Metamfetamina acționează asupra subpopulațiilor neuronilor care reglează comportamentul sexual la șobolani masculi (2010)

Neuroscience. 31 martie 2010;166(3):771-84. doi: 10.1016/j.neuroscience.2009.12.070. Publicat în format electronic la 4 ianuarie 2010.

Frohmader KS , Wiskerke J , Wise RA , Lehman MN , Coolen LM.

Sursa

Departamentul de Anatomie și Biologie Celulară, Școala de Medicină și Stomatologie Schulich, Universitatea din Western Ontario, Londra, ON, Canada, N6A 5C1.

Abstract

Metamfetamina (Met) este un stimulent extrem de adictiv. Abuzul de metamfetamină este frecvent asociat cu practicarea unui comportament sexual cu risc și cu o prevalență crescută a virusului imunodeficienței umane, iar utilizatorii de metamfetamină raportează o dorință sexuală, o excitație și o plăcere sexuală sporite. Baza biologică a acestei legături dintre droguri și sex este necunoscută. Studiul actual demonstrează că administrarea de metamfetamină la șobolanii masculi activează neuronii din regiunile creierului ale sistemului mezolimbic implicate în reglarea comportamentului sexual. Mai exact, metamfetamina și împerecherea coactivează celulele din nucleul accumbens (miezul și învelișul), amigdala bazolaterală și cortexul cingular anterior. Aceste descoperiri ilustrează faptul că, spre deosebire de credința actuală, drogurile de abuz pot activa aceleași celule ca un întăritor natural, adică comportamentul sexual, și, la rândul lor, pot influența căutarea compulsivă a acestei recompense naturale.

Cuvinte cheie: nucleul accumbens, amigdala bazolaterală, cortexul prefrontal, abuzul de substanțe, reproducerea, dependența

Motivația și recompensa sunt reglementate de sistemul mezolimbic, o rețea interconectată a zonelor creierului cuprinsă între nucleul accumbens (NAc), amigdala basolaterală și cortexul prefrontal medial (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas și Volkow, 2005). Există dovezi ample că sistemul mezolimbic este activat ca răspuns la ambele substanțe de abuz (Di Chiara și Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi și colab., 1999) și comportamente naturale recompensatoare, cum ar fi comportamentul sexual (Fiorino și colab., 1997, Balfour și colab., 2004). Comportamentul sexual al bărbatului, și în special ejacularea, este extrem de satisfăcător și întăritor în modelele animalelor (Pfaus și colab., 2001). Distribuția rozătoarelor masculine dezvoltă o preferință a locului condiționat (CPP) la copulare (Agmo și Berenfeld, 1990, Martinez și Paredes, 2001, Tenk, 2008) și va efectua sarcini operant pentru a avea acces la o femeie receptivă sexual (Everitt și colab., 1987, Everitt și Stacey, 1987). Drogurile de abuz sunt, de asemenea, recompensatoare și consolidate, iar animalele vor învăța să se auto-administreze substanțe de abuz, inclusiv opiacee, nicotină, alcool și psihostimulante (Înțelept, 1996, Pierce și Kumaresan, 2006, Feltenstein și See, 2008). Deși se știe că atât medicamentele de abuz, cât și comportamentul sexual acționează în zonele creierului mezolimbic, în prezent nu este clar dacă medicamentele de abuz influențează aceiași neuroni care mediază comportamentul sexual.

Studiile electrofiziologice au demonstrat că alimentele și cocaina activează neuronii în NAc. Cu toate acestea, cei doi agenți de întărire nu activează aceleași celule în NAc (Carelli și colab., 2000, Carelli și Wondolowski, 2003). În plus, administrarea alimentară și sucroza nu provoacă modificări pe termen lung ale proprietăților electrofiziologice induse de cocaină (Chen și colab., 2008). În schimb, o colecție de dovezi sugerează că comportamentul sexual masculin și drogurile de abuz pot acționa într-adevăr pe aceleași neuroni mezolimbici. Psihostimulantele și opioidele modifică expresia comportamentului sexual la șobolanii masculi (Mitchell și Stewart, 1990, Fiorino și Phillips, 1999a, Fiorino și Phillips, 1999b). Date recente din laboratorul nostru au arătat că experiența sexuală modifică capacitatea de reacție la psihostimulatori, așa cum reiese din răspunsurile locomotorii sensibilizate și percepția de recompensă sensibilizată la d-amfetamina la animale experimentate sexual (Pitchers și colab., 2009). Un răspuns similar a fost observat anterior cu expunerea repetată la amfetamină sau alte medicamente de abuz (Lett, 1989, Shippenberg și Heidbreder, 1995, Shippenberg și colab., 1996, Vanderschuren și Kalivas, 2000). Împreună, aceste constatări sugerează că comportamentul sexual și răspunsurile la medicamente de abuz sunt mediate de aceiași neuroni în sistemul mezolimbic. Prin urmare, primul obiectiv al studiului prezent este de a investiga activarea neuronală a sistemului mezolimbic prin comportamentul sexual și administrarea medicamentului la același animal. În particular, am testat ipoteza că psihostimulantul, metamfetamina (Meth), acționează direct asupra neuronilor care în mod normal mediază comportamentul sexual.

Metamfetamina este unul dintre cele mai consumate droguri ilicite din lume (NIDA, 2006, Ellkashef și colab., 2008 ) și a fost frecvent asociată cu alterarea comportamentului sexual. Interesant este că utilizatorii de metamfetamină raportează o dorință și o excitație sexuală sporite, precum și o plăcere sexuală sporită ( Semple și colab., 2002 , Schilder și colab., 2005 ). Mai mult, abuzul de metamfetamină este frecvent asociat cu un comportament sexual compulsiv ( Rawson și colab., 2002 ). Utilizatorii raportează adesea că au numeroși parteneri sexuali și sunt mai puțin predispuși să utilizeze protecție decât alți consumatori de droguri ( Somlai și colab., 2003 , Springer și colab., 2007 ). Din păcate, studiile care indică utilizarea metamfetaminei ca predictor al comportamentului sexual cu risc sunt limitate, deoarece se bazează pe auto-rapoarte neconfirmate ( Elifson și colab., 2006 ). Prin urmare, este necesară o investigație a bazei celulare a modificărilor comportamentului sexual induse de metamfetamină la un model animal pentru înțelegerea acestei legături complexe dintre droguri și sex.

Având în vedere dovezile prezentate mai sus care sugerează că drogurile de abuz, și în special metamfetamina, pot acționa asupra neuronilor implicați în mod normal în medierea comportamentului sexual, obiectivul prezentului studiu a fost de a investiga activarea neuronală prin comportamentul sexual și administrarea psihostimulantului metamfetamină . Acest studiu a implementat o tehnică neuroanatomică, utilizând vizualizarea imunohistochimică a genelor timpurii imediate Fos și a Map kinazei fosforilate (pERK) pentru a detecta activarea neuronală concomitentă prin comportamentul sexual și, respectiv, metamfetamină. Fos este exprimat doar în nucleul celulelor, cu un nivel maxim de expresie la 30-90 de minute după activarea neuronului. Există dovezi ample că activitatea sexuală induce expresia Fos în creier ( Pfaus și Heeb, 1997 , Veening și Coolen, 1998 ), inclusiv în sistemul mezocorticolimbic ( Robertson și colab., 1991 , Balfour și colab., 2004 ). Există, de asemenea, dovezi că drogurile utilizate în abuz induc expresia pERK în sistemul mezocorticolimbic ( Valjent și colab., 2000 , Valjent și colab., 2004 , Valjent și colab., 2005 ). Spre deosebire de expresia Fos, fosforilarea ERK este un proces extrem de dinamic și are loc doar la 5-20 de minute după activarea neuronală. Profilurile temporale distincte ale Fos și pERK le fac un set ideal de markeri pentru activarea neuronală ulterioară prin doi stimuli diferiți.

PROCEDURI EXPERIMENTALE

Subiecții

Șobolanii Sprague Dawley masculi adulți (210–225 g) obținuți de la Charles River Laboratories (Montreal, QC, Canada) au fost adăpostiți câte doi per cușcă în cuști standard din plexiglas (cuști de uz casnic). Camera pentru animale a fost menținută la un ciclu de lumină inversată de 12/12 ore (luminile se sting la ora 10:00). Hrana și apa au fost disponibile ad libitum. Toate testele au fost efectuate în prima jumătate a fazei de întuneric, sub iluminare roșie slabă. Femelele stimulente utilizate pentru comportament sexual au fost ovariectomizate bilateral sub anestezie profundă (13 mg/kg ketamină și 87 mg/kg xilazină) și au primit un implant subcutanat conținând 5% benzoat de estradiol (EB) și 95% colesterol. Receptivitatea sexuală a fost indusă prin administrarea subcutanată (s.c.) a 500 μg progesteron în 0.1 ml ulei de susan cu 4 ore înainte de testare. Toate procedurile au fost aprobate de Comitetul pentru Îngrijirea Animalelor de la Universitatea din Western Ontario și sunt conforme cu liniile directoare stabilite de Consiliul Canadian pentru Îngrijirea Animalelor.

Proiecte experimentale

Experimentele 1 și 2: Șobolanii masculi (n=37) au fost lăsați să se împerecheze cu o femelă receptivă la o singură ejaculare (E) sau timp de 30 de minute, oricare dintre acestea a survenit prima, în cuști de testare curate (60 × 45 × 50 cm) pe parcursul a cinci sesiuni de împerechere pre-test, de două ori pe săptămână, pentru a dobândi experiență sexuală. În timpul ultimelor două sesiuni, au fost înregistrați toți parametrii standard pentru performanța sexuală, inclusiv: latența la montare (ML; timpul de la introducerea femelei până la prima montare), latența intromisiei (IL; timpul de la introducerea femelei până la prima montare cu penetrare vaginală), latența ejaculării (EL; timpul de la prima intromisie până la ejaculare), intervalul post-ejaculare (PEI; timpul de la ejaculare până la prima intromisie ulterioară), numărul de montare (M) și numărul de intromisii (IM) ( Agmo, 1997 ). Toți masculii au primit o injecție zilnică de 1 ml/kg de NaCl 0.9% (soluție salină; sc) cu 3 zile consecutive înainte de ziua testului, pentru obișnuirea cu manipularea și injecțiile. Cu o zi înainte de ziua testului, toți masculii au fost adăpostiți individual. La masculii experimentați, Fos poate fi indus prin indicii contextuale condiționate asociate cu experiența sexuală anterioară ( Balfour și colab., 2004 ). Prin urmare, toate manipulările de împerechere și control din timpul testelor finale au fost efectuate în cușca lor (evitând indiciile condiționate predictive) pentru a preveni activarea indusă de indicii condiționate la masculii de control neîmperecheați. Masculii au fost distribuiți în opt grupuri experimentale care nu au diferit în nicio măsură a performanței sexuale în timpul ultimelor două sesiuni de împerechere (datele nu sunt prezentate). În timpul testului final, masculii fie au fost lăsați să se împerecheze în cușca lor până când au manifestat o ejaculare (sex), fie nu au primit parteneră feminină (fără sex). Toți masculii împerecheați au fost perfuzați la 60 de minute după începerea împerecherii pentru a permite analiza expresiei Fos induse de împerechere. Masculii au primit o injecție cu 4 mg/kg metamfetamină sau 1 ml/kg soluție salină (s.c.) (n=4 fiecare), fie cu 10 (experimentul 1), fie cu 15 (experimentul 2) minute înainte de perfuzie, pentru analiza fosforilării kinazei MAP induse de medicamente. Doza și timpul înainte de perfuzie s-au bazat pe rapoarte anterioare ( Choe și colab., 2002 , Choe și Wang, 2002 , Chen și Chen, 2004 , Mizoguchi și colab., 2004, Ishikawa și colab., 2006 ). Grupurile de control au inclus masculi care nu s-au împerecheat, dar au primit metamfetamină cu 10 (n=7) sau 15 (n=5) minute înainte de sacrificare sau injecții cu soluție salină cu 10 (n=5) sau 15 (n=4) minute înainte de sacrificare. După sacrificare, creierele au fost procesate pentru imunohistochimie.

Experiment 3: Întrucât o doză mare de Meth a fost utilizată în experimentele 1 și 2, a fost efectuat un experiment neuroanatomic suplimentar pentru a investiga dacă comportamentul sexual și o doză mai mică de Meth induc modele dependente de doză de activare neuronală suprapusă. Acest studiu a fost realizat într-o manieră identică cu cea a experimentelor 1 și 2. Cu toate acestea, la testul final, grupurile îmbogățite și neamestecate (n = 6 fiecare) au primit 1 mg / kg Meth (sc) 15 min înainte de sacrificare.

Experimentul 4: Pentru a testa dacă activarea neuronală cauzată de sex și metamfetamină este specifică pentru metamfetamină, acest experiment a investigat dacă modele similare de activare neuronală suprapusă ar putea fi observate în cazul psihostimulantului d-amfetamină (Amph). Acest experiment a fost efectuat în mod identic ca experimentele 1 și 2. Cu toate acestea, în testul final, masculilor li s-a administrat fie Amph (5 mg/kg), fie soluție salină (1 mg/kg) (sc) cu 15 minute înainte de sacrificare (n = 5 fiecare). Masculii neîmperecheați din grupul de control au primit soluție salină sau Amph cu 15 minute înainte de sacrificare. O prezentare generală a grupurilor experimentale utilizate în experimentele 1-4 este prezentată în Tabelul 1.

Tabelul 1      

Prezentare generală a grupurilor experimentale incluse în experimente 1-4.

Pregătirea țesuturilor

Animalele au fost anesteziate cu pentobarbital (270 mg / kg; ip) și perfuzate transcardial cu 5 ml de soluție salină urmată de 500 ml 4% paraformaldehidă în tampon fosfat 0.1 M (PB). Creierele au fost îndepărtate și post-fixate pentru 1 h la temperatura camerei în același agent de fixare, apoi au fost imersate în 20% zaharoză și 0.01% azidă de sodiu în 0.1 M PB și depozitate la 4 ° C. Secțiunile coronale (35 μm) au fost tăiate pe un microtome de congelare (H400R, Micron, Germania), colectate în patru serii paralele în soluție de crioprotector (30% zaharoză și 30% etilenglicol în 0.1 M PB) și depozitate la 20 ° C prelucrare.

imunohistochimie

Toate incubările au fost efectuate la temperatura camerei cu agitare ușoară. Secțiunile plutitoare au fost spălate extensiv cu soluție salină tamponată cu fosfat (PBS) 0.1 M între incubări. Secțiunile au fost incubate în 1% H₂O₂ timp de 10 minute, apoi blocate în soluție de incubare (PBS conținând 0.1% albumină serică bovină și 0.4% Triton X-100) timp de 1 oră.

Perk / Fos

Țesutul a fost incubat peste noapte cu un anticorp policlonal de iepure împotriva kinazelor map p42 și p44 ERK1 și ERK2 (pERK; 1:400 experiment 1 lot 19; 1:4.000 experiment 2 și 3 lot 21; Cell Signaling Cat # 9101;), urmat de o incubare de 1 oră cu IgG biotinilat de măgar anti-iepure (1:500; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) și complex avidină-peroxidază de hrean (ABC Elite; 1:1000; Vector Laboratories, Burlingame, CA). Apoi, țesutul a fost incubat timp de 10 minute cu tiramidă biotinilată (BT; 1:250 în PBS + 0.003% H₂O₂ ; Tyramid Signal Amplification Kit, NEN Life Sciences, Boston, MA) și timp de 30 de minute cu strepavidină conjugată cu Alexa 488 (1 : 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). În continuare, țesutul a fost incubat peste noapte cu un anticorp policlonal de iepure împotriva c-Fos (1:500; SC-52; Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), urmat de o incubare de 30 de minute cu anticorp de capră anti-iepure Alexa 555 (1:200; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). După colorare, secțiunile au fost spălate bine în PB 0.1 M, montate pe lame de sticlă cu gelatină 0.3% în ddH 2 0 și acoperite cu un mediu de montare apos (Gelvatol) conținând agentul anti-decolorare 1,4-diazabiciclo(2,2)octan (DABCO; 50 mg/ml, Sigma-Aldrich, St. Louis, MO). Controalele imunohistochimice au inclus omiterea unuia sau a ambilor anticorpi primari, rezultând absența marcării la lungimea de undă corespunzătoare.

Analiza datelor

Comportamentul sexual

Pentru toate cele patru experimente, parametrii standardi pentru performanța sexuală au fost înregistrați așa cum s-a descris mai sus și s-au analizat utilizând analiza varianței (ANOVA). Analiza datelor privind comportamentul sexual în timpul zilei de testare finală nu a evidențiat diferențe semnificative între grupuri în niciunul dintre parametrii performanței sexuale.

pERK / Fos Cell Counts

Celulele marcate simplu și dual pentru Fos și pERK au fost numărate în nivelurile caudale ale subregiunilor nucleu și înveliș NAc, amigdalei bazolaterale (BLA), amigdalei mediale posterodorsale (MEApd), amigdalei centrale (CeA), nucleului preoptic medial (MPN), nucleului patului posteromedial și posterolateral al striei terminale (BNSTpm și BNSTpl) și subregiunile zonei cingulare anterioare (ACA), prelimbice (PL) și infralimbice (IL) ale mPFC. Imaginile au fost capturate folosind o cameră CCD răcită (Microfire, Optronics) atașată la un microscop Leica (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Germania) și software-ul Neurolucida (MicroBrightfield Inc) cu setări fixe ale camerei pentru toți subiecții (folosind obiective 10x). Folosind software-ul neurolucida, zonele de analiză au fost definite pe baza unor repere ( Swanson, 1998 ) unice pentru fiecare regiune a creierului (vezi Figura 1 ). Zonele standard de analiză au fost utilizate în toate zonele, cu excepția nucleului și învelișului NAc. În aceste din urmă zone, expresia pERK și Fos nu a fost omogenă și a apărut în modele asemănătoare petelor. Prin urmare, întregul nucleu și înveliș au fost conturate pe baza reperelor (ventriculul lateral, comisura anterioară și insulele Calleja). Zonele de analiză nu au diferit între grupurile experimentale și au fost de 1.3 mm² în nucleul și învelișul NAc. Zonele standard de analiză pentru zonele rămase au fost: 1.6 mm² în BLA, 2.5 și 2.25 mm² în MEApd și respectiv CeA, 1.0 mm² în MPN, 1.25 mm² în subregiunile BNST și mPFC și 3.15 mm² în VTA. Două secțiuni au fost numărate bilateral pentru fiecare regiune a creierului per animal și s-au calculat numărul de celule marcate simplu și dual pentru pERK și Fos, precum și procentele de celule pERK care au exprimat markerul Fos. Pentru experimentele 1, 2 și 4, mediile grupurilor au fost comparate folosind ANOVA cu două căi (factori: împerechere și droguri) și Fisher's LSD pentru comparații post-hoc la un nivel de semnificație de 0.05. Pentru experimentul 3, mediile grupurilor au fost comparate folosind teste t nepereche la un nivel de semnificație de 0.05.

Figura 1      

Scheme schematice și imagini care ilustrează zonele creierului de analiză. Domeniile de analiză indicate s-au bazat pe repere unice pentru fiecare regiune a creierului, nu diferă între grupurile experimentale și au fost 1.25 mm2 în subregiunile mPFC (a), 1.3 mm2 în ...

imagini

Imaginile digitale pentru Figura 3 au fost capturate folosind o cameră CCD (DFC 340FX, Leica) atașată la un microscop Leica (DM500B) și au fost importate în software-ul Adobe Photoshop 9.0 (Adobe Systems, San Jose, CA). Imaginile nu au fost modificate în niciun fel, cu excepția ajustării luminozității.

Figura 3      

Imaginile reprezentative ale secțiunilor NAc imunozălțate pentru Fos (roșu, a, d, g, j) și pERK (verde, b, e, h, k) de animale din fiecare grup experimental: , Sex + Sal (d, e, f), Fără Sex + Meth (g, h, i) și Sex + Meth (j, k, l). Panourile dreapta sunt ...

REZULTATE

Activarea neuronală a sistemului limbic prin comportamentul sexual și administrarea metalelor

Experimentul 1: Analiza celulelor marcate simplu și dual pentru Fos indus de împerechere și pERK indus de metamfetamină la masculii care au primit metamfetamină cu 10 minute înainte de sacrificare a relevat Fos indus de împerechere în MPN, BNSTpm, miezul și învelișul NAc, BLA, VTA și toate subregiunile mPFC, în concordanță cu studiile anterioare care demonstrează expresia Fos indusă de împerechere în aceste zone ( Baum și Everitt, 1992 , Pfaus și Heeb, 1997 , Veening și Coolen, 1998 , Hull și colab., 1999 ). Administrarea de metamfetamină cu 10 minute înainte de sacrificare a indus pERK în miezul și învelișul NAc, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl și regiunile mPFC, în concordanță cu modelele de activare induse de alți psihostimulanți ( Valjent și colab., 2000 , Valjent și colab., 2004 , Valjent și colab., 2005 ).

Mai mult, au fost observate trei modele de co-exprimare a activării neuronale prin comportament sexual și metamfetamină: în primul rând, au fost identificate zone ale creierului unde sexul și drogurile au activat populații neuronale care nu se suprapun ( Tabelul 2 ). Mai exact, în CeA, MEApd, BNSTpl și mPFC, s-au observat creșteri semnificative atât ale pERK indus de medicamente (F(1,16) = 7.39–48.8; p = 0.015- < 0.001), cât și ale Fos indus de sex (F(1,16) = 16.53–158.83; p < 0.001). Cu toate acestea, în aceste regiuni nu au existat creșteri semnificative ale neuronilor marcați dual la masculii tratați cu metamfetamină împerecheați. Singura excepție a fost MEApd, unde s-a constatat un efect al împerecherii asupra numărului de celule marcate dual (F(1,16) = 9.991; p = 0.006). Cu toate acestea, nu a existat un efect general al tratamentului medicamentos, iar marcarea duală în grupurile tratate cu metamfetamină nu a fost semnificativ mai mare decât în ​​grupurile tratate cu soluție salină, prin urmare nu a fost cauzată de medicament ( Tabelul 2 ). În al doilea rând, au fost identificate zone ale creierului în care activarea neuronală a fost indusă doar prin împerechere ( Tabelul 3 ). Mai exact, MPN, BNSTpm și VTA au fost activate doar prin împerechere și au prezentat creșteri semnificative ale Fos indus de împerechere (F(1,16) = 14.99–248.99; p ≤ 0.001), dar nu și pERK indus de metamfetamină.

Tabelul 2      

Privire de ansamblu asupra expresiei PERK induse de imperechere și Meth induse în zonele cerebrale unde sexul și medicamentele activează populațiile neuronale care nu se suprapun.
Tabelul 3      

Privire de ansamblu asupra exprimării PERK indusă de Fos și Meth induse în zonele creierului în care activarea neuronală a fost indusă doar prin împerechere.

În cele din urmă, au fost găsite zone ale creierului în care sexul și drogurile au activat populații suprapuse de neuroni ( Figura 2 și 3 ). În nucleul și învelișul NAc, BLA și ACA, au existat efecte generale ale împerecherii (F(1,16) = 7.87–48.43; p = 0.013-<0.001) și tratamentului medicamentos (F(1,16) = 6.39–52.68; p = 0.022-<0.001), precum și o interacțiune între acești doi factori (F(1,16) = 5.082–47.27; p = 0.04-<0.001; nicio interacțiune semnificativă în ACA) asupra numărului de celule care exprimă atât Fos indus de împerechere, cât și pERK indus de metamfetamină. Analiza post-hoc a relevat că numărul de neuroni marcați dual a fost semnificativ mai mare la masculii împerecheați injectați cu metamfetamină, comparativ cu masculii neîmperecheați tratați cu metamfetamină (p=0.027-<0.001) sau cu masculii împerecheați tratați cu soluție salină (p=0.001-<0.001) ( Figura 2 și 3) . Când datele au fost exprimate ca procente de neuroni activați de medicament, 39.2 ± 5.3% în miezul NAc, 39.2 ± 5.8% în învelișul NAc, 40.9 ± 6.3% în BLA și 50.0 ± 5.3% dintre neuronii ACA au fost activați atât prin împerechere, cât și prin metamfetamină.

Figura 2      

Sexul indus Fos și expresia pERK indusă de Meth în NAc, BLA și ACA neuronii 10 min după administrarea de 4 mg / kg Meth. Numerele medii ± sem de celule marcate cu Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) și dublu (c, f, i, l) ...

O observație neașteptată a fost că, în cazul comportamentului sexual, nivelul pERK indus de metamfetamină a fost influențat de pERK. Deși metamfetamina a indus semnificativ nivelurile de pERK atât la masculii injectați cu metamfetamină, cât și la cei neîmperecheați, în cazul NAc, BLA și ACA, marcarea cu pERK a fost semnificativ mai mică la masculii injectați cu metamfetamină, comparativ cu masculii neîmperecheați, injectați cu metamfetamină ( Figura 2b, e, h, k ; p=0.017-<0.001). Această constatare poate susține în continuare ipoteza că sexul și drogurile acționează asupra acelorași neuroni, dar poate indica și modificări induse de împerechere în absorbția sau metabolismul medicamentelor, care, la rândul lor, provoacă răspunsuri neuronale alterate la metamfetamină. Pentru a investiga dacă comportamentul sexual provoacă un model temporal diferit de activare indusă de medicamente, secțiuni din NAc, BLA și ACA au fost colorate pentru masculii sacrificați la un moment ulterior (15 minute) după administrarea medicamentului (experimentul 2).

Experimentul 2: Analiza celulelor marcate simplu și dual a confirmat descoperirile descrise mai sus, conform cărora comportamentul sexual și expunerea ulterioară la metamfetamină cu 15 minute înainte de sacrificare au dus la creșteri semnificative ale imunomarcării cu Fos și pERK în miezul și învelișul NAc, BLA și ACA. În plus, s-a constatat din nou o co-exprimare semnificativă a Fos indus de împerechere și a pERK indus de metamfetamină în aceste zone ( Figura 4 ; efect de împerechere: F(1,12)=15.93–76.62; p=0.002-<0.001; efectul medicamentului: F(1,12)=14.11–54.41; p=0.003-<0.001). Numărul de neuroni marcați dual la masculii împerecheați injectați cu metamfetamină a fost semnificativ mai mare în comparație cu masculii neîmperecheați tratați cu metamfetamină (p<0.001) sau tratați cu soluție salină (p<0.001). Când datele au fost exprimate ca procente de neuroni activați de medicamente, 47.2 ± 5.4% (nucleul NAc), 42.7 ± 7.6% (învelișul NAc), 36.7 ± 3.7% (BLA) și 59.5 ± 5.1% (ACA) dintre neuronii activați prin împerechere au fost, de asemenea, activați de Meth. Mai mult, pERK indus de medicamente nu a diferit între animalele împerecheate și cele neîmperecheate ( Figura 4b, e, h, k ), în toate zonele, cu excepția ACA (p<0.001). Aceste date indică faptul că, într-adevăr, comportamentul sexual provoacă o modificare a modelului temporal al inducerii pERK de către Meth.

Figura 4      

Sexul indus Fos și expresia pERK indusă de Meth în NAc, BLA și ACA neuronii 15 min după administrarea de 4 mg / kg Meth. Numerele medii ± sem de celule marcate cu Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) și dublu (c, f, i, l) ...

Activarea neuronală după comportamentul sexual și 1 mg / kg Meth

Până în prezent, rezultatele au arătat că administrarea de metamfetamină în doze de 4 mg/kg a substanței respective a activat populații suprapuse de neuroni în nucleul și învelișul NAc, BLA și ACA. Pentru a investiga influența dozei de medicament asupra acestei suprapuneri de activare, au fost studiate și modelele de activare neuronală utilizând o doză mai mică de metamfetamină. Nucleul și învelișul NAc, BLA și ACA au fost analizate pentru activarea indusă de sex și metamfetamină. Într-adevăr, comportamentul sexual și expunerea ulterioară la metamfetamină au dus la creșteri semnificative ale imunomarcării cu Fos și pERK în subregiunile nucleului și învelișului NAc, BLA, precum și în neuronii din regiunea ACA a celulelor prefrontale m ( Figura 5 ). Interesant este că doza mai mică de metamfetamină a dus la un număr similar de neuroni marcați cu pERK ca cei induși de administrarea de 4 mg/kg de metamfetamină în cele patru regiuni ale creierului analizate. Mai important, nucleul și învelișul NAc, BLA și ACA au prezentat creșteri semnificative ale numărului de celule marcate dual ( Figura 5c, f, i, l ) în comparație cu masculii neîmperecheați injectați cu metamfetamină (p=0.003-<0.001). Când datele au fost exprimate ca procente de neuroni activați de medicament, 21.1 ± 0.9% și 20.4 ± 1.8% în nucleul și învelișul NAc, respectiv 41.9 ± 3.9% în BLA și 49.8 ± 0.8% dintre neuronii ACA au fost activați de sex și metamfetamină.

Figura 5      

Sexul indus Fos și expresia pERK indusă de Meth în NAc, BLA și ACA neuronii 15 min după administrarea de 1 mg / kg Meth. Numerele medii ± sem de celule marcate cu Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) și dublu (c, f, i, l) ...

Activarea neuronală după comportamentul sexual și administrarea d-amfetaminei

Pentru a testa dacă rezultatele de mai sus erau specifice pentru Meth, a fost efectuat un experiment suplimentar pentru a studia activarea neuronală indusă de împerechere și de Amph. Analiza celulelor marcate simplu și dual pentru pERK și Fos a arătat că comportamentul sexual și expunerea ulterioară la Amph au dus la creșteri semnificative ale imunomarcării Fos și pERK în miezul și învelișul NAc și BLA ( Figura 6 ; efect de împerechere: F(1,15)=7.38–69.71; p=0.016-<0.001; efectul medicamentului: F(1,15)=4.70–46.01; p=0.047-<0.001). Mai mult, numărul de neuroni marcați dual a fost semnificativ mai mare la masculii tratați cu Amph împerecheați comparativ cu masculii netratați cu Amph (p=0.009-<0.001) sau tratați cu soluție salină împerecheați (p=0.015-<0.001) ( Figura 6c, f, i ). Când datele au fost exprimate ca procente de neuroni activați de medicamente, 25.7 ± 2.8% și 18.0 ± 3.2% în miezul și învelișul NAc, respectiv 31.4 ± 2.0% dintre neuronii BLA au fost activați atât prin împerechere, cât și prin Amph. Regiunea ACA a mPFC a prezentat niveluri semnificative de Fos indus de împerechere ( Figura 6j ; F(1,15)=168.51; p<0.001). Cu toate acestea, spre deosebire de Meth, Amph nu a dus la creșteri semnificative ale nivelurilor de pERK induse de medicamente în ACA ( Figura 6k ) sau ale numărului de neuroni marcați dual în ACA ( Figura 6l ) în comparație cu masculii injectați cu soluție salină, atât împerecheați, cât și neîmperecheați.

Figura 6      

Sexul indus de Fos și expresia pERK indusă de amf în NAc, BLA și ACA neuronii 15 min după administrarea de 5 mg / kg Amph. Numerele medii ± sem de celule marcate cu Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) și dublu (c, f, i, l) ...

DISCUŢIE

Studiul actual demonstrează la nivel celular o suprapunere între activarea neuronală prin comportamentul sexual de întărire naturală și psihostimulantul Meth. Prin urmare, aceste date arată că nu numai medicamentele acționează pe aceleași regiuni ale creierului care reglementează recompensa naturală, dar, de fapt, medicamentele activează aceleași celule implicate în reglarea recompensei naturale. În mod specific, sa arătat aici că comportamentul sexual și Meth au activat o populație de neuroni în nucleul NAc și coajă, BLA și ACA din mPFC, identificând potențialele locații în care Meth ar putea influența comportamentul sexual.

Constatarea actuală că comportamentul sexual și administrarea Meth activează suprapunerea populațiilor de neuroni în NAc, BLA și ACA este în contrast cu constatările din alte studii care arată că diferite populații de neuroni NAc codifică droguri și recompense naturale.

Mai exact, studiile electrofiziologice care au comparat activarea neuronală în timpul autoadministrării recompenselor naturale (hrană și apă) și a cocainei administrate intravenos au indicat faptul că autoadministrarea cocainei a activat o populație diferențială, nesuprapusă, de neuroni, care, în general, nu a răspuns în timpul răspunsului operant pentru întărirea cu apă și hrană (92%). Doar 8% dintre neuronii acumulați au prezentat activare atât prin cocaină, cât și prin recompensa naturală ( Carelli et al., 2000 ).

În schimb, majoritatea (65%) celulelor din NAc au prezentat activare prin diferite recompense naturale (hrană și apă), chiar dacă un stimulent a fost mai plăcut la gust (zaharoză) ( Roop și colab., 2002 ).

Mai mulți factori au contribuit la discrepanța cu rezultatele curente. În primul rând, diferite abordări tehnice au fost folosite pentru a investiga activitatea neuronală. Studiul actual a utilizat o metodă neuroanatomică pentru detectarea activării neuronale concomitente prin doi stimuli diferiți utilizând imunocytochemie fluorescentă duală pentru Fos și pERK, permițând investigarea activării unice a celulelor pe spații mari ale spațiilor creierului. În contrast, studiile efectuate de Carelli și colaboratorii au utilizat înregistrări electrofiziologice restricționate la NAc de comportament al animalelor pentru a se adresa dacă autoadministrarea drogurilor de abuz activează aceleași circuite neuronale utilizate de recompensele naturale.

În al doilea rând, studiul actual a investigat o recompensă naturală diferită, și anume comportamentul sexual, în comparație cu studiile anterioare, care au utilizat hrană și apă la șobolani cu dietă restricționată ( Carelli, 2000 ). Hrana și apa ar putea avea o valoare recompensatoare mai mică decât împerecherea. Comportamentul sexual este foarte recompensator, iar șobolanii formează ușor CPP pentru copulație ( Agmo și Berenfeld, 1990 , Martinez și Paredes, 2001 , Tenk, 2008 ). Deși șobolanii cu dietă restricționată formează CPP pentru apă ( Agmo și colab., 1993 , Perks și Clifton, 1997 ) și hrană ( Perks și Clifton, 1997 ), șobolanii cu dietă nerestricționată consumă și formează de preferință CPP pentru alimente mai gustoase ( Jarosz și colab., 2006 , Jarosz și colab., 2007 ).

În al treilea rând, studiile noastre au inclus diferite droguri de abuz în comparație cu studiile anterioare, utilizând metamfetamină și amfetamină în loc de cocaină . Rezultatele actuale demonstrează că în mod specific metamfetamina și, într-o măsură mai mică, amfetamina, au dus la activarea neuronilor activați și de comportamentul sexual. Experiența legată de consumul de droguri ar fi putut juca, de asemenea, un rol în descoperirile noastre. Studiile actuale au utilizat animale care aveau experiență sexuală, dar neavizate la consumul de droguri. În schimb, studiile electrofiziologice ale lui Carelli și colegilor săi au folosit animale „bine antrenate” care au fost expuse repetat la cocaină.

Prin urmare, este posibil ca activarea neuronilor activați de comportamentul sexual indusă de metamfetamină să fie modificată la șobolanii experimentați cu droguri. Cu toate acestea, studiile preliminare din laboratorul nostru sugerează că este puțin probabil ca experiența cu drogurile să fie un factor major, deoarece comportamentul sexual și tratamentul cu metamfetamină la masculii tratați cronic cu metamfetamină au co-activat procente similare de neuroni activați de droguri, așa cum s-a raportat în studiul actual (20.3 ± 2.5% în miezul NAc și 27.8 ± 1.3% în învelișul NAc; Frohmader și Coolen, observații nepublicate).

În cele din urmă, studiul actual a investigat acțiunea „directă” a drogurilor care utilizează administrarea pasivă. Prin urmare, analiza actuală nu dezvăluie informații privind circuitele neuronale implicate în căutarea drogurilor sau indiciile asociate cu recompensa produsă de droguri, ci mai degrabă dezvăluie activitatea neuronală cauzată de acțiunea farmacologică a drogului . În studiile electrofiziologice anterioare, activitatea neuronală NAc care apare în câteva secunde după răspunsurile întărite nu este rezultatul acțiunii farmacologice a cocainei, ci depinde în mare măsură de factorii asociativi din cadrul paradigmei de autoadministrare ( Carelli, 2000 , Carelli, 2002 ). Mai exact, activitatea neuronală NAc este influențată de prezentările independente de răspuns ale stimulilor asociați cu administrarea intravenoasă de cocaină, precum și de contingențele instrumentale (de exemplu, apăsarea pârghiei) inerente acestei paradigme comportamentale ( Carelli, 2000 , Carelli și Ijames, 2001 , Carelli, 2002 , Carelli și Wightman, 2004 ). În concluzie, descoperirile noastre privind co-activarea prin recompensa naturală și cea cauzată de droguri pot fi specifice activării prin comportament sexual și prin administrarea pasivă de metamfetamină și amfetamină.

Meth și sexul a activat suprapunerea populațiilor de neuroni în nucleul NAc și în cochilie într-o manieră dependentă de doză. Neuronii coactivi din NAc pot media potențialele efecte ale Meth asupra motivației și proprietăților de recompensare a comportamentului sexual, deoarece leziunile NAc perturbă comportamentul sexual (Liu și colab., 1998, Kippin și colab., 2004). În plus, acești neuroni sunt potențial un locus pentru efecte dependente de doză asupra dozei de împerechere, deoarece doza Meth mai mică (1 mg / kg) a redus numărul celulelor marcate dublu cu 50% comparativ cu doza mai mare de Meth (4 mg / kg). Deși acest studiu nu identifică fenotipul chimic al neuronilor coactivi, studiile anterioare au arătat că expresia pERK și Fos indusă de medicament în NAc depinde atât de receptorii dopaminici (DA) cât și de glutamat (Valjent și colab., 2000, Ferguson și colab., 2003, Valjent și colab., 2005, Sun și colab., 2008). Deși nu este clar dacă activarea neuronală indusă de împerechere în NAC este dependentă de acești receptori, acest lucru a fost demonstrat în alte regiuni ale creierului, în special în zona preoptică mediană (Lumley și Hull, 1999, Dominguez și colab., 2007). Thus, Meth poate acționa asupra neuronilor, de asemenea activat în timpul comportamentului sexual prin activarea receptorilor de dopamină și glutamat. Rolul glutamatului de NAc în comportamentul sexual este în prezent neclar, dar este bine stabilit că DA joacă un rol critic în motivarea comportamentului sexual (Hull și colab., 2002, Hull și colab., 2004, Pfaus, 2009). Studiile de microdializă au raportat creșteri ale efluxului de NAc DA în timpul fazelor apetitoare și consumatoare ale comportamentului sexual masculin (Fiorino și Phillips, 1999a, Lorrain și colab., 1999) și efluxul mesolimbic DA a fost corelat cu facilitarea inițierii și menținerii comportamentului sexual al șobolanilor (Pfaus și Everitt, 1995). Mai mult, studiile de manipulare DA arată că antagoniștii DA din NAc inhibă comportamentul sexual, în timp ce agoniștii facilitează inițierea comportamentului sexualr (Everitt și colab., 1989, Pfaus și Phillips, 1989). Astfel, Meth poate afecta motivația comportamentului sexual prin activarea receptorilor DA.

Spre deosebire de NAc, numărul celulelor dublu marcate în BLA și ACA a rămas relativ neschimbat, indiferent de doza Meth. BLA este critică pentru învățarea asociativă discretă și este puternic implicată în evaluarea condiționată și evaluarea recompensei în timpul răspunsului instrumental (Everitt și colab., 1999, Cardinal și colab., 2002, Vezi, 2002). Șobolanii cu leziuni BLA afișează presiunea scăzută a pârghiei pentru stimulentele condiționate asociate cu alimentele (Everitt și colab., 1989) sau armare sexuală (Everitt și colab., 1989, Everitt, 1990). În schimb, această manipulare nu afectează faza consumatoare a hrănirii și a comportamentului sexual (Cardinal și colab., 2002). BLA joacă, de asemenea, un rol cheie în memoria stimulilor condiționați asociate cu stimulii de droguri (Grace și Rosenkranz, 2002, Laviolette și Grace, 2006). Leziunile sau inactivările farmacologice ale BLA blochează achiziția (Whitelaw și colab., 1996) și expresie (Grimm și vezi, 2000) restabilirea condiționată a cocainei, fără a afecta procesul de administrare a medicamentului. În plus, Amph infuzat direct în BLA are ca rezultat o repornire potențială a medicamentului în prezența indiciilor condiționate (Vezi et al., 2003). Prin urmare, este posibil ca transmisia DA îmbunătățită de psihostimulant în BLA să aibă ca rezultat o saliență emoțională potențiată și căutarea (Ledford și colab., 2003) de recompensă sexuală, contribuind astfel la intensificarea mișcării sexuale și a dorinței raportate de către Meth abuzatori (Semple și colab., 2002, Verde și Halkitis, 2006).

În ACA, activarea neuronală a neuronilor activați sexual a fost independentă de doză și specifică pentru metamfetamină, deoarece nu a fost observată cu amfetamina. Deși metamfetamina și amfetamina au proprietăți structurale și farmacologice similare, metamfetamina este un psihostimulant mai puternic decât amfetamina, cu efecte de lungă durată (NIDA, 2006). Studiile efectuate de Goodwin și colab. au arătat că metamfetamina generează un eflux de dopamină (DA) mai mare și inhibă clearance-ul DA aplicat local mai eficient la acnidazole (NAc) la șobolan decât la amfetamina. Aceste caracteristici ar putea contribui la proprietățile de dependență ale metamfetaminei în comparație cu amfetamina ( Goodwin și colab., 2009 ) și poate la diferențele de activare neuronală observate între cele două medicamente. Cu toate acestea, nu este clar dacă diferitele modele de rezultate se datorează diferențelor de eficacitate dintre medicamente sau problemelor de potență legate de dozele utilizate și sunt necesare investigații suplimentare.

Co-activarea de către Meth și sexul nu a fost observată în alte subregiuni ale mPFC (IL și PL). La șobolan, ACA a fost extensiv studiată folosind sarcini apetitoare, sprijinind un rol în asociațiile de stimulare-întărire (Everitt și colab., 1999, Vezi, 2002, Cardinal și colab., 2003). Există dovezi ample că mPFC este implicat în pofta de droguri și recidiva la comportamentul care caută consumul de droguri și la consumul de droguri atât la oameni, cât și la șobolani (Grant și colab., 1996, Childress și colab., 1999, Capriles și colab., 2003, McLaughlin și See, 2003, Shaham și colab., 2003, Kalivas și Volkow, 2005). euîn conformitate cu aceasta, sa propus ca disfuncționalitatea mPFC cauzată de expunerea repetată la medicamente de abuz să poată fi responsabilă de controlul redus al impulsurilor și de comportamentul crescut al medicamentelor, așa cum se observă în multe persoane dependente (Jentsch și Taylor, 1999). Datele recente din laboratorul nostru au demonstrat că leziunile mPFC duc la continuarea căutării comportamentului sexual atunci când acest lucru a fost asociat cu un stimul aversiv (Davis și colab., 2003). Chiar dacă acest studiu nu a investigat ACA, susține ipoteza că mPFC (și ACA specific) mediază efectele Meth asupra unei pierderi a controlului inhibitor asupra comportamentului sexual, așa cum a fost raportat de Meth abusersSalo și colab., 2007).

În concluzie, împreună, aceste studii constituie un prim pas critic către o mai bună înțelegere a modului în care drogurile abuzive acționează asupra căilor neuronale care în mod normal mediază recompensele naturale. Mai mult, aceste constatări ilustrează faptul că, spre deosebire de convingerea actuală că medicamentele de abuz nu activează aceleași celule în sistemul mezolimbic ca și recompensa naturală, Meth și, într-o măsură mai mică, Amph, activează aceleași celule ca și comportamentul sexual. La rândul lor, aceste populații neurale co-activate pot influența căutarea unei recompense naturale după expunerea la medicament. În cele din urmă, rezultatele acestui studiu pot contribui în mod semnificativ la înțelegerea noastră a bazei dependenței în general. Comparațiile asemănărilor și diferențelor, precum și alterarea activării neuronale a sistemului mezolimbic provocată de comportamentul sexual față de droguri de abuz pot conduce la o mai bună înțelegere a abuzului de substanțe și a modificărilor asociate în răsplata naturală.

recunoasteri

Aceasta cercetare a fost sustinuta de subventii de la National Institutes of Health R01 DA014591 si Institutele canadiene de cercetare in domeniul sanatatii RN 014705 la LMC.

ABREVIERI

  • ABC
  • avidin-biotină-complex de peroxidază de hrean
  • ACA
  • zona anterioară cingulate
  • AMPH
  • d-amfetamină
  • BLA
  • amigdala bazolaterală
  • BNSTpl
  • nucleul patului posterolateral al stria terminalis
  • BNSTpm
  • patul posteromedial al stria terminalis
  • BT
  • tiramidă biotinilată
  • CeA
  • Amigdala centrală
  • CPP
  • condiția preferată a locului
  • E
  • ejaculare
  • EL
  • ejacularea latenta
  • IF
  • zona infralimbică
  • IL
  • latența intromisiei
  • IM
  • pătrundere
  • M
  • monta
  • MAP Kinase
  • proteina kinazică activată de mitogen
  • MEApd
  • posterodorsal medial amigdala
  • Meth
  • metamfetamina
  • ML
  • latență la montare
  • mPFC
  • cortexul prefrontal medial
  • MPN
  • nucleul preoptic medial
  • NAc
  • nucleul Accumbens
  • PB
  • Fosfat tampon
  • PBS
  • fosfat salin tamponat
  • PEI
  • post ejaculatory interval
  • Perk
  • fosforilat MAP kinază
  • PL
  • zona prelimbic
  • VTA
  • zona tegmentală ventrală

Note de subsol

Declinarea responsabilității editorului: Acesta este un fișier PDF al unui manuscris needitat care a fost acceptat pentru publicare. Ca serviciu pentru clienții noștri, oferim această versiune timpurie a manuscrisului. Manuscrisul va fi supus corecturii, tehnoredactării și revizuirii corecturii rezultate înainte de a fi publicat în forma sa finală, care poate fi citată. Vă rugăm să rețineți că în timpul procesului de producție pot fi descoperite erori care ar putea afecta conținutul, iar toate declinările de responsabilitate legale care se aplică revistei sunt valabile.

Referinte

  1. Agmo A. Comportamentul sexual al șobolanilor. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Proprietățile de întărire a ejacularii la șobolanii masculi: rolul opioidelor și al dopaminei. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Recompensa și armarea produsă de apa potabilă: Rolul opioidelor și al subtipurilor receptorilor de dopamină. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Comportamentul sexual și indicatorii de mediu asociați sexului activează sistemul mezolimbic la șobolanii masculi. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Creșterea expresiei c-fos în zona preoptică mediană după împerechere la șobolanii masculi: Rolul inputurilor aferente din domeniul tegumentului central al amigdalei și al midbrainului central. Neuroscience. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Un rol al cortexului prefrontal în restabilirea indusă de stres și cocaina a căutării de cocaină la șobolani. Psihofarmacologie (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Cardinalul RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Emoție și motivație: rolul amigdalei, striatului ventral și al cortexului prefrontal. Neuroștiințe și recenzii bio-comportamentale. 2002; 26: 321-352. [PubMed]
  8. Cardinalul RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Rolul cortexului cingular anterior în controlul asupra comportamentului de către stimulii condiționați Pavlovian la șobolani. Neuroștiințe comportamentale. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Activarea arderii celulelor accumbens prin stimulente asociate cu administrarea de cocaină în timpul autoadministrării. Synapse. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleul accumbens declanșarea celulelor în timpul comportamentelor îndreptate spre obiectiv pentru cocaină vs. întărire „naturală”. Fiziologie și comportament. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Activarea selectivă a neuronilor accumbens de către stimulii asociați cu cocaină în timpul unui program multiplu de apă / cocaină. Cercetarea creierului. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Dovada că circuitele neuronale separate în nucleul accumbens codifică cocaina față de recompensa "naturală" (apă și hrană). J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Microcircuitul funcțional în accumbens care stă la baza dependenței de droguri: informații despre semnalarea în timp real în timpul comportamentului. Opinia curentă în neurobiologie. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Codificarea selectivă a cocainei față de recompensele naturale de către neuronii nucleului accumbens nu este legată de expunerea cronică la medicament. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Răspunsurile neuronale în cortexul prefrontal și nucleul accumbens în timpul administrării heroinei la șobolanii care se mișcă liber. Brain Res. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Cocaina, dar nu Natural Reward Self-Administration și pasivă Cocaine Infusion produce LTP persistent în VTA. Neuron. 2008; 59: 288-297. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Activitatea Cdk5 îmbunătățită și translocarea p35 în Striatum ventral al șobolanilor tratați cu metamfetamină acută și cronică. Neuropsychopharmacology. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Activarea lingvistică în timpul poftei induse de cocaina. Am J Psihiatrie. 1999; 156: 11-18. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamina mărește fosforilarea factorilor kinazei și a factorilor de transcripție reglați prin semnal extracelular în striatum de șobolan prin intermediul receptorilor metabotropici de glutamat de grup I. Neuropsychopharmacology. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII reglează fosforilarea ERK1 / 2 indusă de amfetamină în neuronii striatali. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Societatea de neuroendocrinologie comportamentală. Voi. 44. Cincinnati, Ohio: Hormoni și comportament; 2003. Leziunile cortexului prefrontal medial nu distrug comportamentul sexual la șobolanii de sex masculin; p. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Medicamentele abuzate de oameni cresc preferențial concentrațiile de dopamină sinaptică în sistemul mesolimbic al șobolanilor în mișcare liberă. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1988; 85: 5274-5278. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Împerecherea activează receptorii NMDA în zona preoptică mediană a șobolanilor masculi. Neuroștiințe comportamentale. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Predictorii de riscuri sexuale în rândul noilor consumatori de droguri. Jurnal de cercetare sexuală. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmacoterapia dependenței de metamfetamină: O actualizare. Abuz de substante. 2008; 29: 31-49. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Motivația sexuală: o analiză neurală și comportamentală a mecanismelor care stau la baza răspunsurilor apetitoare și copulative ale șobolanilor de sex masculin. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interactiuni intre amigdala si striatum ventral in asociatii de stimulare-recompensa: Studii folosind un program de ordinul doi de armare sexuala. Neuroscience. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Studii de comportament instrumental cu armare sexuală la șobolanii masculi (Rattus norvegicus): I. Controlul prin stimulente vizuale scurte asociate cu o femeie receptivă. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Procesele asociative în dependență și recompensa rolul subsistemelor Striatale Amygdala-Ventral. Analele Academiei de Științe din New York. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Studii de comportament instrumental cu armare sexuală la șobolani masculi (Rattus norvegicus): II. Efectele leziunilor din zona preoptică, castrarea și testosteronul. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, vezi RE. Neurocircuitul dependenței: o imagine de ansamblu. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Exprimarea mRNA c-fos evocată de amfetamină în caudate-putamen: efectele antagoniștilor receptorilor DA și NMDA variază ca o funcție a fenotipului neuronal și a contextului de mediu. Jurnalul de Neurochimie. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Modificări dinamice ale fluxului de dopamină nucleus accumbens în timpul efectului Coolidge la șobolanii masculi. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitarea comportamentului sexual și îmbunătățirea efluxului de dopamină în celulele nucleare de șobolani masculi după sensibilizarea comportamentală indusă de D-amfetamină. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitarea comportamentului sexual la șobolanii masculi după sensibilizarea comportamentală indusă de d-amfetamină. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamina și metamfetamina afectează diferențial transportatorii de dopamină in vitro și in vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978-2989. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Reglarea răspunsurilor condiționate ale neuronilor amigdali bazolaterali. Fiziologie și comportament. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, Londra ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Activarea circuitelor de memorie în timpul poftei de cocaină provocată de băutură. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1996; 93: 12040-12045. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  39. AI verde, Halkitis PN. Metamfetamină de cristal și socialitate sexuală într-o subcultură gay urbană: o afinitate electivă. Cultură, sănătate și sexualitate. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, vezi RE. Disocierea nucleelor ​​limbice primare și secundare relevante într-un model animal de recădere. Neuropsychopharmacology. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Interacțiuni hormon-neurotransmițător în controlul comportamentului sexual. Cercetarea creierului comportamental. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Comportamentul sexual al bărbatului. În: Pfaff DW și colab., Editori. Hormoni creier și comportament. San Diego, CA: Elsevier Science (SUA); 2002. pp. 1-138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamina și serotonina: influențe asupra comportamentului sexual masculin. Fiziologie și comportament. 2004; 83: 291-307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitri A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Efectele administrării singulare și repetate a metamfetaminei sau morfinei asupra exprimării genei neuroglican C în creierul șobolanului. Jurnalul Internațional de Neuropsihopharmacologie. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Condiții preferate de locație (CPP) pentru "gustări alimentare" cu calorii ridicate la tulpini de șobolani predispuși genetic față de obezitatea indusă de dietă: rezistență la blocarea naltrexonei. Farmacologie Biochimie și comportament. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Efectul antagonismului opioid asupra preferințelor locului condiționat la gustări. Farmacologie Biochimie și comportament. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsivitatea care rezultă din disfuncțiile frontale ale abuzului de droguri: implicații pentru controlul comportamentului prin stimulente legate de recompensă. Psihofarmacologie (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Baza neuronală a dependenței: o patologie a motivației și alegerii. Am J Psihiatrie. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Memorie și dependență: circuite neuronale partajate și mecanisme moleculare. Neuron. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Rolul opus al nucleului accumbens și al zonei hipotalamice anterioare laterale în controlul comportamentului sexual la șobolanul mascul. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Canabinoizii potențează plasticitatea învățării emoționale în neuronii cortexului prefrontal medial prin intrările amigdale bazolaterale. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, a se vedea RE. Reintroducerea potențială a comportamentului căutător de cocaină după perfuzarea D-amfetaminei în amigdala bazilaterală. Neuropsychopharmacology. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Expunerile repetate intensifică mai degrabă decât diminuează efectele de recompensare ale amfetaminei, morfinei și cocainei. Psihofarmacologie (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Comportamentul sexual la șobolanii masculi după leziuni radiofrecvente sau leziuni care diminuează dopamina în nucleul accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Serotonina hipotalamică laterală inhibă Nucleus Accumbens dopamina: Implicații pentru satietatea sexuală. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Efectele unui antagonist D1 și ale experienței sexuale asupra imunoreactivității Fos induse de copulație în nucleul preoptic medial. Cercetarea creierului. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Numai împerecherea în ritm propriu este plină de satisfacție la șobolanii de ambele sexe. Hormonul Behav. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, Vezi RE. Inactivarea selectivă a cortexului prefrontal dorsomedial și amigdala bazolaterală atenuează restabilirea condiționată a comportamentului căutător de cocaină stins în șobolani. Psihofarmacologie (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Facilitarea comportamentelor sexuale la șobolanii masculi în prezența unor stimuli combinate anterior cu injecții sistemice de morfină. Farmacologie Biochimie și comportament. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Regulament de recompensă de metamfetamină prin kinază controlată prin semnal extracelulare 1 / 2 / ETS ca Gene-1 cale de semnalizare prin activarea dopaminei NIDA Seria de Rapoarte de Cercetare: abuz de metamfetamină și dependență 2006 NIH Numărul publicației 06-4210.PubMed]
  61. Perks SM, Clifton PG. Reevaluarea întăritorului și preferința de loc condiționată. Fiziologie și comportament. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Căile de dorință sexuală. Jurnalul de Medicină Sexuală. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Psihofarmacologia comportamentului sexual. În: Bloom FE, Kupfer DJ, editori. Psihofarmacologie: a patra generație de progres. New York: Raven; 1995. pp. 743-758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Implicațiile inducerii imediate-timpurii a genei în creier după stimularea sexuală a rozătoarelor feminine și masculine. Brain Research Bulletin. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condiționarea și comportamentul sexual: o analiză. Hormonul Behav. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Efectele diferențiate ale antagoniștilor receptorilor de dopamină asupra comportamentului sexual al șobolanilor masculi. Psychopharmacology. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Sistemul dopaminei mezolimbice: calea comună finală pentru efectul de întărire a drogurilor de abuz? Neuroștiințe și recenzii bio-comportamentale. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Experiența sexuală induce plasticitate funcțională și structurală în sistemul mezolimbic. Biologie psihiatrie. 2009 În presă.
  69. Ranaldi R, Pococ D, Zereik R, Wise RA. Fluctuațiile dopaminei în nucleul accumbens în timpul întreținerii, extincției și reintroducerii administrării intravenoase de D-amfetamină. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Droguri și efecte sexuale: rolul tipului de drog și a genului. Oficial al tratamentelor privind abuzul de substanțe. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Comportamentul sexual crește expresia c-fos în creierul mascul al șobolanilor. Brain Res. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Accumbens activitatea în timpul unui program multiplu pentru apă și sucroză armarea la șobolani. Synapse. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Controlul atenției și nivelurile metabolice ale creierului la abuzatorii de metamfetamină. Biologie psihiatrie. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Metamfetamina cristalină și ecstasy diferă în raport cu sexul nesigur în rândul tinerilor homosexuali. Revista canadiană de sănătate publică. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. Vedeți RE. Substraturile neurale ale recidivelor condiționate cu comportamentul căutării de droguri. Farmacologie Biochimie și comportament. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. Vezi RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Dependența de droguri, Relapse și Amygdala. Analele Academiei de Științe din New York. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivații asociate utilizării metamfetaminei în rândul bărbaților HIV care fac sex cu bărbații. Oficial al tratamentelor privind abuzul de substanțe. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Modelul de refacere a recidivelor de droguri: istoric, metodologie și constatări majore. Psihofarmacologie (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilizarea efectelor condiționate condiționate ale cocainei: caracteristici farmacologice și temporale. J. Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilizarea efectelor benefice condiționate ale morfinei: farmacologia și caracteristicile temporale. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Predictorii comportamentelor cu risc sexual sexual HIV într-un eșantion comunitar de bărbați și femei care utilizează droguri injectabile. SIDA și comportament. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Utilizarea metamfetaminei și comportamentul riscului sexual în studenții de liceu din SUA: Constatări dintr-un studiu național privind comportamentul riscului. Știința preventivă. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Soarele WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Efectele receptorilor dopaminei și NMDA asupra expresiei Fos induse de cocaină în striatul șobolanilor Fischer. Cercetarea creierului. 2008; 1243: 1-9. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  84. Swanson LW, redactor. Brain Maps: Structura creierului de șobolan. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Răsplata sexuală la șobolanii masculi: Efectele experienței sexuale asupra preferințelor locului condiționat asociate cu ejacularea și intromisiile. Hormonul Behav. 2008 [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Pagini C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Implicarea cascadei kinazei reglată de semnal extracelular pentru proprietățile de recompensare a cocainei. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Pagini C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Medicamentele dependente și non-dependente induc modele distincte și specifice ale activării ERK în creierul mouse-ului. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Reglarea unei cascade de fosfatază proteică permite semnale convergente de dopamină și glutamat pentru a activa ERK în striatum. Proc Natl Acad Sci SUA A. 2005; 102: 491-496. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Alterarea transmiterii dopaminergice și glutamatergice în inducerea și exprimarea sensibilizării comportamentale: o analiză critică a studiilor preclinice. Psihofarmacologie (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Activarea neuronală după comportamentul sexual la creierul de șobolan masculin și feminin. Cercetarea creierului comportamental. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Leziunile excitotoxice ale amigdalei bazolaterale afectează dobândirea comportamentului de căutare a cocainei în cadrul unui program de armare de ordinul doi. Psychopharmacology. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. Wise RA. Neurobiologia dependenței. Opinia curentă în neurobiologie. 1996; 6: 243-251. [PubMed]