Metamfetamina acționează asupra subpopulațiilor neuronilor care reglează comportamentul sexual la șobolani masculi (2010)

Neuroscience. 2010 Mar 31; 166 (3): 771-84. doi: 10.1016 / j.neuroscience.2009.12.070. Epub 2010 Jan 4.

Frohmader KS, Wiskerke J, Wise RA, Lehman MN, Coolen LM.

Sursă

Departamentul de Anatomie și Biologie Celulară, Școala de Medicină și Stomatologie Schulich, Universitatea din Western Ontario, Londra, ON, Canada, N6A 5C1.

Abstract

Metamfetamina (Meth) este un stimulent extrem de dependent. Abuzul de abuz este frecvent asociat cu practica comportamentului cu risc sexual și creșterea prevalenței virusului imunodeficienței umane, iar utilizatorii Meth raportează o creștere a dorinței sexuale, excitării și plăcerii sexuale. Baza biologică pentru acest raport drog-sex nu este cunoscută. Studiul actual demonstrează că administrarea Meth la șobolanii de sex masculin activează neuronii în regiunile cerebrale ale sistemului mezolimbic implicate în reglarea comportamentului sexual. Mai exact, Meth și împerecherea coacționează celulele în nucleul nucleului accumbens și în cochilie, amigdala bazolaterală și cortexul cingular anterior. Aceste constatări ilustrează faptul că, spre deosebire de convingerile actuale, medicamentele de abuz pot activa aceleași celule ca un armament natural, adică un comportament sexual și, la rândul său, pot influența căutarea compulsivă a acestei recompense naturale.

Cuvinte cheie: nucleul accumbens, amigdala bazolaterală, cortexul prefrontal, abuzul de substanțe, reproducerea, dependența

Motivația și recompensa sunt reglementate de sistemul mezolimbic, o rețea interconectată a zonelor creierului cuprinsă între nucleul accumbens (NAc), amigdala basolaterală și cortexul prefrontal medial (mPFC) (Kelley, 2004, Kalivas și Volkow, 2005). Există dovezi ample că sistemul mezolimbic este activat ca răspuns la ambele substanțe de abuz (Di Chiara și Imperato, 1988, Chang et al., 1997, Ranaldi și colab., 1999) și comportamente naturale recompensatoare, cum ar fi comportamentul sexual (Fiorino și colab., 1997, Balfour și colab., 2004). Comportamentul sexual al bărbatului, și în special ejacularea, este extrem de satisfăcător și întăritor în modelele animalelor (Pfaus și colab., 2001). Distribuția rozătoarelor masculine dezvoltă o preferință a locului condiționat (CPP) la copulare (Agmo și Berenfeld, 1990, Martinez și Paredes, 2001, Tenk, 2008) și va efectua sarcini operant pentru a avea acces la o femeie receptivă sexual (Everitt și colab., 1987, Everitt și Stacey, 1987). Drogurile de abuz sunt, de asemenea, recompensatoare și consolidate, iar animalele vor învăța să se auto-administreze substanțe de abuz, inclusiv opiacee, nicotină, alcool și psihostimulante (Înțelept, 1996, Pierce și Kumaresan, 2006, Feltenstein și See, 2008). Deși se știe că atât medicamentele de abuz, cât și comportamentul sexual acționează în zonele creierului mezolimbic, în prezent nu este clar dacă medicamentele de abuz influențează aceiași neuroni care mediază comportamentul sexual.

Studiile electrofiziologice au demonstrat că alimentele și cocaina activează neuronii în NAc. Cu toate acestea, cei doi agenți de întărire nu activează aceleași celule în NAc (Carelli și colab., 2000, Carelli și Wondolowski, 2003). În plus, administrarea alimentară și sucroza nu provoacă modificări pe termen lung ale proprietăților electrofiziologice induse de cocaină (Chen și colab., 2008). În schimb, o colecție de dovezi sugerează că comportamentul sexual masculin și drogurile de abuz pot acționa într-adevăr pe aceleași neuroni mezolimbici. Psihostimulantele și opioidele modifică expresia comportamentului sexual la șobolanii masculi (Mitchell și Stewart, 1990, Fiorino și Phillips, 1999a, Fiorino și Phillips, 1999b). Date recente din laboratorul nostru au arătat că experiența sexuală modifică capacitatea de reacție la psihostimulatori, așa cum reiese din răspunsurile locomotorii sensibilizate și percepția de recompensă sensibilizată la d-amfetamina la animale experimentate sexual (Pitchers și colab., 2009). Un răspuns similar a fost observat anterior cu expunerea repetată la amfetamină sau alte medicamente de abuz (Lett, 1989, Shippenberg și Heidbreder, 1995, Shippenberg și colab., 1996, Vanderschuren și Kalivas, 2000). Împreună, aceste constatări sugerează că comportamentul sexual și răspunsurile la medicamente de abuz sunt mediate de aceiași neuroni în sistemul mezolimbic. Prin urmare, primul obiectiv al studiului prezent este de a investiga activarea neuronală a sistemului mezolimbic prin comportamentul sexual și administrarea medicamentului la același animal. În particular, am testat ipoteza că psihostimulantul, metamfetamina (Meth), acționează direct asupra neuronilor care în mod normal mediază comportamentul sexual.

Meth este una dintre cele mai abuzate droguri ilicite din lume (NIDA, 2006, Ellkashef și colab., 2008)nd a fost frecvent legată de comportamentul sexual alterat. Interesant, utilizatorii Meth raportează o dorință și o excitare sexuală sporită, precum și o plăcere sexuală sporită (Semple și colab., 2002, Schilder și colab., 2005). În plus, Abuzul de abuz este frecvent asociat cu comportamentul sexual compulsiv (Rawson și colab., 2002). Utilizatorii adesea raportează că au numeroși parteneri sexuali și sunt mai puțin susceptibili de a utiliza protecția decât alți agresori (Somlai și colab., 2003, Springer și colab., 2007). Din păcate, studiile care indică utilizarea lui Meth ca predictor al comportamentului cu risc sexual sunt limitate, deoarece se bazează pe rapoarte de sine neconfirmate (Elifson și colab., 2006). Prin urmare, este necesară o investigație privind baza celulară a modificărilor induse de Meth în comportamentul sexual într-un model animal pentru înțelegerea acestei legături complexe de droguri și sexe.

Având în vedere dovezile prezentate mai sus, care sugerează că medicamentele de abuz și mai ales Meth pot acționa asupra neuronilor implicați în mod normal în medierea comportamentului sexual, obiectivul prezentului studiu a fost de a investiga activarea neuronală prin comportamentul sexual și administrarea Meth psychostimulant. Acest studiu a implementat o tehnică neuroanatomică, utilizând vizualizarea imunohistochimică a genelor timpurii imediate Fos și Map Kinase fosforilate (pERK) pentru a detecta activarea neuronală concomitentă prin comportamentul sexual și, respectiv, Meth. Fos este exprimat numai în nucleul celulelor, cu un nivel maxim de exprimare 30-90 minute după activarea neuronului. Există dovezi ample că activitatea sexuală induce expresia Fos în creier (Pfaus și Heeb, 1997, Veening și Coolen, 1998), inclusiv sistemul mezocorticolimbic (Robertson și colab., 1991, Balfour și colab., 2004). Există, de asemenea, dovezi că medicamentele de abuz induc expresia pERK în sistemul mezocorticolimbic (Valjent și colab., 2000, Valjent și colab., 2004, Valjent și colab., 2005). Spre deosebire de expresia Fos, fosforilarea ERK este un proces foarte dinamic și are loc doar 5-20 minute după activarea neuronală. Profilele temporale distincte ale Fos și pERK le fac un set ideal de markeri pentru activarea neuronală ulterioară prin doi stimuli diferiți.

PROCEDURI EXPERIMENTALE

Subiecții

Șobolani masculi adulți Sprague Dawley (210-225 g), obținuți de la Charles River Laboratories (Montreal, QC, Canada), au fost adăpostiți câte doi pe cușcă în cuști standard din plexiglas. Sala de animale a fost menținută la un ciclu de lumină inversă 12 / 12 h (se aprinde la 10.00 h). Au fost disponibile alimente și apă ad libitum. Toate testele au fost efectuate în prima jumătate a fazei întunecate sub iluminare roșie. Femeile de stimulare utilizate pentru comportamentul sexual au fost ovarectomizate bilaterale sub anestezie profundă (13 mg / kg ketamină și 87 mg / kg xylazină) și au primit un implant subcutanat conținând 5% benzoat de estradiol (EB) și 95% colesterol. Receptivitatea sexuală a fost indusă prin administrarea subcutanată (sc) a progesteronului 500 μg în 0.1 ml de ulei de susan 4 h înainte de testare. Toate procedurile au fost aprobate de Comitetul pentru îngrijirea animalelor de la Universitatea din Western Ontario și sunt conforme cu liniile directoare prezentate de Consiliul canadian privind îngrijirea animalelor.

Proiecte experimentale

Experimentele 1 și 2: șobolanii masculi (n = 37) au fost lăsați să se îmbine cu o femeie receptivă la o ejaculare (E) sau pentru 30 min, care a apărut întâi în cuști curate (60 × 45 × 50 cm) - sesiuni săptămânale de împerechere săptămânale, pentru a obține experiență sexuală. În timpul ultimelor două sesiuni, s-au înregistrat toți parametrii standardi pentru performanța sexuală, incluzând: timpul de latență (ML, timpul de la introducerea femeii până la prima vârstă), latența intromisiei (IL, timpul de la introducerea femeii până la prima vârstă cu vaginalitate ejaculare (EL), timp de la prima intromisă până la ejaculare), interval post-ejaculare (PEI, timpul de la ejaculare la prima intromisie ulterioară), numărul de suporturi (M) și numărul de intromisiuni (IM)Agmo, 1997). Toți masculii au primit 1 ml / kg injecție zilnică de 0.9% NaCI (soluție salină; sc) 3 consecutive de zile înainte de ziua testului, pentru obișnuirea manipulării și injecțiilor. Cu o zi înainte de ziua testului, toți bărbații au fost adăpostiți singuri. La bărbații cu experiență, Fos poate fi indus de indiciile contextuale condiționate asociate cu experiența sexuală anterioară (Balfour și colab., 2004). Prin urmare, toate manipulările de împerechere și de control în timpul testelor finale s-au efectuat în cușcă (pentru a evita indicațiile predictive condiționate) pentru a împiedica activarea determinată de indicele condiționată la bărbații de control nemulțumiți. Masculii au fost distribuite în opt grupuri experimentale care nu diferă în nici o măsură de performanță sexuală în timpul ultimelor două sesiuni de împerechere (datele nu sunt prezentate). În timpul testului final, bărbații au fost fie îngrijiți să se îmbine în cuștile lor până când au arătat o ejaculare (sex) sau nu au primit partener de sex feminin (fără sex). Toți bărbații îmbogățiți au fost perfrați 60 minute după debutul împerecherii pentru a permite analiza expresiei Fos induse de împerechere. Bărbații au primit o injecție de 4 mg / kg Meth sau 1 ml / kg de soluție salină (sc) (n = 4 fiecare), fie 10 (experiment 1), fie 15 (experiment 2) min înainte de perfuzie pentru analiza fosforilării induse de medicament din kinaza MAP. Dozele și timpul înainte de perfuzie au fost bazate pe rapoartele anterioare (Choe și colab., 2002, Choe și Wang, 2002, Chen și Chen, 2004, Mizoguchi și colab., 2004, Ishikawa și colab., 2006). Grupurile de control au inclus bărbați care nu s-au îmbarcat, dar au primit Meth 10 (n = 7) sau 15 (n = 5) min înainte de sacrificare sau injecții saline 10 (n = 5) sau 15 . După sacrificare, creierele au fost procesate pentru imunohistochimie.

Experiment 3: Întrucât o doză mare de Meth a fost utilizată în experimentele 1 și 2, a fost efectuat un experiment neuroanatomic suplimentar pentru a investiga dacă comportamentul sexual și o doză mai mică de Meth induc modele dependente de doză de activare neuronală suprapusă. Acest studiu a fost realizat într-o manieră identică cu cea a experimentelor 1 și 2. Cu toate acestea, la testul final, grupurile îmbogățite și neamestecate (n = 6 fiecare) au primit 1 mg / kg Meth (sc) 15 min înainte de sacrificare.

Experimentul 4: Pentru a testa dacă activarea neuronală cauzată de sex și Meth este specifică pentru Meth, acest experiment a investigat dacă modele similare de activare neuronală care se suprapun pot fi observate în cazul d-amfetaminei psihostimulante (Amph). Acest experiment a fost realizat într-o manieră identică cu cea a experimentelor 1 și 2. Cu toate acestea, la testul final, bărbații au fost administrați fie Amph (5 mg / kg), fie salină (1 mg / kg) (sc) 15 min înainte de sacrificare (n = 5 fiecare). Controlul masculilor nemulțumiți a primit salină sau Amph 15 minute înainte de sacrificare. O prezentare generală a grupurilor experimentale utilizate în experimentele 1-4 este furnizată în Tabelul 1.

Tabelul 1      

Prezentare generală a grupurilor experimentale incluse în experimente 1-4.

Pregătirea țesuturilor

Animalele au fost anesteziate cu pentobarbital (270 mg / kg; ip) și perfuzate transcardial cu 5 ml de soluție salină urmată de 500 ml 4% paraformaldehidă în tampon fosfat 0.1 M (PB). Creierele au fost îndepărtate și post-fixate pentru 1 h la temperatura camerei în același agent de fixare, apoi au fost imersate în 20% zaharoză și 0.01% azidă de sodiu în 0.1 M PB și depozitate la 4 ° C. Secțiunile coronale (35 μm) au fost tăiate pe un microtome de congelare (H400R, Micron, Germania), colectate în patru serii paralele în soluție de crioprotector (30% zaharoză și 30% etilenglicol în 0.1 M PB) și depozitate la 20 ° C prelucrare.

imunohistochimie

Toate incubările au fost efectuate la temperatura camerei cu agitare ușoară. Secțiunile plutitoare libere au fost spălate extensiv cu soluție salină tamponată cu fosfat 0.1 M (PBS) între incubări. Secțiunile au fost incubate în 1% H2O2 pentru 10 min, apoi blocată în soluție de incubare (PBS conținând albumină serică bovină 0.1% și 0.4% Triton X-100) pentru 1 h.

Perk / Fos

Țesutul a fost incubat peste noapte cu un anticorp policlonal de iepure împotriva kinazelor p42 și p44 ERK1 și ERK2 (pERK; 1: 400 experiment 1 lot 19; 1: experiment 4.000 2 și 3 lot 21; Incubări 9101 h cu IgG anti-iepure de măgar biotinilat (1: 1, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA) și complex de peroxidază de avardină-hrean (ABN Elite, 500: 1, Vector Laboratories, Burlingame, CA). Apoi, țesutul a fost incubat timp de 1000 min cu tiramidă biotinilată (BT; 10: 1 în PBS + 250% H2O2; Kitul de amplificare a semnalului tiramid, NEN Life Sciences, Boston, MA) și pentru 30 min cu strepavidina conjugată cu Alexa 488 (1: 100; Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). În continuare, țesutul a fost incubat peste noapte cu un anticorp policlonal de iepure împotriva c-Fos (1: 500, SC-52, Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, CA), urmată de o incubare 30 min cu Alexa 555 de capră anti-iepure 1: 200, Jackson Immunoresearch Laboratories, West Grove, PA). După colorare, secțiunile au fost spălate bine în 0.1 M PB, montate pe culise de sticlă cu 0.3% gelatină în ddH20 și acoperite cu un mediu de montare apoasă (Gelvatol) conținând agent anti-decolorare 1,4-diazabiciclo (2,2) octan (DABCO; 50 mg / ml, Sigma-Aldrich, St Louis, MO). Controlul imunohistochimic a inclus omiterea unuia sau a doi anticorpi primari, rezultând în absența etichetării la lungimea de undă adecvată.

Analiza datelor

Comportamentul sexual

Pentru toate cele patru experimente, parametrii standardi pentru performanța sexuală au fost înregistrați așa cum s-a descris mai sus și s-au analizat utilizând analiza varianței (ANOVA). Analiza datelor privind comportamentul sexual în timpul zilei de testare finală nu a evidențiat diferențe semnificative între grupuri în niciunul dintre parametrii performanței sexuale.

pERK / Fos Cell Counts

Celulele singulare și dublate marcate pentru Fos și pERK au fost numărate în nivelele caudale ale subregiunilor NAc de bază și cochilie, amigdala bazolaterală (BLA), amigdala mediană posterioară (MEApd), amigdala centrală (CeA), nucleul preoptic median (MPN) nucleul patului posterolateral al stria terminalis (BNSTpm și BNSTpl) și zona cingulată anterioară (ACA), subregiunile prelimbic (PL) și infralimbic (IL) ale mPFC. Imaginile au fost capturate utilizând o cameră CCD răcită (Microfire, Optronics) atașată la un microscop Leica (DM500B, Leica Microsystems, Wetzlar, Germania) și software-ul Neurolucida (MicroBrightfield Inc). Utilizând software-ul neurolucida, s-au definit domenii de analiză bazate pe repere (Swanson, 1998) unic pentru fiecare regiune creier (a se vedea Figura 1). Domeniile standard de analiză au fost utilizate în toate domeniile, cu excepția nucleului NAc și a cochiliei. În cele din urmă zone, expresia pERK și Fos nu a fost omogenă și a apărut în modele asemănătoare patch-urilor. Prin urmare, întregul nucleu și cochilie au fost evidențiate pe baza reperelor (ventricul lateral, drumeții anterioare și insulele Calleja). Domeniile de analiză nu diferă între grupurile experimentale și au fost 1.3 mm2 în nucleul și cochilia NAc. Domeniile standard de analiză pentru zonele rămase au fost: 1.6 mm2 în BLA, 2.5 și 2.25 mm2 în MEApd și respectiv CeA, 1.0 mm2 în MPN, 1.25 mm2 în subregiunile BNST și mPFC și 3.15 mm2 în VTA. Două secțiuni au fost numărate bilateral pentru fiecare regiune creier per animal și au fost calculate numărul de celule marcate singulare și duble pentru pERK și Fos, precum și procentele celulelor pERK care au exprimat markerul Fos. Pentru experimentele 1, 2 și 4, mediile grupului au fost comparate utilizând ANOVA cu două căi (factori: împerechere și medicament) și LSD Fisher pentru post hoc comparații la un nivel de semnificație al 0.05. Pentru experimentul 3, mediile de grup au fost comparate utilizând t-teste ne-corelate la un nivel de semnificație al 0.05.

Figura 1      

Scheme schematice și imagini care ilustrează zonele creierului de analiză. Domeniile de analiză indicate s-au bazat pe repere unice pentru fiecare regiune a creierului, nu diferă între grupurile experimentale și au fost 1.25 mm2 în subregiunile mPFC (a), 1.3 mm2 în ...

imagini

Imagini digitale pentru Figura 3 au fost capturate folosind camera CCD (DFC 340FX, Leica) atașată la un microscop Leica (DM500B) și au fost importate în software Adobe Photoshop 9.0 (Adobe Systems, San Jose, CA). Imaginile nu au fost modificate în nici un fel, cu excepția ajustării luminozității.

Figura 3      

Imaginile reprezentative ale secțiunilor NAc imunozălțate pentru Fos (roșu, a, d, g, j) și pERK (verde, b, e, h, k) de animale din fiecare grup experimental: , Sex + Sal (d, e, f), Fără Sex + Meth (g, h, i) și Sex + Meth (j, k, l). Panourile dreapta sunt ...

REZULTATE

Activarea neuronală a sistemului limbic prin comportamentul sexual și administrarea metalelor

Experimentul 1: Analiza celulelor marcate cu un singur și dublu pentru pERK indusă de Fos și Meth induse la bărbații care au primit Meth 10 minute înainte de sacrificare a prezentat Fos indus de împerechere în nucleul MPN, BNSTpm, NAc și BLA, VTA, și toate subregiunile de mPFC, în concordanță cu studiile anterioare care demonstrează expresia Fos indusă de împerechere în aceste domenii (Baum și Everitt, 1992, Pfaus și Heeb, 1997, Veening și Coolen, 1998, Hull și colab., 1999). Administrarea Meth 10 minute înainte de sacrificarea pERK indusă în nucleul și coaja NAc, BLA, MeApd, CeA, BNSTpl și regiunile de mPFC, în conformitate cu modelele de activare induse de alți psihostimulanțiValjent și colab., 2000, Valjent și colab., 2004, Valjent și colab., 2005).

Mai mult decât atât, s-au observat trei modele de coexpresie a activării neuronale prin comportamentul sexual și Meth: În primul rând, s-au identificat zonele creierului în care sexul și medicamentele au activat populații neuronale care nu se suprapun (Tabelul 2). Mai exact, în CeA, MEApd, BNSTpl și mPFC, creșteri semnificative atât în ​​pERK indus de medicament (F (1,16) = 7.39-48.8; p = 0.015- <0.001), cât și în Fos indus de sex (F (1,16, 16.53) = 158.83-0.001; p <1,16) au fost observate. Cu toate acestea, în aceste regiuni nu au existat creșteri semnificative ale neuronilor cu dublă etichetă la bărbații tratați cu Meth împerecheați. Singura excepție a fost MEApd, unde s-a găsit un efect al împerecherii asupra numărului de celule dublu marcate (F (9.991) = 0.006; p = XNUMX). Cu toate acestea, nu a existat niciun efect general al tratamentului medicamentos, iar etichetarea dublă în grupurile tratate cu metanfetamină nu a fost semnificativ mai mare decât în ​​grupurile tratate cu soluție salină, deci nu a fost cauzată de medicament (Tabelul 2). În al doilea rând, au fost identificate zone ale creierului în care activarea neurală a fost indusă doar prin împerechere (Tabelul 3). În mod specific, MPN, BNSTpm și VTA au fost activate numai prin împerechere și au conținut creșteri semnificative în Fos (F (1,16) = 14.99-248.99; p ≤ 0.001 induse de împerechere), dar nu pERK indus de Meth.

Tabelul 2      

Privire de ansamblu asupra expresiei PERK induse de imperechere și Meth induse în zonele cerebrale unde sexul și medicamentele activează populațiile neuronale care nu se suprapun.
Tabelul 3      

Privire de ansamblu asupra exprimării PERK indusă de Fos și Meth induse în zonele creierului în care activarea neuronală a fost indusă doar prin împerechere.

În cele din urmă, s-au găsit zone ale creierului în care sexul și medicamentele au activat populațiile neuronilor suprapuse (Figura 2 și and3) .3). În nucleul și coaja NAc, BLA și ACA, au existat efecte generale ale împerecherii (F (1,16) = 7.87-48.43; p = 0.013- <0.001) și a tratamentului medicamentos (F (1,16) = 6.39– 52.68; p = 0.022- <0.001), precum și o interacțiune între acești doi factori (F (1,16) = 5.082-47.27; p = 0.04- <0.001; fără interacțiune semnificativă în ACA) pe numărul de celule care exprimă ambele Fos indus de împerechere și PERK indus de Meth. Analiza post-hoc a arătat că numărul de neuroni dublu etichetați a fost semnificativ mai mare la bărbații injectați cu metamfetamină împerecheați, comparativ cu bărbații tratați cu metamfetamină nemateriali (p = 0.027- <0.001) sau cu bărbați tratați cu soluție salină împerecheați (p = 0.001- <0.001) masculi (Figura 2 și and3) .3). Atunci când datele au fost exprimate ca procente ale neuronilor activate de medicament, 39.2 ± 5.3% în nucleul NAc, 39.2 ± 5.8% în carcasa NAc, 40.9 ± 6.3% în BLA și 50.0 ± 5.3% din neuronii ACA au fost activate atât împerecherea cât și Meth.

Figura 2      

Sexul indus Fos și expresia pERK indusă de Meth în NAc, BLA și ACA neuronii 10 min după administrarea de 4 mg / kg Meth. Numerele medii ± sem de celule marcate cu Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) și dublu (c, f, i, l) ...

O observație neașteptată a fost că comportamentul sexual a afectat pERK indus de Meth. Cu toate că Meth a indus semnificativ nivelurile pERK atât în ​​grupurile Meth injectate, cât și în cele asociate, în NAc, BLA și ACA, etichetarea cu pERK a fost semnificativ mai mică la bărbații impliați cu metale injectate comparativ cu bărbații nesimțiți cu metale injectate (Figura 2b, e, h, k; p = 0.017- <0.001). Această constatare poate sprijini în continuare ipoteza că sexul și medicamentele acționează asupra acelorași neuroni, dar poate fi, de asemenea, o indicație a modificărilor induse de împerechere în absorbția sau metabolizarea drogurilor, care la rândul lor determină răspunsuri neurale modificate la Meth. Pentru a investiga dacă un comportament sexual provoacă un alt tip temporal de activare indusă de medicament, secțiunile de NAc, BLA și ACA au fost colorate pentru bărbații sacrificați la un moment ulterior (15 min) după administrarea medicamentului (experiment 2).

Experimentul 2: Analiza celulelor marcate cu un singur și dublu a confirmat descoperirile descrise mai sus, conform cărora comportamentul sexual și expunerea ulterioară la Meth 15 minute înainte de sacrificare au avut ca rezultat creșteri semnificative ale Fos și imunocomolecției pERK în nucleul și cochilia NAc, BLA și ACA. În plus, în aceste domenii s-au găsit din nou, coexprimarea semnificativă a pERK indusă de Fos și Meth induse de împerechere (Figura 4; efect de împerechere: F (1,12) = 15.93-76.62; p = 0.002- <0.001; efectul medicamentului: F (1,12) = 14.11-54.41; p = 0.003- <0.001). Numărul de neuroni dublu etichetați la bărbații împerecheați cu metamfetamină împerecheați a fost semnificativ mai mare în comparație cu bărbații tratați cu metamfetamină neimperecheați (p <0.001) sau cu bărbați tratați cu soluție salină împerecheați (p <0.001). Când datele au fost exprimate ca procente de neuroni activați de droguri, 47.2 ± 5.4% (nucleu NAc), 42.7 ± 7.6% (coajă NAc), 36.7 ± 3.7% (BLA) și 59.5 ± 5.1% (ACA) de neuroni activați prin împerechere au fost, de asemenea, activate de Meth. Mai mult, pERK indus de droguri nu a diferit între animalele împerecheate și cele nepereche (Figura 4b, e, h, k), în toate zonele, cu excepția ACA (p <0.001). Aceste date indică faptul că comportamentul sexual provoacă într-adevăr o modificare a tiparului temporal al inducerii pERK de către Meth.

Figura 4      

Sexul indus Fos și expresia pERK indusă de Meth în NAc, BLA și ACA neuronii 15 min după administrarea de 4 mg / kg Meth. Numerele medii ± sem de celule marcate cu Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) și dublu (c, f, i, l) ...

Activarea neuronală după comportamentul sexual și 1 mg / kg Meth

Rezultatele de până acum au arătat că comportamentul sexual și 4 mg / kg Meth au activat suprapunerea populațiilor de neuroni în nucleul și cochilia NAc, BLA și ACA. To investighează influența dozei de medicament asupra acestei suprapuneri în activare, au fost de asemenea studiate modelele de activare neurală utilizând o doză mai mică de Meth. Miezul și coaja NAc, BLA și ACA au fost analizate pentru activare indusă de sex și Meth. Într-adevăr, comportamentul sexual și expunerea ulterioară la Meth au dus la creșteri semnificative ale Fos și imunocompoziției pERK în subregiunile de bază și coajă NAc, BLA, precum și neuronii din regiunea ACA a mPFC (Figura 5). Interesant, doza mai mică de Meth a determinat un număr similar de neuroni marcați cu pERK indus de 4 mg / kg Meth în cele patru regiuni ale creierului analizate. Mai important, nucleul și coaja NAc, BLA și ACA au prezentat creșteri semnificative ale numărului de celule marcate dublu (Figura 5c, f, i, l) în comparație cu bărbații injectați cu metanfetamină neechipați (p = 0.003- <0.001). Când datele au fost exprimate ca procente de neuroni activați de droguri, 21.1 ± 0.9% și 20.4 ± 1.8% în nucleul NAc și, respectiv, în înveliș, 41.9 ± 3.9% în BLA și 49.8 ± 0.8% din neuronii ACA au fost activate de sex și Meth.

Figura 5      

Sexul indus Fos și expresia pERK indusă de Meth în NAc, BLA și ACA neuronii 15 min după administrarea de 1 mg / kg Meth. Numerele medii ± sem de celule marcate cu Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) și dublu (c, f, i, l) ...

Activarea neuronală după comportamentul sexual și administrarea d-amfetaminei

Pentru a testa dacă rezultatele de mai sus au fost specifice pentru Meth, a fost efectuat un experiment suplimentar pentru studierea activării neurale induse de împerechere și Amph. Analiza celulelor marcate singular și dublu pentru pERK și Fos a arătat că comportamentul sexual și expunerea ulterioară la Amph au dus la creșteri semnificative ale Fos și imunoconjugării pERK în nucleul și cochilia NAc și în BLA (Figura 6; efect de împerechere: F (1,15) = 7.38-69.71; p = 0.016- <0.001; efectul medicamentului: F (1,15) = 4.70-46.01; p = 0.047- <0.001). Mai mult decât atât, numărul de neuroni duali marcați a fost semnificativ mai mare la bărbații tratați cu Amph comparativ cu cei tratați cu Amph nematurați (p = 0.009- <0.001) sau cu bărbați tratați cu soluție salină (p = 0.015- <0.001) bărbați (Figura 6c, f, i). Când datele au fost exprimate ca procente ale neuronilor activați de medicament, 25.7 ± 2.8% și 18.0 ± 3.2% în nucleul NAc respectiv în cochilie și 31.4 ± 2.0% din neuronii BLA au fost activate atât de împerechere, cât și de Amph. Regiunea ACA a mPFC a prezentat nivele semnificative de Fos indusă de împerechere (Figura 6j; F (1,15) = 168.51; p <0.001). Cu toate acestea, spre deosebire de Meth, Amph nu a avut ca rezultat creșteri semnificative ale nivelurilor de PERK induse de medicamente în ACA (Figura 6k) sau numere de neuroni etichetați dublu în ACA (Figura 6l) în comparație cu bărbații injectați cu soluție salină, atât în ​​vârstă de 18 ani,

Figura 6      

Sexul indus de Fos și expresia pERK indusă de amf în NAc, BLA și ACA neuronii 15 min după administrarea de 5 mg / kg Amph. Numerele medii ± sem de celule marcate cu Fos (a, d, g, j), pERK (b, e, h, k) și dublu (c, f, i, l) ...

DISCUŢIE

Studiul actual demonstrează la nivel celular o suprapunere între activarea neuronală prin comportamentul sexual de întărire naturală și psihostimulantul Meth. Prin urmare, aceste date arată că nu numai medicamentele acționează pe aceleași regiuni ale creierului care reglementează recompensa naturală, dar, de fapt, medicamentele activează aceleași celule implicate în reglarea recompensei naturale. În mod specific, sa arătat aici că comportamentul sexual și Meth au activat o populație de neuroni în nucleul NAc și coajă, BLA și ACA din mPFC, identificând potențialele locații în care Meth ar putea influența comportamentul sexual.

Constatarea actuală că comportamentul sexual și administrarea Meth activează suprapunerea populațiilor de neuroni în NAc, BLA și ACA este în contrast cu constatările din alte studii care arată că diferite populații de neuroni NAc codifică droguri și recompense naturale.

În mod specific, studiile electrofiziologice care au comparat activarea neuronală în timpul auto-administrării recompenselor naturale (alimente și apă) și cocainei intravenoase au indicat că administrarea de cocaină autoadministrată a declanșat o populație neuronală diferențiată, care nu se suprapunea și care, în general, și armarea produselor alimentare (92%). Numai 8% din neuronii accumbal au arătat activarea atât de cocaină cât și de recompensa naturală (Carelli și colab., 2000).

În schimb, o majoritate (65%) a celulei din NAc a arătat activarea prin recompense naturale (alimente și apă), chiar dacă un agent de întărire a fost mai gustos (sucroză) (Roop și colab., 2002).

Mai mulți factori au contribuit la discrepanța cu rezultatele curente. În primul rând, diferite abordări tehnice au fost folosite pentru a investiga activitatea neuronală. Studiul actual a utilizat o metodă neuroanatomică pentru detectarea activării neuronale concomitente prin doi stimuli diferiți utilizând imunocytochemie fluorescentă duală pentru Fos și pERK, permițând investigarea activării unice a celulelor pe spații mari ale spațiilor creierului. În contrast, studiile efectuate de Carelli și colaboratorii au utilizat înregistrări electrofiziologice restricționate la NAc de comportament al animalelor pentru a se adresa dacă autoadministrarea drogurilor de abuz activează aceleași circuite neuronale utilizate de recompensele naturale.

În al doilea rând, studiul actual a investigat o recompensă naturală diferită, adică un comportament sexual, comparativ cu studiile anterioare, care au folosit alimente și apă la șobolani restricționați (Carelli, 2000). Alimentele și apa ar putea avea o valoare mai mică decât recompensarea. Comportamentul sexual este foarte răsplător și șobolanii formează ușor CPP la copulare (Agmo și Berenfeld, 1990, Martinez și Paredes, 2001, Tenk, 2008). Cu toate acestea, șobolanii cu dietă restricționată formează CPP pentru apă (Agmo și colab., 1993, Perks și Clifton, 1997) si mancare (Perks și Clifton, 1997), dșobolanii nerestricționați, de preferință, consumă și formează CPP pentru alimente mai gustoase (Jarosz și colab., 2006, Jarosz și colab., 2007).

În al treilea rând, studiile noastre au inclus diferite medicamente de abuz în comparație cu studiile anterioare, utilizând metamfetamina și amfetamina în loc de cocaină. Rezultatele actuale demonstrează că în mod specific Meth, și într-o mai mică măsură amfetamina, au dus la activarea neuronilor, de asemenea activate de comportamentul sexual. Experiența medicamentului poate să fi jucat, de asemenea, un factor în constatările noastre. Studiile curente au folosit animale care au fost experimentate sexual, dar nu au primit medicamente. În schimb, studiile electrofiziologice ale lui Carelli și colaboratorilor au folosit animale "bine instruite" care au primit expuneri repetate la cocaină.

Prin urmare, este posibil ca activarea metastatică a neuronilor activată de comportamentul sexual să fie modificată la șobolanii tratați cu medicamente. Cu toate acestea, studiile preliminare de la laboratorul nostru sugerează că experiența de droguri este puțin probabil să fie un factor major, deoarece comportamentul sexual și tratamentul Meth la bărbații tratați cronic cu Meth co-a activat procente similare ale neuronilor activi, așa cum se arată în studiul actual (20.3 ± 2.5% în nucleul NAc și 27.8 ± 1.3% în coaja NAc; Frohmader și Coolen, observații nepublicate).

În cele din urmă, studiul actual a investigat acțiunea "directă" a medicamentelor care utilizează administrarea pasivă. Prin urmare, analiza actuală nu dezvăluie informații privind circuitele neuronale implicate în căutarea de droguri sau indicii asociate cu recompensa de droguri, ci dezvăluie mai degrabă activitatea neuronală cauzată de acțiunea farmacologică a medicamentului. În studiile electrofiziologice anterioare, activitatea neuronală NAc care apare în câteva secunde de răspunsuri întărite nu este rezultatul acțiunii farmacologice a cocainei, dar depinde în mare măsură de factorii asociativi din cadrul paradigmei de autoadministrareCarelli, 2000, Carelli, 2002). În mod specific, activitatea neuronală NAc este influențată de prezentările independente de răspuns ale stimulilor asociate cu administrarea de cocaină intravenoasă, precum și de contingențele instrumentale (de exemplu, apăsarea pârghiilor) inerente acestei paradigme comportamentaleCarelli, 2000, Carelli și Ijames, 2001, Carelli, 2002, Carelli și Wightman, 2004). În concluzie, constatările noastre de coactivare prin recompense naturale și de droguri pot fi specifice pentru activarea prin comportament sexual și administrate pasiv Meth și Amph.

Meth și sexul a activat suprapunerea populațiilor de neuroni în nucleul NAc și în cochilie într-o manieră dependentă de doză. Neuronii coactivi din NAc pot media potențialele efecte ale Meth asupra motivației și proprietăților de recompensare a comportamentului sexual, deoarece leziunile NAc perturbă comportamentul sexual (Liu și colab., 1998, Kippin și colab., 2004). În plus, acești neuroni sunt potențial un locus pentru efecte dependente de doză asupra dozei de împerechere, deoarece doza Meth mai mică (1 mg / kg) a redus numărul celulelor marcate dublu cu 50% comparativ cu doza mai mare de Meth (4 mg / kg). Deși acest studiu nu identifică fenotipul chimic al neuronilor coactivi, studiile anterioare au arătat că expresia pERK și Fos indusă de medicament în NAc depinde atât de receptorii dopaminici (DA) cât și de glutamat (Valjent și colab., 2000, Ferguson și colab., 2003, Valjent și colab., 2005, Sun și colab., 2008). Deși nu este clar dacă activarea neuronală indusă de împerechere în NAC este dependentă de acești receptori, acest lucru a fost demonstrat în alte regiuni ale creierului, în special în zona preoptică mediană (Lumley și Hull, 1999, Dominguez și colab., 2007). Thus, Meth poate acționa asupra neuronilor, de asemenea activat în timpul comportamentului sexual prin activarea receptorilor de dopamină și glutamat. Rolul glutamatului de NAc în comportamentul sexual este în prezent neclar, dar este bine stabilit că DA joacă un rol critic în motivarea comportamentului sexual (Hull și colab., 2002, Hull și colab., 2004, Pfaus, 2009). Studiile de microdializă au raportat creșteri ale efluxului de NAc DA în timpul fazelor apetitoare și consumatoare ale comportamentului sexual masculin (Fiorino și Phillips, 1999a, Lorrain și colab., 1999) și efluxul mesolimbic DA a fost corelat cu facilitarea inițierii și menținerii comportamentului sexual al șobolanilor (Pfaus și Everitt, 1995). Mai mult, studiile de manipulare DA arată că antagoniștii DA din NAc inhibă comportamentul sexual, în timp ce agoniștii facilitează inițierea comportamentului sexualr (Everitt și colab., 1989, Pfaus și Phillips, 1989). Astfel, Meth poate afecta motivația comportamentului sexual prin activarea receptorilor DA.

Spre deosebire de NAc, numărul celulelor dublu marcate în BLA și ACA a rămas relativ neschimbat, indiferent de doza Meth. BLA este critică pentru învățarea asociativă discretă și este puternic implicată în evaluarea condiționată și evaluarea recompensei în timpul răspunsului instrumental (Everitt și colab., 1999, Cardinal și colab., 2002, Vezi, 2002). Șobolanii cu leziuni BLA afișează presiunea scăzută a pârghiei pentru stimulentele condiționate asociate cu alimentele (Everitt și colab., 1989) sau armare sexuală (Everitt și colab., 1989, Everitt, 1990). În schimb, această manipulare nu afectează faza consumatoare a hrănirii și a comportamentului sexual (Cardinal și colab., 2002). BLA joacă, de asemenea, un rol cheie în memoria stimulilor condiționați asociate cu stimulii de droguri (Grace și Rosenkranz, 2002, Laviolette și Grace, 2006). Leziunile sau inactivările farmacologice ale BLA blochează achiziția (Whitelaw și colab., 1996) și expresie (Grimm și vezi, 2000) restabilirea condiționată a cocainei, fără a afecta procesul de administrare a medicamentului. În plus, Amph infuzat direct în BLA are ca rezultat o repornire potențială a medicamentului în prezența indiciilor condiționate (Vezi et al., 2003). Prin urmare, este posibil ca transmisia DA îmbunătățită de psihostimulant în BLA să aibă ca rezultat o saliență emoțională potențiată și căutarea (Ledford și colab., 2003) de recompensă sexuală, contribuind astfel la intensificarea mișcării sexuale și a dorinței raportate de către Meth abuzatori (Semple și colab., 2002, Verde și Halkitis, 2006).

În ACA, activarea neurală a neuronilor activi sexual a fost independentă de doză și specifică pentru Meth, deoarece nu a fost observată la Amph. Deși Meth și Amph au proprietăți structurale și farmacologice similare, Meth este un psihostimulant mai puternic decât Amph cu efecte mai lungi (NIDA, 2006). Studiile lui Goodwin și colab. a arătat că Meth generează un eflux mai mare de DA și inhibă curgerea AD aplicată local mai eficient la NAc de șobolan decât Amph. Aceste caracteristici ar putea contribui la proprietățile de dependență ale Meth în comparație cu Amph (Goodwin și colab., 2009) și, probabil, diferențele de activare neurală observate între cele două medicamente. Cu toate acestea, nu este clar dacă diferitele modele de rezultate se datorează diferențelor de eficacitate între problemele legate de medicamente sau cu potența legate de dozele utilizate și este necesară o investigație ulterioară.

Co-activarea de către Meth și sexul nu a fost observată în alte subregiuni ale mPFC (IL și PL). La șobolan, ACA a fost extensiv studiată folosind sarcini apetitoare, sprijinind un rol în asociațiile de stimulare-întărire (Everitt și colab., 1999, Vezi, 2002, Cardinal și colab., 2003). Există dovezi ample că mPFC este implicat în pofta de droguri și recidiva la comportamentul care caută consumul de droguri și la consumul de droguri atât la oameni, cât și la șobolani (Grant și colab., 1996, Childress și colab., 1999, Capriles și colab., 2003, McLaughlin și See, 2003, Shaham și colab., 2003, Kalivas și Volkow, 2005). euîn conformitate cu aceasta, sa propus ca disfuncționalitatea mPFC cauzată de expunerea repetată la medicamente de abuz să poată fi responsabilă de controlul redus al impulsurilor și de comportamentul crescut al medicamentelor, așa cum se observă în multe persoane dependente (Jentsch și Taylor, 1999). Datele recente din laboratorul nostru au demonstrat că leziunile mPFC duc la continuarea căutării comportamentului sexual atunci când acest lucru a fost asociat cu un stimul aversiv (Davis și colab., 2003). Chiar dacă acest studiu nu a investigat ACA, susține ipoteza că mPFC (și ACA specific) mediază efectele Meth asupra unei pierderi a controlului inhibitor asupra comportamentului sexual, așa cum a fost raportat de Meth abusersSalo și colab., 2007).

În concluzie, împreună, aceste studii constituie un prim pas critic către o mai bună înțelegere a modului în care drogurile abuzive acționează asupra căilor neuronale care în mod normal mediază recompensele naturale. Mai mult, aceste constatări ilustrează faptul că, spre deosebire de convingerea actuală că medicamentele de abuz nu activează aceleași celule în sistemul mezolimbic ca și recompensa naturală, Meth și, într-o măsură mai mică, Amph, activează aceleași celule ca și comportamentul sexual. La rândul lor, aceste populații neurale co-activate pot influența căutarea unei recompense naturale după expunerea la medicament. În cele din urmă, rezultatele acestui studiu pot contribui în mod semnificativ la înțelegerea noastră a bazei dependenței în general. Comparațiile asemănărilor și diferențelor, precum și alterarea activării neuronale a sistemului mezolimbic provocată de comportamentul sexual față de droguri de abuz pot conduce la o mai bună înțelegere a abuzului de substanțe și a modificărilor asociate în răsplata naturală.

recunoasteri

Aceasta cercetare a fost sustinuta de subventii de la National Institutes of Health R01 DA014591 si Institutele canadiene de cercetare in domeniul sanatatii RN 014705 la LMC.

ABREVIERI

  • ABC
  • avidin-biotină-complex de peroxidază de hrean
  • ACA
  • zona anterioară cingulate
  • AMPH
  • d-amfetamină
  • BLA
  • amigdala bazolaterală
  • BNSTpl
  • nucleul patului posterolateral al stria terminalis
  • BNSTpm
  • patul posteromedial al stria terminalis
  • BT
  • tiramidă biotinilată
  • CeA
  • Amigdala centrală
  • CPP
  • condiția preferată a locului
  • E
  • ejaculare
  • EL
  • ejacularea latenta
  • IF
  • zona infralimbică
  • IL
  • latența intromisiei
  • IM
  • pătrundere
  • M
  • monta
  • MAP Kinase
  • proteina kinazică activată de mitogen
  • MEApd
  • posterodorsal medial amigdala
  • Meth
  • metamfetamina
  • ML
  • latență la montare
  • mPFC
  • cortexul prefrontal medial
  • MPN
  • nucleul preoptic medial
  • NAc
  • nucleul Accumbens
  • PB
  • Fosfat tampon
  • PBS
  • fosfat salin tamponat
  • PEI
  • post ejaculatory interval
  • Perk
  • fosforilat MAP kinază
  • PL
  • zona prelimbic
  • VTA
  • zona tegmentală ventrală

Note de subsol

Declinarea responsabilității editorului: Acesta este un fișier PDF al unui manuscris needitat care a fost acceptat pentru publicare. Ca serviciu pentru clienții noștri oferim această versiune timpurie a manuscrisului. Manuscrisul va fi supus copierii, tipăririi și revizuirii probelor rezultate înainte de a fi publicat în forma sa finală. Rețineți că în timpul procesului de producție pot fi descoperite erori care ar putea afecta conținutul și toate denunțările legale care se referă la jurnal.

Referinte

  1. Agmo A. Comportamentul sexual al șobolanilor. Brain Res Brain Res Protoc. 1997; 1: 203-209. [PubMed]
  2. Agmo A, Berenfeld R. Proprietățile de întărire a ejacularii la șobolanii masculi: rolul opioidelor și al dopaminei. Behav Neurosci. 1990; 104: 177-182. [PubMed]
  3. Agmo A, Federman I, Navarro V, Padua M, Velazquez G. Recompensa și armarea produsă de apa potabilă: Rolul opioidelor și al subtipurilor receptorilor de dopamină. Pharmacol Biochem Behav. 1993; 46 [PubMed]
  4. Balfour ME, Yu L, Coolen LM. Comportamentul sexual și indicatorii de mediu asociați sexului activează sistemul mezolimbic la șobolanii masculi. Neuropsychopharmacology. 2004; 29: 718-730. [PubMed]
  5. Baum MJ, Everitt BJ. Creșterea expresiei c-fos în zona preoptică mediană după împerechere la șobolanii masculi: Rolul inputurilor aferente din domeniul tegumentului central al amigdalei și al midbrainului central. Neuroscience. 1992; 50: 627-646. [PubMed]
  6. Capriles N, Rodaros D, Sorge RE, Stewart J. Un rol al cortexului prefrontal în restabilirea indusă de stres și cocaina a căutării de cocaină la șobolani. Psihofarmacologie (Berl) 2003; 168: 66-74. [PubMed]
  7. Cardinalul RN, Parkinson JA, Hall J, Everitt BJ. Emoție și motivație: rolul amigdalei, striatului ventral și al cortexului prefrontal. Neuroștiințe și recenzii bio-comportamentale. 2002; 26: 321-352. [PubMed]
  8. Cardinalul RN, Parkinson JA, Marbini HD, Toner AJ, Bussey TJ, Robbins TW, Everitt BJ. Rolul cortexului cingular anterior în controlul asupra comportamentului de către stimulii condiționați Pavlovian la șobolani. Neuroștiințe comportamentale. 2003; 117: 566-587. [PubMed]
  9. Carelli RM. Activarea arderii celulelor accumbens prin stimulente asociate cu administrarea de cocaină în timpul autoadministrării. Synapse. 2000; 35: 238-242. [PubMed]
  10. Carelli RM. Nucleul accumbens declanșarea celulelor în timpul comportamentelor îndreptate spre obiectiv pentru cocaină vs. întărire „naturală”. Fiziologie și comportament. 2002; 76: 379–387. [PubMed]
  11. Carelli RM, Ijames SG. Activarea selectivă a neuronilor accumbens de către stimulii asociați cu cocaină în timpul unui program multiplu de apă / cocaină. Cercetarea creierului. 2001; 907: 156-161. [PubMed]
  12. Carelli RM, Ijames SG, Crumling AJ. Dovada că circuitele neuronale separate în nucleul accumbens codifică cocaina față de recompensa "naturală" (apă și hrană). J Neurosci. 2000; 20: 4255-4266. [PubMed]
  13. Carelli RM, Wightman RM. Microcircuitul funcțional în accumbens care stă la baza dependenței de droguri: informații despre semnalarea în timp real în timpul comportamentului. Opinia curentă în neurobiologie. 2004; 14: 763-768. [PubMed]
  14. Carelli RM, Wondolowski J. Codificarea selectivă a cocainei față de recompensele naturale de către neuronii nucleului accumbens nu este legată de expunerea cronică la medicament. J Neurosci. 2003; 23: 11214-11223. [PubMed]
  15. Chang JY, Zhang L, Janak PH, Woodward DJ. Răspunsurile neuronale în cortexul prefrontal și nucleul accumbens în timpul administrării heroinei la șobolanii care se mișcă liber. Brain Res. 1997; 754: 12-20. [PubMed]
  16. Chen BT, Bowers MS, Martin M, Hopf FW, Guillory AM, Carelli RM, Chou JK, Bonci A. Cocaina, dar nu Natural Reward Self-Administration și pasivă Cocaine Infusion produce LTP persistent în VTA. Neuron. 2008; 59: 288-297. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  17. Chen PC, Chen JC. Activitatea Cdk5 îmbunătățită și translocarea p35 în Striatum ventral al șobolanilor tratați cu metamfetamină acută și cronică. Neuropsychopharmacology. 2004; 30: 538-549. [PubMed]
  18. Childress AR, Mozley PD, McElgin W, Fitzgerald J, Reivich M, O'Brien CP. Activarea lingvistică în timpul poftei induse de cocaina. Am J Psihiatrie. 1999; 156: 11-18. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  19. Choe ES, Chung KT, Mao L, Wang JQ. Amfetamina mărește fosforilarea factorilor kinazei și a factorilor de transcripție reglați prin semnal extracelular în striatum de șobolan prin intermediul receptorilor metabotropici de glutamat de grup I. Neuropsychopharmacology. 2002; 27: 565-575. [PubMed]
  20. Choe ES, Wang JQ. CaMKII reglează fosforilarea ERK1 / 2 indusă de amfetamină în neuronii striatali. Neuroreport. 2002; 13: 1013-1016. [PubMed]
  21. Davis JF, Loos M, Coolen LM. Societatea de neuroendocrinologie comportamentală. Voi. 44. Cincinnati, Ohio: Hormoni și comportament; 2003. Leziunile cortexului prefrontal medial nu distrug comportamentul sexual la șobolanii de sex masculin; p. 45.
  22. Di Chiara G, Imperato A. Medicamentele abuzate de oameni cresc preferențial concentrațiile de dopamină sinaptică în sistemul mesolimbic al șobolanilor în mișcare liberă. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1988; 85: 5274-5278. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  23. Dominguez JM, Balfour ME, Lee HS, Brown HJ, Davis BA, Coolen LM. Împerecherea activează receptorii NMDA în zona preoptică mediană a șobolanilor masculi. Neuroștiințe comportamentale. 2007; 121: 1023-1031. [PubMed]
  24. Elifson KW, Klein H, Sterk CE. Predictorii de riscuri sexuale în rândul noilor consumatori de droguri. Jurnal de cercetare sexuală. 2006; 43: 318-327. [PubMed]
  25. Ellkashef A, Vocci F, Hanson G, White J, Wickes W, Tiihonen J. Farmacoterapia dependenței de metamfetamină: O actualizare. Abuz de substante. 2008; 29: 31-49. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  26. Everitt BJ. Motivația sexuală: o analiză neurală și comportamentală a mecanismelor care stau la baza răspunsurilor apetitoare și copulative ale șobolanilor de sex masculin. Neurosci Biobehav Rev. 1990; 14: 217-232. [PubMed]
  27. Everitt BJ, Cador M, Robbins TW. Interactiuni intre amigdala si striatum ventral in asociatii de stimulare-recompensa: Studii folosind un program de ordinul doi de armare sexuala. Neuroscience. 1989; 30: 63-75. [PubMed]
  28. Everitt BJ, Fray P, Kostarczyk E, Taylor S, Stacey P. Studii de comportament instrumental cu armare sexuală la șobolanii masculi (Rattus norvegicus): I. Controlul prin stimulente vizuale scurte asociate cu o femeie receptivă. J Comp Psychol. 1987; 101: 395-406. [PubMed]
  29. Everitt BJ, Parkinson JA, Olmstead MC, Arroyo M, Robledo P, Robbins TW. Procesele asociative în dependență și recompensa rolul subsistemelor Striatale Amygdala-Ventral. Analele Academiei de Științe din New York. 1999; 877: 412-438. [PubMed]
  30. Everitt BJ, Stacey P. Studii de comportament instrumental cu armare sexuală la șobolani masculi (Rattus norvegicus): II. Efectele leziunilor din zona preoptică, castrarea și testosteronul. J Comp Psychol. 1987; 101: 407-419. [PubMed]
  31. Feltenstein MW, vezi RE. Neurocircuitul dependenței: o imagine de ansamblu. Br J Pharmacol. 2008; 154: 261-274. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  32. Ferguson SM, Norton CS, Watson SJ, Akil H, Robinson TE. Exprimarea mRNA c-fos evocată de amfetamină în caudate-putamen: efectele antagoniștilor receptorilor DA și NMDA variază ca o funcție a fenotipului neuronal și a contextului de mediu. Jurnalul de Neurochimie. 2003; 86: 33-44. [PubMed]
  33. Fiorino DF, Coury A, Phillips AG. Modificări dinamice ale fluxului de dopamină nucleus accumbens în timpul efectului Coolidge la șobolanii masculi. J Neurosci. 1997; 17: 4849-4855. [PubMed]
  34. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitarea comportamentului sexual și îmbunătățirea efluxului de dopamină în celulele nucleare de șobolani masculi după sensibilizarea comportamentală indusă de D-amfetamină. J Neurosci. 1999a; 19: 456-463. [PubMed]
  35. Fiorino DF, Phillips AG. Facilitarea comportamentului sexual la șobolanii masculi după sensibilizarea comportamentală indusă de d-amfetamină. Psychopharmacology. 1999b; 142: 200-208. [PubMed]
  36. Goodwin JS, Larson GA, Swant J, Sen N, Javitch JA, Zahniser NR, De Felice LJ, Khoshbouei H. Amfetamina și metamfetamina afectează diferențial transportatorii de dopamină in vitro și in vivo. J Biol Chem. 2009; 284: 2978-2989. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  37. Grace AA, Rosenkranz JA. Reglarea răspunsurilor condiționate ale neuronilor amigdali bazolaterali. Fiziologie și comportament. 2002; 77: 489–493. [PubMed]
  38. Grant S, Londra ED, Newlin DB, Villemagne VL, Liu X, Contoreggi C, Phillips RL, Kimes AS, Margolin A. Activarea circuitelor de memorie în timpul poftei de cocaină provocată de băutură. Proc Natl Acad Sci SUA A. 1996; 93: 12040-12045. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  39. AI verde, Halkitis PN. Metamfetamină de cristal și socialitate sexuală într-o subcultură gay urbană: o afinitate electivă. Cultură, sănătate și sexualitate. 2006; 8: 317–333. [PubMed]
  40. Grimm JW, vezi RE. Disocierea nucleelor ​​limbice primare și secundare relevante într-un model animal de recădere. Neuropsychopharmacology. 2000; 22: 473-479. [PubMed]
  41. Hull EM, Lorrain DS, Du J, Matuszewich L, Lumley LA, Putnam SK, Moses J. Interacțiuni hormon-neurotransmițător în controlul comportamentului sexual. Cercetarea creierului comportamental. 1999; 105: 105-116. [PubMed]
  42. Hull EM, Meisel RL, Sachs BD. Comportamentul sexual al bărbatului. În: Pfaff DW și colab., Editori. Hormoni creier și comportament. San Diego, CA: Elsevier Science (SUA); 2002. pp. 1-138.
  43. Hull EM, Muschamp JW, Sato S. Dopamina și serotonina: influențe asupra comportamentului sexual masculin. Fiziologie și comportament. 2004; 83: 291-307. [PubMed]
  44. Ishikawa K, Nitri A, Mizoguchi H, Mohri A, Murai R, Miyamoto Y, Noda Y, Kitaichi K, Yamada K, Nabeshima T. Efectele administrării singulare și repetate a metamfetaminei sau morfinei asupra exprimării genei neuroglican C în creierul șobolanului. Jurnalul Internațional de Neuropsihopharmacologie. 2006; 9: 407-415. [PubMed]
  45. Jarosz PA, Kessler JT, Sekhon P, Coscina DV. Condiții preferate de locație (CPP) pentru "gustări alimentare" cu calorii ridicate la tulpini de șobolani predispuși genetic față de obezitatea indusă de dietă: rezistență la blocarea naltrexonei. Farmacologie Biochimie și comportament. 2007; 86: 699-704. [PubMed]
  46. Jarosz PA, Sekhon P, Coscina DV. Efectul antagonismului opioid asupra preferințelor locului condiționat la gustări. Farmacologie Biochimie și comportament. 2006; 83: 257-264. [PubMed]
  47. Jentsch JD, Taylor JR. Impulsivitatea care rezultă din disfuncțiile frontale ale abuzului de droguri: implicații pentru controlul comportamentului prin stimulente legate de recompensă. Psihofarmacologie (Berl) 1999; 146: 373-390. [PubMed]
  48. Kalivas PW, Volkow ND. Baza neuronală a dependenței: o patologie a motivației și alegerii. Am J Psihiatrie. 2005; 162: 1403-1413. [PubMed]
  49. Kelley AE. Memorie și dependență: circuite neuronale partajate și mecanisme moleculare. Neuron. 2004; 44: 161-179. [PubMed]
  50. Kippin TE, Sotiropoulos V, Badih J, Pfaus JG. Rolul opus al nucleului accumbens și al zonei hipotalamice anterioare laterale în controlul comportamentului sexual la șobolanul mascul. European Journal of Neuroscience. 2004; 19: 698-704. [PubMed]
  51. Laviolette SR, Grace AA. Canabinoizii potențează plasticitatea învățării emoționale în neuronii cortexului prefrontal medial prin intrările amigdale bazolaterale. J Neurosci. 2006; 26: 6458-6468. [PubMed]
  52. Ledford CC, Fuchs RA, a se vedea RE. Reintroducerea potențială a comportamentului căutător de cocaină după perfuzarea D-amfetaminei în amigdala bazilaterală. Neuropsychopharmacology. 2003; 28: 1721-1729. [PubMed]
  53. Lett BT. Expunerile repetate intensifică mai degrabă decât diminuează efectele de recompensare ale amfetaminei, morfinei și cocainei. Psihofarmacologie (Berl) 1989; 98: 357-362. [PubMed]
  54. Liu YC, Sachs BD, Salamone JD. Comportamentul sexual la șobolanii masculi după leziuni radiofrecvente sau leziuni care diminuează dopamina în nucleul accumbens. Pharmacol Biochem Behav. 1998; 60: 585-592. [PubMed]
  55. Lorrain DS, Riolo JV, Matuszewich L, Hull EM. Serotonina hipotalamică laterală inhibă Nucleus Accumbens dopamina: Implicații pentru satietatea sexuală. J Neurosci. 1999; 19: 7648-7652. [PubMed]
  56. Lumley LA, Hull EM. Efectele unui antagonist D1 și ale experienței sexuale asupra imunoreactivității Fos induse de copulație în nucleul preoptic medial. Cercetarea creierului. 1999; 829: 55-68. [PubMed]
  57. Martinez I, Paredes RG. Numai împerecherea în ritm propriu este plină de satisfacție la șobolanii de ambele sexe. Hormonul Behav. 2001; 40: 510-517. [PubMed]
  58. McLaughlin J, Vezi RE. Inactivarea selectivă a cortexului prefrontal dorsomedial și amigdala bazolaterală atenuează restabilirea condiționată a comportamentului căutător de cocaină stins în șobolani. Psihofarmacologie (Berl) 2003; 168: 57-65. [PubMed]
  59. Mitchell JB, Stewart J. Facilitarea comportamentelor sexuale la șobolanii masculi în prezența unor stimuli combinate anterior cu injecții sistemice de morfină. Farmacologie Biochimie și comportament. 1990; 35: 367-372. [PubMed]
  60. Mizoguchi H, Yamada K, Mizuno M, Mizuno T, Nitta A, Noda Y, Nabeshima T. Regulament de recompensă de metamfetamină prin kinază controlată prin semnal extracelulare 1 / 2 / ETS ca Gene-1 cale de semnalizare prin activarea dopaminei NIDA Seria de Rapoarte de Cercetare: abuz de metamfetamină și dependență 2006 NIH Numărul publicației 06-4210.PubMed]
  61. Perks SM, Clifton PG. Reevaluarea întăritorului și preferința de loc condiționată. Fiziologie și comportament. 1997; 61: 1–5. [PubMed]
  62. Pfaus JG. Căile de dorință sexuală. Jurnalul de Medicină Sexuală. 2009; 6: 1506-1533. [PubMed]
  63. Pfaus JG, Everitt BJ. Psihofarmacologia comportamentului sexual. În: Bloom FE, Kupfer DJ, editori. Psihofarmacologie: a patra generație de progres. New York: Raven; 1995. pp. 743-758.
  64. Pfaus JG, Heeb MM. Implicațiile inducerii imediate-timpurii a genei în creier după stimularea sexuală a rozătoarelor feminine și masculine. Brain Research Bulletin. 1997; 44: 397-407. [PubMed]
  65. Pfaus JG, Kippin TE, Centeno S. Condiționarea și comportamentul sexual: o analiză. Hormonul Behav. 2001; 40: 291-321. [PubMed]
  66. Pfaus JG, Phillips AG. Efectele diferențiate ale antagoniștilor receptorilor de dopamină asupra comportamentului sexual al șobolanilor masculi. Psychopharmacology. 1989; 98: 363-368. [PubMed]
  67. Pierce RC, Kumaresan V. Sistemul dopaminei mezolimbice: calea comună finală pentru efectul de întărire a drogurilor de abuz? Neuroștiințe și recenzii bio-comportamentale. 2006; 30: 215–238. [PubMed]
  68. Pitchers KK, Balfour ME, Lehman MN, Richtand NM, Yu L, Coolen LM. Experiența sexuală induce plasticitate funcțională și structurală în sistemul mezolimbic. Biologie psihiatrie. 2009 În presă.
  69. Ranaldi R, Pococ D, Zereik R, Wise RA. Fluctuațiile dopaminei în nucleul accumbens în timpul întreținerii, extincției și reintroducerii administrării intravenoase de D-amfetamină. J Neurosci. 1999; 19: 4102-4109. [PubMed]
  70. Rawson RA, Washton A, Domier CP, Reiber C. Droguri și efecte sexuale: rolul tipului de drog și a genului. Oficial al tratamentelor privind abuzul de substanțe. 2002; 22: 103-108. [PubMed]
  71. Robertson GS, Pfaus JG, Atkinson LJ, Matsumura H, Phillips AG, Fibiger HC. Comportamentul sexual crește expresia c-fos în creierul mascul al șobolanilor. Brain Res. 1991; 564: 352-357. [PubMed]
  72. Roop RG, Hollander RJ, Carelli RM. Accumbens activitatea în timpul unui program multiplu pentru apă și sucroză armarea la șobolani. Synapse. 2002; 43: 223-226. [PubMed]
  73. Salo R, Nordahl TE, Natsuaki Y, Leamon MH, Galloway GP, Waters C, Moore CD, Buonocore MH. Controlul atenției și nivelurile metabolice ale creierului la abuzatorii de metamfetamină. Biologie psihiatrie. 2007; 61: 1272-1280. [PubMed]
  74. Schilder AJ, Lampinen TM, Miller ML, Hogg RS. Metamfetamina cristalină și ecstasy diferă în raport cu sexul nesigur în rândul tinerilor homosexuali. Revista canadiană de sănătate publică. 2005; 96: 340-343. [PubMed]
  75. Vedeți RE. Substraturile neurale ale recidivelor condiționate cu comportamentul căutării de droguri. Farmacologie Biochimie și comportament. 2002; 71: 517-529. [PubMed]
  76. Vezi RE, Fuchs RA, Ledford CC, McLaughlin J. Dependența de droguri, Relapse și Amygdala. Analele Academiei de Științe din New York. 2003; 985: 294-307. [PubMed]
  77. Semple SJ, Patterson TL, Grant I. Motivații asociate utilizării metamfetaminei în rândul bărbaților HIV care fac sex cu bărbații. Oficial al tratamentelor privind abuzul de substanțe. 2002; 22: 149-156. [PubMed]
  78. Shaham Y, Shalev U, Lu L, De Wit H, Stewart J. Modelul de refacere a recidivelor de droguri: istoric, metodologie și constatări majore. Psihofarmacologie (Berl) 2003; 168: 3-20. [PubMed]
  79. Shippenberg TS, Heidbreder C. Sensibilizarea efectelor condiționate condiționate ale cocainei: caracteristici farmacologice și temporale. J. Pharmacol Exp Ther. 1995; 273: 808-815. [PubMed]
  80. Shippenberg TS, Heidbreder C, Lefevour A. Sensibilizarea efectelor benefice condiționate ale morfinei: farmacologia și caracteristicile temporale. Eur J Pharmacol. 1996; 299: 33-39. [PubMed]
  81. Somlai AM, Kelly JA, McAuliffe TL, Ksobiech K, Hackl KL. Predictorii comportamentelor cu risc sexual sexual HIV într-un eșantion comunitar de bărbați și femei care utilizează droguri injectabile. SIDA și comportament. 2003; 7: 383-393. [PubMed]
  82. Springer A, Peters R, Shegog R, White D, Kelder S. Utilizarea metamfetaminei și comportamentul riscului sexual în studenții de liceu din SUA: Constatări dintr-un studiu național privind comportamentul riscului. Știința preventivă. 2007; 8: 103-113. [PubMed]
  83. Soarele WL, Zhou L, Hazim R, Quinones-Jenab V, Jenab S. Efectele receptorilor dopaminei și NMDA asupra expresiei Fos induse de cocaină în striatul șobolanilor Fischer. Cercetarea creierului. 2008; 1243: 1-9. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  84. Swanson LW, redactor. Brain Maps: Structura creierului de șobolan. Amsterdam: Elsevier Science; 1998.
  85. Tenk CM, Wilson H, Zhang Q, Pitchers KK, Coolen LM. Răsplata sexuală la șobolanii masculi: Efectele experienței sexuale asupra preferințelor locului condiționat asociate cu ejacularea și intromisiile. Hormonul Behav. 2008 [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  86. Valjent E, Corvol JC, Pagini C, Besson MJ, Maldonado R, Caboche J. Implicarea cascadei kinazei reglată de semnal extracelular pentru proprietățile de recompensare a cocainei. J Neurosci. 2000; 20: 8701-8709. [PubMed]
  87. Valjent E, Pagini C, Herve D, Girault JA, Caboche J. Medicamentele dependente și non-dependente induc modele distincte și specifice ale activării ERK în creierul mouse-ului. Eur J Neurosci. 2004; 19: 1826-1836. [PubMed]
  88. Valjent E, Pascoli V, Svenningsson P, Paul S, Enslen H, Corvol JC, Stipanovich A, Caboche J, Lombroso PJ, Nairn AC, Greengard P, Herve D, Girault JA. Reglarea unei cascade de fosfatază proteică permite semnale convergente de dopamină și glutamat pentru a activa ERK în striatum. Proc Natl Acad Sci SUA A. 2005; 102: 491-496. [Articol gratuit PMC] [PubMed]
  89. Vanderschuren LJ, Kalivas PW. Alterarea transmiterii dopaminergice și glutamatergice în inducerea și exprimarea sensibilizării comportamentale: o analiză critică a studiilor preclinice. Psihofarmacologie (Berl) 2000; 151: 99-120. [PubMed]
  90. Veening JG, Coolen LM. Activarea neuronală după comportamentul sexual la creierul de șobolan masculin și feminin. Cercetarea creierului comportamental. 1998; 92: 181-193. [PubMed]
  91. Whitelaw RB, Markou A, Robbins TW, Everitt BJ. Leziunile excitotoxice ale amigdalei bazolaterale afectează dobândirea comportamentului de căutare a cocainei în cadrul unui program de armare de ordinul doi. Psychopharmacology. 1996; 127: 213-224. [PubMed]
  92. Wise RA. Neurobiologia dependenței. Opinia curentă în neurobiologie. 1996; 6: 243-251. [PubMed]