DeltaFosB în Nucleus Accumbens este critică pentru întărirea efectelor recompensei sexuale. (2010)

COMENTARII: Delta FosB este un marker pentru toate dependențele, atât comportamentale, cât și chimice. Pe măsură ce această moleculă crește în circuitul recompensei, crește și comportamentele dependente. Este una dintre moleculele implicate în modificările neuroplastice. Acest experiment arată că crește odată cu experiența sexuală, la fel ca în cazul dependenței de droguri. În experiment, ei au folosit ingineria genetică pentru a-și crește nivelurile dincolo de „normal”. Acest lucru a dus la o facilitare sporită a activității sexuale. Credem că acest lucru se întâmplă cu dependența de porno.

STUDIU FULL

Pitchers KK, Frohmader KS, Vialou V, Mouzon E, Nestler EJ, Lehman MN, Coolen LM.

Genele Brain Behav. 2010 Oct; 9 (7): 831-40 doi: 10.1111 / j.1601-183X.2010.00621.x. Epub 2010 Aug 16.

Departamentul de Anatomie si Biologie Celulara, Scoala de Medicina si Stomatologie Schulich, Universitatea din Western Ontario, Londra, Ontario, Canada.

REZUMAT

Comportamentul sexual la șobolanii masculi este recompensat și consolidat. Cu toate acestea, se cunosc puține despre mecanismele celulare și moleculare specifice care mediază răsplata sexuală sau despre efectele de întărire ale recompensei asupra expresiei ulterioare a comportamentului sexual. Acest studiu testează ipoteza că ΔFosB, forma trunchiată a FosB, exprimată în mod stabil, joacă un rol critic în întărirea comportamentului sexual și facilitarea motivației și performanței sexuale prin experiență.

Experiența sexuală a determinat acumularea ΔFosB în câteva regiuni creierului limbic, incluzând nucleul accumbens (NAc), cortexul prefrontal medial, zona tegmentală ventrală și putamenul caudat, dar nu nucleul preoptic medial.

Apoi, inducția de c-Fos, o țintă în aval (reprimată) a ΔFosB, a fost măsurată la animale cu experiență sexuală și naivă. Numărul de celule c-Fos-imunoreactive induse de împerechere a fost semnificativ scăzut în cazul animalelor cu experiență sexuală comparativ cu controalele care nu au primit naivitate sexuală.

În cele din urmă, nivelurile ΔFosB și activitatea sa în NAc au fost manipulate folosind transferul genetic mediat de virusuri pentru a studia rolul său potențial în medierea experienței sexuale și facilitarea performanței sexuale indusă de experiență. Animalele cu supraexprimare a ΔFosB au prezentat o facilitare sporită a performanței sexuale odată cu experiența sexuală în comparație cu grupul de control. În schimb, exprimarea ΔJunD, un partener dominant de legare negativă a ΔFosB, a atenuat facilitarea performanței sexuale indusă de experiența sexuală și a îngreunat menținerea pe termen lung a facilitării în comparație cu proteina fluorescentă verde și grupurile care supraexprimă ΔFosB.

Împreună, aceste constatări susțin un rol critic pentru exprimarea ΔFosB în NAc pentru efectele de întărire a comportamentului sexual și a facilității de performanță sexuală indusă de experiența sexuală.

INTRODUCERE

Comportamentul sexual este foarte răsplătit și întăritor pentru rozătoarele masculine (Coolen și colab. 2004; Pfaus et al. 2001). Mai mult, experiența sexuală alterează comportamentul sexual ulterior și recompensele (Tenk et al. 2009). Cu o experiență de împerechere repetată, comportamentul sexual este facilitat sau "întărit", evidențiat de latențele scăzute pentru inițierea împerecherii și facilitarea performanței sexuale (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Cu toate acestea, mecanismele celulare și moleculare subiacente ale recompensei sexuale și ale întăririi sunt puțin înțelese. Comportamentul sexual și indicațiile condiționate care prezic împerecherea au demonstrat că provoacă tranzitoriu expresia genei c-fos imediat imediată în sistemul mesolimbic al șobolanilor masculi (Balfour et al. 2004; Pfaus et al. 2001). Mai mult, sa demonstrat recent că experiența sexuală induce neuroplasticitatea de lungă durată în sistemul mezolimbic de șobolan masculin (Frohmader et al. 2009; pitchers et al. 2010). În plus, la șobolanii de sex masculin, sa demonstrat că experiența sexuală inducă ΔFosB, a Membru al familiei Fos, în nucleul accumbens (NAc) (Wallace et al. 2008). ΔFosB, o variantă trunchiată de FosB, este un membru unic al familiei Fos datorită stabilității sale mai mari (Carle et al. 2007; Ulery-Reynolds et al. 2008; Ulery et al. 2006) și joacă un rol în îmbunătățirea motivației și recompensării pentru medicamentele de abuz și pentru plasticitatea neuronală pe termen lung care mediază dependența (Nestler et al. 2001). ΔFosB formează un complex de factor de transcripție heteromeric (proteină activator-1 (AP-1)) cu proteine Jun, de preferință JunD (Chen et al. 1995; Hiroi et al. 1998). Prin suprapresiunea inductibilă a ΔFosB, limitată în primul rând la striatum folosind șoareci bi-transgenici, se produce un fenotip comportamental dependent de droguri, în ciuda absenței expunerii anterioare a medicamentului (McClung et al. 2004). Acest fenotip comportamental include un răspuns locomotor sensibilizat la cocaină (Kelz et al. 1999), preferința crescută pentru cocaină (Kelz et al. 1999) și morfină (Zachariou et al. 2006) și creșterea autoadministrării cocainei (Colby et al. 2003).

Similar recompensei medicamentoase, ΔFosB este suprareglat de comportamentele naturale de recompensare și mediază exprimarea acestor comportamente. Supraexprimarea ΔFosB în NAc folosind modele pe rozătoare crește mersul voluntar pe roată ( Werme și colab ., 2002 ), răspunsul instrumental la alimente ( Olausson și colab ., 2006 ), aportul de zaharoză ( Wallace și colab ., 2008 ) și facilitează comportamentul sexual masculin ( Wallace și colab ., 2008 ) și feminin ( Bradley și colab ., 2005 ) . Astfel, ΔFosB poate fi implicat în medierea efectelor experiențelor naturale de recompensare . Studiul actual extinde studiile anterioare investigând în mod specific rolul ΔFosB în NAc în rezultatele pe termen lung ale experienței sexuale asupra comportamentului de împerechere ulterior și activării neuronale în sistemul mezolimbic.

În primul rând, sa stabilit care regiuni ale creierului implicate în circuitele de recompensă și în comportamentul sexual exprimă ΔFosB induse de experiența sexuală.
Apoi, efectul ΔFosB indus de experiența sexuală asupra exprimării induse de împerechere a c-Fos, o țintă în aval reprimată de ΔFosB (Renthal et al. 2008), a fost investigat.
În cele din urmă, efectul manipulării activității ΔFosB în NAc (supraexpresia genelor și exprimarea unui partener negativ-obligatoriu dominant) asupra comportamentului sexual și facilitării experienței induse de motivație și performanță sexuală a fost determinată utilizând tehnologia de livrare a vectorilor virale.

METODE

animale

Șobolanii Sprague Dawley masculi adulți (200–225 grame) au fost obținuți de la Charles River Laboratories (Senneville, QC, Canada). Animalele au fost adăpostite în cuști din plexiglas cu un tub tunel, în perechi de același sex, pe tot parcursul experimentelor. Camera pentru colonii a fost reglată termic și menținută la un ciclu de lumină-întuneric de 12/12 ore, cu hrană și apă disponibile ad libitum, cu excepția perioadei de testare comportamentală. Femelele stimul (210–220 grame) pentru sesiunile de împerechere au primit un implant subcutanat conținând 5% benzoat de estradiol și 95% colesterol, după ovariectomie bilaterală sub anestezie profundă (0.35 g ketamină/0.052 g xilazină). Receptivitatea sexuală a fost indusă prin administrarea a 500 µg progesteron în 0.1 ml ulei de susan, cu aproximativ 4 ore înainte de testare. Toate procedurile au fost aprobate de Comitetele pentru Îngrijirea și Utilizarea Animalelor de la Universitatea din Western Ontario și au fost conforme cu ghidurile CCAC care implică animale vertebrate în cercetare.

Comportamentul sexual

Sesiunile de împerechere au avut loc în faza incipientă de întuneric (între 2-6 ore după debutul perioadei de întuneric) sub iluminare roșie slabă. Înainte de începerea experimentului, animalele au fost împărțite aleatoriu în grupuri. În timpul sesiunilor de împerechere, șobolanii masculi au fost lăsați să copuleze până la ejaculare timp de 1 oră, iar parametrii comportamentului sexual au fost înregistrați, inclusiv: latența montării (ML; timpul de la introducerea femelei până la prima montări), latența intromisiunilor (IL; timpul de la introducerea femelei până la prima montări cu penetrare vaginală), latența ejaculării (EL; timpul de la prima intromisiune până la ejaculare), intervalul post-ejaculare (PEI; timpul de la ejaculare până la prima intromisiune ulterioară), numărul de montări (M; împingeri pelvine fără penetrare vaginală), numărul de intromisiuni (IM; montări inclusiv penetrare vaginală) și eficiența copulației (CE = IM/(M+IM)) ( Agmo 1997 ). Numărul de montări și intromisiuni nu a fost inclus în analiza animalelor care nu au manifestat ejaculare. Latențele montajului și intromisiei sunt parametri care indică motivația sexuală, în timp ce latența ejaculării, numărul de montaje și eficiența copulației reflectă performanța sexuală ( Hull 2002 ).

Experiment 1: Exprimarea ΔFosB

Șobolanii masculi neexperimentați sexual au fost lăsați să se împerecheze în cuști de testare curate (60 × 45 × 50 cm) timp de 5 sesiuni de împerechere zilnice consecutive sau au rămas neexperimentați sexual. Tabelul suplimentar 1 prezintă paradigma comportamentală pentru grupurile experimentale: neexperimentați, fără sex (NNS; n=5), sex neexperimentat (NS; n=5), fără sex experimentat (ENS; n=5) și sex experimentat (ES; n=4). Animalele NS și ES au fost sacrificate la 1 oră după ejaculare în ultima zi de împerechere pentru a investiga expresia c-Fos indusă de împerechere. Animalele NNS au fost sacrificate concomitent cu animalele ENS la 24 de ore după sesiunea finală de împerechere pentru a examina ΔFosB indus de experiența sexuală. Grupurile cu experiență sexuală au fost potrivite pentru comportamentul sexual înainte de testarea ulterioară. Nu s-au detectat diferențe semnificative între grupuri pentru nicio măsură comportamentală în cadrul sesiunii de împerechere corespunzătoare, iar facilitarea comportamentului sexual indusă de experiența sexuală a fost demonstrată de ambele grupuri experimentate ( Tabelul suplimentar 2 ). Grupurile de control au inclus masculi neexperimentați sexual, manipulați concomitent cu animale în curs de împerechere, asigurând expunerea la mirosuri și vocalizări ale femelelor fără contact direct cu femela.

Pentru sacrificare, animalele au fost anesteziate profund folosind pentobarbital sodic (270 mg/kg; ip) și perfuzate intracardiac cu 50 mL de soluție salină 0.9%, urmată de 500 mL de paraformaldehidă 4% în tampon fosfat (PB) 0.1 M. Creierele au fost prelevate și fixate ulterior timp de 1 oră la temperatura camerei în același fixativ, apoi imersate în zaharoză 20% și azidă de sodiu 0.01% în PB 0.1 M și depozitate la 4°C. Secțiunile coronale (35 µm) au fost tăiate cu un microtom de congelare (H400R, Micron, Germania), colectate în patru serii paralele în soluție crioprotectoare (zaharoză 30% și etilen glicol 30% în PB 0.1 M) și depozitate la -20°C. Secțiunile plutitoare libere au fost spălate extensiv cu soluție salină tamponată cu fosfat 0.1 M (PBS; pH 7.3–7.4) între incubări. Secțiunile au fost expuse la 1% _H₂O₂ timp de 10 minute la temperatura camerei pentru a distruge peroxidazele endogene, apoi blocate în soluție de incubare PBS+, care este PBS conținând 0.1% albumină serică bovină (articol _din catalog 005-000-121; Jackson ImmunoResearch Laboratories, West Grove, PA) și 0.4% Triton X-100 (articol din catalog BP151-500; Sigma-Aldrich) timp de 1 oră. Secțiunile au fost apoi incubate peste noapte la 4°C într-un anticorp policlonal de iepure pan-FosB (1:5K; sc-48 Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA, SUA). Anticorpul pan-FosB a fost generat împotriva unei regiuni interne partajate de FosB și ΔFosB. Celulele ΔFosB-IR au fost în mod specific ΔFosB-pozitive deoarece în momentul post-stimul (24 de ore) tot FosB detectabil indus de stimul este degradat ( Perrotti et al . 2004 ; Perrotti et al . 2008 ). În plus, în acest experiment, animalele care s-au împerecheat în ultima zi (NS, ES) au fost sacrificate la 1 oră după împerechere, deci înainte de exprimarea FosB. Analiza Western blot a confirmat detectarea ΔFosB la aproximativ 37 kD. După incubarea cu anticorpi primari, secțiunile au fost incubate timp de 1 oră în IgG de capră anti-iepure conjugat cu biotină (1:500 în PBS+; Vector Laboratories, Burlingame, CA, SUA) și apoi 1 oră în peroxidază avidină-biotină-raven (ABC elite; 1:1K în PBS; Vector Laboratories, Burlingame, CA, SUA). După această incubare, secțiunile au fost procesate într-unul din următoarele moduri:

1. Etichetare peroxidază unică

Secțiuni de animale NNS și ENS au fost utilizate pentru o analiză cerebrală a acumulării ΔFosB indusă de experiența sexuală. După incubarea ABC, complexul de peroxidază a fost vizualizat după tratamentul timp de 10 minute cu o soluție de cromogen conținând 0.02% tetrahidroclorură de 3,3'-diaminobenzidină (DAB; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO) amplificată cu 0.02% sulfat de nichel în 0.1 M PB cu peroxid de hidrogen (0.015%). Secțiunile au fost spălate bine în 0.1 M PB pentru a termina reacția și montate pe lame de sticlă Superfrost plus codificate (Fisher, Pittsburgh, PA, SUA) cu 0.3% gelatină în ddH20. _După deshidratare, toate lamele au fost acoperite cu DPX (xilen ftalat de dibutil).

2. Imunofluorescență dublă

Secțiuni din toate cele patru grupuri experimentale care conțineau NAc și mPFC au fost utilizate pentru analiza ΔFosB și c-Fos. După incubarea ABC, secțiunile au fost incubate timp de 10 minute cu tiramidă biotinilată (BT; 1:250 în PBS + 0.003% H2O2 _Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) și timp de ₃₀ de minute cu strepavidină conjugată cu Alexa 488 (1:100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). Secțiunile au fost apoi incubate peste noapte cu un anticorp policlonal de iepure care recunoaște specific c-Fos (1:150; sc-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), urmată de o incubare de 30 de minute cu anticorp secundar conjugat cu Cy3 de capră anti-iepure (1:200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA, SUA). După colorare, secțiunile au fost spălate bine în PB 0.1 M, montate pe lame de sticlă codificate cu gelatină 0.3% în ddH ₂ 0 și acoperite cu un mediu de montare apos (Gelvatol) conținând agentul anti-decolorare 1,4-diazabiciclo(2,2)octan (DABCO; 50 mg/ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Controalele imunohistochimice au inclus omiterea unuia sau a ambilor anticorpi primari, rezultând absența marcării la lungimea de undă corespunzătoare.

Analiza datelor

Analiza cerebrală a ΔFosB

Doi experimentatori, orbi la tratament, au efectuat scanarea creierului pe lame codificate. Celulele ΔFosB-imunorreactive (-IR) din întregul creier au fost analizate semicantitativ folosind o scală care să reprezinte numărul de celule ΔFosB-pozitive, așa cum este prezentat în Tabelul 1. În plus, pe baza rezultatelor semicantitative, numărul de celule ΔFosB-IR a fost numărat folosind zone standard de analiză în zonele creierului implicate în recompensă și comportament sexual, utilizând un tub de desen cu cameră lucida atașat la un microscop Leica DMRD (Leica Microsystems GmbH, Wetzlar, Germania): NAc (miez (C) și coajă (S); 400×600µm) analizat la trei niveluri rostral-caudale ( Balfour et al . 2004 ); aria tegmentală ventrală (VTA; 1000×800µm) analizată la trei niveluri rostral-caudale ( Balfour și colab ., 2004 ) și coada VTA ( Perrotti și colab ., 2005 ); cortexul prefrontal (aria cingulată anterioară (ACA); cortexul prelimbic (PL); cortexul infralimbic (IL); 600×800µm fiecare); putamenul caudat (CP; 800×800µm); și nucleul preoptic medial (MPN; 400×600 µm) ( Figurile suplimentare 1-3 ). Două secțiuni au fost numărate per subregiune și mediate per animal pentru calcularea mediei grupului. Mediile grupurilor neexperimentate sexual și experimentate ale celulelor ΔFosB-IR au fost comparate pentru fiecare subregiune folosind teste t nepereche.

Rezumat al exprimării ΔFosB la animalele naivă și experimentate sexual

Analiza ΔFosB și c-Fos

Imaginile au fost capturate folosind o cameră CCD răcită (Microfire, Optronics) atașată la un microscop Leica (DM5000B, Leica Microsystems; Wetzlar, Germania) și software-ul Neurolucida (MicroBrightfield Inc) cu setări fixe ale camerei pentru toți subiecții (folosind obiective 10x). Numărul de celule care exprimă c-Fos-IR sau ΔFosB-IR în zonele standard de analiză din miezul și învelișul NAc (400×600µm fiecare; Figura suplimentară 1 ) și ACA din mPFC (600×800µm; Figura suplimentară 3 ) au fost numărate manual de către un observator care nu cunoștea grupurile experimentale, în 2 secțiuni per animal folosind software-ul Neurolucida (MBF Bioscience, Williston, VT) și mediate per animal. Mediile grupurilor de celule c-Fos sau ΔFosB au fost comparate folosind ANOVA bidirecțională (Factori: experiență sexuală și activitate sexuală) și Fisher LSD pentru comparații post-hoc la un nivel de semnificație de 0.05.

Experiment 2: manipularea expresiei ΔFosB

Transferul genei mediate de vectorul viral

Șobolanii Sprague Dawley masculi, naivi sexual, au fost împărțiți aleatoriu în grupuri înainte de intervenția chirurgicală stereotaxică. Toate animalele au primit microinjecții bilaterale cu vectori virali adeno-asociați recombinanți (rAAV) care codifică GFP (control; n=12), ΔFosB de tip sălbatic (n=11) sau un partener de legare dominant-negativ al ΔFosB denumit ΔJunD (n=9) în NAc. ΔJunD scade transcripția mediată de ΔFosB prin heterodimerizare competitivă cu ΔFosB înainte de legarea regiunii AP-1 în promotorii genei ( Winstanley et al . 2007 ). Titrul virusului a fost determinat prin qPCR și evaluat in vivo înainte de începerea studiului. Titrul a fost de 1-2 × 10 ¹¹ particule infecțioase per mL. Vectorii rAAV au fost injectați într-un volum de 1.5 µL/parte timp de 7 minute (coordonate: AP +1.5, ML +/−1.2 de la Bregma; DV −7.6 de la suprafața craniului conform Paxinos și Watson, 1998) folosind o seringă Hamilton (5 µL; Harvard Apparatus, Holliston, MA, SUA). Vectorii nu produc o toxicitate mai mare decât perfuziile de control singure ( Winstanley et al., 2007 ; pentru detalii despre prepararea AAV, vezi Hommel et al., 2003 ). Experimentele comportamentale au început la 3 săptămâni după injecțiile cu vectori, permițând o infecție virală optimă și stabilă ( Wallace et al ., 2008 ). Expresia transgenelor la speciile murine atinge un vârf la 10 zile și rămâne crescută timp de cel puțin 6 luni ( Winstanley et al ., 2007 ). La sfârșitul experimentului, animalele au fost perfuzate transcardiac, iar secțiunile de NAc au fost imunoprocesate pentru GFP (1:20K; anticorp anti-GFP de iepure; Molecular Probes) utilizând o reacție ABC-peroxidază-DAB (așa cum este descrisă mai sus) pentru a verifica histologic locurile de injectare folosind GFP ca marker ( Figura suplimentară 4 ). Vectorii ΔFosB și ΔJunD conțin, de asemenea, un segment care exprimă GFP, separat printr-un situs intern de intrare ribozomală, permițând verificarea locului de injectare prin vizualizarea GFP la toate animalele. Doar animalele cu locuri de injectare și răspândire a virusului limitate la NAc au fost incluse în analizele statistice. Răspândirea virusului a fost în general limitată la o porțiune a NAc și nu s-a răspândit rostral-caudal în întregul nucleu. Mai mult, răspândirea virusului a părut a fi în mare parte limitată fie la înveliș, fie la miez. Cu toate acestea, variația locurilor de injectare și răspândirea în cadrul NAc nu au influențat efectele asupra comportamentului. În cele din urmă, injecțiile cu GFP nu au afectat comportamentul sexual sau facilitarea comportamentului sexual indusă de experiență, comparativ cu animalele nechirurgicale din studiile anterioare ( Balfour și colab ., 2004 ).

Comportamentul sexual

La trei săptămâni după livrarea vectorilor virali, animalele au fost îmbinate la o singură ejaculare (sau timp de 1) pentru sesiuni de împerechere consecutive 4 pentru a câștiga experiență sexuală (sesiuni de experiență) și au fost testate ulterior pentru exprimarea pe termen lung a experienței induse de comportament sexual 1 și săptămâni 2 (sesiuni de testare 1 și 2) după sesiunea de experiență finală. Parametrii comportamentului sexual au fost înregistrați în timpul tuturor sesiunilor de împerechere, așa cum este descris mai sus. Diferențele statistice pentru toți parametrii în timpul fiecărei sesiuni de împerechere au fost comparate în cadrul grupurilor și între grupuri, utilizând măsurători repetate ANOVA (Factori: tratament și ședințe de împerechere) sau ANOVA într-o singură direcție (latența ejaculării, numărul de suporturi și intromisme; ) urmată de testele Fisher LSD sau Newman-Keuls pentru comparații post hoc la un nivel de semnificație al 0.05. Concret, efectele facilitare ale experienței sexuale asupra parametrilor de împerechere au fost comparate între sesiunea de experiență 1 (naivă) și sesiunile de experiență 2, 3 sau 4 fiecare, precum și între grupurile experimentale din cadrul fiecărei sesiuni de experiență. În plus, pentru a analiza efectele tratamentului (vector) asupra facilitării pe termen lung a comportamentului sexual, parametrii de împerechere au fost comparați între sesiunea de experiență 4 și sesiunea de testare 1 și 2 în cadrul fiecărui grup de tratament și comparate între grupurile experimentale din cadrul fiecărei sesiuni de testare.

REZULTATE

Experiența sexuală determină acumularea ΔFosB

Inițial, a fost efectuată o investigație semi-cantitativă a acumulării ΔFosB în creier la bărbații cu experiență sexuală, comparativ cu grupul de control neexperimentat sexual. Un rezumat al constatărilor generale este prezentat în Tabelul 1. Analiza ΔFosB-IR a fost aprofundată prin determinarea numărului de celule ΔFosB-IR în mai multe regiuni ale creierului asociate cu limbicul, utilizând zone standard de analiză. Figura 1 prezintă imagini reprezentative ale DAB-Ni care colorează NAc la animale neexperimentate sexual și experimentate sexual. O suprareglare semnificativă a ΔFosB a fost constatată în subregiunile mPFC ( Figura 2A ), nucleul și învelișul NAc (2B), putamenul caudat (2B) și VTA (2C). În NAc, au existat diferențe semnificative la toate nivelurile rostro-caudale în nucleul și învelișul NAc, iar datele prezentate în Figura 2 reprezintă media pe toate nivelurile rostro-caudale. În schimb, nu a existat o creștere semnificativă a ΔFosB-IR în nucleul preoptic medial hipotalamic (NNS: Medie 1.8 +/− 0.26; ENS: Medie 6.0 +/− 1.86).

Imagini reprezentative care prezintă celule ΔFosB-IR (negru) în NAc de sex fără naiv (A) și nu experimentează grupuri sexuale (B). aco: comisia anterioară Bara de scară indică 100 μm.

Numărul celulelor ΔFosB-IR în: subregiuni de cortex prefrontal medial, infralimbic (IL), prelimbic (PL) și cortex cingular anterior (ACA); B. Nucleus accumbens core and shell și caudate putamen (CP); C. Rostral, mijloc, caudal și coadă ...

Experiența sexuală atenuează c-Fos indusă de împerechere

Efectul experienței sexuale asupra nivelurilor ΔFosB în NAc a fost confirmat utilizând tehnici de colorare fluorescentă. În plus, au fost analizate efectele experienței sexuale asupra exprimării c-Fos. Figura 3 demonstrează imagini reprezentative ale celulelor ΔFosB- (verde) și c-Fos (roșu) -IR în toate grupele experimentale (A, NNS, B, NS, C, ENS, D, ES). Experiența sexuală a crescut semnificativ expresia ΔFosB în nucleul NAc (Figura 4A: F_1,15 = 12.0; p = 0.003) și coajă (Figura 4C: F_1,15 = 9.3; p = 0.008). Prin contrast, împerecherea cu 1 oră înainte de perfuzie nu a avut un efect asupra expresiei ΔFosB (Figura 4A, C) și nu a fost detectată nicio interacțiune între experiența sexuală și imperecherea imediat înainte de perfuzie. A existat un efect global de împerechere înainte de perfuzie pe exprimarea c-Fos atât în nucleul NAc (Figura 4B: F_1,15 = 27.4; p <0.001) și shell (Figura 4D: F_1,15 = 39.4; p <0.001). Mai mult, un efect general al experienței sexuale a fost detectat în nucleul NAc (Figura 4B: F_1,15 = 6.1; p = 0.026) și coajă (Figura 4D: F_1,15 = 1.7; p = 0.211) și a fost detectată o interacțiune între experiența sexuală și împerecherea înainte de perfuzie în nucleul NAc (F_1,15 = 6.5; p = 0.022), cu o tendință în coajă (F_1,15 = 1.7; p = 0.211; F_1,15 = 3.4; p = 0.084). Analizele post hoc au demonstrat expresia c-Fos indusă de împerechere în miezul și în cochilia bărbaților naivi naivi sexualiFigura 4B, D). Cu toate acestea, la bărbații cu experiență sexuală, c-Fos nu a crescut semnificativ în nucleul NAc (Figura 4B) și atenuată semnificativ în cochilie (Figura 4D). Astfel, experiența sexuală a determinat o reducere a expresiei c-Fos indusă de împerechere. Valorile P pentru comparații specifice perechi sunt în legendele figurii.

Imagini reprezentative care prezintă ΔFosB (verde) și c-Fos (roșu) în NAc pentru fiecare grup experimental. Scara de bare indică 100 μm.

Experiența sexuală indusă de ΔFosB și c-Fos induse de împerechere. Numerele de celule imunoreactive ΔFosB (nucleu, A; Shell, C, ACA, E) sau c-Fos (Core, B; Shell, D; ACA, F) pentru fiecare grupă: NNS (n = 5) 5), ENS (n = 5) sau ES (n = 4). Datele sunt exprimate ...

Efectul experienței sexuale asupra nivelurilor de c-Fos induse de împerechere nu s-a limitat la NAc. O atenuare similară a expresiei c-Fos a fost observată în ACA la animalele cu experiență sexuală, comparativ cu grupul de control neexperimentat sexual. Experiența sexuală a avut un efect semnificativ asupra expresiei ΔFosB în ACA ( Figura 4E : F1,15 ₌ 154.2; p < 0.001). Împerecherea înainte de perfuzie nu a avut un efect asupra expresiei ΔFosB ( Figura 4C ), dar a crescut semnificativ c-Fos ( Figura 4F : _F1,15 = 203.4; p < 0.001) în ACA. Mai mult, expresia c-Fos indusă de împerechere în ACA a fost semnificativ scăzută de experiența sexuală ( Figura 4F : _F1,15 = 15.8; p = 0.001). O interacțiune bidirecțională între experiența sexuală și împerechere înainte de perfuzie a fost detectată pentru expresia c-Fos ( Figura 4F : F1,15 ₌ 15.1; p < 0.001). Valorile P pentru comparații specifice pe perechi sunt prezentate în legendele figurilor. În cele din urmă, nu a existat o reducere semnificativă a expresiei c-Fos induse de împerechere în nucleul preoptic medial (NS: Medie 63.5 +/− 4.0; ES: Medie 41.4 +/− 10.09), o zonă în care experiența de împerechere nu a cauzat o creștere semnificativă a expresiei ΔFosB, indicând faptul că expresia c-Fos indusă de împerechere nu a fost afectată în toate zonele creierului.

ΔFosB în NAc mediază întărirea comportamentului sexual

Pentru a explora un mecanism molecular potențial pentru întărirea comportamentului sexual, așa cum sa demonstrat prin facilitarea comportamentului sexual indus de experiență, s-au determinat efectele manipulării locale a nivelurilor ΔFosB și activitatea sa transcripțională. Experiența sexuală în timpul celor patru sesiuni de experiență consecutive a avut un efect semnificativ asupra latenței de montare (Figura 5A: F_1,23 = 13.8; p = 0.001), latența intromisiei (Figura 5B: F_1,23 = 18.1; p <0.001) și latența ejaculării (Figura 5C: GFP, F_11,45 = 3.8; p = 0.006). Animalele de control GFP au prezentat facilitarea comportamentului sexual indusă de experiență și au prezentat latențe semnificativ mai mici la prima montare, prima intromisie și ejaculare în timpul sesiunii de experiență 4 comparativ cu sesiunea de experiență 1Figura 5A-C; a se vedea legenda figura pentru valorile p). Această facilitare indusă de experiența comportamentului sexual a fost observată, de asemenea, în grupul ΔFosB pentru latențele de montare și intromisiune, dar nu a fost detectată o diferență semnificativă în latența ejaculării (Figura 5A-C). Spre deosebire de acestea, animalele ΔJunD au prezentat o facilitate ușoară; chiar dacă latențele pentru mounts, intromisiuni și ejaculări au scăzut cu sesiuni de împerechere repetate, nici unul dintre acești parametri nu a atins semnificație statistică atunci când este comparat între sesiunile de experiență 1 și 4 (Figura 5A-C). Între comparațiile de grup pentru fiecare sesiune de experiență rezultă că ΔJunD a avut latențe semnificativ mai mari pentru a se monta, a intromita și a ejacula în timpul sesiunilor de experiență în comparație cu ΔFosB și GFPFigura 5A-C). În plus, atât experiența sexuală cât și tratamentul au avut efecte semnificative asupra eficienței copulației (Figura 5F: experiență sexuală, F_1,12 = 22.5; p <0.001; tratament, F_1,12 = 3.3; p = 0.049). Bărbații ΔFosB au crescut eficiența copulației în timpul sesiunii de experiență 4 comparativ cu sesiunea de experiență 1 (Figura 5F). În plus, animalele ΔFosB au avut în mod semnificativ mai puține suplimente care au precedat ejacularea în timpul zilei de sesiune 4, comparativ cu sesiunea de experiență 1 (Figura 5D: F_10,43 = 4.1; p = 0.004) și că bărbații ΔJunD au avut semnificativ mai multe suplimente care au precedat ejacularea, astfel scăzând semnificativ eficiența copulației decât oricare dintre celelalte două grupuri (Figura 5D și F). Astfel, animalele GFP și ΔFosB au prezentat facilitatea de inițiere a comportamentului sexual și a performanței sexuale induse de experiență, în timp ce animalele ΔJunD nu au făcut acest lucru.

Comportamentul sexual al animalelor GFP (n = 12), ΔFosB (n = 11) și ΔJunD (n = 9): latența de montare (A), latența intromisiei (B), latența ejaculării numărul de intromisiuni (E) și eficiența copulației (F). Datele sunt exprimate ...

Pentru a testa ipoteza că expresia ΔFosB este esențială pentru exprimarea pe termen lung a facilitării comportamentului sexual indusă de experiență, animalele au fost testate la 1 săptămână (sesiunea de testare 1) și la 2 săptămâni (sesiunea de testare 2) după ultima sesiune de experiență. Într-adevăr, comportamentul sexual facilitat a fost menținut atât în grupurile GFP, cât și în cele ΔFosB, deoarece niciunul dintre parametrii comportamentali nu a diferit între sesiunile de testare 1 sau 2 și sesiunea de experiență finală 4, în cadrul grupurilor GFP și ΔFosB ( Figura 5A-C ; cu excepția latenței ejaculării și a eficienței copulației în sesiunea de testare 1 pentru animalele ΔFosB). Diferențe semnificative între animalele ΔJunD și grupurile GFP sau ΔFosB au fost detectate în ambele sesiuni de testare pentru toți parametrii comportamentului sexual ( Figura 5A-F ). Nu au fost detectate diferențe între sau în cadrul grupurilor atunci când s-a comparat numărul de intromisii, PEI sau procentele de animale care au ejaculat (100% dintre masculii din toate grupurile au ejaculat în ultimele patru sesiuni de împerechere).

DISCUŢIE

Studiul actual a demonstrat că experiența sexuală provoacă o acumulare de ΔFosB în mai multe regiuni ale creierului asociate cu sistemul limbic, inclusiv nucleul și învelișul NAc, mPFC, VTA și putamenul caudat. În plus, experiența sexuală a atenuat expresia c-Fos indusă de împerechere în NAc și ACA. În cele din urmă, s-a demonstrat că ΔFosB din NAc este esențial în medierea facilitării împerecherii în timpul dobândirii experienței sexuale și a exprimării pe termen lung a facilitării comportamentului sexual indusă de experiență . Mai exact, reducerea transcripției mediate de ΔFosB a atenuat facilitarea indusă de experiență a motivației și performanței sexuale, în timp ce supraexprimarea ΔFosB în NAc a cauzat o facilitare sporită a comportamentului sexual, în termeni de creștere a performanței sexuale cu mai puțină experiență. Împreună, descoperirile actuale susțin ipoteza că ΔFosB este un mediator molecular critic pentru plasticitatea neuronală și comportamentală pe termen lung indusă de experiența sexuală.

Constatările actuale extind studiile anterioare care au arătat ΔFosB indus de experiența sexuală în NAc la șobolani masculi ( Wallace și colab ., 2008 ) și hamsteri femele ( Hedges și colab ., 2009 ). Wallace și colab. (2008) au arătat că supraexprimarea rAAV-ΔFosB în NAc a îmbunătățit comportamentul sexual la animalele neexperimentate sexual în timpul primei sesiuni de împerechere, evidențiat de mai puține intromisiuni la ejaculare și intervale post-ejaculatorii mai scurte, dar nu a avut niciun efect la masculii cu experiență sexuală ( Wallace și colab ., 2008 ).

În schimb, studiul actual nu a demonstrat niciun efect al supraexprimării ΔFosB la bărbații neexperimentați sexual în timpul primului test, ci mai degrabă în timpul și după dobândirea experienței sexuale. Supraexprimatorii ΔFosB au demonstrat o performanță sexuală crescută (eficiență crescută a copulației) în comparație cu animalele GFP.

În plus, studiul actual a testat rolul ΔFosB prin blocarea transcripției mediate de ΔFosB utilizând un vector viral care exprimă ΔJunD. Prevenirea creșterii expresiei ΔFosB indusă de experiență a inhibat facilitarea motivației sexuale indusă de experiență (latențe crescute ale montajului și intromisiei), precum și performanța sexuală (latență crescută a ejaculării și număr de montaje) și exprimarea ulterioară pe termen lung a comportamentului sexual facilitat.

Prin urmare, aceste date sunt primele care indică un rol obligatoriu pentru ΔFosB în dobândirea facilitării comportamentului sexual indusă de experiență. Mai mult, aceste date arată că ΔFosB este, de asemenea, implicat critic în exprimarea pe termen lung a comportamentului facilitat indus de experiență. Propunem că această exprimare pe termen lung a comportamentului facilitat reprezintă o formă de memorie pentru recompensa naturală, prin urmare, ΔFosB din NAc este un mediator al memoriei recompensei. Experiența sexuală a crescut, de asemenea, nivelurile de ΔFosB în VTA și mPFC, zone implicate în recompensă și memorie ( Balfour și colab ., 2004 ; Phillips și colab ., 2008 ). Sunt necesare studii viitoare pentru a elucida o potențială semnificație a reglării în sus a ΔFosB în aceste zone pentru memoria recompensei.

Expresia ΔFosB este foarte stabilă, având astfel un potențial mare ca mediator al adaptărilor persistente ale creierului după perturbări cronice (Nestler et al. 2001). Sa demonstrat că ΔFosB crește treptat în NAc față de injecțiile multiple cu cocaină și persistă timp de până la câteva săptămâni (Speranţă et al. 1992; Speranţă et al. 1994). Aceste schimbări în exprimarea NAc ΔFosB sunt asociate cu sensibilizarea la recompensă și dependența de droguri (Chao & Nestler 2004; McClung & Nestler 2003; McClung et al. 2004; Nestler 2004, 2005, 2008; Nestler et al. 2001; Zachariou et al. 2006). În schimb, rolul ΔFosB în medierea recompensei naturale a fost subestimat. Au apărut dovezi recente care sugerează că inducerea ΔFosB în NAc este implicată în recompense naturale. Nivelurile ΔFosB sunt în mod similar crescute în NAc după aportul de zaharoză și roata. Exprimarea excesivă a ΔFosB în striatum utilizând șoareci bitransgenici sau vectori virali la șobolani determină o creștere a aportului de zaharoză, o motivație sporită pentru alimente și o alergare sporită a roților spontane (Olausson et al. 2006; Wallace et al. 2008; Werme et al. 2002). Datele actuale adaugă substanțial la aceste rapoarte și susțin în continuare ideea că ΔFosB este un mediator critic pentru întărirea recompensei și memoria naturală a recompensei.

ΔFosB poate media întărirea comportamentului sexual indusă de experiență prin inducerea plasticității în sistemul mezolimbic. Într-adevăr, experiența sexuală provoacă o serie de modificări de lungă durată ale sistemului mezolimbic ( Bradley & Meisel 2001 ; Frohmader et al . 2009 ; Pitchers et al . 2010 ). La nivel comportamental, la șobolanii masculi cu experiență sexuală s-a demonstrat un răspuns locomotor sensibilizat la amfetamină și o recompensă sporită pentru amfetamină ( Pitchers et al . 2010 ); un răspuns locomotor modificat la amfetamină a fost observat și la hamsterii femele ( Bradley & Meisel 2001 ). În plus, s-au constatat creșteri ale numărului de spini dendritici și ale complexității arborilor dendritici în urma unei perioade de abstinență de la experiența sexuală la șobolanii masculi ( Pitchers et al . 2010 ) . Studiul actual sugerează că ΔFosB ar putea fi un mediator molecular specific al rezultatelor pe termen lung ale experienței sexuale. În acord, s-a demonstrat recent că ΔFosB este important în inducerea modificărilor coloanei dendritice ca răspuns la administrarea cronică de cocaină ( Dietz și colab ., 2009 ; Maze și colab ., 2010 ).

Nu este clar care neurotransmițător(i) din amonte este(s) responsabil(i) pentru inducerea ΔFosB în acnon-nuclear (NAc), dar DA a fost propus ca și candidat ( Nye et al . 1995 ). Practic toate drogurile de abuz, inclusiv cocaina, amfetamina, opiaceele, canabinoizii și etanolul, precum și recompensele naturale, cresc ΔFosB în NAc ( Perrotti et al . 2005 ; Wallace et al . 2008 ; Werme et al . 2002 ). Atât drogurile de abuz, cât și recompensele naturale cresc concentrația sinaptică de DA în NAc ( Damsma et al . 1992 ; Hernandez & Hoebel 1988a , b ; Jenkins & Becker 2003 ). Inducerea ΔFosB de către drogurile de abuz a fost demonstrată în celulele care conțin receptori DA, iar ΔFosB indus de cocaină este blocat de un antagonist al receptorului DA D1 ( Nye et al . 1995 ). Prin urmare, se presupune că eliberarea de DA stimulează expresia ΔFosB și, prin urmare, mediază neuroplasticitatea legată de recompensă . Ideea că nivelurile de ΔFosB sunt dependente de DA este susținută în continuare de constatarea că zonele creierului în care experiența sexuală a modificat nivelurile de ΔFosB primesc într-adevăr un input dopaminergic puternic din partea atriului ventral (ATV), inclusiv cortexul prefrontal medial și amigdala bazolaterală.

Cu toate acestea, în schimb, ΔFosB nu este crescut în zona preoptică medială, chiar dacă această zonă primește input dopaminergic, deși din surse hipotalamice ( Miller & Lonstein 2009 ). Sunt necesare studii viitoare pentru a testa dacă expresia ΔFosB indusă de împerechere și efectele experienței sexuale asupra motivației și performanței sexuale depind de acțiunea DA. Rolul DA în recompensa sexuală la șobolanii masculi nu este în prezent complet clar ( Agmo & Berenfeld 1990 ; Pfaus 2009 ). Există dovezi ample că DA este eliberat în NAc în timpul expunerii la o femelă sau în timpul împerecherii ( Damsma et al . 1992 ) și neuronii DA sunt activați în timpul comportamentului sexual ( Balfour et al . 2004 ). Cu toate acestea, injecțiile sistemice de antagoniști ai receptorilor DA nu previn preferința de loc condiționată indusă de recompensa sexuală ( Agmo & Berenfeld 1990 ), iar ipoteza că DA este esențială pentru întărirea împerecherii indusă de experiență nu este testată.

De asemenea, este neclar cu privire la mediatorii din aval ai efectelor ΔFosB asupra comportamentului sexual. Sa demonstrat că ΔFosB acționează atât ca un activator transcripțional, cât și ca represor prin intermediul unui mecanism dependent de AP-1 (McClung & Nestler 2003; Peakman et al. 2003). Numeroase gene țintă au fost identificate, incluzând gena c-fos (Speranţă et al. 1992; Speranţă et al. 1994; Morgan & Curran 1989; Renthal et al. 2008; Zhang et al. 2006), cdk5 (Bibb et al. 2001), dinorfina (Zachariou et al. 2006), sirtuin-1 (Renthal et al. 2009), Subunități NFκB (Ang et al. 2001), Ond subunitatea receptorului de glutamat AMPA GluR2 (Kelz et al. 1999). Rezultatele actuale demonstrează că nivelurile de c-Fos induse de împerechere au fost reduse prin experiența sexuală din zonele creierului cu ΔFosB crescut (NAc și ACA). Supresia c-Fos apare dependentă de perioada de la ultima asociere de împerechere și repetare, ca în studiile anterioare, o astfel de scădere a c-Fos nu a fost detectată la șobolani masculi testați săptămâna 1 după sesiunea de împerechere finalăBalfour et al. 2004) sau după experiența sexuală care constă doar într-o singură sesiune de împerechere (Lopez & Ettenberg 2002). Mai mult, concluzia actuală este conformă cu dovezile că ΔFosB reprimă gena c-fos după expunerea cronică la amfetamină (Renthal et al. 2008). În concordanță cu aceste constatări, inducerea mai multor mARN-uri genetice imediate (c-fos, fosB, c-jun, junB și zif268) a fost redusă după injectările repetate de cocaină în comparație cu injecțiile acute cu medicamenteSperanţă et al. 1992; Speranţă et al. 1994) și c-fos indusă de amfetamină a fost suprimată în urma retragerii din administrarea cronică de amfetamină (Jaber et al. 1995; Renthal et al. 2008). Relevanța funcțională a reglementării descrescătoare a expresiei c-Fos după tratamentul cronic de droguri sau experiența sexuală rămâne neclară și sa sugerat a fi un mecanism homeostatic important pentru a regla sensibilitatea animalului la expunerea repetată a recompensării (Renthal et al. 2008).

În concluzie, studiul actual demonstrează că ΔFosB din NAc joacă un rol integral în memoria recompensei sexuale, susținând posibilitatea ca ΔFosB să fie important pentru întărirea generală a recompensei și a memoriei . Rezultatele studiului actual elucidază în continuare înțelegerea noastră asupra mecanismelor celulare și moleculare care mediază recompensa și motivația sexuală și se adaugă la o serie de studii care arată că ΔFosB este un jucător important în dezvoltarea dependenței, demonstrând un rol al ΔFosB în întărirea naturală a recompensei.

Material suplimentar

Supunem Fig S1-S4 și Tabelul S1-S2

Faceți clic aici pentru a vizualiza.^{(167K, pdf)}

Mulţumiri

Aceasta cercetare a fost sustinuta de subventii de la Institutul Canadian de Sanatate Cercetare la LMC, Institutul National de Sanatate Mintala la EJN, si Stiinte naturale si inginerie Consiliul de Cercetare din Canada la KKP si LMC.

REFERINȚE

Agmo A. Comportamentul sexual al șobolanilor. Brain Res Brain Res Protoc. 1997;1: 203-209. [PubMed]
Agmo A, Berenfeld R. Proprietățile de întărire a ejaculării la șobolanii masculi: rolul opioidelor și al dopaminei. Behav Neurosci. 1990;104: 177-182. [PubMed]
Ang E, Chen J, Zagouras P, Magna H, Holland J, Schaeffer E, Nestler EJ. Inducerea factorului nuclear-kappaB în nucleul accumbens prin administrarea cocainei cronice. J Neurochem. 2001;79: 221-224. [PubMed]
Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Comportamentul sexual și indicatorii de mediu asociați sexului activează sistemul mezolimbic la șobolanii masculi. Neuropsychopharmacology. 2004;29: 718-730. [PubMed]
Bibb JA, Chen J, Taylor JR, Svenningsson P, Nishi A, Snyder GL, Yan Z, Sagawa ZK, Ouimet CC, Nairn AC, Nestler EJ, Greengard P. Efectele expunerii cronice la cocaină sunt reglementate de proteina neuronală Cdk5. Natura. 2001;410: 376-380. [PubMed]
Bradley KC, Haas AR, Meisel RL. Leziunile 6-hidroxidopamină la hamsterii de sex feminin (Mesocricetus auratus) elimină efectele sensibilizate ale experienței sexuale asupra interacțiunilor copulative cu bărbații. Behav Neurosci. 2005;119: 224-232. [PubMed]
Bradley KC, Meisel RL. Inducerea comportamentului sexual al c-Fos în nucleul accumbens și activitatea locomotorie stimulată de amfetamină este sensibilizată de experiența sexuală anterioară la hamsterile siriene femele. J Neurosci. 2001;21: 2123-2130. [PubMed]
Carle TL, Ohnishi YN, Ohnishi YH, Alibhai IN, Wilkinson MB, Kumar A, Nestler EJ. Mecanisme dependente de proteazom și independente pentru destabilizarea FosB: identificarea domeniilor FosB degron și implicațiile pentru stabilitatea DeltaFosB. Eur J Neurosci. 2007;25: 3009-3019. [PubMed]
Chao J, Nestler EJ. Neurobiologia neurologică a dependenței de droguri. Annu Rev Med. 2004;55: 113-132. [PubMed]
Chen J, Nye HE, Kelz MB, Hiroi N, Nakabeppu Y, Hope BT, Nestler EJ. Reglarea proteinelor delta FosB și FosB prin tratamente de convulsii electroconvulsive și tratamente cu cocaină. Farmacologie moleculară. 1995;48: 880-889. [PubMed]
Colby CR, Whisler K, Steffen C, Nestler EJ, Self DW. Supraexpresia specifică de tip celular de tip Striatal a DeltaFosB sporește stimularea cocainei. J Neurosci. 2003;23: 2488-2493. [PubMed]
Coolen LM, Allard J, Truitt WA, Mckenna KE. Reglementarea centrală a ejaculării. Physiol Behav. 2004;83: 203-215. [PubMed]
Damsma G, Pfaus JG, Wenkstern D, Phillips AG, Fibiger HC. Comportamentul sexual crește transmiterea dopaminei în nucleul accumbens și striatum de șobolani masculi: comparație cu noutatea și locomoția. Behav Neurosci. 1992;106: 181-191. [PubMed]
Dietz DM, labirint I, mecanic M, Vialou V, Dietz KC, Iniguez SD, Laplant Q, Russo SJ, Ferguson D, Nestler EJ. Rolul esențial al ΔFosB în reglarea cocainei asupra spinii dendritici ai neuronilor nucleului accumbens. Societatea pentru Neuroștiințe Rezumat. 2009
Frohmader KS, Pitchers KK, Balfour ME, Coolen LM. Pastile de amestecare: analiza efectelor drogurilor asupra comportamentului sexual la om și modele animale. Hormonul Behav. 2009 In presa.
Hedges VL, Chakravarty S, Nestler EJ, Meisel RL. Supraexpresia Delta FosB în nucleul accumbens sporește recompensa sexuală la hamsterii sirieni de sex feminin. Genele Brain Behav. 2009;8: 442-449. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Hrănirea și stimularea hipotalamică măresc cifra de afaceri a dopaminei în accumbens. Physiol Behav. 1988a;44: 599-606. [PubMed]
Hernandez L, Hoebel BG. Recompensa alimentară și cocaina măresc dopamina extracelulară în nucleul accumbens măsurată prin microdializă. Life Sci. 1988b;42: 1705-1712. [PubMed]
Hiroi N, Marek GJ, Brown JR, Ye H, Saudou F, Vaidya VA, Duman RS, Greenberg ME, Nestler EJ. Rolul esențial al genei fosB în acțiunile moleculare, celulare și comportamentale ale convulsiilor cronice electroconvulsive. J Neurosci. 1998;18: 6952-6962. [PubMed]
Hommel JD, Sears RM, Georgescu D, Simmons DL, DiLeone RJ. Distrugerea genei locale în creier utilizând interferența ARN-mediată virale. Nat Med. 2003;9: 1539-1544. [PubMed]
Hope B, Kosofsky B, Hyman SE, Nestler EJ. Reglarea exprimării genetice imediate și legarea AP-1 în nucleul accumbens de șobolan prin cocaină cronică. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1992;89: 5764-5768. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Hope BT, Nye HE, Kelz MB, Self DW, Iadarola MJ, Nakabeppu Y, Duman RS, Nestler EJ. Inducerea unui complex AP-1 de lungă durată compus din proteine modificate Fos în creier prin cocaină cronică și alte tratamente cronice. Neuron. 1994;13: 1235-1244. [PubMed]
Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Conduita sexuală la bărbați. Hormonul Behav. 2002;1: 1-139.
Jaber M, Cador M, Dumartin B, Normand E, Stinus L, Bloch B. Tratamentele acute și cronice de amfetamină reglementează în mod diferit nivelele ARN ale neuropeptidelor messenger și imunoreactivitatea Fos în neuronii striatali ai șobolanilor. Neuroscience. 1995;65: 1041-1050. [PubMed]
Jenkins WJ, Becker JB. Creșteri dinamice ale dopaminei în timpul copulației ritmice la șobolanii femele. Eur J Neurosci. 2003;18: 1997-2001. [PubMed]
Kelz MB, Chen J, Carlezon WA, Jr, Whisler K, Gilden L, Beckmann AM, Steffen C, Zhang YJ, Marotti L, Self DW, Tkatch T, Baranauskas G, Surmeier DJ, Nestler EJ. Exprimarea factorului de transcripție deltaFosB în creier controlează sensibilitatea la cocaină. Natura. 1999;401: 272-276. [PubMed]
Lopez HH, Ettenberg A. Expunerea la șobolani femele produce diferențe în inducerea c-fos între șobolanii masculi naivi și cei experimentați. Brain Res. 2002;947: 57-66. [PubMed]
Maze I, Covington HE, 3rd, Dietz DM, LaPlant Q, Rental W, Russo SJ, Mecanic M, Mouzon E, Neve RL, Haggarty SJ, Ren Y, Sampath SC, Hurd YL, Greengard P, Tarakhovsky A, Schaefer A, Nestler EJ. Rolul esențial al histonmetiltransferazei G9a în plasticitatea indusă de cocaină. Știință. 2010;327: 213-216. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
McClung CA, Nestler EJ. Reglementarea expresiei genelor și a recompensei cocainei de către CREB și DeltaFosB. Nat Neurosci. 2003;6: 1208-1215. [PubMed]
McClung CA, Ulery PG, Perrotti LI, Zachariou V, Berton O, Nestler EJ. DeltaFosB: un comutator molecular pentru adaptarea pe termen lung în creier. Brain Res Mol Brain Res. 2004;132: 146-154. [PubMed]
Miller SM, Lonstein JS. Proiecții dopaminergice în zona preoptică mediană a șobolanilor postpartum. Neuroscience. 2009;159: 1384-1396. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Morgan JI, Curran T. Cuplaj stimulativ-transcripție în neuroni: rolul genelor celulare imediate-timpurii. Tendințe Neurosci. 1989;12: 459-462. [PubMed]
Nestler EJ. Mecanisme moleculare ale dependenței de droguri. Neuropharmacology. 2004;47 Suppl 1: 24-32. [PubMed]
Nestler EJ. Neurobiologia dependenței de cocaină. Știință Pract Perspect. 2005;3: 4-10. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Nestler EJ. Revizuire. Mecanisme transcripționale ale dependenței: rolul DeltaFosB. Philos Trans R. Soc Lond. B Biol Sci. 2008;363: 3245-3255. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Nestler EJ, Barrot M, Self DW. DeltaFosB: un comutator molecular susținut pentru dependență. Proc Natl Acad Sci SUA A. 2001;98: 11042-11046. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Nye HE, Hope BT, Kelz MB, Iadarola M, Nestler EJ. Studii farmacologice privind reglarea inducției cronice asociate cu FOS cu cocină în striatum și nucleul accumbens. J Pharmacol Exp Acolo. 1995;275: 1671-1680. [PubMed]
Olausson P, Jentsch JD, Tronson N, Neve RL, Nestler EJ, Taylor JR. DeltaFosB în nucleul accumbens reglează comportamentul instrumental și motivația armată de alimente. J Neurosci. 2006;26: 9196-9204. [PubMed]
Peakman MC, Colby C, Perrotti LI, Tekumalla P, Carle T, Ulery P, Chao J, Duman C, Steffen C, Monteggia L, Allen MR, Stock JL, Duman RS, McNeish JD, Barrot M, Self DW, Nestler EJ , Schaeffer E. Explicarea specifică a regiunii cerebrale a unui mutant negativ dominant al c-Jun la șoarecii transgenici reduce sensibilitatea la cocaină. Brain Res. 2003;970: 73-86. [PubMed]
Perrotti LI, Bolanos CA, Choi KH, Russo SJ, Edwards S, Ulery PG, Wallace DL, Self DW, Nestler EJ, Barrot M. DeltaFosB se acumulează într-o populație de celule GABAergic în coada posterioară a zonei tegmentale ventrale după tratamentul psihostimulant. Eur J Neurosci. 2005;21: 2817-2824. [PubMed]
Perrotti LI, Hadeishi Y, Ulery PG, Barrot M, Monteggia L, Duman RS, Nestler EJ. Inducția deltaFosB în structurile cerebrale legate de recompense după stresul cronic. J Neurosci. 2004;24: 10594-10602. [PubMed]
Perrotti LI, Weaver RR, Robison B, Renthal W, Maze I, Yazdani S, Elmore RG, Knapp DJ, Selley DE, Martin BR, Sim-Selley L, Bachtell RK, Self DW, Nestler EJ. Modele distincte ale inducției DeltaFosB în creier prin medicamente de abuz. Synapse. 2008;62: 358-369. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Pfaus JG. Căile de dorință sexuală. J Sex Med. 2009;6: 1506-1533. [PubMed]
Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condiționarea și comportamentul sexual: o analiză. Hormonul Behav. 2001;40: 291-321. [PubMed]
Phillips AG, Vacca G, Ahn S. O perspectivă de sus în jos privind dopamina, motivația și memoria. Pharmacol Biochem Behav. 2008;90: 236-249. [PubMed]
Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Neuroplasticitatea în sistemul mesolimbic indusă de recompensa naturală și abstinența recompensă ulterioară. Biol Psihiatrie. 2010;67: 872-879. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Rentale W, Carle TL, Maze I, Covington HE, 3rd, Truong HT, Alibhai I, Kumar A, Montgomery RL, Olson EN, Nestler EJ. Delta FosB mediază desensibilizarea epigenetică a genei c-fos după expunerea cronică la amfetamină. J Neurosci. 2008;28: 7344-7349. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Rentalul W, Kumar A, Xiao G, Wilkinson M, Covington HE, 3rd, Maze I, Sikder D, Robison AJ, LaPlant Q, Dietz DM, Russo SJ, Vialou V, Chakravarty S, Kodadek TJ, Nestler EJ. Analiza genomului asupra reglajului cromatinei de cocaină relevă un rol pentru sirtuine. Neuron. 2009;62: 335-348. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Răsplata sexuală la șobolanii masculi: efectele experienței sexuale asupra preferințelor locului condiționat asociate cu ejacularea și intromisele. Hormonul Behav. 2009;55: 93-97. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Ulery-Reynolds PG, Castillo MA, Vialou V, Russo SJ, Nestler EJ. Fosforilarea lui DeltaFosB mediază stabilitatea sa in vivo. Neuroscience. 2008
Ulery PG, Rudenko G, Nestler EJ. Reglarea stabilității DeltaFosB prin fosforilare. J Neurosci. 2006;26: 5131-5142. [PubMed]
Wallace DL, Vialou V, Rios L, Carle-Florence TL, Chakravarty S, Kumar A, Graham DL, Green TA, Kirk A, Iniguez SD, Perrotti LI, Barrot M, DiLeone RJ, Nestler EJ, Bolanos-Guzman CA. Influența DeltaFosB asupra nucleului accumbens asupra comportamentului natural al recompensei. J Neurosci. 2008;28: 10272-10277. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
Werme M, Messer C, Olson L, Gilden L, Thoren P, Nestler EJ, Brene S. Delta FosB reglează rularea roților. J Neurosci. 2002;22: 8133-8138. [PubMed]
Winstanley CA, LaPlant Q, Theobald DE, Green TA, Bachtell RK, Perrotti LI, DiLeone RJ, Russo SJ, Garth WJ, Self DW, Nestler EJ. Inducția DeltaFosB în cortexul orbitofrontal mediază toleranța la disfuncția cognitivă indusă de cocaină. J Neurosci. 2007;27: 10497-10507. [PubMed]
Zachariou V, Bolanos CA, Selley DE, Theobald D, Cassidy MP, Kelz MB, Shaw-Lutchman T, Berton O, Sim-Selley LJ, Dileone RJ, Kumar A, Nestler EJ. Un rol esențial pentru DeltaFosB în nucleul accumbens în acțiunea morfinei. Nat Neurosci. 2006;9: 205-211. [PubMed]
Zhang J, Zhang L, Jiao H, Zhang Q, Zhang D, Lou D, Katz JL, Xu M. c-Fos facilitează dobândirea și dispariția modificărilor persistente induse de cocaină. J Neurosci. 2006;26: 13287-13296. [PubMed]