice.

Proteine ​​reticulare

Această metodă a fost descrisă în detaliu anterior (Boudreau și Wolf, 2005; Ferrario și colab., 2010). Șobolanii au fost decapitați, creierul lor a fost îndepărtat rapid și întreaga NAc (sau subregiunile de miez și coajă) a fost disecată pe gheață dintr-o secțiune coronală 2mm obținută folosind o matrice cerebrală. Țesutul NAc integral a fost tocat imediat în felii de 400μm folosind un tocător de țesut McIllwain (Vibratome, St. Louis, MO), în timp ce subregiunile de miez și coajă mai mici au fost tocate manual cu ajutorul unui bisturiu. S-a adăugat apoi țesut la tuburile Eppendorf conținând CSF artificial rece la gheață picat cu 2 mM bis (sulfosuccinimidil) subratat (BS3; Pierce Biotechnology, Rockford, IL). Reacția de reticulare a fost lăsată să se desfășoare timp de 30 min la 4 ° C cu agitație blândă și apoi a fost terminată prin adăugarea de 100mM glicină (10 min la 4 ° C). Țesutul a fost granulat printr-o scurtă centrifugare, a fost suspendat din nou în tamponul de liză rece, care conține proteaze și inhibitori de fosfatază, sondat pentru 5 sec și centrifugat din nou. Aliquotele supernatantului s-au păstrat la -80 ° C până la analizarea prin Western blotting.

Analiza Western blot a DARs în țesutul reticulat

Probele (proteine ​​/ lizat total 20-30μg) au fost electroforate pe geluri 4-15% Tris-HCl (Biorad, Hercules, CA). Proteinele au fost transferate pe membrane de fluorură de polivinilidenă pentru imunoblotare folosind curent constant (1.15mA) pentru 1.5 h. O serpentină de răcire a fost utilizată pentru a preveni încălzirea excesivă. Transferul complet de agregate cu greutate moleculară mare a fost confirmat prin colorarea gelurilor după transferul cu albastru Coomassie. Mai mult, am verificat că proteinele DAR reticulate nu au fost detectate în gelul de stivuire (datele nu sunt prezentate). După transfer, membranele au fost spălate în ddH2O, uscat la aer pentru 1 hr la temperatura camerei (RT), re-hidratat cu 100% MeOH, spălat în soluție salină tamponată cu TIS (XBS) și scufundat în 1M NaOH, pH 0.1 pentru 10 min la RT. Apoi, au fost spălate în TBS, blocate cu 15% Album Seric Bovin (Sigma – Aldrich, St. Louis, MO) în TBS-Tween-3 (TBS-T), pH 20, pentru 7.4 hr la RT și incubate peste noapte. la 1 ° C cu anticorpi care recunosc D4 DAR (1: 1; Millipore; Cat # AB1000P), D1765 DAR (2: 1; Millipore, Billercia, CA; Cat # AB1000P) și D5084 DAR (3; Mill; Cat # AB1P). DAR D1000 și D1786 nu au fost analizate din cauza lipsei de anticorpi care recunosc atât receptorii reticulate cât și cei intracelulari. Trebuie menționat că loturile de anticorpi DAR utilizate în aceste experimente au fost achiziționate în 4-5; Loturile actuale ale acestor anticorpi (2005-06) prezintă diferite modele de bandaj care nu sunt modificate în țesuturi de la șoarecii knockout DAR (observații nepublicate). După incubația primară de anticorpi, membranele au fost spălate cu soluție TBS-T, incubate timp de 2009 min cu IgG anti-iepure conjugată HRP sau IgG anti-mouse (10: 60; Upstate Biotechnology, Lake Placid, NY), spălate cu TBS- T, clătit cu ddH2O, și cufundat în substratul de detectare a chimioluminiscenței (Amersham GE, Piscataway, NJ). După ce au fost dezvoltate blocaje, imaginile au fost capturate cu ajutorul versajului Versa Doc Imaging Software (Bio-Rad). Densitățile difuze ale benzilor de suprafață și intracelulare au fost determinate utilizând software-ul Quantity One (Bio-Rad). Valorile nivelurilor de proteine ​​de suprafață, intracelulare și totale (de suprafață + intracelulare) au fost normalizate la proteine ​​totale pe banda determinată folosind Ponceau S (Sigma-Aldrich) și analizate cu TotalLab (Non Linear Dynamics, Newcastle, Marea Britanie). Raportul suprafață / intracelular nu a necesitat normalizare, deoarece ambele valori sunt determinate pe aceeași bandă. Pentru a examina specificul anticorpului, au fost efectuate studii de preabsorbție pentru anticorpii DAR cu peptida utilizată pentru a genera fiecare anticorp. Anticorpul D1, D2 sau D3 DAR a fost combinat cu o concentrație în exces de 10 de peptidă în 500μl de TBS, amestecat pentru 4 ore la 4 ° C, diluat până la un volum final de 20ml, adăugat la membrană și incubat peste noapte la 4 ° C.

Analiza datelor

Datele au fost analizate utilizând SPSS cu ANOVA utilizând expunerea la medicamente (ser fiziologic vs. cocaină) și Ziua retragerii (WD1 vs. WD45) ca factori între subiecți, urmată de un test post hoc Tukey. Semnificația a fost stabilită la p <0.05.

REZULTATE

Analiza DAR cu BS3 test de reticulare

Scopul acestui studiu a fost de a analiza suprafața celulară și expresia totală a D1, D2 și D3 DAR în alicoturi de țesut NAc obținute după întreruperea auto-administrării cocainei (6 h / zi pentru 10 zile). Așa cum este descris în Metode, grupurile sunt proiectate WD1 sau WD45 pentru a indica numărul de zile petrecute în cuști acasă fără acces la cocaină înainte de analiza DAR. Țesutul NAc de la aceiași șobolani a fost utilizat anterior pentru a demonstra că formarea receptorilor AMPA lipsiți de GluR2 stă la baza expresiei poftei de cocaină indusă de cue incubată la șobolani expuși la cocaină pe WD45 (Conrad și colab., 2008). Pentru a evalua distribuția DAR, am folosit aceeași BS3 test de reticulare utilizat anterior pentru a studia distribuția receptorilor AMPA. BS3 este un agent de reticulare proteic impermeabil la membrană și, prin urmare, selectează legături de proteine ​​de suprafață celulare, formând agregate de masă moleculară mare. Proteinele intracelulare nu sunt modificate. Astfel, piscinele de suprafață și intracelulare ale unei proteine ​​particulare pot fi distinse prin electroforeza cu gel SDS-poliacrilamidă și prin blotarea Western (Boudreau și Wolf, 2005; Boudreau și colab., 2007; 2009; Conrad și colab., 2008; Nelson și colab., 2009; Ferrario și colab., 2010). În plus, pentru a cuantifica nivelurile de proteine ​​de suprafață și intracelulare, am utilizat suma nivelurilor de suprafață + intracelulare ca măsură a proteinei receptoare totale și a raportului suprafață / intracelular ca măsură a distribuției receptorilor.

Fig. 1 ilustrează metoda prin compararea țesutului reticulat (X) și nereticulat (Nere) probat pentru fiecare DAR. Benzile de suprafață sunt prezente numai după reticulare. Benzile intracelulare sunt diminuate în țesutul reticulat, în comparație cu o cantitate egală de țesut nereticulat, deoarece, în prima parte, porțiunea exprimată la suprafață a bazinului total de receptori este acum prezentă în banda de suprafață. În consecință, nivelurile totale de proteine ​​DAR pe benzile care nu sunt reticulate sunt aproximativ egale cu suma valorilor S și I pe benzile reticulate (vezi legenda din Fig. 1; aceeași echivalență a fost observată în toate celelalte experimente). Trebuie menționat că, deși BS3 oferă o măsură precisă a diferențelor relative în raporturile S / I între grupurile experimentale, nivelul absolut de S / I măsurat depinde de condițiile experimentale și de anticorp. De exemplu, ia în considerare două proteine, A și B, care sunt distribuite în mod similar între compartimentele S și I. Dacă anticorpul împotriva lui A își recunoaște forma reticulată mai puțin avidă decât forma nemodificată (intracelular), în timp ce anticorpul B recunoaște ambele forme la fel de bine, raportul S / I măsurat va fi mai mic pentru A decât B, chiar dacă proporția fiecărei proteine ​​pe suprafața este de fapt aceeași.

Fig. 1

Măsurarea expresiei de suprafață DAR folosind un test de reticulare proteic și demonstrarea imunospecificității prin preabsorbirea anticorpilor DAR cu peptide utilizate pentru creșterea fiecărui anticorp

Pentru DAR D1 și D3, am cuantificat o singură bandă intracelulară și o singură suprafață (Fig. 1a, c). Pentru D2 DAR, au fost detectate trei benzi intracelulare. În concordanță cu alte studii (de ex. Fishburn și colab., 1995; Kim și colab., 2008), am identificat aceste benzi ca monare (~ 55kDa), glicozilate (~ 75kDa) și dimerice (~ 100kDa) D2 DAR (Fig. 1b). De asemenea, a fost detectată o bandă de suprafață. Toate cele trei specii intracelulare au contribuit la bazinul DAR D2 DAR exprimat la suprafață, bazat pe intensitatea scăzută a tuturor celor trei benzi intracelulare din țesutul reticulat în raport cu controalele fără reticulare. Toate cele trei benzi intracelulare D2 DAR au fost însumate pentru a genera valoarea intracelulară utilizată pentru a determina nivelurile D2 DAR totale (suprafață + intracelular) și raportul D2 DAR suprafață / intracelular. O bandă slabă a fost de asemenea detectată la ~ 200kDa, dar imunoreactivitatea sa a fost prea mică pentru a fi cuantificată (Fig. 1b). Studiile de preabsorbție, efectuate cu peptide utilizate pentru a genera fiecare anticorp, au demonstrat imunospecificitatea tuturor benzilor cuantificate în experimentele noastre, inclusiv benzile de suprafață (Fig. 1d, e, f). Mai mult, modelele de bandaj observate au fost similare cu cele găsite în studiile anterioare de imunoblotare folosind aceiași anticorpi (de ex. Huang și colab., 1992 - D1 DAR; Boundy și colab., 1993a - D2 DAR; Boundy și colab., 1993b - D3 DAR), iar studiile imunohistochimice cu acești anticorpi au relevat distribuția anatomică așteptată pentru DAR D1 (Huang și colab., 1992) și DAR D2 (Boundy și colab., 1993a; Wang și Pickel, 2002; Paspalas și Goldman-Rakic, 2004; Pinto și Sesack, 2008).

D1 DAR

Pe WD45 nu s-au găsit diferențe semnificative între cocaina și grupurile saline. Cu toate acestea, efectele auto-administrării cocainei au fost evidente pe WD1. Analiza întregului NAc a indicat un raport D1 DAR suprafață / intracelular semnificativ mai mare în grupul WD1-Coc comparativ cu grupurile care au administrat soluție salină (Fig. 2a). Acest lucru a fost atribuit unei creșteri modeste a DAR D1 de suprafață combinată cu o scădere modestă a DAR D1 intracelulare (niciunul dintre aceste două ultime nu a fost semnificativ statistic), în absența vreunei modificări a nivelurilor DAR total D1 (suprafață + intracelular) (Fig. 2a). În cadrul nucleului NAc, nu s-a găsit niciun efect semnificativ pentru nicio măsură D1 DAR (Fig. 2b). Cu toate acestea, shell-ul NAc a afișat modificări similare cu cele observate în întregul NAc, dar puțin mai robuste (Fig. 2c). Raportul DAR suprafață / intracelular DAR a fost crescut în grupul WD1-Coc datorită creșterii semnificative a expresiei D1 DAR de suprafață. Nivelurile intracelulare au fost neschimbate, dar a existat o tendință spre creșterea nivelurilor totale D1 DAR. În rezumat, o porțiune mai mare de proteină D1 DAR a fost exprimată la suprafață în coaja NAc a șobolanilor WD1-Coc în comparație cu șobolanii WD1-Sal. Distribuția D1 DAR a revenit la starea de control după 1 zile de la retragerea din autoadministrarea cocainei.

Fig. 2

Expresia D1 DAR de suprafață a crescut în coaja NAc după 1 zi de la retragerea din autoadministrarea cocainei

D2 DAR

În întregul NAc, efectul major observat a fost scăderea expresiei D2 DAR la șobolani care au administrat auto-cocaină în comparație cu controalele saline (Fig. 3a). Acest lucru a fost cel mai pronunțat pe WD45, atunci când au fost observate scăderi în banda de suprafață, toate cele trei benzi intracelulare (~ 55, 75 și 100kDa) și în total D2 DAR niveluri comparativ cu controalele saline. Raportul DAR superficial / intracelular D2 DAR a fost ușor, dar semnificativ crescut în grupul WD45-Coc, datorită unei scăderi mai mari a DAR-urilor intracelulare decât DAR-urilor D2 de suprafață, indicând probabil că celulele compensează diminuarea expresiei D2 DAR prin distribuirea unei porțiuni mai mari de disponibile D2 DAR la suprafață. Este important să rețineți că raportul ridicat de suprafață / intracelular nu sugerează o transmisie DAR D2 DAR crescută în acest caz, deoarece nivelul absolut al DAR D2 exprimat la suprafață a fost redus. În grupul WD1-Coc, singurul efect semnificativ a fost o scădere a nivelurilor intracelulare ale monomerului D2 DAR (~ 55kDa), în comparație cu ambele grupuri WD45-Sal și WD1-Sal, deși alte câteva măsuri au avut de asemenea tendința de a scădea (Fig. 3a).

Fig. 3

Nivelurile intracelulare și de suprafață D2 DAR în NAc au scăzut după 45 zile de la retragerea din autoadministrarea cocainei

O scădere generală a expresiei D2 DAR a fost, de asemenea, evidentă în subregiunile core și shell ale NAc (Fig. 3b și 3c, respectiv), deși efectele tind să fie mai pronunțate în coajă. Astfel, nivelurile D2 DAR de suprafață au scăzut la șobolanii de cocaină doar pe WD45 în miez, dar pe WD1 și WD45 în coajă. DAR-urile totale D2 au scăzut semnificativ doar în coajă. Scăderi ale benzilor intracelulare D2 DAR au avut loc atât în ​​zilele de retragere atât în ​​miez, cât și în cochilie, deși au existat diferențe specifice de retragere și regiune în ceea ce privește banda intracelulară a prezentat un efect semnificativ statistic. În rezumat, nivelul D2 DAR de suprafață și proteine ​​intracelulare au fost reduse în NAc după administrarea de cocaină. Unele scăderi au fost deja evidente de WD1.

D3 DAR

Modificări semnificative ale distribuției D3 DAR nu au fost observate pe WD1 după administrarea de cocaină, ci dezvoltate de WD45. În cadrul întregii NAc, grupul WD45-Coc a avut un raport D3 DAR suprafață / intracelular mai mare decât toate celelalte grupuri, atribuibil combinației de o creștere modestă a nivelurilor suprafeței și o scădere modestă a nivelurilor intracelulare (niciun efect nu a fost semnificativ); nivelurile totale D3 DAR au fost neschimbate (Fig. 4a).

Fig. 4

Expresia D3 DAR de suprafață a fost crescută în NAc după 45 zile de la retragerea din autoadministrarea cocainei

Nucleul NAc a prezentat modificări similare, dar mai pronunțate. Astfel, grupul WD45-Coc a avut niveluri DAR de suprafață D3 mai ridicate în comparație cu toate celelalte grupuri, ceea ce a dus la un raport suprafață / intracelular mai mare (Fig. 4b). În coaja NAc, singura modificare semnificativă în raport cu controalele saline a fost o creștere a raportului D3 DAR suprafață / intracelular (Fig. 4c). Atât în ​​miez, cât și în coajă, nivelurile totale de proteine ​​D3 DAR au fost mai mari la WD45-Coc în comparație cu șobolani WD1-Coc (Fig. 4b, c). Din punct de vedere funcțional, cea mai importantă schimbare este, probabil, creșterea expresiei de suprafață D3 DAR în NAc pe WD45, efect care a fost cel mai evident în subregiunea principală.

DISCUŢIE

Am analizat nivelurile de suprafață și intracelulare D1, D2 și D3 DAR în NAc de șobolani pe WD1 sau WD45 după întreruperea autoadministrării cu cocaină cu acces extins. Deși rezultatele comportamentale nu sunt prezentate aici, am arătat anterior că șobolanii expuși la acest regim de cocaină prezintă incubare de pofta de cocaină indusă de cete pe WD45 (Conrad și colab., 2008). Mai mult, aceiași șobolani expuși la cocaină folosiți pentru obținerea țesutului NAc analizat aici au fost arătați anterior că prezintă niveluri crescute de GluR1 de suprafață celulară pe WD45, indicând formarea receptorilor AMPA lipsiți de GluR2 care însoțesc incubația poftei de cocaină indusă de cue (Conrad și colab., 2008). Rolul DAR-urilor în incubație nu a fost studiat anterior. Mai mult, studiul nostru este primul care măsoară DAR-urile exprimate la suprafață în orice model animal de dependență. Așa cum s-a descris mai jos, deși toate cele trei DAR studiate au arătat modificări dependente de timp după întreruperea autoadministrării cocainei, speculăm că scăderile dependente de timp în expresia D2 DAR de suprafață și creșterile expresiei D3 DAR în nucleul NAc sunt cel mai probabil să contribuie la incubarea căutării de cocaină indusă de ciment.

Pe lângă observarea modificărilor dependente de timp, am observat modificări DAR diferite în subregiuni de bază și coajă. Nucleul este implicat în reacția motorie la armatoarele condiționate, în timp ce coaja este mai implicată în procesarea informațiilor legate de efectele de consolidare ale psiostimulenților (Ito și colab., 2000; 2004; Rodd-Henricks și colab., 2002; Ikemoto, 2003; Fuchs și colab., 2004; Ikemoto și colab., 2005). În concordanță cu aceasta, miezul este o parte importantă a circuitelor neuronale care stă la baza incubării căutării de cocaină indusă de cue (Conrad și colab., 2008). Acest lucru sugerează că adaptările DAR în nucleu sunt mai probabil să fie legate de incubare. Cu toate acestea, trebuie avut în vedere faptul că miezul și cochilia nu pot fi luate în considerare în mod izolat, deoarece interacționează ca parte a buclelor anatomice în spirală care leagă regiunile ganglionilor corticali, limbici și bazali (Haber, 2003). Mai mult, aceste bucle se bazează pe mai multe emițătoare pe lângă DA, cum ar fi glutamatul. Reținerea interacțiunilor core-shell și rolul mai multor sisteme de emițător poate ajuta la explicarea unor discrepanțe aparente în literatura core-shell. De exemplu, studiile funcționale de inactivare implică miez, dar nu și coajă în reîncadrarea indusă de cocaină și indusă de ceteMcFarland și Kalivas, 2001; Fuchs și colab., 2004). Cu toate acestea, așa cum se va discuta mai detaliat mai jos, atât miezul cochiliu, cât și miezul medial (dar nu și miezul lateral) sunt implicate în reglarea DAR a reîncărcării cu cocaină (Anderson și colab., 2003; 2008; Bachtell și colab., 2005; Schmidt și Pierce, 2006; Schmidt și colab., 2006).

Am limitat sfera revistei noastre de literatură, concentrându-ne pe adaptările DAR după administrarea de cocaină, mai degrabă decât pe tratamentul non-contingent al cocainei (pentru recenzii din ultimul subiect, a se vedea Pierce și Kalivas, 1997; Anderson și Pierce, 2005). De asemenea, ne-am concentrat asupra studiilor care utilizează injecția intra-NAc de droguri selective ale subtipului DAR, mai degrabă decât administrarea sistemică a medicamentelor (de ex. Self și colab., 1996; De Vries și colab., 1999). Cu toate acestea, este interesant de remarcat faptul că au fost găsite schimbări în funcție de timp în răspunsul la agoniștii sistemici DA după întreruperea autoadministrării cocainei (De Vries și colab., 2002; Edwards și colab., 2007). Aceste modificări ar putea fi legate de modificările expresiei DAR raportate aici sau ar putea reflecta modificările funcției DAR în alte regiuni ale creierului.

Expresia D1 DAR de suprafață crește tranzitoriu în coaja NAc după întreruperea administrării de cocaină

După auto-administrare de cocaină, expresia D1 DAR a fost crescută în coaja NAc pe WD1, dar normalizată de WD45, în timp ce nu s-au observat modificări în miez, ceea ce indică o creștere tranzitorie limitată la coajă. Rezultate similare au fost obținute în studiile anterioare folosind autoradiografia receptorilor. Ben-Shahar și colab. (2007) a găsit o creștere a densității D1 DAR în coaja de NAc a șobolanilor 20 min (dar nu 14 sau 60 zile) după întreruperea administrării extinse (6 oră / zi) de auto-administrare a cocainei, în timp ce nu s-au observat modificări în miez sau după un acces scurt de auto cocaină. -administrare (2 hr / zi). Nader și colab. (2002) a observat o creștere mică a densității D1 DAR în coajă, dar nu a miezului de maimuțe rhesus ucise după ultimele ședințe de auto-administrare de cocaină 100. Maimuțele au evaluat 30 zile după întreruperea aceluiași regim au arătat creșterea densității D1 DAR în NAc rostral și atât în ​​miez, cât și în cochilie la niveluri mai caudale, dar densitatea D1 DAR s-a normalizat cu 90 zile (Beveridge și colab., 2009). Toate aceste rezultate, la fel ca ale noastre, indică o creștere tranzitorie a nivelului D1 DAR, în special în coajă, după întreruperea auto-administrării cocainei. Cu toate acestea, un studiu anterior realizat de acest grup a indicat o scădere a densității D1 DAR în NAc (cea mai robustă în coajă) a maimuțelor rhesus care au avut auto-administrată cocaină pentru o perioadă de timp mult mai lungă (18 luni; Moore și colab., 1998a). Scăderea legării D1 DAR în NAc a fost, de asemenea, găsită 18 hr după întreruperea unui regim de acces extins la șobolani, deși aportul total de cocaină în acest studiu a fost mai mare decât în ​​studiile discutate mai sus (De Montis și colab., 1998). Aceste rezultate indică faptul că adaptările D1 DAR depind de multe aspecte ale expunerii la cocaină. O altă considerație este că autoradiografia receptorilor măsoară totalitatea receptorilor celulari, în timp ce experimentele noastre de reticulare proteică pot distinge între receptorii de suprafață și intracelulari. Interesant, un studiu de imunoblotare a găsit o tendință către creșterea nivelului D1 DAR în NAc a consumatorilor de cocaină umană (Worsley și colab., 2000).

Creșterea tranzitorie a expresiei de suprafață D1 DAR pe care am observat-o în coaja NAc este importantă pentru incubarea poftei de cocaină indusă de cue? Acest lucru este dificil de evaluat, deoarece niciun studiu nu a testat efectul injecției intra-NAc de agoniști sau antagoniști DAR D1 DAR asupra cocainei induse cu cete care urmărește retragerea din cușcă acasă (sau reintegrarea indusă de cocaină după antrenamentul de extincție). Cu toate acestea, receptorii D1 din NAc medial (cochilie și miez medial) sunt implicați în reintegrarea inițiată de cocaină a căutării cocainei după extincție, aparent printr-un mecanism care necesită activarea cooperativă a DAR D1 și D2 (Anderson și colab., 2003; 2008; Bachtell și colab., 2005; Schmidt și Pierce, 2006; Schmidt și colab., 2006). Împreună cu rezultatele noastre, acest lucru ar putea sugera că neuronii din coaja NAc sunt mai sensibili la cocaina mediată de D1 DAR care caută în retragere timpurie din cauza reglării tranzitorii a D1R. Cu toate acestea, trebuie să se utilizeze prudență la extrapolarea de la reîncadrarea la studiile de incubare, deoarece antrenamentul de extincție și retragerea în cușcă sunt asociate cu neuroadaptări diferite în NAc (Sutton și colab., 2003; Ghasemzadeh și colab., 2009; Wolf și Ferrario, 2010). Este important de remarcat faptul că D1 DAR-urile în amigdala bazolaterală și cortexul prefrontal sunt, de asemenea, importante pentru reintroducerea indusă de ceca pentru căutarea cocainei (de ex. Ciccocioppo și colab., 2001; Alleweireldt și colab., 2006; Berglind și colab., 2006).

La nivel celular, atât DAR-urile presinaptice cât și cele postsinaptice pot modula excitabilitatea neuronilor spinoși medii, tipul celular predominant și neuronul de ieșire al NAc (Nicola și colab., 2000; O'Donnell, 2003). Se cunoaște că administrarea repetată de contingent non-contingent îmbunătățește unele efecte ale activării D1 DAR în NAc. Astfel, la o zi până la o lună după întreruperea tratamentului cu cocaină, s-a observat capacitatea sporită a agoniștilor D1 DAR de a inhiba activitatea neuronilor spinoși medieni (condusă de glutamat ionitoforetic) în întregul NAc (Henry și White, 1991; 1995). Cu toate acestea, expresia crescută a suprafeței D1 DAR raportată aici este puțin probabil să explice aceste rezultate anterioare, deoarece este limitată la coajă și a fost demonstrată doar pe WD1. La o zi după o provocare de cocaină administrată 10-14 zile după întreruperea injecțiilor repetate de cocaină, Beurrier și Maleka (2002) a observat o îmbunătățire a inhibării mediate de DA a răspunsurilor sinaptice excitative în neuronii spinici medii NAc, care aparent a fost mediată de DAR-uri presinaptice asemănătoare D1 pe terminalele nervului glutamat. Cu toate acestea, posibilele efecte ale injecției provocatoare (de exemplu, vezi Boudreau și colab., 2007 și Kourrich și colab., 2007), combinate cu diferențele de specii și lipsa de înregistrări în miez, fac dificilă compararea descoperirilor cu ale noastre. De asemenea, trebuie menționat că agoniștii și antagoniștii DAR folosiți de Henry și White (1991); 1995) și Beurrier și Malenka (2002) nu a făcut distincția între DAR D1 și D5.

Nivelurile D2 DAR scad în NAc după întreruperea administrării de cocaină

Efectul principal observat în studiul nostru a fost o scădere a proteinei D2 DAR atât în ​​miezul NAc, cât și în coajă, după întreruperea autoadministrării cocainei, în raport cu controalele saline. Acest lucru a fost mai pronunțat în cochilie, unde benzile intracelulare, de suprafață și total au fost reduse atât pentru WD1 cât și pentru WD45. În nucleu, expresia de suprafață D2 DAR a fost scăzută doar pe WD45, iar nivelul total D2 DAR nu a scăzut semnificativ. Mai multe alte studii au descoperit în mod similar, scăderea expresiei D2 DAR după întreruperea administrării de cocaină. La maimuțele rhesus cu experiență extinsă de autoadministrare a cocainei, densitatea D2 DAR, măsurată cu autoradiografia receptorilor, a fost scăzută în multe regiuni striatale, inclusiv nucleul NAc și cochilia, când țesutul a fost obținut imediat după ultima sesiuneMoore și colab., 1998b; Nader și colab., 2002). Utilizând PET, acest efect în ganglionii bazali a fost detectat în săptămâna 1 de la inițierea autoadministrării cocainei (Nader și colab., 2006). Rata la care nivelurile de D2 DAR se recuperează în timpul retragerii poate depinde de aportul total de cocaină. Într-un studiu de autoradiografie, nivelurile de D2 DAR din NAc s-au recuperat pentru a controla valorile după 30 sau 90 zile de retragere din sesiunile 100 de auto-administrare a cocainei (Beveridge și colab., 2009). Cu toate acestea, într-un studiu PET asupra maimuțelor cu expunere mai lungă (anul 1) și, prin urmare, aportul de cocaină total mai mare, 3 al maimuțelor 5 a arătat recuperarea nivelului D2 DAR după 90 zile, în timp ce maimuțele 2 nu s-au redresat nici după 12 luni (Nader și colab., 2006). În general, aceste rezultate corespund bine cu concluziile noastre privind scăderea nivelului D2 DAR pe toată durata retragerii.

Studiile PET asupra dependenților de cocaină umană au descoperit, de asemenea, niveluri reduse de D2 DAR în multe regiuni striatale, inclusiv striatum ventral, care au fost evidente în retragerea precoce, precum și după 3-4 luni de detoxifiere (Volkow și colab., 1990, 1993, 1997). Cu toate acestea, semnificația pentru comportament nu este clară, deoarece disponibilitatea D2 DAR nu s-a corelat cu efectele subiective pozitive ale cocainei sau cu decizia de a lua mai multă cocaină după o doză primară (Martinez și colab., 2004). Este important de menționat că, deși pofta de cocaină indusă de cue indică o creștere dependentă de timp în timpul retragerii („incubație”), aceasta nu apare pentru căutarea cocainei cu cocaină (Lu și colab., 2004a). Prin urmare, rezultatele Martinez și colab. (2004) lăsați deschisă posibilitatea ca disponibilitatea D2 DAR să se coreleze cu căutarea de cocaină indusă de cue, care se concentrează pe modelul de incubație studiat aici. Disponibilitatea scăzută a D2 DAR la consumatorii de cocaină umană se corelează cu scăderea metabolismului cortical frontal (Volkow și colab., 1993). Alături de alte modificări, acest lucru poate contribui la pierderea controlului care apare atunci când dependenții sunt expuși la droguri sau semne de droguri, și la o mai mare saliență a drogurilor în comparație cu recompensele care nu sunt medicamente (Volkow și colab., 2007; Volkow și colab., 2009). Trebuie menționat că scăderea nivelului de D2 DAR într-un studiu PET poate indica o eliberare crescută de DA în loc de scăderea nivelului DAR D2 DAR, dar rezultatele recente argumentează această explicație în cazul pacienților dependenți de cocaină (Martinez și colab., 2009). Mai mult, un studiu postmortem asupra utilizatorilor de cocaină umană a constatat o tendință către scăderea nivelului de D2 DAR în NAc folosind imunoblotarea (Worsley și colab., 2000).

Studiile efectuate în dependenții de cocaină umană nu pot determina dacă scăderea disponibilității D2 DAR este o trăsătură predispozantă sau un rezultat al expunerii la cocaină, dar alte rezultate indică faptul că ambele sunt adevărate. Pe de o parte, experimentele la oameni care nu consumă droguri au găsit o corelație inversă între disponibilitatea D2 DAR și rapoartele „gustului medicamentului” atunci când se administrează metilfenidat (Volkow și colab., 1999; 2002). Aceste descoperiri sugerează că disponibilitatea redusă a DAR D2 DAR poate crește vulnerabilitatea la dependență. O concluzie similară este susținută de studiile efectuate pe maimuțele rhesus. În maimuțele găzduite social, obținerea dominației sociale crește disponibilitatea D2 DAR în striatum și acest lucru este asociat cu o sensibilitate mai scăzută la efectele de consolidare ale cocainei în comparație cu maimuțele subordonate (Morgan și colab., 2002). Starea socială este, de asemenea, corelată cu disponibilitatea Striatal D2 DAR la voluntarii umani fără droguri (Martinez și colab., 2010). Pe de altă parte, atât studiile PET, cât și autoradiografia receptorilor arată că autoadministrarea pe termen lung a cocainei scade disponibilitatea receptorului D2 DAR striatal în maimuțele găzduite individual, după cum sa discutat mai sus (Moore și colab., 1998b; Nader și colab., 2002; Nader și colab., 2006). Auto-administrarea cronică de cocaină pare, de asemenea, să scadă disponibilitatea D2 DAR în maimuțele dominante social adăpostite (Czoty și colab., 2004). Astfel, după auto-administrarea pe termen lung a cocainei, nu au mai existat diferențe semnificative în disponibilitatea receptorilor D2 sau efectele de consolidare ale cocainei între maimuțele dominante și cele subordonate (Czoty și colab., 2004). Cu toate acestea, nivelurile crescute de D2 DAR s-au remergut la maimuțele dominante în timpul abstinenței și acest lucru a fost corelat cu o latență mai lungă în reacția la noutate, o trăsătură predictivă a sensibilității scăzute la efectele de întărire a cocainei (Czoty și colab., 2010).

La fel ca la oameni și maimuțe, studiile la șobolani indică faptul că disponibilitatea DAR D2 DAR este un factor de risc pentru vulnerabilitatea la cocaină. Astfel, studiile PET la șobolani cu impulsivitate ridicată (o trăsătură asociată cu creșterea auto-administrării cocainei) arată disponibilitatea redusă a D2 / D3 DAR în striatul ventral (Dalley și colab., 2007). Nivelurile D2 DAR din NAc sunt, de asemenea, reduse la șobolani care arată un răspuns locomotor ridicat la noutate, o altă trăsătură asociată vulnerabilității dependenței (Hooks și colab., 1994). Rezultatele noastre la șobolani indică faptul că nivelul scăzut de D2 DAR în NAc poate fi, de asemenea, o consecință a expunerii repetate la cocaină, în concordanță cu studiile efectuate la maimuțe și la oameni (mai sus). Cu toate acestea, două studii autoradiografice ale receptorilor la șobolani au găsit rezultate care diferă de ale noastre. Ben-Shahar și colab. (2007) nu a observat scăderea nivelului D2 DAR în NAc după retragere (20 min, 14 zile din 60 zile) dintr-un regim de autoadministrare cu cocaină cu acces extins similar cu al nostru (6 hr / zi), deși au fost observate scăderi în coaja NAc după un regim de acces limitat (2 hr / zi) și 14 zile de retragere (Ben-Shahar și colab., 2007). Stéfanski și colab. (2007) nu a găsit modificări în nivelurile D2 DAR în nucleu sau coajă 24 h după întreruperea autoadministrării cu acces limitat a cocainei (2 h / zi), deși nivelurile DAR D2 DAR au scăzut în controalele cu cocaină jugată. După cum s-a menționat mai sus, autoradiografia receptorilor măsoară receptorii celulari totali, în timp ce studiile de reticulare PET și proteice măsoară receptorii de suprafață a celulelor.

În general, studiile privind relația dintre nivelurile D2 DAR și auto-administrarea de cocaină susțin un model în care DAR D2 limitează, în mod normal, auto-administrarea cocainei. Prin urmare, sugerăm că nivelul scăzut de D2 DAR observat în experimentele noastre poate contribui la cocaina indusă de cec care caută retragerea cocainei. În special, faptul că expresia de suprafață D2 DAR în nucleul NAc a fost redusă pe WD45, dar nu și WD1, combinată cu un rol cheie pentru nucleul NAc în căutarea de cocaină indusă de cue, sugerează că reglarea DAR D2 DAR dependentă de timp în nucleul NAc poate contribuie la intensificarea în timp a căutării de cocaină indusă de ciment. Acest lucru ar putea prezice că perfuzia intra-NAc a unui agonist D2 în timpul retragerii ar reduce căutarea de cocaină indusă de cue. Din păcate, niciun studiu nu a examinat efectele medicamentelor intra-NAc D2 DAR în modelul de incubație. Pe de altă parte, studiile privind reîncadrarea primă de cocaină indică faptul că D1 și D2 DAR-urile din cochilie și miezul medial lucrează în mod cooperant pentru a promova căutarea cocainei (Anderson și colab., 2003; Bachtell și colab., 2005; Schmidt și Pierce, 2006; Schmidt și colab., 2006). Pe baza acestor constatări, expresia DAR D2 DAR observată în experimentele noastre ar putea fi prevăzută că va reduce căutarea cu cocaină, adică produce un efect opus intensificării dependente de retragere care este observată de fapt. Discrepanța poate reflecta problemele introduse prin generalizarea de la reîncadrarea inițiată de cocaină după antrenamentul de extincție până la cocaina indusă de cete care caută după retragere.

O creștere dependentă de timp a expresiei de suprafață D3 DAR apare în miezul NAc după întreruperea administrării de cocaină

Studiile asupra medicamentelor care preferă D3 DAR în paradigmele de auto-administrare și restabilire a cocainei sugerează că antagoniștii D3 DAR pot fi utili în tratarea dependenței de cocaină și, în special, în reducerea reactivității la indicii asociate cu cocaina (Heidbreder și colab., 2005; 2008; Le Foll și colab., 2005; Xi și Gardner, 2007). Aceste rezultate implică faptul că activarea D3 DAR de către DA endogenă poate fi implicată în medierea căutării cu cocaină indusă de cue. Rezultatele noastre arată că expresia suprafeței D3 DAR în miezul NAc este neschimbată pe WD1 de la autoadministrarea cu cocaină cu acces extins, dar a crescut pe WD45 în asociere cu incubarea poftei de cocaină. D3 DAR expresia suprafeței nu a crescut semnificativ în coajă, deși a existat o creștere mică, dar semnificativă a raportului suprafață / intracelular. Având în vedere rolul transmisiei D3 DAR în răspunsul la indicii asociate cu cocaină și importanța miezului pentru căutarea de cocaină indusă de cue, este tentant să speculăm că o expresie crescută a suprafeței D3 DAR în nucleul NAc a contribuit la incubarea cocainei induse de cocaina. pofta care se observă pe WD45. Cu toate acestea, site-ul neural la care antagoniștii D3 DAR acționează pentru a reduce consumul de cocaină nu a fost stabilit. În mod specific, niciun studiu nu a examinat efectul injecției intra-NAc de D3 DAR care preferă medicamentele asupra căutării de cocaină indusă de cue. Într-un alt model, Schmidt și colab. (2006) a constatat că injecția de agonist PD 3 care preferă D128,907 în miez sau în coajă nu a produs restabilirea cocainei care urmărește antrenamentul de extincție.

Rezultatele noastre sunt în general în concordanță cu studiile de autoradiografie ale receptorilor care au măsurat nivelurile totale de D3 DAR în NAc după expunerea la cocaină. Staley and Mash (1996) a raportat că legarea D3 DAR a fost mai mare în NAc a victimelor supradozajului cu cocaină în comparație cu controalele adaptate vârstei. După expunerea la cocaină într-o paradigmă de preferință la un loc condiționat și trei zile de retragere, șoarecii au prezentat o legare crescută a D3 DAR în miezul și cochilii NAc (Le Foll și colab., 2002). Neisewander și colab. (2004) a măsurat legarea D3 DAR la șobolani cu experiență extinsă de autoadministrare a cocainei care au fost testate pentru reîncadrarea amorsată cu cocaină după diferite perioade de retragere și apoi ucise 24 h mai târziu. Legarea D3 DAR în NAc a fost nemodificată pe WD1, dar a crescut după o perioadă mai lungă de timp (WD31-32), în concordanță cu observația noastră privind o creștere dependentă de timp. Mai mult, un tratament medicamentos în timpul retragerii care a redus căutarea cocainei a atenuat, de asemenea, creșterea legăturii D3 DAR, ceea ce sugerează că reglarea D3 DAR este funcțional legată de căutarea cocainei. Trebuie menționat că D3 DAR crește în Neisewander și colab. (2004) au fost semnificative în nucleu, în timp ce numai tendințele au fost observate în coajă, dar subregiunile au fost analizate într-o porțiune rostrală a NAc, unde miezul și cochilia sunt mai puțin distincte. Analiza noastră a fost realizată pe miez și coajă din porțiuni rostrale și caudale ale NAc.

Schimbări contrastante în DAR D1, D2 și D3 după auto-administrarea de cocaină

Diferențe importante în trafic și sortare intracelulară a diferitelor subtipuri DAR pot ajuta la explicarea observației noastre că nivelurile DAR D2 DAR sunt reduse pe WD45 după administrarea de cocaină, în timp ce nivelurile D1 DAR sunt neschimbate. După expunerea acută la un agonist DA, toate DAR-urile se interiorizează, dar D1 DAR-urile se reciclează rapid la suprafață, în timp ce D2 DAR-urile sunt vizate pentru degradare (Bartlett și colab., 2005). Dacă se întâmplă același lucru după expunerea prelungită la niveluri ridicate de DA în timpul autoadministrării cocainei, ar putea ajuta la explicarea rezultatelor unei creșteri tranzitorii a expresiei D1 DAR, dar a unei scăderi mai persistente a expresiei D2 DAR. Acumularea DAR D3 poate fi legată de interiorizarea mai puțin indusă de agoniști în comparație cu DAR D2 (Kim și colab., 2001). Atenție este necesară, desigur, la extrapolarea din răspunsurile la traficul de DAR în sistemele de expresie după un tratament agonist pe termen scurt la răspunsurile acestora la neuronii adulți, după tratamentul și retragerea pe termen lung a cocainei.

concluzii

Am efectuat primul studiu privind expresia suprafeței DAR după retragerea din expunerea repetată la cocaină, folosind o paradigmă de autoadministrare a cocainei care duce la incubarea poftei de cocaină. D1 DAR expresia suprafeței a crescut în coaja NAc pe WD1, dar normalizată de WD45. Nivelurile intracelulare de D2 DAR au scăzut în nucleul NAc și în cochilie la ambele timpi de retragere. Cu toate acestea, în timp ce expresia de suprafață D2 DAR a fost, de asemenea, scăzută în coajă la ambele timpi de retragere, miezul a arătat o scădere a expresiei D2 DAR de suprafață pe WD45, dar nu și pe WD1. Modificările induse de cocaină în suprafața D3 DAR și expresia totală în miez au fost, de asemenea, dependente de timp; ambele măsuri au fost crescute pe WD45, dar nu și pe WD1. Implicațiile funcționale ale acestor schimbări sunt complexe de prevăzut. Cu toate acestea, pe baza literaturii discutate mai sus, incluzând rezultatele care demonstrează un rol mai important pentru nucleu decât cochilie în căutarea de cocaină indusă de cue, sugerăm că scăderea dependentă de timp a suprafeței celulare D2 DAR și creșterea suprafeței celulare D3 DAR în NAc miezul poate contribui la incubarea căutării de cocaină indusă de ciment. Cu toate acestea, aceste efecte sunt susceptibile de a fi modulatoare, în funcție de rolul „mediator” al receptorilor AMPA lipsiți de NAc GluR2 pentru expresia poftei de cocaină indusă de cue (Conrad și colab., 2008).

Mulţumiri

Această lucrare a fost susținută de DA009621, DA00453 și un NARSAD Distinguished Investigator Award pentru MEW, DA020654 to MM și predoctoral National Research Award Award DA021488 pentru KLC

ABREVIERI

AMPA
α-amino-3-hidroxi-5-metilizoxazol-4-propionat
BS3
bis (sulfosuccinimidil) suberat
DAR
Receptorul dopamină
Coc
Cocaină
GPCR
Receptor cuplat cu proteina G
NAc
Nucleus accumbens
ANIMAL DE COMPANIE
topografia cu emisii de pozitroni
RT
temperatura camerei
Sal
Ser fiziologic
SDS
Dodecil sulfat de sodiu
TBS
Soluție salină tamponată cu Tris (TBS)
TBS-T
TBS-Tween-20
WD1
Ziua de retragere 1
WD45
Ziua de retragere 45

Note de subsol

Declinarea responsabilității editorului: Acesta este un fișier PDF al unui manuscris needitat care a fost acceptat pentru publicare. Ca serviciu pentru clienții noștri oferim această versiune timpurie a manuscrisului. Manuscrisul va fi supus copierii, tipăririi și revizuirii probelor rezultate înainte de a fi publicat în forma sa finală. Rețineți că în timpul procesului de producție pot fi descoperite erori care ar putea afecta conținutul și toate denunțările legale care se referă la jurnal.

REFERINȚE

  • Alleweireldt AT, Hobbs RJ, Taylor AR, Neisewander JL. Efectele SCH-23390 perfuzate în amigdala sau cortexul adiacent și ganglionii bazali asupra căutării cocainei și autoadministrării la șobolani. Neuropsychopharmacology. 2006;31: 363-374. [PubMed]
  • Anderson SM, Bari AA, Pierce RC. Administrarea antagonistului de receptor dopamină de tip D1 SCH-23390 în nucleul medial accumbens shell atenuează reintegrarea indusă de cocaină a comportamentului de căutare a medicamentului la șobolani. Psihofarmacologie (Berl) 2003;168: 132-138. [PubMed]
  • Anderson SM, Famous KR, Sadri-Vakili G, Kumaresan V, Schmidt HD, Bass CE, Terwilliger EF, Cha JH, Pierce RC. CaMKII: o punte biochimică care leagă sistemele accumbens de dopamină și glutamat în căutarea cocainei. Nat Neurosci. 2008;11: 344-353. [PubMed]
  • Anderson SM, Pierce RC. Modificări induse de cocaină în semnalizarea receptorilor dopaminei: implicații pentru întărire și restabilire. Farmacol și Ther. 2005;106: 389-403. [PubMed]
  • Bachtell RK, Whisler K, Karanian D, Self DW. Efectele administrării în coajă a acumbenului intra-nucleu a agoniștilor și antagoniștilor dopaminei asupra comportamentelor de luare a cocainei și a cocainei în șobolan. Psihofarmacologie (Berl) 2005;183: 41-53. [PubMed]
  • Bartlett SE, Enquist J, Hopf FW, Lee JH, Gladher F, Kharazia V, Waldhoer M, Mailliard WS, Armstrong R, Bonci A, Whistler JL. Sensibilitatea la dopamina este reglată prin sortarea țintită a receptorilor D2. Proc Natl Acad Sci SUA. 2005;102: 11521-11526. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Ben-Shahar O, Keeley P, Cook M, Brake W, Joyce M, Nyffeler M, Heston R, Ettenberg A. Modificări ale nivelului receptorilor D1, D2 sau NMDA în timpul retragerii de la accesul zilnic scurt sau extins la cocaina IV. Brain Res. 2007;1131: 220-228. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Berglind WJ, Cazul JM, MP Parker, Fuchs RA, a se vedea RE. Antagonismul receptorilor Dopamine D1 sau D2 din amigdala bazolaterală modifică în mod diferit achiziția asociațiilor cu cocaină necesară pentru reintegrarea indusă de cocaina care dorește cocaina. Neuroscience. 2006;137: 699-706. [PubMed]
  • Beurrier C, Malenka RC. Inhibarea îmbunătățită a transmiterii sinaptice de dopamină în nucleul obișnuit în timpul sensibilizării comportamentale la cocaină. J Neurosci. 2002;22: 5817-5822. [PubMed]
  • Beveridge TJ, Smith HR, Nader MA, Porrino LJ. Abinerea de la administrarea cronică a cocainei modifică sistemele de dopamină striatică la maimuțele rhesus. Neuropsychopharmacology. 2009;34: 1162-1171. [PubMed]
  • Boudreau AC, Ferrario CR, Glucksman MJ, Wolf ME. Modificări ale căii de semnalizare și substraturi de protein kinază A noi legate de sensibilizarea comportamentală la cocaină. J Neurochem. 2009;110: 363-377. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Boudreau AC, Reimers JM, Milovanovic M, Wolf ME. Receptorii receptorului AMPA la nivelul nucleului accumbens de șobolan cresc în timpul retragerii cocainei, dar se internalizează după provocarea cu cocaină în asociere cu activarea modificată a protein kinazelor activate de mitogen. J Neurosci. 2007;27: 10621-10635. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Boudreau AC, Wolf ME. Sensibilizarea comportamentală față de cocaină este asociată cu creșterea expresiei suprafeței receptorului AMPA în nucleul accumbens. J Neurosci. 2005;25: 9144-9151. [PubMed]
  • Boundy VA, Luedtke RR, Artymyshyn RP, Filtz TM, Molinoff PB. Dezvoltarea anticorpilor policlinici anti-D2 receptor dopamină folosind peptide specifice secvenței. Mol Pharmacol. 1993a;43: 666-676. [PubMed]
  • Boundy VA, Luedtke RR, Gallitano AL, Smith JE, Filtz TM, Kallen RG, Molinoff PB. Exprimarea și caracterizarea receptorului de dopamină D3 de șobolan: proprietăți farmacologice și dezvoltarea anticorpilor. J Pharmacol Exp Acolo. 1993b;264: 1002-1011. [PubMed]
  • Bulenger S, Marullo S, Bouvier M. Rolul emergent al homo- și heterodimerizării în biosinteza și maturizarea receptorului cuplat cu proteina G. Trends Pharmacol Sci. 2005;26: 131-137. [PubMed]
  • Ciccocioppo R, Sanna PP, Weiss F. Stimulent predictiv pentru cocaină induce un comportament care caută medicamente și activarea neurală în regiunile cerebrale limbice după mai multe luni de abstinență: inversarea de antagoniști D (1). Proc Natl Acad Sci SUA. 2001;98: 1976-1981. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Conrad KL, Tseng KY, Uejima JL, Reimers JM, Heng LJ, Shaham Y, Marinelli M, Wolf ME. Formarea acumbens receptorii AMPA lipsiți de GluR2 mediază incubarea poftei de cocaină. Natura. 2008;454: 118-121. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Czoty PW, Gage HD, Nader MA. Diferențele în disponibilitatea receptorilor de dopamină D2 și reacția la noutatea la maimuțele masculine adăpostite social în timpul abstinenței de la cocaină. Psihofarmacol Epub. 2010 Jan 13;
  • Czoty PW, Morgan D, Shannon EE, Gage HD, Nader MA. Caracterizarea funcției receptorilor de dopamină D1 și D2 în maimuțele cynomolgus adăpostite social, care administrează cocaină. Psihofarmacologie (Berl) 2004;174: 381-388. [PubMed]
  • Dalley JW, Fryer TD, Brichard L, Robinson ES, Theobald DE, Laane K, Pena Y, Murphy ER, Shah Y, Probst K, Abakumova I, Aigbirhio FI, Richards HK, Hong Y, Baron JC, Everitt BJ, Robbins TW . Receptorii D2 / 3 Nucleus accumbens prezic impulsivitatea trăsăturii și întărirea cocainei. Știință. 2007;315: 1267-1270. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • David C, Fishburn CS, Monsma FJ, Jr., Sibley DR, Fuchs S. Sinteza și procesarea receptorilor de dopamină D2. Biochem. 1993;32: 8179-8183. [PubMed]
  • De Montis G, Co C, Dworkin SI, Smith JE. Modificări ale complexului receptorilor dopaminei D1 la șobolani care administrează cocaină. Eur J Pharmacol. 1998;362: 9-15. [PubMed]
  • De Vries TJ, Schoffelmeer AN, Binnekade R, Raaso H, Vanderschuren LJ. Recidiva la comportamentul de căutare a cocainei și a heroinei mediat de receptorii dopaminei D2 depinde de timp și este asociat cu sensibilizarea comportamentală. Neuropsychopharmacology. 2002;26: 18-26. [PubMed]
  • De Vries TJ, Schoffelmeer AN, Binnekade R, Vanderschuren LJ. Mecanismele dopaminergice care mediază stimulentul de a căuta cocaină și heroină în urma retragerii pe termen lung a administrării de droguri IV. Psihofarmacologie (Berl) 1999;143: 254-260. [PubMed]
  • Edwards S, Whisler KN, Fuller DC, Orsulak PJ, Self DW. Modificări legate de dependență în răspunsurile comportamentale ale receptorului dopaminei D1 și D2 în urma autoadministrării cronice a cocainei. Neuropsychopharmacology. 2007;32: 354-366. [PubMed]
  • Ferrario CR, Li X, Wang X, Reimers JM, Uejima JL, Wolf ME. Rolul redistribuirii receptorilor de glutamat în sensibilizarea locomotorie la cocaină. Neuropsychopharmacology. 2010;35: 818-833. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Fiorentini C, Busi C, Gorruso E, Gotti C, Spano P, Missale C. Reglarea reciprocă a dopaminei D1 și a funcției receptorului D3 și traficul prin heterodimerizare. Mol Pharmacol. 2008;74: 59-69. [PubMed]
  • Fiorentini C, Gardoni F, Spano P, Di Luca M, Missale C. Reglarea traficului de receptori dopamina D1 și desensibilizarea prin oligomerizare cu receptori glutamat N-metil-D-aspartat. J Biol Chem. 2003;278: 20196-20202. [PubMed]
  • Fishburn CS, Elazar Z, Fuchs S. Glicozilarea diferențială și traficul intracelular pentru izoformele lungi și scurte ale receptorului dopaminic D2. J Biol Chem. 1995;270: 29819-29824. [PubMed]
  • RB gratuit, Hazelwood LA, Cabrera DM, Spalding HN, Namkung Y, Rankin ML, Sibley DR. Expresia receptorilor dopaminei D1 și D2 este reglată prin interacțiunea directă cu calnexina proteinei chaperone. J Biol Chem. 2007;282: 21285-21300. [PubMed]
  • Fuchs RA, Evans KA, Parker MC, vezi RE. Implicarea diferențială a subregiunilor nucleului și a cochiliei nucleului accumbens în reintroducerea condiționată indusă de indiciul de cocaină la șobolani. Psihofarmacologie (Berl) 2004;176: 459-465. [PubMed]
  • Gawin FH, Kleber HD. Abstinență simptomatologie și diagnostic psihiatric la consumatorii de cocaină. Observații clinice. Arch Gen Psychiatry. 1986;43: 107-113. [PubMed]
  • George SR, O'Dowd BF, Lee SP. Oligomerizarea receptorului cuplat cu proteina G și potențialul său de descoperire a medicamentelor. Nat Rev Drug Discov. 2002;1: 808-820. [PubMed]
  • Ghasemzadeh MB, Vasudevan P, Mueller C, Seubert C, Mantsch JR. Modificări specifice regiunii în expresia receptorului de glutamat și distribuția subcelulară după extincția auto-administrării cocainei. Brain Res. 2009;1267: 89-102.
  • Ginés S, Hillion J, Torvinen M, Le Crom S, Casado V, Canela EI, Rondin S, Lew JY, Watson S, Zoli M, Agnati LF, Verniera P, Lluis C, Ferre S, Fuxe K, Franco R. Dopamine Receptorii D1 și adenozina A1 formează complexe heteromerice care interacționează funcțional. Proc Natl Acad Sci SUA. 2000;97: 8606-8611. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Grimm JW, Hope BT, Wise RA, Shaham Y. Neuroadaptarea. Incubarea poftei de cocaina dupa retragere. Natura. 2001;412: 141-142. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Haber SN. Ganglia bazală primată: rețele paralele și integrative. J Chem Neuroanat. 2003;26: 317-330. [PubMed]
  • Heidbreder C. Antagonism selectiv la receptorii dopaminei D3 ca țintă pentru farmacoterapia cu dependență de droguri: o revizuire a dovezilor preclinice. SNC Neurol Disord Targets pentru consumul de stupefiante. 2008;7: 410-421. [PubMed]
  • Heidbreder CA, Gardner EL, Xi ZX, Thanos PK, Mugnaini M, Hagan JJ, Ashby CR., Jr. Rolul receptorilor centrali de dopamină D3 în dependența de droguri: o revizuire a dovezilor farmacologice. Brain Res Brain Res Rev. 2005;49: 77-105. [PubMed]
  • Henry DJ, FJ Alb. Administrarea repetată a cocainei determină îmbunătățirea persistentă a sensibilității receptorului D1 dopaminei din nucleul accumbens. J Pharmacol Exp Acolo. 1991;258: 882-890. [PubMed]
  • Henry DJ, FJ Alb. Persistența sensibilizării comportamentale la paralelele cu cocaină are o inhibare sporită a neuronilor nucleului accumbens. J Neurosci. 1995;15: 6287-6299. [PubMed]
  • Cârlige MS, Juncos JL, Justice JB, Jr., Meiergerd SM, Povlock SL, Schenk JO, Kalivas PW. Răspunsul locomotor individual la noutăți prezice modificări selective în receptorii D1 și D2 și ARNm. J Neurosci. 1994;14: 6144-6152. [PubMed]
  • Huang Q, Zhou D, Chase K, Gusella JF, Aronin N, DiFiglia M. Localizarea imunohistochimică a receptorului dopaminei D1 în creierul de șobolan, relevă transportul axonal, localizarea pre și post sinaptică și prevalența în ganglionii bazali, sistemul limbic și nucleu reticular talamic. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1992;89: 11988-11992. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Ikemoto S. Implicarea tuberculului olfactiv în recompensa de cocaină: studii de administrare intracraniană. J Neurosci. 2003;23: 9305-9311. [PubMed]
  • Ikemoto S, Qin M, Liu ZH. Diviziunea funcțională pentru întărirea primară a D-amfetaminei se află între striatul ventral medial și lateral: este divizibilă miezul, cochilia și tuberculul olfactiv accumbens? J Neurosci. 2005;25: 5061-5065. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Ito R, Dalley JW, Howes SR, Robbins TW, Everitt BJ. Disocierea în eliberarea condiționată de dopamină în nucleul accumbens nucleul și învelișul ca răspuns la indicii de cocaină și în timpul comportamentului căutător de cocaină la șobolani. J Neurosci. 2000;20: 7489-7495. [PubMed]
  • Ito R, Robbins TW, Everitt BJ. Controlul diferențial asupra comportamentului de căutare a cocainei de către nucleul nucleului accumbens și coajă. Nat Neurosci. 2004;7: 389-397. [PubMed]
  • Javitch JA. Furnicile merg de două în două: structura oligomerică a receptorilor cuplate cu proteina G. Mol Pharmacol. 2004;66: 1077-1082. [PubMed]
  • Kim KM, Valenzano KJ, Robinson SR, Yao WD, Barak LS, Caron MG. Reglarea diferențială a receptorilor dopaminei D2 și D3 de către receptorii kinazei cuplate cu proteina G și beta-arrestine. J Biol Chem. 2001;276: 37409-37414. [PubMed]
  • Kim OJ, Ariano MA, Namkung Y, Marinec P, Kim E, Han J, Sibley DR. Expresia și traficul D2 al receptorilor dopaminei este reglat prin interacțiuni directe cu ZIP. J Neurochem. 2008;106: 83-95. [PubMed]
  • Kosten T, Kosten T, Poling J, Oliveto A. „Incubarea” recidivei de cocaină în timpul unui studiu clinic disulfiram. Colegiul pe probleme de dependență de droguri. 2005 Rezumat #357.
  • Kourrich S, Rothwell PE, Klug JR, Thomas MJ. Experiența cocainei controlează plasticitatea sinaptică bidirecțională în nucleul accumbens. J Neurosci. 2007;27: 7921-7928. [PubMed]
  • Lachowicz JE, Sibley DR. Caracteristicile moleculare ale receptorilor dopaminei la mamifere. Farmacol Toxicol. 1997;81: 105-113. [PubMed]
  • Le Foll B, Frances H, Diaz J, Schwartz JC, Sokoloff P. Rolul receptorului dopaminei D3 în reactivitate la semne asociate cu cocaină la șoareci. Eur J Neurosci. 2002;15: 2016-2026. [PubMed]
  • Le Foll B, Goldberg SR, Sokoloff P. Receptorul dopaminei D3 și dependența de droguri: efecte asupra recompensei sau nu? Neuropharmacology. 2005;49: 525-541. [PubMed]
  • Lee SP, O'Dowd BF, Ng GY, Varghese G, Akil H, Mansour A, Nguyen T, George SR. Inhibarea expresiei suprafeței celulare de către receptori mutanți demonstrează că receptorii dopaminergici D2 există ca oligomeri în celulă. Mol Pharmacol. 2000a;58: 120-128. [PubMed]
  • Lee SP, O'Dowd BF, Rajaram RD, Nguyen T, George SR. Homodimerizarea receptorilor de dopamină D2 este mediată de mai multe locații de interacțiune, inclusiv o interacțiune intermoleculară care implică domeniul transmembranar 4. Biochimie (Mosc) 2003;42: 11023-11031.
  • Lee SP, So CH, Rashid AJ, Varghese G, Cheng R, Lanca AJ, O'Dowd BF, George SR. Co-activarea receptorilor dopaminei D1 și D2 generează un nou semnal de calciu mediat de fosfolipază C. J Biol Chem. 2004;279: 35671-35678. [PubMed]
  • Lee SP, Xie Z, Varghese G, Nguyen T, O'Dowd BF, George SR. Oligomerizarea receptorilor de dopamină și serotonină. Neuropsychopharmacology. 2000b;23: S32-40. [PubMed]
  • Lu L, Grimm JW, Dempsey J, Shaham Y. Cocaina care caută perioade extinse de retragere la șobolani: cursuri diferite de timp de reacție induse de cocaina versus primă de cocaină în primele luni 6. Psihofarmacologie (Berl) 2004a;176: 101-108. [PubMed]
  • Lu L, Grimm JW, Hope BT, Shaham Y. Incubarea poftei de cocaină după retragere: o revizuire a datelor preclinice. Neuropharmacology. 2004b;47(Suppl 1): 214-226. [PubMed]
  • Marcellino D, Ferre S, Casado V, Cortes A, Le Foll B, Mazzola C, Drago F, Saur O, Stark H, Soriano A, Barnes C, Goldberg SR, Lluis C, Fuxe K, Franco R. Identificarea dopaminei D1 -Heteromeri receptori D3. Indicații pentru un rol al interacțiunilor sinergice ale receptorilor D1-D3 în striatum. J Biol Chem. 2008;283: 26016-26025. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Martinez D, Broft A, Foltin RW, Slifstein M, Hwang DR, Huang Y, Perez A, Frankle WG, Cooper T, Kleber HD, Fischman MW, Laruelle M. Dependența de cocaină și disponibilitatea receptorilor d2 în subdiviziunile funcționale ale striatului: relația cu comportamentul care solicită cocaină. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 1190-1202. [PubMed]
  • Martinez D, Orlowska D, Narendran R, Slifstein M, Liu F, Kumar D, Broft A, Van Heertum R, Kleber HD. Disponibilitatea receptorului 2 / 3 de tip dopamină în striatum și statut social la voluntarii umani. Biol Psihiatrie. 2010;67: 275-278. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Martinez D, Slifstein M, Narendran R, Foltin RW, Broft A, Hwang DR, Perez A, Abi-Dargham A, Fischman MW, Kleber HD, Laruelle M. Receptorii dopaminici D1 în dependența de cocaină măsurată cu PET și alegerea pentru auto- administrează cocaina. Neuropsychopharmacology. 2009;34: 1774-1782. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • McFarland K, Kalivas PW. Circuitul care mediază reîncadrarea comportamentului căutător de droguri indusă de cocaină J Neurosci. 2001;21: 8655-8663. [PubMed]
  • Missale C, Nash SR, Robinson SW, Jaber M, Caron MG. Receptorii dopaminei: de la structură la funcție. Physiol Rev. 1998;78: 189-225. [PubMed]
  • Moore RJ, Vinsant SL, Nader MA, Porrino LJ, Friedman DP. Efectul auto-administrării cocainei asupra receptorilor D1 de dopamină striată la maimuțele rhesus. Synapse. 1998a;28: 1-9. [PubMed]
  • Moore RJ, Vinsant SL, Nader MA, Porrino LJ, Friedman DP. Efectul autoadministrării cocainei asupra receptorilor dopaminergici D2 la maimuțele rhesus. Synapse. 1998b;30: 88-96. [PubMed]
  • Morgan D, Grant KA, Gage HD, Mach RH, Kaplan JR, Prioleau O, Nader SH, Buchheimer N, Ehrenkaufer RL, Nader MA. Dominanța socială la maimuțe: receptorii dopaminei D2 și autoadministrarea cocainei. Nat Neurosci. 2002;5: 169-174. [PubMed]
  • Nader MA, Daunais JB, Moore T, Nader SH, Moore RJ, Smith HR, Friedman DP, Porrino LJ. Efectele autoadministrării cocainei asupra sistemelor de dopamină striatală la maimuțele rhesus: expunerea inițială și cronică. Neuropsychopharmacology. 2002;27: 35-46. [PubMed]
  • Nader MA, Morgan D, Gage HD, Nader SH, Calhoun TL, Buchheimer N, Ehrenkaufer R, Mach RH. Imagistica PET a receptorilor de dopamină D2 în timpul administrării cronice de cocaină la maimuțe. Nat Neurosci. 2006;9: 1050-1056. [PubMed]
  • Neisewander JL, Baker DA, Fuchs RA, Tran-Nguyen LT, Palmer A, Marshall JF. Expresie de proteine ​​Fos și comportament de căutare a cocainei la șobolani după expunerea la un mediu de auto-administrare a cocainei. J Neurosci. 2000;20: 798-805. [PubMed]
  • Neisewander JL, Fuchs RA, Tran-Nguyen LT, Weber SM, Coffey GP, Joyce JN. Creșteri ale legării receptorului D3 de dopamină la șobolani care primesc o provocare la cocaină în diferite momente de timp după autoadministrarea cocainei: implicații pentru comportamentul căutător de cocaină. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 1479-1487. [PubMed]
  • Nelson CL, Milovanovic M, Wetter JB, Ford KA, Wolf ME. Sensibilizarea comportamentală la amfetamină nu este însoțită de modificări ale expresiei suprafeței receptorului de glutamat în nucleul accumbens de șobolan. J Neurochem. 2009;109: 35-51. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Neve KA, Seamans JK, semnalizare a receptorului Trantham-Davidson H. Dopamina. J Recepție Transduct semnal Res. 2004;24: 165-205. [PubMed]
  • Nicola SM, Surmeier J, Malenka RC. Modulația dopaminergică a excitabilității neuronale în striatum și nucleu accumbens. Annu Rev Neurosci. 2000;23: 185-215. [PubMed]
  • O'Donnell P. Dopaminare a ansamblurilor neuronale ale creierului anterior. Eur J Neurosci. 2003;17: 429-435. [PubMed]
  • Paspalas CD, Goldman-Rakic ​​PS. Microdomenii pentru neurotransmisia de volum a dopaminei în cortexul prefrontal primat. J Neurosci. 2004;24: 5292-5300. [PubMed]
  • Pierce RC, Kalivas PW. Un model de expresie a sensibilizării comportamentale la psihostimulatori de tip amfetaminic. Brain Res Brain Res Rev. 1997;25: 192-216. [PubMed]
  • Pinto A, Sesack SR. Analiza ultrastructurală a aporturilor corticale prefrontal la amigdala de șobolan: relații spațiale cu presupunii axoni de dopamină și receptorii D1 și D2. Brain Struct Funct. 2008;213: 159-175. [PubMed]
  • Rocheville M, Lange DC, Kumar U, Patel SC, Patel RC, Patel YC. Receptori pentru dopamină și somatostatină: formarea de hetero-oligomeri cu activitate funcțională îmbunătățită. Știință. 2000;288: 154-157. [PubMed]
  • Rodd-Henricks ZA, McKinzie DL, Li TK, Murphy JM, McBride WJ. Cocaina se auto-administrează în coajă, dar nu miezul nucleului accumbens al șobolanilor Wistar. J Pharmacol Exp Acolo. 2002;303: 1216-1226. [PubMed]
  • Scarselli M, Novi F, Schallmach E, Lin R, Baragli A, Colzi A, Griffon N, Corsini GU, Sokoloff P, Levenson R, Vogel Z, Maggio R. D2 / D3 heterodimere cu receptor dopamină prezintă proprietăți funcționale unice. J Biol Chem. 2001;276: 30308-30314. [PubMed]
  • Schmidt HD, Anderson SM, Pierce RC. Stimularea receptorilor de dopamină asemănătoare cu D1 sau D2 în coajă, dar nu miezul nucleului accumbens restabilește comportamentul căutător al cocainei la șobolan. Eur J Neurosci. 2006;23: 219-228. [PubMed]
  • Schmidt HD, Pierce RC. Activarea cooperativă a receptorilor de dopamină asemănătoare D1 și D2 în nucleul accumbens este necesară pentru reîncadrarea comportamentului căutător de cocaină la șobolan. Neuroscience. 2006;142: 451-461. [PubMed]
  • Self DW, Barnhart WJ, Lehman DA, Nestler EJ. Modularea opusă a comportamentului de căutare a cocainei de către agoniștii receptorilor dopaminei, precum D1 și D2. Știință. 1996;271: 1586-1589. [PubMed]
  • Deci CH, Verma V, Alijaniaram M, Cheng R, Rashid AJ, O'Dowd BF, George SR. Semnalizarea calciului de către receptorii de dopamină D5 și hetero-oligomeri ai receptorului D5-D2 are loc printr-un mecanism distinct de cel pentru hetero-oligomerii receptorilor de dopamină D1-D2. Mol Pharmacol. 2009;75: 843-854. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Staley JK, Mash DC. Creșterea adaptativă a receptorilor de dopamină D3 în circuitele de recompensă ale creierului în cazurile de fatalitate ale cocainei umane. J Neurosci. 1996;16: 6100-6106. [PubMed]
  • Stéfanski R, Ziolkowska B, Kusmider M, Mierzejewski P, Wyszogrodzka E, Kolomanska P, Dziedzicka-Wasylewska M, Przewlocki R, Kostowski W. Administrare activă versus pasivă de cocaină: diferențe în modificările neuroadaptive ale sistemului dopaminergic cerebral. Brain Res. 2007;1157: 1-10. [PubMed]
  • Sutton MA, Schmidt EF, Choi KH, Schad CA, Whisler K, Simmons D, Karanian DA, Monteggia LM, Neve RL, Self DW. Reglarea indusă de extincție în receptorii AMPA reduce comportamentul care solicită cocaină. Natura. 2003;421: 70-75. [PubMed]
  • Volkow ND, Fowler JS, Wang GJ, Baler R, Telang F. Imagingul rolului dopaminei în consumul de droguri și dependență. Neuropharmacology. 2009;56(Suppl 1): 3-8. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  • Volkow ND, Fowler JS, Wang GJ, Hitzemann R, Logan J, Schlyer DJ, Dewey SL, Wolf AP. Scăderea disponibilității receptorilor de dopamină D2 este asociată cu un metabolism frontal redus la persoanele care abuză de cocaină. Synapse. 1993;14: 169-177. [PubMed]
  • Volkow ND, Fowler JS, Wang GJ, Swanson JM, Telang F. Dopamina în consumul de droguri și dependența: rezultatele studiilor imagistice și implicațiile tratamentului. Arch Neurol. 2007;64: 1575-1579. [PubMed]
  • Volkow ND, Fowler JS, Wolf AP, Schlyer D, Shiue CY, Alpert R, Dewey SL, Logan J, Bendriem B, Christman D, și colab. Efectele abuzului cocainei cronice asupra receptorilor de dopamină postsynaptic. Am J Psychiatry. 1990;147: 719-724. [PubMed]
  • Volkow ND, Wang GJ, Fowler JS, Logan J, Gatley SJ, Gifford A, Hitzemann R, Ding YS, Pappas N. Predicția de a consolida răspunsurile la psiostimulenți la oameni prin nivelurile receptorilor de dopamină cerebrală D2. Am J Psychiatry. 1999;156: 1440-1443. [PubMed]
  • Volkow ND, Wang GJ, Fowler JS, Logan J, Gatley SJ, Hitzemann R, Chen AD, Dewey SL, Pappas N. Reducerea reacției dopaminergice striate la subiecții dependenți de cocaină. Natura. 1997;386: 830-833. [PubMed]
  • Volkow ND, Wang GJ, Fowler JS, Thanos PP, Logan J, Gatley SJ, Gifford A, Ding YS, Wong C, Pappas N. Brain Receptorii DA D2 prezice efectele de întărire ale stimulentelor la om: studiu de replicare. Synapse. 2002;46: 79-82. [PubMed]
  • Wang H, Pickel VM. Receptorii Dopamine D2 sunt prezenți în aferentele corticale prefrontal și țintele lor în petele nucleului caudat-putamen de șobolan. J Comp Neurol. 2002;442: 392-404. [PubMed]
  • Wolf ME, Ferrario CR. AMPA receptor plasticitate în nucleul accumbens după expunerea repetată la cocaina. Neurosci Biobehav Rev Epub. 2010 Jan 28;
  • Worsley JN, Moszczynska A, Falardeau P, Kalasinsky KS, Schmunk G, Guttman M, Furukawa Y, Ang L, Adams V, Reiber G, Anthony RA, Wickham D, Kish SJ. Proteina receptorului Dopamine D1 este crescută în nucleul obișnuit al utilizatorilor de metamfetamină cronică umană. Mol psihiatrie. 2000;5: 664-672. [PubMed]
  • Xi ZX, EL Gardner. Acțiuni farmacologice ale NGB-2904, un antagonist selectiv al receptorilor dopaminei D3, în modelele animale de dependență de droguri. CNS Drug Rev. 2007;13: 240-259. [PubMed]